DE2821189A1

DE2821189A1 - Coriolinderivate, deren herstellung und diese enthaltende pharmazeutische praeparate

Info

Publication number: DE2821189A1
Application number: DE19782821189
Authority: DE
Inventors: Mamoru Kunishima; Akira Matsuda; Yuya Nakayama; Tomio Takeuchi; Hamao Umezawa
Original assignee: Nippon Kayaku Co Ltd
Current assignee: Nippon Kayaku Co Ltd
Priority date: 1977-05-17
Filing date: 1978-05-13
Publication date: 1978-11-23
Also published as: IT7849350A0; IT1156738B; CA1123445A; US4190589A; JPS6143354B2; FR2391206A1; GB1580682A; FR2391206B1; JPS53141262A

Description

Coriolin, Coriolin B und Coriolin C sind natürliche Terpenoidverbindungen, die aus der Eulturlösung von Ba»sidiomycetes Coriolus Consors durch Ifinezawa et al. extrahiert und isoliert -wor den sind (vgl. »J. Antibiotic^ 24, 631 (1971), 22, 215 (1969) und "Tetrahedron Letters" 1971, 1955). Derzeit bekannte Coriolinverbindungen mit Antitumoraktivität schließen zusätzlich zu dem obengenannten Coriolin und Coriolin C solche Derivate, wie 5-Dehydrocoriolin B, 5,8-Dehydrocoriolin B und dergleichen, ein (vgl. die obigen Literaturstellen J. Antibiotics und Tetrahedron Letters).

Gegenstand der Erfindung sind Coriolinderivate der allgemeinen Formel:

(X)

in der R: -CO(CH₂)₆CH₃ oder -COCH(OH)(CH₂) Xi =CH₂ oder -COOR¹,
R*:H oder eine Niedrigalkylgruppe, Y: -OH oder =0 und
Z: -OH oder -OCH₃,

8098Λ7/0928

-Vr-

Die Erfindung umfaßt auch ein Verfahren zur Herstellung dieser Derivate.

Die Verbindung I gemäß der Erfindung hat eine derart modifizierte chemische Struktur, daß die Epoxidgruppe in C^-Stellung der vorstehend beschriebenen Coriolinverbindungen durch eine α-substituierte '5-gliedrige Lactongruppierung ersetzt worden ist. Di Verbindung zeigt den Effekt, daß die Überlebenszeit bei der Mausleukämie L-1210 verlängert wird. Da weiterhin diese Verbindung eine höhere Hemmaktivität als bekannte Coriolinverbindunge: ι gegen experimentelle Tumorzellen, wie Heia-Zellen, hat und nur eine verhältnismäßig niedrige Toxizität hat, kann angenommen werden, daß die Verbindung zur Bekämpfung von menschlichem Tumor verwendet werden kann.

Typische Beispiele der Verbindung I gemäß der Erfindung sind solche der folgenden allgemeinen Formel:

Niedrigalkylgruppen sind geradkettige oder verzweigte Gruppen mit zweckmäßig 1 bis 6, vorzugsweise 1 bis 4, besonders bevorzugt mit 1 oder 2 Kohlenstoffatomen.

3098A7/0928

O CD SO OO

Ver	Ο ω ft ι,Ι	LU	R	X Y	Z	_. 3 _ Verbindung	Aussehen	Molekular	i Infrarotabsorp-	(KBr-Me-	2925 1465	1739 1312
bin	U σ					Pp, ⁶C '	formel	t ions spektrum",	0	1200	1165
dung τξ						_c fberechnet, %	cm" '		1042	1C10
uT ♦						(gefunden, %	thode	931	899
						Tjfberechnet, % (gefunden, %		751	721
1 -CO(CH₂)₆CH₃	^CH₂ -OH	-OCH₃	1a-Octanoyl-4-(15- methjrlen-i 5ct-buta-	Kristalle	^C26^H40°7	3405 1664
			nolid)-5ß-hydroxy-	152-153	o7, d.\ 67,39	1265	2940 1669	1771 1468
			6ß,7ß-oxid-8ß-me-		O . CCS 7	1108	1269	1190
			thoxyhirstan		,DO	980	1132	1097
						811	1013	961
					^C25^K38°7	672	900	883
2 -C0(CH₂)₆CH₃	=CH₂ -OH	-OH	1a~0ctanoyl-4-(16- methylen-15a-buta-	Kristalle	66^70 8 50	3420 1733	842	810
			nolid)-6ß,7ß-oxid-	I D⁴T, 0"- 165,5	8,'47	1390	726	67Ο
			5ß,8ß-dihydroxy-			1167	2950	1770
			hirstan			1067	1664	1462
					Co^rH/ (-\0o	932	1300	1269
					iiD *·{·υ ö 64,98 65,35	864	1110	1085
				amorphes		750	1010	952
3 -COCH(CH₉)KCH,	5 =CH₂ -OH	-OCH₃	1a-(a-Hydroxyocta-	Pulver		3440	810	750
nw			noyl)-4-(16-methy-	54-58		1740	670
UXl			len-15cc-butanolid)-		C₂₅H₃₈O₈ 64,36	1375	2950	1775
			5ß-hydroxy-6ß,7ß-		HO«	1200	I67O 1275	1465 1200
			oxid-8ß-methoxyhir-			1040	1133	1100
			stan	Kristalle	930		Q8O
	• ■	-OH		129-131	720
if — oUuitl VvXl/> JcVvil·;	r =CH_O -OH		1a-(a-Hydroxyocta-		3430
OH			noyl)-4-(16-methy- len-15cc-butanolid)-		1730 1380
			6ß,7ß-oxid-5ß,8ß-	1175
		dihvdroxyhirstan	1070

CD CD OO

	υ	6	■·	-CH —0	-OCH₃	•	- 4	Kristal le	•	^C26^H38°7 £Tr7 K Λ	IAO IACTv CTvVO	810	755	720
5 (	f\|-CO(CH₂)₆CH₃						1a-Octanoyl-4-(16- methylen-15a~buta~	63-69	Of ,51 Cry ?D	3440 1669	2950 1467	2680 1405	175 1370
lsi						nolid)-5-oxo-6ß,7ß-		ο/',^ο	1342	1288	1270	1228
L		-CO(CH₂)₆CH₃				oxid-8ß-methoxy-			1210	1160	1117	1100
					hirstan			1079	1042	1020	1010
								960	933	920	892
	7							855	835	810	779
			-CH₂ =0	-OH		Kristal le	^C25^H36°7 66,94 67,70	76Ο	726	692	669
				1a-Octanoyl-4-(16- methylen-15a~buta-	175-	Q f\CZ.	3410 1727	3300 1655	2910 1452	2840 1390
	-C0CH(CH₂)₅CH₃			nolid)-5-oxo-6ß,7ß-	175,5	O 4 (JO J	1369	1332	1290	1265
8				oxid-8ß-hydroxy-			1232	1189	1159	1033
				hirstan		^C26^H38°8 65,25	1022	1002	960	948
						ft Γ\Γ\	931	889 '	872	839
	-COCH(CHg)₃CH₃'	-CH₂ =0	-OCH₃		amorphes Pulver	ο, UU 8,21	800	748	712	630
	.OH			1 α-(α-Hydroxyocta- noyl)-4-(16-methy-	42-45	^C25^H36°a '	3490 1463	3940 1378	1760 1279	1662 1181
				len-15a-butanolid)-		Qfcj· . O^	1110	1040	1002	959
				5-oxo-6ß,7ß-oxid-		*	930	910	890	851
		-CH₂ =0	-OH	8ß-methoxyhirstan	Kristal le	7^76	803 659	769	720	681
			1 α-(α-Hydroxyocta- noyl)-4-(16-methy-	98-99		^ r r 3410 1730	3350 1655	2930 1450	2345 1390
		len-15a-butanolid)-		1370	1330	1290	1270
	5-oxo-6ß,7ß-oxid-		1230	1190	1160	1070
	8ß-hydroxyiiirstan		1020	1000	960	950
			890	850	800	765
		715	690	660

9	-C0(CH₂)₆CH₃	ι ι	χ	ί	-COOC₂H₅	=0	-OCH₃	- 5 1 a-Octar.oyl-4- (16- carboäthoxy-15α-	Kristal le	^C29^H42°9 65,05 Cc r\r\	3480 1463	2950 1375	1795 1345	1740 1300
			j				butanolid)~5-oxo-	129-	Oz) , UU ο + r\	1269	1220	1160	1118
		r;	!				6ß,7ß-oxid-8ß-	130,5	O,IU 8,12	1010	963	932	895
		ϋ 1	i , I .1				methoxyhirstan		C* TT O	863 722	842 655	778	741
10	-COCH(CH₉ )-CI	L -COOC₀H=	=0	-OCH,	1 α-(α-Hydroxyo cta-	Kristal	63,25 63,21 7,69	3485	296Ο	1800	1740
	nw				noyl)-4-(16-carbo-	le		1470	1375	1345	13ΟΟ
	UxI				äthoxy-15a-butano-	138-139	C₂₇H₃₈O₉ *C.1, r\Ji*	1270	1220	1165	1120
					lid)-5-oxo-6ß,7ß-		O4,01	1000	970	932	900
					oxid-8ß-methoxyhir-		7 56	875	850	780	740
					s tan		7*49	725	655
11	-coCch^cHj	-COOH	=0	-OCH₃	1a-0ctanoyl-4-(16- car-boxy-15a-butano-	amorphes Pulver	^C28^H40°9	3440 1745	2950 1593	288 0 1465	1795 1418
					lid)-5-oxo-6ß,7ß-	40-45		1380	1165	1110	1055
					oxid-8ß-methoxyhir-		7 ^7	1019	985	965	934
					stan		7 80	890	837	775	723
12	-C0(CH₂)₆CH₃	-COOCH, D	=0	-OCH₃	1 a-0ctanoyl-4- (16- carboinethoxy-15a-	Kristal le		3440 1733	2940 1451	1787 1439	1753 1330
					butanolid)-5-oxo-	107-109		1350	1310	1300	1242
					6ß,7ß-oxid-8ß-me-			1220	1185	1147	1118
				thoxyhirstan			1093	1048	1013	990
						960	931	910	890
						840	796	772	750
						740	668

Die Verbindungen j. gejnäß der Erfindung können nach den Verfahren A Oder B hergestellt werden, die durch die nachfolgenden Eea&tionsscheiaen veranschaulicht sind.

HOOC

Eormaldehyd

\ DZalkylamin

H₂C C

(IX)

(III)

-erforderlichenfalls . -iernung-der Schutz-

Darin "bedeuten;

R¹: -CO(CH^)₆CH₅, -COCH(OH)(CHg)₅ ()

O-Schutzgruppe

E¹: -OCH3, -OH, O-Schutzgruppe

R : -CH(CHg)₆CH₅, -COCH(OH)(CHg)₅CH₃,

Z : -OH, -

η 09847/0928

Verfahren B

Oxidation

(IV)

(I"¹)

erforderlichenfalls _o Entfernung der Schutzgruppe

1 1
Darin haben R , Z , R und Z die gleichen Bedeutungen wie oben

und X: =CH₂, -COOH, -COO-Niedrigalkyl.

Bei dem Verfahren A kann die Verbindung I^! der Verbindung I in der Weise hergestellt werden, daß man Dialkylamin und Formaldehyd mit der Verbindung II im Lösungsmittel umsetzt und die Schutzgruppe, wenn eine solche vorhanden ist, entfernt. Insbesondere wird 1 Mol der Verbindung II in der 2- bis 10-fachen Volumenmenge eines inerten Lösungsmittels, vorzugsweise eines niedrigen Alkohols, wie Äthanol, aufgelöst. Zu dieser Lösung wird Dialkylamin, z.B. Diäthylamin, in der 1,5- bis 8-fachen, vorzugsweise 3- bis 5-fachen molaren Menge und wäßriger Formaldehyd in der 1,5- bis 6-fachen, vorzugsweise 2- bis 4-fachen molaren Menge gegeben. Diese Substanzen werden bei 5 bis 50⁰C, vorzugsweise 15 bis 30⁰C, 2 bis 8 h, vorzugsweise 3 bis 5 h,

809847/0928

umgesetzt. Nach beendigter Umsetzung wird die Reaktionslösung extrahiert, und zwar entweder so, wie sie ist, oder nach Entfernung der Schutzgruppen, wenn solche vorhanden sind, durch gäbe von konzentrierter Salzsäure und anschließende Verdünnung mit Wasser. Die Extraktion erfolgt mit einem mit Wasser nicht mischbaren flüchtigen Lösungsmittel, wie Chloroform» Der Extrakt wird im Vakuum zur Trockene eingedampft. Der erhaltene Rückstand wird mit einem flüchtigen Kohlenwasserstoff (Petroleumkohlenwasserstoff), wie η-Hexan, behandelt und die Kristalle der angestrebten Produkte können erhalten werden. Wenn die angestrebten Produkte nicht mit hoher Reinheit erhalten v/erden können oder wenn bei den obigen Verfahrensweisen nur eine niedrige Ausbeute resultiert, dann wird der Extrakt von der Reaktionslösung oder der von den Kristallen abgetrennten Mutterlauge isoliert und durch Adsorptionsmethoden, beispielsweise Chromatographiech$ Prozesse, gereinigt. Sodann wird kristallisiert, wodurch die gereinigten Produkte mit hoher Ausbeute erhalten werden können.

Bei dem Verfahren B kann die Verbindung I" in der Weise hergestellt werden, daß die Verbindung I¹, ihre Derivate oder die Verbindung IV, die Schutzgruppen enthalten kann, in einem organischen Lösungsmittel oxidiert wird. Im Falle der Verwendung der Verbindung XV schließt sich an den Oxidationsprozeß erforderlichenfalls eine Entfernung der Schutzgruppen des Zwischenprodukts I"' an.

Bei diesem Oxidationsprozeß sind bevorzugte Reaktionsmedien bei spielsweise Pyridin, Benzol, Aceton, Essigsäure, Dimethylsulfoxid oder Gemische davon.

Bevorzugte Oxidationsmittel sind z.B. Chromsäure, Dicyclohexylcarbodiimid und dergleichen, wobei Chromsäure besonders bevorzugt wird.

809847/0928

Die Menge des verwendeten Oxidationsmittels ist die 1- bis 10-fache, vorzugsweise 3- bis 7-fache molare Menge der Ausgangsverbindung .

Die angestrebte Verbindung I kann aus der Reaktionslösung in dei Weise erhalten werden, daß man die Reaktionslösung filtriert, das Filtrat mit einem organischen Lösungsmittel, wie Äthylacetat und Chloroform, unter Zugabe von Wasser extrahiert, den Extrakt konzentriert und trocknet und sodann diesen durch Umkristallisation oder Chromatographie mit Kieselsäure reinigt.

Nachfolgend werden die Antitumor- und antibiotischen Effekte dei Verbindungen I gemäß der Erfindung beschrieben.

1. Tumorhemmtest:

(1) Effekt auf Hela-S^-Zellen:

Hela-S,-Zellen werden in eine Kunststoff schale mit 0,7 x 10"^ Zellen/Platte gegeben. Adler-MEM-Medium, enthaltend 60 ug Kanamycin/ml und 10% Kalbserum (hergestellt von Nissui Seiyaku K.K.), wurde verwendet. Am zweiten Tag nach der Inokulierung wurde das Kulturmedium durch ein neues Adler-Medium MEM ersetzt, bei dem die erfindungsgemäße Verbindung in verschiedenen Konzentrationen gemäß Tabelle II zugesetzt worden war. Die Anzahl der Zellen betrug 1,58 χ 10⁵ Zellen/Platte. Nach dreitägiger Kultivierung wurde das Kulturmedium eliminiert, mit einer physiologischen Kochsalzlösung gewaschen und mit O,O59o Trypsin etwa 15 min lang bei Raumtemperatur behandelt. Sodann wurden die Zellen durch Pipettierung dispergiert. Die Anzahl der Zellen wurde mittels eines Zählers gemessen. Durch Vergleich mit der ^ontrollprobe ohne Zugabe der Verbindung wurde die Hemmrate (%) anhand folgender Gleichung bestimmt. Die LD^Q-Werte wurden errechnet:

809847/0928

Ab

2S21189

Hemmung (%)= 1-

- .10 -

Anzahl der Zellen Anzahl der Zellen (nach Zugabe der ) - /zum Zeitpunkt der \

Verbindung ^Zugabe der Verbin-' _ dung

Anzahl der Zellen Anzahl der Zellen (beim Kontrollver-) - /zum Zeitpunkt der \ such ^Zugabe der Verbin-'

dung

xiOO

(2) Effekt auf L-1210 (lymphatische Leukämie):

L-1210-Zellen, 1 χ 10^, 0,05 ml, wurden intraperitoneal in BDF-Mäuse inokuliert. Eine angegebene Menge des Mittels (als O,5/6igej wäßrige CMC-Suspension) wurde 10 Tage lang einmal täglich aufgebracht, wobei 24 h nach der Inokulierung begonnen wurde. Die Dosierung war gemäß Tabelle III.

Die Beobachtung wurde weitergeführt, bis die Mäuse starben. Die Rate der Verlängerung der Überlebensperiode wurde gemäß der folgenden Gleichung anhand des Vergleichs mit der Kontrollgruppe (Zugabe von nur O,5?6iger wäßriger CMC-Lösung) errechnet:

durchschnittliche Über- durchschnittliche Über-

Verlän- (lebenstage bei der Test-)-0.ebenstage bei der )

gerungs- gruppe Kontrollgruppe ^

rate der ~ durchschnittliche Uberlebenstage bei der Kontroll-

Überle- gruppe

bensperiode

II. Testergebnisse:

Der Effekt für Hela-S,-Zellen und der Effekt zur Verlängerung der Überlebensperiode von L-121O-Mäusen ist in Tabelle II bzw. III zusammengestellt.

8 Π 9 8 L 1 I Π 9 ? 8

	Tabelle II	Hemmrate (%)	ID
	Effekt auf Hela-S,-Zellen		ji g/ml
Verbin	Konzentration	91,4	1,2
dung Nr.	Ji g/ml	38,2
1	2	86,0	1,3
	1	35,0
2	2	100	0,1
	1	50,4
VJl	0,2	72,0	0,15
	0,1	30,0
6	0,2	84,0	0,135
	0,1	33,0
7	0,2	68,0	0,16
	0,1	25,0
8	0,2	91,8	0,25
	0,1	27,4
9	0,4	80,0	0,40
	0,2	20,0
10	0,6	71,6	5,95
	0,3	' 29,4
11	8	77,6	0,76
	4	20,0
5-Dehydro-	1
coriolin B	0,5

809847/0928

282", 189

Tabelle III

Effekt auf die Verlängerung der Überlebensperiode von L-1210-

Mäusen

jj^Maus/Tage χ 10 Verbin= ,	__ 100	50	Dosierung 25	12,5	6
1	120	110	110	100	100
2	123	132	110	105	105
5	169	160	148	141	106
6	175	165	145	145	125
7	175	160	142	136	125
8	178	157	149	120	105
9	141	134	113	106	99
10	146	136	120	110	110
11	148	141	148	134	106
5-Dehydro- coriolin B	toxisch	144	137	138	106

Fußnote: Der Effekt der Verlängerung der Überlebensperiode wurde ausgehend von den durchschnittlichen Überlebenstagen der Kontrollgruppe ohne Zuführung der Verbindung, die als 100% gesetzt wurde, errechnet.

Test des antibiotischen Effekts:

Der antibakterielle Effekt der Verbindungen I gemäß der Erfindung wurde anhand der minimalen Hemmkonzentrationen unter Verwendung der Agarstreifeiimethode bestimmt. Bouillon-agar wurde als Kulturmedium verwendet. Die Ergebnisse sind in Tabelle IV zusammengestellt:

809847/092Θ

- 13 -

Tabelle IV

Minimale Hemmkonzentrationen für das Wachstum (mcg/ml)	Mikroorgani smen Mycobacterium 607 Stapholococcus aureus	3,13	Bacillus subtilis
Verbin dung Nr.	12,5	6,25	6,25
1	12,5	25	6,25
2	. 12,5	25	3,13
5	25	■ 25	3,13
6	12,5	25	3,13
7	25	50	6,25
8	25	50	6,25
9	50	100	12,5
10	100	25
11

Aus den vorstehenden Ergebnissen wird ersichtlich, daß die Verbindungen I gemäß der Erfindung eine Hemmaktivität bei niedriger Konzentration gegenüber Heia-Zellen haben. Dabei handelt es sich um experimentelle Tumorzellen. Die Verbindungen sind mit den bekannten Coriolinderivaten hinsichtlich des Effekts der Ve: längerung der Überlebensperiode von Mäusen, die mit Leukämie L-1210 inokuliert worden sind, vergleichbar. Während jedoch die im Kontrollversuch verwendeten Corlolinderivate eine Toxizität bei 100 ug/Maus zeigten, wurde bei allen Verbindungen I gemäß der Erfindung keine Toxizität festgestellt. Ein antibakterieller Effekt wurde ebenfalls bei den Verbindungen I festgestellt. Es kann daher erwartet werden, daß die Verbindungen I gemäß der Erfindung als Antitumormittel und als antibakterielle Mttel verwendet werden können.

Die Ausgangsverbindungen II und III, die erfindungsgemäß verwendet werden, werden aus Coriolin B hergestellt, welches mit hoher Ausbeute aus der Kulturlösung von Basidiomycetes Coriolus Consors (vgl. JA-PS 46 078/1974) und aus 5-Dihydrocoriolin C (vgl. JA-OS 67 490/1973) sowie nach den folgenden Verfahren her gestellt werden:

809847/0928

CH₃ COO

ssigsäureanhydride

*t)R

R :-C0 (CH₀) JZEL : Coriolin B

'R :~C0 (CH₂J

R :-COCH (CH₂J₅CH₃ :' 5-Bihydrocoriolin C Λ -COCH(CH₂J₅CH₃ OH / \ 0(

Methyljodid'- Alkali '

Silberoxid

o&er

OCOCH

(V)

H OR

OH

ΓΗ mn y° \ H 3,4-.DLhVdTo-

^UW3 ⁰⁰VQzVv 2H-pyran Alkali

(VI)

Säure

R : -CO

Xj,

OH

-COQH(CH₂J₅CH₃

COOCH

R⁴ : -CO(CH₂J₆CH₃ ν -COCH (CH₂J

(vpder

-COCH(CH₀JpCH-.

I ^{2 J} ·/

OH /

(IV). (wenn- X:-COOR J

2) erforderlichenfalls Entfernung von ·-■* Tetrahydrofuranyl

Alkali ^- (iv) (wenn X:-COOH)od£5r (11)

Spezifische Beispiele der vorstehenden Verfahren sind wie folgt:

809847/0928

;< ^Ra

OCH₃

OCH^

OCH-

CH_n (COOR*

Alkali ^H0

H OR

(V)

R⁵OOC

HOOC

C-O H OR ;

HCl/
Methanol_H0

a W

(VI)

R⁵OOC

R : -CO CCH.J.CH,; -COCH OH

R : Niedrigalkylgruppe R⁴: -CO (CH₂) ' -COCH

R⁵OOC

H OR

Alkali

1/

HOOC

COCH (CH₂ J₅CH₃ OH

(n^b)

HOOC

H OR

(11°)

Nachstehend werden in den Vergleichsbeispielen Verfahren zur Herstellung der Ausgangsverbindungen beschrieben.

yerßleichsbeispiel

Synthese von 1a-Octanoyl-4-(i6-carboäthoxy-15a-butanolid)-5ßhydroxy-6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan:

809847/0920

-7 19

(1) Synthese von 5-Acetylcoriolin B:

3 g Coriolin B wurden in einer Mischlösung aus 15 ml Pyridin und 1,05 ml Essigsäureanhydrid aufgelöst und 2 Tage lang bei 5⁰C stehen gelassen. Die Reaktionslösung wurde in 100 ml Wasser gegossen und der Niederschlag wurde durch Filtration abgetrennt mit Wasser und danach mit η-Hexan gewaschen und sodann getrocknet. Das getrocknete Produkt wurde mit 20 ml Methanol extrahiert. Die Extrakte wurden eingeengt, getrocknet und aus Aceton/Wasser umkristallisiert, wodurch 1,75 g Rohprodukt erhalten wurden.

Das Produkt wurde auf eine Säule aufgegeben, die mit 85 ml Kieselgel gefüllt war. Nach Adsorption der angestrebten Produkte wurde mittels Chloroform eluiert und das Produkt wurde aus Aceton und Wasser umkristallisiertj auf diese Weise wurden 1,6 g 5-Acetylcoriolin in Form von nadeiförmigen Kristallen erhalten. Schmelzpunkt 145°C. Ausbeute 46

(2) Synthese von 8-Methoxycoriolin B:

1,5 g 5-Acetylcoriolin B wurden in 3 ml Dimethylformamid aufgelöst. Es wurden unter Rühren 3,0 ml Methyljodid und 750 mg Silberoxid zugesetzt. Sodann wurde 4 h lang bei 40 bis 42°C weiter gerührt. Die Reaktionslösung wurde filtriert, und der Niederschlag wurde mit Chloroform gewaschen und mit dem Filtrat vereinigt/. Die Lösung wurde mit etwa der 5-fachen Volumenmenge Was ser versetzt und sodann mit Chloroform extrahiert. Die Extrakte wurden im Vakuum konzentriert und zu einem Feststoff zur Trocke ne eingedampft. Der Rückstand wurde in einer kleinen Menge von Chloroform aufgelöst und in eine Säule, die mit 50 ml Kieselgel gefüllt war, zusammen mit Chloroform gegossen. Sodann wurde nach Adsorption auf der Kolonne mit Chloroform eluiert. Eine Eluatfraktion, enthaltend 5-Acetyl-S-methoxycoriolin B, wurde gesammelt, konzentriert, im Vakuum zu einem Feststoff eingedampft und die Rückstände wurden miteinander mit η-Hexan ver-

809847/0929

rührt. Nadeiförmige Kristalle von S-Acetyl-e-methoxycoriolin B wurden kristallisiert. Es wurde erneut abfiltriert und getrocknet. Schmelzpunkt 115 bis 116⁰C. Ausbeute 79,

65Ο mg von S-Acetyl-e-methoxycoriolin B wurden in 65 ml Methanol aufgelöst und es wurden 1,3 ml 2&Lge wäßrige Natriumhydrogencarbonatlösung zugesetzt und es wurde 1 h und 40 min bei 49 bis 52°C umgesetzt. Die Reaktionslösung wurde mit verdünnter Salzsäure auf einen pH-Wert von 5,0 eingestellt und mit Chloroform extrahiert. Die Extrakte wurden konzentriert und im Vakuum zur Trockene eingedampft. Es wurde aus einer Mischlösung aus Äthylacetat und η-Hexan umkristallisiert, wodurch 550 mg 8-Methoxy~ coriolin B in Form von nadelförmigen Kristallen erhalten wurde. Schmelzpunkt 74,5 bis 75⁰C Ausbeute 93,0%. NMR (CDCl₃)^: 3,34 (-OCH₃, s).

(3) Synthese von la-Octanoyl^-Oö-carboäthoxy-ISa-butano-

lid)-5ß-hydroxy-6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan:

473 mg Natriuminetall wurden in 9 ml absolutem Äthanol aufgelöst 9 ml Diäthylmalonat wurden auf einmal unter Rühren zugesetzt, v/ob ei die Lösung bei 52⁰C gehalten wurde. Nachdem die Lösung bei der obigen Temperatur 30 min gehalten v/orden v/ar, wurden 1,6 g 8-Methoxycoriolin B auf einmal zugesetzt und darin unter Rühren aufgelöst. Die Temperatur der Lösung wurde weitere 8 h bei 50 bis 52⁰C gehalten.

Zu der obigen Reaktionslösung wurden jeweils 40 ml Äthylacetat und Wasser gegeben. Es wurde in einem Scheidetrichter geschüttelt und das Ganze wurde stehen gelassen, um die wäßrige Schich zu entfernen. Die obere Schicht wurde mit Salzsäure neutralisiert und mit 20 ml Wasser gewaschen.

Die Schicht der Athylacetatfraktion wurde konzentriert und im Vakuum zu einem Feststoff eingedampft. Der Rückstand wurde mit

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einer geringen Menge von η-Hexan verrührt. Die resultierenden Kristalle der angestrebten Produkte wurden filtriert und getrocknet, wodurch 1,05 g nadelförmige Kristalle erhalten wurden Schmelzpunkt 152 bis 152,5°C NMR (CDCl₃)^: ^26 (-OCH₃, s), 4,29, 4,06 (-CH₂CH₃, d, J = 7).

Die Mutterlauge der Kristalle wurde konzentriert, zur Trockene eingedampft und sodann unter Verwendung von 45 ml Kieselgel chromatographiert. Es wurde zuerst mit Chloroform und sodann mit V/o Methanol/Chloroform eluiert. Fraktionen, die die angestrebten Produkte enthielten, wurden konzentriert und zu einem Feststoff eingedampft. Die Rückstände wurden mit η-Hexan behandelt, wodurch I90 mg nadeiförmige Kristalle erhalten wurden. Schmelzpunkt 149 bis 151⁰C

Ver/Tleichsbeispiel 2 '

Synthese von 1 a-Octanoyl-4- (16-carboäthoxy-15oc-butanolid)-6ß, 7ß oxid~5ß,8ß-dihydroxyhirstan:

(1) Synthese von 8-0-Tetrahydropyranylcoriolin B:

1,48 g 5-Acetylcoriolin B wurden in 30 ml wasserfreiem Benzol aufgelöst und es wurde unter Rühren mit 28 mg p-Toluolsulfonsäure und 0,54 ml 3,4-Dihydro-2H-pyran versetzt. Das Gemisch wurde 2 h und 40 min bei Raumtemperatur stehen gelassen. Die Reaktionslösung wurde zweimal mit jeweils 10 ml Wasser gewaschen, um die Benzolphase abzutrennen. Diese wurde konzentriert und im Vakuum eingedampft. Auf diese Weise wurden 2,1 g öliges Produkt von 5-Acetyl-8-0-tetrahydropyranylcoriolin B erhalten. Das obige Produkt wurde ganz in 140 ml Methanol aufgelöst. Hier zu wurden 2,8 ml 2?6ige wäßrige Natriumhydrogencarbonatlösung gegeben und das Gemisch wurde 1 h und 20 min lang bei 55 bis 6O⁰C gehalten. Die Reaktionslösung wurde mit Salzsäure neutralisiert und konzentriert. Die Rückstände wurden in Äthylacetat aufgelöst und mit einer geringen Wassermenge gewaschen, um die

B 0 9 8 A 7 / 0 9 2 9

Äthylacetatphase zu isolieren. Diese wurde im Vakuum konzentrier und eingedampft, wodurch 1,68 g öliges Produkt von 8-0-Tetrahydropyranylcoriolin B erhalten wurden.

(2) Synthese von la-Octanoyl^-Oö-carboäthoxy-^ct-butanolid)~6ß,7ß-oxid-5ß,8ß~dihydroxyhirstan:

433 mg Natriummetall wurden in 9 ml absolutem Äthanol aufgelöst Es wurden 9 ml Diäthylmalonat zugesetzt und das Gemisch wurde 30 min lang bei 52 bis 63⁰C gehalten. Sodann wurden 1,68 g 8-O-Tetrahydropyranylcoriolin B, gelöst in 2,2 ml absolutem Äthanol, zugefügt. Das Gemisch wurde 4 h und 30 min lang bei 54 bis 60⁰C umgesetzt und in der gleichen Weise wie im ■Vergleichsbeispiel 1 (3) behandelt, um die angestrebten Produkte zu extrahieren. Das Lösungsmittel wurde von dem Extrakt abdestilliert. 8,6 g Rückstand wurden in 88 ml Methanol aufgelöst und zu dem Gemisch wurden 0,18 ml konzentrierte Salzsäure gegeben. Das Gemisch wurde 1 h lang bei Raumtemperatur stehen gelassen, mit Natriumhydroxid neutralisiert und sodann konzentriert.

Die Rückstände wurden mit Wasser versetzt und mit Äthylacetat extrahiert. Sodann wurde der Extrakt mit Wasser gewaschen, konzentriert, zu einem Feststoff eingedampft und sodann mit einer geringen Menge von n-Hexan behandelt, um das angestrebte Produkt zu kristallisieren. Dieses wurde durch Filtration gewonnen und getrocknet, wobei 650 mg nadeiförmige Kristalle erhalten wurden. Schmelzpunkt 183 bis 186⁰C. Ausbeute 36,4%. NI-IR (CDCl₃) ^: 4,25, 4,03 (OCH₂CH₃, d, ^J = 7).

Vergleichsbeispiel 3,

Synthese von 1a-(a-Hydroxyoctanoyl)-4-(i6-carboäthoxy-15a-butanolid)-5ß-hydroxy-6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan:

Synthese von 2^f,5-Diacetyl-5-dihydrocoriolin C:

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Wie im Vergleichsbeispiel 1 (1) wurden 2 g 5-Dihydrocoriolin C acetyliert, wobei 10 ml Pyridin und 1,4 ml Essigsäureanhydrid verwendet wurden. Es wurde mit Kieselgel chromatographiert und das Produkt wurde umkristallisiert, wodurch 1,12 g 2',5-Diacetyl-5-dihydrocoriolin C als nadeiförmige Kristalle erhalten wur den. Schmelzpunkt 133,5⁰C. Ausbeute 47%.

(2) 5-Dihydro-8-methoxycoriolin C:

700 mg 2^f,5-Diacetyl-5-dihydrocoriolin C wurden in 1,0 ml Dimethylformamid aufgelöst und mit 1 ml Methyljodid in Gegenwart von 182 mg Silberoxid 2 h lang bei 40⁰C umgesetzt. Die Reaktion produkte wurden einer Chromatographie mit Kieselgel unterworfen, wodurch 316 ml eines öligen Produkts von 2^f,5~Diacetyl-5-dihydro-8-methoxycoriolin C erhalten wurden. Ausbeute 63,8%.

1,3 g der obigen Verbindung wurden in 100 ml Methanol aufgelöst, mit 4,8 ml einer 2%igen wäßrigen Natriumhydrogencarbonatlösung versetzt und sodann 1 h lang bei 57 bis 60°C behandelt. Die Reaktionslösung wurde mit 1N-Salzsäure neutralisiert und konzentriert. Die konzentrierte Lösung wurde in einer geringen Menge von Äthylacetat aufgelöst, mit Wasser gewaschen und die Äthylacetatphase wurde konzentriert und getrocknet. Der erhaltene Rückstand wurde in einer kleinen Menge von Chloroform aufgelöst und chromatographiert, wobei 30 ml Kieselgel verwendet wurden. Es wurde mit Chloroform und sodann einer 0,5%igen Methanol/Chloroform-Lösung eluiert. Das Eluat wurde konzentriert und eingedampft, wodurch 620 mg des angestrebten Produkts als amorpher Feststoff erhalten wurden. Ausbeute 56,83%. NMR (CDCl₃)^: 3,35 (-OCH^, s).

(3) Synthese von 1a-(a-Hydroxyoctanoyl)-4-(i6-carboäthoxy-15cc-butanolid)-5ß-hydroxy-6ß, 7ß-oxid-8-methoxyhirstan:

180 mg Natriummetall wurden in 5 ml absolutem Äthanol aufgelöst und mit 3 ml Diäthylmalonat versetzt. Sodann wurde das Gemisch

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'^:>ΐίΤ,

rO

30 min lang bei 55⁰C stehen gelassen. 473 mg 5~Dihydro-8-methoxycoriolin· C, gelöst in 1 ml Äthanol, vrurden zu der obigen Lösung gegeben und das Gemisch wurde 2 h lang bei 57 bis 62°C umgesetzt. Jeweils 15 ml Äthylacetat und Wasser wurden zu der
Reaktionslösung zugesetzt und das Gemisch wurde geschüttelt. Di Äthylacetatphase wurde isoliert und mit Wasser gewaschen. Die
Äthylacetatphase wurde abgetrennt und im Vakuum getrocknet. Der Rückstand wurde unter Zugabe einer geringen Menge von n-Hexan
kristallisiert, filtriert und getrocknet. Auf diese Weise wurden 225 mg nadeiförmige Kristalle erhalten. Schmelzpunkt 104,5 ⁰

bis 105,5⁰C, Ausbeute 38,2#. NMR (CDCl₃)^: 3,25 (-OCH₃, s),
4,25, 4,00 (-OCH₂CH₃, d, J= 7).

Verflleichsbeispiel 4

Synthese von 1 α-(α-Hydroxyoctanoyl)-4-(16-carboäthoxy-15a~butanolid)-6ß,7ß-oxid-5ß,8ß-dihydroxyhirstan:

(1) Synthese von S-O-Tetrahydropyranyl-S-dihydrocoriolin C

1,0 g 2',S-Diacetyl-S-dihydrocoriolin C wurden in 20 ml wasserfreiem Benzol aufgelöst und das Gemisch wurde mit 20 mg p-ToluoT. sulfonsäure und 0,37 ml 3,4-Dihydro-2H-pyran versetzt. Es wurde in der gleichen Weise wie im Vergleichsbeispiel 2 (1) umgesetzt. Sodann wurde das angestrebte Produkt mit Äthylacetat extrahiert] wodurch 1,35 g eines öligen Produkts von 2^T,5-Diacetyl-8-0-tetrahydropyranyl-5-dihydrocoriolin C erhalten wurden. Das Produkt wurde mit 2?oiger wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung in Methanol hydrolysiert, wodurch 1,06 g eines öligen Produkts von ß-O-Tetrahydropyranyl-S-dihydrocoriolin C erhalten wurden.

(2) Synthese von 1 α-(α-Hydroxyoctanoyl)-4-(16-carboäthoxy-15a-butanolid)-6ß,7ß-oxid-5ß,8ß-dihydroxyhirstan:

100 mg Natriummetall wurden in 2 ml absolutem Äthanol aufgelöst und mit 2 ml Diäthylmalonat versetzt. Das Gemisch wurde 30 min

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bei 55⁰C stehen gelassen. Hierzu wurden 309 mg 8-0-Tetrahydropyranyl-5-dihydrocoriolin C, gelöst in 1 ml Äthanol, gegeben. Es wurde 3 h lang bei 58⁰C umgesetzt. Jeweils 10 ml Äthylacetat und Wasser wurden zu der obigen Reaktionslösung zugesetzt und das Gemisch wurde geschüttelt. Die Äthylacetatphase wurde abgetrennt und mit Wasser gewaschen.

Die Lösungsmittelphase wurde konzentriert und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wurde in 15 ml Methanol aufgelöst und mit 0,03 ml konzentrierter Salzsäure versetzt. Sodann wurde 1 h lang bei Raumtemperatur stehen gelassen. Nach Konzentrieren der Reaktionslösung wurden Äthylacetat und Wasser zugegeben und die Lösungsmittelphase wurde abgetrennt, mit Wasser gewaschen, konzentriert und zu einem Feststoff eingedampft. Der Rückstand wur de durch Behandlung mit einer'geringen Menge von η-Hexan kristallisiert. Die resultierenden Kristalle wurden filtriert und getrocknet, wodurch 120 mg des angestrebten Produkts in Form von nadeiförmigen Kristallen erhalten wurden. Schmelzpunkt 129 bis 131°C. Ausbeute 31,5%, NMR (CDCl₃)⁶: 4,18, 3,97 (-OCH₂CH₅, d, J* 7).

Vergleichsbeispiel 5

Synthese von 1a-0ctanoyl-4-(i6-carbomethoxy~15a>butanolid)-5ß~ hydroxy-6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan:

60 mg Natriummetall wurden in 1,0 ml absolutem Methanol aufgelöst. Die Lösung wurde bei 47⁰C gehalten. Es wurden 0,85 ml Dimethylmalonat unter Rühren zugesetzt. Hierauf wurde weitere 30 min lang bei 47°C gerührt. 200 mg 8-Methoxycoriolin B wurden sodann zugesetzt und es wurde 7 h lang bei 58 bis 61⁰C umgesetz Sodann wurde bei Raumtemperatur über Nacht stehen gelassen.

Die Reaktionslösung wurde mit 1N-Salzsäure neutralisiert. Der Niederschlag wurde durch Filtration gewonnen, mit wäßrigem Me-

H098A7/0928

thanol gewaschen und sodann getrocknet, wodurch 140 mg rohe Kri stalle des angestrebten Produkts erhalten wurden.

Das resultierende grobe Rohprodukt wurde aus wäßrigem Methanol umkristallisiert, wodurch 70 mg nadeiförmige Kristalle erhalten wurden. Schmelzpunkt 138 bis 139⁰C.

Die Kristalle wurden erneut aus einer Mischlösung von Äthylacetat und n-Hex_an umkristallisiert, wodurch 50 mg nadelförmige Kristalle des angestrebten Produkts erhalten wurden. Schmelzpunkt 149,5 bis 151⁰C MMR (CDCl₃)^: 3,25 (OCH₃, s), 3,75 (COOCH₃, s).

Nachstehend werden anhand der Beispiele das erfindungsgemäße Herstellungsverfahren beschrieben.

Beispiel 1

Synthese von 1 a-Octanoyl-4- (16-methylen-15oc-butanolid) -5ß-hydro xy-6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan (Verbindung Nr. 1):

(1) 650 mg 1a-0ctanoyl-4-(16-carboäthoxy-15a-butanolid)-5ß-hydroxy-6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan wurden in 65 ml Methanol aufgelöst unddas Gemisch wurde 1 h und 20 min lang unter Zugabe von 6,5 m^Yltfatriumhydroxid am Rückfluß erhitzt. Die Reak tionslösung wurde mit 1N-Salzsäure neutralisiert und konzentriert. Jeweils 20 ml Äthylacetat und Wasser wurden zu dem Konzentrat gegeben. Nach dem Schütteln der Lösung wurde die Äthylacetatphase abgetrennt und mit einer kleinen Wassermenge gewaschen. Die Äthylacetatphase wurde konzentriert, zu einem Feststoff eingedampft und dieser wurde aus einer Mischlösung von Äthylacetat und η-Hexan umkristallisiert. Hierbei wurden 635 mg nadeiförmige Kristalle von 1a-0ctanoyl-4-(i6-carboxy-15a-butanolid)-5ß-hydroxy-6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan erhalten. Schmelzpunkt (Zersetzungspunkt) I78 bis 179°C

809847/0928

618

j NACHGEREtOHTJ

(2) 635 mg der unter (1) erhaltenen Verbindung wurden in 2,9 ml Methanol aufgelöst. Es wurden 0,53 ml ^Diäthylamin und 0,31 ml einer 3O?6igen wäßrigen Formaldehydlösung unter Rühren zugesetzt. Es wurde 2 h lang bei Raumtemperatur umgesetzt. Die Reaktionslösung wurde im Vakuum konzentriert und die zurückgebliebene Lösung wurde durch Zugabe von 50 ml Äthylacetat, 30 ml Wasser und der geeigneten Menge von 1N-Salzsäure unter Schütteln auf einen pH-Wert von 4 eingestellt. Die Äthylacetatphase wurde abgetrennt und mit einer kleinen Wassermenge gewaschen. Die Äthylacetatphase wurde konzentriert. 495 mg Rückstand wurden aus Äthylacetat/η-Hexan umkristallisiert, wodurch 160 mg des angestrebten Produkts, d.h. der Verbindung Nr. 1, in Form von nadeiförmigen Kristallen erhalten wurden. Schmelzpunkt 152 bis 153⁰C NMR^(CDCl₅) : 3,43 (-OCH₃, s), 6,23, 5,59 (=CH₂, s).

Die von dem umkristallisierten Produkt abgetrennte Mutterlauge wurde konzentriert, zu einem Feststoff eingedampft und in eine Säule eingegeben, die mit 15 ml Kieselgel gefüllt war. Es wurde nacheinander mit Chloroform, 0,5% Methanol/Chloroform und Λ% ^Methanol/Chloroform eluiert. Die Fraktion, die das angestrebte Produkt enthielt, wurde abgetrennt, konzentriert und das Produkt wurde umkristallisiert, wodurch 140 mg sekundäre Kristalle erhalten wurden. Schmelzpunkt 149 bis 149,5°C, Gesamtausbeute 300 mg.

Beispiele 2 bis 4

Verbindungen mit der folgenden allgemeinen Formel, die in der Tabelle I zusammengestellt sind, wurden in der gleichen Weise wie im Beispiel 1 synthetisiert. - *

809847/0928

B»i- Ver

angestrebte Sub

-C0(CH2)₆CH₃

I

\
Ausgangssub

•

MeOH

Ausbeu

X^s

MeOH

ange

Physikalisches

/ iirisxaiie
* Fp: 164,5 -

spiel bin-

stanz

-CH₂

stanz (ver

1N-NaOH
Reak-

te der
freien
Säure

wäßriger

streb
tes
Produkt

Aussehen

165,5⁰C,

Nr. dung
Nr.

-OH

wendete Menge)

- 25 -

tions-

(ver

HCHO

1 \ " AV

Eigens chaften

NMR (CDCl,)ο
5,31, 6,θδ
(-Cg₂)

Tabelle I

bedin-

wendete

Diäthyl-

I ) AD—
(T^k V^a

Reaktion (1

gungen

Menge)

amin

gape

amorph

-COCHC₆H₁₃

1)

Reak-
tionsbe-

2) Aus-
beu-

Fp: 54 -. 58⁰C

OH

3)

Reaktion (2)

dingun-

xe

NMR (CDCl,) :

-CH₂

D

gen

3,40 (-OCH, ,)
5,57, 6,21³'3

-OCH₃
•"A

30 ml

570 mg

2)

2,3 ml

2 2

R:

R: -C0(CH₂)₆CH₃

2,1 ml

(570 mg)

0,29 ml

1) 228 mg nadeiförmige

X:

X: -COOC₂H₅

15 min

3)

0,46 ml

2) 44,1?

CD

2:

2: -OH

Rück
flüs
sen

1 h 50
min lang
bei Raum-

O
CO

(600 mg)

4)

temp.

gr

.

D

6 ml

220 mg

0,9 ml

3 3

R:

R: -COCHC₆H₁₃

2)

0,52 ml

(220 mg)

0,14 ml

1)130mg

•
OH

3)

20 min

D

0,22 ml

2)65,6%

T

X:

X: -COOC₀H₁-

Rück
flüs
sen

2)

1 h lang
bei Raum-
temp.

Z
Mb««

2:

2: -CH₃
(228 mg)

3)

D

4)

2)

3)

D

2)

3)

4)

	•	H	I	•I	bei F temp.	T- CVl I^ O·	ι H Φ H ta	-
		seile	KrJ t 0	U	30 ml 510 mg 2 ml (510 mg) 30 min Rück-
		g	O O -O	5,35, 6,05	<»■■> <~» ^~s ν oj to»
		Fortsetzunp	nadelförmii stalle Fp: 129-131 NMR (CDCl,]		to	(600 mg)
			I) 200 mg 2) 37,5%	H Ö 3 *α η a a*	P OJ W ο ο ο _ O OW O OO I I I ·· ·« ··
				2 ml 0,25 0,4 D 2 h 1	ITV rf" VO
			O-O W _, O OW O O I I I
I			· ·· ·· cd X* N
I

809847/0928

Beispiel 5

Synthese von 1a~0ctanoyl-4-(i6-methylen~15a-butanolid)-5--oxo-· 6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan (Verbindung Nr. 5):

200 mg 1a-0ctanoyl-4-(i6-methylen-15a-butanolid)-5ß-hydroxy-6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan wurden in 5 ml Pyridin aufgelöst. Unter Eiskühlung wurde eine Suspension zugesetzt, die in der Weise hergestellt worden war, daß 200 mg Chromsäure unterEiskühlung zu 7 ml Pyridin gegeben worden waren. Es wurde unter Rühren weitere 48 h lang bei 1O⁰C umgesetzt. Die Reaktionslösun wurde filtriert und das Filtrat wurde mit Äthylacetat unter Zugabe von Wasser extrahiert. Die Äthylacetatphase wurde isoliert mit Wasser gewaschen, konzentriert und sodann getrocknet. Der Rückstand wurde mit 10 ml Kieselgel chromatographiert. Die Adsorptionsschicht auf dem Kieselgel wurde mit Chloroform und sodann mit 0,7% Methanol/Chloroform eluiert. Die Fraktion, die das Eluat von 0,756 Methanol/Chloroform enthielt, wurde konzentriert und zur Trockene eingedampft. Das Produkt wurde aus Äthylacetat/n-Hexan umkristallisiert, wodurch 180 mg des angestrebten Produkts als nadeiförmige Kristalle erhalten wurden. Schmelzpunkt 68 bis 69°C (89,6# Ausbeute). MR: (CDCl₃)S, 3,45 (s, OCH₃), 5,58, 6,17 (=CH^).

Beispiel 6

Synthese von 1a-Octanoyl-4-(16-methylen-15a-butanolidj-5-oxo-6ß,7ß-oxid-8ß-hydroxyhirstan (Verbindung Nr. 6):

(1) Synthese von 1a-Octanoyl-4-(16-methylen-15oc-butanolid)

6ß,7ß-oxid-5ß-acetoxy-8ß-hydroxyhirstan:

700 mg 1 a-Octanoyl-4- (16-methylen-15cc-butanolid)-6ß, 7ß-oxid-5ß,8ß-dihydroxyhirstan wurden in 3 ml Pyridin aufgelöst und das Gemisch wurde mit 0,21 ml Essigsäureanhydrid versetzt. Es wurde

809847/0928

1189

24 h lang bei 2 bis 3°C umgesetzt. Die Reaktionslösung wurde mi Wasser verdünnt und mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wur de mit Wasser gewaschen und im Vakuum konzentriert. 870 mg des resultierenden Rückstandes wurden mit 30 ml Kieselgel chromatographiert. Das resultierende Produkt wurde nacheinander mit Chloroform, 0,5% Methanol/Chloroform und 1% Methanol/Chloroform eluiert. Die Fraktion, die das angestrebte Produkt enthielt, wurde konzentriert und zur Trockene eingedampft. Es wurden 640 mg (82,9% Ausbeute) der angestrebten Verbindung in Form eines amorphen Pulvers erhalten. NMR (CDCl₃) : 2,13 (-OCOCH^s).

(2) Synthese von 1a-0ctanoyl-4-(i6-methylen-15ct-butanolid) 6ß,7ß-oxid-5ß-acetoxy-8ß-tetrahydropyranylhirstan:

640 mg 5-Acetoxyverbindung, hergestellt gemäß (1) oben, wurden in 14 ml Benzol aufgelöst. Unter Rühren wurden 0,2 ml 3,4-Dihydro-2H-pyran und 18 ml p-Toluolsulfonsäure zugegeben. Es wurde 30 h lang bei Raumtemperatur umgesetzt.

Die Reaktionslösung wurde in einen Scheidetrichter gegeben. Die Benzolphase v/urde nacheinander mit 5 ml Wasser, 2%iger wäßriger Natriumhydrogencarbonatlösung und 6 ml Wasser gewaschen.

Die Benzolphase wurde konzentriert und getrocknet. Der Rückstand wurde in 50 ml Methanol aufgelöst, mit einer 2%igen wäßrigen Natriumhydrogencarbonatlösung versetzt und 2 h lang bei 48 bis 53⁰C gehalten. Die Reaktionslösung wurde konzentriert und sodann mit einer geringen Menge von Wasser und Äthylacetat geschüttelt, um die ^thylacetatphase abzutrennen. Diese v/urde mit Wasser gewaschen, konzentriert und sodann zur Trockene eingedampft, wodurch 720 mg eines öligen Produkts der 3-0-Tetrahydro- · pyranylverbindung erhalten wurden.

(3) Synthese von 1a-0ctanoyl-4-(i6-methylen-15a-butanolid)·· 5-oxo-r 6ß, 7ß-oxid-8ß-hydroxyhirstan:

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- 29 -

189

720 ml 8-0-Tetrahydropyranylverbindung, hergestellt unter (2) oben, wurden in 7 ml Pyridin aufgelöst. Unter Eiskühlung wurde eine Suspension zugesetzt, die durch Zugabe von 500 mg Chromsäure unter Eiskühlung zu 8,5 ml Pyridin hergestellt worden war Das Gemisch wurde 24 h bei 20⁰C gehalten. Die Reaktionslösung wurde filtriert und das Filtrat wurde mit Äthylacetat unter Zugabe von Wasser extrahiert.

Die Äthylacetatphase wurde abgetrennt, mit Wasser gewaschen, konzentriert und getrocknet.

Der Rückstand wurde in 16 ml Methanol aufgelöst, mit 0,08 ml konzentrierter Salzsäure versetzt und bei Raumtemperatur 2 h lang stehen gelassen. Während dieser Zeit wurden die Tetrahydro pyranylgruppen entfernt. "

Die Reaktionslösung wurde mit Äthylacetat unter Zugabe von Wasser extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser gewaschen, konzentriert und getrocknet. Der Rückstand wurde mit 25 ml Kieselgel chromatographiert. Die Adsorptionsschicht auf dem Kieselgel wurde nacheinander mit Chloroform und 1% Methanol/Chloroform eluiert. Die mit Λ% Methanol/Chloroform eluierte Fraktion wurde konzentriert, zur Trockene eingedampft und das Produkt wurde aus Äthylacetat/n-Hexan-Lösung umkristallisiert, wodurch 245 mg des angestrebten Produkts als nadeiförmige Kristalle erhalten wurden. Schmelzpunkt 175 bis 175,5°C. NMR ⁶

5,40, 6,35 C=CH₂). Beispiele 9 bis 13

Die in der folgenden Tabelle aufgeführten Verbindungen wurden wie im Beispiel 8 (3) synthetisiert.

803847/0921

OO O CO 00

Ver

angestrebte Sub

Ausgangssub

(120 mg)
[1,2 ml]

··

CrO-

30

mg

1) Reaktions-

angestreb

Aussehen

S

amorphes Pulver

I
1

nadeiförmige Kri

Bei

bin

stanz

stanz (verwen

R: -CO(CH₂)₆CH₃

Menj

je

ml

temp.

tes Pro

physikalische

VJ
η

Fp: 42 bis 45°C

stalle

spiel

dung

dete Menge)

X: -COOCpHc

Pyridin-

2) Reaktions

dukt

Eigenschaften

71
Θ

NMR ( CDCl₃ )k·.

Fp: 129 bis 13O,5°C

Nr.

Pyridin (ver

Y: -OH

Menge

zeit

1) Abgabe

0

3,43 (-0CH₃,s),5,37

NMR (CDCl₃)k: 3,29

wendete Menge)

Z: -OCH₃

2) Ausbeute

6,30 (=CH₂)

(-OCH₅,s)^ ; 4.22.
4.00ToCH₂CH,, d,

7

R: -COCHC₆H₁₃

R: -COCHC₆H₁,

(200 mg)
L5,0 ml]

100

3 bis 7°C

30 mg

J = 7J "

9

OH

2,0

7 Tage

25,1%

Y · fTT
•Λ. · -ννΠ«

X: =CH₂

mg

nadeiförmige Kri-
A· at· ^I T Λ.

Y: =0

Y: OH

ml

stalle

Z: -OCH₃

Z: OCH₃

Fp: 98 bis 99⁰C

(120 mg)
L1,2 ml]

NMR (CDCl₃)*>: 5,42

R: -COCHC₆H₁₃

6,37 C=CH₂)

8

R: -COCHC₆H₁,

OH

100

3 bis 7°C

40 mg

10

OH

X: =CHp

2,0

mg

7 Tage

35,5%

X: -CH₂
Y: =0

Y: OH

ml

Z: -OH

R: -CO(CH₂)₆CH₃

9

X:' -COOCpH=

250

10⁰C

171 nig

11

Y: =0

7,0

43 h

85,8°/₀

Z: -OCH,

3

OO O co OO

co

00

-

R: -COCHC₆H₁,
t \J I ^y

R: -COCHC^H.,, ^v

(200 mg)

100

-

ml

•

31

3

-

15

-

¹W-

mg

■

nadeiförmige Kristalle

(-0CH₃, ς

(-0CH^. ε

Z j

12 10

OH

J ■"- ■ w*
OH

[5 ml]⁰

2,0

mg

7

19

bis 7⁰C

45

6%

mg

Fp: 138 bis 139⁰C

j, d,

ί
m I
Ii

X: -COOCgH₅

R: -CO(CHg)₆CH₃

ml

Tage

37,

7%

NMR (CDCl₃)*>: 6,29

I

Y: =0

Y: -OH

X:-COOCH₃

4,23, 4,02 (OCHgCH,

Z: -OCH,

Z: -OCH,;

Y: -OH

J =7) " "

"(120 mg)
!/l,2ml]

Z: -OCH,
*(55 mg)

R: -CO(CHg)₆CH₃

L1,5 ml]

R: -CO(CHg)₆CH₃

X: -COOH

200

10

mg

amorphes Pulver

(-0CH,, £

13 11

X: -COOH

Y: -OH

5,0

mg

25

⁰C

121

4%

Fp: 42 bis 45°C

Y: =0

Z: -OCH₃

ml

h

60,

NMR (CDCl₃) : 3,40

Z: -OCH,

nadeiförmige Kristalle

Fp: 107 bis 109⁰C

R: -CO(CHg)₆CH₃

NMR (CDCl₃) : 3,30

14 12

X: -COOCHg

65 mg

bis 23°C

45

3,70 (-COOCH,,s)

Y: =0

1,5

h

69,

Z: -OCH₃

00 CD

Claims

Patentansprüche

Coriolinderivate der allgemeinen Formel:

in der R : -CO(CH₂J₆CH₃ oder -COCH(OH)(CH₂

X : =CH₂,-C00H oder -COOR«,

R'i Niedrigalkylgruppe,

Y : -OH, =0 und

Zx -OH oder -OCH₃.'
2. Coriolinderivate nach Anspruch 1, dadurch g e .kennzeichnet, daß die Substituenten der allgemeinen Formel folgende Bedeutungen haben:

R : -CO(CH₂J₆CH₃ oder -COCH(OH)(CH₂J₅CH.

X : =CH₂, -COOH, -COOCH₃ oder -COOC₂H₅/

Y : -OH und =0 und

Z : -OH oder -OCH₃.
3. 1 cc-Octanoyl-4- (16-methylen-15a-butanolid) -5-oxo-6ß, 7ß-

oxid-8ß-methoxyhirstan.
4." 1 a-Octanoyl-4- (16-methylen-15cc-butanolid)-5-oxo-6ß, 7B-

oxid-8[-hydroxyhirstan.
5. 1 α- (cc-Hydroxyoctanoyl)-4- (16-methylen-15a-butanolidJ-

5-oxo-6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan.

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ORIGINAL INSPECTED
6. 1 a-(ct-Hydroxyoctanoyl)-4- (i6-methylen-15a-butanolid)-5-oxo~6ß,7ß-oxid-8ß-hydroxyhirstan..
7- 1a-0ctanoyl-4-(i6-carboäthoxy-15a-butanolid)-5-oxo-6ß,7ß-oxid-8ß~methoxyhirstan.
8. 1α-Ca-Hydroxyoctanoyl)-4-(1ö-carboäthoxy-ISa-butanolid 5-oxo-6ß,7ß-oxid-8ß-methoxyhirstan.
9. 1g-0ctanoyl-4-(i6-carbomethoxy-15a-butanolid)-5-oxo-6ß, 7ß-oxid^iSethoxyhir s tan.
10. Verfahren zur Herstellung von Coriolinderivaten der allgemeinen Formel:

in der R : -C0(CH₂)₆CH₃ oder -COCH(OH)(CH₂)^CH₃ und Z : -OCH₃ oder -OH,

dadurch gekennzeichnet , daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel:

HOOC

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- 54 -

in der R¹: -CH(CH₂)₆CH₃ oder -COCH(OR²) (C^)₅CH₃,

R : H, Acyl- oder Pyranylgruppe,

Z¹: -OCH₃ oder -OR⁵ und

R : H, Acyl- oder Pyranylgruppe,

bedeuten, mit Dialkylamin und Formaldehyd in einem Lösungsmit-

2 3 tel umsetzt und daß man sodann die Gruppen R und R^ entfernt,

wenn diese Acyl- oder Pyranylgruppen sind.
11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch g e k e η η zeichnet , daß, wenn die Subst gruppen sind, diese Acetylgruppen sind.

2 3 zeichnet , daß, wenn die Substituenten R und R Acyl-
12. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß man als Lösungsmittel einen niedrigen Alkohol verwendet.
13. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß man das Dialkylamin in der 1,5- bis 8-fachen molaren Menge pro Mol der Ausgangsverbindung verwendet.
14. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch g e k e η η-zeichnet, daß man den Formaldehyd in der 1,5- bis 6-fachen molaren Menge pro Mol der Ausgangsverbindung verwendet,
15. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch ' g e k e η η -

ζ e i c

trägt."

zeichnet, daß die Reaktionstemperatur 5 bis 50⁰C be-
16. Verfahren zur Herstellung von Coriolinderivaten der

allgemeinen Formel:

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worin R : -C0(CH₂)₆CH₃ oder -COCH(OH)(CH₂)^

Z : -OH oder -OCH₃,

X : =CH₂ oder -COOR^ und

R : H oder Niedrigalkylgruppe

bedeuten, dadurch gekennzeichnet, eine Verbindung der allgemeinen Formel:

daß man

worin R R² Z R¹

-CO(CHg)₆CH₃ oder -COCH(OR H, Acyl- oder Pyranylgruppe, -OCH₃ oder -OR³,

H, Acyl- oder Pyranylgruppe,

λ. =CH₂ oder -COOR und

H oder Niedrigalkylgruppe

bedeuten, durch ein Oxidationsmittel in einem organischen Lösungsmittel oxidiert und daß man die Gruppen R und Br entfernt, wenn diese Acyl- oder Pyranylgruppen sind.

g e k e η η daß die Substituenten R² und R^, wenn sie
17. Verfahren nach Anspruch 16, dadurch

zeichnet , Acylgruppen sind, Acetylgruppen sind
18. Verfahren nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, daß, wenn der Substituent R eine Niedrigalkylgruppe ist, er eine Methyl- oder Äthylgruppe ist.

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19. Verfahren nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet , daß man als organisches Lösungsmittel Pyridin, Benzol, Aceton, Essigsäure, ^Dimethylsulfoxid oder ein Gemisch davon verwendet.
20. Verfahren nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet , daß man als Oxidationsmittel Chromsäure oder Dicyclohexylcarbodiimid verwendet.
21. Verfahren nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, daß man das Oxidationsmittel in der 1- bis 10-fachen molaren Menge pro Mol der Ausgangsverbindung verwendet.
22. Pharmazeutische,Präparate enthaltend Verbindungen nach Ansprüchen 1 bis 21 gegebenenfalls im Gemisch mit üblichen pharmazeutischen Verdünnungsmitteln oder Trägerstoffen.

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