DE2819898C2

DE2819898C2 -

Info

Publication number: DE2819898C2
Application number: DE2819898A
Authority: DE
Inventors: Alfred Dr. Bottmingen Ch Sallmann; Gerhard Dr. Bettingen Ch Baschang
Original assignee: Ciba Geigy AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1977-05-11
Filing date: 1978-05-06
Publication date: 1989-12-14
Also published as: FR2390424B1; IE780952L; US4421765A; FR2390424A1; DK206278A; IL54689A0; GB1582420A; JPS53141235A; SE439772B; IL54689A; CA1158236A; LU78106A1; NZ187225A; ATA337878A; CH647228A5; NL7805032A; AU3597478A; JPS6319506B2; DE2819898A1; DK152208B

Description

Die Erfindung betrifft substituierte Phenylessigsäureamidverbindungen, ferner Verfahren zu deren Herstellung sowie pharmazeutische Präparate, die diese Verbindungen enthalten.

Die Erfindung betrifft insbesondere Phenylessigsäureamidverbindungen der allgemeinen Formel

worin R₁ Chlor oder Brom darstellt, R₂ Chlor oder Brom bedeutet, R₃ für Hydroxy, Niederalkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Amino oder substituiertes Amino der allgemeinen Formel

-NH-CH(R₄′)-C(=O)-R₃′ (Ib)

steht,
worin R₄′ eine der Bedeutungen von R₄ und R₃′ eine der Bedeutungen von R₃ hat, wobei der Rest der allgemeinen Formel

-NH-CH(R₄)-C(=O)-R₃ (Ic),

worin R₃ und R₄ dieselben Bedeutungen haben wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, aus einem, zwei oder drei Aminosäureestern besteht, und R₄ Wasserstoff oder gegebenenfalls durch Hydroxy, Niederalkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Mercapto, Niederalkylthio mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Carboxy, Niederalkoxycarbonyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen im Niederalkoxyteil, Carbamoyl, Amino, Guanidino, Phenyl, durch Hydroxy monosubstituiertes Phenyl, Imidazolyl, Indolyl oder S′-substituiertes Dithio der allgemeinen Formel

worin R₁ Chlor oder Brom darstellt und R₂ Chlor oder Brom bedeutet, substituiertes Niederalkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt, sowie Salze von solchen Verbindungen der allgemeinen Formel I mit salzbildenden Eigenschaften.

Die im Zusammenhang mit der vorliegenden Beschreibung mit "nieder" bezeichneten Reste und Verbindungen enthalten vorzugsweise 1 bis 7 und in erster Linie 1 bis 4 Kohlenstoffatome.

Der Rest der allgemeinen Formel

-NH-CH(R₄)-C(=O)-R₃ (Ic),

worin R₃ und R₄ dieselben Bedeutungen haben wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, entspricht einer Aminosäure- oder einer Peptid-Verbindung der allgemeinen Formel

worin R₃ und R₄ dieselben Bedeutungen haben wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I und in erster Linie einer entsprechenden α-Aminosäure-Verbindung, wie der Säure selber oder einem Ester oder Amid davon, bzw. einem aus entsprechenden α-Aminosäure-Verbindungen zusammengesetzten Peptid, wie Dipeptid oder Tripeptid. Dabei erfolgt die Bindung mit dem Phenylaminophenylessigsäureteil der Verbindung der allgemeinen Formel I über die a-Aminogruppe einer α-Aminosäure. Bevorzugt als Reste von Aminosäure-Verbindungen der allgemeinen Formel III oder von Aminosäuren, die sich zur Bildung einer Peptid-Verbindung der allgemeinen Formel III eignen, sind Reste von solchen Aminosäuren, für die im genetischen Code die Information zur Proteinbiosynthese vorhanden ist, d. h. von Aminosäuren, die in natürlichen Peptid- oder Proteinsubstanzen vorkommen, wobei solche Aminosäuren in der DL-, aber auch in der D- oder L-Form vorliegen können, wobei vorzugsweise zumindest die dem Rest der allgemeinen Formel

-NH-CH(R₄)-C(=O)- (Id),

worin R₄ dieselbe Bedeutung hat wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, entsprechende Aminosäure die D-Konfiguration besitzt.

Nachfolgend können die Allgemeinbegriffe folgende Bedeutung haben:
Niederalkyl ist z. B. Methyl, Äthyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, Isobutyl, sek.-Butyl oder tert.-Butyl, ferner n-Pentyl, n-Hexyl, Isohexyl oder n-Heptyl.

Niederalkoxy ist z. B. Methoxy, Äthoxy, n-Propyloxy, Isopropyloxy oder n-Butyloxy.

Niederalkylthio ist insbesondere Methylthio, ferner auch Äthylthio.

Niederalkoxycarbonyl ist z. B. Methoxycarbonyl oder Äthoxycarbonyl, ferner n-Propyloxycarbonyl oder Isopropyloxycarbonyl.

Imidazolyl ist z. B. 4-Imidazolyl. Indolyl ist z. B. 3-Indolyl. Durch Hydroxy monosubstituiertes Phenyl ist z. B. 4-Hydroxyphenyl.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I mit salzbildenden Eigenschaften können in freier Form oder in Form ihrer Salze, insbesondere ihrer pharmazeutisch verwendbaren, nicht-toxischen Salze vorliegen. Verbindungen der allgemeinen Formel I mit sauren salzbildenden Gruppen, insbesondere mit freien Carboxylgruppen, können Salze mit Basen bilden, wie Alkali- oder Erdalkalimetall-, insbesondere Natrium-, Kalium-, Magnesium- oder Calciumsalze, ferner Ammoniumsalze, sowie Salze mit organischen Basen, wie mit geeigneten Aminen, z. B. Äthylamin, Triäthylamin, Äthanolamin, Diäthanolamin, Diäthylaminoäthanol, Äthylendiamin, Benzylamin, Procain, Pyrrolidin, Piperidin, Morpholin, 1-Äthyl-piperidin oder 2-Piperidinoäthanol. Verbindungen der allgemeinen Formel I mit basischen salzbildenden Gruppen, insbesondere mit Amino- und Guanidinogruppen, können Säureadditionssalze, u. a. mit anorganischen Säuren, wie Halogenwasserstoffsäuren, z. B. Chlorwasserstoffsäure oder Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure oder Phosphorsäure, oder mit organischen Säuren, wie aliphatischen, cycloaliphatischen, aromatischen oder heterocyclischen Carbon- oder Sulfonsäuren, z. B. Ameisen-, Essig-, Propion-, Bernstein-, Glykol-, Milch-, Äpfel-, Wein-, Zitronen-, Ascorbin-, Malein-, Hydroxymalein-, Fumar-, 4-Hydroxybenzoe-, Salicyl-, 4-Aminosalicyl-, Embon-, Methansulfon-, Äthansulfon-, 2-Hydroxyäthansulfon-, Äthylensulfon- oder Toluolsulfonsäure, bilden. Verbindungen der allgemeinen Formel I mit einer sauren und einer basischen salzbildenden Gruppe können auch in der Form der inneren Salze vorliegen.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I der vorliegenden Erfindung können in Form von Gemischen von Isomeren, wie Racematen, oder von reinen Isomeren, z. B. Antipoden, vorliegen.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I besitzen wertvolle pharmakologische, insbesondere anti-inflammatorische und analgetische, Eigenschaften. Die anti-inflammatorische Wirksamkeit kann z. B. an Ratten anhand der im Dosisbereich von etwa 1 bis 10 mg/ kg p. o. deutlichen Wirkung im Kaolin-Pfotenödem nach Helv. Physiol. Acta 25, 156 (1967) und anhand der im Dosisbereich von etwa 10 bis 30 mg/kg p. o. deutlichen Wirkung im Adjuvans-Arthritis-Modell nach Pharmacology 2, 288 (1969) sowie in vitro anhand der Hemmwirkung auf die Prostaglandinsynthese aus Arachidonsäure durch Rinder-Samenblasenenzyme im Konzentrationsbereich von etwa 50 bis 200 mg/l nachgewiesen werden. Die analgetische Wirkung zeigt sich z. B. im Writhing-Syndrom der Maus nach Pharmacol. exp. Therap. 125, 237 (1959) im Dosisbereich von etwa 100 mg/kg p. o.

Es hat sich zudem herausgestellt, daß sich die Verbindungen der allgemeinen Formel I, insbesondere diejenigen, in denen zumindest die dem Rest der allgemeinen Formel

-NH-CH(R₄)-C(=O)- (Id),

worin R₄ dieselbe Bedeutung hat wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, entsprechende Aminosäure die D-Konfiguration aufweist, durch eine relativ geringe Toxizität und insbesondere eine gute gastrointestinale Verträglichkeit auszeichnen, wie sich anhand von Standardversuchen nachweisen läßt.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I können deshalb als Antiphlogistika, z. B. zur Behandlung von rheumatischen, arthritischen und anderen, mit Entzündungen verbundenen Erkrankungen, oder als Analgetika, z. B. zur Behandlung von Schmerzzuständen, verwendet werden.

Zudem eignen sich die Verbindungen der allgemeinen Formel I der vorliegenden Erfindung als UV-Absorber für kosmetische Zwecke, z. B. als Bestandteil von Sonnenschutzcremen, da sie die schädlichen, rötenden Strahlen von 290-300 nm absorbieren, während sie die erwünschten bräunenden Strahlen von über 315 nm durchlassen.

Die den Aminosäure- oder Peptid-Amidverbindungen der allgemeinen Formel I zugrundeliegenden Phenylaminophenylessigsäuren sowie deren Ester sind bekannt und werden z. B. in der US-Patentschrift Nr. 36 52 762 beschrieben; sie zeigen ebenfalls antiphlogistische sowie analgetische Wirkungen. Im Vergleich mit diesen vorbekannten Verbindungen weisen die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I analoge antiphlogistische, dazu etwas geringere analgetische Wirkungen auf; sie sind jedoch deutlich weniger toxisch und besser verträglich. Auch einfache Amide der genannten Phenylaminophenylessigsäuren sind bekannt; diesen gegenüber sind die Verbindungen der allgemeinen Formel I, insbesondere diejenigen, in denen zumindest die dem Rest der allgemeinen Formel

-NH-CH(R₄)-C(=O)- (Id),

worin R₄ dieselbe Bedeutung hat wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, entsprechende Aminosäure die D-Konfiguration aufweist, wesentlich stärker antiphlogistisch wirksam und weisen zudem einen besseren therapeutischen Index auf. Schließlich sind aus der Deutschen Offenlegungsschrift 26 18 936 bereits N-Acylglutamine mit antiinflammatorischen Eigenschaften bekannt, die sich jedoch bezüglich der Struktur des Acylteils deutlich von den erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I unterscheiden.

Insbesondere betrifft die Erfindung die in den Beispielen beschriebenen Verbindungen der allgemeinen Formel I, vorzugsweise diejenigen, in denen zumindest die dem Rest der allgemeinen Formel

-NH-CH(R₄)-C(=O)- (Id),

worin R₄ dieselbe Bedeutung hat wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, entsprechende Aminosäure die D-Konfiguration aufweist.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I können nach an sich bekannten Methoden hergestellt werden.

So kann man sie erhalten, wenn man eine Verbindung der allgemeinen Formel

oder ein reaktionsfähiges Derivat davon mit einer Verbindung der allgemeinen Formel

oder einem Derivat davon umsetzt, wobei R₁, R₂, R₃ und R₄ dieselben Bedeutungen haben wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I und funktionelle Gruppen in geschützter Form vorliegen können, und, wenn notwendig, in verfahrensgemäß erhältlichen Verbindungen geschützte funktionelle Gruppen in die freien funktionellen Gruppen überführt, und, wenn erwünscht, eine erhaltene erfindungsgemäße Verbindung der allgemeinen Formel I im Rahmen der Definition der Endstoffe in eine andere erfindungsgemäße Verbindung der allgemeinen Formel I umwandelt, ein erhaltenes Salz in die freie Verbindung der allgemeinen Formel I oder in ein anderes Salz oder eine erhaltene freie Verbindung der allgemeinen Formel I in ein Salz umwandelt und/oder ein verfahrensgemäß erhältliches Isomerengemisch in die einzelnen Isomeren trennt.

Wenn erwünscht oder notwendig, können an der Reaktion nicht teilnehmende, gegebenenfalls in Verbindungen der allgemeinen Formel III vorhandene funktionelle Gruppen vorübergehend geschützt sein und gleichzeitig oder nachträglich wieder freigesetzt werden; geeignete, in Frage kommende Schutzgruppen für funktionelle Gruppen werden in den unten erwähnten Publikationen eingehend beschrieben. So kommen z. B. für Carboxylgruppen z. B. veresternde Gruppen, insbesondere Niederalkyl, z. B. Methyl, Äthyl oder tert.-Butyl, oder Phenylniederalkyl, z. B. Benzyl oder Benzhydryl, und für Hydroxy- und Mercaptogruppen insbesondere Acylreste, wie Niederalkanoyl-, z. B. Acetyl-, oder Aroyl-, z. B. Benzoylreste, oder vor allem Reste, die sich von Kohlensäureverbindungen ableiten, wie Benzyloxycarbonyl, Niederalkoxycarbonyl, z. B. Äthoxycarbonyl oder tert.-Butyloxycarbonyl, ferner gegebenenfalls, z. B. durch Nitro, Niederalkoxy, wie Methoxy, oder Halogen, z. B. Chlor, substituiertes Benzyl, oder Tetrahydropyranylreste als Schutzgruppen in Frage.

Die Umsetzung einer Säure-Verbindung der allgemeinen Formel II mit einer Aminverbindung der allgemeinen Formel III kann nach den z. B. in der Peptidchemie üblichen Methoden erfolgen; es wird in diesem Zusammenhang z. B. auf Schröder and Lübke, The Peptides, Bände I und II (Academic Press; 1965), Lübke, Schröder und Kloss, Chemie und Biochemie der Aminosäuren, Peptide und Proteine, Bände I und II (Georg Thieme Verlag, Stuttgart; 1974), und Wünsch, Synthese von Peptiden, Bd. XV/1 von Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie (Georg Thieme Verlag, Stuttgart; 1974), hingewiesen.

So kann man die Verbindungen der allgemeinen Formel I u. a. nach der sog. Anhydridmethode herstellen, mittels welcher man ein gegebenenfalls in situ hergestelltes Anhydrid einer Säure der allgemeinen Formel II mit der Aminverbindung der allgemeinen Formel III umsetzt. Die Anhydridmethode wird insbesondere unter Verwendung von gemischten, ferner auch von symmetrischen, Anhydriden, z. B. von Anhydriden mit anorganischen Säuren, wie von Säurehalogeniden, insbesondere von Säurechloriden (die man z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II mit Thionylchlorid, Phosphorpentachlorid oder Oxalylchlorid erhalten kann; Säurechloridmethode), von Aziden (die man z. B. aus einem Ester einer Säure der allgemeinen Formel II über das entsprechende Hydrazid und dessen Behandlung mit salpetriger Säure erhalten kann; Azidmethode), von Anhydriden mit Kohlensäurehalbderivaten, wie Kohlensäure-niederalkylhalbestern (die man z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II mit Halogen-, wie Chlorameisensäure-niederalkylestern erhalten kann; Methode der gemischten O-Alkylkohlensäureanhydride), oder von Anhydriden mit dihalogenierter, insbesondere dichlorierter Phosphorsäure, bzw. mit Phosphorigsäurediestern (die man z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II mit Phosphoroxychlorid, Chlorphosphorigsäurediestern, wie 1,3-Butylendioxy-chlorphosphit, oder Diphosphorigsäurediestern, wie Diphosphorigsäuretetraäthylester erhalten kann; Phosphoroxychloridmethode und deren bekannte Modifikationen), durchgeführt. Ferner kann man auch Anhydride mit organischen Säuren, wie gemischte Carbonsäureanhydride (die man z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II mit Phenylessigsäure-, Pivalinsäure- oder Trifluoressigsäurechlorid erhalten kann; Methode der gemischten Carbonsäureanhydride), oder symmetrische Anhydride (die man z. B. durch Kondensation einer Säure der allgemeinen Formel II in Gegenwart eines Carbodiimids, wie N,N′-Dicyclohexylcarbodiimid, oder von 1-Diäthylamino-propin erhalten kann; Methode der symmetrischen Anhydride), verwenden.

Eine weitere bevorzugte Methode zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel II ist die Methode der aktivierten Ester, lt. welcher man einen, gegebenenfalls in situ hergestellten aktivierten Ester einer Säure der allgemeinen Formel II mit der Aminverbindung der allgemeinen Formel III umsetzt. Dabei verwendet man als aktivierte Ester z. B. am Verknüpfungskohlenstoff des veresternden Restes ungesättigte Ester, z. B. Verbindungen vom Vinylester-Typ, wie eigentliche Vinylester (die man z. B. durch Umesterung eines Esters einer Säure der allgemeinen Formel II mit Vinylacetat erhalten kann; Methode des aktivierten Vinylesters), Carbamoylvinylester (die man z. B. durch Behandeln der Säure der Formel II mit einem Isoxazoliumreagens, z. B. 2-Äthyl-5-phenyl-isoxazolium-3′-sulfonat, erhalten kann; 1,2-Oxazolium- oder Woodward-Methode), oder 1-Niederalkoxy-vinylester (die man z. B. durch Behandeln der Säure der allgemeinen Formel II mit einem Niederalkoxy-acetylen, z. B. Äthoxyacetylen, erhalten kann; Äthoxyacetylen-Methode). Ferner kann man Amidinotyp-Ester, wie N,N′-disubstituierte Amidinoester (die man z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II, die man bei Verwendung eines Säureadditionssalzes, z. B. des Hydrochlorids, der Aminkomponente der allgemeinen Formel III, auch in Form eines Salzes, wie eines Ammonium-, z. B. Benzyltrimethylammoniumsalzes, einsetzen kann, mit einem geeigneten N,N′-disubstituierten Carbodiimid, z. B. N,N′-Dicyclohexyl-carbodiimid, erhalten kann; Carbodiimid-Methode) oder N,N-disubstituierte Amidinoester (die man z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II mit einem N,N-disubstituierten Cyanamid, z. B. N,N-Diäthylcyanamid, N,N-Diphenylcyanamid oder N,N-Dibenzylcyanamid, erhalten kann; Cyanamid-Methode), verwenden.

Bevorzugt als aktivierter Ester sind Arylester (die man z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II mit einem durch Elektronen-entziehende Substituenten geeignet substituierten Phenol, z. B. 4-Nitrophenol, 4-Methylsulfonylphenol, 2,4,5-Trichlor-phenol, 2,3,4,5,6-Pentachlor-phenol oder 4-Phenyldiazophenol, in Gegenwart eines geeigneten Kondensationsmittel, wie 2-Äthyl-5-phenyl-isoxazolium-3′-sulfonat, oder durch Umesterung, z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II mit einem zur Umesterung geeigneten Arylester, z. B. Trifluoressigsäure-4-nitrophenylester, wenn notwendig, in Gegenwart eines geeigneten Umesterungskatalysators, z. B. Pyridin, erhalten kann; Methode der aktivierten Arylester).

Weitere aktivierte Ester sind u. a. Cyanmethylester (die man z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II mit Chloracetonitril in Gegenwart einer Base erhalten kann; Cyanmethylester-Methode), Thioester (die man z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II mit gegebenenfalls, z. B. durch Nitro, substituierten Thiophenolen, u. a. mit Hilfe der 1,2-Oxazolium- oder Woodward-Methode, erhalten kann; Methode der aktivierten Thiolester) oder Aminoester (die man z. B. durch Behandeln einer Säure der allgemeinen Formel II mit einer N-Hydroxyamino-Verbindung, z. B. N-Hydroxy-succinimid, N-Hydroxy-piperidin, N-Hydroxy- phthalimid, 8-Hydroxy-chinolin oder 1-Carboxy-2-hydroxy-1,2- dihydro-chinolin, z. B. nach der 1,2-Oxazolium- oder Woodward- Methode, erhalten kann; Methode der aktivierten N-Hydroxyester).

Ferner kann man die Verbindungen der allgemeinen Formel I nach der Methode der cyclischen Amide herstellen, insbesondere indem man Amide von Säuren der allgemeinen Formel II mit fünfgliedrigen Diazacyclen aromatischen Charakters, wie entsprechenden Imidazoliden (die man z. B. durch Behandeln der Säure mit N,N′-Carbonyldiimidazol erhalten kann; Imidazolid-Methode) oder Pyrazoliden (die man z. B. über das Säurehydrazid durch Behandeln mit Acetylaceton erhalten kann; Pyrazolid-Methode), mit einer Aminverbindung der allgemeinen Formel III umsetzt.

Im Zusammenhang mit der Herstellung von Verbindungen der allgemeinen Formel I, worin der Rest der allgemeinen Formel

-NH-CH(R₄)-C(=O)-R₃ (Ic),

worin R₃ und R₄ dieselben Bedeutungen haben wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, für den Rest einer entsprechenden Peptidverbindung der allgemeinen Formel III steht, kann die Umsetzung eines Säureausgangsmaterials der allgemeinen Formel II mit einer Aminverbindung der allgemeinen Formel III auch stufenweise erfolgen. Das heißt, die einen Peptidrest der allgemeinen Formel Ic bildenden Aminosäurereste können auch einzeln oder in Form von kleineren Peptidbruchstücken nach der oben beschriebenen Methode eingeführt werden, indem man z. B. eine Säureverbindung der allgemeinen Formel II oder ein reaktionsfähiges Derivat davon mit einer der Aminverbindung der allgemeinen Formel III entsprechenden Aminosäureverbindung oder einem Derivat davon oder mit einer der Aminverbindung der allgemeinen Formel III entsprechenden kleineren Peptidverbindung oder einem Derivat davon umsetzt und eine so erhältliche Amidverbindung oder ein reaktionsfähiges Derivat davon mit einer weiteren der Aminverbindung der allgemeinen Formel III entsprechenden Aminosäureverbindung oder einem Derivat davon oder mit einem weiteren der Aminverbindung der allgemeinen Formel III entsprechenden kleineren Derivat davon umsetzt.

Wie erwähnt, wird die Reaktion einer Säureverbindung der allgemeinen Formel II oder eines reaktionsfähigen Derivates davon mit einer Aminverbindung der allgemeinen Formel III oder einem Derivat davon in an sich bekannter Weise durchgeführt, wobei man, wenn notwendig oder erwünscht, in Gegenwart eines geeigneten Kondensationsmittels, wie eines entsprechenden basischen Mittels, z. B. von einer organischen Base, wie eines Triniederalkylamins, z. B. von Triäthylamin oder Diisopropyl-äthyl-amin, oder von einer aromatischen oder hetercyclischen Base, z. B. von Pyridin, oder eines Gemisches von basischen Mitteln, üblicherweise in Gegenwart eines geeigneten Lösungsmittels oder Lösungsmittelgemisches, und, wenn notwendig, unter Kühlen oder Erwärmen, z. B. in einem Temperaturbereich von etwa 0°C bis etwa 120°C, ferner, wenn notwendig, in einem geschlossenen Gefäß (gegebenenfalls unter Druck) und/oder in einer Inertgas-, z. B. Stickstoffatmosphäre, arbeitet.

Die Ausgangsstoffe sind bekannt oder können in an sich bekannter Weise, gegebenenfalls in situ, hergestellt werden. So kann man z. B. eine Aminverbindung der allgemeinen Formel III in Form eines Säureadditionssalzes, wie eines Hydrohalogenids, z. B. Hydrochlorids, einsetzen und daraus in Gegenwart eines geeigneten basischen Mittels, z. B. einer anorganischen Metallbase oder einer organischen Base, wie eines geeigneten Amins, z. B. eines Triniederalkylamins, wie von Triäthylamin oder Diisopropyl-äthyl- amin, die freie Aminverbindung der allgemeinen Formel III freisetzen.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I können ebenfalls erhalten werden, indem man eine Verbindung der allgemeinen Formel I

oder ein Salz davon mit einer Verbindung der allgemeinen Formel

oder einem Salz davon kondensiert, wobei R₁, R₂, R₃ und R₄ dieselben Bedeutungen haben wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I und einer der Reste Y₁ und Y₂ eine primäre Aminogruppe und der andere eine durch Anilino ersetzbare Abgangsgruppe bedeutet und wobei funktionelle Gruppen in geschützter Form vorliegen können, und, wenn notwendig oder erwünscht, eine oder mehrere der vorstehend erwähnten zusätzlichen Maßnahmen durchführt.

Eine durch Anilino ersetzbare Abgangsgruppe ist beispielsweise ein Halogenatom mit einer Atomnummer von 17 bis und mit 53, insbesondere Iod.

Die Kondensation von Verbindungen der allgemeinen Formeln IV und V erfolgt in üblicher, insbesondere in der für analoge nucleophile Substitutionen bekannten, Weise, beispielsweise durch Behandlung mit Kupfer oder mit einer Verbindung des einwertigen Kupfers, z. B. mit Kupfer-I-oxid, Kupfer-I-chlorid, Kupfer-I-bromid oder Kupfer- I-iodid, vorteilhaft in Gegenwart eines basischen Kondensationsmittels, wie eines Alkalimetall- oder Erdalkalimetallhydroxides oder -carbonates, vorzugsweise von Kaliumcarbonat, oder indem man eine Carbonsäure der allgemeinen Formel IV, in der R₃ für Hydroxy steht oder Carboxy enthält, in Form eines Alkalimetallsalzes, z. B. als Natrium- oder Kaliumsalz, einsetzt. Erforderlichenfalls erhitzt man trocken oder vorzugsweise in einem inerten, polaren organischen Lösungsmittel, wie Amylalkohol, Diäthylenglykolmonomethyläther oder vor allem Dimethylformamid, Dimethylacetamid oder N- Methylpyrrolidon, auf etwa 80 bis 200°, vor allem auf 100-180°C, z. B. auf Siedetemperatur.

Die als Ausgangsstoffe zu verwendenden Verbindungen der allgemeinen Formel IV können beispielsweise hergestellt werden, indem man eine Säure der allgemeinen Formel

worin Y₁ dieselbe Bedeutung hat wie in Verbindungen der allgemeinen Formel IV und worin eine primäre Aminogruppe Y₁ gegebenenfalls in geschützter, z. B. in acetylierter, Form vorliegen kann, oder ein reaktionsfähiges funktionelles Derivat davon mit einer Aminoverbindung der allgemeinen Formel III, in der funktionelle Gruppen gegebenenfalls in geschützter Form vorliegen können, oder einem Derivat davon kondensiert, wobei man die obengenannten, in der Peptidchemie üblichen Methoden anwendet. Die Säuren der allgemeinen Formel VI können beispielsweise erhalten werden, indem man in üblicher Weise den entsprechenden o-Y₁-Benzylalkohol, worin Y₁ dieselbe Bedeutung hat wie in Verbindungen der allgemeinen Formel IV, z. B. mit Thionylchlorid oder Phosphortribromid, halogeniert, das so erhältliche o-Y₁-Benzylhalogenid, worin Y₁ dieselbe Bedeutung hat wie in Verbindungen der allgemeinen Formel IV, mit Kaliumcyanid in das entsprechende o-Y₁-Phenylacetonitril, worin Y₁ dieselbe Bedeutung hat wie in Verbindungen der allgemeinen Formel IV, überführt und dieses, z. B. mit Schwefelsäure oder Natronlauge, hydrolysiert. Aus der so erhältlichen Säure können in üblicher Weise gewünschtenfalls deren funktionelle Derivate hergestellt werden.

Die Ausgangsstoffe der allgemeinen Formel V sind bekannt oder können nach an sich bekannten Methoden hergestellt werden.

Falls in verfahrensgemäß erhältlichen Verbindungen der allgemeinen Formel I funktionelle Gruppen in geschützter Form vorliegen, so können solche Gruppen in an sich bekannter Weise freigesetzt werden. So kann man diese hydrogenolytisch, z. B. durch Behandeln mit Wasserstoff in Gegenwart eines Edelmetall-, z. B. Palladium- oder Platinkatalysators, oder durch Solvolyse, wie, z. B. saure, Hydrolyse, entfernen.

Verfahrensgemäß erhältliche Verbindungen der allgemeinen Formel I können im Rahmen der Definition der Endstoffe in andere Verbindungen der allgemeinen Formel I überführt werden. So kann man in Verbindungen der allgemeinen Formel I Gruppen R₃ ineinander umwandeln. So kann man z. B. eine Niederalkoxygruppe R₃ mittels Solvolyse, wie Hydrolyse oder Alkoholyse, z. B. in Gegenwart eines basischen Mittels, wie eines Alkalimetallhydroxids, z. B. von Natrium- oder Kaliumhydroxid, in Hydroxy R₃ umwandeln.

Ferner kann man eine Hydroxygruppe R₃ nach einem der üblichen Verätherungsverfahren, wie Behandeln der Hydroxygruppe mit einem Niederalkanol in Gegenwart einer Säure, insbesondere einer Mineralsäure, oder eines dehydratisierenden Mittels, wie N,N′-Dicyclohexyl-carbodiimid, Behandeln eines Salzes, wie eines Metall- oder Ammoniumsalzes der Hydroxygruppe mit einem reaktionsfähigen Ester eines Niederalkanols, wie einem entsprechenden Halogenid oder Behandeln der Hydroxygruppe mit einer geeigneten Diazoverbindung, oder einem anderen geeigneten Verätherungsverfahren in eine Niederalkoxygruppe R₃, oder durch Behandeln mit Ammoniak oder einem entsprechenden Amin in Amino oder substituiertes Amino der allgemeinen Formel

-NH-CH(R₄′)-C(=O)-R₃′ (Ib),

worin R₃′ und R₄′ dieselben Bedeutungen haben wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, überführen. Ferner kann man auch Niederalkoxy R₃, z. B. durch Behandeln mit Ammoniak oder einem entsprechenden Amin, in Amino oder substituiertes Amino der allgemeinen Formel

-NH-CH(R₄′)-C(=O)-R₃′ (Ib),

worin R₃′ und R₄′ dieselben Bedeutungen haben wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, überführen.

Ferner kann man in einer erhaltenen Verbindung der allgemeinen Formel I eine Niederalkoxygruppe R₃ durch Umätherung, z. B. durch Behandeln mit einem Niederalkanol in Gegenwart eines sauren oder basischen Mittels, z. B. eines entsprechenden Metallniederalkanolats, in eine andere Niederalkoxygruppe R₃ umwandeln.

Die obigen Reaktionen werden in üblicher Weise in An- oder Abwesenheit von Verdünnungs-, Kondensations- und/ oder katalytischen Mitteln und, falls notwendig, bei erniedrigter oder erhöhter Temperatur, im geschlossenen Gefäß und/oder in einer Inertgasatmosphäre durchgeführt.

Je nach Verfahrensbedingungen und Ausgangsstoffen erhält man gegebenenfalls salzbildende Endstoffe der allgemeinen Formel I in freier Form oder in Form ihrer Salze, die sich in üblicher Weise ineinander oder in andere Salze umwandeln lassen. So kann man Verbindungen der allgemeinen Formel I mit einer freien Carboxylgruppe in Form ihrer Salze mit Basen erhalten; sie können in üblicher Weise, z. B. durch Umsetzen der freien Säure mit einem entsprechenden basischen Mittel, wie einem Alkali- oder Erdalkalimetallhydroxid, -carbonat, -hydrogencarbonat, -amid oder -hydrid, einem geeigneten Alkalimetall-niederalkanolat oder Ammoniak oder einem Amin in ein Salz, vor allem in ein pharmazeutisch verwendbares Salz, überführt werden. Aus entsprechenden Salzen lassen sich freie Säuren der allgemeinen Formel I in üblicher Weise, z. B. durch Umsetzen mit sauren Mitteln, freisetzen. Verbindungen der allgemeinen Formel I mit basischem Charakter kann man gegebenenfalls in Form ihrer Säureadditionssalze erhalten. Sie lassen sich durch Umsetzen einer freien basischen Verbindung der allgemeinen Formel I mit einer organischen oder anorganischen Säure, insbesondere einer solchen, die zur Bildung eines pharmazeutisch verwendbaren Salzes geeignet ist, in Salze umwandeln. Erhaltene Säureadditionssalze von basischen Verbindungen der allgemeinen Formel I können in an sich bekannter Weise, z. B. durch Behandeln mit alkalischen Mitteln, z. B. Alkalimetallhydroxiden oder basischen Ionenaustauschern, in die freien Basen überführt werden. Innere Salze von Verbindungen der allgemeinen Formel I, die sowohl eine saure als auch eine basische salzbildende Gruppe aufweisen, kann man z. B. durch Ausfällen beim isoelektrischen Punkt erhalten.

Diese und andere Salze können zur Reinigung der Verbindungen der allgemeinen Formel I verwendet werden, z. B. indem man die freien Verbindungen in ihre Salze überführt, diese isoliert und wieder in die freien Verbindungen überführt. Infolge der engen Beziehung zwischen den Verbindungen der allgemeinen Formel I in freier Form und in Form ihrer Salze sind im vorausgegangenen und nachfolgend unter den freien Verbindungen der allgemeinen Formel I sinn- und zweckgemäß gegebenenfalls auch die entsprechenden Salze zu verstehen.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I können je nach der Wahl der Ausgangsstoffe und Arbeitsweisen und je nach der Anzahl der asymmetrischen Kohlenstoffatome als optische Antipoden, Racemate oder als Isomerengemische vorliegen.

Erhaltene Isomerengemische können auf Grund der physikalisch-chemischen Unterschiede der Bestandteile in bekannter Weise in die reinen Isomeren aufgetrennt werden, beispielsweise durch Chromatographie und/ oder fraktionierte Kristallisation. Vorteilhafterweise isoliert man das wirksamere der Isomeren.

Die Erfindung betrifft auch diejenigen Ausführungsformen des Verfahrens, nach denen man von einer auf irgendeiner Stufe des Verfahrens als Zwischenprodukt erhältlichen Verbindung ausgeht und die fehlenden Verfahrensschritte durchführt oder bei denen man einen Ausgangsstoff unter den Reaktionsbedingungen bildet oder bei denen eine Reaktionskomponente gegebenenfalls in Form ihrer Derivate, wie ihrer Salze, und/oder in Form von Isomerengemischen oder reinen Isomeren einsetzt.

Zweckmäßig verwendet man für die Durchführung der erfindungsgemäßen Reaktionen solche Ausgangsstoffe, die zu der eingangs besonders erwähnten Gruppe von Endstoffen und vor allem zu den speziell beschriebenen oder hervorgehobenen Endstoffen führen.

Die vorliegende Erfindung betrifft ebenfalls pharmazeutische Präparate, welche Verbindungen der allgemeinen Formel I oder pharmazeutisch verwendbare Salze von solchen Verbindungen mit salzbildenden Gruppen enthalten. Bei den erfindungsgemäßen pharmazeutischen Präparaten handelt es sich um solche zur enteralen, wie oralen oder rektalen, sowie parenteralen Verabreichung an Warmblüter, welche den pharmakologischen Wirkstoff allein oder zusammen mit einem pharmazeutisch anwendbaren Trägermaterial enthalten.

Diese pharmazeutischen Präparate enthalten von etwa 10% bis etwa 95%, vorzugsweise von etwa 20% bis etwa 90%, des Wirkstoffes. Erfindungsgemäße pharmazeutische Präparate sind z. B. solche in Dosiseinheitsform, wie Drag´es, Tabletten, Kapseln, Suppositorien oder Ampullen.

Die pharmazeutischen Präparate der vorliegenden Erfindung werden in an sich bekannter Weise, z. B. mittels konventioneller Misch-, Granulier-, Dragier-, Lösungs- oder Lyophilisierungsverfahren, hergestellt. So kann man pharmazeutische Präparate zur oralen Anwendung erhalten, indem man den Wirkstoff mit festen Trägerstoffen kombiniert, ein erhaltenes Gemisch gegebenenfalls granuliert und das Gemisch bzw. Granulat, wenn erwünscht oder notwendig nach Zugabe von geeigneten Hilfsstoffen, zu Tabletten oder Drag´e-Kernen verarbeitet.

Geeignete Trägerstoffe sind insbesondere Füllstoffe, wie Zucker, z. B. Lactose, Saccharose, Mannit oder Sorbit, Cellulosepräparate und/oder Calciumphosphate, z. B. Tricalciumphosphat oder Calciumhydrogenphosphat, ferner Bindemittel, wie Stärkekleister, z. B. Mais-, Weizen-, Reis- oder Kartoffelstärkekleister, Gelatine, Tragakant, Methylcellulose, Hydroxypropyl-methylcellulose, Natriumcarboxymethylcellulose und/oder Polyvinylpyrrolidon, und/oder, wenn erwünscht, Sprengmittel, wie die obengenannten Stärken, ferner Carboxymethylstärke, quervernetztes Polyvinylpyrrolidon, Agar, Alginsäure oder ein Salz davon, wie Natriumalginat. Hilfsmittel sind in erster Linie Fließregulier- und Schmiermittel, z. B. Kieselsäure, Talk, Stearinsäure oder Salze davon, wie Magnesium- oder Calciumstearat, und/oder Polyäthylenglykol. Drag´e-Kerne werden mit geeigneten, gegebenenfalls Magensaft-resistenten, Überzügen versehen, wobei man u. a. konzentrierte Zuckerlösungen, welche gegebenenfalls arabischen Gummi, Talk, Polyvinylpyrrolidon, Polyäthylenglykol und/oder Titandioxid enthalten, Lacklösungen in geeigneten organischen Lösungsmitteln oder Lösungsmittelgemischen oder, zur Herstellung von Magensaft-resistenten Überzügen, Lösungen von geeigneten Cellulosepräparaten, wie Acetylcellulosephthalat oder Hydroxypropylmethylcellulosephthalat, verwendet. Den Tabletten oder Drag´e-Überzügen können Farbstoffe oder Pigmente, z. B. zur Identifizierung oder zur Kennzeichnung verschiedener Wirkstoffe, beigefügt werden.

Weitere oral anwendbare pharmazeutische Präparate sind Steckkapseln aus Gelatine sowie weiche, geschlossene Kapseln aus Gelatine und einem Weichmacher, wie Glycerin oder Sorbitol. Die Steckkapseln können den Wirkstoff in Form eines Granulats, z. B. im Gemisch mit Füllstoffen, wie Lactose, Bindemitteln, wie Stärken, und/oder Gleitmitteln, wie Talk oder Magnesiumstearat, und gegebenenfalls Stabilisatoren enthalten. In weichen Kapseln ist der Wirkstoff vorzugsweise in geeigneten Flüssigkeiten, wie fetten Ölen, Paraffinöl oder flüssigen Polyäthylenglykolen, gelöst oder suspendiert, wobei ebenfalls Stabilisatoren zugefügt sein können.

Zur parenteralen Verabreichung eignen sich in erster Linie wäßrige Lösungen eines Wirkstoffs in wasserlöslicher Form, z. B. eines wasserlöslichen Salzes, ferner Suspensionen des Wirkstoffs, wie entsprechende ölige Injektionssuspensionen, wobei man geeignete lipophile Lösungsmittel oder Vehikel, wie fette Öle, z. B. Sesamöl, oder synthetische Fettsäureester, z. B. Äthyloleat oder Triglyceride, verwendet, oder wäßrige Injektionssuspensionen, welche viskositätserhöhende Stoffe, z. B. Natrium-Carboxymethylcellulose, Sorbit und/oder Dextran, und gegebenenfalls auch Stabilisatoren enthalten.

Die Dosierung des Wirkstoffs hängt von der Warmblüter-Spezies, dem Körpergewicht, dem Alter und vom individuellen Zustand sowie von der Applikationsweise ab. Durchschnittlich wird einem Warmblüter von etwa 70 kg Körpergewicht eine Tagesdosis von etwa 50 bis etwa 200 mg, vorzugsweise von etwa 75 bis etwa 150 mg, Wirkstoff verabreicht.

Die nachfolgenden Beispiele illustrieren die oben beschriebene Erfindung; Temperaturen werden in Celsiusgraden angegeben.

Beispiel 1

Eine Lösung von 50,5 g 2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester (Smp. 105-106°) und 21,1 g L-Glutaminäthylester in 400 ml Chloroform wird bei Raumtemperatur unter Rühren mit 24,5 ml Triäthylamin versetzt. Anschließend wird die Lösung fünf Stunden bei Raumtemperatur gerührt und mit 1000 ml Essigsäureäthylester verdünnt. Die organische Lösung wird dreimal mit je 200 ml Wasser, zweimal mit je 100 ml 2n wäßriger Natriumcarbonatlösung und mit 200 ml Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck bei 40° eingedampft. Den Rückstand chromatographiert man an 1000 g Silicagel. Die Fraktionen 1-7, eluiert mit je 600 ml Methylenchlorid, enthalten Ausgangsmaterial. Die Fraktionen 8- 12, eluiert mit je 600 ml eines 3 : 1-Gemisches von Methylenchlorid und Methanol, werden vereinigt und unter vermindertem Druck bei 40° eingedampft. Den Rückstand kristallisiert man aus Äthanol und erhält so den L-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminäthylester, Smp. 178- 181°, [α] _D = -13±1° (c = 1,0 in Methanol).

In analoger Weise kann man DL-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminäthylester herstellen, der nach der in Beispiel 2 beschriebenen Methode zu Säure verseift werden kann.

Beispiel 2

Zu einer Lösung von 9,1 g L-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminäthylester in 800 ml Äthanol läßt man während 30 Minuten bei 55-60° 20 ml 1n wäßrige Natriumhydroxidlösung zutropfen. Dann läßt man die Lösung auf Raumtemperatur abkühlen und 24 Stunden stehen. Das auskristallisierte Natriumsalz des L-(-)-N-{[2- (2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutamins wird abfiltriert, Smp. 174-178°, [α] _D = +5±1° (c = 1,0 in Wasser).

Beispiel 3

Eine Suspension von 20,9 g 2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester und 10,8 g des Hydrochlorids des DL-Phenylalaninmethylesters in 125 ml Chloroform wird unter Rühren mit 11,0 ml Triäthylamin versetzt und während 15 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man verdünnt mit 150 ml Essigsäureäthylester und wäscht zweimal mit je 50 ml 2n-Salzsäure, zweimal mit 50 ml einer 2n wäßrigen Natriumcarbonatlösung und zweimal mit 50 ml Wasser. Dann wird die organische Phase über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Der ölige Rückstand wird an 250 g Silicagel chromatographiert. Die Fraktionen 3-16, eluiert mit je 300 ml Methylenchlorid, enthalten den reinen DL-N-{[2- (2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-phenylalaninmethylester; sie werden vereinigt und unter vermindertem Druck eingedampft. Den Rückstand kristallisiert man aus Äthanol, Smp. 148-150°.

In analoger Weise erhält man N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glycinäthylester, Smp. 161- 162° (nach Umkristallisieren aus Essigsäureäthylester), ausgehend von 16,6 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl essigsäure-4-nitrophenylester und 7,6 g Hydrochlorid des Glycinäthylesters.

Beispiel 4

Eine Lösung von 4,4 g DL-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenyl]-acetyl}-phenylalaninmethylester in 250 ml Methanol wird auf 50° erwärmt und tropfenweise unter Rühren mit 12 ml einer 1n wäßrigen Natriumhydroxidlösung versetzt. Die Lösung wird während 2 Stunden bei 50° gerührt, abgekühlt und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Den Rückstand löst man in 300 ml Wasser. Die wäßrige Lösung wird mit 100 ml Diäthyläther extrahiert und bei 0° mit 2n-Salzsäure angesäuert. Das ausgeschiedene Öl wird mit 100 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Man wäscht die organische Phase mit 30 ml Wasser, trocknet sie über Magnesiumsulfat und engt sie unter vermindertem Druck zur Trockne ein. Den Rückstand löst man in 96 ml einer 0,1n wäßrigen Natriumhydroxidlösung. Die klare wäßrige Lösung (pH 7,0) wird am Hochvakuum lyophilisiert, wobei das Natriumsalz des DL-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-ami no)-phenyl]-acetyl}-phenylalanins als weiße Kristalle erhalten wird.

Beispiel 5

Eine Suspension von 10,0 g N-{[2-(2,6-Dichlorphe nyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glycinäthylester in 100 ml Äthanol wird bei Raumtemperatur tropfenweise mit einer Lösung von 1,55 g Kaliumhydroxid in 20 ml Äthanol versetzt. Anschließend wird die Suspension eine Stunde bei Raumtemperatur gerührt und die nun klare Lösung unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Man löst den Rückstand in 100 ml Wasser, wäscht die Lösung mit 40 ml Diäthyläther und stellt sie mit 2n-Salzsäure sauer. Die ausgeschiedenen Kristalle werden mit 500 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die organische Phase wird dreimal mit je 50 ml einer 0,5n wäßrigen Natriumhydrogencarbonatlösung extrahiert. Die wäßrig-alkalischen Extrakte werden vereinigt und mit 2 n Salzsäure angesäuert. Die ausgeschiedenen Kristalle werden in 200 ml Essigsäureäthylester gelöst; die Lösung wird mit 30 ml Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt, wobei das N-{[2-(2,6- Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glycin auskristallisiert, Smp. 200-201°.

Beispiel 6

Eine Lösung von 25,0 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-ami no)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester und 9,4 g des Hydrochlorids des L-Serinmethylesters in 125 ml Pyridin und 15,5 ml Diisopropyl-äthyl-amin wird eine Stunde bei Raumtemperatur gerührt und auf ein Gemisch von Eis und 2 n Salzsäure gegossen. Die ausgeschiedenen Kristalle werden mit 400 ml Essigsäureäthylester extrahiert; die organische Phase wird dreimal mit je 40 ml 1n-Kaliumhydrogencarbonatlösung und zweimal mit 50 ml Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingeengt. Den Rückstand kristallisiert man aus einem Gemisch von Essigsäureäthylester und Petroläther; der L-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)- phenyl]-acetyl}-serinmethylester schmilzt bei 159-161°; [α] _D = +26°±1° (c = 0,78 in Chloroform).

Beispiel 7

Eine Lösung von 15,0 g L-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-serinmethylester in 1500 ml Äthanol versetzt man bei Raumtemperatur unter Rühren in 150 ml 2n wäßriger Natriumhydroxidlösung. Die Lösung wird 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und anschließend unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Den Rückstand löst man in 700 ml Wasser; die wäßrige Phase wird durch eine Schicht eines Diatomeenerdepräparats (Hyflo) filtriert und das Filtrat zweimal mit 100 ml Diäthyläther gewaschen, auf 0° abgekühlt und mit konzentrierter Salzsäure angesäuert. Die ausgeschiedenen Kristalle werden abfiltriert, mit Wasser gründlich gewaschen und bei 50° 13 mbar getrocknet. Das L-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenyl]-acetyl}-serin schmilzt unter Zersetzung bei 190-200°.

Zur Umwandlung in das entsprechende Natriumsalz werden 14,0 g der obigen Säure in 200 ml Wasser suspendiert. Unter Rühren setzt man 36,1 ml einer 1n wäßrigen Natriumhydroxidlösung zu und rührt das Gemisch 30 Minuten bei Raumtemperatur, wobei sich eine klare Lösung bildet. Anschließend wird diese unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Den Rückstand löst man in 300 ml Äthanol; die äthanolische Lösung wird unter vermindertem Druck auf etwa 50 ml eingeengt. Man verdünnt mit 50 ml Diäthyläther und filtriert die ausgeschiedenen Kristalle ab. Das so erhältliche Natriumsalz des L-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)- phenyl]-acetyl}-serins schmilzt bei 175-190° (mit Zersetzen); [α] _D = +11°±1° (c = 1,18 in Wasser).

Beispiel 8

Eine Lösung von 20,0 g 2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester und 9,47 g Hydrochlorid des L-Asparaginsäuredimethylesters in 100 ml Pyridin wird mit 12,4 ml Diisopropyl-äthyl-amin versetzt und während 2½ Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Dann gießt man die Mischung auf ein Gemisch von 2n-Salzsäure und Eis aus. Das ausgeschiedene Öl wird mit 400 ml Chloroform extrahiert; man wäscht die Chloroformlösung mit 100 ml 2 n Salzsäure, dreimal mit je 40 ml einer 2n wäßrigen Natriumcarbonatlösung und 50 ml Wasser, trocknet sie über Magnesiumsulfat und engt sie unter vermindertem Druck zur Trockne ein. Den öligen Rückstand löst man in Essigsäureäthylester. Nach Zusatz von Diäthyläther kristallisiert der L-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- asparaginsäuredimethylester aus. Man filtriert ab und trocknet die weißen Kristalle unter vermindertem Druck, Smp. 135-136° [α] _D = +58°±1° (c = 1,07 in Chloroform).

Beispiel 9

Eine Lösung von 12,0 g L-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-asparaginsäuredimethylester in 3000 ml Äthanol wird mit 150 ml einer 2n wäßrigen Natriumhydroxidlösung versetzt und 15 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die entstandene weiße Suspension wird unter vermindertem Druck bei Raumtemperatur zur Trockne eingedampft. Den Rückstand löst man in 500 ml Wasser und stellt die wäßrige Lösung mit konzentrierter Salzsäure sauer. Die ausgeschiedenen Kristalle werden abfiltriert, mit Wasser gewaschen und im Vakuum (0,01 mbar) getrocknet. Die L-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-asparaginsäure schmilzt bei 169-171°; [α] _D = -21±1° (c = 0,54 in Äthanol).

Zur Herstellung des Natriumsalzes löst man 10,7 g der obigen Säure in 250 ml Äthanol. Die Lösung wird tropfenweise mit 26 ml einer 1n wäßrigen Natriumhydroxidlösung versetzt, wobei weiße Kristalle ausfallen. Die Suspension wird 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und filtriert. Der Filterrückstand wird mit wenig kaltem Äthanol ausgewaschen und im Vakuum (0,1 mbar) getrocknet. Das Mononatriumsalz der L-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phe nyl]-acetyl}-asparaginsäure schmilzt bei 150-152° (unter Zersetzung); [α] _D = +45±1° (c = 1,03 in Wasser).

Beispiel 10

Eine Lösung von 33,4 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-ami no)-phenylessigsäure-4-nitro-phenylester und 16,96 g des Hydrochlorids des D-Glutaminsäuredimethylesters in 320 ml Chloroform wird mit 27,0 ml Diisopropyl-äthyl-amin versetzt und 15 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Dann wird die Lösung zweimal mit je 50 ml 2n-Salzsäure, zweimal mit je 50 ml einer 2n wäßrigen Natriumcarbonatlösung und 50 ml Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Den Rückstand verreibt man mit 50 ml kaltem Diäthyläther und filtriert die gebildeten Kristalle ab. Diese werden aus einem Gemisch von Essigsäureäthylester und Methylenchlorid umkristallisiert. Der D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)- phenyl]-acetyl}-glutaminsäuredimethylester schmilzt bei 118- 120°; [α] _D = -17±1° (c = 0,53 in Chloroform).

In analoger Weise erhält man: L-(+)-N-{[2-(2,6- Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminsäuredibenzylester, Smp. 74-76° nach Umkristallisieren aus Diäthyläther [α] _D = +4°±1° (c = 0,53 in Chloroform), ausgehend von 4,17 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester und 3,63 g des Hydrochlorids des L-Glutaminsäuredibenzylesters.

Beispiel 11

Eine Suspension von 10,0 g D-(-)-N-{[2-(2,6-Di chlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminsäuredimethylester in 1000 ml Äthanol wird 20 Minuten bei Raumtemperatur gerührt, wobei Lösung eintritt. Dann setzt man unter Rühren 125 ml einer 2n wäßrigen Natriumhydroxidlösung tropfenweise bei Raumtemperatur zu, läßt die Lösung 15 Stunden bei Raumtemperatur stehen und engt sie unter vermindertem Druck bei 20° zur Trockne ein. Man löst den öligen Rückstand in 500 ml Wasser und stellt die klare wäßrige Lösung bei 0° mit 2n-Salzsäure sauer. Die ausgeschiedenen Kristalle werden abfiltriert, mit 40 ml Wasser gewaschen und im Vakuum (0,01 mbar) bei Raumtemperatur getrocknet; die D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- glutaminsäure schmilzt bei 95-137° (mit langem Sintern); [α] _D = -30±1° (c = 0,50 in Äthanol).

Zur Herstellung des Mononatriumsalzes der obigen Säure löst man 8,43 g D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)- phenyl]-acetyl}-glutaminsäure in 150 ml Äthanol und versetzt die Lösung unter Rühren tropfenweise mit 19,82 ml einer 1n wäßrigen Natriumhydroxidlösung. Nach 10minütigem Rühren kristallisiert das Natriumsalz aus der Lösung aus. Die Suspension wird filtriert; der kristalline Filterrückstand wird mit kaltem Äthanol gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Das Mononatriumsalz der D-(-)- N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminsäure schmilzt bei 170-185° (unter Sintern); [α] _D = -43±1° (c = 0,97 in Wasser).

Beispiel 12

Eine Lösung von 14,0 g L-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminsäuredimethylester in 300 ml Essigsäureäthylester wird in Gegenwart von 1,4 g Palladium-auf-Kohle-Katalysator (5%) bei 10- 15° während drei Stunden hydriert. Man filtriert vom Katalysator ab und engt das Filtrat unter vermindertem Druck bei 25° auf ein Volumen von etwa 30 ml ein. Nach Zusatz von 150 ml Diäthyläther kristallisiert die L-(+)-N-{[2-(2,6- Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminsäure aus. Man filtriert die Kristalle ab und trocknet sie im Vakuum (0,1 mbar) bei 25°, Smp. 138-141°; [α] _D = +29±1° (c = 0,61 in Äthanol).

Das Mononatriumsalz der obigen Säure kann man herstellen, indem man eine Lösung von 8,5 g L-(+)-N-{[2- (2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminsäure in 100 ml Äthanol tropfenweise unter Rühren mit 16,57 ml einer 1n wäßrigen Natriumhydroxidlösung versetzt; die erhaltene Suspension wird auf 0° gekühlt und filtriert. Das kristalline Mononatriumsalz der L-(+)-N-{[2-(2,6-Di chlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminsäure schmilzt bei 180-185°; [α] _D = +42°±1° (c = 1,0 in Wasser).

Beispiel 13

Eine Lösung von 4,2 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-ami no)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester und 3,6 g L-Leucyl- L-serin-methylester-hydrochlorid in 30 ml Dimethylformamid wird mit 1,5 ml Triäthylamin versetzt und während einer Stunde bei Raumtemperatur reagieren gelassen. Dann säuert man mit 1n-Salzsäure bis pH = 5 an und verteilt zwischen Chloroform und Wasser. Die organische Phase wird nach Waschen mit Wasser getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wird mit Diäthyläther verrieben. Nach Umkristallisieren aus einem Gemisch von Essigsäureäthylester und Petroläther erhält man den N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-ace tyl}-L-Leucyl-L-serin-methylester in farblosen Kristallen, Smp. 216-218°: [α] _D = -30° (c = 0,635 in Chloroform).

Beispiel 14

Eine Mischung von 1,45 g L-Cystein und 4,17 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester in 40 ml Dimethylacetamid wird unter einer Stickstoffatmosphäre mit 1,67 ml Triäthylamin versetzt und während 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Man säuert die Reaktionslösung mit 1n-Salzsäure an und dampft unter vermindertem Druck zu einem sirupartigen Rückstand ein und verteilt diesen zwischen Chloroform und Wasser. Die organische Phase wird mit Wasser gewaschen; man stellt ihren pH-Wert mit Triäthylamin auf etwa 5 ein, trocknet sie über Natriumsulfat und dampft ein. Der Rückstand wird in Chloroform durch 300 g Silikagel (Merck) filtriert. Die schnellen Begleitprodukte werden auf diese Weise abgetrennt; das L- (+)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-cystein wird durch Elution mit einem 9 : 1-Gemisch von Chloroform und Äthanol erhalten. Nach Kristallisation aus einem Gemisch von Äthanol und Wasser fällt das Produkt in Form von farblosen Kristallen an; [α] _D = +37° (c = 0,97 in Methanol).

Beispiel 15

Durch Luftoxidation einer Lösung von L-(+)-N- {[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-cystein in Dichloräthan bei 30-40° erhält man das L-(-)-Bis-N-{[2- (2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-cystin neben Ausgangsmaterial. Durch Kristallisieren aus Diäthyläther erhält man die reine Verbindung mit Smp. 178-181°, [α] _D = -52° (c = 0,93 in Methanol).

Beispiel 16

Zu einer Lösung von 3,9 g 2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenylessigsäure-p-nitrophenylester und 2,6 g D- Alanyl-D-glutaminsäure-α-amid-γ-tert.-butylester-hydrochlorid in 20 ml N,N-Dimethylformamid gibt man bei Raumtemperatur 1,4 ml Triäthylamin hinzu und läßt 15 Stunden rühren. Dann dampft man unter vermindertem Druck zur Trockne ein, verreibt den Rückstand mehrmals mit Äther und saugt die farblosen Kristalle ab. Dieses Kristallisat wird mit 0,2n- Salzsäure verrieben, abgesaugt und zunächst mit verdünnter Natriumbicarbonatlösung und dann mit Wasser gewaschen. Dann kristallisiert man aus Methanol-Wasser um. Man erhält den N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-D-alanyl- D-glutaminsäure-α-amid-γ-tert.-butylester in Form farbloser Kristalle vom Smp. 230-235°; [α] _D = +10° (c = 1,0 in Chloroform).

Beispiel 17

Zu einer Lösung von 3 g 2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenylessigsäure-p-nitrophenylester und 3 g L-β- Tert.-butyl-asparaginyl-L-phenylalanyl-methylester-hydrochlorid in 15 ml Chloroform gibt man 2 ml Triäthylamin hinzu und läßt 15 Stunden bei Raumtemperatur stehen. Dann dampft man unter vermindertem Druck zur Trockne ein, nimmt mit Äther auf und filtriert das Ungelöste ab. Das Äther- Filtrat wird mehrmals mit 10%iger Sodalösung ausgeschüttelt, bis die Ätherphase nicht mehr gelb gefärbt ist, dann wäscht man mit Wasser, trocknet die Ätherphase über Natriumsulfat und dampft zur Trockne ein. Die so erhaltenen Kristalle werden in Chloroform über 100 g Kieselgel filtriert, um lipophile Verunreinigungen zu entfernen. Nach Eindampfen der die gewünschte Substanz enthaltenden, durch Dünnschichtchromatographie (R_F etwa 0,5 in Chloroform, identifiziert im UV-Licht sowie durch Besprühen mit Schefelsäure und Erwärmen) ermittelten Fraktionen erhält man den N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-L-β- tert.-butyl-asparaginyl-L-phenylalanyl-methylester in Form farbloser Kristalle vom Smp. 61-65°; [α] _D = +24° (c = 1,0 in Chloroform).

Beispiel 18

Eine Mischung von 20,0 g 2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenylessigsäure-4-nitro-phenylester und 9,47 g des Hydrochlorids des D-Asparaginsäuredimethylesters in 9,4 ml Diisopropyl-äthyl-amin und 100 ml Pyridin wird 1½ Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die entstandene gelbe Lösung wird unter Rühren auf Eis gegossen und die Suspension mit 2 n Salzsäure auf pH 6,0 gestellt. Das ausgeschiedene Öl wird mit 200 ml Chloroform extrahiert. Man wäscht die Chloroformlösung mit 20 ml 2n-Salzsäure, zweimal mit je 20 ml Wasser, zweimal mit je 200 ml 2n-Natriumcarbonatlösung und 50 ml Wasser. Hierauf wird die organische Phase über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Den Rückstand kristallisiert man aus einem Gemisch von Essigsäureäthylester und Äther. Der D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-asparaginsäuredimethylester schmilzt bei 134-136°; [α] _D = -60° ±1° (c = 0,5 in Chloroform).

In analoger Weise erhält man: D-(-)-N-{[2-(2,6-Di chlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-serinmethylester, Smp. 161-163° nach Umkristallisieren aus Essigsäureäthylester; [α] _D = -25°±1° (c = 1,0 in Chloroform), ausgehend von 4,17 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester und 1,55 g Hydrochlorid des D-Serinmethylesters, und D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-methioninmethylester, Smp. 135-137° nach Umkristallisation aus Äther-Petroläther; [α] _D = -39°±1° (c = 1,0 in Chloroform), ausgehend von 4,17 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester und 2,0 g D-Methioninmethylester.

Beispiel 19

Eine Lösung von 10,7 g D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-asparaginsäuredimethylester in 3 l Äthanol wird mit 250 ml 2n-Natronlauge und 50 ml Wasser versetzt. Die Mischung wird 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und anschließend unter vermindertem Druck bei 20-25° zur Trockne eingeengt. Den Rückstand löst man in 400 ml Wasser. Man extrahiert die klare, bläuliche Lösung mit 50 ml Äther und stellt sie bei 0° mit konzentrierter Salzsäure sauer. Das ausgeschiedene Öl kristallisiert beim Stehenlassen. Die Kristalle werden abfiltriert, mit Wasser gewaschen und im Vakuum (0,1 mbar) bei Raumtemperatur über Phosphorpentoxyd getrocknet. Die D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenyl]-acetyl}-asparaginsäure schmilzt bei 170-176°. [α] _D = -23°±1° (c = 0,5 in Äthanol).

Zur Herstellung des Natriumsalzes löst man 9,2 g der obigen Säure in 100 ml Äthanol. Die Lösung wird unter Rühren tropfenweise bei 0-5° mit 22,3 ml n-Natronlauge versetzt. Nach beendetem Zutropfen (20 Minuten) werden die ausgeschiedenen Kristalle abfiltriert, mit 50 ml Äther nachgewaschen und im Vakuum (0,1 mbar) bei Raumtemperatur über Phosphorpentoxyd 20 Stunden getrocknet. Das D-(-)-N-{[2-(2,6- Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-asparaginsäure-natriumsalz-monohydrat schmilzt bei 153-155°. [a] _D = -46°±1° (c = 1,0 in Wasser).

In analoger Weise erhält man D-(-)-N-{[2-(2,6-Di chlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-methionin, Smp. 146-152°.

Beispiel 20

Eine Lösung von 4,17 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-ami no)-phenylessigsäure-4-nitro-phenylester in 50 ml Pyridin wird bei Raumtemperatur unter Rühren mit 1,47 g D-Glutaminsäure versetzt. Dann wird eine Mischung von 50 ml Pyridin und 1,7 ml Diisopropyl-äthylamin tropfenweise zugegeben. Man rührt die Mischung 20 Stunden bei Raumtemperatur und gießt auf Eis. Die Suspension wird mit konzentrierter Salzsäure sauergestellt und das ausgeschiedene Öl dreimal mit je 50 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte werden bei 5° viermal mit je 80 ml 2n- Natriumcarbonatlösung extrahiert. Die vereinigten Natriumcarbonatlösungen werden bei 0° mit konzentrierter Salzsäure angesäuert. Die entstandene Suspension wird zweimal mit je 60 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Diese beiden Extrakte werden vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingeengt. Den Rückstand, gelbliche Kristalle, chromatographiert man an Silicagel. Man eluiert zunächst mit Äther einen Vorlauf und mit Methanol die Hauptfraktion. Die methanolischen Eluate werden vereinigt und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Den Rückstand löst man in 10 ml 2n-Natriumcarbonatlösung, säuert mit 2n-Salzsäure an und extrahiert mit Essigsäureäthylester. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Die D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminsäure, gelbliche Kristalle, schmilzt bei 95-137° unter Zersetzung. [α] _D = -30±1° (c = 0,5 in Äthanol).

Beispiel 21

In analoger Weise wie in Beispiel 1-15 beschrieben kann man folgende Verbindungen erhalten:
L-N^α-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-lysinmethylester, den man durch Behandeln von 2-(2,6- Dichlorphenyl-amino)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester mit L-N^ε-4-Methoxybenzyloxycarbonyl-lysinmethylester-hydrochlorid in Gegenwart einer geeigneten Base, z. B. Diisopropyl-äthyl-amin, und Abspalten der 4-Methoxybenzyloxycarbonylgruppe durch Hydrogenolyse mit Wasserstoff in Gegenwart eines Palladiumkatalysators erhalten kann;
L-N^α-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-lysin und das Natriumsalz davon, die man durch Solvolyse des L-N^α-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-lysinmethylesters mit einem wäßrigen oder alkoholischen Alkalimetallhydroxid, z. B. Natriumhydroxid, erhalten kann, wobei die freie Säure aus einem Alkalimetallsalz z. B. durch Behandeln mit einer Säure, z. B. Salzsäure, und das Natriumsalz aus der freien Säure, z. B. durch Behandeln mit Natriumhydroxid erhalten werden kann;
L-N^ε-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-lysin-methylester, den man durch Behandeln von 2-(2,6- Dichlorphenyl-amino)-phenylessigsäure-4-nitrophenylester mit L-N^α-4-Methoxybenzyloxycarbonyl-lysinmethylester-hydrochlorid in Gegenwart einer geeigneten Base, z. B. Diisopropyl-äthylamin, und Abspalten der 4-Methoxybenzyloxycarbonylgruppe durch Hydrogenolyse mit Wasserstoff in Gegenwart eines Palladiumkatalysators erhalten kann:
L-N^ε-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-lysin und das Natriumsalz davon, die man durch Solvolyse des L-N^ε-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-lysinmethylesters mit einem wäßrigen oder alkoholischen Alkalimetallhydroxid, z. B. Natriumhydroxid, erhalten kann, wobei die freie Säure aus einem Alkalimetallsalz z. B. durch Behandeln mit einer Säure, z. B. Salzsäure, und das Natriumsalz aus der freien Säure z. B. durch Behandeln mit Natriumhydroxid erhalten werden kann:
N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- L-asparagyl-L-phenylalanin;
N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- L-alanyl-D-glutaminsäure-α-amid;
N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- L-seryl-L-threonin-methylester;
N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- L-isoleucyl-L-glycin-methylester; und
N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- L-methionyl-L-leucyl-L-phenylalanin.

Beispiel 22

In analoger Weise wie in den Beispielen 1-21 beschrieben kann man ferner herstellen:
D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]- acetyl}-serin und dessen Natriumsalz,
D-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- prolin und dessen Natriumsalz,
D-N^α-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-lysin sowie dessen Natriumsalz und Hydrochlorid,
D-N^α-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-arginin sowie dessen Natriumsalz und Hydrochlorid,
D-N^α-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutamin und dessen Natriumsalz,
D-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-phenylglycinmethylester und
D-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-phenylglycin sowie dessen Natriumsalz.

Beispiel 23

Eine Lösung von 38,5 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-ami no)-phenylessigsäure-4-nitro-phenylester und 16,8 g D- Glutaminäthylester in 277 ml wasserfreiem Pyridin wird bei Raumtemperatur mit 23,9 g N,N-Diisopropyl-äthyl-amin versetzt. Die Lösung wird bei Raumtemperatur 90 Minuten unter Durchleiten von Stickstoff gerührt. Anschließend wird die Lösung auf 1000 ml Eiswasser gegossen und mit konzentrierter kalter Salzsäure auf pH 2 angesäuert. Man extrahiert mit 3000 ml Essigsäureäthylester, wäscht die Essigsäureäthylesterphase nacheinander mit 400 ml Wasser, zweimal mit je 300 ml 2n-Natriumcarbonatlösung und viermal mit je 300 ml Wasser, trocknet über Magnesiumsulfat und engt unter vermindertem Druck bei 40° zur Trockne ein. Der Rückstand wird in 50 ml Diäthyläther suspendiert und abfiltriert. Die Kristalle werden nochmals in 50 ml Methylenchlorid suspendiert und erneut abfiltriert. Man erhält so den D-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- glutaminäthylester, Smp. 180-185°; [α] _D = +11±1° (c = 1,08 in Methanol). Aus dem Diäthyläther- sowie Methylenchloridmutterlaugen kann auf folgende Weise zusätzliches reines Produkt gewonnen werden: Die Mutterlaugen werden unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Den Rückstand löst man in 700 ml Methylenchlorid. Die Methylenchloridlösung wird auf eine Trennsäure, enthaltend 400 g Kieselgel, aufgetragen. Die Fraktionen 1-10, eluiert mit je 300 ml Methylenchlorid, enthalten Verunreinigungen. Die Fraktionen 11-13, eluiert mit je 300 ml Methylenchlorid-Diäthyläther (3 : 1), werden vereinigt und unter vermindertem Druck bei 40° zur Trockne eingedampft. Den Rückstand suspendiert man in 60 ml Äther und filtriert ab. Man erhält so zusätzlichen D-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- glutaminäthylester, Smp. 181-185°; [α] _D = +11°±1° (c = 1,0 in Chloroform).

Beispiel 24

In analoger Weise wie in Beispiel 2 beschrieben erhält man ausgehend von 21,6 g D-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutaminäthylester das Natriumsalz des D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlor-amino)-phenyl]-acetyl}- glutamins, Smp. 198-201° (aus Äthanol), [α] _D = -3±1° (c = 1,0 in Wasser).

Beispiel 25

In analoger Weise wie in Beispiel 6 beschrieben erhält man
ausgehend von 41,7 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)- phenylessigsäure-4-nitrophenylester und 15,6 g D-Serin-me thylester-hydrochlorid D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-ami no)-phenyl]-acetyl}-serinmethylester, Smp. 161-162° (aus Essigsäureäthylester, [α] _D = -25±1° (1,0%ige Lösung in Chloroform);
ausgehend von 25,0 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)- phenylessigsäure-4-nitrophenylester und 12,0 g D-Methionin- methylester-hydrochlorid D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl- amino)-phenyl]-acetyl}-methioninmethylester, Smp. 134-135° (aus Essigsäureäthylester), [α] _D = -40±1° (c = 1,0 in Chloroform) und
ausgehend von 20,9 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)- phenylessigsäure-4-nitrophenylester und 10,1 g D-Phenyl- glycinmethylester-hydrochlorid D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphe nyl-amino)-phenyl]-acetyl}-phenylglycinmethylester, Smp. 158-160° (aus Essigsäureäthylester), [α] _D = -109±1° (c = 1,0 in Chloroform).

Beispiel 26

Eine Suspension von 30,4 g D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-serinmethylester in 1000 ml Äthanol wird unter Rühren und Einleiten von Stickstoff mit 76,5 ml n-Natronlauge versetzt. Die entstandene Lösung wird 19 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die ausgeschiedenen Kristalle werden abfiltriert und mit 30 ml Äthanol- Diäthyläther (1 : 1) nachgewaschen. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck bei 30° auf ein Volumen von ca. 200 ml eingeengt und die ausgeschiedenen Kristalle abfiltriert. Diese Kristallfraktion besteht aus reinem Natriumsalz des D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- serins, Smp. 200-205°; [α] _D = -17±1° (c = 1,0 in Wasser).

Beispiel 27

Eine Suspension von 21,1 g D-(-)-N-{[2-(2,6-Di chlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-methioninmethylester in 600 ml Methanol wird unter Rühren und Einleiten von Stickstoff mit 47,8 ml n-Natronlauge versetzt. Die Suspension wird 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, wobei eine klare Lösung entsteht. Diese wird unter vermindertem Druck bei 30° eingedampft. Den Rückstand löst man in 40 ml Methanol. Nach Zusatz von Äther scheiden sich gelbe Kristalle aus. Sie werden abfiltriert, mit 20 ml Äther-Äthanol (9 : 1) nachgewaschen und anschließend in 50 ml Diäthyläther-Methanol suspendiert, abfiltriert und 10 Stunden bei Raumtemperatur über Phosphorpentoxyd getrocknet. Das Natriumsalz des D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-methionins (Monohydrat) schmilzt bei 186-188°; [α] _D = -40±1° (c = 1,0 in Wasser).

Beispiel 28

In analoger Weise wie in Beispiel 9 beschrieben erhält man ausgehend von 10,7 g D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-asparaginsäuredimethylester D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-asparaginsäure, Smp. 170-173°, [α] _D = -23±1° (c = 0,5 in Äthanol), und aus 9,2 g derselben ihr Mononatriumsalz (als Monohydrat), Smp. 151-153°, [α] _D = -46±1° (c = 0,5 in Wasser).

Beispiel 29

Analog wie in Beispiel 27 beschrieben erhält man das Natriumsalz des D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)- phenyl]-acetyl}-phenylglycin-monohydrats, Smp. 238-245° (nach Umkristallisieren aus Methanol-Diäthyläther); [α] _D = -8±1° (c = 1,0 in Wasser), ausgehend von 19,65 g D-(-)-N- {[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-phenylglycinmethylester.

Beispiel 30

Das Gemisch aus 0,75 g D-Penicillamin, 1,29 g N-Äthyl-diisopropylamin und 10 ml Pyridin wird mit der Lösung von 2,85 g 2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenylessigsäure-p-nitrophenylester in 10 ml Pyridin versetzt und 20 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Pyridin wird am Hochvakuum abgedampft und der Rückstand wird in Äthylacetat gelöst. Diese Lösung wird nacheinander mit 2n-Sodalösung, n-Salzsäure und Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wird mit Gemischen aus Toluol und Essigsäureäthylester an Silicagel chromatographiert. Die das gewünschte Produkt enthaltende Fraktionen werden in Äther gelöst, klarfiltriert und mit Petroläther ausgefällt. Man erhält so das Dimere des D-N- {[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-pencillamins mit einem Zersetzungspunkt von 160°.

Beispiel 31

Tabletten, enthaltend 25 mg des Natriumsalzes von L-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutamin, können z. B. wie folgt erhalten werden:

Zusammensetzung (für 10 000 Tabletten)
Natriumsalz von L-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutamin\|250 g
Lactose	460 g
Maisstärke	450 g
Polyvinylpyrrolidon	20 g
Magnesiumstearat	10 g
kolloidales Siliciumoxid	10 g
Wasser	q. s.

Das Natriumsalz von L-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlor phenyl-amino)-phenyl]-acetyl}-glutamin, die Lactose und 450 g der Maisstärke werden gemischt und mit einer wäßrigen Lösung von Polyvinylpyrrolidon befeuchtet. Das Gemisch wird granuliert und getrocknet, und mit dem Magnesiumstearat, dem kolloidalen Siliciumoxid und dem Rest der Maisstärke versetzt. Das Gemisch wird durch ein Sieb getrieben, gemischt und zu Tabletten von 140 mg Gewicht (Durchmesser: 7 mm) verpreßt.

Beispiel 32

In analoger Weise wie in Beispiel 31 beschrieben kann man ebenfalls Tabletten, enthaltend 25 mg des Natriumsalzes von D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl)-amino-phenyl]- acetyl}-glutaminsäure, herstellen.

Beispiel 33

In analoger Weise wie in Beispiel 31 beschrieben kann man ferner Tabletten, enthaltend jeweils 25 mg einer anderen Zielverbindung gemäß einem der Beispiele 1-10 und 12-30, herstellen.

Beispiel 34

In analoger Weise wie in Beispiel 10 beschrieben erhält man, ausgehend von 2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl essigsäure-4-nitrophenylester und L-glutaminsäuredimethylester, den L-(+)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]- acetyl}-glutaminsäuredimethylester, Smp 119-124°.

Claims

1. Phenylessigsäureamidverbindungen der allgemeinen Formel worin R₁ Chlor oder Brom darstellt, R₂ Chlor oder Brom bedeutet, R₃ für Hydroxy, Niederalkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Amino oder substituiertes Amino der allgemeinen Formel-NH-CH(R₄′)-C(=O)-R₃′ (Ib)steht,
worin R₄′ eine der Bedeutungen von R₄ und R₃′ eine der Bedeutungen von R₃ hat, wobei der Rest der allgemeinen Formel-NH-CH(R₄)-C(=O)-R₃ (Ic),worin R₃ und R₄ dieselben Bedeutungen haben wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, aus einem, zwei oder drei Aminosäureestern besteht, und R₄ Wasserstoff oder gegebenenfalls durch Hydroxy, Niederalkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Mercapto, Niederalkylthio mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Carboxy, Niederalkoxycarbonyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen im Niederalkoxyteil, Carbamoyl, Amino, Guanidino, Phenyl, durch Hydroxy monosubstituiertes Phenyl, Imidazolyl, Indolyl oder S′-substituiertes Dithio der allgemeinen Formel worin R₁ Chlor oder Brom darstellt und R₂ Chlor oder Brom bedeutet, substituiertes Niederalkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt und pharmazeutisch verwendbare Salze von Verbindungen der allgemeinen Formel I mit salzbildenden Eigenschaften.

2. Phenylessigsäureamidverbindungen gemäß Anspruch 1, worin zumindest die dem Rest der allgemeinen Formel -NH-CH(R₄)-C(=O)- (Id),worin R₄ dieselbe Bedeutung hat wie in Verbindungen der allgemeinen Formel I, entsprechende Aminosäure die D-Konfiguration aufweist, und pharmazeutisch verwendbare Salze von Verbindungen der allgemeinen Formel I mit salzbildenden Eigenschaften.

3. D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- glutaminsäure oder deren Natriumsalz.

4. D-(-)-N-{[2-(2,6-Dichlorphenyl-amino)-phenyl]-acetyl}- asparaginsäure oder deren Natriumsalz.

5. Verfahren zur Herstellung von Phenylessigsäureamidverbindungen gemäß Anspruch 1 der allgemeinen Formel worin R₁, R₂, R₃ und R₄ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben, sowie von Salzen von solchen Verbindungen mit salzbildenden Eigenschaften, dadurch gekennzeichnet, daß man

a) eine Verbindung der allgemeinen Formel oder ein reaktionsfähiges Derivat davon mit einer Verbindung der allgemeinen Formel oder einem Derivat davon umsetzt, wobei R₁, R₂, R₃ und R₄ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben und funktionelle Gruppen in geschützter Form vorliegen können, oder
b) eine Verbindung der allgemeinen Formel oder ein Salz davon mit einer Verbindung der allgemeinen Formel oder einem Salz davon kondensiert, wobei R₁, R₂, R₃ und R₄ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben und einer der Reste Y₁ und Y₂ eine primäre Aminogruppe und der andere eine durch Anilino ersetzbare Abgangsgruppe bedeutet und wobei funktionelle Gruppen in geschützter Form vorliegen können, und jeweils, wenn notwendig, in einer verfahrensgemäß erhältlichen Verbindung geschützte funktionelle Gruppen in die freien funktionellen Gruppen überführt, und jeweils, wenn eine Verbindung der allgemeinen Formel I hergestellt werden soll, worin R₁, R₂ und R₄ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben und R₃ Hydroxy ist, in einer erhaltenen Verbindung der allgemeinen Formel I, worin R₁, R₂ und R₄ die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben und R₃ Niederalkoxy mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen ist, diese Niederalkoxygruppe R₃ mittels Solvolyse in Hydroxy R₃ umwandelt und, wenn erwünscht, jeweils ein erhaltenes Salz in die freie Verbindung der allgemeinen Formel I oder in ein anderes Salz oder eine erhaltene freie Verbindung der allgemeinen Formel I in ein Salz umwandelt.

6. Pharmazeutisches Präparat, als Wirkstoff enthaltend eine Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 4, gegebenenfalls zusammen mit einem pharmazeutisch anwendbaren Trägermaterial.