DE2614946A1

DE2614946A1 - Neue nucleotidderivate

Info

Publication number: DE2614946A1
Application number: DE19762614946
Authority: DE
Inventors: Minoru Akiyama; Torao Ishida; Takashi Shirai
Original assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Asahi Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1975-04-08
Filing date: 1976-04-07
Publication date: 1976-10-14
Also published as: US4055716A; DE2614946C2; FR2306701B1; FR2306701A1

Description

VON KREISLER SCHÖNWALD MEYER EI3HOLD FUES VON KREISLER KELLER SELTING

26H946

PATENTANWÄLTE

Dr.-Ing. von Kreisler + 1973

Dr.-Ing. K. Schönwald, Köln

Dr.-Ing. Th. Meyer, Köln

Dr.-Ing. K. W. Eishold, Bad Soden

Dr. J. F. Fues, Köln

Dipl.-Chem. Alek von Kreisler, Köln

Dipl.-Chem. Carola Keller, Köln

Dipl.-Ing. G. Selting, Köln

Fu/Ax

5 Köln ι , den 6. März 1976

DEICFMANNHAUS AM HAUfTUAHNHOF

Asahi Kasci Kogyo Kabushiki Kaisha, No.25-1, üojimailaniadori "l-choitie, Kita-ku, Üsaka-Shi, Osaka (Japan).

Neue Muoleotidderivate

4
Die Erfindung betrifft N -Acyl-l-ß-D-arabinofuranoxylcytosin-

4 5·-aminoester mit antileukämischer Wirkung und N -Acyll-ß-D-arbinofuranosylcytosin-5'-halogenester, die als Zwischenprodukte für die Synthese der vorstehend genannten Arabinofuranosylcytosinaminoester geeignet sind.

N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosine haben eine bemerkenswerte Wirkung gegen L-1210-Leukämie bei Mäusen, und von diesen Verbindungen haben diejenigen, die einen Acylrest mit 14 bis 22 C-Atomen enthalten, besonders gute

4
Wirkungen. Diese N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosine sind im allgemeinen in Wasser unlöslich oder nur wenig löslich und können durch Umsetzung von Arabinofuranosylcytosin mit einem Säureanhydrid in Wasser und einem mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel, z.B. einem Lösungsmittelgemisch aus Wasser und Dioxan (Volumenverhältnis 1:10), bei einer Temperatur von etwa 60°C für etwa 4 Stunden hergestellt werden.

Gegenstand der Erfindung sind Verbindungen, die ausgezeichnete Dispergierbarkeit in Wasser aufweisen und durch

~* 4
chemische Modifizierung von N -A<

sylcytosinen hergestellt werden.

* 4
chemische Modifizierung von N -Acyl-1-ß-D-arabinofurano-

609842/0962

Telefon: (0221) 234541-4 · Telex: 888 2307 dopa d · Telegramm: Dompatent Köln

Von der Anmelderin wurden zahlreiche Untersuchungen mit dem Ziel durchgeführt, wirksamere antileukämische Mittel durch Auswahl von Materialien, die die Lebensdauer von mit L-1210-Leukämie infizierten Mäusen verlängern, zu finden. Hierbei wurde die Methode angewendet, die vom Drug Research and Development Department des nationalen Krebsinstituts der Vereinigten Staaten zur Auswahl von Antitumormitteln und antileukämischen Mitteln für den Menschen entwickelt wurde. (Auf weltweiter Basis gesammelte Daten haben bestätigt, daß Medikamente, die gegen L-1210-Leukämie wirksam sind, die größte Aussicht haben, für die Behandlung der Leukämie beim Menschen wirksam verwendet zu werden.) Als Ergebnis dieser Untersuchungen

4 wurde gefunden, daß mit neuen Verbindungen, den N -Acyll-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-aminoestern, das vorstehend genannte Ziel erreicht wird. Ferner wurden neue

4
N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'—halogenester gefunden, die vorteilhafte Zwischenprodukte für die Herstellung der neuen Verbindungen sind.

Die Erfindung wird nachstehend unter Bezugnahme auf die Abbildungen beschrieben.

4 Fig.l zeigt das Infrarot-Absorptionsspektrum von N -Stearoy1-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat gemäß der Erfindung.

Fig.2 zeigt das UV-Absorptionsspektrum einer Lösung des

4 i

erfindungsgemäßen N -Palmitoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chlorpropionat in Methanol.

Fig.3 zeigt das UV-Absorptionsspektrum einer Lösung des j

4 !

erfindungsgemäßen N -Margaroyl-1-ß-D-arabinofuranosyl-

cytosin-5'-Ν,Ν-diäthylglycinats in Dioxan. j

Fig.4 zeigt das UV-Absorptionsspektrum einer Lösung des erfindungsgemäßen N -Stearoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin—5 '-Ν,Ν-diiäthylaminopropionats in Dioxan.

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Fig.5 zeigt das Infrarot-Absorptionsspektrum von er-

4
findungsgemäßem N -Steroyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5 · -N,N-diäthylaminopropionat.

4
Die N -Acyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-S'-ester gemäß

der Erfindung können durch die Formel

MIR¹

HO .
dargestellt werden. Hierin steht R für einen Acyl-

rest mit 3 bis 28 C-Atomen, vorzugsweise für

einen der folgenden Acylreste: Propionyl, |

Butyryl, Isobutyryl, n-Valeryl, Isovaleryl, Caproyl,

Heptanoyl, Caprylyl, Nonanoyl, Capryl, Undecanoyl,
Lauroyl, Tridecanoyl, Myristoyl, Tetradecenoyl, Pentadecanoyl, Palmitoyl, Margaroyl, Stearoyl, Oleoyl, Nonadecanoyl, Arachidoyl, Heneicosanoyl, Behenoyl oder
Lignoceroyl, wobei Myristoyl, Tetradecenoyl, Pentadecanoyl, Palmitoyl, Margaroyl, Stearoyl, Oleoyl, Nonadeca-

noyl, Arachidoyl, Heneicosanoyl und Behenoyl besonders

2
bevorzugt werden. R steht für eine Gruppe der Formel

XCHp, XCHpCH₂ oder CH₃CHX, worin X ein Halogenatom, vorzugsweise ein Chloratom oder Bromatom, oder eine Gruppe
der Formel (CH₃) ₂N oder (C₂H₅^N ist. Die N⁴-Acyl-l-ß-D- ^! arabinofuranosylcytosin-S'-halogenester der allgemeinen

Formel (I), worin X ein Halogenatom ist, können als

4
Zwischenprodukte zur Herstellung der N -Acyl-1-ß-D-ara-

binofuranosylcytosin-5'-aminoester der Formel (I), worin ! X eine Gruppe der Formel (CH₃J₂N oder (CpHc)₂N ist, ver- j

wendet werden. I

4 !

N -Acetyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosine der Formel (I), ■

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worin R zwei C-Atome enthält, fallen nicht unter die Erfindung, da der Acetylrest während der Aufarbeitung nach der Reaktion leicht freigegeben wird.

4
Die N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-halogen-

4
acetate und N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-halogenpropionate gemäß der Erfindung können durch Um-

4
Setzung von N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosinen ryit einem Halogenacetylhalogenid bzw. einem Halogenpropionylhalogenid hergestellt werden. Das Halogenid wird vorteilhaft in einer Menge von 1 bis etwa 3 Mol pro Mol des Ausgangsmaterials verwendet. Das Halogenid kann auf einmal zugegeben, jedoch ist es besonders vorteilhaft, es in Fortionen während der gesamten Reaktion zuzusetzen, um die Produktausbeute zu steigern.

Die Reaktion wird im allgemeinen bei Normaldruck durchgeführt. Die Reaktionstemperatur unterliegt keinen besonderen Beschränkungen, jedoch sind im allgemeinen nie-

drige Temperaturen (von Raumtemperatur bis weniger als etwa 50°C) zweckmäßig. Die Reaktionszeit beträgt vorzugsweise mehr als etwa 6 Stunden bis etwa 24 Stunden. Es ist vorteilhaft, die Reaktion in einem organischen Lösungsmittel von hoher Polarität, z.B. Pyridin, Aceton, Tetrahydrofuran, Ν,Ν-Dimethylformamid und N,N-Dimethylacetamid, vorzugsweise in Ν,Ν-Dimethylacetamid durchzuführen .

Der Verlauf und Fortgang der Veresterung kann durch Dünnschichtchromatographie unter Verwendung von Kieselgel und eines Lösungsmittelgemisches aus Chloroform und : Methanol (Volumenverhältnis beispielsweise 5:1) verfolgt werden. Nach beendeter Reaktion kann nicht umgesetztes Säurehalogenid mit Wasser zersetzt werden, wodurch das Reaktionsprodukt ausgefällt wird. Das erhaltene Produkt kann ohne Reinigung in die anschließende Reaktion eingesetzt werden. Falls erforderlich, kann jedoch eine

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~⁵~ 26H9A6

Reinigung durch Umkrisfcallisation, Säulenchromatographie o.dgl. vorgenommen werden. Als Lösungsmittel für die Umkristallisation werden Aceton, Tetrahydrofuran, Äthylacetat u.dgl. verwendet. Für die Säulenchromatographie kann Kieselgel als Adsorptionsmittel und ein Lösungsmittelgemisch aus Methanol und Chloroform als Entwickler verwendet werden. Das Mischungsverhältnis von Methanol und Chloroform im Entwickler wird von zunächst etwa 1:20 verändert, wobei das Volumen des Methanols allmählich erhöht wird, bis das Verhältnis schließlich 1:5 beträgt.

Das Reaktionsprodukt kann durch sein Infrarot-Absorptionsspektrum, das UV-Absorptionsspektrum und durch Elementaranalyse identifiziert werden.

4
Die N -Acyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-S'-aminoester der Formel (I), worin X eine Gruppe der Formel (CI-U)₂N

oder (C₀H₁-) ~N ist, können durch Umsetzung der vorstehend

^ά ° ^ 4
beschriebenen N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-halogenester mit Dimethylamin oder Diethylamin in einer Menge von etwa 1 bis 10 Mol pro Mol des verwendeten

4
N -Acy1-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-halogenesters hergestellt werden. Die Reaktionstemperatur unterliegt keiner besonderen Beschränkung, jedoch sind im allgemeinen niedrige Temperaturen (von Raumtemperatur bis unter O⁰C) zweckmäßig. Die Reaktionszeit liegt im Bereich von mehr als etwa 5 Minuten bis etwa 24 Stunden und beträgt vorzugsweise 4 bis 5 Stunden bei Normaldruck. Die Reaktion kann ohne Lösungsmittel oder in einem Lösungsmittel, z.B. Diäthyläther, Tetrahydrofuran, Aceton, Benzol, η-Hexan, Chloroform und Methylendichlorid, das in einer Menge von etwa 1 bis 50 Mol pro Mol Dimethylamin oder Diäthylamin verwendet wird, durchgeführt werden.

Diese Reaktion kann an der Luft durchgeführt werden, jedoch ist es zweckmäßig, unter einer Argon- oder Stick-

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stoffatmosphäre zu arbeiten, weil die Aufarbeitung einfacher ist.

Der Verlauf und Fortgang der Aminierung kann durch Dünnschichtchromatographie unter Verwendung von Kieselgel und eines Losungsmittelgemisches aus Chloroform und Methanol (im Volumenverhältnis von beispielsweise etwa 5:1) verfolgt werden. Sobald die Bestätigung vorliegt, daß das Ausgangsmaterial verschwunden ist, wird das gebildete Aminhydrochlorid abfiltriert, und das Lösungsmittel und nicht umgesetztes Amin werden unter vermindertem Druck abdestilliert. Das hierbei erhaltene weiße Pulver wird dann durch Säulenchromatographie unter Verwendung von Kieselgel gereinigt. Als Entwickler wird ein Lösungsmittelgemisch aus Methanol und Chloroform verwendet, dessen Mischungsverhältnis von zunächst etwa 1:20 durch allmähliche Erhöhung des Volumens des Methanols bis zu einem Endwert von etwa 1:5 (Volumenverhältnis) verändert wird.

Das in dieser Weise hergestellte Reaktionsprodukt kann durch sein Infrarotspektrum, UV-Spektrum und NMR-Spektrum und durch Elementaranalyse identifiziert werden.

Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele weiter erläutert. Alle Arbeitsschritte werden bei Normaldruck durchgeführt, falls nicht anders angegeben.

Beispiel 1

4
1,01 g N -Stearoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin wurden in 12 ml N,N-Dimethylacetamid gelöst. Zur Lösung wurde auf dem Eiswasserbad eine Lösung von 0,24 g Chloracetylchlorid in N,N-Dimethylacetamid gegeben, worauf 1 Std. bei Raumtemperatur gerührt wurde. Dem Gemisch wurden dann 0,24 g Chloracetylchlorid zugesetzt, worauf 20 bis 40 Minuten bei Raumtemperatur gerührt wurde. Dem erhal-

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tenen Gemisch wurden zur Beendigung der Reaktion 100 ml Wasser zugesetzt. Die hierbei gebildete Fällung wurde abfiltriert, mit Wasser gut gewaschen und aus Aceton umkristallisiert. Nach dem Trocknen unter vermindertem Druck von 5 mm Hg wurde 1,0 g Produkt als weißer amorpher Feststoff erhalten. Die Ausbeute betrug 9^ Mol.-^.

Es ist zu bemerken, daß die vorstehend beschriebene Reaktion in 20 bis 40 Minuten nach der zweiten Zugabe von Chloracetylchlorid beendet sein sollte. Wenn die Reaktion vor der genannten Zeit beendet wird, würde das einqesetzte N⁴-Stearoyl-l-ß-D-arabinofuranoxylcytosin nicht umgesetzt werden. Wird andererseits die Reaktion länger als 40 Minuten durchgeführt, würde die Veresterung auch an der 3'-Stellung stattfinden. Daher kann das gewünschte Produkt, in dem nur die 5'-Stellung selektiv verestert ist, in hoher Ausbeute erhalten werden, solange die Reaktion im vorstehend genannten Zeitbereich abgebrochen wird.

Elementaranalyse für C₂QH₄₈O₇N₃Cl:

Berechnet: C 59.42, H 8.25, 0 19.11, N 7.17, Cl 6.05 Gefunden: C 59.52, H 8.20, 0 19.08, N 7.22, Cl 6.00 UV-Absorptionsspektrum (Methanol):

max

213 mu, 248 m.u und 299 mn ΓΙ Γ

Infrarotspektrum (KBr): 1733 cm (Ester)

Beispiel 2 j

Auf die in Beispiel 1 beschriebene Weise, jedoch mit '

4 anderen Ausgangsmaterialien wurden die folgenden N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-halogenester hergestellt: N -Palmitoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat: ■ Elementaranalyse für C₂₇II₄₄O₇N,Cl:

Berechnet: C 58-. 10, H 7.95, 0 20.07, N 7.53, Cl 6.35 Gefunden: : C 58.22, H 7.98, 0 20.02, N 7.50, Cl 6.32

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UV-Absorptionsspektrum (Methanol)-λ__Λν: 213 τημ, 248 πιμ und 299 mu

ill Ci-A

N -Margaroyl-l-p-D- arabinofuranos>'lcytosin-5 · -chloracetat: '

Elementaranalyse für C₀₀H,_rO^N,Cl:

28 46 7 j

Berechnet: C 58.79, II 8.10, 0 19.57, N 7.54, Cl 6.20 Gefunden: C 58.91, H 8.05, 0 19.42, K 7.41. Cl 6.23 UV-Absorptionsspektrum (Methanol): A_n : 213 my, 248 my uid 299 my.

Ill B X

4
N -Propionyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat

4
N -Butyryl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat

4
N -Valery1-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat

4
N -Caproyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5·-chloracetat

4
N -Heptanoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-

chloracetat

4
N -Caprylyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat

4
N -Lauroyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat

4
N -Myristoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat

N -Tetradecenoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat

4
N -Pentadecanoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5·-chlor-'

acetat

N -Nonadecanoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat

N -Arachidoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat

4
N -Behenoy1-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat

4
N -Lignoceroyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chlor- ι

acetat |

ι Beispiel 3 j

4
1,01 g N -Stearoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin wurden '

in 12 ml Ν,Ν-Dimethylacetamid gelöst. Zur Lösung wurden 0,27 g ß-Chlorpropionylchlorid gegeben, während mit Eis gekühlt wurde, worauf 2 Stunden unter Kühlen mit Eis

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gerührt wurde. Dem erhaltenen Gemisch wurden weitere
0,27 g ß-Chlorpropionylchlorid zugesetzt, worauf 2 Stunden gerührt wurde, während mit Eis gekühlt wurde. Anschließend wurde Wasser zum Reaktionssystem gegeben, um
die Reaktion abzubrechen. Die gebildete Fällung wurde
abfiltriert, mit Wasser gewaschen und dann aus Aceton
umkristallisiert. Nach dem Trocknen unter vermindertem^
Druck von 5 mm Hg wurden 1,10g Produkt als weißer
amorpher Feststoff erhalten. Ausbeute 93 Mol-%.

Elementaranalyse für C_3nH₅₀O₇N₅Cl:

Berechnet: C 60.03, H 8.40, 0 18.66, N 7.00, CI 5.91

Gefunden: c 60.00, H 8.3S, 0 19.80, N 7.10, Cl 6.00

UV-Absorptionsspektrum (Methanol )i.
λ „_v: 213 πιμ, 248 my und 299 :ημ

— Ί

Infrarotspektrum; 1733 cm (Ester)

Beispiel 4 ;

Auf die in Beispiel 3 beschriebene Weise, jedoch unter ; Verwendung anderer Ausgangsmaterialien, wurden die

4 ^:

folgenden N -Acy1-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-

hglogenester hergestellt:

4
N -Palmitoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chlorpropionat

Elementaranalyse für C,_eH. ,.O₇N,C1: |

Zo 4Ö Ij \

Berechnet: C 58.79, H 8.10, 0 19.57, N 7.34, Cl 6.20 1

Gefunden: C 58.90, H 8.07, 0 19.38, N 7.42, Cl 6.22 i

UV-Absorptionsspektrum (.-lethanol) :

: 213 mü, 248 mu und 2yy mu
max Γ Γ Γ

N -jtfargaroyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5 · -chlorpropionat

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Elementaranalyse für C H 0 N-.C1:

Berechnet: C 59.42, H 8.25, 0 19.11, N 7.17, Cl 6.05

Gefunden: C 59.44, H 8.22, 0 19.08, N 7.22, Cl 6.08

UV-Absorptionsspektrum (Methanol:

\ : 213 luu, 248 mu und 299 mu max / / /

4
N -Propionyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chiorpropionat N⁴-Butyryl-l-ß chlorpripionat N⁴-Valeryl-l-ß chlorpropionat N⁴-Caproyl-l-ß chlorpropionat N⁴-Heptanoyl-1 chlorpropionat N⁴-Caprylyl-1-chlorpropionat N⁴-Lauroyl-l-ß chlorpropionat N⁴-Myristoyl-1 chlorpripionat

4
N -Tetradeceno chlorpropionat

4
N -Pentadecano chlorpropionat

4
N -Nonadecanoy chlorpropionat N⁴-Arachidoylchlorpropionat

N -Behenoyl-1-chlorpropionat

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N -Butyryl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-

4
N -Valeryl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-

4
N -Caproy1-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-

4
N -Heptanoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'—

4
N -Caprylyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-

N -Lauroyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'

N -Myristoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'—

4
N -Tetradecenoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5 ^f-

N -Pentadecanoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-

N -Nonadecanoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'

N -Arachidoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-

N -Behenoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-

261A9A6

4
N -Lignoceroy1-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chlor-

propionat.

Beispiel 5

3,70 g IHäthylamin wurden unter Argon zu 0,30 g

4
N -Stearoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-chloracetat gegeben, worauf 4 bis 5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt wurde. Nachdem durch Dünnschichtchromatographie die Bestätigung vorlag, daß das Ausgangsmaterial verschwunden war, wurde das nicht umgesetzte Diethylamin unter vermindertem Druck von 20 mm Hg unter einer Argonatmosphäre abdestilliert. Das gebildete Pulver j

i wurde in absolutem Diäthyläther gelöst und das Diäthylaminhydrochlorid (das im Diäthyläther unlöslich ist) abfiltriert. Der Diäthyläther wurde unter vermindertem Druck von 20 mm Hg abdestilliert, wobei 0,32 g eines weißen Pulvers erhalten wurden, das dann durch Säulenchromatographie an Kieselgel gereinigt wurde, wobei ; 0,29 g eines weißen Pulvers erhalten wurden (Ausbeute | 91 Mol-%). !

I Elementaranalyse für C_o-,H_cc.0„N .: .

Jo DcS / 4 ι

Eerechnet: C 63.65, H 9.37, 0 17.98, N 9.00

i Gefunden: C 63.72, H 9.33, 0 18.00, N 9.10 !

UV-Absorptionsspektrum (Dioxan):

7 -1

λ : 248 my and 307 πιμ max

Infrarotspektrum (KBr: 1733 cm"
Kernmagnetisches Resonanzspektrum δ(ppm) CDCl,:

2.64 (q. 411. J=SHs) C₉H,.

Z b^s _N _

1.04 (t. 6H. J=SHz) C₉H₁.-^

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Beispiel 6

Auf die in Beispiel 5 beschriebene Weise, jedoch unter

Verwendung anderer Ausgangsmaterialien wurden die fol-

4
genden N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-aminoester hergestellt:

4
N -Palmitoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5 ' Ν,Ν-diäthylglycinat:

Elementaranalyse für C-.H^-O₇N.:

Berechnet: C 62.60, H 9.15, 0 13.83, N 9.42

Gefunden: C 62.77, H 9.12, 0 18.77, N 9.50

-Absorptionsspektrum (Dioxan): 248 mu und 307 mu

4
N -Margaroyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-Ν,Ν-diäthylglycinat:

Elementaranalyse für C-pHj.-.O^N .:

Berechnet: G 63.13, II 9.27, 0 18.40, N 9.20

Gefunden: C 63.00, H 9.25, 0 18.35, N 9.29

UV-Absorptionsspektrum (Dioxan): 248 und 307 mu

4
N -Stearoyl—1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-Ν,Ν-diäthylaminopropionat:
Elementaranalyse für C-j.H,_o0„N.: Berechnet: C 64.11, H 9.50, 0 17.59, N 8.80 Gefunden: C 64.05, H 9.53, 0 17.71, N 8.90 UV-Absorptionsspektrum (Dioxan): 248 und 307 mu

4
N -Palmitoyl-1-ß-D—arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-diäthylaminopropionat:
Elementaranalyse für ^C32^H56°7^N4 ^: Berechnet: c 63.43, H 9.27, 0 18.40, N 9.20 Gefunden: c 63.35, H 9.25, 0 18.29, N 9.18

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UV-Absorptionsspektrum (Dioxan): 248 und 307 mu

N -Margaroyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-diäthylaminopropionat:

Elementaranalyse für Ο-.,Η,-οΟ.,Ν.:

Berechnet: C 63.65, H 9.37, 0 17.98, N 9.00 Gefunden: C 63.67, H 9.42, 0 18.01, N 9.03

UV-Absorptionsspektrum (Dioxan): 248 und 307 mu

4 N -Propionyl—1-diäthylglycinat

4 N -Propionyl-1-diäthylaminopropionat N⁴-Butyryl-1-äthylglycinat N⁴-Butyryl-1-aminopropionat N⁴-Valeryl-1-äthylglycinat N⁴-Valeryl-1-aminopropionat

4 N -Capro glycinat

4 N -Capro aminopropionat

4 N —Heptanoyl—1

diäthylglycinat i

4 N -Heptanoyl-1-ß-D-ar diäthylaminopropionat N⁴-Caprylyl-l-ß

diäthylglycinat I

4 N -Propionyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N,-

4 N -Propionyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5·-N,N-

4 N -Butyry1-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N,-di-

4 N —Butyryl-1—ß-D—arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-diäthyl-

4 N —Valeryl-1—ß—D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-di-

4 ^[

N -Valeryl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-diäthyl-

4 N -Caproyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-diäthyl-

4 N -Caproyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-diäthyl-;

4 N -Heptanoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-

4 N —Heptanoyl-1—ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-

4 ^;

N -Caprylyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N- ι

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N -Caprylyl-T-ß-D-arabinofuranosylcytosin-b^r-N, N-diäfchylaminopropionat

N -Lauroyl-1-ß-ü-arabinofuranosylcytosin-5^C-N,N-diä thyIglycinat

N -Lauroyl-1-β-diäthylaminopropionat

4 W -Myristoyl-ldiäthylglycinat

4 M Myristoyl—1-ß diäthylaminopropionat

4 W -Tetradecenoy diäthyIglycinat

4 N —Tetradecenoy diäthylaminopropxonat

4 N Pentadecanoyl diäthyIglycinat

4 N —Pentadecanoy diäthylaminopropionat

4 N -Nonadecanoyl diäthylglycinat

4 N -Nonadecanoyl diäthylaminoprapionat N⁴-Arachidoyl-1 diäthylglycinat N⁴-Arachidoyl-1 diäthylaminopropionat

4 N -Behenoyl-1-ß diäthylglycinat

4 N -Behenoyl-1-ß diäthylaminopropionat

N -Lignoceroyldiäfchylglycinat

N -Lauroyl-1-β-ϋ-arabinofuranosylcytosin-5'-N ,N-

4 W -Myristoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-S'—N,N,—

4 M Myristoyl—1-ß-D—arabinofuranosylcytosln—5'-N,N-

4 W -Tetradecenoyl-l-ß-D-arabino£uranosylcytosin-5'-M,N-

4 N —Tetradecenoyl—1-ß-D—arabinofuranosylcytosin—5'-N,N-

4 N Pentadecanoyl-1—ß-D-arabinosfuranosylcytosin—5<-Ν,Ν*

4 N —Pentadecanoyl—1-ß—D—arabinofuranosylcytosin—5'-N,N-

4 N -Nonadecanoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-S'-NjN-

4 N —Arachidoyl—1—ß-D-arabinofuranosylcytosin—5·—N,N-

4 N -Arachidoyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-

4 N —Behenoyl—1-ß-D—arabinofuranosylcytosin—5·—N,N-

4 N -Behenoyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-

N -Lignoceroyl-i-ß^D-arabinof uranosylcytosin-;)' -U₁U-

609842/0962

26H946

N -Lignoceroyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-N,N-diäthylaminopropionat.

Dispergierbarkeitstest

4
Die Dispergierbarkeit der N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-aminoester gemäß der Erfindung wurde bewertet, indem 10 mg der Testverbindung zu 1 ml Wasser gegeben wurden. Die erhaltenen Ergebnisse sind nachstehend in Tabelle 1 genannt.

Wie die Werte in Tabelle 1 zeigen, haben die Verbindungen gemäß der Erfindung im Vergleich zu dem als

4
Ausgangsmaterial verwendeten N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin verbesserte Dispergierbarkeit in Wasser.

N -Acylrest

Tabelle

N⁴-Acyl-l-ß-D-arabinofuranosylcytosin

N -Acyl-l-ß- N -Acyl-l-ß-D-arabino-D-arabinofuranosylfuranosyl- : cytosin-5¹- cytosin-5¹- ■ Ν,Ν-diäthyl- N,N-diäthyl-_; glycinat

ammopropionat

Propionyl

Butyryl
Valeryl

Caproyl

Heptanoyl

Caprylyl

Lauroyl

Myristoyl

Tetradecenoyl

Pentadecanoyl

Palmitoyl

Margaroyl

Stearoyl

dispergiert

schwimmt auf der Wasseroberfläche

dto.

Il It It It

tt

It It

— Il Il

löslich löslich i 10 mg/ml) (10 mg/ml) i

dto.(5 mg/ml)dto.(5 mg/ml)

äußerst gut äußerst gut dispergiert dispergiert ,

dto,

tt

It
It

tt

ti

ti
tt
ti

It

dto.

Il Il Il

tt

It ti Il

Il

tt

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	schwimmt auf der Wasser oberfläche	26U9A6
Nonadecanoyl	dto.	äußerst gut äußerst gut dispergiert dispergiert
Arachidoyl	t!	dto. dto.
Behenoyl	Biologischer Test	Il Il

Die Antikrebswirkung der neuen Verbindungen, d.h. der

4
N -Acyl-1-ß-D-arabinofuranosylcytosin-5'-aminoester gemäß der Erfindung wurde wie folgt bestimmt: Männlichen CDF^-Mäusen (3 Mäuse pro Gruppe) wurden L-1210-Leukämiezellen in einer Menge von 100 000 Zellen/Maus intraperitoneal injiziert. Nach 2 Tagen und 6 Tagen wurde eine physiologische Kochsalzlösung, die die Testverbindung in einer Menge von 100, 200 bzw. 400 mg/kg enthielt} den Mäusen intraperitoneal injiziert. Ferner wurde für Vergleichszwecke den Mäusen, die mit L-1210-Leukämie · infiziert worden waren, eine physiologische Kochsalzlösung verabreicht, die keine Testverbindung enthielt. ;

Die Antikrebswirkung der Testverbindungen wurde mit Hilfe des Vergleichs der Überlebensrate T/C (%) , d.h. der 100-fachen mittleren Überlebenszeit der Gruppen, denen die Testverbindung injiziert worden war, geteilt durch die mittlere Überlebenszeit der Vergleichsgruppen, denen keine Testverbindung injiziert worden war, bewertet.

Gemäß dieser Bewertung zeigt ein Vergleichswert der

Überlebensrate T/C (%) von weniger als 100% an, daß die -

Testverbindung toxisch ist, während ein Wert von mehr ^!

als 125% anzeigt, daß die Testverbindung therapeutische J

Wirkungen aufweist. Die Ergebnisse in der folgenden ι

Tabelle 2 zeigen, daß von den Verbindungen gemäß der

4 Erfindung diejenigen, in denen der N -Acylrest 14 bis 22 C-Atome enthält, eine hohe Überlebensrate bei niedriger Konzentration aufwiesen und daher besonders wert-! voll sind. ι

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26H9A6

Tabelle 2

N - Acyl-1- ß-P- arabino- N - A₁-Vl -1 - R-P-arabinofuranosylcytosin-5'-furanoxy!cytosin-^ '-N₃N-- Ν,Ν-diäthylqlycinat diäthylaminopropionat

	400 (mg_/kgj_	T/C O	100 (mg/kg)	T IΓ f S- ϊ I/L (ν J	120	100 OgAg!
N⁴-Acyl- rest	130	200	125	400 200 OeAg) (mg/kg)	125	120
Propionyl	132	125	127	128	130	120
Bj tyryl	132	127	127	132	123	119
Valeryl	140	130	125	130	132	125.
Csproyl	143	133	123	133	181	127
Heptanoyl	200	127	140	141	173	135
Caprylyl	225	182	170	202	182	141
Lauroyl	90	201	278	212	288	281
Myristoyl	91	192	250	93	310	230
Tetradecenoyl	95	309	320	99	340	340
Pentadecanoyl	99	305	349	95	321	381
Palmitoyl	120	280	390	125	315	388
Margaroyl	140	279	355	111	280	344
Stearoyl	120	244	298	140	351	295
Nonadecanoyl	303	260	300	120	288	299
Arachidoyl	341	362	260	311	127	250
Behenoyl	120	298	127	321	130	131
Lignoceroyl	in-	125		115		110
1-ß-D-Arabino- furanosylcytos			150

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Claims

" ¹⁸ " 26U9A6

Patentansprüche

Nucleotidderivate der Formel

,1

1 2

in der R ein Acylrest mit 3 bis 28 C-Atomen .und R eine Gruppe der Formel XCH₂, XCH₂CH₂ oder CH₃CHX ist, worin X ein Halogenatom oder eine Gruppe der Formel (CH₃)₂N oder (C₂H₅J₂N ist.
2) Nucleotidderivate nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Acylrest R 14 bis 22 C-Atome enthält.

Nucleotidderivate nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß sie Myristoyl, Tetradecenoyl, Pentadecanoyl, Palmitoyl, Margaroyl, Stearoyl, Nonadecanoyl, Arachidoyl oder Behenoyl als Acylrest enthalten.

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