DE2264847A1 - Verfahren und reagenz zur bestimmung von cholesterin - Google Patents
Verfahren und reagenz zur bestimmung von cholesterinInfo
- Publication number
- DE2264847A1 DE2264847A1 DE2264847*A DE2264847A DE2264847A1 DE 2264847 A1 DE2264847 A1 DE 2264847A1 DE 2264847 A DE2264847 A DE 2264847A DE 2264847 A1 DE2264847 A1 DE 2264847A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- cholesterol
- determination
- reagent
- cholestenone
- esterase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/60—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving cholesterol
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Patentanwälte Dipl.-Ing. F. Wftckmann,
Dipl.-Ing. H.Weickmann, Dipl.-Phys. Dr. K. Fincke
Dipl.-Ing. R A.Weickmann, Dipl.-Chem. B. Huber
8 MÜNCHEN 86, DEN 2 2 6 A 8 4
POSTI-ACH 860 820 HKW MÖHLSTRASSE 22, RUFNUMMER 98 39 21/22
int.Nr. 1825 B I
BOEHRINGER MANNHEIM GMBH, 68 Mannheim, Sandhofer Str. 112-132
Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin
Ausscheidung aus Patent (Patentanmeld. P 22 24 132.3)
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur enzymatisehen Bestimmung
von verestertem und freiem Cholesterin und ein Reagenz zur Durchführung dieses Verfahrens.
Die Bestimmung von Cholesterin hat für die medizinische Diagnostik
eine erhebliche Bedeutung. Ein erhöhter Cholesterinspiegel im Blut ist ein wesentlicher Risikofaktor der Arteriosklerose.
Bei hohen Cholesterinwerten, also Hypercholesterinämie, kommen Koronarinsuffizienz und Herzinfarkt häufiger vor
als bei niedrigen Cholesterinwerten. Hypercholesterinämie begünstigt das Auftreten von Arteriosklerose und Koronarerkrankungen
und muß daher frühzeitig erkannt werden, damit die Behandlung rechtzeitig beginnen kann. Erhöhte Cholesterinwerte
finden sich häufig auch bei Diabetes mellitus, nephrotischem Syndrom, Hypothyreose und Leberkrankheiten, wie der biliären
509822/0764
Cirrhose. Eine rasche und zuverlässig durchführbare Methode zur Bestimmung von Cholesterin hat daher große Bedeutung.
Die bekannten und brauchbaren Methoden zur Cholesterinbestimmung
basieren auf der Reaktion nach Liebermann und Burchard. Freies und verestertes Cholesterin bilden danach mit Essigsäureanhydrid
und konzentrierter Schwefelsäure blaugrüngefärbte Verbindungen, deren Farbintensität der Cholesterinkonzentration
proportional ist und spektrometrisch gemessen wird. ,
Dieses bekannte Verfahren weist jedoch wesentliche Nachteile auf. Der Hauptnachteil dieses Verfahrens liegt in seiner Unspezifität.
Die Liebermann-Burchard-Reaktion stellt eine relativ unspezifische Steroidreaktion dar, die außer von Cholesterin
auch von anderen Steroiden eingegangen wird. Da beispielsweise im Plasma noch 1 bis 3 % Dihydrocholesterol und
0,5 bis 1,4 $> Δ -Cholestenol neben anderen Steroiden vorhanden
sind, ergibt sich ein unerwünscht großer Fehler. Ein weiterer Nachteil besteht darin, daß mit aggressiven und ätzenden
Reagenzien gearbeitet werden muß.
Aufgabe der Erfindung ist daher die Schaffung eines neuen vollenzymatischen Verfahrens und eines Reagenzes zur Bestimmung
von verestertem und freiem Cholesterin, welches die oben erwähnten Nachteile nicht aufweist und insbesondere absolut
spezifisch für Cholesterin ist und keine aggressiven Reagenzien erfordert.
Gelöst wird diese Aufgabe erfindungsgemäß durch ein Verfahren
zur Bestimmung von Cholesterin, welches darin besteht, daß man Cholesterin in wässrigem Medium mit Cholesterinoxydase
inkubiert und entweder den Sauerstoffverbrauch oder gebilde-
509822/0764
226A8A7
tes HpOp bzw. Cholestenon bestimmt, dann Cholesterinesterase
zusetzt und anschließend das gebundene Cholesterin bestimmt.
Das erfindungsgemäße Verfahren führt zur vollenzymatischen Umsetzung von verestertem und von freiem Cholesterin und ermöglicht
damit die Bestimmung von sowohl Gesamtcholesterin, gebundenem Cholesterin als auch freiem Cholesterin durch Messung
eines der oben aufgeführten Reaktionsprodukte bzw. des bei der Reaktion verbrauchten Sauerstoffs.
Cholesterinoxydase ist ein neues Enzym, welches nachstehende Reaktion katalysiert:
Cholesterin + O2 , cholestenon + ^
Durch die erfindungsgemäße Koppelung dieser Reaktion mit der enzymatischen Spaltung von verestertem Cholesterin wird eine
rasche und quantitative Spaltung des veresterten Cholesterins erzielt und auch freigesetztes Cholesterin rasch quantitativ
weiteroxydiert. Das Verfahren ermöglicht damit eine absolut spezifische und genaue quantitative Bestimmung des gesamten
Cholesterins.
Cholesterinoxydase, das Ausgangsmaterial zur ihrer Gewinnung, ihre Reinigung und die Eigenschaften sind in den deutschen Offenlegungsschriften
DT-OS 2 224 133-4 und 2 224 131.2 beschrieben.
Das Verfahren der Erfindung eignet sich zur Bestimmung von Cholesterin in wässrigen Medien aller Art, wie Lebensmittelextrakten,
Körperflüssigkeiten.und insbesondere Serum, in denen Cholesterin auch in veresterter Form vorkommt.
509822/0764
Als Cholesterinesterase wird eine solche aus Leber oder Pankreas bevorzugt.
Die Messung des SauerstoffVerbrauchs, der HpOp-Bildung oder
der Cholestenonbildung gemäß obiger allgemeiner Gleichung kann nach den hierfür bekannten und üblichen Methoden erfolgen.
Geeignete Methoden zur Bestimmung des Sauerstoffverbrauches sind beispielsweise Gaschromatographie und Depolarisationsverfahren.
Bevorzugt wird die polarometrische Bestimmung mittels Sauerstoffelektrode, da sich dieses Verfahren besonders
zur automatisierten Durchführung der Cholesterinbestimmung eignet. Derartige Bestimmungsmethoden sind bekannt. Besonders
geeignet erwiesen sich die in den deutschen Offenlegungsschriften 2 130 340 und 2 130 308 beschriebenen Methoden zur
polarometrischen Messung des Sauerstoffverbrauchs in wässrigen Medien.
Gebildetes Wasserstoffperoxyd kann sowohl titrimetrisch als auch potentiometrisch, polarographisch und colorimetrisch sowie
enzymatisch bestimmt werden. Bevorzugt werden die enzymatischen Methoden unter Verwendung von Katalase oder Peroxydase,
da diese nicht nur äußerst spezifisch und zuverlässig sind, sondern auch mit der Hauptreaktion unter Bildung von Wasserstoffperoxyd
auf einfachste Weise kombiniert werden können. Als besonders geeignet erwies sich insbesondere die Bestimmung
mittels Katalase in Gegenwart von ß-Diketonen, z.B. Acetylaceton und Methanol bzw. Äthanol oder Methylenglycol, sowie
die Bestimmung mittels Peroxydase in Gegenwart eines Chromogens, Bei der Bestimmung mittels Katalase, Acetylaceton und Methanol
wird letzteres zu Formaldehyd oxydiert, der mit Acetylaceton eine Farbreaktion eingeht, die gemessen werden kann. Bei der
Bestimmung mittels Peroxydase werden als Chromophor Verbindungen zugesetzt, die nach der Reaktion photometrisch bestimmt
werden können. Ein Beispiel für ein geeignetes Chromophor ist
509822/0764
226A847
2,2*-Aminobenzthiazolinsulfonsäure.
Die Bestimmung des Cholestenons erfolgt mit Hilfe von Ketoreagenzien,
vorzugsweise einem mit Ketogruppen unter Hydrazonbildung umsetzenden Hydrazinderivat, wie z.B. 2,4-Dinitrophenylhydrazin.
Gegenstand der Erfindung ist weiter ein Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin, welches aus Cholesterinoxydase, einem
System zur Bestimmung von HpOp oder einem System zur Bestimmung
von Cholestenon und aus Cholesterinesterase besteht. In einer ersten bevorzugten Äusführungsfrom besteht dieses Reagenz
aus Cholesterinoxydase, Cholesterinesterase, Katalase, Acetylaceton, Methanol und Puffer, einzeln oder gemischt. In einer
weiteren bevorzugten Ausführungsform besteht das Reagenz aus Cholesterinoxydase, Cholesterinesterase, Peroxydase, Chromogen
und Puffer, einzeln oder gemischt. Als Chromogen wird 2,2f-Aminobenzthiazolinsulfonsäure
bevorzugt.
Gemäß einer weiteren bevorzugten Ausführungsform besteht das erfindungsgemäße Reagenz aus Cholesterinoxydase, Cholesterinesterase
und einem mit Ketogruppen unter Hydrazonbildung reagierenden Hydrazinderivat sowie gegebenenfalls einem Puffer.
Als Hydrazinderivat wird 2,4-Dinitrophenylhydrazin bevorzugt.
Die oben erwähnten bevorzugten Reagenzkombinationen können außer den aufgeführten obligaten Bestandteilen zusätzlich übliche
Lösungsmittel, Stabilisatoren oder/und oberflächenaktive Substanzen enthalten. Alle diese Zusatzstoffe sind dem Fachmann
bekannt und in Nachweissystemen für Wasserstoffperoxyd bzw. Cholestenon üblich.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung weiter.
509822/0764
0,02 ml Serum werden zu 10,0 ml 0,5 M Kaliumphosphatpuffer,
pH 7,5» der 0,4 % Hydroxypolyäthoxydodecan enthält, gegeben.
Es wird die Extinktion (E1) bei 240 nm in einem geeigneten
Spektralphotometer abgelesen und die Reaktion mit 0,02 ml (entsprechend 0,2 U) Cholesterinoxydase gestartet. Nach 5 min
wird erneut die Extinktion (E9) abgelesen. Die Konzentration
des gebildeten Δ -Cholesten-3-ons und damit des freien Cholesterins
ergibt sich aus der Differenz zwischen der ersten und der zweiten Ablesung unter Berücksichtigung des molaren Extinktionskoeffizienten
für Δ -Cholesten-3-on bei 240 nm U = 15,5 οΐη2/μΜο1).
Zur Bestimmung des veresterten Cholesterins werden nun 0,02 ml (= 0,2 U) Cholesterinesterase aus Candida spec. (WS 90024)
dazugegeben und nach 15 min die Extinktion (E,) abgelesen.
Die Konzentration des veresterten Cholesterins ergibt sich aus der Differenz E, - E2 unter Berücksichtigung der Eigenabsorption
der Cholesterinesterase. Die Messung einer typischen Probe ergab '50 mg % freies Cholesterin und 148 mg i» verestertes
Cholesterin. Die Vergleichsbestimmung nach Liebermann/Burchard ergab 212 mg % Gesamtcholesterin (freies und
verestertes Cholesterin).
10 g Ammoniumhydrogenphosphat werden in 100 ml Wasser gelöst und mit 85 #iger Phosphorsäure auf pH 7,0 eingestellt. Dann
werden 6,6 . 10^U Katalase zugesetzt. Mit der so erhaltenen
Lösung wird eine Mischung von 0,2 ml Acetylaceton, 10 ml Methanol, 1,2 g Polyäthylenglykol und 1,2 g Natriumcholat
auf 100 ml aufgefüllt.
5,0 ml der so erhaltenen Lösung werden mit 0,05 ml Serum bzw.
509822/0764
0,05 ml einer Cholesterin-Standard-Lösung mit einem Gehalt
von 200 mg $ Cholesterin gemischt. Aliquots der serumhaltigen Probe sowie der Cholesterin-Standard-haltigen Probe werden mit
je 0,2 U Cholesterinoxydase und 0,2 U Cholesterinesterase aus Pankreas versetzt und 70 min bei 370C inkubiert. Dann wird der
gebildete Farbstoff bei 405 um photometrisch gemessen unter
Berücksichtigung des Reagentienleerwertes.
Der Cholesteringehalt der serumhaltigen Probe wird unter Benutzung
des Standards als Bezugsgröße bestimmt. Kontrollbestimmungen nach Liebermann/Burchard ergaben eine Abweichung
von etwa 5 #.
509822/0764
Claims (8)
- Patentansprüchef1.) Verfahren zur Bestimmung von Cholesterin, dadurch gekennzeichnet, daß Cholesterin in wässrigem Medium mit Cholesterinoxydase inkubiert und entweder der Sauerstoffverbrauch oder gebildetes H2O2 bzw. Cholestenon bestimmt wird, dann Cholesterinesterase zugesetzt und anschließend das gebundene Cholesterin bestimmt wird.
- 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Sauerstoffverbrauch polarometrisch gemessen wird.
- 3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß gebildetes H2O2 enzymatisch mit Katalase oder Peroxydase bestimmt wird.
- 4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß gebildetes Cholestenon mit einem Ketoreagenz, wie 2,4-Dinitrophenylhydrazin, gemessen wird.
- 5. Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin, dadurch gekennzeichnet, daß es aus Cholesterinoxydase, einem System zur Bestimmung von H2O2 oder einem System zur Bestimmung von Cholestenon und Cholesterinesterase besteht.
- 6. Reagenz nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß das System zur Bestimmung von H2O2 aus Katalase, Acetylaceton, Methanol und Puffer besteht.
- 7. Reagenz nach Anspruch 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, daß das System zur Bestimmung von HpOp aus Peroxydase, Chromogen und Puffer besteht.509822/07 64
- 8. Reagenz nach Anspruch 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, daß das System zur Bestimmung von Cholestenon aus einem mit Ketogruppen unter Hydrazonbildung reagierenden Derivat, insbesondere 2,4-Dinitropheny!hydrazin, besteht.509822/0764
Priority Applications (9)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE2264847A DE2264847C2 (de) | 1972-05-17 | 1972-05-17 | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin |
DE19722224132 DE2224132C2 (de) | 1972-05-17 | 1972-05-17 | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin |
CH681273A CH589295A5 (de) | 1972-05-17 | 1973-05-14 | |
GB2308273A GB1429525A (en) | 1972-05-17 | 1973-05-15 | Process and reagent for the quantitative determination of cholesterol |
AT426273A AT324580B (de) | 1972-05-17 | 1973-05-15 | Verfahren und reagens zur bestimmung von cholesterin |
BE131117A BE799543A (fr) | 1972-05-17 | 1973-05-15 | Procede et reactif pour le dosage du cholesterol, |
NL7306738A NL181282C (nl) | 1972-05-17 | 1973-05-15 | Werkwijze en reagentiacombinatie voor het bepalen van veresterd en vrij cholesterol in vloeistoffen. |
FR7317898A FR2191743A5 (de) | 1972-05-17 | 1973-05-17 | |
AU55861/73A AU484754B2 (en) | 1972-05-17 | 1973-05-17 | Process and reagent forthe determination of cholesterol |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE2264847A DE2264847C2 (de) | 1972-05-17 | 1972-05-17 | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin |
DE19722224132 DE2224132C2 (de) | 1972-05-17 | 1972-05-17 | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE2264847A1 true DE2264847A1 (de) | 1975-05-28 |
DE2264847C2 DE2264847C2 (de) | 1978-11-30 |
Family
ID=25763268
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE19722224132 Expired DE2224132C2 (de) | 1972-05-17 | 1972-05-17 | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin |
DE2264847A Expired DE2264847C2 (de) | 1972-05-17 | 1972-05-17 | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE19722224132 Expired DE2224132C2 (de) | 1972-05-17 | 1972-05-17 | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
AT (1) | AT324580B (de) |
BE (1) | BE799543A (de) |
CH (1) | CH589295A5 (de) |
DE (2) | DE2224132C2 (de) |
FR (1) | FR2191743A5 (de) |
GB (1) | GB1429525A (de) |
NL (1) | NL181282C (de) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4186251A (en) * | 1973-03-01 | 1980-01-29 | Miles Laboratories, Inc. | Composition and method for determination of cholesterol |
US4164448A (en) * | 1973-12-07 | 1979-08-14 | Boehringer Mannheim Gmbh | Activation of cholesterol oxidase for cholesterol assay |
US3869349A (en) * | 1974-03-25 | 1975-03-04 | Eastman Kodak Co | Method for the enzymatic hydrolysis of cholesterol esters |
CA1056282A (en) * | 1974-03-25 | 1979-06-12 | Charles T. Goodhue | Multilayer analytical elements for use in the assay of cholesterol |
US3884764A (en) * | 1974-03-25 | 1975-05-20 | Eastman Kodak Co | Method and composition for blood serum cholesterol analysis |
US4116773A (en) * | 1976-07-01 | 1978-09-26 | Beckman Instruments, Inc. | Enzymatic reagent and method for increasing the sensitivity of enzymatic substrate analyses using oxygen rate analyzers |
DE2649749A1 (de) * | 1976-10-29 | 1978-05-11 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und reagens zur bestimmung von gesamtcholesterin oder gebundenem cholesterin |
DE2653537C3 (de) | 1976-11-25 | 1979-08-23 | Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt | Verfahren und Mittel zur Bestimmung von Hydroperoxiden |
EP0044432B1 (de) * | 1980-07-10 | 1984-08-08 | Ivan Endre Modrovich | Stabilisierte enzymatische Lösungen und Verfahren zum Bestimmen von Gesamtcholesterin im menschlichen Serum |
US5047327A (en) * | 1982-04-02 | 1991-09-10 | Ivan E. Modrovich | Time-stable liquid cholesterol assay compositions |
US9494605B2 (en) | 2009-11-20 | 2016-11-15 | Pharnext | Diagnostic tools for charcot-marie-tooth disease |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR1422881A (fr) * | 1963-08-16 | 1966-01-03 | Warner Lambert Pharmaceutical | Composition auxiliaire de diagnostic utilisable pour déterminer le cholestérol |
NL137003C (de) * | 1967-10-14 | |||
FR2047147A5 (de) * | 1969-05-06 | 1971-03-12 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | |
DE2130340C3 (de) * | 1971-06-18 | 1975-07-03 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und Vorrichtung zur quantitativen Bestimmung von einzelnen Proben unterschiedlicher Konzentration von Substanzen |
GB1385319A (en) * | 1971-09-22 | 1975-02-26 | Nat Res Dev | Enzyme preparations |
-
1972
- 1972-05-17 DE DE19722224132 patent/DE2224132C2/de not_active Expired
- 1972-05-17 DE DE2264847A patent/DE2264847C2/de not_active Expired
-
1973
- 1973-05-14 CH CH681273A patent/CH589295A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-05-15 AT AT426273A patent/AT324580B/de active
- 1973-05-15 NL NL7306738A patent/NL181282C/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-05-15 BE BE131117A patent/BE799543A/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-05-15 GB GB2308273A patent/GB1429525A/en not_active Expired
- 1973-05-17 FR FR7317898A patent/FR2191743A5/fr not_active Expired
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE2264847C2 (de) | 1978-11-30 |
NL7306738A (de) | 1973-11-20 |
NL181282C (nl) | 1987-07-16 |
DE2224132C2 (de) | 1980-04-03 |
BE799543A (fr) | 1973-11-16 |
GB1429525A (en) | 1976-03-24 |
DE2224132B1 (de) | 1973-11-22 |
CH589295A5 (de) | 1977-06-30 |
AT324580B (de) | 1975-09-10 |
DE2224132A1 (de) | 1973-11-22 |
NL181282B (nl) | 1987-02-16 |
AU5586173A (en) | 1974-11-21 |
FR2191743A5 (de) | 1974-02-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0186134B1 (de) | Mittel zur Verbesserung des Nachweises Wasserstoffperoxid liefernder Oxidase-Reaktionen und seine Verwendung | |
EP0068356B1 (de) | Mittel und Verfahren zum Nachweis von Wasserstoffperoxid oder Peroxidasen | |
DE3003490C2 (de) | ||
DE2833612A1 (de) | Mittel und verfahren zur bestimmung von wasserstoffperoxyd | |
EP0354441A2 (de) | Verfahren zur kolorimetrischen Bestimmung eines Analyten mittels enzymatischer Oxidation | |
EP0030718B1 (de) | Verfahren und Reagens zur Bestimmung von Triglyceriden | |
DE2913553B1 (de) | Verfahren und Reagenz zur enzymatischen Bestimmung von Enzymsubstraten | |
DE3526829A1 (de) | Verfahren und reagenzeinheit zum bestimmen von alpha-amylase | |
DE2264847C2 (de) | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin | |
DE2818603A1 (de) | Kinetisches glucosereagens und dessen verwendung in einem kinetischen nachweisverfahren | |
EP0054146B1 (de) | Nachweis von NAD (P) H oder Salicylat | |
DE3046241A1 (de) | Verfahren und reagenz zur bestimmung von cholesterin | |
DE2653537A1 (de) | Verfahren und mittel zur bestimmung von hydroperoxiden | |
DE2834706A1 (de) | Verfahren und reagens zur bestimmung von glutamat-oxalacetat-transaminase und glutamat-pyruvat-transaminase | |
DE2326756A1 (de) | Verfahren zur quantitativen bestimmung von harnsaeure | |
DE3125667C2 (de) | Verfahren und Mittel zum Nachweis von Wasserstoffperoxid | |
DE2906732C2 (de) | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung der Peroxidase | |
DE2509156A1 (de) | Verfahren zur bestimmung der cholesteringesamtmenge in einer serumprobe und einzelreagens zur durchfuehrung dieses verfahrens | |
EP0228046B1 (de) | Verfahren zur Steigerung der Quanten-Ausbeute bei der Oxidation von Luminol durch Peroxide in Gegenwart von Peroxidase | |
DE2615958A1 (de) | Stabilisierte coenzymloesung | |
DE2459087A1 (de) | Verfahren und reagenz zur bestimmung von serumtriglyceriden | |
DE3443415A1 (de) | Zusammensetzung zur bestimmung von wasserstoffperoxid | |
DD201734A5 (de) | Verfahren und reagens zur bestimmung von glycerin | |
DE3150416C2 (de) | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung der Aktivität von Angiotensin-konvertierendem Enzym | |
DE2612725C3 (de) | Verfahren und Reagenz zur Bestimmung von Cholesterin |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C2 | Grant after previous publication (2nd publication) |