DE2125641C2 - Verwendung eines Schweinefuttermittels - Google Patents
Verwendung eines SchweinefuttermittelsInfo
- Publication number
- DE2125641C2 DE2125641C2 DE2125641A DE2125641A DE2125641C2 DE 2125641 C2 DE2125641 C2 DE 2125641C2 DE 2125641 A DE2125641 A DE 2125641A DE 2125641 A DE2125641 A DE 2125641A DE 2125641 C2 DE2125641 C2 DE 2125641C2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- endotoxins
- pig
- feed
- bacteria
- endotoxin
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 claims description 60
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 23
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 22
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 12
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 claims description 9
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims description 8
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 5
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 claims description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 4
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 22
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 6
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 5
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 5
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 4
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 4
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 4
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 4
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 4
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 4
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 4
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 4
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 4
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 4
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 2
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 2
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 2
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 2
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 2
- 239000006161 blood agar Substances 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 2
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 2
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 2
- 229940126578 oral vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000006833 oxoid nutrient broth Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 235000007558 Avena sp Nutrition 0.000 description 1
- 241000252203 Clupea harengus Species 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 241000442132 Lactarius lactarius Species 0.000 description 1
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 235000020263 barley milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000019514 herring Nutrition 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 1
- 229940040461 lipase Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000002366 mineral element Substances 0.000 description 1
- 229940029985 mineral supplement Drugs 0.000 description 1
- 235000020786 mineral supplement Nutrition 0.000 description 1
- 238000011587 new zealand white rabbit Methods 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 235000006180 nutrition needs Nutrition 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000012956 testing procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 229960001322 trypsin Drugs 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
- A61K39/0258—Escherichia
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Feed For Specific Animals (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
| Weybridge- | Internationale Serotypen- | K88a,b (L) |
| Klassifikation | Klassifikation | |
| G7 | 08:K87(B) | |
| E65 | 045: K | |
| E57 | 0138 :K81 (B) | ► K85a,c(B) |
| E4 | 0139 :K82 (B) | K8Sa,c(L) |
| E68II | 0141 :K85a,b-^ | K88a,c(L) |
| G1253 | 0147 :K89 (B) | |
| »Abbotstown« | 0149 :K91 | |
Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung eines Schweinefuttermittels, wodurch die Anfälligkeit von
Schweinen gegenüber Störungen des Magen-Darm-Traktes vermindert wird.
Diese Störungen treten oft als Folge der Anwesenheit eines oder mehrerer pathogener Stämme oes Bakteriums
Escherichia coli im Eingeweide auf, wobei es sich im besonderen um solche Stämme handelt, welche die
folgenden Serotypen aufweisen:
Wenn die Umgebung oder die Kost des Schweines geändert wird, z. B. wenn es wieder in den Stall gebracht
oder abgestillt wird, so läßt der Wechsel der Umstände das System des Schweines in einem Zustande, der für die
Wucherung der pathcgenen E. coü-Stämme günstig ist. und die Störungen des Magen-Darm-Traktes, die sich
dann ergeben können, beeinträchtigen den allgemeinen Gesundheitszustand des Tieres, reduzieren die Geschwindigkeit
der Gewichtszunahme und verursachen oft Tod.
Die Erfindung betrifft die Verwendung eines Schweinefuttermittels, insbesondere für Jungschweine, das
neben den üblichen Futtermittelbestandteilen ein aus inaktivierten Zellen von Escherichia CoIi erhaltbares
Antigenmaterial enthält.
Die vorliegende Erfindung geht auf die Feststellung zurück, daß das Eingeweide des Schweines dadurch
angeregt werden kann. Antikörper gegen die bereits vorhandenen pathogenen E. coli-Stämme zu produzieren,
daß man in das Eingeweide (zum Unterschied von der Einführung in den Blutstrom, wie bei Injektion) die
Endotoxine eines oder mehrerer der erwähnten E. coli-Serotypen. im wesentlichen frei von den lebenden
E. coli-Organismen, einführt.
Aus der DD-PS 62 894 ist ein Oralimpfstoff bekannt, der hergestellt wird durch Abtötung von Escherichia CoIi
Bakterien mittels Formalin. Dabei werden die Endotoxine in eine unlösliche Form übergeführt und der erfindungsgemäßen
Verwendung entzogen.
Die vorveröffentlichte NL-PA 69 12 159. die der nachveröffentlichten US-PS 36 51 214 entspricht, betrifft die
Hersteilung oraler Vaccine aus Bakterien, die für die Gas'ro-enteritis in Kälbern verantwortlich sind. Dieses
bekannte Vaccin wird aus abgetöteten Bakterien hergestellt, und es kenn mit Futtermitteln gemischt werden.
Wenngleich hierbei die Bakterien abgetötet und Endotoxine aus den Bakterien freigesetzt werden, werden
solche freigesetzten Endotoxine nach der bekannten Arbeitsweise verworfen.
Demgegenüber werden in dem erfindungsgemäß verwendeten Schweinefuttermittel als Antigenmaterial
Endotoxine eingesetzt, die erhalten worden sind durch Züchten von Bakterien einer oder mehrerer der Escherichia
CoIi Serotypen 08, 045, 0138, 0139, 0141, 0147 und 0149 und Abtöten der gezüchteten Bakterienkulturen
unter Freisetzen der Endotoxine. wobei die Endotoxine jedes Serotyps in einer Menge von 104 bis 105 Einheiten
pro kg Futtermittel anwesend sind.
Gegenstand der Erfindung ist somit die Verwendung eines Schweinefuttermittels insbesonders für Jung-
schweine. das neben den üblichen Futtermittelbestandteilen ein aus inaktivierten Zellen von Escherichia Coli
erhallbares Antigenmaterial enthält zum Schutz der Schweine gegenüber Störungen des Magen-Darm-Traktes.
dadurch gekennzeichnet, daß als Antigenmaterial Endotoxine eingesetzt werden, die erhalten worden sind durch
Züchten von Bakterien einer oder mehrerer der Escherichia-Coli-Serotypen 08, 045, 0138, 0139. 0141, 0147 und
0149 und Abtöten der gezüchteten Bakterienkulturen unter Freisetzen der Endotoxine und daß das Schweine-
futtermittel in einer solchen Menge zur Verfügung gestellt wird, daß mindestens 1 bis 5 Hämaggluiinations-
Hemmeinheiten jeder Escherichia-Coli-Serogruppe pro Schwein pro Tag aufgenommen werden.
Wenn das Material, welches in das Eingeweide des Schweines eingeführt werden soll, als »Endotoxine«
bezeichnet wird, so soll damit nicht gesagt sein, daß von diesem Material Exotoxine oder Zellmaterial, innerhalb
t dessen die Endotoxine im lebenden Bakterium eingeschlossen sind, ausgeschlossen sein müssen: es soll lediglich
zu verstehen gegeben werden, daß die Endotoxine für Erzielung des gewünschten immunologischen Effektes
, von pri märer Wichtigkeit sind, während dies für die Exotoxine und die Zellrückstände nicht zutrifft Gelegentlich
wird es jedoch bequem sein, entweder Exotoxine oder Zellrückstände oder beide mit den Endotoxinen vergesellschaftet
zu lassen, erstens um sich die Mühe ihrer Abtrennung zu ersparen und zweitens um tieren antigene
Kapazität, soweit sie sie besitzen, nützen zu können.
Wie bereits angegeben, bringt die Einführung der Endotoxine von nur einem der erwähnten E coli-Serotypen
in das Eingeweide eine gewisse günstige Wirkung, insoweit als die Fähigkeit des betreffenden Serotyps, schidlich
zu wirken, dann vermindert sein wird. Jedoch ist es vorzuziehen, die Endotoxine von allen Serotypen zu
verabreichen. Die zu verabreichenden Endotoxine können durch Züchtung jedes Serotyps (eine Probe von
jedem ist aus dem Central Veterinary Laboratory des Ministeriums für Landwirtschaft und Fischereiwesen, New
Haw, Weybridge, Surrey, UK, erhältlich) und, wenn Wachstum des Mikroorganismus — und somit Produktion
von Endotoxinen — in geeignetem Ausmaß vorangekommen ist, durch Abtötung der wuchernuen Mikroorganismen
und Freisetzung der Endotoxine gewonnen werden. Dies kann durch Sieden oder Autoklavieren erfolgen.
Die gesamten sterilisierten Kulturen, von denen jede Exotoxine und Zellrückstände neben Endotoxinen
enthält, können dann vereinigt und verabreicht werden. Statt jedoch die gesamten Kulturen zu sterilisieren,
werden vorzugsweise die Bakterien abgetrennt (bequemerweise durch Zentrifugierung) und in einem kleinen
v Volumen eines wäßrigen Mediums (z. B. Wasser oder Salzlösung) behandelt, um die Bakterien zu töten und
v Freikommen tvji Endotoxinen zu verursachen.
1^ Der einfachste und wirtschaftlichste Weg, die abgetrennten Bakterien zu töten, besteht in Erhitzung. Wenn
>tl Erhitzung genügend ausgedehnt wird — z. B. 1 Stunde bei 1000C, 20 Minuten bei 125° C — wird ein großer Teil
der Endotoxine aus ihrer Vergesellschaftung mit den Zellwänden der abgetöteten Bakterien in das Medium, in
i, welchem die Erhitzung erfolgt, freigesetzt Die restlichen gebundenen Endotoxine können, wie gefunden wurde,
durch Behandlung mit einem Enzym, wie z. B. Trypsin, Lysozym, Pepsin, Lipase oder deren Mischungen, in
iß Lösung gebracht werden. Die Ergebnisse typischer Behandlungsmethoden sind in Tabelle 1 zusammengefaßt,
£ welche die relativen Mengen (Titer) von Endotoxinen, ins Wasser freigesetzt durch eine vorhergehende Behandlung
zur Abtötung der Bakterien, gefolgt von einer Enzymbehandlung, um an die Bakterienzellwände gebunden
gelassenes Endotoxin freizusetzen, zeigt
*) Freisetzung infolge natürlicher Lysis von Mikroorganismen.
In der Praxis erfolgt die Verabreichung der Endotoxine an das Schwein zweckmäßigerweise als ein Bestandteil
eines Schweinefuttermittels, geeigneterweise eines solchen, welches Protein, Kohlehydratquelle, z. B. Getreide
und die Vitamine sowie die mineralischen Elemente enthält, welche wesentliche Komponenten der Schweinekost
sind.
Es wurde gefunden, daßSchweinefutterbestandteile, wie z. B. Heringmehl, Hefe, Weizenmehl, Haferflocken,
gemahlene Gerste und Magermilchpulver die Neigung haben, E. coli-Endotoxine bei pH 5,9 und darüber an sich
zu binden, wie in Tabelle II gezeigt ist.
| Abtötungsbeharvdlung | Um | Gesamte | Endotoxine, freigesetzt durch Abtötungsbehandlung, | Lysozym | 5C | Pepsin | Lipase | Lipase | Lysozym | Lysozym |
| — Exponierung gegen | gesetzte | gefolgt von Behandlung der getöteten Bakterien mit Enzym | Trypsin | Trypsin | -f Pepsin |
|||||
| En- j- | 1 Stunde lang bei 37' | 640 | 2560 | 1280 | 1280 | 1280 | 5120 | |||
| toxine | Trypsin | 1280 | 5120 | 2560 | 2560 | 5120 | 5120 | |||
| 2500 | 5120 | — | — | 5120 | 5120 | |||||
| 320*) | 1280 | 640 | 1280 | 1280 | 1280 | 640 | 320 | |||
| 100°C 20 Min. lang | 1280 | 2560 | ||||||||
| 125°C20Min.lang | 2560 | 2560 | ||||||||
| Ultraschallwellen | 640 | 2560 | 320 | 640 | 320 | 1280 | 2560 | 5120 | ||
| (9 mm Sonde; 1,5 Amp.) | ||||||||||
| bei 00C 30 Min. lang | 2560 | 1280 | — | 1280 | 2560 | 1280 | ||||
| pH3,5bei45°C | 640 | 640 | ||||||||
| 60 Min. lang | ||||||||||
| 5% wäßrig. Butanol | 640 | 2560 | ||||||||
| bei 3715C 2 Std. lang |
Futterbestandteil Titer von gebundenem Endotoxin pro Gewichtseinheit
des Bestandteils bei pH
5,3 5,9 6,3 6,8 7,2
5,3 5,9 6,3 6,8 7,2
Weizenmehl Haferflocken gemahlene Gerste 10 Heringmehl Hefe Magermilchpulver
Es wurde auch gefunden, daß proteolytische Enzyme, wie z. B. Trypsin, in der Lage sind, die auf diese Weise
gebundenen Endotoxine freizusetzen. So setzt bei pH 7,2 Trypsin etwa die Hälfte des oben angeführten gebundenen
Endotoxingehaltes von Hefe und Magermilchpulver frei. Des weiteren wurde gefunden, daß E. coli-Endoto:-:ine
aus wäßrigen Systemen bei einem pH-Wert unterhalb 5 gefällt werden, wie in Tabelle III gezeigt wird.
| 0 | 480 | 480 | 480 | 560 |
| 0 | 0 | 0 | 320 | 560 |
| 0 | 0 | 320 | 320 | 480 |
| 0 | 480 | 480 | 480 | 560 |
| 0 | 320 | 480 | 480 | 560 |
| 0 | 320 | 480 | 480 | 560 |
pH Titer von Endotoxin, vorhanden in
Standardlösung nach Einstellung auf den angegebenen pH-Wert
| 7,0 | 320 |
| 6,5 | 320 |
| 6,0 | 320 |
| 5,5 | 320 |
| 5,0 | 320 |
| 4,5 | 16Q |
| 4,0 | 80 |
| 3,2 | 40 |
| 2,5 | 40 |
Es ist bequem, die Endotoxine in ein Futtermittel dadurch einzuverleiben, da3 man zunächst ein Vorgemisch
der Endotoxine mit einem der Futtermittelbestandteiie (geeigneterweise Magermilch) und Wasser herstellt und
dann das Vorgemisch mit den übrigen Futtermittelbestandteilen vermischt. Wenn man so vorgeht, ist es wünschenswert,
die in den Tabellen II und III verzeichneten Resultate zu berücksichtigen, d. h. das Vorgen.isch auf
einen -iH-Wert im Bereich 5—6 einzustellen, um sicherzustellen, daß bei der Nahrungsaufnahme zumindest ein
Teil des Endotoxingehaltes des Futters für die Anregung des Eingeweide-Immunsystems des Schweines unmittelbar
verfügbar gemacht wird.
Die Erfindung hat besondere Bedeutung für die Verbesserung der Infektions-Widerstandsfähigkeit von
Schweinen in der Abstillungsperiode, wenn sie Beanspruchung besonders unterworfen sind. Durch Fütterung
des Endotoxinmaterials vor Abstillung des Schweines, beginnend, sagen wir, bei einem Alter «on 4—10 Tagen
und fortgesetzt bis zum Abs-.'llen, kann das Eingeweide des Schweines angeregt werden, die angemessenen
Antikörper zu produzieren, so daß zu dem Zeitpunkt, an welchem das Ferkel von der Sau genommen wird,
genügend hohe Antikörper-Zirkulation im Eingeweide vorhanden ist, um jeglicher E. coli-Wucherung gewachsen
zu sein oder zumindest um die Ernstlichkeit jeglichen Krankheitszustandes, der sich entwickelt, zu mindern.
Das Endotoxinmaisrial kann für diesen Zweck in einem sogenannten »creep feed« einverleibt werden, d. h. in
einem Futter, welches speziell dafür formuliert ist, den Ernährungsbedürfnissen von Ferkeln im Stadium vor dem
Abstillen gerecht zu werden. Das Futter muß den Ferkeln unter Vorsichtsmaßnahmen zur Verfugung gestellt
werden, um zu verhüten, daß die Sau es auffrißt; im allgemeinen geschieht dies dadurch, daß man das Futter nur
über einen engen Eingang zugänglich macht.
Minimale Dosierungen liegen im Bereich 1 —5 Einheiten (bezüglich Messung einer Einheit sei auf die folgenden
Beispiele verwiesen) der Endotoxine von jedem E. coli-Serotyp pro Schwein pro Tag. Es wurde jedoch
beobachtet, daß Schweine keine üblen Wirkungen zeigen, wenn ihnen die tausendfachen Mengen zugeführt
werden. Eine sehr geeignete Dosierung für Einverleibung in ein Schweinefuttermittel beträgt 104 — 103 Einheiten
der Endotoxine von jedem Serotyp pro kg Futtermittel.
Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele veranschaulicht.
Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele veranschaulicht.
Beispiel 1
Herstellung und Isolierung von Endotoxinen
Herstellung und Isolierung von Endotoxinen
Endotoxine wurden von jedem der 7 E. coli-Sprotypen, die zu Beginn der Beschreibung angeführt sind,
hergestellt, wöbe' m allgemeinen die Methode von Westphal, Luderitz und Bister (1952) Z. Natur. Forsch. 7,148,
befolgt wurde. Eine gefriergetrocknete Kultur von E. coli wurde in Peptonwasser rekonstituiert und 6 Stunden
lang bei 370C inkubiert. Nach geeignetem Wachstum wurde die Kultur an einer Platte mit gereinigtem Schaf-
blut-Agar auf Reinheit kontrolliert und dann verwendet, um geneigte Flächen von Nähragar (Oxoid) in Roux-Flasciien
zu beimpfen. Die Kultur ließ man Ober Nacht bei 37°C wachsen, und die Bakterien wurden in sterilem
destilliertem Wasser geerntet. Die erhaltene Bakteriensuspension wurde aseptisch in 30 ml Universal-Flaschen
verteilf und 10 Minuten lang bei 4000 Umdrehungen pro Minute zentrifugiert. Die überstehende Flüssigkeit
wurde entfernt und die zurückbleibenden ßukterienkügelchen wurden in 4 rn! sterilen destillierten Wassers
resuspendiert und dann gefriergetrocknet.
Um Endotoxine zu isolieren, wurden 0,5 g gefriergetrocknete E. coli in 5 ml 0,15 M NaCl suspendiert, und es
wurden 10 ml 90%igen wäßrigen Phenols als Lysierungsmittel zugesetzt. Die Mischung wurde bei 68°C 30 Minuten
lang unter ständigem Rühren erhitzt, hernach bei 4000 U/Min, zentrifugiert, um die Zeilrückstande zu
verdichten. Die wäßrige Phase wurde entfernt und auf 4"C gekühlt, dann wurden ihr langsam 10 Volumina
eiskalten Äthanols zugefügt. Der so gebildete Niederschlag wurde in Wasser wieder gelöst, und durch Zugabe
von 2 Voluminas Äthanols wurden Nukleinsäuren aus der Lösung gefällt, welche entfernt wurden. Aus der
verbliebenen Lösung wurden durch Zugabe weiterer 8 Voluminas Äthanols Endotoxine gefällt. Diese wurden
durch Zentrifugierung abgetrennt, mit eiskaltem Äthanol gewaschen und in 0.15 M NaCI wieder gelöst (diese
Lösung von Endotoxinen wird als Reagens 1 bezeichnet).
Prüfung von Endotoxinen a) Herstellung von Antiserum
Spezifische Hyperimmunseren (»Antiseren«) wurden in weißen Neuseeland-Kaninchen gegen gewaschene,
hitzegelötete (100°C, 2'I2 Stunden) Organismen jedes der E. coli-Serotypen hergestellt.
Suspensionen der hitzegetöteten Organismen wurden in 0.15 M NaCI (angenähert 3 χ ΙΟ9 Organismen pro ml)
hergestellt und intravenös injiziert. Das Immunisierungsprogramm begann mit einem Injektionsvolumen von
0.1 rn! und wurde an jedem 4. Tag mit verdoppelten Voluminas bis !,6 ml fortgesetzt. Die Kaninchen ließ man
10 Tage nach Beendigung des Programms ausbluten und das erhaltene Blut wurde zentrifugiert. Die· obere
Schicht von Hyperimmunserum wurde gesammelt (dieses Antiserum wird als Reagens 2 bezeichnet).
b) Messung von Antikörper- (Anii-Endotoxin-)Aktivität in Antiserum
Schuf-Erythrozyten wurden durch Behandlung einer 5°/bigen Suspension gewaschener gepackter Zellen mit
einem gleichen Volumen der Endotoxin-Lösung Reagens 1 bei 37 0C 30 Minuten lang sensibiiisiert. Die sensibilisierten
Zellen wurden durch Zentrifugierung abgetrennt, durch Waschen von überschüssigen Endotoxinen
befreit und in 0,15 M NaCI resuspendiert, um eine 2,5%ige Suspension von Endotoxin-sensibilisierten Schaf-Erythroz\
ten zu bilden (diese wird als Reagens 3 bezeichnet).
Reagens 2 (das Antiserum) wurde serienmäßig mit 0,15 M NaCl verdünnt, um eine Serie von Lösungen
^lpirhcri Volumens Π νοΙΛ von AnLikörnerkonzentration !/5, 1/10, 1/20, l-'4O ... 1/(5x2""'^ ClCrJeHi0Cn von
Reagens 2 zu erhalten, und zu jeder dieser Lösungen wurde 1/5 Vol. von Reagens 3 zugesetzt. In den stärkeren
•Xntiserumlösungen trat Hämagglutination ein, aber nicht in den schwächeren, und als Endpunkt der Titration
(festgestellt bei 4CC) wurde diejenige Lösung genommen, in welcher Hämagglutination nur gerade noch auftrat.
Bei einer t> ptschen Vorgangsweise mag der Endpunkt bei der 12. Lösung liegen, d. h. bei der Losung, welche eine
^ir.tikorperkonzentration 1/(5 χ 2:l) derjenigen von Reagens 2 aufweist. Man würde angeben, daß Reagens 2
einen Aniiserumuter von 5 x2p ( = 10 240) besitzt.
c) Messung der Endotoxin-Konzentration in einer Lösung unbekannter Konzentration
Die Lösung (Y), die zu prüfen war, wurde mit 0,15 M NaCI serienmäßig verdünnt, um eine Serie von Lösungen
gleichen Volumens (3 Vol.) von Endotoxinkonzentration 1/3. 1/6, 1/12. 1/24 etc. derjenigen der Lösung Y zu
erhalten, leder dieser Lösungen wurde 1 Vol. von Reagens 2 (Antiserum) so verdünnt, daß sich ein Titer von 20
(siehe oben b)) ergibt, und dann (nach wenigen Minuten) 1 Vol. von Reagens 3 (sensibilisierte Schaf-Erythrozyten)
zugefügt: ei, ergaben sich schließliche Endotoxinkonzentrationen 1/5, 1/10. 1/20 ... 1/(5 χ 2'i-l) derjenigen
von Losung Y. Hämagglutination wurde in den stärkeren Endotoxinlösungen inhibiert, trat aber in den schwächeren
auf. und als Endpunkt der Titration wurde diejenige Lösung genommen, in welcher Hämagglutination
nur gerade noch inhibiert wurde. Bei einer typischen Vorgangsweise mag dies bei der sechsten Lösung sein, mit
Endotoxinkonzentration 1/(5 χ 25) derjenigen von Lösung Y. Man würde dann sagen, daß Lösung Y einen Titer
von 5 χ 2U = iöOi besitzt, äquivalent 160 Einheiten von Endotoxin pro ml.
A. Herstellung von Endotoxinmaterial
Die folgende Vorgangsweise wurde getrennt für jeden der zu Beginn der Beschreibung angeführten E coli-
Serot ν pen befolgt.
a) Das Bakterium wurde von einem Kultur-Verwahrungsvorrat auf Platten mit gereinigtem Blutagar ausgestrichen
und 24 Stunden lang bei 37'C inkubiert. Die Platten wurden dann in herkömmlicher Weise auf
Reinheit des Stammes kontrolliert.
b) Kolonien des Bakteriums wurden von den Platten in 50 ml Oxoid-Nährbrühe Nr. 2 (Katalog-Nr. CM 67)
überführt. Die Brühe wurde 24 Stunden bei 37 C gehalten.
c) Die ginze Kultur, erhalten gemäß b), wurde zum Impfen von I1A Liter Oxoid-Nährbrühe Nr. 2 verwendet,
und die Brühe wurde, unter Schütteln. 24 Stunden lang bei 37°C inkubiert.
Jede so hergestellte schließliche Kultur enthielt etwa 10'° lebensfähige Bakterien pro ml und eine Probe der
Kultur, wenn 2 Stunden lang bei 125°C gedämpft und dem Prüfungsvorgang unterworfen, ergab einen Titer von
2560, entsprechend 2560 Einheiten Endotoxin pro ml gedämpfter Kultur.
Die Kulturen aller Serotypen wurden vereinigt und die vereinigten Kulturen wurden 2 Stunden lang in einem
5 Autoklaven(125°C) gedämpft, um die Bakterien abzutöten.
B. Herstellung von Schweinefuttermittel
Die gesamte sterilisierte Brühe, erhalten gemäß A, wurde auf pH 5 eingestellt und im Gewichtsverhältnis
ίο 15 : 85 einem herkömmlichen Schwulneabstillfutter folgender Zusammensetzung einverleibt:
Gewichtsprozente
walzengetrocknete Magermilch 20
Weißfischmehl 25
15 walzengetrocknete Hafergrütze (Haferflocken) 36
Zucker(Saccharose) 10
getrocknete Hefe(75% unextrahiert) 5,5
Düi'SChicbcriräFi 2
Natriumchlorid 0,5
20 mineralische Ergänzung 1,0
Das erhaltene Gemisch wurde bei 650C auf einen Feuchtigkeitsgehalt von etwa 15% getrocknet.
Die schließliche Kultur jedes Serotyps, erhalten gemäß vorgehender Arbeitsweise A, wurde zentrifugiert, um
die Bakterien abzutrennen, die dann in Wasser resuspendiert und 30 Minuten lang bei 125°C erhitzt wurden. Die
abgetöteten Bakterien wurden dann 3 Stunden lang bei 370C mit einer Mischung der Enzyme Lysozym und
Pepsin behandelt, und das gesamte Endotoxinmaterial, resultierend aus der Abtötungsbehandlung und der
30 Enzymbehandlung, wurde geprüft. Die geprüften Endotoxinmaterialien von allen Serotypen wurden vereinigt,
auf pH 5 eingestellt und an Magermilch zugefügt. Diese Mischung wurde dann einer herkömmlichen Schweinefuttermittelkomposition
einverleibt, so daß sich eine Konzentration von 104 Einheiten der Endotoxine jedes
Serotyps pro kg Futtermittel ergab.
Claims (1)
- Patentanspruch:Verwendung eines Schweinefuttermittels insbesondere für Jungschweine, das neben den üblichen Futtermittelbestandteilen ein aus inaktivierten Zellen von Escherichia CoIi erhaltbares Antigenmaterial enthält zum Schutz der Schweine gegenüber Störungen des Magen-Darm-Traktes, dadurch gekennzeichnet, daß als Antigenmaterial Endotoxine eingesetzt werden, die erhalten worden sind durch Züchten von Bakterien einer oder mehrerer der Escherichia CoIi Serotypen 08, 045, 0138, 0139, 0141, 0147 und 0149 und Abtöten der gezüchteten BakLerienkulturen unter Freisetzen der Endotoxine und daß das Schweinefuttermittel in einer solchen Menge zur Verfügung gestellt wird, daß mindestens 1 bis 5 Hämagglutinations-Hemmeinheiten jeder Escherichia-Coli-Serogruppe pro Schwein pro Tag aufgenommen werden.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB2674670 | 1970-06-03 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE2125641A1 DE2125641A1 (de) | 1971-12-09 |
| DE2125641C2 true DE2125641C2 (de) | 1986-03-13 |
Family
ID=10248578
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE2125641A Expired DE2125641C2 (de) | 1970-06-03 | 1971-05-24 | Verwendung eines Schweinefuttermittels |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| BE (1) | BE768078A (de) |
| CA (1) | CA979806A (de) |
| DE (1) | DE2125641C2 (de) |
| DK (1) | DK144083C (de) |
| ES (2) | ES391698A1 (de) |
| FR (1) | FR2119903B1 (de) |
| GB (1) | GB1336015A (de) |
| IE (1) | IE35321B1 (de) |
| IT (1) | IT1024507B (de) |
| NL (1) | NL7107538A (de) |
| SE (1) | SE421173C (de) |
| YU (1) | YU42918B (de) |
| ZA (1) | ZA713510B (de) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BE789864A (fr) * | 1971-10-14 | 1973-04-09 | Unilever Nv | Elevage des veaux |
| GB1560934A (en) * | 1975-05-07 | 1980-02-13 | Unilever Ltd | Methods for the resistance of non-human mammals to gastro-intestinal disorders |
| US4285931A (en) | 1978-01-30 | 1981-08-25 | Merck & Co., Inc. | E. coli enterotoxin vaccine for veterinary and human use |
| FR2466251B1 (fr) * | 1979-10-03 | 1983-03-18 | Agronomique Inst Nat Rech | Vaccin animal anticolibacillaire, obtention et application |
| CH639852A5 (fr) * | 1979-07-26 | 1983-12-15 | Om Laboratoires Sa | Medicament contre les maladies infectieuses des voies urinaires et digestives. |
| RU2125455C1 (ru) * | 1996-09-25 | 1999-01-27 | Саратовская научно-исследовательская ветеринарная станция | Способ профилактики диареи молодняка сельскохозяйственных животных |
| WO2008106763A1 (en) * | 2007-03-08 | 2008-09-12 | The Governors Of The University Of Alberta | Bacterial endotoxin for the prevention of metabolic disorders and bacterial infections |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA768129A (en) * | 1967-09-26 | M. Berger Frank | Endotoxin fractions and method for producing same | |
| DD62894A (de) * | ||||
| DE1792256C3 (de) * | 1968-08-10 | 1979-07-05 | Kali-Chemie Pharma Gmbh, 3000 Hannover | Oral applizierbare, polyvalente Impfstoffe gegen lokale Darminfektionen |
-
1970
- 1970-06-03 GB GB2674670A patent/GB1336015A/en not_active Expired
-
1971
- 1971-05-24 DE DE2125641A patent/DE2125641C2/de not_active Expired
- 1971-05-28 YU YU1371/71A patent/YU42918B/xx unknown
- 1971-05-28 ES ES391698A patent/ES391698A1/es not_active Expired
- 1971-05-31 CA CA114,338A patent/CA979806A/en not_active Expired
- 1971-06-01 DK DK265771A patent/DK144083C/da active
- 1971-06-01 IT IT68877/71A patent/IT1024507B/it active
- 1971-06-01 ZA ZA713510A patent/ZA713510B/xx unknown
- 1971-06-01 IE IE701/71A patent/IE35321B1/xx unknown
- 1971-06-02 NL NL7107538A patent/NL7107538A/xx unknown
- 1971-06-02 FR FR7120015A patent/FR2119903B1/fr not_active Expired
- 1971-06-03 BE BE768078A patent/BE768078A/xx not_active IP Right Cessation
- 1971-06-03 SE SE7107207A patent/SE421173C/xx unknown
-
1973
- 1973-08-14 ES ES417901A patent/ES417901A1/es not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES417901A1 (es) | 1976-06-16 |
| FR2119903A1 (de) | 1972-08-11 |
| ES391698A1 (es) | 1975-07-16 |
| GB1336015A (en) | 1973-11-07 |
| DE2125641A1 (de) | 1971-12-09 |
| DK144083C (da) | 1989-11-20 |
| YU137171A (en) | 1982-02-28 |
| IT1024507B (it) | 1978-07-20 |
| NL7107538A (de) | 1971-12-07 |
| IE35321L (en) | 1971-12-03 |
| SE421173C (sv) | 1985-10-28 |
| CA979806A (en) | 1975-12-16 |
| DK144083B (da) | 1981-12-07 |
| YU42918B (en) | 1989-02-28 |
| SE421173B (sv) | 1981-12-07 |
| ZA713510B (en) | 1973-01-31 |
| BE768078A (fr) | 1971-12-03 |
| FR2119903B1 (de) | 1974-10-18 |
| IE35321B1 (en) | 1976-01-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ferdous et al. | Beneficial effects of probiotic and phytobiotic as growth promoter alternative to antibiotic for safe broiler production | |
| DE69014030T2 (de) | Mittel für die Verhütung und Behandlung von Diarrhöe. | |
| DE69835880T2 (de) | Verfahren zur verabreichung einer lebensfähige mikroorganismen enthaltenden zusammensetzung an geflügel | |
| DE60032599T2 (de) | Bakterienstamm, verarbeitete pflanzenextrakte und probiotische zubereitungen für die menschliche und tierärtzliche verwendung | |
| DE2010654C3 (de) | Normalisierung der Darmflora von Mensch und Haustier | |
| Stokstad | Antibiotics in animal nutrition | |
| AU721811B2 (en) | Animal feed | |
| US20110129529A1 (en) | Probiotic products for pet applications | |
| Smith | The immunization of mice, calves and pigs against Salmonella dublin and Salmonella cholerae-suis infections | |
| Khaziakhmetov et al. | Valuable effect of using probiotics in poultry farming | |
| Kelley et al. | Effects of Varying Doses of a Probiotic Supplement Fed to Healthy Dogs Undergoing Kenneling Stress. | |
| DE3853888T2 (de) | Verwendung von einem fructo-oligosaccharid zur herstellung einer bacteriostatischen zusammensetzung zur vorbeugung des wachsens von salmonellen und ein verfahren zur vorbeugung des wachsens von salmonellen. | |
| DE3781652T2 (de) | Zubereitung, geeignet fuer die behandlung von darmstoerungen. | |
| DE2125641C2 (de) | Verwendung eines Schweinefuttermittels | |
| DE69231558T2 (de) | Selektion und isolierung von mikrofungi zur verwendung in der biologischen kontrolle von parasitären nematoden in tieren | |
| Binek et al. | Evaluation of the efficacy of feed providing on development of gastrointestinal microflora of newly hatched broiler chickens | |
| Van Zytveld et al. | Aflatoxicosis: the presence of aflatoxins or their metabolites in livers and skeletal muscles of chickens | |
| Kasianenko et al. | Application of mannan oligosaccaharides (Alltech Inc.) in waterfowl: optimal dose and effectiveness | |
| CN110430763A (zh) | 饲料添加剂配方及其制备和使用方法 | |
| DE69625188T2 (de) | Pektin und ein phospholipid enthaltendes arzneimittel zur verwendung gegen durchfall und magengeschwüre | |
| DE2250315C2 (de) | Verwendung eines Kälberfuttermittels | |
| US3911109A (en) | Rearing calves | |
| WO1995004539A1 (en) | Immunopotentiator and method of immunopotentiating animal with the same | |
| JP3674742B2 (ja) | 雛用ゲル状サルモネラ抑制剤及びそれを用いる雛のサルモネラ抑制方法 | |
| RU2797587C1 (ru) | Пробиотическая кормовая добавка для коров и телят |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| OD | Request for examination | ||
| 8128 | New person/name/address of the agent |
Representative=s name: LEDERER, F., DIPL.-CHEM. DR. MEYER-ROXLAU, R., DIP |
|
| D2 | Grant after examination | ||
| 8328 | Change in the person/name/address of the agent |
Free format text: LEDERER, F., DIPL.-CHEM. DR., PAT.-ANW., 8000 MUENCHEN |
|
| 8364 | No opposition during term of opposition | ||
| 8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |