CN110430763A - 饲料添加剂配方及其制备和使用方法 - Google Patents

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Abstract

本申请所公开的主题涉及用于单胃动物饲料的饲料添加剂配方。特别地，所公开的配方包含分离的木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD‑1。饲料添加剂配方可以进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba‑BPD1。所公开的配方加入到用于单胃动物的饲料中，能协同改善动物的性能。

Description

饲料添加剂配方及其制备和使用方法
相关申请的交叉引用
本申请要求2017年3月7日提交的、申请号为62/467,848的美国临时专利申请的优先权，其全部内容均通过引用并入本文。
技术领域
本申请所公开的主题一般地涉及饲料添加剂配方(formulation)及制备和使用所公开的配方的方法。
背景技术
数十年来，动物生产依赖于抗生素生长促进剂(AGP)，从而维持动物健康以及改善其产率。随着许多国家将AGP从动物生产中移除，生产者们试图使用多种饲料添加剂，如功效水平不同、结果不一致的有机酸、酶以及益生菌。特别地，现在市场上使用的许多酶和益生菌产品均很昂贵，并且被证实应用在工业饲料和动物生产过程中会不稳定。因此，提供酶和益生菌的新组合是有益的，所述组合添加进动物饲料中时，显著地改善动物生产的性能特点。
发明内容
在有些实施例中，所公开的主题针对用于单胃动物饲料的饲料添加剂配方。特别地，所述配方包含分离的木聚糖酶以及地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物或具有其所有鉴定特征(identifyingcharacteristics)的突变体。在有些实施例中，所述配方进一步地包括解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物或具有其所有鉴定特征的突变体。
在有些实施例中，所公开的主题针对用于单胃动物的饲料组合物，其包含分离的木聚糖酶以及地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物或具有其所有鉴定特征的突变体。在有些实施例中，饲料组合物进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物，或具有其所有鉴定特征的突变体。
在有些实施例中，所公开的主题针对提升单胃动物的性能的方法。所述方法包括给予动物有效量的饲料组合物，所述饲料组合物包含木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物或者具有其所有鉴定特征的突变体。在该方法的有些实施例中，饲料组合物进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物或具有其所有鉴定特征的突变体。
在有些实施例中，所公开的主题针对制备用于单胃动物的饲料组合物的方法。特别地，所述方法包括向饲料组合物中加入配方，所述配方包含木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物或者具有其所有鉴定特征的突变体。在有些实施例的方法中，所述配方进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物或具有其所有鉴定特征的突变体。
附图说明
图1a为3个琼脂扩散试验的照片，示出了无害李斯特菌(Listeria innocua)和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1之间的相互作用。
图1b为3个琼脂扩散试验的照片，示出了肠沙门氏菌(Salmonella enteria)和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1之间的相互作用。
图2a为3个琼脂扩散试验的照片，示出了大肠杆菌(E.coli)和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1之间的相互作用。
图2b为3个琼脂扩散试验的照片，示出了肠沙门氏菌和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1之间的相互作用。
图2c为3个琼脂扩散试验的照片，示出了无害李斯特菌和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1之间的相互作用。
图3a为折线图(line graph)，示出了在pH3.0孵育0、1、2或3小时后，地衣芽孢杆菌菌株PWD-1在24小时内的增长。
图3b为折线图，示出了在pH3.0孵育0、1、2或3小时后，解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1在24小时内的增长。
图4a为折线图，示出了首先暴露于LB培养基的牛胆汁(Ox gall)中0、1、2或3小时后，地衣芽孢杆菌菌株PWD-1在8小时内的增长。
图4b为折线图，示出了首先暴露于LB培养基的牛胆汁0、1、2或3小时后，解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1在8小时内的增长。
图5为柱状图，示出了在缓冲液、牛血清白蛋白和猪粘液(swine mucus)存在下，地衣芽孢杆菌菌株PWD-1、解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)菌株168和枯草芽孢杆菌菌株C102的生长。
图6为一系列柱状图，示出了以地衣芽孢杆菌菌株PWD-1、木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和木聚糖酶来补充动物饲料的以及对照的14天、21天以及42天龄肉鸡(broiler)的病变评分。
图7a为柱状图，说明了以地衣芽孢杆菌菌株PWD-1、木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和木聚糖酶来补充动物饲料的以及对照的21天肉鸡的体重。
图7b为柱状图，说明了以地衣芽孢杆菌菌株PWD-1、木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和木聚糖酶来补充动物饲料的以及对照的42天的肉鸡的体重。
图8a为柱状图，说明了以地衣芽孢杆菌菌株PWD-1、木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和木聚糖酶补充动物饲料的以及对照的21天肉鸡的饲料转化率(FCR)。
图8b为柱状图，说明了以地衣芽孢杆菌菌株PWD-1、木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和木聚糖酶来补充动物饲料的以及对照的42天肉鸡的饲料转化率(FCR)。
图9a为柱状图，说明了以地衣芽孢杆菌菌株PWD-1、木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和木聚糖酶来补充动物饲料的以及对照的21天龄肉鸡的沙门氏菌的发病率(％)。
图9b为柱状图，说明了以地衣芽孢杆菌菌株PWD-1、木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和木聚糖酶来补充动物饲料的以及对照的42天龄肉鸡的沙门氏菌的发病率(％)。
图10为柱状图，说明了以抗生素生长促进剂(AGP)、木聚糖酶+地衣芽孢杆菌菌株PWD-1+解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(不同浓度)来补充动物饲料的以及对照的21天肉鸡的体重。
图11a为柱状图，说明了以AGP、木聚糖酶+地衣芽孢杆菌菌株PWD-1+解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(不同浓度)来补充动物饲料的以及对照的21天肉鸡的饲料转化率。
图11b为柱状图，说明了以AGP、木聚糖酶+地衣芽孢杆菌菌株PWD-1+解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(不同浓度)补充动物饲料的以及对照的42天肉鸡的饲料转化率。
图12a为柱状图，说明了以AGP、木聚糖酶+地衣芽孢杆菌菌株PWD-1+解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(不同浓度)来补充动物饲料的以及对照的21天龄肉鸡的死亡率百分比。
图12b为柱状图，说明了以AGP、木聚糖酶+地衣芽孢杆菌菌株PWD-1+解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(不同浓度)来补充动物饲料的以及对照的42天肉鸡的死亡率百分比。
图13为柱状图，说明了相对于对照的和未被攻击的肉鸡，以木聚糖酶(10U/g饲料)、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(1×105CFU/g饲料)与解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(5×105CFU/g饲料)(“Xyl+B+Y”)的组合物，或盐霉素钠(“抗球虫药”)补充动物饲料后饲养肉鸡，通过口服灌胃对抗球虫药敏感的菌株进行攻击的28天龄的肉鸡的死亡率，所述对抗球虫药敏感的菌株是堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)、巨型艾美耳球虫(Eimeriamaxima)和柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)。
具体实施方式
所公开的主题将在下文中参照附图进行全面描述，其中示出了一些(并非所有)实施例。那些从存在于上述描述和相关附图中的指导中受益的本领域技术人员，将想到所公开的主题的许多修改和其他实施例。因此，需要理解的是，所公开的主题并不限于所公开的具体实施例，所作的修改和其他实施例都意图包括在所附的权利要求书范围内。
除非另有规定，所有的本文所用的技术术语均与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同。
根据长期存在的专利法惯例，本申请(包括权利要求)中使用的术语“一(a)”、“一个(an)”和“所述(the)”指一个或多个。因此，例如，“一种蛋白质”的提法包括多种蛋白质，除非上下文明显与此相反。
根据说明书和所附的权利要求的目的，术语“大约”与一个或多个数字或数字范围连用时，应该理解为，指的是所有此类数字，包括在范围内的所有数字和通过扩大所阐述数值的上下限边界来修改该范围的所有数字。用端点表述的数值范围包括归入该范围内的所有数字，如整数，包括其分数(例如，1到5的表述包括1、2、3、4和5，以及其分数，如1.5、2.25、3.75、4.1等等)以及任何在此范围内的范围。
贯穿说明书和权利要求书，术语“包含”(“comprise”、“comprises”和“comprising”)用于非排它性意义，除了上下文中另有规定。类似地，术语“包括(include)”和“具有”以及语法变体，旨在表明其为非限制性的，使得对于列表中的项目的引述，不排除可以代替或增加到所列项目中的其它类似项目。
所公开的主题涉及到用于单胃动物饲料的饲料添加剂配方。特别地，所公开的配方包含分离的木聚糖酶以及至少一种微生物益生菌菌株地衣芽孢杆菌PWD-1(登记号：53757)，或具有其所有鉴定特征的突变体。所公开的配方可以加入到动物饲料中，导致意想不到的协同改善的动物特点，如下面更多细节所阐述的那样。
因此，所公开的饲料添加剂配方包含分离的木聚糖酶作为必要组分。术语“木聚糖酶”用于此处指一类将线性多糖β-1,4-木聚糖降解为木糖的酶，从而分解半纤维素——植物细胞壁的主要组分之一。在有些实施例中，木聚糖酶是内-1,4-β-木聚糖酶。术语“分离的”用于此处指酶基本是纯的(即无污染分子)。
适用于所公开的配方的木聚糖酶可以用本领域技术人员已知的方法生产。例如，在有些实施例中，木聚糖酶可以通过固体或深层培养产生，包括分批、进料分批和连续流动工艺。可替代地或额外地，木聚糖酶可以是任何商业上可获得的木聚糖酶。木聚糖酶可以作为液体或干(粉末)制剂提供。
木聚糖酶可以从本领域已知或使用的任何合适的来源获得，如源于细菌，所述细菌选自于芽孢杆菌(Bacillus)、链霉菌(Streptomyces)、梭菌(Clostridium)、高温单孢菌(Thermonospora)、木霉菌(Trichoderma)、嗜热丝孢菌(Thermomyces)、曲霉(Aspergillus)、青霉(Penicillium)、小四孢菌(Microtetra-spora)、瘤胃球菌(Ruminococcus)等等。可替代地或额外地，木聚糖酶可以从真菌中获得，所述真菌选自于木霉菌、曲霉、腐殖霉(Humicola)、新考玛脂霉(Neocallimastix)等等。
在有些实施例中，木聚糖酶在动物胃肠道或接近动物胃肠道的pH和温度条件下是稳定和活跃的。
所公开的配方进一步地包含微生物地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物或具有其所有鉴定特征的突变体。地衣芽孢杆菌菌株PWD-1在美国专利号4908220和4959311中均有描述，其全部公开内容均通过引用并入到本文中。在有些实施例中，所公开的配方进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物或具有其所有鉴定特征的突变体。解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1在美国专利申请公布号2010/0143316中有描述，其全部内容均通过引用并入到本文中。
术语“生物纯培养物”指从具有不同特性的微生物中物理分离出来的培养物。如此处所用，短语“细菌菌株的生物纯培养物”指选自于下列对象的一种或组合：细菌菌株的生物纯发酵培养物的孢子、细菌菌株的生物纯发酵培养物的营养细胞、细菌菌株的生物纯发酵培养物的一种或多种产物、细菌菌株的生物纯发酵培养的培养固体、细菌菌株的生物纯发酵培养的培养上清液、细菌菌株的生物纯发酵培养的提取物以及细菌菌株的生物纯发酵培养的一种或多种代谢产物。
此处使用的术语“突变体”指源于母株(即地衣芽孢杆菌菌株PWD-1或解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1)的基因变体。在有些实施例中，突变体的性能与母株相当或比母株更好(如与母株相当或比母株更好地保持或改善动物生长)。
地衣芽孢杆菌和/或解淀粉芽孢杆菌菌株可以从实验室或培养物保藏(culturecollections)中获得。生物纯培养物可以通过本领域已知的方法制备，如应用无菌技术以及在合适的条件(即pH、温度、氧气水平等)下，在培养物特异性培养基(culture-specificmedium)中进行培养。
本发明的实施例1和2示出了地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1抑制人和动物病原体生长，所述病原体包括无害李斯特菌、大肠杆菌和肠沙门氏菌。图1a和1b说明了地衣芽孢杆菌菌株PWD-1分别长得超过(overgrow)无害李斯特菌和肠沙门氏菌。图2a和2b说明了解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1分别阻止了大肠杆菌和肠沙门氏菌的生长。图2c说明了解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1比无害李斯特菌长得更大(outgrow)。
所公开的实施例3示出了地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1对于酸性环境是有抵抗力的，这是益生菌的一个重要特征，因为在进入肠道之前，微生物菌株会暴露于动物消化道(gut)中的苛刻的酸性条件下。如图3a所示，地衣芽孢杆菌菌株PWD-1暴露于酸性环境下，相比于中性环境，其生长延迟3小时。同样观察到，暴露于酸性环境下1、2和3小时的地衣芽孢杆菌菌株PWD-1，能够恢复并呈现增长。如图3b所示，解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1暴露于酸性后也能恢复，虽然经观察比地衣芽孢杆菌菌株慢。
类似地，益生微生物在胃环境中的存活不仅包括低的pH环境，也包括分泌到胃肠道的胆汁中的酶。本公开内容的实施例4示出了地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1暴露于牛胆汁(母牛胆汁与酒精(alcohol)混合)中后能够恢复——牛胆汁传统意义上被用作胃环境的代表。图4a和4b说明了地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1均能在暴露于LB培养基的牛胆汁中多达3小时后恢复。
益生菌菌株附着在肠粘液上是所期望的，因为它限制了病原体进入粘液内层(lining)。本公开内容的实施例5示出了地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1具有附着在猪的粘液上的能力。图5示出了地衣芽孢杆菌菌株PWD-1附着在猪的粘液上的水平，与对照菌株枯草芽孢杆菌菌株C102相当。
本公开内容的实施例6描述了将木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1加入到商业肉鸡家禽的饮食(diet)中的效果研究。饲养这些鸟类的饲料组合物中含有106CFU/g地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和15U/g木聚糖酶(表1)。实验环境包括轻度的压力(mild stress)，如通过堆积垃圾垫料(litter bedding)形成的细菌/球虫攻击，以及重度的压力(severestress)。特别地，鸟类会在第1天、第7天和第10天(孵化后)受到多种病原体的攻击，所述病原体包括细菌剂量(细胞数量/鸟)大于107的产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)、104个细胞/鸟的堆型艾美耳球虫、以及103个细胞/鸟的巨型艾美耳球虫。在日龄为14、21和42天时，分别测量肠道病变评分。较低分值是所期望的。每种饮食都是以玉米/大豆为基础的，但相比于标准肉鸡的饮食，其代谢能(ME)减少了100kcal/kg(表2)。不同时期的组的BWG(体重增加)和FCR(饲料转化率)基于BW(体重)和FI(食物摄入)计算(表3)。
从这个研究中得到的病变评分分析的结果如表4和图6所示。
表4.经产气荚膜梭菌、堆型艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫攻击的，且用含有106CFU/g的地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和15U/g的木聚糖酶的饲料组合物饲养的肉鸡的肠道病变评分。*代表强烈的协同作用。
表4和图6的数据示出，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合，对于降低受病原体攻击的鸟类的肠道病变具有意想不到的有利效果。特别地，以含有木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的饲料饲养的鸟类在21天和42天时，病变评分的减少值分别为0.90和0.78，显著地优于每个单独的组分减少值的效果总和(即分别为0.59和0.33)。在42天这一时间点上，由饲料的组合导致的改善作用是显著的，是减少值的总和的2倍以上(即减少值0.78比0.33)。因此，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合示出了对动物健康的协同改善作用。
所公开的实施例6也描述了当木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1加入到商业肉鸡家禽的饮食中时，对于体重(BW)、饲料转化率(FCR)和沙门氏菌发病率的效果。图7a和7b说明了木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1显著地(p＜0.05)改善了日龄为21天和42天的鸟类的体重。此外，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合的改善作用比单独的任一组分大。
结果进一步地说明了，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1显著地(p＜0.05)改善了日龄为21天和42天时的FCR(图8a和8b)。此外，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合的改善作用，比单独的任一组分大，如图8a和8b所示。
图9a和9b说明了木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1显著地(p＜0.05)减少了日龄为21天和42天时的沙门氏菌发病率(Salmonella incidence)。此外，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合的改善作用，比单独的任一组分更为显著。
木聚糖酶与地衣芽孢杆菌菌株PWD-1相组合，当加入到玉米/大豆饮食中时，可以在产气荚膜梭菌和多种艾美耳菌的攻击下，显著地改善肉鸡成长性能。
所公开的实施例7描述了向商业肉鸡的饮食中加入木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1的效果。肉鸡饲料中含有浓度为15单位/g饲料的木聚糖酶，以及浓度范围各自为104到106的地衣芽孢杆菌菌株和解淀粉芽孢杆菌菌株(表5)。
如图10所示，以木聚糖酶和2×105CFU/g饲料或更高的芽孢杆菌菌株(地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1)补充饲料后，显著地(p＜0.05)改善了21天日龄时的体重。
如图11a和11b所示，以木聚糖酶和2×105CFU/g饲料或更高的芽孢杆菌菌株(地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1)补充饲料后，显著地(p＜0.05)改善了21天和42天日龄时的FCR。
进一步地，图12a和12b说明了以木聚糖酶和2×105CFU/g饲料或更高的地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1补充饲料后，显著地(p＜0.05)减少了鸟类在21天和42天日龄时的死亡率(42天的死亡率平均减少了80％)。作为对比，AGP(抗生素BMD(亚甲基水杨酸杆菌肽))包合物并未显著地改善对照的死亡率。
木聚糖酶与地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1相组合，当加入到玉米/大豆饮食中时，可以在产气荚膜梭菌和多种艾美耳球虫的攻击下显著地改善肉鸡的生长性能。
所公开的实施例8描述了一个研究，用来评估木聚糖酶(10U/g饲料)、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(1×105CFU/g饲料)和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(5×105CFU/g饲料)的组合物(被称为“Xyl+B+Y”)对于最小化消化道病变(gut lesion)的严重程度、改善以标准玉米-大豆作为饮食并在严重球虫病攻击条件下饲养的肉鸡雏鸡(broiler chicken)的总成活率的效果。在研究中，对雏鸡进行两次攻击，用含有高免疫原性的、对抗球虫药敏感的堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫的活卵囊的活疫苗进行口服灌胃，并且将Xyl+B+Y的组合物与图13中称为“抗球虫药”的盐霉素钠作比较。
攻击后7天(14天日龄)，相对于经攻击的对照(数据未显示)，单独的Xyl+B+Y减少了36％的上消化道病变评分。在攻击后14天，相比于经攻击的对照而言(数据未显示)，单独的Xyl+B+Y减少了50％的中消化道病变评分。图13中数据显示，相对于经攻击的对照，经Xyl+B+Y处理的死亡率显著地降低了(P＜0.02)87％。相比之下，抗球虫药处理只降低死亡率25％。在第28天，经Xyl+B+Y处理后，相对于经攻击的对照(数据未显示)，饲料转化率降低了7个点。
木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1的组合比单独的抗球虫药而言，可以更有效地最小化因严重的艾美耳球虫感染导致的鸟类的死亡率。
因此，此处提供了用于添加到单胃动物饲料组合物中的饲料添加剂配方。提供的饲料添加剂配方加入到饲料组合物中，用于改善单胃动物如家禽和猪的健康和/或性能。性能的提升包括下列一种或多种组合：平均日增重增加、总增重增加、饲料转化率改善、病变评分减少、死亡率降低、疾病减少，或病原体发病率降低。所述病原体包括但不限于下列一种或其组合：产气荚膜梭菌、艾美耳球虫属、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、柔嫩艾美耳球虫、沙门氏菌或球虫病诱导寄生虫。在一个实施例中，动物为家禽，提升的性能包括由产气荚膜梭菌或艾美耳球虫的一种或其组合引起的病变评分减少。
在一个实施例中，用于单胃动物饲料中的饲料添加剂配方包含分离的木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物，或其具有其所有鉴定特征的突变体。所述饲料添加剂配方可以进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM21836)的生物纯培养物，或其具有其所有鉴定特征的突变体。
在一个实施例中，提供了用于单胃动物的饲料组合物，其包含所公开的饲料添加剂配方。
在一个实施例中，提供了制备用于单胃动物的饲料组合物的方法，包括向饲料组合物中加入配方，所述配方包含木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物，或其具有其所有鉴定特征的突变体。在所述方法中，所述配方可以进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物，或其具有其所有鉴定特征的突变体。
在一个实施例中，提供了用于提升单胃动物性能的方法，包括：给予单胃动物有效量的饲料组合物，所述的饲料组合物包含木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物，或者其具有其所有鉴定特征的突变体。饲料组合物可进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物，或其具有其所有鉴定特征的突变体。
在一个实施例中，存在于所公开的配方中的木聚糖酶的量的范围为大约10,000-200,000单位/g。木聚糖酶存在于所公开的配方中的量的范围可以是30,000-200,000单位/g。因此，木聚糖酶存在的量可以为大约10,000；20,000；30,000；40,000；50,000；60,000；70,000；80,000；90,000；100,000；110,000；120,000；130,000；140,000；150,000；160,000；170,000；180,000；190,000；或200,000单位/g。一个单位的木聚糖酶活性定义为：在50℃下，在pH为6.0的50mM柠檬酸三钠缓冲液中，每秒从0.5％的木聚糖(Sima X4252，来源于Beechwood)释放1毫摩尔还原糖(木糖当量)所需的酶的量。
在有些实施例中，地衣芽孢杆菌菌株存在于所公开的配方中的数量为大约108到1012CFU/g(菌落形成单位/g)。在有些实施例中，地衣芽孢杆菌菌株存在于所公开的配方中的数量至少为大约109CFU/g。在有些实施例中，解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌菌株存在于所公开的配方中的数量为大约108到1012CFU/g。在有些实施例中，解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌菌株存在于所公开的配方中的数量至少为大约109CFU/g。因此，存在于所公开的配方中的菌株的数量为至少大约108、109、1010、1011、1012或1013CFU/g。
除了木聚糖酶和细菌菌株外，所公开的配方可以进一步地包含载体，用以改善生产、稳定性和/或性能特性。术语“载体”用在此处指一种可食用材料，有助于将加入其中的成分均匀掺入到所公开的配方中。合适的载体可以包括(但不限于)石灰石、麦芽糊精、环糊精、小麦及其组合。在有些实施例中，活性成分与载体的比例可以为大约1:9、1:8、1:7、1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1或9:1。
所公开的配方可以为任何所期望的形式，包括(但不限于)固体、粉末、悬浮浓缩液、液体或颗粒。
在有些实施例中，所公开的配方可以是对于热处理是热稳定的配方，所述热处理温度高达约70℃、80℃、85℃、90℃或95℃，热处理时间长达大约1、5、10、15、30或60分钟。此处所用的术语“热稳定”指的是：与加热到具体温度之前相比，冷却到室温后，存在于配方中的原组分仍然至少为75％。
在有些实施例中，所公开的配方的保质期可以大于30、40、50、60、70或80周。应该理解的是，所期望的时间长度和正常保质期可以随着储存温度、加工条件、包装材料、包装设备等等的不同而改变。
所公开的配方可以加入到饲料组合物中，供单胃动物消耗。所述配方可以直接与动物饲料混合，和/或可以与饲料添加剂混合(即维他命饲料添加剂、矿物质饲料添加剂、氨基酸饲料添加剂等等)然后再与动物饲料混合。可替代地或额外地，所公开的配方可以加入到动物的饮用水中。
“动物饲料”或“饲料”用于此处，指的是任何化合物、制剂、混合物或组合物，适用于或打算用于给单胃动物摄取。在有些实施例中，饲料可以包括家禽类饲料或猪饲料组合物。术语“单胃动物”用在此处包括具有一个胃的任何动物，应用于大多数肉食动物和杂食动物，除反刍动物外。因此，在有些实施例中，合适的单胃动物可以包括(但不限于)家禽(如肉鸡雏鸡、蛋鸡、火鸡)和/或猪(swine)(如猪(pig)或小猪(piglet))。
在有些实施例中，所公开的配方可以加入到动物饲料中。因此所公开的配方可以加入到动物饲料中，用来生产含有所期望数量的木聚糖酶和所公开的菌株的饲料。如本领域普通技术人员所理解的，稀释量可由单胃动物的饲料需求、动物的年龄和预期用途(如用于蛋鸡或肉鸡的雏鸡)决定。例如，在有些实施例中，木聚糖酶的浓度范围为大约5到30单位/g饲料。在有些实施例中，木聚糖酶的浓度范围为大约7.5到30单位/g饲料(即大约为5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、14.5、15、15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、20、20.5、21、21.5、22、22.5、23、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26.5、27、27.5、28、28.5、29、29.5或30单位/g饲料)。有些实施例中，地衣芽孢杆菌在饲料组合物中的量的范围为至少大约5×104CFU/g饲料。在有些实施例中，地衣芽孢杆菌在饲料组合物中的数量范围为至少大约105CFU/g。在有些实施例中，地衣芽孢杆菌在饲料组合物中的数量范围为至少大约106CFU/g。在有些实施例中，饲料组合物进一步地包含所公开的解淀粉芽孢杆菌菌株，浓度为至少大约105CFU/g饲料。在有些实施例中，饲料组合物包含两种菌株的总浓度为至少大约105CFU/g饲料。在有些实施例中，饲料组合物包含两种菌株的总浓度为至少大约2.0×105CFU/g。
当给予单胃动物时，与缺乏所公开的配方的饲料组合物相比，有效量的包含了所公开的配方的饲料组合物显示出了对于动物的性能的提升。术语“有效量”指足以提高动物的性能，同时又不会产生任何明显不利的副作用的饲料量。
在有些实施例中，性能的提升包括单胃动物平均日增重增加和/或总增重增加。平均日增重指所有动物在一段时间内的总增重除以动物总数和这段时间的天数。总增重指所有动物在一段时间内的全部增重。
在有些实施例中，性能的提升包括改善单胃动物的饲料转化率(FCR)。饲料转化率指动物将饲料的质量转化为身体的质量的效率。
在有些实施例中，性能的提升包括单胃动物病变评分的减少。例如，在有些实施例中，动物是家禽，病变是由产气荚膜梭菌或艾美耳球虫属带来的，例如(但不限于)堆型艾美耳球虫、柔嫩艾美球虫和/或巨型艾美耳球虫。
在有些实施例中，性能的提升包括单胃动物的死亡率减少。
在有些实施例中，性能的提升包括单胃动物的疾病减少。病原体可以包括(但是不限于)产气荚膜梭菌、艾美耳球虫属、堆型艾美耳球虫、柔嫩艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和/或球虫病诱导寄生虫。疾病和病变评分的一种或两种可由产气荚膜梭菌、堆型艾美耳球虫、柔嫩艾美球虫、巨型艾美耳球虫或球虫病诱导寄生虫的一种或其组合导致。
在有些实施例中，性能的提升包括病原体发病率降低。在有些实施例中，在动物生产环境中(如地面上的围栏垃圾(floor pen litter))和/或动物肠道里的病原体发病率有所减少。在一个实施例中，动物可以是家禽，性能的提升包括由产气荚膜梭菌或艾美球虫属(Eimeria spc)的一种或其组合所引起的病变评分的减少。在另一个实施例中，动物是家禽，病原体发病率降低是沙门氏菌发病率降低。
实施例
下面包括的实施例提供了本领域普通技术人员实施所公开的主题中具有代表性的实施例的指引。鉴于本发明以及本领域普通技术人员的一般水平，本领域技术人员可以理解的是：下列实施例仅意图作为示范性的，并且在不偏离所公开主题的范围的前提下，多种变换、修改和替换都是可以实施的。
实施例1
地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的益生菌特性的体外评价
地衣芽孢杆菌菌株PWD-1经一系列琼脂扩散试验，测试其对大肠杆菌、肠沙门氏菌、无害李斯特菌和猪弯曲杆菌(Campylobacter hyointestinalis)等病原体替代物的抵抗性。在每个试验中，将其中一种病原体替代物涂布到3个琼脂平板上，并且将地衣芽孢杆菌菌株PWD-1放入每个平板的孔中。所述平板在37℃下温育过夜，并且拍照，以显示病原体和地衣芽孢杆菌之间的相互作用。
图1a和1b示出了地衣芽孢杆菌菌株PWD-1分别长得超过无害李斯特菌和肠沙门氏菌。
实施例2
解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1的益生菌特性的体外评价
重复实施例1的实验，使用解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1代替地衣芽孢杆菌菌株PWD-1。
图2a和2b说明了解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1分别抑制大肠杆菌和肠沙门氏菌的生长。图2c说明了解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1比无害李斯特菌长得更大。
实施例3
地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1的耐酸性研究
对酸性环境有抵抗力，这是益生微生物具有的一个重要特征，因为在进入肠道之前，微生物会暴露在动物消化道中的苛刻酸性条件下。使地衣芽孢杆菌菌株PWD-1暴露于pH3.0的LB培养基中0、1、2或3小时。然后将所述培养基中和到pH为7.0，并通过600nm处的吸收监测生长。对解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1重复此试验。
如图3a所示，相对于中性介质，暴露于酸性环境下的地衣芽孢杆菌菌株PWD-1延迟生长3小时。同样观察到，暴露于酸性环境下1、2和3小时的地衣芽孢杆菌菌株PWD-1能够恢复和呈现增长。如图3b所示，解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1暴露于酸性环境后能够恢复，虽然经观察到其速率慢于地衣芽孢杆菌菌株。
实施例4
地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1的抗胆汁研究
益生微生物存活的胃环境不仅包括低的pH环境，也包括分泌到胃肠道的酶。牛胆汁(母牛(cow)胆汁与酒精混合)传统意义上被认为是胃环境的代表。使地衣芽孢杆菌菌株PWD-1暴露于LB培养基重的0.3％牛胆汁0、1、2或3小时，并通过600nm的吸收监测生长8小时，如图4a所示。对解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1重复此试验，如图4b所示。
图说明了地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1暴露于LB培养基的牛胆汁中长达3小时后能够恢复。
实施例5
地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1对肠粘液的附着
益生菌菌株对肠粘液的附着是令人期望的，因为它限制了病原体进入粘液层(mucus lining)。测试了地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1，评价了对猪粘液的附着能力。来源于ATCC的枯草芽孢杆菌菌株168-a和Calsporin(可速必宁)的枯草芽孢杆菌菌株C102作为对照样也进行了测试。无蛋白质涂层(仅缓冲液)和BSA(牛血清白蛋白)用来作为对照。监测每一种菌株的生长，如图5所示。图中显示地衣芽孢杆菌菌株PWD-1附着至猪粘液的水平，与枯草芽孢杆菌菌株C102相当。
实施例6
将木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1加入商业肉鸡饮食中的效果研究
对象：一天日龄(Day-old)、混合性别，罗氏(Ross)708肉鸡。
统计设计：随机完全区组设计(RCBD)。
处理：用木聚糖酶(XYLAMAX，可从BioResource International，Inc.，Durham，North Carolina，United States获取)以及地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(“ProB”)作为2个因素，作2×2因子排列，如下表1所示。
表1
处理
处理 木聚糖酶(U/g饲料) Pro B(CFU/g饲料)
对照 0 0
Pro B 0 10<sup>6</sup>
木聚糖酶 15 0
Pro B+木聚糖酶 15 10<sup>6</sup>
持续时间：0-42天。
重复：52只鸟/围栏，8围栏/处理
饮食：所有处理包括3阶段的饮食(即初始期、生长期和完成期)，如下表2所示。每一饮食都是基于玉米/大豆，但是与标准肉鸡饮食相比，代谢能(ME)降低了100kcal/kg。
表2
动物饮食总结
阶段 年龄(天) ME(Kcal/kg) 粗蛋白(％)
初始期 0-21 2930 22
生长期 22-35 3030 20
完成期 36-42 3080 19
疾病攻击：堆积的垃圾用来创造研究中的“轻度的场地类似的亚临床攻击模式”。细菌包括产气荚膜梭菌、堆型艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫。
反应测量：如下表3所示。不同时期的组BWG(体重增加)和FCR(饲料转化率)是基于BW(体重)和FI(食物摄入)计算的。
表3
反应测量
反应 数据收集
BW(个体) 0、14、21、42天
FI(围栏) 0、14、21、42天
死亡 发生时
病变评分 14、21、42天
沙门氏菌发病 21、42天
统计方法：ANOVA(方差分析)和LSD(最小显著性差异)分析。如果p＜0.05，则认为差异显著。
结果：如图6所示，木聚糖酶显著地(p＜0.05)降低了日龄为14天、21天和42天的病变评分，地衣芽孢杆菌菌株PWD-1显著地(p＜0.05)降低了日龄为14天和21天的病变评分。木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合的改善作用，经显示，要比单独任一组分的改善作用更大。特别地，在第21天和42天，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1组合的效果，要比对单独的任一组分的效果的总和还要大，从而表明了协同作用(如下面表4所示，*代表强烈的协同作用)。在第42天的时间点上，由饲料的组合导致的改善作用是显著的，是单独每个组分的改善作用的2倍以上。因此，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合显示出对于动物健康的协同改善作用。
表4.经产气荚膜梭菌、堆型艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫攻击，且用含有106CFU/g的地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和15U/g的木聚糖酶的饲料组合物饲养的肉鸡肠道病变评分数。
图7a和7b说明了木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1显著地(p＜0.05)改善了21天和42天日龄的鸟类的BW。此外，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合的改善作用，经示出，比单独的任一组分的改善作用更大。
结果进一步地说明了，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1显著地(p＜0.05)改善了21天和42天日龄的鸟类的FCR(图8a和8b)。此外，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合的改善作用比单独的任一组分的改善作用更大，如图8a和8b所示。
图9a和9b说明了木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1显著地(p＜0.05)降低了21天和42天日龄的鸟类的沙门氏菌发病率。此外，木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合的改善作用比单独的任一组分的改善作用更大。
结论：木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合加入到玉米/大豆的饮食中，在产气荚膜梭菌和多种艾美耳球虫的攻击下，显著地改善了肉鸡的生长性能和消化道健康。数据支持了这一结论，即木聚糖酶和地衣芽孢杆菌菌株PWD-1的组合的效果包括对于动物健康的协同有益效果。
实施例7
将木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1加入商业肉 鸡饮食中的效果的研究
对象：一天日龄、混合性别的罗氏708肉鸡。
统计设计：随机完全区组设计(RCBD)。
处理：6组处理，用木聚糖酶(xyl，可从BioResource International,Inc.,Durham,North Carolina,United States获取)、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(ProB)、解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(ProY)和抗生素BMD(亚甲基水杨酸杆菌肽)作为变量，如表5所示。
表5
处理
持续时间：0-42天
重复：52只鸟/围栏，10或6围栏/处理
饮食：所有处理包括3阶段的饮食(即初始期、生长期和完成期)，如上面表5所示。每一种饮食都基于玉米/大豆，但是与标准肉鸡饮食相比，代谢能(ME)降低了100kcal/kg。
疾病攻击：堆积的垃圾(Built-up litter)用来创造研究中的“轻度的场地类似的亚临床攻击模型”。细菌包括产气荚膜梭菌、堆型艾美耳球虫，和巨型艾美耳球虫，以及柔嫩艾美球虫。
反应测量：如上面表5所示，不同时期的组BWG(体重增加)和FCR(饲料转化率)是基于BW(体重)和FI(食物摄入)计算的。
统计方法：数据经ANOVA和LSD分析。如果p＜0.05，则认为差异显著。
结果：如图10所示，以木聚糖酶和2×105CFU/g饲料或更高的芽孢杆菌属菌株(地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1)补充饲料后，显著地(p＜0.05)改善了21天日龄的体重。
如图11a和11b所示，以木聚糖酶和2×105CFU/g饲料或更高的芽孢杆菌属菌株(地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1)补充饲料后，显著地(p＜0.05)改善了21天和42天日龄的饲料转化率。
进一步地，图12a和12b说明了以木聚糖酶和2×105CFU/g饲料或更高的地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1补充饲料后，显著地(p＜0.05)减少了21天和42天日龄的鸟类的死亡率(42天时的死亡率平均减少了80％)。作为对比，AGP(BMD)包合物并未显著地改善对照的死亡率。
结论：木聚糖酶与地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1组合，当加入到玉米/大豆饮食中时，在产气荚膜梭菌和多种艾美耳球虫的攻击下显著地改善肉鸡生长性能。数据支持以下结论：将地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1与木聚糖酶组合，在不同的包合水平下(105到106CFU/g饲料)，均是有效的。
实施例8
将木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1加入到重度 球虫病攻击条件下的商业肉鸡饮食后的效果
本研究的目的在于评估100g/公吨的包合物最小化消化道病变的严重程度和改善肉鸡雏鸡的整体存活率的效果，所述肉鸡以标准玉米/大豆饮食喂养并在重度球虫病攻击条件下饲养，所述包合物包含木聚糖酶(10U/g饲料)、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(1×105CFU/g饲料)和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(5×105CFU/g饲料)的组合。
材料和方法：400只雄性Ross 708肉鸡雏鸡随机地分配到4组饮食处理的其中一组，7个复制(replicate)电池笼/种处理(除了处理组1，其为未攻击的阳性对照，包括4个复制笼子)，以及16只鸟/笼。鸟类以可以以糊状、基于大豆-玉米的饮食饲养28天，自由采食。对处理2-4的鸟类进行两次攻击，用含有高免疫原性、对抗球虫药敏感的堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫菌株的活卵囊的活疫苗进行口服灌胃，比率为1mL/鸟(10×疫苗制造商推荐剂量)。处理1中的鸟为未攻击的阳性对照，用1mL/鸟蒸馏水灌胃。所有处理组中，日龄为1天和7天的鸟均通过口服灌胃。在处理3和4中，用木聚糖酶(10U/g饲料)、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(1×105CFU/g饲料)与解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(5×105CFU/g饲料)(称为“Xyl+B+Y”)补充饲料，或用商业化抗球虫药(盐霉素钠)(称为“抗球虫药”)补充饲料。评价的关键参数为上消化道肠道病变评分、中消化道肠道病变评分、死亡率/存活率，和饲料转化率(FCR)。
结果和讨论：上消化道的球虫相关(cocci-linked)大体病变与堆型艾美耳球虫感染密切相关，并且通常在最初感染后的7天内最为严重。攻击后7天(日龄为14天)，相比于经攻击的对照(数据未显示)，单独的Xyl+B+Y减少了36％的上消化道病变评分。
肠中段(由回肠和部分十二指肠和空肠组成)对于巨型艾美耳球虫感染最为敏感。攻击后14天，相比于经攻击的对照(数据未显示)，单独的Xyl+B+Y减少了50％的中段病变评分。
相比于未被攻击的对照，在本研究中进行的艾美耳球虫攻击方案导致被攻击的对照的28天死亡率的显著地提升(P＜0.02)。数据在图13中有示出。但是，相比于经攻击的对照，Xyl+B+Y处理中的死亡率显著地降低(P＜0.02)87％。相比之下，抗球虫药处理的死亡率仅降低25％。
28天时，相比于经攻击的对照，Xyl+B+Y处理的饲料转化率减少7个点。处理之间(数据未显示)，28天时的体重并没有受到处理的影响，平均为1226g/鸟。
总之，在重度的球虫病的条件下，木聚糖酶(10U/g饲料)、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(1×105CFU/g饲料)和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(5×105CFU/g饲料)的组合单独可以通过减轻肠道病变的严重程度有效地保护肉鸡的消化道健康，从而维持消化道功能并且促进营养物质的高利用率。在最小化遭受重度艾美耳球虫感染的鸟类的死亡率方面，木聚糖酶、地衣芽孢杆菌菌株PWD-1和解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1的组合可以比单独的抗球虫药更为有效。

Claims (28)

1.一种用于单胃动物饲料的饲料添加剂配方，所述配方包含分离的木聚糖酶和生物纯培养物，所述生物纯培养物是地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物，或其具有其所有鉴定特征的突变体。
2.根据权利要求1所述的饲料添加剂配方，其进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物，或其具有其所有鉴定特征的突变体。
3.根据权利要求1所述的饲料添加剂配方，其中所述木聚糖酶为内-1,4-β-木聚糖酶。
4.根据权利要求1所述的饲料添加剂配方，其中所述配方为固体、粉末、悬浮浓缩液、液体或颗粒。
5.根据权利要求1所述的饲料添加剂配方，其进一步地包含载体。
6.根据权利要求5所述的饲料添加剂配方，其中所述载体包括石灰石。
7.根据权利要求1所述的饲料添加剂配方，其中所述木聚糖酶的范围为10,000-200,000单位/g，所述地衣芽孢杆菌的范围为108-1012CFU/g。
8.根据权利要求2所述的饲料添加剂配方，其中所述木聚糖酶的范围为10,000-200,000单位/g，所述地衣芽孢杆菌的范围为108-1012CFU/g，所述解淀粉芽孢杆菌的范围为108-1012CFU/g。
9.一种用于单胃动物的饲料组合物，其包含如权利要求1所述的饲料添加剂配方。
10.根据权利要求9所述的饲料组合物，其进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物，或其具有其所有鉴定特征的突变体。
11.根据权利要求9所述饲料组合物，其中木聚糖酶的范围为5-30单位/g饲料，地衣芽孢杆菌的范围为至少5×104CFU/g饲料。
12.根据权利要求10所述的饲料组合物，其中木聚糖酶的范围为5-30单位/g饲料，地衣芽孢杆菌菌株和解淀粉芽孢杆菌菌株中的每一种的范围为至少105CFU/g饲料，总共为至少1×105CFU/g饲料。
13.一种提升单胃动物的性能的方法，包括：给予单胃动物有效量的饲料组合物，所述饲料组合物包含木聚糖酶和生物纯培养物，所述生物纯培养物是地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物，或者其具有其所有鉴定特征的突变体。
14.根据权利要求13所述的方法，其中所述饲料组合物进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物，或其具有其所有鉴定特征的突变体。
15.根据权利要求13所述的方法，其中木聚糖酶为内-1,4-β-木聚糖酶。
16.根据权利要求13所述的方法，其中动物为家禽。
17.根据权利要求16所述的方法，其中动物为肉鸡。
18.根据权利要求13所述的方法，其中动物为猪。
19.根据权利要求13所述的方法，其中性能的提升包括下列一种或多种组合：平均日增重增加、总增重增加、饲料转化率改善、病变评分减少、死亡率降低、疾病减少，或病原体发病率降低。
20.根据权利要求19所述的方法，其中疾病和病变评分中的一种或两种由产气荚膜梭菌、堆型艾美耳球虫、柔嫩艾美球虫、巨型艾美耳球虫或球虫病诱导寄生虫中的一种或组合导致。
21.根据权利要求19所述的方法，其中动物为家禽，性能的提升包括由产气荚膜梭菌或艾美耳球虫中的一种或组合所引起的病变评分减少。
22.根据权利要求19所述的方法，其中动物为家禽，病原体发病率降低是沙门氏菌发病率降低。
23.一种制备用于单胃动物的饲料组合物的方法，包括向饲料组合物中加入配方，所述配方包含木聚糖酶和生物纯培养物，所述生物纯培养物是地衣芽孢杆菌菌株PWD-1(登记号：53757)的生物纯培养物，或者其具有其所有鉴定特征的突变体。
24.根据权利要求23所述的方法，其中所述配方进一步地包含解淀粉芽孢杆菌菌株Ba-BPD1(登记号：DSM 21836)的生物纯培养物，或其具有其所有鉴定特征的突变体。
25.根据权利要求23所述的方法，其中木聚糖酶为内-1,4-β-木聚糖酶。
26.根据权利要求23所述的方法，其中配方为固体、粉末、悬浮浓缩液、液体或颗粒。
27.根据权利要求23所述的方法，其中木聚糖酶的范围为5-30单位/g饲料，地衣芽孢杆菌的范围为至少5×104CFU/g饲料。
28.根据权利要求24所述的方法，其中木聚糖酶的范围为5-30单位/g饲料，地衣芽孢杆菌菌株和解淀粉芽孢杆菌菌株中的每一种的范围为至少105CFU/g饲料，总共为至少1×105CFU/g饲料。
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