DE2125046B2 - Verfahren und Vorrichtung zur Korrektur einer mit statistischen Fehlern behafteten Zählung von mikroskopischen Teilchen, insbesondere von Blutkörperchen - Google Patents
Verfahren und Vorrichtung zur Korrektur einer mit statistischen Fehlern behafteten Zählung von mikroskopischen Teilchen, insbesondere von BlutkörperchenInfo
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Description
wird. ,jo
Die Erfindung löst diese Aufgabe dadurch, daß jeder Zählzyklus in mindestens zwei aufeinanderfolgende
Teilzählintervalle geteilt wird, daß die mittlere Impulshäufigkeit oder eine davon abhängige Größe
des ersteren dieser Intervalle gemessen und das Ergebnis mit einem die Korrekturkurve ausdrückenden
Signal verglichen wird und daß während des Ablaufs des zweiten Zählintervalls eine dem Ergebnis des
Vergleichs proportionale Anzahl von Impulsen als Korrekturimpulse dienen.
Eine Vorrichtung zur Durchführung dieses Verfahrens ist im Anspruch 11 angegeben.
Dadurch, daß die mittlere Impulshäufigkeit periodisch je Zählzyklus festgestellt und ein analoges
Signal erzeugt wird, das den Veränderungen der Impulshäufigkeit exakt folgt, kann eine verhältnismäßig
exakte Zählung erreicht werden. Jede der auleinanderfolgenden
Impulshäufigkeitsmessungen liefert bei anderen Werten einen anderen Korrekturwert und
6o führt zu einer entsprechenden Zählmodifizierung der
h.ipulsreihe. Ferner läßt sich die Impulshäufigkeit
in kurzen Intervallen, beispielsweise von 100 Impulsen, feststellen, wobei die Zähländerung im Verlaufe des
letzten Teilzählintervalls erfolgt, so daß man am 65 Ende jedes Teilzählintervalls ein genaues Meßergebnis
erAusgestaltungen der Erfindung ergeben sich aus
den Unteransprüchen.
Die Erfindung wird nachfolgend an Hand eines in der Zeichnung dargestellten Ausfuhrungsbeispiels
näher erläutert. In der Zeichnung zeigt
Fig. 1 ein vereinfachtes Blockschaltbild der Korrekturvorrichtung
nach der Erfindung,
Fig. 2 ein etwas detaillierteres Blockschaltbild
einer Vorrichtung zur Feststellung der Impulshäufigkeit,
Fig. 3 ein teil weises Schaltbild der Ausgleichsschaltung
in der in Fig. 1 gezeigten Korrekturvorrichtung,
Fig. 4 Einzelheiten der elektrischen Schaltung der Korrekturvorrichtung und
F i g. 5 eine detaillierte Ausführung der Ausgleichsschaltung nach Fig. 3.
Die von der Korrekturvorrichtung verarbeiteten Impulse können von permanenten Detektoren als
Impulsquelle, wie etwa einem Geiger-Müller-Zähler, einer Fotovervielfacherröhre, einem Teilchenzähler
od. dgl. geliefert werden. Das Ausführungsbeispiel bezieht sich auf einen Coulter-Teilchendetektor, mit
einem Meßgefäß mit einer geeichten Meßöffnung, die die Teilchen in flüssiger Suspension, beispielsweise
Blutkörperchen in einer elektrisch leitenden Lösung passieren. Nach der Erfindung soll die Teilchen-Impulszählung
abhängig von einem statistischen Gesetz korrigiert werden, das die Anzahl der koinzidenten
Durchgänge von Teilchen berücksichtigt, die im Verlaufe der Zählung der Teilchen bei ihrem Durchtritt
durch die Meßöffnung auftreten.
Teilchen-Koinzidenzen, bedingt durch den gleichzeitigen Durchtritt von zwei Teilchen durch die
Meßöflhung, hängen bekanntlich vom Lösungsgrad,
d. h. der Konzentration der Teilchen in der untersuchten Flüssigkeit und von den räumlichen Abmessungen
der Meßöffnung ab. Weiter hat sich gezeigt daß die Koinzidenzen von der Durchtrittsgeschwindigkeit
der Teilchen durch die Meßöffnung und der Viskosität der Suspension unabhängig sind.
Die Koinzidenzrate, d. h. der Prozentsatz der Koinzidenzen bei einer bestimmten Menge gezählter Teilchen,
ist unabhängig von der gezählten Anzahl und damit auch von dem analysierten Volumen, da die
Rate ein Phänomen ausdrückt, das während des ganzen Meßvorganges permanent und konstant ist.
Es hat sich herausgestellt, daß die Gesetzmäßigkeit der Änderung, die die Koinzidenzrate steuert, wenn
diese 10% der gezählten Teilchen nicht übersteigt, sich wie foigt ausdrücken läßt:
Die Erfindung basiert hauptsächlich darauf, daß der gleichzeitige Durchgang von zwei oder mehr
Teilchen, der beim Coulter-Zähler von der Teilchenkonzentration und den Abmessungen der Meßöffnung
S abhängt, in Beziehung steht zur mittleren Durchtrittshäufigkeit der Teilchen durch die Meßöffnung.
Die mittlere Durchtrittshäufigkeit der Teilchen durch die Meßöffnung kann man in regelmäßigen Intervallen
messen. Beim Feststellen des Häufigkeitswertes
ίο bestimmt man einen Wert, der die Erfassung von
Anomalien, d. h. von Koinzidenzen während des Zählens erlaubt.
Man erhält
Man erhält
F=-
wobei
η = Anzahl der Teilchen im Volumen und
T = Zeit für den Durchtritt dieses Volumens
durch die Meßöffnung, d. h. zum Zählen
der η Teilchen.
Zur Ermittlung der mittleren Durchtrittshäufigkeit genügt es deshalb, wenn man irgendeine Anzahl von
Teilchen-Impulsen, beispielsweise von 100 Impulsen, betrachtet und die zum Zählen dieser Teilchen-Impulse
erforderliche Zeit feststellt.
Aus den Gleichungen (1) und (2) kann man die prozentuale Koinzidenzrate
errechnen. Daraus folgt
( Έ V
wobei für eine Coulter-Meßöffnung gilt:
ί Λ3 500
ί Λ3 500
π = 2.5
106
500 π2
V ' ΙΟ6
V ' ΙΟ6
d3 _,
und
d3 _
η.
·=■ \2
(D
Aus Gleichung (3) folgt die Koinzidenzrate
wobei
π = Anzahl der nicht gezählten Impulse,
π = Anzahl der gezählten Impulse,
ρ = Koinzidenzfaktor.
π = Anzahl der gezählten Impulse,
ρ = Koinzidenzfaktor.
Bei einem Coulter-Zähler
Die Ausdrücke d, V und Γ sind bei gegebenen
Meßbedingungen konstant. Es gilt dann
kFA = Koinzidenzrate.
P =
500
(2)
wobei
d = Durchmesser der Meßöffnung in Mikron und K = Volumen des Saughebers des Coulter-Zählers in Mikroliter
Bei einer Coulter-Meßöflnung unterliegt die Koinzidenzrate somit während des Zählvorganges einer
linearen Veränderung abhängig von der mittleren Durchtrittshäufigkeit der Teilchen. Hiervon wird
bei dem Verfahren und der Vorrichtung gemäß der Erfindung zur Korrektur der Zahl der Teilchenimpulse aber die Ausgleichsschaltung Gebrauch ge
macht, wobei die mittlere Durchtrirtshäufakeit ffir
7 & 8
jede Meßphase während des Zählvorganges durch schaltung 7 zugeführt wird und dort zur Errechnung
einen Häufigkeitsmesser ermittelt wird. der Anzahl der der Addierschaltung 3 zuzuführenden
Bei dem dargestellten Ausführungsbeispiel wird Korrektur-Impulse dient. Der Verstärker 15 kann
davon ausgegangen, daß die unregelmäßig aufein- durch einen elektronischen Schalter 17 kurzgeschlos-
anderfolgenden Teilchen-Impulse von einem Coulter- 5 sen werden, der während des Zählzyklus zwischen
Teilchendetektor gezählt werden, mit einer Korrektur den Impulsen 0 und 19 über eine Steuerschaltung 18
in Abhängigkeit von der erwähnten Gesetzmäßigkeit, zurückgestellt wird, die hierzu ein Signal von der
gesteuert durch die Veränderung der Koinzidenzrate, Steuerschaltung 5 erhält.
die während der Teilchenerfassung eintritt. Die Vor- Nach F i g. 4 liegt der Detektor 1 an einer Impulsrichtung
umfaßt eine Impulsquelle 1 in Form eines io formerschaltung 19, z. B. einer monostabilen Kipp-Teilchendetektors,
der über eine Leitung 2 eine un- schaltung, die abhängig von einem angeschlossenen
regelmäßige Impulsfolge abgibt. Die über die Lei- Kondensator 20 den Teilchen-Impulsen vom Detektor
tung 2 abgegebene Impulsfolge gelangt direkt zu einer eine bestimmte Impulsbreite von etwa zwei Mikro-Addierschaltung
3, die an eine übliche Ausgabevor- Sekunden verleiht. Der Ausgang der Impulsformerrichtung
4 angeschlossen ist. Außerdem gelangt die 15 schaltung 19 ist mit der Steuerschaltung 5 verbunden,
vom Detektor 1 gelieferte Impulsfolge zu einer Steuer- die zwei normale, binär kodierte Dekadenzähler 20,21
schaltung 5, an die ein Häufigkeitsmesser 6 ange- enthält. Der Zähler 20 zählt die Einer und der Zähler 21
schlossen ist, der die mittlere Häufigkeit der vom die Zehner. Für die Zehnerzählung ist der Einer-Detektor
1 gelieferten Teilchenimpulse mißt. Der Aus- dekadenzähler 20 über eine Leitung 22 an den Zehnergang
des Häufigkeitsmessers 6 und die Steuerschal- jo dekadenzähler 21 angeschlossen. Der Dekadenzähler
tung 5 sind mit einer Ausgleichsschaltung 7 für die 20 umfaßt zwei Ausgänge, die an zwei Inverterschal-Anzahl
der Zählkorrekturimpulse verbunden. Eine tungen 23,24 mit je sechs Kanälen liegen. Die Inverter-Ausgangsleitung
8 der Ausgleichsschaltung 7 führt schaltung 23 wird vollständig benutzt, während von der
über eine Verzögerungsschaltung 9 zur Addierschal- Inverterschaltung 24 lediglich fünf Kanäle benutzt
tung 3, in der die Zahl der Korrekturimpulse zu der 25 werden. Von den Ausgängen des Dekadenzählers 21
Impulsfolge addiert wird, «lie über die Leitung 2 dienen lediglich die mit 1, 2 und 9 bezeichneten, zur
direkt vom Detektor 1 kommt. Ermittlung der erwähnten drei Intervalle 0 bis 19, 20
Die Anzahl der Korrekturimpulse steht im direkten bis 89 und 90 bis 99. Der Ausgang »1« des Dekaden-Verhältnis
zur Koinzidenzrate. Der Addiervorgang Zählers 21 gelangt über eine Diode 25 zum einen Einkann
somit in einem vorgegebenen Zyklus wiederholt 30 gang eines NAND-Gliedes 26, dessen anderer Einwerden.
Für das Ausführungsbeispiel wurde ein gang mit dem Ausgang »9« des gleichen Dekaden-Wiederholungszyklus
von 100 Impulsen gewählt. Für Zählers 21 direkt verbunden ist. Der Ausgang »2« je 100 vom Detektor 1 gelieferten Teilchenimpulse dieses Zählers 21 liegt über eine Diode 28 an einei
erhält die Addierschaltung 3 somit eine Anzahl von Leitung 27. Die Anoden der Dioden 25 und 28 sind
Korrekturimpulsen, die sowohl von einer analogen 35 über einen Widerstand 29 an eine positive Spannung
Spannung des Häufigkeitsmessers 6 als auch einer angeschlossen. Die Ausgänge der Inverterschaltungen
mathematischen Funktion oder einer Gesetzmäßigkeit 23 und 24 sind mit Ausnahme der Leitung für »9« in
bestimmt wird, die die Ausgleichsschaltung 7 berück- einem Kabel 30 vereinigt, das mit der Ausgleichssichtigt.
Die Steuerschaltung 5 teilt die Zyklen von schaltung 7 verbunden ist. Der letzte Ausgang 9 dei
100 Impulsen in drei Intervalle ein: 40 Inverterschaltung 24 liegt an einer Leitung 31, dk
über eine Schaltung von Gliedern 56, 57 zur Aus-
0 bis 19 Rückstellung gleichsschaltung 7 führt.
20 bis 89 Häufigkeitsmessung Die Bezugsspannungsquelle 13 des Häufigkeits-
90 bis 99 Korrektur messers 6 besteht aus der Reihenschaltung eines
45 Widerstandes 32 und eines Potentiometers 33, zwi-
Abhängig von den Bedingungen des jeweiligen sehen der positiven Spannungsquelle + V und Masse
Meßverfahrens kann man auch eine andere Ver- wobei der Schleifkontakt des Potentiometers am
teilung dieser Intervalle wählen. Drainanschluß eines Feldeffekttransistors 12 liegt
Nach Fi g. 2 liefert der Häufigkeitsmesser 6 eine der die Funktion des Schalters 12 in Fig. 2 ausübt
analoge Spannung, die eine lineare Funktion der vom 50 Der Sourceanschluß des Feldeffekttransistors 12 liegi
Detektor 1 abgegebenen Impulsfolge ist. Infolge der über einen Schalter 34 an einem der Regulierwider-Steuerung durch die Steuerschaltung 5 bewirkt der stände 35, die bestimmte Werte besitzen und den
Häufigkeitsmesser 6 eine Häufigkeitsmessung ledig- variablen Widerstand 14 nach Fig.l bilden. Dei
lieb im Intervall, entsprechend den Impulsen 20 bis 89, Gateanschluß des Feldeffekttransistors 12 fuhrt zu
bei je 100 vom Detektor 1 gelieferten Impulsen. Hier- 55 einer Diode 36 mit parallelgeschaltetem Widerstanc
zu erhält der Häufigkeitsmesser 6 von der Steuerschal- 37. Die Kathode der Diode 36 liegt an einem Span
tung S aber eine Leitung 10 ein Steuersignal, das an nungsteüer aus einem Widerstand 38, zwischen Masse
φ-- Steuerschaltung 11 einet elektronischen Schalters und einem Widerstand 39, an einer negativen Span'
12 gegeben wird. Dieser Schalter 12 liegt an einer nimgsquelle -V. Die Verbindungsstelle der Wider
Bezugsspannungsquelle 13, die eine einstellbare Be- 60 stände 38 und 39 liegt am Kollektor eines Transistor!
zugsspannung liefert Außerdem ist der Schalter 12 40. der zur Steuerschaltung 11 gehört. Der Ennttei
mit einem variablen Widerstand 14 verbunden, was des Transistors 40 ist an eine positive Spannung»
noch ausführlicher erläutert wird. Der Widerstand 14 quelle + V angeschlossen. Seine Basis ist über einet
liegt am Eingang einet Funkttonsverttarkers 15, dem Widerstand 41 mit der Leitung 1Θ und einem Wider
ein als Integrator wirkendet Kondensator 16 parallel 65 stand 42 verbunden, der an die positive Spannungs
geschaltet ist. Der Autgang dei Verstärkers 15 bildet quelle + V angeschlossen ist.
den Ausgang dei Hfluflgkeitsmetters. an dem die Der Verbindungspunkt der Widerstände 35 liegt an
analoge Spannung auftritt, die danach der Ausgleichs- Verstärker 15, der einen Differenzspannungsverstär
stärker 43 enthält, der von zwei Feldeffekttransistoren 44 und 45 gebildet wird, deren Ausgänge zu einem
Funktionsverstärker 46 führen. Der Kondensator 16 liegt zwischen dem Eingang des Differenzspannungsverstärkers
43 und dem Ausgang des Funktionsverstärkers 46. Das analoge Ausgangssignal des Häufigkeitsmessers
6 erscheint auf einer Leitung 47, die mit einem der Eingänge der Ausgleichsschaltung 7 verbunden
ist.
Der Kondensator 16 liegt parallel zur Drain-Source-Strecke eines Feldeffekttransistors 17, der den
Schalter 17 in F i g. 2 bildet. Der Gateanschluß dieses Transistors ist an den Verbindungspunkt der Anode
einer Diode 48 und eines parallelgeschalteten Widerstandes 49 angeschlossen. Der andere Anschluß
dieses Widerstandes und die Kathode der Diode liegen an einer negativen Spannungsquelle — V und
am Kollektor eines Transistors 50, der zur Steuerschaltung 18 gehört. Die Basis des Transistors 50
liegt über einen Widerstand 51 an der Leitung 27 der Steuerschaltung 5 und über einen Widerstand 52
an einer positiven Spannungsquelle + V. Der Emitter des Transistors 50 ist ebenfalls an diese Spannungsquelle + V angeschlossen.
Die vom Detektor 1 gelieferten Impulse erscheinen auf der Leitung 2 und werden der Verzögerungsschaltung 9 zugeführt, die aus einer Reihenschaltung
eines Kondensators 53 und eines Widerstandes 54 zwischen der positiven Spannungsquelle + P und Masse
besteht, wobei der Verbindungspunkt an einem der Eingänge der Addierschaltung 3 liegt, die von einem
NAND-Glied gebildet ist. Der andere Eingang dieser Addierschaltung 3 ist mit dem Ausgang der Ausgleichsschaltung
7 über die Leitung 8 verbunden.
Die Verzögerungsschaltung 9 gibt den zugeführten Impulsen eine Verzögerung von zwei Mikrosekunden.
Die verzögerten Impulse werden nach einer Impulsformung in einer Schaltung 55, die der Impulsformerschaltung
19 gleicht, einem der Eingänge eines NAND-Gliedes 56 zugeführt, das am anderen Eingang das
Signal der Leitung 31 vom Ausgang »9« des Inverters 24 der Steuerschaltang 5 erhält. Der Ausgang des
Gliedes 56 gelangt zu einem Inverterglied 57, das eine positive Spannung erhall und ausgangsseitig mit der
Ausgleichsschaltung 7 verbunden ist.
Die Ausgleichsschaltung 7 nach den F i g. 3 und 5 umfaßt zehn parallele, gleiche Kanäle, von denen in
F i g. 3 nur einer gezeigt ist. In F i g. 3 liegt ein Spannungsteiler 58 zwischen Masse und einer negativen
Spannungsquelle —V. Die Verbindungspunkte 59 zweier Widerstände R1, R2 usw. sind jeweils mit den
einzelnen Kanälen der Schaltung verbunden. Jeder Verbindungspunkt 59 des Spannungsteilers fährt zu
einem der Eingänge eines Funktionsverstärkers 60 über einen Widerstand 61. Der andere Eingang dieses
Verstärkers liegt über einen Widerstand 62 am Ausgang des Häufigkeitsmessers 6, wobei die beiden Eingänge
dieses Verstärkers 60 über eine Diode 63 miteinander verbunden sind. Der Ausgang des Funktionsverstärkers
60 führt über einen Widerstand 65 zu einem der vier Eingänge eines NAND-Gliedes 64.
Der gleiche Eingang Hegt über eine Diode 66 an Masse und über eine Diode 67 an einer positiven Spannungsquelle + V. Ein zweiter Eingang des Gliedes 64 führt
zum Glied 57, ein dritter Eingang über die Leitung zur Steuerschaltung 5 und der vierte Eingang zum
Steuerschalter 68, wodurch die Vorrichtung mit oder ohne Zählkorrektur arbeiten kana Der Ausgang des
Gliedes 64 ist über eine Diode 69 an die Addierschaltung 3 gelegt.
Wie Fig. 5 zeigt, sind die Ausgänge der zehn
NAND-Glieder 64 der zehn Kanäle der Schaltung 7 untereinander und über einen Widerstand 70 mit
einem Spannungsanschluß + V verbunden. Die Ausgangsimpulse werden der Ausgangsleitung 8 zugeführt
Der Widerstand R12 des Spannungsteilers 58 liegt
an Masse. Der Ausgang des Verstärkers 72 ist über einen Widerstand 73 an eine Meldeschaltung 71 angeschlossen.
Die Eingänge des Verstärkers 72 liegen über Widerständen 74 bzw. 75 an der Leitung 47, die
den Ausgang des Häufigkeitsmessers 6 bildet, und am Verbindungspunkt der Widerstände Rn und R12 des
Spannungsteilers 58.
Die beschriebene Ausführungsform arbeitet wie folgt:
Die Steuerschaltung 5 erhält die vom Detektor 1 kommenden Teilchen-Impulse und bestimmt einen
Zähl-Zyklus von 100 Impulsen. Jeder Zyklus wird in drei Intervalle unterteilt. Die Ausgänge »1«, »2« und
»9« des Zehnerdekadenzählers 21 dienen hierzu. Während des ersten Intervalls, d. h. des Rückstellintervalls
zwischen den Impulsen I und 19, gelangt ein Signal von den Ausgängen »1«, »2« des Dekadenzählers 21
auf die Leitung 27, schaltet den Transistor 50 und damit den Transistor 17 durch, der den Verstärker 15
des Haufigkeitsmcssers 6 kurzschließt. Das Glied 26
bleibt leitend und der Kondensator 16 entladen. Während des folgenden Intervalls zwischen den Impulsen 20
und 89 gibt das Glied 26 ein Ausgangssignal auf die Leitung 10. Dieses Ausgangssignal schaltet den Transistor^
durch, der den Transistor bzw. Schalter 12 schließt. Durch Einschalten des Transistors 12 wird
die Bezugsspannung, von der Bezugsspannungsquelle 13 über einen der Widerstände 35, auf die Schaltungsanordnung
15 mit dem Verstärker 46 und den Kondensator 16 gegeben, so daß letzterer während des
Intervalls, in der der Schalter 12 geschlossen ist, aufgeladen wird.
Die Häufigkeitsmeßschaltung 6 gibt über die Leitung 47 eine Spannung ab, die der Zeit zwischen dem
20. und dem 89. Impuls proportional ist. Diese analoge Spannung ist der Häufigkeit der vom Detektor
1 abgegebenen Impulse umgekehrt proportional,
wie folgender Ausdruck zeigt ·
Kv =
1
RC
RC
Fd/
(7)
wobei
= RC VT'
mit
V
=
T - Zeitintervall zwischen dem 20. und 89. Impuls.
~ ara KVotentionieter33 eingestellte Konstante,
wobei das Potentiometer abhängig von den
physikalischen Parametern des Detektors I
einstellbar ist,
Vs = Ausdruck der Ze« als Spannung zwischen dem
20. und dem 89. Impuls, d. fa„ Vs ist der Zählzejt
fur ein Intervall von 100 gezählten Imj pulsen analog, und
K^r = eine Integrationskonstante, die am Schalter 34
einstellbar ist, dessen Stellung von den physikalischen Parametern des Detektors 1 abhangt.
Bei Verwendung eines Coulter-Zählers als Detektor 1 ermöglicht das Potentiometer 33 die Steuerung
der Vorrichtung in Abhängigkeit vom Druck am Saugheber dieses Zählers und der Viskosität der zu
untersuchenden Flüssigkeit. Der Schalter 34 wählt eine Integrationskonstante, abhängig vom Durchmesser
der Meßöffnung des Detektors.
Sobald am Ausgang 9 des Dekadenzählers 21 ein Signal erscheint, wird das Tor 26 wieder geschlossen,
der Schalter 12 öffnet und schaltet den Häufigkeitsmesser
6 ab, der das gerade gebildete analoge Spannungssignal speichert. Das 90. Signal wird vom Inverter
24 umgeformt und auf das Glied 56 gegeben, das dann Impulse der Impulsformerschaltung 55 durchläßt.
Diese Impulse sind gegenüber denjenigen des Detektors 1 verzögert. Das Ausgangssignal des Gliedes
56 wird im Glied 57 umgekehrt und auf die Ausgleichsschaltung 7 gegeben. Letztere bewirkt einen Vergleich
zwischen dem Ausgangsspannungswert des Häufigkeitsmessers 6 und einer analogen Bezugsspannung,
die vom Spannungsteiler58 (Fig. 3) abhängig von
dem Korrekturgesetz gebildet wird. Dadurch ändert sich die Korrekturrate, d. h. die Anzahl der Korrekturimpulse,
die pro 100 gezählten Impulsen hinzugefügt werden, nach der erwähnten Gesetzmäßigkeit:
T = JcF
T = fc/Fs,
T = fc/Fs,
(8)
wobei F5 die Ausgangsspannung des Häufigkeitsmessers6
ist.
Jeder der zehn Kanäle der Ausgleichschaltung 7 entspricht einer von zehn Korrekturraten, so daß
grundsätzlich 0 bis 10 Korrekturimpulse für je 100 gezählte Impulse zur Verfugung stehen.
Jedes NAND-Glied64 (Fig. 5) ist leitend, wenn
seine vier Eingänge Eingangssignale erhalten und ist nicht leitend, wenn einer der Eingänge kein Signal
erhält. Wenn ein NAND-Glied 64 leitend ist, erscheint auf der Leitung 8 ein Impuls. Ein Eingang eines
Gliedes 64 erhält eine Eingangsspannung, wenn ein Signal auf der Leitung 31, die mit dem Ausgang 9
der Steuervorrichtung 5 verbunden ist, erscheint, d. h. zwischen den Impulsen 90 und 99. Ein weiterer Eingang
erhält auch Eingangsspannung, wenn diesem über einen der Ausgänge der Inverterschaltungen 23
oder 24 über das Kabel 30 ein Signal zugeführt wird. Das bedeutet, daß die Impulse 90 bis 99 nacheinander
1 bis 10 Impulse für die Glieder 64 bewirken können. Auf einen weiteren Eingang jedes Gliedes 64 wird die
Spannung des Häufigkeitsmessers 6 gegeben. Diese Spannung wird den Widerständen 62 zugeführt und
mit den Spannungen verglichen, die an den Verbindungspunkten 59 der Widerstände R1 bis R1, des
Teilers 58 anfaller*. Die Werte dieser Widerstände sind so gewählt, daß die aufeinanderfolgenden Spannungswerte
an den Verbmdungspunkteri 59 übereinstimmen mit dem Gesetz T= k/V„ das eine Hyperbel
beschreibt. Der vierte Eingang jedes NAND-Gliedes 64 erhält eine Eingangsspannung, wenn der Schalter 68
in der Koinzidenzkorrekturstellung ist.
Der eine Eingang jedes Verstärkers 60 erhält entsprechend seinem Verbindungspunkt 59 ein definiertes
Potential, das einem Punk· einer Hyperbel oder einer gegebenen Korrekturrate entspricht Der andere
Eingang jedes Verstärkers 60 Hegt an dem Potential auf der Leitung 47 Die Widerstände 61 und 62 sind
gleich groß. Zur Vergrößerung des Gleichgewichtspunktes sind die Verstärker 60 offen geschaltet. Dadurch
überwiegt der Teilereingang des zugeordneten Verstärkers, der dem Teilerpunkt entspricht, an dem
die gegebene Spannung entsteht, wenn der Häufigkeitsmesser 6 eine kleinere Spannung als die gegebene
Spannung am Teiler 58 liefert, so daß der Verstärker eine Ausgangsspannung abgibt, die nach Rückführung
durch die Diode 67 auf eine logische »1« auf das zugeordnete Gatter 64 gegeben wird. Wenn dagegen
der Häufigkeitsmesser 6 eine Spannung liefert, die größer ist als die Spannung am Verbindungspunkt des
Spannungsteilers 57, so überwiegt der Häufigkeitsmessereingang, und der Verstärker 60 liefert eine
negative Spannung, die über die Diode 66 an Masse geht. In diesem Fall bleibt das zugeordnete Glied 64
gesperrt.
Ein Korrekturzyklus läuft auf folgende Weise ab:
Zwischen den Impulsen 0 und 19 wird die Häufigkeitsmesser
6 wie beschrieben zurückgestellt, und zwischen den Impulsen 20 bis 89 erfolgt die Messung.
Sobald der 90. Impuls auftritt, wird das Glied 56 durch das Signal auf der Leitung 31 angesteuert und
wird immer dann geöffnet, wenn von der Verzögerungsschaltung 9 und der Impulsformerschaltung 55
ein verzögerter Impuls zugeführt wird. Das Glied 57 liefert somit zur Ausgleichsschaltung 7 eine Reihe
von Impulsen, die gegenüber den vom Detektor 1 kommenden Impulsen um zwei Mikrosekunden verzögert
sind.
Es sei beispielsweise angenommen, daß der Häufigkeitsmesser 6 eine Häufigkeit entsprechend der Spannung
F5 ermittelt hat, die kleiner ist als die Spannung
am Verbindungspunkt zwischen den Widerständen R6 und R7. was einer Korrekturrate 6 entspricht oder
6 Impulsen, die den Impulsen vom Detektor 1 hinzuzufügen
sind. Dadurch wird beim Auftreten des 90. Impulses der erste Kanal der Schaltung 7 geöffnet,
da die Spannung des Häufigkeitsmessers 6 kleiner ist als die Spannung am Verbindungspunkt 59 zwischen
den Widerständen R1 und R2- Die Spannung des
Häufigkeitsmessers 6 ist außerdem kleiner als das Potential an den Widerständen R2-R). Ri-R4, R+-R5,
Rs-Rf, und R^-R1. so daß die entsprechenden Glieder 64
in den ersten sechs Kanälen offen sind. Dagegen ist die Spannung des Häufigkeitsmessers 6 höher als die
Spannung zwischen den Widerständen R7 und R8, so
daß das zugeordnete Glied 64 in den übrigen Kanälen geschlossen ist.
Das öffnen eines Gliedes 64 bewirkt somit einen entsprechenden Impuls auf der Leitung 8, der nach
Abgabe des 90. bis 96. Impulses durch den Detektor 1 infolge des NAND-Gliedes der Addierschaltung 3
addiert wird.
Wenn die Spannung des Häufigkeitsmessers6kleinei ist als das Potential zwischen den Widerständen R1
und R12, das eine Korrektur von mehr als zehn Im
pulsen erfordern würde, so bewirkt der Verstärker T die Abgabe einer Alarmmeldung über die Vorrich
tung 71.
Eine Aufgabe der Vorrichtung ist es. die Zählun:
der Impulse mit einer Genauigkeit von ± 1 % zu korn gieren. Es läßt sich zeigen, daß die Messung der mitt
leren Impulshäufigkeit mit einer Genauigkeit vo; maximal 4% ausführbar ist, wenn man die vom Detek
tor selbst und der zugehörigen Apparatur bewirkte Fehler berücksichtigt. Ferner führen die in der Korrel
turvorrichtung verwendeten Schaltungen höchste« zu einem Fehler von ± 5%. Diese Fehler von 4 und 5*!
führen jedoch im endgültigen Zählresultat lediglich zu 0,4 bzw. 0,5%, da sie lediglich 10% der gezählten
Impulse betreffen (maximale Korreküirrate). Daraus folgt, daß die Genauigkeit von ±1% ohne weiteres
zu erreichen isL
Bei Versuchen mit einem Coulter-Detektor mit einer Meßöflhung von 100 Mikron und einer untersuchten
Flüssigkeitsmenge von 500 Mikrolitem wurden die Widerstände des Spannungsteilers 58 wie
folgt errechnet: «°
Unter der Annahmt^ daß eine Impulshäufigkeit
eines Koinzidenzfehlers von 0,5% mit einer Spannung von 10 Volt in Übereinstimmung gebracht wird,
ist es möglich, diese Spannung durch Einstellen des Spannungsteilers 32,33 zu eichen. Ferner kann man
durch die Zeitkonstante der Schaltung mit dem Widerstand 35 und der Kapazität 16 mittels der Funktion
F = k/VM die Spannungen entsprechend den Häufigkeiten
errechnen für eine Korrektur von 1, 2, 3 ... %.
Da die Genauigkeit in absoluten Weiten 1% erreichen muß, ist die erste Stufe der Korrekturrate
nicht mit 1%, sondern mit 0,5% zu wählen. Die weiteren Stufen werden dann zu 1,5, 2,5, 3,5%...
gewählt. Mit einer Spannung von 15 Volt am Spannungsteiler 58 kann man dann die Spannungs- und
Widerstandsgrößen gemäß folgender Tabelle errechnen:
Teüer- | Kor | Kanal | Teiler | Werte der |
spannung | rektur | nummer der | widerstand | Widerstände |
(negativ) | rate |
Ausgleichs
schaltung |
R1 bis R12 | |
(%) | 0 | (Ohm) | (Ohm) | |
15 | 0 | 1 | 3000 | 1000 |
10 | 0,5 | 2 | 2000 | 1330 |
3,33 | 1,5 | 3 | 666 | 267 |
2 | 2,5 | 4 | 400 | 113 |
1,43 | 3,5 | 5 | 286 | 66,5 |
1,1 | 4,5 | 6 | 220 | 37,4 |
0,91 | 5,5 | 7 | 182 | 28 |
0,77 | 6,5 | 8 | 154 | 21 |
0,666 | 7,5 | 9 | 133,2 | 15,8 |
0,587 | 8,5 | 117,4 | 12,4 |
Tefler-
spannung
(negativ)
Kor-
rektnr-
taie
Kanalnummer der
Ausgleichsschaltung
Teüerwidecstand
(Ohm)
Werte der Widerstände K1 bis R12
(Ohm)
35
40
45
0,526 9,5 10 105,2 10
0,480 10,5 Meldung 95,2 95
Verwendbar sind beispielsweise die folgenden Bauteile und Logikschaltungen:
Glieder3,26,56und57 7400N
Impalsformerschaltungen 19 und
55 SN74121N
Dekadenzähler 20 und 21 SN 749 N und
SN 7442 N
Inverter 23 und 24 SN 7404 N
Verstärker 46 809 CE
Verstärker60und72 SCF2709CE
Gatter 64 SN 7420 N
Transistoren 40 und 50 2 N 2905 A
Transistor 12 U 1714
Transistor 17 2N3821
Verstärker 13 2N3957
Dioden 25, 28, 36, 48, 63, 66, 67
und69 1N4148
Kondensator 16 1 Micro
Kondensator 20 2200 pF
Kondensator 53 22 nF
Widerstand 54 Ik
Widerstand 29 33 k
Widerstand 32 100
Widerstand 33 820
Widerstand35 5k bis 100k
Widerstand 49 270 k
Widerstand 51,52 10 k
Widerstand 61,62 40,2 k
Widerstand 65 2,2 k
Widerstand 70 33 k
Selbstverständlich können die Werte der Widerstände R1 bis R12 des Spannungsteilers 58 so gewählt
werden, daß an Stelle der für das Ausfuhrungsbeispiel angenommenen Gesetzmäßigkeit eine andere Gesetzmäßigkeit
bzw. deren Kurvenverlauf zur Anwendung kommt
Hierzu 3 BIa-Tt Zeichnungen
Claims (1)
- Patentansprüche:1. Verfahren zur Korrektur einer mit statistischen Fehlern behafteten Zählung von mikroskopischen Teilchen, insbesondere von Blutkörperchen, bei s dem die von den Teilchen ausgelösten Impulse über Zählzyklen addiert und den die Zählzyklen bestimmenden zugehörigen Zwischenzählwerten entsprechend einer den durch Teilchenkoinzidenz bedingten Fehler berücksichtigenden Korrekturkurve bereits während der Zählung Teilkorrekturbeträge selbsttätig hinzugefügt werden, dadurch gekennzeichnet, daß jeder Zählzyklus in mindestens zwei aufeinanderfolgende Teilzählintervalle geteilt wird, daß die mittlere Impulshäufigkeit oder eine davon abhängige Größe des ersteres dieser Intervalle gemessen und das Ergebnis mit einem die Korrekturkurve ausdrückenden Signal verglichen wird und daß während des Ablaufs des zweiten Zählintervalls eine dem Ergebnis des Vergleichs proportionale Anzahl von Impulsen als Korrekturimpulse dienen.2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die als Korrekturimpulse dienenden Impulse vor dem Addieren gegenüber den Impulsen der Impulsfolge um eine vorgegebene Periode verzögert werden.3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß jeder Zählzyklus in drei Intervalle unterteilt und daß das Ergebnis des gemessenen mittleren Häufigkeitswertes während des zusätzlichen dritten, den anderen vorausgehenden Intervalls, gelöscht wird.4. Verfahren nach den Ansprüchen 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß man zum Abzählen 3s und Abteilen der Impulse bzw. Intervalle die Teilchenimpulse der Impulsreihe in digitaler Form verarbeitet.5. Verfahren nach den Ansprüchen 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß zur Messung der mittleren Teilchen-Impulshäufigkeit als analoger Spannungswert eine Bezugsspannung je Zyklus integriert wird.6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß zum Zählen von Teilchen in flüssiger Suspension eine Teilchenimpulsreihe erzeugt wird, wobei die Bezugsspannung zur Messung der mittleren Teilchen-Impulshäufigkeit einstellbar ist, so daß die Integration der Bezugsspannung vom Flüssigkeitsdruck und Viskositätsparametern der Teilchensuspension unabhängig ist.7. Verfahren nach Anspruch 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, daß die Teilchen in der Suspension mittels eines Coulterschen Tastöffnungsrohres erfaßt werden und daß die zu integrierende Spannung einstellbar und proportional dem Tastöffnungsdurchmesser gewählt wird.8. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß die vorgegebene Gesetzmäßigkeit durch mehrere diskrete Spannungswerte definiert ist, die je einen digitalen Wert von Korrekturimpulsen repräsentieren.9. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß die diskreten Spannungswerte zu einer Hyperbel gehören.10. Vorrichtung zur Ausführung des Verfahrens nach den Ansprüchen 1 bis 9, gekennzeichnet durch eine Steuerschaltung (5) mit Einrichtungen (20 bis 29), die mindestens zwei Teflzählintervaüe der unregelmäßig aufeinanderfolgenden Teilchen-Impulse bestimmen, für die Ausgänge (30, 31) vorhanden sind, durch einen an die Steuerschaltung (5) angeschlossenen Impulshäufigkeitsmesser (6) für das erste Teilzäblmtervall (Impulse 20 bis 89), der am Ausgang (47) ein analoges Spannungssignal liefert, das eine Funktion der mittleren Teilchen-Impulshäufigkeit während des ersten Teilzählißtervalls ist, durch eine das analoge Ausgangssignal des Impulshäufigkeitsmessers (6) aufnehmende Ausgleichsschaltung (7) mit Einrichtungen (58) zur Erzeugung eines analogen Spannungssignals, abhängig von einer vorgegebenen Gesetzmäßigkeit und mit Einrichtungen (60) zur Ausführung eines Vergleiches zwischen dem analogen Ausgangssignal des Impulshäufigkeitsmessers und dem analogen, die Gesetzmäßigkeit ausdrückenden Signal, worauf, abhängig vom Vergleichsergebnis, eine Anzahl Zählkorrekturimpulse geliefert werden, und durch eine am Ausgang der Ausgleichsschaltung angeschlossene Addierstufe (3), die die Impulse der Impulsreihe und die Korrekturimpulse der Ausgleichsschaltung zusammenaddiert und den Summenrest an die Ausgabestufe (4) liefert.11 Vorrichtung nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß die Steuerschaltung (5) so ausgebildet (21, 24,31) und angeschlossen (56,57) ist, daß die Impulse des zweiten Teilzählintervalls (Impulse 90 bis 99) der Ausgleichsschaltung (7) überführbar sind und daß diese Ausgleichsschaltung einen Schaltkreis (64,69, 70) enthält, der aus der Zahl der Impulse des zweiten Teilzählintervalls die Korrekturimpulse bestimmt.12. Vorrichtung nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß die Ausgleichsschaltung (5) mit der Addierschaltung (3) über eine Verzögerungsschaltung (9) verbunden ist.13. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 10 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß die Steuerschaltung (5) Einrichtungen (20, 21, 25, 28) zur Bildung eines dritten Teilzählintervalls (Impulse 0 bis 19) besitzt und daß der Impulshäufigkeitsmesser (6) auf dieses dritte TeilzählintervaU ansprechende Rückstellmittel (17, 18) zum Zurückstellen des Impulshäufigkeitsmessers besitzt.14. Vorrichtung zur Durchführung des Verfahrens nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Steuerschaltung (5) zyklisch arbeitend ausgebildet ist und daß das dritte TeilzählintervaU (Impulse 0 bis 19) dem ersten TeilzählintervaU (Impulse 20 bis 89) vorangeht.15. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 10 bis 14, dadurch gekennzeichnet, daß der Impulshäufigkeitsmesser (6) und die Steuerschaltung (5) eine logische Verknüpfungsschaltung (11, 12, 17, 18,20,21,22,26) zur digitalen Impulszählung enthalten, die die Impulsreihe zyklisch in Zählzyklen gleicher Größe (100 Impulse) und jeden Zählkyklus in ein erstes (Impulse 20 bis 89), ein zweites (Impulse 90 bis 99) und ein drittes (Impulse 0 bis 19) Teilzählintervall unterteilt.16. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 10 bis IS, dadurch gekennzeichnet, daß der Impulshäufigkeitsmesser (6) einen Integrator (15, 16) umfaßt, der an eine Bezugsspannungsquelle (13) über einen ersten Schalter (12) angeschlossen ist,gesteuert durch die Steuerschaltung (5) wäh-,d des ersten Teilzählintervalls (Impulse 20 # 89) schließbar istj7. Vorrichtung nach Anspruch 16, dadurch gezeichnet, daß der Impulshäufigkeitsmesser (6) λ Entladekreis (16) aufweist, der eiten zweiten, Integrator parallelgeschaltetcn Schalter (17) ilt und daß der zweite Schalter durch die ,^schaltung (5) nach dem ersten Teilzählinter- ■r¥all zu Rückstellzwecken schließbar (27, 50) ist S 18. Vorrichtung nach Anspruch 16 oder 17, ge- s'kennzekhüct durch eine Einrichtung (1) zur Erzeugung der Impulsreihe durch zu zählende Teilchen in flüssiger Suspension, wobei pro Teilchen ein Impuls erzuugt wird, und durch eine erste Schaltung (32, 33) im Impulshäufigkeitsmesser (6) I zur Einstellung der Bezugsspannung (13) für den Integrator (15,16), so daß die Integration von den Parametern des Flüssigkeitsdruckes und der Visko- 'sität der Teilchensuspension unabhängig ist. 1 19. Vorrichtung nach Anspruch 18, gekennzeichnet durch einen Coulterschen Teilchendetektor als Impulserzeugungseinrichtung (1) mit einem Meßrohr und mit einer zweiten Schaltung (34, 35) im Impulshäufigkeitsmesser (6) zur Einstellung der Bezugsspannung (13) für den Integrator (15,16), damit die Integration vom Tastöffnungsdurchmesser des Meßrohres unabhängig ist.20. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 10 bis"l9, dadurch gekennzeichnet, daß die Ausgleichsschaltung (7) eine Einrichtung (58) für disksete Spannungswerte enthält, die in ihrer Gesamtheit einer vorgegebenen Gesetzmäßigkeit folgen.21. Vorrichtung nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, daß die Spannungseinrichtung (58) so ausgeführt ist (R, bis R12, 59), daß eine Gruppe von Spannungswerten definiert ist, die die mathematischen Parameter einer die vorgegebene Gesetzmäßigkeit repräsentierenden Hyperbel ausdrücken.22. Vorrichtung nach Anspruch 20 oder 21, dadurch gekennzeichnet, daß die durch die Spannungseinrichtung (58) ausgedrückte vorgegebene Gesetzmäßigkeit das Auftreten der Teilchenkoinzidenz in einem Coulterschen Teilchendetektor repräsentiert.23. Vorrichtung nach einem der Ansprüche 20 bis 22, dadurch gekennzeichnet, daß ein diskreter Spannungswert einem unterschiedlichen Verarbeitungskanal, F i g. 5, für Korrekturimpulsdaten elektrisch zugeordnet ist und daß jeder Kanal ein Vergleichselement (60) enthält, das als einen Eingang (61) seinen zugeordneten, diskreten Spannungswert hat, wobei sämtliche Vergleichselemente die Vergleichseinrichtung umfassen.24. Vorrichtung nach Anspruch 23, dadurch gekennzeichnet, daß jeder Verarbeitungskanal durch ein logisches Glied (64) abgeschlossen ist, das auf sein Vergleichselement (60) derart anspricht, daß, wenn das Vergleichselement von seinem diskreten Spannungswert (59) und nicht von dem analogen Wert des Impulshäufigkeitsmessers (6) beherrscht wird, ein Korrekturimpuls von diesem Kanal erzeugt wird und von diesem logischen Glied (64) zur Addierschaltung (3) gelangt, wobei die Anzahl der derart beherrschten logischen Glieder (64) die Anzahl der erzeugten Korrekturimpulse bestimmt.Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Korrektur einer mit statistischen Fehlern behafteten Zählung von mikroskopischen Teilchen, insbesondere von Blutkörperchen, bei dem die von den Teilchen ausgelösten Impulse über Zählzykle ι addiert und den die 7ählzyklen bestimmenden zugehörigen Zwischenzählwerten entsprechend einer den durch Teilchenkoinzidenz bedingten Fehler berücksichtigenden Korrekturkurve bereits während der Zählung Teilkorrekturbeträge selbsttätig hinzugefügt werden, sowie eine Vorrichtung zur Durchführung dieses Verfahrens.Ein derartiges Verfahren ist bereits aus der FR-PS 15 82131 bekannt. Hierbei werden vorgegebenen, im wesentlichen äquidistanten Zwischenzählwerten vorbestimmte, von Bereich zu Bereich ansteigende Teilkorrekturbeträge selbsttätig hinzugefügt. Nachteilig ist hierbei, daß die Korrekturen nach relativ langen Zählzyklen von 1000 gezählten Impulsen erfolgen, so daß, wenn die Teilchenzählung während eines solchen Zählkylusses beendet wird, das erhaltene Resultat ungenau ist, da die Zählung der nach der letzten Korrektur erfaßten Teilchen nicht korngiert ist.Außerdem bleibt die Koinzidenzkorrekturrate in einem gewissen Zählbereich, beispielsweise von 200 Korrekturen für den Bereich von 40000 bis 80000 Impulsen konstant, während die tatsächliche Änderung der Rate kontinuierlich erfolgt. Es wäre allerdings möglich auch bei dem bekannten Verfahren mit einem kürzeren und kleineren Korrekturintervall zu arbeiten, um dadurch die Zählgenauigkeit zu verbessern. Hierdurch würde die verwendete Schaltung aber beträchtlich kompliziert und dadurch die Vorrichtung erheblich verteuert. Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, das bekannte Verfahren und die zugehörige Vorrichtung so zu verbessern, daß die Korrektur und damit das Zählergebnis exakter werden, ohne daß schaltungstechnisch ein erheblicher Mehraufwand notwendig
Applications Claiming Priority (2)
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FR7018222 | 1970-05-20 | ||
FR7018222A FR2088111A1 (de) | 1970-05-20 | 1970-05-20 |
Publications (3)
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---|---|
DE2125046A1 DE2125046A1 (de) | 1971-12-30 |
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Also Published As
Publication number | Publication date |
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JPS5340117B1 (de) | 1978-10-25 |
NL7106913A (de) | 1971-11-23 |
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DK137257C (de) | 1978-07-10 |
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C3 | Grant after two publication steps (3rd publication) | ||
E77 | Valid patent as to the heymanns-index 1977 | ||
EHJ | Ceased/non-payment of the annual fee |