DE2065879A1

DE2065879A1 - Verfahren zur herstellung von dl-6- aminoacylamidopenicillansaeuren

Info

Publication number: DE2065879A1
Application number: DE19702065879
Authority: DE
Inventors: Spaeter Genannt Werden Wird
Original assignee: Osaka University NUC
Current assignee: Osaka University NUC
Priority date: 1969-04-30
Filing date: 1970-04-24
Publication date: 1976-08-26
Also published as: DE2020133A1; ES379011A1; NL7005611A; FR2040451A1; DK132026C; DK132026B; NL142416B

Description

DK. tillKO lyll'L-iivv» blAl'i

DIPL.-ING. SCHWABE DR. DR. SANDMAIR

PATENTANWÄLTE 2.06 5 8

8 MÜNCHEN 86, POSTFACH 86 02 45

Anwaltsakte: 26 72 6

8. APf?. 1276

President of Osaka University, Osaka/Japan

Verfahren zur Herstellung von DL-6-Aminoacylamidopenicillansäuren.

Ausscheidung aus Patentanmeldung P 20 20 133.6-44

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von DL-e-Aminoacylamidopenicillansäuren der Formel I

H₂N-R-CONH-CH CH C (I)

CH₃ OC N CH-COOH

609835/0959

8 München 80, Mauerkircherslralie 45 !tanken- B.ivensthe Vereinsh;mk München 453 IUU

Telegramme: BERCiSTAPHPATRNT München Hypo-Bank München 3fi92f>23 TELEX. 0524SW) BERCi ü Posischeck München ο: 14.1 -S08

COPV

in der H₂N-R-CO- ein Aminosäurerest ist, oder deren Salzen durch Acylieren von 6-Aminopenicillansäure (6-APS) oder einem Salz der 6-APS mit einer N-geschützten DL-Aminosäure der Formel

^R4 ^R3

A-C^ N-R-COOH (III)

in der N-R-COOH ein Aminosäurerest und

?3

A-C eine von einem ß-Ketoncarbonsäurederi-

0

vat abgeleitete Schutzgruppe ist, oder einem funktionellen Säurederivat einer N-geschützten DL-Aminosäure der Formel III in Gegenwart eines wasserfreien inerten Lösungsmittels bei einer Temperatur im Bereich von 0°C bis -30°C zu einer N-geschützten DL-6-Aminoacylamidopenicillansäure der Formel

^R4 ^R3

C = C S CH

A-C N-R-CONH-CH CH C (II)

s.
CH₃

OC N CH-COOH

und Hydrolysieren der dabei erhaltenen DL-6-Aminoacylamidopenicillansäure der Formel II oder eines ihrer Salze mit einer Säure bei höchstens Zimmertemperatur und einem

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_ 3 —

pH-Wert von höchstens 5,0.

Die DL-ö-Aminoacylamidopenicillansäuren der obigen allgemeinen Formel I oder deren Salze sind sowohl bedeutende antibakterielle Substanzen als auch therapeutische Mittel für Menschen und Tiere zur Behandlung von insbesondere durch grampositive und gramnegative Bakterien verursachten Infektionskrankheiten.

Für die Herstellung der 6-Aminoacylamidopenicillansäuren wurde bereits eine Anzahl von Verfahren vorgeschlagen, einschließlich denen der veröffentlichten Japanischen Patentanmeldungen 16 277/61, 4 064/65, 8 353/65 usw. Jedoch kann keinem dieser vorgeschlagenen Verfahren nachgesagt werden, daß es für industrielle Zwecke geeignet ist und dies wegen der geringen Ausbeute, der Schwierigkeit des Verfahrens oder der geringen Reinheit des Produkts. Zu den Verfahren, die als relativ vorteilhaft anzusehen sind, gehören die der veröffentlichten Japanischen Patentanmeldung 15 947/67 und 20 315/67, die das funktioneile Säurederivat einer oC-Aminosäure, deren Aminogruppe durch ß-Diketon oder einen Ester der ß-Ketosäure geschützt ist, verwenden. Diese Verfahren sind jedoch aus industriellen Gesichtspunkten nicht zufriedenstellend.

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Aus Chemische Berichte, Band 98 (1965) Seite 789 bis 796 und der NL-PA 6 717 873 sind bereits Verfahren der eingangs definierten Gattung bekannt, bei denen N-geschützte Aminosäuren der obigen Formel III eingesetzt werden, in der A eine Phenylgruppe, eine Methylgruppe, eine Äthoxygruppe oder eine gegebenenfalls substituierte Phenylaminogruppe bedeutet.

Diese vorbekannten Verfahren vermögen nun hinsichtlich der Ausbeute und der Reinheit, in der die Produkte erhalten werden, nicht zu befriedigen, was der Wirtschaftlichkeit dieser Verfahren äußerst abträglich ist.

Es wurde nunmehr überraschenderweise gefunden, daß die DL-6-Aminoaeylamidopenicillansäuren der obigen allgemeinen Formel I im Vergleich zu den herkömmlichen Verfahren sowohl in höherer Ausbeute als auch mit größerer Reinheit dadurch erhalten werden können, daß man die Aminogruppe der Aminosäure durch ein Ν,Ν'-disubstituiertes ß-Ketosäureamid der folgenden allgemeinen Formel V

RoCO-CH-CON' (V)

schützt und somit eine N-geschützte DL-Aminsäure der obigen allgemeinen Formel III einsetzt, in der A eine

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Dialkylaminogruppe oder eine Morpholinogruppe bedeuten.

Gegenstand der Erfindung ist daher ein Verfahren der eingangs definierten Art, das dadurch gekennzeichnet ist, daß man als Acylierungsmittel eine N-geschützte DL-Aminosäure der Formel III, in der R₃ eine Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen und R. ein Wasserstoffatom oder eine niedere Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen ist oder R₃ und R₄ zusammen mit den Kohlenstoffatomen, an die sie gebunden sind, einen Cyclopentenyl- oder Cyclohexenylring bilden und A eine Aminogruppe der Formel

^Rr

N- (VI)

^R2

ist, in der R₁ und R₂ je eine Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen bedeuten oder gemeinsam zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, und einem Sauerstoffatom einen Morpholinring bilden.

Unter der Bezeichnung "funktionelle Säurederivate", wie sie hier verwendet wird, fallen solche Derivate, in denen ein Teil der Carboxylgruppe durch andere Atome oder funktionelle Gruppen ersetzt wird.

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Zu den oben erwähnten Salzen gehören solche mit anorganischen Säuren, mit organischen Säuren wie beispielsweise Alkylsulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Toluolsulfonsäure oder Naphthylsulfonsäure, mit Metallen wie Natrium, Kalium, Calcium, Magnesium oder Aluminium, mit Ammoniak und mit substituiertem Ammoniak wie Triäthylamin, Ν,Ν-Dimethylbenzylamin, N-Alkylmorpholinen, N-Alkylpiperidinen,Procain usw.

Während darüber hinaus N-Monoaryl-substituiertes Acetoacetamid dem Fachmann als schützendes Mittel bekannt ist, hat das spezifische Ν,Ν-disubstituierte Säureamid der Formel (V), worin jeder der Reste R₁ und R₂ die oben angegebene Bedeutung hat, gegenüber dem herkömmlichen schützenden Mittel folgende Vorteile. Die geschützte DL-Aminosäure /Formel (III)_7 kann in hoher Ausbeute hergestellt werden und kann sehr einfach aufgrund fehlender Aufnahmefähigkeit von Feuchtigkeit und leichter Kristallisation gehandhabt werden und es werden höhere Ausbeuten des Kondensationsprodukts /Formel (II)_7 von 6-APS oder deren Salz mit einem funktionellen Säurederiviat der N-geschützten DL-Aminosäure /Formel (III£7 und eine höhere Ausbeute an DL-6-Aminoacylamidopenicillansäure /Formel (I17 nach Hydrolyse des Kondensationsprodukts im Vergleich mit denen bekannter Verfahren erhalten, wobei die Vergleichsbasis 6-APS und die gleichen Reaktionsbedingungen ist.

609835/0959 " ⁷ "

Die in der vorliegenden Erfindung verwendete geschützte Aminosäure (III) kann durch Kondensation einer Aminosäure der Formel (IV) oder deren Salz mit einem N,N-disubstituierten ß-Ketosäureamid /Formel (V)_7 hergestellt werden. Die Aminosäure (IV) liegt dabei in racemischer Form vor.

H y ^R1

H₉N-R-COOH + R-. CO-CON

(IV) (V)

Ώ 1

?4 ^R3

C' P \

" N-C N-R-COOH

(III)

Weil angenommen wird, daß die N-geschützte DL-Aminosäure (III) in den tautomeren Formen (lila) und (IHb) vorliegt, wird ebenso angenommen, daß die hiervon abstammende N-geschützte DL-6-Aminoacylamidopenicillansäure (II) in ähnlichen tautomeren Formen vorliegt. Jedoch gelten aus Gründen der Vereinfachung und Kürze die Strukturformeln (III) und (II) sowohl für die tautomeren Formen der Aminosäure als auch der N-geschützten DL-6-Aminoacylamidopenicillansäure und ihre Nomenklaturen entsprechen den gegebenen Strukturformeln. Die punktierte Linie in den Formeln (II), (III), (HIa) und (HIb) kennzeichnet

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eine Wasserstoffbindung.

(HIa)

N-R-COOH

N-C

^R3

-H'

(HIb)

, N-R-COOH

In der Formel (IV) einer Aminosäure stellt die Gruppierung ^ N-R-COOH einen DL-Aminosaurerest mit einer oder mehreren Aminogruppen in irgendeiner Stellung dar und die gesamten Aminogruppen werden in dem erfindungsgemäßen Verfahren geschützt.

Wie die DL-Aminosäure der Formel (IV), so kann geeigneterweise eine Vielzahl solcher von aliphatischen, arylaliphatischen, aromatischen, cycloaliphatischen oder heterocyclischen Verbindungen herrührenden Säuren verwendet werden. Jedoch ist die bevorzugteste DL-Aminosäure eine solche, die eine Aminogruppe in (/-Stellung zu der Carboxylgruppe aufweist und der Formel

?5

(IV)

R₆-C- COOH

ΝΗλ

entspricht, worin R₅ ein Wasserstoffatom, ein Methyl-, Methylthiomethylrest oder dergleichen ist, R_fi ein Methyl-

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thioäthyl-, Phenyl-, Nitrophenyl-, Aminophenyl-, Alkoxyphenyl-, Alkylphenyl-, Halogenphenyl-, Thienyl-, Methylthienyl-, Pyridyl-, Imidazol-, Thiazol-, Pyrazol-, Pyrazolon-, Isooxazol-, Isothiazol-, Pyrrol-, Furan-, Tetrahydropyrrol-, Tetrahydrothienyl-, Sydnone-, Cyclopentyl- oder Cyclphexylrest ist, wobei auch die Reste R- und R_fi gemeinsam einen Ring bilden können, wie Tetrahydrothienyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl oder dergleichen.

Als typische Beispiele des Ν,Ν-disubstituierten ß-Ketosäureamids der Formel (V), das ein schützendes Mittel für die Aminogruppe dieser Erfindung ist, können N,N-Dimethylacetoacetamid, Ν,Ν-Diäthylacetoacetamid, N-Morpholinoacetoacetamid, 2-N,N-Dimethylcarbamylcyclopentanon, 2-N-Morpholinocarbamylcyclopentanon, 2-N,N-Dimethylcarbamylcyclohexanon und so weiter erwähnt werden. Besonders bevorzugte schützende Mittel sind N,N-Dimethylacetoacetamid, Ν,Ν-Diäthylacetoacetamid und N-Morpholinoacetoacetamid.

Nach der Erfindung wird DL-6-APS oder ihr Derivat mit einer geschützten DL-Aminosäure der Formel (III) oder einem funktioneilen Säurederivat derselben umgesetzt. Als Derivat der DL-6-APS werden Salze mit Alkali, Erdalkali und anderen Metallen, substituierten Aminen oder

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Silylderivate verwendet.

Zu typischen Beispielen des funktionellen Säurederivats der geschützten DL-Aminosäure der Formel (III) gehören gemischte Säurehydride, die'gebildet sind durch Mischen der geschützten DL-Aminosäure mit beispielsweise Dimethylacetylhalogenxden, Trimethylacetylhalogeniden (Pivalylhalogeniden), Diphenylacetylhalogeniden, Diäthylacetylhalogeniden, Äthylchlorformiat, Isobutylchlorformiat oder Isopropylchlorformiat, ferner Zwischenprodukte, die gebildet sind durch die Reaktion der N-geschützten DL-Aminosäure mit Carbodiimiden wie N,N¹-Carbodiimidazol, und reaktionsfähige Ester der geschützten Aminosäure wie p-Methoxyphenylester, p-Nitrophenylester, Propargylester, Carboxymethylthioester, N-Hydroxysuccinimidester oder Cyanomethylester.

Die Acylierung der 6-APS mit einem solchen funktionellen Säurederivat der N-geschützten DL-Aminosäure der Formel (III) wird vorzugsweise bei einer Temperatur unter O⁰C in einer wässrigen Lösung, die ein Alkalimetallsalz der 6-APS oder ein tertiäres Aminsalz, wie Triäthylaminsalz der 6-APS, enthält oder in einem gemischten Lösungsmittel, das Wasser enthält oder in einem wasserfreien Lösungsmittel durchgeführt. Als organisches Lösungsmittel kann jedes inerte Lösungsmittel wie Aceton,

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Acetonitril, Isobutylmethylketon, Methylenchlorid, Chloroform, Äthylendichlorid, Dimethylformamid, Dioxan, Tetrahydrofuran, Äthylenglycol-dimethyläther, Toluol oder Dimethylsulfoxid verwendet werden.

Bei der Durchführung der Hydrolyse des vorliegenden Verfahrens kann die durch Acylierung gebildete N-geschützte DL-6-Aminoacylamidopenicillansäure entweder nach ihrer Isolierung aus dem Acylierungsgemisch oder während sie in dem Acylierungsgemisch verbleibt, hydrolysiert werden. Die Hydrolyse wird vorzugsweise in einer wässrigen Lösung oder in einem Lösungsmittel, das Wasser enthält, bei einer Temperatur unter Zimmertemperatur und bei einem pH-Wert vorzugsweise unter 5 durchgeführt, wobei sie durch die Zugabe einer geringen Menge verdünnter Mineralsäure oder einer wässrigen Lösung einer starken organischen Säure, wie einer organischen Sulfonsäure, Phosphonsäure, phosphonischen Säure, Ameisensäure oder einer Halogen-enthaltenden aliphatischen Säure bewirkt wird.

Nach Beendigung der Hydrolyse kann die sich ergebende DL-6-Aminoacylamidopenicillansäure (I) oder ihr Salz in der üblichen Weise gereinigt werden, wobei man sie aus dem hydrolisierten Gemisch mit einem Lösungsmittel, wie beispielsweise Isobutylmethylketon, Essigsäureester,

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Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff oder Methylenchlorid, das das freigesetzte schützende Mittel nicht lösen kann, extrahiert. Sie kann auch durch Auskristallisieren des hydrolysierten Gemisches mittels Einstellen des pH-Werts des Gemisches gereinigt werden.

Das Verfahren der vorliegenden Erfindung hat sich besonders zweckmäßig erwiesen, wenn es zur Herstellung von Aminobenzylpenicillin, 6-(1'-Aminocyclohexylcarboamido)-penicillansäure und dergleichen verwendet wird.

Die nachfolgenden Beispiele erläutern die Erfindung.

Bezugsbeispiel 1

a) Herstellung des Natriumsalzes von N-(1-N'-Morpholino-

carbamylpropen-2-yl)- ^-aminophenylessigsäure. 5,0 Millimol D-Phenylglycin werden in einer wässrigen Lösung, die 5,0 Millimol Natriumhydroxid enthält, gelöst und die Lösung wird durch Verdampfen unter reduziertem Druck konzentriert und dann zur Trockne gebracht. Das getrocknete Produkt wird in 5 bis 10 ml Methanol oder Äthanol durch Erwärmen gelöst und zu 5,0 bis 5,5 Millimol N-Morpholinoacetoacetamid zugegeben. Das sich ergebende Gemisch wird unter 30 Minuten langem Erhitzen auf dem Wasserbad behandelt, dann wird der Reaktionspartner nach Kühlen filtriert oder unter reduziertem Druck

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2 O B R R 7

zur Trockene verdampft. Der Rückstand wird über Nacht unter Vakuum über konzentrierter Schwefelsäure oder Phosphorpentoxid getrocknet und aus Methanol oder Äthanol umkristallisiert, wodurch man das Natriumsalz von N-(1-N¹-Morpholino-carbamylpropen-2-yl)- ^-aminophenylessigsäure erhält; Schmelzpunkt 248°C (Zerfall); Ausbeute 97%.

b) Das Verfahren des Bezugsbeispiels 1a) wird wiederholt, ausgenommen daß anstelle von N-Morpholinoacetoacetamid Ν,Ν-Dimethylacetoacetamid verwendet wird, wodurch man das Natriumsalz von N-(1-N¹,N'-Dimethylcarbamylpropen-2-yl)- oC -aminophenylessigsäure erhält; Schmelzpunkt 258°C (Zerfall); Ausbeute 97%.

c) In einer ähnlichen Weise wie in den vorausgehenden Beispielen werden unter Verwendung von D-Phenylglycin und Kaliumhydroxid in äquimolarem Verhältnis die nachfolgenden Verbindungen erhalten:

Kaliumsalz von N-(T-N¹-Morpholino-carbamylpropen-2-yl)-t^-amino-2-phenylessigsäure; Schmelzpunkt 214 bis 218⁰C (Zerfall); Ausbeute 93%.

Kaliumsalz von N-(1-N¹,N'-Diäthylcarbamylpropen-2-yl)-o(-amino-2-phenylessigsäure; Schmelzpunkt 213 bis 216°C (Zerfall); Ausbeute 87%.

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Kaliumsalz von N-(1-N¹,N¹-Dimethyl-carbamylpropen-2-yl)-o(-amino-2-phenylessigsäure; Schmelzpunkt 212 bis 213 ⁰C (Zerfall); Ausbeute 92%.

Beispiel 1

Herstellung von Aminobenzylpenicillin.

5 Millimol Pivalylchlorid werden in 20 ml trockenem Aceton oder trockenem Tetrahydrofuran gelöst und die Lösung bei einer Temperatur unter -10°C gekühlt. Der gekühlten Lösung wird ein Tropfen Ν,Ν-Dimethylbenzylamin oder N-Methylmorpholin unter Rühren zugegeben, dann werden weiterhin schnell zugegeben 5 Millimol trockenes feines Pulver von Natrium- oder Kaliumsalz von N-(1-N'-Morpholinocarbamyl-propen-2-yl) -D-o^-aminophenylessigsäure, die nach dem Bezugsbeispiel 1a) oder c) erhalten wurde,und das Gemisch wird 30 Minuten bei der gleichen Temperatur gerührt.

Andererseits werden 5 Millimol 6-APS in 15 ml eines 1:1 (Volum)Gemisches von Aceton und Wasser, das 5,5 bis 6 Millimol Triäthylamin enthält, oder in 15 ml wasserfreiem Methylenchlorid, das 11 Millimol Triäthylamin enthält, gelöst und die Lösung wird auf eine Temperatur unter -10°C gekühlt. Das wie oben hergestellte gemischte Säureanhydrid wird der gekühlten Lösung zugegeben, während sie heftig gerührt und bei einer Temperatur unter 0°C gehalten wird.

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Nachdem man ungefähr eine weitere Stunde bei einer Temperatur unter O⁰C gerührt hat, wird das Gemisch zusätzliche 2 bis 3 Stunden bei 2⁰C bis 5⁰C gerührt. Das organische Lösungsmittel wird mittels Verdampfen unter reduziertem Druck aus dem Reaktionsgemisch, das Wasser enthält, ohne vorausgehendes Filtrieren oder aus dem filtrierten Reaktionsgemisch in dem Fall, daß ein wasserfreies organisches Lösungsmittel verwendet wird, entfernt. Dem konzentrierten Reaktionsgemisch werden unge- ^ fähr 10 ml Methylisobutylketoη oder Chloroform zugegeben und es wird kräftig weitere 30 Minuten gerührt, während 1 bis 5 N Salzsäure zum Beibehalten des pH-Werts bei 2 zugegeben werden. Dann wird die organische Schicht entfernt und der wässrigen Schicht werden Natriumcarbonat oder Triäthylamin nach und nach zugegeben, um den pH-Wert auf 4,5 bis 4,8 einzustellen und sie wird über Nacht bei unter 0⁰C gehalten. Die zugefüllten Kristalle werden isoliert und in der üblichen Weise gereinigt,

wodurch man das vorgesehene Produkt mit einer Ausbeute ^

von 60% erhält. Die minimale inhibierende Konzentration gegen Escherichia coli ist 6,3 f/ml. Reinheit: 48% (nach dem Hydroxylamxnverfahren).

Bezugsbeispiel 2

Herstellung des Natriumsalzes von N-(2-N'-Morpholinocarbamylcyclopent-1-yl)-o(-aminophenylessigsaure.

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2-Äthoxycarbonylcyclopentanon und Morpholin werden in einer Äthanollösung durch Erhitzen zum Umsetzen veranlaßt, wodurch man 2-N-Morpholinocarbamylcyclopentanon mit einem Siedepunkt von 19O°C bis 194°C/4mmHg erhält, das weiter mit Natriumsalz von D-Phenylglycin in der ähnlichen Weise umgesetzt wird, wie es im Bezugsbeispiel 1a beschrieben wurde, wodurch man das in der Überschrift bezeichnete Kondensat erhält; Schmelzpunkt 233⁰C bis 236⁰C (Zerfall); Ausbeute 83%.

Beispiel 2

Herstellung von Aminobenzylpenicillin.

Das im Bezugsbeispiel 2 erhaltene Natriumsalz von N- (2-N-Morpholinocarbamylcyclopent-1-yl) -o(-aminophenylessigsäure wird mit 6-APS in der ähnlichen Weise, wie in Beispiel 1 beschrieben, umgesetzt und das Reaktionsprodukt wird unter Bildung von Aminobenzylpenicillin mit 54%iger Ausbeute hydrolysiert, wobei man eine Reinheit von 67% erhält.

Bezuqsbeispiel 3

Herstellung des Natriumsalzes von N-(I-N'-Morpholinocarbamylpropen-2-yl) -öt-amino-2' -thienylessigsäure,

Das Natriumsalz von DL-o^-Amino-2-thienylessigsäure /Chemical Abstract, 51, 4944 (1957)_7 wird mit N-Morpholinoacetoacetamid in der im Bezugsbeispiel 1a) beschriebenen

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Weise umgesetzt, wodurch man die in der Überschrift bezeichnete Verbindung erhält; Schmelzpunkt 154°C bis 160°C (Zerfall); Ausbeute 95%.

Beispiel 3

Herstellung von DL-o( -Amino-2'-thienylmethylpenicillxn.

5 Millimol Isobutylchlorformiat werden in 15 ml wasserfreiem Acetonitril, das einen Tropfen N-Methylmorpholin enthält, gelöst und die Lösung wird auf eine Temperatur unter -1O°C gekühlt. Zu der gekühlten Lösung werden 5 Millimol Natriumsalz von N-(1-N'-Morpholinopropen-2-yl)-©C-amino-2'-thienylessigsäure, die nach dem Bezugsbeispiel 3 erhalten wurde, zugegeben und das Gemisch wird bei der gleichen Temperatur 20 Minuten gerührt. 5 Millimol 6-APS werden in 5 ml Wasser, das 5,5 Millimol Tritähylamin enthält, gelöst und mit 5 ml Aceton verdünnt. Die Lösung wird auf -8⁰C gekühlt, den oben hergestellten gemischten Säureanhydrid zugegeben, während kräftig gerührt und die Temperatur unter 0⁰C gehalten wird, Nachdem man ungefähr eine halbe Stunde gerührt hat, wird das Gemisch bei. 2° bis 5⁰C weitere 3 Stunden gerührt und dann von dem organischen Lösungsmittel durch Verdampfen unter reduziertem Druck befreit. Der sich ergebenden konzentrierten wässrigen Lösung werden 20 ml Isobutylmethylketon zugegeben und es wird dann weiter heftig gerührt, während man 30%ige Salpetersäure zugibt,

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um den pH-Wert auf ungefähr 2,5 zu halten. Dann wird die wässrige Schicht aus der organischen Schicht abgetrennt, der pH-Wert auf 5 durch Zugabe von Triäthylamin eingestellt und gefriergetrocknet. Das erhaltene nicht gereinigte oC-Amino-2'-thienylmethylpenicillin weist eine Minimalinhibierungskonzentration von 25 y~/ml gegen Escherichia coli auf.

Bezugsbeispiel 4

Herstellung des Natriumsalzes von N-(1-N¹-Morpholinocarbamylpropen-2-yl) -o^-amino-^-methylthiobuttersäure.

Natriumsalz von DL-Methionin und N-Morpholinoacetoacetamid werden wie im Bezugsbeispiel 1a) umgesetzt, wodurch man die in der Überschrift bezeichnete Verbindung erhält; Schmelzpunkt 98⁰C bis 102⁰C; Ausbeute 76%.

Beispiel 4

Herstellung von 6-(ot-Amino-^-methylthiobutyrylamido) penicillinsäure.

Nach dem in Beispiel 1 beschriebenen Verfahren wird 6-APS mit dem Natriumsalz von N-(1-N¹-Morpholinocarbamylpropen-2-yl)-ot-amino-^-methylthiobuttersäure, das wie im Bezugsbeispiel 4 angegeben, erhalten wurde, umgesetzt und das Reaktionsprodukt wird unter Bildung der in der Überschrift bezeichneten Verbindung hydrolysiert; Ausbeute 50%, minimale inhibitorische Konzentration 25 gegen Escherichia coli.

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Bezugsbeispiel 5

Herstellung des Natriurnsalzes von N-(1-N¹ ,N'-Dimethylcarbamylpropen-2-yl)-1-aminocyclohexylcarbonsäure.

Nach dem im Bezugsbeispiel 1a) beschriebenen Verfahren wird das Natriumsalz von 1-Aminocyclohexylcarbonsäure /Chemische Berichte, 19, 1922 (19O6)_7 mit N,N-Dimethylacetoacetamid umgesetzt, wodurch man das in der Überschrift bezeichnete Produkt erhält; Schmelzpunkt 242⁰C gm bis 245°C (Zerfall); Ausbeute 94%.

Beispiel 5

Herstellung der 6-(1-Aminocyclohexylcarboamido)-penicillansäure.

Nach dem im Beispiel 1 beschriebenen Verfahren wird 6-APS mit dem Kondensationsprodukt von Bezugsbeispiel 5 umgesetzt und das Reaktionsprodukt wird unter Bildung

A der in der Überschrift bezeichneten Verbindung hydroly- ™

siert; Ausbeute 43%, minimale inhibitorische Konzentration 50 )T/ial gegen Escherichia coli.

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Claims

Patentansprüche

Verfahren zur Herstellung von DL-6-Aminoacylamidopenicillansäure der Formel

H₂N-R-CONH-CH- CH C (I)

Il I ^CH3

OC N CH-COOH

in der H2N-R-CO- ein Aminosäurerest ist, oder deren Salzen durch Acylieren von 6-Aminopenicillansäure (6-APS) oder einem Salz der 6-APS mit einer N-geschützten DL-Aminosäure der Formel

R₄ R
C= C

A-C N-R-COOH (III)

0 — W

in der N-R-COOH ein Aminosäurerest und y

H
R₄ R₃

C » C^

A-C^. eine von einem ß-Ketocarbonsäurederivat 0

abgeleitete Schutzgruppe ist, oder einem funktionellen Säurederivat einer N-geschützten DL-Aminosäure der Formel III in Gegenwart eines wasserfreien inerten Lösungsmittels bei einer Temperatur im Bereich von O⁰C bis -30⁰C zu einer N-geschützten DL-6-Aminoacylamidopenicillansäure der Formel

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_ _ 20RH879

^R4 ^R3

C= i_x ^ S_x CH₃

A-C N-R-CONH-CH—CH C (II)

^₀ H^X j I 1^CH₃

OC N — CH-COOH

und Hydrolysieren der dabei erhaltenen DL-6-Aminoacylamidopenicillansäure der Formel II oder eines ihrer Salze mit einer Säure bei höchstens Zimmertemperatur und einem pH-Wert von höchstens 5,0, dadurch gekennz eichnet, daß man als Acylierungsmittel eine N-geschützte DL-Aminosäure der Formel III, in der R₃ eine Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen und R. ein Wasserstoffatom oder eine niedere Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen ist oder R₃ und R. zusammen mit den Kohlenstoffatomen, an die sie gebunden sind, einen Cyclopentenyl- oder Cyclohexenylring bilden und A eine Aminogruppe der Formel

N- (VI)

ist, in der R- und R, je eine Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen bedeuten oder gemeinsam zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, und einem Sauerstoffatom einen Morpholinoring bilden.

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2. Verfahren gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die N-geschützte DL-Aminosäure der Formel (III) dadurch hergestellt wird, daß man eine DL-Aminosäure oder ein Salz derselben mit einem N,N-Di-substituierten ß-Ketosäureamid der Formel (V)

H R₁

R₃CO - C - CONC. (V)

R₄ R₂

worin die Reste R₁, R₂, R^ und R. die in Anspruch 1 gebene Bedeutung haben, in Gegenwart eines Lösungsmittels umsetzt.
3. Verfahren gemäß Anspruch 2, dadurch g e kennzeich ne t, daß das N,N-disubstituierte ß-Ketosäureamid der Formel (V) ein Ν,Ν-Dimethylacetoacetamid, Ν,Ν-Diäthylacetoacetamid und/oder N-Morpholinoacetoacetamid ist.
4. Verfahren gemäß Anspruch 1, dadurch g e kennz eichnet, daß das funktioneile Säurederivat der N-geschützten DL-Aminosäure der

Formel (III) in Form eines gemischten Säureanhydrids verwendet wird, wobei dieses in der Weise hergestellt wird, daß man eine N-geschützte DL-Aminosäure der Formel (III) oder ein Salz derselben mit einem di~ oder 60983 B /0959 -23-

trisubstituierten Essigsäurehalogenid oder einem Alkylchlorformiat in Gegenwart eines wasserfreien inerten Lösungsmittels in Gegenwart eines N-Methyltertiären Amins umsetzt.
5. Verfahren gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man als DL-Aminosäure eine DL-»(.-Aminosäure der Formel (IV¹)

?s i

R^-C- COOH (IV)

ο ι

NH₂

verwendet, worin R₅ ein Wasserstoffatom, ein Methyl-, Methylthiomethylrest oder dergleichen ist, R₆ ein Methylthioäthyl-, Phenyl-, Nitrophenyl-, Aminophenyl-, Alkoxyphenyl-, Alkylphenyl-, Halogenphenyl-, Thienyl-, Methylthienyl-, Pyridyl-, Imidazol-, Thiazol-, Pyrazol-, Pyrazolon-, Isoxazol-, Isothiazol-, Pyrrol-, Furan-, Tetrahydropyrrol-, Tetrahydrothienyl-,

Sydnone-, Cyclopentyl- oder Cyclphexylrest ist, wobei ^

auch R₅ und R,- gemeinsam einen Ring wie Tetrahydrothienyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl oder dergleichen bilden können.

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