DE204326T1 - Verfahren zur herstellung von l-threonin und l-isoleucin. - Google Patents
Verfahren zur herstellung von l-threonin und l-isoleucin.Info
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Claims (8)
1. Verfahren zur Herstellung von L-Threonin oder L-lsoleucin,
dadurch gekennzeichnet , daß man in einem Medium einen Mikroorganismus züchtet, der
zur Gattung Corynebacterium oder Brevibacterium gehört und eine rekombinante DNA aus einem DNA-Fragment, das die für
die Synthese von Homoserin-Dehydrogenase und Homoserin-Kinase eines zur Gattung Corynebacterium oder Brevibacterium
gehörenden Mikroorganismus verantwortliche genetische Information
trägt, und einerVektor-DNA enthält, das L-Threonin oder L-Isoleucin in der Kulturbrühe ansammelt und L-Threonin
oder L-Isoleucin daraus gewinnt.
2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei der Vektor in einem zur Gattung Corynebacterium oder Brevibacterium gehörenden
Mikroorganismus replizierbar ist und aus pCGl, pCG2, pCG4-,
pCG11, pCE5i, pCE52, pCE53, pCE54, pCB101 und davon abgeleiteten
Plasmiden ausgewählt ist.
3· Rekombinante DNA, enthaltend ein DNA-Fragment, das die genetische
Information trägt, die verantwortlich ist für die Synthese von Homeserin-Dehydrogenase und Homoserin-Kinase,
die von einem zur Gattung Corynebacterium oder Brevibacterium gehörenden Mikroorganismus stammen und in der Lage sind,
einem zur Gattung Corynebacterium oder Brevibacterium gehörenden
Wirts-Mikroorganismus Resistenz gegen ein Threonin- oder Isoleucin-Analoges zu verleihen.
-2- 020432S
4. Zur Gattung Corynebacterium oder Brevibacterium gehörender
Mikroorganismus, enthaltend eine rekombinante DNA aus einem DNA-Fragment, das die für die Synthese von Homoserin-Dehydrogenase
und Homoserin-Kinase, die von einem zur Gattung Corynebacterium oder Brevibacterium gehörenden Mikroorganismus
stammen, verantwortliche genetische Information trägt, und einer Vektor-DNA.
5. Für die Aminosäure-Sequenz von Homoserin-Dehydrogenase gemaß
Tabelle 3 codierende DNA.
6. Für die Aminosäure-Sequenz von Homoserin-Kinase gemäß Tabelle .3 codierende DNA.
7· Verfahren zur Herstellung von L-Threonin oder L-Isoleucin,
dadurch gekennzeichnet, daß man eine rekombinante DNA, die
ein DNA-Fragment enthält, das die genetische Information trägt, die für die Synthese von Homoäerin-Dehydrogenase
* und Homoserin-Kinase eines zur Gattung Corynebacterium oder
Brevibacterium gehörenden Mikroorganismus, in einen Lysin erzeugenden zur Gattung Corynebacterium oder Brevibacterium
gehörenden Mikroorganismus einführt, die so erhaltene Transformante
in einem Medium züchtet, das L-Threonin oder L-Isoleucin im Medium ansammelt und L-Threonin oder L-Isoleuein
daraus gewinnt.
8. Für die Expression eines fremden Gens in einem zur Gattung Corynebacterium oder Brevibacterium gehörenden Mikroorganismus
notwendige DNA-Sequenz, die 120 Nucleotid-Sequenzen stromaufwärts vom Startcodon des für Homoserin-Dehydrogenase
oder Homoserin-Kinase oder eines Teils davon codierenden offenen Leserahmens und 60 Nucleotid-Sequenzen stromabwärts
vom Stopcodon des für Homoserin-Kinase oder einen Teil davon codierenden offenen Leserahmens in der in Tabelle 3
dargestellten DNA-Sequenz enthält.
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