DE10301650A1

DE10301650A1 - Medizinisch nützliche 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthaline, Verfahren zu ihrer Herstellung, sie enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung

Info

Publication number: DE10301650A1
Application number: DE10301650A
Authority: DE
Inventors: Gerhard Prof. Dr. Bringmann; Robert-Michael Pfeifer; Reto Dr. Brun; Werner E.G. Prof. Dr. Müller
Original assignee: Johannes Gutenberg Universitaet Mainz; Julius Maximilians Universitaet Wuerzburg
Current assignee: Johannes Gutenberg Universitaet Mainz; Julius Maximilians Universitaet Wuerzburg
Priority date: 2003-01-17
Filing date: 2003-01-17
Publication date: 2004-07-29
Also published as: WO2004065349A1; AU2003300228A1; AU2003300228A8

Abstract

Es werden die Verbindungen 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalin-Derivate der allgemeinen Formel 1 DOLLAR F1 beschrieben sowie Verfahren zu ihrer Herstellung. 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthaline haben in Zellkulturmodellen Antitumor-Eigenschaften. Weiterhin stellen diese Substanzen Inhibitoren für neurodegenerative Erkrankungen dar und zeigen eine ausgeprägte antiprotozoische Aktivität.

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue bioaktive Verbindungen aus der Klasse der 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthaline. Die Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen, diese enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung bei der Behandlung von Erkrankungen.
Hintergrund der Erfindung
Meeresorganismen, insbesondere marine Mikroorganismen, sind reichhaltige Quelle von Wirkstoffen [siehe u. a. G. Bringmann, G. Lang in Progr. Mol. Subcell. Biol. (Hrsg.: W. E. G. Müller), in press; G. Bringmann, G. Lang, J. Mühlbacher, K. Schaumann, S. Steffens, P. G. Rytik, W. E. G. Müller, in Progr. Mol. Subcell. Biol. (Hrsg.: W. E. G. Müller), in press]. Besonders interessante Wirkstoffe aus marinen Streptomyceten sind die Ansamycine, darunter z.B. die Naphthomycine [Lit. u.a.: H. G. Floss, J. M. Bealt, Angew. Chem. 1989, 101, 147-179; Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1989, 28, 146-178; T. Okabe, B. D. Yuan, F. Isono, I. Sato, H. Fukazawa, T. Nishimura, N. Tanaka, J. Antibiot. 1985, 948-951; siehe auch Römpp Naturstoffe (Hrsg.: B. Fugmann, S. Lang-Fugmann, W. Steglich), Thieme Verlag, Stuttgart, New York, 1997, S 424-425); A. S. Sarma, T. Daum, W. E. G. Müller in Secondary metabolites from marine sponges (Hrsg.: Akademie gemeinnütziger Wissenschaften zu Erfurt), Ullstein-Mosby Verlag, Berlin, 1993, S. 1-168]. Die Tatsache, daß diesen Wirkstoffen oft Naphthalin-Teilstrukturen zugrunde liegen, sowie die nützlichen antünfektiven Bioaktivitäten von Naphthylisochinolin-Alkaloiden (wenngleich letztere aus terrestrischen tropischen Pflanzen stammen, siehe u.a. G. Bringmann, D. Feineis, Act. Chim. Therap. 2000, 26, 151-171; G. Bringmann, F. Pokorny in The Alkaloids (Hrsg.: G. Cordell), Bd. 46, Academic Press, New York, 1995, S. 127-271; G. Bringmann, U. Holzgrabe, V. Hoerr, G. Stich, Pharmazie, eingereicht.) veranlaßten uns, nach anderen, chemisch modifizierten und zugleich synthetisch leichter zugänglichen Naphthalin-Derivaten zu suchen, die pharmazeutisch interessante und möglicherweise medizinisch nützliche Eigenschaften haben und sich aufgrund guter Herstellbarkeit für eine mögliche Entwicklung neuer Medikamente gegen Tumorerkrankungen, Infektionserkrankungen und / oder neurodegenerative Krankheiten eignen.
Es wurde nun gefunden, daß 2-Amino-substituierte 1-Phenylnaphthaline der allgemeinen Formel 1 ausgeprägte antitumorale und antiprotozoische (z.B. antitrypanosomale) Eigenschaften besitzen. Weiterhin besitzen diese Substanzen eine starke neuroprotektive Wirkung in vitro, die auf eine medizinisch wertvolle Eigenschaft auch zur In-Vivo-Behandlung von neurodegenerativen Erkrankungen schließen läßt.
Die Erfindung betrifft Verbindungen der allgemeinen Struktur 1, wobei diese (abgesehen von der möglichen Präsenz von Chiralitätszentren in R¹-R⁴) auch an der Achse achiral (d.h. frei durchdrehbar) oder chiral (d.h. rotationsgehindert) sein und dann als (M)- oder als (P)-Atropisomer oder auch als Racemat vorliegen können,
worin R¹, H, ein unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, ein Alkenyl, ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe, eine Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen oder ein Heteroatomsubstituent wie OR, NR₂ oder SR ist, wobei R ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe, eine Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen sein kann;
R² H, ein unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe oder eine Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen oder ein Neteroatomsubstituent wie OR, NR₂ oder SR ist, wobei R ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe, eine Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen sein kann;
oder R¹ und R² miteinander in der Art verknüpft sind, daß dadurch ein stickstoffhaltiger unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter aromatischer oder gesättigter Ring erhalten wird,
R³ und R⁴ jeweils einer oder mehrere gleiche oder verschiedene Substituenten sind, ausgewählt aus H, unsubstituiertem, monosubstituiertem und/oder polysubstituiertem C₁-C₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, unsubstituiertem, monosubstituiertem und/oder polysubstituiertem Aryl- oder Heteroarylrest, unsubstituierter, monosubstituierter und/oder polysubstituierter Benzylgruppe, einer Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigter oder Heteroatom- oder arylsubstituierter Acylgruppe, Alkoxysubstituenten, wie z.B. -OMe, -OEt, -OnPr, -iPr, -OnBu, -OiBu, – OsecBu, -OtBu, dessen Alkylgruppe verzweigt, unverzweigt oder cyclisch ist, über ein Schwefelatom gebundene Alkylgruppe, wie z.B. -SMe, -SEt oder Sulfonylgruppe, wie z.B. -SO₃H, -SO₂Me, -SO₂CF₃, -SO₂C₆HaCH₃ oder SO₂C₆HaCH₂Br oder einem Stickstoffsubstituenten, wie z.B. -NH₂, -NHR, – NRR' (mit R, R' = Alkyl, Aryl usw.), -NC, -NO₂, Fluor-, Chlor-, Brom-, Iod-, – CN oder Heterosubstituent, oder
R³ ein an zwei benachbarten Kohlenstoffatomen des Naphthalingerüsts kondensierter aromatischer oder gesättigter Ring ist,
R⁴ H, unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter AnI- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe oder eine Acylgruppe wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen, Alkoxysubstituenten, wie z.B. -OMe, -OEt, – OnPr, -iPr, -OnBu, -OiBu, -OsecBu, -OtBu, dessen Alkylgruppe verzweigt, unverzweigt oder cyclisch ist, eine über ein Schwefelatom gebundene Alkylwie z.B. -SMe, -SEt oder eine Sulfonylgruppe, wie z. B. -SO₃H, -SO₂Me, – SO₂CF₃, -SO₂C₆H₄CH₃ oder SO₂C₆H₄CH₂Br oder ein Stickstoffsubstituent, wie z.B. -NH₂, -NHR, -NRR' (mit R, R' = Alkyl, Aryl usw.), -NC, -NO₂, Fluor-, Chlor-, Brom-, Iod-, -CN oder ein Heterosubstituent ist, oder zwei oder mehrere R³ und R⁴ miteinander in der Art verknüpft sind, daß dadurch ein iso- oder heteroaromatischer oder -gesättigter Ring erhalten wird, und pharmazeutisch verträgliche Salze oder Solvate dieser Verbindung.
Ausgenommen von den oben genannten erfindungsgemäßen Verbindungen sind die folgenden bereits publizierten Substanzen (G. Bringmann, M. Breuning, Tetrahedron: Asymmetry 1998, 9, 667-679; G. Bringmann, M. Breuning, S. Tasler, N. Endress, C. L. J. Ewers, L. Göbel, K. Peters, E.-M. Peters, Chem. Eur. J. 1999, 5, 3029-3038; S. Kumar, M. Prashad, A. P. Bhaduri, Indian J. Chem, Sect. 8 1981, 36-40; T. Laird, W. D. Ollis, I. O. Sutherland, J. Chem. Soc. Perkin. Trans. 1 1980, 1477-1486):
Besonders bevorzugte Verbindungen der allgemeinen Formel 1 sind die folgenden:
und deren Salze und Solvate.
In der vorliegenden Endung wird eine neue bioaktive und synthetisch hergestellte Substanzgruppe, die 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthaline, vorgestellt; ferner werden Verfahren zu deren Herstellung als auch zur Verwendungen dargestellt.
Diese erfindungsgemäßen Verbindungen können mit den üblichen Lösungsmitteln, Hilfs- und Trägerstoffen zu Tabletten, Dragees, Kapseln, Tropflösungen, Suppositorien, Injektions- und Infusionszubereitungen verarbeitet werden, um therapeutisch zur peroralen, rektalen oder parenteralen Applikation Verwendung zu finden.
Die vorliegende Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Herstellung oben genannter Verbindungen.
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft die Verwendung einer Reihe der oben genannten Verbindungen zur Behandlung von Erkrankungen, wie z.B. Tumorerkrankungen, Infektionserkrankungen und/oder neurodegenerativen Erkrankungen. Die Verwendung kann zum Beispiel in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz erfolgen.
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft eine pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine erfindungsgemäße Verbindung, zusammen mit geeigneten Zusatz- oder Hilfsstoffen. Diese pharmazeutische Zusammensetzung kann dadurch gekennzeichnet sein, daß die Verbindung in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz vorliegt.
Besonders bevorzugt sind pharmazeutische Zusammensetzungen, in denen die erfindungsgemäße Verbindung in einer Menge von 20 μg vorliegt oder pharmazeutische Zusammensetzungen, in denen die erfindungsgemäße Verbindung in solch einer Menge vorliegt, daß ein Konzentrationsbereich zwischen 0,3 und 5,0 mg/kg bei der Behandlung in vivo vorliegt. Bevorzugt ist eine pharmazeutische Zusammensetzung gemäß der vorliegenden Erfindung, die weitere Chemotherapeutika enthält. Diese Chemotherapeutika können alle für den Fachmann üblichen Chemotherapeutika im Rahmen einer Krebstherapie, Infektionstherapie und/oder Therapie von neurodegenerativen Erkrankungen umfassen.
Erfindungsgemäß kann die oben genannte pharmazeutische Zusammensetzung in Form von Tabletten, Dragees, Kapseln, Tropflösungen, Suppositorien, Injektions- oder Infusionszubereitungen zur peroralen, rektalen oder parenteralen Verwendung vorliegen. Solche Darreichungsformen und deren Herstellung sind dem Fachmann bekannt.
Die Verfahrensprodukte der allgemeinen Formel 1 gewinnen zusätzlich an Wert dadurch, daß sie sich sehr leicht durch chemische Synthese gewinnen lassen. Generell lassen sie sich z.B. durch intermolekulare Arylkupplung geeignet funktionalisierter und ggf. geschützter Naphthalin- und Phenylderivate synthetisieren, besonders effektiv aber nach dem von uns entwickelten 'Lacton-Verfahren' (siehe u. a. G. Bringmann, M. Breuning, S. Taster, Synthesis, 1999, 525-558; G. Bringmann, M. Breuning, R.-M. Pfeifer, W. Schenk, K. Kamikawa, M. Uemura, J. Organomet. Chem. 2002, 661, 31-47; G. Bringmann, S. Taster, R.-M. Pfeifer, M. Breuning, J. Organomet. Chem. 2002, 661, 49-65). Entsprechend diesem Konzept erfolgt die Kupplung nicht inter-, sondern intramolekular: Nach Vorfixierung des Naphthalin- und des Phenyl-Teils über eine Estertunktion wie in 2, gelingt die intramolekulare Kupplung (meist Palladium-katalysiert) in exellenten Kupplungsausbeuten, wobei Biaryl-Lactone des Typs 3 entstehen. Diese enthalten zwar schon die Biarylachse, sind aber noch nicht axial-chiral, sondern an der Achse konfigurativ labil. Dadurch lassen sich diese Lactone 3 atropselektiv, zudem auch noch wahlweise zum M- oder zum P-konfigurierten Atropisomer des jeweiligen Produkts vom allgemeinen Typ 4 oder 5 ringöftnen, z.B. durch Oxazaborolidin-vermittelte enantioselektive Reduktion zu 4 (G. Bringmann, M. Breuning, P. Henschel, J. Hinrichs, Org. Synth. 2002, 79, 72-83) oder diastereoselektive Amidolyse mit chiralen N-Nucleophilen zu 5 (G. Bringmann, M. Breuning, S. Tasler, N. Endress, C. L. J. Ewers, L. Göbel, K. Peters, E.-M. Peters, Chem. Eur. J. 1999, 5, 3029-3038). Unerwünschte atropisomere Nebenprodukte (falls überhaupt gebildet) lassen sich einem Recycling zuführen, durch Re-cyclisierung zurück zum Lacton 3.
Schema 1. Ein effizienter Zugang zu den Ausgangssubstanzen 4 und 5 der erfindungsgemäßen Verbindungen 1
Alle Reaktionen verlaufen in sehr guten bis hervorragenden chemischen bzw. optischen Ausbeuten. Dies macht die Substanzen des Typs 4 und 5 – und damit die erfindungsmäßigen Substanzen des Typs 1 – zu einer nun leicht in großen Mengen und unterschiedlichsten Varianten verfügbaren Substanzklasse. Aber auch andere Syntheseverfahren zum Aufbau der erfindungsmäßigen Substanzen 1 sind möglich, z.B. durch herkömmliche (J. Hassan, M. Sevignon, C. Gozzi, E. Schulz, M. Lemaire, Chem. Rev. 2002, 102, 1359-1469; G. Bringmann, R. Walter, R. Weinich, Angew. Chem. 1990, 102, 1006-1019; Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1990, 29, 977-991) intermolekulare Kupplung.
Wie unten beispielhaft beschrieben, lassen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen 1 sowohl aus den Diolen 4 wie aus den Amiden 5 synthetisch gewinnen.
Schema 2. Zugangswege zu den erfindungsgemäßen Verbindungen 1
Die Verfahrensprodukte der allgemeinen Formel 1 besitzen wertvolle pharmakologische Eigenschaften.
Antitumorale Wirkungen
Die Antitumorwirkung wurde u.a. am L5178y-Mäuselymphomzellsystem nachgewiesen (ATCC CRL 1722). Diese Zellen wurden in Suspensionskultur gehalten, wie bereits früher beschrieben (W. E. G. Müller, R. K. Zahn, Cancer Res. 1979, 39, 1102-1107). Die ED₅₀-Konzentrationen für einige ausgewählte 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalin-Derivate seien im folgenden aufgeführt. Die Antitumor-Aktivität der Derivate der 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthaline wurde bei den Tumorzell-Linien PC-12 (adrenaler, phaeochromocytomaler Tumor [Ratte]; ATCC CRL 1721), Sarcoma 180 (Sarkom [Maus]; ATCC TIB 66) als auch HeLa S3 (epitheloides Carcinom [Cervix; Mensch]; ATCC CCL 2.2) gezeigt. An diesen In-vitro-Modellen werden ED₅₀-Konzentrationen unterhalb einer Konzentration von 5 μg/ml gemessen, die auf eine potente Wirkung in vivo schließen läßt.
Antitrypanosomale Wirkungen
Der Test wurde in 96-Loch-Mikrotiterplatten mit je 100 μl RPMI 1640 Medium mit 10% fötalem Kälberserum und 2mM L-Glutamin durchgeführt, jeweils mit 2000 L6-Zellen (Rattenmyoblasten) pro Loch. Nach 24 h wurden 5000 trypomastigote Formen von T. cruzi (Tulahuen Stamm C2C4 ausgestattet mit dem Galactosidase-Gen, Lac Z) und die Substanz in unterschiedlichen Konzentrationen zugegeben. Die Platten wurden bei 37°C und bei 5% CO-₂ Gehalt (Inkubations-Atmosphäre) 96 Stunden lang inkubiert. Zur Bestimmung der IC₅₀-Werte wurde CPRG/Nonidet als Substrat zugegeben. Die Farbreaktion, die sich innerhalb der nächsten 2-4 Stunden entwickelte, wurde photometrisch bei 540 nm ausgewertet und der IC₅₀ aus der sigmoidalen Hemmungskurve bestimmt. Die Cytotoxizität wurden im selben Test mit nicht infizierten L-6-Zellen bei gleicher Verdünnungsrate bestimmt. Die Zellen wurden ausgesät und während 3 Tagen einer seriellen Verdünnungsreihe der Substanz ausgesetzt. Dann wurde die Viabilität mittels Alamar Blue bestimmt (B. Räz, M. Iten, Y. Grethen-Buhlen, R. Kaminsk, R. Brun, Acta Trop. 1997, 68, 139-147). Die zytotoxischen Aktivitäten wurden als IC₅₀ Werte ausgedrückt.
Neuroprotektive Wirkungen
Die vorliegende Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zur Behandlung von neurodegenerativen Erkrankungen. Grundlage dieser Erkrankungen ist häufig eine Beeinträchtigung der neuronalen Glutamat-Kanäle. Werden diese durch Antagonisten in In-vitro-Modellen auf physiologische Aktivitäten zurückmoduliert, kann auch auf eine effektive In-vivo-Wirkung geschlossen werde. Als Beispiele hierfür seien erwähnt die Krankheitsbilder aus der Gruppe der Alzheimer-Erkrankungen (S. Perovic, M. Böhm, E. Meesters, H. C. Schröder, G. Pergande, W. E. G. Müller, Mech. Ageing Develop. 1998, 101, 1-19) sowie auch Prion-Erkrankungen (W. E. G. Müller, N. C. Schröder, N. Ushijima, J. Dapper and J. Bormann, Europ. J. Pharmacol. 1992, 226, 209-214). Die gefundenen effektiven Dosen, die neuroprotektiv wirken, liegen ebenfalls unterhalb von 5 μg/ml in den verwandten 1n-vitro-Modellen. Dieser Befund läßt wiederum auf einen hohen therapeutischen Nutzen bei neurodegenerativen Erkrankungen schließen.
Die Verabreichung kann erfindungsgemäß in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz erfolgen.
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung umfaßt der Ausdruck „ein unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann", bevorzugterweise die folgenden Gruppen: Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, nButyl, secButyl, tButyi, Isoamyl und Cyclohexyl;
der Ausdruck „ein Alkenyl" bevorzugtennreise die folgenden Gruppen: Vinyl, Allyl, Butenyl, ISObutenyl, 1-Pentenyl, 2-Pentenyl, Cyclohexenyl, der Ausdruck „unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Neteroarylrest" bevorzugterweise die folgenden Gruppen: Phenyl, Bromphenyl, Tolyl, 2-Furyl, 3-Furyl, 2-Pyrrolyl, 2-Pyridyl, Naphthyl, Xylyl und 2-Thienyl;
der Ausdruck „unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe" bevorzugterweise die folgenden Gruppen: Benzyl, p-Brombenyzl, p-Methoxybenzyl, 2,6-Dimethylbenzyl, o-Nitrobenzyl und 2,6-Dichlorbenzyl;
der Ausdruck „eine Acylgruppe" bevorzugterweise die folgenden Gruppen: Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen;
der Ausdruck „ein Heteroatomsubstituent" bevorzugterweise die folgenden Gruppen: OR, NR₂ oder SR, wobei R ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe, eine Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen sein kann.
der Ausdruck „ein stickstoffhaltiger unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter aromatischer oder gesättigter Ring" bevorzugterweise die folgenden Gruppen: ein Anilinring, ein Indylring, ein Pyrrol, ein Piperidin, ein Pyrrolidin, ein Chinolin oder ein Isochinolin;
der Ausdruck „Alkoxysubstituenten" bevorzugterweise die folgenden Gruppen: -OMe, -OEt, -OnPr, -iPr, -OnBu, -OiBu, -OsecBu, -OtBu, dessen Alkylgruppe verzweigt, unverzweigt oder cyclisch ist;
der Ausdruck „über ein Schwefelatom gebundene Alkylgruppe" bevorzugterweise die folgenden Gruppen: -SMe, -SEt oder Sulfonylgruppe, wie -SO₃H, -SO₂Me, -SO₂CF₃, -SO₂C₆H₄CH₃ oder SO₂C₆H₄CH₂Br; und der Ausdruck „Stickstoffsubstituent" bevorzugterweise die folgenden Gruppen: -NH₂, -NHR, -NRR' (mit R, R' = Alkyl, Aryl usw.), -NC, -NO₂.
Es wird aufgrund von vorläufigen Versuchen weiterhin angenommen, daß erfindungsgemäße Verbindungen, die besonders gute Aktivitäten aufweisen, bevorzugt die folgenden Reste R¹ bis R⁴ aufweisen können.
R¹ ist N, ein unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, ein Alkenyl, ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe, eine Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder aryllsubstituierte Acylgruppen.
R² ist H, ein unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe oder eine Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen.
R¹ und sind R² miteinander in der Art verknüpft, daß dadurch ein stickstoffhaltiger unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter aromatischer oder gesättigter Ring erhalten wird.
R³ und sind R⁴ jeweils einer oder mehrere gleiche oder verschiedene Substituenten, ausgewählt aus H, unsubstituiertem, monosubstituiertem und/oder polysubstituiertem C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, unsubstituiertem, monosubstituiertem und/oder polysubstituiertem Aryl- oder Heteroanlrest, unsubstituierter, monosubstituierter und/oder polysubstituierter Benzylgruppe, einer Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigter oder Heteroatom- oder arylsubstituierter Acylgruppe, Alkoxysubstituenten, wie z.B. -OMe, -OEt, -OnPr, -iPr, -OnBu, -OiBu, – OsecBu, -OtBu, dessen Alkylgruppe verzweigt, unverzweigt oder cyclisch ist, über ein Schwefelatom gebundene Alkylgruppe, wie z.B. -SMe, -SEt oder Sulfonylgruppe, wie z.B. -SO₃H, -SO₂Me, -SO₂CF₃, -SO₂C₆H₄CH₃ oder SO₂C₆H₄CH₂Br oder einem Stickstoffsubstituenten, wie z.B. -NH₂, -NHR, – NRR' (mit R, R' = Alkyl, Aryl usw.), -NC, -NO₂.
R³ ist ein an zwei benachbarten Kohlenstoffatomen des Naphthalingerüsts kondensierter aromatischer oder gesättigter Ring.
R⁴ ist H, unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe oder eine Acylgruppe wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen, Alkoxysubstituenten, wie z.B. -OMe, -OEt, – OnPr, -iPr, -OnBu, -OiBu, -OsecBu, -OtBu, dessen Alkylgruppe verzweigt, unverzweigt oder cyclisch ist, eine über ein Schwefelatom gebundene Alkylwie z.B. -SMe, -SEt oder eine Sulfonylgruppe, wie z. B. -SO₃H, -SO₂Me, – SO₂CF₃, -SO₂C₆HaCH₃ oder SO₂C₆HaCH₂Br oder ein Stickstoffsubstituent, wie z.B. -NH₂, -NHR, -NRR' (mit R, R' = Alkyl, Aryl usw.).
Zwei oder mehrere R³ und R⁴ sind miteinander in der Art verknüpft, daß dadurch ein iso- oder heteroaromatischer oder -gesättigter Ring erhalten wird.
Jedoch zeigen auch die anderen erfindungsgemäßen Verbindungen eine überraschende biologische Aktivität.
Zuletzt betrifft ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung schließlich die Verwendung einer Verbindung der allgemeinen Formel 1,
wobei die Reste R¹ bis R⁴ wie oben definiert sind, zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Tumor- und/oder neurodegenerativen Erkrankungen und/oder zur Behandlung von Entzündungszuständen und/oder zur Behandlung der Chagas-Krankheit.
Die Erfindung soll im folgenden anhand von Beispielen näher verdeutlicht werden, ohne jedoch in irgendeiner Weise auf diese Beispiele beschränkt zu sein.
Beispiel 1: Synthese des antitumoraktiven Triflats 1c
Darstellung des Benrylalkohols rac-6
1,24 g (4,96 mmol) des Diols rac-4a (hergestellt nach G. Bringmann, T. Hartung, L. Goebel, O. Schupp, K. Peters, H. G. von Schnering, Liebigs Ann. Chem. 1992, 7, 769-775) wurden in 60 ml Aceton gelöst, mit 3,24 g (9,92 mmol) Cs₂CO₃ und mit 1,2 ml (9,92 mmol) Benzylbromid versetzt und über Nacht bei Raumtemp. gerührt. Nach beendeter Reaktion wurde zur Abtrennung der anorganischen Salze über Celite abgefrittet und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Der ölige Rückstand wurde in etwas Dichlormethan aufgenommen und dreimal mit ges. K₂CO₃-Lösung gewaschen. Man trocknete die vereinigten organischen Phasen über MgSO₄ und adsorbierte direkt an Kieselgel. Säulenchromatographische Reinigung (PE (Petrolether, 40-60°C)/Et₂O (Diethylether) = 3:1) ergab den Benzylalkohol rac-6 als farbloses Öl.
1-(2'-Benzyloxyphenyl)-2-(hydroxymethyl)naphthalin (rac-6)
Ausbeute: 1,62 g (4,76 mmol; 96%).
IR (Film): ṽ = 3300 cm^-1 (s, O-H), 3125 (s, sh, C-H), 1580, 1560 (m, m, C=C),1478 (s), 1400 (s),1270 (m, C-OH), 1100 (s).
¹H-NMR (400 MHz, Aceton): δ = 4.02 (t, J = 5.5 Hz, 1 H, OH), 4.53, 4,58 (dd, dd jeweils ³J = 5.5 Hz und ²J = 18.7 Hz, je 1 H, CH₂OH), 5.00, 5.05 (d, d, J = 12.4 Hz, OCH₂C₆H₅), 7.01 – 7.04 (m, 2 H, Ar-H), 7.07 – 7.28 (m, 6 H, Ar-H), 7.32 – 7.48 (m, 4 H, Ar-H), 7.86 (d, J = 8.6 Hz, 1 H, Ar-H), 7.93 (t, J = 7.8 Hz, 2 H, Ar-H).
¹³C-NMR (100 MHz, Aceton): δ = 62.75 (CH₂OH), 70.39 (OCH₂C₆H₅), 113.9, 121.7, 125.8, 126.0, 126.3, 126.8, 127.5, 128.0, 128.1, 128.6, 128.8, 129.9, 132.4, 133.4, 133.6, 134.1, 138.1, 138.4, 157.2 (Ar-C).
MS (70 eV): m/z (%) 340 (8) [M⁺], 321 (5) [M⁺ – H₂O], 249 (22) [M⁺- C₇H₇], 231 (50) [M⁺- C₇H₇ - H₂O], 202 (18) [C₁₆H₉ ⁺], 91 (100) [C₇H₇ ⁺].
C₂₄H₂₀O₂ (HRMS): Ber. 340,1463 Gef. 340,1466.
Synthese des Bromethers rac-7
In 40 ml abs. Dichlormethan wurden 1,62 g (4.76 mmol) rac-6 gelöst und mit 2,50 g (9,52 mmol) PPh₃ (Triphenylphosphin), 3,10 g (9.52 mmol) (CBrCl₂)₂ (1,2-Dibromtetrachlorethan) (G. Bringmann, S. Schneider, Synthesis 1983, 139-141) versetzt. Die gelbe Reaktionsmischung wurde bis zum vollständigen Umsatz bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wurde direkt auf Kieselgel aufgezogen und durch Säulenchromatographie (PE /Et₂O = 5:1) gereinigt, wobei das gesuchte Produkt als orangefarbenes Öl anfiel.
1-(2'-Benzyloxyphenyl)-2-bromomethylnaphthalin (rac-7)
Ausbeute: 1,84 g (4,56 mmol, 96%).
IR (Film): ṽ = 3020, 2998 cm^-1 (m, m, CH), 1576, 1555 (m, m, C=C), 1475, 1429, 1200 (s, s, s), 1095, 1005, 804 (m, m, m).
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) = 4.38, 4.53 (d, d, J = 9.8 Hz, je 1 H, CH₂Br), 4.97, 5.00 (d, d, J = 12.8 Hz, je 1 H, OCH₂Ph), 6.94 – 6.99 (m, 2 H, Ar-N), 7.08 – 7.20 (m, 5 H, Ar-H), 7.31 – 7.52 (m, 5 H), 7.65 (d, 6.5 Hz, 1 H, Ar-H), 7.86 – 7.92 (m, 2 H Ar-H).
¹ ³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ = 33.15 (CH₂Br), 69.98 (OCH₂C₆H₅), 113.1, 121.1, 126.2, 126.3, 126.5, 126.9, 127.4, 127.9, 128.2, 128.3, 129.5, 131.8, 132.9, 133.2, 133.2, 136.0, 137.1, 156.3 (Ar-C).
MS (70 eV): m/r (%) = 404/402 (6/7) [M⁺], 323 (4) [M⁺- Br], 233 (100) [M⁺ – C₇H₆Br], 232 (99) [M⁺ – C₇H₇Br], 91 (86) [C₇H₇ ⁺].
C₂₄H₁₉OBr (HRMS): Ber. 402,0619 Gef. 402,0626.
Aminierung des ßromids rac-7
591,3 mg (1,47 mmol) rac-1l wurden in 20 ml Dimethylamin (Dimethylamin wurde direkt vor Durchführung der Reaktion aus einer Lösung des Hydrochlorids durch Zusatz von KOH-Plätzchen erzeugt und direkt in die Reaktionsmischung einkondensiert) gelöst und 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wurde überschüssiges HNMe₂ abdestilliert und der Rückstand an desaktiviertem Kieselgel (7,5% NH₃) gereinigt (PE /Et₂O = 10:1 → 5:1 ), wobei das Amin rac-1l als blaßbraunes Öl erhalten wurde.
1-(2'-Benzyloxyphenyl)-2-(N,N-dimethylaminomethyl)naphthalin (rac-1l) Ausb. 472,1 mg (1.28 mmol, 88%).
IR (Film): ṽ = 3059, 2983, 3852, cm^-1 (m, s, m, C-H), 1599 (m, C=C), 1490, 1444, 1036, 695 (m, s, s, m, s, s).
¹H-NMR (400 MHz, [D₆]-Aceton): δ = 2.09 (s, 6 H, NCH₃), 3.27, 3.36 [d, J = 12.4 Hz, je 1 H, CH₂N(CH₃)], 5.01, 5.04 (d, d, je 1 H, OCH₂CsH₅), 7.00 – 7.03 (m, 2 H, Ar-H), 7.09 – 7.18 (m, 5 H, Ar-H), 7.22 (d, J = 8.3 Hz, 1 H, Ar-H), 7.32 - 7.44 (m, 4 H, Ar-H), 7.81 (d, J = 8.6 Hz, 1 H, Ar-H), 7.87-7.92 (m, 2 H, Ar-H).
¹ ³C-NMR (100 MHz, [D₆]-Aceton): δ = 45.8 (N(CH₃)₂), 62.0 (Ar-CH₂NMe₂), 70.3 (OCH₂C₆H₅), 113.7, 121.5, 125.9, 126.4, 127.1, 127.5, 127.8, 128.0, 128.1, 128.6, 128.8, 128.9, 129.8, 132.7, 133.6, 133.8, 135.9, 136.2, 138.3, 157.5 (Ar-C).
MS (70 eV); m/z (%): 367 (25) [M⁺], 322 (51) [M⁺ – HNEt₂], 276 (16) [M⁺ – C₇H₇], 260 (9) [M⁺ – C₇H₇O], 231 (100) [M⁺ – HNEt₂ – C₇H₇], 91 (6) [C₇H₇ ⁺].
C₂₆H₂₅NO: Ber.367,1936 Gef.367,1936 (MS).
Freisetzung der Phenolfunktion
In 10 ml abs. Dichlormethan wurden 466,1 mg (1,27 mmol) des benzylgeschützten Amins rac-1l gelöst, auf 0 °C abgekühlt und mit 2,54 mL einer 1 M-BCl₃ Lösung (in Xylol) (entspricht 2 Äquiv.) versetzt. Nach beendeter Reaktion (1 Stunde) wurde überschüssiges BCl₃ mit Methanol vernichtet und anschließend das Lösungsmittel abdestilliert und der Rückstand an desakt. Kieselgel (7,5% NH₃) (PE/Et₂O = 3:1 → 1:1) gereinigt. Der so erhaltene Aminoalkohol rac-1d wurde in Form eines blaßgelben Öls isoliert.
1-(2'-Hydroxyphenyl)-2-(N,N-dimethylaminomethyl)naphthalin (rac-1d)
Ausbeute: 221,3 mg (0,80 mmol, 63%).
IR (Film): ṽ = 3513, cm^-1 (s, br, O-H), 3060, 2925, 2853 (m, s, m, C-N), 1700, 1608, 1501, 1467, 1448, 757 (m, s, m, s, s, s).
¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ = 2.21 [s, 6 H, N(CH₃)], 3.11, 3.75 [d, d, J = 11.9 Hz, je 1 H, CH₂N(CH₃)₂], 6.96 - 6.99 (m, 2 H, Ar-H), 7.18 (d, J = 7.8 Hz, 1 H, Ar-H), 7.25 – 7.43 (m, 5 H, Ar-H), 7.76 – 7.80 (m, 2 H, Ar-H), 11.10 (s, br., 1 H, -OH).
¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃): δ = 43.9 [N(CH₃)₂], 63.0 [CH₂N(CH₃)₂], 119.8, 120.7, 125.7, 125.9, 127.1, 127.1, 127.5, 128.0, 128.6, 129.2, 132.1, 132.4, 133.5, 133.7, 137.4, 156.5 (Ar-C).
MS (70 eV); m/z (%): 277 (33) [M⁺], 262 (6) [M⁺ – CH₃], 231 (43) [M⁺ – C₂H₆O], 43 (100) [C₃H₇ ⁺].
C₁₉H₁₈NO: Ber.277,1467 Gef.277,1465 (MS).
Darstellung des Triflats rac-1c
221,3 mg (0,80 mmol) des Alkohols rac-1d wurden unter Argon in 10 ml abs. Dichlormethan gelöst, mit 360 mg (3,20 mmol) DABCO (1,4-Diazabicyclooctan) versetzt, auf 0 °C abgekühlt und 30 Minuten bei dieser Temp. gerührt. Dann tropfte man über einen Zeitraum von 2 Minuten 0,33 ml (2,40 mmol) Tf₂O (Trifluormethansulfonsäureanhydrid) hinzu und rührte, bis die DC-Kontrolle (Kieselgel, PE/Et₂O = 3:1) vollständigen Umsatz anzeigte (ca. 8 Stunden). Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand an Kieselgel adsorbiert. Säulenchromatographie (PE/Et₂O = 10:1) lieferte rac-1c nach Umkristallisation als hellgelbes Pulver.
1-(2'-Trifluormethansulfonoxyphenyl)-2-(N,N-dimethylaminomethyl)naphthalin (rac-1c)
Ausbeute: 221,3 mg (0,55 mmol, 69%).
Schmp.: 157°C (Et₂O/PE).
IR (KBr): ṽ = 3020, 2980 (m, m, C-H), 1654 (m), 1560 (m), 1420 (s), 1218 (s), 1135 (m), 889 (m), 773 (m).
¹H-NMR (400 MHz, [D₆]-Aceton): 2.43, 2.97 [t, t, J = 2.5 Hz, je 3 H, N(CH₃)₂], 4.59, 4.67 [d, d, J = 13.6 Hz, je 1 H CH₂N(CH₃)], 7.40 – 7.47, m, 2 H, Ar-H), 7.55 (m_c, 1 H, Ar-H), 7.61 (d, J = 7.8 Hz), 7.66 – 7.74 (m, 3 H, Ar-H), 7.84 (d, J = 8.7 Hz, 1 H, 3-H), 7.99 (d, J = 8.7 Hz, 4-H), 8.09 (d, J = 8.6 Hz, 1 H , Ar-H).
¹³C-NMR (100 MHz, [D₆]-Aceton): 44.9, 46.1 [N(CH₃)₂], 59.5 [CH₂N(CH₃)₂], 119.4 (q, J = 319 Hz, CF₃), 123.1, 127.5, 128.0, 128.2, 129.0, 129.8, 130.3, 130.5, 131.8, 132.2, 133.6, 135.0, 137.1, 148.3 (Ar-C).
MS (70 eV); m/z (%): 409 (12) [M⁺], 408 (10) [M⁺ - H], 366 (6) [M⁺ – C₂H₅N], 260 (98) [M⁺- Tf], 244 (63) [M⁺- OTf], 58 (100) [C₃H₈N].
C₂₀H₁₇F₃O₃S (M⁺- H): Ber. 408,0881 Gef. 408,0885 (MS).
Beispiel 2: Darstellung der antitrypanosomal aktiven Verbindung (M,R-1k)
O-Isopropylierung des Amids (M,R)-5a
1,16 g (2,94 mmol) des Amids (M,R)-5a (hergestellt nach G. Bringmann, M. Breuning, S. Tasler, H. Endress, C. L. J. Ewers, L. Göbel, K. Peters, E.-M. Peters, Chem. Eur. J. 1999, 5, 3029-3038) wurden in 120 ml Aceton gelöst und nach Zugabe von 1,18 ml (2,01 g, 11,8 mmol) Isopropyliodid sowie 1,92 g (5,88 mmol) Cs₂CO₃ 2 Tage bei Raumtemp. gerührt (DC-Kontrolle: Kieselgel, PE/Et₂O = 1:1). Die anorganischen Salze wurden durch Filtration entfernt, das Lösungsmittel im Vakuum abdestilliert und der Rückstand an Kieselgel (PE/Et₂O = 10:1) gereinigt, wodurch man (M,R)-8 als farbloses Öl erhielt. Umkristallisation aus Et₂O/PE lieferte das O-isopropylgeschützte Amid (M,R)-8 als weißen Feststoff.
(M,1''R)-1-[2'-Isopropoxy-4',6'-dimethylphenylJ-2-naphthoesäure-1''-phenylethylamid [(M,R)- 8]
Ausbeute: 1,22 g (2,79 mmol, 95%).
Schmp. 143 °C (Et₂O/PE).
[α] 21 / D = – 16.4 [c = 1,26 in CHCl₃ (Chloroform)].
IR (KBr): ṽ = 3447 cm^-1 (m, N-H), 2928 (m, C-H), 1649 (s, C=O), 1519 (s, C=C), 1102, 805 (w, w).
¹H-NMR (250 MHz, CDCl₃): δ = 0.92 [d, J = 6.1 Hz, 3 H, OCH(CH₃)₂], 1.10 [d, J = 6.1 Hz, 3 H, OCH(CH₃)₂], 1.45 (d, J = 6.9 Hz, 3 H, NCHCH₃), 1.76 (s, 3 H, 4'-Me), 2.49 (s, 3 H, 8'-Me), 4.37 (qui., J = 6.1 Hz, 1 H, NCHCH₃), 5.12 (sept., J = 6.1 Hz, 1 H, OCH(CH₃)₂), 6.60 (d, J = 6.0 Hz, 1 H, NH), 6.84 – 6.91 (m, 4 H, Ar-H), 7.21 – 7.60 (m, 6 H, Ar-H), 7.85 – 7.92 (m, 3 H, Ar-H).
¹³C-NMR (63 MHz, CDCl₃): δ = 19.7, 21.5, 21.7, 21.7, 22.4 (4'-Me, 6'-Me, C-2'', CH(CH₃)₂), 49.1 (C-1''), 70.3 [OCH(CH₃)₂], 112.1, 123.9, 124.8, 125.6, 126.0, 126.2, 126.3, 126.5, 126.7, 127.6, 127.9, 128.1, 132.1, 132.9, 134.0, 134.1, 138.8, 139.2, 143.1, 155.0 (Ar-C), 168.6 (C=O).
MS (70 eV): m/r (%) = 437 (26) [M⁺], 422 (1) [M⁺ – CH₃], 394 (1) [M⁺ – C₃H₇], 379 (1) [M⁺ – C₃N₇ – CH₃], 274 (100) [M⁺ – C₈H₁₀N – C₃H₇], 259 (9) [M⁺ – C₈H₁₀N – C₃H₇ - CH₃], 120 (22) [C8H₁₀N⁺].
C₃₀H₃₁NO₂ (437,59) Ber. C 82.34 H 7.14 N 3.20
Gef. C 81.82 N 7.24 N 2.94
N-Methylierung des Amids (M,R)-8
1,32 g (2,94 mmol) des Amids (M,R)-8 wurden in 80 ml Benzol gelöst, mit 4,90 g (35,3 mmol) K₂CO₃, 2,41 g (60,3 mmol) NaOH sowie 109 mg (294 μmol) Tetrabutylammoniumiodid versetzt und auf 60 °C erwärmt. Nach Zugabe von 835 mg (5,88 mmol) Methyliodid wurde die Suspension 3 Tage zum Sieden erhitzt (DC-Kontrolle: Kieselgel, PE/Et₂O = 3:1 ). Nach beendeter Reaktion vernichtete man überschüssiges Mel durch Zusatz weniger mL konz. NH₃, entfernte das Lösungsmittel in vacuo, nahm in etwas Et₂O auf und filtrierte über Celite. Das Filtrat wurde vom Lösungsmittel befreit und an Kieselgel chromatographiert (PE/Et₂O = 5:1), wobei das Amid (M,R)-10 in Form schwach gelblicher Kristalle anfiel, die aus CH₂Cl₂ umkristallisiert wurden.
(M,1''R)-1-[2'-Isopropoxy-4;6'-dimethylphenyl]-2-naphthoesäure-N-methy1-1''phenylethylamid [(M,R)-10]
Ausb. 1,23 g (2,65 mmol, 90%).
Schmp. 156 – 158 °C (CH₂Cl₂/PE).
[α] 21 / D = + 237.2 [c = 1,03 in CNC1₃].
IR (KBr): ṽ = 3025 cm^-1 (m, Ar-H), 2973, 2922 (s, s, C-H), 1635 (s, C=O), 1618 (m, C=C), 1449, 1312, 1117 (m, m, m), 1083 (m, C-O), 817, 758, 703, 597 (m, m, m, m).
Das Produkt lag als Gemisch zweier Rotamere um die C-N-Bindung vor (Verhältnis: Rotamer A/Rotamer B = 5/1 nach ¹H-NMR).
¹H-NMR (250 MHz, CDCl₃): Rotamen A: δ = 0.71 (d, J = 6.1 Hz, 3 H, OCH(CH₃)₂), 0.77 (d, J = 6.1 Hz, 3 H, OCH(CH₃)₂), 1.55 (d, J = 7.0, 3 H, NCHCH₃), 2.05 (s, 3 H, 6'-Me), 2.49 (s, 6 H, 4'-Me und NCH₃), 4.25 (sept., J = 6.1 Hz, 1 H, OCH(CH₃)₂), 6.02 (q, J = 7.0 Hz, 1 H, NCHCH₃), 6.62 (s, 1 H, 3'-H oder 5'-H), 6.83 (br., 3 H, Ar-H), 7.16 – 7.19 (m, 3 H, Ar-H), 7.29 – 7.51 (m, 4 H, Ar-H), 7.86 – 7.91 (m, 2 N, Ar-H); Rotamer B: δ = 0.86 (d, J = 6.1 Hz, 3 H, OCH(CH₃)₂), 0.98 (d, J = 6.1 Hz, 3 H, OCH(CH₃)₂), 2.07 (s, 3 H, 6'-Me), 2.41 (s, 6 H, 4'-Me und NCH₃), 4.40 (sept., J = 6.1 Hz, 1 H, CH(CH₃)₂), 5.16 (q, J = 7.0 Hz, 1 H, NCHCH₃), 6.67 (s, 1 H, 3'-H oder 5'-H), 7.74 – 7.81 (m, 2 N, Ar-H). Nicht beobachtete Signale für Rotamer B fallen vermutlich mit den Werten für Rotamen A zusammen.
¹³C-NMR (63 MHz, CDCl₃): Rotamer A: δ = 15.4 (NCCH₃), 20.4, 21.5, 21.7, 21.9 (4'-Me, 6'-Me, CH(CH₃)₂), 30.9 (NCH₃), 49.4 (NCHC), 69.3 (CH(CH₃)₂), 110.6, 123.0, 123.5, 124.3, 125.9, 126.0, 126.2, 126.4, 127.0, 127.4, 127.8, 128.5, 132.4, 132.9, 133.1, 138.2, 138.4, 140.3, 141.6, 155.6 (Ar-C), 171.2 (C=O); Rotamer B: δ = 19.3, 21.5, 22.0, 22.8 (4'-Me, 6'-Me, CH(CH₃)₂), 27.8 (N-CH₃), 55.8 (NCHC), 69.9 (CH(CH₃)₂), 111.3, 123.5, 124.0, 126.6, 126.7, 127.1, 127.9, 132.6, 133.1, 134.5, 140.2, 140.6 (Ar-C), 171.9 (C=O). Nicht beobachtete Signale für Rotamer B fallen vermutlich mit den Werten für Rotamer A zusammen.
MS (70 eV): m/z (%) = 451 (73) [M⁺], 408 (8) [M⁺ – C₃H₇], 392 (4) [M⁺ – OC₃H₇], 274 (100) [M⁺ – C₁₂H₁₉N], 77 (3) [C₆H₅ ⁺], 43 (4) [C₃H₇ ⁺].
C₃₁H₃₃NO₂(451,61) Ber. C 82.45 H 7.36 N 3.10
Gef. C 81.69 H 7.06 N 2.99
Reduktion des Amids (M,R)-9
1,36 g (2,94 mmol) Amid (M,R)-9 gelöst in 80 ml THF (Tetrahydrofuran) wurden unter Eiskühlung und Argon-Atmosphäre vorsichtig portionsweise mit 1,12 g (29,4 mmol) LiAlH₄ versetzt. Nach 45 Minuten Rühren bei Raumtemp. zeigte die DC-Kontrolle (PE/Et₂O = 10:1) eine vollständige Umsetzung an, so daß überschüssiges LiAlH₄ durch schwach saure Aufarbeitung mit 0.1 M HCl zerstört wurde. Die wäßrige Phase wurde erschöpfend mit EtO isoliert, und die vereinigten organischen Phasen wurden über MgSO₄ getrocknet. Aufreinigung mittels Säulenchromatographie (PE/Et₂O = 3:1 -i Et₂O) lieferte (M,R)-1m als leicht gelbliches Öl.
(M,1''R)-1-[2'-(1-Methyl)ethoxy-4;6'-dimethylphenyl-2]-(N-methyl-(N-1''phenyl-ethyl)-aminomethylnaphthalin [(M,R)-1m]
Ausb. 1,08 g (2,41 mmol, 82%).
[α] 23 / D = + 23.8 [c = 1,25 in CHCl₃].
IR (Film): ṽ = 3050 cm^-1 (m, Ar-H), 2970 (s, C-H), 1605 (m, C=C), 1450, 1308, 1114 (m, m, m), 1069 (m, C-O), 817, 760, 698 (w, w, m).
¹H-NMR (250 MHz, CDCl₃): δ = 0.76 (d, J= 6.1 Hz, 3 H, CH(CH₃)₂), 0.85 (d, J = 6.1 Hz, 3 H, CH(CH₃)₂), 1.24 (d, J = 6.7 Hz, 3 H, NCHCH₃), 1.77 (s, 3 H, 6'-Me), 2.02 (s, 3 H, 4'-Me), 2.42 (s, 3 H, NCH₃), 3.31 (d, J = 14 Hz, 1 H, NCH₂Aryl), 3.38 (d, J = 14 Hz, 1 H, NCH₂Aryl), 4.21 (sept., J = 6.1 Hz, 1 H, NCHCH₃), 6.64, 6.76 (s, s, je 1 H, 3'-H und 5'-H), 7.10 – 7.40 (m, 8 H, Ar-H), 7.80 – 7.86 (m, 3 H, Ar-H).
¹ ³C-NMR (63 MHz, CDCl₃): δ = 18.1, 20.0, 21.7, 21.8, 30.9 (4'-Me, 6'-Me, CH(CH₃)₂ und (NCCH₃), 38.8 (NCH₃), 56.3, 63.2 [NCH₂Aryl, und NCHCH₃], 69.5 [OCH(CH₃)₂], 111.8, 122.7, 124.7, 125.1, 125.3, 125.9, 126.5, 126.7, 126.9, 127.5, 127.7, 128.0, 132.6, 134.3, 136.2, 137.7, 138.6, 145.4, 155.7 (Ar-C).
MS (70 eV): m/z (%) = 437 (70) [M⁺], 422 (73) [M⁺ – CH₃], 332 (34) [M⁺ – C₈H₉], 303 (95) [M⁺ – C₉H₁₂N], 259 (100) [M⁺ – C₉H₁₂N – C₃H₇], 43 (3) [C₃H₇ ⁺].
C₃₁H₃₅NO (HRMS): Ber. 437,2719 Gef. 437,2711.
Freisetzung der Phenolfunktion von (M,R)-1m mittels HBr
524 mg (1,20 mmol) (M,R)-1m wurden in 50 ml 48 proz. HBr gelöst und unter Rühren 16 Stunden zum Sieden erhitzt. Anschließend wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt, der Rückstand in Methanol aufgenommen und mit konz. Ammoniak auf pH 12 eingestellt. Die Lösung wurde über Alox (Aluminiumoxid) (basisch, Akt. III) filtriert, das Lösungsmittel im Vakuum entfernt und das verbleibende rote Öl säulenchromatographisch [desakt. Kieselgel (7.5% Ammoniak), PE/Et₂O = 3:1 → 1:1) gereinigt. Man erhielt neben 39 mg (89 μmol, 7 %) Edukt, (M,R)-1g als zitronengelbes iOI.
(M,1''R)-1-[2'-hydroxy-4;6'-dimethylphenyl]-2-(N-methyl-N-(1''-phenylethyl)aminomethylnaphthalin [(M,R)-1g]
Ausb. 430 mg (1,09 mmol, 91%).
[α] 21 / D = – 25.8 (c = 1,15 in CHCl₃).
IR (Film): ṽ = 3057, 2971, 2913, 2846 cm^-1 (m, s, s, m, C-H), 1614, 1565, 1494, 1312, 1154 , 1048, 838, 809, 762, 702 (s, m, m, s, s, w, m, m, w, s).
¹H-NMR (400 MHz, [D₆]-Aceton): δ = 1.26 [d, J = 6.8 Hz, 3 H, NCH₃], 1.71 (s, 3 H, 6'-Me), 2.07 (s, 3 H, 4'-Me), 2.36 (s, 3 H, NCH₃), 3.35 (d, J = 12.1 Hz, 1 H, NCH₂C), 3.56 (d, J = 12.1 Hz, 1 H, NCH₂C), 3.59 (q., J = 6.8 Hz, 1 H, NCHCH₃), 6.61 (s, 2 H, 3-H' und 5'-H), 7.19 -7.44 (m, 8 H, Ar-H), 7.78 (d, J = 12.8 Hz, 1 H, Ar-H) 7.88 – 7.91 (m, 2 H, Ar-N), 8.12 (s, br., 1 H, OH).
¹³C-NMR (100 MHz, [D₆]-Aceton): δ = 18.3, 20.1, 21.4, [4'-Me, 6'-Me und NCHCH₃], 38.8 (N-CH₃), 57.3, 64.2, (NCH₂Aryl und NCHCH₃), 116.0, 123.2, 123.9, 126.1, 126.4, 126.7, 127.7, 128.0, 128.7,128.8, 128.9, 133.9, 134.1, 135.3, 136.9, 138.7, 139.0, 144.5, 156.0 (Ar-C).
MS (70 eV): m/z (%) = 395 (11) [M⁺], 380 (10) [M⁺ – CH₃], 291 (34) [M⁺ – C₈H₁₀N], 303 (95) [M⁺ – C₉H₁₂N], 259 (100) [M⁺ – C₉H₁₂N].
C₃₁H₃₅NO (HRMS): Ber. 395,2256 Gef. 395,2257.
Darstellung des Triflats (M,R)-1k
650 mg (1,65 mmol) (M,R)-1g wurden in 15 ml Dichlormethan gelöst und bei 0°C mit 555 mg (4,95 mmol) DABCO versetzt. Nach 30 Minuten wurden bei dieser Temperatur 411 μl Tf₂O hinzugetropft und auf Raumtemp. erwärmt. Nach beendeter Reaktion wurde direkt an desaktiviertem (7.5% NH₃) Kieselgel adsorbiert und säulenchromatographisch (PE/Et₂O = 5:1) gereinigt. Man erhielt (M,R)-1 k als orangefarbenes ö1, das durch Kristallisation aus Et₂O/PE als ockerfarbener Feststoff anfiel.
(M,1''R)-1-[4',6'-dimethylphenyl-2'-trifluormethansulfoneloxy]-2-(N-methyl-N(1''-phenyl-ethyl)aminomethylnaphthalin [(M,R)-1k]
Ausbeute: 774 mg (1,47 mmol, 89%)
Schmp. 37 °C (Et₂O/PE).
[α] 19 / D = – 14.7 (c = 1,00 in CHCl₃).
IR (Film): ṽ = 3005, 2912 (m, s, C-H), 1592 (s, C=C), 1395, 1202, 1120, 805 (s, s, s, w).
¹H-NMR (400 MHz, [Ds]-Aceton): δ = 1.21 (d, J = 6.8 Hz, 3 H, NCHCH₃), 1.90 (s, 3 H, 6'-Me), 2.01 (s, 3 H, 4'-Me), 2.52, (s, 3 H, N-CH₃), 3.35 (d, J = 11.8 Hz, 1 H, NCH₂Aryl), 3.39 (d, J = 11.8 Hz, 1 H, NCH₂Aryl), 3.46 (q, J = 6.8 Hz, 1 H, NCHCH₃), 7.18 – 7.26 (m, 3 H, Ar-H), 7.28 – 7.29 (m, 4 H, Ar-H), 7.36 – 7.41 (m, 2 H, Ar-H), 7.45 (m_c, 1 H, Ar-H), 7.85 (d, J = 8.6 Hz, 1 H, Ar-H), 7.93 - 8.00 (m, 2 H, Ar-H).
¹³C-NMR (100 MHz, [D₆]-Aceton): δ = 19.1, 20.1, 21.1, (4'-Me, 6'-Me und C-2''), 39.1 (NMe), 57.6, 64.9 ((NCH₂Aryl und NCHCH₃), 119.7 (Ar-C), 129.2 (g, J = 324 Hz, CF₃), 125.9, 126.4, 127.1, 127.6, 128.1, 128.3, 128.9, 129.3, 129.4, 131.2, 131.6, 133.0, 133.8, 137.5, 140.9, 141.7, 145.2, 148.7 (Ar-C).
MS (70 eV): m/r (%) = 527 (16) [M⁺], 512 (38) [M⁺- CH₃], 422 (7) [M⁺ – C₈H₉], 259 (100) [M⁺ – C₉H₁₂N].
C₂₉H₂₈F₃NO₃S (527,59) Ber. C 66.02 H 5.35 N 2.65 S 6.08
Gef. C 65.87 H 5.48 N 2.60 S 5.94
Beispiel 3: Darstellung des neuroprotektiven 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalins rac-1f
Die Darstellung von rac-1f aus rac-4b erfolgte analog zu rac-1l aus rac-4a (siehe Beispiel 1).
Im folgenden sind die physikalischen und spektroskopischen Daten angegeben.
Schmp.: 98°C (PE/Et₂O).
IR (Film): ṽ = 3058, 2934, 2843, 2765 cm^-1 (m, s, m, m, C-H), 1605, 1585, 1499, 1542, 1414, 1336, 1225, 1205, 1156, 1127, 1058, 1036, 992, 945, 813, 755 (s, s, w, m, m, m, m, m, s, m, m,w, w, w, w).
¹H-NMR (400 MHz, [D6]-Aceton): δ = 2.09 [s, 6 H, N(CH₃)₂], 3.23 [s, 2 N CH₂N(CH₃)₂], 3.58 (s, 6 H, 2'-OCH₃ und 6'-OCH₃), 3.92 (s, 3 H, 4'-CH3), 6.41 (s, 2 H, 3'-H und 5'-H), 7.26 – 7.41 (m, 3 H, Ar-H), 7.75 – 7.86 (m, 3 H, Ar-H).
¹ ³C-NMR (100 MHz, CDCl₃): δ = 30.90 (NMe₂), 42.6 (CH₂NMe₂), 55.46 (4'-OMe), 55.66 (2'-OMe und 6'-OMe), 86.47, 90.88, 106.6, 107.8, 126.3, 126.5, 127.2, 128.2, 128.7, 130.6, 132.9, 133.7, 158.6, 162.0 (Ar-C).
MS (70 eV); m/z (%): 351 (28) [M⁺], 336 (100) [M⁺ – CH₃], 306 (20) [M⁺ – C₃H₉], 290 (7) [M⁺ – C₃H₉O], 276 (11) [M⁺ – C₃H₉NO], 260 (7) [M⁺ – C₃H₉NO₂].
C₂₅H₂₂NO₃ (HRMS): Ber. 351.1834 Gef. 351.1835.
Beispiel 4: Biologische Eigenschaften der Verbindungen
a) Antitumorale Aktivität
Die antitumorale Aktivität von Phenyl-2-aminomethylnaphthalinen wurde an einer Reihe von Tumor-transformierten Zellen, wie den L5178y Mäuselymphomzellsystem (ATCC CRL 1722), getestet. Wie beschrieben (W. E. G. Müller, R. K. Zahn, Cancer Res. 1979, 39, 1102-1107) wurden die Zellen in RPMI-Medium, dem 10% fötales Kälberserum zugesetzt worden war, kultiviert. Als Inokulumskonzentration wurde 10.000 Zellen/ml gewählt. Zum Startzeitpunkt wurde die ausgewählte Substanz zugegeben und die Kultur 72 Stunden inkubiert. Danach wurde die Anzahl der lebenden Zellen mittels des kolorimetrischen XTT-Ansatzes bestimmt und mit einem ELISA-Reader ausgewertet (siehe: D. A. Scudiero, R. N. Shoemaker, K. D. Paull, A. Monks, S. Tierney, T. H. Nofziger, M. J. Currens, D. Seniff, M. R. Boyd, Cancer Res. 1988, 48, 4827-4833; T. Daum, J. Engels, M. Mag, J. Muth, S. Lücking, H. C. Schnöder, E. Matthes, W. E. G. Müller, Inteivirology 1992, 33, 65-75).
Die ED₅₀-Konzentrationen einiger ausgewählter 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalin-Derivate für die genannten Tumorzellinien wurden nach Durchführung des kolorimetrischen XTT-Tests durch lineare Regression bestimmt (L. Sachs, Angewandte Statistik. Springer, Berlin, 1984 1-168). Die jeweiligen Mittelwerte mit der dazugehörigen Standardabweichung wurden aus 10 unabhängigen Experimenten ermittelt.
Ergebnis: Es wird deutlich, daß die 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalin-Derivate bei [den] niedrigen Konzentrationen von bis zu 1,5 μg/ml die Zellproliferation nach 72 Stunden entscheidend reduzieren. Besonders stark hemmend – und hochselektiv – ist rac-1c mit einer Aktivität (EDso-Konzentration) von 1,510,2 ug/ml. Auch die übrigen Derivate besitzen eine ausgeprägte Wirkung auf die Zeltproliferation von L5178y-Zellen. Die EDso-Konzentration der 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalin-Derivate in Zellkulturansätzen von PC-12-Zellen, Sarcoma-180-Zellen als auch von HeLa-S3-Zellen liegt ebenso niedrig. Beispielhaft kann auch das Derivat rac-1n erwähnt werden, das bei L5178y-Zellen eine ED₅₀-Konzentration von 0,6±0,1 μg/ml aufweist; vergleichbar ist diese Konzentration in Ansätzen mit PC-12-Zellen bei 2,4±0,2 μg/ml, mit Sarcoma 180-Zellen bei 0,510,1 μg/ml und mit HeLa S3-Zellen bei 0,65±0,1 μg/ml.
Deshalb wird geschlossen, daß das Antitumorspektrum der 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalin-Derivate breit ist.
b) Antitrypanosomale Aktivität
Die antitrypanosomale Aktivität von 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalinen wurde an T. cruzi infizierten L6-Zellen durchgeführt. Wie bereits beschrieben (G. Bringmann, A. Hamm, C. Günther, M. Michel, R. Brun, V. Mudogo, J. Nat. Prod. 2000, 63, 1465-1470) wurden die L-6 Zellen in RPMI-Medium, dem 10% fötales Kälberserum zugesetzt worden war, ausgesetzt. Nach 24 Stunden wurden 5000 trypomastigote Formen von T. cruzi zugegeben und die Kultur 96 Stunden bei 5% CO₂-Gehalt und 37°C inkubiert. Die Zytotoxizität wurde anhand von nicht infizierten L-6-Zellen bestimmt, die nach 3 Tagen Inkubation mit der Substanz mittels Alamar Blue auf Viabilität getestet wurden.
Ergebnis: Wie beispielhaft die Substanz (M,R)-1k zeigt, besitzen 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalin-Derivate eine ausgeprägte Wirkung gegen T. cruzi, den Erreger der Chagas-Krankheit (F. Koberle, Adv. Parasitol. 1968, 6, 63-69). Im In-vitro-Modell wies (M,R)-1 k einen IC₅₀-Wert von 2.495 auf, zeigte aber keine Anzeichen von Zytotoxizität (IC₅₀ > 90 μg/ml). Auch die anderen Verbindungen zeigten gute Aktivitäten.
c) Neuroprotektive Aktivität
Materialien: Es wurden die gleichen Materialien wie früher beschrieben verwendet (S. Perovic, A. Wichels, C. Schütt, G. Gerdts, S. Pahler, R. Steffen, W.E.G. Müller, Environm. Toxicol. Pharmacol. 1998, 6, 125-133). Fura-2-acetoxymethylester (Fura-2-AM) wurde von Molecular Probes (Leiden, Niederlande), RPMI 1640 von Biochrom KG (Berlin, Deutschland) und die Antikörper "Mäuse-anti-neurofilament" (68 kDa) und „Mäuse-anti-glialfibrillary-acidic-Protein" (Anti-GFAP) von Roche Diagnostics (Mannheim, Deutschland) bezogen.
Zellen: Die kortikale Zeltkultur wurde aus den Gehirnen von 18-19 Tage alten Rattenembryonen nach R. 1. Freshney (in: Culture of Animal Cells: A Manual of Basic Technique (Hrsg.: R. 1. Freshney), A. R. Liss Inc., New York, 1987, S. 257-288) erhalten; die Methode wurde leicht modifiziert (S. Perovic, C. Schleger, G. Pergande, S. Iskric, H. Ushijima, P. Rytik, W. E. G. Müller, Eur. J. Pharmacol. 1994, 288, 27-33). Zusammenfassend wurden die Neuronen aus den Cerebral-Hemisphären isoliert und diese in "Hank's ballanced salt solution" ohne Ca²+ and Mg²+ (HBSS) überführt. Vorher wurden die Zellen in HBSS mit Hilfe von 0,025% (w/v) Trypsin (10 min; 37°C) dissoziiert. Die proteolytische Reaktion wurde mit 10% (v/v) fötalem Kälberserum (FKS) beendet. Die Einzelzelt-Suspension wurde zentrifugiert und das resultierende Pellet mit Medium aufgenommen. Die Zellen wurden in eine mit Poly-i-Lysin (5 μg/ml, 300 μl/cm²) beschichtete Kammer mit einer Zelldichte von 2,0 × 10⁵ Zellen/cm² ausplattiert. Das DMEM/10% FKS-Medium wurde zwei Tage nach der Isolierung entfernt und durch DMEM/Serum-freies Medium ersetzt. Sieben Tage nach der Isolierung erfolgte eine Immunfärbung mit „Anti-Neurofilament"-Antikörper (gegen ein 68-kDa-Protein) als Marken für Neuronen und „Anti-GFAP" als Marken für Gliazellen. Die Kulturen enthalten >80% Neuronen; die restlichen Zellen waren GFAP-positiv und stellten hauptsächlich Astrozyten dar.
Beladen von Neuronen mit Fura-2-AM: Die intrazelluläre Ca²⁺-Konzentration ([Ca²⁺]i) wurde durch Fluoreszenzmessungen bestimmt. Als Parameter wurde das Verhältnis der Fluoreszenz des Ca²⁺-Indikatorfarbstoffes Fura-2-AM bei den Wellenlängen von 340 und 380 nm herangezogen (G. Grynkiewicz, M. Poenie, R.Y. Tsien, A new generation of Ca²⁺ indicators with greatly improved fluorescence properties. J. Biol. Chem., 260 (1985) 3440-3450). Die Neuronen wurden mit 4 μM Fura-2-AM in DMEM/Serum-freiem Medium (plus 1 % bovines Serumalbumin) 45 Minuten lang bei 37°C beladen. Nach der Inkubation wurden die Zellen zweimal mit Medium gewaschen und weitere 45 Minuten bei 37°C inkubiert. Diese Inkubationszeit ist ausreichend, um die Neuronen mit „inaktivem [insensitivem]-Fura-2" zu beladen; anschließend kann dann die intrazelluläre Hydrolyse durch Esterasen erfolgen.
Eine Calcium-Kalibrierungskurve wurde nach der Methode von Grynkiewicz et al. (Literatur siehe oben) erstellt. Fluoreszenzbilder wurden bei 340 nm und 380 nm erhalten. Der Quotient aus den beiden Fluoreszenzdaten (340/380 nm) wurde berechnet und für die Erstellung der Kalibrierungskurve eingesetzt. Eine Einheit 1.0 aus diesem Quotient (340/380 nm) entspricht 228 nM [Ca²⁺]i.
Versuchsansatz – Änderungen des Calciumspiegels in Neuronen: In dieser Versuchsreihe wurden die Zellen zuerst mit Fura-2-AM beladen und anschließend mit den verschiedenen Testsubstanzen (in Locke's Lösung; 154 mM NaCl, 5,6 mM KCI, 3,6 mM NaHCO₃, 5,6 mM Glucose und 10 mM Hepes; pH 7,4; ohne CaCl₂) behandelt. Die Testsubstanzen wurden in 100% Dimethylsulfoxid (DMSO) (Konzentration: 20 mg/ml) gelöst und bei -20°C gelagert. Neuronen wurden im ersten Ansatz (Kontrollen) 5 Minuten mit 0,25% DMSO (Kontrolle) stimuliert; nach 10 Minuten wurde 200 μl L-Glutaminsäure (L-Glu) und 2,4 mM CaCl₂ zu den Zellen gegeben. Im Testansatz (mit den erfindungsmäßigen Substanzen) wurden die Zellen mit den Test-Derivaten zunächst vorinkubiert (5 Minuten mit 1 μg/ml der 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthaline); anschließend wurden 200 μM L-Glu und 2,4 mM CaCl₂ zu den Ansätzen zugegeben (für 10 min), und es wurde die Änderung des Calciumspiegels der vorinkubierten Neuronen bestimmt. Die Versuchsdauer zur Messung des [Ca²⁺]_i Spiegels betrug 20-22 Minuten.
Zur Durchführung wurden die Zellen auf poly-L-Lysin beschichtete Deckgläsern im 4 Kammersystem (Lab-Tek Chamber Slide System; Nunc, Wiesbaden, Deutschland) kultiviert. Mit einem "inverted-stage"-Mikroskop Olympus IX70 mit apochromatisch reflektierendem Licht und dem Fluoreszenzobjektiv UApo40X/340 wurden die Fluoreszenzmessungen durchgeführt. Die Zellen wurden alternierend mit Licht der Wellenlängen 340 und 380 nm mit Hilfe eines computergesteuerten Schmalband-Interferenzfilters vor einer 100-W-Xenon Lampe beleuchtet. Zusätzlich wurde ein 0,25-ND-Filter für 380 nm benutzt. Die Fluoreszenzemissionen bei 510 nm wurden mit einer CCD-Kamera (Modell C2400-87; Hamamatsu, Herrsching, Deutschland) aufgezeichnet. Die Bilder wurden computergestützt, mit dem Imaging-System Argus 50, Hamamatsu, digitalisiert als 256x256 pixels mit 8-bit-Arrays. Das Fluoreszenzverhältnis 340nm / 380nm wurde durch Division der Bilderpaare ermittelt.
Statistik: Die Ergebnisse wurden mittels eines gepaarten Student^`s t-test (L. Sachs, Angewandte Statistik (Springer, Berlin) (1984) Seite 1-552 ausgewertet.
Ergebnisse
Die Neuronen wurden mit dem betreffenden 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalin vorinkubiert und anschließend mit Glutamat behandelt. In den Kontrollen (ohne 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalin-Derivate) wurde ein Anstieg von intrazellulärem Calcium ([Ca²⁺]_i) von 1,521±0,568 (280%) gemessen. In der folgenden Tabelle ist die prozentuale Reduktion des [Ca²⁺]_i-Spiegels angegeben. Dabei wurden die Kontrollen (ohne Vorinkubation mit der Testsubstanz) 100% gesetzt.
Ergebnis: Aus diesen Daten wird signifikant deutlich, daß die hier aufgeführten 1-Phenyl-2-aminomethylnaphthalin-Derivate eine hohe neuroprotektive Aktivität besitzen.

Claims

Verbindung der allgemeinen Formel 1:
worin R¹, H, ein unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, ein Alkenyl, ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryloder Heteroanlrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe, eine Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen oder ein Heteroatomsubstituent wie OR, NR₂ oder SR ist, wobei R ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe, eine Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen sein kann; R² N, ein unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe oder eine Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen oder ein Heteroatomsubstituent wie OR, NR₂ oder SR ist, wobei R ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe, eine Acylgruppe, wie B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen sein kann; oder R¹ und R² miteinander in der Art verknüpft sind, daß dadurch ein stickstoffhaltiger unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter aromatischer oder gesättigter Ring erhalten wird, R³ und R⁴ jeweils einer oder mehrere gleiche oder verschiedene Substituenten sind, ausgewählt aus H, unsubstituiertem, monosubstituiertem und/oder polysubstituiertem C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, unsubstituiertem, monosubstituiertem und/oder polysubstituiertem Aryl- oder Heteroanlrest, unsubstituierter, monosubstituierter und/oder polysubstituierter Benzylgruppe, einer Acylgruppe, wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumanl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigter oder Heteroatom- oder arylsubstituierter Acylgruppe, Alkoxysubstituenten, wie z.B. -OMe, -OEt, -OnPr, -iPr, -OnBu, -OiBu, – OsecBu, -OtBu, dessen Alkylgruppe verzweigt, unverzweigt oder cyclisch ist, über ein Schwefelatom gebundene Alkylgruppe, wie z.B. -SMe, -SEt oder Sulfonylgruppe, wie z.B. -SO₃H, -SO₂Me, -SO₂CF₃, -SO₂C₆H₄CH₃ oder SO₂C₆HaCH₂Br oder einem Stickstoffsubstituenten, wie z.B. -NH₂, -NHR, – NRR' (mit R, R' = Alkyl, Aryl usw.), -NC, -NO₂, Fluor-, Chlor-, Brom-, lod-, – CN oder Heterosubstituent, oder R³ ein an zwei benachbarten Kohlenstoffatomen des Naphthalingerüsts kondensierter aromatischer oder gesättigter Ring ist, R⁴ H, unsubstituiertes, monosubstituiertes oder polysubstituiertes C₁-C₁₈-Alkyl, wobei das Alkyl gerade, verzweigt oder cyclisch sein kann, Alkenyl, ein unsubstituierter, monosubstituierter oder polysubstituierter Aryl- oder Heteroarylrest, eine unsubstituierte, monosubstituierte oder polysubstituierte Benzylgruppe oder eine Acylgruppe wie z.B. Formyl, Acetyl, Trichloracetyl, Fumaryl, Maleyl, Succinyl, Benzoyl, verzweigte oder Heteroatom- oder arylsubstituierte Acylgruppen, Alkoxysubstituenten, wie z.B. -OMe, -OEt, – OnPr, -iPr, -OnBu, -OiBu, -OsecBu, -OtBu, dessen Alkylgruppe verzweigt, unverzweigt oder cyclisch ist, eine über ein Schwefelatom gebundene Alkylwie z.B. -SMe, -SEt oder eine Sulfonylgruppe, wie z. B. -SO₃H, -SO₂Me, – SO₂CF₃, -SO₂C₆H₄CH₃ oder SO₂C₆HaCH₂Br oder ein Stickstoffsubstituent, wie z.B. -NH₂, -NHR, -NRR' (mit R, R' = A1ky1, Aryl usw.), -NC, -NO₂, Fluor-, Chlor-, Brom-, Iod-, -CN oder ein Heterosubstituent ist, oder zwei oder mehrere R³ und R⁴ miteinander in der Art verknüpft sind, daß dadurch ein iso- oder heteroaromatischer oder -gesättigter Ring erhalten wird, und pharmazeutisch verträgliche Salze oder Solvate dieser Verbindung, mit der Maßgabe, daß Formel 1 nicht die folgenden Formeln

bedeutet.
Verbindung der allgemeinem Formel 1 nach Anspruch 1, ausgewählt aus den folgenden Strukturformeln:

und deren Salze und Solvate.
Verfahren zur Synthese einer Verbindung der allgemeinen Formel 1 nach Anspruch 1, umfassend die Synthese aus einem geeigneten Diol 4 oder geeigneten Amid 5.
Verfahren nach Anspruch 3, weiterhin umfassend eine anschließende synthetische Derivatisierung der dargestellten Verbindungen.
Verbindung nach Anspruch 1 oder 2 zur Verwendung zur Behandlung von Erkrankungen.
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung nach Anspruch 1 oder 2, zusammen mit geeigneten Zusatz- oder Hilfsstoffen.
Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz vorliegt.
Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 6 oder 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung in einer Menge von 20 μg pro Dosiseinheit vorliegt.
Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 6 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß sie weitere Chemotherapeutika enthält.
Pharmazeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 6 bis 9 in Form von Tabletten, Dragees, Kapseln, Tropflösungen, Suppositorien, Injektions- oder Infusionszubereitungen zur peroralen, rektalen oder parenteralen Verwendung.
Verwendung einer Verbindung der allgemeinen Formel 1,
wobei die Reste R¹ bis R⁴ wie in Anspruch 1 definiert sind, zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Tumor- und/oder neurodegenerativen Erkrankungen und/oder zur Behandlung von Entzündungszuständen und/oder zur Behandlung der Chagas-Krankheit.
Verwendung nach Anspruch 11 in Form einer Depotsubstanz oder als Vorläufer zusammen mit einer geeigneten, pharmazeutisch verträglichen Verdünnungslösung oder Trägersubstanz.
Verwendung nach einem der Ansprüche 11 oder 12, einer Menge in einem Konzentrationsbereich zwischen 0,3 und 3,0 μg/ml bei der Behandlung in vivo.