DE102022116009A1 - Fibroblasten-Aktivierungsprotein adressierender Präkursor und Radiotracer - Google Patents

Fibroblasten-Aktivierungsprotein adressierender Präkursor und Radiotracer Download PDF

Info

Publication number
DE102022116009A1
DE102022116009A1 DE102022116009.2A DE102022116009A DE102022116009A1 DE 102022116009 A1 DE102022116009 A1 DE 102022116009A1 DE 102022116009 A DE102022116009 A DE 102022116009A DE 102022116009 A1 DE102022116009 A1 DE 102022116009A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
precursor
fap
tumor
radiotracer
und
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
DE102022116009.2A
Other languages
English (en)
Inventor
Frank Rösch
Marian Meckel
Euy Sung Moon
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ITM ONCOLOGICS GMBH, DE
Original Assignee
Positron Prec GmbH
Positron Precision GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Positron Prec GmbH, Positron Precision GmbH filed Critical Positron Prec GmbH
Priority to DE102022116009.2A priority Critical patent/DE102022116009A1/de
Priority to PCT/EP2023/066972 priority patent/WO2024002853A1/en
Publication of DE102022116009A1 publication Critical patent/DE102022116009A1/de
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/041—Heterocyclic compounds
    • A61K51/044—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins
    • A61K51/0455—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine, rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
    • A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
    • A61K51/04—Organic compounds
    • A61K51/0497—Organic compounds conjugates with a carrier being an organic compounds

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

A precursor compound and radiotracer for targeting fibroblast activation protein comprise a chelator Ch and ligand TV with Eine Päkursorverbindung und ein Radiotracer für die Adressierung von Fibroblasten-Aktivierungsprotein umfassen einen Chelator Ch und einen Liganden TV mit

Description

  • Die vorliegende Erfindung betrifft eine Präkursorverbindung und einen daraus abgeleiteten Radiotracer für die Abbildung der Exprimierung von Fibroblasten-Aktivierungsprotein (FAP). Die erfindungsgemäße Präkursorverbindung hat die Struktur Ch-L1-B-L2-TV, worin
    Figure DE102022116009A1_0003
    Figure DE102022116009A1_0004
    L1 eine bifunktionale Linkergruppe ist;
    L2 eine bifunktionale Linkergruppe ist;
    B abwesend oder eine bifunktionale Linkergruppe ist;
    L1 dafür ausgebildet ist, mit Ch und L2 oder mit Ch und B kovalent zu binden, sofern B vorhanden ist;
    B, sofern vorhanden, dafür ausgebildet ist, kovalent mit L1 und L2 zu binden; und
    L2 dafür ausgebildet ist, mit L1 und TV oder mit TV und B kovalent zu binden, sofern B vorhanden ist.
  • HINTERGRUND
  • Nuklearmedizinische Diagnose von Tumoren mit 68Ga
  • Positronen-Emissions-Tomographie (PET) in Kombination mit Computertomographie (CT) mit Gallium-68 (Ga-68 oder 68Ga) ist heute eine etablierte nuklearmedizinische Untersuchung. Die U.S. Food and Drug Administration sowie die European Medicinal Agency haben Ga-68-markiertes 1,4,7,10-Tetraazacyclododecan-1,4,7,10-tetraessigsäure (DOTA)-octreotat (DOTATATE) und DOTA(0)-d-Phe(1)-Tyr(3)-octreotid oder DOTATOC zur Lokalisierung von Somatostatinrezeptor-positiven neuroendokrinen Tumoren (NETs) bei erwachsenen und pädiatrischen Patienten (in den USA) und bei erwachsenen Patienten mit Verdacht auf sogenannte gut differenzierte gastroenteropankreatische neuroendokrine Tumoren (GEP-NETs) (in der EU). Kürzlich wurde der prostataspezifische Membranantigen-Inhibitor PSMA-11 für die Bildgebung und das Staging von metastasierten Prostatakarzinomen zugelassen. Der diagnostische Wert der PET/CT wird hauptsächlich durch Sensitivität, Spezifität und Genauigkeit bestimmt. Die Sensitivität misst den Anteil der korrekt identifizierten Positiven (Richtig-Positive dividiert durch die Summe der Richtig-Positiven und Falsch-Negativen). Die Spezifität misst den Anteil der korrekt identifizierten Negative (wahr-negative geteilt durch die Summe der richtig-negativen und falsch-positiven Ergebnisse). Die diagnostische Genauigkeit bezieht sich auf die Fähigkeit eines Tests, zwischen dem Zielzustand und der Gesundheit zu unterscheiden. Dieses Unterscheidungspotential kann durch die Maße Sensitivität und Spezifität, Target-Hintergrund-Verhältnis oder die Fläche unter der Receiver Operating Characteristic Curve (ROC-Kurve) quantifiziert werden.
  • Fibroblasten-Aktivierungsprotein (FAP) ist eine membrangebundene Serinprotease, die in der Nuklearmedizin zunehmend Beachtung findet, um verschiedene Krebsarten mit FAPspezifischen radioaktiv markierten Wirkstoffen sowohl für die Diagnostik als auch für die Therapie zu adressieren. FAP wird von krebsassoziierten Fibroblasten (CAFs), die in mehr als 90 % der üblichen menschlichen Epitheltumoren reichlich vorhanden sind, überexprimiert. Bei CAFs handelt es sich um einen im Tumorstroma enthaltenen myofibroblastischen Phänotyp. Stromazellen machen bis zu 90 % der gesamten Tumormasse aus. FAP kann auch durch Fibroblasten exprimiert werden, die bei Wundheilung, chronischer Entzündung, Leberzirrhose, rheumatoider Arthritis, Lungenfibrose, Knochen- und Weichgewebesarkomen auftreten. In gesundem Gewebe wird jedoch nahezu kein FAP exprimiert. Daher eignen sich FAP-adressierende Radiopharmaka gut für die molekulare Bildgebung mittels PET oder SPECT sowie für die Radioendotherapie von Krebstumoren und Metastasen.
  • FAP-Inhibitor Chinolin-glycin-4,4-difluoro-2-cyanopyrrolidin
  • Ein potenter FAP-Inhibitor (FAPi), allgemein als UAMC1110 bezeichnet, basiert auf einem Chinolin-Glycin-4,4-Difluor-2-Cyanopyrrolidin-Gerüst. UAMC1110 hat eine niedrige nanomolare FAP-Affinität und eine hohe Selektivität in Bezug auf Enzyme der Dipeptidylpeptidase (DPP)- und Prolyloligopeptidase (PREP)-Familie. Die hohe FAP-Selektivität von UAMC1110 ist besonders attraktiv für das Tumor-Targeting angesichts der im menschlichen Körper nahezu allgegenwärtigen Expression von DPP und PREP. Da PREP die gleiche Endopeptidase-Aktivität wie FAP zeigt und in gesunden Organen und Geweben reichlich vorhanden ist, ist eine hohe FAP-Spezifität für potente FAP-Liganden essentiell. UAMC1110 weist eine FAP-Affinität im niedrigen nM-Bereich und PREP- und DPP4-Affinität im µM-Bereich auf. Daher werden in der Nuklearmedizin seit kurzem UAMC1110-basierte FAPi-Radiopharmazeutika eingesetzt.
    Figure DE102022116009A1_0005
  • Chelatoren in Radiometall-haltigen Radiopharmazeutika
  • Die folgenden Eigenschaften sind für einen Präkursor und daraus abgeleitete Radiotracer relevant:
    • - schnelle und effektive Komplexierung eines diagostischen oder therapeutischen Radioisotops mit der Markierungsgruppe;
    • - hohe Affinität und Selektivität für Tumorzellen und Metastasen im Vergleich zu gesundem Gewebe;
    • - in-vivo-Stabilität, d. h. biochemische Persistenz im Blutserum unter physiologischen Bedingungen;
    • - hohe Aufnahme in Tumoren und Metastasen für eine präzise Diagnose und wirksame Therapie;
    • - schnelle Clearance aus gesundem Gewebe und Blut, um die systemische Dosis und Toxizität zu minimieren.
  • Dem derzeitigem Kenntnisstand zufolge:
    • - beeinflussen der Chelator und das Radioisotop stark die Affinität und Pharmakokinetik von Radiotracern;
    • - kann DOTA die Affinität eines Targeting-Liganden stark beeinträchtigen;
    • - interagieren Chelator, Radioisotop und Zielligand unvorhersehbar in synergistischer oder antagonistischer Weise.
  • Fani et al. berichten, dass der Chelator und das Radiometall eines Radiotracers die Affinität eines Targeting-Liganden stark beeinflussen können. Reubi et al. zeigen, dass die Konjugation eines zielgerichteten Liganden mit DOTA seine Affinität zu dem zellulären Zielrezeptor wesentlich verringern kann. Reubi et al. weisen darauf hin, dass eine Kombination aus Chelator, Radiometall und Targeting-Ligand eine synergistische oder antagonistische Wirkung erzielen kann, die selten vorhersagbar ist. Im Allgemeinen ist die Konjugation eines zielgerichteten Liganden mit einem Linker und einer großen Chelatoreinheit nicht vorteilhaft und mindert die Affinität zu dem zellulären Zielrezeptor erheblich.
  • Beispielsweise ist der Chelator DOTA nicht gut geeignet, um das relativ kleine (Radio-)Metall Gallium zu komplexieren, und erfordert eine erhöhte Reaktionstemperatur, die für viele Antikörper und hitzeempfindliche Biomoleküle nachteilig ist. Nach der Komplexierung benötigen 68Ga-DOTA-Chelate Zeit zum Abkühlen vor der intravenösen Injektion, wodurch sie aufgrund der kurzen 68Ga-Halbwertszeit von 67,7 min der klinischen Anwendung Einschränkungen auferlegen.
  • „Hybride“ Chelator-Gerüste DATA und AAZTA
  • DATA (1,4-Bis(carboxymethyl)-6-[methyl-carboxymethyl-amino]-1,4-diazepan) und AAZTA (1,4-Bis(carboxymethyl)-6-[bis(carboxymethyl)-amino]-1,4-Diazepan) zeigen zyklische, azyklische und hybride Eigenschaften und weisen vorteilhafte Eigenschaften für die Markierung mit 68Ga auf. Insbesondere ermöglicht DATA eine schnelle und quantitative 68Ga-Markierung in einem weiten pH-Bereich bei Umgebungstemperatur. Darüber hinaus sind [68Ga]Ga-DATA-Chelate immun gegen Transchelatisierung (DTPA und Apo-Transferrin) und Transmetallierung (FeIII) und in physiologischem Milieu stabil.
  • DETAILLIERTE BESCHREIBUNG
  • Die Erfindung hat die Aufgabe, die nukleare Theranostik von endothelialen Krebstumoren und Metastasen, die eine erhöhte FAP-Exprimierung aufweisen, zu verbessern.
  • Diese Aufgabe wird gelöst durch einen Präkursor mit der Struktur Ch-L1-B-L2-TV, worin
    Figure DE102022116009A1_0006
    Figure DE102022116009A1_0007
    L1 eine bifunktionale Linkergruppe ist;
    L2 eine bifunktionale Linkergruppe ist;
    B abwesend oder eine bifunktionale Linkergruppe ist;
    L1 dafür ausgebildet ist, mit Ch und L2 oder mit Ch und B kovalent zu binden, sofern B vorhanden ist;
    B, sofern vorhanden, dafür ausgebildet ist, kovalent mit L1 und L2 zu binden; und
    L2 dafür ausgebildet ist, mit L1 und TV oder mit TV und B kovalent zu binden, sofern B vorhanden ist.
  • Zweckmäßige Ausführungsformen der erfindungsgemäßen Präkursorverbindung sind gekennzeichnet durch eines der folgenden Merkmale oder eine Kombination aus zwei oder mehr der folgenden Merkmale, sofern sich die kombinierten Merkmale nicht ausschließen oder widersprechen und denen zufolge:
    Figure DE102022116009A1_0008
    Figure DE102022116009A1_0009
    Figure DE102022116009A1_0010
    Figure DE102022116009A1_0011
    Figure DE102022116009A1_0012
    • - m = 4;
    • - n = 4;
    • - L1 die Struktur
      Figure DE102022116009A1_0013
      aufweist, worin
      • - jedes Pi für 1 ≤ i ≤ k vorhanden und für i > k abwesend ist mit k = 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 oder 10;
      • - jedes Ps mit s = 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 oder 10, sofern vorhanden, unabhängig voneinander gewählt ist aus der Gruppe umfassend -CH2-, -CH2CH2O-, -N(H)- , -C(O)- und -C(CH3)-;
    • - L2 die Struktur
      Figure DE102022116009A1_0014
      aufweist, worin
      • - jedes Qj für 1 ≤ j ≤ h vorhanden und für j > h abwesend ist mit h = 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 oder 10;
      • - jedes Qs mit s = 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 oder 10, sofern vorhanden, unabhängig voneinander gewählt ist aus der Gruppe umfassend -CH2-, -CH2CH2O-, -N(H)- , -C(O)- und -C(CH3)-;
      Figure DE102022116009A1_0015
      Figure DE102022116009A1_0016
      Figure DE102022116009A1_0017
      Figure DE102022116009A1_0018
      Figure DE102022116009A1_0019
    • - B abwesend ist;
    • - die Präkursorverbindung die Struktur
      Figure DE102022116009A1_0020
      aufweist;
    • - die Präkursorverbindung die Struktur
      Figure DE102022116009A1_0021
      aufweist;
    • - die Präkursorverbindung die Struktur
      Figure DE102022116009A1_0022
      aufweist;
    • - die Präkursorverbindung die Struktur
      Figure DE102022116009A1_0023
      aufweist;
    • - die Präkursorverbindung die Struktur
      Figure DE102022116009A1_0024
      aufweist.
  • Die Erfindung hat die weitere Aufgabe, einen Radiotracer bereitzustellen, der eine verbesserte nukleare Theranostik von endothelialen Krebstumoren und -metastasen mit erhöhter FAP-Expression ermöglicht.
  • Diese Aufgabe wird durch einen Radiotracer gelöst, der aus der oben beschriebenen Präkursorverbindung und dem damit komplexierten Radioisotop 68Ga besteht.
  • Weitere zweckmäßige Ausgestaltungen der Erfindung betreffen:
    • - ein radiopharmazeutisches Kit, umfassend eine der oben beschriebenen Präkursorverbindungen oder ein Salz davon;
    • - ein radiopharmazeutisches Kit, umfassend eine der oben beschriebenen Präkursorverbindungen oder ein Salz davon und ein Lösungsmittel, ausgewählt aus der Gruppe, umfassend Wasser, 0,45 % wässrige NaCl-Lösung, 0,9 % wässrige NaCl-Lösung, Ringer-Lösung (Ringer-Lactat), 5 % wässrige Dextrose-Lösung und wässrige Alkohollösung;
    • - ein radiopharmazeutisches Kit, umfassend
      • - ein Fläschchen, das eine der oben beschriebenen Präkursorverbindungen oder ein Salz davon enthält;
    • - ein radiopharmazeutisches Kit, umfassend
      • - ein Fläschchen, enthaltend eine der oben beschriebenen Präkursorverbindungen oder ein Salz davon und ein lyophilisiertes Puffermittel, ausgewählt aus der Gruppe umfassend Natriumacetat, Gentisinsäure, Ascorbinsäure, Bernsteinsäure, HEPES, Natriumcarbonat, Natriumbicarbonat und Salze davon;
    • - ein radiopharmazeutisches Kit, umfassend
      • - ein erstes Fläschchen, das eine der oben beschriebenen Präkursorverbindungen oder ein Salz davon enthält, und
      • - ein zweites Fläschchen mit
      • - einem Lösungsmittel ausgewählt aus der Gruppe umfassend Wasser, 0,45 % wässrige NaCl-Lösung, 0,9 % wässrige NaCl-Lösung, Ringer-Lösung (Ringer-Lactat), 5 % wässrige Dextrose-Lösung und wässrige Alkohollösung, oder
      • - eine Pufferlösung, die so konfiguriert ist, dass sie den pH-Wert zwischen 3 und 7,4 hält.
  • In dieser Erfindung werden die folgenden synonymen Verbindungsbezeichnungen verwendet:
    Figure DE102022116009A1_0025
    „DATA5m.NH.FAPi“
    (S)-2,2'-(6-((carboxymethyl)(methyl)amino)-6-(5-((4-((4-((2-(2-cyano-4,4-difluoropyrrolidin-1-yl)-2- oxoethyl)carbamoyl)chinolin-6-yl)oxy)butyl)amino)-5-oxopentyl)-1,4-diazepan-1,4-diyl)diessigsäure
    Figure DE102022116009A1_0026
    „DATA5m.Pipz. FAPi“
    (S)-2,2'-(6-((carboxymethyl)(methyl)amino)-6-(5-(4-(2-((4-((4-((2-(2-cyano-4,4-difluoropyrrolidin-1-yl)- 2-oxoethyl)carbamoyl)chinolin-6-yl)oxy)butyl)amino)-2-oxoethyl)piperazin-1-yl)-5-oxopentyl)-1,4-diazepan-1,4-diyl)diessigsäure
    Figure DE102022116009A1_0027
    „DATA5m. Pipd-N-Me. FAPi“
    (S)-2,2'-(6-((carboxymethyl)(methyl)amino)-6-(5-(4-((2-((4-((4-((2-(2-cyano-4,4-difluoropyrrolidin-1-yl)-2-oxoethyl)carbamoyl)chinolin-6-yl)oxy)butyl)amino)-2-oxoethyl)(methyl)amino)piperidin-1-yl)-5-oxopentyl)-1,4-diazepan-1,4-diyl)diessigsäure
    Figure DE102022116009A1_0028
    „DATA5m. NH-Pyr. FAPi“
    2,2'-(6-((carboxymethyl)(methyl)amino)-6-(5-(((S)-1-(2-((4-((4-((2-((S)-2-cyano-4,4-difluoropyrrolidin- 1-yl)-2-oxoethyl)carbamoyl)chinolin-6-yl)oxy)butyl)amino)-2-oxoethyl)pyrrolidin-3-yl)amino)-5- oxopentyl)-1,4-diazepan-1,4-diyl)diessigsäure
    Figure DE102022116009A1_0029
    „DA TA5m. Pyr-N-Me. FAPi“
    2,2'-(6-((carboxymethyl)(methyl)amino)-6-(5-((S)-3-((2-((4-((4-((2-((S)-2-cyano-4,4-difluoropyrrolidin- 1-yl)-2-oxoethyl)carbamoyl)chinolin-6-yl)oxy)butyl)amino)-2-oxoethyl)(methyl)amino)pyrrolidin-1-yl)- 5-oxopentyl)-1,4-diazepan-1,4-diyl)diessigsäure
    Figure DE102022116009A1_0030
    „DATA5m. SA. FAPi“
    2,2'-(6-((carboxymethyl)(methyl)amino)-6-(5-((S)-3-((2-((4-((4-((2-((S)-2-cyano-4,4-difluoropyrrolidin- 1-yl)-2-oxoethyl)carbamoyl)chinolin-6-yl)oxy)butyl)amino)-2-oxoethyl)(methyl)amino)pyrrolidin-1-yl)- 5-oxopentyl)-1,4-diazepan-1,4-diyl)diessigsäure
    Figure DE102022116009A1_0031
    „UAMC1110“
    (S)-N-(2-(2-cyano-4,4-difluoropyrrolidin-1-yl)-2-oxoethyl)chinolin-4-carboxamid
  • BEISPIELE
  • Beispiel 1: DATA5m Prochelator Synthese
  • Schema 2 illustriert die Synthese des DATA5m Prochelators (cf. J. Seemann, B. Waldron, D. Parker, F. Roesch; DATATOC: a novel conjugatefor kit-type 68Ga labelling of TOC at ambient temperature; EJNMMI Radiopharmacy and Chemistry (2016) 1:4, DOI 10.1186/s41181-016-0007-3).
  • 5-(1,4-Dibenzyl-6-nitro-[1, 4]diazepan-6-yl)-pentansäuremethylester (1)
  • 2-Nitrocyclohexanon (0,608 g, 4,3 mmol) wird hinzugefügt zu Amberlyst A21 (1,216 g, 2 Masseäquivalente) in EtOH und 2 h gerührt bei 60 °C unter Argon. N,N'-Dibenzylethylenediamin (1,020 g, 4,3 mmol) and Paraformaldehyd (0,446 g, 14,9 mmol) werden hinzugefügt und die Reaction bei 60 °C über Nacht gerührt. Die Mischung wird durch Celite® gefiltert und Lösungsmittel unter reduziertem Druck entfernt. Der erhaltene Rückstand wird wieder gelöst in CHCl3 (40 mL) und sukzessive gewaschen mit wässriger K2CO3-Lösung (2 × 30 mL, 0,1 M) und H2O (30 mL), über MgSO4 getrocknet, gefiltert und Lösungsmittel unter reduziertem Druck entfernt. Reinigung mittels Silicagel-Säulenchromatographie (DCM) liefert die Titelverbindung als gelbes Öl (1,607 g, 85 %). Rf = 0,80 (DCM).
  • 5-(1,4-Dibenzyl-6-nitro-[1,4]diazepan-6-yl)-pentansäuremethylester (2)
  • Eine katalytische Menge Pd(OH)2/C and Essigsäure (50 µL, 0,87 mmol) wird hinzugefügt zu dem geschützten Triamin 1 (0,10 g, 0,29 mmol) in MeOH (20 mL) und die Mischung unter Wasserstoff-Atmosphäre (1 atm H2) für 3 h geschwenkt. Mittels TLC (DCM) wird die vollständige Reduktion der Nitrogruppe und Abspaltung des N-Substituenten Benzyl kontrolliert. Pd(OH)2/C wird mittels Celite®-Filter entfernt. Under reduziertem Druck wird Lösungsmittel entfernt, um ein gelbes Öl (0,065 g, 97 %) zu erhalten.
  • 5-[1,4-Bis-tert-butoxycarbonylmethyl-6-(tert-butoxycarbonylmethyl-amino)-[1,41diazepan-6-yl]-pentansäuremethylester (3)
  • tert-Butyl-bromessigsäure (0,567 g, 2.91 mmol) wird hinzugefügt zu 2 (0,208 g, 0,91 mmol) und K2CO3 (0,377 g, 2,73 mmol) in MeCN (25 mL) und die Mischung für 24 h bei 368 K unter Argonatmosphäre gerührt. Zur Bildung des tetraalkylierten Derivats wird die Reaktion mittels TLC (Hexan/Ethylacetat; 1:1) kontrolliert. Unter reduziertem Druck wird wird Lösungsmittel entfernt, das erhaltene Öl wieder gelöst in CHCl3 (25 mL), sukzessive gewaschen mit wässriger K2CO3-Lösung (2 × 25 mL, 0,1 M) und H2O (25 mL), über MgSO4 getrocknet, gefiltert und Lösungsmittel unter reduziertem Druck entfernt. Reinigung mittels Silicagel- Säulenchromatographie (Hexan/Ethylacetat, 2:1 → 1:1) liefert ein gelbes Öl (0,229 g, 44 %). Rf = 0,35 (Hexan/Ethylacetat; 2:1).
  • 5-[1,4-Bis-tert-butoxycarbonylmethyl-6-(tert-butoxycarbonylmethyl-methyl-amino)-[1,4]diazepan-6-yl]-pentansäuremethylester (4)
  • lodmethan (0,023 g, 0.16 mmol) wird hinzugefügt zu 3 (0,104 g, 0,18 mmol) und K2CO3 (0,025 g, 0,18 mmol) in Eisbad-gekühltem DCM/MeCN (3:1). Nach Erwärmung auf Raumtemperatur wird die Reaktionsmischung über Nacht stehengelassen. Unter reduziertem Druck wird das Lösungsmittel entfernt und das erhaltene Öl wieder gelöst in CHCl3 (20 mL), gefiltert und sukzessive gewaschen mit wässriger K2CO3-Lösung (2 × 20 mL, 0.1 M) und H2O (20 mL), über MgSO4 getrocknet, gefiltert und Lösungsmittel unter reduziertem Druck entfernt. Reinigung mittels Silicagel-Säulenchromatographie (Hexan/Ethylacetat, 3:1 → 2:1) liefert ein gelbes Öl (0,043 g, 46 %). Rf = 0.38 (Hexan/Ethylacetat; 2:1).
  • 5-[1,4-Bis-tert-butoxycarbonylmethyl-6-(tert-butoxycarbonylmethyl-methyl-amino)-[1,4]diazepan-6-yl]-pentansäure (5)
  • LiOH (0,009 g, 0,039 mmol) gelöst in H2O (0,5 mL) wird hinzugefügt zu 4 (0,010 g, 0,023 mmol) in THF (0,5 mL) und die Mischung bei 298 K gerührt. Die Reaktion wird mittels LC-ESI MS auf Ester-Spaltung kontrolliert. Nach Abschluß wird das Lösungsmittel durch Lyophilisierung entfernt. H2O (5 mL) wird hinzugefügt und durch Lyophilisierung entfernt und diese Prozedur zweimal wiederholt. Der erhaltene Feststoff wird mit eiskaltem DCM (0,5 mL) gewaschen und vakuumgetrocknet, um einen wachsartigen gelben Feststoff (0,009 g, 70 %) zu erhalten.
    Figure DE102022116009A1_0032
    Schema 2: Synthese des 3tBu-geschützten DATA5m Prochelators (i) Amberlyst-21, EtOH; (ii) CH2O, EtOH; (iii) CH3COOH, Pd(OH)2/C, H2, EtOH; (iv) BrCH2COOtBu, K2CO3, MeCN; (v) CH3I, K2CO3, DCM : MeCN; (vi) LiOH, THF : H2O
  • Beispiel 2: Synthese des FAP-adressierenden Liganden
  • Schemata 3-5 illustrieren die Synthese von FAP-adressierenden Liganden (cf. K. Jansen, L. Heirbaut, R. Verkerk, J.D. Cheng, J. Joossens, P. Cos, L. Maes, A.-M. Lambeir, I. De Meester, K. Augustyns, P. Van der Veken; Extended Structure-Activity Relationship and Pharmacokinetic Investigation of (4-Quinolinoyl)glycyl-2-cyanopyrrolidine Inhibitors of Fibroblast Activation Protein (FAP); J. Med. Chem. 2014 Apr 10; 57(7): 3053-74, DOI 10.1021/jm500031w).
    Figure DE102022116009A1_0033
    Schema 3: Synthese von (S)-4,4-difluoro-1-(aminoacetyl)pyrrolidon-2-carbonitril (a) TEMPO (0.02 eq), 1,3,5-Trichlor-1,3,5-triazin-2,4,6-trion, DCM, 1 h, 0°C, 74%; (b) DAST, DCM, 16 h, 61%; (c) KOH, MeOH, 16 h, 86%; (d) DCC, HONSu, NH3, DCM, 2 h, 72%; (e) TFA, DCM, 1 h, 90%; (f) HATU, Boc-Gly-OH, DIPEA, DCM, 3 h, 77%; (g) TFAA, pyridin, THF, -15°C, 70%; (h) TsOH, MeCN, 24 h, 90%.
    Figure DE102022116009A1_0034
    Schema 4: Synthese von 6-methoxychinolin-4-carbonsäure (a) PBr3, DMF, 3 h, 63%; (b) Zn(CN)2, Pd/C, Zn++(COO-)2, dppf, 110°C, 3 h, 72%; (c) NaOH, H2O/EtOH, Reflux, 94%.
    Figure DE102022116009A1_0035
    Schema 5: Konjugation von (S)-4,4-difluoro-1-(aminoacetyl)pyrrolidon-2-carbonitril mit 6-methoxychinolin-4-carbonsäure.
  • Beispiel 3: Affinität zu FAP und PREP
  • Die erfindungsgemäßen Präkursorverbindungen und Radiotracer weisen eine hohe Affinität zu FAP und ausgezeichnete Selektivität auf, d.h. schwache Bindung zu PREP. Somit ermöglichen sie einen hohen Bildkontrast für die Diagnose von endothelialen Tumoren und Metastasen mit Gallium-68 PET/CT.
  • Die nachfolgende Tabelle 1 gibt gemessene Affinitäten zu FAP und PREP für die erfindungsgemäßen Präkursorverbindungen 1-4 und die Referenzverbindung 5 sowie den originalen FAP-Inhibitor UAMC1110 als gegenwärtigen Goldstandard wieder. Tabelle 1: Affinititäten zu FAP und PREP
    # Verbindung PREP IC50 [µM] FAP IC50 [nM] S* SF**
    (A) DATA5m.NH.FAPi 6.4 ± 0.4 0.27 ± 0.02 23.7 × 103 5.6
    (B) DATA5m.Pipz.FAPi 1.5 ± 0.3 0.27 ± 0.01 5.6 × 103 1.3
    (D) DATA5m.NH-Pyr.FAPi 3.3 ± 0.2 0.28 ± 0.02 11.8 × 103 2.8
    (E) DATA5m.Pyr-N-Me.FAPi 2.6 ± 0.3 0.31 ± 0.02 8.4 × 103 2.0
    (F) DATA5m.SA.FAPi 1.7 ± 0.1 0.8 ± 0.02 2.1 × 103 0.5
    (G) UAMC1110 1.8 ± 0.01 0.43 ± 0.02 4.2 × 103 1.0
    * S = PREP IC50 / FAP IC50
    ** SF = S relativ zu UAMC1110
  • Die erfindungsgemäßen Präkursorverbindungen (A), (B), (D) und (E) weisen ein höhere Affinität zu FAP auf als die Referenzverbindung (F) und der UAMC1110 Goldstandard (G). Verbindung (A), (D) und (E) zeigen reduzierte Bindung zum off-target PREP verglichen mit Referenz (F) und (G). Verbindung (B) hat eine PREP-Affinität, die vergleichbar ist mit (F) und (G). Alle Verbindungen (A), (B), (D), (E) haben eine merklich höhere Selektivität für FAP als für PREP im Vergleich zu Referenz (F) und zum Goldstandard (G). Die Selektivität von Verbindung (B) ähnelt der von (G). Die Selektivität von Verbindung (E) ist zweifach größer als die von (G). Die Selektivität von Verbindung (D) ist dreifach größer als die von (G). Die Selektivität von Verbindung (A) ist sechsfach größer als die von (G). Die DATA5m-konjugierte Referenzverbindung (F) hat eine niedrigere Affinität zu FAP und geringere Selektivität als (G), was aufgrund der chemischen Modifikation zu erwarten ist.
  • Die erfindungsgemäßen Radiotracer können praktischerweise als gebrauchsfertiges Kit bereitgestellt werden. Ein entsprechendes Kit enthält eine der vorstehend beschriebenen, gefriergetrockneten Präkursorverbindungen oder ein Salz davon, einen Puffer für pH-Anpassung, Antioxidantien als Radikalfänger, um Radiolyse zu verhindern, und lyophilisierende Füllstoffe. Der jeweilige Radiotracer wird erzeugt durch Hinzufügen einer Lösung von [68Ga]GaCl3 in Salzsäure gemäß der Monographie „Gallium (68Ga) chloride solution“ des Europäischen Arzneibuchs.
  • Beispiel 4: PET MIP mit [68Ga]Ga-DATA5m.Pip.FAPi
  • 1 zeigt ein mit PET MIP unter Verwendung des erfindunsgemäßen Radiotracers [68Ga]Ga-DATA5m.Pip.FAPi erzeugte Aufnahme eines an Radiojod-refraktärem, differenziertem Schilddrüsenkrebs erkrankten, 52-jährigen männlichen Patienten. Multiple Metastasen in Pankreas (1), Lunge (2) und Lymphknoten (3) sind detektierbar.
  • Beispiel 5: PET MIP mit [68Ga]Ga-DATA5m.NH.FAPi
  • 2 zeigt eine mit PET MIP unter Verwendung des erfindunsgemäßen Radiotracers [68Ga]Ga-DATA5m.NH.FAPi erzeugte Aufnahme eines an Radiojod-refraktärem, differenziertem Schilddrüsenkrebs erkrankten, 40-jährigen männlichen Patienten. Multiple Läsionen in Leber (1), Lunge (2) und Lymphknoten (3) sind detektierbar.
  • Beispiel 6: Koronale PET/CT-Bildgebung
  • 3 zeigt eine unter Verwendung des erfindungsgemäßen Radiotracers [68Ga]Ga-DATA5m.NH-Pyr.FAPi erzeugte koronale PET/CT Aufnahme eines an metastasierendem gastroesophagealem Krebs erkrankten männlichen Patienten. Multiple skeletalle Metastasen sind detektierbar.
  • Die Annotationen in 3 bezeichnen
    • Li
    Leber
    Ki
    Nieren
    BI
    Blase
    L1
    Tumor Knochenläsion, Becken
    L2
    Tumor Knochenläsion, Becken
    L3
    Tumor Knochenläsion, Rippen
    L4
    Tumor Läsion
    L5
    Tumor Läsion
    L6
    Tumor Knochenläsion, Rückenwirbel
    L7
    Tumor Knochenläsion, Schulter
    L8
    multiple Tumor Knochenläsion, Becken
    L9
    Tumor Läsion, Becken
    L10
    multiple Tumor Knochenläsion, Rückenwirbel
    L11
    multiple Tumor Knochenläsion, Becken
    L12
    Tumor Knochenläsion, Rippen

Claims (17)

  1. Präkursorverbindung mit der Struktur Ch-L1-B-L2-TV, worin
    Figure DE102022116009A1_0036
    Figure DE102022116009A1_0037
     L1 eine bifunktionale Linkergruppe ist; L2 eine bifunktionale Linkergruppe ist; B abwesend oder eine bifunktionale Linkergruppe ist; L1 dafür ausgebildet ist, mit Ch und L2 oder mit Ch und B kovalent zu binden, sofern B vorhanden ist; B, sofern vorhanden, dafür ausgebildet ist, kovalent mit L1 und L2 zu binden; und L2 dafür ausgebildet ist, mit L1 und TV oder mit TV und B kovalent zu binden, sofern B vorhanden ist.
  2. Präkursorverbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass
    Figure DE102022116009A1_0038
  3. Präkursorverbindung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass
    Figure DE102022116009A1_0039
  4. Präkursorverbindung nach Anspruch 1, 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet, dass
    Figure DE102022116009A1_0040
  5. Präkursorverbindung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass m = 4.
  6. Präkursorverbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass
    Figure DE102022116009A1_0041
  7. Präkursorverbindung nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass n = 4.
  8. Präkursorverbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass
    Figure DE102022116009A1_0042
  9. Präkursorverbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass
    Figure DE102022116009A1_0043
  10. Präkursorverbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass
    Figure DE102022116009A1_0044
  11. Präkursorverbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass
    Figure DE102022116009A1_0045
  12. Präkursorverbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie die Struktur
    Figure DE102022116009A1_0046
    aufweist.
  13. Präkursorverbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie die Struktur
    Figure DE102022116009A1_0047
    aufweist.
  14. Präkursorverbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie die Struktur
    Figure DE102022116009A1_0048
    aufweist.
  15. Präkursorverbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie die Struktur
    Figure DE102022116009A1_0049
    aufweist.
  16. Präkursorverbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie die Struktur
    Figure DE102022116009A1_0050
    aufweist.
  17. Radiotracer bestehend aus einer Präkursorverbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 16 und dem damit komplexierten Radioisotop 68Ga.
DE102022116009.2A 2022-06-28 2022-06-28 Fibroblasten-Aktivierungsprotein adressierender Präkursor und Radiotracer Pending DE102022116009A1 (de)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102022116009.2A DE102022116009A1 (de) 2022-06-28 2022-06-28 Fibroblasten-Aktivierungsprotein adressierender Präkursor und Radiotracer
PCT/EP2023/066972 WO2024002853A1 (en) 2022-06-28 2023-06-22 Fibroblast activation protein targeting precursor and radiotracer

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102022116009.2A DE102022116009A1 (de) 2022-06-28 2022-06-28 Fibroblasten-Aktivierungsprotein adressierender Präkursor und Radiotracer

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE102022116009A1 true DE102022116009A1 (de) 2023-12-28

Family

ID=87202318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE102022116009.2A Pending DE102022116009A1 (de) 2022-06-28 2022-06-28 Fibroblasten-Aktivierungsprotein adressierender Präkursor und Radiotracer

Country Status (2)

Country Link
DE (1) DE102022116009A1 (de)
WO (1) WO2024002853A1 (de)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102018126558A1 (de) 2018-10-24 2020-04-30 Helmholtz-Zentrum Dresden - Rossendorf E.V. Markierungsvorläufer mit Quadratsäure-Kopplung
DE102021114711A1 (de) 2021-06-08 2022-12-08 Atoms for Cure GmbH Trislinker-konjugierte dimere Markierungsvorläufer und daraus abgeleitete Radiotracer

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102018126558A1 (de) 2018-10-24 2020-04-30 Helmholtz-Zentrum Dresden - Rossendorf E.V. Markierungsvorläufer mit Quadratsäure-Kopplung
DE102021114711A1 (de) 2021-06-08 2022-12-08 Atoms for Cure GmbH Trislinker-konjugierte dimere Markierungsvorläufer und daraus abgeleitete Radiotracer

Also Published As

Publication number Publication date
WO2024002853A1 (en) 2024-01-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1784422B1 (de) Erfindung betreffend glp-1 und exendin
JP6749249B2 (ja) Ｐｓｍａを標的としたイメージング及び放射線治療のための金属／放射性金属標識ｐｓｍａ阻害剤
DE10135355C1 (de) Konjugate makrocyclischer Metallkomplexe mit Biomolekülen und deren Verwendung zur Herstellung von Mitteln für die NMR- und Radiodiagnostik sowie die Radiotherapie
EP2456467B1 (de) Epsilon-polylysin-konjugate und deren verwendung
DE69626392T2 (de) Stabile reagenzien zur herstellung von radiopharmazeutika
DE102018126558A1 (de) Markierungsvorläufer mit Quadratsäure-Kopplung
DE202014011593U1 (de) Markierte Inhibitoren des prostataspezifischen Membranantigens (PSMA), deren Verwendung als bildgebende Mittel und pharmazeutische Wirkstoffe für die Behandlung von Prostatakrebs
EP1409024B1 (de) Makrocyclische metallkomplexe und deren verwendung zur herstellung von konjugaten mit biomolekülen
WO2020065045A1 (en) Labeled inhibitors of prostate specific membrane antigen (psma), their use as imaging agents and pharmaceutical agents for the treatment of psma-expressing cancers
DE102021114711B4 (de) Trislinker-konjugierte dimere Markierungsvorläufer und daraus abgeleitete Radiotracer
WO2005087275A2 (en) Metal radiolabeled pet imaging agents
DE69230287T2 (de) Verbindungen und pharmazeutische zusammensetzungen zum nachweis und zur lokalisierung von geweben mit neurokinin-1-rezeptoren
DE102022116009A1 (de) Fibroblasten-Aktivierungsprotein adressierender Präkursor und Radiotracer
Chervu et al. Technetium-99m-labeled p-aminohippuric acid analog: a new renal agent: concise communication
DE102021111452B3 (de) Markierungsvorläufer und Radiotracer für neuroendokrine Theranostik
DE69723242T2 (de) Ternäre radiopharmazeutische komplexe
DE68913753T2 (de) Zielmittel.
DE69026387T2 (de) Reduktion der nichtzielspezifischen retention von immunokonjugaten und ihren metaboliten
DE60032175T2 (de) Markierte ascorbinsäurederivate
EP1590317B1 (de) Enantiomerenreines (4s,8s)- und (4r, 8r)-4-p-nitrobenzyl-8-methyl-3, 6, 9-triaza- sp 3 /sp n, sp 6 /sp n, sp 9 /sp n-tricarboxymethyl-1, 11-undecandisäure und deren abkömmlinge, verfahren zu deren herstellung und verwendung zur herstellung pharmazeutischer mittel
EP0975670A1 (de) Radiomarkierte somatostatin rezeptor-liganden zur diagnose und therapie
CN102188722A (zh) 一种含二价铁的磁共振成像造影剂
CN113747927A (zh) 包含淀粉酶可切割接头的前列腺特异性膜抗原(psma)配体
DE60006587T2 (de) Makrozyclische liganden für metallpharmazeutika
Werner et al. Novel functional renal imaging with 18F-FDS PET in rat models of kidney diseases

Legal Events

Date Code Title Description
R012 Request for examination validly filed
R083 Amendment of/additions to inventor(s)
R082 Change of representative

Representative=s name: GRAF VON STOSCH PATENTANWALTSGESELLSCHAFT MBH, DE

R002 Refusal decision in examination/registration proceedings
R081 Change of applicant/patentee

Owner name: ITM ONCOLOGICS GMBH, DE

Free format text: FORMER OWNER: POSITRON PRECISION GMBH, 10243 BERLIN, DE

R125 Request for further processing filed
R126 Request for further processing allowed