DE102004051830B4 - Multifunktionales Referenzsystem bei Analytbestimmungen durch Fluoreszenz - Google Patents

Multifunktionales Referenzsystem bei Analytbestimmungen durch Fluoreszenz Download PDF

Info

Publication number
DE102004051830B4
DE102004051830B4 DE102004051830A DE102004051830A DE102004051830B4 DE 102004051830 B4 DE102004051830 B4 DE 102004051830B4 DE 102004051830 A DE102004051830 A DE 102004051830A DE 102004051830 A DE102004051830 A DE 102004051830A DE 102004051830 B4 DE102004051830 B4 DE 102004051830B4
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
analyte
reference substance
substance
luminescence
quenched
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
DE102004051830A
Other languages
English (en)
Other versions
DE102004051830A1 (de
Inventor
Carina Dr. Horn
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Roche Diagnostics GmbH
Original Assignee
Roche Diagnostics GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to DE102004051830A priority Critical patent/DE102004051830B4/de
Application filed by Roche Diagnostics GmbH filed Critical Roche Diagnostics GmbH
Priority to CN200580036606XA priority patent/CN101048651B/zh
Priority to US11/666,198 priority patent/US8759112B2/en
Priority to CA2585041A priority patent/CA2585041C/en
Priority to EP05798048A priority patent/EP1805503A1/de
Priority to PCT/EP2005/011448 priority patent/WO2006045596A1/de
Priority to JP2007537234A priority patent/JP4954078B2/ja
Publication of DE102004051830A1 publication Critical patent/DE102004051830A1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE102004051830B4 publication Critical patent/DE102004051830B4/de
Priority to HK08103503.6A priority patent/HK1113405A1/xx
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/84—Systems specially adapted for particular applications
    • G01N21/8483—Investigating reagent band
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/582—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with fluorescent label
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/66—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood sugars, e.g. galactose
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G01N2021/6432—Quenching
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G01N2021/6439—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" with indicators, stains, dyes, tags, labels, marks
    • G01N2021/6441—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" with indicators, stains, dyes, tags, labels, marks with two or more labels

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

System für den Lumineszenz-Nachweis eines Analyten in einer flüssigen Probe, umfassend einen Träger, umfassend
eine Analyt-spezifische Substanz, die in der Lage ist, bei Kontakt mit dem Analyten ein erstes Lumineszenzsignal abzugeben, und
eine Referenzsubstanz, die in der Lage ist, ein zweites Lumineszenzsignal abzugeben, welches durch Kontakt mit der flüssigen Probe gequencht wird, wobei ein einziger Detektor zum Messen der Lumineszenzsignale der Analyt-spezifischen Substanz und der Referenzsubstanz verwendet wird.

Description

  • Die vorliegende Erfindung betrifft ein System für den Lumineszenz-Nachweis eines Analyten in einer flüssigen Probe, wobei das System einen Träger umfasst, auf dem sich eine Analyt-spezifische Substanz und eine Referenzsubstanz befinden. Des weiteren betrifft die Erfindung ein Verfahren zum Nachweis eines Analyten in einer flüssigen Probe, wobei das genannte System verwendet wird. Das erfindungsgemäße System eignet sich zusätzlich zum Nachweis eines Analyten dazu, die Probenmenge zu bestimmen, die Menge des Analyten zu bestimmen und/oder die Funktionsbereitschaft des Trägers für einen Nachweis festzustellen.
  • Das erfindungsgemäße System und Verfahren zum Nachweis eines Analyten beruht auf einem Lumineszenz-Nachweis, insbesondere einem Fluoreszenz-Nachweis. Solche Nachweissysteme sind im Stand der Technik bereits seit langem bekannt. Bei den heutigen Analysemethoden stellt die photometrische Auswertung von analytischen Testelementen eines der gebräuchlichsten Verfahren zum schnellen Nachweis bzw. zur schnellen Bestimmung der Konzentration von Analyten in Proben dar. Allgemein werden photometrische Auswertungen im Bereich der Analytik, der Umweltanalytik und vor allem im Bereich der medizinischen Diagnostik eingesetzt. Insbesondere im Bereich der Blutglucosediagnostik aus Kapillarblut besitzen Testelemente, die photometrisch ausgewertet werden, einen großen Stellenwert.
  • Bei fluoreszenzspektrometrischen Nachweissystemen hängt die Intensität der Emission der fluoreszierenden Substanzen direkt proportional von der Intensität der Anregung ab. Dabei kann die Intensität der Anregung durch viele Faktoren beeinflusst werden, zum Beispiel durch das Verhalten der Lichtquelle über die Zeit oder Veränderungen der Lichtwege. Gerade in einem Kleingerät, welches nicht feststehend in einem Labor zur Messung benutzt wird, können Veränderungen der Lichtwege unterschiedliche Anregungsintensitäten hervorrufen. Daher ist es sehr schwierig, absolute Fluoreszenzmessungen reproduzierbar durchzuführen.
  • Aus diesem Grunde verwenden die heute gängigen Fluoreszenz-Testsysteme eine Referenzsubstanz, auf die bezogen werden kann. Es sind verschiedene Arten von Referenzsubstanzen bekannt.
  • Beispielsweise ist im Stand der Technik bekannt, in Nachweissystemen, die auf einem Fluorophor beruhen, einen zweiten Fluorophor zu verwenden, der bei einer anderen Wellenlänge emittiert als der für den Analyten spezifischen Fluorophor. Dieser zweite Fluorophor kann somit als Referenz benutzt werden. Dabei kann dann durch zwei verschiedene Filter (und zwei Detektoren) zwischen den beiden Fluorophoren unterschieden werden, wobei ein Fluorophor keine chemische Umsetzung erfährt und als Referenz dienen kann. Dieses Nachweissystem ist beispielsweise in der folgenden Literaturstelle beschrieben: Principles of Fluorescence Spectroscopy, J. R. Lakowicz, Kluwer Academic/Plenum Publishers, New York, Boston, Dordrecht, London, Moscow 1999, 2. Auflage.
  • Ein anderer Ansatz besteht in einer zeitaufgelösten und phasenmodulierten Referenzierung, bei der ein sehr langlebiger Fluorophor, der eine längere Lebensdauer als ein für den Analyten spezifischer kurzlebiger Fluorophor hat, als Referenzsubstanz verwendet wird. Während die langlebige Lumineszenz in ihren Parametern vom Analyten nicht beeinflusst wird, verändert sich die Intensität des für den Analyten spezifischen, kurzlebigen Leuchtstoffs in Abhängigkeit von der jeweiligen Analytkonzentration. Dann kann durch zeitaufgelöste Messung zuerst der Analyt-Fluorophor gemessen werden und anschließend das Abklingen der Referenz aufgenommen werden. Das Verhältnis des Abklingsignals zu dem Signal des Analyten plus dem der Referenzsubstanz muss immer gleich sein, unabhängig mit welcher Intensität eingestrahlt wurde.
  • WO 99/06821 A1 offenbart ein solches System. Hierbei werden zumindest zwei verschiedene Leuchtstoffe co-immobilisiert auf einem Träger verwendet, deren erster zumindest in der Lumineszenzintensität auf den zu bestimmenden Parameter des Analyten anspricht, und deren zweiter zumindest in der Lumineszenzintensität und der Abklingzeit auf den zu messenden Parameter nicht anspricht. Die Leuchtstoffe weisen unterschiedliche Abklingzeiten auf. Das Zeit- oder Phasenverhalten der sich ergebenden Lumineszenzantwort kann somit zur Bildung einer Referenzgröße für die Bestimmung des zu messenden Parameters des Analyten verwendet werden.
  • WO 02/056023 A1 offenbart einen optischen Sensor zur Bestimmung zumindest eines Parameters in einer Probe, wobei auch hier ein auf den Parameter ansprechendes Indikatormaterial mit kurzer Ablingzeit und ein auf den Parameter nicht ansprechendes Referenzmaterial mit langer Abklingzeit verwendet werden. Hierbei sind das Indikatormaterial und das Referenzmaterial auf einem gemeinsamen Träger immobilisert und auf der Probenseite mit einer lichtundurchlässigen Schicht abgedeckt.
  • Die Referenzierung über einen zweiten Fluorophor, der bei einer anderen Wellenlänge gemessen wird, benötigt allerdings einen höheren apparativen Aufwand. So werden zum Beispiel zwei Filter anstelle nur eines einzigen Filters benötigt, um das Anregungslicht abblocken zu können, und es werden in der Regel auch zwei Detektoren benötigt. Hinzu kommt, dass durch die Trennung der optischen Wege nach der Anregung in unterschiedliche Detektoren einer der beiden Wege fehlerhaft sein kann, was dann zu einer falschen Referenzierung führen würde.
  • Bei der zeit- oder phasenaufgelösten Referenzierung besteht der Nachteil, dass die Messungen der Analyten immer vor einem leuchtenden Hintergrund durchgeführt werden müssen. Das bedeutet, dass immer ein gewisser Offset oder Signaluntergrund besteht, der den Messbereich begrenzt. Dieses Prinzip ist beispielsweise in 1 dargestellt.
  • In 1 sieht man den Messbereich des Analytsignals mit und ohne Referenz. Ohne den Referenzfluorophor kann der Messbereich optimal auf den zu umspannenden Dynamikbereich angepasst werden. Mit Referenzfluorophor wird ein Teil des Messbereichs von der Referenz beansprucht.
  • Die Referenzsubstanzen bzw. Referenzleuchtstoffe, die in den oben genannten Verfahren des Standes der Technik eingesetzt werden, können nur als Referenzsubstanz für den Vergleich mit dem Analyten verwendet werden, sie können jedoch keine weiteren Funktionen erfüllen.
  • Ein wichtiges Thema bei der Bestimmung von Analyten im Diagnostik-Bereich ist jedoch auch die Benetzungserkennung und/oder eine Füllkontrolle des Testfeldes.
  • Auch in diesem Bereich gibt es im Stand der Technik Ansätze, die bestehenden Verfahren zu verbessern. WO 83/00931 A1 offenbart eine Vorrichtung und ein Verfahren zum Nachweis einer flüssigen Probe, wobei bestimmt wird, ob eine ausreichende Menge an Probenflüssigkeit aufgetragen wurde. Dies wird erreicht, indem von einem Tropfendetektor, der eine Lichtquelle umfasst, Strahlung auf die Probe abgegeben wird, die innerhalb der Absorptionsbande von Wasser liegt. Es wird zunächst der Probenträger im trockenen und dann im benetzten Zustand bestrahlt und somit die Feuchtigkeit gemessen. Aufgrund des Unterschieds der detektierten Signale wird dann der Feuchtigkeitsgehalt der Probe berechnet.
  • US 5,114,350 A offenbart ein Verfahren und eine Vorrichtung zur Bestimmung der Konzentration eines Analyten in einer Körperflüssigkeitsprobe. Der Grad der Benetzung des Reaktionsträgers wird dadurch gemessen, dass die Menge an reflektiertem Licht gemessen wird, die mit zunehmender Benetzung abnimmt.
  • DE 102 48 555 A1 offenbart ein Verfahren zur Erkennung und Kompensation der Unterdosierung von Teststreifen. In dieser Druckschrift wird ein Testelement beschrieben, welches ein Analyt-spezifisches Reagenz umfasst, das mit einem Analyten in einer Probe wechselwirkt, sowie eine Kontrollsubstanz, die mit einer Probenmatrix der Probe wechselwirkt. Das Analyt-spezifische Reagenz wechselwirkt mit dem Analyten in Abhängigkeit von der Analytkonzentration in einem Detektionswellenlängenbereich. Die Kontrollsequenz wechselwirkt bei Bestrahlung des Testfeldes mit der Probenmatrix in Abhängigkeit von der auf das Testfeld aufgegebenen Probenmenge. Die Kontrollsubstanz kann dabei auch mit dem in der Probenmatrix enthaltenen Wasser reagieren. Ein Beispiel, das in DE 102 48 555 A1 genannt ist, verwendet Chlorphenolrot als Analyt-unabhängigen Farbbildner zur Bestimmung der Probenmenge und 2,18-Phosphormolybdänsäure als Analyt-spezifisches Reagenz zur Bestimmung der Glucosekonzentration in einer Probe, z. B. einer Blutprobe. In dem genannten Beispiel dieses Dokuments müssen somit zwei Wellenlängenbereiche detektiert werden, was dieses Testsystem apparativ aufwändig macht.
  • Shamsipur et al. (Analytica Chinica Acta 2004, 501:55-60) betrifft eine Optodenmembran, welche den Farbstoff TTBB enthält, dessen Fluoreszenz nach Komplexierung mit Ni2+-Ionen gequencht wird.
  • DE 695 13 683 T2 betrifft einen Ionensensor zur Detektion von pH-Änderungen, welcher den Fluoreszenzfarbstoff APTSC verwendet.
  • DE 696 30 531 T2 offenbart ein Fluoreszenzverfahren mit gleichzeitiger Doppelanregung/Einfachemission zur Messung von pH und pCO2. Das Verfahren setzt eine Indikatorspezies frei, die ein Absorptions- oder Anregungsspektrum mit einem ersten Bereich und einem zweiten Bereich hat, wobei der erste und der zweite Bereich nicht wesentlich überlappen und ein Emissionspektrum besitzen, das von dem Absorptions- oder Anregungsspektrum verschieden ist.
  • EP 1 394 219 A1 betrifft pH-sensitive Cyaninfarbstoffe als reaktive Fluoreszenzreganzien, insbesondere LysoSensor Blue DND-167.
  • US 4,255,053 A offenbart ein Verfahren zum Einsatz von zwei Indikatorsubstanzen (Analytindikator, Referenzindikator) zur Konzentrationsbestimmung eines Analyten. Gemäß US 4,255,053 A ist es besonders vorteilhaft, den Referenzindikator so zu wählen, dass die Emissionsspektren des Analytindikators und des Referenzindikators nicht überlappen. Dies macht den Einsatz von zwei Wellenlängebereichen mit dem entsprechenden apparativen Aufwand notwendig.
  • Die der Erfindung zugrunde liegenden Aufgabe bestand darin, ein System und ein Verfahren zum Nachweis eines Analyten in einer flüssigen Probe bereitzustellen, welches mit einer Referenzsubstanz und einer analyt-spezifischen Substanz durchgeführt werden kann, ohne dabei den im Stand der Technik beschriebenen hohen apparativen Aufwand in Kauf nehmen zu müssen.
  • Die erfindungsgemäße Aufgabe wird gelöst durch ein System für den Lumineszenz-Nachweis eines Analyten in einer flüssigen Probe, umfassend einen Träger, umfassend eine Analyt-spezifische Substanz, die in der Lage ist, bei Kontakt mit dem Analyten ein erstes Lumineszenzsignal abzugeben, und eine Referenzsubstanz, die in der Lage ist, ein zweites Lumineszenzsignal abzugeben welches durch Kontakt mit der flüssigen Probe gequencht wird, wobei ein einziger Detektor zum Messen der Lumineszenzsignale der Analyt-spezifischen Substanz und der Referenzsubstanz verwendet wird.
  • Überraschendeweise lassen sich aus dem Stand der Technik bekannte Nachweisverfahren dadurch erfindungsgemäß vereinfachen, dass eine Referenzsubstanz verwendet wird, welche in Abwesenheit der Probe ein Lumineszenzsignal abgibt, welches als Referenzsignal verwendet werden kann. Bei Zugabe der Probe wird dieses Lumineszenzsignal schlagartig im wesentlichen gequencht, d.h. es liefert im wesentlichen kein Signal mehr, oder zumindest ein sehr stark verringertes Signal.
  • Besonders vorteilhaft für die vorliegende Erfindung ist es, wenn Anregung und Emission bei etwa den gleichen Wellenlängen liegen wie für die analytspezifische Substanz. Dies bedeutet, dass dann für die Detektion der Lumineszenzsignale ein einziger Detektor verwendet werden kann.
  • Durch die Eigenschaft der Referenzsubstanz, in Abwesenheit der Probe ein Lumineszenzsignal abzugeben, was dann bei Inkontaktbringen mit der Probe gequencht wird, kann die Referenzsubstanz nicht nur zum Nachweis des Analyten verwendet werden, sondern auch zum Bestimmen der Probenmenge, zum Bestimmen der Menge des Analyten und/oder der Funktionsbereitschaft des Trägers. Die Referenzsubstanz kann beispielsweise so gewählt werden, dass ihr Lumineszenzsignal bei Benetzung gequencht wird. Dann kann die Funktionsbereitschaft des Testsystems sichtbar gemacht werden. Falls also der Träger, der das Testsystem umfasst, in etwa bei der Lagerung feucht geworden ist oder dgl., oder andere Substanzen mit ihm in Kontakt gekommen sind, wird dieses Lumineszenzsignal der Referenzsubstanz gequencht sein, und es ist erkennbar, dass dieses Testsystem nicht funktionsbereit ist.
  • Vorzugsweise ist das Quenchen reversibel, d.h. wird die Probe oder insbesondere die Benetzung entfernt bzw. rückgängig gemacht, so kann auch das Lumineszenzsignal wieder hergestellt werden.
  • Damit kann neben der Referenzierung eine Benetzungserkennung und/oder eine Füllkontrolle mit dem erfindungsgemäßen System erreicht werden. Wird z.B. auf dem Träger ein Testfeld vorgesehen und dieses nicht vollständig von der Probe benetzt, bleibt ein Restlumineszenzsignal bestehen. Es ist dann möglich, rechnerisch eine Korrektur im Bezug auf das Analytsignal über diese Restlumineszenz zu machen.
  • Wenn die Lumineszenzeigenschaften im Bezug auf die Umgebungsfeuchte reversibel sind, kann eine solche Referenzsubstanz auch als Feuchteindikator verwendet werden. Der Feuchteindikator gibt dann über die Lagerbedingungen des Testsystems und seine Funktionsbereitschaft Auskunft. Man kann somit die Referenzsubstanz auch als Indikator für ein zu wählendes Verfallsdatum des Testsystems verwenden.
  • Lumineszenzsubstanzen, insbesondere Fluorophore, die solche Eigenschaften aufweisen, sind im Stand der Technik kaum bekannt. Die meisten Fluorophore erfahren in feuchter Umgebung eine Fluoreszenzerhöhung und kein Quenchen.
  • Als Referenzsubstanz kommen prinzipiell alle Substanzen infrage, welche in der Lage sind, ein Lumineszenzsignal abzugeben, welches durch Kontakt mit der Probe gequencht wird. Hierbei können alle Arten von Substanzen verwendet werden, die durch Kontakt mit irgendeinem Bestandteil der Probe in ihrem Lumineszenzsignal gequencht werden. Bestandteile in zu untersuchenden Proben, welche das Quenchen auslösen können, sind z.B. Wasser, Calcium, Magnesium oder andere Metalle oder deren Ionen, der pH-Wert sowie weitere Faktoren.
  • Wenn Wasser der für das Quenchen auslösende Faktor ist, ist die Referenzsubstanz vorzugsweise ausgewählt aus der Klasse der Chalcone der Formel I.
  • Chalcone sind im Stand der Technik bekannt (B.M. Krasovitskii, D.G. Pereyaslova, ZH. Vsesoyuznogo Obscchestva im. D.I. Mendeleeva, 10 (6), 704 (1965); G.E. Dobretsov, V.A. Petrov, Yu.A. Vladimirov, Studia Biophysica Berlin, 71 (3), 181-187 (1978)).
  • Bevorzugt sind Substanzen der allgemeinen Formel I,
    Figure 00090001
    wobei einer der Reste R2, R3 und R5 ausgewählt ist aus NR11R12 und SO3Na. Die übrigen Substituenten R1, R4, R6, R6, R8, R9 und R10 können beliebige Substituenten sein, vorzugsweise Wasserstoff oder Halogen, insbesondere F, Cl, Br und I.
  • R11 und R12 sind ausgewählt aus Wasserstoff, C1-C4-Alkyl, insbesondere Methyl, Ethyl, Propyl und Butyl, und CH2CH2-SO3Na.
  • Besonders bevorzugte Substanzen, die als erfindungsgemäße Referenzsubstanz geeignet sind, sind Aminochalcone und Chlorchalcone, insbesondere gemäß den allgemeinen Formeln II, III und IV.
  • Figure 00090002
  • Figure 00100001
  • Chlorchalcon wurde gemäß einem Verfahren von Krasovitskii hergestellt (B.M. Krasovitskii, D.G. Pereyaslova, ZH. Vsesoyuznogo Obscchestva im. D.I. Mendeleeva, 10 (6), 704 (1965)).
  • Aminochalcon, bei dem R11 und R12 Methyl sind, ist gewerblich erhältlich und wurde für orientierende Untersuchungen eingesetzt.
  • Das Aminochalcon der allgemeinen Formel V, bei der R11 und R12 beide CH2CH2-SO3Na sind, wurde über eine mehrstufige Synthese hergestellt.
  • Eine weitere bevorzugte Substanz ist somit die der Formel V.
  • Figure 00110001
  • Die Quenchreaktion kann auch durch Metallionen hervorgerufen werden. Es sind somit auch solche Verbindungen als Referenzsubstanzen erfindungsgemäß geeignet, deren Lumineszenzsignal bei Kontakt mit Metallionen gequencht wird.
  • Insbesondere ist es möglich, Referenzsubstanzen auszuwählen, bei denen das Lumineszenzsignal durch den Kontakt mit Calcium- bzw. Magnesiumionen gequencht wird. Hierfür kommen z.B. Fluoreszenzfarbstoffe infrage, die bei einer Komplexbildung mit Ca2+ und/oder Mg2+ aufhören zu fluoreszieren bzw. sehr reduziert fluoreszieren.
  • Ein Beispiel für einen solchen Fluoreszenzfarbstoff ist FuraRED, welcher von der Firma Molprobes erhältlich ist. FuraRED hat die folgende Struktur:
    Figure 00110002
  • Eine dritte erfindungsgemäß geeignete Referenzsubstanz ist eine, welche auf eine pH-Änderung anspricht. Es handelt sich hierbei um Substanzen, deren Lumineszenzsignal bei einer pH-Wert-Änderung gequencht wird.
  • Dies ist besonders vorteilhaft für Proben, wie z.B. Blut. Blut hat eine sehr hohe Pufferkraft und ist daher in der Lage, einen vorher im Testsystem eingestellten pH-Wert zu überspielen. Ist das Testsystem beispielsweise auf einen niedrigeren pH-Wert eingestellt (beispielsweise pH 5), wird bei Auftrag einer Blutprobe das Testsystem umgepuffert auf pH 7.
  • Ein Beispiel für eine solche Referenzsubstanz ist LysoSensor Blue DND-167 von Molprobes (Katalog Nr. L7533, ABS/EM' (nm): 373/425, PKA: 5,1, geeigneter pH-Bereich: 4,5-6,0).
  • LysoSensor Blue DND-167
    Figure 00120001
  • Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist auch ein Verfahren zum Nachweis eines Analyten in einer flüssigen Probe durch Lumineszenz, umfassend
    • (i) Bereitstellen eines Trägers, umfassend eine Analyt-spezifische Substanz, die in der Lage ist, bei Kontakt mit dem Analyten ein erstes Lumineszenzsignal abzugeben, und umfassend eine Referenzsubstanz, die in der Lage ist, ein zweites Lumineszenzsignal abzugeben, welches durch Kontakt mit der flüssigen Probe gequencht wird,
    • (ii) Inkontaktbringen des Trägers mit einer flüssigen Probe, die einen nachzuweisenden Analyten umfasst, und
    • (iii) Messen der Lumineszenzsignale und Nachweisen des Analyten durch Vergleichen der Lumineszenzsignale, wobei ein einziger Detektor zum Messen der Lumineszenzsignale der Analyt-spezifischen Substanz und der Referenzsubstanz verwendet wird.
  • Bei diesem Verfahren ist es ebenfalls, wie oben bereits erwähnt, bevorzugt, eine Referenzsubstanz und eine Analyt-spezifische Substanz zu verwenden, die im Wesentlichen im gleichen Wellenlängenbereich angeregt werden und emittieren. Vorzugsweise wird zunächst das Lumineszenzsignal der Referenzsubstanz in Abwesenheit der Probe gemessen, anschließend wird die flüssige Probe aufgebracht, und es wird das Lumineszenzsignal gemessen, welches von der Probe hervorgerufen wird. Dies geschieht durch Verwendung eines einzigen Detektors.
  • Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung einer Substanz, die in der Lage ist, ein Lumineszenzsignal abzugeben, welches bei Kontakt mit einer Flüssigkeit gequencht wird, als Referenzsubstanz in einem Verfahren zum Nachweis eines Analyten, wobei ein einziger Detektor zum Nachweis des Analyten und zum Messen der Referenzsubstanz verwendet wird.
  • Noch ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung einer Substanz, die in der Lage ist, ein Lumineszenzsignal abzugeben, welches bei Kontakt mit einer Flüssigkeit gequencht wird, als Referenzsubstanz zur Bestimmung der Probenmenge, wobei ein einziger Detektor zum Messen einer Analyt-spezifischen Substanz und der Referenzsubstanz verwendet wird.
  • Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung einer Substanz, die in der Lage ist, ein Lumineszenzsignal abzugeben, welches bei Kontakt mit einer Flüssigkeit gequencht wird, als Referenzsubstanz zur Feststellung der Funktionsbereitschaft eines Systems zum Nachweis eines Analyten.
  • Beschreibung der Figuren
  • 1 zeigt den Messbereich für die Messung für das Lumineszenzsignal eines Analyten mit oder ohne Referenzsubstanz gemäß Verfahren des Standes der Technik.
  • 2 zeigt die Kinetik des Quenchens von Dimethylaminochalcon bei Benetzung.
  • 3 zeigt ein Testsystem unter Verwendung eines Chalcons mit 0,05 Feststoffgehalt. Als Proben wurden 4 Lösungen, jeweils enthaltend 0 mg/dl, 100 mg/dl, 300 mg/dl und 700 mg/dl Glucose verwendet. Es wurde die Intensität der Lumineszenz gemessen und mit dem gequenchten Signal, das von der Kontrollprobe mit 0 mg/dl Glucose stammte, verglichen. Die Differenz-Counts sind maximal, wenn ausreichend Probe aufgetragen wurde. Sie werden immer kleiner, je weniger Probe aufgetragen wird.
  • 4 zeigt die Anzahl der Counts pro Volumen im selben Testformat wie in 3 beschrieben. Ab ca. 1 μl wird ein Plateau erreicht, unterhalb dessen keine zuverlässige Messung möglich ist.
  • 5 zeigt das Absorptions- und Emissionsspektrum von FuraRED.
  • 6 zeigt die Fluoreszenzemission von LysoSensor Blue DND-167 in Abhängigkeit des pH-Werts.
  • Beispiele
  • Beispiel 1
  • In einer einfachen Rezeptur wurde die Funktion des Dimethylaminochalcons überprüft. Da dieses Chalcon nicht wasserlöslich ist, wurde Methanol als Wasserersatz verwendet.
  • Dabei war schon visuell erkennbar, dass das unter UV-Licht in trockenem Zustand stark fluoreszierende Chalcon schlagartig keine Fluoreszenz mehr zeigt, wenn ein Tropfen MeOH aufgbracht wird.
  • Testrezeptur I:
    Figure 00150001
  • Das Chalcon wurde in MeOH gelöst und mit dem Transpafill versetzt. Zu dieser Mischung wurde Propiofan gegeben und die Aufschlemmung homogonisiert. Anschließend wurde die Mischung auf eine Pokalonfolie aufgerakelt und bei 50°C für 5 Minuten getrocknet.
  • Die in 2 dargestellte Messung zeigt die Kinetik des Quenchens, wenn ein Tropfen Methanol auf die grünlich leuchtende Schicht, die auf die Pokalonfolie aufgerakelt wurde, aufgebracht wird. Hier sieht man ganz deutlich, dass ein schlagartiges Quenchen bei Aufbringen von Methanol erreicht wird, was jedoch reversibel ist, sobald das Methanol wieder von der Chalconschicht verdunstet d.h. trocknet.

Claims (15)

  1. System für den Lumineszenz-Nachweis eines Analyten in einer flüssigen Probe, umfassend einen Träger, umfassend eine Analyt-spezifische Substanz, die in der Lage ist, bei Kontakt mit dem Analyten ein erstes Lumineszenzsignal abzugeben, und eine Referenzsubstanz, die in der Lage ist, ein zweites Lumineszenzsignal abzugeben, welches durch Kontakt mit der flüssigen Probe gequencht wird, wobei ein einziger Detektor zum Messen der Lumineszenzsignale der Analyt-spezifischen Substanz und der Referenzsubstanz verwendet wird.
  2. System nach Anspruch 1, weiterhin umfassend eine Auswertungseinheit zum Bestimmen der Probenmenge, der Menge des Analyten und/oder der Funktionsbereitschaft des Trägers.
  3. System nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei die Analyt-spezifische Substanz und die Referenz Fluorophoren sind.
  4. System nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei die Referenzsubstanz ausgewählt ist aus Substanzen, deren Lumineszenzsignal bei Kontakt mit Wasser gequencht wird.
  5. System nach Anspruch 4, wobei die Referenzsubstanz eine Verbindung der Formel I ist,
    Figure 00170001
    wobei einer der Reste R2, R3 und R5 ausgewählt ist aus NR11R12 und SO3Na, und die übrigen Substituenten R1, R4, R6, R7, R8, R9 und R10 beliebige Substituenten sein können und R11 und R12 ausgewählt sind aus Wasserstoff, C1-C4-Alkyl und CH2CH2-SO3Na.
  6. System nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei die Referenzsubstanz ausgewählt ist aus Substanzen, deren Lumineszenzsignal bei Kontakt mit Metallionen gequencht wird.
  7. System nach Anspruch 6, wobei die Referenzsubstanz FuraRed ist.
  8. System nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei die Referenzsubstanz ausgewählt ist aus Substanzen, deren Lumineszenzsignal bei einer pH-Wert-Änderung gequencht wird.
  9. System nach Anspruch 8, wobei die Referenzsubstanz LysoSensor Blue DND-167 ist.
  10. System nach einem der vorhergehenden Ansprüche, wobei die Analyt-spezifische Substanz und die Referenzsubstanz in einem im wesentlichen gleichen Wellenlängenbereich angeregt werden und emittieren.
  11. Verwendung einer Substanz, die in der Lage ist, ein Lumineszenzsignal abzugeben, welches bei Kontakt mit einer Flüssigkeit gequencht wird, als Referenzsubstanz in einem Verfahren zum Nachweis eines Analyten, wobei ein einziger Detektor zum Nachweis des Analyten und zum Messen der Referenzsubstanz verwendet wird.
  12. Verwendung einer Substanz, die in der Lage ist, ein Lumineszenzsignal abzugeben, welches bei Kontakt mit einer Flüssigkeit gequencht wird, als Referenzsubstanz zur Bestimmung der Probenmenge, wobei ein einziger Detektor zum Messen einer Analyt-spezifischen Substanz und der Referenzsubstanz verwendet wird.
  13. Verwendung einer Substanz, die in der Lage ist, ein Lumineszenzsignal abzugeben, welches bei Kontakt mit einer Flüssigkeit gequencht wird, als Referenzsubstanz zur Feststellung der Funktionsbereitschaft eines Systems zum Nachweis eines Analyten.
  14. Verfahren zum Nachweis eines Analyten in einer flüssigen Probe durch Lumineszenz, umfassend (i) Bereitstellen eines Trägers, umfassend eine Analyt-spezifische Substanz, die in der Lage ist, bei Kontakt mit dem Analyten ein erstes Lumineszenzsignal abzugeben, und umfassend eine Referenzsubstanz, die in der Lage ist, ein zweites Lumineszenzsignal abzugeben, welches durch Kontakt mit der flüssigen Probe gequencht wird, (ii) Inkontaktbringen des Trägers mit einer flüssigen Probe, die einen nachzuweisenden Analyten umfasst, und (iii) Messen der Lumineszenzsignale und Nachweisen des Analyten durch Vergleichen der Lumineszenzsignale, wobei ein einziger Detektor zum Messen der Lumineszenzsignale der Analyt-spezifischen Substanz und der Referenzsubstanz verwendet wird.
  15. Verfahren nach Anspruch 14, wobei das Lumineszenzsignal der Referenzsubstanz vor dem in Kontaktbringen des Trägers mit der flüssigen Probe gemessen wird.
DE102004051830A 2004-10-25 2004-10-25 Multifunktionales Referenzsystem bei Analytbestimmungen durch Fluoreszenz Expired - Fee Related DE102004051830B4 (de)

Priority Applications (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102004051830A DE102004051830B4 (de) 2004-10-25 2004-10-25 Multifunktionales Referenzsystem bei Analytbestimmungen durch Fluoreszenz
US11/666,198 US8759112B2 (en) 2004-10-25 2005-10-25 Multifunctional reference system for analyte determinations by fluorescence
CA2585041A CA2585041C (en) 2004-10-25 2005-10-25 Multifunctional reference system for analyte determinations by fluorescence
EP05798048A EP1805503A1 (de) 2004-10-25 2005-10-25 Multifunktionales referenzsystem bei analybestimmungen durch fluoreszenz
CN200580036606XA CN101048651B (zh) 2004-10-25 2005-10-25 多功能荧光分析检测参比体系
PCT/EP2005/011448 WO2006045596A1 (de) 2004-10-25 2005-10-25 Multifunktionales referenzsystem bei analybestimmungen durch fluoreszenz
JP2007537234A JP4954078B2 (ja) 2004-10-25 2005-10-25 蛍光による分析対象物質の決定における多機能参照システム
HK08103503.6A HK1113405A1 (en) 2004-10-25 2008-03-28 Multifunctional reference system for use in analyte detection by fluorescence

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102004051830A DE102004051830B4 (de) 2004-10-25 2004-10-25 Multifunktionales Referenzsystem bei Analytbestimmungen durch Fluoreszenz

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE102004051830A1 DE102004051830A1 (de) 2006-04-27
DE102004051830B4 true DE102004051830B4 (de) 2007-12-13

Family

ID=35427590

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE102004051830A Expired - Fee Related DE102004051830B4 (de) 2004-10-25 2004-10-25 Multifunktionales Referenzsystem bei Analytbestimmungen durch Fluoreszenz

Country Status (8)

Country Link
US (1) US8759112B2 (de)
EP (1) EP1805503A1 (de)
JP (1) JP4954078B2 (de)
CN (1) CN101048651B (de)
CA (1) CA2585041C (de)
DE (1) DE102004051830B4 (de)
HK (1) HK1113405A1 (de)
WO (1) WO2006045596A1 (de)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102008057115A1 (de) * 2008-11-13 2010-05-20 Lre Medical Gmbh Verfahren zur quantitativen Bestimmung der Konzentration von Fluorophoren einer Substanz in einer Probe und Vorrichtung zu seiner Durchführung
DE102021102505A1 (de) 2020-12-21 2022-06-23 Endress+Hauser Conducta Gmbh+Co. Kg Optochemischer Sensor sowie Verfahren zum Messen von lumineszierenden Analyten in einem Messmedium

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010105850A2 (de) 2009-03-20 2010-09-23 Roche Diagnostics Gmbh Testelement zum bestimmen einer körperflüssigkeit und verfahren zum messen
KR101669739B1 (ko) * 2011-11-14 2016-10-27 에프. 호프만-라 로슈 아게 샘플에서 적어도 하나의 분석물을 검출하기 위한 분석 장치

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4255053A (en) * 1977-05-06 1981-03-10 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. Photometer including auxiliary indicator means
DE3852108T2 (de) * 1987-09-03 1995-03-23 Terumo Corp Vorrichtung und verfahren zur optischen messung der konzentration an material.
DE69513683T2 (de) * 1994-10-31 2000-06-08 Minnesota Mining & Mfg Ionensensor und Verfahren zu dessen Herstellung
DE19903506A1 (de) * 1999-01-29 2000-08-10 Inst Chemo Biosensorik Verfahren, Gefäß und Vorrichtung zur Überwachung der Stoffwechselaktivität von Zellkulturen in flüssigen Medien
WO2002103334A1 (de) * 2001-06-18 2002-12-27 Presens Precision Sensing Gmbh Sauerstoffsensoren auf mikrotiterplatte
EP1394219A1 (de) * 1999-06-09 2004-03-03 Carnegie-Mellon University PH-sensitive Cyaninfarbstoffe als reaktive fluoreszierende Reagenzien
DE10248555A1 (de) * 2002-10-18 2004-05-06 Roche Diagnostics Gmbh Verfahren zur Erkennung und Kompensation der Unterdosierung von Teststreifen
DE69630531T2 (de) * 1995-09-12 2004-08-12 Optical Sensors Inc., Minneapolis FLUORESZENZMETHODE MIT GLEICHZEITIGER DOPPELANREGUNG/EINFACHEMISSION ZUR MESSUNG VON pH UND pCO2

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3278024D1 (en) 1981-09-08 1988-02-25 Eastman Kodak Co Method and apparatus for detecting sample fluid
US4420566A (en) * 1982-06-10 1983-12-13 Eastman Kodak Company Method and apparatus for detecting sample fluid on an analysis slide
US5057427A (en) * 1988-04-07 1991-10-15 Sepracor, Inc. Method for resolution of stereoisomers
US5114350A (en) * 1989-03-08 1992-05-19 Cholestech Corporation Controlled-volume assay apparatus
JP2855447B2 (ja) 1989-06-15 1999-02-10 三菱レイヨン株式会社 トナー
EP0429907B1 (de) * 1989-11-21 1994-06-01 Bayer Ag Optischer Biosensor
AU8720891A (en) * 1991-01-04 1992-08-17 Iowa State University Research Foundation Inc. An optical probe and method for monitoring an analyte concentration
JP4272347B2 (ja) 1997-08-01 2009-06-03 プレセンス プレシジョン センシング ゲーエムベーハー 蛍光強度のシグナルを基準化するための方法および装置
EP1062516A1 (de) 1998-03-11 2000-12-27 Sensors for Medicine and Science, Inc. Verwendung von fluoreszenz-lanthanid-chelaten zum nachweis von analyten
US6204067B1 (en) * 1999-06-17 2001-03-20 Board Of Trustees Operating Michigan State University Methods of identifying modulators of the estrogen receptor
DE10101576B4 (de) 2001-01-15 2016-02-18 Presens Precision Sensing Gmbh Optischer Sensor und Sensorfeld
DE10151217B4 (de) * 2001-10-16 2012-05-16 Carl Zeiss Microlmaging Gmbh Verfahren zum Betrieb eines Laser-Scanning-Mikroskops
KR101164048B1 (ko) 2002-05-16 2012-07-18 에프. 호프만-라 로슈 아게 비-재생성 효소-보조효소 복합체를 포함하는 방법 및 시약시스템
US7198756B2 (en) 2002-07-11 2007-04-03 Optical Sensors Incorporated Non-invasive measurement of pH

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4255053A (en) * 1977-05-06 1981-03-10 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. Photometer including auxiliary indicator means
DE3852108T2 (de) * 1987-09-03 1995-03-23 Terumo Corp Vorrichtung und verfahren zur optischen messung der konzentration an material.
DE69513683T2 (de) * 1994-10-31 2000-06-08 Minnesota Mining & Mfg Ionensensor und Verfahren zu dessen Herstellung
DE69630531T2 (de) * 1995-09-12 2004-08-12 Optical Sensors Inc., Minneapolis FLUORESZENZMETHODE MIT GLEICHZEITIGER DOPPELANREGUNG/EINFACHEMISSION ZUR MESSUNG VON pH UND pCO2
DE19903506A1 (de) * 1999-01-29 2000-08-10 Inst Chemo Biosensorik Verfahren, Gefäß und Vorrichtung zur Überwachung der Stoffwechselaktivität von Zellkulturen in flüssigen Medien
EP1394219A1 (de) * 1999-06-09 2004-03-03 Carnegie-Mellon University PH-sensitive Cyaninfarbstoffe als reaktive fluoreszierende Reagenzien
WO2002103334A1 (de) * 2001-06-18 2002-12-27 Presens Precision Sensing Gmbh Sauerstoffsensoren auf mikrotiterplatte
DE10248555A1 (de) * 2002-10-18 2004-05-06 Roche Diagnostics Gmbh Verfahren zur Erkennung und Kompensation der Unterdosierung von Teststreifen

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Analytica Chimica Acta, 501, 2004, S. 55-60 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102008057115A1 (de) * 2008-11-13 2010-05-20 Lre Medical Gmbh Verfahren zur quantitativen Bestimmung der Konzentration von Fluorophoren einer Substanz in einer Probe und Vorrichtung zu seiner Durchführung
US8334522B2 (en) 2008-11-13 2012-12-18 Lre Medical Gmbh Method for the quantitative determination of the concentration of fluorophores of a substance in a sample and apparatus for carrying out the same
DE102008057115B4 (de) * 2008-11-13 2013-11-28 Lre Medical Gmbh Verfahren zur quantitativen Bestimmung der Konzentration von Fluorophoren einer Substanz in einer Probe und Vorrichtung zu seiner Durchführung
DE102021102505A1 (de) 2020-12-21 2022-06-23 Endress+Hauser Conducta Gmbh+Co. Kg Optochemischer Sensor sowie Verfahren zum Messen von lumineszierenden Analyten in einem Messmedium

Also Published As

Publication number Publication date
CA2585041A1 (en) 2006-05-04
JP4954078B2 (ja) 2012-06-13
WO2006045596A1 (de) 2006-05-04
US8759112B2 (en) 2014-06-24
EP1805503A1 (de) 2007-07-11
JP2008518199A (ja) 2008-05-29
US20080014655A1 (en) 2008-01-17
CN101048651B (zh) 2011-09-14
CN101048651A (zh) 2007-10-03
DE102004051830A1 (de) 2006-04-27
CA2585041C (en) 2011-12-13
HK1113405A1 (en) 2008-10-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0906572B1 (de) Maskierung der hintergrundfluoreszenz und -lumineszenz bei der optischen analyse biologisch medizinischer assays
DE10251757B4 (de) Vorrichtung zur Bestimmung der Konzentration von in einer zu untersuchenden Probe enthaltenen Liganden
WO1999006821A1 (de) Verfahren und vorrichtung zur referenzierung von fluoreszenzintensitätssignalen
EP2549264A1 (de) Verfahren und System zum Bestimmen der Konzentration von Substanzen in Körperflüssigkeiten
EP1346223A2 (de) Reagens zur lumineszenz-optischen bestimmung eines analyten
WO1992010740A1 (de) Verfahren und vorrichtung zur kontinuierlichen und reversiblen messung der konzentration einer chemischen spezies
EP0628805B1 (de) Lumineszenzoptischer Indikator zur Bestimmung der Aktivität von Alkalimetallionen in einer Probenlösung
EP2805151B1 (de) Optode zur bestimmung von chemischen parametern
AT390145B (de) Verfahren zur bestimmung der konzentration von in einer substanz enthaltenen stoffen, insbesondere von sauerstoff
AT393035B (de) Verfahren zur quantitativen bestimmung zumindest eines chemischen parameters eines probenmediums
DE102004051830B4 (de) Multifunktionales Referenzsystem bei Analytbestimmungen durch Fluoreszenz
EP2408931A2 (de) Testelement zum bestimmen einer körperflüssigkeit und verfahren zum messen
WO2009095189A1 (de) Verfahren zum sensitiven nachweis von polyaminosäuren und anderen makromolekülen
EP1295124A1 (de) Kompetitives assay-verfahren
EP1340072B1 (de) Verfahren und mittel zur bestimmung von gesamthärte
DE3908918A1 (de) Verfahren zur bestimmung von terbium oder europium enthaltenden chemischen komponenten
DE102019132525B3 (de) Verfahren und Optode zur Bestimmung der Konzentration eines Analyten in einer Probenflüssigkeit
DE102016208967B4 (de) Photometer mit quantitativer Volumenerfassung
DE102020134517A1 (de) Optisches Sensorelement, optischer pH-Sensor sowie Verfahren zur Funktionsüberwachung eines optischen pH-Sensors
DE102011002080B4 (de) Vorrichtung und Verfahren zur Bestimmung der Konzentration von Fluorophoren in einer Probe
DE2318044A1 (de) Verfahren zur analytischen bestimmung von bestandteilen in einer materialprobe wie einer biologischen fluessigkeit
WO2005019822A1 (de) Verfahren und vorrichtung zur detektion von analyten
DE102013205346A1 (de) Lanthanoidkomplexbasierte spektroskopische Hämoglobinbestimmung in einem flüssigen biologischen Medium
DE102004059704B4 (de) Spektroskopischer Nachweis anorganischer, organischer oder biologischer Stoffe
WO2021052934A1 (de) Optischer ph-sensor

Legal Events

Date Code Title Description
OP8 Request for examination as to paragraph 44 patent law
8364 No opposition during term of opposition
R119 Application deemed withdrawn, or ip right lapsed, due to non-payment of renewal fee