DD272869A1 - Naehrmedium zur herstellung von 7-iso-jasmonsaeure - Google Patents
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Abstract
Die Erfindung betrifft ein Naehrmedium zur Herstellung von 7-iso-Jasmonsaeure in aerober Kultur, das fuer die Kultivierung des Pilzes Botryodiplodia theobromae in Hauptkultur genutzt werden kann. 7-iso-Jasmonsaeure kann auf Grund ihrer biologischen Aktivitaet als Pflanzenwachstumsregulator eingesetzt werden. In Form ihrer niederen Ester dient sie als Parfuemstoff. Das erfindungsgemaesse Naehrmedium enthaelt als Grundbestandteil Molke und als Zusatz Oelpresskuchen. Durch die Nutzung dieser landwirtschaftlichen Ab- bzw. Nebenprodukte, kann die Produktion von 7-iso-Jasmonsaeure oekonomisch guenstig gestaltet werden. Das beschriebene Naehrmedium ist fuer die aerobe Emers- oder Submerskultur geeignet.
Description
Nährmedium zur Herstellung von 7-iso-Jasmonsäure
Die Erfindung betrifft ein Näh.rraedium zur Herstellung von 7-iso-Jasmonsäure (synonym mit 2-iso-Jasmonsäure oder 2-Epijaatnonsäure) durch Stämme der Art Botryodiplodia theobromae Pat. in submerser und emerser Kultur. 7-iso-Jasmonsäure und aus ihr durch chemische Modifiketion hergestellte Analoga besitzen als Wirkstoffe Bedeutung für die biologische Prozeßsteuerung in der Land- und Gartenwirtschaft. Nach Applikation ist sie in Pflanzen bei Wachstums-, Entwicklungs- und Stoffwechselprozessen regulatorisch wirksam. Niedere Estei der 7-iso-0'asmonsüure sind als Duftstoffe für die kosmetische Industrie von Interesse. Aus diesen Gründen benötigt man Verfahren zur stabilen Produktion von 7-iso-Jasmonsäure. Die Erfindung stellt ein ökonomisch vorteilhaftes Nährmedium für solche Verfahren zur Verfügung.
Charakteristik des bekannten Standes der Technik
Bisher sind verschiedene Verfahren zur fermentativen Gewinnung von Jasmonsäure und Jasmonsäureanaloga bekannt (Broadbent, D., et al., GB-Patent 1286266; Mierschp 0., et al,, DD-Pe.tent 216734).
In allen vorgeschlagenen Verfahren kommen teure Reinstchemikalien als Bestandteile des Nährmediums zum Einsatz. Bei dem von Miersch und Mitarbeitern beschriebenen mikrobiellen Verfahren zur Herstellung von 7-iso-Jasmonsäure werden hochwertige pflanzliche Rohstoffe, wie Sojamehl, Maisquellwasser und Zitrusextrakt, als C- und N-Quelle verwendet.
Die Gewinnung von 7-iso-Jasmonsäure auf der Basie landwirtschaftlicher Ab- und Nebenprodukte wurde bisher noch nicht beschrieben.
Es ist das Ziel der Erfindung, durch Einsatz eines kostengünstigen Nährmediums die Produktion von 7-iso-Jasmonsäure durch Stämme der Art Botryodiplodia theobromae ökonomischer zu gestalten«
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, auf der Basis landwirtschaftlicher Ab- und Nebenprodukte ein Nährraedium zu ent- ' wiokeln, das eine hohe und stabile Jasmonsäureproduktion gewährleistet»
Erfindungsgemäß werden als Nährmedium für die Produktion von 7~iöo-Jasmonsäure in aeroben Kulturen von Stämmen der Art Botryodiplodia theobromae Molke und Ölpreßkuchen verwendet. Dabei ist Molke der Grundbestandteil, der mit 0,1 - 1 % Ölpreßkuchen supplementiert i^Lrd· Molke fällt als Rückstand der Käsebereitung in großen Mengen an· Sie enthält hauptsächlich Lactose und Proteine neben Mineralstoffen und wasserlöslichen Vitaminen· Ölpreßkuchen, auch Ölsaatenmehl genannt, ist ein Nebenprodukt der Ölgewinnung aus Ölsaat· Geeignet sind z· B. Ölsaatenmehle' von Sonnenblume und Raps·
Die Stämme der Art Botryodiplodia theobromae werden wahlweise unter submersen oder emersen Bedingungen kultiviert· Geeignet ist beispielsweise der Stamm D 7/2· Als Impfmaterial zur aeroben Fermentation dienen auf üblichem Wege angezogene Vorkulturen· Das erfindungsgemäße Nährmedium wird insbesondere für die Hauptkultur eingesetzt. Die Fermentation zur Produktion von 7-iso-Jasmonsäure erfolgt in Stand- oder SohÜttelkultur unter Einsatz des erfindungsgemäßen Mediums. Die Temperatur ist zwischen 20° C und 35° C, der pH-Wert zwischen 4,0 und 7,5 varrierbar· Vorzugsweise arbeitet man jedooh bei Temperaturen von 25 - 30° C, pH-Werten zwischen 5,0 und 6,0 und einer Kulturdauer von 5-10 Tagen·
Nach Beendigung der Fermentation wird die Kulturlösung duroh Zentrifugation vom Mikroorganismus abgetrennt· Die Reinigung
des Wirkstoffes erfolgt nach bekannten Verfahren.
Durch die Nutzung landwirtschaftlicher Ab- oder Nebenprodukte in dem erfindungagemäßen Nährmedium für die Produktion von 7-iso-Jaemonaäure werden hochwertige Ausgangsstoffe substituiert. Das neue Nährmedium gewährleistet eine hohe und stabile 7-iso-Jasmonsäureproduktion. Durch den Einsatz von Molke und Ölpreß« kuchen können die Prozeßkosten gesenkt und das Verfahren damit ökonomischer gestaltet werden. Die hergestellte 7-iso-Jasmonsäure kann durch einfache Verfahren in Jasmonsäure überführt werden.
Die folgenden Beispiele sollen die Erfindung erläutern. Die verwendeten Nährmedien sind der Tabelle 1 zu entnehmen.
Standkultur
Die Stamrahaltung des Pilzes Botryodiplodia theobrom?2 Stamm D 7/2 erfolgt auf Schrägagarröhrchen mit Malzagar. Naoh Bewuchs (28° C)werden die Kulturen bis zur nächsten Beimpfung bei 4° C gelagert. Eine Uberimpfung erfolgt im Abstand von acht Wochen. Mit dem Schrägagarröhrchen werden zur Erzeugung von Impfmaterial Petrischalen beimpft (Vorkultur "!; NL 3)· Eine weitere Vorkultur wird mit Mycelstanzstücken aus der ersten Vorkultur beimpft und 48 h bei 28° C auf einer Rundschüttelmaschine (250 U/min) inkubiert (NL 2). Die Beimpfung der Hauptkultur in 500 ml-Rundstehkolben mit je 100 ml Fährlösung (NL 1) erfolgt mit 48 h alten Vorkulturen. Es wird mit einer Animpfdichte von 0,3 - 0,5 g Trockenbiomasse/l gearbeitet. Die Fermentation erfolgt bei 30° C in St?ndkultur innerhalb von 5-10 Tagen, Nach Verbrauch der 0- und Energiequelle wird die Fermentation beendet. Die Abtrennung der Biomasse erfolgt durch Zentrifugation. Isolierung und Reinigung von 7-iso-Jasmonsäure werden nach bekannten Verfahren durchgeführt. Es v/erden Ausbeuten von ca, 500 mg 7-iso-Jasmonsäure pro Liter erzielt.
2726
BeiopjUl_2 Schuttelkultür
Die Stammhaltung und die Ausführung der Vorkulfcivierung von Botryodiplodia theobromae Stamm D 7/2 «rfolgt, wie in Ausführung8beispiel 1 dargestellt.
Die Beimpfung der Hauptkulturen in 500 ml-Rundstehkolben mit je 100 ml nährlösung (NL 1) erfolgt mit 48 h alten Vorkulturen· Es wird mit einer Aniiapfdichte von 0,5 g Trockenbiomasse/l gearbeitet. Die Fermentation wird auf einer RundschwingsohUttQlrnaschine (250 U/min) bei 30° C innerhalb von 5-7 Tagen duroh~ geführt. Es werden Ausbeuten von oa. 300 mg 7-iso-Jasmonsäure pro Liter erzielt. Abtrennung und Isolierung der 7~iso-Jasmonsäure erfolgen wie in Ausführungsbiiispiel 1.
Zusammensetzung der verwendeten Nährmedien (Angabe in Gramm pro Liter)
NL 1
NL 2
NL 3
| Glucose | - | 30 | 20 |
| Molke ad. | 1000 ml | - | - |
| Ölpreßkuchen | 5 | - | - |
| Malzextrakt | 30 | ||
| Pepton | - | VJl | |
| Hefeextrakt | M | VJl | VJl |
| Sojamehl | - | VJl | - |
| Maisquellwasser | - | 15 | - |
| Agar-Agar | mm | - | 20 |
| Aqua dest. ad | ma | 1000 ml | 1000 |
| pH vor dem Sterili | |||
| sieren | 5,5 | 5,5 | 6,8 |
| pH-Einstellung mit | NaOH | NaOH | NaOH |
| Autoklavieren | .leweila | 20 min b | ei 12 |
Claims (4)
1· Nährmedium zur Herstellung von 7-iso-Jasmonsäure in aeroben Kulturen von Stämmen der Art Botryodiplodia theobromae Pat· unter Verwendung einer assimilierbaren C-, N- und P-Quelle, dadurch gekennzeichnet, daß es Molke und Ölpreßkuchen enthält·
2· Nährmedium nach Anspruch 1, daduroh gekennzeichnet, daß es als Grundbestandteil Molke und als Zusatz 0,1 - 1 % Ölpreßkuchen enthält·
3. Nährmedium nach Anspruch 1 und 2, daduroh gekennzeichnet, daß man es als Hauptkulturraedium für die Produktion von 7-iso-Jaomonsäure durch Stämme von Botryodiplodia theobromae einsetzt«
4· Nährmedium nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß man es für aerobe Kulturen des Stammes D 7/2 einsetzt·
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD31653088A DD272869A1 (de) | 1988-06-08 | 1988-06-08 | Naehrmedium zur herstellung von 7-iso-jasmonsaeure |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD31653088A DD272869A1 (de) | 1988-06-08 | 1988-06-08 | Naehrmedium zur herstellung von 7-iso-jasmonsaeure |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DD272869A1 true DD272869A1 (de) | 1989-10-25 |
Family
ID=5599859
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DD31653088A DD272869A1 (de) | 1988-06-08 | 1988-06-08 | Naehrmedium zur herstellung von 7-iso-jasmonsaeure |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DD (1) | DD272869A1 (de) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997046695A1 (fr) * | 1996-06-06 | 1997-12-11 | Firmenich S.A. | Procede pour la preparation de cetones cycliques |
| EP1118672A2 (de) * | 1999-12-21 | 2001-07-25 | INTERNATIONAL FLAVORS & FRAGRANCES INC. | Herstellung von Jasmonsäure und Methylester als Gewürzmittel für Nahrungsmittel durch Diplodia gossypina |
-
1988
- 1988-06-08 DD DD31653088A patent/DD272869A1/de not_active IP Right Cessation
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997046695A1 (fr) * | 1996-06-06 | 1997-12-11 | Firmenich S.A. | Procede pour la preparation de cetones cycliques |
| EP1118672A2 (de) * | 1999-12-21 | 2001-07-25 | INTERNATIONAL FLAVORS & FRAGRANCES INC. | Herstellung von Jasmonsäure und Methylester als Gewürzmittel für Nahrungsmittel durch Diplodia gossypina |
| EP1118672A3 (de) * | 1999-12-21 | 2002-10-16 | INTERNATIONAL FLAVORS & FRAGRANCES INC. | Herstellung von Jasmonsäure und Methylester als Gewürzmittel für Nahrungsmittel durch Diplodia gossypina |
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