CZ83598A3

CZ83598A3 - Přípravek obsahující cyklosporin a způsob jeho přípravy

Info

Publication number: CZ83598A3
Application number: CZ98835A
Authority: CZ
Inventors: Jong Soo Woo
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 1996-06-19
Filing date: 1997-06-19
Publication date: 1998-07-15
Also published as: IL147369A0; CY2549B1; KR20000016761A; SG88752A1; SI9720011A; ATE392891T1; CA2226091A1; DE69731072D1; ES2227700T3; IL123840A0; CN1207044A; NO982382L; BR9706804A; HK1010492A1; NO323816B1; PT1413297E; MX9804414A; CA2226091C; EP1413297A1; PT869810E

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká například měkkých tobolek obsahujících jako aktivní složku cyklosporin. Přesněji se předkládaný vynález týká měkkých tobolek, které obsahují stabilní cyklosporinové prostředky v obalu z želatinové tobolky obsahujících určitou změkčující látku, a způsobu jejich přípravy.

Dosavadní stav techniky

Cyklosporin je specifická makromolekulám! (molární hmotnost 1202,64 g/mol) cyklická peptidická sloučenina obsahující 11 aminokyselin, která má široké rozmezí využitelných farmakologických aktivit, zejména imunosupresivní aktivitu a protizánětlivou aktivitu. Proto se cyklosporin používá pro potlačení vrozených imunologických reakcí organismů, které jsou způsobeny transplantovanými orgány a tkáněmi, například při transplantaci srdce, plic, jater, ledvin, slinivky břišní, kostní dřeně, kůže a rohovky a zejména při transplantaci cizích tkání a orgánů. Dále je cyklosporin využitelný při potlačení hematologických poruch jako je chudokrevnost, různá autoimunní onemocnění jako je systémový lupus erythematosus, idiopatický malabsorpční syndrom, atd., a zánětlivých onemocnění jako je arthritida, revmatické poruchy, atd. Cyklosporin je využitelný při léčbě onemocnění způsobených prvoky, například malárie, schistosomózy atd., a dále byl nedávno použit v chemoterapii.

Cyklosporin je vysoce lipofilní a hydrofobní. Proto je cyklosporin málo rozpustný ve vodě a také v organických rozpouštědlech jako je methanol, ethanol, aceton, ether, chloroform apod. Kvůli této nízké rozpustnosti cyklosporinu ve vodě je při orálním podávání cyklosporinu jeho biologická využitelnost výrazně nízká a může být silně ovlivněna stavem každého jednotlivého pacienta. Proto je velmi obtížné zachovat účinnou léčebnou koncentraci. Dále může cyklosporin vykázat značné • 4 ···· • 44

4 4 4 · 9

44 444 • · 4 · · 4

4 4 4 4 4

444 44 44 44

4 vedlejší účinky jako je nefrotoxicita. Protože je cyklosporin málo rozpustný ve vodě, je tedy velmi obtížné jej upravit do prostředků pro orální podávání. Proto se mnoho studií obšírně zabývalo přípravou prostředků, které jsou vhodné pro účinné orální podávání cyklosporinu, a které poskytnou jednotnou dávku a vhodnou biologickou využitelnost.

Prostředky vhodné pro orální podávání cyklosporinu, který je málo rozpustný ve vodě, byly obvykle upraveny do formy emulgovaného koncentrátu.

Jeden typický způsob použití této kombinace je popsán v U.S. patentu číslo 4,388,307, který byl uveřejněn 14. června 1983. Tento patent popisuje kapalné prostředky obsahující cyklosporin s využitím ethanolu. V souladu se způsobem, který je popsaný v této US patentové přihlášce, se cyklosporin spojí s nosičem skládajícím se z ethanolu jako další povrchově aktivní látky; olivového oleje jako rostlinného oleje a produktu transesterifikace triglyceridu přírodního rostlinného oleje a polyalkenpolyolu jako povrchově aktivní látky, za vzniku kapalného prostředku.

Výsledný kapalný prostředek se podává jako vodný roztok, který se velmi obtížně upravuje pro podávání a pro získání jednotné dávky pro orální podávání.

Aby se snížily obtíže ředění cyxklosporinových kapalných prostředků ve vodě před orálním podáváním, kapalné prostředky ve formě emulgovaného prekoncentrátu se upraví do měkkých tobolek, které jsou nyní komerčně dostupné pod názvem Sandimmune (registrovaná obchodní značka). Aby se splnila podmínka rozpustnosti cyklosporinu, v tomto případě cyklosporinové měkké tobolky obsahují ethanol. Protože ethanol může jako těkavá látka dokonce při teplotě místnosti prostoupit želatinový obal tobolky, preventivně se těkavosti ethanolu z měkké tobolky v průběhu skladování a distribuce předchází tak, že se měkké tobolky mohou zabalit do speciálního obalového materiálu, jako je hliník-hliníkové bublinové balení.

·· ··· · • · ·· '

Nedávno byly vyvinuty cyklosporinové prostředky, které jsou stabilní v průběhu skladování a dále poskytují stabilní biologickou dostupnost látek a rozdíl mezi jednotlivými pacienty, takže biologický účinek cyklosporinu je jednotně zachován. Jeden z prostředků, které byly vyvinuty pro tento účel, je popsán v korejské patentové přihlášce číslo 93-113. Tento prostředek se prodává pod registrovanou obchodní známkou Sandimmun Neoral. Protože se v tomto prostředku také využívá ethanol, může mít stejné nevýhody jako dřívější prostředky, které obsahovaly ethanol, například stabilitu při skladování a změny v obsahu ethanolu.

Podstata vynálezu

Studovali jsme mnoho kombinací různých povrchově aktivních látek, olejových složek, dalších povrchově aktivních látek atd., abychom našli cyklosporinový prostředek, který je stabilní a který má vyšší biologickou využitelnost a nižší rozdíl v úrovni množství v krvi mezi jednotlivými pacienty než dřívější prostředky obsahující cyklosporin, vzhledem k jeho farmakokinetickým vlastnostem. Nakonec jsme zjistili, že určité cyklosporinové prostředky obsahující složky definované níže mohou uspokojit výše zmíněné požadavky, a to nám umožnilo podat tento vynález.

Proto aspekt podle předkládaného vynálezu poskytuje prostředky, které jsou vhodné pro přípravu měkkých tobolek, které obsahují cyklosporin jako aktivní složku; polyethylenglykol jako hydrofilní látku nebo propylenkarbonát jako nehydrofilní látku nebo jejich směs; olejovou složku, která je definována níže a povrchově aktivní látku.

Další aspekt podle předkládaného vynálezu poskytuje měkké tobolky obsahující prostředky, které obsahují cyklosporin jako aktivní složku; polyethylenglykol jako hydrofilní látku nebo propylenkarbonát jako nehydrofilní látku nebo jejich směs; směs esterifikovaných mastných kyselin a primárních alkoholů, triglyceridu mastných kyselin se středním řetězcem (pokud je to • 44

9 4 4 4

44 4 4

4 4 4 · 4

4 4 4 4

444 44 44

4»«4

99 • 4 4 4 4

4 4 4 4

4 94 4 4 ·

4 4 4 4 • 4 44 44 nutné) a jako olejovou složku monoglycerid mastné kyseliny; povrchově aktivní látku, která má hodnotu HLB (hydrofilně lipofilní rovnováha) 8 až 17.

Dále jiný aspekt podle předkládaného vynálezu poskytuje způsob přípravy měkkých želatinových tobolek, které jsou definovány výše.

Přestože je předkládaný vynález popsán zejména s ohledem na měkké želatinové tobolky, mělo by být poznamenáno, že předkládaný vynález zahrnuje také samotné prostředky, které mohou být použity například jako roztoky pro pití, například jako Sandimmun Neoral, nebo prostředky v jiných jednotných dávkových formách.

V jednom aspektu se předkládaný vynález týká tobolek obsahujících cyklosporin, které mají vysokou stálost při skladování, například vykazují malé změny prostředku v čase a mají zvýšenou biologickou využitelnost, a skládají se z prostředků, ve kterých je obsažen cyklosporin jako aktivní hydrofilní látka nebo látka nebo jejich směs;

složka; polyethylenglykol jako propylenkarbonát jako nehydrofilní olejová složka, která je popsána níže; a povrchově aktivní látka.

Pro úpravu těchto prostředků obsahujících cyklosporin do měkkých tobolek se musí použít želatinový obal. Když se připravuje měkká tobolka s běžným obalem obsahujícím glycerin jako změkčovadlo, má měkká tobolka některé nevýhody, například se emulgovaný stav prekoncentrované emulse může měnit z důvodu vtékání 'glycerinu do emulse, a proto je rozpustnost cyklosporinu výrazně nižší, což způsobí, že se cyklosporin z emulse sráží.

Proto se v předkládaném vynálezu s výhodou jako změkčovadlo měkkých obalů tobolek používá želatinový obal, který obsahuje propylenglykol a polyethylenglykol, ne glycerin. Tím se vyřeší problém spojený s vtékáním glycerinu.

•	··			··		····
·· ·		•	•		•	•	• «	•		•
•
• ·		•	• ·		•	• ·	*··	•		•
• ·		•	•		•	• ·	•	•		•
···	··			··		·*	··>		··

Když se obal tobolky obsahující propylenglykol a polyethylenglykol v souladu s předkládaným vynálezem připraví pomocí způsobu chlazení vodou, pro který se běžně používá chladící válec, špatně se tento obal z válce odstraňuje. Tato odstranitelnost obalu tobolky z chladícího válce může být zlepšena pomocí chlazení chladícího válce nepřetržitě cirkulující chladíc! vodou, čímž se sníží teplota obalu na asi 17 °C. Obal tobolky, který se ochladí na nižší teplotu má ale nižší lepivost v průběhu procesu obalování a může způsobit snížení produktivity.

Proto způsob pro přípravu želatinových obalů, které neobsahují jako změkčovadlo glycerin podle předkládaného vynálezu, využívá způsob chlazení vzduchem místo dříve používaného způsobu chlazení vodou, při kterém se může obal tobolky ochladit na optimální teplotu pomocí proudu vzduchu z fénu, a proto se obal snadno odstraní z chladícího válce a dále se udržuje při optimální teplotě asi 21 °C, aby se zvýšila lepivost při procesu obalování a zajistila se vysoká produktivita.

Jak bylo uvedeno výše, látky v souladu s předkládaným vynálezem mohou být připraveny za použití želatinových obalů tobolek neobsahujících glycerin a za použití způsobu chlazení vzduchem za vzniku prostředků, které neobsahují ethanol jako nízkovroucí těkavé rozpouštědlo, a proto mají vyšší stálost při skladování, například vykazují malé změny prostředku v čase, a mají zvýšenou biologickou využitelnost.

Podrobněji se předkládaný vynález týká cyklosporinových prostředků, které obsahují:

1) cyklosporin jako aktivní složku;

2) polyethylenglykol nebo propylenkarbonát nebo jejich směs;

3) směs esterifikované mastné kyseliny a primárního alkoholu, a monoglyceridu mastné kyseliny, a popřípadě triglycerid mastné kyseliny se středním řetězcem, jako olejovou složku a

9 9 9

9

9 4 •9 «·9·

4) povrchově aktivní látku, která má hodnotu HLB (hydrofilně lipofilní rovnováha) 8 až 17, například želatinový obal obsahující polyethylenglykol a propylenglykol jako změkčovadlo. Další aspekt podle předkládaného vynálezu poskytuje cyklosporinový prostředek, který obsahuje:

1) cyklosporin jako aktivní složku; a

2) propylenkarbonát.

Pokud je to nutné, mohou tyto prostředky, které jsou také prostředky v souladu s předkládaným vynálezem, popřípadě dále obsahovat jakékoli další složky, které jsou popsány v předkládaném vynálezu.

Cyklosporin, který se používá jako farmaceuticky aktivní složka v prostředcích v souladu s předkládaným vynálezem, je cyklická peptidická sloučenina, která má využitelnou imunosupresivní aktivitu a protizánětlivou aktivitu, jak je popsáno výše. Jako cyklosporinová složka prostředků v souladu s předkládaným vynálezem může být využit také cyklosporin A, B, C, D, G, a podobně. Nejvýhodnější je cyklosporin A, protože má pevně stanovenou léčebnou účinnost a farmakologické vlastnosti.

Jako druhá složka prostředků v souladu s předkládaným vynálezem, která může působit jako další povrchově aktivní látka vedle polyethylenglykolu, který má vysokou teplotu varu, je netěkavá látka, která neprostupuje želatinovým obalem měkké tobolky a má vysokou rozpustnost pro cyklosporin, a může být použita jako hydrofilní složka. V prostředcích podle předkládaného vynálezu může být také použit jakýkoli polyethylenglykol, který je možné zkapalnit, například polyethylenglykol (PEG) o molární hmotnosti 200 až 600 g/mol, s výhodou PEG 200.

Alternativně se může jako nehydrofilní složka použít propylenkarbonát (teplota varu 242 °C) . V souladu s předkládaným ·· ···· vynálezem se může použít směs nehydrofilní látky a hydrofilní látky, která je definována výše. Pokud se jako složka podle předkládaného vynálezu použije směs polyethylenglykolu a propylenkarbonátu, obvykle se mísí v hmotnostním poměru 1:0,1-5, s výhodou 1:0,1-3, nejvýhodněji 1:0,1-2.

V souladu s předkládaným vynálezem má použití polyethylenglykolu a propylenkarbonátu určité výhody. Je to například zvýšená stabilita prostředků v souladu s předkládaným vynálezem při skladování, v důsledku které je obsah složek v prostředku udržován na stejné úrovni. Dále může použití propylenkarbonátu zvýšit rozpustnost aktivní složky cyklosporinu a inhibovat pronikání vody z obalu želatinové tobolky do prostředku, což zvýší stabilitu prostředku.

V prostředcích v souladu s předkládaným vynálezem se druhá složka používá s výhodou v hmotnostním poměru 0,1 až 10, výhodněji 0,5 až 8 a nejvýhodněji 1 až 5 hmotnostních dílů na 1 hmotnostní díl cyklosporinu.

Třetí složkou používanou v prekocentrované emulsi v souladu s předkládaným vynálezem je olejová složka. Jako olejová složka v souladu s předkládaným vynálezem se používá směs esterifikovaných sloučenin mastných kyselin a primárního alkoholu, triglyceridu mastné kyseliny se středním řetězcem (pokud je přítomen) a monoglyceridu mastné kyseliny. Estérifikovaná sloučenina mastné kyseliny a primárního alkoholu, která může být použita v souladu s předkládaným vynálezem může obsahovat esterifikovanou mastnou kyselinu, která má 8 až 20 atomů uhlíku a primární alkohol, který má 2 až 3 atomy uhlíku, například isopropylmyristát, isopropylpalmitát, ethyllinoleát, ethyloleát, atd., výhodná je zejména sloučenina kyseliny linolové a ethanolu. Dále jako triglycerid mastné kyseliny se středním řetězcem (pokud je přítomen) může být použit triglycerid nasycené mastné kyseliny, která obsahuje 8 až 10 atomů uhlíku, jako triglycerid rostlinného oleje nasycené mastné kyseliny bývá nejvýhodnější triglycerid kyseliny kaprylové/kap•9 9999

rinové. Monoglycerid mastné kyseliny, který může být také použit jako olejová složka v souladu s předkládaným vynálezem, je monoglycerid mastné kyseliny, který obsahuje 18 až 20 atomů uhlíku, s výhodou monoglycerid kyseliny olejové.

V prekoncentrátu mikroemulse v souladu s předkládaným vynálezem může být olejová složka použita v hmotnostním poměru 1 až 10, s výhodou 2 až 6, na jeden hmotnostní díl cyklosporinu.

S výhodou jsou monoglycerid mastné kyseliny a ester mastné kyseliny přítomny v olejové složce například v hmotnostním poměru 1:1 až 1:2, například 1:1 až 1:1,2.

Popřípadě je také přítomen triglycerid kyseliny kaprylové/kaprinové například v poměru k ethyllinoleátu 1:0,1 až 0,2.

Ve směsi olejů, které se používají jako olejová složka v souladu s předkládaným vynálezem, je poměr míšení monoglyceridu mastné kyseliny: esterifikované sloučenině mastné kyseliny a primárního alkoholu: triglyceridu mastné kyseliny se středním řetězcem (pokud je přítomen) obvykle v hmotnostním poměru 1:0,1-5:0,1-10, s výhodou 1:0,1-3,0:0,1-3,0.

Čtvrtou složkou použitou v souladu s předkládaným vynálezem je povrchově aktivní látka. Vhodnou povrchově aktivní látkou pro použití v souladu s předkládaným vynálezem je jakákoli farmaceuticky přijatelná povrchově aktivní látka, která má hodnotu HLB (hydrofilně lipofilní rovnováha) 8 až 17, která je schopna stabilně emulgovat lipofilní složky prostředku obsahujícího cyklosporin-olejovou složku a hydrofilní část obsahující další povrchově aktivní složku ve vodě za vzniku stabilní mikroemulse. Příklady výhodných povrchově aktivních látek v souladu s předkládaným vynálezem jsou polyoxyethylenové produkty hydrogenovaných rostlinných olejů, estery polyoxyethylensorbitanu a mastných kyselin, apod., například NIKKOL HCO-50, NIKKOL HCO-40, NIKKOL HCO-60, TWEEN 20, TWEEN 21, TWEEN 40, TWEEN 60, TWEEN 80, TWEEN 81, atd. S výhodou může být použit zejména polyoxyethylen (50) hydrogenovaný ricínový olej, • · · · 4 · který je komerčně dostupný pod obchodním názvem NIKKOL HCO-50 (NIKKO Chemical Co., Ltd.) a polyoxyethylen (20) sorbitanmonolaurát, který je komerčně dostupný pod obchodním názvem TWEEN 20 (ICI Chemicals), který má kyselou hodnotu 1, saponifikační hodnotu 48 až 56, hydroxylovou hodnotu asi 45 až 55 a hodnotu pH (5 %) 4,5 až 7,0.

Povrchově aktivní látka může také obsahovat jakoukoli výše zmíněnou povrchově aktivní látku samotnou nebo, s výhodou, jako směs dvou nebo více povrchově aktivních látek, které jsou vybrané z výše uvedených látek. V prostředcích v souladu s předkládaným vynálezem se povrchově aktivní látka používá v poměru 1 až 10 dílů hmotnosti, s výhodou v poměru 2 až 8 dílů hmotnosti, na 1 díl hmotnosti cyklosporinu.

Dále, když se v prostředku v souladu s předkládaným vynálezem použije směs dvou povrchově aktivních látek, například polyoxyethylen (50) hydrogenovaný ricínový olej a polyoxyethylen (20) sorbitanmonolaurát, je hmotnostní poměr polyoxyethylen (50) hydrogenovaného ricínového oleje: polyoxyethylen (20) sorbitanmonolaurátu s výhodou 1:0,1-5, výhodněji 1:0,5-4.

V prostředcích v souladu s předkládaným vynálezem jsou čtyři složky s výhodou přítomny v hmotnostním poměru cyklosporin: druhá složka: olejová složka: povrchově aktivní složka 1 : 0,1-10 : 1-10 : 1-10, a výhodněji v poměru cyklosporin: druhá složka: olejová složka: povrchově aktivní složka = 1 : 0,5-8 : 2-6 : 2-8.

Dále k těmto prostředkům, prostředky ilustrované pomocí následujících příkladů mohou být považovány za další výhodné prostředky v souladu s předkládaným vynálezem.

Pro orální podávání mohou být prostředky v souladu s předkládaným vynálezem obsahující výše uvedené složky upraveny do formy měkkých tobolek. Protože se při přípravě měkkých tobolek v souladu s předkládaným vynálezem nepoužívá ethanol jako nízkovroucí těkavé rozpouštědlo, jsou tobolky • · flflflfl • fl flfl • fl fl fl farmaceuticky stabilní, a poskytují požadované zlepšení včetně zvýšení biologické využitelnosti. Pomocí běžných způsobů pro přípravu měkkých tobolek může být obtížné připravit obal měkkých tobolek. Když se měkké tobolky připravují pomocí běžného způsobu pro přípravu tobolek obsahujících glycerin jako změkčovadlo, takto připravené měkké tobolky mohou mít některé nevýhody, jako například, že emulgovaný stav prekoncentrované emulse se může vlivem pronikání glycerinu do emulse měnit, a tak se rozpustnost cyklosporinu výrazně sníží, protože se cyklosporin z emulse sráží.

Proto dalším aspektem v souladu s předkládaným vynálezem je zjištění, že pokud se obal tobolky připraví za použití směsi polyethylenglykolu a propylenglykolu, a ne glycerinu, jako změkčovadla, získají se měkké tobolky, které jsou stabilní po dlouhou dobu. Jako změkčovadlo může být použit jakýkoli polyethylenglykol, který může být zkapalněn, s výhodou polyethylenglykol, který má molární hmotnost 200 až 600 g/mol.

Popřípadě může být použit polyethylenglykol 200. V obalech měkkých tobolek v souladu s předkládaným vynálezem se s výhodou používá směs polyethylenglykolu a propylenglykolu s výhodou v poměru 0,1 až 0,5 dílů hmotnosti, výhodněji 0,1 až 0,4 dílů hmotnosti a nej výhodněji 0,2 až 0,3 dílů hmotnosti vzhledem k jednomu dílu hmotnosti želatiny, která se použije při přípravě obalu tobolky. Ve směsi polyethylenglykolu a propylenglykolu jako změkčovadla se propylenglykol mísí s výhodou v poměru 1 až 10 dílů hmotnosti, výhodněji 3 až 8 dílů hmotnosti a nejvýhodněji 3 až 6 dílů hmotnosti vzhledem k jednomu dílu hmotnosti polyethylenglykolu.

Aby se zlepšila odstranitelnost pásu měkkého obalu tobolky z chladícího válce, používá se při způsobu přípravy obalu želatinové tobolky v souladu s předkládaným vynálezem způsob chlazení vzduchem místo způsobu chlazení vodou. Protože se v souladu s touto metodou chlazení vzduchem obal tobolky nepřehřívá a může se dobře odstranit z chladícího válce při

optimální teplotě asi 21 °C, lepivost při procesu obalování je vyšší, což zajistí vysokou produktivitu, a velkou účinnost tohoto postupu.

Při přípravě měkkých tobolek v souladu s předkládaným vynálezem je vhodný průtok vzduchu pro chladící válec pro chlazení obalu tobolek s výhodou 15 m³/min, nejvýhodněji 10 m³/min.

Při úpravě prostředků v souladu s předkládaným vynálezem do měkkých tobolek mohou tobolky dále, pokud je to nutné, obsahovat farmaceuticky přijatelné přísady, které se běžně používají při přípravě měkkých tobolek. Mezi takové přísady patří, například lecitin, látky upravující viskozitu, vůně (například mátovou silici, atd.), antioxidační látky (například tokoferol, vitamín E, atd.), konzervační látky (například paraben, atd.), barviva, aminokyseliny, atd.

Měkké tobolky v souladu s předkládaným vynálezem se mohou připravit pomocí jednotného smísení další povrchově aktivní látky, olejové složky a povrchově aktivní látky, ve kterých se za míchání a opatrného zahřívání na teplotu asi 60 °C rozpustí cyklosporin a potom se vzniklý koncentrát, s nebo bez výše uvedených farmaceuticky přijatelných přísad běžně používaných při přípravě měkkých tobolek, upraví společně s želatinovým obalem, obsahujícím polyethylenglykol a propylenglykol jako změkčovadlo, v přístroji pro přípravu měkkých tobolek pomocí chlazení vzduchem do požadovaných měkkých tobolek obsahujících cyklosporin.

Prostředky a způsoby v souladu s předkládaným vynálezem jsou využitelné pro stejné indikace a mohou být podávány stejným způsobem a ve stejných dávkách jako známé prostředky obsahující cyklosporin, pokud je to nutné, upraví se dávkování na základě standardních pokusů na zvířatech pro zjištění biologické využitelnosti, například na zvířatech nebo lidech, jak je například popsáno níže.

• · » « • · • ·

I

99

Pokud zde nebudou detailně popsány excipienty prostředků v souladu s předkládaným vynálezem, jsou také popsány například v Η. P. Fiedler, Lexikon der Hilfsstofe, Edito Cantor Verlag, Aulendorf, Německo, 4. vydání, 1996, Handbook of Pharmaceutical Excipients, American Pharmaceutical Association, Washington, a The Pharmaceutical Society, Londýn, 2. vydání, 1994 a Korejský patent 94-29208, vydaný 9. 11. 1994.

Předkládaný vynález bude dále ilustrován následujícími příklady. Tyto příklady však v žádném případě neomezují rozsah předkládaného vynálezu.

·« ·· · 4 tttt • · · · «· ·*

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Složka Obsah (mg/tob.)

Cyklosporin 25 polyethylenglykol 200 45 polyethylenkarbonát 25 polyoxyethylen (50) hydrogenovaný ricínový 35 olej polyoxyethylen (20) sorbitan monolaurát 85 ethyllinoleát 40 triglycerid kyseliny kaprylové/kaprinové 5 monoglycerid kyseliny olejové 35 celkem 295 mg

Příklad 2

Složka Obsah (mg/tob.)

Cyklosporin 25 polyethylenglykol 200 70 polyoxyethylen (50) hydrogenovaný ricínový 35 olej polyoxyethylen (20) sorbitan monolaurát 85 ethyllinoleát 40 triglycerid kyseliny kaprylové/kaprinové 5 monoglycerid kyseliny olejové 35 celkem 295 mg

•	tt · · 4 4 4 4 ·· ·· 4* 4 4 · 4*«· 44 4 4· · · ·· 4 4 4 4 · ·· 4444 ·
¹⁴	44 4 · 4 4 44 4 444 4 4 · · ·* ·*
Příklad 3
Složka	Obsah (mg/tob.)
Cyklosporin	25
polyethylenglykol 200 polyethylenkarbonát	100 50

polyoxyethylen (50) hydrogenovaný ricínový 35

olej
polyoxyethylen (20) sorbitan monolaurát ethyllinoleát triglycerid kyseliny kaprylové/kaprinové monoglycerid kyseliny olejové	85 40 5 35
celkem	375 mg
Příklad 4
Složka	Obsah (mg/tob.)
Cyklosporin	25
polyethylenglykol 200 polyethylenkarbonát	45 25

polyoxyethylen (50) hydrogenovaný ricínový 50

olej
polyoxyethylen (20) sorbitan monolaurát ethyllinoleát triglycerid kyseliny kaprylové/kaprinové monoglycerid kyseliny olejové	100 40 5 35
celkem	325 mg

♦ * ► <

·· ··♦♦

Příklad 5

Složka

Obsah (mg/tob.)

Cyklosporin 25 polyethylenglykol 200 45 polyethylenkarbonát 25 polyoxyethylen (50) hydrogenovaný ricínový 35 olej polyoxyethylen (20) sorbitan monolaurát 85 ethyllinoleát 80 triglycerid kyseliny kaprylové/kaprinové 10 monoglycerid kyseliny olejové 70 celkem 375 mg

Příklad 6

Měkké tobolky se připraví z prostředků podle příkladu 1 za použití následujících prostředků pro obal tobolky, a potom se vizuálně pozoruje změna vlastností a stavu způsobená pronikáním glycerinu.

6.1	(kontrolní	skupina)
	Složka	Hmotnostní poměr
	želatina	20
	čistá voda	16
	glycerin	9
6.2	(testovaná	skupina)
	Složka	Hmotnostní poměr
	želatina	20
	čistá voda	16

16	• • 4 1	♦ ♦· ·· · 9 9 · · 9 9 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 99 99	·· · ·9 99 9 9 9 9 9 9 9 9 99 9 9 99 9 9 · 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
propylenglykol polyethylenglykol	200
Výsledky, které byly pozorovány,	j sou	popsány v	následuj ící
tabulce 1.
Tabulka 1:Stabilita obsahu	tobolek	podle	obalu tobolky
Složení Těsně po Po 1 dni	Po 2	Po 5	Po 10	Po 30
tobolky přípravě	dnech	dnech	dnech	dnech
Kontrolní 0 +	+	++	+++	+++
skupina
Testovaná 0 0	0	0	0	0
skupina
Vysvětlivky: 0 = obsah	je stabilní

+ ++ + + + = nízká emulgace = lehké srážení = srážení

Jak je zřejmé z výsledků popsaných v tabulce 1, tobolky připravené za použití prostředku kontrolní skupiny 6.1 obsahující glycerin jako změkčovadlo působí některé problémy včetně vzniku sraženiny, který je glycerinu, zatímco tobolky připravené testované skupiny 6.2 obsahující způsobený pronikáním za použití prostředku polyethylenglykol a propylenglykol jako změkčovadlo udržují stabilní stav.

Příklad 7

Měkké tobolky obsahující prostředek z příkladu 1 se připraví za použití prostředku obalu tobolky testované skupiny 6.2 použité výše v příkladu 6 pomocí způsobu chlazení vodou (teplota vody 12 °C) a pomocí způsobu chlazení vzduchem (průtok vzduchu 10 m³/min) .

• · · · ·♦ ·· ·· ···· «♦ ··

V obou případech se pozorovala a porovnávala odstranitelnost obalu tobolky z chladícího válce. Výsledky pozorování jsou popsány v následující tabulce 2.

Tabulka 2: Odstranitelnost želatinového obalu z chladícího

válce v závislosti na způsobu chlazení.
	(jednotka: stupeň úhlu)
Prostředek obalu	Způsob chlazení vodou	Způsob chlazení vzduchem
Příklad 6.2	> 100 stupňů	< 50 stupňů
	(nízká odstranitelnost)	(dobrá odstranitelnost)

Z výsledků uvedených v tabulce 2 výše je zřejmé, že měkké tobolky připravené pomocí způsobu chlazení vzduchem v souladu s předkládaným vynálezem vykazují daleko lepší odstranitelnost z chladícího válce ve srovnání s tobolkami připravenými pomocí způsobu chlazení vodou. Obecně se má za to, že pokud je úhel při odstranění želatinového obalu z chladícího válce asi 70 nebo více, je odstranitelnost nízká, a pokud je úhel při odstranění želatinového obalu z chladícího válce nižší než 70, je odstranitelnost dobrá. Měkké tobolky připravené pomocí způsobu chlazení vodou se z chladícího válce uspokojivě neodstraní i když je prostředek odstraňován při úhlu 100 stupňů a více.

Naopak měkké tobolky připravené pomocí způsobu chlazení vzduchem v souladu s předkládaným vynálezem je možné lehce odstranit z chladícího válce při úhlu 50 stupňů a níže, a proto mají dobrou lepivost a produktivitu.

• 4 444444 • 4 · · · • 4 4 4 ·

4 4 4 4 4

444 44 44

44

4 4 4

4 4 4 ·

4 4

4 4*

Příklad 8

Biologická využitelnost prostředků připravených pomocí opouzdření přípravku podle příkladu 1 želatinovým obalem, který má složení podle příkladu 6.2, jako testovaného prostředku se porovnala s biologickou využitelností komerčně dostupného produktu obsahujícího ethanol, tobolky SANDIMMUN, jako kontrolního prostředku pro odhad vlivu cyklosporinového prostředku v souladu s předkládaným vynálezem na biologickou využitelnost cyklosporinu a pro zjištění rozdílu mezi těmito prostředky.

Při tomto pokusu se testovaný prostředek i kontrolní prostředek podávaly v množství 300 mg cyklosporinu na kg králíka.

Králíci byli stejně krmeni běžným pevným krmivém pro králíky 4 dny nebo více za stejných podmínek v drátěných klecích. Když se orálně podal prostředek, byli králíci drženi 48 hodin v kontrolní ocelové kleci a během této doby mohli volně pít vodu.

Přes jícen jim byly do hloubky 30 cm zasunuty Levinovy trubičky o průměru 5 mm, které byly předtím na povrchu pokryty vaselinou, aby ze omezilo tření. Každý z testovaných a kontrolních prostředků se emulgoval s 50 ml vody a potom se převedl do stříkačky, která byla napojena na Levinovu trubičku. Za použití xylenu byly roztaženy ušní žilky králíků a z každého ucha byla králíkovi odebrána krev před testem a po 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 10 a 24 hodinách pomocí stříkačky opatřené heparinem. K 1 ml takto získané krve se přidalo 0,5 ml vodného nasyceného roztoku chloridu sodného a 2 ml etheru a směs se potom 5 minut třepala a odstřeďovala při 5000 otáčkách za minutu po dobu 10 minut aby došlo k oddělení horní vrstvy (etherové vrstvy). Oddělil se 1 ml horní vrstvy a zakotvil se na aktivovaném oxidu křemičitém sep-pak^R (Waters). Tento sep-pak se promyl 5 ml n-hexanu a 2 ml methanolu. Eluát se odpařil do sucha a sušil v dusíkové atmosféře za sníženého tlaku. Tento zbytek se analyzoval pomocí HPLC (kapalinová *♦ 0 0 · 0 0 0 4

0 0 0 0 0 00 0 000 · ·· ··· · < • 0 0 004 0 0 4

00 00 00 00 [podmínky HPLC: kolona μacetonitril: methanol: voda chromatografie za vysokého tlaku)

Bondapak^R Ci₈ (Waters) , mobilní fáze

- 55:15:30, detekce 210 nm, průtok 1,0 ml/minutu, teplota na koloně 70 °C, citlivost 0,01, nastříknutý objem 100μ1].

Výsledky získané z testovaného a kontrolního prostředku jsou shrnuty v tabulce 3:

Tabulka 3: Biologická využitelnost testovaného prostředku podle předkládaného vynálezu a komerčně dostupného

prostředku (SANDIMMUN^R)
Parametr	Kontrola	Prostř. (A)	Testovaný prostředek (B)	P (B/A)
M ± S.D. (n=6)	CV % (S.D./M)	M ± S.D. (n=6)	CV % (S.D./M)
AUC ^g.hod/ml)	13,5±10,0	74,0 %	57,0±17,0	29,8 %	4,1
Cmax ^g.hod/ml)	0, 8±0,3	37,5	6, 0±l,5	25, 0 %	7,5

Vysvětlivky: AUC - plocha pod křivkou koncentrace v krvi

C_max = Maximální koncentrace cyklosporinu v krvi M ± S.D. = Střední hodnota ± směrodatná odchylka CV = poměr směrodatné odchylky ke střední hodnotě

P(B/A) = poměr střední hodnoty testovaného prostředku k střední hodnotě kontrolního prostředku

Jak je z tabulky uvedené výše zřejmé, testované prostředky vykazují zvýšené hodnoty AUC a C_max, které jsou asi čtyřikrát nebo vícekrát a sedmkrát nebo vícekrát vyšší (v tomto pořadí) než u kontrolních prostředků. Z toho je možné usoudit, že biologická využitelnost testovaných prostředků je výrazně vyšší

• · · · · • · « ·· ·· ♦ · ·· ve srovnání s kontrolními prostředky. Dále, testované prostředky v souladu s předkládaným vynálezem vykazují účinek na snížení rozdílu mezi jednotlivými testovanými subjekty (CV %), což lze usoudit podle asi dvojnásobné nebo vícenásobné hodnoty AUC a podle jeden a půl násobné hodnoty C_max, ve srovnání s kontrolním prostředkem.

Z toho je možné usoudit, že když se měkké tobolky v souladu s předkládaným vynálezem podávají orálně, vykazují zvýšenou biologickou využitelnost cyklosporinu asi čtyřikrát vyšší než dřívější komerčně dostupný prostředek obsahující ethanol, tobolky SANDIMMUN*, a také snížený rozdíl mezi biologickou využitelností cyklosporinu u jednotlivých subjektů, a zároveň zůstávají stabilní, bez jakékoli změny během dlouhé doby skladování. Je tedy zřejmé, že měkké tobolky v souladu s předkládaným vynálezem poskytují výrazné zlepšení v oblasti prostředků cyklosporinových měkkých tobolek.

Příklad 9

Připravené měkké tobolky obsahují:

II

Cyklosporin A

Polyethylenglykol 200 Propylenkarbonát Polyoxyethylen 50hydrogenovaný ricínový olej Polyserbát 20 Ethyllinoleát Glyceryl monooleát Vitamín E Celkem mg 45 mg 25 mg mg 8 5 mg 40 mg 40 mg 1 mg

301 mg

100 mg 18 0 mg 10 0 mg

160 mg 34 0 mg 160 mg 160 mg 4 mg

1204 mg • « ·*» ·

Φ · · · · · · • « · · · ♦ · • · · · · · ··· · • · · * · · · • · φ *· ·· ·· ·

Průmyslová využitelnost

Předkládaný vynález se týká měkkých želatinových tobolek obsahujících cyklosporin, které jsou stabilní při skladování, a které mají vyšší biologickou využitelnost a nižší rozdíl v úrovni množství v krvi mezi jednotlivými pacienty než dřívější prostředky obsahující cyklosporin. Cyklosporin se používá pro potlačení vrozených imunologických reakcí organismů, které jsou způsobeny transplantovanými orgány a tkáněmi, a také při potlačení různých hematologických poruch.

i ·· ·· ···· ·· *· ·· · * »· · »··· • ·· · · · · · ·· ·· » » · · · · ··· · * • · · »··· ··· ·»« »» »· ·» ·· ··

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Prostředek obsahující cyklosporin, vyznačuj ící se tím, že se skládá z (1) cyklosporinu jako aktivní složky, (2) polyethylenglykolu nebo propylenkarbonátu nebo jejich směsi, (3) směsi esterifikované sloučeniny mastné kyseliny a primárního alkoholu a monoglyceridu mastné kyseliny jako olejové složky, a (4) povrchově aktivní látky, která má hodnotu HLB (hydrofilně lipofilní rovnováhu) 8 až 17.
2. Prostředek obsahující cyklosporin podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedený cyklosporin je cyklosporin A a je v želatinovém obalu, který obsahuje polyethylenglykol a propylenglykol jako změkčovadlo.
3. Prostředek obsahující cyklosporin podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že uvedený polyethylenglykol je polyethylenglykol o molární hmotnosti 200 až 600 g/mol.
4. Prostředek obsahující cyklosporin podle nároku 1, 2 nebo 3, vyznačující se tím, že uvedený polyethylenglykol je polyethylenglykol o molární hmotnosti 200 g/mol.
5. Prostředek obsahující cyklosporin podle nároku 1, 2, 3 nebo 4, vyznačující se tím, že složka (2) je směsí polyethylenglykolu a propylenkarbonátu, které jsou smíseny v hmotnostním poměru 1 : 0,1-5.
6. Prostředek obsahující cyklosporin podle nároku 5, vyznačující se tím, že složka (2) je směsí polyethylenglykolu a propylenkarbonátu, které jsou smíseny v hmotnostním poměru 1 : 0,2-2.

99

9 «

99

9 9 9 4

9 a

9 9 9
7. Prostředek obsahující cyklosporin podle kteréhokoli z nároků 1 až 6, vyznačující se tím, že uvedenou esterifikovanou sloučeninou mastné kyseliny a primárního alkoholu je ethyllinoleát.
8. Prostředek obsahující cyklosporin podle kteréhokoli z nároků 1 až 7, vyznačující se tím, že dále v olejové směsi obsahuje triglycerid mastné kyseliny se středním řetězcem, kterým je popřípadě triglycerid kyseliny kaprylové/kaprinové.
9. Prostředek obsahující cyklosporin podle kteréhokoli z nároků 1 až 8, vyznačující se tím, že monoglyceridem mastné kyseliny je monoglycerid kyseliny olejové.
10. Prostředek obsahující cyklosporin podle kteréhokoli z nároků 1 až 9, vyznačující se tím, že hmotnostní směšovací poměr monoglyceridu mastné kyseliny a esterifikované sloučeniny mastné kyseliny a primárního alkoholu v olejové směsi je 1 : 0,1-5.
11. Prostředek obsahující cyklosporin podle kteréhokoli z nároků 1 až 10, vyznačující se tím, že uvedenou povrchově aktivní látkou je polyoxyethylenový produkt hydrogenovaného rostlinného oleje nebo polyoxyethylen sorbitanový ester mastné kyseliny.
12. Prostředek obsahující cyklosporin podle nároku 11, vyznačující se tím, že uvedená povrchově aktivní látka je směsí povrchově aktivní látky obsahující polyoxyethylen (50) hydrogenovaný ricínový olej : polyoxyethylen(20) sorbitanlaurát ve směšovacím poměru 1 : 0,1-5.
13. Prostředek obsahující cyklosporin podle kteréhokoli z nároků 1 až 12, vyznačující se tím, že cyklosporin, složka (2) , olejová složka a povrchově aktivní látka jsou přítomny v hmotnostním poměru 1 : 0,1-10 : 1-10 : 1-10.
14. Prostředek obsahující cyklosporin podle nároku 13, vyznačující se tím, že cyklosporin, složka (2), olejová složka a povrchově aktivní látka jsou přítomny v hmotnostním poměru 1 : 0,5-8 : 2-6 : 2-8.
15. Prostředek obsahující cyklosporin podle kteréhokoli z nároků 1 až 14, vyznačující se tím, že směs polyethylenglykolu a propylenglykolu jako změkčovadla je použita v poměru 0,1 až 0,5 jednotek hmotnosti vzhledem k jednotce hmotnosti želatiny.
16. Prostředek obsahující cyklosporin podle kteréhokoli z nároků 1 až 15, vyznačující se tím, že ve změkčovadle je propylenglykol smísen v poměru 1-10 jednotek hmotnosti vzhledem k jednotce hmotnosti polyethylenglykolu.
17. Způsob přípravy prostředku obsahujícího cyklosporin podle kteréhokoli z nároků 1 až 16, vyznačující se tím, že zahrnuje jednotné smísení složky (2), olejové složky a povrchově aktivní látky, rozpuštění cyklosporinu v této směsi za míchání a opatrného zahřívání na teplotu 60 °C, a, pokud je to nutné, opouzdření vzniklého koncentrátu do želatinového obalu, který obsahuje polyethylenglykol a propylenglykol jako změkčovadlo, ve stroji pro přípravu měkkých tobolek, a ochlazení vzniklých měkkých tobolek v chladícím válci pomocí způsobu chlazení vzduchem.
18. Způsob podle nároku 17, vyznačující se tím, že chlazení podle způsobu chlazení vzduchem se provádí při průtoku vzduchu 5 až 15 m³/minutu.
19. Prostředek obsahující cyklosporin, vyznačuj ící se t i m , že obsahuje

1) cyklosporin jako aktivní složku; a

2) propylenkarbonát.

• · · · · · »'· • · • · • · • · • ·
20. Prostředek podle nároku 19, v y z n a č u tím, že obsahuje jednu nebo více dalších jsou definovány v kterémkoli z nároků 1 až 16.

jící složek, ·· flfl s e které