CZ360498A3 - Kočičí vakcína obsahující Chlamydia psittaci, způsob její přípravy a způsob prevence chlamydiové infekce u koček - Google Patents
Kočičí vakcína obsahující Chlamydia psittaci, způsob její přípravy a způsob prevence chlamydiové infekce u koček Download PDFInfo
- Publication number
- CZ360498A3 CZ360498A3 CZ983604A CZ360498A CZ360498A3 CZ 360498 A3 CZ360498 A3 CZ 360498A3 CZ 983604 A CZ983604 A CZ 983604A CZ 360498 A CZ360498 A CZ 360498A CZ 360498 A3 CZ360498 A3 CZ 360498A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- chlamydia psittaci
- feline
- vaccine
- cats
- cell line
- Prior art date
Links
- 241001647378 Chlamydia psittaci Species 0.000 title claims abstract description 67
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 57
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 title claims abstract description 54
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 23
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title abstract 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 7
- 241000282324 Felis Species 0.000 claims abstract description 23
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 46
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 21
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 21
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 21
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 210000001325 yolk sac Anatomy 0.000 claims description 10
- 206010061041 Chlamydial infection Diseases 0.000 claims description 7
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 6
- 241000867607 Chlorocebus sabaeus Species 0.000 claims description 5
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 5
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000701915 Feline panleukopenia virus Species 0.000 claims description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 201000000902 chlamydia Diseases 0.000 claims description 4
- 208000012538 chlamydia trachomatis infectious disease Diseases 0.000 claims description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 4
- -1 EMA-31 Chemical compound 0.000 claims description 3
- 241000714165 Feline leukemia virus Species 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 claims description 3
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- FJLUATLTXUNBOT-UHFFFAOYSA-N 1-Hexadecylamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCN FJLUATLTXUNBOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 claims description 2
- 241000713800 Feline immunodeficiency virus Species 0.000 claims description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 claims description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 claims description 2
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 claims description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 2
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 claims description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 2
- 239000002799 interferon inducing agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 claims description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 claims description 2
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical compound O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 2
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 claims description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 claims description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 claims description 2
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims 3
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 claims 1
- 241000711475 Feline infectious peritonitis virus Species 0.000 claims 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 claims 1
- 241000223997 Toxoplasma gondii Species 0.000 claims 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical group P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 claims 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 claims 1
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 abstract description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 206010051497 Rhinotracheitis Diseases 0.000 description 7
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 5
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 4
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 4
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 4
- 241000714201 Feline calicivirus Species 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 208000023514 Barrett esophagus Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 208000007190 Chlamydia Infections Diseases 0.000 description 2
- 241000498849 Chlamydiales Species 0.000 description 2
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 2
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 2
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 2
- 206010037151 Psittacosis Diseases 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 2
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 108010062490 p27 antigen Proteins 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 241001185363 Chlamydiae Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 208000009701 Embryo Loss Diseases 0.000 description 1
- 208000004729 Feline Leukemia Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010035742 Pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 206010037742 Rabies Diseases 0.000 description 1
- 241000223996 Toxoplasma Species 0.000 description 1
- 206010058874 Viraemia Diseases 0.000 description 1
- 238000001793 Wilcoxon signed-rank test Methods 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 208000028512 chlamydia infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 229920001038 ethylene copolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 210000000744 eyelid Anatomy 0.000 description 1
- 208000005098 feline infectious peritonitis Diseases 0.000 description 1
- 229960004279 formaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 229940031346 monovalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 210000004894 snout Anatomy 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/118—Chlamydiaceae, e.g. Chlamydia trachomatis or Chlamydia psittaci
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/23—Parvoviridae, e.g. feline panleukopenia virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
- A61K39/265—Infectious rhinotracheitis virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
- A61K2039/521—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/10034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
- C12N2750/14334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/16011—Caliciviridae
- C12N2770/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Oblast vynálezu
Vynález se týká deaktivované, iraunogenicky účinné a nereaktivní kočičí vakcíny proti Chlamydia psittaci, dále postupu výroby této vakcíny a způsobu prevence chlamydiové infekce u koček za použití této vakcíny.
Dosavadní stav techniky
Kočičí chlamydiáza je častým onemocněním spojivek a dýchacího traktu koček, známá pod názvem kočičí pneumonitida (FPn). Charakteristickým rysem tohoto vysoce nakažlivého onemocnění je kýchání a kašlání s přidruženými mukopurulentními výtoky z očí a čenichu (hlen a hnis). Na toto onemocnění jsou citlivé kočky všech věkových skupin, a i když mortalita není vysoká, toto onemocnění infikovaná koťata a starší kočky značně oslabuje. Vzhledem k extrémně infekční povaze představuje FPn závažný problém pro nemocnice, kliniky pro domácí zvířata i chovné stanice pro kočky. Předpokládá se zároveň, že perzistentní infekce pohlavního ústrojí Chlamydia psittaci je příčinou neúspěšného rozmnožování v chovných stanicích pro kočky.
Výsledky studií vakcinace s přípravky, obsahujícími modifikované živé Chlamydia psittaci, nebyly jednoznačné a poskytly rozporuplné výsledky. V publikaci : Cello, Am. J. Vet. Med. Assoc. 158:932-938, 1971, bylo prokázáno, že tyto vakcíny nepředstavují pro kočky významný způsob ochrany.
V publikaci : Shewen a kol., Can. J. Com. Vet. Res. 44:244-251, 1980, byl popsán způsob částečné ochrany pomocí této vakcíny, zatímco v publikaci : McKercher (Am. J. Vet. Res. 13;557-561, 1952, a v dalších publikacích autoři uvádí téměř 100 % ochranu, poskytovanou těmito vakcínami. Protože však vakcinované kočky dostávají živé Chlamydia psittaci, mohou se některé z těchto mikroorganismů přenést na jiné kočky a výsledkem může být opačný proces.
Studie s deaktivovanými chlamydiovými vakcínami vedly k různorodým výsledkům a k nepřijatelným lokálním a systémovým reakcím u vakcinovaných koček. Studie se srovnatelnými typy expozice, provedené se čtyřmi přípravky deaktivovaných vakcin a sériově vyráběnou modifikovanou živou vakcinou ukázaly, že deaktivované přípravky nezajišťují prakticky žádnou ochranu proti chlamydiovým infekcím u koček (viz. publikace : Shewen a kol., Can. J. Comp. Med. 44:244-251, 1980). Vakcína s deaktivovanou Chlamydia psittaci je popisována v patentu Spojených států amerických č. 5 242 686 (autoři Chu a kol.). Tato vakcína však není čištěná a po podání kočkám způsobuje nepřijatelné lokální reakce (COMPENDIUM).
Jestliže je známo, že vakcíny s modifikovanými živými chlamydiovými viry mohou být vzhledem k možnosti přenosu virů nebezpečné pro jiná zvířata, dále, že se mohou rekombinovat s divokými kmeny Chlamydia psittaci a může dojít k obnově jejich virulence, a jestliže je rovněž známo, že vakcíny s deaktivovanými chlamydiemi, které j sou v současné době na trhu, jsou buď neúčinné nebo způsobují nepřijatelné lokální reakce, potom je zřejmé, že v tomto oboru existuje potřeba účinných, nereaktivních vakcin proti chlamydiovým infekcím.
• β · · • 4» · * • » ·· • · · · · · • · ·
Podstata vynálezu
Cílem předloženého vynálezu je nabídnout přípravek, obsahující deaktivovanou chlamydii, s vysokou imunogenitou bez vysokého podílu antigenové hmoty, určený pro použití u koček. Dalším cílem tohoto vynálezu je nabídnout jednoduchý způsob výroby vhodné čištěné Chlamydia psittaci pro výrobu nereaktivni, účinné vakcíny jako monovalentního přípravku nebo v kombinaci s dalšími kočičími antigeny.
Tento vynález se týká deaktivované, imunogeneticky účinné Chlamydia psittaci, inkorporované do vakcín proti chlamydii ve velmi malých množstvích (nízká antigenová zátěž neboli nízký podíl antigenové hmoty), která se čistí mimo buňky, v nichž se pěstuje, přičemž tímto způsobem se získává vakcína, která po podání kočkám je nereaktivni, avšak vysoce účinná. V této vakcíně je imunogenicky účinná, čištěná Chlamydia psittaci o nízké antigenové hmotě, kombinovaná s účinným množstvím adjuvans a farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem pro tyto látky. Proces čištění při výrobě Chlamydia psittaci zahrnuje několik kroků, mezi něž patří použití membrány žloutkového vaku, omytí žloutkového materiálu jako výchozího produktu k inokulaci linie savčích buněk, jako například linie buněk Buffalo Green Monkey (BGM) (ATCC č. ) načež po skončení destrukce buněk chlamydii (cytopatický účinek neboli CPE) následuje odstranění buněk a jejích zbytků z přípravku před deaktivací. Jedním z hlavních požadavků tohoto vynálezu je, aby linie buněk, použitá k pěstování Chlamydia psittaci, byla mikroorganismem zničena do 7 dnů od infekce Chlamydii psittaci (průkaz minimálně 80 % CPE do 7 dnů od infekce chlamydii).
• · · • · ··· • · · · · • · · ·
• · · ·
Popis přiloženého obrázku
Na přiloženém obrázku 1 je znázorněn graf, představující skupinový přehled klinických skóre (průměrné skóre/den, který je dále uveden v tabulce 1, ukazující, že pokud se do vakcíny inkorporovala velmi malá množství Chlamydia psittaci (méně než 50 pg/dávku), zajišťovala tato dávka stejnou ochranu jako velká množství Chlamydia psittaci (50 až 1000 pg/mililitr, jak je uvedeno v publikaci Chu a kol.).
Podle předmětného vynálezu byla vyvinuta kompozice vakcíny obsahující velmi malé množství čištěné, deaktivované, imunogenicky účinné Chlamydia psittaci v kombinaci s účinným množstvím adjuvans, a farmaceuticky přijatelného nosiče nebo ředidla těchto látek, kterou lze kombinovat s jinými kočičími antlgeny. Po podání kočkám je vakcína nereaktivní, avšak vysoce účinná.
Termín imunogenicky účinné množství, ve smyslu, v něž se používá v tomto textu, označuje schopnost Chlamydia psittaci, obsažené ve vakcíně, chránit po vakcinaci kočky před infekcí Chlamydia psittaci. Termín velmi malé množství se týká množství Chlamydia psittaci, přidaného k vakcíně, které je menší než 50 pg/dávku. Termín čištěný se týká procesů, při nichž dochází k odstranění přítomnosti žloutkového materiálu v konečné vakcíně. Mezi tyto procesy patří (tento výčet však není úplný) inokulace tkáňové kultury membránou žloutkového vaku, která byla omytím zbavena žloutkového materiálu, fyziologickým roztokem, umletí a opětné suspendování ve fosfátovém pufru s použitím linie buněk zničených Chlamydii psittaci, a odstranění buněk a jejich zbytků před deaktivací Chlamydia psittaci.
··
9 9
9 999
9 9 9 9
9 9 9
99
Dó rozsahu předmětného vynálezu náleží i postup přípravy vakcíny proti chlamydiovým infekcím, při němž se provede kultivace Chlamydia psittaci ve žloutkovém vaku, odběr membrány žloutkového vaku z tohoto žloutkového vaku a jejím zmražení jako základního výchozího produktu k inokulaci, kultivace tohoto základního výchozí produktu k inokulaci nebo pasážováni tohoto základního výchozího produktu k inokulaci vysoce senzitivní buněčnou linií, pěstované na povrchu až do doby, kdy je minimálně 80 % této buněčné linie zničeno Chlamydii psittaci, odběr zničené senzitivní buněčné linie a média obsahujícího Chlamydia psittaci, doprovázející uvedenou buněčnou linii, odstraněni zničené buněčné linie z Chlamydia psittaci, deaktivace Chlamydia psittaci a smícháni deaktivované Chlamydia psittaci s adjuvans a fyziologicky přijatelnou nosičovou látkou.
Chlamydia psittaci má vývojový cyklus z odlišnými reprodukčními (retikulárními tělísky) a infekčními (základní tělíska) formami. Pokud se pěstuje v buněčných liniích, nejčastěji používaných k pěstování chlamydií (například buňky psích jater, McCoyovy buňky a buňky CRFK), nemá tento mikroorganismus úplný cytopatický účinek na desku s buňkami. Při výrobě se tak obtížně stanovuje optimální doba odběru. Dochází i k produkci chlamydií s nízkou imunogenitou, takže je nutno provádět opakovaně jejich odběr z buněk nebo je po odběru vysoce koncentrovat. V některých případech (popsaných v patentu Spojených států amerických č. 5 242 686) je nutno provádět jejich deaktivaci v subkultuře. Výsledkem těchto procedur je vakcína s vysokou antigenovou zátěží (vysoká antigenová hmota o hodnotě 50 až 1000 pg/dávku) a s reaktivitou u koček po vakcinaci. Infikování buněk, jako • · · · • 9 999 • · · · · • · · · ·· ·· · ·· 99 • 9 9 9
9 99
999 9 9
9 9
99 je například buněčná linie Buffalo Green Monkey, které jsou vysoce senzitivní vůči infekci mikroorganismem Chlamydia psittaci, vede k úplné destrukci desky s buňkami, kdy je pak počet infekčních mikroorganismů v kultuře velmi vysoký. Tyto mikroorganismy lze snadno odstranit (vyčistit) z buněk a zbytků (debris) buněk filtrací, centrifugací nebo ultracentrifugací a, pokud se formuluje do vakcíny obsahující adjuvans a přijatelný farmaceutický nosič je velmi malé množství odebraných vyčištěných Chlamydia psittaci (< 50 gg/dávku) imunogenicky účinné.
Podle vynálezu se izolát Chlamydie, jako je kmen Cello Chlamydia psittaci, nejdříve šířil v membráně žloutkového vaku vajec s kuřecími embryi. Izolát Chlamydia psittaci byl inokulován do žloutkového vaku vajec s kuřecími embryi a inkuboval se 5 až 7 dní při teplotě 37 °C. Počínaje pátým dnem byla vejce byla každý den prohlížena proti světlu, aby se určila jejich viabilita. V den, kdy bylo zjištěno uhynutí embryí u 25 % vaj ec, byly membrány žloutkových vaků stále ještě viabilních vajec odebrány, vymyty fosfátovým pufrem, aby se zbavily přebytečného proteinu ve žloutku a asepticky smíchány, načež následovalo opětné suspendování těchto smíchaných membrán ve fosfátovém pufru. Jednomililitrové alikvótní podíly tohoto smíchaného a resuspendovaného výchozího produktu k inokulaci byly uloženy ve zmraženém stavu při teplotě -70 °C. Stejným postupem jako je uvedeno shora se provádí až 5 pasáží tohoto zárodečného materiálu (výchozí produkt), čímž se získá zárodečný produkt, použitelný k inokulaci buněk tkáňové kultury.
Při výrobě antigenu vakcíny s Chlamydia psittaci se začíná přípravou kultury tkáňových buněk. Buňky Buffalo Green Monkey se pěstovaly v Dulbeccově médiu MEM s vysokým ·· ·· • · · · • · ··· • · · · ♦ • · · · ♦ · ·· · ·· ·· » · · 4
I · ·· «·· · 1 • · « ·« ·· obsahem glukózy (DMEM/H)obsahuj ícím 5 % fetálního bovinního séra, 10 mM pufru HERPES a neomycin. Jakmile byly buňky konfluentni, byly infikovány Chlamydií psittaci v DMEM/H s neomycinem. Chlamydia psittaci se absorbovala do buněk s malým objemem média a pak bylo přidáno další DMEM/H médium. Infikované buňky byly inkubovány po dobu 5 až 7 dní při teplotě 37 °C. Za normálních okolností bylo 6. den po infikování 90 až 100 % desek s buňkami zničeno. V této fázi byl proveden odběr Chlamydia psittaci (odběrová tekutina), což bylo provedeno protřepáváním s nádobami, aby se odstranily veškeré zbylé buňky. Buňky a zbytky (debris) buněk byly z odběrových tekutin odstraněny pomocí filtrů schopných zachytit částice o velikosti přes 5 mikrometrů nebo centrifugací. Poté se provedla deaktivace vyčištěných odběrových tekutin. Mezi deaktivační činidla patří binární ethylenimin, formalin, thimerosal a betapropiolakton, přičemž ovšem tento výčet není na tato činidla omezen. Hodnota pH byla upravena na neutrální hodnotu a vyčištěné odběrové tekutiny byly adjustovány na imunogenicky účinné množství pro přípravek s adjuvans zředěním ve fosfátovém pufru. Imunogenicky účinné množství Chlamydia psittaci bylo obvykle menší, než 50 gg/dávku a ve výhodném provedení nižší než 10 gg/dávku. Pro tyto účely je možno použít libovolného adjuvans. Mezi možné adjuvans, které byly použity v případě předmětného vynálezu, patří polymery a kopolymery, polymery a kopolymery kyseliny akrylové, kyselina polyakrylová jako Carbopol, povrchově aktivní činidla jako hexadecylamin, saponin, Quil A, hydroxid hlinitý, fosforečnan hlinitý, peptidy jako je muramyldipeptid, olejové emulze, imunomodulátory jako jsou interleukiny a interferony, induktory interferonů, kopolymery ethylenu a anhydrid kyseliny maleinové jako jsou EMA-31, NEOCRYL A640 a POLYGEN^ (které je možno získat od firmy MVP Laboratories), přičemž • · • · • ··· • · I • · ( ·· • · · · • ··· · · ·· ·· ovšem tímto výčtem není rozsah použitelných látek nijak omezen. Lze též použít směsí libovolných výše uvedených adj uvans nebo kombinaci adj uvans.
Podle předmětného vynálezu bylo zjištěno, že popsané adjuvans působ! v účinných množstvích mezi 0,01 % a 50 % obj./obj. celkové dávky vakcíny. Ve výhodném provedeni se nastaví koncentrace adj uvans na hodnotu mezi 1 % a 15 %. Podle j eště výhodněj šího provedení se POLYGEN používá v koncentracích mezi 1 % a 5 % a Carbopol se používá v koncentracích mezi 0,1 % a 0,5 %.
Kompozice vakcíny v případě předmětného vynálezu rovněž zahrnuje i farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo a může obsahovat i další kočičí antigeny, jako jsou antigeny pro kočičí rinotracheitidu, kočičí leukémii, kočičí kalicivirus a kočičí panleukopénii, virus imunodeficience koček, kočičí infekční peritonitidu, Toxoplasma gondti a vzteklinu.
·· • · · • · ··· · · ·
4 4 4 • 4 *· » 4 4 4 ··· · ·
4 4 • 4 44
TABULKA 1
Přehled výsledků pro jednotlivé skupiny (klinická skóre) a průměrné výsledky za den (průměrné skóre/den)
| Den | Kontrolní skupina | 25 μΐ antigenová hmota | 50 μΐ antigenová hmota | 100 μΐ antigenová hmota |
| -3 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 |
| 1 | 0,05 | 0,00 | 0,00 | 0,05 |
| 5 | 2,63 | 0,78 | 1,00 | 0,85 |
| 9 | 3,38 | 0,88 | 0,75 | 0,63 |
| 13 | 3,60 | 0,93 | 0,63 | 0,58 |
| 17 | 3,23 | 0,90 | 1,00 | 0,73 |
| 21 | 3,76 | 0,68 | 0,98 | 0,93 |
| 25 | 3,15 | 0,20 | 0,65 | 0,60 |
| Průměr 5.-28.den | 3,29 | 0,73 | 0,83 | 0,72 |
V následující tabulce č. 2 je demonstrována účinnost multikomponentní vakcíny, obsahující deaktivovaný virus kočičí rinotracheitidy, kočičí kalicivirus, virus kočičí panleukopénie, virus kočičí leukémie a kočičí Chlamydia psittaci, připravená podle tohoto vynálezu.
·· ·· • · · · • · · · ··· · · • · · ·· ··
TABULKA 2
Výsledky testování účinnosti pětisložkové kočičí vakcíny, obsahující kočičí Chlamydia psittaci, viry kočičí rinotracheitidy, leukémie, kočičí kalicivirus a virus kočičí panleukopénie
| Antigen při expozici | Odpověď titru č. > l:8/celkem | Ochrana |
| Kočičí panleukopénie SC | 4/4 | 100% |
| IM | 4/4 | 100 % |
| CONT | 0/4 | 0% |
| Kočičí leukémie SC | NA | 80% |
| IM | NA | 90% |
| CONT | NA | 22% |
| Kočičí rinotracheitida SC | NA | vynikající „T“ = 34 |
| IM | NA | vakc. C.M. = 9,7 cont. C.M. = 49,3 vynikající „T“ = 34 |
| CONT | NA | vakc. C.M. = 8,3 kont. C.M. = 49,3 žádná |
| Kočičí kalcivirus SC | NA | vynikající „T“ = 34 |
| IM | NA | vakc. C.M. = 9,0 cont. C.M. = 20,0 vynikající „T“ = 34 |
| vakc. C.M. = 4,7 kont. C.M. = 20,0 | ||
| CONT | NA | žádná |
| Kočičí Chlamydia psittaci SC | NA | vynikající, AV M.S. = 0,54 |
| IM | NA | vynikající; AV M.S. = 0,49 |
| CONT | NA | žádná, prům. AV M.S. = 2,04 |
C.M. - kumulativní skóre
A V M.S. - průměrné skóre „T“ - statistický výpočet (jednosměrná modifikace Wilcoxonova testu o dvou vzorcích v modifikaci Mann-Whitney) srovnávající klinická skóre vakcino váných versus kontrolních koček (definované pomocí hodnot 9 CFR 115.130, 113.149, 113.131, 115.150, SAM 310 a SAM 311. Hodnota „T“ > 31 se rovná ochraně).
Φ* Φ· • · · « ♦ · »·
Jako další možné aplikace předloženého vynálezu lze vakcínu podávat ve formě přípravku s pozvolným uvolňováním, například přípravek s laktid-glykolidovým kopolymerem, ve formě mikročástic, umožňující pozvolné uvolňováni nebo ve formě implantátu.
Do rozsahu předmětného vynálezu náleží i způsob prevence vzniku chlamydiové infekce u koček, kdy se kočce podává imunogenicky účinné množství vakcíny, která je blíže popsána výše. Při použití předloženého vynálezu se jedná o parenterální způsoby aplikace (subkutánní, intramuskulární, intraperitoneálni a intradermální) nebo perorální/nasální způsob aplikace. Výhodnými způsoby aplikace j sou subkutánní a intramuskulární. Ukázalo se, že účinným léčebným režimem je minimálně dvojitá aplikace vakcíny, přičemž interval mezi každou aplikací je 2 až 4 týdny, ideálně 14 až 30 dni.
Příklady provedení vynálezu
Kočičí vakcína obsahující Chlamydia psittaci, postup její přípravy a použití a aplikace jsou blíže vysvětleny v následujících konkrétních příkladech, přičemž tyto příklady jsou pouze ilustrativní a nijak neomezují rozsah předmětného vynálezu.
Příklad 1
Monovalentní vakcína proti Chlamydia psittaci u kočky
Uchovávaný podíl buněk Buffalo Green Monkey se rozmrazil, načež byl tento podíl přidán do růstového média obsahujícího DMEM/H + 5% fetálního hovězího séra, 10 mM HERPES pufru a 30 gg/ml neomycinu a tento podíl byl odstřeďován po dobu 10 až 15 minut při 400 až 600 g. Odstředěný podíl buněk se poté převedl do suspenze v čerstvém růstovém médiu a potom byl vložen do otáčecích lahví. Otáčecí lahve se inkubovaly při teplotě 37 °C, až buňky dozrály do konfluence (splynutí)
Subkultury buněk se získávaly až do doby, kdy byl k dispozici požadovaný počet otáčecích lahví pro výrobní účely. Velikost výrobních šarží obvykle dosahuje 50 až 500 otáčecích lahví. Ve fázi kdy byly produkční kultury buněk BGM v otáčeních lahvích 3 až 5 dní staré a konfluentni z minimálně 95 %, odstranilo se růstové médium a přidal se výchozí produkt k inokulaci Chlamydia psittaci při multiplicitě infekce (MOI) od 0,01 do 0,1. Médiem, použitým k pěstování Chlamydie, bylo DMEM/H plus 30 gg/ml neomycinu. Otáčení lahve se znovu inkubovaly pro absorbci Chlamydie při teplotě 36 až 38 °C podobu 1 hodiny a pak se do každé otáčení lahve přidalo 200 mililitrů dalšího média. Inkubace při teplotě 36 až 38 °C pokračovala dalších 5 až 7 dní až do dosažení hodnoty CPE > 80 %. Tekutina z otáčecích lahví se odebrala třepáním otáčecích lahví, aby se z povrchu odstranily všechny zbývající buňky a přenesly se odběrové tekutiny do nádoby. Odběrová tekutina se vyčistila filtrací přes polypropylenový filtr (5 mikronů), aby se odstranily přebytečné zbytky (debris) buněk. Vyčištěné buňky se deaktivovaly pomocí 0,01 M binárního ethyleniminu (BEI) po dobu 72 hodin při teplotě 2 až 8 °C. Po deaktivaci se BEI neutralizoval thiosulfátem sodným na konečnou koncentraci 0,02 M.
Vyčištěný, deaktivovaný produkt Chlamydia psittaci se zředil na tři různé hladiny antigenu (tři různé antigenové hmoty). Nejvyšší zkoušená antigenová hmota byla « · • ··
100 gl/dávku, což se rovnalo přibližně hodnotě 100 gg/dávku, středně vysoká zkoušená antigenová hmota dosahovala hodnoty 50 gl/dávku, což se přibližně rovnalo hodnotě 50 gg/dávku, a nejnižší zkoušená antigenová hmota činila 25 gl/dávku, neboli přibližně 25 gg/dávku. Všechny antigenové hmoty byly zředěny fosfátovým pufrem tak, aby celkový objem každého přípravku byl 0,95 mililitru.
K získání hotových vakcín se do každého přípravku přidal n
POLYGEN o objemu 0,05 mililitru jako adjuvans. Tyto vakcíny v dávce 1 mililitr byly podávány skupinám 5 séronegativních koček v intervalu 3 týdnů. První dávka byla podána v den 0, druhá dávka v 21.den. Skupina 5 séronegativních koček stejného věku a ze stejného prostředí nebyla vakcinována a tvořila nevakcinované kontroly. Všechny kočky byly infikovány intranasálně a intraokulárně virulentním kmenem Chlamydia psittaci 2 až 8 týdnů po pomocné druhé dávce. Všechny kočky byly sledovány po dobu 28 dní na přítomnost klinických známek onemocnění Chlamydia psittaci včetně teploty, . výtoku z očí, konjunktivity, exsudátu z čenichu, kýchání, kašláni, dyspney, anorexie, dehydratace a depresí. Analýza dat se prováděla technikou vyhodnocování skóre vážením. Vážnější známky onemocnění dostávaly vyšší číselné hodnoty. Všechna data byla statisticky analyzována ve čtyřdenním intervalu a jsou uvedena v tabulce 1. Tyto data jsou v grafické formě uvedena na obr.l.
Výsledky, uvedené v tabulce 1 a na obr.l, jasně ukazují, že Chlamydia psittaci, pokud byla připravena podle tohoto vynálezu, je účinná při antigenové hmotě již 25 gg/dávku. Protože vakcínou s tak nízkou antigenovou hmotou zajišťovala ochranu odpovídající ochraně, kterou poskytovala vakcína s vysokou antigenovou hmotou, lze předpokládat, že hodnoty nižší než 25 gg/dávku, pokud se • · * · « a · · · · · * · ·· * 1 a a · · · • · ·♦· ? »«····· • · · · · * A ··· připraví podle předloženého vynálezu, by též měly ochranný účinek.
Příklad 2
Deaktivovaná kočičí Chlamydia psittaci, připravená podle příkladu 1 tohoto vynálezu, byla smíchána se čtyřmi dalšími deaktivovanými kočičími antigeny, aby vznikla vícesložková vakcína. Chlamydia psittaci (10^’® Τϋΐϋ^θ/πιΐ) s 35 mililitrů POLYGENu jako adjuvans bylo smícháno s virem kočičí leukémie při antigenové dávce 1,25 ELISA relativní potence jednotka/dávka s POLYGENem jako adjuvans, 10®’® TCID^o/dávku viru kočičí rinotracheitidy s POLYGENem jako adjuvans, 10^’® TCID^g/dávku kočičího kaliciviru s POLYGENem jako adjuvans a 10^’^ TCID^g/dávku viru kočičí panleukopénie s POLYGENem jako adjuvans. Tato pětisložková vakcína byla zkoušena na účinnost při vakcinaci/infekci u koček. Na začátku experimentu byla všem kočkám odebrána krev na získání vzorků séra a plné krve. U sér byly stanoveny titry protilátek proti virům kočičí rinotracheitidy, kaliciviru a panleukopénie. U všech koček bylo testování zahájeno s titry menšími než 1 : 2 pro tyto viry. Kočky použité v protokolu FeLV vykazovaly negativitu na antigen p27. Pět skupin koček (n = 74) ve věku 13 až 15 týdnů bylo vakcinováno a o tři týdny později dostaly pomocnou dávku 1,0 mililitr pětisložkové vakcíny. Přibližně polovina koček byla vakcinována subkutánně a polovina dostala vakcínu intramuskulárně.
Osm vakcinovaných (čtyři subkutánně a 4 intramuskulárně) koček a jedna kontrolní kočka bylo hodnoceno na sérologickou odpověď na vakcinaci a pomocnou dávku proti kočičí panleukopénii. Sérologická odpověď 1 : 8 • · » ·4 • · « · ·· • · • · < » ·· se u tohoto přípravku považuje za hodnotu znamenající ochranu. Výsledky po vakcinaci jsou uvedeny v tabulce 2.
Dvanáct koček, jimž byla aplikována pětisložková vakcína (6 subkutánně a 6 intramuskulárně) a čtyři nevakcinované kontrolní kočky byly infikovány virulentním virem kočičí rinotracheitidy. Před infikováním byly odebrány krční stery a krevní vzorky. Po infikování byly všechny kočky sledovány na známky onemocnění. Klinické známky onemocnění a teplota byly zaznamenávány a analyzovány s použitím průměrných skóre, uvedených v tabulce 2. Účinnost se prokazuje statisticky významným rozdílem v klinických skóre mezi vakcinovanými kočkami a kontrolami.
Dvanáct koček, jimž byla jimž byla aplikována pětisložková vakcína (6 subkutánně a 6 intramuskulárně) a čtyři nevakcinované kontrolní kočky byly infikovány virulentním kočičím kalicivirem. Po infikování byly odebrány krční stěry a krevní vzorky. Kromě toho byly kočky sledovány na známky onemocnění. Dále byly zaznamenávány klinické známky, bylo vyhodnoceno skóre a byla provedena analýza dat, jejíž výsledky jsou uvedeny v tabulce 2. Účinnost se prokazuje statisticky významným rozdílem v klinických skóre mezí vakcinovanými kočkami a kontrolami.
Dvanáct koček, j imž byla j imž byla aplikována pětisložková vakcína (10 subkutánně a 10 intramuskulárně) a deset nevakcinovaných kontrolních koček bylo infikováno virulentním virem Chlamydia psittaci a sledováno na přítomnost klinických známek onemocnění, jak uvedeno v příkladu 1. Těmto klinickým známkám onemocnění bylo přidělováno skóre. Účinnost se prokazuje statisticky významným rozdílem mezi skóre vakcinovaných koček a kontrol.
• · ·· ·· • · · • · ···
Souhrnné výsledky tohoto experimentu jsou též uvedeny v tabulce 2.
Dvacetdva koček, jimž byla aplikována pětisložková vakcína (11 subkutánně a 11 intramuskulárně) a devět nevakcinovaných kontrolních koček, bylo infikováno virulentním virem FeLV. Tento pokus vyžaduje provést nejprve imunosupresi koček a poté je po následující dva dny infikovat. Kočky byly po 3. týdnu až do 12. týdne po infekci kontrolovány na přítomnost virémie na základě detekce antlgenu p27 v krvi s použitím techniky nepřímé imunofluorescence (IFA). Ochrana byla stanovena podle zásad, popsaných v publikaci : Shibley a kol. (JAVMA 1991, 199: 1402-1406) a uvedených v tabulce 2.
Z tabulky 2 je zřejmé, že všech pět složek této vícesložkové vakcíny, obsahující kočičí Chlamydia psittaci podle tohoto vynálezu, bylo účinných. Je třeba si též uvědomit, že žádná vakcinovaná kočka v této studii, ani žádné vakcinované kočky v jiných studiích, provedených s vakcínou Chlamydia psittaci nebo s vícesložkovými vakcínami obsahujícími Chlamydia psittaci, neprokázaly lokální ani systémové reakce na vakcínu. Hlavním důvodem pro tuto absenci reaktivity byla nízká antigenová hmota Chlamydia psittaci.
I když se v popisu předmětného vynálezu uvádějí konkrétní aplikace předloženého vynálezu, je třeba si uvědomit, že lze použít různých modifikací a změn, které jsou zřejmé odborníkům pracujícím v tomto oboru a obeznámené se současným stavem techniky, a které též spadají do rámce vynálezu podle následující definice patentových nároků • ·· .! ·· «
W ΘΘ PRAHA 2, Hí
Claims (14)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Deaktivovaná, imunogenicky účinná a nereaktivní vakcína proti Chlamydia psittaci, vyznačující se tím, že obsahuje velmi malé množství Chlamydia psittaci.
- 2. Deaktivovaná, imunogenicky účinná a nereaktivní vakcína proti Chlamydia psittaci podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedené velmi malé množství Chlamydia psittaci je množství nižší než 50 pg/dávku.
- 3. Deaktivovaná, imunogenicky účinná a nereaktivní vakcína proti Chlamydia psittaci podle nároku 1, vyznačující se tím, že dále obsahuje kočičí antigen jiný, než Chlamydia psittaci.
- 4. Deaktivovaná, imunogenicky účinná a nereaktivní vakcína proti Chlamydia psittaci podle nároku 3, vyznačující se tím, že jiný kočičí antigen je vybrán ze skupiny zahrnující kočičí rinotracheitis, kočičího kalcivir, vir kočičí leukémie, Toxoplasma gondii, vir vztekliny, vir kočičí panleukopénie, vir kočičí imunodeficience a vir kočičí infekční peritonitidy.
- 5. Způsob přípravy vakcíny proti chlamydiovým infekcím, vyznačující se tím, že zahrnuje:- kultivaci Chlamydia psittaci ve žloutkovém vaku,- odběr membrány žloutkového vaku z uvedeného žloutkového vaku a zmrazení odběrového materiálu jako základního zárodečného produktu k inokulaci, ·· ·9 » 9 · ·- kultivaci uvedeného základního zárodečného produktu k inokulaci nebo pasáže uvedeného základního zárodečného produktu ve vysoce senzibilní buněčné linii pěstované na povrchu tak dlouho, dokud není minimálně 80 % buněčné linie zničeno Chlamydií psittaci,- odebrání zničené senzibilni buněčné linie a média obsahujícího Chlamydia psittaci a doprovázejícího uvedenou buněčnou linii,- odstranění zničené buněčné linie z Chlamydia psittaci,- deaktivaci Chlamydia psittaci,- smíchání deaktivované Chlamydie psittaci s adjuvans a fyziologicky přijatelným nosičem.
- 6. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že vysoce senzibilní buněčnou linií je buněčná linie Buffalo Green Monkey.
- 7. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že uvedená deaktivace zahrnuje přidání účinného množství deaktivační látky k deaktivaci Chlamydia psittaci, která si stále ještě podržuje imunogenitu.
- 8. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že se uvedená deaktivační látka volí ze skupiny látek zahrnující binární ethylenimin, beta-propiolakton, formalin, merthiolát, thimerosal, glutaraldehyd a detergenty.
- 9. Způsob podle nároku 7, vyznačujíc! se tím, že deaktivační látkou je binární ethylenimin.
- 10. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se adjuvans volí ze skupiny zahrnující polymery a kopolymery, polymery a kopolymery kyseliny akrylové, kyselinu polyakrylovou jako Carbopol, povrchově aktivní látky jako hexadecylamin, saponin, Quil A, hydroxid hlinitý, fosforečnan hlinitý, peptidy, jako je muramyl dipeptid, olejové emulze, imunomodulátory jako jsou interleukiny a interferony, induktory interferonu, kopolymery ethylenu a anhydridu kyseliny maleinové, jako je EMA-31, NEOCRYL A640 a POLYGEN® a jejich směsi.
- 11. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že adjuvans je POLYGEN^.
- 12. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se fyziologicky přijatelný nosič je zvolen ze skupiny zahrnující fosfátový fyziologický pufr, fyziologický roztok a minimální základní médium.
- 13. Způsob prevence chlamydiové infekce u koček, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikaci imunogenicky účinného množství vakcíny podle nároku 3 kočce.
- 14. Způsob prevence chlamydiové infekce u koček, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikaci imunogenicky účinného množství vakcíny podle nároku 5 kočce.Zastupuje :Dr. Miloš Všetečka ·· *· ·· ·♦ • · · · · • · *·· . · · · i · · i · ;.· ··. • ·· ··· · «Klinické skóre
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/643,673 US5972350A (en) | 1996-05-06 | 1996-05-06 | Feline vaccines containing Chlamydia psittaci and method for making the same |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ360498A3 true CZ360498A3 (cs) | 1999-03-17 |
| CZ297848B6 CZ297848B6 (cs) | 2007-04-11 |
Family
ID=24581818
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ0360498A CZ297848B6 (cs) | 1996-05-06 | 1997-04-21 | Deaktivovaná, imunogenicky úcinná a nereaktivní vakcína Chlamydia psittaci a zpusob její prípravy |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5972350A (cs) |
| EP (1) | EP0904106A1 (cs) |
| JP (1) | JP2000510121A (cs) |
| AU (1) | AU717628B2 (cs) |
| BG (1) | BG63564B1 (cs) |
| BR (1) | BR9708975A (cs) |
| CA (1) | CA2203234A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ297848B6 (cs) |
| EE (1) | EE04516B1 (cs) |
| IL (1) | IL126628A (cs) |
| NO (1) | NO320871B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ332620A (cs) |
| PL (1) | PL329734A1 (cs) |
| SK (1) | SK149198A3 (cs) |
| TR (1) | TR199802259T2 (cs) |
| WO (1) | WO1997041889A1 (cs) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20010048927A1 (en) * | 2000-02-01 | 2001-12-06 | Richard Stephens | Porin B (PorB) as a therapeutic target for prevention and treatment of infection by chlamydia |
| US20030129161A1 (en) * | 2001-09-17 | 2003-07-10 | Hsien-Jue Chu | Interleukin-12 as a veterinary vaccine adjuvant |
| US7105171B2 (en) * | 2002-03-07 | 2006-09-12 | The Regents Of The University Of California | Porin B (PorB) as a therapeutic target for prevention and treatment of infection by Chlamydia |
| US20050202046A1 (en) * | 2004-03-11 | 2005-09-15 | Wyeth | Canine vaccine for protection against ehrlichiosis |
| US7306807B2 (en) | 2004-09-13 | 2007-12-11 | Wyeth | Hemorrhagic feline calicivirus, calicivirus vaccine and method for preventing calicivirus infection or disease |
| CN100423775C (zh) * | 2005-04-15 | 2008-10-08 | 中国农业科学院兰州兽医研究所 | 牛衣原体病灭活疫苗及其制备与检验方法 |
| WO2008150404A1 (en) * | 2007-05-30 | 2008-12-11 | Wyeth | Raccoon poxvirus expressing genes of feline antigens |
| FR3039406B1 (fr) * | 2015-07-28 | 2020-09-18 | Centre Nat Rech Scient | Composition vaccinale contre les infections a chlamydiaceae |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5242686A (en) * | 1990-11-07 | 1993-09-07 | American Home Products Corporation | Feline vaccine compositions and method for preventing chlamydia infections or diseases using the same |
| CN1134112A (zh) * | 1993-11-03 | 1996-10-23 | 辉瑞大药厂 | 衣原体感染的疫苗及治疗方法 |
-
1996
- 1996-05-06 US US08/643,673 patent/US5972350A/en not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-04-21 AU AU29962/97A patent/AU717628B2/en not_active Ceased
- 1997-04-21 JP JP09540090A patent/JP2000510121A/ja not_active Ceased
- 1997-04-21 CZ CZ0360498A patent/CZ297848B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-04-21 EP EP97924574A patent/EP0904106A1/en not_active Withdrawn
- 1997-04-21 IL IL12662897A patent/IL126628A/en not_active IP Right Cessation
- 1997-04-21 SK SK1491-98A patent/SK149198A3/sk unknown
- 1997-04-21 TR TR1998/02259T patent/TR199802259T2/xx unknown
- 1997-04-21 NZ NZ332620A patent/NZ332620A/xx unknown
- 1997-04-21 EE EE9800388A patent/EE04516B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1997-04-21 PL PL97329734A patent/PL329734A1/xx unknown
- 1997-04-21 WO PCT/US1997/007514 patent/WO1997041889A1/en not_active Application Discontinuation
- 1997-04-21 CA CA002203234A patent/CA2203234A1/en not_active Abandoned
- 1997-04-21 BR BR9708975A patent/BR9708975A/pt not_active Application Discontinuation
-
1998
- 1998-11-03 BG BG102890A patent/BG63564B1/bg unknown
- 1998-11-05 NO NO19985172A patent/NO320871B1/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0904106A1 (en) | 1999-03-31 |
| NO985172L (no) | 1999-01-06 |
| WO1997041889A1 (en) | 1997-11-13 |
| NO320871B1 (no) | 2006-02-06 |
| AU2996297A (en) | 1997-11-26 |
| JP2000510121A (ja) | 2000-08-08 |
| CZ297848B6 (cs) | 2007-04-11 |
| SK149198A3 (en) | 2000-02-14 |
| BG102890A (en) | 1999-09-30 |
| CA2203234A1 (en) | 1997-11-06 |
| AU717628B2 (en) | 2000-03-30 |
| US5972350A (en) | 1999-10-26 |
| NO985172D0 (no) | 1998-11-05 |
| BR9708975A (pt) | 1999-08-03 |
| BG63564B1 (bg) | 2002-05-31 |
| IL126628A0 (en) | 1999-08-17 |
| EE9800388A (et) | 1999-06-15 |
| PL329734A1 (en) | 1999-04-12 |
| NZ332620A (en) | 2000-04-28 |
| EE04516B1 (et) | 2005-08-15 |
| MX9703278A (es) | 1998-05-31 |
| TR199802259T2 (xx) | 1999-02-22 |
| IL126628A (en) | 2002-09-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5242686A (en) | Feline vaccine compositions and method for preventing chlamydia infections or diseases using the same | |
| CN109568573A (zh) | 疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
| US6951650B1 (en) | Antigenic class of avian reoviruses | |
| CZ360498A3 (cs) | Kočičí vakcína obsahující Chlamydia psittaci, způsob její přípravy a způsob prevence chlamydiové infekce u koček | |
| KR100302522B1 (ko) | 고양이장코로나바이러스로부터의개코로나바이러스왁찐 | |
| EP0612532A2 (en) | Canine coronavirus vaccine from feline enteric coronavirus | |
| US6004563A (en) | Feline vaccine compositions and method for preventing chlamydia infections or diseases using the same | |
| US7211260B1 (en) | Infectious bursitis vaccine | |
| CN111686246B (zh) | 一种用于猪流行性腹泻病毒的抗原抗体复合物疫苗及其制备方法 | |
| KR100556275B1 (ko) | 클라미디아시타시를함유하는고양이백신및그의제조방법 | |
| US20020146425A1 (en) | Feline vaccines containing chlamydia psittaci and method for making the same | |
| NZ234815A (en) | An attenuated canine parvovirus and vaccine containing it | |
| MXPA97003278A (es) | Vacunas felinas que contienen chlamydia psittaci y metodo para preparar las mismas | |
| CN1223589A (zh) | 包含鹦鹉热衣原体的猫疫苗及其制备方法 | |
| AU3441693A (en) | Feline leukemia virus vaccines | |
| MXPA99007134A (en) | Infectious bursitis vaccine | |
| FR2601251A1 (fr) | Agent viral non pathogene pour la prevention de la gastroenterite transmissible porcine, son obtention et son utilisation comme vaccin. | |
| WO1993004698A1 (en) | Method of enhancing anti-rabies immune responses |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 19970421 |