SK149198A3 - Feline vaccines containing chlamydia psittaci and method for making the same - Google Patents
Feline vaccines containing chlamydia psittaci and method for making the same Download PDFInfo
- Publication number
- SK149198A3 SK149198A3 SK1491-98A SK149198A SK149198A3 SK 149198 A3 SK149198 A3 SK 149198A3 SK 149198 A SK149198 A SK 149198A SK 149198 A3 SK149198 A3 SK 149198A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- chlamydia psittaci
- feline
- vaccine
- cats
- cell line
- Prior art date
Links
- 241001647378 Chlamydia psittaci Species 0.000 title claims abstract description 67
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 59
- 241000282324 Felis Species 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims abstract description 53
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 21
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 21
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 21
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 10
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 7
- 206010061041 Chlamydial infection Diseases 0.000 claims description 6
- 206010051497 Rhinotracheitis Diseases 0.000 claims description 6
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 6
- 241000867607 Chlorocebus sabaeus Species 0.000 claims description 5
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 5
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 201000000902 chlamydia Diseases 0.000 claims description 4
- 208000012538 chlamydia trachomatis infectious disease Diseases 0.000 claims description 4
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 claims description 4
- -1 mertiolate Chemical compound 0.000 claims description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 241000714165 Feline leukemia virus Species 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 claims description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 claims description 3
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 3
- FJLUATLTXUNBOT-UHFFFAOYSA-N 1-Hexadecylamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCN FJLUATLTXUNBOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 claims description 2
- 241000713800 Feline immunodeficiency virus Species 0.000 claims description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 claims description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N [(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hy Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O)O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CC[C@H]2[C@@]1(C=O)C)C)(C)CC(O)[C@]1(CCC(CC14)(C)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O[C@H]5[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UZQJVUCHXGYFLQ-AYDHOLPZSA-N 0.000 claims description 2
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 2
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002799 interferon inducing agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 claims description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 claims description 2
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical compound O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 claims description 2
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 claims description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 claims description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 claims description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 claims description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 2
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 claims description 2
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 claims 1
- 241000711475 Feline infectious peritonitis virus Species 0.000 claims 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 241000711798 Rabies lyssavirus Species 0.000 claims 1
- 241000223997 Toxoplasma gondii Species 0.000 claims 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical group P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 claims 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 claims 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 11
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 abstract description 10
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 38
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 10
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 10
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 6
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 5
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- 241000714201 Feline calicivirus Species 0.000 description 4
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 4
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 4
- 208000007190 Chlamydia Infections Diseases 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 208000023514 Barrett esophagus Diseases 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 241000498849 Chlamydiales Species 0.000 description 2
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 2
- 208000004729 Feline Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 241000701915 Feline panleukopenia virus Species 0.000 description 2
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 2
- 206010024769 Local reaction Diseases 0.000 description 2
- 206010037151 Psittacosis Diseases 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 2
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 108010062490 p27 antigen Proteins 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 206010041232 sneezing Diseases 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000009701 Embryo Loss Diseases 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010035742 Pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 206010058874 Viraemia Diseases 0.000 description 1
- 238000001793 Wilcoxon signed-rank test Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 208000022531 anorexia Diseases 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000000991 chicken egg Anatomy 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 description 1
- 229920001038 ethylene copolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 206010015915 eye discharge Diseases 0.000 description 1
- 229960004279 formaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229940031346 monovalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000005000 reproductive tract Anatomy 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 210000004894 snout Anatomy 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 210000001325 yolk sac Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/118—Chlamydiaceae, e.g. Chlamydia trachomatis or Chlamydia psittaci
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/23—Parvoviridae, e.g. feline panleukopenia virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
- A61K39/265—Infectious rhinotracheitis virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
- A61K2039/521—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/16011—Herpesviridae
- C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
- C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/10034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
- C12N2750/00011—Details
- C12N2750/14011—Parvoviridae
- C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
- C12N2750/14334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/16011—Caliciviridae
- C12N2770/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Vynález sa týka deaktivovanej, imunogénne účinnej a nereaktívnej mačacej vakcíny proti Chlamydia psittaci, ďalej postupu výroby tejto vakcíny a spôsobu prevencie chlamýdiovej infekcie u mačiek za použitia tejto vakcíny.
Doterajší stav techniky
Mačacia chlamydiáza je častým ochorením spojiviek a dýchacieho traktu mačiek, známa pod názvom mačacia pneumonitída (FPn). Charakteristickým rysom tohto vysoko nákazlivého ochorenia je kýchanie a kašľanie s pridruženými mukopurulentnými výtokmi z očí a ňufáka (hlien a hnis). Na toto ochorenie sú citlivé mačky všetkých vekových skupín, a i keď mortalita nie je vysoká, toto ochorenie infikované mačky a staršie mačky značne oslabuje. Vzhľadom k extrémne infekčnej povahe predstavuje FPn závažný problém pre nemocnice, kliniky pre domáce zvieratá i chovné stanice pre mačky. Predpokladá sa zároveň, že perzistentná infekcia pohlavného ústroja Chlamydiou psittaci je príčinou neúspešného rozmnožovania v chovných staniciach pre mačky.
Výsledky štúdií vakcinácie s prípravkami, obsahujúcimi modifikované živé Chlamydia psittaci, neboli jednoznačné a poskytli rozporuplné výsledky. V publikácii : Cello, Am. J. Vet. Med. Assoc. 158:932-938, 1971, bolo preukázané, že tieto vakcíny nepredstavujú pre mačky významný spôsob ochrany. V publikácii : Shewen a kol., Can. J. Com. Vet. Res. 44:244-251, 1980, bol popísaný spôsob čiastočnej ochrany pomocou tejto vakcíny, zatiaľ čo v publikácii : McKercher (Am. J. Vet. Res. 13,557-561, 1952, a v ďalších publikáciách autori uvádzajú takmer 100 % ochranu, poskytovanú týmito vakcínami. Pretože však vakcínované mačky dostávajú živé Chlamydia psittaci, môžu sa niektoré z týchto mikroorganizmov preniesť na iné mačky a výsledkom môže byť opačný proces.
31100/H
Štúdie s deaktivovanými chlamýdiovými vakcínami viedli k rôznorodým výsledkom a k neprijateľným lokálnym a systémovým reakciám u vakcínovaných mačiek. Štúdie s porovnávateľnými typmi expozície, uskutočňované so štyrmi prípravkami deaktivovaných vakcín a sériovo vyrábanou modifikovanou živou vakcínou ukázali, že deaktivované prípravky nezaisťujú prakticky žiadnu ochranu proti chlamýdiovým infekciám u mačiek (viď. publikácia : Shewen a kol., Can. J. Comp. Med. 44:244-251, 1980). Vakcína s deaktivovanou Chlamydia psittaci \e popisovaná v patente Spojených štátov amerických č. 5 242 686 (autori Chu a kol.). Táto vakcína však nie je čistená a po podaní mačkám spôsobuje neprijateľné lokálne reakcie (COMPENDIUM).
Ak je známe, že vakcíny s modifikovanými živými chlamýdiovými vírusmi môžu byť vzhľadom k možnosti prenosu vírusov nebezpečné pre iné zvieratá, ďalej, že sa môžu rekombinovať s divokými kmeňmi Chlamydia psittaci a môže dôjsť k obnove ich virulencie, a ak je rovnako známe, že vakcíny s deaktivovanými chlamýdiami, ktoré sú v súčasnej dobe na trhu, sú buď neúčinné alebo spôsobujú neprijateľné lokálne reakcie, potom je zrejmé, že v tomto odbore existuje potreba účinných, nereaktívnych vakcín proti chlamýdiovým infekciám.
Podstata vynálezu
Cieľom predloženého vynálezu je ponúknuť prípravok, obsahujúci deaktivovanú chlamýdiu, s vysokou imunogenitou bez vysokého podielu antigénovej hmoty, určený na použitie u mačiek. Ďalším cieľom tohto vynálezu je ponúknuť jednoduchý spôsob výroby vhodne čistenej Chlamydia psittaci na výrobu nereaktívnej, účinnej vakcíny ako monovalentného prípravku alebo v kombinácii s ďalšími mačacími antigénmi.
Tento vynález sa týka deaktivovanej, imunogénne účinnej Chlamydia psittaci, inkorporovanej do vakcín proti chlamýdii vo veľmi malých množstvách (nízka antigénová záťaž alebo nízky podiel antigénovej hmoty), ktorá sa čistí mimo bunky, v ktorých sa pestuje, pričom týmto spôsobom sa získava vakcína, ktorá po podaní mačkám je nereaktívna, avšak vysoko účinná. V tejto vakcíne
31100/H je imunogénne účinná, čistená Chlamydia psittaci s nízkou antigénovou hmotou, kombinovaná s účinným množstvom adjuvans a farmaceutický prijateľným nosičom alebo riedidlom na tieto látky. Proces čistenia pri výrobe Chlamydia psittaci zahrňuje niekoľko krokov, medzi ktoré patrí použitie membrány žítkového vaku, umytie žítkového materiálu ako východiskového produktu na inokuláciu línie cicavčích buniek, ako napríklad línie buniek Buffalo Green Monkey (BGM) (ATCC č. ) načo po skončení deštrukcie buniek chlamýdií (cytopatický účinok alebo CPE) nasleduje odstránenie buniek a ich zvyškov z prípravku pred deaktiváciou. Jednou z hlavných požiadaviek tohto vynálezu je, aby línie buniek, použité na pestovanie Chlamydia psittaci, boli mikroorganizmom zničené do 7 dní od infekcie Chlamydia psittaci (preukaz minimálne 80 % CPE do 7 dní od infekcie chlamýdií).
Popis priloženého obrázku
Na priloženom obrázku 1 je znázornený graf, predstavujúci skupinový prehľad klinických skóre (priemerné skóre/deň, ktorý je ďalej uvedený v tabuľke 1, ukazujúci, že pokiaľ sa do vakcíny inkorporovali veľmi malé množstvá Chlamydia psittaci (menej než 50 pg/dávku), zaisťovala táto dávka rovnakú ochranu ako veľké množstvo Chlamydia psittaci (50 až 1000 pg/mililiter, ako je uvedené v publikácii Chu a kol.).
Podľa predmetného vynálezu bola vyvinutá kompozícia vakcíny obsahujúca veľmi malé množstvo čistenej, deaktivovanej, imunogénne účinnej Chlamydia psittaci v kombinácii s účinným množstvom adjuvans, a farmaceutický prijateľného nosiča alebo riedidla týchto látok, ktorú možno kombinovať s inými mačacími antigénmi. Po podaní mačkám je vakcína nereaktívna, avšak vysoko účinná.
Termín „imunogénne účinné množstvo“, v zmysle v ktorom sa používa v tomto texte, označuje schopnosť Chlamydia psittaci, obsiahnutej vo vakcíne, chrániť po vakcinácii mačky pred infekciou Chlamydia psittaci. Termín „veľmi malé množstvo“ sa týka množstva Chlamydia psittaci , pridaného do vakcíny, ktoré je menšie než 50 pg/dávku. Termín „čistený“ sa týka procesov, pri ktorých dochádza k odstráneniu prítomnosti žítkového materiálu v konečnej vakcíne.
31100/H
Medzi tieto procesy patrí (tento výpočet však nie je úplný) inokulácia tkanivovej kultúry membránou žítkového vaku, ktorá bola umytím zbavená žítkového materiálu, fyziologickým roztokom, pomletie a opätovné suspendovanie vo fosfátovom pufri s použitím línie buniek zničených Chlamydia psittaci , a odstránenie buniek a ich zvyškov pred deaktiváciou Chlamydia psittaci.
Do rozsahu predmetného vynálezu patrí i postup prípravy vakcíny proti chlamýdiovým infekciám, pri ktorom sa uskutoční kultivácia Chlamydia psittaci v žítkovom vaku, odber membrány žítkového vaku z tohto žítkového vaku a jeho zmrazenie ako základného východiskového produktu na inokuláciu, kultivácia tohto základného východiskového produktu na inokuláciu alebo pasážovanie tohto základného východiskového produktu na inokuláciu vysoko senzitívnou bunkovou líniou, pestované na povrchu až do doby, keď je minimálne 80 % tejto bunkovej línie zničené Chlamydiou psittaci, odber zničenej senzitívnej bunkovej línie a média obsahujúceho Chlamydia psittaci , doprevádzajúce uvedenú bunečnú líniu, odstránenie zničenej bunečnej línie z Chlamydia psittaci, deaktivácia Chlamydia psittaci a zmiešanie deaktivovanej Chlamydia psittaci s adjuvans a fyziologicky prijateľnou nosičovou látkou.
Chlamydia psittaci má vývojový cyklus s odlišnými reprodukčnými (retikulárnymi telieskami) a infekčnými (základné telieska) formami. Pokiaľ sa pestuje v bunkových líniách, najčastejšie používaných na pestovanie chlamydií (napríklad bunky psích pečienok, McCoyove bunky a bunky CRFK), nemá tento mikroorganizmus úplný cytopatický účinok na dosku s bunkami. Pri výrobe sa tak obtiažne stanovuje optimálna doba odberu. Dochádza i k produkcii chlamýdii s nízkou imunogenitou, takže je nutné uskutočňovať opakovane ich odber z buniek alebo ich po odbere vysoko koncentrovať. V niektorých prípadoch (popísaných v patente Spojených štátov amerických č. 5 242 686) je nutné uskutočňovať ich deaktiváciu v subkultúre. Výsledkom týchto procedúr je vakcína s vysokou antigénovou záťažou (vysoká antigénová hmota s hodnotou 50 až 1000 pg/dávku) a s reaktivitou u mačiek po vakcinácii. Infikovanie buniek, ako je napríklad bunková línia Buffalo Green Monkey, ktoré sú vysoko senzitívne voči infekcii mikroorganizmom Chlamydia psittaci, vedie k úplnej deštrukcii dosky s bunkami, keď je potom počet infekčných mikroorganizmov
31100/H v kultúre veľmi vysoký. Tieto mikroorganizmy možno ľahko odstrániť (vyčistiť) z buniek a zvyškov (debris) buniek filtráciou, centrifugáciou alebo ultracentrifugáciou a , pokiaľ sa formuluje do vakcíny obsahujúcej adjuvans a prijateľný farmaceutický nosič, je veľmi malé množstvo odobratých vyčistených Chlamydia psittaci (< 50 pg/dávku) imunogénne účinné.
Podľa vynálezu sa izolát Chlamydie, ako je kmeň Cello Chlamydia psittaci , najprv šíril v membráne žítkového vaku vajec s kuracími embryami. Izolát Chlamydia psittaci bol inokulovaný do žítkového vaku vajec s kuracími embryami a inkuboval sa 5 až 7 dní pri teplote 37 °C. Počínajúc piatym dňom boli vajcia každý deň prehliadnuté proti svetlu, aby sa určila ich viabilita. V deň, keď bolo zistené uhynutie embryí u 25 % vajec, boli membrány žítkových vakov stále ešte viabilných vajec odobraté, vymyté fosfátovým pufrom, aby sa zbavili prebytočného proteínu v žĺtku a aseptický zmiešané, načo nasledovalo opätovné suspendovanie týchto zmiešaných membrán vo fosfátovom pufri. Jednomililitrové alikvotné podiely tohto zmiešaného a resuspendovaného východiskového produktu na inokuláciu boli uložené v zmrazenom stave pri teplote - 70 °C. Rovnakým postupom ako je uvedené hore sa uskutočňuje až 5 pasáží tohto zárodočného materiálu (východiskový produkt), čím sa získa zárodočný produkt, použiteľný na inokuláciu buniek tkanivovej kultúry.
Pri výrobe antigénu vakcíny s Chlamydia psittaci sa začína prípravou kultúry tkanivových buniek. Bunky Buffalo Green Monkey sa pestovali v Bulbeccovom médiu MEM s vysokým obsahom glukózy (DMEM/H), obsahujúcim 5 % fetálneho bovinného séra, 10 mM pufru HERPES a neomycín. Akonáhle boli bunky konfluentné, boli infikované Chlamydia psittaci v DMEM/H s neomycínom. Chlamydia psittaci sa absorbovala do buniek s malým objemom média a potom bolo pridané ďalšie DMEM/H médium. Infikované bunky boli inkubované po dobu 5 až 7 dní pri teplote 37 °C. Za normálnych okolností bolo 6. deň po infikovaní 90 až 100 % dosiek s bunkami zničené. V tejto fáze bol uskutočnený odber Chlamydia psittaci (odberová tekutina), čo bolo uskutočnené pretrepávaním s nádobami, aby sa odstránili všetky zvyšné bunky. Bunky a zvyšky (debris) buniek boli z odberových tekutín odstránené pomocou filtrov schopných zachytiť častice s veľkosťou cez 5
31I00/H mikrometrov alebo centrifugáciou. Potom sa uskutočnila deaktivácia vyčistených odberových tekutín. Medzi deaktivačné činidlá patrí binárny etylénimín, formalín, timerosal a betapropiolaktón, pričom však tento výpočet nie je na tieto činidlá obmedzený. Hodnota pH bola upravená na neutrálnu hodnotu a vyčistené odberové tekutiny boli adjustované na imunogénne účinné množstvo pre prípravok s adjuvans zriedením vo fosfátovom pufri. Imunogénne účinné množstvo Chlamydia psittaci bolo obvykle menšie, než 50 gg/dávku a vo výhodnom uskutočnení nižšie než 10 gg/dávku. Pre tieto účely je možné použiť ľubovolný adjuvans. Medzi možné adjuvans, ktoré boli použité v prípade predmetného vynálezu, patria polyméry a kopolyméry, polyméry a kopolyméry kyseliny akrylovej, kyselina polyakrylová ako Carbopol, povrchovo aktívne činidlá ako hexadecylamín, saponín, Quil A, hydroxid hlinitý, fosforečnan hlinitý, peptidy ako je muramyldipeptid, olejové emulzie, imunomodulátory ako sú interleukíny a interferóny, induktory interferónov, kopolyméry etylénu a anhydrid kyseliny maleinovej ako sú EMA-31, NEOCRYL A640 a POLYGÉN® (ktoré je možné získať od firmy MVP Laboratories), pričom však týmto výpočtom nie je rozsah použiteľných látok nijako obmedzený. Možno tiež použiť zmesi ľubovolných vyššie uvedených adjuvans alebo kombinácie adjuvans.
Podľa predmetného vynálezu bolo zistené, že popísané adjuvans pôsobí v účinných množstvách medzi 0,01 % a 50 % obj. /obj. celkovej dávky vakcíny. Vo výhodnom uskutočnení sa nastaví koncentrácia adjuvans na hodnotu medzi 1 % a 15 %. Podľa ešte výhodnejšieho uskutočnenia sa POLYGÉN® používa v koncentráciách medzi 1 % a 5 % a Carbopol® sa používa v koncentráciách medzi 0,1 % a 0,5 %.
Kompozícia vakcíny v prípade predmetného vynálezu rovnako zahrňuje i farmaceutický prijateľný nosič alebo riedidlo a môže obsahovať i ďalšie mačacie antigény, ako sú antigény pre mačaciu rinotracheitidu, mačaciu leukémiu, mačací kalicivírus a mačaciu panleukopéniu, vírus imunodeficiencie mačiek, mačaciu infekčnú peritonitídu, Toxoplazma gondii a besnotu.
31100,Ή
Tabuľka 1
Prehľad výsledkov pre jednotlivé skupiny (klinické skóre) a priemerné výsledky za deň (priemerné skóre/deň)
| Deň | Kontrolná skupina | 25μΙ antigénová hmota | 50μΙ antigénová hmota | 100μΙ antigénová hmota |
| -3 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 |
| 1 | 0,05 | 0,00 | 0,00 | 0,05 |
| 5 | 2,63 | 0,78 | 1,00 | 0,85 |
| g | 3,38 | 0,88 | 0,75 | 0,63 |
| 13 | 3,60 | 0,93 | 0,63 | 0,58 |
| 17 | 3,23 | 0,90 | 1,00 | 0,73 |
| 21 | 3,76 | 0,68 | 0,98 | 0,93 |
| 25 | 3,15 | 0,20 | 0,65 | 0,60 |
| Priemer 5.-28.deň | 3,29 | 0,73 | 0,83 | 0,72 |
V nasledujúcej tabuľke č. 2 je demonštrovaná účinnosť multikomponentnej vakcíny, obsahujúcej deaktivovaný vírus mačacej rinotracheitídy, mačací kalicivírus, vírus mačacej panleukopénie, vírus mačacej leukémie a mačacia Chlamydia psittaci, pripravená podľa tohto vynálezu.
31100.Ή
Tabuľka 2
Výsledky testovania účinnosti päťzložkovej mačacej vakcíny, obsahujúce mačacie Chlamydia psittaci, vírusy mačacej rinotrachitídy, leukémie, mačacej kalicivírus a vírus mačacej panleukopénie
| Antigén pri expozícii | Odpoveď titru č. >1:8/celkom | Ochrana |
| Mačacia panleukopénia | ||
| SC | 4/4 | 100% |
| IM | 4/4 | 100% |
| ČÓŇŤ | 0/4 | 0% |
| Mačacia leukémia | ||
| SC | NA | 80% |
| IM | NA | 90% |
| CONT | NA | 22% |
| Mačacia rinotracheitída | ||
| SC | NA | vynikajúci „T“ = 34 |
| vakc. C.M. =9,7 | ||
| cont. C.M. = 49,3 | ||
| IM | NA | vynikajúci „T“ = 34 |
| vakc. C.M. = 8,3 | ||
| kont. C.M. = 49,3 | ||
| CONT | NA | žiadna |
| Mačací kalcivírus | ||
| SC | NA | vynikajúci „T“ = 34 |
| vakc. C.M. =9,0 | ||
| cont. C.M. = 20,0 | ||
| IM | NA | vynikajúci „T“ = 34 |
| vakc. C.M. = 4,7 | ||
| kont. C.M. = 20,0 | ||
| CONT | NA | žiadna |
| Mačacia Chlamydia psittaci | ||
| SC | NA | vynikajúci, AV M.Š.= 0,54 |
| IM | NA | vynikajúci, AV M.S. = 0,49 |
| CONT | NA | žiadna, priem. AV M.Š. = 2,04 |
31100/H
C.M. - kumulatívne skóre
AV M.S.- priemerné skóre „T“ - štatistický výpočet (jednosmerná modifikácia Wilcoxonového testu s dvomi vzorcami v modifikácii Mann-Whitney) porovnávajúci klinické skóre vakcínovaných versus kontrolných mačiek (definované pomocou hodnôt 9 CFR
115.130, 113.149, 113.131, 115.150, SAM 310 a SAM 311. Hodnota „T“ > 31 sa rovná ochrane).
Ako ďalšie možné aplikácie predloženého vynálezu možno vakcínu podávať vo forme prípravku s postupným uvoľňovaním, napríklad prípravok s laktid-glykolidovým kopolymérom, vo forme mikročastíc, umožňujúce pozvoľné uvoľňovanie alebo vo forme implantátu.
Do rozsahu predmetného vynálezu patrí i spôsob prevencie vzniku chlamýdiovej infekcie u mačiek, keď sa mačke podáva imunogénne účinné množstvo vakcíny, ktorá je bližšie popísaná vyššie. Pri použití predloženého vynálezu sa jedná o parenterálne spôsoby aplikácie (subkutánne, intramuskulárne, intraperitoneálne a intradermálne) alebo perorálny/nasálny spôsob aplikácie. Výhodnými spôsobmi aplikácie sú subkutánne a intramuskulárne. Ukázalo sa , že účinným liečebným režimom je minimálne dvojitá aplikácia vakcíny, pričom interval medzi každou aplikáciou je 2 až 4 týždne, ideálne 14 až 30 dní.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Mačacia vakcína obsahujúca Chlamydia psittaci, postup jej prípravy , použitie a aplikácia sú bližšie vysvetlené v nasledujúcich konkrétnych príkladoch, pričom tieto príklady sú iba ilustratívne a nijako neobmedzujú rozsah predmetného vynálezu.
Príklad 1
Monovalentná vakcína proti Chlamydia psittaci u mačky
Uchovávaný podiel buniek Buffalo Green Monkey sa rozmrazil, načo bol tento podiel pridaný do rastového média obsahujúceho DMEM/H + 5 % fetálneho hovädzieho séra, 10 mM HERPES pufru a 30 pg/ml neomycínu a tento podiel bol odstreďovaný po dobu 10 až 15 minút pri 400 až 600 g. Odstredený podiel buniek sa potom previedol do suspenzie v čerstvom rastovom médiu a potom bol vložený do otáčacích fliaš. Otáčacie fľaše sa inkubovali pri teplote 37 °C, až bunky dozreli do konfluencie (splynutia).
Subkultúry buniek sa získavali až do doby, kedy bol k dispozícii požadovaný počet otáčacích fliaš na výrobné účely. Veľkosť výrobných šarží
31100H obvykle dosahuje 50 až 500 otáčacích fliaš. Vo fáze keď boli produkčné kultúry buniek BGM v otáčaných fľašiach 3 až 5 dní staré a konfluentné s minimálne 95 %, odstránilo sa rastové médium a pridal sa východiskový produkt na inokuláciu Chlamydia psittaci pri multiplicite infekcie (MOI) od 0,01 do 0,1. Médiom, použitým na pestovanie Chlamydie, bolo DMEM/H plus 30 pg/ml neomycínu. Otáčané fľaše sa znovu inkubovali pre absorpciu Chlamydie pri teplote 36 až 38 °C po dobu 1 hodiny a potom sa do každej otáčanej fľaše pridalo 200 mililitrov ďalšieho média. Inkubácia pri teplote 36 až 38 °C pokračovala ďalších 5 až 7 dní až do dosiahnutia hodnoty CPE >80 %. Tekutina z otáčacích fliaš sa odobrala trepaním otáčacích fliaš, aby sa z povrchu odstránili všetky zvyšné bunky a preniesli sa odberové tekutiny do nádoby. Odberová tekutina sa vyčistila filtráciou cez polypropylénový filter (5 mikrónov), aby sa odstránili prebytočné zvyšky (debris) buniek. Vyčistené bunky sa deaktivovali pomocou 0,01 M binárneho etylenimínu (BEI) po dobu 72 hodín pri teplote 2 až 8 °C. Po deaktivácii sa BEI neutralizoval tiosulfátom sodným na konečnú koncentráciu 0,02 M.
Vyčistený, deaktivovaný produkt Chlamydia psittaci sa zriedil na tri rôzne hladiny antigénu (tri rôzne antigénové hmoty). Najvyššie skúšaná antigénová hmota bola 100 μΙ/dávku, čo sa rovnalo približne hodnote 100 pg/dávku, stredne vysoká skúšaná antigénová hmota dosahovala hodnoty 50 μΙ/dávku, čo sa približne rovnalo hodnote 50 μΙ/dávku, a najnižšie skúšaná antigénová hmota činila 25 μΙ/dávku, alebo približne 25 pg/dávku. Všetky antigénové hmoty boli zriedené fosfátovým pufrom tak, aby celkový objem každého prípravku bol 0,95 mililitra. Na získanie hotových vakcín sa do každého prípravku pridal POLYGÉNr s objemom 0,05 mililitrov ako adjuvans. Tieto vakcíny v dávke 1 mililiter boli podávané skupinám 5 séronegatívnych mačiek v intervale 3 týždňov. Prvá dávka bola podaná v deň 0, druhá dávka v 21. deň. Skupina 5 séronegatívnych mačiek rovnakého veku a z rovnakého prostredia nebola vakcinovaná a tvorila nevakcinované kontroly. Všetky mačky boli infikované intranasálne a intraokulárne virulentným kmeňom Chlamydia psittaci 2 až 8 týždňov po pomocnej druhej dávke. Všetky mačky boli sledované po dobu 28
31100/Ή
II dní na prítomnosť klinických známok ochorenia Chlamydia psittaci včítane teploty, výtoku zočí, konjunktivity, exsudátu zčumáka, kýchanie, kašľanie, dyspney, anorexie, dehydratácie a depresie. Analýza dát sa uskutočnila technikou vyhodnocovania skóre vážením. Vážnejšie znaky ochorenia dostávali vyššie číselné hodnoty. Všetky dáta boli štatisticky analyzované vo štvordennom intervale a sú uvedené v tabuľke 1. Tieto dáta sú v grafickej forme uvedené na obr. 1.
Výsledky, uvedené v tabuľke 1 a na obr. 1, jasne ukazujú, že Chlamydia psittaci, pokiaľ bola pripravená podľa tohto vynálezu, je účinná pri antigénovej hmote už 25 pg/dávku. Pretože vakcínou s tak nízkou antigénovou hmotou zaisťovala ochranu zodpovedajúcu ochrane, ktorú poskytovala vakcína s vysokou antigénovou hmotou, možno predpokladať, že hodnoty nižšie než 25 pg/dávku, pokiaľ sa pripravia podľa predloženého vynálezu, by tiež mali ochranný účinok.
Príklad 2
Deaktivovaná mačacia Chlamydia psittaci, pripravená podľa príkladu 1 tohto vynálezu, bola zmiešaná so štyrmi ďalšími deaktivovanými mačacími antigénmi, aby vznikla viaczložková vakcína. Chlamydia psittaci (106,° TCIDso/ml) s 35 mililitrami POLYGÉNu ako adjuvans bolo zmiešané s vírusom mačacej leukémie pri antigénovej dávke 1,25 ELISA relatívnej potencie jednotiek/dávka s POLYGÉNom ako adjuvans, 1O8,0 TCID5o/dávku vírusu mačacej panleukopénie s POLYGÉNom ako adjuvans. Táto päťzložková vakcína bola skúšaná na účinnosť pri vakcinácii/infekcii mačiek. Na začiatku experimentu bola však mačkám odobratá krv na získanie vzoriek séra a plnej krvi. U sér boli stanovené titre protilátok proti vírusom mačacej rinotracheitídy, kalicivírusu a panleukopénie. U všetkých mačiek bolo testovanie zahájené s titrami menšími než 1 : 2 pre tieto vírusy. Mačky použité v protokole FeLV vykazovali negativitu na antigén p27. Päť skupín mačiek (n = 74) vo veku 13 až 15 týždňov bolo vakcinovaných a o tri týždne neskôr dostali pomocnú dávku 1,0 mililitrov päťzložkovej vakcíny. Približne polovica mačiek bola vakcinovaná subkutánne a polovina dostala vakcínu intramuskulárne.
31100/H
Osem vakcinovaných (štyri subkutánne a 4 intramuskulárne) mačiek a jedna kontrolná mačka boli hodnotené na sérologickú odpoveď na vakcináciu a pomocnú dávku proti mačacej panleukopénii. Serologická odpoveď 1 : 8 sa u tohto prípravku považuje za hodnotu znamenajúcu ochranu. Výsledky po vakcinácii sú uvedené v tabuľke 2.
Dvanásť mačiek, ktorým bola aplikovaná päťzložková vakcína (6 subkutánne a 6 intramuskulárne) a štyri nevakcínované kontrolné mačky boli infikované virulentným vírusom mačacej rinotracheitídy. Pred infikovaním boli odobraté krčné stery a krvné vzorky. Po infikovaní boli všetky mačky sledované na známky ochorenia. Klinické známky ochorenia a teplota boli zaznamenávané a analyzované s použitím priemerných skóre, uvedených v tabuľke 2. Účinnosť sa preukazuje štatisticky významným rozdielom v klinických skóre medzi vakcinovanými mačkami a kontrolami.
Dvanásť mačiek, ktorým bola aplikovaná päťzložková vakcína (6 subkutánne a 6 intramuskulárne) a štyri nevakcínované kontrolné mačky boli infikované virulentným mačacím kalicivírusom. Po infikovaní boli odobraté krčné stery a krvné vzorky. Okrem toho boli mačky sledované na známky ochorení. Ďalej boli zaznamenávané klinické známky, bolo vyhodnotené skóre a bola uskutočnená analýza dát, ktorej výsledky sú uvedené v tabuľke 2. Účinnosť sa preukazuje štatisticky významným rozdielom v klinických skóre medzi vakcinovanými mačkami a kontrolami.
Dvanásť mačiek, ktorým už bola aplikovaná päťzložková vakcína (10 subkutánne a 10 intramuskulárne) a desať nevakcinovaných kontrolných mačiek bolo infikovaných virulentným vírom Chlamydia psittaci a sledovaných na prítomnosť klinických známok ochorení, ako je uvedené v príklade 1. Týmto klinickým známkam ochorení bolo prideľované skóre. Účinnosť sa preukazuje štatisticky významným rozdielom medzi skóre vakcionovaných mačiek a kontrol.
Súhrnné výsledky tohto experimentu sú tiež uvedené v tabuľke 2.
Dvadsaťdva mačiek, ktorým bola apikovaná päťzložková vakcína (11 subkutánne a 11 intramuskulárne) a deväť nevakcinovaných kontrolných mačiek, bolo infikovaných virulentným vírusom FeLV. Tento pokus vyžaduje
31100/H uskutočniť najprv imunosupresiu mačiek a potom ich nasledujúce dva dni infikovať. Mačky boli po 3. týždni až do 12. týždňa po infekcii kontrolované na prítomnosť virémie na základe detekcie antigénu p27 v krvi s použitím techniky nepriamej imunofluorescencie (IFA). Ochrana bola stanovená podľa zásad, popísaných v publikácii : Shibley a kol. (JAVMA 1991, 199: 1402-1406) a uvedených v tabuľke 2.
Z tabuľky 2 je zrejmé, že všetkých päť zložiek tejto viaczložkovej vakcíny, obsahujúcich mačací Chlamydia psittaci podľa toto vynálezu, bolo účinných. Je potrebné si tiež uvedomiť, že žiadna vakcinovaná mačka v tejto štúdii, ani žiadne vakcínované mačky v iných štúdiách, uskutočnených s vakcínou Chlamydia psittaci alebo s viaczložkovými vakcínami obsahujúcimi Chlamydia psittaci , nepreukázali lokálne ani systémové reakcie na vakcínu. Hlavným dôvodom pre túto absenciu reaktivity bola nízka antigénová hmota Chlamydia psittaci.
I keď sa v popise predmetného vynálezu uvádzajú konkrétne aplikácie predloženého vynálezu, je potrebné si uvedomiť, že možno použiť rôzne modifikácie a zmeny, ktoré sú zrejmé odborníkom pracujúcim v tomto odbore a oboznámených so súčasným stavom techniky, a ktoré tiež spadajú do rámca vynálezu podľa nasledujúcej definície patentových nárokov.
Claims (14)
1. Deaktivovaná, imunogénne účinná a nereaktívna vakcína proti Chlamydia psittaci, vyznačujúca sa tým, že obsahuje veľmi malé množstvo Chlamydia psittaci.
2. Deaktivovaná, imunogénne účinná a nereaktívna vakcína proti Chlamydia psittaci podľa nároku 1, vyznačujúca sa tým, že uvedené veľmi malé množstvo Chlamydia psittaci je množstvo nižšie než 50 pg/dávku.
3. Deaktivovaná, imunogénne účinná a nereaktívna vakcína proti Chlamydia psittaci podľa nároku 1, vyznačujúca sa tým, že ďalej obsahuje mačací antigén iný, než Chlamydia psittaci.
4. Deaktivovaná, imunogénne účinná a nereaktívna vakcína proti Chlamydia psittaci podľa nároku 3, vyznačujúca sa tým, že iný mačací antigén je vybraný zo skupiny zahrňujúcej mačaciu rinotracheitis, mačací kaicivírus, vírus mačacej leukémie, Toxoplazma gondii, vírus besnoty, vírus mačacej panleukopénie, vírus mačacej imunodeficiencie a vírus mačacej infekčnej peritonitídy.
5. Spôsob prípravy vakcíny proti chlamýdiovým infekciám, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje:
- kultiváciu Chlamydia psittaci v žítkovom vaku,
- odber membrány žítkového vaku z uvedeného žítkového vaku a zmrazenie odberového materiálu ako základného zárodočného produktu na inokuláciu,
- kultiváciu uvedeného základného zárodočného produktu na inokuláciu alebo pasáže uvedeného základného zárodočného produktu vo vysoko senzibilnej bunkovej línii pestovanej na povrchu tak dlho, dokiaľ nie je minimálne 80 % bunkovej línie zničených Chlamydiou psittaci,
- odohranie zničenej senzibilnej bunkovej línie a média obsahujúceho Chlamydia psittaci a doprevádzajúceho uvedenú bunkovú líniu,
31100/Ή
- odstránenie zničenej bunkovej línie z Chlamydia psittaci,
- deaktiváciu Chlamydia psittaci,
- zmiešanie deaktivovanej Chlamydia psittaci s adjuvans a fyziologicky prijateľným nosičom.
6. Spôsob podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že vysoko senzibilnou bunkovou líniou je bunková línia Buffalo Green Monkey.
7. Spôsob podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že uvedená deaktivácia zahrňuje pridanie účinného množstva deaktivačnej látky na deaktiváciu «
Chlamydia psittaci, ktorá si stále ešte podržiava imunogenitu.
;;
8. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že sa uvedená deaktivačná látka volí zo skupiny látok zahrňujúcej binárny etylenimín, betapropiolaktón, formalín, mertiolát, timerozal, glutaraldehyd a detergenty.
9. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že deaktivačná látka je binárny etylenimín.
10. Spôsob podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že sa adjuvans volí zo skupiny zahrňujúcej polyméry a kopolyméry, polyméry a kopolyméry kyseliny akrylovej, kyselinu polyakrylovú ako Carbopol, povrchovo aktívne látky ako hexadecylamín, saponín, Quil A, hydroxid hlinitý, fosforečnan hlinitý, peptidy, ako je muramyl dipeptid, olejové emulzie, imunomodulátory ako sú interleukíny a interferóny, induktory interferónu, kopolyméry etylénu a anhydridu kyseliny maleínovej, ako je EMA-31, NEOCRYL A640 a POLYGÉN® a ich zmesi.
«
11. Spôsob podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že adjuvans je
POLYGÉN®.
12. Spôsob podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že fyziologicky prijateľný nosič je zvolený zo skupiny zahrňujúcej fosfátový fyziologický pufor, fyziologický roztok a minimálne základné médium.
13. Spôsob prevencie chlamýdiovej infekcie u mačiek, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje aplikáciu imunogénne účinného množstva vakcíny podľa nároku 3 mačke.
14. Spôsob prevencie chlamýdiovej infekcie u mačiek, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje aplikáciu imunogénne účinného množstva vakcíny podľa nároku 5 mačke.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/643,673 US5972350A (en) | 1996-05-06 | 1996-05-06 | Feline vaccines containing Chlamydia psittaci and method for making the same |
| PCT/US1997/007514 WO1997041889A1 (en) | 1996-05-06 | 1997-04-21 | Feline vaccines containing chlamydia psittaci and method for making the same |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK149198A3 true SK149198A3 (en) | 2000-02-14 |
Family
ID=24581818
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK1491-98A SK149198A3 (en) | 1996-05-06 | 1997-04-21 | Feline vaccines containing chlamydia psittaci and method for making the same |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5972350A (sk) |
| EP (1) | EP0904106A1 (sk) |
| JP (1) | JP2000510121A (sk) |
| AU (1) | AU717628B2 (sk) |
| BG (1) | BG63564B1 (sk) |
| BR (1) | BR9708975A (sk) |
| CA (1) | CA2203234A1 (sk) |
| CZ (1) | CZ297848B6 (sk) |
| EE (1) | EE04516B1 (sk) |
| IL (1) | IL126628A (sk) |
| NO (1) | NO320871B1 (sk) |
| NZ (1) | NZ332620A (sk) |
| PL (1) | PL329734A1 (sk) |
| SK (1) | SK149198A3 (sk) |
| TR (1) | TR199802259T2 (sk) |
| WO (1) | WO1997041889A1 (sk) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20010048927A1 (en) * | 2000-02-01 | 2001-12-06 | Richard Stephens | Porin B (PorB) as a therapeutic target for prevention and treatment of infection by chlamydia |
| US20030129161A1 (en) * | 2001-09-17 | 2003-07-10 | Hsien-Jue Chu | Interleukin-12 as a veterinary vaccine adjuvant |
| US7105171B2 (en) * | 2002-03-07 | 2006-09-12 | The Regents Of The University Of California | Porin B (PorB) as a therapeutic target for prevention and treatment of infection by Chlamydia |
| US20050202046A1 (en) * | 2004-03-11 | 2005-09-15 | Wyeth | Canine vaccine for protection against ehrlichiosis |
| US7306807B2 (en) * | 2004-09-13 | 2007-12-11 | Wyeth | Hemorrhagic feline calicivirus, calicivirus vaccine and method for preventing calicivirus infection or disease |
| CN100423775C (zh) * | 2005-04-15 | 2008-10-08 | 中国农业科学院兰州兽医研究所 | 牛衣原体病灭活疫苗及其制备与检验方法 |
| AU2008260593A1 (en) * | 2007-05-30 | 2008-12-11 | Wyeth | Raccoon poxvirus expressing genes of feline antigens |
| FR3039406B1 (fr) * | 2015-07-28 | 2020-09-18 | Centre Nat Rech Scient | Composition vaccinale contre les infections a chlamydiaceae |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5242686A (en) * | 1990-11-07 | 1993-09-07 | American Home Products Corporation | Feline vaccine compositions and method for preventing chlamydia infections or diseases using the same |
| CA2175081A1 (en) * | 1993-11-03 | 1995-05-11 | James Evan Sandbulte | Vaccine and method for treatment of chlamydial infections |
-
1996
- 1996-05-06 US US08/643,673 patent/US5972350A/en not_active Expired - Fee Related
-
1997
- 1997-04-21 IL IL12662897A patent/IL126628A/en not_active IP Right Cessation
- 1997-04-21 SK SK1491-98A patent/SK149198A3/sk unknown
- 1997-04-21 EE EE9800388A patent/EE04516B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1997-04-21 JP JP09540090A patent/JP2000510121A/ja not_active Ceased
- 1997-04-21 TR TR1998/02259T patent/TR199802259T2/xx unknown
- 1997-04-21 BR BR9708975A patent/BR9708975A/pt not_active Application Discontinuation
- 1997-04-21 CZ CZ0360498A patent/CZ297848B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-04-21 CA CA002203234A patent/CA2203234A1/en not_active Abandoned
- 1997-04-21 EP EP97924574A patent/EP0904106A1/en not_active Withdrawn
- 1997-04-21 NZ NZ332620A patent/NZ332620A/xx unknown
- 1997-04-21 WO PCT/US1997/007514 patent/WO1997041889A1/en not_active Application Discontinuation
- 1997-04-21 AU AU29962/97A patent/AU717628B2/en not_active Ceased
- 1997-04-21 PL PL97329734A patent/PL329734A1/xx unknown
-
1998
- 1998-11-03 BG BG102890A patent/BG63564B1/bg unknown
- 1998-11-05 NO NO19985172A patent/NO320871B1/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO320871B1 (no) | 2006-02-06 |
| EP0904106A1 (en) | 1999-03-31 |
| CZ360498A3 (cs) | 1999-03-17 |
| TR199802259T2 (xx) | 1999-02-22 |
| CZ297848B6 (cs) | 2007-04-11 |
| AU717628B2 (en) | 2000-03-30 |
| WO1997041889A1 (en) | 1997-11-13 |
| NO985172L (no) | 1999-01-06 |
| BG63564B1 (bg) | 2002-05-31 |
| JP2000510121A (ja) | 2000-08-08 |
| CA2203234A1 (en) | 1997-11-06 |
| NO985172D0 (no) | 1998-11-05 |
| BG102890A (en) | 1999-09-30 |
| MX9703278A (es) | 1998-05-31 |
| EE04516B1 (et) | 2005-08-15 |
| BR9708975A (pt) | 1999-08-03 |
| NZ332620A (en) | 2000-04-28 |
| US5972350A (en) | 1999-10-26 |
| EE9800388A (et) | 1999-06-15 |
| AU2996297A (en) | 1997-11-26 |
| IL126628A0 (en) | 1999-08-17 |
| IL126628A (en) | 2002-09-12 |
| PL329734A1 (en) | 1999-04-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3993230B2 (ja) | 改良された修飾ｂｒｓｖ生ワクチン | |
| EP0329264B1 (en) | Veterinary vaccines | |
| US5242686A (en) | Feline vaccine compositions and method for preventing chlamydia infections or diseases using the same | |
| CN109568573A (zh) | 疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
| US6951650B1 (en) | Antigenic class of avian reoviruses | |
| SK149198A3 (en) | Feline vaccines containing chlamydia psittaci and method for making the same | |
| KR100531491B1 (ko) | 백신으로서 소 호흡 코로나바이러스 | |
| KR100302522B1 (ko) | 고양이장코로나바이러스로부터의개코로나바이러스왁찐 | |
| EP0612532A2 (en) | Canine coronavirus vaccine from feline enteric coronavirus | |
| US6004563A (en) | Feline vaccine compositions and method for preventing chlamydia infections or diseases using the same | |
| US7211260B1 (en) | Infectious bursitis vaccine | |
| EP0310362B1 (en) | Vaccine for protection of cats against feline infectious peritonitis | |
| KR100556275B1 (ko) | 클라미디아시타시를함유하는고양이백신및그의제조방법 | |
| US20020146425A1 (en) | Feline vaccines containing chlamydia psittaci and method for making the same | |
| MXPA97003278A (es) | Vacunas felinas que contienen chlamydia psittaci y metodo para preparar las mismas | |
| CN1223589A (zh) | 包含鹦鹉热衣原体的猫疫苗及其制备方法 | |
| AU3441693A (en) | Feline leukemia virus vaccines | |
| FR2601251A1 (fr) | Agent viral non pathogene pour la prevention de la gastroenterite transmissible porcine, son obtention et son utilisation comme vaccin. | |
| MXPA99007134A (en) | Infectious bursitis vaccine |