CZ303552B6 - Memnopeptid, farmaceutická kompozice tento memnopeptid obsahující, zpusob prípravy tohoto memnopeptidu a jeho použití k príprave léciva - Google Patents
Memnopeptid, farmaceutická kompozice tento memnopeptid obsahující, zpusob prípravy tohoto memnopeptidu a jeho použití k príprave léciva Download PDFInfo
- Publication number
- CZ303552B6 CZ303552B6 CZ20022904A CZ20022904A CZ303552B6 CZ 303552 B6 CZ303552 B6 CZ 303552B6 CZ 20022904 A CZ20022904 A CZ 20022904A CZ 20022904 A CZ20022904 A CZ 20022904A CZ 303552 B6 CZ303552 B6 CZ 303552B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- memnopeptide
- formula
- group
- salt
- hydrogen
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 35
- 241001598067 Memnoniella echinata Species 0.000 claims abstract description 26
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 claims abstract description 17
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 15
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 31
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 22
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 21
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 19
- 108010055874 memnopeptide A Proteins 0.000 claims description 16
- GRBLBISGALXJDT-LHTGWLQBSA-N memnopeptide a Chemical compound C1CCC(C(=O)N2C(CCC2)C(O)=O)N1C(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C1N(CCC1)C(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C(CCS(C)=O)N1C(C2=CC(O)=C3C[C@]4(OC3=C2C1)[C@]1(CC[C@@H](O)C(C)(C)[C@@H]1CC[C@H]4C)C)=O)CC1=CNC=N1 GRBLBISGALXJDT-LHTGWLQBSA-N 0.000 claims description 16
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 15
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 13
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 claims description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 10
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 10
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 10
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 10
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 9
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 8
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 claims description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 7
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 7
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 6
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 5
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 claims description 4
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims description 4
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 4
- 150000002402 hexoses Chemical group 0.000 claims description 4
- 150000003462 sulfoxides Chemical class 0.000 claims description 4
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 claims description 3
- 125000000904 isoindolyl group Chemical group C=1(NC=C2C=CC=CC12)* 0.000 claims description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 claims description 3
- GZCGUPFRVQAUEE-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- CFRRIZLGFGJEDB-SRVKXCTJSA-N Met-His-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CFRRIZLGFGJEDB-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 2
- MCWHYUWXVNRXFV-RWMBFGLXSA-N Pro-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 MCWHYUWXVNRXFV-RWMBFGLXSA-N 0.000 claims description 2
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 claims description 2
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 1
- SSWJYJHXQOYTSP-SRVKXCTJSA-N Pro-His-Gln Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O SSWJYJHXQOYTSP-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 claims 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 claims 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 38
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 30
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 17
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 13
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- 150000003505 terpenes Chemical group 0.000 description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 9
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 9
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 7
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 210000001908 sarcoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 description 5
- -1 nitrogen-containing terpenes Chemical class 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- 108091006112 ATPases Proteins 0.000 description 4
- 102000057290 Adenosine Triphosphatases Human genes 0.000 description 4
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 4
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 4
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 229910000358 iron sulfate Inorganic materials 0.000 description 4
- 210000003365 myofibril Anatomy 0.000 description 4
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 4
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 4
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- GSDSWSVVBLHKDQ-UHFFFAOYSA-N 9-fluoro-3-methyl-10-(4-methylpiperazin-1-yl)-7-oxo-2,3-dihydro-7H-[1,4]oxazino[2,3,4-ij]quinoline-6-carboxylic acid Chemical compound FC1=CC(C(C(C(O)=O)=C2)=O)=C3N2C(C)COC3=C1N1CCN(C)CC1 GSDSWSVVBLHKDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 3
- 239000012541 Fractogel® Substances 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 241001279361 Stachybotrys Species 0.000 description 3
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 3
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 229960001699 ofloxacin Drugs 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 125000000830 polyketide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 3
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 3
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 3
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 description 3
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine Chemical compound O=NN(C)C(=N)N[N+]([O-])=O VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 241001279364 Stachybotrys chartarum Species 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 108010055297 Sterol Esterase Proteins 0.000 description 2
- 102000000019 Sterol Esterase Human genes 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 2
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 2
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 2
- DXGLGDHPHMLXJC-UHFFFAOYSA-N oxybenzone Chemical compound OC1=CC(OC)=CC=C1C(=O)C1=CC=CC=C1 DXGLGDHPHMLXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- IHUKVJKKTBLTEE-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-acetamido-5-[[amino-(methylcarbamoylamino)methylidene]amino]-n-methylpentanamide Chemical compound CNC(=O)NC(N)=NCCC[C@H](NC(C)=O)C(=O)NC IHUKVJKKTBLTEE-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KEQGZUUPPQEDPF-UHFFFAOYSA-N 1,3-dichloro-5,5-dimethylimidazolidine-2,4-dione Chemical compound CC1(C)N(Cl)C(=O)N(Cl)C1=O KEQGZUUPPQEDPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010065929 Cardiovascular insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 229910052684 Cerium Inorganic materials 0.000 description 1
- 101000936911 Chionoecetes opilio Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 102000008130 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010049894 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229940118365 Endothelin receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241001071795 Gentiana Species 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 1
- 108010016183 Human immunodeficiency virus 1 p16 protease Proteins 0.000 description 1
- 101710144867 Inositol monophosphatase Proteins 0.000 description 1
- RRHGJUQNOFWUDK-UHFFFAOYSA-N Isoprene Chemical group CC(=C)C=C RRHGJUQNOFWUDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001598064 Memnoniella Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004756 Respiratory Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 229910000318 alkali metal phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052936 alkali metal sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000316 alkaline earth metal phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- APUPEJJSWDHEBO-UHFFFAOYSA-P ammonium molybdate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-][Mo]([O-])(=O)=O APUPEJJSWDHEBO-UHFFFAOYSA-P 0.000 description 1
- 239000011609 ammonium molybdate Substances 0.000 description 1
- 235000018660 ammonium molybdate Nutrition 0.000 description 1
- 229940010552 ammonium molybdate Drugs 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012482 calibration solution Substances 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- GWXLDORMOJMVQZ-UHFFFAOYSA-N cerium Chemical compound [Ce] GWXLDORMOJMVQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- XTHPWXDJESJLNJ-UHFFFAOYSA-N chlorosulfonic acid Substances OS(Cl)(=O)=O XTHPWXDJESJLNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 229930004069 diterpene Natural products 0.000 description 1
- 125000000567 diterpene group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000002308 endothelin receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002329 esterase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052816 inorganic phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000006029 inositol monophosphatase Human genes 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003835 ketolide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000001589 microsome Anatomy 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 229930003658 monoterpene Natural products 0.000 description 1
- 150000002773 monoterpene derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000002577 monoterpenes Nutrition 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- 230000003836 peripheral circulation Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000009894 physiological stress Effects 0.000 description 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 235000021251 pulses Nutrition 0.000 description 1
- 238000013094 purity test Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 210000003660 reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 229930004725 sesquiterpene Natural products 0.000 description 1
- 150000004354 sesquiterpene derivatives Chemical class 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 229930188593 spirodihydrobenzofuranlactam Natural products 0.000 description 1
- 229930187239 stachybocin Natural products 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 108010046845 tryptones Proteins 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Peptidové slouceniny nazvané memnopeptidy obecného vzorce I, ve kterém obecné symboly mají specifické významy, farmaceutické kompozice obsahující tyto memnopeptidy jako úcinnou látku, zpusob prípravy techto memnopeptidu kultivací mikroorganismu Memnoniella echinata FH2272, DSM 13195, a použití techto memnopeptidu k príprave léciva k lécení srdecní nedostatecnosti, diabetu mellitus a mikrobiální infekce.
Description
Memnopeptid, farmaceutická kompozice tento memnopeptid obsahující, způsob přípravy tohoto mem no peptidu a jeho použití k přípravě léčiva
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká nových peptidových derivátů, zvaných memnopeptidy, které lze získat fermentací Memnoniella echinata FH2272, tj. DSM 13195, v kultivačním médiu, způsobu přípravy memnopeptidů a použití memnopeptidů jako léčiv, např. pro přípravu léčiv k léčení srdeční nedostatečnosti.
Dosavadní stav techniky
Kardiovaskulární poruchy se stále ještě umisťují jako první v příčinách úmrtí v západních průmyslových zemích. Nezanedbatelnou část tvoří pacienti s diagnózou srdeční nedostatečnosti. Srdeční nedostatečností se rozumí nepřiměřená činnost srdce. Srdce není schopné produkovat výdej, který by odpovídal požadavkům savce. Srdeční nedostatečnost je akutní nebo chronická neschopnost srdce, při zátěži či dokonce v klidu, shromáždit výdej krve nezbytný pro metabolismus nebo pojmout venózní návrat. Je to srdeční stav, při němž kompenzační mechanismy, jako jsou frekvence srdeční, tepový objem nebo zvýšení krevního tlaku, již dále nepostačují pro udržení normálního srdečního výdeje. Nedostatečnost srdeční má širokou škálu příčin, například zánětlivé nebo degenerativní myokardiální (srdečního svalu) změny, koronární cirkulační poruchy a infarkt myokardu. Srdeční nedostatečnost vede ke změnám v periferním oběhu, poruše dýchání, funkce ledvin a elektrolytové rovnováhy a také snižuje sílu kosterního svalstva, a konečně, často vede k úmrtí.
Nedostatečnost srdeční se obecně vyskytuje v pokročilém věku. Incidence činí 3 poruchy na 1000 obyvatel ročně ve věku 35 až 64 let a 10 poruch na 1000 obyvatel ročně ve věkové skupině od 65 do 94 let. Mortalita se ve věku 75 let zvyšuje téměř o faktor 200 v porovnání s věkovou skupinou mezi 35 a 44 roky. Míra mortality se mezi lety 1970 a 1983 udržovala přibližně na konstantní úrovni, jak ukázaly studie provedené v USA. Pro Spolkovou Republiku Německo se předpokládají stejná čísla. Více než 50 % pacientů umírá v prvních pěti letech po určení diagnózy. Tato statistická šetření ukazují vysokou závažnost srdeční nedostatečnosti pro populaci, avšak potvrzují také nedostatečné možnosti lékařského ošetření, jež jsou dnes ošetřujícímu lékaři dostupné.
Vzhledem k nedostatečnosti současných způsobů léčby, byly nalezeny nové koncepty, které by mohly vést k novým srdečním léčebným prostředkům. Schopnost srdečního a kosterního svalstva kontrahovati se, a tak vykonat mechanickou práci, je závislá na
1) kontraktilních strukturních prvcích (myofibrily) a
2) chemické energii (ATP) dostupné myofibrilám, která se během procesu kontrakce převádí na energii mechanickou. Během procesu kontrakce dochází ke zkracování myofibril. Toto může být vyvoláno motorickými nervovými impulzy, jejichž působením vápníkové ionty (Ca2*) během několika málo milisekund vstupují z extracelulámího prostoru do prostoru sarkoplasmatického a zásoby vápníku se vyprazdňují. Při myokardiální nedostatečnosti (srdeční nedostatečnosti) může být koncentrace Ca2b v myofibrilách snížena. Ionty Ca2+ jsou však pro aktivaci kontraktilního aparátu nepostradatelné. Pokud je zvýšená poptávka, Ca“ jsou obecně pumpovány do sarkoplasmatického retikula (SR) za katalýzy membránové Ca2+ dependentní Mg2+ ATPázy, tento enzym je také nazýván jako Ca2+ ATPáza sarko(endo)plasmatického retikula (SERCA2). Podle hydropatické analýzy obsahuje Ca2 ATPáza deset transmembránových spirál a mnoho extramembránových smyček. Na cytosolové straně se tvoří domény pro vazbu Ca2+ ATP, pro fosforylaci a pro interakci s modulátorovým
- í CZ 303552 B6 proteinem fosfolambanem (PLB). Posledně jmenovaný je proteinový pentamer, který je umístěn v membráně sarkoplasmatického retikula (SR) a vykazuje v nefosforylovaném stavu inhibiční vliv na SERCA2. Při fyziologickém stresu probíhá fosforylace PLB, která zvyšuje afinitu SERCA2 k Ca2+, a tak zvyšuje rychlost transportu Ca2+ v sarkoplasmatickém retikulu (SR). Fosforylace PLB, tj. proteinu obsahujícího 52 aminokyselin, probíhá na dvou aminokyselinových zbytcích: serin-16 může být fosforylován pomocí cAMP dependentní proteinkinázy a threonin může být fosforylován v pozici 17 pomocí Ca2+/kalmodutin dependentní kinázy. Fosforylace způsobuje změnu v konfirmaci PLB, následovanou zvýšenou afinitou SERCA2 vůči Ca2+. Anti-PLB protilátky jsou schopné napodobit PLB fosfoiylační účinek, a tak potvrdit klíčovou roli PLB jako regulátoru kontraktilní aktivity srdce (Phospholamban: Protein Structure, Mechanism of Action and Role in Cardiac Function, Η. K. Simmerman a L. R. Jones, Physiological Reviews, sv. 78, č. 4, 921 ff, 1998). Aktivátory SERCA by proto měly příznivě působit na srdeční nedostatečnost.
Bylo překvapivě zjištěno, že kultury kmene hub Memnoniella echinata FH 2272, tj. DSM 13195, obsahují přirozené látky, které jsou schopné vykazovat příznivé účinky na srdce a cirkulaci. Izolované účinné látky, tj. memnopeptidy, jsou přirozené látky obsahující specifické skupiny složek. Tyto skupiny složek zahrnují terpenové jednotky, tzv. polyketidovou skupinu a skupinu obsahující dusík.
Terpeny jsou přirozeně se vyskytující sloučeniny, které lze formálně interpretovat jako polymerační produkty uhlovodíku isopropenu. Podle počtu isoprenových skupin lze rozlišovat monoterpeny, obsahující 10 uhlíkových atomů, seskviterpeny, obsahující 15 uhlíkových atomů, diterpeny, obsahující 20 uhlíkových atomů, atd. Z mateřské struktury lze vytvořit velký počet sloučenin pomocí substituce, cyklizace, přeskupení, oxidace atd.; proto je v literatuře popsáno mnoho tisíc terpenů. Sloučeniny obsahující dusík a pocházející z terpenů byly také publikovány, avšak počítají se mezi alkaloidy, např. gentianové alkaloidy (Rompp Chemie Lexikon (Rómpp's Chemical Encyclopedia), 9. vydání, sv. 6, str. 4508 ff., Georg Thieme Verlag, Stuttgart/New York, 1992). Tyto terpeny se však podstatně liší od memnopeptidů podle vynálezu, kde terpeny neobsahují polyketidovou skupinu, jejíž prostřednictvím mohou vázat dusík.
Příklady dalších známých terpenů obsahujících dusík jsou:
- stachybociny (J. Antibiotics, 48: str. 1396, 1995);
- stachybotriny (Y. Nozawa a kol., J. Antibiotics, 50: str. 635 až 645, 1997);
- spirodihydrobenzofuranové laktamy (J. Antibiotics, 49: str. 13, 1996);
- nakijichinony (Tetrahedron, 51: str. 10867 až 10874, 1995);
- F1839-A až J, tj, terpeny s polyketidovými skupinami obsahující dusík (japonský patent 061864133 a 08283118). Jsou to inhibitoiy cholesterolesterázy.
Tyto terpeny byly syntetizovány z různých kmenů rodů Memnoniella echinata a Stachybotrys a jiných. Byly popsány jako antagonisté endothe línových receptorů, jako inhibitoiy HIV-1 proteázy a cholesterolesterázy a jeho vlasová tonika. Dále byl z kultur kmene Memnoniella echinata, ATCC 20928, izolován inhibitor inositolmonofosfatázy L-671,776 (Y. K. T. Lam a kol. J. Antibiotics, 45, str. 1397 až 1402, 1992).
Memnopeptidy podle vynálezu mají rozličné spektrum účinků. Význačnou vlastností je jejich aktivační účinek na SERCA2, a tím na srdeční nedostatečnost.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je memnopeptid obecného vzorce I . 7
ve kterém
Rt a R2 společně znamenají dvojnou vazbou navázaný atom kyslíku nebo dva atomy vodíku nebo atom vodíku a hydroxylovou skupinu nebo atom vodíku a O-alkýlovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy,
R3 a R4 společně znamenají dvojnou vazbou navázaný atom kyslíku nebo dva atomy vodíku nebo atom vodíku a hydroxylovou skupinu nebo atom vodíku a O-alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy,
R8 se zvolí ze skupiny zahrnující atom vodíku, hydroxylovou skupinu, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy a O-alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy,
Ri znamená skupinu obecného vzorce II
ve kterém R9 znamená atom vodíku nebo glykosidicky vázaný cukr, přičemž cukrem je hexóza, která je případně substituována skupinou Ci-C4-alkyl nebo skupinou NH2, nebo skupinu obecného vzorce III
ve kterém RJ0 znamená atom vodíku nebo glykosidicky vázaný cukr, přičemž cukrem je hexóza, která je případně substituována skupinou C|-C4-alkyI nebo skupinou NH7, přičemž pokud R6 znamená skupinu obecného vzorce II, potom R5 znamená vazbu k uhlíkovému atomu C9 obecného vzorce II a R7 znamená atom vodíku nebo R? znamená vazbu k uhlíkovému atomu C9 obec30 ného vzorce II a Rs znamená atom vodíku, a pokud Ré znamená skupinu obecného vzorce III, potom R5 a R7 znamenají atom vodíku,
A znamená přírodní aminokyselinu zvolenou ze skupiny zahrnující Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Ser, Thr, Phe, Tyr, Trp, Lys, Arg, Asp, His, Glu, Asn, Gin, Cys a Met,
-3 CZ 303552 B6 n znamená celé číslo od 2 do 12, přičemž význam každého symbolu A je stejný s každým dalším symbolem A nebo odlišný od každého dalšího symbolu A, přičemž dusíkový atom v isoindolovém kruhu obecného vzorce I je N-koncový aminový dusík první aminokyseliny ze skupiny (A)n, a (A)n tvoří peptidový řetězec, nebo jeho sůl.
Výhodným memnopeptidem podle vynálezu je memnopeptid obecného vzorce IV
ve kterém symboly Rt, R2, R3, R4, R9 a (A)n mají výše uvedené významy.
Výhodným memnopeptidem podle vynálezu je memnopeptid obecného vzorce IV, ve kterém R) a R2 společně znamenají dvojnou vazbou navázaný atom kyslíku, R3 a R4 znamenají atomy vodíku a Rg znamená atom vodíku, nebo jeho sůl.
Výhodným memnopeptidem podle vynálezu je memnopeptid obecného vzorce V
ve kterém symboly Rh R2, R3, R4, R5, R7, R§, R10 a (A)n mají výše uvedené významy, nebo jeho sůl.
Výhodnými výše uvedenými memnopeptidy podle vynálezu jsou memnopeptidy, ve kterém symbol (A)n znamená peptidový řetězec obsahující sekvenci aminokyselin Met-His-Gln-ProHis-Gln-Pro-Leu-Pro-Pro, tj. sekvenci identifikační č. 1, kde je skupina Met oxidována na sulfoxid, nebo jeho sůl.
Výhodným memnopeptidem podle vynálezu je výše uvedený memnopeptid, ve kterém symboly Rg a R10 znamenají aldohexózu, nebo jeho sůl.
-4 CZ 303552 B6
Výhodným memnopeptidem podle vynálezu je memnopeptid obecného vzorce IVb
ve kterém má symbol (A)n výše uvedené významy.
Výhodným memnopeptidem podle vynálezu je memnopeptid A, CT&HioeNieOjgS, vzorce IVa io
(IVa) nebo jeho sůl.
Výhodným memnopeptidem podle vynálezu je memnopeptid, ve kterém skupina (A)n obsahuje 15 část aminokyselinové sekvence kaseinu.
Výhodným memnopeptidem podle vynálezu je memnopeptid, ve kterém symbol (A)„ znamená sekvenci aminokyselin Met His Gin Pro His Gin Pro Leu Pro Pro, tj. sekvenci identifikační č. 1.
Výhodným memnopeptidem podle vynálezu je memnopeptid, ve kterém je methionin Met oxidován k vytvoření sulfoxidu.
-5CZ 303552 Β6
Předmětem vynálezu je rovněž farmaceutická kompozice, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje alespoň jeden memnopeptid obecného vzorce I, přičemž uvedený memnopeptid je definován výše, a přijatelný nosič.
Předmětem vynálezu je rovněž způsob přípravy výše definovaného memnopeptidu obecného vzorce I nebo jeho soli, jehož podstata spočívá v tom, že se kultivuje mikroorganizmus Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195 nebo jedna zjeho variant nebo mutantů za vhodných podmínek v živném prostředí obsahujícím alespoň jeden zdroj uhlíkových atomů a alespoň jeden zdroj atomů dusíku, dokud není alespoň jeden memnopeptid obecného vzorce I přítomen v kultivačním prostředí, načež se uvedený memnopeptid izoluje.
Výhodně se memnopeptid dále převede na alespoň jednu fyziologicky přijatelnou sůl. Výhodně uvedená kultivace probíhá za aerobních podmínek. Výhodně se uvedený alespoň jeden zdroj atomů dusíku zvolí ze skupiny zahrnující aminokyseliny a peptidy. Výhodně uvedené živné prostředí obsahuje kase i nový pepton v koncentraci pohybující se v rozmezí od 0,05 % do 5 % hmotnosti, vztaženo na celkovou hmotnost živného prostředí. Výhodně uvedené živné prostředí obsahuje kaseinový pepton, glukózu, kukuřičný výluh a stopy chloridu draselného, síranu hořeěnatého a síranu železnatého.
Předmětem vynálezu je rovněž použití výše definovaného memnopeptidu obecného vzorce I nebo jeho soli k přípravě léčiva k léčení srdeční nedostatečnosti.
Předmětem vynálezu je rovněž použití výše definovaného memnopeptidu obecného vzorce I nebo jeho soli podle některého z nároků 1 až 11 k přípravě léčiva k léčení onemocnění, u nichž je srdeční nedostatečnost primární nebo sekundární příčinou.
Předmětem vynálezu je rovněž použití výše definovaného monopeptidu obecného vzorce I nebo jeho soli k přípravě léčiva k léčení diabetes mellitus.
Předmětem vynálezu je rovněž použití memnopeptidu obecného vzorce I nebo jeho soli k přípravě léčiva k léčení mikrobiální infekce.
Fyzikálněchemické a spektroskopické vlastnosti výhodné sloučeniny podle vynálezu lze shrnout následovně:
Memnopeptid A
Vzhled: bezbarvá látka rozpustná v polárních organických rozpouštědlech a ve vodě.
Je stabilní v neutrálním, mírně kyselém prostředí.
Empirický vzorec: C76H|08N16O18S, molekulová hmotnost: 1565,87,
Uv absorbce (Zmax): 270 nm,
NMR data: viz tabulka 1.
Číslování uhlíkových atomů a související NMR chemické posuny jsou klasifikovány podle číslovacího postupu pro cyklické seskviterpeny.
-6CZ 303552 B6
Schéma 1 — Číslování cyklického seskviterpenového ketolidu
Tabulka 1
NMR data (chemické posuny) memnopeptidu A v perdeuterodimethylsulfoxidu (DMSO-d6) při ίο 310K
| 5J3C | m | m | •ÍHH | njCH (10 Hz) | přirazení | ||
| 1 | 15.42 | q | 0.668 | d | 1.802 | 1.802 | Terpen -8-Me |
| 2 | 15.72 | q | 0.978 | s | - | 2.035,1.783 | Terpen -10-Me |
| 3 | 20.37 | 1 | 1.409 1.480 | m | 2.035,1.538 2.035, | 2.035 | Terpen -6 |
| 4 | 21.43 | q | 0.873 | d | 1.878 | 1.678,1.428,0.890 | Leu8-8 |
| S | 22.25 | q | 0.827 | s | 0.918 | 0.918, 2.035 | Terpen -4-Me |
| 8 | 22.64 22.80 | t t | 2.182 2.307 2.19 2.31 | ddt ddt ddt ddt | 4.892.2.788 2.632 4.869, 2.757, 2.635 | 4.892, 2.788, 2.632 4.869, 2.757, 2.635 | Met1-P |
| 7 | 23.08 | q | 0.890 | d | 1.678 | 1.678, 1.428, 0.873 | |
| S | 23.88 br | d | 1.678 | m | 0.87, 0.88 | Leu&y | |
| 9 | 23.90 | t | 1.764 0.962 | m m | 0.962,1.416.1.871 | 0.978.1.416,3227 | Terpen -1 |
| 10 | 24.22 | t | 1.910 | m | 2.144,4.588, 3.467 | 2.144,1.771,4.588, 3.467, 3.689 | ProO-γ |
| 11 | 24.32 | t | 1.863 | m | 2.031, 1.798, 3.625 | 4.356, 3.825, 2,153,1.792 | Pro4-r |
| 12 | 24.37 | t | 1.927 | m | (2.153), (1.814), 3.624 | 4,388, 3.624,1.814 | Pro^y |
| 13 | 24.43 | t | 1.926 | m | 2.144, 1.840, 3.655, 3.538 | 4224, 3.655, 3.538 | Ρκ>1θ-γ |
| 14 | 24.77 | t | 1.840 1.418 | m m | 1.418, 1.740,0.962 1.840, 0.928 | Terpen -2 | |
| 15 | 26.51 | t | 1.940 1.719 | m m | 1.719,4.484,2.198 1.719,4.484,2.198 | 2.198 | Gln^-β |
| 18 | 28.85 | t | 1.927 1.722 | m m | 1.722,4.468,2.168 1.927,4.468,2.188 | 2.166 | GlrAp |
-7CZ 303552 B6
| 17 | 27.04 br | t | 2.976 3.067 | dd dd | 4.598 | HieSqi | |
| 18 | 27.09 | t | 2.937 3.067 | dd dd | 4,570 | (4.570) | |
| 19 | 27.50 | t | 2.144 1.771 | m tn | 1.771.4.578.1.905, 1.945 2.144.4.578.1.905, 1.945 | 1.945, 3,689,3.467,4.578 | ProSfp |
| 20 | 28.34 | t | 2.144 1.840 | m m | 1.840.4223.1.926 2.144.4223.1.926 | 4,223,3.669,3.533 | Prolog |
| 21 | 28.50 | 9 | 0.918 | 5 | 0.827 | 0.827 | Terpen -4-Me |
| 22 | 28.86 · | t | 1.798 2.031 | m m | 4.356, 2.031,(1.863) | Prc4-p | |
| 23 | 28,89 | t | 1.814 2.012 | m m | 2.012,4.388,(1.927) 1.814, 4.388, (1.927) | 4.388,3.646 | Pro7-p |
| 24 | 30.63 | t | 1.538 1.430 | m m | 1.430,1.460, (1.409), (1.802) 1.538.1.460,1.802 | 0.667 | Terpen -7 |
| 25 | 30.64 | t | 2.166 | t | 1.927,1.722 | 1.927,1.722.4.466,6.807 | Gin6-? |
| 26 | 30.65 | t | 2.192 | t | 1.940,1.719 | 1.940,1.719, 4.489, 6.789 | GÍň3^ |
| 27 | 31.62 | t | 3.154 2.792 | d d | 2.792 3.154 | 6.598 | Terpen -11 |
| 28 | 36.43 | d | 1.802 | ddq | 1.538,1.430,0.667 | 0.667, 2.790, 3.156 | Terpen -8 |
| 29 | 37.22 | s | - | - | - | 0.903, 0.824 | Terpen -4 |
| 30 | 37.73 37.84 | q | 2.548 2.546 | s | 2.682, 2.758 2.633,2.783 | ||
| 31 | 39.45 | d | 2.035 | dd | 1.409,1.460 | 0.903, 0.824, 0.971 | Terpen -5 |
| 32 | 40.07 40.03 | t | 1.428 | dt | 4.536, 1.678 | 0.890, 0.873, 4.536 | Leu0-P |
| 33 | 41.71 | s | 3.156, 2.790. 0.977, (1.764), 2.035 | Terpen -10 | |||
| 34 | 4425 | t | 4.332 | - | - | 4.88Ϊ | Terpen -8' |
| 35 | 46.10 | t | 3.669 3.533 | 1.934 | 4.223, 2.147,1,934,1.851 | ProlTts | |
| 36 | 46.53 | t | 3.689 3.467 | m m | 1.905, 1.936 | 4.588, 2.165,1.781,1.936 | Pro^S |
| 37 | 46.81 | t | 3.624 | m | 1.927 | 1.814,4.388 | ΡτοΠ — |
| 38 | 46.87 | t | 3.644 | m | 1.863 | - | |
| 39 | 48.56 | d | 4.534 | dt | 7.918, 1.428 | 7.918, 1.428, 1.678 | Leu0-a |
- 8 CZ 303552 B6
| 40 | 49.44 49.70 | t t | 2.662. 2758 2.633, 2.783 | ddt ddt ddt ddt | 2758, 2.182,2289 2.682 2162 2289 2783.2289,2162 2633, 2289.2162 | 4.892,2.550 4.869,2.545 | Met fy |
| 41 | 50.16 | d | 4.466 | dt | 8.110,1.927,1.722 | 2166 | GlnO-α |
| 42 | 50.31 | d | 4.464 | dt | 8.206.1.935,1.707 | 2182 | GlrJ-α |
| 43 | 51.37 | d | 4.570 | ddd | 8.135.2975,3.082 | 2.975,3.082 | His^a |
| 44 | 51.66 | d | 4.590 4.585 | ddd | 8.496, 2934. 3.067 8.506.2.934,3.067 | 2.934, 3.067 | |
| 45 | 53.30 53.52 | d | 4.892 4.869 | 2162 2284 2162 2284 | 2162 | Met1-a | |
| 46 | 57.33 | d | 4.568 | dd | 2144,1.771 | 2144, 1.771, 1.905. 1.945, 3.684 | Pro^-a |
| 47 | 58.31 | d | 4223 | dd | 2.144, 1.840 | 3.669, 3.553.1.926. 2144, (1.840) | PnJO-a |
| 46 | 59.20 | d | 4.388 | dd | 2012,1.814 | 2012 | Pro7-cz |
| 49 | 59.44 | d | 4.356 | dd | 2031,1.798 | 3.635,1.880 | Pro4-a |
| 50 | 73.50 73.51 | d | 3.227 | dd | 1.840. 1.416 | 0.903, 0.824 | Terpen -3 |
| 51 | 97.93 97.91 | 5 | 3.154, 2792, 0.972 0.668 | Terpen -9 | |||
| 52 | 100.90 100.86 | d | 6.598 6.596 | s | Terpen -3' | ||
| 53 | 112.62 11255 | s | 6.593.4.330 | Terpen -5* | |||
| 54 | 110.92 116.90 | s | 3.154,2.792. 6.597 | Terpen -1' | |||
| 55 | 116.95 | d | 7230 | s | 8.655 | (3.06η, 2937, 8.665 | |
| 56 | 11726 | d | 7.322 | s | 8.771 | 3.092 3.000, 8.771 | HišS^ |
| 57 | 129.32 | s | 8.783.7.322 3.083 2976, 4.585 | His^-γ | |||
| 56 | 129.63 | s | - | - | - | 7230, 3.064.2.937, 4.592 | |
| 59 | 133.00 132.98 | s | 4,330 | 1-4' | |||
| 60 | 133.63 | d | 8.655 | s | 7230 | 7230 | Hiá^š |
| 61 | 133.68 | d | 8.771 | s | 7.320 | 7.320 | hísS^Š |
| 62 | 153.60 153.62 | s | 6.597, 3.157, 2792 | Terpen -2' | |||
| 63 | 155.73 | s | - | - | - | (6.59η, 3.154, 2.792. | Terpen -6* |
-9CZ 303552 B6
| 4.330 | |||||||
| 64 | 166.11 168.07 | s | 6.597,4.330,4.881 | Terpen -7' | |||
| 65 | 169.57 | s | - | - | 4.566. (4.223) | Proy-CO | |
| 66 | 169.59 | 3 | - | - | 8.110, (4.570) | His^CO | |
| 67 | 169.69 | s | • | - | 4.534,1.444 | LeuB-CO | |
| 68 | 169.74 | s | - | 8207,2.937. 4.585 | HisŽ-CO | ||
| 69 | 169.97 169.89 | s | 8.513, 4.869, 2.190 8.499,4.892.2.182 | Meti-CO | |||
| 70 | 170.07 | 3 | - | - | 4.471, 1.733, 1.924, 4.356 | Gln^-CO | |
| 71 | 170.21 | S | - | - | 4,466,1-722,1.927,4.368 | Gín^-CO | |
| 72 | 170.99 * | s | 4.538, 4.388, 2.012, 1.844,7.918 | Pro/-CO | |||
| 73 | 171.32 | 5 | 8.136,4.356,2.003, 1.805,4.570 | Pro4-CO | |||
| 74 | 173.10 | S | - | - | 4.225, 2.144, 1.840 | Pro™-CO | |
| 75 | 173.80 173.81 | s | 2.19,1.93, 1.73 | 3-Gln-5-CO | |||
| 76 | 173.86 173.86 | s | 726,2.19,1.93,1.73 | 4-Gln-S-CO | |||
| OH | 9,75 | br | NOE: 6.598 | Terpen -2*-OH | |||
| NH | 8.506 8.496 | d d | 4.585 4.590 | NOE: 4.869/4.692 | Hisi-NH | ||
| NH | 8.206 | d | 4.464 | NOE : 3.072, 2.948, 4.588 | Gln^-NH | ||
| NH | 8.135 | d | 4.563 | Ηίδϋ-ΝΗ | |||
| NH | 6.110 | d | 4.470 | NOE: 4.570, (4.470), 1.727, (1.927) | GlnB-NH | ||
| NH | 7.918 | d | 4534 ' | NOE :4.388. 1.827, 1.688.1.427 | LeuB-NH | ||
| NH2 | 7.260 6.807 | s 3 | (6.807) (7.260) | Glnk-NH2 | |||
| NH2 | 7.230 6.789 | S s | (6.789) (7.230) | GÍn3^NH2 |
Podle jednoho provedení vynálezu lze sloučeniny obecného vzorce získat fermentací Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195, nebo jedné z jejích variant nebo mutací, za vhodných podmí? nek v kultivačním médiu, dokud není alespoň jeden memnopeptid obecného vzorce I přítomen v kultivačním médiu, následovanou poté izolací memnopeptidů.
Předkládaný vynález se proto dále týká způsobu přípravy sloučeniny obecného vzorce I, který zahrnuje fermentací mikroorganismu Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195, nebo jedné io z jeho variant či mutant, za vhodných podmínek v kultivačním médiu, dokud alespoň jeden memnopeptid obecného vzorce I není přítomen v kultivačním médiu a poté izolaci memnopeptidů z kultivačního média.
Podle jednoho provedení se kmen FH 2272, DSM 13195, jeho mutanty a varianty, fermentuje 15 v živném roztoku (také zvaném kultivační médium) obsahujícím alespoň jeden zdroj uhlíkových atomů a alespoň jeden zdroj atomů dusíku a popřípadě obsahující obvyklé anorganické soli, dokud nejsou memnopeptidy přítomny v kultivačním médiu. Memnopeptidy lze poté izolovat
- 10 CZ 303552 B6 z kultivačního média a popřípadě rozdělit na jednotlivé účinné složky a purifikovat. Podle jednoho provedení se memnopeptidy shromažďují v kultivačním médiu a rozdělí se na jednotlivé složky.
Podle jiného provedení se alespoň jeden zdroj atomů dusíku použitý pro kultivační médium zvolí ze skupiny zahrnující aminokyseliny a peptidy. Aminokyseliny a peptidy použité jako zdroje dusíkových atomů mohou být stejné jako skupina (A)n definovaná výše.
Způsob podle vynálezu lze použít pro fermentací v laboratorním měřítku (rozsah mililitr až litr) io a v průmyslovém měřítku (rozsah kubický metr).
Byla vypěstována silně produkující kolonie Memnoniella echinata FH 2272. Izolát byl uložen v Německé sbírce mikroorganismů a buněčných kultur s.r.o. (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH), Mascheroder Weg IB, 3300 Brunswick, Německo, podle is pravidel Budapešťské konvence 14. prosince 1999, pod následujícím číslem: Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195.
Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195, má hnědozelené mycelium a vyznačuje se konidioforovými vlastnostmi rodu Memnoniella,
K syntéze alespoň jedné sloučeniny z memnopeptidů podle vynálezu lze použít také varianty a mutanty kmene Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195. Tyto mutanty lze vytvořit způsoby o sobě známými pomocí fyzikálních prostředků, např. záření, jako např. ultrafialovými paprsky nebo rentgenovými paprsky, nebo pomocí chemických mutagenů, jako jsou ethylmethan25 sulfonát (EMS), 2-hydroxy-4-methoxybenzofenon (MOB) nebo N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidin (MNNG). Mezi možné varianty patří blízce příbuzný druh Stachybotrys, jako jsou Stachybotrys atra, Stachybotrys chartarum nebo Stachybotrys complementi.
Hledání mutantů a variant, které syntetizují alespoň jednu sloučeninu z memnopeptidů podle vynálezu, lze provádět podle následujícího schématu:
- separace mycelia po fermentací;
- extrakce mycelia organickým rozpouštědlem;
- extrakce memnopeptidů z filtrátu kultury pomocí pevné fáze;
- analýza pomocí vysokotlaké kapalinové chromatografie (HPLC), DC nebo testováním biologické aktivity.
Podmínky fermentace popsané níže lze aplikovat na houbu Memnoniella echinata FH 2272, uložený izolát DSM 13195 a její mutanty a varianty.
Podle jednoho provedení produkuje Memnoniella echinata FH 2272 memnopeptid A v živném roztoku obsahujícím alespoň jeden zdroj uhlíkových atomů, kaseinový pepton jako zdroj dusíkových atomů a obvyklé anorganické soli. Memnoniella echinata FH 2272 je podle jednoho provedení DSM 13195.
Mezi možné zdroje uhlíkových atomů pro aerobní fermentací patří asimilovatelné uhlohydráty a cukerné alkoholy, jako jsou glukóza, laktóza, sacharóza, škroby, dextriny, fruktóza, molázy, glycerol, galaktóza a D-mannitol, a přírodní produkty obsahující uhlovodany, jako je sladový extrakt. Mezi možné zdroje dusíkových atomů patří například aminokyseliny; peptidy; proteiny;
degradaění produkty aminokyselin, peptidů a proteinů, jako je kasein, peptony a tryptony; masové extrakty; kvasinkové extrakty; extrakty z arašídů; rozmělněná semena, například kukuřice, pšenice, bobů, sójy a bavlníku; kompozice obsahující semena; destilační zbytky z výroby alkoholu; masová moučka; kvasinkové extrakty; ammoniové soli a nitráty. Podle jednoho provedení se alespoň jeden zdroj dusíkových atomů zvolí ze synteticky získaných peptidů a biosynteticky
- II CZ 303552 B6 získaných peptidu. Živný roztok popřípadě obsahuje alespoň jednu anorganickou sůl. Podle jednoho provedení se anorganická sůl zvolí ze skupiny zahrnující chloridy, uhličitany, sírany a fosforečnany. Sírany a fosforečnany lze zvolit ze skupiny zahrnující sírany alkalických kovů, fosforečnany alkalických kovů, sírany kovů alkalických zemin a fosforečnany kovů alkalických zemin, přičemž kovy alkalických zemin se zvolí ze skupiny zahrnující železo, zinek, kobalt a hořčík.
Tvorba memnopeptidů podle vynálezu může probíhat v živném roztoku obsahujícím kaseinový pepton. Podle jednoho provedení živný roztok obsahuje kaseinový pepton v koncentraci, která se pohybuje přibližně od 0,05 do 5 %. Jiné provedení zahrnuje koncentraci kaseinového peptonu pohybující se v rozmezí od 0,1 do 1 %. Další provedení zahrnuje koncentraci kaseinového peptonu pohybující se v rozmezí od 0,2 do 5 %. Živný roztok může obsahovat glukózu. Jedno provedení zahrnuje koncentraci glukózy pohybující se od 0,5 do 3 %, Živný roztok může také obsahovat kukuřičný výluh. Podle jednoho provedení obsahuje živný roztok kukuřičný výluh v koncentraci, která se pohybuje od 0,05 do 1 %. Jiné provedení zahrnuje koncentraci kukuřičného výluhu pohybující se od 0,1 do 0,5 %. Živný roztok může obsahovat stopu alespoň jedné složky zvolené ze skupiny zahrnující chlorid draselný, síran hořečnatý a síran železa.
Podle jednoho provedení obsahuje živný roztok kaseinový pepton, glukózu, kukuřičný výluh a stopu chloridu draselného, síranu hořečnatého a síranu železa. Podle jiného provedení obsahuje živný roztok kaseinový pepton v koncentraci, která se pohybuje v rozmezí přibližně od 0,05 do 5 %, glukózu v koncentraci pohybující se v rozmezí od 0,5 do 3 %, kukuřičný výluh v koncentraci pohybující se v rozmezí od 0,05 do 1 % a stopu chloridu draselného, síranu hořečnatého a síranu železa. Všechny údaje v procentech jsou udány v procentech hmotn. celkového živného roztoku.
V tomto živném roztoku vytváří Memnoniella echinata, kterou může být Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195, směs memnopeptidů. V závislosti na složení živného roztoku se může lišit kvantitativní podíl jednoho či více memnopeptidů podle vynálezu. Kromě toho lze syntézu jednotlivých memnopeptidů kontrolovat složením média tak, že se memnopeptid netvoří vůbec nebo se může tvořit v množství nižším než detekční limit mikroorganismu.
Kultivaci mikroorganismů lze provádět aerobně, tj. například ponořením pomocí protrepávání nebo míchání v protřepávacích baňkách nebo fermentorech, popřípadě se zaváděním vzduchu nebo kyslíku. Lze ji provádět při teplotě pohybující se přibližně v rozmezí 18 až 37 °C, užším rozmezí přibližně od 20 do 32 °C a ještě užším rozmezí přibližně od 25 do 30 °C. Rozmezí pH by mělo být mezi 6 a 8, jako například mezi 6,5 a 7,5. Obecně se mikroorganismus kultivuje za těchto podmínek po dobu činící 24 až 300 hodin, zpravidla 36 až 140 hodin.
Výhodně lze kultivaci provádět v mnoha stupních, tj. v živném médiu lze připravit alespoň jednu předkulturu a pak ji inokulovat do aktuálního produkčního média, tj. hlavní kultivace, například v obj. poměru 1:10. Předkulturu lze získat například inokulací mycelia do živného roztoku a ponecháním růst přibližně po dobu 36 až 120 hodin, jako např. po dobu 48 až 72 hodin, Mycelium lze získat například ponecháním kmene růst přibližně po dobu 3 až 40 dnů, jako např. 4 až 10 dnů, na pevném nebo v kapalném živném médiu, například slado-kvasinkovém agaru nebo bramborodextrózovém agaru (standardní médium pro plísňové houby, například od Difco).
Průběh fermentace lze monitorovat pomocí pH kultury' nebo objemu mycelia a rovněž tak chromatografickými metodami, jako je tenkovrstvá chromatografie nebo vysokotlaká kapalinová chromatografie, nebo testováním biologické aktivity. Sloučenina podle vynálezu se může nacházet jak v my cel i u, tak ve filtrátu kultury, avšak větší část se obvykle nachází ve filtrátu kultury.
Níže popsaný způsob izolace slouží k purifikaci memnopeptidů podle vynálezu, například memnopeptidu A. Izolaci či purifikaci memnopeptidů podle vynálezu z kultivačního média lze provádět známými způsoby, přičemž je nutno brát v potaz chemické, fyzikální a biologické vlastnosti
- 12CZ 303552 B6 přírodních látek. Pro testování koncentrací memnopeptidu v kultivačním médiu nebo v jednotlivých izolačních stupních lze použít tenkovrstvou chromatografií, například na silikagelu, s použitím směsi isopropanolu a 25% NH3 jako eluentu nebo HPLC, Detekci při tenkovrstvé chromatografické separaci lze provádět například pomocí barevných reagencií, jako je směs kyseliny chlorsulfonové a ledové kyseliny octové, množství tvořené látky se vhodně porovná s kalibračním roztokem.
K izolaci memnopeptidu podle vynálezu se obvykle nejprve mycelium vyjme z kultivačního bujónu pomocí obvyklých postupů a poté se memnopeptidy extrahují z buněčné hmoty pomocí io organického rozpouštědla případně mísitelného s vodou. Fáze organického rozpouštědla obsahuje přírodní látky podle vynálezu; lze ji popřípadě koncentrovat ve vakuu a zbytek lze dále purifikovat, jak je popsáno níže. Podle jednoho provedení se memnopeptid extrahuje z kultivace přidáním rozpouštědla ke směsi hub a bujónu.
Kultivační filtrát lze výhodně smíchat s koncentrátem myceliového extraktu a extrahovat vhodným organickým rozpouštědlem nemísitelným s vodou, například n-butanolem. Následně vyjmutou organickou fázi lze případně koncentrovat ve vakuu. K odtučnění cenných produktů lze koncentrát rozředit nepolárním rozpouštědlem, ve kterém nejsou sloučeniny podle vynálezu příliš rozpustné, například hexanem, petroletherem nebo diethyletherem. Při tomto procesu memnopep20 tidy precipitují a lipofilní nečistoty zůstávají rozpuštěny a lze je odstranit obvyklou separací pevné/kapalné fáze.
Precipitát obsahující memnopeptidy lze rozpustit ve směsi voda/methanol 1/30 původního objemu. Precipitát se v průběhu tohoto zcela rozpustí a lze ho lyofilizovat. Lyofilizát, následně zvaný jako surový produkt, může obsahovat 5 až 50 % memnopeptidu a lze ho použít pro další izolaci.
Další izolaci alespoň jednoho memnopeptidu podle vynálezu lze provádět pomocí chromatografie na vhodných materiálech, například na molekulových sítech, silikagelu, aluminiu, iontoměničích nebo na adsorpčních piyskyřicích nebo na reversních fázích (RP). Memnopeptidy lze separovat pomocí této chromatografie. Chromatografií memnopeptidů lze provádět s použitím pufrovaných vodných roztoků nebo směsí vodných a organických roztoků.
Směsmi vodných a organických roztoků se rozumí všechny organická rozpouštědla mísitelná s vodou, jako jsou methanol, propanol a acetonitril, v koncentraci činící 5 až 80 % rozpouštědla, zpravidla 20 až 50 % rozpouštědla, nebo alternativně všechny pufrované vodné roztoky, které jsou mísitelné s organickými rozpouštědly. Použité pufry mohou být stejné jako výše jmenované.
Separaci memnopeptidů na základě jejich různé polarity lze provádět pomocí chromatografie s reverzními fázemi, například na MCI® (adsorpční pryskyřice od Mitsubishi, Japonsko) nebo
Amberlite XAD® (Toso Haas), nebo dalších hydrofobních materiálech, jako např. na fázích RP-8 či RP-18. Kromě toho lze separaci provádět pomocí chromatografie s normálními fázemi, například na silikagelu, aluminiu apod.
Chromatografií memnopeptidů lze provádět pomocí pufrovaných nebo acidifikovaných vodných roztoků nebo směsí vodných roztoků s alkoholy či jinými organickými rozpouštědly, mísitelnými s vodou. Podle jednoho provedení se organické rozpouštědlo zvolí ze skupiny zahrnující propanol a acetonitril.
Pufrovanými nebo acidifikovanými vodnými roztoky se rozumí alespoň jeden roztok samotný nebo v kombinaci. Uvedený alespoň jeden roztok lze například zvolit ze skupiny zahrnující vodu, fosfátové pufry, ammoniumacetát, citrátové pufry a kyseliny. Podle jednoho provedení se koncentrace cUrátového pufru pohybuje v rozmezí od 0 do 0,5M. Kyseliny se zvolí ze skupiny zahrnující kyselinu mravenčí, kyselinu octovou, kyselinu trifluoroctovou a všechny komerčně dostupné kyseliny odborníkovi v oboru známé. Podle jednoho provedení se koncentrace komerčně
- 13CZ 303552 B6 dostupné kyseliny pohybuje v rozmezí od 0 do I %. Podle dalšího provedení koncentrace kyseliny činí 0,1 %.
Chromatografií lze provádět s použitím gradientu, který začíná 100 % vody a končí 100 % rozpouštědla. Použije se alespoň jedno rozpouštědlo. Lze také použít směs dvou nebo více rozpouštědel. Podle jednoho provedení se lineární gradient pohybuje od 20 do 50 % rozpouštědla zvoleného ze skupiny zahrnující propanol a acetonitril.
Alternativně lze také provádět gelovou chromatografií či chromatografií na hydrofobních fázích.
Gelovou chromatografií lze provádět na polyakrylamidových nebo kopolymerových gelech, jako jsou Biogel-P 2® (Biorad) nebo Fractogel TSK HW 40® (Merck, Německo nebo Toso Haas, USA).
Dalším, velmi účinným, způsobem purifikace sloučenin podle vynálezu může být použití iontoměničů. Například, základní memnopeptid A lze velmi výhodně izolovat na kationtových měničích, jako je Fractogel® EMD SO3“. Lze použít roztoky pufrů s hodnotou pH mezi 5 a 8, jako např. pH mezi 6 a 7,5. Eluce lze například dosáhnout použitím vzestupného gradientu soli. Kromě vody může být výhodné použít jako rozpouštědlo směsi vodných pufrových roztoků s organickým rozpouštědlem. Podíl organického rozpouštědla může činit mezi 10 % a 90 %, jako např. mezi 30 % a 60 %.
Pořadí výše uvedených chrom atografických metod může být zaměnitelné.
Dalším, velmi účinným, purifikačním stupněm pro memnopeptidy je krystalizace. Memnopeptidy lze vykrystalizovat z roztoků v organických rozpouštědlech a ze směsí vody a organických rozpouštědel. Krystalizací lze provádět způsoby o sobě známými, například koncentraci nebo ochlazením nasycených roztoků memnopeptidů.
Memnopeptidy podle vynálezu jsou stabilní v pevném stavu a v roztocích o pH v rozmezí mezi 3 a 8, například 5 a 7, a lze je proto vpravit do běžných farmaceutických prostředků.
Tvorbu memnopeptidů obsahujících dusík lze zvýhodnit přidáním žádoucích aminokyselin nebo peptidů jako prekurzorů ke kultivacím Memnoniella echinata. Příznačné pro druhy Memnoniella echinata může být to, že vážou aminoskupiny aminokyselin a peptidů a mohou syntetizovat pětičlenný kruhový laktam, obvykle isoindolový kruhový systém. K této vazbě dochází buď nastartováním z aldehydového prekurzoru v průběhu oxidace nebo z laktonového oxidačního stupně v podobě otevřeného kruhu nebo v podobě cyklického laktonu. Tato schopnost Memnoniella echinata vázat aminy je zcela překvapivá a lze ji použít pro získání chráněných, konvertovaných aminových derivátů, jako jsou terpenové deriváty aminokyselin a peptidů.
Alespoň jedna sloučenina z memnopeptidů podle vynálezu může být, díky svým cenným farmakologickým vlastnostem, vhodná k použití v lidském nebo veterinárním lékařství jako léčivo.
Předkládaný vynález se proto týká použití sloučeniny obecného vzorce I nebo její fyziologicky tolerovatelné soli k přípravě srdečního léčiva k léčení či profylaxí srdeční nedostatečnosti.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu lze také použít k přípravě léčiva k léčení onemocnění, u nichž je srdeční nedostatečnost primární nebo sekundární příčinou daného onemocnění, jako je např. oběhová nedostatečnost.
Mechanismus účinku memnopeptidů je nejistý, avšak byl zaznamenán významný účinek.
K detekci aktivátorů SERCA2, které imitují fosforylační účinek PLB, lze použít kolorimetrický test, který určuje aktivitu Ca2+ATPázy v mikrosomech srdce psa v přítomnosti testovaných látek.
- 14CZ 303552 B6
Test lze provádět na devadesátišestijamkových mikrotitračních deskách. Lze stanovovat enzymatické uvolňování anorganického fosfátu z ATP, který vytváří s molybdenanem amonným modře zbarvený komplex, který lze stanovovat ve spektrofotometru při 620 nm.
Memnopeptidy aktivují SERCA2 v koncentracích od 12,5μΜ.
Kromě toho mají memnopeptidy antimikrobiální účinek.
Předkládaný vynález se proto týká použití sloučeniny obecného vzorce I nebo její fyziologicky ío tolerovatelné soli k přípravě léčiva k léčení mikrobiálních, například bakteriálních, infekcí.
Tabulka 3 ukazuje minimální inhibiční koncentrace (MIC) antimikrobiálního spektra memnopeptidu A proti některým vybraným baktériím.
Tabulka 3
| Kmen | Resistence vůči. | MIC [gg/ml] |
| Staphylococcus aureus SG 511 | - | 16 |
| Staphylococcus aureus 285 | Penicilín | 16 |
| Staphylococcus aureus 503 | Penicilín | 16 |
| Staphylococcus aureus FH 1982 | Methicilin | 16 |
| Staphylococcus aureus 701E | Methicilin | 16 |
| Staphylococcus aureus 707E | Methicilin | 16 |
| Staphylococcus aureus 9 Tíib | Ofloxacin | 16 |
| Staph. epidermidis ZH 2c | - | 16 |
| Staph. epidermidis 763 | Methicilin | >16 |
| Staph. epidermidis 5747IIW | Methicilin | 32 |
| Staph. epidermidis 291 | Ofloxacin | 8 |
| Staph. epidermidis 799 | Ofloxacin | 8 |
| Enterococcus faecium Md8B | - | 8 |
| Enterococcus faecium VR1 | Vancomycin | >64 |
| Enterococcus faecium VR2 | Vancomycin | >64 |
| Streptococcus pyogenes VR3 | Vancomycin | >64 |
| Streptococcus pyogenes 308A | - | 8 |
| Streptococcus pyogenes 77A | - | 4 |
Kromě antimikrobiálního účinku vykazují sloučeniny podle vynálezu slabé antimykotické, tj. protihoubové, vlastnosti, například proti Candida albicans.
Kromě toho látky podle vynálezu vykazují určitý výhodný inhibiční účinek na glukóza-6-fosfát25 translokázu (G-6-P-TL), enzym, který je významný pro metabolismus glukózy, a proto pro léčení diabetes mellitus. Například sloučenina memnopeptid A vykazuje selektivní účinky proti G-6P-TL, avšak neinhibuje koenzym G-6-P-fosfatázu.
Předkládaný vynález se proto týká použití sloučeniny obecného vzorce I nebo její fyziologicky 30 tolerovatelné soli k přípravě léčiva k léčení diabetes mellitus.
- 15 CZ 303552 B6
Vynález se také týká farmaceutických prostředků alespoň jedné sloučeniny memnopeptidů podle vynálezu.
Alespoň jednu sloučeninu memnopeptidů podle vynálezu lze obecně podávat jako takovou v ne5 rozředěné formě. Použití v podobě směsi s vhodnými pomocnými látkami nebo přísadami představuje jedno z provedení vynálezu. Přísadami, které lze použít v léčivech, mohou být obvyklé farmako logicky tolerovatelné přísady nebo/a pomocné látky.
Obecně lze léčiva podle vynálezu podávat orálně nebo parenterálně, možné je však také podání io rektální. Vhodnými pevnými nebo kapalnými podobami farmaceutických prostředků jsou například granule, prášky, tablety, potažené tablety, (mikro)kapsle, čípky, sirupy, emulze, suspenze, aerosoly, kapky nebo injektovatelné roztoky v podobě ampule a přípravky s chráněným uvolňováním účinné sloučeniny, ve kterých jsou obvykle použity přísady a aditiva nebo/a pomocné látky, jako jsou desintegrační činidla, pojivá, potahové prostředky, bobtnací činidla, glidanty nebo lubrikanty, aromatická činidla, sladidla nebo solubilizační Činidla. Často používanými přísadami nebo pomocnými látkami, které lze zmínit, jsou například uhličitan hořečnatý, oxid titaničitý, laktóza, mannitol a jiné cukry, talek, laktoprotein, želatina, škrob, vitaminy, celulóza a její deriváty, živočišné či rostlinné oleje, polyethylenglykoly a rozpouštědla, jako jsou voda, alkoholy, glycerol a polyhydroxyalkoholy.
Pokud je to vhodné mohou být dávkovači jednotky pro orální podávání mikroopouzdřené, za účelem opoždění uvolňování nebo jeho prodloužení po delší časový úsek, například pomocí potažení nebo zalití účinné sloučeniny ve formě částic do vhodných polymerů, vosků nebo podobně.
Podle jednoho provedení lze farmaceutické prostředky připravovat a podávat v dávkových jednotkách, přičemž každá jednotka obsahuje, jako účinnou složku, určitou dávku alespoň jedné sloučeniny memnopeptidů podle vynálezu. V případě pevné dávkovači formy, jako jsou tablety, kapsle a čípky, může touto dávkou být až přibližně 500 mg, avšak zpravidla přibližně 0,1 až 200 mg, a v případě injekčních roztoků v podobě ampule až přibližně 200 mg, avšak obvykle při30 bližně 0,5 až 100 mg, za den.
Podávaná denní dávka je obecně závislá na tělesné hmotnosti, věku, pohlaví a stavu savce. V určitých situacích však mohou být vhodné i vyšší či nižší denní dávky. Podávání denní dávky lze provádět jak použitím jednoho podání v podobě jednotlivé dávkovači jednotky nebo i více menších dávkovačích jednotek, tak i pomocí vícenásobného podávání rozdělených dávek v určitých intervalech.
Léčiva podle vynálezu lze připravovat vnesením alespoň jedné sloučeniny memnopeptidů podle vynálezu do vhodné formy pro podávání, s použitím obvyklých přísad a, pokud je to vhodné, aditiv nebo/a pomocných látek.
Předkládaný vynález dále ilustrují následující příklady provedení vynálezu. Procentuální údaje jsou hmotnostní. Směšovací poměry jsou udány v případě kapalin jako objemové, pokud není uvedeno jinak. Následující příklady jsou určeny k ilustraci předkládaného vynálezu, aniž by něja45 kým způsobem omezovaly jeho rozsah.
- 16CZ 303552 B6
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Příprava glycerolové kultury Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195
100 ml živného roztoku (sladový extrakt 2,0 %, kvasinkový extrakt 0,2 %, glukóza 1,0 %, (NH4)2HPO4 0,05 %, pH 6,0) ve sterilní 300 ml Erlenmeyerově baňce bylo inokulováno kmenem Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195, a inkubováno na rotačním protřepávači při 25 °C a 140 otáčkách za minutu po dobu 7 dní. Poté bylo 1,5 ml této kultury rozředěno 2,5 ml 80% glycerolu a uchováváno při -20 °C.
Příklad 2
Příprava kultury nebo předkultury Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195 v Erlenmeyerově baňce
Sterilní 300 ml Erlenmeyerova baňka obsahující 100 ml následujícího živného roztoku, 10 g/1 glukózy, 5 g/1 kaseinového peptonu, 1,7 g/1 kapalného kukuřičného výluhu a 7 ml roztoku stopových prvků (10 g/1 KCl, 10 g/1 MgSO4 x 7 H2O, 3,6 g/1 FeSO4 x 7 H2O a 6 g/1 MnSO4 x H2O) bylo inokulováno kulturou vypěstovanou v kultivační zkumavce (stejný živný roztok, avšak s2% agaru) nebo 1 ml glycerolové kultury (viz příklad 1) a inkubováno na protřepávači při 180 otáčkách za minutu a 30 °C. Maximální produkce alespoň jedné sloučeniny memnopeptidu podle vynálezu bylo dosaženo přibližně po 120 hodinách. Pro inokulaci 10 a 200 1 fermentoru postačuje ponořená kultura stará 48 až 96 hodin (inokulované množství přibližně 10 %) ze stejného živného roztoku.
Příklad 3
Příprava memnopeptidu
1 fermentor pracoval za následujících podmínek: živný roztok;
g/I glukózy,
0,5 g/1 kaseinového peptonu,
1,7 g/1 kapalného kukuřičného výluhu, ml roztoku stopových prvků, pH 6,5 (před sterilizací), roztok stopových prvků;
g/1 KCl, 10 g/1 MgSO4 x 7 H2O,
3,6 g/1 FeSO4 x 7 H2O a 6 g/1 MnSO4 x H2O, inkubační doba: 45 hodin, inkubaění teplota: 28 °C,
- 171 rychlost mixeru: 300 otáček za minutu, provzdušnění: 15 1.min“1.
Tvorba pěny byla případně potlačována opakovaným přidáváním ethanolového polyolového roztoku. Maxima produkce bylo dosaženo přibližně po 35 až 70 hodinách.
Příklad 4 io
Izolace směsi memnopeptidu z kultivačního roztoku Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195
Po dokončení fermentace Memnoniella echinata FH 2272, DSM 13195, byl kultivační bujón is z fermentoru, získaný podle příkladu 3 (2001), filtrován s přidáním přibližně 2 % filtračního pomocného prostředku (např. Celíte®) a buněčná hmota (22 1) byla extrahována 66 litry methanolu. Methanolový roztok obsahující cennou látku byl zbaven mycelií pomocí filtrace a koncentrován ve vakuu. Koncentrát byl rozředěn vodou a aplikován na připravený sedmnáctilitrový sloupec MCI GEL, CHP20P, společně s filtrátem kultury (180 1). Toto bylo eluováno pomocí gra20 dientu vody po 60% propan-2—olu ve vodě. Tok z válce (25 litrů za hodinu) byl shromážděn ve frakcích (každá 10 1) a frakce obsahující memnopeptid (od 25% do 30% propan-2-olu) byly smíchány.
Koncentrací ve vakuu bylo získáno 20 1 hnědého roztoku. Do sloupce (125 mm x 500 mm) bylo vloženo 6 litrů kationtového měniče, Fractogel® EDM SO3upraveného na pH 7 pufrem fosforečnanu draselného. Po naplnění iontoměniěe 20 litry koncentrátu popsaného výše, bylo toto eluováno gradientem lOmM pufru fosforečnanu draselného o pH 7, po 1M NaCl v lOmM pufru fosforečnanu draselného o pH 7 ve směsi voda/methanol (1:1). Tok z válce, tj. nevázaný materiál, obsahoval neutrální memnopeptidy (49 g). Tok z válce činil 12 litrů za hodinu; během gradiento30 vé eluce byly ve frakcích shromažďovány jednolitrové porce. Memnopeptid A byl získán pomocí 0,75M NaCl (frakce 31 a 32). Frakce 31 a 32 byly smíchány a koncentrovány ve vakuu přibližně na objem 500 ml.
Příklad 5
Získání memnopeptidu A pomocí gelové chromatografie
Na sloupec o kapacitě 3,9 1 naplněný přípravkem Fractogel® TSK HW^40 s (šířka x výška = 40 10 cm x 50 cm) bylo aplikováno 8 g produktu získaného podle příkladu 4. Sloupec byl proháněn eluent, tj. směs methanolu a vody (1:1), při rychlosti toku činící 20 ml za minutu a výtok ze sloupce byl shromažďován ve frakcích (20 ml). Memnopeptid A byl nalezen převážně ve frakcích 75 až 85. Tyto byly smíchány a zbaveny methanolu ve vakuu. Takto bylo získáno 0,9 g směsi účinné sloučeniny.
Příklad 6
HPLC systém k detekci memnopeptidů
Systém popsaný níže umožňoval testování čistoty a také separaci a kvantifikaci memnoterpenů, například v surové směsi nebo ve filtrátech kultur.
Eluent: 0,1% kyselina trifluoroctová v 32% acetonitrilu.
- 18CZ 303552 B6
Sloupec: Nucleosil lOOCigAB 250/4, Macherey-Nagel.
Průtok: 1,2 ml/min.
Detekce; absorpce ultrafialového světla při 210 nm.
Za uvedených podmínek mohl memnopeptid A vykazovat následující retenční čas: Memnopeptid A: 7,0 minut.
Příklad 7 io
Purifikace memnopeptidů A
500 ml roztoku memnopeptidů A izolovaného a získaného podle příkladu 5 bylo aplikováno na 500 ml sloupec Nucleosil® 100-7Ci8AB 250/4 a podroben chromatografií s použitím gradientu
25 až 50 % acetonitrilu ve směsi 0,05% kyselina trifluoroctová/voda. Tok eluentu činil 50 ml za minutu; velikost frakce činila 50 ml. Memnopeptid A byl nalezen ve frakcích 71 až 88. Opakovanou purifikaci smíchaných frakcí konstantní koncentrací roztoku ve výši 28 % acetonitrilu v 0,05% kyselině trifluoroctové bylo po sušení mrazením získáno >95 % čistého memnopeptidů C(100mg).
Charakterizace memnopeptidů A:
pg memnopeptidů A bylo hydrolyzováno v konstantě se vařící kyselině chlorovodíkové a podrobeno zkoumání v aminokyselinovém analyzéru. Byly nalezeny následující obvyklé aminokyse25 liny:
kyselina glutamová 11 nmol prolin 22 nmol histidin 10 nmol ao leucin 5,6 nmol methioninoxid 5,5 nmol absorpce UV: λ'3χ při 269 nm, 305 nm (okraj).
Hmotová spektra získaná pomocí ionizace rychlými neutrálními částicemi (FAB) s vysokou rozlišovací schopností ukázala intenzívní MH při m/z 1565,7819, což bylo v dobrém souladu s vypočítanou hmotou (pro C76Hi09N16Ot8S, monoisotropní) činící 1565,7827. MS/MS fragmentace odpovídala obecnému vzorci IVa.
Claims (21)
- PATENTOVÉ NÁROKY ve kterém ioRi a R? společně znamenají dvojnou vazbou navázaný atom kyslíku nebo dva atomy vodíku nebo atom vodíku a hydroxylovou skupinu nebo atom vodíku a O-alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy,15 R3 a R4 společně znamenají dvojnou vazbou navázaný atom kyslíku nebo dva atomy vodíku nebo atom vodíku a hydroxylovou skupinu nebo atom vodíku a O-alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy,R8 se zvolí ze skupiny zahrnující atom vodíku, hydroxylovou skupinu, alkylovou skupinu obsa20 hující 1 až 4 uhlíkové atomy a Oalkylovou skupinu obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy,Ré znamená skupinu obecného vzorce II ve kterém R9 znamená atom vodíku nebo glykosidicky vázaný cukr, přičemž cukrem je hexóza, kteráje případně substituována skupinou C]-C4-alkyl nebo skupinou NH2, nebo skupinu obecného vzorce III ve kterém Ri0 znamená atom vodíku nebo glykosidicky vázaný cukr, přičemž cukrem je hexóza, která je případně substituována skupinou C]-C4-alkyl nebo skupinou NH2, přičemž pokud Ró znamená skupinu obecného vzorce II, potom R5 znamená vazbu k uhlíkovému atomu C9 obecné-20CZ 303552 B6 ho vzorce II a R7 znamená atom vodíku nebo R? znamená vazbu k uhlíkovému atomu C9 obecného vzorce II a Rs znamená atom vodíku, a pokud R$ znamená skupinu obecného vzorce III, potom R5 a R7 znamenají atom vodíku,A znamená přírodní aminokyselinu zvolenou ze skupiny zahrnující Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Ser, Thr, Phe, Tyr, Trp, Lys, Arg, Asp, His, Glu, Asn, Gin, Cys a Met, n znamená celé číslo od 2 do 12, přičemž význam každého symbolu A je stejný s každým dalším symbolem A nebo odlišný od každého dalšího symbolu A, přičemž dusíkový atom v isoindolovém kruhu obecného vzorce I je N-koncový aminový dusík první aminokyseliny ze skupiny (A)n, a (A)n tvoří peptidový řetězec, nebo jeho sůl.
- 2. Memnopeptid podle nároku 1 obecného vzorce IV ve kterém symboly Rb R2, R3, R4, R9 a (A)n mají významy uvedené v nároku 1, nebo jeho sůl.
- 3. Memnopeptid podle nároku 2, ve kterém R| a R2 společně znamenají dvojnou vazbou navázaný atom kyslíku, R3 a R
- 4 znamenají atomy vodíku a R9 znamená atom vodíku, nebo jeho sůl.ve kterém symboly R,, R2, R3, R4, R5, R7, Rs, Rio a (A)n mají významy uvedené v nároku 1, nebo jeho sůl.-21 CZ 303552 B6
- 5. Memnopeptid podle některého z nároků 1 až 4, ve kterém symbol (A)n znamená peptidový řetězec obsahující sekvenci aminokyselin Met-His-Gln-Pro-His-Gln-Pro-Leu-Pro-Pro, tj. sekvenci identifikační č. 1, kde je skupina Met oxidována na sulfoxid, nebo jeho sůl.5
- 6. Memnopeptid podle některého z nároků 1 až 5, ve kterém symboly R9 a R10 znamenají aldohexózu, nebo jeho sůl.
- 7. Memnopeptid podle nároku 1 obecného vzorce IVb (IVbJ ve kterém má symbol (A)n významy uvedené v nároku 1.
- 8. Memnopeptid podle nároku 1, kterým je memnopeptid A, CvňHiosNiňOigS, vzorce IVa nebo jeho sul.20
- 9. Memnopeptidem podle některého z nároků 1 až 8, ve kterém skupina (A)n obsahuje část aminokyselinové sekvence kaseinu.-22CZ 303552 B6
- 10. Memnopeptid podle nároku 9, ve kterém symbol (A)n znamená sekvenci aminokyselin Met His Gin Pro His Gin Pro Leu Pro Pro, tj. sekvenci identifikační č. 1.5
- 11. Memnopeptid podle nároku 10, ve kterém je methionin Met oxidován k vytvoření sulfoxidu.
- 12. Farmaceutická kompozice, vyznačená tím, že obsahuje alespoň jeden memnopeptid obecného vzorce I, přičemž uvedený memnopeptid je definován v některém z nároků 1 až 11, a přijatelný nosič,
- 13. Způsob přípravy memnopeptidů obecného vzorce I nebo jeho soli definovaných v některém z nároků lažll, vyznačený tím, že se kultivuje mikroorganizmus Memnoniella echinata FH2272, DSM 13195 nebo jedna z jeho variant nebo mutant za vhodných podmínek v živném prostředí obsahujícím alespoň jeden zdroj uhlíkových atomů a alespoň jeden zdroj ato15 mů dusíku, dokud není alespoň jeden memnopeptid obecného vzorce I přítomen v kultivačním prostředí, načež se uvedený memnopeptid izoluje.
- 14. Způsob podle nároku 13, vyznačený tím, že se memnopeptid dále převede na alespoň jednu fyziologicky přijatelnou sůl.
- 15. Způsob podle nároku 13 nebo 14, vyznačený tím, že uvedená kultivace probíhá za aerobních podmínek.
- 16. Způsob podle některého z nároků 13 až 15, vyznačený tím, že se uvedený alespoň 25 jeden zdroj atomů dusíku zyoIí ze skupiny zahrnující aminokyseliny a peptidy.
- 17. Způsob podle některého z nároků 13 až 16, vyznačený tím, že uvedené živné prostředí obsahuje kaseinový pepton v koncentraci pohybující se v rozmezí od 0,05 % do 5 % hmotnosti, vztaženo na celkovou hmotnost živného prostředí.
- 18. Způsob podle některého z nároků 13 až 17, vyznačený tím, že uvedené živné prostředí obsahuje kaseinový pepton, glukózu, kukuřičný výluh a stopy chloridu draselného, síranu hořečnatého a síranu železnatého.35
- 19. Použití memnopeptidů obecného vzorce I nebo jeho soli podle některého z nároků l až 11 k přípravě léčiva k léčení srdeční nedostatečnosti.
- 20. Použití memnopeptidů obecného vzorce I nebo jeho soli podle některého z nároků 1 až 11 k přípravě léčiva k léčení onemocnění, u nichž je srdeční nedostatečnost primární nebo sekun40 dámí příčinou.
- 21. Použití memnopeptidů obecného vzorce I nebo jeho soli podle některého z nároků 1 až 11 k přípravě léčiva k léčení diabetes mellitus.45 22. Použití memnopeptidů obecného vzorce I nebo jeho soli podle některého z nároků 1 až 11 k přípravě léčiva k léčení mikrobiální infekce.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP00104114A EP1130027A1 (de) | 2000-02-29 | 2000-02-29 | Memno-Peptide, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung derselben |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20022904A3 CZ20022904A3 (cs) | 2002-11-13 |
| CZ303552B6 true CZ303552B6 (cs) | 2012-12-05 |
Family
ID=8167973
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20022904A CZ303552B6 (cs) | 2000-02-29 | 2001-02-15 | Memnopeptid, farmaceutická kompozice tento memnopeptid obsahující, zpusob prípravy tohoto memnopeptidu a jeho použití k príprave léciva |
Country Status (30)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6627604B2 (cs) |
| EP (2) | EP1130027A1 (cs) |
| JP (1) | JP4787449B2 (cs) |
| KR (1) | KR100997073B1 (cs) |
| CN (1) | CN1274715C (cs) |
| AR (1) | AR029808A1 (cs) |
| AT (1) | ATE313556T1 (cs) |
| AU (2) | AU5031801A (cs) |
| BR (1) | BR0108757A (cs) |
| CA (1) | CA2401032C (cs) |
| CY (1) | CY1105550T1 (cs) |
| CZ (1) | CZ303552B6 (cs) |
| DE (1) | DE60116063T2 (cs) |
| DK (1) | DK1261625T3 (cs) |
| EE (1) | EE05406B1 (cs) |
| ES (1) | ES2254394T3 (cs) |
| HK (1) | HK1052712B (cs) |
| HR (1) | HRP20020703B1 (cs) |
| HU (1) | HU228067B1 (cs) |
| IL (2) | IL151458A0 (cs) |
| ME (1) | ME00379B (cs) |
| MX (1) | MXPA02007845A (cs) |
| NO (1) | NO329082B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ521036A (cs) |
| PL (1) | PL206818B1 (cs) |
| RU (1) | RU2261254C2 (cs) |
| SI (1) | SI1261625T1 (cs) |
| SK (1) | SK287310B6 (cs) |
| WO (1) | WO2001064715A2 (cs) |
| ZA (1) | ZA200206841B (cs) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1308613B1 (it) | 1999-02-17 | 2002-01-09 | Pharmacia & Upjohn Spa | Acidi grassi essenziali nella prevenzione di eventi cardiovascolari. |
| EP1130027A1 (de) * | 2000-02-29 | 2001-09-05 | Aventis Pharma Deutschland GmbH | Memno-Peptide, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung derselben |
| DE10050091A1 (de) * | 2000-10-09 | 2002-04-25 | Biotechnolog Forschung Gmbh | Casein-Peptidfragmente mit wachstumsbeeinflußender Aktivität auf Zellkulturen |
| ITMI20010129A1 (it) * | 2001-01-25 | 2002-07-25 | Pharmacia & Upjohn Spa | Acidi grassi essenziali nella terapia di insufficienza cardiaca e scompenso cardiaco |
| US7160917B2 (en) * | 2002-12-13 | 2007-01-09 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Spirobenzofuran lactams and their derivatives, processes for their preparation and use thereof |
| DE10258650A1 (de) * | 2002-12-13 | 2004-06-24 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Neue Spirobenzofuranlactame und ihre Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung derselben |
| DE102012016127A1 (de) | 2011-08-31 | 2013-02-28 | Daniel Elias | Bioaktive, regenerative Mischung zur Herstellung eines Ergänzungsnahrungsmittels |
| US11030144B2 (en) * | 2018-12-14 | 2021-06-08 | Texas Instruments Incorporated | Peripheral component interconnect (PCI) backplane connectivity system on chip (SoC) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07330622A (ja) * | 1994-06-06 | 1995-12-19 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 新規生理活性物質スタキボシンｄ及びその製法 |
| JPH10251262A (ja) * | 1997-01-13 | 1998-09-22 | Mercian Corp | プロテアーゼ阻害物質およびその製造方法 |
| EP1261625A2 (en) * | 2000-02-29 | 2002-12-04 | Aventis Pharma Deutschland GmbH | Memno peptides, a process for their preparation and their use |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3442815B2 (ja) * | 1992-05-13 | 2003-09-02 | 第一製薬株式会社 | ジアザビシクロアルケン誘導体 |
| JPH09501178A (ja) * | 1993-08-06 | 1997-02-04 | スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション | エンドセリン受容体アンタゴニスト |
| RU2083585C1 (ru) * | 1994-12-13 | 1997-07-10 | Волгоградское акционерное общество открытого типа "Химпром" | Способ получения метилового эфира n-бензилоксикарбонил-l-аспартил-l-фенилаланина |
| JPH08283118A (ja) * | 1995-04-07 | 1996-10-29 | Kao Corp | 美白剤 |
| DE19731571A1 (de) * | 1997-07-23 | 1999-01-28 | Merck Patent Gmbh | Endothelin-Rezeptor-Antagonisten |
| DE19754082A1 (de) * | 1997-12-05 | 1999-06-10 | Knoll Ag | Methode zur Bekämpfung der Fettleibigkeit |
| JP2003527065A (ja) * | 1997-12-16 | 2003-09-16 | ジェネンコア インターナショナル インコーポレーテッド | 新しいｅｇｉｉｉ様酵素、そのような酵素をコードするｄｎａおよびそのような酵素の産生方法 |
-
2000
- 2000-02-29 EP EP00104114A patent/EP1130027A1/de not_active Withdrawn
-
2001
- 2001-02-15 HK HK03104943.7A patent/HK1052712B/zh not_active IP Right Cessation
- 2001-02-15 JP JP2001564208A patent/JP4787449B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-02-15 ME MEP-2008-591A patent/ME00379B/me unknown
- 2001-02-15 SK SK1226-2002A patent/SK287310B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2001-02-15 EE EEP200200480A patent/EE05406B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2001-02-15 IL IL15145801A patent/IL151458A0/xx active IP Right Grant
- 2001-02-15 RU RU2002125877/04A patent/RU2261254C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-02-15 BR BR0108757-6A patent/BR0108757A/pt active Search and Examination
- 2001-02-15 CZ CZ20022904A patent/CZ303552B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-02-15 CN CNB018057144A patent/CN1274715C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-02-15 DK DK01923574T patent/DK1261625T3/da active
- 2001-02-15 EP EP01923574A patent/EP1261625B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-15 HR HR20020703A patent/HRP20020703B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2001-02-15 WO PCT/EP2001/001661 patent/WO2001064715A2/en active IP Right Grant
- 2001-02-15 AU AU5031801A patent/AU5031801A/xx active Pending
- 2001-02-15 HU HU0204584A patent/HU228067B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2001-02-15 KR KR1020027011092A patent/KR100997073B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2001-02-15 NZ NZ521036A patent/NZ521036A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-02-15 CA CA2401032A patent/CA2401032C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-02-15 AT AT01923574T patent/ATE313556T1/de active
- 2001-02-15 DE DE60116063T patent/DE60116063T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-15 AU AU2001250318A patent/AU2001250318B2/en not_active Ceased
- 2001-02-15 SI SI200130491T patent/SI1261625T1/sl unknown
- 2001-02-15 PL PL358300A patent/PL206818B1/pl unknown
- 2001-02-15 MX MXPA02007845A patent/MXPA02007845A/es active IP Right Grant
- 2001-02-15 ES ES01923574T patent/ES2254394T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-02-27 AR ARP010100884A patent/AR029808A1/es active IP Right Grant
- 2001-02-28 US US09/794,346 patent/US6627604B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-08-25 IL IL151458A patent/IL151458A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-08-27 ZA ZA200206841A patent/ZA200206841B/en unknown
- 2002-08-28 NO NO20024105A patent/NO329082B1/no not_active IP Right Cessation
-
2006
- 2006-02-13 CY CY20061100199T patent/CY1105550T1/el unknown
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07330622A (ja) * | 1994-06-06 | 1995-12-19 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 新規生理活性物質スタキボシンｄ及びその製法 |
| JPH10251262A (ja) * | 1997-01-13 | 1998-09-22 | Mercian Corp | プロテアーゼ阻害物質およびその製造方法 |
| EP1261625A2 (en) * | 2000-02-29 | 2002-12-04 | Aventis Pharma Deutschland GmbH | Memno peptides, a process for their preparation and their use |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Ogawa K et al. J. Antibiot. 48(12), 1995, 1396-1400 * |
| Roggo BE et al. J. Antibiot. 49(1), 1996, 13-19 * |
| Roggo BE et al. J. Antibiot. 49(4), 1996, 374-379 * |
| Sakai K et al. J. Antibiot. 48(6), 1995, 447-456 * |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100319563B1 (ko) | 약리학적 작용을 갖는 악티노플레인스 종으로부터의 리포펩타이드, 이의 제조방법 및 이를 함유하는 약제학적 조성물 | |
| DE69222142T2 (de) | Neuartige prolyl-endopeptidase-inhibitoren sna-115 und sna-115t, ihre herstellung, und hierbei verwendete stämme | |
| KR20100132518A (ko) | 환형 화합물을 생산하는 미생물 | |
| CZ303552B6 (cs) | Memnopeptid, farmaceutická kompozice tento memnopeptid obsahující, zpusob prípravy tohoto memnopeptidu a jeho použití k príprave léciva | |
| JP4620873B2 (ja) | Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍｔｕｂａｋｉｉ由来の新規抗寄生虫薬であるセファイボール、その製造方法およびその使用 | |
| JP2011516048A (ja) | アクチノマデュラ・ナミビエンシス由来の高度に架橋したペプチド | |
| AU2001250318A1 (en) | Memno peptides, a process for their preparation and their use | |
| JP4095815B2 (ja) | トリプシンの新規インヒビターｔｕ−５３５０物質とその製造法及び用途 | |
| JPS6337098B2 (cs) | ||
| JPH0987265A (ja) | アミノ酸誘導体 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20180215 |