CZ301655B6

CZ301655B6 - Farmaceutický prostredek

Info

Publication number: CZ301655B6
Application number: CZ20021047A
Authority: CZ
Inventors: A. Zeligs@Michael
Original assignee: Bioresponse L. L. C.
Priority date: 1999-09-23
Filing date: 2000-09-22
Publication date: 2010-05-12
Also published as: DE60034689D1; EP1213964B1; CA2383250A1; AU777588B2; AU7605300A; US20040156910A1; EP1213964A4; CZ20021047A3; US6689387B1; US7384972B2; EP1213964A1; DE60034689T2; CA2383250C; WO2001020990A1; ATE361069T1; NZ518021A

Abstract

Predmetem rešení je použití farmaceutického prostredku, který obsahuje jako svou úcinnou složku množství indolu, úcinného pro lécení nebo prevenci bolestivosti pri mastalgii. Prostredek je úcinný také pri prevenci nebo zlepšení príznaku spojených s endometriózou a v nekterých prípadech muže príznive ovlivnit také dysplazii deložního hrdla. S výhodou se prostredek podává jako potravinový doplnek.

Description

Farmaceutický prostředek

Oblast techniky

Vynález se týká použití farmaceutického prostředku pro prevenci nebo zlepšení příznaků, spojených s bolestmi v mléčné žláze a s endometriózou. Prostředky obsahují fytochemické látky ze skupiny indolů, jako diindolylmethan DIM a jeho prekurzor, indol-3-karbinol I3C, nebo jeho analog, 2-(indol-3-ylmethyl)-3,3-diindolylmethan, LTR-1.

Dosavadní stav techniky

Bolest v prsech a v mléčné žláze

Při typickém průběhu života současných žen se označuje období od přibližně 35. roku až do ustávání menstruace jako „peřímenopauza“. Ženu je možno klasifikovat do tohoto období v případě, že sice v posledních 12 měsících došlo k menstruaci, avšak vyskytla se nepravidelnost v časových intervalech nebo v intenzitě menstruace. V průběhu tohoto časového období se u žen také ve zvýšeném měřítku objevuje opakující se bolest v mléčných žlázách a endometrióza, na jejímž základě vznikají bolestivé stavy vzhledem k přítomnosti abnormální endometriáiní tkáně. Tyto dva stavy, kteréjsou pro perimenopauzu společné, nejsou ještě zcela objasněny a z tohoto důvodu prozatím nejsou také dostatečně účinně léčeny tak, aby nedocházelo k nežádoucím vedlejším účinkům, jak je popsáno v publikaci Prior, J. C., Perimenopause: the complex endocrinology of the menopausal transition, Endocr. Rev., 19, s. 397-428,1998.

Pro toto období se předpokládají změny v koncentraci estrogenu, bylo však identifikováno jen malé množství trvale se vyskytujících abnormalit ve vnitřní sekreci. Koncentrace estrogenů v krevním oběhu je v tomto období normální u nemocných s mastalgií i u nemocných s endomet30 riózou. Byla prokázána snížená produkce progesteronu, v jejímž důsledku může dojít k poměrnému převažujícímu účinku estrogenu. Avšak žádné teoretické vysvětlení nerovnováhy vnitřní sekrece nevysvětluje výskyt mastalgie a endometriózy podle publikace Santoro N., Rosenberg, J. a další, Characteristics of reproductive hormonal dynamics in the perimenopause, J, Clinical Endocrinology and Metab., 81, s. 1495-501,1996.

Návratná cyklická mastalgie je jednou z nejčastějších příčin, pro které žena navštíví lékaře. Pravděpodobně 50 až 70 % všech žen trpí v některém období života obtížnou mastalgií. Ve své nejběžnější formě je mastalgie chronický stav, při němž se navrací bolestivost, která je nejobtížnější v průběhu několika dnů před menstruaci podle publikace Blue, J., Harman, J. a další,

4o Mastalgia revíew: St. Marks Breast Centre, New Zealand Medical Journal, 111 (1059), s. 33-34, 1998. Tradiční léčení spočívalo obvykle v dietních předpisech, které zakazovaly kávu, tuky a doporučovaly také snížené požívání alkoholu, dále doporučoval pupálkový olej, a různé hormonální prostředky, jako bromocriptin a danazol v závažnějších případech. V případě bromocríptinu (Parioděl) a danazoiu došlo v 70 % ke zlepšení stavu, na druhé straně však docházelo ve 30 až

3 5 % k nežádoucím vedlejším účinkům podle publikací Gateley, C. A a Mansen, R. E., Management of the painful and modular breast, British Medical Bulletin, 47, 284-94, 1991, Nazli K. a další, Controlled trial of the prolactin inhibitor bromocriptine (Parlodel) in the treatment of severe cyclical mastalgia, British Journal of Clinical Practice, 1989,43 (9), 322-7, Kontosolis K, a další, Comparison of tamoxifen with danazol for treatment of cyclical mastalgia, Gynecol. so Endocrinol. 1997, 11, s. 393-397. Při použití medroxyprogesteronacetátu ke zvýšení koncentrace progesteronu nedocházelo k lepším výsledkům než při podání placeba v kontrolním pokusu podle publikace Maddox, P. R., Harrison, B. J., a další, A randomized controlled trial of medroxyprogesterone acetate in mastalgia, Annals of the Royal College of surgeons of England, 72 (2),

s. 71-6,1990.

Byly také činěny pokusy $ potravinovými doplňky. Šlo o přidávání vysokých dávek pupálkového oleje, beta-karotenu a vitaminu A do stravy postižených žen. Pupíkový olej se ve Velké Británii užívá nejčastěji na začátku léčení vzhledem k tomu, že nemá hormonální povahu. Tato látka normalizuje poměr esenciálních mastných kyselin k nasyceným mastným kyselinám v krevním séru žen s mastalgií, olej je nutno podávat 3 až 4 měsíce k dosažení příznivého účinku. Ke zlepšení došlo u až 40 % nemocných, avšak vyskytla se řada vedlejších účinků, zejména plynnatost a nauzea podle publikace Maddox, P. R., The management of mastalgia in the UK, Hormone Research, 32, s. 21-27, 1989. Při italských výzkumech byly prováděny pokusy s kombinací betakarotenu a vitaminu A (retínolu) při léčení mastalgie podle publikace Santamaria L., DellOrti M. io a další, Beta-carotene supplementation assocciated with intermittent retinol administration in the treatment of pre-menopausal mastodynia. Bolí Chim Far, 128, s. 284-287, 1989. Byly popisovány určité úspěchy, avšak nezbytné dávky retínolu pro dosažení těchto úspěchů, 150 000 až 300 000 mezinárodních jednotek denně jsou příliš vysoké a jsou proto spojeny s výskytem podstatných vedlejších účinků, jako jsou bolest hlavy, suchost v ústech, nauzea, obluzení, vypadává15 ní vlasů a olupování pokožky. Je tedy zřejmé, že při běžném výskytu mastalgie jako poruchy u žen, by bylo zapotřebí mít k dispozici účinnější způsob léčení s přijatelným rizikem a s malými vedlejšími účinky, jak je zřejmé z publikace Ashley B., Mastalgia, Lippincotts Primary Care Practice, 1998,2(2), 189-93.

Endometrióza

Endometrióza je onemocnění, které postihuje přibližně 15 % fertilních žen a až 50 % infertilních žen. Pravděpodobnost výskytu tohoto onemocnění se zvyšuje s věkem a je nejvyšší v perimenopauze podle publikace Tzingounis V. A., Cardamakis E., Modem approach to endometriosis,

Annals of the New York Academy of Sciences, 816, s. 320-330, 1997. Endometrióza znamená přítomnost funkčních endometriálních žlázek a stromatu na abnormálních místech mimo děložní dutinu. Přes široký výzkum není tato choroba vysvětlena a není vysvětlena ani její patogeneze. Stejně jako v případě mastalgie byly při tomto onemocnění podávány hormonální léky. Nejobvyklejší z těchto léků je danazol. Danazol je syntetický steroid s androgenním účinkem, který potla30 čuje cyklické změny v podvěsku mozkovém, které jsou nezbytné pro vznik menstruace. V důsledku toho vzniká amenorrhea, což znamená, že vůbec nedochází k menstruaci. 1 když bylo tímto způsobem dosaženo úlevy od bolesti pri endometrióze, docházelo také k nežádoucím vedlejším účinkům až u 80 % žen, jimž byl podáván danazol podle publikace Greenbiatt R., B, Dmowski W. P. a další Ciinical studies with an anti-gonadotropin danazol, Fertil Steril, 22,

s. 102,1971. Tyto vedlejší účinky zahrnovaly přibývání na váze, zadržování vody, akné, zmenšování prsů, návaly horka a změny nálady. Kromě danazolu byly užívány také jiné hormony včetně analogů hormonu, uvolňujícího gonadotropin (GnRH) a včetně gestrinonu, syntetického steroidu, odvozeného od 19-nortestosteronu. Vedlejší účinky, spojené s podáváním těchto látek jsou rovněž podstatné a zahrnují spektrum příznaků, spojených s hypoestrogenismem a s menopauzou.

Jde tedy o návaly horka, noční pot a osteoporózu, podle publikaci Telima, E. J., Puolakka, J. a další, Placebo-controlled comparison of danazol and high-dose medroxyprogesterone acetate in the treatment of endometriosis, Gynecol Endocrinol 1, s, 51, 1987, a Thomas E, J., Cooke I. D. a další, Impact of gestrinone on the course of asymptomatic endometriosis, Br. Med J., 294, s. 272, 1987. Je tedy rovněž zřejmé, že by bylo nezbytné mít k dispozici prostředky pro léčení endometriózy bez výskytu závažných vedlejších účinků.

Indoly ve stravě

Di indoly Imethan DIM, jeho prekurzor, indol-3-karbinol I3C a jeho analog, 2-(indol-3-ylso methyl)-3,3 -diindolyImethan LTR-1 jsou přírodní chemické látky a tvoří část indolů v křížatých zeleninách, například DIM a I3C je možno nalézt v brokolici, květáku kapustě a růžičkové kapustě podle publikace Bradfieid CA a Bjeldanes LF, High performance liquid chromatographic analysis of anticarcinogenic indoles in Brassica oleracea. J. Agric. Food Chem. 1987, 35,46-49.

DIM spolu s lineárním trimerem LTR-1 se tvoří z prekurzoru I3C po enzymatickém uvolnění této látky z glukosinolátů, které se nacházejí ve všech křížatých zeleninách.

-2CZ 301655 B6

Je známo, že existuje souvislost mezi indoly z uvedených zelenin a metabolismem estrogenů.

H. Leon Bradlow, Ph. D. a jeho skupina v Strang Cancer Prevention Laboratory, New York poprvé popsali spojení mezi látkami z křížatých zelenin a metabolizmem estrogenů. Prokázali, že přídatné podávání I3C může vést k dramatickým změnám v metabolismu estrogenů, jakje popsáno v publikaci Michnovicz JJ a další, Changes in levels of urinary estrogen metabolites after oral indole-3-carbinol treatment in human. J. Nati. Cancer Inst. 1997 May 21, 89(10), 718-23. Tato změna v metabolismu může podstatně snížit množství estrogenů jako riziko zhoubných nádorů a může být příspěvkem ke zlepšení metabolismu estrogenů. V případě, že se uvedené látky přidá10 vají ke stravě, dochází k posunu metabolismu estrogenů. Produkuje se pak převážně 2-hydroxya 2-methoxyestrogen podle publikace Michnovicz JJ a další, Changes in levels of urinary estrogen metabolites after oral indole-3-carbinol treatment in human. J. Nati. Cancer Inst. 1997 May 21, 89(10), 718-23. Zvýšený podíl 2-hydroxymetabolitů chrání mléčnou žlázu před vznikem zhoubných nádorů. Tento vztah byl dokumentován také v kontrolních pokusech, které byly popsány v publikaci Ho GH, a další Urinary 2/16 alpha-hydroxyestrone ratio: correlation with sérum insulin-like growth factor binding protein-3 and a potential biomarker of breast cancer risk. Ann. Acad. Med. Singapore 1998, 27, 294-299, a Schneider J. a další, Abnormal oxidative metabolism of estradiol in women with breast cancer. Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1982, 79, 3047-3051. 2-hydroxymetabolity jsou označovány za „dobré estrogeny“ podle publikace Brad20 low HL a další, 2-hydroxyestrone: the goo' estrogen. J. Endocrinol. 1996 Sep„ 150 Suppl. S259-65 a mohou mít funkci antioxidačních látek podle publikace Komura S. a další, Catecholestrogen as a natural antioxidant. Ann. Ν. Y. Acad. Sci. 1996 Jun. 15, 786,419-429.

US 5 948 808 (Stephen H. Safe) popisuje sloučeniny a prostředky, obsahující 13C a DIM, vhodné pro léčení nádorů závislých na estrogenech a zvláště pro léčení neoplastických onemocnění mléčné žlázy a zhoubných nádorů endometria. Dokument uvádí výsledky, které potvrzují, že substituovaný 13C a/nebo DIM jsou účinné pri inhibici růstu lidského nádoru mléčné žlázy MCF-7 a nádorů mléčné žlázy u krys kmene Sprague-Dawley na modelu karcinomu mléčné žlázy, vyvolaném DMBA (Příklady 2 a 3, Tabulky 1 až 3). Uvedený dokument však nepopisuje ani nenavrhuje použití požíváteIných indolů pro léčení nebo prevenci mastalgie nebo endometriózy, jejichž povaha je odlišná od nádorového bujení.

S ohledem na známý stav techniky a na známé indoly v potravinách byla v patentovém spisu US 5 895 787 popsána možnost použití I3C, který se mění na DIM a LTR-1 po průchodu žalud35 kem jako doplňku potravin ke snížení příznaku fíbromyalgie. Přes toto použití nebylo možno dokumentovat žádný vztah mezi fibro-myalgií a složením estrogenů podle publikace Bengtsson A., Henriksson, K. G„ Primary fíbromyalgia. A clinical and laboratory study of 55 patients., Scand J. Rheumatol., 15(3), s. 340-7, 1986. Publikované zprávy prokázaly vhodnost doplnění stravy pomocí 13C u opakující se papillomatózy hrtanu a u dysplasií v oblasti děložního hrdla podle publikace Rosen, C. A., Woodson, G. E. a další, Preliminary results of the use of indole-3carbinol for recurrent respirátory papillomatosis, Otolaryngology Head Neck Surgery, 118, s. 810-5, 1998, a Jin L„ Qi, M. a další, Indole-3-carbinol prevents cervical cancer in human papilloma virus type 16 (HPV16) transgenic mice, Cancer Research, 59(16), s. 3991-7, 1999. Obě onemocnění jsou v souvislosti s infekcí lidským papillomavirem a mohou být citlivá na metabolismus estrogenů. Použití DIM a LTR-1 může v tomto případě zlepšit rovnováhu metabolitů estrogenů, jakje popsáno například v patentové přihlášce US 09/053180. Je tedy zřejmé, že by indoly ve stravě nebo jako potravinové doplňky mohly příznivě ovlivnit bolesti v mléčné žláze nebo endometriózu.

Předchozí práce, týkající se indolů, například DIM, prokázaly schopnost těchto látek zabránit vzniku nádorů mléčné žlázy u různých živočichů podle publikace Chen, L, McDougal, A. a další, Aryl hydrocarbon receptor-mediated antiestrogenic and antitumorigenic activity of diindolylmethane, Carcinogenesis, 19(9), 1631-9, 1998, dosud však nebyla popsána možnost použít ťytochemické látky z křížatých rostlin při léčení mastalgie nebo endometriózy.

-3CZ 301655 B6

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří použití farmaceutického prostředku pro prevenci nebo zlepšení příznaků, s spojených s mastalgií a endometriózou, prostředek obsahuje jako svou účinnou složku fytochemické látky typu indolů. Po podání téchto látek obvykle dochází ke snížení bolestivosti, která je spojena s endometriózou a mastalgií nebo je možno zabránit vzniku bolestivých pocitů. Z fytochemických látek, které je možno použít jako účinné složky farmaceutického prostředku podle vynálezu, je možno uvést zvláště indoly v potravě, a to diindolylmethan DIM, jeho prekurzor, to indol-3-karbinol I3C ajeho analog, 2-(indoÍ-3-ylmethyl)-3,3'-dÍindolylmethan LTR-1.

Farmaceutický prostředek podle vynálezu může kromě uvedených účinných látek obsahovat také farmaceutické nosiče a běžné pomocné látky.

Vynález je založen na pozorování, že podáváním fytochemických látek, zvláště I3C, DIM a LT-1 je možno zlepšit příznaky mastalgie a endometriózy.

Vstřebávání DIM a příbuzných indolů, jako potravinových doplňků, je možno usnadnit jejich zařazením do prostředků, uvedených v patentové přihlášce číslo US 09/053180. Dále je možno účinnost DIM a dalších obdobných látek zlepšit současným podáváním s grapefruitovým koncentrátem, který může dále usnadnit vstřebávání těchto látek.

Ve výhodném provedení dochází po podání farmaceutického prostředku podle vynálezu k prevenci bolestivosti mléčné žlázy. Podle dalšího výhodného provedení obsahuje farmaceutický prostředek jako ťytochemickou látku DIM, I3C a LTR-1, Ve specifickém provedení se indoly I3C, DIM nebo LTR-1 podávají samostatně nebo v kombinaci nebo spolu s dalšími potravinovými doplňky perorálně, popřípadě v zapouzdřené formě.

I3C se s výhodou podává v dávce 200 až 500 mg denně. Podle alternativního provedení se I3C může podávat v dávkách 200 až 300 mg denně, 300 až 400 mg denně a 400 až 500 mg denně.

DIM je možno podávat v množství 150 až 500 mg denně. Ve výhodných provedeních se dávka DIM, I3C nebo LTR-1 pohybuje v rozmezí 150 až 200 mg denně, 200 až 300 mg denně, 300 až 400 mg denně nebo 400 až 500 mg denně.

V jednom z výhodných provedení se DIM podává ve formě farmaceutického prostředku, který zlepšuje vstřebávání této látky, tak jak je popsán v patentové přihlášce US 09/053180, tímto způsobem je možno podávat 60 až 500 mg DIM denně, přičemž látka je suspendována ve formě mikročástic v nosiči, tvořeném převážně Škrobovou matricí. Ve výhodných provedeních se dávka takto zpracovaného DIM pohybuje v rozmezí 60 až 100 mg denně, 100 až 200 mg denně, 200 až 300 mg denně, 300 až 400 mg denně nebo 400 až 500 mg denně.

LTR-1 se s výhodou rovněž podává ve formě farmaceutického prostředku, který zlepšuje vstřebávání této látky a obsahuje uvedenou látku tak, aby bylo možno podávat množství 60 až 500 mg

LTR-1 denně, látka je suspendována ve formě mikročástic ve škrobové matrici, tak jak bylo uvedeno svrchu, podle vynálezu je však možno podávat jakýkoliv jiný prostředek s obsahem LTR-1. Ve výhodném provedení se dávka LTR-I pohybuje v rozmezí 150 až 200 mg denně. Podle dalších výhodných proveden se může dávka zpracovaného LTR-1 pohybovat v rozmezí 60 až 100 mg denně, 200 až 300 mg denně, 300 až 400 mg denně nebo 400 až 500 mg denně.

Dávky fytochemických látek podle vynálezu je také možno vypočítat na bázi tělesné hmotnosti nemocného. Výhodné jsou dávky fytochemických látek v rozmezí 0,5 až 3 mg těchto látek na kg tělesné hmotnosti denně. Podle dalšího výhodného provedení se fýtochemické látky podávají v dávkách 0,5 až 2,0 mg na kg hmotnosti denně, zvláště výhodná dávka je 1,5 mg na kg denně.

-4CZ 301655 B6

Ke zvýšení vstřebávání fytochemických látek k dosazení ještě účinnějšího potlačení příznaků mastalgie, je možno indoly, například I3C, DIM nebo LTR-1 podávat současně s grapefruity, grapefruitovým koncentrátem, grapefruitovou šťávou nebo jejím koncentrátem nebo jakýmkoliv odvozeným prostředkem.

Podle dalšího možného provedení se indoly, například DIM nebo LTR-1 podávají ve formě liposomálního spreje pod jazyk přímo na ústní sliznici. Tato suspenze liposomů umožní podávat fytochemické látky ve formě systému s prodlouženým uvolňováním těchto látek. Při vstřebávání indolů, například DIM nebo LTR-1 z liposomů ústní sliznici, je možno se vyvarovat metabo10 lismu při „prvním průchodu játry“. Při tvorbě liposomů se užívají běžné prostředky tohoto typu a běžné strukturní lipidové složky, tak jak jsou popsány v publikaci Ranade, V. V., Drug delivery systems, 1. Site-specifíc drug delivery using liposomes as carriers, J. Clin. Pharmacol. 29(8), 685-94 1989. Ve výhodném provedení se liposomální sprej podává tak, aby byla zajištěna dávka 5 až 30 mg indolu, například DIM nebo LTR-1 denně při podání 2 až 12 postřiků typického pro15 středku s obsahem liposomů.

Fytochemické látky, jako DIM nebo LTR-1, je možno podávat také pro transdermální vstřebávání ve formě krému, nanášeného přímo na pokožku. Tento krém může využívat pro zlepšené vstřebávání různá změkčovadla, fytochemické látky, například DIM nebo LTR-1 jsou v krému obsaženy v koncentraci 1 až 3 % hmotnostní. Krém tohoto typuje obvykle v podstatě hydratační kosmetický krém, který je upraven pro aplikaci přímo na bolestivé prsy, zejména u žen, které si nepřejí aplikovat fytochemické látky perorálně. Některé z prostředků mohou také obsahovat neurohormon melatonin, určený k aplikaci na noc ve formě krému a kombinující příznivý účinek melatoninu a fytochemických látek. Tímto způsobem je možno aplikovat indoly a melatonin přímo na tkáň prsu, takže se současně využívá příznivého účinku melatoninu na spánek. V jednom ze specifických provedení se aplikuje 5 až 10 ml takového prostředku denně, tímto prostředkem se podá 5 až 30 mg DIM nebo jiného indolu denně a popřípadě 3 až 10 mg melatoninu denně.

Fytochemickou látku, například DIM nebo LTR-1 je také možno podávat ve formě vaginálního krému nebo čípku, který uvedenou mikrokrystalickou fytochemickou látku obsahuje v dávce 20 až 100 mg. Tímto způsobem je možno aplikovat indoly z křížatých rostlin přímo na sliznici pochvy a děložního hrdla pro zlepšení dysplazie děložního hrdla.

Fytochemické látky podle vynálezu je možno podávat v jakémkoliv galenickém zpracování a při jakémkoliv systému podávání v průběhu dne.

Způsob podání indolu a jeho množství vždy určí ošetřující lékař v závislosti na celé řadě faktorů, jako jsou věk, celkový zdravotní stav, závažnost léčeného onemocnění a podobně.

Léčeným subjektem může být jakýkoliv živočich, například savec, s výhodou člověk, přičemž může jít o dítě nebo o dospělého. Ve výhodném provedení je léčebným subjektem žena.

Léčení endometriózy

Farmaceutický prostředek je možno dle vynálezu použít k prevenci nebo ke zlepšení příznaků, spojených s endometriózou. Ve výhodných provedeních dochází k úplné prevenci nebo úplnému potlačení bolestivosti po aplikaci farmaceutického prostředku. Podle jiného provedení dochází ke snížení příslušného markéru pro endometriózu, například antigenů Ca-125 v krevním séru u nemocných, trpících endometriózou v průběhu léčení fytochemickými látkami. Ve výhodném provedení obsahuje farmaceutický prostředek jako fytochemické látky 13C, DIM nebo LTR-1 samostatně nebo v kombinaci nebo spolu sjinými potravinovými doplňky a prostředek je určen k perorálnímu podání, například ve formě zapouzdřeného potravinového doplňku.

-5CZ 301655 B6

I3C se s výhodou podává v dávce 200 až 500 mg denně. Podle alternativního provedení se 13C může podávat v dávkách 200 až 300 mg denně, 300 až 400 mg denně a 400 až 500 mg denně.

DIM je možno podávat v množství 150 až 500 mg denně. Ve výhodných provedeních se dávka

DIM, I3C nebo LTR-1 pohybuje v rozmezí 30 až 100 mg denně, 100 až 200 mg denně, 200 až 300 mg denně, 300 až 400 mg denně nebo 400 až 500 mg denně.

V jednom z výhodných provedení se DIM podává ve formě farmaceutického prostředku, který zlepšuje vstřebávání této látky, tak jak je popsán v patentové přihlášce US 09/053180, tímto io způsobem je možno podávat 60 až 500 mg DIM denně, přičemž látka je suspendována ve formě mikročástic v nosiči, tvořeném převážně škrobovou matricí. Ve výhodných provedeních se dávka takto zpracovaného DIM pohybuje v rozmezí 30 až 100 mg denně, 100 až 200 mg denně, 200 až

300 mg denně, 300 až 400 mg denně nebo 400 až 500 mg denně.

is LTR-1 se s výhodou rovněž podává ve formě farmaceutického prostředku, který zlepšuje vstřebávání této látky a obsahuje uvedenou látku tak, aby bylo možno podávat množství 60 až 500 mg LTR-1 denně, látka je suspendována ve formě mikročástic ve škrobové matrici, tak jak bylo uvedeno svrchu, podle vynálezu je však možno podávat jakýkoliv jiný prostředek s obsahem LTR-1. Ve výhodném provedení se dávka LTR-1 pohybuje v rozmezí 100 až 200 mg denně.

Podle dalších výhodných proveden se může dávka zpracovaného LTR-1 pohybovat v rozmezí 30 až 100 mg denně, 200 až 300 mg denně, 300 až 400 mg denně nebo 400 až 500 mg denně.

Dávky íytochemických látek podle vynálezu je také možno vypočítat na bázi tělesné hmotnosti nemocného. Výhodné jsou dávky Íytochemických látek v rozmezí 1 až 3 mg těchto látek na kg tělesné hmotnosti denně. Podle dalšího výhodného provedení se fytochemické látky podávají v dávkách 1,5 až 2,5 mg na kg hmotnosti denně, zvláště výhodná dávka je 2,0 mg na kg denně.

Ke zvýšení vstřebávání fytochemických látek k dosažení ještě účinnějšího potlačení příznaků mastalgie, je možno indoly, například I3C, DIM nebo LTR-1 podávat současně s grapefruity, grapefruitovým koncentrátem, grapefruitovou šťávou nebo jejím koncentrátem nebo jakýmkoliv odvozeným prostředkem. Tímto způsobem je možno potlačit příznaky endometriózy včetně sníženi markérů.

Podle dalšího možného provedení se indoly, například DIM nebo LTR-1 podávají ve formě lipo35 somálního spreje pod jazyk přímo na ústní sliznici. Tato suspenze liposomů umožní podávat fytochemické látky ve formě systému s prodlouženým uvolňováním těchto látek. Při vstřebávání indolů, například DIM nebo LTR-I z liposomů ústní sliznici, je možno se vyvarovat metabolismu při „prvním průchodu játry“. Pří tvorbě liposomů se užívají běžné prostředky tohoto typu a běžné strukturní lipidové složky, tak jak jsou popsány v publikacích Ranade, V. V., Drug delivery systems, 1. Site-specific drug delivery using liposomes as carriers, J. Clin. Pharmacol. 29(8), 685-94, 1989, Crommelin, D. J. A. a Schreir, H., Liposomes, Colloidal Drug Delivery Systems, Kreuter, J. editor, Marcel Dekker, N. Y., 1994, s. 85. Ve výhodném provedení se liposomální sprej podává tak, aby byla zajištěna dávka 5 až 30 mg indolu, například DIM nebo LTR-I denně při podání 2 až 12 postřiků typického prostředku s obsahem liposomů.

Fytochemické látky, jako DIM nebo LTR-1, je možno podávat také pro transdermální vstřebávání ve formě krému, nanášeného přímo na pokožku. Tento krém může využívat pro zlepšené vstřebávání různá zmékčovadla, fytochemické látky, například DIM nebo LTR-1 jsou v krému obsaženy v koncentraci 1 až 3 % hmotnostní. Krém tohoto typuje obvykle v podstatě hydratační kosmetický krém, který je upraven pro aplikaci přímo na pokožku, zejména u žen, které si nepřejí aplikovat fytochemické látky perorálně. Některé z prostředků mohou také obsahovat neurohormon melatonin, určený k aplikaci na noc ve formě krému a kombinující příznivý účinek melatoninu a íytochemických látek. Tímto způsobem je možno aplikovat indoly a melatonin přímo na tkáň, takže se současně využívá příznivého účinku melatoninu na spánek. V jednom ze specific-6CZ 3W1655 B6 kých provedení se aplikuje 5 až 10 ml takového prostředku denně, tímto prostředkem se podá až 30 mg DIM nebo jiného indolu denně a popřípadě 3 až 10 mg melatoninu denně.

Fytochemické látky podle vynálezu je možno podávat v jakémkoliv galenickém zpracování a při io jakémkoliv systému podávání v průběhu dne.

Léčeným subjektem může být jakýkoliv živočich, například savec, s výhodou člověk, přičemž může jít o dítě nebo o dospělého. Ve výhodném provedení je léčebným subjektem žena. Farmaceutický prostředek

Farmaceutický prostředek použitý podle vynálezu s výhodou obsahuje účinnou složku a jeden nebo větší počet farmaceuticky přijatelných nosičů. Nosiče musí být „přijatelné“ v tom smyslu, že musí být kompatibilní s ostatními složkami prostředku a nesmí být škodlivé pro léčený organismus.

Je zřejmé, že množství fytochemické látky ve farmaceutickém prostředku se bude lišit podle způsobu podání, v závislosti na léčeném onemocnění, na celkovém stavu nemocného, jeho věku, na lékové formě farmaceutického prostředku a podobně.

S výhodou je fytochemická látka pro použiti ve farmaceutickém prostředku zpracována ke zvýše30 ní své biologické dostupnosti, tak jak je popsáno v patentové přihlášce US 09/053180. Takto zpracovaný DIM nebo LTR-1 se označuje jako „zpracovaný DIM“ nebo zpracovaný LTR-1“. Pro účely vynálezu je však možno využít jakýkoliv vhodný prostředek s obsahem fytochemické látky.

Dále jsou uvedeny složky, které je možno použít při zpracování DIM nebo LTR-1 na farmaceutický prostředek:

1. Přibližně 10 až 40 % hmotnostních LTR-l nebo DIM.

2. Přibližně 10 až 40 % hmotnostních následujících složek samostatně nebo v kombinaci:

sukcinát vitaminu E, polyethylenglykol 1000, směs sukcinátu vitaminu E s polyethylenglykolem s molekulovou hmotnosti 400 až 2000, jiné estery polyethylenglykolů, například vytvořený s mastnými kyselinami, jako je kyselina olejová nebo stearová, polyvinylpyrrolidony, polyvinylpolypyrrolidony, poloxamer 188, Tweeny nebo Spaný.

3. Přibližně 5 až 20 % hmotnostních následujících složek samostatně nebo v kombinaci: fosfatidylcholin (odvozený od sojového lecithinu a dodávaný jako prostředek Phospholipon 50G od Rhone Poulenc Rorer), dioleoylfosfatidylcholin, fosfatidylglycerol, dioleoylfosfatidylglycerol, dimyristoylfosfatidylcholin, dipalmitoylfosfatidylcholin, fosfatidylethanolaminy, fosfatidylseri50 ny, sfingomyeliny nebo jiné zdroje fosfolipidů, dodávané například v čištěném stavu od Milk Fat Globule Membrane, glycerolestery, polyglycerolestery nebo ethoxylovaný ricinový olej.

4. 15 až 30 % hmotnostních následujících složek samostatně nebo v kombinaci: hexanol, ethanol, butanol, heptanol, 2-methyl-l-pentanol, různá rozpouštědla typu ketonů, přijatelná pro

-7CZ 301655 B6 potravinářské účely, například methy lethyl keton, aceton nebo jiná rozpouštědla, propylenglykol a některá rozpouštědla typu esterů, například ethylacetát.

5. Přibližně 20 až40 % hmotnostních následujících složek samostatně nebo v kombinaci:

modifikovaný škrob, například prostředek Capsul^R (National Starch, lne., methylcelulóza, hydroxypropy Imethy leelulóza, hydroxyethylcelulóza, hydroxypropylethylcelulóza, pektin, arabská guma, želatina nebo jiné prostředky, vytvářející polymemí matrici, v oboru známé, rozpustné ve vodě a vhodné pro sušení rozprašováním.

io 6. 0,5 až 35 % hmotnostních následujících složek jednotlivě nebo v kombinaci: Aerosil 200, nebo jakákoliv jiná pomocná látka na bázi oxidu křemičitého, podporující sypnost nebo příbuzná sůl, tyto látky jsou v oboru běžně známé.

Dále bude podrobně uveden způsob použití zpracovaného DIM ve farmaceutickém prostředku:

!5

1. 6,75 kg TPGS se zahřeje za stálého míchání těsně nad teplotu tání ve vyhřívané nádobě, jde o „první nádobu“.

2. 9,38 kg hexanolu a 9,83 kg DIM, mletého v tryskovém mlýnu, se přidá do první nádoby a směs se míchá při teplotě 70 °C až do vzniku homogenní suspenze, pak se přidá 1,4 kg fosfatidylcholinu.

3. Ve druhé velké nádobě se smísí 185 litru vody a 10,7 kg škrobu a připraví se homogenní směs pomocí Cowlesova míchadla. Vzniklá směs se neutralizuje na pH 7 přidáním malého množ25 ství uhličitanu sodného, pak se zahřeje na 75 ^ĎC aještě 1 hodinu se míchá.

4. Obsah první nádoby se přidá ke směsi s obsahem škrobu ve druhé větší nádobě a výsledná směs se důkladně promísí pomalou rychlostí 15 minut při použití mísícího zařízení se statorem a rotorem.

5. Směs ze stupně 4 se suší rozprašováním spolu s malým množstvím, například 0,5 % hydrofilního oxidu křemičitého za vzniku volně sypného prášku jemně dispergovaných mikročástic, obsahujících společně vysrážený TPGS, fosfatidylcholin a DIM v amorfní, nekrystalické struktuře.

6. Sypný práškový produkt se uloží po odvzdušnění a propláchnutí dusíkem v evakuovaných plastových sáčcích.

7. Analýza přítomnosti nezměněné složky prokáže 30 až 33 % hmotnostních DIM.

Zpracovaný DIM je možno připravit následujícím způsobem:

a) zahřeje se jeden nebo větší počet solubilizačních emulgátorů ze skupiny komplexu sukcinátu vitaminu E s poiyethylenglykolem 1000, polyvinylpyrrolídonu, polyoxyethylenstearátu, cholátu sodného, deoxycholátu a taurocholátu,

b) k produktu ze stupně (a) se přidá rozpouštědlo a jako smáčedlo fosfolipid ze skupiny fosfatidylcholin, dioleoylfosfatidylcholin, fosfatidylglycerol, dioleoylfosfatidylglycerol, dimyristoylfosfatidylcholin, dipalmitoylfosfatidylcholin, fosfatidylethanolamin, fosfatidylserin asfingo50 myelin za vzniku roztoku,

c) v roztoku ze stupně (b) se rozpustí LTR-1 a/nebo DIM,

d) k roztoku ze stupně (c) se přidá roztok, obsahující zapouzdřující materiál,

-8CZ 3(11655 B6

e) roztok, vzniklý ve stupni (d) se míchá za vzniku mikrodisperze s velikosti Částic 5 pm nebo nižší a

f) výsledná směs se suší rozprašováním za vzniku pevného hydrofobního prostředku s obsa5 hem fytochemické látky.

Obecně je možno uvést, že vhodná léčebně účinná dávka I3C je 300 až 500 mg denně. DIM se s výhodou podává ve formě prostředku, který zvyšuje vstřebávání a který je například popsán v patentové přihlášce US 09/053180, obvyklá dávka je 50 až 200 mg denně v případě suspenze ío mikročástic ve škrobové matrici jako nosiči. LTR-1 se s výhodou podává rovněž v prostředku, který zvyšuje vstřebáváni v dávce 50 až 200 mg denně ve formě suspenze mikročástic ve škrobové matrici jako nosiči. Výsledné množství fytochemické látky musí určit ošetřující lékař. Fytochemické látky podle vynálezu je možno podávat jako takové nebo ve vzájemné kombinaci a/nebo s jinými doplňky potravin. Kombinace fytochemických látek a potravinových doplňků je možno podávat ve formě téhož prostředku, současně ve formě odlišných prostředků nebo odděleně následně v různých intervalech.

Farmaceutické prostředky zahrnují prostředky, vhodné pro parenterální podání včetně nitrosvalového a nitrožilního podání, prostředky pro perorální, rektální nebo intradermální podání, nejvýhodnějším způsobem podávání je perorální podání. Farmaceutickým prostředkem tedy může být tableta, pilulka, sirup, kapsle, čípek, prostředky pro transdermální podání, práškové materiály, zejména lyofilizované prášky pro rekonstituci s nosičem pro nitrožilní podání a podobně.

Pod pojmem „nosič“ se rozumí ředidlo, pomocná látka nebo nosné prostředí, v němž se účinná látka podává. Nosič může obsahovat pojivo, jako je mikrokrystalická celulóza, polyvinylpyrrolidon, tragakantová guma, Želatina, škrob, laktóza nebo monohydrát laktózy, dále desintegrační činidlo, jako je kyselina alginová, kukuřičný Škrob a podobně, kluzné látky nebo smáčedla, jako stearan horečnatý nebo laurylsíran sodný nebo také koloidní oxid křemičitý, sladidla, jako jsou sacharóza nebo sacharin a/nebo látky pro úpravu chuti, například mátová silice, methylsalicylát nebo pomerančová příchuť.

Farmaceutické prostředky, vhodné pro perorální podání, například tablety nebo pilulky, je možno připravit lisováním nebo odléváním, popřípadě spolu s jedním nebo větším počtem nosičů nebo pomocných látek. Lisované tablety je možno připravit lisováním směsi ve vhodném zařízení na tablety vhodného rozměru. Směs pro lisování může obsahovat fytochemickou látku, pojivo, kluznou látku, inertní ředidlo a/nebo desintegrační činidlo.

Ve výhodném provedení se postupuje tak, že se mikrokrystalická celulóza smísí s fytochemickou látkou a smáčedlem, například laurylsíranem sodným až do vzniku homogenní směsí. Pak se za míchání přidá další podivo, například polyvinylpyrrolidon spolu s malým množstvím vody. Výsledná směs se nechá projít granulačními síty a pak se suší před lisováním na tablety v běžném tabletovacím zařízení.

Tableta může být povlečená nebo nepovlečená. NepovleČená tableta může být opatřena dělící rýhou. Povlečená tableta může být opatřena povlakem cukru, šelaku, filmu nebo může být opatřena enterosolventním povlakem.

Farmaceutické prostředky, vhodné pro parenterální podání, zahrnují sterilní roztoky nebo suspen50 ze účinné látky. Ve vodném nebo olejovém nosiči je účinná látka ve formě roztoku nebo suspenze. Vhodným farmaceutickým nosičem pro toto použití mohou být sterilní kapaliny, například voda a oleje včetně živočišných, rostlinných nebo syntetických tuků, jako jsou arašídový olej, sojový olej, minerální olej sezamový olej a podobně. Účinnou látku je možno dodávat také ve formě lyofilizovaného prášku, obsahujícího fytochemickou látku a určeného k rekonstituci roz55 puštěním ve farmaceuticky přijatelném nosiči, který fytochemickou látku rozpouští.

-9CZ 301655 B6

V případě, že farmaceutickým prostředkem je kapsle, může tato kapsle obsahovat kapalný nosič, například olej, jako kakaové máslo.

Použitelnými farmaceutickými pomocnými látkami jsou například škrob, glukóza, laktóza, sacharóza, želatina, rýžová mouka, pšeničná mouka, slad, křída, silikagel, stearan sodný, glycerol monostearát, mastek, chlorid sodný, sušené odstředěné mléko, glycerol, propylenglykol, voda, ethanol a podobně. Farmaceutický prostředek může mít formu roztoku, suspenze, emulze, tablety, pilulky, kapsle, prášku, prostředku s prodlouženým uvolňováním a podobně. Prostředek může io mít také formu čípku, v němž je obvyklým pojivém a nosičem triglycerid.

Podle ještě dalšího možného provedení může být účinná látka začleněna do systému s řízeným uvolňováním této látky. Podle jednoho z možných provedení je možno použít čerpadla podle svrchu uvedené Langerovy publikace nebo podle publikací Sefton, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng.

14, 201, 1987, Buchwald a další, Surgeiy 88, 507 (1980), Saudek a další, N. Engl. J. med. 321,

754 (1989). Podle dalšího možného provedení je možno použít polymerní materiály, popsané v souhrnných publikacích Medical Applications of Control led Release, Langer and Wise, eds., CRC Pres., boča Raton, Florida (1974), Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance, Smolen and Balí, eds., Wiley, New York (1984), Ranger and Peppas, J. Macro20 mol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23, 61 (1983), Levý a další, Science 228, 190 (1985), During a další, Ann. Neurob 25, 351, (1989), Howard a další, J. Neurosurg. 71, 105 (1989).

Další systémy s řízeným uvolňováním jsou diskutovány v souhrnné publikaci Langer, Sicence 249, 1527-1533,(1990),

Podle jednoho z dalších možných provedení farmaceutického prostředku podle vynálezu mohou být dvě nebo větší počet účinných složek obsaženy v oddělených prostředcích, které je možno podávat současně nebo následně.

Součást podstaty vynálezu tvoří také farmaceutický balíček, který obsahuje jednu nebo větší počet nádobek, naplněných jednou nebo větším počtem účinných složek podle vynálezu ve formě farmaceutického prostředku, Farmaceutický balíček může také obsahovat informace o farmaceutickém prostředku, zejména doklady o povolení tohoto prostředku k prodeji a podávání jako potravinového doplňku.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Zpracování DIM nebo LTR-1 pro dosažení zvýšené biologické dostupnosti při perorálnim podání

Zpracovaný DIM a LTR-1 se získá podle stupňů, uvedených v patentové přihlášce US 09/053180. Získá se směs přibližně 10 až 40 % hmotnostních DIM nebo LTR-1 a přibližně

10 až 40 % hmotnostních komplexu vitaminu E ve formě sukcinátu a polyethylenglykolu 1000 (Vitamin-E-TPGS, Eastman Chemical), 2 až 20 % hmotnostních fosfatidylcholinu (Phospholipon 50G, Rhone Poulenc) a 15 až 30 % hmotnostních hexanolu, vztaženo na hmotnost výsledného prostředku. Směs se homogenizuje mícháním. Homogenní směs indolů a dalších složek, rozpustných v oleji a uvedených svrchu se přidá k roztoku modifikovaného škrobu ve vodě (Capsul Starch, National Starch, lne.). Škrobová složka tvoři 30 až 70 % výsledné suché hmot- 10CZ 301655 B6 nosti produktu. Dobře dispergovaná výsledná směs se pak suší rozprašováním. Výsledným produktem je jemný prášek, který obsahuje DIM nebo LTR-1 ve Škrobových částicích.

Příklad 2

Výroba kapslí s obsahem 13C, DIM a LTR-1

Čistý indol-3-karbinol, I3C se běžné dodává (Sabinsa, Inc. nebo Designed Nutritional Products, io Inc. nebo Capsules Inc.). Kapsle s obsahem 300 až 500 mg se připraví vložením uvedeného množství 13C do kapslí z neprůhledné želatiny.

Kapsle s obsahem 150 až 300 mg zpracovaného DIM podle příkladu 1 se připraví tak, že se zpracovaný DIM smísí s mikrokrystalickou celulózou a prášková směs se uloží do kapslí z neprůhled15 né želatiny.

Podobně kapsle s obsahem 150 až 300 mg zpracovaného LTR-1, získaného podle příkladu 1, se získají smísením zpracovaného LTR-1 s mikrokrystalickou celulózou a uložením práškové směsi do kapslí z neprůhledné želatiny.

Příklad 3

Zpracování DIM nebo LTR-1 do krému pro transdermální podávání

Při přípravě vodné fáze emulze se směs 70 g propylenglykolu a 633 g vody zahřeje na 95 °C. Olejová fáze emulze se připraví tak, že se zahřeje směs následujících složek na 105 °C: 30 g cetostearylalkoholu (Alfol 16/18, Vista), 30 g hydrogenovaného sojového monoglyceridu (Myverol 18-06, Quest), 30 g směsi esteru polyoxyethylenu s kyselinou stearovou a mono- adiglyceridů mastných kyselin (Arlacel 165, ICI), 10 g polyethylenu (Epolene N-34, Eastman) a 50 g skvalenu. Fáze s účinnou složkou se připraví odděleně tak, že se opatrně zahřeje na teplotu 63 °C směs následujících složek: 30 g d-a-tokoferolu polyethylenglykol 1000 sukcinátu (Vitamin E TPGS, Eastman), 50 g isopropylmyristátu a 115 g DIM nebo 15 g LTR-1. Svrchu uvedená olejová fáze se přidá do vodné fáze při použití homogenizátoru, opatřeného statorem a rotorem při mírné rychlosti. Pak se směs zchladí na 75 °C a přidá se při nízké rychlosti míšení 50 g citrónové silice, pak se přidá fáze s účinnou složkou. Nakonec se k emulzi přidají 2 g směsi methylparabenu a propylparabenu v poměru 3:1. Směs se přenese do zásobníku vysokotlakého homogenizačního zařízení, například do zařízení Microfluidics Model 110Y. Emulze se nechá homogenizátorem projít přibližně 5krát při pracovním tlaku 105 MPa, který je dostatečný k vytvoření krému poža40 dováné konzistence, který se stáním nerozdělí na své složky.

Příklad 4

Zpracování DIM nebo LTR-1 na liposomální sprej pro podání pod jazyk nebo ústní sliznici

Standardní způsob přípravy liposomů byl použit k získání liposomální suspenze DIM a také liposomální suspenze LTR-1. 7,0 g polyethylenglykolu bylo zahřálo na vodní lázni na 92 °C, pak bylo přidání 8 g částečně hydrogenovaného čistého lecithinu z vaječného žloutku a 320 mg so stearylaminu a složky byly rozpuštěny na Čirou kapalínu. K této kapalině bylo přidáno 500 mg

DIM, zpracovaného v tryskovém mlýnu. Průhledný roztok byl pak přidán k 200 ml 1% vodného roztoku dextranu T40, předem zahřátého na 55 °C a směs byla míchána v zařízení, opatřeném šnekem 3 minuty při teplotě 50 °C, načež byla zahlazena na teplotu místnosti. Tímto způsobem byla získána bělavá suspenze liposomů v dextranu T40, kterým byl zapouzdřen DIM.

-11CZ 301655 B6

Obdobný postup byl použit k přípravě liposomální suspenze zapouzdřeného LTR.-1.

Příklad 5

Použití zpracovaného DIM pro léčení mastalgíe

Účelem této studie bylo stanovení, zda jsou fytochemické látky z křížatých zelenin, například diindolylmethan DIM, účinné při zmírnění bolestivosti při uvedeném chronickém stavu.

in

B. R, je žena ve stáří 44 let, která trpí perimenopauzálními příznaky, jde o chronické opakující se bolesti mléčných žláz. Tyto bolesti trvají několik let a v současné době se zhoršují.

Ve věku 35 let byla u této ženy provedena vaginální hysterektomie vzhledem k příliš velkému 15 a bolestivému menstruálnímu krvácení. VajeČníky byly ponechány, takže nedostávala žádnou substituční hormonální terapii (HRT). V průběhu posledních 4 let každý měsíc dochází k bolestivosti mléčných žláz přibližně 1 týden v každém měsíci. Bolestivost je v obou mléčných žlázách aje spojená s pocitem napětí nebo otoků, zvýšená je také bolestivost na dotyk. Pokus o zlepšení při podávání doplňku s obsahem Don Quai byl neúspěšný,

Před podáním jakýchkoliv indolových doplňků byla nejprve odebrána ranní moč pro rozbor hormonálních derivátů. Pak byl podáván biologicky dostupný DIM jako potravinový doplněk v dávce 225 mg denně, současně bylo podáváno vyšší množství vlákniny. Bolestivost v mléčných žlázách byla vyhodnocena po 1 měsíci. V této době byl také odebrán druhý vzorek moči.

Vzorky moči byly analyzovány na koncentraci metabolitů 2-hydroxyestrogenu a 16-hydroxyestrogenu při použití zkoušky Elisa (Estratest, Immunacare, Inc., Bethlehem, Pa.). V následující tabulce jsou shrnuty výsledky pokusů, pokud jde o bolestivost mléčných žláz a také koncentrace metabolitů estrogenu.

Sledovaná hodnota	Před DIM	Po DIM
Hodnocení bolestivosti: 0-žádná, 1-mírná, 2»střední, 3=značná, 4=velmi 2načná	střední 2/4	žádná 0/4
Napětí v prsech	značné 3/4	žádné 0/4
Metabolity estrogenu v moči (ng/ml/mg kreatininu)
2-hydroxyestron	22,2	26, 4
16-fcydroxyestron	7,3	5,1
poměr 2-hyčroxy- k 16-hydroxyestronu	2,97	5,08
Metabolity estronu celkem	28,9	31,3

-12CZ 3U1655 B6

Příklad 6

Perorální podávání zpracovaného DIM u žen s bolestivostí mléčné žlázy

20 žen, ošetřovaných různými lékaři bylo zařazeno do otevřené studie, při níž byl použit pří mastalgii jako potravinový doplněk zpracovaný DIM. Do studie byly zařazeny ženy, které trpěly bolestivosti mléčných žláz na obou stranách po dobu alespoň 6 měsíců. V průběhu studie nepoužívaly ženy žádné jiné potravinové doplňky ani bylinné čaje, které by mohly ovlivnit koncentraci estrogenu. Zejména nepoužívaly pupálkový olej, isoflavony ze sóji, hřebíčkový extrakt, io Don Quai, ani Black Cohash. Při použití kalendáře zaznamenávaly jednotlivé ženy úroveň bolestivosti, napětí v prsech nebo otoků při použití stupnic pro každou kategorii obtíží. 18 z 20 žen pozorovalo určité zlepšení příznaků v době 10 dnů až 1 měsíc po začátku podávání potravinového doplňku. U 12 žen bylo možno pozorovat podstatné zlepšení, to znamená snížení od střední do značné úrovně obtíží až na nulu. Toto zlepšení příznaků bylo možno pozorovat při podávání

150 až 300 mg doplňku denně, což odpovídá denní dávce 50 až 100 mg DIM. U žádné z žen se neobjevily nežádoucí vedlejší příznaky. Zvláště je nutno uvést jednu nemocnou ve stáří 51 let, u níž došlo k úplnému vymizení bolestivosti a současně k vymizení cysty v mléčné žláze, tato cysta byla lékařem dobře dokumentována.

Příklad 7

Transdermální použití DIM při léčení chronické bolestivosti mléčných žláz

Ε. B. je žena ve stáří 38 let, u niž dochází opakovaně k bolestivosti mléčné žlázy na obou stranách. Tato bolestivost se zhoršuje před menstruací každý měsíc a začíná jíž jeden týden po konci menstruace. Současně se vyskytuje pocit napětí, který vadí v pohybu a pocit tíhy nebo otoku v obou prsech.

Bolestivost byla nejprve 1 měsíc zaznamenávána, pak začala žena používat kosmetický prostředek s obsahem DIM. Po jednom týdnu podávání 5 ml krému na noc došlo k úplnému vymizení bolestivosti. Současně došlo i k vymizení pocitu otoku mléčných žláz. Krém byl užíván 2 měsíce, aniž by došlo k návratu bolestivosti a aniž by došlo k jakýmkoliv vedlejším účinkům.

Po dvou měsících bylo používání krému přerušeno. V průběhu 1 měsíce se pak navrátila bolestivost mléčných žláz, přestože byla méně závažná než dříve.

Příklad 8

Použití DIM v případě endometriózy

P. M. je atletická žena ve stáří 32 let se závažnou endometriózou. Její příznaky se opakují každý měsíc přibližně uprostřed cyklu a mimo to se projevuje bolestivost při menstruaci vzhledem k endometrióze, která byla prokázána laparoskopií pánve. Byla potvrzena agresivní endometrióza s ektopíckými ostrůvky implantované slizniee dě ložní, které byly z pánve odstraněny, další malé ostrůvky však byly rozesety po serosním povlaku střev. Před laparoskopií byla uváděna po dobu 2 let intenzivní bolest v pánvi uprostřed cyklu a v průběhu menstruace. Matka této ženy rovněž trpěla od svých 20 let podobnými příznaky, později se však vyvinul zhoubný nádor vaječníků, který si vyžádal radikální chirurgický zákrok v jejích 56 letech. U této matky a její sestry došlo po menopauze také k chronické opakované bolestivosti prsů s fibrocystickými změnami mléčných žláz. Také mladší sestra léčené mladé ženy měla bolestivou menstruaci a bolest v pánvi, takže laparoskopií byla rovněž potvrzena endometrióza.

-13CZ 301655 B6

Po laparoskopii u nemocné byla další menstruační perioda rovněž spojena se značnou bolestí.

Pak byl podáván biologicky dostupný zpracovaný DIM od přibližně 6 týdnů po laparoskopii.

Nejprve bylo podáváno 300 mg biologicky dostupného zpracovaného DIM denně po dobu jednoho měsíce, pak byla dávka snížena na 150 mg denně. Od začátku léčení došlo k vymizení bolesti uprostřed cyklu a ke zmírnění bolesti při menstruaci. DIM byl podáván přibližně 1 rok. V průběhu této doby již nebylo zapotřebí podávat při menstruaci analgetika, nebyly pozorovány žádné vedlejší příznaky.

Diagnóza endometriózy a snížení intenzity bolesti bylo v korelaci s koncentrací antigenu Ca-125 io v krevním séru, Ca-125 je markér, jimž je možno sledovat endometriózu u dané nemocné podle publikace Pittaway, D. E., a Fayez J. A., The use of CA-125 in the diagnosis and management of endometriosis, Fertil Steril, 46, s. 790, 1986. V následující tabulce je uvedeno spojení tohoto markéru se změnami závažnosti endometriózy.

Stav	Před	Po chir.	Návštěva	Návštěva	Návštěva
nemocné	chir.zákr.	zákroku	1	2	3
DIM	ne	ne	ano	ano	ano
Ca-125	69,6	54,1	26,4	23,2	34,0
Bolest	značná	střední	zlepšená	zlepšená	zlepšená

Příklad 9

Použití transdermálního a zpracovaného DIM pro léčení mastalgie za současného zlepšení dísplazie děložního hrdla

V. H. je žena ve stáří 45 let s dlouhou historií fibrocystických mléčných žláz s opakovanou bolestivostí prsů a současně s displazií děložního hrdla. Bolestivost v prsech se dostavuje každý měsíc ve druhé části menstruačního cyklu a vyžaduje použití analgetik, například ibuprofenu. Bolestivost v prsech se zlepšuje s nástupem menstruace. Abnormální děložní nátěry byly poprvé zazna25 menány přibližně v 35 letech. Dysplazie byla hodnocena jako intraepiteliální neoplazie skupiny I pri biopsii přibližně před jedním rokem. Zena začala používat transdermálně DIM v koncentraci 1,5 % ve formě krému k úlevě od bolestivosti prsů. Po dvou týdnech došlo ke dramatickému zlepšení. Současně došlo k vymizení chronického výtoku, který byl připisován dysplazií děložního hrdla. Po dvou týdnech transdermálního užívání DIM počal být ženě perorálně podáván zpracovaný DIM v dávce 50 mg denně. Po dvou měsících perorálního léčení bylo možno prokázat při vyšetření normální děložní hrdlo. V průběhu léčení také nebyly pozorovány žádné nežádoucí vedlejší příznaky.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

40 1. Použití množství poživatel ného indolu, účinného ke snížení nebo prevenci bolesti pri mastalgii pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci mastalgie u jedince s mastalgií nebo jedince ohroženého vznikem mastalgie.
2. Použití podle nároku l, při němž se poživatelný indol volí ze skupiny indol-3-karbinol

45 (13C), diindolylmethan (DIM) a 2-(indol-3-y Imethy 1)-3,3'-diindolylmethan (LTR-1).

- 14CZ 301655 B6
3. Použití podle nároku 1, při němž poživatelným indolem je DIM.
4. Použití podle nároku 3, při němž se DIM uvede do suspenze ve formě mikročástic v matrici škrobového nosiče.
5. Použití podle nároku 1, při němž poživatelným indolem je LTR-1.
6. Použití podle nároku 5, při němž se LTR-1 uvede do suspenze ve formě mikročástic v matrici škrobového nosiče.
7. Použití množství poživatelného indolu, účinného ke snížení nebo prevenci příznaků, spojených s endometriózou pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci endometriózy u jedince s endometriózou nebo jedince ohroženého vznikem endometriózy.

is
8. Použití podle nároku 1, při němž jde o příznaky ze skupiny bolest, dysplasie a koncentrace antigenů Ca-125, zjistitelná v krevním séru.
9. Použití podle nároku 7 nebo 8, při němž se poživatelný indol volí ze skupiny indol—3 grapefruit grapefruitový koncentrát, grapefruitová šťáva nebo koncentrát grapefruitové Šťávy, karbínol

20 (13C), diindolylmethan (DIM) a 2-(indol-3-ylmethyl)-3,3'-diindolylmentan (LTR-1).
10. Použití podle nároku 9, při němž poživatelným indolem je DIM.
11. Použití podle nároku 10, při němž se DIM uvede do suspenze ve formě mikročástic v matrici 25 škrobového nosiče.
12. Použití podle nároku 9, při němž poživatelným indolem je LTR-1.
13. Použití podle nároku 12, pri němž se LTR-1 uvede do suspenze ve formě mikročástic 30 v matrici Škrobového nosiče.
14. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13, pri němž se současně užije grapefruit, grapefruitový koncentrát, grapefruitová šťáva nebo koncentrát grapefruitové šťávy,

35 15. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 14, pri němž se léčivo zpracovává pro orální podání nebo na pilulku nebo tabletu nebo kapsli nebo krém nebo jako liposomový sprej.
17. Prostředek, obsahující množství poživatelného indolu, účinného ke snížení nebo prevenci bolesti při mastalgii nebo ke snížení nebo prevenci příznaků, spojených s endometriózou, zpraco40 váný na krém nebo liposomový sprej.
18. Prostředek podle nároku 17, v němž poživatelným indolem je DIM.
19. Prostředek podle nároku 18, v němž je DIM uveden do suspenze ve formě mikročástic 45 v matrici škrobového nosiče.
20. Prostředek podle nároku 16, dále obsahující grapefruit, grapefruitový koncentrát, grapefruitovou šťávu nebo koncentrát grapefruitové šťávy.