CZ300593B6 - Vakcína proti viru chripky savcu celedi konovitých EIV, použití této vakcíny a souprava tuto vakcínu obsahující - Google Patents

Vakcína proti viru chripky savcu celedi konovitých EIV, použití této vakcíny a souprava tuto vakcínu obsahující Download PDF

Info

Publication number
CZ300593B6
CZ300593B6 CZ0017499A CZ17499A CZ300593B6 CZ 300593 B6 CZ300593 B6 CZ 300593B6 CZ 0017499 A CZ0017499 A CZ 0017499A CZ 17499 A CZ17499 A CZ 17499A CZ 300593 B6 CZ300593 B6 CZ 300593B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
vaccine
eiv
plasmid
equine
sequence
Prior art date
Application number
CZ0017499A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ17499A3 (cs
Inventor
Audonnet@Jean-Christophe
Bouchardon@Annabelle
Riviere@Michel
Original Assignee
Merial
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merial filed Critical Merial
Publication of CZ17499A3 publication Critical patent/CZ17499A3/cs
Publication of CZ300593B6 publication Critical patent/CZ300593B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/205—Rhabdoviridae, e.g. rabies virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
    • A61K39/27—Equine rhinopneumonitis virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/33—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Clostridium (G)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16111—Cytomegalovirus, e.g. human herpesvirus 5
    • C12N2710/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/36011—Togaviridae
    • C12N2770/36111—Alphavirus, e.g. Sindbis virus, VEE, EEE, WEE, Semliki
    • C12N2770/36122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/36011—Togaviridae
    • C12N2770/36111—Alphavirus, e.g. Sindbis virus, VEE, EEE, WEE, Semliki
    • C12N2770/36134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Vakcína proti viru chripky savcu celedi konovitých EIV, jejíž podstata spocívá v tom, že obsahuje alespon jeden plazmid, který obsahuje a exprimuje in vivo v bunce hostitele celedi konovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA nebo EIV NP nebo EIV HA a NP, a farmaceuticky prijatelný nosic, jakož i použití této vakcíny pro výrobu soupravy urcené pro vyvolání imunologické odezvy u savce celedi konovitých a této soupravy jako takové.

Description

(57) Anotace:
Vakcína proti viru chřipky savců čeledi koňovitých EIV, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje alespoň jeden plazmid, který obsahuje a exprimuje ín vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA nebo EIV NP nebo EIV HA a NP, a farmaceuticky přijatelný nosič, jakož i použití této vakcíny pro výrobu soupravy určené pro vyvolání imunologické odezvy u savce čeledi koňovitých a této soupravy jako takové.
Vakcína proti viru chřipky savců čeledi konovitých EIV, použití této vakcíny a souprava tuto vakcínu obsahující
Oblast techniky
Vynález se týká vakcíny proti viru chřipky savců čeledi konovitých EIV, použití této vakcíny pro výrobu soupravy určené pro vyvolání imunologické odezvy u savců čeledi konovitých a této soupravy jako takové.
Dosavadní stav techniky
Patologie koní představuje dosti velkou rozmanitost. Vedle dobře známých dýchacích nemocí, jako je rhinopneumonie a chřipka, jsou koně náchylní, zejména na americkém kontinentě, na různé encefalitidy. Konečně trpí koně také různými jinými chorobami, mezi nimiž lze citovat zejména tetanus, lymfatické onemocnění, zánět tepny koní a v neposlední řadě virus vztekliny.
Podmínky vystavení koní různým patogenním mikroorganismům jsou znásobeny četným převážením koní na velké vzdálenosti po zemi nebo vzduchem, takže riziko nákazy má stoupající tendenci.
Nebo, vezme-li se v úvahu vysoká cena těchto zvířat zejména reproduktivních, jízdních a závodních koní, je z ekonomického hlediska významné kontrolovat co nejvíce rizika nákazy, která vedou k jejich dlouhodobé indispozici nebo ztrátě. Už existuje určité množství vakcín, jejichž účinnost je proměnlivá.
Na rhinopneumonii lichokopytníků, vyvolanou různými kmeny viru koňského oparu (EHV), byly vyvinuty inaktivované podjednotkové vakcíny, které všechny představují určité množství omezení projevující se neúplnou ochranou krátkého trvání a případně problémy škodnosti souvisejícími s použitými pomocnými látkami.
Koňská chřipka představuje také významné onemocnění, kterému se hodlá bránit vakcinací. Používanými vakcínami jsou vakcíny inaktivované nebo podjednotkové, které představují určitou účinnost avšak nejsou nicméně bez problémů, často není ochrana úplná a má zpravidla poměrně krátké trvání, vyžadující jako v případě rhinopneumonie revakcinaci. Jsou také problémy se škodlivostí vakcín.
Zavedeny jsou vakcíny na základě protitetanového anatoxinu a představují nepopiratelnou účinnost.
Existují také vakcíny proti encefalitidám, encefalitidě západní, východní a venezuelské, jejichž účinnost je rovněž málo známá.
Z důvodů jednak ekonomických, jednak racionálností koňských vakcín byly už navrženy formulace vícečetných vakcín k prevenci vůči několika těmto nakažlivým nemocem.
Dosud vyvinuté úsilí se týkalo neaktivovaných vakcín nebo živých vakcín, případně směsí těchto vakcín. Jejich zavedení naráží na problémy vztahu účinnosti a stability. Ve skutečnosti jde o zajištění vztahu mezi různou účinností vakcín se zřetelem na různé použité antigeny nebo se zřetelem na samotné formulace jmenovitě v případech, kde se kombinují neaktivované vakcíny s živými vakcínami. Je také zřejmý problém konzervace takových kombinovaných vakcín a rovněž problém jejich neškodnosti zejména ve spojení s pomocnými prostředky. Obecně jsou takové vakcíny velmi drahé.
- 1 CZ 300593 B6
Tyto formulace ostatně neumožnily spojit tři hlavní účinky, totiž účinek na koňskou chřipku, rhinopneumonii, zejména RHV-1 a EHV 4 a tetanus. Bylo známo například spojení účinků na chřipku a encefalitidu, nebo rhinopneumonii a encefalitidu.
Podle patentových spisů WO-A 90/11092, WO-A 93/19183, WO-A 94/21797 a WO-A 95/20660 se používá nedávno vyvinuté techniky polynukleotidních vakcín. Tvrdí se, že vakcíny používají plazmidu schopného exprese antigenu začleněného do plazmidu v hostitelských buňkách. Navrhují se všechny cesty podávání (například intraperitoneální, intravenosní, intramuskulámí, transkutánní, intradermický a sliznicový). Použít lze rovněž různých vakcinačních prostředků, jako DNA uložených na povrchu částic z lata a určených k proniknutí do kůže zvířete (Tang a kol., Nátuře 356, str. 152 až 154, 1992) a injektáž tekutin umožňujících proniknutí do kůže, svalů, tukových tkání a tkání děložních (Furth a kol. Analytical Bioehemistry 205, str. 365 až 368, 1992).
Polynukleotidové vakcíny mohou vyžívat stejně dobře jak DNA jako takové, tak DNA formulované například na bázi liposomů nebo kationických lipidů.
Polynukleotidové vektory, zahrnující geny HA nebo NP, byly zkoumány na virus chřipky (influenza virus) u myší, u fretek a u kuřat. Žádného poznatku nelze použít u koní.
Pokud jde o tetanus, bylo nedávno oznámeno, že imunizace myši exprimujícím plazmidem s fragmentem C vyvolala koncová netoxická C-oblast tetanového toxinu výskyt seroprotekěních protilátek u myší.
Není dosud možno přenášet přímo poznatky výsledků, získaných u zvířat s malou životností, na ostatní savce a zejména na savce velkých postav.
Ochranu lichokopytníků a zejména koní proti infekčnímu onemocnění je tudíž stále potřeba vylepšovat.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je vakcína proti viru chřipky savců čeledi koňovitých EIV, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje alespoň jeden plazmid, který obsahuje a exprímuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA nebo EIV NP nebo EIV H A a NP, a farmaceuticky přijatelný nosič.
Vakcína výhodně obsahuje plazmid nebo plazmidy, které obsahují a exprimují in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA aNP.
Vakcína výhodně obsahuje plazmid, který obsahuje a exprímuje v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA aNP.
Vakcína obsahuje první plazmid, který obsahuje a exprímuje v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nukleové kyseliny mající sekvenci kódující EIV HA, a druhý plazmid, který obsahuje a exprímuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nukleové kyseliny mající sekvenci kódující EIV NP.
Vakcína výhodně obsahuje plazmid nebo plazmidy, které obsahují a exprimují in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA.
-2CZ 300593 B6
Vakcína obsahuje a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA.
Vakcína výhodně obsahuje a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu 5 nukleové kyseliny mající sekvenci kódující EIV HA.
Vakcína výhodně obsahuje plazmid nebo plazmidy, které obsahují a exprimují in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA z různých kmenů EIV.
Vakcína výhodně obsahuje a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV NP.
Vakcína výhodně obsahuje plazmid, který obsahuje a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi is koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující
EIVNP.
Vakcína výhodně obsahuje plazmid, který obsahuje a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nukleové kyseliny mající sekvenci kódující EIV NP.
Předmětem vynálezu je rovněž použití výše definované vakcíny a vakcíny zvolené ze souboru, zahrnujícího celou živou vakcínu, inaktivovanou celou vakcínu, podjednotkovou vakcínu a rekombinantní vakcínu pro výroby soupravy určené pro vyvolání imunologické odezvy u savce čeledi koňovitých.
Předmětem vynálezu je rovněž použití výše definované vakcíny pro výrobu farmaceutického činidla určeného pro vyvolání imunologické odezvy u savce čeledi koňovitých.
Předmětem vynálezu je konečně souprava, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje (i) vakcínu 30 podle některého z nároků 1 až 11 a (ii) koňskou vakcínu zvolenou ze souboru zahrnujícího celou živou vakcínu, inaktivovanou celou vakcínu, podjednotkovou vakcínu a rekombinantní vakcínu.
V případě účinnosti na chřipku čeledi koňovitých je výhodné použít gen kódující hemaglutidin HA nebo spojení genů kódujících HA a NP. Výhodně se v jedné vakcíně spojuje sekvence HA chřipkového viru a zejména různých kmenů nacházejících se v terénu. Na oplátku zaručuje NP křížovou ochranu a bylo by možné spokojit se se sekvencí jednoho samotného virového kmene.
Formulace vakcíny podle vynálezu může případně ještě přinášet jednu nebo několik jiných účinností vůči jiným nemocem lichokopytníků a jmenovitě účinností viru encefalitidy západní EEV, encefalitidy východní WEV a cnccfali tidy vcnczucl ske VEV s výhodou vuci trém současné.
Mezi účinnostmi mohou rovněž figurovat s výhodou účinnost proti nemoci Lyme, B. burgdorferi tepenného zánětu lichokopytníků (EAV) a vztekliny.
Z genů shora citované encefalitidy se používá genů antigenu C a E2 a s výhodou genu E2 samotného nebo ve spojení obou genů E2 a C.
Se zřetelem na účinnost vůči nemoci Lyme se volí mezi geny OspA, OspB a plOO, s výhodou OspA.
Pro tepenný zánět lichokopytníků se volí geny Ε, M a N samotné nebo spojené. Pro vzteklinu se volí gen G.
Pro formulace vakcíny podle vynálezu lze volit objem dávek 0,1 až 10 ml a zejména 1 až 5 ml.
-3CZ 300593 B6
Dávka obvykle zahrnuje 10 ngaž 1 mg, s výhodou 100 ngaž 500 pg a výhodněji také 1 až 250 pg podle typu plazmidu.
S výhodou se používá prostých plazmidů jednoduše včleněných do vakcinačního nosiče, kterým je obecně například fyziologický roztok (0,9% roztok chloridu sodného), ultračistá voda a pufr TE. Lze ostatně použít všechny formy polynukleotídové vakcíny popsané ve stavu techniky.
Každý plazmid obsahuje promotor schopný zajistit expresi genu začleněného v závislosti na hostitelských buňkách. Obecně je to eukaryotový silný promotor a zejména vyspělý promotor io cytomegaloviru CMV-IE, lidského nebo myšího nebo případně jiného původu, jako krysího, prasečího, morčatového.
Obecněji by mohl být promotor bud1 virového nebo buněčného původu. Jako virový promotor kromě CMV-IE je možno uvést vyspělý nebo opožděný promotor viru SV40 nebo promotor
LTR viru Rousova sarkomu. Může to také být promotor víru, jehož původcem je gen, například promotor genu.
Jako buněčný promotor se uvádí promotor genu cytokostemího, jako je například promotor desminu (Bolmont a kol. Journal of Submicroscopic Cytology and Pathology, 22, str. 117 až 122
1990 a Zbenlin a kol., Gene 78, str. 243 až 254 1989) nebo ještě promotor aktinu.
Jelikož ve stejném plazmidu je obsaženo několik genů, mohou být obsaženy ve stejné transkřípění jednotce nebo ve dvou různých jednotkách.
Vynález se také týká formulací jednoúčinkových vakeín obsahujících jeden nebo několik plazmidů kódujících jeden nebo několik genů, shora popsaných, jednoho z citovaných patologických činidel, jmenovitě rhinopneumonie nebo nemoci Lyme, koňského tepenného zánětu, encefalitidy západní, východní a encefalitidy venezuelské, přičemž geny jsou shora popsané. Tyto formulace mohou zaujímat shora uvedené charakteristiky, pokud jde o volbu genů téhož onemocnění ajejích kombinaci, složení plazmidů, objemů dávky a dávek.
Vynález se také týká způsobu vakcinace lichokopytníků a jmenovitě koní proti infekčním chorobám, který spočívá v podávání účinné dávky formulace s více účinky nebo s jedním účinkem shora popsané vakcíny.
Tento způsob vakcinace zahrnuje podávání jedné nebo několika dávek formulace vakcíny.
Formulace vakeín podle vynálezu se mohou podávat různými způsoby známými obecně k pólynukleotidové vakcinaci a pomocí známých technik podávání. Dosud se dává přednost výhradně int ramusku lární mu podávání.
Vakcinaci lze také provádět intradermiekou cestou pomocí injektoru tekutým nástřikem, s výhodou několika tryskami a zejména pomocí injektoru s injekční hlavicí opatřenou několika otvory nebo tryskami, jmenovitě s 5 až 6 otvory nebo tryskami například přístrojem PIGJET (vyráběný a obchodní produkt společnosti Endoscopic, Laons, Francie).
Objem dávky pro takový přístroj se s výhodou redukuje na 0,1 až 0,9 ml, zejména 0,2 až 0,6 ml a nejvýhodnčji 0,4 až 0,5 ml, přičemž se objem může podávat v jedné nebo několika, s výhodou 2 aplikacích.
Shora uvedené jednoúčinkové vakcíny mohou být použity zejména k přípravě víceúčinkových vakeín podle vynálezu.
-4CZ 300593 B6
Formulace jednoúčinkové vakcíny mohou být využity také ve spojení s vakcínou jiného typu (zcela živou nebo inaktivovanou, nebo inaktivovanou, rekombinantní, podjednotkovou) se zřetelem na shora popsanou vakeínu.
Vynález se také týká použití různých plazmidu podle vynálezu k výrobě vakcíny určené k vakcinaci prvně vakcinovaných koní alespoň první klasickou vakcínou (jednoúčinkovou nebo víceúěinkovou) typu dosavadního stavu techniky volenou jmenovitě ze souboru zahrnujícího dřívější živou vakeínu, dřívější inaktivovanou vakeínu, podjednotkovou vakeínu, rekombinantní vakeínu, přičemž první vakeína obsahuje nebo může exprimovat alespoň jeden kódovaný antigen alespoň io jedním plazmidem nebo alespoň jedním antigenem zajištujícím křížovou ochranu.
Výrazně má polynukleotidová vakeína účinek, který se dá vyjádřit zesílením imunitní odezvy a založení dlouhodobé imunity.
Obecně vakcíny první vakcinace mohou být voleny z obchodně dostupných vakeín od výrobců veterinárních vakeín.
Při jednom výhodném způsobu podle vynálezu se podává zvířeti napřed účinná dávka vakcíny klasického typu, jmenovitě neaktivované, živé, utlumené nebo rekombinantní, nebo také vakcíny podjednotkové k zajištění primo-vakcinace a s výhodou s prodlením 2 až 4 týdnů se zajistí podání víceúčinkové nebo monoúčinkové podle vynálezu.
Vynález se týká také vakcinačního kitu obsahujícího vakeínu první vakcinace jak dále popsáno a formulaci vakcíny podle vynálezu pro porovnání. Pojednává také o formulaci vakcíny podle vynálezu doprovázené poznámkou o použití této formulace jako porovnání se shora popsanou primo-vakcinací.
Vynález zahrnuje také způsob přípravy formulace vakcíny podle tohoto vynálezu.
Vynález objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení pomocí přiložených obrázků.
Seznam obrázků
Obr. 1: Plazmid pVR1012
Obr.2 Plazmid PAB042
Obr.3 Plazmid PAB031
Obr.4 Plazmid pAB013
Obr. 5 Plazmid pAB032
Obr. 6 Plazmid pAB043
Obr. 7 Plazmid pAB033
Obr. 8 Sekvence genu HA chřipky lichokopytníků kmen Fontainebleau
Obr.9 Plazmid pAB099
Obr. 10 Plazmid pAB085
Obr. 11 Plazmid pAB084
Obr. 12 Plazmid pAB070
Obr. 13 Plazmid pAB017
Obr. 14 Plazmid pAB094
Obr. 15 Plazmid pAB093
Obr. 16 Plazmid pAB096
Obr. 17 Plazmid pAB095
Obr. 18 Plazmid pAB098
-5CZ 300593 B6
Obr. 19 Plazmid pAB097 Obr. 20 Plazmid pAB041
Seznam sekvencí SEQ ID č.
SEQ ID č. 1:
SEQ IDč. 2:
SEQ IDČ. 3:
SEQ IDč.4:
SEQ ID č. 5:
SEQ IDč. 6:
SEQ IDČ. 7:
SEQ IDč. 8:
SEQ IDČ.9:
SEQ IDč. 10
SEQ IDČ. 11
SEQ IDč. 12
SEQ IDč. 13
SEQ IDč. 14
SEQ IDČ. 15
SEQ IDč. 16
SEQ IDč. 17
SEQ IDČ. 18
SEQ IDč. 19
SEQ ID č. 20
SEQ IDč. 21
SEQ ID č. 22
SEQ IDč. 23
SEQ IDč. 24
SEQ IDč. 25
SEQ IDČ. 26
SEQ ID č. 27
SEQ IDČ. 28
SEQ IDč. 29
SEQ IDČ. 30
SEQ IDČ.31
SEQ IDč. 32
SEQ IDč. 33
SEQ IDč. 34
SEQ IDč. 35
SEQ IDč. 36
oligonukleotid AB013 oligonukleotid AB014 oligonukleotid AB071 oligonukleotid AB074 oligonukleotid AB030 oligonukleotid AB031 oligonukleotid AB075 oligonukleotid AB076 oligonukleotid AB015 oligonukleotid AB016 oligonukleotid AB077 oligonukleotid AB078 oligonukleotid AB186 oligonukleotid AB 187 sekvence genu HA chřipky lichokopytníků (kmen Fontainebleau) oligonukleotid AB156 oligonukleotid AB 159 oligonukleotid AB157 oligonukleotid AB128 oligonukleotid AB 129 oligonukleotid ABO38 oligonukleotid AB039 oligonukleotid AB176 oligonukleotid AB177 oligonukleotid AB174 oligonukleotid AB175 oligonukleotid AB180 oligonukleotid AB181 oligonukleotid AB178 oligonukleotid AB179 oligonukleotid AB184 oligonukleotid AB185 oligonukleotid AB182 oligonukleotid AB183 oligonukleotid AB011 oligonukleotid AB012
-6CZ 300593 B6
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Kultivace virů
Viry se pěstují v buněčném systému využitém až do získání cytopathického jevu. Buněčné systémy k použití pro každý virus jsou pracovníkům v oboru dobře známy. Stručně řečeno, buňky ío citlivé na použitý virus, pěstované v minimálně potřebném prostředí Eagle (prostředí „MEM“) nebo vjiném vhodném prostředí, se očkují studovaným virovým kmenem za použití vícenásobku infekce 1. Infikované buňky se tedy inkubují při teplotě 37 °C po dobu potřebnou k výskytu úplného cytopathického jevu (nejméně 36 hodin).
Příklad 2
Kultivace bakterií
Tetanus: Bakterie se kultivují ve vhodném prostředí a za podmínek dobře známých pracovníkům v oboru k získání bakteriální biomasy postačující k extrakci genetického materiálu. Tato extrakce se provádí technikami popsanými v literatuře (J. Sambrook a kol., Molecular Cloning; A Laboratory Manual 2. vydání. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 1989).
Kmeny Borrelia burgdorferi se kultivují ve vhodném prostředí za podmínek dobře známých pracovníkům v oboru. Tyto podmínky a prostředí jsou popsány v literatuře (A. Barbour, J. Biol. Med. 57, str. 71 až 75, 1984). Extrakce bakteriální DNA se provádí za podmínek, které popsal W. Simpson a kol. (Infect. Immun. 58, str. 847 až 853, 1990). Použitá technika je popsána v literatuře (J. Sambrook a kol., Molecular Cloning: A Laboratory Manual 2. vydání. Cold Spring
Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 1989).
Příklad 3
Extrakce virových genomických DNA
Po kultivaci se supernatant a lýzované buňky shromáždí a celá virová suspenze se odstředí při 1000 g během 10 minut při teplotě +4 °C k vyloučení buněčných úlomků. Pak se virové částice podrobí ultraodstředění při 400 000 g po dobu jedné hodiny pří teplotě + 4 °C. Sraženina se vyjme do mi ni mál ního množství pufru (Tris 10 mM, EDTA 1 mM). Tato koncentrovaná virová suspenze se zpracuje proteinázou K (100 pg/ml konečný) v přítomnosti dodecylsulfátu sodného (SDS) (0,5% konečný) během dvou hodin při teplotě 37 °C. Virová DNA se pak extrahuje směsí fenol/chloroform a pak se vysráží se dvěma objemy absolutního ethanolu. Nechá se stát přes noc při teplotě -20 °C, DNA se odstředí při 10 000 g během 15 minut při teplotě + 4 °C. Sraženina
DNA se suší a vyjme se do minimálního množství sterilní ultračisté vody. Štěpí se s restrikčními enzymy.
Příklad 4
Izolování genomických virových RNA
Virus na RNA se čistí způsoby dobře známými pro pracovníky v oboru. Genomické virové RNA se pak izolují za použití extrakční techniky „thiokyanát guanidinu/fenol-chloroform“, kterou popsal P. Chomczynski aN. Sacchí (Anal.Biochem. 162, str. 156 až 159, 1987).
-7CZ 300593 B6
Příklad 5
Technika molekulární biologie
Všechny konstrukce plazmidů se uskutečnily standardní technikou molekulární biologie kterou popsal J. Sambrook a kol. (Molecular Cloning: A Laboratora Manual, 2. vydání, nakladatel Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York 1989). Všechny restrikční fragmenty pro tento vynález byly izolovány pomocí kitu „Geneclean“ (BIO 101 Inc. La Jolla, CA).
Příklad 6
Technika RT-PCR
Specifické oligonukleotidy (nesoucí na koncích 5' restrikční místa k usnadnění vnějšího klonování zesílených fragmentů) se syntetizují tak, že pokrývají úplně kódované oblasti genů před zesílením (viz specifické příklady). Polymerázová řetězová reakce (PCR) spřažená s reverzní transkripcí (RT) se uskutečňuje standardními technikami (J. Sambrook a kol. (Molecular CIo20 ning: A Laboratora Manual, 2. vydání, nakladatel Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York 1989). Každá reakce RT-PCR se provede dvojicí specifických zesilovačů a při použití matrice RNA genomického virového extraktu. Amplifíkované komplementární DNA se vyjmou do isoamylové směsi fenol/chloroform/alkohol (25:24:1) před štěpením restrikčními enzymy.
Příklad 7
Plazmid pVR1012
Plazmid pVR1012 (obr. 1) se získá podle Vical Inc. San Diego, CA, USA. Konstrukci popsal J. Hartikka a kol. (Human Gene Therapy, 7, str. 1205 až 1217, 1996).
Příklad 8
Konstrukce plazmidu pAB042 (gen EHV-lgB)
Reakce PCR se provádí s genomickou DNA koňského oparového viru typu 1 (EHV-1) (kmen 40 Kentucky D) (P. Guo a kol., J. Virol 64, str. 2399 až 2406, 1990) a s následujícími oligonukleotidy:
ABO13 (32 mer) (SEQ ID č.1)
5'AAAACTGCAGCCGTCATGTCCTCTGGTTGCCG 3'
ABO14 (39 mer) (SEQ ID č.2)
5'ATAAGAAGCGGCCGCTAAACATGTTTAAACCATTTTTTC 3' k izolaci genu kódujícího glykoprotein gB (EHV-1 gB) ve formě fragmentu Pstl-Notl. Po vyčištění se produkt PCR 2981 pb v přítomnosti Pstl aNotl k izolování fragmentu Pstl-Notl 2959 pb.
Tento fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předem štěpeným v přítomnosti Pstl a Notl, k získání plazmidu pAB042 (7841 pb) (obr. 2).
-8CZ 300593 B6
Příklad 9
Konstrukce plazmídu pAB031 (gen EHV-4gB)
Reakce PCR se provádí s genomickou DNA koňského oparového viru typu 4 (EHV-4) (kmen
1942) (M. Riggio a kol., J. Virol. 63, str. 1123 až 1 133, 1989) a s následujícími o ligonukleotidy:
AB071 (38 mer) (SEQ ID č.3) ' AAAACTGCAGACATGTCCACTTGTTGCCGTGCTATTTG 3'
ABO74 (36 mer) (SEQ ID č,4)
5'CTAGTCTAGATTAAACCATTTTTTCGCTTTCCATGG 3 k amplifikaci fragmentu 2949 pb obsahujícího gen kódující glykoprotein gB EHV-4 ve formě fragmentu Pstl-Xbal. Po vyčištění se produkt PCR štěpí v přítomnosti Pstl a Xbal k získání fragio mentu Pstl-Xbal 2931 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předběžně štěpeným Pstl a Xbal k získání plazmídu pAB031 (7806 pb) (obr. č. 3).
Příklad 10
Konstrukce plazmídu pAB013 (gen EHV-IgD)
Reakce PCR se provádí s genomickou DNA koňského oparového viru typu 1 (EHV-1) (kmen Kentucky D) (J.C. Audonnet a kol., J. Gen. Virol. 71 str. 2969 až 2978, 1990) a s následujícími oligonukleotidy:
ABO3O (32 mer) (SEQ ID č.5)
5'AAAACTGCAGCATGTCTACCTTCAAGCTTATG 3'
ABO31 (37 mer) (SEQ ID č.6)
5'CGCGGATCCTTACGGAAGCTGGGTATATTTAACATCC 3 k izolování genu kódujícího glykoprotein gD (EHV-1 gD) ve formě fragmentu Pstl-BamHI. Po vyčištění se produkt PCR 1228 pb štěpí v přítomnosti Pstl a BamHl k izolování fragmentu Pstl-BamHI 1211 pb. Fragmente se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předběžně štěpeného
Pstl a BamHl k získání plazmídu pAB013 (6070 pb) (obr. č. 4).
Příklad 11
Konstrukce plazmídu pAB032 (gen EHV^4 gD)
Reakce PCR se provádí s genomickou DNA koňského oparového viru typu 4 (EHV—4) (A. Culíinane a kol., J. Gen. Virol. 74, str. 1959 až 1964, 1993) a s následujícími oligonukleotidy:
ABO75 (33 mer) (SEQ ID č.7)
5AAAACTGCAGATATGTCTACCTTCAAGCCTATG 3 *
ABO7Ó (33 ner) (SEQ ID £.8)
5'CGCGGATCCTTACGGAAGCTGAGTATATTTGAC 3' k izolování genu kódujícího glykoprotein gD EHV-4 (EHV—4gD) ve formě fragmentu PstlBamHI, Po vyčištění se produkt PCR 1230 pb štěpí v přítomnosti Pstl a BamHl k izolování fragmentu Pstl-BamHI 1212 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předběžně štěpeného v přítomnosti Pstl a BamHl k získání plazmídu pAB032 (6071 pb) (obr. č. 5).
-9CZ 300593 B6
Příklad 12
Konstrukce plazmidů pAB043 (chřipkový koňský gen HA kmen Praha)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 v s genomickou DNA koňského viru chřipky (Equine influenza Virus nebo EIV) (kmen H7N7 Praha) (J. McCauley číslo dostupnosti sekvence v genové bance - X62552), připraveného způsobem popsaným v příkladu č. 4 a s následujícími oligonukleotidy:
ABO15 (36 mer) (SEQ ID č.9)
5’ACGCGTCGACATGAACACTCAAATTCTAATATTAGC 3'
ABO16 (35 mer) (SEQ ID č.10) ,θ 5CGCGGATCCCTTATATACAAATAGTGCCACCGCATG 3' k izolování genu kódujícího glykoprotein HA koňského viru chřipky ve formě fragmentu SallBamHI. Po vyčištění se produkt RT PCR 1733 pb štěpí v přítomnosti Sáli a BamHI k izolování fragmentu Sall-BamHI 1720 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předběžně štěpeného v přítomnosti Sáli a BamHI k získání plazmidů pAB043 (6588 pb) (obr. č. 6).
Příklad 13
Konstrukce plazmidu pAB033 (koňského chřipkový gen HA kmen Suffolk)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genom ickou DNA koňského viru chřipky (EIV) (kmen Suffolk) (M. Binns číslo dostupnosti sekvence v genové bance = X68437), připraveného způsobem popsaným v příkladu č. 4 a s následujícími oligonukleotidy: ABO77 (33 mer) (SEQ ID č.ll)
ACGCGTCGACGCATGAAGACAACCATTATTTTG 3'
ABO78 (34 mer) (SEQ ID č.12)
5'CGCGGATCCTCAAATGCAAATGTTGCATCTGATG 3' k izolování genu kódujícího glykoprotein HA koňského viru chřipky ve formč fragmentu SallBamHI. Po vyčištění se produkt RT PCR 1729 pb štěpí v přítomnosti Sáli a BamHI k izolování fragmentu Sall-BamHI 1717 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předběžně štěpeného v přítomnosti Sáli a BamHI k získání plazmidu pABO33 (6584 pb) (obr. č. 7).
Příklad 14
Konstrukce plazmidu pAB099 (koňského chřipkový gen HA kmen Fontainebleau)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genomickou RNA koňského viru chřipky (EIV) (kmen Fontainebleau), připraveného podle příkladu 4 as následujícími oligonukleotidy:
AB1S6 (32 mer) (SÉQ ID č.13)
5'TTTGCGGCCGCATGAAGACAACCATTATTTTG 3'
AB1S7 (35 mer) (SEQ ID Č.14)
5'TTTGCGGCCGCTTACTCAAATGCAAATGTTGCATC 3'
- 10CZ 300593 B6 k izolování genu kódujícího glykoproteín HA viru koňské chřipky (kmen Fontainebleau) (obr. č. 8 a SEQ ID č. 15) ve formě fragmentu Notl-Notl. Po vyčištění se produkt RT PCR 1724 pb štěpí v přítomnosti Notl k izolování fragmentu Notl-Notl 1710 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předběžně štěpeného v přítomnosti Notl k získání plazmidu pAB099 (6625 pb), který obsahuje gen HA (chřipkový koňský kmen Fontainebleau) ve správné orientaci vůči promotoru (obr. č. 9).
Příklad 15 io
Konstrukce plazmidu pAB085 (chřipkový koňský gen NP kmen Praha)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genomickou DNA viru koňské chřipky (EIV) (kmen H7N7 Praha) (O. Gorman a kol., J. Virol. 65. str. 3704 až 3714, 1991), is připraveného způsobem popsaným v příkladu č. 4 a s následujícími oligonukleotidy:
AB156 (32 mer) (SEQ ID č.16)
5CCGGTCGACATGGCGTCTCAAGGCACCAAACG 3'
AB159 (34 mer) (SEQ ID ¢.17)
5'CGCGGATCCTTAATTGTCAAACTCTTCTGCATTG 3 * k izolování genu kódujícího glykoproteín NP viru koňské chřipky ve formě fragmentu Sall— BamHI. Po vyčištění se produkt RT PCR 1515 pb štěpí v přítomnosti Sall a BamHI k izolování fragmentu Sall-BamHI 1503 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předběžně štěpeného Sall a BamHIb k získání plazmidu pAB085 (6371 pb) (obr. č. 10).
Příklad 16
Konstrukce plazmidu pAB084 (chřipkový koňský gen NP kmen Jillin)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genomickou DNA viru koňské chřipky (EIV) (kmen H3N8 Jillin) (O. Gorman a kol., J. Virol. 65. str. 3704 až 3714, 1991), připraveného způsobem popsaným v příkladu č. 4 a s následujícími oligonukleotidy:
AB156 (32 mer) (SEQ ID č.16)
5'CCGGTCGACATGGCGTCTCAAGGCACCAAACG 3'
AB157 (34 mer) (SEQ ID č.18)
5'CGCGGATCCTTAATTGTCATATTCCTCTGCATTG 3' k izolování genu kódujícího glykoproteín NP viru koňské chřipky ve formě fragmentu SallBamHI. Po vyčištění se produkt RT PCR 1515 pb štěpí pomocí Sall a BamHI k izolování fragmentu Sall-BamHI 1503 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předběžně štěpeného v přítomnosti Sall a BamHI k získání plazmidu pAB084 (6371 pb) (obr. č. 11).
Příklad 17
Konstrukce plazmidu pAB070 (podjednotkový gen C tetanového toxinu)
Reakce PCR se provádí s genomickou DNA Clostridium tetani (kmen CN3911) (J. Fairweather a kol., J, Bact. 165, str. 21 až 27, 1986), připravenou způsobem popsaným v příkladu č. 2 a s následujícími oligonukleotidy:
-11 CZ 300593 B6
AB128 (34 mer) (SEQ ID č,19)
5'AAACTGCAGATGAAAAATCTGGATTGTTGGGTTG 3
AB129 (30 mer) (SEQ ID č.20)
TTTGGATCCTTAATCATTTGTCCATCCTTC 3' k izolování sekvence kódující podjednotku C toxinu Clostridium tetani ve formě fragmentu PstlBamHI, Po vyčištění se produkt PCR 1377 pb štěpí v přítomnosti Pstl a BamHI k izolování fragmentu Pstl-BamHI 1361 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předběžně štěpeného v přítomnosti Pstl a BamHI k získání plazmidu pAB070 (6219 pb) (obr. č. 12).
Příklad 18 io Konstrukce plazmidu pABOl 7 (gen ospA Borrelia burgdorferi)
Reakce PCR se provádí s genomickou ADNA Borrelia burgdorferi (kmen B31) (S. Bergstrom a kol., Mol. Microbiol 3, str. 479 až 486, 1989), připravenou způsobem popsaným v příkladu č. 2 a s následujícími oligonukleotidy:
ABO38 (37 mer) (SEQ ID č.21)
5ACGCGTCGACTATGAAAAAATATTTATTGGGAATAGG 3 '
ABO39 (34 mer) (SEQ ID č.22) 15 5CGCGGATCCCTTATTTTAAAGCGTTTTTAATTTC 3' k izolování genu kódujícího protein membrány OspA ve formě fragmentu SalI-BamHI. Po vyčištění se produkt PCR 842 pb štěpí pomocí Sáli a BamHI k izolování fragmentu SalI-BamHI 829 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7) předběžně štěpeného v přítomnosti Sáli a BamHI k získání plazmidu PABOl7 (5698 pb) (obr. č. 13).
Příklad 19
Konstrukce plazmidu pAB094 (gen E2 viru východní encefalitidy)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genomickou RNA viru východní encefalitidy (EEV) (kmen North America 82V2137) (S. Weaver a kol., Virology 197, str. 375 až 390, 1993), připraveného způsobem popsaným v příkladu č. 4 a s následujícími oligonukleotidy: AB176 (34 mer) (SEQ ID č.23)
5'AAACTGCAGATGGATTTGGACACTCATTTCACCC 3
AB177 (44 mer) (SEQ ID č.24)
5'CGCGGATCCTCAATAAAAATCATGCCCTCGTCGGCTTAATGCAG 3' k izolování genu kódujícího glykoprotein E2 EEV ve formě fragmentu Pstl-BamHI. Po vyčištění se produkt RT-PCR 1294 pb štěpí v přítomnosti Pstl a BamHI k izolování fragmentu PstlBamHI 1278 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7), předběžně štěpeného v přítomnosti Pstl a BamHI k získání plazmidu pAB094 (6136 pb) (obr. č. 14).
- 12 CZ 300593 B6
Příklad 20
Konstrukce plazmidu pAB093 (gen C viru východní encefalitidy)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genomickou RNA viru východní encefalitidy (EEV) (kmen North America 82V2137) (S.Weaver a kol., Virology 197, str. 375 až 390, 1993), připraveného způsobem popsaným v příkladu č. 4 a s následujícími oligonukleotidy:
AB174 (33 mer) (SEQ ID c.25)
5AAACTGCAGATGTTCCCATACCCTACACTTAAC 3*
AB175 (45 mer) (SEQ ID £.26)
5'TGAAGATCTTCAATAAAAATCACCATGGCTCTGACCCCTCTGGTG 3' io k izolování genu kódujícího protein kapsidu C (EEV C) ve formě fragmentu Pstl—BglII- Po vyčištění se produkt RT-PCR 801 pb štěpí v přítomnosti Pstl a BglII k izolování fragmentu PstlBglII 785 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7), předběžně štěpeného v přítomnosti Pstl a BglII k získání plazmidu pAB093 (5650 pb) (obr. č. 15).
Příklad 21
Konstrukce plazmidu pAB096 (gen E2 viru západní encefalitidy)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genomickou RNA viru západní encefalitidy (WEV) (kmen BSF1703) (C. Hahn a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. Sp. st. a., 85, str. 5997 až 6001, 1988), připraveného způsobem popsaným v příkladu ě. 4 a s následujícími oligonukleotidy:
AB1SO (35 mer) (SEQ ID č.27)
5'ACGCGTCGACATGAGCATTACCGATGACTTCACAC 3
AB181 (44 mer) (SEQ ID c.28)
5'CGCGGATCCTCAATAAAAATCAAGCGTTGGTTGGCCGAATACAG 3' k izolování genu kódujícího glykoprotein E2 WEV ve formě fragmentu SalI-BamHI. Po vyčištění se produkt RT-PCR 1304 pb štěpí v přítomnosti Sáli a BamHI k izolování fragmentu Sáli— BamHI 1291 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad č. 7), předběžně štěpeného v přítomnosti Sáli a BamHI k získání plazmidu pAB096 (6159 pb) (obr. č. 16).
Příklad 22
Konstrukce plazmidu pAB095 (gen C viru západní encefalitidy)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genomickou RNA viru západní encefalitidy (WEV) (kmen BSF1703) (C. Hahn a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. Sp. st. a. 85, str. 5997 až 6001, 1988), připraveného způsobem popsaným v příkladu č. 4 a s následujícími oligonukleotidy:
AB178 (34 mer) (SEQ ID č.29)
5'ACGCGTCGACATGTTTCCATACCCTCAGCTGAAC 3'
AB179 (44 mer) (SEQ ID Č.3O) 'CGCGGATCCTCAATAAAAATCACCACGGTTCAGAACCTTCGGGG 3 '
- 13CZ 300593 B6 k izolování genu kódujícího protein kapsidu C viru WEV ve formě fragmentu SalI-BamHI. Po vyčištění se produkt RT-PCR 809 pb štěpí v přítomnosti Sáli a BamHI k izolování fragmentu SalI-BamHI 796 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad 7), předběžně štěpeného v přítomnosti Sáli a BamHI k získání plazmidů pAB095 (5664 pb) (obr. č. 17).
Příklad 23
Konstrukce plazmidů pAB098 (gen E2 viru venezuelské encefalitidy)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genomickou RNA viru venezuelské encefalitidy (VEV) (kmen P676 (typ IC)) (R. Kinney a kol., Virology 191, str. 569 až 580, 1992), připraveného způsobem popsaným v příkladu č. 4 a s následujícími oligonukleotidy: AB184 (35 mer) (SEQ ID č,3l)
5'ACGCGTCGACATGTCCACCGAGGAGCTGTTTAAGG 3'
AB185 (44 mer) (SEQ ID č,32)
5'CGCGGATCCTCAATAAAAATCAGGCCCGGGCAGTGCGGGCGCAG 3 ' k izolování genu kódujícího glykoproteinprotein E2 viru VEV ve formě fragmentu SalI-BamHI. Po vyčištění se produkt RT-PCR 1304 pb štěpí v přítomnosti Sáli a BamHI k izolování fragmentu SalI-BamHI 1291 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad č. 7), předběžně štěpeného v přítomnosti Sáli a BamHI k získání plazmidů pAB098 (6159 pb) (obr. č. 18).
Příklad 24
Konstrukce plazmidů pAB097 (gen C viru venezuelské encefalitidy)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genomickou RNA viru venezuelské encefalitidy (VEV) (kmen P676 (typ IC)) (R. Kinney a kol., Virology 191, str. 569 až 580, 1992), připraveného způsobem popsaným v příkladu č. 4 a s následujícími oligonukleotidy:
AB182 (30 mer) (SEQ ID č.33)
5'AAACTGCAGATGTTCCCGTTCCAGCCAATG 3 '
AB183 (45 mer) (SEQ ID č.34) ' CGCGGATCCTCAATAAAAATCACCATTGCTCGCAGTTCTCCGGAG 3 ' k izolování genu kódujícího protein kapsidu C viru VEV vc formě fragmentu Pstl-BamHI. Po vyčištění se produkt RT-PCR 856 pb štěpí v přítomnosti Pstl a BamHI k izolování fragmentu Pstl-BamHI 839 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad č. 7), předběžně štěpeného Pstl a BamHI k získání plazmidů pAB097 (5698 pb) (obr. č. 19).
Příklad 25
Konstrukce plazmidů pAB041 (gen G víru vztekliny)
Reakce RT-PCR se provádí způsobem popsaným v příkladu 6 s genomickou RNA viru vztekliny (kmen ERA) (A. Anilionis a kol., Nátuře 294, str. 275 až 278, 1981), připraveného způsobem popsaným v příkladu č. 4 a s následujícími oligonukleotidy:
- 14 CZ 300593 B6
ABO11 {33 mer) (SEQ ID č.35)
5'AAAACTGCAGAGATGGTTCCTCAGGCTCTCCTG 3'
ABO12 <34 mer) (SEQ ID č.36)
5'CGCGGATCCTCACAGTCTGGTCTCACCCCCACTC 3' k amplifikaei fragmentu 1589 pb obsahujícího gen kódující protein G viru vztekliny. Po vyčištění se produkt RT-PCR štěpí v přítomnosti Pstl a BamHI k získání fragmentu Pstl-BamHI 1578 pb. Fragment se liguje do vektoru pVR1012 (příklad č. 7), předběžně štěpeného v přítomnosti Pstl a BamHI k získání plazmidu pAB041 (6437 pb) (obr. ě. 20).
Příklad 26 io Příprava a čištění plazmidu
K přípravě plazmidů, určených k vakcinaei zvířat, je možno použít veškeré techniky dovolující získat suspenzi vyčištěných plazmidů převážně ve formě supersvinuté. Tyto techniky jsou pracovníkům v oboru dobře známy. Citovat lze zejména techniku alkalické lýze následované dvakrát po sobě následujícím ultraodstředěním pod gradientem chloridu česného v přítomnosti bromidu ethidium, jak je popsal J. Sambrook a kol. (Moleeular Cloning: A Laboratory Manual, 2. vydání, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York 1989). Lze se též orientovat na patentové spisy PCT WO 95/21250 a PCT WO 96/02658, které popisují způsoby průmyslové výroby plazmidů použitelných k vakcinaei. Pro účely výroby vakeín (viz příklad 17), jsou vyěiš20 těné plazmidy resuspendovány způsobem k získání vysoce koncentrovaných roztoků (více než 2 mg/ml) vhodných ke skladování. K tomu jsou plazmidy resuspendovány bud1 v ultraěisté vodě, nebo v pufru TE (Tris-HCl 10 mM, EDTA 1 mM, pH 8).
Příklad 27
Výroba asociovaných vakeín
Různé plazmidy, potřebné k výrobě asociované vakcíny, se smísí z jejich koncentrovaných rozto30 ků (příklad 16). Smísení se provede tak, aby konečná koncentrace každého plazmidu odpovídala účinné dávce každého plazmidu. Použitelnými roztoky k nastavení konečné koncentrace vakcíny mohou být buď 0,9% roztok chloridu sodného, nebo pufr PBS. K výrobě vakeín přicházejí v úvahu také zvláštní formulace, jako jsou liposomy a kati on to vé lipidy.
Příklad 28
Vakcinace koní
Koně se vakcinují dávkami 100, 250 nebo 500 pg na plazmid.
Injektovat se dá intramuskulárně injekční stříkačkou do krčních svalů. V tomto případě jsou vakcinační dávky podávány ve množství 2 ml. Injektovat lze také intradermicky za použití tryskového kapalinového injekčního přístroje (bez injekční jehly) dodávajícího 0,2 ml v 5 místech (0,04 ml na jedno místo) (například přístrojem „PIGJET“). V tomto případě jsou dávky vakcíny podávány v objemech 0,2 nebo 0,4 ml, což odpovídá jednomu nebo dvěma podáním. Pokud se provádějí dvě po sobě následující podání pomocí přístroje PIGJET, provádějí se posunutým způsobem tak, že dvě zóny injektáže jsou od sebe vzdáleny přibližně 1 až 2 cm.
- 15 CZ 300593 B6
Průmyslová využitelnost
Složení vakcíny pro ošetřování koní napadených různým virovým onemocněním a k prevenci takových onemocnění.

Claims (14)

PATENTOVÉ NÁROKY io
1. Vakcína proti viru chřipky savců čeledi koňovitých EIV, vyznačená tím, že obsahuje alespoň jeden plazmid, který obsahuje a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV
15 HA nebo EIV NP nebo EIV HA a NP, a farmaceuticky přijatelný nosič.
2. Vakcína podle nároku 1, vyznačená tím, že obsahuje plazmid nebo plazmidy, které obsahují a exprimují in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA a NP.
3. Vakcína podle nároku 2, vyznačená tím, že obsahuje plazmid, který obsahuje a exprimuje v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA aNP.
25
4. Vakcína podle nároku 1, vyznačená tím, že obsahuje první plazmid, který obsahuje a exprimuje v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nukleové kyseliny mající sekvenci kódující EIV HA, a druhý plazmid, který obsahuje a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nukleové kyseliny mající sekvenci kódující EIV NP.
30
5. Vakcína podle nároku 1, vyznačená tím, že obsahuje plazmid nebo plazmidy, které obsahují a exprimují in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA.
6. Vakcína podle nároku 5, vyznačená tím, že obsahuje a exprimuje in vivo v buňce
35 hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA.
7. Vakcína podle nároku 5, vyznačená tím, že obsahuje a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nukleové kyseliny mající sekvenci kódující EIV HA.
8. Vakcína podle nároku 1, vyznačená tím, že obsahuje plazmid nebo plazmidy, které obsahují a exprimují in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV HA z různých kmenů EIV.
45
9. Vakcína podle nároku 1, vyznačená tím, že obsahuje a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV NP.
10, Vakcína podle nároku9, vyznačená tím, že obsahuje plazmid, který obsahuje
50 a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nebo molekuly nukleové kyseliny mající sekvenci nebo sekvence kódující EIV NP.
11. Vakcína podle nároku 9, vyznačená tím, že obsahuje plazmid, který obsahuje a exprimuje in vivo v buňce hostitele čeledi koňovitých molekulu nukleové kyseliny mající
55 sekvenci kódující EIV NP.
- 16CZ 300593 B6
12. Použití vakcíny podle některého z nároků 1 až 11 a vakcíny zvolené ze souboru, zahrnujícího celou živou vakcínu, inaktivovanou celou vakcínu, podjednotkovou vakcínu a rekombinantní vakcínu pro výrobu soupravy určené pro vyvolání imunologické odezvy u savce čeledi koňovi5 tých.
13. Použití vakcíny podle některého z nároků 1 až 11 pro výrobu farmaceutického činidla určeného pro vyvolání imunologické odezvy u savce čeledi koňovitých.
io
14. Souprava, vyznačená tím, že obsahuje (i) vakcínu podle některého z nároků 1 až 11 a (ii) koňskou vakcínu zvolenou ze souboru zahrnujícího celou živou vakcínu, inaktivovanou celou vakcínu, podjednotkovou vakcínu a rekombinantní vakcínu.
CZ0017499A 1996-07-19 1997-07-15 Vakcína proti viru chripky savcu celedi konovitých EIV, použití této vakcíny a souprava tuto vakcínu obsahující CZ300593B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9609400A FR2751226B1 (fr) 1996-07-19 1996-07-19 Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies du cheval

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ17499A3 CZ17499A3 (cs) 1999-05-12
CZ300593B6 true CZ300593B6 (cs) 2009-06-24

Family

ID=9494494

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0017499A CZ300593B6 (cs) 1996-07-19 1997-07-15 Vakcína proti viru chripky savcu celedi konovitých EIV, použití této vakcíny a souprava tuto vakcínu obsahující
CZ20080390A CZ301365B6 (cs) 1996-07-19 1997-07-15 Imunogenní kompozice pro vyvolání u savce celedi konovitých imunologické odezvy proti viru rinopneumonitidy, použití této kompozice pro výrobu léciva a souprava obsahující tuto kompozici

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20080390A CZ301365B6 (cs) 1996-07-19 1997-07-15 Imunogenní kompozice pro vyvolání u savce celedi konovitých imunologické odezvy proti viru rinopneumonitidy, použití této kompozice pro výrobu léciva a souprava obsahující tuto kompozici

Country Status (13)

Country Link
US (2) US6207166B1 (cs)
EP (2) EP1647281A3 (cs)
JP (2) JP2000516199A (cs)
AR (2) AR009947A1 (cs)
AU (1) AU735372B2 (cs)
BR (1) BR9710502A (cs)
CA (2) CA2260858C (cs)
CZ (2) CZ300593B6 (cs)
DE (1) DE69734778T2 (cs)
FR (1) FR2751226B1 (cs)
NZ (1) NZ333754A (cs)
PL (1) PL188409B1 (cs)
WO (1) WO1998003198A1 (cs)

Families Citing this family (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2751226B1 (fr) * 1996-07-19 1998-11-27 Rhone Merieux Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies du cheval
FR2775601B1 (fr) * 1998-03-03 2001-09-21 Merial Sas Vaccins vivants recombines et adjuves
FR2776928B1 (fr) * 1998-04-03 2000-06-23 Merial Sas Vaccins adn adjuves
PL210451B1 (pl) * 1999-06-10 2012-01-31 Merial Sas Szczepionka DNA przeciwko wirusowi nosówki psów (CDV)
US6645740B1 (en) * 1999-06-10 2003-11-11 Merial Limited Nucleic acids encodings equine GM-CSF
FR2794648B1 (fr) * 1999-06-10 2003-03-07 Merial Sas Vaccins adn pour animaux de compagnie et de sport
AU2001252390A1 (en) * 2000-05-01 2001-11-12 Powderject Vaccines, Inc. Nucleic acid immunization
US6803041B2 (en) * 2001-03-20 2004-10-12 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Equine herpesvirus vaccine
FR2823222B1 (fr) 2001-04-06 2004-02-06 Merial Sas Vaccin contre le virus de la fievre du nil
US7906311B2 (en) 2002-03-20 2011-03-15 Merial Limited Cotton rat lung cells for virus culture
EP2390352A1 (en) 2003-03-18 2011-11-30 Quantum Genetics Ireland Limited Systems and methods for improving protein and milk production of dairy herds
US7468273B2 (en) 2003-05-01 2008-12-23 Meial Limited Canine GHRH gene, polypeptides and methods of use
CA2545886A1 (en) 2003-11-13 2005-06-02 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Methods of characterizing infectious bursal disease virus
MXPA06009452A (es) 2004-02-19 2007-03-15 Univ Alberta Polimorfismos del promotor de leptin y sus usos.
US7959929B2 (en) 2005-04-21 2011-06-14 University Of Florida Research Foundation, Inc. Materials and methods for respiratory disease control in canines
US11865172B2 (en) 2005-04-21 2024-01-09 University Of Florida Research Foundation, Inc. Materials and methods for respiratory disease control in canines
RS51324B (sr) 2005-04-25 2010-12-31 Merial Ltd. Vakcine protiv nipah virusa
US20080241184A1 (en) 2005-08-25 2008-10-02 Jules Maarten Minke Canine influenza vaccines
EP1951751B1 (en) 2005-11-14 2017-11-01 Merial, Inc. Gene therapy for renal failure
US7771995B2 (en) 2005-11-14 2010-08-10 Merial Limited Plasmid encoding human BMP-7
US7682619B2 (en) 2006-04-06 2010-03-23 Cornell Research Foundation, Inc. Canine influenza virus
US7862821B2 (en) 2006-06-01 2011-01-04 Merial Limited Recombinant vaccine against bluetongue virus
US20080274137A1 (en) * 2007-05-02 2008-11-06 Jean Christophe Francis Audonnet DNA plasmids having improved expression and stability
CA2684923C (en) 2007-05-02 2015-01-06 Merial Limited Dna plasmids having improved expression and stability
RU2559527C2 (ru) 2008-11-28 2015-08-10 Мериал Лимитед Рекомбинантная вакцина от птичьего гриппа и её применение
CA2757030C (en) 2009-04-03 2019-01-15 Merial Limited Vectors comprising newcastle disease viruses and compositions thereof
JP5933451B2 (ja) 2009-12-28 2016-06-08 メリアル リミテッド 組換えｎｄｖ抗原及びその使用
US20130197612A1 (en) 2010-02-26 2013-08-01 Jack W. Lasersohn Electromagnetic Radiation Therapy
ES2795148T3 (es) 2010-03-12 2020-11-20 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Vacunas recombinantes contra el virus de la fiebre aftosa y usos de las mismas
CA2809127C (en) 2010-08-31 2019-04-02 Merial Limited Newcastle disease virus vectored herpesvirus vaccines
WO2012090073A2 (en) 2010-12-30 2012-07-05 The Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting chemotherapy sensitivity
EP2694677A2 (en) 2011-04-04 2014-02-12 Netherland Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors
AU2012240246A1 (en) 2011-04-04 2013-05-09 Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors
WO2012145577A1 (en) 2011-04-20 2012-10-26 Merial Limited Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile
JP6407714B2 (ja) 2011-04-25 2018-10-17 アドヴァンスド バイオサイエンス ラボラトリーズ インコーポレイテッド 短縮型ｈｉｖエンベロープタンパク質（ｅｎｖ）、前記に関連する方法及び組成物
ES2764079T3 (es) 2011-05-27 2020-06-02 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Vacunas genéticas contra el virus Hendra y el virus Nipah
US9669085B2 (en) 2011-06-01 2017-06-06 Merial Inc. Needle-free administration of PRRSV vaccines
ES2626297T3 (es) 2011-08-12 2017-07-24 Merial, Inc. Preservación asistida por vacío de productos biológicos, en particular de vacunas
WO2013093629A2 (en) 2011-12-20 2013-06-27 Netherlands Cancer Institute Modular vaccines, methods and compositions related thereto
EA034564B1 (ru) 2012-02-14 2020-02-20 Мериал, Инк. Ротавирусная субъединичная вакцина, способ ее получения и применение
WO2013123242A1 (en) 2012-02-14 2013-08-22 Merial Limited Recombinant poxviral vectors expressing both rabies and ox40 proteins, and vaccines made therefrom
WO2013138776A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Merial Limited Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g
KR101490292B1 (ko) 2012-04-16 2015-02-04 한국생명공학연구원 신규한 ｈ3ｎ8 말 인플루엔자 바이러스
US10801039B2 (en) 2012-06-13 2020-10-13 The University Court Of The University Of Glasgow Reassortant BTV and AHSV vaccines
WO2014164697A1 (en) 2013-03-12 2014-10-09 Merial Limited Reverse genetics schmallenberg virus vaccine compositions, and methods of use thereof
EP3215188A1 (en) 2014-11-03 2017-09-13 Merial, Inc. Methods of using microneedle vaccine formulations to elicit in animals protective immunity against rabies virus
AR105482A1 (es) 2015-06-23 2017-10-11 Merial Inc Vectores virales recombinantes que contienen la proteína menor del virus del síndrome reproductor y respiratorio porcino (prrsv) y sus métodos de elaboración y uso
AU2016308630B2 (en) 2015-08-20 2019-09-19 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. FCV recombinant vaccines and uses thereof
PL3355915T3 (pl) 2015-09-29 2024-03-25 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Szczepionki zawierające cząstki wirusopodobne (VLP) parwowirusa psów (CPV) i ich zastosowania
MA49414A (fr) 2015-11-23 2020-04-22 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Protéines de fusion de dmdv et e2 et leurs utilisations
TWI760322B (zh) 2016-01-29 2022-04-11 美商百靈佳殷格翰動物保健美國有限公司 重組腺病毒載體裝載之fmdv疫苗及其用途
CN109136264B (zh) * 2018-09-19 2022-07-29 天康制药(苏州)有限公司 马疱疹病毒1型gB-gD融合蛋白、重组载体和真核细胞株及其制备方法和疫苗

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1986007593A1 (en) * 1985-06-20 1986-12-31 Biotechnology Research Partners, Limited Methods and compositions useful in preventing equine influenza
EP0304786A2 (de) * 1987-08-27 1989-03-01 Bayer Corporation Intranasale Impfung von Pferden mit inaktivierten Mikroorganismen oder antigenem Material
WO1993019183A1 (en) * 1992-03-23 1993-09-30 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculatioon of dna transcription unit
WO1995020660A2 (en) * 1994-01-27 1995-08-03 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of dna transcription unit
EP0936922A1 (fr) * 1996-07-19 1999-08-25 Merial Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies du cheval

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU1671688A1 (ru) * 1989-01-27 1991-08-23 Всесоюзный Научно-Исследовательский Институт Молекулярной Биологии Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L. - продуцент моноклональных антител к гликопротеиду Е1 вируса восточного энцефаломиелита лошадей
US5185440A (en) * 1989-06-20 1993-02-09 North Carolina State University cDNA clone coding for Venezuelan equine encephalitis virus and attenuating mutations thereof
FR2659349B1 (fr) * 1990-03-12 1993-12-24 Rhone Merieux Virus herpes recombinants notamment pour la realisation de vaccins, leur procede de preparation, les plasmides realises au cours de ce procede et les vaccins obtenus.
US5243121A (en) 1992-03-19 1993-09-07 Engelhard Corporation Fluid catalytic cracking process for increased formation of isobutylene and isoamylenes
US5925358A (en) * 1993-02-26 1999-07-20 Syntro Corporation Recombinant fowlpox viruses and uses thereof
EP1064305B1 (en) * 1998-03-27 2004-09-15 The Secretary of State for Defence Recombinant virus

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1986007593A1 (en) * 1985-06-20 1986-12-31 Biotechnology Research Partners, Limited Methods and compositions useful in preventing equine influenza
EP0304786A2 (de) * 1987-08-27 1989-03-01 Bayer Corporation Intranasale Impfung von Pferden mit inaktivierten Mikroorganismen oder antigenem Material
WO1993019183A1 (en) * 1992-03-23 1993-09-30 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculatioon of dna transcription unit
WO1995020660A2 (en) * 1994-01-27 1995-08-03 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of dna transcription unit
EP0936922A1 (fr) * 1996-07-19 1999-08-25 Merial Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies du cheval

Also Published As

Publication number Publication date
AU3772797A (en) 1998-02-10
CA2260858A1 (en) 1998-01-29
CZ17499A3 (cs) 1999-05-12
EP0936922A1 (fr) 1999-08-25
NZ333754A (en) 2001-03-30
CA2660355A1 (en) 1998-01-29
CA2660355C (en) 2012-05-22
AR059828A2 (es) 2008-04-30
EP0936922B1 (fr) 2005-11-30
EP1647281A3 (fr) 2009-08-05
AR009947A1 (es) 2000-05-17
WO1998003198A1 (fr) 1998-01-29
US6558674B1 (en) 2003-05-06
DE69734778D1 (de) 2006-01-05
PL188409B1 (pl) 2005-01-31
EP1647281A2 (fr) 2006-04-19
AU735372B2 (en) 2001-07-05
US6207166B1 (en) 2001-03-27
DE69734778T2 (de) 2006-09-07
CZ301365B6 (cs) 2010-01-27
JP2000516199A (ja) 2000-12-05
JP2008143900A (ja) 2008-06-26
PL331202A1 (en) 1999-07-05
BR9710502A (pt) 1999-08-17
FR2751226A1 (fr) 1998-01-23
CA2260858C (en) 2011-01-18
FR2751226B1 (fr) 1998-11-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ300593B6 (cs) Vakcína proti viru chripky savcu celedi konovitých EIV, použití této vakcíny a souprava tuto vakcínu obsahující
KR100620302B1 (ko) 개 질병, 특히 호흡기 및 소화성 질병 치료용폴리뉴클레오티드 백신 제제
KR100687509B1 (ko) 고양이과 동물의 폴리뉴클레오티드 백신 제제
US6376473B1 (en) Polynucleotide vaccine formula in particular against bovine respiratory pathology
KR20000065258A (ko) 조류 폴리뉴클레오티드 백신 제제
JP2003502345A (ja) ペットまたはスポ−ツ用動物のためのｄｎａワクチン
JPH10251163A (ja) イヌパルボウイルスｄｎａワクチン
US7294338B2 (en) Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies, in particular respiratory and digestive pathologies
AU765539B2 (en) Polynucleotide vaccine formula for treating horse diseases
AU776827B2 (en) Polynucleotide vaccine formula, particularly for treating bovine respiratory disease
HK1083763A (en) Polynucleotide vaccine formula against equine pathologies
NZ506427A (en) A canidae vaccine comprising the rabies G gene under the control of the CMV-IE promoter

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20170715