CZ285389B6 - Stabilní vodný farmaceutický prostředek, obal obsahující tento prostředek a způsob stabilizování IFN - je ve vodném prostředku - Google Patents

Stabilní vodný farmaceutický prostředek, obal obsahující tento prostředek a způsob stabilizování IFN - je ve vodném prostředku Download PDF

Info

Publication number
CZ285389B6
CZ285389B6 CZ952955A CZ295595A CZ285389B6 CZ 285389 B6 CZ285389 B6 CZ 285389B6 CZ 952955 A CZ952955 A CZ 952955A CZ 295595 A CZ295595 A CZ 295595A CZ 285389 B6 CZ285389 B6 CZ 285389B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
gamma
ifn
pharmaceutical composition
interferon
composition according
Prior art date
Application number
CZ952955A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ295595A3 (en
Inventor
Tue Nguyen
Original Assignee
Genentech, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Genentech, Inc. filed Critical Genentech, Inc.
Publication of CZ295595A3 publication Critical patent/CZ295595A3/cs
Publication of CZ285389B6 publication Critical patent/CZ285389B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61J—CONTAINERS SPECIALLY ADAPTED FOR MEDICAL OR PHARMACEUTICAL PURPOSES; DEVICES OR METHODS SPECIALLY ADAPTED FOR BRINGING PHARMACEUTICAL PRODUCTS INTO PARTICULAR PHYSICAL OR ADMINISTERING FORMS; DEVICES FOR ADMINISTERING FOOD OR MEDICINES ORALLY; BABY COMFORTERS; DEVICES FOR RECEIVING SPITTLE
    • A61J1/00—Containers specially adapted for medical or pharmaceutical purposes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A61K38/217—IFN-gamma
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/186—Quaternary ammonium compounds, e.g. benzalkonium chloride or cetrimide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Je popsán stabilní vodný farmaceutický prostředek obsahující efektivní množství IFN-.gama., který nebyl předem lyofilizován, acetátový pufr udržující pH mezi 4,0 a 6,0, neiontové detergentní činidlo, isotonické činidlo a ochranné činidlo, které je vybráno ze skupiny sestávající z fenolu, benzylalkoholu a benzethoniumhalogenidu. Dále je popsána nádoba, která obsahuje tento stabilní vodný farmaceutický prostředek. Je popsán také způsob stabilizování IFN-.gama. ve vodném prostředku. ŕ

Description

Vynález se týká stabilního vodního farmaceutického prostředku na bázi IFN-γ, který má protivirové a antiproliferační vlastnosti.
Dosavadní stav techniky
IFN-γ je jedním ze členů skupiny interferonů, která vykazuje protivirové a antiprofilační vlastnosti, charakteristické pro interferony-α a -β (IFN-α a IFN-β), ale, na rozdíl od těchto interferonů, je labilní při pH 2. IFN-γ byl původně produkován po mitogenní indukci lymfocytů. Rekombinantní příprava lidského IFN-γ byla poprvé popsána Grayem, Goeddlem a spolupracovníky [Gray a spol.: Nátuře 295, 503 (1982).] a je předmětem USA patentů č. 4 762 791, 4 929 544, 4 727 138 a 4 925 793. Rekombinantní lidský IFN-γ podle Graye a Goeddela, jak je produkován vE. coli, sestává ze 146 aminokyselin, na N-konci molekuly je sekvence CysTyrCys. Později bylo zjištěno, že přírodní lidský IFN-γ (tj. takový, který se získá mitogenní indukcí lidských periferních krevních lymfocytů a následným vyčištěním) je popyleptid, kterému chybí na N-konci skupina CysTyrCyr (Gray a spol., viz výše). Nedávno byla určena krystalová struktura rekombinantního lidského IFN-γ, odvozeného od E. coli (rhIFN-γ) [Ealick a spol.: Science 252, 698 (1991),] která ukázala, že tento protein existuje jako těsně vnitřně ztočený nekovalentní homodimer, v němž jsou dva identické polypeptidové řetězce orientovány antiparalelním způsobem.
O IFN-γ je známo, že vykazuje široký rozsah biologických aktivit, včetně protinádorové, antimikrobiální a imunoregulační aktivity. Rekombinantní lidský IFN-γ (rhifn-γ, Actimmune^, Genentech, lne., South San Francisco, Kalifornie) je komerčně dostupný jako imunodulační léčivý prostředek pro léčení chronické granulomatozní choroby, charakterizované prudkými, recidivujícími infekcemi kůže, lymfatických uzlin, jater, plic a kostí díky fagocytámí dysfunkci [Baehner R.L.: Pediatrie Pathol. 10, 143 (1990).] IFN-γ byl navržen také pro léčení atopické dermatitidy, obvyklého zánětlivého kožního onemocnění, pro něž je charakteristický silný pruritus, chronický průběh s častým opakováním exacerbace, odlišná klinická morfologie a distribuce poranění kůže (viz PCT spis číslo WO 91/07984, publikovaný 13. června 1991), vaskulámí stenóza, včetně léčení restenózy následující po angioplastii a/nebo vaskulámí chirurgii (PCT) spis číslo WO 90/01389, publikovaný 5. dubna 1990), různá onemocnění plic, včetně syndromů úzkosti při dýchání (RDS), jako je syndrom úzkosti při dýchání u dospělých (ARDS) a neonatální forma, která je označována různě, jako idiopathická RDS nebo choroba hyalinní membrány (PCT spis číslo WO 89/01341, publikovaný 23. února 1989). IFN-γ byl dále úspěšně použit při léčení různých alergií, např. astma, stavů souvisejících s HTV-infekcí, jako jsou oportunistické infekce, např. pneumonie způsobená Pneumocystis carinii, a sepse související s trauma.
Stabilní kapalné prostředky, obsahující efektivní množství nelyofilizovaného IFN-γ spolu s pufrem, schopným udržovat pH na 4,0 až 6,0 stabilizačním činidlem, jako je mannitol, a neiontovým detergentním činidlem, jsou popsány v USA patentu č. 5 151 265 z 29. září 1992.
Známý komerční kapalný prostředek IFN-γ (Actimmune(R) rhuIFN^-lb, Genetech, lne.) je sterilní, čirý, bezbarvý roztok bez ochranného činidla, naplněný do lékovek po jedné dávce pro subkutánní injekci. Každá 0,5 ml lékovka s Actimmunem obsahuje 100 pg (3 miliony jednotek, specifická aktivita: 30 milionů j./mg) IFN-γ-lb, připraveného ve 20 mg mannitolu, 0,36 mg
- 1 CZ 285389 B6 jantaranu sodného, 0,05 mg polysorbátu 20 a sterilní vodě pro injekce. Jelikož tyto prostředky neobsahují žádné ochranné činidlo, jsou určeny jako jediná terapeutická dávka pro jednorázové použití. Jakékoliv nepoužité množství se musí vyhodit.
Pro některé indikace, které vyžadují dlouhodobé používání s opakovaným podáváním, jako je léčení atopické dermatitidy nebo karcinomu ledvinových buněk, by bylo žádoucí vyvinout stabilní kapalné farmaceutické prostředky, obsahující více dávek IFN-γ, přičemž IFN-γ si zachovává biologickou aktivitu a fyzikální stabilitu po prodlouženou dobu za doporučených podmínek skladování. Takové prostředky by měly s výhodou obsahovat až 30-násobek terapeuticky efektivního množství IFN-γ pro zamýšlené terapeutické použití a měly by zůstávat stabilní alespoň po dobu 14 dnů od prvního podání. Příprava takových prostředků, obsahujících více dávek, však není jasná.
Proteiny, na rozdíl od tradičních (organických nebo anorganických) léčivých látek, mají velkou velikost. Pro biologickou aktivitu je podstatné, aby alespoň základní sekvence aminokyselin byla zachována neporušená kvůli konformační integritě. A dále, protože proteiny mají více funkčních skupin, jako jsou různé vedlejší řetězce jejich aminokyselin, existuje možnost mnoha degradačních reakcí ve stejné době. Jestliže existují takové násobné degradační cesty s možnými různými aktivačními energiemi, potom je pravděpodobné, že degradační profil se bude s teplotou značně měnit.
Výsledkem této komplexity je to, že proteiny jsou často nestálé, a jelikož se degradují, stanovení mechanismu jejich degradace a charakterizace jejich degradačního profilu, včetně identifikace reakce limitující rychlost, je také mimořádně složitý proces. Často neexistují jasné prostředky stanovení chemické identity a měření množství degradačních produktů. Obecně platí, že excipienty mají významný vliv na stabilitu proteinů jak ve fyzikálních pojmech, tak také v biochemických a v testech aktivity. Jejich pečlivý výběr je důležitým a obtížným aspektem při navrhování prostředku.
Předcházející problémy jsou zvláště pravdivé pro IFN-γ, což je protein o molekulové hmotnosti kolem 15 000, představující vlákno nějakých 143 (146) aminokyselin, o němž je notoricky známo, že je tepelně nestálý a náchylný k agregaci a proteolytické degradaci [Wetzel R.L. a spol.: „Unfolding and Inactivation“, Protein Design and the Development of New Therapeutics and Vaccines, Hook J. B. a Poste G., red., Plenům Publishing Corp., str. 79, 1990; Mulkerring M.G. a Wetzel R.: Biochemistry 28, 6556 (1989)].
Uvedené nedostatky dosavadní stavu techniky jsou z převážné části odstraněny u stabilního vodného farmaceutického prostředku podle tohoto vynálezu.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu je stabilní vodný farmaceutický prostředek na bázi IFN-γ s protivirovými aantiproliferačními vlastnosti, jehož podstata je vtom, že obsahuje farmaceuticky účinné množství IFN-γ, který nebyl předem lyofílizován, acetátový pufr udržující pH mezi 4,0 a 6,0, neiontové detergentní činidlo, izotonické činidlo a ochranné činidlo, které je vybráno ze skupiny, zahrnující fenol, benzylalkohol a benzethoniumhalogenid.
Farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu obsahuje jako IFN-γ s výhodou lidský IFN-γ.
Konkrétněji farmaceutický prostředek jako IFN-γ obsahuje desCysTyrCys-IFN-γ.
-2 CZ 285389 B6
Ještě výhodněji farmaceutický prostředek podle vynálezu jako IFN-γ obsahuje desCysTyrCysIFN-γ, z něhož jsou na C-konci odstraněny 4 aminokyseliny.
Farmaceutický prostředek obsahuje výhodně IFN-γ, mající specifickou aktivitu alespoň 2.107 jednotek/mg (U/mg).
S výhodou farmaceutický prostředek obsahuje alespoň 6 milionů jednotek lidského IFN-γ, majícího specifickou aktivitu 30 jednotek/mg.
Farmaceutický prostředek podle vynálezu může obsahovat 6 až 90 milionů jednotek lidského IFN-γ, majícího specifickou aktivitu 30 jednotek/mg.
Jako neiontové detergentní činidlo obsahuje farmaceutický prostředek podle vynálezu s výhodou polysorbát.
Jako izotonické činidlo obsahuje farmaceutický prostředek cukerný polyhydroxyalkohol, zejména mannitol.
Jako ochranné činidlo obsahuje farmaceutický prostředek podle vynálezu s výhodou fenol nebo benzylalkohol.
Objasnění výkresů
Obrázek 1 ukazuje vliv různých ochranných činidel na biologickou aktivitu rhuIFN-γ (Actimmune(R), Genenter, lne., South San Francisco, Kalifornie) v kapalném farmaceutickém prostředku bez ochranného činidla při 25 °C.
Obrázky 2A a 2B ukazují vliv různých koncentrací fenolového ochranného činidla na biologickou aktivitu rhuIFN-γ v kapalném farmaceutickém prostředku při 25 °C.
Obrázek 3 ukazuje vliv 0,9 % benzylakoholu na biologickou aktivitu rhuIFN-γ v kapalných prostředcích, obsahujících 1 mM sukcinát a 5 mM sukcinát, při 25 °C.
Obrázek 4 ukazuje vliv 0,4 % fenolového ochranného činidla při 25 °C na biologickou aktivitu rhuIFN-γ v kapalných farmaceutických prostředcích, obsahujících 5 mM sukcinát a 1 mM sukcinát.
Obrázek 5 ukazuje vliv fenolu na biologickou aktivitu rhuIFN-γ v 1 mM sukdinátu a 10 mM acetátovém prostředku při 25 °C.
Při pokusu získat INF-γ prostředek o více dávkách, v nichž zbývající farmaceuticky aktivní dávky IFN-γ jsou chráněny a zůstávají vhodné pro terapeutickou aktivaci po prodlouženou dobu od prvního podání autoři tohoto vynálezu zjistili, že mnohá známá farmaceuticky přijatelná ochranná činidla nejsou slučitelná s jinými složkami, konvenčně používanými v kapalných farmaceutických prostředcích IFN-γ, a že tato neslučitelnost vede k dramatickému poklesu stability. Zvláště zjistili, že přidání různých terapeuticky přijatelných ochranných činidel způsobilo, že komerční kapalný farmaceutický prostředek IFN-γ (Actimmune(R), Genentech, lne.) byl nestálý, což vedlo k tvorbě agregátů a ke ztrátě biologické aktivity. Tento vynález je výsledkem úspěšného výzkumu, který vedl ke stabilnímu vodnému farmaceutickému prostředku IFN-γ, který obsahuje ochranné činidlo. Pojmy „gama-interferon“, „interferon gama“ a „IFN-γ“ tak, jak se zde používají, jsou navzájem zaměnitelné a týkají se všech forem (lidských a zvířecích) IFN-γ, o nichž je známo, že jsou biologicky aktivní v přijatelných IFN-γ testech,
-3 CZ 285389 B6 jako je inhibice replikace viru ve vhodné linii buněk (inhibice replikace viru encefalomyokarditidy v lidské buněčné linii A549 karcinomu plic lidských IFN-γ), indukce antigenů třídy II, stabilita na teplo, jiné protivirové, protinádorové a imunoregulační testy nebo neutralizace protilátek s imunoreaktivitou na IFN-γ, ale ne na IFN-α a -β. Tyto pojmy zahrnují IFN-γ v maturované, pro, met, nebo des (1 až 3) (také nazývané desCysTyrCys IFN-γ) formě, ať jsou získány z přírodního zdroje, chemicky syntetizovány nebo připraveny způsoby technologie rekombinantní DNA. Úplný popis prostředku rekombinantního lidského IFN-γ (rhuIFN-γ) včetně jeho cDNA a aminokyselinových sekvencí je uveden ve shora uvedených USA patentech, jako je například USA patent č. 4 762 791. Rekombinantní lidské IFN-γ, jimž chybí CysTyrCys, včetně různých zkomolených derivátů jsou například popsány v evropském patentové spisu č. 146 354. Nelidské zvířecí interferony včetně IFN-γ jsou například popsány v evropském spisu č. 88 622. Tento pojem zahrnuje různě glykosylované formy a další varianty a deriváty těchto přírodních (divokého typu) interferonů, ať už jsou známy odborníkům nebo budou dostupný v budoucnu. Příklady těchto variant jsou allely a produkty místně řízené mutageneze, v nichž jsou zbytky deletovány, vloženy a/nebo substituovány (viz např. evropský spis č. 146 354, na který je shora odkazováno). Je známo, že IFN-γ má úzké hostitelské rozmezí, tedy, že pro léčení živočicha by se měl používat IFN-γ homologní pro tohoto živočicha. Při léčení lidí se s výhodou používá desCysTyrCys varianta se sekvencí, uvedenou v USA patentu č. 4 717 138, a její doplněk, evropský patent 77 670, popřípadě C-koncová varianta, u které se při post-translačním opracování vynechají zbytky čtyř posledních aminokyselin.
Pojem „terapeuticky efektivní množství“ IFN-γ ve farmakologickém smyslu v souvislosti s tímto vynálezem znamená množství, které je efektivní při prevenci nebo léčení patologických stavů při léčení, při němž je IFN-γ účinný. Příklady těchto stavů, bez omezení jenom na tyto, jsou různé nádory, mikrobiální infekce, chronická granulomatózní choroba, atopická dermititida, vaskulámí stenóza včetně léčení restenózy po angioplastii a/nebo vaskulámí chirurgii, syndromy úzkosti z dýchání (RDS), jako je syndrom úzkosti z dýchání u dospělých (ARDS) a neonatální forma, nazývané různě jako idiopatický RDS nebo nemoc hyalinní membrány, alergie, např. astma, a stavy související s HIV infekcí, jako jsou oportunistické infekce, např. pneumonie způsobená Pneumocystis carinii, tuberkulóza atd.
Pojem „farmaceutický prostředek“ označuje prostředky, které jsou v takové formě, která umožňuje jednoznačně účinnou biologickou aktivitu aktivních složek, a které neobsahují žádné další složky, které jsou toxické pro subjekty, kterým by se měl tento prostředek podávat.
Pojem „farmaceuticky přijatelné“ excipienty (ředidla, přísady) znamená takové excipienty, které se mohou odůvodněně podávat savcům proto, aby se dosáhlo efektivní dávky použité účinné složky.
IFN—γ „si zachovává svoji biologickou aktivitu“ ve farmaceutickém prostředku, jestliže má biologickou aktivitu v daném čase kolem 20 % biologické aktivity, kterou měl v době, kdy byl tento farmaceutický prostředek připraven, podle standardního testu biologické aktivity IFN-γ, jako je například A549 protivirový test.
IFN-γ „si zachovává svoji fyzikální stabilitu“ v kapalném farmaceutickém prostředku, jestliže při vizuálním zkoumání nebo při měření vytěsňovací HPLC nevykazuje žádné známky agregace.
Rozmezí pH 4,0 až 6,0 bylo již dříve popsáno jako optimální pH pro stabilitu IFN-γ ve vodném prostředku. Bylo také popsáno, že při skladování kolem 5 °C a výše kapalné prostředky bez ochranného činidla, obsahující předem nelyofilizovaný rhuIFN-γ, mají znatelně lepší stabilitu než lyofilizované rhuIFN-γ prostředky, zvláště pak, že tvorba agregátů v těchto kapalných prostředcích je významně nižší (viz např. USA patent číslo 5 152 265 z 29. září 1992).
-4CZ 285389 B6
Nyní bylo zjištěno, že přidání ochranného činidla (protimikrobiálního činidla) ke kapalnému prostředku IFN-γ, u něhož se pH udržuje sukcinátovým pufrem, vede k nechtěné tvorbě agregátu a že tento protein vykazuje v těchto roztocích rychlou ztrátu aktivity. Při pokusu identifikovat důvody nižší stability těchto roztoků, obsahujících ochranné činidlo, autoři tohoto vynálezu zjistili, že ke tvorbě agregátu nedochází díky neslučitelnosti IFN-γ a použitých ochranných činidel, ale že je způsobena spíše současnou přítomností sukcinátového pufru a testovaných ochranných činidel. I když přesná povaha reakcí, při kterých dochází k tvorbě agregátu, není pochopena a degradační produkty nebyly izolovány, překvapivě bylo zjištěno, že degradaci se lze vyhnout a že lze připravit stabilní farmaceutické prostředky nahrazením sukcinátového pufru acetátovým pufrem, který je schopen udržovat pH v žádoucím rozmezí.
V prvním pokusu byl studován vliv různých ochranných činidel na biologickou aktivitu rhuIFN-γ vActimmune (rhIFN-y-lb, Genentech, lne.). IFN-γ byl dialyzován v příslušném pufru. Koncentrace IFN-γ byla upravena na 0,2 mg/ml. Byla přidána ochranná činidla a směs byla míchána do rozpuštění. 1 ml podíly byly přeneseny do 3 ml skleněných lékovek typu I a skladovány při 5 a 25 °C. Lékovky byly periodicky odebírány (jedna lékovka/pro jeden čas/pro danou skladovací teplotu) a testovány. Testy zahrnovaly SDS-PAGE, ELIA, A549 protivirový biotest [viz např. Fish E.N. a spol.: Drug Design and Delivery 2, 1991 (1988).] a, méně často, HPLC na obrácených fázích, chromatografií na ionexu a vytěsňovací chromatografií. Diskutována je pouze biologická aktivita a data, získaná z SDS-PAGE, protože nejcitlivěji zobrazují změny. Skutečná uvedená pokusná data byla získána při teplotě 25 °C (zrychlené studie stability), protože při 5 °C by bylo pro zjištění změn potřeba podstatně delšího času.
Jak je uvedeno na obrázku 1, přidání 1 % hmotn. benzylalkoholu nebo 0,4 % hmotn. fenolu jako ochranného činidla způsobilo dramatický pokles biologické aktivity IFN-γ při 25 °C při srovnání s kontrolou bez ochranného činidla a s prostředky, obsahujícími dvě různé koncentrace benzethoniumchloridu.
Obrázek 2 ukazuje vliv různých koncentrací fenolu na biologickou aktivitu rhuIFN-γ (Actimmune(R), Genentech, lne.) v kapalném prostředku při 25 °C. I když biologická aktivita IFN-γ byla v roztocích, chráněných 0,1 a 0,2% hmotn. fenolu, uspokojivá, tvorba agregátů v těchto roztocích byla podle SDS-PAGE (elektroforéza na polyakryalmidovém gelu s dodecylsulfátem sodným) (obrázek 2B) zvýšena.
Obrázek 3 ilustruje účinek 0,9 % hmotn. benzylalkoholu na biologickou aktivitu rhuIFN-γ při 25 °C v prostředcích, pufrovaných 1 mM sukcinátem a 5 mM sukcinátem. Skutečnost, že ztráta biologické aktivity je menší u prostředku, obsahujícího nižší koncentraci sukcinátu, zřejmě indikuje, že přítomnost sukcinátového pufru je alespoň částečně odpovědna za problémy stability u roztoků rhuIFN-γ s ochrannými činidly. Tento závěr je podpořen výsledky, uvedenými na obrázku 4. Ztráta biologické aktivity IFN-γ je méně dramatická ve vodných roztocích, jejichž pH je udržováno na 5,0 1 mM sukcinátem než v roztocích s 5 mM sukcinátem.
Vliv 0,4 % hmotn. fenolu na biologickou aktivitu rhuIFN—γ byl potom studován v kapalných prostředcích, obsahujících 1 mM sukcinátový pufr a 10 mM sukcinátový pufr. Jak je uvedeno na obrázku 5, stabilita roztoku, pufrovaného acetátovým pufrem, posuzovaná podle biologické aktivity IFN-γ, byla v podstatě stejná jako aktivita u kontrolního roztoku bez ochranného činidla, pufrovaného sukcinátem a acetátem. Při vizuálním hodnocení nebo při hodnocení SDS-PAGE nebyly detergovány žádné agregáty.
- 5 CZ 285389 B6
Příklady provedení vynálezu
Farmaceutické prostředky podle tohoto vynálezu obsahují:
a) IFN-γ, který nebyl předem lyofilizován,
b) acetátový pufr, schopný udržovat pH mezi 4,0 a 6,0 (rozsah pH maximální stability proteinu v roztoku),
c) neiontové detergentní činidlo, primárně určené pro stabilizování proteinu proti agregaci, indukované mícháním,
d) izotonické činidlo,
e) ochranné činidlo, které je vybráno ze skupiny, sestávající z fenolu, benzylalkoholu a benzethoniumhalogenidu, např. chloridu, a
f) vodu.
Neiontovými detergentními (povrchově aktivními) činidly mohou být například polysorbáty (např. polysorbát (Tween) 20, 80 atd.) nebo poloxamery (např. poloxamer 188). Použití neiontových povrchově aktivních činidel umožňuje, aby prostředek byl vystaven povrchovému střihu, aniž by došlo k denaturaci proteinu. Dále pak lze prostředky s tímto povrchově aktivním činidlem použít v aerosolových zařízeních, jako jsou zařízení, používaná pro pulmonámí dávkování a tryskové vstřikovací pistole bez jehly (viz např. evropský patent 257 956).
Izotonická činidla jsou přítomna proto, aby se získala izotoničnost kapalných prostředků podle tohoto vynálezu. Mezi izotonická činidla patří cukerné polyhydroxyalkoholy, s výhodou cukerné tri- a vyšší-hydroxyalkoholy, jako je glycerin, erythritol, arabitol, xylitol, sorbitol a mannitol. Tyto cukerné alkoholy se mohou používat samotné nebo v kombinacích. Pro úpravu izotoničnosti roztoků se může používat také chlorid sodný nebo jiné příslušné anorganické soli.
Acetátovým pufrem může být například směs kyseliny octové s octanem sodným, směs hydroxidu sodného s kyselinou octovou atd. Kapalný prostředek podle tohoto vynálezu je pufrován tak, aby jeho pH bylo v rozmezí 4,0 až 6,0, s výhodou 4,5 až 5,5, nejvýhodněji kolem pH 5.
Ochranná činidla fenol, benzylakohol a benzethniumhalogenidy, např. chlorid, jsou známá protimikrobiální činidla.
Ve výhodném provedení kapalný farmaceutický prostředek podle tohoto vynálezu obsahuje následující složky:
INF-γ octan sodný (pH 5,0) Tween 20 fenol mannitol voda pro injekce, USP 0,1 až 2,0 mg/ml 5 až 100 mM 0,1 až 0,01 % hmotn. 0,05 až 0,4 % hmotn. 5 % hmotn. do 100 % hmotn.
Procenta v tomto prostředku jsou hmotnostní procenta, vztažená na hmotnost prostředku. Fenol může být nahrazen 0,5 až 1,0 % hmotn. benzylakoholu a mannitol může být nahrazen 0,9 % hmotn. chloridu sodného.
-6CZ 285389 B6
Nejvýhodnější prostředky obsahují:
INF-γ 0,1 až 1,0 mg/ml octan sodný (pH 5,0) 10 mM
Tween 20 0,01 % hmotn.
fenol 0,2 % hmotn.
mannitol 5 % hmotn.
Fenol může být nahrazen 0,75 % hmotn. benzylakoholu a manitol 0,9 % hmotn. chloridu sodného.
Kapalné prostředky s ochrannými činidly s výhodou obsahují více dávek terapeuticky účinného množství IFN-γ. Vzhledem k úzkému rozsahu hostitelů tohoto polypeptidu jsou pro léčení lidí výhodné takové kapalné prostředky, které obsahují lidský IFN-γ, výhodněji přírodní sekvenci lidského IFN-γ. Vzhledem k modifikované biologické odpovědi, IFN-γ vykazuje rozmanité účinky na široký okruh typů buněk u různých lidí a u různých druhů jiných savců. Terapeuticky efektivní dávka bude ovšem záviset na takových faktorech, jako je patologický stav, který má být léčen (včetně prevence), věk pacientů, hmotnost, celkový lékařský stav, historie léčení atd. Její stanovení závisí na zkušenosti ošetřujícího lékaře. Efektivní dávka bude obvykle v rozmezí od 0,001 až 1,0 mg/kg, výhodněji od 0,01 do 1 mg/kg, nej výhodněji 0,01 až 0,1 mg/kg. V těchto prostředcích bude huIFN-γ vykazovat s výhodou specifickou aktivitu řádově kolem 2.107 nebo více jednotek/mg proteinu při testování na buňkách A549 proti viru encefalomyokarditidy. Znečištění endotoxinem by mělo být udržováno minimálně na bezpečné úrovni, například menší než 0,5 ng/mg proteinu. Navíc pak pro podávání člověku by měly kapalné prostředky vyhovovat, pokud jde o sterilitu, pyrogeničnost, obecnou bezpečnost a čistotu, požadavkům FDA Office a biologickým standardům.
Prostředky se s výhodou podávají jako opakované intravenózní (i.v.), subkutánní (s.c.) nebo intramuskulámí (i.m.) injekce nebo jako aerosolové prostředky, vhodné pro intranazální nebo intrapulmonámí podávání (pro intrapulmonámí podávání viz např. evropský patent 257 956).
Doporučená dávka pro léčení pacientů s chronickým granulomatózním onemocněním je 50 pg/m2 (1,5 milionu j./m2) pro pacienty, jejichž plocha povrchu těla je větší než 0,5 m2, a 1,5 pg/kg/dávku pro pacienty, jejichž plocha povrchu těla je 0,5 m2 nebo menší. Doporučuje se podávat injekce subkutánně třikrát týdně.
Pro snížení infekce a úmrtí pacientů se silnými poraněními se může podávat dávka 100 pg rhuIFN-γ jednou denně. Mezi infekce, kterým lze takto předcházet nebo které je možné takto léčit, patří pneumonie, bakteriémie, intraabdominální nebo intratorakální infekce, hlavní infekce při poranění, vestikulitida/meningitida atd.
Stabilní vodné prostředky podle tohoto vynálezu jsou s výhodou obsaženy v lékovkách, které obsahují až kolem 30 terapeuticky efektivních dávek IFN-γ. Biologická aktivita IFN-γ je s výhodou alespoň 20 % z biologické aktivity, vykazované po dobu alespoň 14 dnů po prvním podání, výhodněji po dobu alespoň 200 dnů po prvním podání.
Všechny citace v tomto spisu a všechny odkazy zde uvedené jsou zde výslovně zahrnuty jako odkazy.
I když předcházející část se týká zvláštních výhodných provedení, je tomu třeba rozumět tak, že tento vynález není jimi omezen. Zručnému odborníkovi v oblasti techniky je zřejmé, že lze připravit různé modifikace uvedených provedení, aniž by se tato modifikovaná provedení
- 7 CZ 285389 B6 odchýlila od celkové koncepce tohoto vynálezu. Všechny takové modifikace jsou zahrnuty v rozsahu tohoto vynálezu.

Claims (11)

1. Stabilní vodný farmaceutický prostředek na bázi interfenonu gamma s protivirovými aantiproferačními vlastnostmi, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceuticky efektivní množství interferonu-gamma, který nebyl předem lyofilizován, acetátový pufř, udržující pH mezi 4,0 a 6,0, neiotové detergentní činidlo, izotonické činidlo a ochranné činidlo, které je vybráno ze skupiny, sestávající z fenolu, benzylalkoholu a benzethoniumhalogenidu.
2. Farmaceutický prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, feron-gamma obsahuje lidský interferon gamma.
3. Farmaceutický prostředek podle nároku 2, vyznačující se tím, feron-gamma obsahuje desCysTyrCys-interferon-gamma.
že jako interže jako inter-
4. Farmaceutický prostředek podle nároku 2, vyznačující se tím, že jako interferon-gamma obsahuje desCysTyrCys-interferon-gamma, z něhož jsou na C-konci odstraněny 4 aminokyseliny.
5. Farmaceutický prostředek podle nároku 2, vyznačující se tím, že obsahuje interferon-gamma, který má specifickou aktivitu alespoň 2.107 jednotek/mg prostředku.
6. Farmaceutický prostředek podle nároku 5, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň dvě terapeuticky efektivní dávky lidského interferonu-gamma, kde jedna terapeuticky efektivní dávka je 100 až 1500 pg interferonu-gamma, který má specifickou aktivitu 30 milionů jednotek/mg.
7. Farmaceutický prostředek podle nároku 6, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň dvě terapeuticky efektivní dávky lidského interferonu-gamma, kde jedna terapeuticky efektivní dávka je 100 pg interferonu-gamma, který má specifickou aktivitu 30 milionů jednotek/mg.
8. Farmaceutický prostředek podle nároku 5, vyznačující se tím, že jako neiontové detergentní činidlo obsahuje polysorbát.
9. Farmaceutický prostředek podle nároku 8, vyznačující se tím, že jako izotonické činidlo obsahuje cukerný polyhydroxyalkohol.
10. Farmaceutický prostředek podle nároku 9, vyznačující se tím, že jako cukerný polyhydroxyalkohol obsahuje mannitol.
11. Farmaceutický prostředek podle nároku 10, vyznačující se tím, že jako ochranné činidlo obsahuje fenol nebo benzylalkohol.
CZ952955A 1993-05-12 1994-05-04 Stabilní vodný farmaceutický prostředek, obal obsahující tento prostředek a způsob stabilizování IFN - je ve vodném prostředku CZ285389B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US6032793A 1993-05-12 1993-05-12

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ295595A3 CZ295595A3 (en) 1996-04-17
CZ285389B6 true CZ285389B6 (cs) 1999-07-14

Family

ID=22028807

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ952955A CZ285389B6 (cs) 1993-05-12 1994-05-04 Stabilní vodný farmaceutický prostředek, obal obsahující tento prostředek a způsob stabilizování IFN - je ve vodném prostředku

Country Status (23)

Country Link
EP (1) EP0697887B1 (cs)
JP (1) JP4053586B2 (cs)
KR (1) KR100330325B1 (cs)
CN (1) CN1120724C (cs)
AT (1) ATE173632T1 (cs)
AU (1) AU683469B2 (cs)
CA (1) CA2159602C (cs)
CZ (1) CZ285389B6 (cs)
DE (1) DE69414841T2 (cs)
DK (1) DK0697887T3 (cs)
ES (1) ES2126114T3 (cs)
FI (1) FI111442B (cs)
GR (1) GR3029286T3 (cs)
HK (1) HK1008303A1 (cs)
HU (1) HUT72980A (cs)
IL (1) IL109350A (cs)
NO (1) NO320069B1 (cs)
NZ (1) NZ266354A (cs)
PL (1) PL176079B1 (cs)
SK (1) SK280958B6 (cs)
TW (1) TW275585B (cs)
WO (1) WO1994026302A1 (cs)
ZA (1) ZA942955B (cs)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2758154B2 (ja) * 1995-04-06 1998-05-28 エフ・ホフマン−ラ ロシユ アーゲー インターフェロンを含む液体製剤
US6090781A (en) * 1996-11-06 2000-07-18 Genentech, Inc. Stabilizing formulation for NGF
US6964947B1 (en) 1995-11-07 2005-11-15 Genentech, Inc. Stabilizing formulation for NGF
KR100497087B1 (ko) * 1995-11-07 2005-09-09 제넨테크, 인코포레이티드 신경성장인자의안정화조성물
JP3493866B2 (ja) * 1995-12-27 2004-02-03 ライオン株式会社 発泡性口腔用組成物
AR006598A1 (es) * 1996-04-19 1999-09-08 Merck Sharp & Dohme "composiciones anti-fungosas, su uso en la manufactura de medicamentos y un procedimiento para su preparación"
EP0920306A2 (en) 1996-07-12 1999-06-09 Leukosite, Inc. Chemokine receptor antagonists and methods of use therefor
SK284989B6 (sk) * 1996-12-24 2006-04-06 Biogen, Inc. Kvapalná kompozícia obsahujúca interferón a spôsob stabilizácie interferónu
US20030190307A1 (en) 1996-12-24 2003-10-09 Biogen, Inc. Stable liquid interferon formulations
US6991790B1 (en) 1997-06-13 2006-01-31 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6221378B1 (en) * 1998-02-10 2001-04-24 Generex Pharmaceuticals Incorporated Mixed micellar delivery system and method of preparation
US7070799B1 (en) 1998-02-10 2006-07-04 Generex Pharmaceuticals, Inc. Method for administering insulin to the buccal region
US6017545A (en) * 1998-02-10 2000-01-25 Modi; Pankaj Mixed micellar delivery system and method of preparation
GB9803448D0 (en) * 1998-02-18 1998-04-15 Pharma Mar Sa Pharmaceutical formulation
AU4445201A (en) * 2000-03-30 2001-10-08 Generex Pharmaceuticals Inc. Method for administering insulin to the buccal region
AUPR381601A0 (en) * 2001-03-19 2001-04-12 Monash University Method of treating respiratory conditions
JP5052736B2 (ja) * 2001-05-30 2012-10-17 中外製薬株式会社 タンパク質製剤
EP1516627A1 (en) * 2003-09-17 2005-03-23 CONARIS research institute AG Interferon-Gamma for the treatment of diseases associated with the NOD2 gene
JP5137055B2 (ja) * 2006-03-10 2013-02-06 塩野義製薬株式会社 安定化されたインターフェロン−γ組成物

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0257956B2 (en) * 1986-08-19 2000-11-22 Genentech, Inc. Use of polypeptide growth factors and cytokines for the manufacture of a device and of a dispersion
PT88490B (pt) * 1987-09-14 1992-11-30 Novo Nordisk As Processo para a preparacao de composicoes farmaceuticas para libertacao nao-enterica trans-mucosa contendo monossacaridos ou oligossacaridos
IL88233A (en) * 1987-11-03 1993-08-18 Genentech Inc Gamma interferon formulation

Also Published As

Publication number Publication date
AU683469B2 (en) 1997-11-13
ATE173632T1 (de) 1998-12-15
FI111442B (fi) 2003-07-31
JP4053586B2 (ja) 2008-02-27
WO1994026302A1 (en) 1994-11-24
KR960702320A (ko) 1996-04-27
HUT72980A (en) 1996-06-28
ES2126114T3 (es) 1999-03-16
EP0697887B1 (en) 1998-11-25
CZ295595A3 (en) 1996-04-17
SK137895A3 (en) 1997-02-05
JPH08510242A (ja) 1996-10-29
CA2159602C (en) 2008-08-26
SK280958B6 (sk) 2000-10-09
NO954544D0 (no) 1995-11-10
DE69414841D1 (de) 1999-01-07
NZ266354A (en) 1997-06-24
HU9503223D0 (en) 1996-01-29
CN1122575A (zh) 1996-05-15
GR3029286T3 (en) 1999-05-28
HK1008303A1 (en) 1999-05-07
FI955136A0 (fi) 1995-10-27
PL311639A1 (en) 1996-03-04
KR100330325B1 (ko) 2002-11-01
DE69414841T2 (de) 1999-06-02
AU6782294A (en) 1994-12-12
PL176079B1 (pl) 1999-04-30
EP0697887A1 (en) 1996-02-28
NO954544L (no) 1995-11-10
DK0697887T3 (da) 1999-08-09
IL109350A (en) 2001-01-28
NO320069B1 (no) 2005-10-17
CN1120724C (zh) 2003-09-10
CA2159602A1 (en) 1994-11-24
FI955136A (fi) 1995-10-27
ZA942955B (en) 1995-10-30
TW275585B (cs) 1996-05-11
IL109350A0 (en) 1994-07-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ285389B6 (cs) Stabilní vodný farmaceutický prostředek, obal obsahující tento prostředek a způsob stabilizování IFN - je ve vodném prostředku
ES2286868T3 (es) Composicion acuosa a base de hormana del crecimiento humana.
EP1417972B2 (en) Stabilized teriparatide solutions
EP2586459B1 (en) Vegf antagonist formulations
AU2005249233B2 (en) Stabilized interferon liquid formulations
JP5346065B2 (ja) Ｈｓａを含まない安定なインターフェロン液体製剤
EP2399604A1 (en) Novel antibody formulation
US6982081B2 (en) Composition for treatment of and method of monitoring hepatitis C virus using interferon-TAU
US11207411B2 (en) Stabilized preparation of interferon beta variant
JP2002516874A (ja) 組換えヒトインターフェロンβ−１Ａ（ＩＦＮ−β−１Ａ）処方物
EP2585044B1 (en) Long-term storage of non-glycosylated recombinant human g-csf
JPS6048933A (ja) ガンマ−・インタ−フェロン組成物
WO2021245541A1 (en) A composition of pegylated interferon alpha-2b for the treatment of sars-cov-2 infection and related manifestations

Legal Events

Date Code Title Description
IF00 In force as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20140504