CZ285388B6 - Oxytocinový antagonista - Google Patents
Oxytocinový antagonista Download PDFInfo
- Publication number
- CZ285388B6 CZ285388B6 CZ952778A CZ277895A CZ285388B6 CZ 285388 B6 CZ285388 B6 CZ 285388B6 CZ 952778 A CZ952778 A CZ 952778A CZ 277895 A CZ277895 A CZ 277895A CZ 285388 B6 CZ285388 B6 CZ 285388B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- oxytocin
- antagonist
- compound
- pmp
- arg
- Prior art date
Links
- 239000003336 oxytocin antagonist Substances 0.000 title claims abstract description 39
- 229940121361 oxytocin antagonists Drugs 0.000 title claims abstract description 39
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 3
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 claims abstract description 27
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 claims abstract description 25
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 claims abstract description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 25
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 claims abstract description 24
- QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N D-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-SECBINFHSA-N 0.000 claims abstract description 21
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims abstract description 14
- GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N Vasopressin Natural products N1C(=O)C(CC=2C=C(O)C=CC=2)NC(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 claims abstract description 10
- 208000006399 Premature Obstetric Labor Diseases 0.000 claims abstract description 9
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims abstract description 6
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims abstract description 6
- 206010036600 Premature labour Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 208000026440 premature labor Diseases 0.000 claims abstract description 6
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims abstract description 5
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229960001639 penicillamine Drugs 0.000 claims abstract description 5
- LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-5-amino-2-(aminomethyl)-6-[(2r,3s,4r,5s)-5-[(1r,2r,3s,5r,6s)-3,5-diamino-2-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-amino-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-hydroxycyclohexyl]oxy-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl]oxyoxane-3,4-diol;sulfuric ac Chemical compound OS(O)(=O)=O.N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO LJRDOKAZOAKLDU-UDXJMMFXSA-N 0.000 claims abstract description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims abstract description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 claims abstract description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims abstract description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229960002429 proline Drugs 0.000 claims abstract description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 23
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 claims 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 54
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 abstract description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 abstract description 2
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 abstract description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 abstract description 2
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 description 66
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 description 64
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 description 62
- 102400000050 Oxytocin Human genes 0.000 description 62
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 62
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 42
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 24
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 description 22
- 230000004044 response Effects 0.000 description 21
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 18
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 17
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 16
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 15
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 14
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 11
- 108700000544 ANTAG III Proteins 0.000 description 10
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 10
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 10
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 10
- -1 ethyl 4-tetrahydrothiopyranylidene Chemical group 0.000 description 9
- 102000004279 Oxytocin receptors Human genes 0.000 description 8
- 108090000876 Oxytocin receptors Proteins 0.000 description 8
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 8
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 8
- 108700000560 ANTAG I Proteins 0.000 description 7
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 6
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 6
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 5
- 241000282520 Papio Species 0.000 description 5
- 208000036029 Uterine contractions during pregnancy Diseases 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 5
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 5
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 5
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 5
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229940116211 Vasopressin antagonist Drugs 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 239000003038 vasopressin antagonist Substances 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N D-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001504519 Papio ursinus Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 238000005915 ammonolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 230000012173 estrus Effects 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000002632 myometrial effect Effects 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 3-mercaptopropanoic acid Chemical class OC(=O)CCS DKIDEFUBRARXTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700000551 ANTAG II Proteins 0.000 description 2
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 2
- 229930182827 D-tryptophan Natural products 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 2
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- XNOPRXBHLZRZKH-MQYCRUOZSA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1C(CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-MQYCRUOZSA-N 0.000 description 2
- QKFJKGMPGYROCL-UHFFFAOYSA-N phenyl isothiocyanate Chemical compound S=C=NC1=CC=CC=C1 QKFJKGMPGYROCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940117953 phenylisothiocyanate Drugs 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N protoneodioscin Natural products O(C[C@@H](CC[C@]1(O)[C@H](C)[C@@H]2[C@]3(C)[C@H]([C@H]4[C@@H]([C@]5(C)C(=CC4)C[C@@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@H](CO)O4)CC5)CC3)C[C@@H]2O1)C)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- UERNRFHISLXQFU-DFWYDOINSA-N (2S)-5-oxopyrrolidine-2-carboxylic acid pyridine Chemical compound c1ccncc1.OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 UERNRFHISLXQFU-DFWYDOINSA-N 0.000 description 1
- WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N (2s)-5-[amino-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]methylidene]azaniumyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C=C1 WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- IZIWNJRAVSDMFB-DEOFYFBKSA-N (2s)-n-[(2s)-1-[(2-amino-2-oxoethyl)amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-1-[(4r,7s,13s,16r)-7-(2-amino-2-oxoethyl)-10-(3-amino-3-oxopropyl)-13-[(2s)-butan-2-yl]-16-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-20,20-dimethyl-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentaza Chemical compound C([C@@H]1C(=O)N[C@H](C(NC(CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC(C)(C)CC(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 IZIWNJRAVSDMFB-DEOFYFBKSA-N 0.000 description 1
- AGFYZLVFPSGUIX-UHFFFAOYSA-N (4-methylphenyl)methanethiol Chemical compound CC1=CC=C(CS)C=C1 AGFYZLVFPSGUIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HJMMCTZLXOVMFB-LBPRGKRZSA-N (4-nitrophenyl) (2s)-5-amino-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-5-oxopentanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 HJMMCTZLXOVMFB-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 108700035816 1-deaminopenicillamine- oxytocin Proteins 0.000 description 1
- DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 1-hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1.C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 DFPYXQYWILNVAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800001144 Arg-vasopressin Proteins 0.000 description 1
- IAPXDJMULQXGDD-NSHDSACASA-N Boc-Asn-OPhNO2 Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 IAPXDJMULQXGDD-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000986765 Homo sapiens Oxytocin receptor Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-Leucine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 1
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 1
- 125000003440 L-leucyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- NHTGHBARYWONDQ-JTQLQIEISA-N L-α-methyl-Tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@](N)(C)CC1=CC=C(O)C=C1 NHTGHBARYWONDQ-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 238000006845 Michael addition reaction Methods 0.000 description 1
- AXDLCFOOGCNDST-UHFFFAOYSA-N N-methyl-DL-tyrosine Natural products CNC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 AXDLCFOOGCNDST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 1
- 208000005107 Premature Birth Diseases 0.000 description 1
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 101500028584 Rattus norvegicus Oxytocin Proteins 0.000 description 1
- 101000986756 Rattus norvegicus Oxytocin receptor Proteins 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 229940083335 Vasopressin agonist Drugs 0.000 description 1
- 102100026383 Vasopressin-neurophysin 2-copeptin Human genes 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- YBCVMFKXIKNREZ-UHFFFAOYSA-N acoh acetic acid Chemical compound CC(O)=O.CC(O)=O YBCVMFKXIKNREZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- VWXRQYYUEIYXCZ-OBIMUBPZSA-N atosiban Chemical compound C1=CC(OCC)=CC=C1C[C@@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CCCN)C(=O)NCC(N)=O)CSSCCC(=O)N1 VWXRQYYUEIYXCZ-OBIMUBPZSA-N 0.000 description 1
- 229960002403 atosiban Drugs 0.000 description 1
- 108700007535 atosiban Proteins 0.000 description 1
- QFFVPLLCYGOFPU-UHFFFAOYSA-N barium chromate Chemical compound [Ba+2].[O-][Cr]([O-])(=O)=O QFFVPLLCYGOFPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 159000000006 cesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N chloroform Substances ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 230000009989 contractile response Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N dcm dichloromethane Chemical compound ClCCl.ClCCl DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008232 de-aerated water Substances 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 1
- 230000002196 ecbolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 1
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- OCLXJTCGWSSVOE-UHFFFAOYSA-N ethanol etoh Chemical compound CCO.CCO OCLXJTCGWSSVOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMRYLZJIPRVVCW-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-(oxan-4-ylidene)acetate Chemical compound CCOC(=O)C=C1CCOCC1 HMRYLZJIPRVVCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDKTXUZRZVUZRW-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-(thian-4-ylidene)acetate Chemical compound CCOC(=O)C=C1CCSCC1 BDKTXUZRZVUZRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 1
- 102000052321 human OXTR Human genes 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 235000014705 isoleucine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000005567 liquid scintillation counting Methods 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- COTNUBDHGSIOTA-UHFFFAOYSA-N meoh methanol Chemical compound OC.OC COTNUBDHGSIOTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004118 muscle contraction Effects 0.000 description 1
- 210000000754 myometrium Anatomy 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000000276 potassium ferrocyanide Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 235000013930 proline Nutrition 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000006190 sub-lingual tablet Substances 0.000 description 1
- 229940098466 sublingual tablet Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- XOGGUFAVLNCTRS-UHFFFAOYSA-N tetrapotassium;iron(2+);hexacyanide Chemical compound [K+].[K+].[K+].[K+].[Fe+2].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] XOGGUFAVLNCTRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AWDBHOZBRXWRKS-UHFFFAOYSA-N tetrapotassium;iron(6+);hexacyanide Chemical compound [K+].[K+].[K+].[K+].[Fe+6].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] AWDBHOZBRXWRKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRJVKCZJCNSOW-UHFFFAOYSA-N thian-4-one Chemical compound O=C1CCSCC1 OVRJVKCZJCNSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- GGUBFICZYGKNTD-UHFFFAOYSA-N triethyl phosphonoacetate Chemical compound CCOC(=O)CP(=O)(OCC)OCC GGUBFICZYGKNTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 238000000870 ultraviolet spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 238000005292 vacuum distillation Methods 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/16—Oxytocins; Vasopressins; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/06—Antiabortive agents; Labour repressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/26—Containing cys-cys disulfide bridge between nonadjacent cysteine residues
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Paints Or Removers (AREA)
- Polyoxymethylene Polymers And Polymers With Carbon-To-Carbon Bonds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Abstract
Oxytocinový antagonista vzorce I, kde ( S ) Pmp je kyselina .beta., .beta. - ( 3-thiapentamethylen ) - .beta. - merkaptopropionová, D- Trp je D forma tryptofanu a Ile, Gln, Asn, Pen ( Pen=penicilamin ), Pro, Arg, jsou L formy isoleucinu, glutaminu, asparaginu, prolinu a argininu. Tato sloučenina může být podána těhotným ženám pro zabránění předčasnému porodu při vyloučení nežádoucích vedlejších účinků způsobených antagonismem k antidireutickému hormonu, vasopresinu.ŕ
Description
Předložený vynález se týká nové sloučeniny, která je vysoce aktivní jako oxytocinový antagonista a která vykazuje slabý antagonismus pro vasopresin.
Dosavadní stav techniky
Předčasný porod je hlavní příčinou prenatální morbidity a mortality ve Spojených státech. Současné metody inhibice předčasného porodu nejsou vždy úspěšné a jsou často spojeny s výraznými vedlejšími účinky. Protože děloha je cílovým orgánem pro oxytocin, považuje se oxytocin za důležitý faktor, působící při předčasném porodu, mohl by vývoj potentního oxytocinového antagonisty vést k úspěšné inhibici předčasného porodu s malými vedlejšími účinky.
Strukturně jsou oxytocin (OT) a antidiuretický hormon (ADH), také nazývaný vasopresin, podobné. Jejich struktury jsou pro porovnání uvedeny dále:
3 456789
Cys-Tyr-Ile-Gin-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2
OXYTOCIN (OT)
3 456 789
Cys-Tyr - Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH2
VASOPRESIN (ADH)
V literatuře jsou uváděny různé informace o syntéze antagonistů ADH pro použití při léčbě hypertenze a syntéze antagonistů acytocinu. V 1960, Law H.D. a V. DuVigneaud, J. Am. Chem. Soc., 82:4579, popsali první syntézu oxytocinového antagonisty (2-O-methyltyrosin-OT).
V roce 1967, Chán, Fear a DuVigneaud, Endocrinology, 81:1267, popsali syntézu 1-Lpenicilamin-oxytocinu a 1-deaminopenicilamin-oxytocinu. Toto byla první studie pro prokázání in vivo inhibičního účinku oxytocinového antagonisty na děložní stahy a odpověď na oxytocin u anestetizovaných krys.
V roce 1980, Sawyer a spol., Endocrinology, 106:81, popsali syntézu oxytocinového antagonisty, která spojuje dva důležité rysy antagonisty Lawa a DuVigneauda a antagonisty podle Chena a spol.. Nový antagonista byl (1-deamino-penicilamin, 2-O-methyltyrosin) oxytocin. Nový antagonista má pA2 7,8 jak bylo stanoveno oxytocickou biozkouškou. pA2 je negativní logaritmus molámí koncentrace antagonisty, který redukuje odpověď na antagonistů o 1/2. Toto je definováno Schildem, British J. Parmacology, 2:189 (1947).
V roce 1983, Manning a spol., J. Med. Chem., 26:1607-161 popisuje syntézu mnoha antagonistů ADH. Jeví se, že jeden z těchto antagonistů má potenciální antioxytocinovou aktivitu [β,β
- 1 CZ 285388 B6 pentamethylen-£-merkaptopropionová kyselina’, D-Phe2,Ile4]argininvasopresin s pA2 8,2, nebo jinak řečeno, 2,5krát potentnější než antagonista popsaný Sawyerem a spol., v roce 1980 (viz str. 1610, tabulka I, sloučenina č. 1). Tento oxytocinový antagonista může být nazván [Pmp1, DPhe2, Phe3, Ile4, Arg8]oxytocin. Příbuzný oxytocinový antagonista, [Pmp1, D-Trp2, Phe3, Ile4, Arg8]oxytocin, byl popsán Wilsonem a Flouretem, Abstract for Socienty for the Study of Reproduction meeting July 14-17, 1986.
V roce 1981, Melin a spol., Endocrinology, 88:173, vyvinuli oxytocin antaconistu pro inhibici předčasného porodu. Syntetizovali 1-deamino, ethyloxytocin, který měl pA2 7,2. Také prokázali, že tato sloučenina inhibuje děložní stahy u krys in vivo a u lidí in vitro a in vivo (Akerland a spol., Obstet. and Gynecol., 62:309, 1983). V roce 1985, Akerland a spol., Obstet. And Gynecol. Scand., 64:499, popsali syntézu 1-deamino [D-Tyr(Oet)2, Thr4, Om8]vasopresinu s pA2 8.3. Tuto sloučeninu testovali in vitro na tkáni lidské dělohy a prokázali, že inhibuje děložní stahy.
US patent č. 4597901 popisuje třídu vasopresin antagonistů, ve kterých cystein-1 je přítomen jak v oxytocinu tak vasopresinu a je nahrazen kyselinou p,|3-cyklopentamethylen-|3-merkaptopropionovou.
Jiné aminokyseliny vasopresinu jsou substituovány. Výsledná třída sloučenin jsou vasopresin antagonisté s biologickou aktivitou manifestovanou vodní diurézou.
Podstata vynálezu
Předložený vynález zahrnuje oxytocinového antagonistu, který je analogem oxytocinu. Ve sloučenině podle vynálezu, je cystein-1 oxytocinu nahrazen kyselinou P,p-(3-thiepentamethylen)-|3-merkaptopropionovou. Navíc je L-tyrisin-2 nahrazen D-tryptofanem a penicilamin nahrazuje 1-cystein v poloze 6 a L-arginin nahrazuje v poloze 8 L-leucin. Výsledná sloučenina [(S)Pmp1, D-Trp2, Pen6, Arg8]oxytocin, je považována za novou a byly u ní nalezeny významné vlastnosti. Je vysoce aktivním oxytocinovým antagonistou. Současně, i když je strukturně podobná vasopresinu a vasopresinovým antagonistům popsaným v literatuře, vykazuje nová sloučenina minimální ADH antagonismus. Jestliže se tyto dva antagonismy vyjádří jako poměr, má sloučenina podle vynálezu velmi vysoký poměr anti-oxytocin/anti/ADH aktivity. Tato kombinace vlastností je vysoce výhodná pro terapeutické použití. Účinné anti-oxytocinového působení může být dosaženo s minimálními anti-Adh vedlejšími účinky. Sloučenina podle předloženého vynálezu je proto vhodná pro inhibici stahů děložního svalu v odpovědi na tělesný oxytocin a může být použita pro potlačení předčasného porodu.
Vlastním předmětem vynálezu je oxytocinový antagonista podle předloženého vynálezu má vzorec I
23456789
kde Pmp je kyselina
P,[3-(3-thiapentamethylen)-[3-merkaptopropionová, D-Trp je D forma tryptofanu a Ile, Gin, Asn, Pen (Pen = penicilamin), Pro, Arg, jsou L formy isoleucinu, glutaminu, asparaginu, prolinu a argininu.
-2 CZ 285388 B6
Dalším předmětem vynálezu je farmaceutický prostředek s obsahem oxytocinační antagonisty jako účinné složky k použité při ošetřování těhotných žen k zabránění předčasnému porodu, při vyloučení nežádoucích vedlejších účinků způsobených antagonismem k antidiuretickému hormonu.
Významné vlastnosti nové sloučeniny podle vynálezu jsou prokázány biostudiemi, které budou popsány dále.
Oxytocinová biostudie
Protokol použitý pro postup pro oxytocinovou biostudii je odvozen od postupů popsaných v článku Sawyera a spol., Endocrinology, 106:81 (1980), který je naopak založen na publikacích Munsicka, Brit. J. Pharmacol., 3:328 (1960) a Holtona, Brit. J. Pharmacol., 3:328 (1948). Výpočty pK2 byly popsány Schildem British J. Pharmacology, 2:189 (1947). Hlavní rozdíl v postupu podle vynálezu od postupů popsaných je ten, že plocha podle kontrakcí je integrována, zatímco většina jiných technik vypočítává amplitudu. Integrace poskytuje mnohem konzistnější a spolehlivější výsledky, ačkoliv pK2 hodnoty jsou přibližně řádově nižší než ty, které jsou uváděny za použití amplitudy kontrakce jako konečného bodu.
Metoda:
1. Pro zkoušku se použijí 1,5 cm kousky zvířecí dělohy z nedotčených krys (Holtzman) v přirozeném esteru.
2. Pufr/lázeň pro studii - Použitý pufr je Munsinks. Tento pufr obsahuje 0,5 mM Mg++, který snižuje pA2 hodnocení, ale výsledky jsou uvedeny pro lepší korelaci s in vivo daty (Sawyer a spol., 1980). Pufr je plynován kontinuálně 95 % kyslíku, 5 % oxidu uhličitého, což poskytuje pH 7,4. Teplota lázně pro studii je 37 °C. Pro studii se použije 10 ml lázeň, která obsahuje vodní plášť pro udržení teploty a výstupní a vstupní hroty pro přívod a odstranění pufru.
3. Polygraf/převáděč - Kousky děložní tkáně použité ve studii se na jednom konci ukotví a napojí k zařízení Statham Strain Gauge Force Transducer na opačném konci, který je naopak připojen k zařízení Grass Polygraph Model 79 pro sledování stahů.
4. Studiový protokol (a) Tkáň se ekvilibruje v lázni pro studii po jednu hodinu s promýváním novým pufrem každých patnáct minut. Po celou dobu je tkáň zatížena zatížením 1 gram.
(b) Tkáň se na počátku stimuluje oxytocinem při 10 nM pro „aklimatizaci“ tkáně a se 4 mM KC1 pro stanovení maximální stahové odezvy.
(c) Křivka odezvy kumulativní dávky je pak poskytnuta s oxytocinem a koncentrace oxytocinu rovná přibližně 80 % se použije pro hodnocení pA2 antagonisty.
d) Tkáň se vystaví oxytocinu (Calbiochemical, San Diego, Kalifornie) na jednu minutu a promyje se. Před přídavkem další dávky agonisty nebo antagonisty se dodržuje tříminutový interval. Jeli testován antagonista, podá se tento pět minut před agonistou. Pro agonistu činí jednu minutu. Všechny odezvy jsou integrovány za použití zařízení 7P10 Grass Integrátor. Toto je hlavní rozdíl mezi předloženým protokolem a jinými protokoly známými z literatury, které obvykle měří amplitudu stahů jako odezvu. Jedna koncentrace oxytocinu, rovna 80 % maximální odezvy, se použije pro test antagonisty. Použijí se tři různé koncentrace antagonisty, dvě, které budou redukovat odezvu na antagonistu menší než 50 % a jedna, která bude redukovat odezvu větší než 50 % (ideální by byl tento vztah 25 %, 50 % a 75 %). Toto se opakuje třikrát pro každou dávku antagonisty po tři studie.
-3 CZ 285388 B6 (e) Výpočty pA2: Poměry dávka-odezva (DR) se vypočtou pro antagonistu a zobrazí se Schildův graf vynesením log (DR-1) proti log koncentrace antagonisty. Vynesená křivka se vypočte pomocí čtverečné regresní analýzy. pA2 je koncentrace antagonisty v bodě, kde regresní čára protíná 0 bod log (DR-1) souřadnice. pA2 je převrácený log koncentrace antagonisty, která bude snižovat odezvu na agonistu na polovinu.
Jako analog oxytocinu, může být nová sloučenina podle vynálezu nazvána jako [(S)Pmp’,DTrp2,Pen6, Arg8] oxytocin. Jestliže sloučenina byla testována ve výše popsané studii na kompetitivní antagonismus s oxytocinem, byla jako průměr z deseti zkoušek hodnota pA2 nalezena jako větší než 8,86.
ADH-biostudie
Výše uvedená sloučenina byla také testována na antagonismus k vasopresinu. Anti-Adh aktivita mohla být stanovena měřením změny vděložním výstupu způsobené ADH za přítomnosti a nepřítomnosti antagonisty. Vhodná ADH-studie je popsána v práci Sawyera a spol., Endocrinology, 63:694 (1958). Při testu touto metodou bylo zjištěno, že sloučenina [(S)Pmp1, DTrp2,Pen6,Arg8]oxytocin vykazuje velmi nízkou aktivitu jako antagonista vasopresinu. Poměr oxytocinového antagonismu k ADH antagonismu byl velmi vysoký, nad 1866 ve srovnání se 200 pro kompozice popsané v rodičovských přihláškách.
Pro svoji oxytocin antagonistickou aktivitu s minimálním vasopresin antagonismem, sloučenina podle vynálezu bude vhodná pro léčbu symptomů, vyžadujících oxytocin antagonistu u lidí a zvířat. Může být použita pro inhibici děložních stahů a ztráty mléka jakož i pro inhibici předčasného porodu. I když struktura sloučeniny je složena jak z oxytocinu tak vasopresinu, vykazuje nejen zvýšenou anti-oxytocinovou aktivitu, ale také silně zvýšenou anti—ADH aktivitu. Tato sloučenina by také mohla být použita pro inhibici dysmerroheay nebo sloužit jako antidotum při nadměrné stimulaci děložních stahů během vyvolání porodu oxytocinem nebo pro léčbu hypertenze.
Sloučenina podle vynálezu může být podávána ženám různými známými způsoby podání. Pro nemocniční použití bude vhodným způsobem podání intravenózní infuze. Nicméně může být sloučenina také podávána intraperitoneálně, subkutánně nebo intramuskulámě. Orální podání může být také uskutečnitelné. Pokud je to žádoucí, mohou být tablety nebo kapsle poskytnuty s enterickým potahem, chránícím sloučeninu před destrukcí v žaludku a umožňujícím její uvolnění v intestinálním traktu. Sublinguální podání poskytnutím vhodné dávky této sloučeniny v tabletových triturátech umístěných pod jazyk může být také proveditelné. Toto je způsob, kterým se podává hormon oxytocin pro vyvolání ztráty mléka z prsů taktující matky.
V této léčbě se používá účinné, ale netoxické množství sloučeniny. Dávkový režim pro ochranné nebo léčebné symptomy pro sloučeninu podle vynálezu je vybrán podle mnoha různých faktorů, zahrnujících typ, stáří, hmotnost, pohlaví a medikální stav ženy, obtížnost symptomů a způsob podání sloučeniny. Ošetřující lékař stanoví a předepíše účinné množství oxytocin antagonisty podle způsobu podání pro prevenci nebo zastavení stavu, který je inhibován. Například se rozmezí účinné dávky pohybuje od 0,01 do 100 miligramů na kilogram tělesné hmotnosti na den při podání intravenózním způsobem, ve sterilním normálním salinickém roztoku.
Sloučenina podle vynálezu může být připravena novou metodou. Náhrada tryptofanu v peptidech musela být vyloučena, protože Trp-peptidy jsou citlivé ke kyselinám. Bodanszky a spol., J. med. Che., 23:1258-1261 (1980) a Sawyer a spol., Endocrinology, 106:81 (1980) vyrobili [Trp8]oxytocin mnohem nesnadnějšími nepřímými metodami, za účelem vyloučení zpracování
-4 CZ 285388 B6
Trp-peptidu v kyselém prostředí. Způsoby popsané v US přihláškách č. 07/289780 a 07/433644 jsou zde zahrnuty jako reference.
Příklady provedení vynálezu
Příklad I ίο Syntéza [(S)Pmp1, D-Trp2,Pen6,Arg6]oxytocinu
Syntéza derivátů kyseliny β-merkaptopropionové.
Tetrahydrothiopyran—4-on se nechá reagovat s triethylfosfonoacetátem metodou popsanou 15 Wadsworthem a Emmonsem (Wadsworth W.S., Jr. Emmons, W.D. (1971) vOrganic synthesis (Baumgarten, H. vyd.) Col. Vol. V., str. 547-549, John Wiley & Sons, NY), za poskytnutí ethyl4-tetrahydrothiopyranyliden(TPE)acetátu. Michaelovou adicí 4-methylbenzylmerkatpanu metodou Podle Yima a Huffmana (Yim, N.C.F. a Huffman W.F. (1983) Int. J. Pept. Prot. Res. 21, 568-570) a zmýdelněním se získá tetrahydrothiopyranyl—4-(4-methyl-benzylthio)-4-octová 20 kyselina nebo (S)PmP(S-Meb). Viz obr. 1.
Používané zkratky plně odpovídají doporučení IUPACIUB Comminssion on Biochemical Nomenclature (J. Bio. Chem. 264, 688-673 (1989)). Pokud není uvedeno jsou aminokyseliny v L-konfiguraci. Jiné použité zkratky jsou: OT - oxytocin; PmP-p,P~pentamethylen-P-mer25 kaptopropionová kyselina; (S)Pmp~P,[3-(3-thiapentapentamethylen)-(3-merkaptopropionová kyselina; Boc- terč, butoxykarbonyl,; Meb-4-methylbenzyl; Tos-p-toluensulfonyl; ONp-4nitrofenyl ester; DCM-dichlormethan; TFA-kyselina trifluoroctivá; EtOH-ethanol; DIEAdiisopropylethylamin; DMF-dimethylformamid; DCC-dicyklohexylkarbodiimid; HOBt-1hydroxybenzotriazol; MeOH-methanol; CHL-chloroform; Ac2O-cetanhydrid; TEA-triethyl30 amin; MeCN-acetonitril; BuOH-n-butanol; AcOH kyselina octová, Pyr-pyridin; Et20ethylether; HPLC-vysokotlaková kapalinová chromatografie; TLC-chromatografíe na tenké vrstvě; PITC-fenylisothiokyanát; PTC-fenylthiokarbamyl; UV ultrafialový; OR optická otáčivost.
Syntéza peptidů
Všechny chráněné prekurzory antagonistů byly syntetizovány manuálně metodou v pevné fázi (SP-solid phase) (Merrifield R.B. (1963) J. Am. Chem. Soc. 85, 2149-54). Následovala Bocaminokyselinová strategie syntézy (Stewart J. M. a Yuong J.D (1984) v Solid Phase Peptide 40 Synthesis str. 1-176, Pierce Chemical Co., Rockford, IL). Všechny polohy 1 analogu PmP měly thiolovou skupinu chráněnou 4-methylbenzylovou skupinou. Úplná kondenzace byla sledována pomocí ninhydrinového testu (Kaiser E. Colescot R.L., Bossinger C.D. a Cook P.I. (1970) Anal. Biochem. 34, 595-598). Chráněné peptidy byly z pryskyřice odstraněny amonolýzou (Manning M., (1968) J. Am. Chem. Soc. 90, 1348-1349). Chráněné peptidy byly zbaveny chránících 45 skupin na funkcích postranního řetězce redukcí pomocí Na/kapalný amoniak (du Vigneaud V.,
Ressler C., Swan J.M., Roberts C.W., katsoyannis P.G. a Gordon S. (1953) J. Am. Chem. Soc. 75, 4879-4880) nebo kap. HF-anisolem (Sakakibara S. a Shinonishi Y. (1965) Bul. Che. Soc. Jpn. 38, 1412-1413) a byly cyklizovány disulfhydrylpeptidy ve velmi zředěném roztoku (Manning M., Lammek B. a Kolodziejczyk A.M. (1981) J. Med. Chem. 24, 701-706) na 50 cyklické disulfidy oxidací hexakyanoželezitanem draselným (Hope D.B., Murti V.V.S. a du
Vigneaud V. (1962) J.Biol.Chem. 237, 1563-1566). Volné peptidy byly zbaveny malých množství vedlejších produktů a solí gelovou filtrací (Porath J. a Flodin P. (1959) Nátuře (Londýn) 183, 1657-1659) na Sephadexu G-15 (Manning M., Wuu T.C. a Baxter J.W.M. (1968)
- 5 CZ 285388 B6
J. Chromatogr. 38, 396-398) a preparativní vysokotlakovou kapalinovou chromatografii (HPLC) (Flouret G. Brieher W., Mahana K. a Wilson L., Jr. (1991) J. med. Chem. 34, 643-646). Čistota peptidu byla sledována pomocí TLC, HPLC a aminokyselinové analýzy (Bidlingmeier v Solid Phase Peptide Synthesis str. 1-176; Pierce Chemical Co., Rockford, IL). Pro aminokyselinovou analýzu byly analogy hydrolyzovány 6N HCI po 24 h při 110 °C a výsledné aminokyselinové složky byly derivatizovány fenylisothiokyanátem a analyzovány metodou Waters Associates Picotag (za použití Waters Picotag setu jak uvedeno výše (Flouret G., Brieher W., Mahan K. a wilson L Jr. (1991) J. med. Chem. 34, 642-646). Optické otáčivosti byly měřeny pomocí zařízení Rudolph Polarimeter (přesnost ± 0,01°).
Syntéza chráněných peptidů v pevné fázi
Boc-aminokyseliny byly použity pro syntézu a pro ochranu funkčních skupin vedlejšího řetězce, Boc-Arg(Tos), Boc-Pen(Med) a (S)Pmp(Meb). Byla použita Boc-Gly-pryskyřice (0,7 mmol Boc-Gly/g), která byla připravena na 200 až 400 mesh chlormethylované pryskyřice (BioRed), 1% zesítění divinylbenzenem, esterifikací solí cesia s příslušnou Boc-aminokyselinou (Gisin B.F. (1973) Helv. Chim. Acta 65, 1476-1482). Boc-Gly-piyskyřice (0,5-0,7 mmol/g) byly ručně vsazeny do požadovaného počtu kondenzačních cyklů SP metodou syntézy jak byla modifikována dříve (Flouret G., Brieher W., Mahan K. a Wilson L. Jr. (1991) J. Med. Chem. 34, 642-646). V každém cyklu byla Boc skupina odstraněna 30% kyselinou trifluoroctovou v DCM a po neutralizaci pryskyřice s 10% DIEA byla provedena kondenzace se trojnásobným přebytkem Boc-aminokyselina a DCC. Ve příslušných stupních byl použit šesti molámí přebytek Boc-Asn-ONp nebo Boc-Gln-ONp v DMF a přebytek činidla byl odstraněn vysrážením vodou. Ukončení kondenzačního stupně bylo sledováno pomocí ninhydrinového testu, který obvykle poskytne negativní odezvu. Je-li test pozitivní, byl kondenzační stupeň opakován, ale byl-li pouze slabě pozitivní, byl peptid zakončen acetylací s Ac2O:DIEA:DCM (1:1:8). Nechráněný Boc-D-Trp byl zaveden do polohy 2. Boc-skupina pak byla odstraněna 30% TFA v DCM, obsahujícím 1 % merkaptoethanolu a 10% anisolu a (S)Pmp(S-Meb) byl zaveden ve 3molámím přebytku v DMF roztoku aktivací s DCC a HOBt. Konečný složený peptid byl odstraněn z pryskyřice amonolýzou s MeOH (25 ml) nasyceným amoniakem. Po 3 dnech byla pryskyřice odstraněna filtrací a třikrát extrahována horkým DMF. Methanolický filtrát a DMF extrakty byly spojeny a odpařeny dosucha. Zbytek byl rozpuštěn v DMF (2-3 ml) a chráněný peptidamid byl vysrážen ze spojených DMF extraktů zpracováním vodou nebo EtOH:Et2O, za získání 400 až 600 mg chráněného peptidu. TLC analýza chráněných peptidů získaná po amonolýze obvykle vykazuje jednu hlavní složku s malými množstvími nečistot a proto tyto látky mohou být použity přímo pro odstranění chránících skupin a přípravu volných analogů.
Ethyl-4-tetrahydrothiopyranylidenacetát
Tento ester byl připraven jak je popsáno pro přípravu ethyl-4-tetrahydropyranylidenacetátu (Wandsworth, W.S., Jr. Emmons W.D (1973) vOrganic Synthesis (Baumgarten H. Ed.) Coli. Vol. V., str. 547-549, John Wiley & Sons, New York) a vakuovou destilací, olej (73% výtěžek).
Kyselina tetrahydrothiopyranyl-4-(4-methyl-benzylthio)-4-octová, nebo (S)Pmp(4-S-Meb).
Tato chráněná kyselina byla připravena z předchozího esteru, metodou podle Yima a Huffmana jak je popsána pro Pmp (Int. J. Pept. Prot. Res. 21, 568-570, 1983), t.t. 113 až 1158 (50-70% výtěžek). [(S)Pmp1, D-Trp2, Pen6, Arg8]OT nebo Antag III.
(S)-Pmp(S-Meb)-D-Trp-Ile-Gln-Asn-Pen(Meb)-Pro-Arg(Tos)-Gly-NH2 (600 mg), sestavený metodou SP (vycházející z 0,5 mmol aminokyselinové pryskyřice) jak je popsáno výše, se rozpustí v kapalném amoniaku (200 ml) čerstvě destilovaného ze sodíku a zpracovaného za bezvodých podmínek s kouskem sodíku až do zachování světle modré barvy po asi 15 až
-6CZ 285388 B6 sekund. Po odpaření amoniaku ve vakuu se pevná látka rozpustí ve 20 ml 50% AcOH. Tento rozpuštěný peptid se přidá k odvzdušněné vodě (2 1) (tento velký objem může být významně snížen modifikovaným postupem), pH se upraví na 7,0 přídavkem koncentrovaného hydroxidu amonného a cyklizace na peptiddisulfid se provede asi při titraci disulfhydrylpeptidu s 0,01 N hexakyanoželezitanem draselným do vzniku trvalé žluté barvy a pak přídavkem 20% přebytku roztoku hexakyanoželezitanu. Po 20 min se hexakyanoželezitanové a hexakyanoželeznatanové soli odstraní mícháním po 10 min s AG1 X-2 (Cf) iontoměničovou pryskyřicí (15 g) a pak průchodem suspenze sloupcem, obsahujícím další iontovýměnnou pryskyřici (15 g) za použití dalšího 0,2N AcOH (100 ml) pro promývání. Spojené filtráty a promývací roztoky se lyofilizují. Analýza získané pevné látky, obsahující peptid, byla provedena na analytické pBondapak Ci8 koloně (30 x 0,39 cm), monitorování při 220 nm a eluce isokraticky s 55 % rozpouštědla B (rozpouštědlo A, 0,05 % TFA; rozpouštědlo B 60 % MeCN-40 % 0,05 % TFA) rychlostí l,8ml/min. Za těchto podmínek zde dochází k dobrému oddělení nečistot. Pryskyřice byla rozpuštěna v nejmenším možném objemu 50% kyseliny octové a nanesena na sloupec Sephadexu G-15 (115 x 2,7 cm) a eluuje se stejným rozpouštědlem rychlostí asi 50 až 60 ml/h (6). Eluát se sleduje vUV spektrofotometru při 254 nm. Frakce, odpovídající hlavnímu píku se sledují analytickou HPLC, analytickou pBondapakovou CI8 kolonou (30 x 0,39 cm), za eluce 57 % rozpouštědla B a peptidy se detegují při 220 nm. Čisté frakce z hlediska HPLC se spojí a lyofilizují. Zbytek se rozpustí ve 0,2N AcOH (20 ml) a nanese na preparativní Danymax-60A, 8 pm, CI8 (Rainin) kolona, 21,4 x 25 cm, s 5 cm ochranným modulem. Gradient probíhal od 0 do 45 % B po 45 minut, eluce při 5 ml/min, sledování eluentu při 280 nm. Střední části hlavní složky se eluují po přibližně 3,5 h. Čistší frakce stanovené podle analytické HPLC, byly spojeny a lyofilizovány a získal se Antag III (240 mg, 42 % z počáteční pryskyřice). Analogická čistota byla potvrzena chromatografii na tenké vrstvě (TLC) ve čtyřech oddělených rozpouštědlových systémech, analytickou HPLC a aminokyselinovou analýzou. Analogy poskytly očekávané poměry ± při aminokyselinové analýze. D-Tryptofan v peptidech byl hodnocen UV spektrofotometrií při 280 nm (13). Nižší hodnota nalezené pro tryptofan, 0,96, naznačuje, že peptidový lyofilizát může obsahovat TFA a/nebo vodu.
Tabulka 1 [a]D 270 - 39° (IN, AcOH
TLC (A) n-BuOH-AcOH-H2O (4:1:1) Rf 0,27 (B) n-BuOH-AcOH:H2O (4:1:5, horní fáze) Rf 0,42 (C) n-BuOH-AcOH:H2O (5:1:1) Rf 0,19 (D) n-BuOH-AcOH:H2O:Pyr (5:1:1:1) Rf 0,56
Příklad III
Srovnávací testování sloučenin
Pro srovnání s [(S)Pmp1, D-Trp2, Pen6, Arg8]oxytocin (antagonista D v tabulce 2) byly syntetizovány tři příbuzné sloučeniny. Jednou z nich je sloučenina popsaná Manningem a spol., J. Med. Chem. 26:1607-1613 (1983). Tato sloučenina může být nazvána [Pmp1, D-Phe2, Phe3, Ile4,Arg8]oxytocin. Tato sloučenina je v tabulce 2 nazývána Antagonista A. Další sloučeninou byl [Pmp1, D-Trp2, Phe3, Ile4, Arg8]oxytocin, který byl popsán v US č. 07/23980 a je označen v tabulce 2 jako antagonista B. Třetí srovnávací sloučenina - [Pmp1, D-Trp2, Arg8]oxytocin byl popsán v US přihlášce č. 07/433664 a je označen jako antagonista C v tabulce 2. V biostudii byly srovnávány čtyři sloučeniny.
- 7 CZ 285388 B6
Oxytocinová biostudie
Protokol použitý pro oxytocinovou biostudii je odvozen od postupu popsaného v článku Sawyera a spol, Endocrinology, 106:81 (1980), který je naopak založen na článku Munsicka, Brit. J. Pharmacol., 3:328 (1960) a Holtona, Brit. J. Pharmacol., 3:328 (1948). Výpočty pro pA2 hodnoty jsou popsány Schildem, Brit. J. Pharmacol. (1947). Hlavní rozdíl v postupu od postupů dříve popsaných spočívá v integraci plochy pod kontrakcí místo ve výpočtu amplitudy. Integrace poskytuje mnohem konzistentnější a správnější výsledky, i když pA2 hodnoty jsou asi řádově nižší než ty, které jsou uváděny za použití amplitudy kontrakce jako konečného bodu.
Metoda: Zvířata: 1,5 cm kousky dělohy z nedotčených krys (Holtman) v přirozeném estru se použijí pro zkoušku. Pufr/zkouška lázeň: Použitým pufrem je Munsickův pufr. Tento pufr obsahuje 0,5 mM Mg4-1, který redukuje pA2 hodnoty, ale výsledky jsou uváděny tak, že lépe korelují s daty in vivo (Sawyer a spol., 1980). Tento pufr je kontinuálně plynován 95 % kyslíku: 5 % oxidu uhličitého na pH 7,4. Teplota zkušební lázně je 37 °C. Používá se 10 ml zkušební lázeň, která obsahuje vodní plášť pro udržení teploty a přívodní a výstupní trubičky pro přidávání a odstraňování pufru.
Polygraf/převáděč. Kousky děložní tkáně použité pro zkoušku se napojí na zařízení Statham Strain Gauge Force transducer, který se naopak připojí k zařízení Grass Polygraph Model 79 pro sledování koncentrací.
Zkušební protokol: (a) Tkáň se ekvilibruje ve zkušební lázni po jednu hodinu s promýváním novým pufrem každých 15 minut. Jeden gram zatížení je po celou dobu udržován na tkáni.
(b) Tkáň se stimuluje na počátku oxytocinem v koncentraci 10 nM pro „aklimatizaci“ tkáně a se 4 mM KC1 pro stanovení maximální kontraktilní odezvy.
(c) Potom se stanoví křivka kumulativní dávkové odezvy s oxytocinem a koncentrace oxytocinu ekvivalentní přibližně 80 % maxima použitého pro hodnocení pA2 antagonisty.
(d) Tkáň se vystaví oxytocinu (Calbiochemical) na jednu minutu a promyje se. Před přídavkem další dávky agonisty nebo antagonisty. Jestliže se testuje antagonista, je podán pět minut před agonistou. Agonista se podává po jednu minutu. Všechny odezvy jsou integrovány za použití integrátoru 7P10 Grass. Toto je hlavní rozdíl mezi naším protokolem a jinými protokoly z literatury, kde se obvykle měří amplituda koncentrací jako odezva. Jediná koncentrace oxytoxinu rovná 80 % maximální odezvy, se použije pro test antagonisty. Použijí se tři různé koncentrace antagonistů, dvě které budou snižovat odezvu více než o 50 % (ideálně by tento vztah měl být 25 %, 50 % a 75 %). Toto se opakuje pro každou dávku antagonisty třikrát pro tři body zkoušky.
Anti-ADH aktivita je měřena změnou antagonisty v moči při ADH za přítomnosti a nepřítomnosti antagonisty pro stanovení specifity antagonisty. Anti-ADH zkouška je popsána v práci Sawyera a spol., Endocrinology, 63:694 (1958).
Byly provedeny další studie pro stanovení, zda výsledky biozkoušky na krysách odpovídají vazebné schopnosti děložních OT receptorů u krys a u lidí. Byly srovnávány relativní vazebné afinity 5 různých oxytocinových antagonistů.
Zkoušky oxytocin receptoru
Metoda. Krysy. Děložní tkáň byla odebrána ve 21. dnu březosti (doručení = dny 21^ až 22]/2) z Holzmanových krys. Tkáň byla odebrána celá, promyta vodou, rozřezána na malé kousky a zmrazená na -70 °C za homogenizace.
- 8 CZ 285388 B6
Lidé: Lidský myometriální tkáň byla shromážděna od pacientů v době císařského řezu po souhlasu. Tkáň byla promyta ve studeném pufru, rozřezána na malé kousky a zmrazená při
-70 °C za homogenizace.
Izolace oxytocin receptorů: Oxytocin receptory jsou (OTrs) jsou umístěny na buněčné membráně a jsou přítomny ve vysokých koncentracích na konci těhotenství ve tkáni dělohy. Zmrazená tkáň se homogenizuje v Tris pufru, homogenát se zfiltruje a filtrát se odstředí při 1000 g po 15 minut při 4 °C. Supematant se odstředí při 40 000 g po 30 minut a peleta, obsahující buněčné membrány se resuspenduje v 10% sacharóze. Potom se provede odstředění s hustotním 10 gradientem umístěním 10% sacharózové suspenze nad 35% sacharózu a odstředěním po 30 minut v rotoru s otočnými nádobkami při 105 000 g. Membrány se rozhraní 10%/30% sacharózy se odstraní a resuspendují v Tris pufru, obsahujícím EDTA po 30 minut. Tento postup odstraní dvojvazný kationt a vede k disociaci jakéhokoliv entogenně navázaného OT k receptorů. Tato směs se pak odstřeďuje 15 minut při 100 000 g a peleta, obsahující membránové OTrs se 15 resuspenduje v Tris, PMSF, Mg++ pufru ultrazvukem.
OT receptorová zkouška. Vazebná zkouška zahrnuje 0,1 ml 20 000 cmp tritiem značeného OT (New Engrland Nuclear, 37,1 Ci/nmol), 0,1 ml OT antagonisty přidaného ve zvyšující se koncentraci, 0,25 ml pufru a 0,05 ml membrány (70 až 150 pg proteinu). Nespecifická zkumavka 20 obsahovala lOOnásobek do ní přidaného studeného OTA. Inkubace se provádí 30 minut při 30 °C. Membrána se peletuje odstředěním v ultračistých minizkumavkách (5 x 41 mm) po 30 minut při 105 000 g. Výsledná peleta, obsahující navázaný 3H-OT se rozpustí v 0,lN NaOH při 45 °C po 30 minut a tato směs se pak umístí do kapalinové scintilační počítací kapaliny a ve scintilačním čítači se spočte dpm.
Hodnoty se analyzují zkušebními metodami nelineárních křivek za použití McPhersonova EBDA (J. Pharmacol. Methods 14:213-228, 1985) a Munsonova a Rodbardova LIGAND (Anal. Biochem. 107:220-239, 1980) programu na nasycení a kompetiční analýzu pro stanovení Kd aKi.
Výsledky srovnávací biostudie a receptorových studií jsou uvedeny v tabulkách 2 až 4.
| Tabulka 2 | |||||
| 35 | ADH biostudie poměr anti-OT/antiADH | ||||
| OTA* | pA2 | oxytoc. biostudie | pA2 | ||
| relativní anti-oxytocinová aktivita | relativní anti-ADHaktivita | ||||
| A | 7,35 | 0,7 | 7,66 | 1,000 | 0,70 |
| B | 7,51 | 1,0 | 7,40 | 0,550 | 1,82 |
| C | 7,77 | 1,7 | 5,51 | 0,07 | 242,86 |
| D | 8,86 | 22,4 | <5,75 | 0,012 | >1866,7 |
*SIoučenina A je [Pmp1, D-Phe2, Phe3, Ile4, Arg*]oxytocin, jak je popsán Manningem a spol.,
J. Med. Chem., 26:1607-1613 (1983).
Sloučenina B je [Pmp1, D-Phe2, Phe3, Ile4, Arg8]oxytocin = ANTAGI
Sloučenina C je [Pmp1, D-Trp2, Arg8]oxytocin = ANTAG II
Sloučenina D je [(S)Pmp1, D-Trp2, Pen6, Arg8]oxytocin = ANTAG III
-9CZ 285388 B6
V tabulce 2, sloučenina D, představuje novou sloučeninu podle tohoto vynálezu, demonstruje vyšší antioxytocinovou aktivitu než ostatní tři sloučeniny. Dále měla mnohem nižší anti-ADH aktivitu. Poměr anti-OT/anti-ADH pro sloučeninu D je vyšší než 1866,70, zatímco poměr pro sloučeninu A byl 0,07 sloučeninu B 1,8 a sloučeninu C 242,9. Tyto údaje proto naznačují, že u sloučeniny D může být očekáváno, že bude docházet k méně anti-ADH vedlejším účinkům při podání účinné dávky oxytocinového antagonisty než u sloučenin A, B nebo C.
Tabulka 3 ilustruje srovnání vazebných afinit (Ka) vyhodnocených ze zkoušky receptoru krysí dělohy (Ka) proti biostudii. Korelace logio Ka s logio ED5o byla vysoce signifikantní (r = 0,92; p < 0,01). Porovnání relativní aktivity ANTAG III (sloučenina D) s ANTAG I (sloučenina B) ve zkoušce receptoru krysí dělohy a biostudii je uvedena v tabulce 5. V obou zkouškách je ANTAG III přibližně 20x účinnější než ANTAG I.
Tabulka 4 představuje vazebnou afinitu různých OTA k lidskému děložnímu Otr ve srovnání s krysí biostudii. Korelace logio Ka k logI0 ED50 byla vysoce signifikantní (r = 0,95; p < 0,01). Porovnání relativní vazebné aktivity ANTAG III versus ANTAG I k lidskému Otr (hOTr) je uvedena v tabulce 5. Při tomto hodnocení je ANTAG ΠΙ (sloučenina D) asi 80x účinnější než ANTAG I. Proto se jeví, že podle zkoušek na krysách by mohl být ANTAG III relativně účinný u lidí. Tato možnost je dále podpořena in vivo studiemi provedenými na březích paviánech, jak je popsáno dále.
Příklad III - testování sloučenin na březích paviánech
Účelem této studie je vyhodnotit relativní in vivo aktivitu čtyř oxytocinových antagonistů za použití uvázaného modelu březího paviána a porovnání těchto výsledků s předchozími aktivitami vyhodnocenými za použití krysích zkoušek a lidských OTr zkoušek. Pavián je vynikající zvířecí model, protože jeho fyziologická a anatomická podobnost s lidmi (viz články naší laboratoře; Am.J. Obstet Gynecol., 163: 1815-1882, 1990; Am.J. Obstet Gynecol., 165: 456-560, 1991; Am.J. Obstet Gynecol., 165: 1487-1498, 1991; články jiných laboratoří: Endocrine Reviews 11:124-150, 1990; 11:151-176, 1990). Březí uvázaní paviáni byli studováni mezi 130. a 145. dnem od počátku březosti = 184. den). Oxytocinoví antagonisté byli podáváni jako injekce jediného bolusu 1 mg intraarteriálně a o 1 minutu později následovala infuze oxytocinu. Oxytocin byl podáván infuzí kontinuálně na počátku při lOmj a za zdvojnásobování dávky každých 20 minut až na 40 mj./min nebo až do té doby, kdy síla stahu (CF = (frekv. X prům. amplituda)/10 minut) jako odpověď byla signifikantní (tj. CF > 50). Jestliže nebyla žádná signifikantní odpověď byl test s oxytocinovým podnětem opakován o 24 hodin později. Interval antagonisté-odpověď (ARI = antagonistsresponse) byl stanoven vynásobením času do první signifikantní odpovědi v minutách poměrem kontrakce k pulzu (CF/OT koncentrace). Výsledky: Výsledky jsou uvedeny v tabulce 5. ARI byl ve vysoké shodě s výsledky krysích a lidských OTr hodnocení vazebné afinity (Ka) (r = 0,98; p < 0,01) se 4/5 oxytocinových antagonistů. Jeden oxytocitový antagonista (antagonista F v tabulce 5) nevykazuje žádnou inhibiční aktivitu při testované dávce i když vykazoval dobrou vazebnou afinitu v krysích a lidských OTr zkouškách a krysí biostudii. Tento oxytocinový antagonista nebyl vyroben v naší laboratoři a není analogem oxytocinu. Jeden mg nejlepšího testovaného oxytocinového antagonisty (sloučenina D, nová sloučenina podle vynálezu) blokuje odpověď na oxytocinového antagonistů po více než 24 hodin. Porovnání relativních aktivit různých OTAs se sloučeninou B (ANTAG I) naznačuje, že sloučenina D, [(S)Pmp1, D-Trp2, Pen6, Arg8]oxytocin (tj. ANTAG ΠΙ) je asi 130krát účinnější než sloučenina B. Souhrnně relativní aktivitní poměry (viz tabulka 5) ANTAG III (D) k ANTAG I (B) při krysí biostudii, krysí receptorové studii, lidské receptorové studii a in vivo zkoušce s paviány, byly 22, 20, 82 a 133. Tyto hodnoty indikují, že krysí zkoušky by mohly nedoceňovat potenci ANTAG III u primátů.
-10CZ 285388 B6
Tabulka 3
Porovnání relativní vazby k děložním receptorům (Ka) a biostudiiové inhibiční aktivity (ED50) pro oxytocinové antagonisty
| oxytocinový antagonista | receptorová studie Ka(10+8M·’) | oxytocinová biostudie ED50 (nm) |
| A | 0,39 | 44,76 |
| B | 1,16 | 30,90 |
| C | 2,03 | 16,98 |
| C2 | 11,50 | 1,91 |
| D | 24,40 | 1,38 |
| E | 0,51 | 102,33 |
| F | 5,89 | 19,93 |
receptorová studie - děloha březí krysy (P-21) biostudie - estrus krysího uteru
A - popsána Manningem a spol., J. Med. Chem., 26:1607 (1983). B - [Pmp1, D-Trp2, Phe3, Ile4, Arg8]oxytocin = ANTAG I
C - [Pmp1, D-Trp2, Arg8]oxytocin = ANTAG II.
C2 - [Pmp1, D-Trp2, Pen6, Arg8]oxytocin = ANTAG II—2,
D - [(S)Pmp1, D-Trp2, Pen6, Arg8]oxytocin = ANTAG III E - [Mpa1, D-Tyr(Et)2, Thr4, Om8]oxytocin (tj. ATOSIBAN) F - L-366, 948 od Měrek Pharmaceutical
Tabulka 4
Porovnání vazby děložního receptoru (Ka) v lidské myometriální tkání s krysí děložní biostudiovou inhibiční aktivitou (ED50) pro oxytocinové antagonisty
| OTA | receptorová zkouška Ka(10+8M’’) | biostudie ED50 (nM) |
| B | 0,51 | 30,9 |
| C | 1,82 | 17,0 |
| D | 41,7 | 1,38 |
| E | 0,53 | 102,3 |
| F | 2,49 | 20,0 |
Receptorová studie - myometriální tkáň odebraná ženám při provedení cis. řezu biostudie - estrus krysí dělohy sloučeniny B-F jsou popsány u tab. 3
-11CZ 285388 B6
Tabulka 5
Porovnání poměrů biologické aktivity (ARI) 5 oxytocinových antagonistů (OTA) u březích paviánů k poměrům oxytocin receptorové (OTr) vazebné afinity a biostudie aktivity u krys a u lidí
| OTA | ARI | ARI (OTA/ANTI) | rOTr (OTA/ANTI) | hOTR (OTA/ANTI) | biostudie (ANTI/OTA) |
| B | 59 | 1 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
| C | 547 | 9 | 1,8 | 3,6 | 1,8 |
| D | 7856 | 133 | 20,0 | 81,8 | 22,1 |
| E | - | — | 0,4 | 1,0 | 0,3 |
| F | 0 | 0 | 5,1 | 4,9 | 1,5 |
ARI - interval antagonisté-odezva u březích paviánů (viz text u vysvětlení výpočtu) rOTr - krysí oxytocinový receptor hOTr - lidský oxytocinový receptor biostudie - krysí oxytocinová biostudie ANTI-ANTAGI
Sloučenina B-F jsou popsány v tabulce 3.
I když byl vynález popsán zejména v souvislosti se speciálními a výhodnými provedeními, je třeba chápat, že je schopen modifikace, aniž by byl porušen rozsah vynálezu. Následující patentové nároky jsou míněny jako pokrývači všechny variace, použití nebo adaptace vynálezu, obecně jeho principy a zahrnující takové odchylky od předloženého popisu, které jsou v této oblasti běžné nebojsou odborníkům v oboru zřejmé.
Claims (2)
1. Oxytocinový antagonista obecného vzorce I
1 23456789 (S) Pmp-D-Trp-Ile-Gln-Asn-Pen-Pro-Arg-Gly-NH2
S —-------------------S (I) kde (S)Pmp je kyselina p,P-(3-triapentamethylen)-B-merkaptopropionová, D-Trp je D forma tryptofanu a Ile, Gin, Asn, Pro, Arg, jsou L formy isoleucinu, glutaminu, asparaginu, prolinu a arginonu a Pen je penicilamin.
2. Farmaceutický prostředek k použití při ošetřování těhotných žen k zabránění předčasnému porodu, při vyloučení nežádoucích vedlejších účinků způsobených antagonismem k antidiuretickému hormonu, vasopresinu, vyznačující se tím, že jako aktivní složka je obsažen oxytocinový antagonista podle nároku 1.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/052,887 US5373089A (en) | 1988-09-02 | 1993-04-26 | Oxytocin antagonist |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ277895A3 CZ277895A3 (en) | 1996-01-17 |
| CZ285388B6 true CZ285388B6 (cs) | 1999-07-14 |
Family
ID=21980563
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ952778A CZ285388B6 (cs) | 1993-04-26 | 1994-02-09 | Oxytocinový antagonista |
Country Status (24)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5373089A (cs) |
| EP (1) | EP0695309B1 (cs) |
| JP (1) | JPH10507995A (cs) |
| KR (1) | KR100291304B1 (cs) |
| CN (1) | CN1041634C (cs) |
| AT (1) | ATE182898T1 (cs) |
| AU (1) | AU681399B2 (cs) |
| BR (2) | BR9405914A (cs) |
| CA (1) | CA2155872C (cs) |
| CZ (1) | CZ285388B6 (cs) |
| DE (1) | DE69419910T2 (cs) |
| DK (1) | DK0695309T3 (cs) |
| ES (1) | ES2134351T3 (cs) |
| FI (1) | FI105921B (cs) |
| GR (1) | GR3031432T3 (cs) |
| HU (1) | HU217972B (cs) |
| IL (1) | IL108685A (cs) |
| NO (1) | NO954260D0 (cs) |
| NZ (1) | NZ266049A (cs) |
| PL (1) | PL177055B1 (cs) |
| RU (1) | RU2120944C1 (cs) |
| SK (1) | SK130295A3 (cs) |
| WO (1) | WO1994025485A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA941160B (cs) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE501678C2 (sv) * | 1993-07-13 | 1995-04-10 | Ferring Bv | Peptid med oxytocinantagonistaktivitet samt farmaceutisk komposition innehållande nämnda peptid |
| ATE305781T1 (de) | 1996-02-23 | 2005-10-15 | Lilly Co Eli | Non-peptidische vasopressin via antagonisten |
| EP0983769A4 (en) | 1997-04-14 | 2002-05-02 | Mitsubishi Tokyo Pharm Inc | PERMUCOSE FORMULATION |
| EP0896001A1 (en) * | 1997-08-08 | 1999-02-10 | Daicel Chemical Industries, Ltd. | Method for preparing oxytocin antagoniste derivatives, intermediates for the preparation of oxytocin antagonist derivatives and method for preparing the intermediates |
| JP2003335797A (ja) * | 2000-06-28 | 2003-11-28 | Daicel Chem Ind Ltd | ペプチド化合物及びそれを有効成分とする医薬組成物 |
| EP1555029A1 (en) * | 2004-01-19 | 2005-07-20 | Ferring B.V. | Use of substances having oxytocin antagonistic properties for the preparation of a medicament for treating hypertension |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4597901A (en) * | 1984-12-14 | 1986-07-01 | Smithkline Beckman Corporation | β-indolylalanyl or β-indolylglycinyl vasopressin antagonists |
| US4711877A (en) * | 1985-09-18 | 1987-12-08 | Smithkline Beckman Corporation | 6-pen-vasopressin compounds |
| WO1990002756A1 (en) * | 1988-09-02 | 1990-03-22 | Northwestern University | Oxytocin antagonist |
| US5070187A (en) * | 1989-11-03 | 1991-12-03 | Trustees Of Boston University | Pharmacologically effective antagonists of arginine-vasopressin |
-
1993
- 1993-04-26 US US08/052,887 patent/US5373089A/en not_active Expired - Fee Related
-
1994
- 1994-02-09 EP EP94915332A patent/EP0695309B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-09 KR KR1019950704748A patent/KR100291304B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1994-02-09 JP JP6524234A patent/JPH10507995A/ja active Pending
- 1994-02-09 SK SK1302-95A patent/SK130295A3/sk unknown
- 1994-02-09 NZ NZ266049A patent/NZ266049A/en unknown
- 1994-02-09 DE DE69419910T patent/DE69419910T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1994-02-09 CZ CZ952778A patent/CZ285388B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-02-09 WO PCT/US1994/001439 patent/WO1994025485A1/en active IP Right Grant
- 1994-02-09 CN CN94191909A patent/CN1041634C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1994-02-09 DK DK94915332T patent/DK0695309T3/da active
- 1994-02-09 HU HU9502366A patent/HU217972B/hu not_active IP Right Cessation
- 1994-02-09 CA CA002155872A patent/CA2155872C/en not_active Expired - Fee Related
- 1994-02-09 BR BR9405914A patent/BR9405914A/pt not_active Application Discontinuation
- 1994-02-09 AT AT94915332T patent/ATE182898T1/de active
- 1994-02-09 ES ES94915332T patent/ES2134351T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-02-09 AU AU66630/94A patent/AU681399B2/en not_active Ceased
- 1994-02-09 PL PL94311475A patent/PL177055B1/pl unknown
- 1994-02-17 IL IL108685A patent/IL108685A/en not_active IP Right Cessation
- 1994-02-21 ZA ZA941160A patent/ZA941160B/xx unknown
- 1994-11-09 RU RU95119837A patent/RU2120944C1/ru active
-
1995
- 1995-07-31 FI FI953646A patent/FI105921B/fi active
- 1995-10-25 NO NO954260A patent/NO954260D0/no not_active Application Discontinuation
-
1997
- 1997-05-14 BR BR1101113-0A patent/BR1101113A/pt active IP Right Grant
-
1999
- 1999-10-07 GR GR990402521T patent/GR3031432T3/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5670482A (en) | Neuropeptide Y antagonists | |
| JPH10330397A (ja) | サイトカイン調節剤およびサイトカインレベルの変化に関連する病状および状態における使用方法 | |
| JPH04501257A (ja) | 心房性ナトリウム利尿ペプチドクリアランス阻害剤 | |
| NL8900864A (nl) | Peptidederivaten en werkwijzen voor het bereiden en toepassen van deze derivaten. | |
| US5106834A (en) | Linear free-sulfhydryl-containing oligopeptide derivatives as antihypertensive agents | |
| JPH0219397A (ja) | アルギニンバソプレシン拮抗剤の新規線形誘導体類 | |
| CZ281507B6 (cs) | Syntetické peptidy, biologický aktivní fragment a jejich netoxické soli | |
| US4490364A (en) | CCK Agonists II | |
| US3862114A (en) | Analogs of substance p | |
| CA1187869A (en) | Deca- undeca- dodeca and tridecapeptides with thymic activity | |
| NO177713B (no) | Analogifremgangsmåte ved fremstilling av hemoreguleringspeptider | |
| CZ285388B6 (cs) | Oxytocinový antagonista | |
| Ferger et al. | Four cyclic disulfide pentapeptides possessing the ring of vasopressin | |
| WO1989010935A1 (en) | Atrial peptide derivatives | |
| FI79716C (fi) | Daeggdjur-pgrf. | |
| EP0431113A1 (en) | Atrial peptide derivatives | |
| Burke et al. | Divergence of the in vitro biological activity and receptor binding affinity of a synthetic insulin analog.[21-Asparaginamide-A] insulin | |
| JP6387095B2 (ja) | バソプレッシン−２受容体アゴニスト | |
| EP0115850B1 (en) | Novel peptide, process for the preparation thereof and pharmaceutical composition containing said peptide | |
| Manning et al. | Effects of a D-Cys6/L-Cys6 interchange in nonselective and selective vasopressin and oxytocin antagonists | |
| EP0247033A1 (en) | Conformationally constrained oxytocin antagonists with prolonged biological activities | |
| CA2163114A1 (en) | Peptides exhibiting oxytocin antagonistic activity | |
| WO1990002756A1 (en) | Oxytocin antagonist | |
| CZ5976U1 (cs) | Rozvětvené linearisované analogy vasopresinu |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20010209 |