CZ257999A3

CZ257999A3 - Antagonista IL-8 receptoru

Info

Publication number: CZ257999A3
Application number: CZ19992579A
Authority: CZ
Inventors: Katherine L. Widdowson; Melvin C. Rutledge
Original assignee: Smithkline Beecham Corporation
Priority date: 1998-01-23
Filing date: 1998-01-23
Publication date: 2000-01-12

Abstract

Předkládaný vynález se týká sloučenin vzorce4/, farmaceutických prostředků obsahujících takové sloučeniny a způsobů léčby onemocnění zprostředkovaných chemokinem, interleukinem-8 4L-8/.

Description

Předkládaný vynález se týká nových benzo-2-triazolových substituovaných sloučenin, farmaceutických prostředků, způsobů pro jejich přípravu, jejich použití pro léčbu onemocnění zprostředkovaných IL-8, GROa, GROp, GROt a NAP-2.

Dosavadní stav techniky

Pro interleukin 8 (IL-8) bylo použito mnoha různých názvů, jako například neutrofilový atraktant/aktivační protein-1 (NAP-1), od monocytů odvozený chemotaktický faktor pro neutrofily (MDNCF), aktivační faktor pro neutrofily (NAF) a chemotaktický faktor T-lymfocytů. Interleukin-8 je chemotaktický faktor pro neutrofily, basofily a podskupinu T-buněk. Je produkován většinou jaderných buněk, včetně makrofágů, fibroblastů, endotelových a epitělových buněk vystavených působení TNF, IL-la, IL-Ιβ nebo LPS, a neutrofily samými při jejich expozici LPS nebo chemotaktickým faktorům jako je FMLP. M. Baggiolini et al., J. Clin. Invest. 84: 1045 (1989); J. Schroder et al., J. Immunol. 139: 3474 (1987) a J. Immunol. 144: 2223 (1990); Strieter et al., Science 243: 1467 (1989) a J. Biol. Chem. 264: 10621 (1989); Cassatella et al., J. Immunol. 148: 3216 (1992).

Groa, Gro3, GroT a NAP-2 také patří do rodiny chemokinů. Podobně jako IL-8 jsou tyto chemokiny také označovány různými názvy. Například, Groa, Grop a GroT byly také označovány jako MSGAa, β a t, v příslušném pořadí (Melanoma Growth Stimulating • · • ·

Activity), viz Richmond et al., J. Cell. Physiology 129: 375 (1986) a Chang et al., J. Immunol. 148: 451 (1992). Všechny z těchto chemokinů patří do a-rodiny, která má ELR motif přímo před CXC motivem, který se váže na receptor pro IL-8 B.

Působení IL-8, GROa, GROS, GROt, NAP-2 a ENA-78 stimuluje in vitro mnoho funkcí. U všech byla prokázaná chemotaktická aktivita pro neutrofily, zatímco u IL-8 a GROa byla prokázána chemotaktická aktivita pro T-lymfocyty a basofily. Kromě toho může IL-8 indukovat uvolnění histaminu z basofilů jak u normálních, tak u atopických jedinců. GRO-α a IL-8 mohou kromě toho indukovat uvolnění enzymu lysozymu a respirační vzplanutí neutrofilů. Dále bylo prokázáno, že IL-8 zvyšuje povrchovou expresi Mac-1 (CDllb/CD18) na neutrofilech bez syntesy proteinů de novo. Toto může způsobovat zvýšení adhese neutrofilů na cévní endotelové buňky. Mnoho známých onemocnění je charakterizováno masivní infiltrací neutrofily. Protože IL-8, GROa, GROS, GROt a NAP-2 navozují akumulaci a aktivaci neutrofilů, předpokládá se účast těchto chemokinů na mnoha akutních a chronických zánětlivých chorobách včetně lupénky a revmatoidní artritidy. Baggiolini et al., FEBS Lett. 307: 97 (1992); Miller et al., Crit. Rev. Immunol. 12: 17 (1992); Oppenheim et al., Annu. Rev. Immunol. 9: 617 (1991); Seitz et al., J. Clin. Invest. 87: 463 (1991); Miller et al., Am. Rev. Respir. Dis. 146: 427 (1992); Donnely et al., Lancet 341: 643 (1993). Kromě toho se předpokládá účast ELR chemokinů (které obsahují aminokyselinový ELR motiv těsně před CXC motivem) v angiostase. Strieter et al., Science 258: 1798 (1992).

In vitro indukují IL-8, GROa, GROS, GROt a NAP-2 změnu tvaru neutrofilů, chemotaxi, uvolnění granulí a respirační vzplanutí, • · 4 ·· » 4 ► 4 ·· ·· · ·· · prostřednictvím vazby na a aktivace receptorů sedmé transmembránové, na G-protein vázané rodiny, zejména prostřednictvím vazby na receptory pro IL-8, hlavně na B-receptor. Thomas et al., J. Biol. Chem. 266: 14839 (1991); a Holmes et al., Science 253: 1278 (1991). Vývoj nepeptidových antagonistů o malé molekule pro členy této receptorové rodiny předcházel. Pro přehled viz R. Freidinger v: Progress in Drug Research, svazek 40, str. 33 - 98, Birkhauser Verlag, Basel 1993. Proto představuje receptor pro IL-8 slibný cíl pro vývoj nových protizánětlivých činidel.

Byly charakterizovány dva vysokoafinitní lidské receptory pro IL-8 (77% homologie): IL-8Ra, který váže s vysokou afinitou pouze IL-8 a IL-8Rb, který má vysokou afinitu jak pro IL-8, tak pro GROa, GROS, GROt a NAP-2. Viz Holmes et al., výše; Murphy et al., Science 253: 1280 (1991); Lee et al., J, Biol. Chem. 267: 16283 (1992); LaRosa et al., J. Biol. Chem. 267: 25402 (1992); a Gayle et al., J. Biol. Chem. 268: 7283 (1993).

V léčbě stále ještě v této oblasti existuje potřeba sloučenin, které jsou schopné vazby na a nebo b receptor IL-8. Při léčbě stavů spojených se zvýšenou produkcí IL-8 (který je odpovědný za chemotaxi neutrofilů a podskupin T-buněk do místa zánětu) budou přínosem sloučeniny, které jsou inhibitory vazby na receptor pro IL-8.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje způsob pro léčbu chemokiny zprostředkovaných onemocnění, kde chemokinem je chemokin, který se váže na a nebo b receptor pro IL-8 a kde způsob obsahuje • · • · • ·

podání účinného množství sloučeniny vzorce (I) nebo (II) nebo její farmaceuticky přijatelné soli. Konkrétně je chemokinem

IL-8.

Předkládaný vynález se také týká způsobu pro inhibici vazby IL-8 na jeho receptory u savců, kteří potřebují takovou inhibici, kde způsob obsahuje podání účinného množství sloučeniny vzorce (I) nebo (II) uvedenému savci.

Předkládaný vynález také obsahuje nové sloučeniny vzorce (I) a (II) a farmaceutické prostředky obsahující sloučeniny vzorce (I) a (II) a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

Sloučeniny vzorce (I) použitelné v předkládaném vynálezu jsou znázorněny strukturou:

kde

R je -NH-C(X₂)-NH)-(CR_i3R_i4)_v-Z;

-\ _{( z}<CR₁₅R_ie)p (Y)n

Z je W, HET, , volitelné substituovaný C_xioalkyl, volitelně substituovaný C_{2 ;Lo}alkenyl, nebo volitelně substituovaný C₂__ioalkynyl;

X je C(X_i)₂, C(O), C(S), S(O)₂, PO(ORJ nebo C=NR_i9;

X je nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, NR₄R_s, © · ^<-x-xo^a^^'^NR4^R5' C(O)NR₄R_s, volitelně substituovaný

C_{i io}alkyl, halogenem substituovaný C_x__xoalkoxy; hydroxy, aryl, arylC_x_₄alkyl, aryloxy, arylC_x_₄alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl,· heterocyklus; heterocyklický C_{i 4}alkyl; heteroarylC alkyloxy;

X₂ je =0 nebo =S;

R_x je nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, nitro, kyano, halogenem substituovaný C_xxoalkyl; C_x__xoalkyl; C₂__xoalkenyl; C_x__xQalkoxy, halogenem substituovaný C_x__xoalkoxy; azid; (CR_aR_a) (0) _tR₄; hydroxy; hydroxy C_x_₄alkyl, aryl, arylC_x_₄alkyl, aryloxy, arylC_x_₄alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heterocyklus; heterocyklický C_x_₄alkyl; heteroarylC_x_₄alkyloxy; arylC₂__xoalkenyl; heteroaryl C₂__xoalkenyl; heterocyklický C_{2 xo}alkenyl; (CR_aR_a) _<3NR₄R_s ; C₂__xQalkenyl C(O)NR₄R_s; (CR_aR_e)(0)NR₄R_xq; S(O)₃R_a;

^CRs^Rs ci^{C 0 R}x x ^-xo³¹^¹ C(O)R^·, C₂__χθalkenyl C(O)OR_xx;

C(O)R (CR R ) C(O)R (CR R ) OC(O)R (CR R ) NR C(O)R .

6 C£ 4 Ti , ' ^(CR.^R. > ,^c Ά > NK A ·· <^CR.^R. > (NEJ R (CR R ) NHS (O) R ; nebo (CR R.) S (0) NR R ; nebo mohou dvě R skupiny dohromady tvořit O-(CH₂)_sO- nebo 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh; a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklus mohou být všechny volitelně substituované;

n je celé číslo mající hodnotu 1 až 3; m je celé číslo mající hodnotu 1 až 3; q je 0, nebo celé číslo mající hodnotu 1 až 10; s je celé číslo mající hodnotu 1 až 3; t je 0, nebo celé číslo mající hodnotu 1 nebo 2; v je 0, nebo celé číslo mající hodnotu 1 až 4; p je celé číslo mající hodnotu 1 až 3;

HET je volitelně substituovaný heteroaryl;

• ·

R₄ a R_s jsou nezávisle vodík, volitelně substituovaný C_i4alkyl, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný arylC^^alkyl, volitelně substituovaný heteroaryl, volitelně substituovaný heteroaryl C_i_₄alkyl, heterocyklus nebo heterocyklický C alkyl, nebo R₄ a R_sspolečně s dusíkem, na který jsou navázány, tvoří 5 až 7 členný kruh, který volitelně obsahuje další heteroatom vybraný z kyslíku, dusíku nebo síry;

Y je nezávisle vybráno ze skupiny: vodík, halogen, nitro, kyano, halogenem substituovaný alkyl; C _ioalkyl;

C₂_x_O ^alk^enyl; ^cx__loalkoxy, halogenem substituovaný C alkoxy; azid; (CRR) S(0) R ; hydroxy; hydroxy C_i_₄alkyl, aryl, arylC_i_₄alkyl, aryloxy, arylC__L_₄alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heteroarylC_i_₄alkyloxy; heterocyklus; heterocyklický C ₄alkyl; aryl C_2;LO aikenyl; heteroaryl C₂__ioalkenyl; heterocyklický C₂ aikenyl;

(CR₈R_e C(O)NR₄R_s; (CR^J^CÍONR^;

(CReRJ^CÍOJNR^; S(O)₃R_e; (CR_eR_e) (0) R^; C₂ ^aikenyl ^C(0)Rxx'· C2_ioalkenyl C(0)0Rii; (CR^J^CÍOR^; (^CR8^R8)<₃0C(0)Rxx; (CR^^NR^OJR^; (CR₈R₈)_<3C(NR₄)NR₄R_s; (CR₈R_e)_qNR₄ CÍNRJR^; (CR₈R₈)^NHS (0) _Λ; (CR_eR_a) (0) ₂NR₄R_s;

nebo mohou dvě Y skupiny dohromady tvořit 0-(CH₂)_e0- nebo 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh; a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklus mohou být všechny volitelně substituované;

R^ a R jsou nezávisle vodík nebo C alkyl, nebo R a R společně s dusíkem, na který jsou navázány, tvoří 5 až 7 členný kruh, který volitelně obsahuje další heteroatom vybraný z kyslíku, dusíku nebo síry;

R_e je nezávisle vybrán z vodíku nebo alkylu;

R _n je C alkyl C(0) R ;

R_i;l je vodík, C_x_₄alkyl, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný arylC_x_₄alkyl, volitelně substituovaný heteroaryl, volitelně substituovaný heteroaryl C_i_₄alkyl, volitelně substituovaný heterocyklus, nebo volitelně substituovaný heterocyklický C_x alkyl;

Ř₁₂ je vodík, C_i___loalkyl, volitelně substituovaný aryl nebo volitelně substituovaný arylalkyl;

R_i3 a R_i4 jsou nezávisle vodík nebo volitelně substituovaný C_3L_₄alkyl, nebo může být jeden z ^Rx3 a R volitelně substituovaný aryl;

^Ris ^{a R}is j^sou nezávisle vodík nebo volitelně substituovaný C^alkyl;

^R17, je C_;L_₄alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, heteroaryl C_i_₄alkyl, heterocyklus, nebo heterocyklický C alkyl, kde aryl, heteroaryl a heterocyklické kruhy mohou všechny být volitelně substituované;

^R18 je vodík, volitelně substituovaný _oalkyl, C_xxoalkoxy, halogenem substituovaný C_xxoalkoxy, hydroxy, arylC_i4alkyl, arylC₂₄alkenyl, heteroaryl, heteroaryl-C_i_₄alkyl, heteroarylC₂₄alkenyl, heterocyklus nebo heterocyklický C_i4alkyl, a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklus mohou být všechny volitelně substituované;

^Ri9 ^Ry^an' ^nitr°, S(O)2N^R4^Rs, ^s(0)2^Ri-7-' alkyl, aryl0_χ_₄alkyl, arylC₂_₄alkenyl, heteroaryl, * heteroaryl-C_x_₄alkyl, heteroarylC₂_₄alkenyl, heterocyklus nebo heterocyklický C_x alkyl, a kde skupiny obsahující aryl, * heteroaryl a heterocyklus mohou být všechny volitelně substituované;

^Ra je NR₆R₇, alkyl, arylC_i4alkyl, arylC₂_₄alkenyl, heteroaryl, heteroaryl-C_x_₄alkyl, heteroaryl-C_{2 4}alkenyl, • · ·♦ ·· ·< • · · · • · · · • · 99 9 · « • · ·· ·· ·« heterocyklus nebo heterocyklický C_i4alkyl, kde aryl, heteroaryl a heterocyklické kruhy mohou všechny být volitelně substituované;

(Y)n (Y)n

W je nebo

E obsahující kruh je volitelně vybrán z O

kde hvězdička * označuje místo připojení kruhu; nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.

Sloučeniny vzorce (II) jsou znázorněny strukturou: (R^m

(II) kde

R je -NH-CÍXJ-NH)-(CR_x3R₁₄)_v-Z;

,(^CR15^R1g)P (Y)n

Z je W, HET, ' ' , volitelně substituovaný C_x__xoalkyl, volitelně substituovaný C₃__χθalkenyl, nebo volitelně • · • · · • · · ··· ·· substituovaný C₂ _ _xoalkynyl;

X je N nebo C(X_x) ;

Χ_χ je nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, Cx-xo³¹^¹· MK.K.- Cx.^alkyl-NRJl,,, C(O)NR^R₌, C_iloalkyl C(O)NR₄R_s, volitelně substituovaný C_xxoalkyl, C_x__xoalkoxy, halogenem substituovaný C_{x xo}alkoxy; hydroxy, aryl, arylC_x_₄alkyl, aryloxy, arylC alkyloxy; heteroaryl;

heteroarylalkyl; heterocyklus; heterocyklický C_x_₄alkyl nebo heteroarylC_x_₄alkyloxy;

X₂ je =0 nebo =S;

R_± je nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, nitro, kyano, halogenem substituovaný C alkyl; C_x alkyl; C₂__ioalkenyl; C __xQalkoxy, halogenem substituovaný C_i__ioalkoxy; azid; (CR_sR_a) (0) _fcR₄; hydroxy; hydroxy C_x_₄alkyl, aryl, arylC_x_₄alkyl, aryloxy, arylC_x_₄alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heterocyklus; heterocyklický C_x_₄alkyl; heteroarylC_x_₄alkyloxy; ary1C₂__XOalkenyl; heteroaryl C_2xoalkenyl; heterocyklický C₂__xoalkenyl; (CR_sR_e) NR R ; ^C2-xo^alkenyl C(O)NR₄R_s; (CR^J^CÍOJNR^, (CR_sR_e) *C (0) NR₄R_xo ; S(O)₃R_e; (CR_eR_e)_<aC(O)R_x;L; C₂__xoalkenyl C(O)R_aC(O)OR_; C(O)R

C^^aikeny¹ (CR R ) C(O)R β 8 ' <3 ' 12 (CR R ) OC(O)R ;

S β q 11 ' (^cWA^c(0)Rxx' (^CRe^Re) <^NR4) NRA '· (^CRe^Rs) <A^C (NR_s) R_xx , (CRR ) NHS(O) R ; nebo (CRR ) S(0) NR R ; nebo mohou dvě R o ei Of 2X7 8 8 C£ 2 4 5 π skupiny dohromady tvořit O-(CH₂)_sO- nebo 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh; a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklus mohou být všechny volitelně substituované;

n je celé číslo mající hodnotu 1 až 3; m je celé číslo mající hodnotu 1 až 3; q je 0, nebo celé číslo mající hodnotu 1 až 10; s je celé číslo mající hodnotu 1 až 3;

·

9 9

999 99»

9

99 t je 0, nebo celé číslo mající hodnotu 1 nebo 2; v je 0, nebo celé číslo mající hodnotu 1 až 4; p je celé číslo mající hodnotu 1 až 3;

HET je volitelně substituovaný heteroaryl;

R₄ a R_s jsou nezávisle vodík, volitelně substituovaný

C_i4alkyl, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný arylC^_₄alkyl, volitelně substituovaný heteroaryl, volitelně substituovaný heteroaryl C_i_₄alkyl, heterocyklus nebo heterocyklický C alkyl, nebo R₄ a R_sspolečně s dusíkem, na který jsou navázány, tvoří 5 až 7 členný kruh, který volitelně obsahuje další heteroatom vybraný z kyslíku, dusíku nebo síry;

Y je nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, nitro, kyano, halogenem substituovaný C_iioalkyl; C _ioalkyl;

C₂__ioalkenyl; __χθalkoxy, halogenem substituovaný

C₁__loalkoxy; azid; (CR_aR_a)(O)_tR₄; hydroxy; hydroxy C alkyl, aryl, arylC alkyl, aryloxy, arylC alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heteroarylC_i4alkyloxy; heterocyklus; heterocyklický C ₄alkyl; arylC₂ alkenyl; heteroaryl C₂__ioalkenyl; heterocyklický C alkenyl;

(CRR) NR R ; C alkenyl C(O)NR R ; (CR R ) C(O)NR R ;

β q 45' 2-10 45' S 8 <3 45*

mohou dvě Y skupiny dohromady tvořit O-(CH₂)_sO- nebo 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh; a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklus mohou být všechny volitelně substituované;

R a R jsou nezávisle vodík nebo C alkyl, nebo R a R společně s dusíkem, na který jsou navázány, tvoří 5 až 7 členný

i kruh, který volitelně obsahuje další heteroatom vybraný z kyslíku, dusíku nebo síry;

R_s je nezávisle vybrán z vodíku nebo C_{x 4}alkylu;

R je C alkyl C(0) R ;

R_x;l je vodík, C_{i 4}alkyl, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný arylC_x_₄alkyl, volitelně substituovaný heteroaryl, volitelně substituovaný heteroaryl C ₄alkyl, volitelně substituovaný heterocyklus, nebo volitelně substituovaný heterocyklický C alkyl;

^Ra.2 3^e vodík, C_x__xoalkyl, volitelně substituovaný aryl nebo volitelně substituovaný arylalkyl;

R₁₃ a R_x4 jsou nezávisle vodík nebo volitelně substituovaný C_x_₄alkyl, nebo může být jeden z R_x3 a R_x4 volitelně substituovaný aryl;

R_1S a R_xe jsou nezávisle vodík nebo volitelně substituovaný C^alkyl;

^R17 3^{e C}x_4^alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, heteroaryl Ci4alkyl, heterocyklus, nebo heterocyklický C_{x 4}alkyl, kde aryl, heteroaryl a heterocyklické kruhy mohou všechny být volitelně substituované;

R_a je NR₆R₇, alkyl, arylC_i4alkyl, arylC₂₄alkenyl, heteroaryl, heteroaryl-C_x_₄alkyl, heteroaryl-C₂₄alkenyl, heterocyklus nebo heterocyklický C ₄alkyl, kde aryl, heteroaryl a heterocyklické kruhy mohou všechny být volitelně substituované;

W je

nebo • · «· · · • 9 · · · ·

99 9 9 · · · · · •9 ·· · · · · ······ ··· ··· · · ··©·* e·e 9 * ·« ··

E obsahující kruh je volitelně vybrán z

nebo kde hvězdička * označuje místo připojení kruhu; nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.

Sloučeniny podle vzorce (I) a (II) mohou být také použity ve veterinární léčbě savců jiných než lidí, kteří potřebují inhibici IL-8 nebo jiných chemokinů, které se váží na a a b receptory pro IL-8. Onemocnění zprostředkovaná chemokiny, léčená terapeuticky nebo profylakticky, u zvířat, zahrnují ta onemocnění, která jsou uvedena v části Způsoby terapie.

Jak je zřejmé, rozdíl mezi sloučeninami vzorce (I) a (II) spočívá v nenasyceném stavu A obsahujícího kruhu a proto v substitucích na X skupině. Zbylé termíny, definované dále, jsou stejné pro sloučeninu vzorce (I) a (II), pokud není uvedeno j inak.

Ve sloučeninách podle vzorce (I) je R výhodně nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, nitro, kyano, halogenem substituovaný C_xxoalkyl, jako je CF₃; C _xoalkyl, jako je • · · * · · • · · · · • 9 tt · · · * · • € · • · β · methyl, ethyl, isopropyl nebo n-propyl; C₂__xQalkenyl; C_x__xQalkoxy, jako je methoxy nebo ethoxy; halogenem substituovaný C_xxoalkoxy, jako je trifluormethoxy; azid; (CR_aR_e)(0)_tR₄, kde t je 0, 1 nebo 2; hydroxy; hydroxy C_x_₄alkyl, jako je methanol nebo ethanol; aryl, jako je fenyl nebo naftyl; arylC_x_₄alkyl, jako je benzyl; aryloxy, jako je fenoxy; arylC_x_₄alkyloxy, jako je benzyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heteroarylC_x_₄alkyloxy; arylC_2xoalkenyl; heteroaryl C₂__xQalkenyl; heterocyklický C₂__xoalkenyl;

(CRR) NR R; C „alkenyl C(O)NR R ; (CR R ) C(0)NR R , (CRR) C(0)NR R ; S (0) H; S (0) R ; (CR R ) C(0)R ;

β β <3 4X0' ' ' 3 ' 3β' 8S <J XX'

C.-xo³¹^¹ C(O)R_xx,

C₂__xQalkenyl C(O)OR_xx (CR R ) C(0)R ’ 8 Θ ' ' X2 ' (CRR) 0C(0)R ,

S S cj ' ' XX (CR R ) C(NR )NR R ββ C( 4 4 5 ' (CR R ) NR C(NR )R

SS q 4 ' 5 ' XX

C(0)R_xx;

(CR₈R_a)_taNR₄C(0)R_xx;

(CR R ) NHS(0)„R.

β S <g ' ' 2 '1-7 ¹ nebo mohou dvě R_x skupiny dohromady tvořit O-(CH₂)_eO- nebo 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh; a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklus mohou být všechny volitelně substituované, jak je definováno dále.

nebo (CR R ) S(O) NR R

8 CJ 2 4 5

Pro použití v předkládaném vynálezu označuje termín skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklus jak kruhy, tak alkylové nebo alkenylové kruhy, jako jsou arylové, arylalkylové a arylalkenylové kruhy. Termíny skupiny a kruhy jsou zaměnitelné.

Výhodně je s celé číslo od 1 do 3.

f

Je známo, že R_x skupina může být substituovaná buď na benzenovém kruhu, nebo na kruhu obsahujícím X, pokud je to možné. ;

Γ i

í r

• ·

Pokud R_x tvoří dioxymůstek, pak je s výhodně 1. Pokud R tvoří další nenasycený kruh, pak je to výhodně 6-členný kruh vedoucí ke tvorbě naftylenového kruhu. Tyto kruhové systémy mohou být nezávisle substituovány, 1 až 3-krát, jinými R_xskupinami jak jsou definovány výše.

Výhodně jsou R₄ a R_s nezávisle vodík, volitelně substituovaný C_x_₄alkyl, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný arylC_x_₄alkyl, volitelně substituovaný heteroaryl, volitelně substituovaný heteroaryl C alkyl, heterocyklus nebo heterocyklický C_x_₄alkyl, nebo R₄ a R_sspolečně s dusíkem, na který jsou navázány, tvoří 5 až 7 členný kruh, který volitelně obsahuje další heetroatom vybraný z O/N/S.

Výhodně jsou R_e a R_v nezávisle vodík nebo C_x4alkyl, nebo R_ea R_v společně s dusíkem, na který jsou navázány, tvoří 5 až 7 členný kruh, který volitelně obsahuje další heetroatom vybraný z O/N/S.

Výhodně je R_g nezávisle vybrán z vodíku nebo C_x_₄alkylu;

Výhodně je q 0 nebo celé číslo vybrané z 1 až 10.

Výhodně je R_xo C_xxoalkyl C(O)₂R₈, jako je CH₂C(O)₂H nebo CH C(O) CH .

2 3

Výhodně je R_xx vodík, C_x_₄alkyl, aryl, arylC_x_₄alkyl, heteroaryl, heteroaryl C_x_₄alkyl, heterocyklus, nebo heterocyklický C alkyl.

Výhodně je R_x2 vodík, C_x__xQalkyl, volitelně substituovaný aryl nebo volitelně substituovaný arylalkyl.

Výhodně jsou R_x3 a R_x4 nezávisle vodík nebo volitelně substituovaný C_x_₄alkyl, který může mít přímý nebo rozvětvený řetězec, jak jsou zde definovány, nebo může být jeden z R a R_X4 volitelně substituovaný aryl.

Výhodně je v 0 nebo celé číslo vybrané z 1 až 4.

Pokud jsou R_x3 nebo R_x4 volitelně substituovaný alkyl, tak může být alkylová skupina substituována jednou až třikrát nezávisle halogenem, halogenem substituovaným C_x_₄alkylem, jako je trifluormethyl, hydroxy-skupinou, hydroxy-C_x_₄alkylem, C_x_₄alkoxy, jako je methoxy nebo ethoxy, halogenem substituovanou C_xxoalkoxy skupinou, S(O)_cR₄, arylem, NR₄R_s, NHC(O)R C(O)NR R , nebo C(O)OR .

, 4 £» Q

Výhodně je R_xv C_x_₄alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, heteroaryl C_x_₄alkyl, heterocyklus, nebo heterocyklický C_X4alkyl, kde aryl, heteroaryl a heterocyklické kruhy mohou všechny být volitelně substituované.

Výhodně je Y nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, nitro, kyano, halogenem substituovaný C_x alkyl; C_xxoalkyl; C₂__xoalkenyl; C_xxoalkoxy, halogenem substituovaný

C „alkoxy; azid; (CR RJ S(0) R ; hydroxy; hydroxy

C_x_₄alkyl, aryl, arylC_x_₄alkyl, aryloxy, arylC_x4alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heteroarylC_x_₄alkyloxy; heterocyklus; heterocyklický C alkyl; arylC_2xoalkenyl; heteroaryl C_2xoalkenyl; heterocyklický C_2xoalkenyl;

• · «·· · ·· · · · «« * • ·· · · · · · · · • · · · · · ·· ··· ··♦ • · e · · · · · »· · ·· ·*· ·· ·ο ··

Ca-xo⁹¹^¹ C(O)NR4R5; (CR^^CÍOJNRJE^; (CVeU^OiNR.Rxo'· S(O)3R8; (CReRe)(0)Rxx; C2_xoalkenyl 0(0)Εχχ; ^.χο⁹¹^¹ C(O)ORxx; (CR_eR_e)_caC(O)R_x2;

(CR_eR₈)_gOC(O)R_xx; (CR₈R_e)_<aC(NR₄)NR₄R₅; (CR^J (NRJ R_xx;

KReReW^Rxx' (cr^j^nhsíojv (CReRe^^^^NRA; ^nebomohou dvě Y skupiny dohromady tvořit O-(CH₂)_sO- nebo 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh. Skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklus mohou být všechny volitelně substituované.

Pokud Y tvoří dioxymůstek, pak je s výhodně 1. Pokud Y tvoří další nenasycený kruh, pak je to výhodně 6-členný kruh vedoucí ke tvorbě naftylenového kruhu. Tyto kruhové systémy mohou být nezávisle substituovány, 1 až 3-krát, jinými Y skupinami jak jsou definovány výše.

Výhodně je R_a NR₆R₇, alkyl, arylC_x_₄alkyl, arylC₂_₄alkenyl, heteroaryl, heteroaryl-C_x_₄alkyl, heteroaryl-C₂_₄alkenyl, heterocyklus nebo heterocyklický C_x alkyl, kde aryl, heteroaryl a heterocyklické kruhy mohou všechny být volitelně substituované.

Z je výhodně halogen, C_{x 4}alkoxy, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný aryloxy nebo arylakoxy,methylendioxy, NR₄R_s, thioC_x_₄alkyl, thioaryl, halogenem substituovaný alkoxy, volitelně substituovaný C_x_₄alkyl nebo hydroxyalkyl. Výhodněji je Y monosubstituovaný halogen, disubstituovaný halogen, disubstituovaný alkoxy, methylendioxy, aryl nebo alkyl, nejlépe jsou tyto skupiny mononebo di-substituované ve 2' pozici nebo ve 2', 3' pozici.

• 9

Ačkoliv Y může být substituovaný v jakékoliv pozici kruhu, n je výhodně jedna. Ačkoliv mohou být oba R_x a Y vodík, je výhodné, aby byl alespoň jeden z kruhů substituován, výhodně jsou substituované oba kruhy.

R je výhodně -NH-C(X₂)-NH)-(CR_x3R_x4)_v-Z;

/(CR₁₅R₁₆)p

Z je výhodně W, HET, , volitelně substituovaný

C_xxoalkyl, volitelně substituovaný C _ioalkenyl, nebo volitelně substituovaný C₂__xoalkynyl;

Výhodně je p celé číslo od 1 do 3.

X₂ j© výhodně =0 nebo =S.

Ve sloučeninách vzorce (I) je X výhodně C(X_x)₂, C(0), C(S), S(0), PO(OR ) nebo C=NR .

^Ris í^e YÝLodně kyan, nitro, S(O)₂NR₄R_s, S(O)₂R_x7, alkyl, arylC_x_₄alkyl, arylC₂₄alkenyl, heteroaryl, heteroaryl-C_x4alkyl, heteroarylC₂_₄alkenyl, heterocyklus nebo heterocyklický C_x_₄alkyl, a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklus mohou být všechny volitelně substituované. Výhodně je R_xs kyan.

Když je X (C(X_x)₂, tak je Χ_χ nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, NR₄R_s, C_x__xoalkyl-NR₄R_s, C(0)NR₄R_s,

C_xxoalkyl-C(O)NR₄R_s, volitelně substituovaný C_xxoalkyl, C_xxoalkoxy, halogenem substituovaný C_x__xoalkoxy; aryl, « · arylC_x_₄alkyl, aryloxy, arylC_x_₄alkyloxy; heteroaryl;

heteroarylalkyl; heterocyklus; heterocyklický C alkyl; heteroarylC_{i 4}alkyloxy. C_x;Loalkyl může být volitelně substituovaný jednou nebo vícekrát hydroxy-skupinou, NR₄R_s nebo halogenem. Výhodně je alespoň jeden Χ_χ vodík.

Výhodně je ve sloučeninách vzorce (I) X C(S) nebo C(0) skupina, lépe C(0).

Výhodně je R_xs vodík, volitelně substituovaný C_{x ;Lo}alkyl, C_X1Oalkoxy, halogenem substituovaný C _1θalkoxy, hydroxy, arylC_;L_₄alkyl, arylC₂₄alkenyl, heteroaryl, heteroaryl-C_x_₄alkyl, heteroarylC₂_₄alkenyl, heterocyklus nebo heterocyklický C_x_₄alkyl, a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklus mohou být všechny volitelně substituované. Lépe je R vodík nebo alkyl a nejlépe je vodík.

Ve sloučeninách vzorce (II) je X výhodně N nebo C(X_x).

Výhodně, pokud je X C(X_x), pak Χ_χ je vodík nebo halogenem substituovaný alkyl.

Je známo, že sloučeniny vzorce (II), které mají kruhový systém, mohou existovat v tautomerické formě.

Výhodně, pokud je Y heteroarylový (HET) kruh, pak je to výhodně heteroarylový kruh nebo kruhový systém. Pokud je HET skupina vícekruhový systém, pak nemusí být kruh obsahující heteroatom přímo připojen na močovinu prostřednictvím (^RX3R₁₄)_Vvazby. Kruhy v těchto kruhových systémech mohou být volitelně substituované, jak je zde definováno. Výhodně je HET skupina • Φ· 9 ·· ♦· ·· • · · · · · · · · · · · ··« · · · · · · · ·· · · · · · · ······ • · · © · · · · *·· «· · · · · · · · · · pyridyl, což může být 2-, 3-, nebo 4-pyridyl. Pokud obsahuje kruhový systém více kruhů, tak se výhodně jedná o benzimidazolový, dibenzothiofenový nebo indolový kruh. Mezi další vhodné kruhy patří, bez omezení, thiofen, furan, pyrimidin, pyrrol, pyrazol, chinolin, isochinolin, chinazolinyl, oxazol, thiazol, thiadiazol, imidazol nebo benzimidazol.

HET kruh může být volitelně substituovaný nezávisle jedním až pěti, lépe 1 až 3 Y, jak je definován výše. Substituce mohou být na jakémkoliv z kruhů HET systému, například na benzimidazolovém kruhu.

Výhodně jsou R a R nezávisle vodík nebo volitelně

16 substituovaný C_i4alkyl, jak je definován pro R_x3 a R .

Výhodně je W

kde hvězdička (*) označuje navázání kruhu.

• ·

E kruh označený hvězdičkou (*) v místě vazby může být volitelně přítomen. Pokud nen přítomen, pak je kruh fenylová skupina, která je substituována R_x, jak byl definován.

E kruh může být také substituován (Y)n skupinou v jakémkoliv kruhu, nasyceném i nenasyceném, a pro ilustraci je zde substituce uvedena pouze na nenasyceném kruhu.

Ačkoliv Y ve W může být substituován v jakékoliv z pěti pozic fenylové skupiny v kruhu (pokud E není přítomen), je Y výhodně monosubstituovaný ve 2'-pouici nebo ve 3'-pozici, kdy pozice 4'- je výhodně nesubstituovaná. Pokud je fenylový kruh disubstituovaný, pak jsou substituenty výhodně ve 2'- nebo 3' pozici monocyklického kruhu. Ačkoliv mohou být oba R_x a Y vodí, je výhodné, aby byl alespoň jeden z kruhů substituován a nejlépe jsou oba kruhy substituované.

Jak je zde uvedeno, znamená volitelně substituovaný, pokud není přesně definováno, skupiny jako je halogen, jako je fluor, chlor, brom nebo jod; hydroxy; hydroxy substituovaný

C_iioalkyl; C_xxoalkoxy, jako je methoxy nebo ethoxy;

S(O)_m,C_iioalkyl, kde m' je 0, 1 nebo 2, jako je methylthio, methylsulfinyl nebo methylsulfonyl; amino, mono a di-substituovaná amino, jako je tomu v NR₄R₅ skupině; NHC(O)R₄; C(O)NR R ; C(O)OH; S(O)NRR; NHS(0) R , C alkyl, jako je methyl, ethyl, propyl, isopropyl nebo t-butyl; halogenem substituovaný C_{x ;LC)}alkyl, jako je CF₃; volitelně substituovaný aryl, jako je fenyl, nebo volitelně substituovaný arylalkyl, jako je benzyl nebo fenethyl, volitelně substituovaný heterocyklus, volitelně substituovaný heterocykloalkyl, volitelně substituovaný heteroaryl, volitelně substituovaný heteroarylalkyl, kde tyto arylové, heteroarylové ·· ··

nebo heterocyklické skupiny mohu být substituované jednou nebo dvakrát halogenem; hydroxy; hydroxy substituovaným alkylem;

1-10

C_iioalkoxy; S(0)C_x__ioalkylem; amino, mono a di-substituovanou amino, jak je tomu v NR₄R__ skupině;

C_{i io}alkylem nebo halogenem substituovaným C_x__;Loalkylem, jako je CF₃.

^R2o 3^e výhodné C_x4alkyl, aryl, aryl C_x_₄alkyl, heteroaryl, heteroaryl C_x_₄alkyl, heterocyklus nebo heterocyklický C_{x 4}alkyl.

Vhodné farmaceuticky přijatelné soli jsou odborníkům v oboru dobře známé a zahrnují bazické soli anorganických a organických kyselin, jako je kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová, kyselina fosforečná, kyselina methansulfonová, kyselina ethansulfonová, kyselina octová, kyselina jablečná, kyselina vinná, kyselina citrónová, kyselina mléčná, kyselina šúavelová, kyselina jantarová, kyselina fumarová, kyselina maleinová, kyselina benzoová, kyselina salicylová, kyselina fenyloctová a kyselina mandlová. Dále, farmaceuticky přijatelné soli sloučenin podle vzorce (I) mohou být také tvořeny s farmaceuticky přijatelnými kationty, například, pokud substituentová skupina obsahuje karboxylovou skupinu. Vhodné farmaceuticky přijatelné kationty jsou odborníkům v oboru dobře známé a zahrnují alkalické sloučeniny, alkalické zeminy, amoniak a kvarterní amonné kationty.

Následující termíny mají v této přihlášce tento význam:

- halogen - všechny halogeny, to znamená chlor, fluor, brom a jod.

• ·· · ·· ·· ·· • · · · · · · · · · · · • ·· · · · · · · · 9 9 99 99 99 999 999

9 9 9 9 9 9 9

999 99 999 99 99 99

- C alkyl nebo alkyl - radikály o 1 až 10 atomech uhlíku s přímým nebo s rozvětveným řetězcem, pokud není délka řetězce jinak omezena, jako je, ale bez omezení, methyl, ethyl, n-propyl, iso-propyl, n-butyl, sec-butyl, iso-butyl, terc-butyl, n-pentyl a podobně.

- termín cykloalkyl, jak je zde použit, označuje cyklické radikály, výhodně o 3 až 8 atomech uhlíku, jako je, ale bez omezení, cyklopropyl, cyklopentyl, cyklohexyl a podobně.

- termín alkenyl, jak je zde použit, označuje radikály o 2 až 10 atomech uhlíku s přímým nebo s rozvětveným řetězcem, pokud není délka řetězce jinak omezena, jako je, ale bez omezení, ethenyl, 1-propenyl, 2-propenyl, 2-methyl-l-propenyl,

1-butenyl, 2-butenyl a podobně.

- aryl - fenyl a naftyl.

- heteroaryl (sám o sobě nebo v jakékoliv kombinaci, jako například heteroaryloxy, nebo heteroarylalkyl) - 5 až 10 členný aromatický kruhový systém, ve kterém jeden nebo více kruhů obsahuje jeden nebo více heteroatomů vybraných ze skupiny skládající se z N, O nebo S, jako je například, ale bez omezení, pyrrol, pyrazol, furan, thiofen, chinolin, isochinolin, chinazolinyl, pyridin, pyrimidin, oxazol, thiazol, thiadiazol, triazol, imidazol nebo benzimidazol.

- heterocyklus (sám o sobě nebo v jakékoliv kombinaci, jako například heterocykloalkyl) - nasycený nebo částečně nenasycený 4-10 členný kruhový systém, ve kterém jeden nebo více kruhů obsahuje jeden nebo více heteroatomů vybraných ze skupiny • ·♦ · ·· ·· ·· ···· ···· · · 9 · ··« · · · · · · · • · · · ·· ·· ······ ··· ·«· · · ··· ·· ··· ·· ·· ·· skládající se z Ν, O nebo S; jako je například, ale bez omezení, pyrrolidin, piperidin, piperazin, morfolin, tetrahydropyran nebo imidazolidin.

- termín arylalkyl nebo heteroarylalkyl nebo heterocykloalkyl znamená C_{i ;Lo}alkyl, jak je definován výše, připojený na aryl, heteroaryl nebo heterocyklickou skupinu, jak jsou také definovány výše, pokud není uvedeno jinak.

- sulfinyl - oxid S (0) odpovídajícího sulfidu, termín thio označuje sulfid a termín sulfonyl označuje plně oxidovanou S(0) skupinu.

- termín kde dvě R_x skupiny (nebo dvě Y skupiny) mohou dohromady tvořit 5 až 6 členný nenasycený kruh znamená tvorbu aromatického kruhového systému, jako je naftylen, nebo fenylové skupiny s připojeným 6 členným částečně nenasyceným kruhem jako je C_g cykloalkenyl, t.j. hexen, nebo C_s cykloalkenylová skupina, cyklopenten.

Příklady sloučenin vzorce (I) jsou:

N-4-(benzimidazolin-2-on-N¹-(2¹-bromfenyl)močovina;

N-4-(1H,3H-2,1,3-benzothiazol-2,2-dioxid)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina;

N-4-(7-kyan-l-N-methyl-benzimidazolin-2-thion)-Ν' -(2,3-dichlorfenyl)močovina;

N-4-(7-kyan-benzimidazolin-2-thion)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina; N-4-(7-kyan-l-methyl-benzimidazolin-2-thion)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina;

N-4-(7-kyan-l-methylbenzimidazolin-2-on) -Ν' -(2,3-dichlorfenyl)močovina;

• · ·· ·· ·· • · · · · · • 9 · · · · • · * ·· · ··· « · · · ·· ·· ♦·

N-4-(7-kyan-benzimidazolin-2-on)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina; N-4-(7-kyan-benzimidazolin-2-thion)-Ν' -(2,3-dichlorfenyl) močovina;

N-4-(7-kyan-benzimidazolin-2-imin)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina; N-(4-kyan-2-oxo-3-methylbenzimidazol-7-yl)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina;

Příklady sloučenin vzorce (II) jsou:

N-7-(benzotriazol)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina;

N-7-(4-brombenzotriazol)-Ν' -(2,3-dichlorfenyl)močovina;

N-7-(4-brom-2-trifluormethyl-benzimidazolyl)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina;

N-4-(2-trifluormethyl-benzimidazolyl)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina; N-7-(4-kyan-benzotriazol)-Ν' -(2,3-dichlorfenyl)močovina;

N-(2-bromfenyl)-Ν' -(4-kyan-benzotriazol)močovina;

N-7-(4-kyan-2-trifluormethyl-benzimidazolyl)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina;

N-7-(4-kyan-benzimidazolyl)-Ν' -(2,3-dichlorfenyl)močovina;

N-7-(4-kyan-benzimidazolyl)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina;

N-7-(4-kyan-benzotriazol)-Ν' -(2,3-dichlorfenyl)močovina.

Výše uvedené názvosloví je založeno na následujícím způsobu číslování kruhů:

Pro vzorec (I); a pro vzorec (II).

• 9

I fl • ·

Způsoby přípravy

Sloučeniny vzorce (I) mohou být získány za použití postupů syntézy, jak jsou některé z nich uvedeny ve Schématech uvedených dále. Syntesa uvedená v těchto schématech je použitelná pro výrobu sloučenin vzorce (I) majících různé Z a R_x skupiny, které reagují, za využití volitelných substituentů, které jsou vhodným způsobem chráněny, pro dosažení kompatibility se zde uvedenými reakcemi. Po následném odstraněni chránících skupin jsou v těchto případech získány sloučeniny, jejichž charakter je zde obecně popsán. Po vzniku močovinového jádra mohou být další sloučeniny těchto vzorců připraveny za použití standartních technik pro vnitřní konversi funkčních skupin, které jsou v oboru dobře známé. Ačkoliv jsou schémata uvedena pro různé sloučeniny vzorce (I), slouží pouze pro ilustraci.

a)NaNO₂, HOAc

Pokud není 2-nitro-substituovaná heterocyklická sloučenina 2 - schéma 1 komerčně dostupná, může být vyrobena reakcí komerčně dostupného 3-nitrofenylendiaminu 1 - schéma 1 s dusitanem sodným v protickém rozpouštědle jako je HOAc.

• ·* · «* *» ·· • · · * · · r « φ · 4 φ

11 1 1 1 4 · · · ·» · * · 9 14 411 111

1 111 1 1

91 14 444 14 · · ··

Schéma 2

Ο,. ₊.Ο Ν

a) trifosgen, Et_aN, DMF

Pokud není 2-nitro-substituovaná heterocyklická sloučenina 2 - schéma 2 komerčně dostupná, může být vyrobena reakcí komerčně dostupného 3-nitrofenylendiaminu 1 - schéma 2 s trifosgenem a triethlyaminem v DMF nebo s thiofosgenem za vzniku thiomočoviny.

Schéma 3

a, b

CF,

a) anhydrid kyseliny trifluoroctové b) toluen, reflux

Pokud není 2-nitro-substituovaná heterocyklická sloučenina 2 - schéma 3 komerčně dostupná, může být vyrobena reakcí komerčně dostupného 3-nitrofenylendiaminu 1 - schéma 3 s ♦ · • · • 9 • · • © · o · © * · 9 · 9 » • · © · · · • · * ··· ··© • · · · • · © »9 9 9 odpovídajícím anhydridem a potom zahříváním při teplotě zpětného toku v toluenu.

Schéma 4 σΝΗΒζ

a. b, c, d»

-NH

I

-SO,

NHBz

NH

a) Et₃N, THF, -70°C b) SOCI₂ c) m-CPBA d) H_2> Pd/C e) NaNOg, 3M H₂SO₄

Pokud není 2-nitro-substituovaná heterocyklická sloučenina

- schéma 4 komerčně dostupná, může být vyrobena reakcí sloučeniny 2 - schéma 4 za standardních podmínek nitrace (za použití HNO₃ nebo NaNO₃) při 23 °C. Pokud není heterocyklická sloučenina 2 - schéma 4 komerčně dostupná, může být vyrobena reakcí komerčně dostupného 1,2-dibenzyldiaminu 1 - schéma 4 s triethylaminem při teplotě -70 °C, potom s thionylchloridem a potom oxidací s m-CPBA a redukcí benzylových skupin pomocí

H /Pd v MeOH.

Schéma 5

a) PhOP(O)CI₂ b) NaNOg • » *6 ♦ « Μ · • · · · · · • · · » · · « · · » · · · « « · st · · ·

Pokud, není 2-nitro-substituovaná heterocyklická sloučenina 2 - schéma 5 komerčně dostupná, může být vyrobena reakcí komerčně dostupného 1,2-dibenzyldiaminu l - schéma 5 s PhOP(O)Cl₂ a potom za standardních podmínek nitrace (za použití HNO₃ nebo NaNOJ při 23 °C.

Schéma 6

a) formaldehyd, reflux

Pokud není heterocyklická sloučenina 2 - schéma 6 komerčně dostupná, může být vyrobena reakcí komerčně dostupného l,2diaminu 1 - schéma 6 s formaldehydem při teplotě zpětného toku.

Schéma 7

a) H₂ Pd/C, MeOH b) PhNCO, DMF, 80°C ·· © • «

Pokud není požadovaný anilin 2 - schéma 7 komerčně dostupný, tak je odpovídající nitro-sloučenina 1 - schéma 4 redukována za standardních podmínek (H₂ Pd/C nebo SnCl₂). Ortho-substituovaná fenylmočovina v 3 - schéma 7 může být připravena za použití standardních podmínek obsahujících kondenzaci komerčně dostupného substituovaného arylisokyanatanu (Aldrich Chemical Co., Milwaukee, Wi.) s odpovídajícím anilinem 2 - schéma 7 v aprotickém rozpouštědle jako je DMF nebo toluen.

Schéma 8

a) CuCN, pyridin, DMF b) TMHI, DMSO, Na-terpentoxid c) NaNO₂, HOAc d) Pd/C H₂ MeOH

Pokud není 7-amino-substituovaná heterocyklická sloučenina 4 - schéma 8 komerčně dostupná, může být připravena reakcí komerčně dostupného 2-brom-5-nitroanilinu 1 - schéma 8 s kyanidem měďným a pyridinem v aprotickém rozpouštědle jako je DMF za vzniku 2-kyan-5-nitroanilinu 2 - schéma 8. Diamin 3 schéma 8 může být vyroben reakcí 2-brom-5-nitroanilinu 1 schéma 8 s tetramethylhydrazinjodidem a silnou chráněnou baží jako je t-pentoxid sodíku, v aprotickém rozpouštědle jako je DMSO. 7-amino-4-kyanbenzotriazol 4 - schéma 8 může být vyroben • 9 * ♦ ·?

• ·

9 9 ·· I

9 reakcí diaminu 3 - schéma 8 s dusitanem sodným, v protickém rozpouštědle jako je HOAc a potom redukcí nitro-skupiny vhodným redukčním činidlem, jako je Pd/C v MeOH.

Amino-substituovaná heterocyklická sloučenina 4 - schéma 8 může být potom přeměněna na odpovídající močovinu kondenzací s komerčně dostupným isokyanatanem.

Příklady provedení vynálezu

Příklady syntesy

Vynález bude nyní popsán v následujících příkladech, které jsou pouze ilustrativní a nejsou vytvořeny jako omezení rozsahu předkládaného vynálezu. Všechny teploty jsou uvedené ve stupních Celsia, všechna použitá rozpouštědla jsou nejvyšší možné čistoty a všechny reakce jsou provedeny za anhydrických podmínek v argonové atmosféře, pokud není uvedeno jinak.

V příkladech jsou všechny teploty uvedeny ve stupních Celsia (°C). Hmotnostní spektra byla získána za použití VG Zab hmotnostního spektrometru s ostřelováním rychlými atomy, pokud není uvedeno jinak. ^H-NMR (dále NMR) spektra byla zaznamenávána při 250 MHz za použití Bruker AM 250 nebo Am 400 spektrometru. Uvedené multiplicity jsou: s = singlet, d = dublet, t = triplet, q = kvartet, m = multiplet a br označuje široký signál. Sat. znamená nasycený roztok, ekviv. znamená poměr molárního ekvivalentu činidla ve vztahu k hlavnímu reaktantu.

Obecný způsob B: Syntéza N,Ν'-fenylmočoviny

Do roztoku fenylisokyanatanu (1,0 ekv.) v dimethylformamidu (1 ml) se přidá odpovídající anilin (1,0 ekv.). Reakční směs se mísí při 80 °C do dokončení (3-16 hodin) a potom se rozpouštědlo odstraní ve vakuu. Způsoby přečištění, zisky a spektrální charakteristiky pro každou jednotlivou sloučeninu jsou uvedeny dále.

Přiklad l: Příprava N-(5-brom-2-benzotriazol)-Ν'-(2,3-dichlorfenyl)močoviny

a) Příprava 4-nitrobenzotriazolu

Roztok 3-nitro-fenylendiaminu (15,3 g, 100 mmol) v kyselině octové (50 ml) se mísí s dusitanem sodným (6,9 g, 100 mmol)

Směs se potom zahřívá po dobu 1 hodiny při 60 °C. Reakční směs se potom ochladí na teplotu okolí a přidá se voda, požadovaný produkt se vysráží z roztoku a směs se filtruje za zisku požadovaného produktu (10,7 g, 65%) . -Η NMR (CD SOCD ) : δ 8,58 (d, 1H), 8,44 (d, 1H), 7,61 (t, 1H).

b) Příprava 4-aminobenzotriazolu

Do roztoku 4-nitrobenzotriazolu (4 g, 24,4 mmol) v methanolu (250 ml) se přidá 10% Pd/C (1,0 g). Směs se probublá argonem a potom se roztokem nechá probublávat vodík po dobu 10 minut a atmosféra vodíku se udržuje pomocí balonu po dobu 4 hodin. Reakční směs se probublá argonem a přidá se další 10% Pd/C (1,0 g) a vodíková atmosféra se udržuje atmosféra vodíku se udržuje pomocí balonu přes noc. Směs se filtruje přes celit • · <ϊ 44 4 4 · · · 4 · · · « 4 « ··« · · · · · · 4

4 4 · 4 4 4 1 ··· *·· ··« 4 9 9 4 · ··· ·« · · · 49 4 4 14 a celit se promyje methanolem. Rozpouštědlo se odpaří a při chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (5%

MeOH/CH₂Cl₂) se získá požadovaná sloučenina (2,0 g, 82%). ^XH

NMR (CD₃SOCD₃): δ 8,71 (s, 1H), 7,16 (t, 1H), 6,75 (d, 1H),

6,36 (d, 1H), 5,90 (s, 1H).

c) Příprava 4-amino-7-brombenzotriazolu

Do roztoku 4-aminobenzotriazolu (550 mg, 4,1 mmol) v kyselině octové (10 ml) se přidá bromid draselný (520 mg, 4,4 mmol), molybdenan amonný (67 mg, 0,55 mmol) a peroxid vodíku (0,5 ml, 30%). Směs se mísí při 25 °C po dobu 3 hodin.

Rozpouštědlo se odpaří a při chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (EtOAc/hexan (1 ekv./l ekv.) se získá požadova sloučenina (400 mg, 45%). ^XH NMR (CD₃SO₂CD₃): δ 7,29 (d, 1H),

6,49 (d, 1H), 6,05 (bs, 3H).

d) Příprava N-(5-brom-2-benzotriazol)-Ν'-(2,3-dichlorfenyl)močoviny

N-(5-brom-2-benzotriazol)-Ν'-(2,3-dichlorfenyl)močovina se připraví ze 4-amino-7-brombenzotriazolu (330 mg, 1,50 mmol) podle obecného způsobu B. Sloučenina se přečistí chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (EtOAc/hexan (2 ekv./3 ekv.) (410 mg, 68%). ¹H NMR (CD₃SOCD₃): δ 10,42 (s, 1H),

9,25 (s, 1H), 8,20 (dd, 3H), 7,96 (d, 1H), 7,64 (d, 1H), 7,33 (m, 2H).

Příklad 2: Příprava N-7-(benzimidazolin-3-on)-Ν' -(2-bromfenyl)močoviny • · « · * · 4 · • 4 4 4 • 4«4 444

4

4· 44

a) Příprava 4-nitro-benzimidazolin-2-onu

Do roztoku 3-nitro-fenylendiaminu (1,0 g, 6,53 mmol) v dimethylformamidu (20 ml) se přidá trifosgen (0,775 g, 2,60 mmol) a triethylamin (1 ml, 7,80 mmol). Směs se potom zahřívá po dobu l hodiny při 80 °C. Rozpouštědla se potom odpaří a sloučenina se vysráží z roztoku pomocí methylenchloridu/hexanu (1 ekv./20 ekv.). (700 mg, 64%). ¹H NMR (CD₃SO₂CD₃): δ 11,61 (S, 1H), 11,35 (S, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,15 (t,

1H) .

b) Příprava 4-amino-benzimidazolin-2-onu

Do roztoku 4-nitro-benzimidazolin-2-onu (700 mg, 3,9 mmol) v methanolu (50 ml) a kyselině octové (10 ml) se přidá 10%

Pd/C (200 mg). Směs se probublá argonem a potom se roztokem nechá probublávat vodík po dobu 10 minut a atmosféra vodíku se udržuje pomocí balonu přes noc. Směs se filtruje přes celit a celit se promyje methanolem. Rozpouštědlo se odpaří a při chromatografií výsledného pevného materiálu na silikagelu (10% MeOH/CH₂Cl₂) se získá požadovaná sloučenina (500 mg, 86%). ¹H NMR (CD₃SO₂CD₃): δ 10,34 (s, 1H) , 10,01 (s, 1H), 6,66 (t, 1H), 6,24 (d, 1H), 6,22 (d, 1H), 5,15 (bs, 2H).

c) Příprava N-7-(benzimidazolin-3-on)-Ν'-(2-bromfenyl)močoviny

N-7-(benzimidazolin-3-on)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina se připraví ze 4-amino-benzimidazolin-2-onu (80 mg, 0,54 mmol) podle obecného způsobu B. Sloučenina se přečistí chromatografií výsledného pevného materiálu na silikagelu (EtOAc/hexan (l

4« 4 4 4 · 4 » 9

9 9 44 44 ······ • · 4 9 · · 9 • 44 94 99 9 99 9 9 44 ekv./l ekv.) (120 mg, 64%). ¹H NMR (CD₃SOCD₃): δ 10,68 (s,

1H) , 10,03 (s, 1H), 9,08 (s, 1H), 8,15 (d, 1H), 8,08 (s, 1H),

7,62 (d, 1H), 7,34 (t, 1H), 6,99 (t, 1H), 6,92 (d, 2H), 6,73 (d, 1H).

Příklad 3: Příprava N-(4-brom-2-trifluormethyl-7-benzimidazolyl)-Ν' -(2-bromfenyl)močoviny

a) Příprava 4-nitro-2-trifluormethylbenzimidazolu

Do roztoku 3-nitro-fenylendiaminu (1,0 g, 6,53 mmol) se přidá anhydrid kyseliny trifluoroctové (1,37 g, 6,53 mmol). Směs se potom míchá po dobu 1 hodiny. Rozpouštědla se potom odpaří a sloučenina se zahřívá při teplotě zpětného toku v toluenu po dobu 2 hodin. Rozpouštědla se potom odpaří a získá se požadovaná sloučenina (1,43 g, 95%). ^ΧΗ NMR (CD₃SO₂CD₃): δ

9,40 (S, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,39 (d, 1H), 7,58 (t, 1H).

b) Příprava 4-amino-2-trifluormethylbenzimidazolu

Do roztoku 4-nitro-2-trifluormethylbenzimidazolu (700 mg,

3,0 mmol) v methanolu (50 ml) se přidá 10% Pd/C (200 mg) . Směs se probublá argonem a potom se roztokem nechá probublávat vodík po dobu 10 minut a atmosféra vodíku se udržuje pomocí balonu přes noc. Směs se filtruje přes celit a celit se promyje methanolem. Rozpouštědlo se odpaří a při chromatografií výsledného pevného materiálu na silikagelu (10% MeOH/CH₂Cl₂) se získá požadovaná sloučenina (560 mg, 93%). ’Ή NMR (CD₃SO₂CD₃): δ 10,49 (s, 1H), 7,09 (t, 1H), 6,72 (d, 1H), 6,30 (d, 1H),

5,52 (bs, 1H).

• 9· 9 9 9 9» • 9 · 9 9 9 9 9 · 99 9 • · 9 9 9 9 9 9 9 •9 99 *9 99 ··· 999

999 999 9 9

999 99 999 9 9 9 · 99

c) Příprava 4-amino-7-brom-2-trifluormethylbenzimidazolu

Do roztoku 4-amino-2-trifluormethylbenzimidazolu (180 mg,

0,9 mmol) v kyselině octové (10 ml) se přidá bromid draselný (117 mg, 0,99 mmol), molybdenan amonný (12 mg, 0,099 mmol) a peroxid vodíku (0,2 ml, 30%). Směs se mísí při 25 °C po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a při chromatografií výsledného pevného materiálu na silikagelu (EtOAc/hexan (1 ekv./l ekv.) se získá požadovaná sloučenina (103 mg, 39%). ¹H NMR (CD₃OD): δ 7,11 (d, 1H), 6,35 (d, 1H).

d) Příprava N-(4-brom-2-trifluormethyl-7-benzimidazolyl)-Ν' -(2-bromfenyl)močoviny

N-(4-brom-2-trifluormethyl-7-benzimidazolyl)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina se připraví ze 4-amino-7-brom-2-trifluormethylbenzimidazolu (33 mg, 0,54 mmol) podle obecného způsobu B. Sloučenina se přečistí chromatografií výsledného pevného materiálu na silikagelu (EtOAc/hexan (1 ekv./l ekv.) (35 mg, 63%). ’Ή NMR (CD SOCD ) : δ 9,95 (s, 1H), 9,54 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,06 (d, 1H), 7,99 (d, 1H), 7,62 (d, 1H), 7,33 (t, 1H), 7,01 (t, 1H).

Příklad 4: Příprava N-(4-triazolfenyl)-Ν'-(2-bromfenyl)močoviny

a) Příprava 2,6-dinitro(1-fenylsulfonylanilinu

Do roztoku 2,6-dinitroanilinu (2 g, 10,92 mmol) v THF (20 ml) se přidá hydrid sodný (437 mg, 10,92 mmol). Po 10 minutách se přidá benzensulfonylchlorid (1,4 ml, 10,92 mmol). Reakční směs • · · · · · *·«· ·· · · · · · » · • · · * · · · ··· ··· • · · · · · · ·♦ ·· · 9 9 9 · 99 se mísí při teplotě okolí po dobu 16 hodin. Potom se reakční směs rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Kombinované organické vrstvy se suší přes MgSO₄, filtrují se a koncentrují se za redukovaného tlaku a při chromatografii výsledné kapaliny na silikagelu (hexan/ethylacetat (5 ekv./l ekv.) se získá požadovaná sloučenina <2,6 g, 74%). EI-MS m/z 324 (M⁺).

b) Příprava 2,β-diamino(l-fenylsulfonyl)anilinu

Do roztoku 2,6-dinitro(1-fenylsulfonylanilinu (450 mg, 1,39 mmol) v ethanolu (10 ml) se přidá chlorid cínatý (1,57 g, 6,95 mmol). Reakční směs se míchá při teplotě zpětného toku po dobu 4 hodin. Potom se ochladí na teplotu okolí. Přidá se NHCO₃(vodný roztok) tak, aby pH bylo 7. Potom se provede extrakce ethylacetátem (3x). Kombinované organické vrstvy se suší přes MgSO₄, filtrují se a koncentrují se za redukovaného tlaku za zisku požadované sloučeniny (338 mg, 92%). EI-MS m/z 264 (M*).

c) Příprava N-(2-benzensulfonylamino-3-aminofenyl)-N'-(2bromfenyl)močoviny

Do roztoku 2-bromfenylisokyanatanu (0,16 mg, 1,28 mmol) v DMF (1,5 ml) se přidá 2,6-diamino(l-fenylsulfonyl)anilin (338 mg, 1,28 mmol). Reakční směs se míchá při 80 °C po dobu 16 hodin a potom se ochladí na teplotu okolí. Při chromatografii výsledné kapaliny na silikagelu (hexan/ethylacetat (5 ekv./l ekv. až 1 ekv./l ekv.) se získá požadovaná sloučenina (430 mg, 73%). EI-MS m/z 461 (M⁺).

d) Příprava N-(4-triazolfenyl)-Ν'-(2-bromfenyl)močoviny • · • · · • · · ·· · «

N-(2-benzensulfonylamino-3-aminofenyl)-Ν' -(2-bromfenyl) močovina (235 mg, 0,51 mmol) se přidá do HC1/H₂O (0,51 ml/1,02 ml), a ochladí se na 0 °C. Do reakční směsi se přidá dusitan sodný (35,4 mg, 0,51 mmol). Reakční směs se mísí při 0 °C po dobu 30 minut. Do reakční směsi se přidá kyanid sodný (25 mg, 0,51 mmol) a směs se ohřeje na teplotu okolí. Reakční směs se mísí při teplotě okolí po dobu 18 hodin. Potom se reakční směs extrahuje třikrát ethylacetátem. Organické vrstvy se kombinují, suší se přes MgSO₄, filtrují se a koncentrují se za redukovaného tlaku a při chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu se získá požadovaná sloučenina (100 mg, 59%). EI-MS m/z 333 (M*).

Příklad 5: Příprava N-7-(2-trifluormethylbenzimidazolyl)-Ν'-(2-bromfenyl)močoviny

a) Příprava 4-nitro-2-trifluormethylbenzimidazolu

Do roztoku 3-nitro-fenylendiaminu (1,0 g, 6,53 mmol) se přidá anhydrid kyseliny trifluoroctové (1,37 g, 6,53 mmol). Směs se potom míchá po dobu 1 hodiny. Rozpouštědla se potom odpaří a sloučenina se zahřívá při teplotě zpětného toku v toluenu po dobu 2 hodin. Rozpouštědla se potom odpaří a získá se požadovaná sloučenina (1,43 g, 95%). ¹H NMR (CD₃SO₂CD₃): δ

9,40 (s, 1H), 8,31 (d, 1H), 8,39 (d, 1H), 7,58 (t, 1H).

b) Příprava 4-amino-2-trifluormethylbenzimidazolu

Do roztoku 4-nitro-2-trifluormethylbenzimidazolu (700 mg,

3,0 mmol) v methanolu (50 ml) se přidá 10% Pd/C (200 mg). Směs se probublá argonem a potom se roztokem nechá probublávat vodík

99 · 9 • 9 9 9 9 · • · · · · · 9 9

999 99 999 99 99 99 po dobu 10 minut a atmosféra vodíku se udržuje pomocí balonu přes noc. Směs se filtruje přes celit a celit se promyje methanolem. Rozpouštědlo se odpaří a při chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (10% MeOH/CH₂Cl₂) se získá požadovaná sloučenina (560 mg, 93%). ¹H NMR (CD₃SO₂CD₃):

10,49 (s, 1H), 7,09 (t, 1H), 6,72 (d, 1H), 6,30 (d, 1H),

5,52 (bs, 1H).

c) Příprava N-7-(2-trifluormethylbenzimidazolyl)-N'-(2-bromfenyl)močoviny

N-7-(2-trifluormethylbenzimidazolyl)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina se připraví ze 4-amino-7-brom-2-trifluormethylbenzimidazolu (360 mg, 1,79 mmol) podle obecného způsobu B. Sloučenina se přečistí chromatografií výsledného pevného materiálu na silikagelu (EtÓAc/hexan (1 ekv./l ekv.) (35 mg, 63%). NMR (CD₃SO_OD₃): δ 9,94 (s, 1H), 9,89 (s,

1H) , 9,02 (s, 1H), 8,09 (d, 1H), 8,00 (d, 1H) , 7,61 (d, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,20 (d, 1H), 7,00 (t, 1H).

Příklad 6: Příprava N-(4-kyan-lH-benzotriazol-7-yl)-N'-(2,3-dichlorfenyl)močoviny

a) Příprava 2-kyan-5-nitroanilinu

Roztok 2-brom-5-nitroanilinu (5,0 g, 23 mmol) v dimethylformamidu (100 ml) a pyridinu (20 ml) se mísí s kyanidem mědhým (2,05 g, 64 mmol). Směs se potom zahřívá při 160 °C po dobu 48 hodin. Reakční směs se potom ochladí na teplotu okolí a filtruje se přes celit, který se potom promyje ethylacetátem. Rozpouštědlo se odpaří a při chromatografií • · výsledného pevného materiálu na silikagelu (25% EtOAc/hexan) se získá požadovaná sloučenina (2,64 g, 70%). ’Ή NMR (CD₃COCD₃): δ 7,75 (S, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,44 (dd, 1H), 6,25 (bs, 2H).

b) Příprava 2-kyan-5-nitro-fenylendiaminu

Do roztoku 2-kyan-5-nitroanilinu (435 mg, 2,67 mmol) v dimethylsulfoxidu (25 ml) se přidá tetramethylhydrazinjodid (534 mg, 2,67 mmol) a t-pentoxid sodný (880 mg, 8,01 mmol).

Směs se míchá při teplotě okolí po dobu 12 hodin, reakce se utlumí 10% HC1. Vysrážené pevné látky se filtrují a zbylý roztok se extrahuje ethylacetátem, rozpouštědlo se odpaří a při chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (25% EtOAc/hexan) se získá požadovaná sloučenina (254 mg, 53%).

NMR (CD₃COCD₃): δ 7,49 (d, 1H), 7,03 (bs, 2H), 6,80 (d, 1H), 5,78 (bs, 2H).

c) Příprava 4-kyan-7-nitrobenzotriazolu

Roztok 2-kyan-5-nitro-fenylendiaminu (120 mg, 0,67 mmol) v kyselině octové (20 ml) se mísí s dusitanem sodným (50 mg, 0,72 mmol) Směs se potom zahřívá po dobu 1 hodiny při 60 °C. Reakční směs se potom ochladí na teplotu okolí a rozpouštědla se odpaří a při chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (50% EtOAc/hexan) se získá požadovaná sloučenina (120 mg, 95%). ^XH NMR (CD₃COCD₃): δ 8,70 (d, 1H), 8,25 (d, 1H).

d) Příprava 4-kyan-7-aminobenzotriazolu

Do roztoku 4-kyan-7-nitrobenzotriazolu (120 mg, 0,63 mmol)

9 99 99 99

9999 9999

999 9999

99 99 99 999999 v methanolu (250 ml) se přidá 10% Pd/C (1,0 g). Směs se probublá argonem a potom se roztokem nechá probublávat vodík po dobu 10 minut a atmosféra vodíku se udržuje pomocí balonu po dobu 4 hodin. Reakční směs se probublá argonem a přidá se další 10% Pd/C (1,0 g) a atmosféra vodíku se udržuje pomocí balonu přes noc. Směs se filtruje přes celit a celit se promyje methanolem. Rozpouštědlo se odpaří a při chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (5% MeOH/CH₂Cl₂) se získá požadovaná sloučenina (95 mg, 94%). ¹H NMR (CD^OD): δ

7,58 (d, 1H), 6,53 (d, 1H).

e) Příprava N-(4-kyan-lH-benztriazol-7-yl)-Ν'-(2,3-dichlorfenyl)močoviny

N-(4-kyan-lH-benztriazol-7-yl)-Ν' -(2,3-dichlorfenyl)močovina se připraví ze 4-kyan-7-aminobenzotriazolu (95 mg, 0,60 mmol) podle obecného způsobu B. Sloučenina se přečistí chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (EtOAc/hexan (2 ekv./3 ekv.) (410 mg, 68%). ¹H NMR (CD₃COCD₃): δ 10,85 (s, 1H),

9,40 (S, 1H), 8,34 (d, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,94 (d, 1H), 7,36 (d, 2H), 7,31 (t, 1H).

Příklad 7: Příprava N-(2-bromfenyl)-Ν' -(4-kyan-lHbenzotriazol-7-yl)močoviny

Roztok 2-brom-5-nitroanilinu (5,0 g, 23 mmol) v dimethylformamidu (100 ml) a pyridinu (20 ml) se mísí s kyanidem měďným (2,05 g, 64 mmol). Směs se potom zahřívá při 160 °C po dobu 48 hodin. Reakční směs se potom ochladí na teplotu okolí a filtruje se přes celit, který se potom promyje ethylacetátem. Rozpouštědlo se odpaří a při chromatografii » « 99 » 9 9

I 9 9 • 9 9

4

99 výsledného pevného materiálu na silikagelu (25% EtOAc/hexan) se získá požadovaná sloučenina (2,64 g, 70%) . ¹H NMR (CD₃COCD₃): δ 7,75 (s, 1H), 7,70 (d, 1H), 7,44 (dd, 1H), 6,25 (bs, 2H).

b) Příprava 2-kyan-5-nitro-fenylendiaminu

Směs se míchá při teplotě okolí po dobu 12 hodin, reakce se utlumí 10% HC1. Vysrážené pevné látky se filtrují a zbylý roztok se extrahuje ethylacetátem, rozpouštědlo se odpaří a při chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (25% EtOAc/hexan) se získá požadovaná sloučenina (254 mg, 53%) . ^XH NMR (CD₃COCD₃): δ 7,49 (d, 1H), 7,03 (bs, 2H), 6,80 (d, 1H), 5,78 (bs, 2H) .

c) Příprava 4-kyan-7-nitrobenzotriazolu

Roztok 2-kyan-5-nitro-fenylendiaminu (120 mg, 0,67 mmol) v kyselině octové (20 ml) se mísí s dusitanem sodným (50 mg, 0,72 mmol) Směs se potom zahřívá po dobu 1 hodiny při 60 °C. Reakční směs se potom ochladí na teplotu okolí a rozpouštědla se odpaří a při chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (50% EtOAc/hexan) se získá požadovaná sloučenina (120 mg, 95%). ^XH NMR (CD₃COCD₃) : δ 8,70 (d, 1H), 8,25 (d, 1H) .

d) Příprava 4-kyan-7-aminobenzotriazolu

Do roztoku 4-kyan-7-nitrobenzotriazolu (120 mg, 0,63 mmol) • ·· • a · · · • ··

9 9 9

9 9

999 99 9 • *·

99

9 9 9 9 • · · · 9

9 999 999

9 9

99 v methanolu {250 ml) se přidá 10% Pd/C (1,0 g). Směs se probublá argonem a potom se roztokem nechá probublávat vodík po dobu 10 minut a atmosféra vodíku se udržuje pomocí balonu po dobu 4 hodin. Reakční směs se probublá argonem a přidá se další 10% Pd/C (1,0 g) a atmosféra vodíku se udržuje pomocí balonu přes noc. Směs se filtruje přes celit a celit se promyje methanolem. Rozpouštědlo se odpaří a při chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (5% MeOH/CH₂Cl ) se získá požadovaná sloučenina (95 mg, 94%). Ή NMR (CD₃OD): δ

7,58 (d, 1H), 6,53 (d, 1H).

e) Příprava N-[4-kyan-(1,4)-benzotriazol-7-yl]-Ν' -(2-bromfenyl)močoviny

N-(5-kyan-2-benzotriazol)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina se připraví ze 7-amino-4-kyanbenzotriazolu (95 mg, 0,60 mmol) podle obecného způsobu B. Sloučenina se přečistí chromatografii výsledného pevného materiálu na silikagelu (EtOAc/hexan (2 ekv./3 ekv.) (410 mg, 68%). ¹H NMR (CD₃SO₂CD₃): δ 10,83 (s, 1H) , 9,18 (S, 1H), 8,20 (d, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,99 (d, 1H) , 7,66 (d,

1H) , 7,40 (t, 1H) , 7,06 (t, 1H) .

Za použití postupů analogických k výše popsaným postupům nebo k postupům uvedeným ve schématech mohou být syntetizoovány následující sloučeniny.

Příklad 8: N-(2H,4H-3,2,4-benzothiazol-3,3-dioxid)-Ν'-(2-bromfenyl)močovina ^XH NMR (DMSO-dJ δ 10,96 (s, 1H), 10,32 (s,lH), 9,05 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,08 (d, 1H, J = 11,50 Hz), 7,63 (d, 1H, J = • · • »

11,50 Hz), 7,35 (t, 1H), 7,18 (d, 1H, J = 11,50 Hz), 7,01 (t, 1H), 6,91 (t, 1H), 6,60 (d, 1H, J = 11,50 Hz).

Příklad 9: N-(5-kyan-4-N-methyl-benzimidazolin-3-thion)-Ν' -{2,3-dichlorfenyl)močovina ^XH NMR (DMSO-dJ δ 11,20 (s, 1H), 9,52 (s,lH), 8,62 (s, 1H),

8,15 (m, 2H), 7,61 (d, 1H, J = 13,25 Hz), 7,45 (d, 1H, J =

13,25 Hz), 7,37 (m, 2H), 3,94 (d, 3H).

Příklad 10: N-(5-kyan-benzimidazolin-3-thion)-N¹-(2-bromfenyl)močovina ¹H NMR (DMSO-d_e) δ 11,57 (s, 1H), 10,43 (S,1H), 9,51 (s, 1H) , 8,31 (S, 1H), 8,09 (d, 1H, J = 13,25 Hz), 7,68 (d, 1H, J =

13,25 Hz), 7,54 (d, 1H, J = 13,25), 7,44 - 7,36 (m, 2H), 7,07 (t, 1H).

Příklad 11: N-(5-kyan-4-N-methyl-benzimidazolin-3-thion)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina ¹H NMR (DMSO-d_e) δ 11,25 (s, 1H), 9,51 (s,lH), 8,31 (s, 1H), 8,09 (d, 1H, J = 13,25 Hz), 7,67 (d, 1H, J = 13, 25 Hz), 7,61 (d, 1H, J = 13,25), 7,50 (d, 1H, J = 13,25), 7,39 (t, 1H), 7,06 (t, 1H), 3,94 (s, 3H).

Příklad 12: N-(4-kyan-2-oxo-3-methylbenzimidazol-7-yl)-Ν'-(2,3-dichlorfenyl)močovina ^XH NMR (DMSO-dJ δ 10,94 (s, 1H) , 9,46 (S,1H), 8,65 (s, 1H) , 8,18 (m, 1H), 7,40 - 7,31 (m, 3H), 7,26 (d, 1H, J = 13,25 Hz),

• ·

• · 9 · © · * · * 99 9 999 ·

99

3,55 (S, 3H).

Příklad 13: N-(4-kyan-2-oxo-2,3-dihydrogenbenzimidazol-7-yl)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina ¹H NMR (DMSO-d^) 5 11,86 (s, 1H), 10,82 (s, 1H), 9,94 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,65 (d, 1H, J = 13,25 Hz), 8,11 (d, 1H, J =

13,25 Hz), 7,85 (t, 1H), 7,76 (m, 2H), 7,50 (t, 1H).

Přiklad 14: N-(4-kyan-2-trifluormethyl-7-benzimidazolyl)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina ^-H NMR (DMSO-d₆) δ 10,30 (s, 1H) , 9,25 (s, 1H) , 8,24 (s, 1H) , 7,96 (m, 2H), 7,85 (d, 1H, J = 13,25 Hz), 7,66 (d, 1H, J =

13,25 Hz), 7,49 (t, 1H), 7,07 (t, 1H).

Příklad 15: N-(4-kyan-7-benzimidazolyl)-Ν' -(2,3-dichlorfenyl)močovina

NMR (DMSO-d_s) δ 10,45 (s, 1H), 10,34 (s, 1H), 9,48 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 8,15 (m, 2H), 7,68 (d, 1H, J = 13,25 Hz),

7,85 (t, 1H), 7,37 (m, 2H).

Příklad 16: N-(4-kyan-7-benzimidazolyl)-Ν'-(2-bromfenyl)močovina ^XH NMR (Aceton-d_s) δ 11,81 (Es, 1H), 9,45 (s, 1H) , 8,84 (s,

1H), 8,34 (s, 1H), 8,26 (m, 2H), 7,65 (d, 2H) ,

7,41 (t, 1H), 7,06 (t, 1H).

<·« ·» ·

Příklad 17: N-(5-kyan-benzimidazolin-3-thion)-Ν'-(2,3-dichlorfenyl)močovina ¹H NMR (DMSO-dJ δ 11,54 (s, 1H), 10,42 (s,lH), 9,52 (s, 1H),

8,62 (s, 1H), 8,15 (m, 1H), 7,54 (d, 1H, J = 13,25 Hz), 7,40 - 7,30 (t, m, 3H).

Příklad 18: N-(5-kyan-N-kyan-2-guanidin)-Ν'-(2-bromfenyl)močovina ^XH NMR (DMSO-d_g) δ 11,84 (s, 1H) , 11,02 (S,1H), 9,66 (s, 1H),

8,42 (s, 1H), 8,04 (d, 1H, J = 13,25 Hz), 7,66 (d, 1H, J =

13,25 Hz), 7,50 (m, 1H), 7,40 (t, 1H), 7,06 (t, 1H) .

Příklad 19: N-(4-kyan-2-oxo-3-methylbenzimidazol-7-yl)-N'-(2-bromfenyl)močovina (alternativní název N-4-(7-kyan-l-methylbenzimidazolin-2-on)-Ν' -(2-bromfenyl)močovina) ’Ή NMR (DMSO-dJ δ 10,89 (s, 1H) , 9,39 (s,lH), 8,30 (s, 1H) , 8,10 (d, 1H, J = 13,25 Hz), 7,76 (d, 1H, J = 13,25 Hz), 7,45 7,32 (m, 2H), 7,26 (d, 1H, J = 13,25 Hz), 7,03 (t, 1H), 3,57 (S, 3H).

Způsoby léčby

Sloučeniny vzorce (I) a (II), nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, mohu být použity pro výrobu léku pro profylaktickou nebo terapeutickou léčbu jakéhokoliv onemocnění u lidí nebo u jiných savců, které je vyvoláno nebo způsobeno nadměrnou nebo neregulovanou produkcí eytokinu IL-8 buňkami

Λ 4 · · ·

4 4 4 ♦ 4 4 · ♦ · ♦ ·

444 444

4

4 44 savce, jako jsou například, ale bez omezení, monocyty a/nebo makrofágy, nebo jiného chemokinů, který se váže na a nebo b receptor pro IL-8, které jsou také označovány jako receptor typu I a II.

V předkládaném vynálezu zahrnují termíny sloučeniny vzorce (I) nebo sloučenina (I) také sloučeniny vzorce (II) nebo sloučeninu (II), pokud není uvedeno jinak.

V souladu s tím předkládaný vynález poskytuje způsob pro léčbu chemokiny zprostředkovaných onemocnění, kde chemokinem je chemokin, který se váže na a nebo b receptor pro IL-8 a kde způsob obsahuje podání účinného množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli. Konkrétně je chemokinem IL-8, GROa, GROS, GROt, NAP-2 a ENA-78.

Sloučeniny vzorce (I) jsou podány v množství dostatečném pro inhibici funkce cytokinů, zejména IL-8, GROa, GROS, GROt,

NAP-2 a ENA-78, takže jsou tyto cytokiny biologicky regulovány ve smyslu jejich snížení na hladiny normální pro fyziologické funkce, nebo v některých případech na hladiny nižší než normální, takže je zmírněno onemocnění. Abnormální hladiny IL-8, GROa, GROS, GROt, NAP-2 a ENA-78 v souvislosti s předkládaným vynálezem jsou například: (i) hladiny volného IL-8 vyšší než nebo rovné 1 pg na ml; (ii) jakékoliv buněčné IL-8, GROa, GROS, GROt, NAP-2 a ENA-78 ve vyšší vyšší než normální fyziologické koncentraci; (iii) přítomnost IL-8, GROa, GROS, GROt, NAP-2 a ENA-78 ve vyšších než základních hladinách v buňkách nebo ve tkáních, ve kterých jsou IL-8, GROa, GROS, GROt, NAP-2 a ENA-78, v příslušném pořadí, produkovány.

• · · · « * 9 · 9 · « 9 » · · · • 9« 999 999

9 9 ·

9* * * ·♦

Existuje mnoho onemocnění, u kterých se předpokládá účast nadměrné nebo neregulované produkce IL-8 při exacerbaci a/nebo vyvolání onemocnění. Mezi onemocnění zprostředkovaná chemokiny patří psoriasa, atopická dermatitida, artritida, astma, chronická obstrukční choroba plicní, syndrom dechové tísně dospělých, zánětlivá střevní onemocnění, Crohnova nemoc, ulcerosní kolitida, mrtvice, septický šok, endotoxinový šok, gram-negativní sepse, syndrom toxického šoku, srdeční a ledvinné reperfusní poškození, glomerulonefritida, trombosa, reakce štěpu proti hostiteli, Alzheimerova nemoc, rejekce alotransplantátu, malarie, restenosa, angiogenese nebo nežádoucí uvolnění hematopoetických kmenových buněk.

Tyto onemocnění jsou primárně charakterizovány masivní infiltrací neutrofily, infiltrací T-buňkami nebo neovaskularizací, a jsou spojeny se zvýšenou produkcí IL-8, GROa, GROS, GROt a NAP-2, která je odpovědná za chemotaxi neutrofilů do místa zánětu nebo za přímý růst endotelových buněk. Oproti jiným zánětlivým cytokinům (IL-1, TNF a IL-6) mají IL-8, GROa, GROS, GROt a NAP-2 tu jedinečnou vlastnost, že navozují chemotaxi neutrofilů, uvolnění enzymů včetně, ale nejenom, uvolnění elastasy, stejně jako produkci a aktivaci peroxidu, α-chemokiny, ale zejména GROa, GROS, GROt nebo NAP-2, působící prostřednictvím I nebo II typu receptorů pro IL-8, mohou podporovat neovaskularizací nádorů podporou přímého růstu endotelových buněk. Proto může inhibice IL-8 indukované chemotaxe nebo aktivace vést k přímé redukci infiltrace neutrofily.

Nové důkazy také ukazují na roli chemokinů v léčně infekce HIV, Littleman et al., Nátuře 381, str. 661 (1996) a Koup et • * · • 4 4 »· 44

4 4 · · · 4 4 • 4 4 4 4 · ·

4 4« 444 444

4 4 4 4 4 4 «4·4· 444 44 44 44 al., Nátuře 381, str. 667 (1996).

Předkládaný vynález také poskytuje prostředek pro léčbu, jak akutní, tak preventivní, jedinců citlivých rizikových z hlediska poškození CNS, za použití sloučenin vzorce (I), které jsou antagonisty receptoru pro chemokiny.

Poškození CNS, jak je zde definováno, zahrnuje jak otevřené, tak penetrující trauma hlavy, například způsobené chirurgickým zákrokem, nebo uzavřené trauma hlavy, jako je poranění v oblasti hlavy. Do této definice je také zahrnut ischemický iktus, zejména v oblasti mozku.

Ischemický iktus může být definován jako ložiskové neurologické onemocnění vzniklé v důsledku nedostatečného krevního zásobení určité oblasti mozku, obvykle v důsledku embolie, trombosy nebo lokálního ateromatosního uzávěru cévy. Role zánětlivých cytokinů v tomto ději byla již stanovena a předkládaný vynález poskytuje prostředek pro potenciální terapii těchto poškození. V současnosti je pro taková akutní poškození dostupná pouze omezená terapie.

TNFa je cytokin s prozánětlivým účinkem, včetně exprese endotelovych leukocytárních adhesních molekul. Leukocyty infiltrují ischemické mozkové léze a proto budou sloučeniny, které inhibují nebo snižují hladiny TNFa, užitečné v léčbě ischemického poškození mozku. Viz Liu et al., Stoke, svazek 25, č. 7, str. 1481 - 88 (1994), jehož objevy jsou zde uvedeny jako odkaz.

Modely uzavřeného poranění hlavy a léčby směsí 5-LO/CO • » činidel jsou diskutovány v Shohami et al., J. of Vaisc and Clinical Physiology and Pharmacology, svazek 3, č. 2, str. 99 107 (1992), jehož objevy jsou zde uvedeny jako odkaz. Bylo zjištěno, že léčba s redukovanou tvorbou otoku zlepšuje konečný stav léčených zvířet.

Sloučeniny vzorce (I) jsou podány v množství dostatečném pro inhibici vazby IL-8 na a a b receptory pro IL-8, jak je prokázáno redukcí chemotaxe a aktivace neutrofilů. Objev, že sloučeniny vzorce (I) jsou inhibitory IL-8 vazby je založen na účincích sloučenin vzorce (I) v in vitro testech receptorové vazby, které jsou zde popsány. Bylo prokázáno, že sloučeniny vzorce (I) jsou inhibitory typu II receptorů pro IL-8.

Jak je zde použit, označuje termín onemocnění nebo chorobný stav zprostředkovaný IL-8 jakékoliv a všechny chorobné stavy, při kterých existuje úloha IL-8, GROa, GROS, GROt, NAP-2 a ENA-78, buď jako produkce IL-8, GROa, GROS, GROt, NAP-2 a ENA-78 samotných, nebo kdy produkce IL-8, GROa, GROS, GROt, NAP-2 a ENA-78 způsobuje uvolnění jiného monokinu, jako je například, ale bez omezení, IL-1, IL-6 nebo TNF. Onemocnění, u kterého je, například, hlavní složkou IL-1, jehož produkce nebo účinek je exacerbován nebovyvolán v odpovědi na IL-8, bude proto považováno za onemocnění zprostředkované IL-8.

Jak je zde použit, označuje termín onemocnění nebo chorobný stav zprostředkovaný chemokinem jakékoliv a všechny chorobné stavy, při kterých existuje úloha chemokinu, který se váže na a nebo b receptory pro IL-8, jako je například IL-8, GROa,

GROS, GROt, NAP-2 a ENA-78. Sem budou patřit onemocnění, při kterých existuje úloha IL-8, buď IL-8 samotného, nebo kde • 9 9 9 · · • « 9 9 9 9

99 9 · » ©999

9 ¢9 99 9 9 >99999 • 9 9 9 9 · 9 ·

999 99 9 9 9 · 9 9» 9 9 produkce IL-8 způsobuje uvolnění jiného monokinu, jako je například, ale bez omezení, IL-1, IL-6 nebo TNF. Onemocnění, u kterého je, například, hlavní složkou IL-1, jehož produkce nebo účinek je exacerbován nebo vyvolán v odpovědi na IL-8, bude proto považováno za onemocnění zprostředkované IL-8.

Jak je zde použit, označuje termín cytokin jakýkoliv secernovaný polypeptid, který ovlivňuje funkci buněk a který je molekulou, která moduluje interakce mezi buňkami imunitní, zánětlivé a hematopoetické odpovědi. Cytokiny zahrnují, ale nejsou omezeny na, monokiny a lymfokiny, bez ohledu na buňky, kterými jsou produkovány. Například, monokin je obecně produkován mononukleárními buňkami, jako jsou makrofágy a/nebo monocyty. Nicméně, mnoho jiných buněk může také produkovat monokiny, jako například přirození zabiječi, fibroblasty, basofily, neutrofily, endotelové; buňky, astrocyty mozku, stromální buňky kostní dřeně, keratinocyty epidermis a B-lymfocyty. Lymfokiny jsou obecně produkovány lymfocyty. Příklady cytokinů zahrnují, ale nejsou omezeny na, interleukin-1 (IL-1), interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8), faktor nekrosy nádorů a (TNF-a) a faktor nekrosy nádorů β (TNF-β).

Jak je zde použit, označuje termín chemokin jakýkoliv secernovaný polypeptid, který ovlivňuje funkci buněk a který je molekulou, která moduluje interakce mezi buňkami imunitní, zánětlivé a hematopoetické odpovědi, podobně jako termín cytokin uvedený výše. Chemokin je secernován primárně přes buněčné membrány a způsobuje chemotaxi a aktivaci specifických buněk krve a leukocytů, neutrofilů, monocytů, makrofágů, T-buněk, B-buněk, endotelových buněk a buněk hladkého svalu.

I', i

Příkady chemokinů zahrnují, ale nejsou omezeny na, IL-8, GROa, GROS, GROt, NAP-2, ENA-78, IP-10, MlP-la, ΜΙΡ-b, PF4 a MCP1, 2 a 3.

Pro použití sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli v terapii bude sloučenina obyčejně formulována do farmaceutického přípravku za použití standartních farmaceutických postupů. Předkládaný vynález se proto také týká farmaceutických prostředků obsahujících účinné, netoxické množství sloučenin vzorce (I) a farmaceuticky přijatelného nosiče nebo ředidla.

Sloučeniny vzorce (I), jejich farmaceuticky přijatelné soli a farmaceutické prostředky, které je obsahují, mohou být vhodně podány jakýmkoliv způsobem, který je běžně používán pro podání léku, například orálně, lokálně, parenterálně nebo inhalačně. Sloučeniny vzorce (I) mohou být podány v běžných dávkových formách připravených smísením sloučenin vzorce (I) se standartními farmaceutickými nosiči za použití běžných postupů. Sloučeniny vzorce (I) mohou být také podány v kombinaci se známými dalšími terapeuticky aktivními sloučeninami. Mezi tyto postupy patří míšení, granulování a stlačení nebo rozpuštění přísad vhodným způsobem pro získání požadovaného přípravku. Je jasné, že forma a charakter farmaceuticky přijatelného nosiče nebo ředidla je určena množstvím aktivní složky, která má být obsažena, způsobem podání a dalšími dobře známými proměnnými. Nosič musí být přijatelný ve smyslu kompatibility s dalšími složkami přípravku a nesmí být škodlivý pro příjemce.

Použité farmaceutické nosiče mohou být například kapalné nebo solidní. Příklady solidních nosičů jsou laktosa, terra • * • · · ··♦ ··· alba, sacharosa, talek, želatina, agar, pektin, arabská klovatina, stearan hořečnatý, kyselina stearová a podobně. Příklady kapalných nosičů jsou sirup, podzemnicový olej, olivový olej, voda a podobně. Podobně mohou nosiče nebo ředidla obsahovat materiály zpomalující uvolňování, které jsou v oboru dobře známé, jako například glyceryl monostearat nebo glyceryldistearat samostatné nebo v kombinaci s voskem.

Může být použito velké množství farmaceutických forem. Tak, pokud je použit solidní nosič, může být přípravek tabletován, může být umístěn v kapsli z tuhé želatiny ve formě prášku nebo pelet nebo ve formě pastilek nebo zdravotních bonbonů. Množství solidního nosiče se bude velmi lišit, ale výhodně bude od přibližně 25 mg do přibližně 1 g. Pokud je použit kapalný nosič, může být přípravek ve formě sirupu, emulse, kapsle z měkké želatiny, sterilní injikovatelné kapaliny, například v ampuly, nebo nevodné kapalné suspense.

Sloučeniny vzorce (I) mohou být podány lokálně, to znamená nesystémově. Tento způsob zahrnuje podání sloučenin vzorce (I) externě na epidermis nebo do bukální dutiny a podání takových sloučenin do ucha, oka a nosu, takže sloučenina nevstupuje významným způsobem do krevního řečiště. Naopak, systémové podání označuje orální, intravenosní, intraperitoneální a intramuskulární podání.

Přípravky vhodné pro lokální podání zahrnují kapalné nebo semikapalné přípravky vhodné pro průnik přes kůži do místa zánětu, jako jsou například tekuté masti, pleúová mléka, krémy, masti nebo pasty a kapky vhodné pro podání do ucha, oka nebo nosu. Aktivní složka může tvořit, pro lokální podání, od • 9

* ·

9 99

9 9

999 999

0,001% do 10% hmot./hmot., například od 1% do 2% hmotnosti přípravku. Může nicméně tvořit až 10% hmot./hmot., ale výhodně bude tvořit méně než 5% hmot./hmot., lépe od 0,1% do 1% hmot./hmot. přípravku.

Lotio podle předkládaného vynálezu zahrnují ty, které jsou vhodné pro podání na kůži nebo do oka. Oční lotio může obsahovat sterilní vodný roztok volitelně obsahující baktericidní činidlo a může být připraveno způsobem podobným způsobu pro přípravu kapek. Lotia a tekuté nasti pro aplikaci na kůži také mohou obsahovat činidla pro vysoušení a ochlazování kůže, jako je alkohol nebo aceton, a/nebo zvlhčovači činidla jako je glycerol nebo oleje jako je ricinový olej nebo podzemnicový olej.

Krémy, masti a pasty podle předkládaného vynálezu jsou semisolidní přípravky aktivní složky pro zevní použití. Mohou být vyrobeny smísením aktivní složky v jemně dělené nebo práškové formě, samostatně nebo v roztoku nebo suspensi ve vodné nebo nevodné kapalině, za použití vhodného přístroje, s mastnými nebo nemastnými bázemi. Baze může obsahovat uhlovodíky jako je tuhý, měkký nebo kapalný parafin, glycerol, včelí vosk, kovové mýdlo; rostlinný sliz; olej přirozeného původu jako je mandlový, kukuřičný, podzemnicový, ricinový nebo olivový olej; vlněný tuk a jeho deriváty nebo mastné kyseliny jako je kyselina stearová nebo olejová spolu s alkoholy jako je propylenglykol nebo makrogel. V přípravku může být obsaženo jakékoliv povrchově aktivní činidlo jako jsou aniontové, kationtové nebo neiontové surfaktanty jako je ester sorbitanu nebo jeho polyoxyethylenový derivát. Suspendační činidla jako jsou přirozené gumy, deriváty celulosy nebo anorganické

materiály jako jsou silikátové křemičitany a další přísady, jako je lanolin, mohou být také obsaženy.

Kapky podle předkládaného vynálezu mohou obsahovat sterilní vodné nebo olejové roztoky nebo suspense a mohou být připraveny rozpuštěním aktivní složky ve vhodném vodném roztoku baktericidního a/nebo fungicidního činidla a/nebo jakéhokoliv jiného vhodného konzervačního činidla, a výhodně obsahují povrchově aktivní činidlo. Vzniklý roztok může být potom přečištěn filtrací, přenesen do vhodného zásobníku, který je potom uzavřen a sterilizován autoklavováním nebo při 98 - 100 °C po dobu půl hodiny. Alternativně může být roztok sterilizován filtrací a přenesen do zásobníku za aseptických podmínek. Příklady baktericidních a fungicidních činidel vhodných pro přípravu kapek jsou dusičnan nebo acetat fenylrtučnátý (0,002%), benzalkoniumchlorid (0,01%) a chlorhexidinacetat (0,01%) . Vhodnými rozpouštědly pro přípravu olejového roztoku jsou glycerol, ředěný alkohol a propylenglykol.

Sloučeniny vzorce (I) mohou být podány parenterálně, to znamená intravenosně, intramuskulárně, subkutánně, intranasálně, intrarektálně, intravaginálně nebo intraperitoneálně. Obecně j sou výhodné subkutánní a intramuskulární formy podání. Vhodná dávková forma pro takové způsoby podání může být připravena běžnými technikami. Sloučeniny vzorce (I) mohou být také podány inhalačně, to znamená intranasálně nebo orálním inhalačním podáním. Vhodná dávková forma pro takové způsoby podání, jako je aerosolový přípravek nebo inhalační přípravek s odměřítelnou dávkou, může být připravena běžnými technikami.

Φ· > « ··

• Φ φφ φφ * φ · · φ ·

Φ Φ · · .9 ·

Φ Φ ·*·♦·· Φ Φ · · • · Φ 4 · ·

Pro všechny způsoby použití, které jsou zde popsány pro sloučeniny vzorce (I), bude denní dávkový režim výhodně od přibližně 0,01 do 80 mg/kg celkové tělesné hmotnosti. Denní dávkový režim při parenterálním podání bude výhodně od přibližně 0,001 do přibližně 80 mg/kg celkové tělesné hmotnosti. Denní dávkový režim při lokálním podání bude výhodně od přibližně 0,1 do přibližně 150 mg, s podáním ve dvou nebo třech denních dávkách. Denní dávkový režim při inhalačním podání bude výhodně od přibližně 0,1 mg/kg do přibližně 1 mg/kg a den. Odborníkům v oboru bude jasné, že optimální množství a rozložení jednotlivých dávek sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli bude určeno podle charakteru a rozsahu léčeného stavu, formy, způsobu a místa podání a podle jednotlivého léčeného pacienta a že taková optimální dávka může být určena běžnými způsoby. Odborníkům v oboru bude také jasné, že optimální terapeutický režim, t.j. počet dávek sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné soli podaných za den po definovaný počet dní, může být určen odborníkem za použití běžných testů pro určení terapeutického režimu.

Vynález bude nyní popsán v následujících biologických příkladech, které jsou pouze ilustrativní a nejsou vytvořeny jako omezení rozsahu předkládaného vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Inhibiční účinky sloučenin podle předkládaného vynálezu na IL-8 a Gro-a chemokiny byly určeny v následujícím in vitro testu:

Test vazby na receptor:

(^12ΞΙ) IL-8 (lidský rekombinantní) byl získán od Amersham Corp., Arlington Heights, IL, se specifickou aktivitou 2000 Ci/mmol. Gro-a byl získán od NEN- New England Nuclear. Všechny další chemikálie byly analytické čistoty. Vysoké koncentrace rekombinantních lidských receptorů typu a a b pro IL-8 byly jednotlivě exprivovány na ovariálních buňkách čínského křečka, jak bylo popsáno dříve (Holmes et al., Science, 1991, 253,

1278). Membrány ovariálních buněk čínského křečka byly homogenizovány podle dříve popsaného protokolu (Haour et al.,

J. Biol. Chem. 249: 2195 - 2205 (1974)), s tou výjimkou, že homogenizačni pufr byl změněn na 10 mM Tris-HCl, 1 mM MgSO₄,

0,5 mM EDTA (ethylen-diamintetra kyselina octová), 1 mM MPMSF (a-toluensulfonylchlorid), 0,5 mg/1 leupeptin, pH 7,5. Koncentrace membránového proteinu byla určena za použití Pierce Co. mikro-test kitu za použití hovězího sérového albuminu jako standardu. Všechny testy byly provedeny na 96-jamkové mikroplotně. Každá reakční směs obsahovala ^12SI IL-8 (0,25 nM) nebo ^X2SI Gro-a a 0,5 gg/ml IL-8Ra nebo 1,0 gg/ml IL-8Rb membrán ve 20 mM bis-Trispropanu a 0,4 mM Tris-HCl pufrech, pH 8,0, obsahujících 1,2 mM MgSO4, 0,1 mM EDTA, 25 mM NaCl a 0,03% CHAPS. Kromě toho byl přidán požadovaný lék nebo sloučenina, která byla předem rozpuštěna v DMSO tak, že její konečná koncentrace byla mezi 0,01 nM a 100 μΜ. Test byl zahájen přidáním ^x25I-IL-8. Po 1 hodině při pokojové teplotě byla plotna sklízena za použití Tomtec sklízeče 96-jamkových ploten na filtr ze skleněných vláken blokovaný 1% polyethylenimin/0,5% BSA, který byl promyt 3-krát 25 mM NaCl, 10 mM TrisHCl, 1 mM MgSO4, 0,5 mM EDTA, 0,03% CHAPS, pH 7,4. Filtr byl potom sušen a odečítán na Betaplate kapalinovém scintilačním přístroji. Rekombinantní IL-8Ra, neboli receptor typu I, je zde také označován jako nepermisivní receptor a rekombinantní IL-8Rb, • 4

4

444 4 444 4

44 444

4 4 4 4 4 4

4 4 4 4 4

444 44 444 44

4 4

444 444 neboli receptor typu II, je zde také označován jako permisivní receptor.

Příklady sloučenin vzorce (I) a (II), které jsou zde uvedené v příkladech 1 až 11 a 13 až 19, vykazovaly pozitivní inhibiční aktivitu při koncentraci < 30 v tomto testu. Sloučenina příkladu 12 nebyla v tomto testu při koncentraci < 30 gg aktivní, pravděpodobně z důvodů nerozpustnosti.

Test chemotaxe

In vitro inhibiční vlastnosti těchto sloučenin jsou určeny v testu chemotaxe neutrofilů, jak je popsán v Current Protocols in Immunology, svazek I, Suppl. 1, Unit 6.12.3, jehož objevy jsou obsaženy v této přihlášce ve své úplnosti. Neutrofily byly izolovány z lidské krve způsobem popsaným v Current Protocols in Immunology, svazek I, Suppl. 1, Unit 7.23.1, jehož objevy jsou obsaženy v této přihlášce ve své úplnosti. Chemotaktické faktory IL-8, GROa, GROS, GROt a NAP-2 jsou umístěny dně komůrky 48-multijakmové komůrky (Neuro Probe, Cabin John, MD) v koncentraci mezi 0,1 a 100 nM. Dvě komůrky jsou separovány polykarbonatovým filtrem 5 μιη. Při testování sloučenin podle předkládaného vynálezu jsou sloučeniny smíseny s buňkami (0,001 - 1000 nM) těsně před přidáním buněk do horní komůrky. Inkubace probíhá přibližně 45 až 90 minut při přibližně 37 °C ve zvlhčeném inkubátoru s 5% CO . Na konci inkubace je polykarbonatová membrána odstraněna a její vrchní strana je promyta a membrána je potom barvena za použití Diff Quick protokolu barvení (Baxter Products, McGaw Park, IL, USA).

Buňky, které se díky chemotaxi pohybovaly směrem k chemokinů, jsou vizuálně počítány mikroskopicky. Obyčejně jsou pro každý • · · · o · ··· • · · · • ·· ·· ·· vzorek počítány čtyři pole, tento počet je zprůměrován za zisku průměrného počtu buněk, které migrovaly. Každý vzorek je testován třikrát a každá sloučenina je opakována alespoň čtyřikrát. K některým buňkám (pozitivní kontrolní buňky) není přidána žádná sloučenina a tyto buňky představují maximální chemotaktickou odpověď buněk. V případech, kdy je požadována negativní kontrola (bez stimulace), není na dno komůrky přidán žádný chemokin. Rozdíl mezi pozitivní kontrolou a negativní kontrolou představuje chemotaktickou aktivitu buněk.

Test uvolnění elastasy

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou testovány na schopnost zabránit uvolnění elastasy z lidských neutrofilů. Neutrofily jsou izolovány z lidské krve způsobem popsaným v Current Protocols in Immunology, svazek I, Suppl. 1, Unit

7.23.1. PMN 0,88 x 10⁶ buněk se suspenduje v Ringerově roztoku (NaCl 118, KC1 4,56, NaHCO₃ 25, KH₂PO₄ 1,03, glukosa 11,1,

HEPES 5 mM, pH 7,4) a umístí se v každé jamce 96-jamkové plotny v objemu 50 μΐ. Do této plotny je přidána testovaná sloučenina (0,001 - 1000 nM) v objemu 50 μΐ, Cytochalasin B v objemu 50 μΐ (20 ^g/ml) a Ringrův pufr v objemu 50 μΐ. Tyto buňky se zahřejí (37 °C, 5% C0₂, 95% RH) na dobu 5 minut před přidáním IL-8, GROa, GROE, GROt nebo NAP-2 v konečné koncentraci 0,01 - 1000 nM. Reakce probíhá po dobu 45 minut a potom se 96-jamková plotna centrifuguje (800 x g), 5 minut) a odebere se 100 μΐ supernatantu. Tento supernatant se přidá do druhé 96 jamkové plotny a potom se přidá arteficiální substrát pro elastasu (MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC, Nova Biochem, La Jolla, CA) v konečné koncentraci 6 μg/ml, rozpuštěný ve fosfátem pufrovaném salinickém roztoku. Plotna se okamžitě umístí do fluorescenční • «· · ·· ·· ·· ···· ···· ····

99 999 9999 · · 9 9··· 999 999 • 99 999 9 9

999 99 9·9 99 ·· ·· čtečky 96-jamkových ploten (Cytofluor 2350, Millipore, Bedford, MA) a data se získávají v 3 minutových intervalech způsobem, který popsal Nakajima et al., J. Biol. Ghem. 254: 4027 (1979). Množství elastasy uvolněné z PMN je počítáno podle rychlosti degradace MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC.

TNFa v testu traumatického poškození mozku

Tento test umožňuje vyšetření exprese mRNA faktoru nekrosy nádorů a ve specifických oblastech mozku po experimentálně vyvoleném traumatickém poškození mozku způsobeném laterálním nárazem kapaliny (TBI) u krys. Dospělé Sprague-Dawley krysy (n = 42) byly uvedeny do anestesie pentobarbitalem sodným (60

i.p.) a byly podrobeny traumatickému poškození mozku způsobenému laterálním nárazem kapaliny střední intenzity (2,4 atm.), který byl zaměřen na levostrannou temporoparietální kůru mozkovou (n = 18), nebo falešné léčbě (anestesii a chirurgickému zákroku bez poranění, n = 18). Zvířata byla utracena dekapitací v l, 6 a 24 hodinu po poranění, byly odebrány mozky a byly připraveny vzorky tkáně levé (poraněné) parietální kůry mozkové (LC), odpovídající oblasti v pravostranné kontralaterální kůře (RC), kůře sousedící s poraněnou parietální kůrou (LA), odpovídající oblasti v pravostranné kontralaterální kůře (RA), levého hippocampu (RH) a pravého hippocampu (RH). Izolovala se celková RNA a provedla se Northern Blot hybridizace a kvantifikace ve vztahu k TNF-α pozitivní kontrolní RNA (makrofág = 100%). Znatelné zvýšení exprese TNFa mRNA je pozorováno v LH (104 ± 17% pozitivní kontroly, p < 0,05 ve srovnání s kontrolou), LC (105 ± 21%, p < 0,05) a LA (69 ± 8%, p < 0,01) v traumatizované hemisféře 1 hodinu po poranění. Zvýšení exprese TNFa mRNA je «· · · ··· · · ·» · • »« «·· «»·· ···» ···· ··· ··· «·· ··· · · ··· ·· ··· »· ·· ·· také pozorováno v LH (46 ± 8%, p < 0,05), LC (30 ± 3%, p < 0, 01) a LA (32 + 3%, p < 0,01) v 6 hodinu, a normalizuje se 24 hodin po poranění. V kontralaterální hemisféře je exprese TNFa mRNA zvýšena v RH (46 + 2%, p < 0,01), RC (4 ± 3%) a RA (22 + 8%) v 1 hodinu, a v RH (28 ± 11%), RC (7 ±5%) a RA (26 ± 6%, p < 0,05) v 6 hodinu, ale ne 24 hodin po poranění.

U kontrolních (chirurgický zákrok bez poranění) nebo naivních zvířat nebyly pozorovány významné změny v expresi TNFa mRNA v jakékoliv ze 6 oblastí mozku v obou hemisférách v jakoukoliv dobu. Tyto výsledky ukazují, že po parasagitálním poranění mozku rázem kapaliny je dočasně změněna exprese TNFa mRNA ve specifických oblastech mozku, včetně oblastí v netraumatizované hemisféře. Protože TNFa může také indukovat nervový růstový faktor (NGF) a stimulovat uvolnění jiných cytokinů z aktivovaných astrocytů, má tato post-traumatická alterace genové exprese TNFa značný význam jak u akutní, tak u regenerativní odpovědi na traumatické poranění CNS.

Model poranění CNS pro IL-β mRNA

Tento test charakterizuje regionální expresi mRNA interleukinu - 1 β (IL-Ιβ) ve specifických oblastech mozku po experimentálně vyvoleném traumatickém poškození mozku způsobeném laterálním nárazem kapaliny (TBI) u krys. Dospělé Sprague-Dawley krysy (n = 42) byly uvedeny do anestesie pentobarbitalem sodným (60 mg/kg, i.p.) a byly podrobeny traumatickému poškození mozku způsobenému laterálním nárazem kapaliny střední intenzity (2,4 atm.), který byl zaměřen na levostrannou temporoparietální kůru mozkovou (n = 18), nebo falešné léčbě (anestesii a chirurgickému zákroku bez poranění, n = 18). Zvířata byla utracena v 1, 6 a 24 hodinu po poranění, • 9

9 9 «9

999 9 9 99 9 » 9 9 9 9 9 9

9 99 999 999

9 9 9 9

999 · · «9 99 byly odebrány mozky a byly připraveny vzorky tkáně levé (poraněné) parietální kůry mozkové (LC), odpovídající oblasti v pravostranné kontralaterální kůře (RC), kůře sousedící s poraněnou parietální kůrou (LA) , odpovídající oblasti v pravostranné kontralaterální kůře (RA), levého hippocampu (RH) a pravého hippocampu (RH). Izolovala se celková RNA a provedla se Northern Blot hybridizace a kvantita IL-ΐβ mRNA v mozkové tkáni je uvedena jako procento ve vztahu k radioaktivitě IL-Ιβ pozitivní makrofágové RNA, která je zpracována ve stejném gelu. 1 hodinu po mozkovém poranění je pozorováno jasné a signifikantní zvýšení exprese IL-Ιβ mRNA v LC (20 ± 0,7% pozitivní kontroly, n = 6, p < 0,05 ve srovnání s kontrolními zvířaty), LH (24,5 ± 0,9%, p < 0,05) a LA (21,5 + 3,1%, p < 0,05) v traumatizované hemisféře, a tato exprese zůstávala zvýšená do 6 hodiny po poranění v LC (4,0 ± 0,4%, n = 6, p < 0,05) a LH (5,0 ± 1,3%, p < 0, 05). U kontrolních nebo naivních zvířat nebyly pozorovány významné změny v expresi IL-Ιβ mRNA v jakékoliv z odpovídajících oblastí mozku. Tyto výsledky ukazují, že po TBI je ve specifických oblastech mozku regionálně stimulována exprese IL-IS mRNA. Tyto regionální změny cytokinů, jako je IL-Ιβ, mají význam po traumatu.

Všechny publikace, včetně patentů a patentových přihlášek, citované v předkládané přihlášce, jsou zde uvedeny jako odkaz, jak by bylo u každé citace uvedeno, že je zde uvedena jako odkaz.

Výše uvedený popis plně popisuje vynález včetně jeho výhodných provedení. Modifikace a vylepšení provedení, která jsou zde podrobně uvedena, spadají do rozsahu následujících patentových nároků. Bez dalšího rozpracování může odborník v ♦ · · t · · · · • 44 4 4 4 4 · 4 · · · »4 4 4 · β · 4 ·

44 44 44 444 444

444 444 4 4

444 44 444 44 44 44 oboru, podle uvedeného popisu, využít předkládaný vynález v jeho plném rozsahu. Proto jsou příklady zde uvedené pouze ilustrativní a žádným způsobem neomezují rozsah předkládaného vynálezu. Provedení vynálezu, která obsahují výjimečnou vlastnost nebo jedinečnost, jsou uvedena v následujících patentových nárocích.

JUDr. Pavel ZELENY adv^sát ~ > ⁵'- .' - ij

Málkova 2. Praha Á ·· tttt • · · · · • · · · · «4 ··· ···

JUDr. Pavel ZELENÝ advokát *·

Málkova 2, Praha 2

Patentové nároky

Claims

1. Sloučenina vzorce kde

R je -NH-C(X )-NH)-(CR R ) -Z;

2 X3X4 ΛΛ '

Z je W, HET, (Y)n , volitelně substituovaný C₁_₁₀alkyl, volitelně substituovaný C₂_₁₀alkenyl, nebo volitelně substituovaný C₂_₁₀alkinyl;

X je C(X₁)₂, C(O), C(S), S(O)₂, PO(OR₄) nebo C=NR₁₉;

X-^ je nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, ^Cl-10^alJ<yl/ NR₄R₅, C₁_₁₀alkyl-NR₄R₅, C(O)NR₄R₅, volitelně substituovaný C-i^Qalkyl, halogenem substituovaný C₁_₁₀alkoxy; hydroxy, aryl, arylC₁_₄alkyl, aryloxy, arylC₁_₄alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heterocyklická skupina; heterocyklický C₁_₄alkyl; heteroarylC₁_₄alkyloxy;

X₂ je =0 nebo =S;

R^ je nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, nitro, kyano, halogenem substituovaný C^-LQ^kyl;

^c2-10^alkenyl; Ci.ioalkoxy, halogenem substituovaný ^cl_10^alkoxy; azid; (CR₈R₈)_gS(O)_tR₄; hydroxy; hydroxy C₁_₄alkyl, aryl, arylC₁_₄alkyl, aryloxy, arylC₁_₄alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heterocyklická skupina; heterocyklický C₁_₄alkyl; heteroarylC₁_₄alkyloxy; arylC₂_₁₀alkenyl; heteroaryl C₂_₁₀alkenyl; heterocyklický • ·· · ·· ·· • · · · ··· · · • · · ··· · · · · • · 9 9 99 99 999999

9 9 9 9 9 9 9 9

999 9 9 999 9 9 99 99 ^2-10^a^^^en^^* (^RgRg* ^2-10^a^^^en^^ C (O)NR^R^ 7 (CRgRg ) gC (O) NR^R-^ θ 7 S(O)^Rg7 (CRgRg )qC (O )R]_]_ 7 C2_^Q&lksnyl C(O)Rj_2_' C2_jQalkenyl C (O) OR 2_ 7 C(O)R^j_7 (CRgRg)qC(O)R^27 (CR₈R₈)_qOC(O)R_i;L; (CRgRg )_qNR₄C(O)R₁₁; (CRgRg )_qC(NR₄ )NR₄R₅; (CRgRg)_qNR₄C(NR₅)R₁₁; (CRgRg)_qNHS(O)₂R₁₇; nebo (CRgRg)_qS(O)₂NR₄R₅; nebo mohou dvě Rj skupiny dohromady tvořit O-(CH₂)_SO- nebo 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh; a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklickou skupinu mohou být všechny volitelně substituované;

HET je volitelně substituovaný heteroaryl;

R₄ a R₅ jsou nezávisle vodík, volitelně substituovaný

C₁_₄alkyl, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný arylC₁_₄alkyl, volitelně substituovaný heteroaryl, volitelně substituovaný heteroaryl C₁_₄alkyl, heterocyklická skupina nebo heterocyklický C₁_₄alkyl, nebo R₄a R₅ společně s dusíkem, na který jsou navázány, tvoří 5 až 7 členný kruh, který volitelně obsahuje další heteroatom vybraný z kyslíku, dusíku nebo síry;

Y je nezávisle vybráno ze skupiny: vodík, halogen, nitro, kyano, halogenem substituovaný C₁__1Qalkyl; Cj-^alkyl; C₂_₁₀alkenyl; C₁__1Qalkoxy, halogenem substituovaný C₁_₁₀alkoxy; azid; (CRgR_g)_qS(O)_tR₄; hydroxy; hydroxy C₁_₄alkyl, aryl, arylC₁_₄alkyl, aryloxy, arylC₁_₄alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heteroarylC₁_₄alkyloxy; heterocyklická skupina; heterocyklický C₁_₄alkyl; arylC₂_₁₀alkenyl; heteroaryl C₂_₁₀alkenyl; heterocyklický • · • · · · · · 9 * · · »· ······· • ·* · » ♦ · 99 9 9 9 9 • · · · · 9 · ·· 99··· · » · 9

C2_joalkenyl; (CRgRg )gNR^Rg7 C2_^Q^lkGnyl C(0)NR^Rg7 (CRgRg)_qC(0)NR₄R₅; (CR₈R₈)_qC(O)NR₄R₁₀; S(O)₃R₈;

(CRgRg )_qC(0)Rj-2_/ ¹³ 2 -1 O^aIťcny 1 C(O)Rq_2_; 2 ^— 10^alkeny 1 C(O)OR-^; (CRgRg)qC(O)R₁₂; (CR_gRg)_qOC(O)R_11? (CRgRg)_qNR₄C(O)R₁₁;

(CRgRg)_qC(NR₄)NR₄R₅; (CRgRg)_qNR₄ C(NR₅)R₁₁; (CRgRg)_qNHS(O)₂R_a; (CRgRg)_qS(O)₂NR₄R₅; nebo mohou dvě Y skupiny dohromady tvořit O-(CH₂)_sO- nebo 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh; a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklickou skupinu mohou být všechny volitelně substituované;

*** Rg a R₇ jsou nezávisle vodík nebo C₁_₄alkyl, nebo R_g a R₇společně s dusíkem, na který jsou navázány, tvoří 5- až 7-členný kruh, který volitelně obsahuje další heteroatom vybraný z kyslíku, dusíku nebo síry;

Rg je nezávisle vybrán z vodíku nebo C₁_₄alkylu;

R₁₀ 3^e Ci_io^aiRyi C(O)₂R₈;

R_X1 je vodík, C₁_₄alkyl, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný arylC₁_₄alkyl, volitelně substituovaný heteroaryl, volitelně substituovaný heteroaryl C₁_₄alkyl, volitelně substituovaný heterocyklická skupina, nebo volitelně substituovaný heterocyklický C₁_₄alkyl;

R₁₂ je vodík, C^-^alkyl, volitelně substituovaný aryl nebo volitelně substituovaný arylalkyl;

R₁₃ a R₁₄ jsou nezávisle vodík nebo volitelně substituovaný C₁_₄alkyl, nebo může být jeden z R₁₃ a R₁₄ volitelně substituovaný aryl;

^r15 ^{a r}16 j^sou nezávisle vodík nebo volitelně substituovaný C^alkyl;

R₁₇ je C₁_₄alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, heteroaryl C₁_₄alkyl, heterocyklická skupina, nebo heterocyklický C₁_₄alkyl, kde aryl, heteroaryl a heterocyklické kruhy mohou všechny být volitelně substituované;

^r18 3^{e v}°ůíkz volitelně substituovaný ^„-^alkyl,

C₁_₁₀alkoxy, halogenem substituovaný C₁_₁₀alkoxy, hydroxy, • 99 9 9 9 9 9 · · • •9 9 999 9 9 99 9 •99 999 9999

9 9 99 9 9 99 999 999

999 999 9 9

999 99 999 99 99 99 arylC₁_₄alkyl, arylc₂_₄alkenyl, heteroaryl, heteroaryl-C₁_₄alkyl, heteroarylC₂_₄alkenyl, heterocyklická skupina nebo heterocyklický C₁_₄alkyl, a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklickou skupinu mohou být všechny volitelně substituované;

R_ig je kyan, nitro, S(O)₂NR₄R₅, S(O)₂R₁₇, alkyl, arylC₁_₄alkyl, arylC₂_₄alkenyl, heteroaryl, heteroaryl-C₁_₄alkyl, heteroarylC₂_₄alkenyl, heterocyklická skupina nebo heterocyklický C₁_₄alkyl, a kde skupiny obsahující alkyl, aryl, heteroaryl a heterocyklickou skupinu mohou být všechny volitelně substituované;

R_a je NRgR-y, alkyl, arylC₁_₄alkyl, arylC₂_₄alkenyl, heteroaryl, heteroaryl-C₁_₄alkyl, heteroaryl-C₂_₄alkenyl, heterocyklická skupina nebo heterocyklický C₁_₄alkyl, kde aryl, heteroaryl a heterocyklickou kruhu mohou všechny být volitelně substituované;

(Y)n kde hvězdička * označuje místo připojení kruhu; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

2. Sloučenina podle nároku 1, kde R-l je halogen, kyan, nitro, CF₃, C(O)NR₄R₅, alkenylC(O)NR₄R₅, C(O)R₄R₁₀, alkenylC(O)OR₁₂, heteroaryl, heteroarylalkyl, heteroarylalkenyl nebo S(O)NR₄R₅.

3. Sloučenina podle nároku 1, kde X je C(0) nebo C(S).

4. Sloučenina podle jakéhokoliv z nároků 1 až 3, kde Z je W.

5. Sloučenina podle nároku 4, kde Y je halogen, C₁_₄alkoxy, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný arylalkoxy, methylendioxy, NR₄R₅, thioC₁_₄alkyl, thioaryl, halogenem substituovaná alkoxy skupina, volitelně substituovaný C₁_₄alkyl nebo hydroxyalkyl.

6. Sloučenina podle nároku 1 vybraná ze skupiny zahrnující:

N-4-(benzimidazolin-2-on-N'-(2'-bromfenyl)močovina;

N-4-(1H,3H-2,1,3-benzothiazol-2,2-dioxid)-N'-(2-bromfenyl)močovina;

N-4-(7-kyan-l-N-methyl-benzimidazolin-2-thion) -N' -(2,3-dichlorfenyl)močovina;

N-4-(7-kyan-benzimidazolin-2-thion)-N'-(2-bromfenyl)močovina; N-4-(7-kyan-l-methyl-benzimidazolin-2-thion)-N’ — (2 —

-bromfenyl)močovina;

N-(4-kyan-2-oxo-3-methylbenzimidazol-7-yl)-N'-(2-bromfenyl)močovina;

N-4-(7-kyan-benzimidazolin-2-on)-N'-(2-bromfenyl)močovina;

N-4-(7-kyan-benzimidazolin-2-thion)-N'-(2,3-dichlorfenyl)močovina;

N-4-(7-kyan-benzimidazolin-2-imin)-N'-(2-bromfenyl) močovina;

a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

7. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství sloučeniny podle nároku 1 a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

8. Způsob léčby onemocnění zprostředkovaného chemokiny u savců, kde se uvedený chemokin váže na a nebo β receptor pro IL-8, vyznačující se tím, že obsahuje podání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 uvedenému savci.

9. Způsob podle nároku Svyznačující se tím, že savec je postižen onemocněním vybraným ze skupiny zahrnující psoriasu, atopickou dermatitidu, astma, chronickou obstrukční chorobu plicní, syndrom dechové tísně dospělých, artritidu, zánětlivá střevní onemocnění, Crohnovu nemoc, ulcerosní kolitidu, septický šok, endotoxinový šok, gram-negativní sepsi, syndrom toxického šoku, mrtvici, srdeční a ledvinné reperfusní poškození, glomerulonefritidu, trombosu, reakci štěpu proti hostiteli, Alzheimerovu nemoc nebo rejekci alotransplantátu.

10. Sloučenina vzorce:

(R,)m (Π) kde

R je -NH-C(X₂)-NH)-(CR₁₃R₁₄)_v-Z;

I (CR-isR-i^P

Z je W, HET, (Y>ⁿ , volitelně substituovaný C^-j^alkyl, volitelně substituovaný C₂_₁₀alkenyl, nebo volitelně substituovaný C₂_₁₀alkinyl;

X je N nebo CCX·^);

X-^ je nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, Ci_iQalkyl, NR₄R^, C^_2_Q^aI^yI~NR₄Rg, C(O)NR₄R^, C^_^Qalkyl C(O)NR₄R₅, volitelně substituovaný C-]__₁₀alkyl, C-j^.^galkoxy, halogenem substituovaný C₁__1Qalkoxy; hydroxy, aryl, arylC₁_₄alkyl, aryloxy, arylC₁_₄alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heterocyklická skupina; heterocyklický C₁_₄alkyl nebo heteroarylC₁_₄alkyloxy;

X₂ je =0 nebo =S;

R-L je nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, nitro, kyano, halogenem substituovaný C-^.^Qalkyl; C^.-j^Qalkyl; C₂_₁₀alkenyl; C₁_₁₀alkoxy, halogenem substituovaný C₁_₁₀alkoxy; azid; (CRgRg)_qs(0)_tR₄; hydroxy; hydroxy Ci_₄alkyl, aryl, arylC₁_₄alkyl, aryloxy, arylC₁_₄alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heterocyklická skupina; heterocyklický C₁_₄alkyl; heteroarylC₁_₄alkyloxy; arylC₂_₁₀alkenyl; heteroaryl C₂_₁₀alkenyl; heterocyklický C₂_₁₀alkenyl; (CRgRg)_qNR₄R₅; C₂_₁₀alkenyl C(O)NR₄R₅; (CRgRg)_qC(O)NR₄R₅, (CRgRg)_qC(O)NR₄R₁₀; S(O)₃R₈;

(CRgRg )_qC(θ)R]_; C₂_₁₀alkenyl C(O)R₃q_; C₂_Q_Qalkenyl C(0)0R^2_^ C(O)R_li; (CRgRg)_qc(O)R₁₂; (CRgRg)_qOC(O)R₁₁;

(CRgRg) NR₄C(O)R_i;l; (CRgRg )_qC(NR₄)NR₄R₅; (CRgRg)_qNR₄C(NR₅)R_1X; (CRgRg)_qNHS(O)₂R₁₇; nebo (CRgRg)_qS(O)₂NR₄R₅; nebo mohou dvě R_xskupiny dohromady tvořit O-(CH₂)_gO- nebo 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh; a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklickou skupinu mohou být všechny volitelně substituované;

n je celé číslo mající hodnotu 1 až 3; m je celé číslo mající hodnotu 1 až 3;

··· ··· p je celé číslo mající hodnotu 1 až 3; q je 0, nebo celé číslo mající hodnotu 1 až 10; s je celé číslo mající hodnotu 1 až 3; t je 0, nebo celé číslo mající hodnotu 1 nebo 2; v je 0, nebo celé číslo mající hodnotu 1 až 4;

HET je volitelně substituovaný heteroaryl;

R₄ a R₅ jsou nezávisle vodík, volitelně substituovaný

Ci_₄alkyl, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný arylC₁_₄alkyl, volitelně substituovaný heteroaryl, volitelně substituovaný heteroaryl C₁_₄alkyl, heterocyklická skupina nebo heterocyklický C₁_₄alkyl, nebo R₄ a R₅společně s dusíkem, na který jsou navázány, tvoří 5- až 7-členný kruh, který volitelně obsahuje další heteroatom vybraný z kyslíku, dusíku nebo síry;

Y je nezávisle vybrán ze skupiny: vodík, halogen, nitro, kyano, halogenem substituovaný C₁_₁₀alkyl; C-^.jQalkyl; C₂_₁₀alkenyl; C^-^Qalkoxy, halogenem substituovaný C-L-ioalkoxy; azid; (CR₈R₈)_qS(O)_tR₄; hydroxy; hydroxy Ci_₄alkyl, aryl, arylC₁_₄alkyl, aryloxy, arylC₁_₄alkyloxy; heteroaryl; heteroarylalkyl; heteroarylC₁_₄alkyloxy; heterocyklická skupina; heterocyklický C₁_₄alkyl; arylC₂_₁₀alkenyl; heteroaryl C₂_₁₀alkenyl; heterocyklický C₂_₁₀alkenyl; (CRgR₈ )_qNR₄R^; C ₂ _ 0^lkeny 1 C (O)NR₄R^;

(CRgRg)_qC(O)NR₄R₅; (CRgRg)_qC(O)NR₄R₁₀; S(O)₃R₈;

(CRgRg )_qC(O)R^-^; C₂_₁₀alkenyl C(0)R·]^; C₂_₁₀alkenyl CÍOjOR^^-i^;

(CRgRg)_qc(O)R₁₂; (CRgRg)_qOC(O)R_li; (CRgRg)_qC(NR₄)NR₄R₅;

(CRgRg )_qNR₄C(NR₅)R_1;L; (CRgRg)_qNR₄C(O)R₁₁, (CRgRg )_qNHS(O) ₂R_a ;

(CRgRg)_qS(O)₂NR₄R₅; nebo mohou dvě Y skupiny dohromady tvořit O-(CH₂)_SO- nebo 5- až 6-členný nasycený nebo nenasycený kruh; a kde skupiny obsahující aryl, heteroaryl a heterocyklickou skupinu mohou být všechny volitelně substituované;

R₆ a R₇ jsou nezávisle vodík nebo C₁_₄alkyl, nebo Rg a R₇společně s dusíkem, na který jsou navázány, tvoří 5- až 7-členný kruh, který volitelně obsahuje další heteroatom vybraný z kyslíku, dusíku nebo síry;

Rg je nezávisle vybrán z vodíku nebo C₁_₄alkylu;

^R10 3® C^-^galkyl C(O)₂Rg;

Rll j^e vodík, C₁_₄alkyl, volitelně substituovaný aryl, volitelně substituovaný arylC₁_₄alkyl, volitelně substituovaný heteroaryl, volitelně substituovaný heteroaryl C₁_₄alkyl, volitelně substituovaný heterocyklická skupina, nebo volitelně substituovaný heterocyklický C₁_₄alkyl;

R₁₂ je vodík, C₁_₁₀alkyl, volitelně substituovaný aryl nebo volitelně substituovaný arylalkyl;

^r13 ^{a r}14 3^sou nezávisle vodík nebo volitelně substituovaný Ci_₄alkyl, nebo může být jeden z R₁₃ a R₁₄ volitelně substituovaný aryl;

^r15 ^{a r}16 3^sou nezávisle vodík nebo volitelně substituovaný C₁_₄alkyl;

R₁₇ je C₁_₄alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, heteroaryl C₃_₄alkyl, heterocyklická skupina, nebo heterocyklický C₁_₄alkyl, kde aryl, heteroaryl a heterocyklické kruhy mohou všechny být volitelně substituované;

R_a je NR_gR₇, alkyl, arylC₁_₄alkyl, arylC₂_₄alkenyl, heteroaryl, heteroaryl-C₃_₄alkyl, heteroaryl-C₂_₄alkenyl, heterocyklická skupina nebo heterocyklický C₁_₄alkyl, kde aryl, heteroaryl a heterocyklické kruhy mohou všechny být volitelně substituované;

W je nebo

Y)n

E obsahující kruh je volitelně vybrán z • · > 4 ·«

N-7-(4-kyan-benzimidazolyl)-N'-(2-bromfenyl)močovina;

N-7-(4-kyan-benzotriazol)-N'-(2,3-dichlorfenyl)močovina;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

16. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství sloučeniny podle nároku 10 a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

17. Způsob léčby onemocnění zprostředkovaného chemokiny u savců, kde se uvedený chemokin váže na a nebo β receptor pro IL-8, vyznačující se tím, že obsahuje podání účinného množství sloučeniny podle nároku 10 uvedenému savci.

18. Způsob podle nároku 17 vyznačující se tím, že savec je postižen onemocněním vybraným ze skupiny zahrnující psoriasu, atopickou dermatitidu, astma, chronickou obstrukční chorobu plicní, syndrom dechové tísně dospělých, artritidu, zánětlivá střevní onemocnění, Crohnovu nemoc, ulcerosní kolitidu, septický šok, endotoxinový šok, gram-negativní sepsi, syndrom toxického šoku, mrtvici, srdeční a ledvinné reperfusní poškození, glomerulonefritidu, trombosu, reakci štěpu proti hostiteli, Alzheimerovu nemoc nebo rejekci alotransplantátu.

19. Způsob výroby sloučeniny vzorce III

N

N (ΠΙ) • · ► 4 ·· ·· ·· ·· • · · · · · • · · · · · • ·« ··· · · · • · · · • · · · ·· vyznačující se tí sloučeniny vzorce IV

N s dusitanem sodným v protickém : redukce nitro-skupiny za vzniku m, že spočívá v reakci ,NH₂ ^snh₂ (IV) ozpouštědle, po které následuje sloučeniny vzorce (III).

20. Způsob výroby sloučeniny vzorce IV (IV) vyznačující se tím, že spočívá v reakci 2-kyan-5nitroanilinu s tetramethylhydrazinjodidem, silnou chráněnou baží, v aprotickém rozpouštědle za vzniku sloučeniny vzorce (IV).

JUDr, Pavel ZE) advokát