CZ214697A3 - Use of photosensitive preparation for preparing a medicament intended for restriction of aloimplant rejection - Google Patents
Use of photosensitive preparation for preparing a medicament intended for restriction of aloimplant rejection Download PDFInfo
- Publication number
- CZ214697A3 CZ214697A3 CZ972146A CZ214697A CZ214697A3 CZ 214697 A3 CZ214697 A3 CZ 214697A3 CZ 972146 A CZ972146 A CZ 972146A CZ 214697 A CZ214697 A CZ 214697A CZ 214697 A3 CZ214697 A3 CZ 214697A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- donor tissue
- tissue
- photosensitizer
- donor
- graft
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 8
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 claims abstract description 82
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims abstract description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 29
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 10
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 8
- 239000008151 electrolyte solution Substances 0.000 claims description 5
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 4
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 claims 1
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 claims 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 33
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 20
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 abstract description 15
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 59
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 33
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 30
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 25
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 16
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 15
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 14
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 13
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 13
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 13
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 13
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 11
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 9
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 9
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 8
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 8
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 8
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 8
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 7
- 241000894007 species Species 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 5
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 5
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 5
- UJKPHYRXOLRVJJ-MLSVHJFASA-N CC(O)C1=C(C)/C2=C/C3=N/C(=C\C4=C(CCC(O)=O)C(C)=C(N4)/C=C4\N=C(\C=C\1/N\2)C(C)=C4C(C)O)/C(CCC(O)=O)=C3C Chemical class CC(O)C1=C(C)/C2=C/C3=N/C(=C\C4=C(CCC(O)=O)C(C)=C(N4)/C=C4\N=C(\C=C\1/N\2)C(C)=C4C(C)O)/C(CCC(O)=O)=C3C UJKPHYRXOLRVJJ-MLSVHJFASA-N 0.000 description 4
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000002165 photosensitisation Effects 0.000 description 4
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 3
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 3
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M Methylprednisolone sodium succinate Chemical compound [Na+].C([C@@]12C)=CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@](O)(C(=O)COC(=O)CCC([O-])=O)CC[C@H]21 FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000000781 anti-lymphocytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 3
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 3
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 229960004584 methylprednisolone Drugs 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 3
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 3
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHIITNFQDPFSES-UHFFFAOYSA-N 25,26,27,28-tetrazahexacyclo[16.6.1.13,6.18,11.113,16.019,24]octacosa-1(25),2,4,6,8(27),9,11,13,15,17,19,21,23-tridecaene Chemical class N1C(C=C2C3=CC=CC=C3C(C=C3NC(=C4)C=C3)=N2)=CC=C1C=C1C=CC4=N1 MHIITNFQDPFSES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UPXRTVAIJMUAQR-UHFFFAOYSA-N 4-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound C1C(C(O)=O)N(C(=O)OC(C)(C)C)CC1NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 UPXRTVAIJMUAQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037260 Atherosclerotic Plaque Diseases 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 2
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 2
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 2
- 229920001651 Cyanoacrylate Polymers 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 2
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 2
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699694 Gerbillinae Species 0.000 description 2
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 2
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 2
- 101000716102 Homo sapiens T-cell surface glycoprotein CD4 Proteins 0.000 description 2
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 2
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010029155 Nephropathy toxic Diseases 0.000 description 2
- 241000223503 Platysma Species 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003633 blood substitute Substances 0.000 description 2
- 229960002802 bromocriptine Drugs 0.000 description 2
- OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N bromocriptine Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@]2(C(=O)N3[C@H](C(N4CCC[C@H]4[C@]3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=C(Br)NC3=C1 OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 2
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 2
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 2
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- JJJFUHOGVZWXNQ-UHFFFAOYSA-N enbucrilate Chemical compound CCCCOC(=O)C(=C)C#N JJJFUHOGVZWXNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 2
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 2
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 description 2
- 238000002650 immunosuppressive therapy Methods 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229960004184 ketamine hydrochloride Drugs 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000007694 nephrotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000002020 noncytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229950008618 perfluamine Drugs 0.000 description 2
- JAJLKEVKNDUJBG-UHFFFAOYSA-N perfluorotripropylamine Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)N(C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F JAJLKEVKNDUJBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940109328 photofrin Drugs 0.000 description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 2
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 2
- -1 porphyrin compounds Chemical class 0.000 description 2
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 2
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 2
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 229960004533 streptodornase Drugs 0.000 description 2
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 2
- 239000003106 tissue adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 229940099259 vaseline Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical class CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- QZCJOXAIQXPLNS-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4,4a,5,5,6,6,7,7,8,8,8a-octadecafluoronaphthalene 4-(2-aminoethyl)benzene-1,2-diol Chemical compound NCCc1ccc(O)c(O)c1.FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C2(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C2(F)C1(F)F QZCJOXAIQXPLNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLVAJLBZYYGQNL-UHFFFAOYSA-N C12CC=C(N1)C=C1C=CC(=N1)C=C1C=CC(N1)=CC=1C3=C(C(N=1)=C2)C=CC=C3 Chemical compound C12CC=C(N1)C=C1C=CC(=N1)C=C1C=CC(N1)=CC=1C3=C(C(N=1)=C2)C=CC=C3 PLVAJLBZYYGQNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JUDGRMABQJKRPW-XIADSQHASA-N CCC1=C(/C=C2\N=C(/C(\CC3=O)=C(/[C@@H](CCC(O)=O)[C@@H]4C)\N/C\4=C\C(C(C)=C4C=C)=N/C\4=C4)C3=C\2C)NC/4=C1C Chemical compound CCC1=C(/C=C2\N=C(/C(\CC3=O)=C(/[C@@H](CCC(O)=O)[C@@H]4C)\N/C\4=C\C(C(C)=C4C=C)=N/C\4=C4)C3=C\2C)NC/4=C1C JUDGRMABQJKRPW-XIADSQHASA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010007617 Cardio-respiratory arrest Diseases 0.000 description 1
- 241000218645 Cedrus Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical class ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 206010012713 Diaphragmatic hernia Diseases 0.000 description 1
- 229920005682 EO-PO block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 206010014950 Eosinophilia Diseases 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 208000012671 Gastrointestinal haemorrhages Diseases 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- XVEBRHQOOYJTHD-WORMITQPSA-N OC(C)C=1C(=C2NC1C=C1C=CC(=N1)C=C1C=CC(N1)=CC=1C=CC(N1)=C2)[2H] Chemical class OC(C)C=1C(=C2NC1C=C1C=CC(=N1)C=C1C=CC(N1)=CC=1C=CC(N1)=C2)[2H] XVEBRHQOOYJTHD-WORMITQPSA-N 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001504519 Papio ursinus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Chemical class 0.000 description 1
- 208000011963 Substance-induced psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- 241001104043 Syringa Species 0.000 description 1
- 235000004338 Syringa vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N Vinyl ether Chemical compound C=COC=C QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000002390 adhesive tape Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000000961 alloantigen Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 description 1
- 238000002583 angiography Methods 0.000 description 1
- 230000003092 anti-cytokine Effects 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 210000003293 antilymphocyte serum Anatomy 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZSERVQBSOBTXFV-DHHJBRQQSA-M bacteriochlorophyll a Chemical class C1([C@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC([C@@H](CC)[C@@H]3C)=[N+]4C3=CC3=C(C(C)=O)C(C)=C5N3[Mg]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ZSERVQBSOBTXFV-DHHJBRQQSA-M 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 210000001953 common bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 201000005890 congenital diaphragmatic hernia Diseases 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 239000012024 dehydrating agents Substances 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 239000008344 egg yolk phospholipid Substances 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 229940052303 ethers for general anesthesia Drugs 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 1
- 208000030304 gastrointestinal bleeding Diseases 0.000 description 1
- 201000004528 gastrointestinal lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 229960000587 glutaral Drugs 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000003709 heart valve Anatomy 0.000 description 1
- 229960003569 hematoporphyrin Drugs 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- HUXSMOZWPXDRTN-UHFFFAOYSA-N methyl 16-ethenyl-11-ethyl-4-hydroxy-22-(3-methoxy-3-oxopropyl)-12,17,21,26-tetramethyl-7,23,24,25-tetrazahexacyclo[18.2.1.15,8.110,13.115,18.02,6]hexacosa-1,4,6,8(26),9,11,13(25),14,16,18(24),19-undecaene-3-carboxylate Chemical compound CCC1=C(C2=NC1=CC3=C(C4=C(C(C(=C5C(C(C(=CC6=NC(=C2)C(=C6C)C=C)N5)C)CCC(=O)OC)C4=N3)C(=O)OC)O)C)C HUXSMOZWPXDRTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 201000003144 pneumothorax Diseases 0.000 description 1
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 1
- 125000003367 polycyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 150000004033 porphyrin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 229960005088 urethane Drugs 0.000 description 1
- 230000002477 vacuolizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 229960000834 vinyl ether Drugs 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000002747 voluntary effect Effects 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
- A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Transplanting Machines (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu terapeutického dodávání aloimplantátů a prevence jejich odhojování příjemcem. Zejména se týká ošetření tkáně dárce metodou fotodynamické terapie za účelem odstranění buněk obsahujících antigeny z tkáně a snížení imunogenity v ní obsažených buněk.
Dosavadní stav techniky
Úspěch transplantace aloimplantátů hostiteli závisí na takových faktorech, jako jsou antigeny v transplantované tkáni, které jsou příjemcem rozpoznávány jako cizí a mohou vyvolat odmítavou reakci, dále buňky v imunitním systému příjemce, které zprostředkovávají odhojování, a reakce, které modifikují buď výskyt cizího antigenu nebo buněčnou reakci. Je známo, že významná složka odhojování aloimplantátů souvisí s přítomností neparenchymálních buněk (cestujících leukocytů) v dárcovské tkáni.
Je rovněž známo, že významnou roli při zprostředkování útoku tkáně štěpu proti příjemci hrají produkty hlavního histokompatibilního systému (major histocompatibility complex, MHC). HMC je obvykle komplexní, protože zahrnuje mnoho různých míst, z nichž každé kóduje zvláštní povrchové antigeny buněk, a protože tato místa mají rozsáhlý polymorfismus. Místa MHC spadají na základě distribuce své tkáně, struktury exprimovaných antigenů a jejich funkcí do jedné ze dvou tříd, třídy I nebo třídy II. Antigeny třídy I, přítomné na všech jádrových buňkách, slouží jako primární cíle pro cytotoxické T (CD8+) lymfocyty. Antigeny třídy II nejsou ve tkáni tolik rozšířeny a slouží jako primární cíle pro pomocné T (CD8+) lymfocyty.
Polymorfní formy jednotlivých míst lidského leukocytového antigenu (HLA) MHC u lidí jsou rozpoznávány protilátkami a různými metodami in vitro, které měří ·· ···» ·· ·» ·· ·.
• : : · .. . , . · · · · ... .
• · · · · ···· ···· «, rozpoznávání T-lymfocytů. Tyto reakce, zprostředkované příjemcovým rozpoznáním polymorfismu u dárce, korelují se silnými odmítavými reakcemi, které probíhají in vivo. Zkoumání buněčné báze odhojování transplantátů studiemi jak in vitro, tak in vivo odhalilo, že odmítavé reakce se účastní jak lymfocyty CD4+, tak CD8+.
Pokusy prodloužit přežití aloimplantátů i xenoimplantátů po transplantaci jak na experimentálních modelech, tak v medicínské praxi, se soustřeďují hlavně na potlačení imunitního aparátu příjemce. Cílem této terapie je preventivní imunosuprese a/nebo léčba odhojování štěpů.
Jako příklady prostředků, používaných pro imunosupresi, je možno uvést cytotoxická léčiva, antimetabolity, kortikosteroidy a antilymfocytické sérum. Klinický úspěch transplantací významně zvětšily nespecifické imunosupresivní prostředky, které se ukázaly jako zvláště účinné v preventivní imunosupresi (azathioprin, bromokryptin, methylprednisolon, prednison a cyklosporin A). Nefrotoxicita cyklosporinu A po renální transplantaci byla snížena současným podáváním steroidů, jako je prednisolon nebo prednisolon ve spojení s azathioprinem. Dále byly ledviny úspěšně transplantovány s použitím anti-lymfocytového globulinu následovaného cyklosporinem A. Jiný postup spočívá v celkovém ozařování mízních uzlin příjemce před transplantací s minimální imunosupresi po transplantaci. Léčba odhojování zahrnuje použití steroidů, 2-amino-6-aryl-5-substituovaných pyrimidinů, heterologního anti-lymfocytového globulinu a monoklonálních protilátek k různým populacím leukocytů.
Hlavní komplikací imunosupresivních léčiv jsou infekce. Kromě toho je systémová imunosuprese doprovázena nežádoucími toxickými účinky, například nefrotoxicitou, používá-li se po renální transplantaci cyklosporin A, a snížením hladiny hemopoietických kmenových buněk. Imunosupresivní léčiva mohou rovněž vést k obezitě, špatnému hojení ran, steroidní hypoglykémii, steroidní psychóze, leukopenii, gastrointestinálnímu krvácení, lymfomu a hypertensi.
Z důvodu těchto komplikací hledají transplantační imunologové metody potlačování imunitní reaktivity antigenově specifickým způsobem tak, aby se ztratila pouze reakce na aloantigen dárce. Takovéto specifické imunosuprese se obvykle dosahuje modifikací buď antigenity transplantované tkáně nebo specifických buněk, • · · • · · ··· · ··· • · ·· ·· schopných zprostředkovat odhojování. V určitých případech záleží skutečnost, zda bude vyvolána imunita nebo tolerance, na způsobu, jímž je antigen dodán imunitnímu systému. Další strategie proti odhojování se zaměřují na eliminaci nebo oslabení cestujících leukocytů, nesoucích MHC, tj. buněk vykazujících antigen („antigen-presenting celíš“, APC), ve tkáních dárce před transplantací.
Mezi metody, které byly popsány za tímto účelem, patří prodloužená doba kultivace dárcovské tkáně (Lafferty a spol., „Thyroid Allograft Immunogenicity is Reduced after a Period in Organ Culture“, Science 188:259 (1975)). Bylo zjištěno, že předběžné ošetření tkání aloimplantátů kultivací ve tkáňové kultuře před transplantací vede na dvou myších modelech k trvalému přijetí přes bariéry MHC (Lafferty a spol., Transplantation 22:138-49 (1975); Bowen a spol., Lancet 2:585-86 (1979)). Byla vyslovena hypotéza, že toto ošetření vede k odstranění cestujících mízních buněk, a tudíž k absenci stimulační buněčné populace nutné pro imunogenitu tkáně. Byly například použity některé vzájemně si odpovídající dvojice HLA dárce-příjemce, například u vaskulárních a ledvinových štěpů, a někdy před krevními transfusemi.
Dárcovská tkáň byla ošetřována růstovým faktorem, například TGF-beta (Czarniecki a spol., patent US č. 5,135.915, vydaný 4.8.1992), někdy v kombinaci s prodlouženou dobou kultivace (Orton, patent US č. 5,192.312, vydaný 9.3.1993).
Dárcovská tkáň může být ošetřena UV zářením (Reemtsma a spol., patent US č. 4,946.438, vydaný 7.8.1990, a Lau a spol., „Prolongantion of Rat Islet Allograft Survival by Direct Ultraviolet Irradiation of the Graft“, Science 223:607 (1984)), někdy ve spojení s mikroenkapsulací (Weber a spol., patent US č. 5,227.298, vydaný 13.7.1993). Jiní pracovníci používali samotné bariérové membrány, jako je dvojvrstva, zahrnující první necytotoxickou vrstvu a druhou vnější vrstvu biokompatibilního a semipermeabilního polymerního materiálu, popisovaná v Cochrum, patent US č. 4,696.286, vydaný 29.9.1987.
Dárcovská tkáň byla ošetřována rozmanitými látkami, například topickou aplikací cyklosporinu na kožní štěpy, jak je popsáno v Hewitt a spol., patent US č.
4,996.193, vydaný 26.2.1991, a perfusí dárcovské ledviny lymfocytickým chalonem, jak uvádí Jones a spol., patent US č. 4,294.824, vydaný 13.10.1981. Doba přežití kožních štěpů byla prodloužena ošetřením kortisonem, thalidomidem nebo urethanem in vitro před implantací laboratornímu zvířeti. Množství léčiva, aplikovaného lokálně na kůži, je menší než množství potřebné k dosažení podobného účinku systémovou injekcí léčiva příjemci. Dárcovská kůže byla ošetřována před transplantací in vitro streptokinasou/streptodornasou, preparáty RNA a DNA příjemce nebo roztoky glutaraldehydu za účelem snížení antigenity implantované kůže.
Propracovanější přístupy zahrnují ošetření dárcovské tkáně monoklonální protilátkou zaměřenou proti produktu MHC spolu s komplementem (Faustman a spol., „Prolongation of Murine Islet Allograft Survival by Pretreatment of Islets with Antibody Directly to la Determinants“, Proč. Nati. Acad. Sci. USA 78:5156 (1981)) nebo ošetření dárcovské tkáně imunokonjugátem protilátky zaměřené proti MHC (Shizuru, J.A. a spol., „Inhibition of Rat Mixed Lymphocyte Pancreatic Islet Cultures with Anti-la Immunotoxin“, Transplantation 42:660 (1986)). Tyto metody poskytly proměnlivé výsledky. Existuje tedy potřeba způsobu prodloužení přežití štěpu při transplantačních operacích, která by minimalizovala toxicitu a další nepříznivé účinky vznikající použitím velkých dávek imunosupresiv.
Metoda používaná podle vynálezu pro selektivní ničení těchto buněk APC zahrnuje kontakt dárcovské tkáně s fotosenzibilizátorem, vystavení působení světla a pak transplantaci. Podobné fotodynamické metody byly již dříve použity primárně pro ničení tkání, jako jsou nádorové tkáně, aterosklerotické plaky, povrchová onemocnění kůže a nežádoucí patogeny v krvi (Levý a spol., patenty US č. 5,283.255, vydaný 1.2.1994, 4,883.790, vydaný 28.11.1989, 4,920.143, vydaný 24.4.1990, 5,095.030, vydaný 10.3.1992, a 5,171.749, vydaný 15.12.1992, na něž se zde tímto odkazuje). Viz rovněž Dougherty a spol., patenty US č. 4,932.934, vydaný 12.6.1990, 4,889.129, vydaný 26.12.1989, 5,028.621, vydaný 2.7.1991, 4,866.168, vydaný 12.9.1989, 5,145.863, vydaný 8.9.1992, a 4,649.151, vydaný 10.3.1987, na něž se zde rovněž odkazuje.
Například patent US č. 4,866.168 Doughertyho a spol. popisuje přípravek, prodávaný pod názvem „Photofrin II“, který se získává izolací vysokoagregátového podílu molekulové hmotnosti hematoporfyrinového derivátu. Jako další konkrétní • · · · · · *· ·· ·· ·» • :· · · ·· · . Μ · · · .
• · · Σ · ··· · ····*·»· «· příklad popisuje patent US č. 4,883.790 Levyho a spol. použití skupiny příbuzných sloučenin, označovaných „monohydrobenzoporfyriny“, pro analogické účely.
Dále bylo popsáno použití mnoha různých fotosenzibilizátorů podobné struktury. Viz například deriváty (l-hydroxyethyl)deuteroporfyrinu, hydrofobní ethery hematoporfyrinu a sloučeniny připravené z methylfeoforbidu (Pandey a spol., patent US č. 5,002.962, vydaný 26.3.1991), konjugáty pyrofeoforbidu (Pandey a spol., patent US č. 5,314.905), deriváty bakteriochlorofylu-a (Dougherty, patenty US č. 5,171.741 a 5,173.504), dimery vázané na monovinyl- a divinylethery (Ward, patent US č. 4,961.920), benzoporfyrínové deriváty (Ailison a spol., patent US č. 5,214.036), dibenzoporfyrinové sloučeniny (Dolphin a spol., patenty US č. 5,308.608 a 5,149.708), takzvané „zelené“ porfyriny, jako jsou deriváty monobenzoporfyrinu (Jamieson a spol., patent US č. 5,087.636), porfyrinové sloučeniny obsahující exocyklické dvojné vazby (Chang a spol., patent US č. 5,064.952) a sodné porfimerové sloučeniny (Clauss a spol., patent US č. 5,244.914). Na popisy všech těchto patentů se zde tímto odkazuje. Obecně se na tato léčiva v prvním přiblížení nahlíží z hlediska použitelnosti ve fotodynamické terapii jako na vzájemně zaměnitelná.
Přestože se fotodynamická terapie zabývá primárně léčbou nádorových buněk, již dříve se objevily další aplikace. Tato fotosenzibilizační léčiva je možno například používat v postupech pro eliminaci aterosklerotických plaků a při ošetřování krve a jiných tělních tekutin za účelem ničení infekčních organismů. Fotodynamická terapie však zjevně dosud nebyla použita k eliminaci cestujících leukocytů ve tkáni dárcovského aloimplantátu.
Zvláštní výhoda vynálezu spočívá vtom, že na rozdíl od terapeutických postupů zahrnujících podávání fotosenzibiiizačního léčiva organismu je možno tkáň nejvhodněji ošetřovat in vitro před skutečnou transplantační procedurou. Tímto způsobem jsou podstatně odstraněny problémy spojené se zajištěním správné hladiny expozice světlu například v případě konjugátu spojeného s cílovými buňkami uvnitř organismu.
Dále se způsobem podle vynálezu získají štěpy, které jsou ve vhodných hostitelích imunologicky stabilní, biologicky funkční a schopné uchovávání před • · · ···· ···· transplantací. Vynález tak umožňuje vytvoření banky fotodynamicky ošetřených štěpů, které mohou být použity pro krátkodobé uchovávání.
Podstata vynálezu
Vynález poskytuje postup pro minimalizaci odhojování transplantátů v živočišných subjektech. Před transplantací se dárcovská tkáň, která obsahuje buňky vykazující antigen (APC), uvede do styku s fotosenzibilizačním prostředkem a vystaví světlu o vlnové délce absorbované tímto fotosenzibilizačním prostředkem po dobu potřebnou k odstranění APC. Tímto ošetřením se neusmrtí keratinocyty, ale může se změnit jejich exprese antigenů třídy I a/nebo II, stejně jako cytokiny, které vylučují, takže se sníží imunogenita kůže samotné.
V jednom provedení je fotosenzibilizační prostředek ve formě konjugátu, zahrnujícího cílově specifickou komponentu, za účelem zvýšení interakce mezi fotosenzibilizačním prostředkem a cílovými APC. Fotosenzibilizační léčivo zprostředkuje destrukci APC, je-li aloimplantát ozářen při vhodné vlnové délce, absorbované fotosenzibilizačním prostředkem.
Podle dále uvedeného podrobného popisu se podle vynálezu dárcovská tkáň před transplantací uvede do styku s fotosenzibilizačním prostředkem. Výraz „dárcovská tkáň“ zahrnuje jakýkoli typ transplantovatelné nebo implantovatelné tkáně z dárce jiného než je příjemce, která obsahuje APC. Dárcovskou tkání, používanou podle vynálezu, může být jakákoli z rozmanitých tkání, například měkká tkáň, jako je amniotická blána novorozence, kostní dřeň, hematopoietické prekursorové buňky, kolagen a kostní protein pro stimulaci růstu chrupavky, orgány, jako je kůže, srdce, játra, slezina, pankreas, lalok štítné žlázy, plíce, ledvina, tubulární orgány (například střevo, krevní cévy nebo jícen), a části orgánů, jako jsou srdeční chlopně a izolované buňky nebo shluky buněk, jako jsou ostrůvkové buňky slinivky nebo jaterní buňky.
Tubulární orgány mohou být používány k náhradě poškozených částí jícnu, krevních cév nebo žlučovodu. Kožní štěpy mohou být používány nejen pro popáleniny, ale i pro úpravu poškozeného střeva nebo pro uzavření určitých defektů, ·· ···· jako je brániční kýla. Ve zvlášť výhodném provedení je dárcovskou tkání kožní tkáň nebo pankreatické ostrůvkové buňky.
Výraz „štěp“, jak je zde používán, se vztahuje na biologický materiál pocházející od dárce, pro transplantaci příjemci. Výraz „transplantát“ a různé jeho varianty se vztahuje na vložení štěpu do příjemce, ať už je transplantace syngenní (kde dárce a příjemce jsou geneticky identičtí), alogenní (kde dárce a příjemce jsou různého genetického původu, ale stejného druhu) nebo xenogenní (kde dárce a příjemce patří k různým druhům). Podle typického scénáře tedy je hostitelem člověk a štěpem je isotransplantát, pocházející od člověka stejného nebo jiného genetického původu. Podle jiného scénáře pochází štěp z odlišného druhu od toho, jemuž se transplantuje, včetně zvířat fylogenicky značně vzdálených druhů, například v případě transplantace srdce paviána do lidského hostitele.
Dárcovská tkáň může být odebrána z jakéhokoli zdroje, ať jde o mrtvoly nebo živé dárce. Příklady vhodných dárců jsou živá zvířata, jako jsou laboratorní zvířata, například psi, kočky, myši, krysy, skokušky (gerbilové), morčata, krávy, primáti, nebo lidé. Výhodně jsou dárci savci včetně člověka.
Lidskými dárci jsou přednostně dobrovolní, pokrevně příbuzní dárci s normálním výsledkem lékařského vyšetření a se stejnou hlavní krevní skupinou ABO, protože překračování bariér mezi hlavními krevními skupinami může bránit přežití aloimplantátu. Je však možno transplantovat například ledvinu dárce typu 0 do příjemce A, B nebo AB.
Výraz „aloimplantát“ se vztahuje na buňky a tkáň, které pocházejí nebo jsou odvozeny od dárce stejného druhu jako je příjemce. Přednostně je dárce stejného druhu jako příjemce.
Výraz „příjemce“, jak je zde používán, se vztahuje na jakéhokoli kompatibilního hostitele transplantátu. Výrazem „kompatibilní“ se rozumí hostitel, který darovaný štěp přijme. Příklady potenciálně použitelných příjemců jsou zvířata, přednostně savci, jako jsou hospodářská zvířata, například koně, krávy nebo ovce, domácí zvířata, například psi nebo kočky, laboratorní zvířata, jako jsou myši, krysy, gerbilové nebo morčata, nebo primáti, například opice nebo lidé. Zejména je ·· ···» příjemcem člověk. Jestliže je jak dárcem, tak příjemcem štěpu člověk, pak se pro zlepšení histokompatibility oba kombinují z hlediska antigenů HLA třídy II.
Fotosenzibilizační prostředky
Pro použití podle vynálezu je obecně vhodná jakákoli z různých sloučenin, které se používají v klasické fotodynamické terapii. Jak je odborníkům známo, hlavní skupinou známých fotosenzibilizačních prostředků jsou sloučeniny příbuzné porfyrinům. Jak je poněkud podrobněji popsáno výše, zahrnují tato léčiva hematoporfyrinové deriváty, vysokomolekulární frakci hematoporfyrinového derivátu, prodávanou jako fotosenzibilizační prostředek Photofrin II, a její aktivní složky, různé syntetické deriváty porfyrinů, jako jsou monohydrobenzoporfyriny, označované také jako benzoporfyrinové deriváty nebo BPD, zelené porfyriny a různé jiné polycyklické sloučeniny, o nichž se má za to, že při ozařování generují singletový kyslík, který způsobuje destrukci tkáně. Způsoby přípravy vhodných fotosenzibilizačních sloučenin jsou plně popsány ve výše uvedených patentech a v publikacích, v nich citovaných. Přednostně je fotosenzibilizačním prostředkem BPD.
Kritickou charakteristikou jakéhokoli fotosenzibilizačního prostředku je v principu jeho tendence vykazovat při ozáření světlem o vlnové délce, která může být fotosenzibilizátorem absorbována, cytotoxický účinek na buňky, v nichž je lokalizován. Přestože se má za to, že v mnoha případech je cytotoxický účinek výsledkem tvorby singletového kyslíku při expozici, není přesný způsob provedení pro vynález kritický.
Jak je do určité míry diskutováno ve výše uvedených patentech Doughertyho a spol., s účinnými fotosenzibilizačními prostředky jsou typicky spojeny četné další specifické vlastnosti. Mezi vlastnosti fotosenzibilizátorů obecně, které mají zvláštní význam při provádění vynálezu, patří relativní absence toxicity vůči buňkám při absenci fotochemického účinku a snadné vymizení z tkání v nepřítomnosti cílově specifické interakce mezi konkrétními buňkami a fotosenzibilizátorem.
Fotosenzibilizační prostředky podle vynálezu mají přednostně absorpční spektrum, které je v rozmezí vlnových délek mezi 350 nm a 1200 nm a které může
Μ
9 9 9
9 • 9 ·
···· ·«·· ·· ·· • ♦ *
9 9 • 99 9 9 ·
«· »»
9999 • · · 9 9 9
9 9
9
9 být o sobě známým způsobem přizpůsobeno požadované penetraci a přednostně leží mezi asi 400 a 900, zejména mezi 600 a 800 nm.
Fotosenzibilizační prostředky podle vynálezu se dávkují způsobem konzistentním s dobrou lékařskou praxí s uvážením charakteru transplantace a upravované poruchy, druhu dárce, zdravotního stavu konkrétního příjemce, přítomnosti jakéhokoli jiného léčiva v dárcovské tkáni nebo v organismu příjemce a dalších faktorů, známých praktikům. Terapeuticky účinné množství fotosenzibilizátoru, uváděné do styku se štěpem, je množství, které účinně snižuje imunogenitu štěpu, takže je kompatibilní s příjemcem a není odmítnut. Obecně je účinné množství pro tento účel v rozmezí asi 0,1 až asi 10 pg/ml, přednostně asi 0,1 až asi 2,0 pg/ml a zejména asi 0,25 až asi 1,0 pg/ml.
Fotosenzibilizační prostředek může být kombinován s jedním nebo více ímunosupresivy pro posílení imunosupresivního účinku na štěp. Účinné množství těchto dalších prostředků závisí na množství fotosenzibilizátoru přítomného ve formulaci, typu transplantátu, důvodu transplantace, místu dodání, způsobu podání, rozvrhu aplikace, dalších výše diskutovaných faktorech a jiných faktorech známých praktikům.
Fotosenzibilizační prostředek se typicky formuluje smísením při teplotě místnosti, vhodném pH a požadovaném stupni čistoty s jedním nebo více fyziologicky přijatelnými nosiči, tj. nosiči, které jsou při použitém dávkování a koncentraci vůči příjemci netoxické. Hodnota pH formulace závisí hlavně na konkrétním použití a koncentraci fotosenzibilizátoru, ale přednostně se pohybuje kdekoli od asi 3 do asi 8.
Fotosenzibilizátor se pro zabránění adhese k nádobám, kde je umístěn, k níž dochází při hodnotách pH blížících se fyziologické hodnotě, a k zajištění aktivace fotosenzibilizátoru přednostně udržuje na neutrálním pH (například asi 6,5 až asi 7,5). Vhodným provedením je tedy formulace v roztoku elektrolytu obsahujícím rovnovážný solný pufr o pH 6,5, ale neobsahujícím fetální bovinní sérum („FBS“). Důvod vypuštění FBS je obsah jeho antigenních složek, které by mohly exacerbovat reakci aloimplantátu. Pokud fotosenzibilizátor přilne k nádobám, v nichž jsou ošetřovány štěpy, přidá se popřípadě vhodná neantigenní složka, jako je lidský ·· ···· sérový albumin, v množství, které neinterferuje s fotosenzibilizátorem při perfusi nebo adhesi k ošetřovanému štěpu.
Má-li se formulace fotosenzibilizátoru aplikovat topicky, například natírá-li se na kožní štěp před transplantací, je výhodné používat viskózní roztok, jako je gel, spíše než neviskózní roztok. Gel může být vytvořen například smísením roztoku fotosenzibilizátoru sgelotvorným činidlem, jako je polysacharid, přednostně vodorozpustný polysacharid, například kyselina hyaluronová, škroby a deriváty celulózy, například methylcelulóza, hydroxyethylcelulóza a karboxymethylcelulóza. Je-li v gelové formulaci přítomen polysacharid, je obvykle přítomen v množství v rozmezí asi 1 až 90 % hmotnostních, přednostně asi 1 až 20 % hmotnostních gelu. Příklady dalších vhodných polysacharidů pro tento účel a stanovení rozpustnosti polysacharidů lze nalézt v dokumentu EP 267015, zveřejněném 11.5.1988, na jehož popis se zde odkazuje.
Má-li být ošetřovaný štěp uchováván po jakoukoli dobu, je fotosenzibilizátor přednostně formulován nebo přidán k emulzi perfluorované sloučeniny (působící jako náhražka krve) pro umožnění přístupu vysokých koncentrací kyslíku ke štěpu. Takové emulze zahrnují perfluorovanou sloučeninu, jako je perfluordekalin a/nebo perfluortripropylamin, emulgovanou pomocí povrchově aktivní látky ve vodě. Perfluorované sloučenina se volí tak, aby byla co nejméně toxická vůči příjemci.
Příklady vhodných povrchově aktivních látek zahrnují poloxamerové povrchově aktivní látky, které představují řadu molekul, tvořených blokovými kopolymery ethylenoxidu a propylenoxidu, buď samotnými nebo ve směsi s fosfolipidem, jako je vaječný lecitin. Dalším příkladem emulze, komerčně dostupné od Green Cross, je Fluosol-DA 20 %, kterýžto produkt obsahuje perfluordekalin a perfluortripropylamin, emulgovaný poloxamerovým surfaktantem Pluronic F-68. Emulze perfluorovaných sloučenin a jejich účinek na savce je úplněji popsán v Bollands a spol., J. Pharm. Pharmacol. 39:1021-1024 (1987), na což se zde tímto odkazuje.
Formulace fotosenzibilizátoru pro použití při terapeutické aplikaci je přednostně sterilní. Sterility se snadno dosáhne sterilní filtrací přes (0,2μιτι) membrány. Jakmile je formulován a sterilizován, nemusí být fotosenzibilizátor stabilní ·· ·«♦·
ΦΦ < φ φ φ • φ φ φφφφ φφφφ vůči oxidativní denaturaci. Pro uchovávání jsou však vhodné lyofilizované formulace pro rekonstituci, například s obsahem BPD.
Cílené systémy
Použití těchto fotosenzibilizátorů pro destrukci schopnosti dárcovské tkáně vyvolat reakci štěpu vůči hostiteli je podpořeno konjugací fotosenzibilizátorů s cílově specifickým prostředkem. Fotosenzibilizátor může být konjugován zejména (1) s jednotkou, která se specificky zaměřuje na buňky obsahující antigen (APC) přímo v dárcovské tkáni, (2) s jednotkou, která se specificky zaměřuje na zprostředkující materiál, který označuje APC pro zaměření konjugátem, nebo (3) s T-buňkami pro situaci štěp versus hostitel. V každém případě je dárcovská tkáň, jakmile byla modifikována interakcí s konjugátem, exponována o sobě známým způsobem tak, aby v ní došlo k podstatnému odstranění skupiny APC.
Vynález poskytuje specifické konjugáty, obsahující fotosenzibilizátor, použitelné k cílenému napadání APC v aloimplantátové dárcovské tkáni, a způsob ničení APC v dárcovské tkáni obecně fotodynamickou terapií (photodynamic therapy, „PDT“). Jedna z formulací, použitelných při tomto způsobu, je tvořena v podstatě fotosenzibilizátorem a systémem pro navázání „naváděcího prostředku“ na fotosenzibilizátor. Další formulace zahrnuje kombinaci systému cíleného na APC a fotosenzibilizátorů konjugovaného s naváděcím prostředkem pro systém cílený na APC. V obou případech je konečný účel dodání fotosenzibilizátorů k APC identický.
K cílovým APC je možno dosáhnout přístupu různými cílově specifickými prostředky, včetně jednotek imunospecifických pro glykoproteinové produkty MHC a lymfokinové faktory, pro které tyto buňky nesou receptory. Pro reakci s glykoproteiny MHC mohou být typicky použity protilátky získané proti těmto glykoproteinům, buď polyklonální nebo monoklonální.
Polyklonální séra se připravují konvenčním způsobem, například injekčním vpravením antigenu, k němuž se požaduje protilátka, do vhodného savce, stanovením hladiny protilátky proti antigenu v séru a přípravou anti-séra při vysokém titru. Preparáty monoklonálních protilátek je rovněž možno připravovat konvenčním způsobem, například metodou, popsanou v Koehler a Milstein, „_“, «· ···
; · · · · • · · » · • *·· · ···
J· of_, (19_), s použitím například lymfocytů periferní krve nebo slezinných buněk z imunizovaných zvířat a znesmrtelněním těchto buněk buď virovou infekcí, fúzí s myelomy nebo jinými konvenčními postupy a screeningem na produkci požadovaných protilátek izolovanými koloniemi.
Kromě protilátek je možno použít vhodných imunoreaktivních fragmentů, jako jsou fragmenty Fab, Fab’ nebo F(ab)2. Četné protilátky, vhodné pro použití při vytváření cíleného mechanismu, jsou již v oboru dostupné. Například použití imunologicky reaktivních fragmentů jako náhražek za celé protilátky je popsáno v Spielberg, H.L., „Immunoassays in the Clinical Laboratory“,_,
3:1-23 (1978).
Kromě imunoreaktivity je možno cílení dosáhnout použití receptorových ligandů, které se zaměřují na receptory na povrchu buněk APC, například na základě komplementarity obrysů schémat náboje mezi receptorem a ligandem. Výraz „receptorový ligand“, jak je zde používán, se vztahuje na jakoukoli látku, přírodní nebo syntetickou, která se váže specificky na receptor na buněčném povrchu APC. Tyto receptorové ligandy zahrnují lymfokinové faktory, například IL2.
Podle konkrétního provedení vynálezu je fotosenzibilizátor konjugován s cílově specifickým prostředkem pro zprostředkující látku, která je pak specifická pro APC. Například v případě krysích buněk vykazujících la může být jako zprostředkující látka použita myší anti-krysí protilátka la. V tomto případě se bude konjugát fotosenzibilizátoru, navázaný na anti-myší protilátku, zaměřovat na buňky značené myší protilátkou přesně stejným způsobem jako se konjugát zahrnující antikrysí protilátku la na ně zaměřuje přímo.
Metody konjugace
Cílený systém může být konjugován přímo s fotosenzibilizátorem s použitím běžných metod a technologie linkerů, jak jsou v oboru obecně známy a popsány například ve výše uvedených patentech Levyho a spoi. Pro proteiny, jako je Ig a další polypeptidy, je možno uskutečnit přímou kovalentní vazbu mezi fotosenzibilizátorem a cílově specifickou složkou například s použitím dehydratačního činidla, jako je karbodiimid. Aktivní jednotky konjugátu mohou být
999 ·· ·« * · * · • · ♦ 9 • 9 ·*« 9 9999 ♦ · ·· ♦ * · • 9 9 • 999 • · *· 99 ·· • ♦ • 9
9 9 samozřejmě také spojeny pomocí iinkerových sloučenin, které jsou bifunkční a jsou schopné se kovalentně vázat s každou z obou aktivních složek.
Do rozsahu vynálezu spadá jakákoli účinná metoda, o níž je známo, že je schopná spojovat dvě chemické jednotky. Linkerovou jednotkou je nutno chápat široce jako kovalentní vazbu nebo jakoukoli linkerovou jednotku, dostupnou v oboru nebo odvoditelnou standardními metodami.
Alternativně je možno zaměřování na cíl zprostředkovat dodatečnými specifickými prostředky. Například, jak je popsáno dále, může být přímo na fotosenzibilizátor navázána sekundární protilátka, zaměřená na APC-specifickou protilátku, a jako můstek mezi imunokonjugátem a cílovou buňkou může být použit prostředek zaměřování na glykoprotein MHC.
Postup léčby
Eliminace nebo funkční oslabení APC nebo modulace jiných kožních buněk, jako jsou keratinocyty, se podle vynálezu uskutečňuje relativně přímočarým způsobem uváděním dárcovské tkáně do styku přímo s fotosenzibilizátorem, který může být ve formě konjugátu, za podmínek, které umožňují vytvoření silné asociace mezi fotosenzibilizátorem (nebo cílově specifickou složkou konjugátu obsahujícího fotosenzibilizátor) a cílovými APC za současné minimalizace koncentrace fotosenzibilizátoru v dárcovské tkáni.
Je výhodné, jestliže toto uvedení do styku zahrnuje nanesení kompozice na jeden nebo více povrchů štěpu nebo inkubaci nebo perfusi orgánového štěpu formulací fotosenzibilizátoru podle vynálezu. Toto ošetření se obecně provádí po dobu alespoň 1 min, přednostně asi 1 min až asi 72 h, zejména asi 2 min až asi 24 h. Doba styku závisí na takových faktorech, jako je koncentrace fotosenzibilizátoru ve formulaci, ošetřovaný štěp a konkrétní typ formulace. Perfuse se provádí jakýmkoli vhodným postupem. Například orgán je možno perfundovat pomocí zařízení, které zajišťuje konstantní tlak nebo perfusi s tlakovým regulátorem a přetokem mezi pumpou a orgánem. Alternativně je možno orgán umístit do těsně uzavřené hyperbarické komory a dodávat perfusát do komory pumpou, která odebírá
···« ·*»« ·· • · « • ♦ · • « * · »· ··« * ♦ · • · • · ··· • · ··♦· tekutinu z rezervoáru, popřípadě s vracením spotřebovaného perfusátu do rezervoáru pomocí ventilu.
U kožních štěpů je možno formulaci natírat nebo nastřikovat na spodní povrch transplantované kůže tak, že mezi spodním povrchem dárcovské tkáně a tkání příjemce vznikne vrstva fotosenzibilizátoru. Přednostně se však celý kožní štěp ponoří do kompozice fotosenzibilizátoru.
Stupeň uvádění do styku může probíhat při různých teplotách s vyloučením pouze těch teplot, které jsou dost vysoké, aby způsobily denaturaci nebo jiné poškození štěpu, a teplot, které jsou dost nízké, aby minimalizovaly příjem fotosenzibilizátoru buňkami. Přednostně se stupeň uvádění do styku provádí při teplotě v rozmezí asi 50 až asi 400 °C, výhodně asi 150 až asi 370 °C a zejména při teplotě okolí.
Po řádné distribuci fotosenzibilizátoru, zajišťující, že je správně asociován s cílovými APC, se takto ošetřená dárcovská tkáň podrobí expozici světlem o vlnové délce, která je absorbována fotosenzibilizátorem a vede k aktivaci jeho cytotoxických vlastností. Taková expozice je samozřejmě v oboru fotodynamické terapie zcela běžná. Příklady postupů a zařízení pro tento účel jsou uvedeny například ve výše zmíněných patentech Doughertyho a spol.
Poté, co byl štěp uveden do styku s fotosenzibilizátorem a exponován světlu, může být uchováván až asi 24 až 48 h. Přednostně se však použije bezprostředně v procesu transplantace. Životnost je možno zvýšit výše popsaným způsobem použitím náhražky krve ve formulaci (například emulze perfluorované sloučeniny) nebo perfusí štěpu formulací fotosenzibilizátoru, obsahující chlazené isotonické činidlo a antikoagulant, a pak glycerolem, což umožňuje zmrazení štěpů s malým poškozením buněk, jak je popsáno v dokumentu JP 60061501, zveřejněném 9.4.1985. Štěp může být mimoto uchováván s různými kapalinami, které zahrnují formulaci, zatímco jsou orgány chlazeny na teplotu mrznutí, za účelem polotrvalé ochrany orgánu bez nekrocytózy buněk.
Před transplantací se štěp přednostně promyje k odstranění kompozice fotosenzibilizátoru, například propláchnutím ve fyziologickém salinickém roztoku nebo jinými prostředky vhodnými pro tento účel. Pro podporu přežití štěpu může být »» *♦ • · ♦ ♦ .· .· • 9 •999 9999 • *» • · · * · · • ··· « ·« • · ► ♦ · «· ·* ··>· • · · také před transplantací příjemci provedena jedna nebo více krevních transfúzí, specifických pro dárce, s mononukleárními krevními buňkami periferní krve, ošetřenými pomocí PDT. Alternativní postup spočívá vtom, že se příjemce před transplantační operací podrobí celkovému ozařování mízních uzlin. Jako součást tohoto vynálezu je možno provádět jakoukoli pre-transplantační proceduru, která bude mít příznivý účinek pro konkrétního příjemce.
V některých případech je žádoucí modifikovat povrch štěpu tak, aby byly vytvořeny kladně nebo záporně nabité skupiny, například použitím vhodné aminokyseliny nebo polymeru nebo navázáním fyziologicky přijatelného zdroje nabitých funkčních skupin. Například záporně nabitý povrch je pro krevní cévy vhodný pro snížení srážení krve. Za určitých okolností je rovněž žádoucí učinit povrch hydrofobním nebo hydrofilním, navázáním například fenylalaninu, šeřinu nebo lysinu na povrch. Imunosupresivním prostředkem, zvlášť účinným pro tyto modifikace povrchu, je glutaraldehyd.
Samotný postup transplantace závisí na konkrétní odstraňované poruše, stavu pacienta atd. Vhodný postup pro každý daný případ určí lékařský praktik. Transplantáty se popřípadě během kritické pooperační doby (prvních tří měsíců) systematicky monitorují jakoukoli vhodnou metodou, například radionuklidovou intravenózní angiografií. Po transplantaci se jako důležitá pro zajištění přežití štěpu často používá imunosupresivní terapie s použitím vhodného imunosupresiva.
Způsob podle vynálezu může být doplněn nebo použit v kombinaci se stejnými nebo sníženými dávkami imunosupresiva, současně podávaného systémově dárci, in vitro dárcovské tkáni nebo příjemci, buď místně nebo systémově. Výraz „imunosupresivum“, jak je zde používán, se vztahuje na látky, které působí tak, že potlačují nebo maskují imunitní systém hostitele, do něhož je štěp transplantován. Zahrnuje látky, které potlačují produkci cytokinů, tlumí nebo potlačují expresi autoantigenů nebo maskují antigeny MHC.
Příklady takovýchto látek zahrnují 2-amino-6-aryl-5-substituované pyrimidiny, azathioprin nebo cyklofosfamid, bromokryptin, glutaraldehyd, antiidiotypické protilátky pro antigeny MHC, cyklosporin A, jeden nebo více steroidů, přednostně kortikosteroidy a glukokortikosteroidy, jako je prednison, methylprednisolon a
* · * ♦ • · .· * ·'♦· · ·»·«
9999 •
dexamethason, protilátky proti interferonu gama, protilátky proti faktoru alfa nádorové nekrózy, protilátky proti faktoru beta nádorové nekrózy, protilátky proti interleukinu-2, protilátky proti cytokinovému receptoru, jako jsou protilátky proti receptoru IL-2, heterologní anti-lymfocytový globulin, protilátky pan-T, přednostně monoklonální protilátky OKT-3, protilátky kCD4, streptokinasu, streptodornasu nebo RNA nebo DNA z hostitele.
Účinné množství, které se stanovuje na základě těchto úvah, je minimální množství nutné k prevenci imunitní reakce, která by měla za následek odhojení štěpu příjemcem, ale stejně tak nutné k dosažení delší doby přežití štěpu. Toto množství je přednostně nižší než množství, které je pro příjemce toxické nebo významně zvyšuje náchylnost příjemce k infekcím. Množství imunosupresiva, nutné podle vynálezu, je typicky nižší než se normálně požaduje pro transplantované štěpy, které nebyly předem ošetřeny, a závisí na individuálních okolnostech transplantátu a typu použitého imunosupresiva.
Jako konkrétní příklad je možno uvést celkové množství imunosupresiva cyklosporinu A, podávaného parenterálně, činící na dávku asi 0,1 až 20 mg/kg tělesné hmotnosti pacienta, oproti typickému rozmezí asi 5 až asi 15 mg/kg/den cyklosporinu A, běžně používaného v konvenční imunosupresivní terapii. U renálních transplantátů se podle obvyklé praxe podávají masivní množství glukokortikosteroidu v krátkých časových obdobích, například methylprednisolon v několikagramových dávkách denně podávaný po dobu 3 až 5 dní a poté 20 až 100 mg prednisonu, bez fotodynamického předběžného ošetření tkáně štěpu. Při předběžném ošetření podle vynálezu jsou použitelné významně nižší dávky.
Jak výše uvedeno, tato navrhovaná množství imunosupresiva jsou z velké části věcí rozhodnutí terapeuta. Klíčovým faktorem při volbě příslušné dávky a postupu dávkování je dosažený výsledek, tj. dlouhodobé přežití štěpu. Například mohou být potřebné relativně vysoké dávky bud’ zpočátku pro léčbu hyperakutního odhojování štěpu, které lze přisoudit destrukci štěpu, zprostředkované protilátkami, nebo v pozdějším stadiu, charakterizovaném náhlým poklesem funkce štěpu.
Jestliže se používá imunosupresivum, může být podáváno jakýmkoli vhodným způsobem, zahrnujícím parenterální, a je-li to požadováno pro místní imunosupresi,
ΦΦ φφ ♦ φ φ φ .* .· φ φ
ΦΦΦΦ ΦΦΦΦ ► φφ • · ♦ φ · » • φφφ φ » φ φφ ΦΦΦ· • · · • · φ φφφ φ φ φ • Φ φ intralesionální aplikaci. Parenterální infuse zahrnují intramuskulární, intravenozní, intraarteriální, intraperitoneální nebo subkutánní aplikaci. Používá-li se imunosupresivum, podává se navíc výhodně pulsní infuzí, zejména s klesajícími dávkami, nebo kontinuální infusí.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 znázorňuje strukturu sloučenin BPD, zvlášť použitelných jako fotosenzibilizační prostředky podle vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Pro osvětlení vynálezu, avšak nikoli kjeho omezení, jsou uvedeny příklady provedení.
Příklad 1
Příprava konjugátu BPD-Ra-Mig
Fotosenzibilizátor BPD-ΜΑ, znázorněný na obr. 1, se v temnu zředí z koncentrace 1 mg/ml na 200 pg/ml ve fosfátem pufrovaném salinickém roztoku a smísí se známým množstvím krysího anti-myšího Ig (RaMlg), který se získá od Cedar Lané Laboratories nebo připraví imunizací králíků myším imunoglobulinem a čištěním protilátek na imunoabsorpčních kolonách. Směs se inkubuje 1 h v temnu při teplotě místnosti a získaný konjugát se dialyzuje přes noc při 4 °C přes membránu propustnou pro molekuly o molekulové hmotnosti menší než 12 až 14 kD proti třem litrům PBS. Modelové studie se značeným BPD-ΜΑ ukazují, že zadržený konjugát má poměr BPD:Ab 10 až 20. Retentát zdialýzy se pak zmrazí a lyofilizuje a uchovává v temnu.
·· ····
Příklad 2
Ošetření tkáně aloimplantátů konjugátem
Dárcovská tkáň pankreatických ostrůvků byla izolována z krys tímto způsobem:
Samci krys SD (200 až 250 g) byli anestetizování intraperitoneálně urethanem (100 mg/kg) a pomocí laparotomie středovou čárou byla bilaterálními pneumotoraxy vyvolána kardiorespirační zástava. Proximální společný žlučovod byl kanylován a distálně okludován v místě vstupu do dvanáctníku. Pankreas pak byl retrográdně rozšířen chladným (4 °C) roztokem kolagenasy (typ XI, Sigma Chemicals) o koncentraci 0,42 mg (650 U)/ml. Po rozšíření kolagenasou in šitu byla provedena totální pankreatektomie.
Žlázy byly vyluhovány po dobu 22 min ve vodní lázni 37 °C. Vyluhované žlázy byly dispergovány triturací přes sterilní silikonovanou pipetu. Surová tkáňová suspenze byla podrobena průchodu filtrem o velikosti síta 200 μπι k odstranění nevyluhovaných trubic, krevních cév a lymfatických uzlin a pak odstřeďována s diskontinuálním gradientem dextranu, tvořeným dvěma monovrstvami o specifické hmotnosti 1,065, resp. 1,031. Z rozhraní monovrstvy byla odsáta ostrůvková tkáň o menší hustotě, promyta a dále přečištěna ručním vysbíráním pod disekčním mikroskopem. Touto metodou bylo získáno 300 až 400 funkčně a morfologicky neporušených ostrůvků na pankreas.
Ostrůvky byly kultivovány in vitro po dobu 1 dne v Hamově médiu F-12, doplněném 25 % telecího séra, 15 mM pufru HEPES a 1 % strepfungizonu. Kultivované ostrůvky byly nejprve inkubovány po dobu několika hodin při 0 °C s komerčně dostupnou myší anti-krysí monoklonální protilátkou la (označenou OX6), dostupnou od SeraLab, v množství 0,2 mg/ml. OX-6 je imunospecifická proti produktu MHC třídy II.
Části ostrůvků, ošetřených OX-6, byly inkubovány při 20 °C po dobu 2 h v temnu s (1) konjugátem Ra-MigG-BPD s poměrem 6,5 BPD : 1 Ab, (2) tímtéž ·· 99
·· ·· • · 9 • 9 · • 9·· « • 9 ·· ·♦
9 ·
999
9
9999 konjugátem s poměrem 20 BPD : 1 Ab, (3) konjugátem BPD s irelevantní protilátkou GA-7slgG s poměrem 6,5 BPD : 1 Ab, (4) BPD samotným a (5) médiem samotným. Inkubační směsi pak byly vystaveny světelné energii 10 J/cm2 o vlnové délce 400 až 800 nm. Ozářené kultury pak byly testovány histologicky a na úbytek APC.
Příklad 3
Charakterizace dárcovské tkáně
V histologických studiích bylo asi 75 až 100 ostrůvků, které byly ošetřeny konjugátem 6,5 BPD : 1 Ab, transplantováno pod tukové pouzdro ledviny příjemcovských syngenních krys SD a alogenních krys WF. Jak u syngenních, tak u alogenních transplantátů poskytli všichni příjemci úspěšné výsledky. Zejména byla jak u syngenních, tak alogenních transplantátů pozorována kompletní náhrada štěpu lymfocytickým infiltrátem a nebyla pozorována identifikovatelná endokrinní tkáň.
Ve studiích úbytku APC byly ostrůvky primárně imunobarveny protilátkou OX6. Takto ošetřené buňky byly podrobeny sekundárnímu barvení kozím anti-myším Ig, značeným FITC (Jackson Laboratories) a podrobeny fluorescenční mikroskopii. V preparátech, které byly ošetřeny konjugáty, nebyly patrné identifikovatelné buňky MHC třídy II. V kontrolních preparátech (konjugát s irelevantní protilátkou, samotný BPD a médium) však byla přítomnost těchto buněk fluorescenční mikroskopií detekována, protože sekundární protilátka, značená FITC, označila APC a emitovala zelenou fluorescenci.
Příklad 4
Prevence odhojování kožních aloimplantátů
Pro stanovení základní hodnoty reprezentující minimální odmítnutí bylo na myších BALB/c v souladu se standardními metodami (Billingham a spol., „The Technique of Free Skin Grafting in Mammals“, J. Exp. Biol. 28:385-99 (1951)) ·· ···· • * · • · · ·· · · • · ·· · ·· *♦ • · · · • · • ·
.......
provedeno devět syngenních štěpů (dárce a příjemce jsou totéž zvíře) tímto postupem: Transplantovaná kůže trupu myší byla oholena a depilována. Myš pak byla anestetizována intraperitoneální injekcí směsi 20 μΙ ketaminhydrochloridu, 10 μΙ xylasinu a 70 μΙ PBS, načež byla opatrným vyříznutím získána kůže (1 cm x 1 cm) v plné tloušťce s ponecháním vhodného lůžka štěpu a tak, aby nedošlo k poškození platysmy.
Autologní kožní štěpy pak byly aplikovány zpět na místo transplantace a udržovány na místě aplikací několika, asi čtyř kapek tkáňového adhesiva Vetbond na rozhraní mezi štěpem a lůžkem štěpu. Štěp byl stlačen pomocí gázy napuštěné vaselinou a spolu s gázou udržován na místě pomocí lepicí pásky Vetrap, která ovinutím kolem těla vytvořila obvaz.
Míra úspěšnosti pro dlouhodobé syngenní štěpy, tj. přes 120 dní, byla vyšší než 90 %. Odmítnutí štěpu bylo považováno za úplné, došlo-li k alespoň 80% nekróze štěpu. Přežití štěpu bylo vyjádřeno jako průměr pomocí doby přežití ve dnech ± standardní odchylka.
Jako kontroly byly pomocí stejných postupů jako výše provedeny rovněž alogenní kožní transplantáty mezi myšmi C57BL/6 (dárci, H-2b) a BALB/c (příjemci, H-2d), avšak s tou výjimkou, že každý kožní štěp byl odebrán z dárcovské myši a nanesen do lůžka štěpu jiné příjemcovské myši. Stručně řečeno byla kůže trupu dárcovských myší oholena a depilována, načež byly získány úplné kožní štěpy (1 cm x 1 cm). Příjemcovské myši byly oholeny a pak anestetizovány intraperitoneální injekcí směsi 20 μΙ ketaminhydrochloridu, 10 μΙ xylasinu a 70 μΙ PBS. Lůžko štěpu každého příjemce bylo připraveno opatrným vyříznutím kůže trupu (1 cm x 1 cm) tak, aby nedošlo k poškození platysmy. Štěpy byly aplikovány na místo alogenního štěpu a udržovány na místě použitím tkáňového adhesiva Vetbond, gázy napuštěné vaselinou a obvazu z pásky Vetrap. Střední doba přežití byla 11,1 dne (standardní odchylka 1,9).
Způsobem podle vynálezu byl kožní vzorek, transplantovaný příjemci, nejprve in vitro uveden po dobu 1 h do styku s roztokem 0,1 pg/ml fotosenzibilizátoru BPD. Kůže pak byla suspendována po dobu 30 min v roztoku elektrolytu, obsahujícím fetální bovinní sérum („FBS“), a vystavena červenému světlu diod emitujících světlo • · • · ·· ♦ · ···9 ···· („LED“) (10 J/cm2 při 690 ±10 nm). Po tomto ošetření světlem byla exponovaná kůže transplantována výše popsaným způsobem příjemcovské myši. Po dobu 8 dní po transplantaci bylo zvíře monitorováno na odmítavou reakci. Střední doba přežití aloimplantátů se zvýšila na 18,5 dne (standardní odchylka 2,1).
Výsledky jsou pro srovnání uvedeny v tabulce 1.
Tabulka 1 typ štěpu syngenní alogenní alogenní s předběžným ošetřením kůže dárce počet testovaných zvířat střední doba přežití (standardní odchylka) neomezená 11,1 dne (1,9)
18,5 dne (2,1)
Z výsledků vyplývá, že imunomodulační účinek fotodynamického ošetření na transplantovanou tkáň může vést k významně prodloužené době přežití implantátu.
Experiment byl zopakován pro porovnání aloimplantátů provedených podle vynálezu s obměnami koncentrace (od 0,25 do 1,0 pg/ml) fotosenzibilizátoru BPD se standardními kontrolními aloimplantáty. Výsledky těchto testů jsou shrnuty v tabulce
2.
Tabulka 2 typ štěpu (počet testovaných zvířat kontrolní aloimplantát (10) alogenní s předběžným ošetřením kůže dárce (5) alogenní s předběžným ošetřením kůže dárce (5) dávka fotosenzibizátoru a světla
1,0 pg/ml BPD, 10 J/cm2 LED
0,5 pg/ml BPD, 10 J/cm2 LED střední doba přežití (standardní odchylka) 7,5 dne (0,84)
11,0 dne (0,0)
14,3 dne (1,5) • ·
Protože se zdá, že dvojnásobné zvýšení množství fotosenzibilizátoru samo o sobě významně neprodloužilo dobu přežití implantátu, bylo postulováno, že imunomodulační účinky fotodynamického ošetření transplantované tkáně mohou záviset na selektivních účincích na buněčnou populaci v kůži a nemusejí být nutně důsledkem cytotoxického účinku fotodynamické terapie.
Příklad 5
Histologické vyšetření kůže určené k transplantaci
K vyšetření účinku ošetření kožních štěpů fotodynamickou terapií za podmínek, které vedou k prodloužení doby přežití, byly výše popsaným způsobem získány a ošetřeny vzorky kůže s výjimkou jiného rozmezí koncentrace fotosenzibilizátoru, tj. 0,25 nebo 0,50 pg/ml BPD. Některé tkáně byly inkubovány v roztoku elektrolytu samotném bez přítomnosti fotosenzibilizátoru jako kontrolní vzorky. Všechny tkáňové vzorky byly inkubovány po dobu 24 h, načež byl reprezentativní počet vystaven světlu. V případě světelné expozice bylo použito červené světlo s hodnotou energie 10 J/cm2.
Všechny vzorky pak byly umístěny do formalinu a podrobeny histologickému vyšetření. Tkáně inkubované v samotném elektrolytovém roztoku (kontrolní vzorky) nebo v roztoku 0,50 pg/ml BPD bez expozice světlem se jevily normální. Vzorky ošetřené buď 0,25 nebo 0,50 pg/ml BPD s následným ošetřením červeným světlem vykazovaly tyto změny: rozšíření jádra, perinukleární vakuolace, pokles eosinofilie epiteliálních buněk, zvýšení objemu cytoplasmy a zvětšení mezibuněčných prostorů mezi keratinocyty na povrchu epitelu. Na základě těchto histologických nálezů bylo postulováno, že fotodynamické ošetření podle vynálezu vedlo spíše než k usmrcení buněk k určitému stupni jejich poškození. Mechanismus tohoto neočekávaného necytotoxického působení není znám.
Odborníkovi je zřejmé, že popsaný vynález je možno obměňovat a modifikovat bez překročení jeho rozsahu, vyjádřeného patentovými nároky.
• ·
• ·
Claims (13)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Použití fotosenzibilizačního prostředku pro přípravu léčiva pro omezování odhojování aloimplantátů zahrnujících dárcovskou tkáň, obsahující buňky vykazující antigeny (APC), přičemž uvedené omezování odhojování aloimplantátů spočívá vtom, žea) dárcovská tkáň se uvede do styku s fotosenzibilizačním prostředkem pro získání modifikované dárcovské tkáně,b) modifikovaná dárcovská tkáň se vystaví světlu o vlnové délce absorbované uvedeným fotosenzibilizačním prostředkem po dobu dostatečnou ke zbavení dárcovské tkáně buněk APC ac) dárcovská tkáň zbavená buněk APC se transplantuje do tkáně příjemce.
- 2. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že dárcovskou tkání je kožní tkáň nebo pankreatické ostrůvky.
- 3. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že fotosenzibilizačním prostředkem je BPD.
- 4. Použití podle nároku 1, v y z n a č u j í c í se t í m , že alespoň některé vlnové délky uvedeného světla jsou ve viditelné části elektromagnetického spektra.
- 5. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že fotosenzibilizační prostředek je ve formě roztoku o rozmezí koncentrace 0,25 až 1,0 pg/ml.
- 6. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že během stupně b) je modifikovaná dárcovská tkáň suspendována v roztoku elektrolytu.··<·· ·· ···· • · • ·
- 7. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že dávka světla během stupně b) je asi 10 J/cm2.
- 8. Použití podle nároku 1, vyznačující se tím, že fotosenzibilizační prostředek je ve formě konjugátu zahrnujícího cílově specifickou složku.
- 9. Použití podle nároku 8, vyznačující se tím, že cílově specifický prostředek zahrnuje činidlo, které se specificky váže na APC.
- 10. Použití podle nároku 8, vyznačující se tím, že cílově specifickým činidlem je protilátka, její fragment nebo receptorový ligand pro receptor na povrchu buněk APC.
- 11. Použití podle nároku 8, vyznačující se tím, že cílově specifický prostředek zahrnuje činidlo, které se váže na značku, která se pak specificky váže na buňky APC.
- 12. Dárcovská tkáň se sníženou náchylností kodhojování aloimplantátů, připravená použitím léčiva podle nároku 1.
- 13. Kompozice, vyznačující se tím, že zahrnuje dárcovskou tkáň obsahující buňky vykazující antigen (APC) ve směsi s fotosenzibilizačním prostředkem.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US37170795A | 1995-01-13 | 1995-01-13 | |
| PCT/CA1996/000019 WO1996021466A1 (en) | 1995-01-13 | 1996-01-12 | Method to prevent transplant rejection |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ214697A3 true CZ214697A3 (en) | 1997-12-17 |
Family
ID=23465087
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ972146A CZ214697A3 (en) | 1995-01-13 | 1996-01-12 | Use of photosensitive preparation for preparing a medicament intended for restriction of aloimplant rejection |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0804238B1 (cs) |
| JP (1) | JP3702330B2 (cs) |
| KR (1) | KR19980701317A (cs) |
| CN (1) | CN1192157A (cs) |
| AT (1) | ATE277636T1 (cs) |
| AU (1) | AU693634B2 (cs) |
| CA (1) | CA2210109C (cs) |
| CZ (1) | CZ214697A3 (cs) |
| DE (1) | DE69633494T2 (cs) |
| ES (1) | ES2227578T3 (cs) |
| FI (1) | FI972953A (cs) |
| HU (1) | HUP9801123A3 (cs) |
| NO (1) | NO973251L (cs) |
| NZ (1) | NZ298355A (cs) |
| PL (1) | PL321246A1 (cs) |
| SK (1) | SK93797A3 (cs) |
| TW (1) | TW426518B (cs) |
| WO (1) | WO1996021466A1 (cs) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5882328A (en) * | 1995-01-13 | 1999-03-16 | Qlt Phototherapeutics, Inc. | Method to prevent transplant rejection |
| US6107325A (en) * | 1995-01-17 | 2000-08-22 | Qlt Phototherapeutics, Inc. | Green porphyrins as immunomodulators |
| US6096776A (en) * | 1995-01-17 | 2000-08-01 | Qlt Phototherapeutics, Inc. | Green porphyrins as immunomodulators |
| US5789433A (en) * | 1995-01-17 | 1998-08-04 | Quadra Logic Technologies, Inc. | Green porphyrins as immunomodulators |
| US5824080A (en) * | 1995-09-28 | 1998-10-20 | The General Hospital Corporation | Photochemistry for the preparation of biologic grafts--allografts and xenografts |
| AU7422098A (en) * | 1997-05-16 | 1998-12-11 | Qlt Phototherapeutics, Inc. | Green porphyrins as immunomodulators |
| US6364907B1 (en) | 1998-10-09 | 2002-04-02 | Qlt Inc. | Method to prevent xenograft transplant rejection |
| US6197294B1 (en) | 1998-10-26 | 2001-03-06 | Neurotech S.A. | Cell surface molecule-induced macrophage activation |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5028594A (en) * | 1988-12-27 | 1991-07-02 | Naxcor | Use of photodynamic compositions for cytotoxic effects |
| US5147289A (en) * | 1990-03-29 | 1992-09-15 | Therakos, Inc | Non-specific immune system enhancement |
| US5820872A (en) * | 1992-11-18 | 1998-10-13 | Yale University | Methods and compositions for improving the effectiveness of X-irradiation therapy for the treatment of an internal solid tumor |
-
1996
- 1996-01-12 AT AT96900220T patent/ATE277636T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-01-12 EP EP96900220A patent/EP0804238B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-01-12 CZ CZ972146A patent/CZ214697A3/cs unknown
- 1996-01-12 HU HU9801123A patent/HUP9801123A3/hu unknown
- 1996-01-12 CN CN96191452A patent/CN1192157A/zh active Pending
- 1996-01-12 ES ES96900220T patent/ES2227578T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-01-12 WO PCT/CA1996/000019 patent/WO1996021466A1/en active IP Right Grant
- 1996-01-12 CA CA002210109A patent/CA2210109C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-01-12 PL PL96321246A patent/PL321246A1/xx unknown
- 1996-01-12 DE DE69633494T patent/DE69633494T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-01-12 SK SK937-97A patent/SK93797A3/sk unknown
- 1996-01-12 KR KR1019970704706A patent/KR19980701317A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-01-12 JP JP52134496A patent/JP3702330B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-01-12 AU AU43818/96A patent/AU693634B2/en not_active Ceased
- 1996-01-12 NZ NZ298355A patent/NZ298355A/en unknown
- 1996-02-05 TW TW085101405A patent/TW426518B/zh not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-07-11 FI FI972953A patent/FI972953A/fi unknown
- 1997-07-11 NO NO973251A patent/NO973251L/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE69633494D1 (de) | 2004-11-04 |
| CA2210109A1 (en) | 1996-07-18 |
| SK93797A3 (en) | 1998-01-14 |
| CA2210109C (en) | 2008-09-23 |
| NO973251L (no) | 1997-09-08 |
| MX9705268A (es) | 1997-10-31 |
| AU4381896A (en) | 1996-07-31 |
| JP2001526623A (ja) | 2001-12-18 |
| HUP9801123A2 (hu) | 1998-08-28 |
| PL321246A1 (en) | 1997-11-24 |
| NO973251D0 (no) | 1997-07-11 |
| HUP9801123A3 (en) | 1999-12-28 |
| EP0804238B1 (en) | 2004-09-29 |
| WO1996021466A1 (en) | 1996-07-18 |
| FI972953A (fi) | 1997-09-08 |
| EP0804238A1 (en) | 1997-11-05 |
| JP3702330B2 (ja) | 2005-10-05 |
| FI972953A0 (fi) | 1997-07-11 |
| TW426518B (en) | 2001-03-21 |
| NZ298355A (en) | 2000-02-28 |
| ES2227578T3 (es) | 2005-04-01 |
| AU693634B2 (en) | 1998-07-02 |
| ATE277636T1 (de) | 2004-10-15 |
| CN1192157A (zh) | 1998-09-02 |
| DE69633494T2 (de) | 2005-10-20 |
| KR19980701317A (ko) | 1998-05-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5882328A (en) | Method to prevent transplant rejection | |
| US5135915A (en) | Method for the treatment of grafts prior to transplantation using TGF-.beta. | |
| US6287558B1 (en) | Devices containing cells or tissue and an agent that inhibits damage by a host cell molecule | |
| EP0621786B1 (en) | Induced tolerance to xenografts | |
| DEEG | Ultraviolet irradiation in transplantation biology: Manipulation of immunity and immunogenicity | |
| EP0804238B1 (en) | Method to prevent transplant rejection | |
| JPH07502727A (ja) | 接着分子に対する抗体を用いた同種移植片拒絶の防止 | |
| Hardy et al. | Pancreatic islet transplantation: immuno‐alteration with ultraviolet irradiation | |
| US5885570A (en) | Induction of tolerance with modified immunogens | |
| Teicher et al. | Modulation of alkylating agents by etanidazole and Fluosol-DA/carbogen in the FSaIIC fibrosarcoma and EMT6 mammary carcinoma | |
| Lambrigts et al. | Development of thymus autografts under the kidney capsule in the pig: a new “organ” for xenotransplantation | |
| Yamaguchi et al. | Prolonged survival of rat hepatic allografts pretreated with a single donor-specific blood transfusion: the distribution of donor cells expressing class I major histocompatibility complex antigens in the recipient | |
| MXPA97005268A (en) | Method to prevent the rejection of transplan | |
| Niimi et al. | Experimental parathyroid transplantation: human parathyroid grafts survived and functioned in mice treated with anti-CD4 monoclonal antibody | |
| JP3553941B2 (ja) | 異種移植片の胸腺 | |
| EDELMAN et al. | Fetal islet allotransplantation in rabbits | |
| JPS60502103A (ja) | 移植器官及び組織の受容性を高める方法 | |
| Hess et al. | Immunosuppression by succinylacetone. II. Prevention of graft-vs-host disease. | |
| Skarsgard | Invitro alteration of rat pancreatic islet immunogenicity in an allogeneic transplant model | |
| DEL PINO et al. | The effects of different schedules of total-body irradiation in heterotopic vascularized bone transplantation: An experimental study in the Lewis rat | |
| CA2414401A1 (en) | Targeted delivery of cytotoxic drugs a) to activated lymphocytes in patients with transplanted organs, b) as radiosensitizers to cancer cells in patients undergoing radiation therapy, and c) in vitamin-binding proteins as drug carriers in the diagnosis and treatment of cancer | |
| Toledo-Pereyra et al. | Improved survival after donor pretreatment with anti-lymphoblast globulin (ALG) in perfused kidneys: Experimental findings |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |