SK93797A3 - Method to prevent transplant rejection - Google Patents
Method to prevent transplant rejection Download PDFInfo
- Publication number
- SK93797A3 SK93797A3 SK937-97A SK93797A SK93797A3 SK 93797 A3 SK93797 A3 SK 93797A3 SK 93797 A SK93797 A SK 93797A SK 93797 A3 SK93797 A3 SK 93797A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- donor tissue
- tissue
- donor
- photosensitizer
- graft
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 41
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 title description 8
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 claims abstract description 85
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims abstract description 33
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 27
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 7
- 239000008151 electrolyte solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 4
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 claims description 4
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 claims description 2
- 102000006240 membrane receptors Human genes 0.000 claims description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 20
- 238000002428 photodynamic therapy Methods 0.000 abstract description 16
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 67
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 34
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 29
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 26
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 16
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 15
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 14
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 14
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 13
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 12
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 12
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 11
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 10
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 10
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 9
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 9
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 8
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 8
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 8
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 8
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 8
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 7
- 241000894007 species Species 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 6
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 6
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 5
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 5
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 5
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 5
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 5
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- UJKPHYRXOLRVJJ-MLSVHJFASA-N CC(O)C1=C(C)/C2=C/C3=N/C(=C\C4=C(CCC(O)=O)C(C)=C(N4)/C=C4\N=C(\C=C\1/N\2)C(C)=C4C(C)O)/C(CCC(O)=O)=C3C Chemical class CC(O)C1=C(C)/C2=C/C3=N/C(=C\C4=C(CCC(O)=O)C(C)=C(N4)/C=C4\N=C(\C=C\1/N\2)C(C)=C4C(C)O)/C(CCC(O)=O)=C3C UJKPHYRXOLRVJJ-MLSVHJFASA-N 0.000 description 4
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 4
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 4
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000002165 photosensitisation Effects 0.000 description 4
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- MHIITNFQDPFSES-UHFFFAOYSA-N 25,26,27,28-tetrazahexacyclo[16.6.1.13,6.18,11.113,16.019,24]octacosa-1(25),2,4,6,8(27),9,11,13,15,17,19,21,23-tridecaene Chemical class N1C(C=C2C3=CC=CC=C3C(C=C3NC(=C4)C=C3)=N2)=CC=C1C=C1C=CC4=N1 MHIITNFQDPFSES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 3
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 3
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 230000000781 anti-lymphocytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 3
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 3
- 229960000587 glutaral Drugs 0.000 description 3
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 3
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 3
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UPXRTVAIJMUAQR-UHFFFAOYSA-N 4-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound C1C(C(O)=O)N(C(=O)OC(C)(C)C)CC1NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 UPXRTVAIJMUAQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037260 Atherosclerotic Plaque Diseases 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 2
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 2
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 2
- 229920001651 Cyanoacrylate Polymers 0.000 description 2
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699694 Gerbillinae Species 0.000 description 2
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 2
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 2
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 2
- FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M Methylprednisolone sodium succinate Chemical compound [Na+].C([C@@]12C)=CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@](O)(C(=O)COC(=O)CCC([O-])=O)CC[C@H]21 FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 206010029155 Nephropathy toxic Diseases 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003633 blood substitute Substances 0.000 description 2
- 229960002802 bromocriptine Drugs 0.000 description 2
- OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N bromocriptine Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@]2(C(=O)N3[C@H](C(N4CCC[C@H]4[C@]3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=C(Br)NC3=C1 OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 2
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 2
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 2
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- JJJFUHOGVZWXNQ-UHFFFAOYSA-N enbucrilate Chemical compound CCCCOC(=O)C(=C)C#N JJJFUHOGVZWXNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 2
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 2
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 2
- 229940124589 immunosuppressive drug Drugs 0.000 description 2
- 238000002650 immunosuppressive therapy Methods 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229960004184 ketamine hydrochloride Drugs 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 229960001810 meprednisone Drugs 0.000 description 2
- PIDANAQULIKBQS-RNUIGHNZSA-N meprednisone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)CC2=O PIDANAQULIKBQS-RNUIGHNZSA-N 0.000 description 2
- 229960004584 methylprednisolone Drugs 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000007694 nephrotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000002020 noncytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 229950008618 perfluamine Drugs 0.000 description 2
- 229950011087 perflunafene Drugs 0.000 description 2
- UWEYRJFJVCLAGH-IJWZVTFUSA-N perfluorodecalin Chemical compound FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)[C@@]2(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)[C@@]21F UWEYRJFJVCLAGH-IJWZVTFUSA-N 0.000 description 2
- JAJLKEVKNDUJBG-UHFFFAOYSA-N perfluorotripropylamine Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)N(C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F JAJLKEVKNDUJBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940109328 photofrin Drugs 0.000 description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 2
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 2
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 description 2
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 2
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 2
- 239000003106 tissue adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 229940099259 vaseline Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical class CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- QZCJOXAIQXPLNS-UHFFFAOYSA-N 1,1,2,2,3,3,4,4,4a,5,5,6,6,7,7,8,8,8a-octadecafluoronaphthalene 4-(2-aminoethyl)benzene-1,2-diol Chemical compound NCCc1ccc(O)c(O)c1.FC1(F)C(F)(F)C(F)(F)C2(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C2(F)C1(F)F QZCJOXAIQXPLNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLVAJLBZYYGQNL-UHFFFAOYSA-N C12CC=C(N1)C=C1C=CC(=N1)C=C1C=CC(N1)=CC=1C3=C(C(N=1)=C2)C=CC=C3 Chemical class C12CC=C(N1)C=C1C=CC(=N1)C=C1C=CC(N1)=CC=1C3=C(C(N=1)=C2)C=CC=C3 PLVAJLBZYYGQNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JUDGRMABQJKRPW-XIADSQHASA-N CCC1=C(/C=C2\N=C(/C(\CC3=O)=C(/[C@@H](CCC(O)=O)[C@@H]4C)\N/C\4=C\C(C(C)=C4C=C)=N/C\4=C4)C3=C\2C)NC/4=C1C Chemical compound CCC1=C(/C=C2\N=C(/C(\CC3=O)=C(/[C@@H](CCC(O)=O)[C@@H]4C)\N/C\4=C\C(C(C)=C4C=C)=N/C\4=C4)C3=C\2C)NC/4=C1C JUDGRMABQJKRPW-XIADSQHASA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010007617 Cardio-respiratory arrest Diseases 0.000 description 1
- 241000218645 Cedrus Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical class ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 229920005682 EO-PO block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 206010014950 Eosinophilia Diseases 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 208000012671 Gastrointestinal haemorrhages Diseases 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- XVEBRHQOOYJTHD-WORMITQPSA-N OC(C)C=1C(=C2NC1C=C1C=CC(=N1)C=C1C=CC(N1)=CC=1C=CC(N1)=C2)[2H] Chemical class OC(C)C=1C(=C2NC1C=C1C=CC(=N1)C=C1C=CC(N1)=CC=1C=CC(N1)=C2)[2H] XVEBRHQOOYJTHD-WORMITQPSA-N 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 101710160107 Outer membrane protein A Proteins 0.000 description 1
- 241001504519 Papio ursinus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Chemical class 0.000 description 1
- 208000011963 Substance-induced psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N Vinyl ether Chemical class C=COC=C QYKIQEUNHZKYBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000002390 adhesive tape Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000000961 alloantigen Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 description 1
- 238000002583 angiography Methods 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000003409 anti-rejection Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 210000003293 antilymphocyte serum Anatomy 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Chemical class 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 210000001953 common bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 150000001923 cyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 239000012024 dehydrating agents Substances 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 239000008344 egg yolk phospholipid Substances 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000001723 extracellular space Anatomy 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009760 functional impairment Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 208000030304 gastrointestinal bleeding Diseases 0.000 description 1
- 201000004528 gastrointestinal lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000003709 heart valve Anatomy 0.000 description 1
- 229960003569 hematoporphyrin Drugs 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- HUXSMOZWPXDRTN-UHFFFAOYSA-N methyl 16-ethenyl-11-ethyl-4-hydroxy-22-(3-methoxy-3-oxopropyl)-12,17,21,26-tetramethyl-7,23,24,25-tetrazahexacyclo[18.2.1.15,8.110,13.115,18.02,6]hexacosa-1,4,6,8(26),9,11,13(25),14,16,18(24),19-undecaene-3-carboxylate Chemical compound CCC1=C(C2=NC1=CC3=C(C4=C(C(C(=C5C(C(C(=CC6=NC(=C2)C(=C6C)C=C)N5)C)CCC(=O)OC)C4=N3)C(=O)OC)O)C)C HUXSMOZWPXDRTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 201000003144 pneumothorax Diseases 0.000 description 1
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- -1 porphyrin compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000004033 porphyrin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960005088 urethane Drugs 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000002747 voluntary effect Effects 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
- A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
- A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Transplanting Machines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Description
Spôsob obmedzovania odhojovania aloimplantátov zahŕňajúcich darcovské tkanivo, obsahujúce bunky vykazujúce antigény (APC), pričom a) darcovské tkanivo sa uvedie do styku s fotosenzibilizačným prostriedkom na získanie modifikovaného darcovského tkaniva, b) modifikované darcovské tkanivo sa vystav! svetlu s vlnou dĺžkou absorbovanou uvedeným fotosenzibilizačným prostriedkom v čase dostatočnom na zbavenie darcovského tkaniva buniek APC a c) darcovské tkanivo zbavené buniek APC sa transplantuje do tkaniva príjemcu. Ošetrením darcovského tkaniva fotodynamickou terapiou sa významne predĺži čas prežitia transplantátov, hlavne kožných aloimplantátov. Fotosenzibilizátor môže byť tiež súčasťou konjugátu, obsahujúceho cieľovo špecifickú jednotku.
γν
Spôsob prevencie odhojovania transplantátov
Oblasť techniky
Vynález sa týka spôsobu terapeutického dodávania aloimplantátov a prevencie ich odhojovania príjemcom. Hlavne sa týka ošetrenia tkaniva darcu metódou fotodynamickej terapie za účelom odstránenia buniek obsahujúcich antigény z tkaniva a zníženia imunogenity v ňom obsiahnutých buniek.
Doterajší stav techniky
Úspech transplantácie aloimplantátu hostiteľovi závisí od takých faktorov, ako sú antigény v transplantovanom tkanive, ktoré sú príjemcom rozpoznávané ako cudzie a môžu vyvolať odmietavú reakciu, ďalej bunky v imunitnom systéme príjemcu, ktoré sprostredkovávajú odhojovanie, a reakcie, ktoré modifikujú buď výskyt cudzieho antigénu alebo bunkovú reakciu. Je známe, že významná zložka odhojovania aloimplantátov súvisí s prítomnosťou neparenchymálnych buniek (cestujúcich leukocytov) v darcovskom tkanive.
Je tiež známe, že významnú úlohu pri sprostredkovaní útoku tkaniva štepu proti príjemcovi zohrávajú produkty hlavného histokompatibilného systému (major histocompatibility complex, MHC). MHC je obvykle komplexný, pretože zahrnuje mnoho rôznych miest, z ktorých každé kóduje zvláštne povrchové antigény buniek, a pretože tieto miesta majú rozsiahly polymorfizmus. Miesta MHC spadajú na základe distribúcie svojho tkaniva, štruktúry exprimovaných antigénov a ich funkcií do jednej z dvoch tried, triedy 1 alebo triedy II. Antigény triedy I, prítomné na všetkých jadrových bunkách, slúžia ako primárne ciele pre cytotoxické T (CD8+) lymfocyty. Antigény triedy II nie sú v tkanive natoľko rozšírené a slúžia ako primárne ciele pre pomocné T (CD8) lymfocyty.
Polymorfné formy jednotlivých miest ľudského leukocytového antigénu (HLA) MHC u ľudí sú rozpoznávané protilátkami a rôznymi metódami in vitro, ktoré merajú rozpoznávanie Tlymfocytov. Tieto reakcie, sprostredkované príjemcovým rozpoznaním polymorfizmu u darcu, korelujú so silnými odmietavými reakciami, ktoré prebiehajú in vivo. Skúmanie bunkovej bázy
Ί odhojovania transplantátov štúdiami ako in vitro, tak in vivo odhalilo, že odmietavej reakcie sa zúčastňujú ako lymfocyty CD4+, tak CD8+.
Pokusy predĺžiť prežitie aloimplantátov i xenoimplantátov po transplantácii ako na experimentálnych modeloch, tak aj v medicínskej praxi, sa sústreďujú hlavne na potlačenie imunitného aparátu príjemcu. Cieľom tejto terapie je preventívna imunosupresia a/alebo liečba odhojovania štepov.
Ako príklady prostriedkov, používaných pre imunosupresiu, je možné uviesť cytotoxické liečivá, antimetabolity, kortikosteroidy a antilymfocytické sérum. Klinický úspech transplantácií významne zväčšili nešpecifické imunosupresivne prostriedky, ktoré sa ukázali ako zvlášť účinné v preventívnej imunosupresii (azatioprín, bromokryptin, metylprednizolón, prednizón a cyklosporín A). Nefrotoxicita cyklosporínu A po renálnej transplantácii bola znížená súčasným podávaním steroidov, ako je prednizolón alebo prednizolón v spojení s azatioprínom. Ďalej boli obličky úspešne transplantované s použitím anti-lymfocytového globulínu nasledovaného cyklosporínom A. Iný postup spočíva v celkovom ožarovaní lymfatických uzlín príjemcu pred transplantáciou s minimálnou imunosupresiou po transplantácii. Liečba odhojovania zahrnuje použitie steroidov. 2-amino-6-aryl-5-substituovaných pyrimidínov, heterológneho anti-lymfocytového globulínu a monoklonálnych protilátok k rôznym populáciám leukocytov.
Hlavnou komplikáciou imunosupresívnych liečiv sú infekcie. Okrem toho je systémová imunosupresia sprevádzaná nežiadúcimi toxickými účinkami, napríklad nefrotoxicitou, ak sa používa po renálnej transplantácii cyklosporín A, a znížením hladiny hemopoietických kmeňových buniek. Imunosupresivne liečivá môžu tiež viesť k obezite, zlému hojeniu rán, steroidnej hypoglykémii. steroidnej psychóze, leukopénii, gastrointestinálnemu krvácaniu, lymfómu a hypertenzii.
Z dôvodu týchto komplikácií hľadajú transplantační imunológovia metódy potlačovania imunitnej reaktivity antigénovo špecifickým spôsobom tak, aby sa stratila len reakcia na aloantigén darcu. Takáto špecifická imunosupresia sa obvykle dosahuje modifikáciou buď antigenity transplantovaného tkaniva alebo špecifických buniek, schopných sprostredkovať odhojovanie. V určitých prípadoch závisí skutočnosť, či bude vyvolaná imunita alebo tolerancia, od spôsobu, ktorým je antigén dodaný imunitnému systému. Ďalšie stratégie proti odhojovaniu sa zameria3 vajú na elimináciu alebo oslabenie cestujúcich leukocytov, nesúcich MHC, t.j. buniek vykazujúcich antigén („antigen-presenting celíš“, APC), v tkanivách darcu pred transplantáciou.
Medzi metódy, ktoré boli opísané za týmto účelom, patrí predĺžená doba kultivácie darcovského tkaniva (Lafferty a spol., „Thyroid Allograft Immunogenicity is Reduced after a Periód in Organ Culture“, Science 188:259 (1975)). Zistilo sa, že predbežné ošetrenie tkanív aloimplantátov kultiváciou v tkanivovej kultúre pred transplantáciou vedie na dvoch myších modeloch k trvalému prijatiu cez bariéry MHC (Lafferty a spol., Transplantation 22:138-49 (1975); Bowen a spol., Lancet 2:585-86 (1979)). Bola vyslovená hypotéza, že toto ošetrenie vedie k odstráneniu cestujúcich lymfatických buniek, a teda k absencii stimulačnej bunkovej populácie nutnej pre imunogenitu tkaniva. Boli napríklad použité niektoré vzájomne si zodpovedajúce dvojice HLA darca - príjemca, napríklad u vaskulárnych a obličkových štepov, a niekedy pred krvnými transfúziami.
Darcovské tkanivo bola ošetrované rastovým faktorom, napríklad TGF-beta (Czarniecki a spol., patent US č. 5,135.915, vydaný 4.8.1992), niekedy v kombinácii s predĺženou dobou kultivácie (Orton, patent US č. 5,192.312, vydaný 9.3.1993).
Darcovské tkanivo môže byť ošetrené UV žiarením (Reemtsma a spol., patent US č. 4,946.438, vydaný 7.8.1990, a Lau a spol., „Prolongantion of Rat Islet Allograft Survival by Direct Ultraviolet Irradiation of the Graft“, Science 223:607 (1984)), niekedy v spojení s mikroenkapsuláciou (Weber a spol., patent US č. 5,227.298, vydaný 13.7.1993). Iní pracovníci používali samotné bariérové membrány, ako je dvojvrstva, zahrnujúca prvú necytotoxickú vrstvu a druhú vonkajšiu vrstvu biokompatibilného a semipermeabilného polymérneho materiálu, opisovaná Cochrumom, patent US č. 4,696.286, vydaný 29.9.1987.
Darcovské tkanivo bolo ošetrované rozmanitými látkami, napríklad topickou aplikáciou cyklosporínu na kožné štepy, ako je opísané Hewittom a spol., patent US č. 4,996.193, vydaný 26.2.1991, a perfúziou darcovskej obličky lymfocytickým chalónom, ako uvádza Jones a spol., patent US č. 4,294.824, vydaný 13.10.1981. Doba prežitia kožných štepov bola predĺžená ošetrením kortizónom, talidomidom alebo uretánom in vitro pred implantáciou laboratórnemu zvieraťu. Množstvo liečiva, aplikovaného lokálne na koži, je menšie ako množstvo potrebné na dosiahnutie podobného účinku systémovou injekciou liečiva príjemcovi. Darcovská koža bola ošetrovaná pred transplantáciou in vitro streptokinázou/streptodornázou, preparátmi RNA a DNA príjemcu alebo roztokmi glutaraldehydu za účelom zníženia antigenity implantovanej kože.
Prepracovanejšie prístupy zahrnujú ošetrenie darcovského tkaniva monoklonálnou protilátkou zameranou proti produktu MHC spolu s komplementom (Faustman a spol., „Prolongation of Murine Islet Allograft Survival by Pretreatment of Islets with Antibody Directly to la Determinants“, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:5156 (1981)) alebo ošetrenie darcovského tkaniva imunokonjugátom protilátky zameranej proti MHC (Shizuru, J.A. a spol., „Inhibition of Rat Mixed Lymphocyte Pancreatic Islet Cultures with Anti-Ia Immunotoxin“. Transplantation 42:660 (1986)). Tieto metódy poskytli premenlivé výsledky. Existuje teda potreba spôsobu predĺženia prežitia štepu pri transplantačných operáciách, ktorý by minimalizoval toxicitu a ďalšie nepriaznivé účinky vznikajúce použitím veľkých dávok imunosupresív.
Metóda používaná podľa vynálezu na selektívne ničenie týchto buniek APC zahrnuje kontakt darcovského tkaniva s fotosenzibilizátorom, vystavenie pôsobeniu svetla a potom transplantáciu. Podobné fotodynamické metódy boli už predtým použité primárne na ničenie tkanív, ako sú nádorové tkanivá, aterosklerotické plaky, povrchové onemocnenia kože a nežiadúce patogény v krvi (Levy a spol., patenty US č. 5,283.255, vydaný 1.2.1994, 4,883.790, vydaný 28.11.1989, 4,920.143, vydaný 24.4.1990, 5,095.030, vydaný 10.3.1992, a 5,171.749, vydaný 15.12.1992, na ktoré sa tu týmto odkazuje). Viď tiež Dougherty a spol., patenty US č. 4,932.934, vydaný 12.6.1990, 4,889.129, vydaný 26.12.1989, 5,028.621, vydaný 2.7.1991, 4,866.168, vydaný 12.9.1989, 5,145.863, vydaný 8.9.1992. a 4,649.151, vydaný 10.3.1987, na ktoré sa tu tiež odkazuje.
Napríklad patent US č. 4,866.168 Doughertyho a spol. opisuje prípravok, predávaný pod názvom „Photofrin II“, ktorý sa získava izoláciou vysokoagregátového podielu molekulovej hmotnosti hematoporfyrínového derivátu. Ako ďalší konkrétny príklad opisuje patent US č. 4,883.790 Levyho a spol. použitie skupiny príbuzných zlúčenín, označovaných „monohydrobenzoporfyríny“, na analogické účely.
Ďalej bolo opísané použitie mnohých rôznych fotosenzibilizátorov s podobnou štruktúrou. Viď napríklad deriváty (l-hydroxyetyl)deuteroporfyrínu, hydrofóbne étery hematoporfyrínu a zlúčeniny pripravené z metylfeoforbidu (Pandey a spol., patent US č. 5,002.962, vydaný 26.3.1991), konjugáty pyrofeoforbidu (Pandey a spol., patent US č. 5,314.905), deriváty bakte riochlorofylu-a (Dougherty, patenty US č. 5,171.741 a 5,173.504), diméry viazané na monovinyl- a divinylétery (Ward, patent US č. 4,961.920), benzoporfyrínové deriváty (Allison a spol., patent US č. 5,214.036), dibenzoporfyrínové zlúčeniny (Dolphin a spol., patenty US č. 5,308.608 a 5,149.708), takzvané „zelené“ porfyríny, ako sú deriváty monobenzoporfýrínu (Jamieson a spol., patent US č. 5,087.636), porfyrínové zlúčeniny obsahujúce exocyklické dvojné väzby (Chang a spol., patent US č. 5,064.952) a sodné porfimérové zlúčeniny (Clauss a spol., patent US č. 5,244.914). Na opisy všetkých týchto patentov sa tu týmto odkazuje. Všeobecne sa na tieto liečivá v prvom priblížení nazerá z hľadiska použiteľnosti vo fotodynamickej terapii ako na vzájomne zameniteľné.
Hoci sa fotodynamická terapia zaoberá primárne liečbou nádorových buniek, už predtým sa objavili ďalšie aplikácie. Tieto fotosenzibilizačné liečivá je možné napríklad používať v postupoch pre elimináciu aterosklerotických plakov a pri ošetrovaní krvi a iných telových tekutín za účelom ničenia infekčných organizmov. Fotodynamická terapia však zjavne doposiaľ nebola použitá na elimináciu cestujúcich leukocytov v tkanive darcovského aloimplantátu.
Zvláštna výhoda vynálezu spočíva v tom, že na rozdiel od terapeutických postupov zahrnujúcich podávanie fotosenzibilizačného liečiva organizmu je možné tkanivo najvhodnejšie ošetrovať in vitro pred skutočnou transplantačnou procedúrou. Týmto spôsobom sú podstatne odstránené problémy spojené so zaistením správnej hladiny expozície svetlu napríklad v prípade konjugátu spojeného s cieľovými bunkami vnútri organizmu.
Ďalej sa spôsobom podľa vynálezu získajú štepy, ktoré sú vo vhodných hostiteľoch imunologický stabilné, biologicky funkčné a schopné uchovávania pred transplantáciou. Vynález tak umožňuje vytvorenie banky fotodynamicky ošetrených štepov, ktoré môžu byť použité na krátkodobé uchovávanie.
Podstata vynálezu
Vynález poskytuje postup pre minimalizáciu odhojovania transplantátov v živočíšnych subjektoch. Pred transplantáciou sa darcovské tkanivo, ktorá obsahuje bunky vykazujúce antigén (APC), uvedie do styku s fotosenzibilizačným prostriedkom a vystaví svetlu s vlnovou dĺžkou absorbovanou týmto fotosenzibilizačným prostriedkom počas doby potrebnej na odstránenie
APC. Týmto ošetrením sa neusmrtia keratinocyty, ale môže sa zmeniť ich expresia antigénov triedy I a/alebo II, rovnako ako cytokíny, ktoré vylučujú, takže sa zníži imunogenita kože samotnej.
V jednom uskutočnení je fotosenzibilizačný prostriedok vo forme konjugátu, zahrnujúceho cieľovo špecifický komponent, za účelom zvýšenia interakce medzi fotosenzibilizačným prostriedkom a cieľovými APC. Fotosenzibilizačné liečivo sprostredkuje deštrukciu APC, ak je aloimplantát ožiarený pri vhodnej vlnovej dĺžke, absorbovanej fotosenzibilizačným prostriedkom.
Podľa ďalej uvedeného podrobného opisu sa podľa vynálezu darcovské tkanivo pred transplantáciou uvedie do styku s fotosenzibilizačným prostriedkom. Výraz „darcovské tkanivo“ zahrnuje akýkoľvek typ transplantovateľného alebo implantovateľného tkaniva z darcu iného ako je príjemca, ktoré obsahuje APC. Darcovským tkanivom, používaným podľa vynálezu, môže byť akékoľvek z rozmanitých tkanív, napríklad mäkké tkanivo, ako je amniotická blana novorodenca, kostná dreň, hematopoietické prekurzorové bunky, kolagén a kostný proteín na stimuláciu rastu chrupavky, orgány, ako je koža, srdce, pečeň, slezina, pankreas, lalok štítnej žľazy, pľúca, obličky, tubuláme orgány (napríklad črevo, krvné cievy alebo pažerák), a časti orgánov, ako sú srdcové chlopne a izolované bunky alebo zhluky buniek, ako sú ostrovčekové bunky pankreasu alebo pečeňové bunky.
Tubulárne orgány môžu byť používané k náhrade poškodených častí pažeráka, krvných ciev alebo žlčovodu. Kožné štepy môžu byť používané nielen pre popáleniny, ale aj na úpravu poškodeného čreva alebo na uzavretie určitých defektov, ako je bráničná prietrž. Vo zvlášť výhodnom uskutočnení je darcovským tkanivom kožné tkanivo alebo pankreatické ostrovčekové bunky.
Výraz „štep“, ako je tu používaný, sa vzťahuje na biologický materiál pochádzajúci od darcu, pre transplantáciu príjemcovi. Výraz „transplantát“ a rôzne jeho varianty sa vzťahuje na vloženie štepu do príjemcu, či už je transplantácia syngénna (kde darca a príjemca sú geneticky identickí), alogénna (kde darca a príjemca sú rôzneho genetického pôvodu, ale rovnakého druhu) alebo xenogénna (kde darca a príjemca patria k rôznym druhom). Podľa typického scenára teda je hostiteľom človek a štepom je izotransplantát, pochádzajúci od človeka rovnakého alebo iného genetického pôvodu. Podľa iného scenára pochádza štep z odlišného druhu od toho, kto rému sa transplantuje, vrátane zvierat fylogenicky značne vzdialených druhov, napríklad v prípade transplantácie srdca paviána do ľudského hostiteľa.
Darcovské tkanivo môže byť odobraté z akéhokoľvek zdroja, či ide o mŕtvoly alebo živých darcov. Príklady vhodných darcov sú živé zvieratá, ako sú laboratórne zvieratá, napríklad psy, mačky, myši, krysy, skokušky (gerbily), morčatá, kravy, primáty, alebo ľudia. Výhodne sú darcami cicavce vrátane človeka.
Ľudskými darcami sú prednostne dobrovoľní, pokrvne príbuzní darcovia s normálnym výsledkom lekárskeho vyšetrenia a s rovnakou hlavnou krvnou skupinou ABO, pretože prekračovanie bariér medzi hlavnými krvnými skupinami môže brániť prežitiu aloimplantátu. Je však možné transplantovať napríklad obličku darcu typu 0 do príjemcu A, B alebo AB.
Výraz „aloimplantát“ sa vzťahuje na bunky a tkanivo, ktoré pochádzajú alebo sú odvodené od darcu rovnakého druhu ako je príjemca. Prednostne je darca rovnakého druhu ako príjemca.
Výraz „príjemca“, ako je tu používaný, sa vzťahuje na akéhokoľvek kompatibilného hostiteľa transplantátu. Výrazom „kompatibilný“ sa rozumie hostiteľ, ktorý darovaný štep prijme. Príklady potenciálne použiteľných príjemcov sú zvieratá, prednostne cicavce, ako sú hospodárske zvieratá, napríklad kone, kravy alebo ovce, domáce zvieratá, napríklad psy alebo mačky, laboratórne zvieratá, ako sú myši, krysy, gerbily alebo morčatá, alebo primáty, napríklad opice alebo ľudia. Hlavne je príjemcom človek. Ak je ako darcom, tak príjemcom štepu človek, potom sa pre zlepšenie histokompatibility oba kombinujú z hľadiska antigénov HLA triedy II.
Fotosenzibilizačné prostriedky
Na použitie podľa vynálezu je všeobecne vhodná akákoľvek z rôznych zlúčenín, ktoré sa používajú v klasickej fotodynamickej terapii. Ako je odborníkom známe, hlavnou skupinou známých fotosenzibilizačných prostriedkov sú zlúčeniny príbuzné porfyrínom. Ako je o niečo podrobnejšie opísané vyššie, zahrnujú tieto liečivá hematoporfyrínové deriváty, vysokomolekulárnu frakciu hematoporfyrínového derivátu, predávanú ako fotosenzibilizačný prostriedok Photofrin II, a jej aktívne zložky, rôzne syntetické deriváty porfyrínov, ako sú monohydrobenzoporfyríny, označované tiež ako benzoporfyrínové deriváty alebo BPD, zelené porfyríny a rôzne iné poly8 cyklické zlúčeniny, o ktorých sa má za to, že pri ožarovaní generujú singletový kyslík, ktorý spôsobuje deštrukciu tkaniva. Spôsoby prípravy vhodných fotosenzibilizačných zlúčenín sú plne opísané vo vyššie uvedených patentoch a v publikáciách, v nich citovaných. Prednostne je fotosenzibilizačným prostriedkom BPD.
Kritickou charakteristikou akéhokoľvek fotosenzibilizačného prostriedku je v princípe jeho tendencia vykazovať pri ožiarení svetlom s vlnovou dĺžkou, ktorá môže byť fotosenzibilizátorom absorbovaná, cytotoxický účinok na bunky, v ktorých je lokalizovaný. Hoci sa má za to, že v mnohých prípadoch je cytotoxický účinok výsledkom tvorby singletového kyslíka pri expozícii, nie je presný spôsob uskutočnenia pre vynález kritický.
Ako je do určitej miery diskutované vo vyššie uvedených patentoch Doughertyho a spol., s účinnými fotosenzibilizačnými prostriedkami sú typicky spojené početné ďalšie špecifické vlastnosti. Medzi vlastnosti fotosenzibilizátorov všeobecne, ktoré majú zvláštny význam pri uskutočňovaní vynálezu, patrí relatívna absencia toxicity voči bunkám pri absencii fotochemického účinku a ľahké vymiznutie z tkanív v neprítomnosti cieľovo špecifickej interakcie medzi konkrétnymi bunkami a fotosenzibilizátorom.
Fotosenzibilizačné prostriedky podľa vynálezu majú prednostne absorpčné spektrum, ktoré je v rozmedzí vlnových dĺžok medzi 350 nm a 1200 nm a ktoré môže byť o sebe známym spôsobom prispôsobené požadovanej penetrácii a prednostne leží medzi asi 400 a 900, hlavne medzi 600 a 800 nm.
Fotosenzibilizačné prostriedky podľa vynálezu sa dávkujú spôsobom konzistentným s dobrou lekárskou praxou s uvážením charakteru transplantácie a upravovanej poruchy, druhu darcu, zdravotného stavu konkrétneho príjemcu, prítomnosti akéhokoľvek iného liečiva v darcovskom tkanive alebo v organizme príjemcu a ďalších faktorov, známych praktikom. Terapeuticky účinné množstvo fotosenzibilizátora, uvádzané do styku so štepom, je množstvo, ktoré účinne znižuje imunogenitu štepu, takže je kompatibilný s príjemcom a nie je odmietnutý. Všeobecne je účinné množstvo pre tento účel v rozmedzí asi 0,1 až asi 10 gg/ml, prednostne asi 0,1 až asi 2,0 pg/ml a hlavne asi 0,25 až asi 1,0 gg/ml.
Fotosenzibilizačný prostriedok môže byť kombinovaný s jedným alebo viac imunosupresívami pre posilnenie imunosupresívneho účinku na štep. Účinné množstvo týchto ďalších prostriedkov závisí od množstva fotosenzibilizátora prítomného vo formulácii, typu transplantátu,
Q X dôvodu transplantácie, miesta dodania, spôsobu podania, rozvrhu aplikácie, ďalších vyššie diskutovaných faktorov a iných faktorov známych praktikom.
Fotosenzibilizačný prostriedok sa typicky formuluje zmiešaním pri teplote miestnosti, vhodnom pH a požadovanom stupni čistoty s jedným alebo viac fyziologicky prijateľnými nosičmi. t.j. nosičmi, ktoré sú pri použitom dávkovaní a koncentrácii voči príjemcovi netoxické. Hodnota pH formulácie závisí hlavne od konkrétneho použitia a koncentrácie fotosenzibilizátora, ale prednostne sa pohybuje kdekoľvek od asi 3 do asi 8.
Fotosenzibilizátor sa kvôli zabráneniu adhézie k nádobám, kde je umiestený, ku ktorej dochádza pri hodnotách pH blížiacich sa fyziologickej hodnote, a na zaistenie aktivácie fotosenzibilizátora prednostne udržuje na neutrálnom pH (napríklad asi 6,5 až asi 7,5). Vhodným uskutočnením je teda formulácia v roztoku elektrolytu obsahujúcom rovnovážny soľný pufer s pH 6,5, ale neobsahujúcom fetálne bovinné sérum („FBS“). Dôvodom vypustenia FBS je obsah jeho antigénnych zložiek, ktoré by mohli exacerbovať reakciu aloimplantátu. Pokiaľ fotosenzibilizátor priľne k nádobám, v ktorých sú ošetrované štepy, pridá sa poprípade vhodná neantigénna zložka, ako je ľudský sérový albumín, v množstve, ktoré neinterferuje s fotosenzibilizátorom pri perfúzii alebo adhézii k ošetrovanému štepu.
Ak sa má formulácia fotosenzibilizátora aplikovať topicky, napríklad ak sa natiera na kožný štep pred transplantáciou, je výhodné používať viskózny roztok, ako je gél, skôr ako neviskózny roztok. Gél môže byť vytvorený napríklad zmiešaním roztoku fotosenzibilizátora s gélotvorným činidlom, ako je polysacharid, prednostne vodorozpustný polysacharid, napríklad kyselina hyalurónová, škroby a deriváty celulózy, napríklad metylcelulóza, hydroxyetylcelulóza a karboxymetylcelulóza. Keď je v gélovej formulácii prítomný polysacharid, je obvykle prítomný v množstve v rozmedzí asi 1 až 90 % hmotnostných, prednostne asi 1 až 20 % hmotnostných gélu. Príklady ďalších vhodných polysacharidov na tento účel a stanovenie rozpustnosti polysacharidov možno nájsť v dokumente EP 267015, zverejnenom 11.5.1988, na opis ktorého sa tu odkazuje.
Keď má byť ošetrovaný štep uchovávaný počas akejkoľvek doby, je fotosenzibilizátor prednostne formulovaný alebo pridaný k emulzii perfluórovanej zlúčeniny (pôsobiacej ako náhradka krvi) na umožnenie prístupu vysokých koncentrácií kyslíka ku štepu. Tiež emulzie zahrnujú perfluórovanú zlúčeninu, ako je perfluórdekalín a/alebo perfluórtripropylamín, emulgovanú pomocou povrchovo aktívnej látky vo vode. Perfluórovaná zlúčenina sa volí tak, aby bola čo najmenej toxická voči príjemcovi.
Príklady vhodných povrchovo aktívnych látok zahrnujú poloxamérové povrchovo aktívne látky, ktoré predstavujú rad molekúl, tvorených blokovými kopolymérmi etylénoxidu a propylénoxidu, buď samotnými alebo v zmesi s fosfolipidom, ako je vaječný lecitin. Ďalším príkladom emulzie, komerčne dostupnej od Green Cross, je Fluosol-DA 20 %, ktorý produkt obsahuje perfluórdekalín a perfluórtripropylamín, emulgovaný poloxamérovým surfaktantom Pluronic F-68. Emulzie perfluórovaných zlúčenín a ich účinok na cicavce sú úplnejšie opísané vBollands a spoi., J. Pharm. Pharmacol. 39:1021-1024 (1987), na čo sa tu týmto odkazuje.
Formulácia fotosenzibilizátora na použitie pri terapeutickej aplikácii je prednostne sterilná. Sterilita sa ľahko dosiahne sterilnou filtráciou cez (0,2pm) membrány. Akonáhle je formulovaný a sterilizovaný, nemusí byť fotosenzibilizátor stabilný voči oxidačnej denaturácii. Pre uchovávanie sú však vhodné lyofilizované formulácie pre rekonštitúciu, napríklad s obsahom BPD.
Cielené systémy
Použitie týchto fotosenzibilizátorov na deštrukciu schopnosti darcovského tkaniva vyvolať reakciu štepu voči hostiteľovi je podporené konjugáciou fotosenzibilizátora s cieľovo špecifickým prostriedkom. Fotosenzibilizátor môže byť konjugovaný hlavne (1) s jednotkou, ktorá sa špecificky zameriava na bunky obsahujúce antigén (APC) priamo v darcovskom tkanive, (2) s jednotkou, ktorá sa špecificky zameriava na sprostredkujúci materiál, ktorý označuje APC pre zameranie konjugátom, alebo (3) s T-bunkami pre situáciu štep verzus hostiteľ. V každom prípade je darcovské tkanivo, akonáhle bolo modifikované interakciou s konjugátom, exponované o sebe známym spôsobom tak, aby v ňom došlo k podstatnému odstráneniu skupiny APC.
Vynález poskytuje špecifické konjugáty, obsahujúce fotosenzibilizátor, použiteľné na cielené napadanie APC v aloimplantátovom darcovskom tkanive, a spôsob ničenia APC v darcovskom tkanive všeobecne fotodynamickou terapiou (photodynamic therapy, „PDT“). Jedna z formulácií, použiteľných pri tomto spôsobe, je tvorená v podstate fotosenzibilizátorom a systémom pre naviazanie „navádzacieho prostriedku“ na fotosenzibilizátor. Ďalšia formulácia zahrnuje kombináciu systému cieleného na APC a fotosenzibilizátora konjugovaného s navádzacím
H prostriedkom pre systém cielený na APC. V oboch prípadoch je konečný účel dodania fotosenzibilizátora k APC identický.
K cieľovým APC je možné dosiahnuť prístup rôznymi cieľovo špecifickými prostriedkami, vrátane jednotiek imunošpecifických pre glykoproteínové produkty MHC a lymfokínové faktory, pre ktoré tieto bunky nesú receptory. Pre reakciu s glykoproteínmi MHC môžu byť typicky použité protilátky získané proti týmto glykoproteínom, buď polyklonálne alebo monoklonálne.
Polyklonálne séra sa pripravujú konvenčným spôsobom, napríklad injekčným vpravením antigénu, ku ktorému sa požaduje protilátka, do vhodného cicavca, stanovením hladiny protilátky proti antigénu v sére a prípravou anti-séra pri vysokom titri. Preparáty monoklonálnych protilátok je tiež možné pripravovať konvenčným spôsobom, napríklad metódou, opísanou v Koehler a Milstein, „___________________“, J. of___________, (19_), s použitím napríklad lymfocytov periférnej krvi alebo slezinných buniek z imunizovaných zvierat a usmrtením týchto buniek buď vírovou infekciou, fúziou s myelómami alebo inými konvenčnými postupmi a screeningom na produkciu požadovaných protilátok izolovanými kolóniami.
Okrem protilátok je možné použiť vhodné imunoreaktívne fragmenty, ako sú fragmenty Fab, Fab’ alebo F(ab)2. Početné protilátky, vhodné na použitie pri vytváraní cieleného mechanizmu, sú už v odbore dostupné. Napríklad použitie imunologický reaktívnych fragmentov ako náhrad za celé protilátky je opísané v Spielberg. H.L.. „Immunoassays in the Clinical Laboratory1',_________________________, 3:1-23 (1978).
Okrem imunoreaktivity je možné cielenie dosiahnuť použitím receptorových ligandov, ktoré sa zameriavajú na receptory na povrchu buniek APC, napríklad na základe komplementárny obrysov modelov náboja medzi receptorom a ligandom. Výraz „receptorový ligand“. ako je tu používaný, sa vzťahuje na akúkoľvek látku, prírodnú alebo syntetickú, ktorá sa viaže špecificky na receptor na bunkovom povrchu APC. Tieto receptorové ligandy zahrnujú lymfokínové faktory, napríklad IL2.
Podľa konkrétneho uskutočnenia vynálezu je fotosenzibilizátor konjugovaný s cieľovo špecifickým prostriedkom pre sprostredkujúcu látku, ktorá je potom špecifická pre APC. Napríklad v prípade krysích buniek vykazujúcich la môže byť ako sprostredkujúca látka použitá myšia anti-krysia protilátka la. V tomto prípade sa bude konjugát fotosenzibilizátora, naviazaný na an ti-myšiu protilátku, zameriavať na bunky značené myšou protilátkou presne rovnakým spôsobom. ako sa konjugát zahrnujúci anti-krysiu protilátku la na ne zameriava priamo.
Metódy konjugácie
Cielený systém môže byť konjugovaný priamo s fotosenzibilizátorom s použitím bežných metód a technológie linkerov, ako sú v odbore všeobecne známe a opísané napríklad vo vyššie uvedených patentoch Levyho a spol. Pre proteiny, ako je Ig a ďalšie polypeptidy. je možné uskutočniť priamu kovalentnú väzbu medzi fotosenzibilizátorom a cieľovo špecifickou zložkou napríklad s použitím dehydratačného činidla, ako je karbodiimid. Aktívne jednotky konjugátu môžu byť samozrejme tiež spojené pomocou linkerových zlúčenín, ktoré sú bifunkčné a sú schopné sa kovalentne viazať s každou z oboch aktívnych zložiek.
Do rozsahu vynálezu spadá akákoľvek účinná metóda, o ktorej je známe, že je schopná spájať dve chemické jednotky. Linkerovú jednotkou je nutné chápať široko ako kovalentnú väzbu alebo akúkoľvek linkerovú jednotku, dostupnú v odbore alebo odvoditeľnú štandardnými metódami.
Alternatívne je možné zameriavanie na cieľ sprostredkovať dodatočnými špecifickými prostriedkami. Napríklad, ako je opísané ďalej, môže byť priamo na fotosenzibilizátor naviazaná sekundárna protilátka, zameraná na APC-špecifickú protilátku, a ako mostík medzi imunokonjugátom a cieľovou bunkou môže byť použitý prostriedok zameriavania na glykoprotein MHC.
Postup liečby
Eliminácia alebo funkčné oslabenie APC alebo modulácie iných kožných buniek, ako sú keratinocyty, sa podľa vynálezu uskutočňuje relatívne priamočiarym spôsobom uvádzaním darcovského tkaniva do styku priamo s fotosenzibilizátorom, ktorý môže byť vo forme konjugátu, v podmienkach, ktoré umožňujú vytvorenie silnej asociácie medzi fotosenzibilizátorom (alebo cieľovo špecifickou zložkou konjugátu obsahujúceho fotosenzibilizátor) a cieľovými APC pri súčasnej minimalizácii koncentrácie fotosenzibilizátora v darcovskom tkanive.
Je výhodné, ak toto uvedenie do styku zahrnuje nanesenie kompozície na jeden alebo viac povrchov štepu alebo inkubáciu alebo períuziu orgánového štepu formuláciou fotosenzibilizátora podľa vynálezu. Toto ošetrenie sa všeobecne vykonáva počas doby aspoň 1 min, prednostne asi 1 min až asi 72 h, hlavne asi 2 min až asi 24 h. Doba styku závisí od takých faktorov, akó je koncentrácia fotosenzibilizátora vo formulácii, ošetrovaný štep a konkrétny typ formulácie. Perfúzia sa vykonáva akýmkoľvek vhodným postupom. Napríklad orgán je možné perfundovať pomocou zariadenia, ktoré zaisťuje konštantný tlak alebo períuziu s tlakovým regulátorom a prietokom medzi pumpou a orgánom. Alternatívne je možné orgán umiestniť do tesne uzavretej hyperbarickej komory a dodávať perfuzát do komory pumpou, ktorá odoberá tekutinu z rezervoára, poprípade s vracaním spotrebovaného perfuzátu do rezervoára pomocou ventilu.
U kožných štepov je možné formuláciu natierať alebo nastrekovať na spodný povrch transplantovanej kože tak, že medzi spodným povrchom darcovského tkaniva a tkanivom príjemcu vznikne vrstva fotosenzibilizátora. Prednostne sa však celý kožný štep ponorí do kompozície fotosenzibilizátora.
Stupeň uvádzania do styku sa môže uskutočňovať pri rôznych teplotách s vylúčením len tých teplôt, ktoré sú dosť vysoké, aby spôsobili denaturáciu alebo iné poškodenie štepu, a teplôt, ktoré sú dosť nízke, aby minimalizovali príjem fotosenzibilizátora bunkami. Prednostne sa stupeň uvádzania do styku vykonáva pri teplote v rozmedzí asi 50 až asi 400 °C, výhodne asi 150 až asi 370 °C a hlavne pri teplote okolia.
Po riadnej distribúcii fotosenzibilizátora, zaisťujúcej, že je správne asociovaný s cieľovými APC, sa takto ošetrené darcovské tkanivo podrobí expozícii svetlu s vlnovou dĺžkou, ktorá je absorbovaná fotosenzibilizátorom a vedie k aktivácii jeho cytotoxických vlastností. Taká expozícia je samozrejme v odbore fotodynamickej terapie úplne bežná. Príklady postupov a zariadení na tento účel sú uvedené napríklad vo vyššie uvedených patentoch Doughertyho a spol.
Potom, čo bol štep uvedený do styku s fotosenzibilizátorom a exponovaný svetlu, môže byť uchovávaný až asi 24 až 48 h. Prednostne sa však použije bezprostredne v procese transplantácie. Životnosť je možné zvýšiť vyššie opísaným spôsobom použitím náhradky krvi vo formulácii (napríklad emulzia perfluórovanej zlúčeniny) alebo perfúziou štepu formuláciou fotosenzibilizátora, obsahujúcou chladené izotonické činidlo a antikoagulant, a potom glycerolom, čo umožňuje zmrazenie štepov s malým poškodením buniek, ako je opísané v dokumente JP
60061501, zverejnenom 9.4.1985. Štep môže byt’ okrem toho uchovávaný s rôznymi kvapalinami, ktoré zahrnujú formuláciu, zatiaľ čo sú orgány chladené na teplotu mrznutia, za účelom polotrvalej ochrany orgánu bez nekrocytózy buniek.
Pred transplantáciou sa štep prednostne premyje na odstránenie kompozície fotosenzibilizátora, napríklad prepláchnutím vo fyziologickom salinickom roztoku alebo inými prostriedkami vhodnými na tento účel. Na podporu prežitia štepu môže byť tiež pred transplantáciou príjemcovi uskutočnená jedna alebo viac krvných transfúzií, špecifických pre darcu, s mononukleárnymi krvnými bunkami periférnej krvi, ošetrenými pomocou PDT. Alternatívny postup spočíva v tom, že sa príjemca pred transplantačnou operáciou podrobí celkovému ožarovaniu lymfatických uzlín. Ako súčasť tohto vynálezu je možné uskutočňovať akúkoľvek pre-transplantačnú procedúru, ktorá bude mať priaznivý účinok pre konkrétneho príjemcu.
V niektorých prípadoch je žiadúce modifikovať povrch štepu tak, aby boli vytvorené kladne alebo záporne nabité skupiny, napríklad použitím vhodnej aminokyseliny alebo polyméru alebo naviazaním fyziologicky prijateľného zdroja nabitých funkčných skupín. Napríklad záporne nabitý povrch je pre krvné cievy vhodný na zníženie zrážania krvi. Za určitých okolností je tiež žiadúce urobiť povrch hydrofóbnym alebo hydrofilným, naviazaním napríklad fenylalanínu, serinu alebo lyzínu na povrch. Imunosupresívnym prostriedkom, zvlášť účinným pre tieto modifikácie povrchu, je glutaraldehyd.
Samotný postup transplantácie závisí od konkrétnej odstraňovanej poruchy, stavu pacienta atď. Vhodný postup pre každý daný prípad určí lekársky praktik. Transplantáty sa poprípade počas kritickej pooperačnej doby (prvých troch mesiacov) systematicky monitorujú akoukoľvek vhodnou metódou, napríklad rádionuklidovou intravenóznou angiografiou. Po transplantácii sa ako dôležitá na zaistenie prežitia štepu často používa imunosupresívna terapia s použitím vhodného imunosupresíva.
Spôsob podľa vynálezu môže byť doplnený alebo použitý v kombinácii s rovnakými alebo zníženými dávkami imunosupresíva, súčasne podávaného systémovo darcovi, in vitro darcovskému tkanivu alebo príjemcovi, buď miestne alebo systémovo. Výraz „imunosupresívum“, ako je tu používaný, sa vzťahuje na látky, ktoré pôsobia tak, že potlačujú alebo maskujú imunitný systém hostiteľa, do ktorého je štep transplantovaný. Zahrnuje látky, ktoré potlačujú produkciu cytokínu, tlmia alebo potlačujú expresiu autoantigénov alebo maskujú antigény MHC.
Príklady takýchto látok zahrnujú 2-amino-6-aryl-5-substituované pyrimidíny, azatioprín alebo cyklofosfamid, bromokryptín, glutaraldehyd, antiidiotypické protilátky pre antigény MHC, cyklosporín A, jeden alebo viac steroidov, prednostne kortikosteroidy a glukokortikosteroidy, ako je prednizón, metylprednizolón a dexametazón, protilátky proti interferónu gama, protilátky proti faktoru alfa nádorovej nekrózy, protilátky proti faktoru beta nádorovej nekrózy, protilátky proti interleukínu-2, protilátky proti cytokínovému receptoru, ako sú protilátky proti receptoru IL-2. heterológny anti-lymfocytový globulín, protilátky pan-T, prednostne monoklonálne protilátky OKT-3, protilátky k CD4, streptokinázu, streptodornázu alebo RNA alebo DNA z hostiteľa
Účinné množstvo, ktoré sa stanovuje na základe týchto úvah, je minimálne množstvo nutné na prevenciu imunitnej reakcie, ktorá by mala za následok odhojenie štepu príjemcom, ale rovnako tak nutné na dosiahnutie dlhšej doby prežitia štepu. Toto množstvo je prednostne nižšie než množstvo, ktoré je pre príjemcu toxické alebo významne zvyšuje náchylnosť príjemcu k infekciám. Množstvo imunosupresíva, nutné podľa vynálezu, je typicky nižšie než sa normálne požaduje pre transplantované štepy, ktoré neboli vopred ošetrené, a závisí od individuálnych podmienok transplantátu a typu použitého imunosupresíva.
Ako konkrétny príklad je možné uviesť celkové množstvo imunosupresíva cyklosporínu A, podávaného parenterálne, činiace na dávku asi 0,1 až 20 mg/kg telesnej hmotnosti pacienta, oproti typickému rozmedziu asi 5 až asi 15 mg/kg/deň cyklosporínu A, bežne používaného v konvenčnej imunosupresívnej terapii. U renálnych transplantátov sa podľa obvyklej praxe podávajú masívne množstvá glukokortikosteroidu v krátkych časových obdobiach, napríklad metylprednizolón v niekoľkogramových dávkach denne podávaný počas doby 3 až 5 dní a potom 20 až 100 mg prednizónu, bez fotodynamického predbežného ošetrenia tkaniva štepu. Pri predbežnom ošetrení podľa vynálezu sú použiteľné významne nižšie dávky.
Ako je vyššie uvedené, tieto navrhované množstvá imunosupresíva sú z veľkej časti vecou rozhodnutia terapeuta. Kľúčovým faktorom pri voľbe príslušnej dávky a postupu dávkovania je dosiahnutý výsledok, t.j. dlhodobé prežitie štepu. Napríklad môžu byť potrebné relatívne vysoké dávky buď spočiatku na liečbu hyperakútneho odhojovania štepu, ktoré možno prisúdiť deštrukcii štepu, sprostredkovanej protilátkami, alebo v neskoršom štádiu, charakterizovanom náhlym poklesom funkcie štepu.
Ak sa používa imunosupresívum, môže byť podávané akýmkoľvek vhodným spôsobom, zahrnujúcim parenterálnu, a ak je to požadované pre miestnu imunosupresiu, intralezionálnu aplikáciu. Parenterálne infúzie zahrnujú intramuskulárnu, intravenóznu, intraarteriálnu, intraperitoneálnu alebo subkutánnu aplikáciu. Ak sa používa imunosupresívum, podáva sa naviac výhodne pulznou infúziou, hlavne s klesajúcimi dávkami, alebo kontinuálnou infúziou.
Prehľad obrázkov na výkresoch
Obr. 1 znázorňuje štruktúru zlúčenín BPD, zvlášť použiteľných ako fotosenzibilizačné prostriedky podľa vynálezu.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Na ozrejmenie vynálezu, avšak nie na jeho obmedzenie, sú uvedené príklady uskutočnenia.
Príklad 1
Príprava konjugátu BPD-Ra-MIg
Fotosenzibilizátor BPD-MA znázornený na obr. 1, sa v tme zriedi z koncentrácie 1 mg/ml na 200 pg/ml vo fosfátom pufrovanom salinickom roztoku a zmieša so známym množstvom krysieho anti-myšieho lg (RaMIg), ktorý sa získa od Cedar Lane Laboratories alebo pripraví imunizáciou králikov myším imunoglobulínom a čistením protilátok na imunoabsorpčných kolónach. Zmes sa inkubuje 1 h v tme pri teplote miestnosti a získaný konjugát sa dialyzuje cez noc pri 4 °C cez membránu priepustnú pre molekuly s molekulovou hmotnosťou menšou ako 12 až 14 kD proti trom litrom PBS. Modelové štúdie so značeným BPD-MA ukazujú, že zadržaný konjugát má pomer BPD:Ab 10 až 20. Retentát z dialýzy sa potom zmrazí a lyofílizuje a uchováva v tme.
Príklad 2
Ošetrenie tkaniva aloimplantátu konjugátom
Darcovské tkanivo pankreatických ostrovčekov bola izolované z krýs týmto spôsobom:
Samce krýs SD (200 až 250 g) boli anestetizované intraperitoneálne uretánom (100 mg/kg) a pomocou laparotómie stredovou čiarou bola bilaterálnymi pneumotoraxami vyvolaná kardiorespiračná zástava. Proximálny spoločný žlčovod bol kanylovaný a distálne okludovaný v mieste vstupu do dvanástnika. Pankreas potom bol retrográdne rozšírený chladným (4 °C) roztokom kolagenázy (typ XI, Sigma Chemicals) s koncentráciou 0,42 mg (650 U)/ml. Po rozšírení kolagenázou in situ bola uskutočnená totálna pankreatektómia.
Žľazy boli vylúhované počas doby 22 min vo vodnom kúpeli 37 °C. Vylúhované žľazy boli dispergované trituráciou cez sterilnú silikónovanú pipetu. Surová tkanivová suspenzia bola podrobená prechodu filtrom s veľkosťou sita 200 pm na odstránenie nevylúhovaných kanálikov, krvných ciev a lymfatických uzlín a potom odstreďovaná s diskontinuálnym gradientom dextranu, tvoreným dvoma monovrstvami so špecifickou hmotnosťou 1,065, resp. 1,031. Z rozhrania monovrstvy bola odsaté ostrovčekové tkanivo s menšou hustotou, premyté a ďalej prečistené ručným vyzbieraním pod disekčným mikroskopom. Touto metódou bolo získaných 300 až 400 funkčne a morfologicky neporušených ostrovčekov na pankreas.
Ostrovčeky boli kultivované in vitro počas doby 1 dňa v Hamovom médiu F-12, doplnenom 25 % teľacieho séra, 15 mM pufru HEPES a 1 % strepfungizónu. Kultivované ostrovčeky boli najprv inkubované počas doby niekoľkých hodín pri 0 °C s komerčne dostupnou myšou anti-krysou monoklonálnou protilátkou la (označenou OX-6), dostupnou od SeraLab, v množstve 0,2 mg/ml. OX-6 je imunošpecifická proti produktu MHC triedy II.
Časti ostrovčekov, ošetrených OX-6, boli inkubované pri 20 °C počas doby 2 h v tme s (1) konjugátom Ra-MigG-BPD s pomerom 6,5 BPD : 1 Ab, (2) tým istým konjugátom s pomerom 20 BPD : 1 Ab, (3) konjugátom BPD s irelevantnou protilátkou GA-7sIgG s pomerom 6,5 BPD : 1 Ab, (4) BPD samotným a (5) médiom samotným. Inkubačné zmesi potom boli vystavené svetelnej energii 10 J/cm2 s vlnovou dĺžkou 400 až 800 nm. Ožiarené kultúry potom boli testované histologický a na úbytok APC.
Príklad 3
Charakterizácia darcovského tkaniva
V histologických štúdiách bolo asi 75 až 100 ostrovčekov, ktoré boli ošetrené konjugátom 6,5 BPD : 1 Ab, transplantovaných pod tukové puzdro obličky príjemcovských syngénnych krýs SD a alogénnych krýs WF. Ako u syngénnych, tak aj u alogénnych transplantátov poskytli všetci príjemcovia úspešné výsledky. Hlavne bola ako u syngénnych, tak aj u alogénnych transplantátov pozorovaná kompletná náhrada štepu lymfocytickým infiltrátom a nebolo pozorované identifikovateľné endokrinné tkanivo.
V štúdiách úbytku APC boli ostrovčeky primárne imunofarbené protilátkou OX-6. Takto ošetrené bunky boli podrobené sekundárnemu farbeniu kozím anti-myším Ig, značeným FITC (Jackson Laboratories) a podrobené fluorescenčnej mikroskopii. V preparátoch, ktoré boli ošetrené konjugátmi, neboli pozorované identifikovateľné bunky MHC triedy II. V kontrolných preparátoch (konjugát s irelevantnou protilátkou, samotný BPD a médium) však bola prítomnosť týchto buniek fluorescenčnou mikroskopiou detegovaná, pretože sekundárna protilátka, značená FITC, označila APC a emitovala zelenú fluorescenciu.
Príklad 4
Prevencia odhojovania kožných aloimplantátov
Na stanovenie základnej hodnoty reprezentujúcej minimálne odmietnutie bolo na myšiach BALB/c v súlade so štandardnými metódami (Billingham a spol., „The Technique of Free Skin Grafting in Mammals“, J. Exp. Biol. 28:385-99 (1951)) uskutočnených deväť syngénnych štepov (darca a príjemca sú to isté zviera) týmto postupom: Transplantovaná koža trupu myší bola oholená a depilovaná. Myš potom bola anestetizovaná intraperitoneálnou injekciou zmesi 20 μΐ ketamínhydrochloridu, 10 μΐ xylazínu a 70 μΙ PBS, načo bola opatrným vyrezaním získaná koža (1 cm x 1 cm) v plnej hrúbke s ponechaním vhodného lôžka štepu a tak, aby nedošlo k poškodeniu platyzmy.
Autológne kožné štepy potom boli aplikované späť na miesto transplantácie a udržované na mieste aplikáciou niekoľkých, asi štyroch kvapiek tkanivového adhezíva Vetbond na rozhra nie medzi štepom a lôžkom štepu. Štep bol stlačený pomocou gázy napustenej vazelínou a spolu s gázou udržovaný na mieste pomocou lepiacej pásky Vetrap. ktorá ovinutím okolo tela vytvorila obväz.
Miera úspešnosti pre dlhodobé syngénne štepy, t.j. vyše 120 dní, bola vyššia ako 90 %. Odmietnutie štepu bolo považované za úplné, keď došlo k aspoň 80% nekróze štepu. Prežitie štepu bolo vyjadrené ako priemer pomocou doby prežitia v dňoch ± štandardná odchýlka.
Ako kontroly boli pomocou rovnakých postupov ako sú vyššie uvedené, uskutočnené tiež alogénne kožné transplantáty medzi myšami C57BL/6 (darcovia, H-2b) a BALB/c (príjemcovia, H-2d), avšak s tou výnimkou, že každý kožný štep bol odobratý z darcovskej myši a nanesený do lôžka štepu inej príjemcovskej myši. Stručne povedané bola koža trupu darcovských myší oholená a depilovaná, načo boli získané úplné kožné štepy (1 cm x 1 cm). Príjemcovské myši boli oholené a potom anestetizované intraperitoneálnou injekciou zmesi 20 μΐ ketamínhydrochloridu, 10 μΙ xylazínu a 70 μΐ PBS. Lôžko štepu každého príjemcu bolo pripravené opav trným vyrezaním kože trupu (1 cm x 1 cm) tak, aby nedošlo k poškodeniu platyzmy. Štepy boli aplikované na miesto alogénneho štepu a udržované na mieste použitím tkanivového adhezíva Vetbond, gázy napustenej vazelínou a obväzu z pásky Vetrap. Stredná doba prežitia bola 11,1 dňa (štandardná odchýlka 1,9).
Spôsobom podľa vynálezu bola vzorka kože, transplantovaná príjemcovi, najprv in vitro uvedená počas doby 1 h do styku s roztokom 0,1 pg/ml fotosenzibilizátora BPD. Koža potom bola suspendovaná počas doby 30 min v roztoku elektrolytu. obsahujúcom fetálne bovinné sérum („FBS“), a vystavená červenému svetlu diód emitujúcich svetlo („LED“) (10 J/cm2 pri 690 ± 10 nm). Po tomto ošetrení svetlom bola exponovaná koža transplantovaná vyššie opísaným spôsobom príjemcovskej myši. Počas doby 8 dní po transplantácii bolo zviera monitorované na odmietavú reakciu. Stredná doba prežitia aloimplantátov sa zvýšila na 18,5 dňa (štandardná odchýlka 2,1).
Výsledky sú pre porovnanie uvedené v tabuľke 1.
Tabuľka 1 ryp štepu počet testovaných zvierat stredná doba prežitia (štandardná odchýlka) syngénny neobmedzená alogénnv
11,1 dní(1,9) alogénny s predbežným ošetrením kože darcu
18,5 dní (2,1)
Z výsledkov vyplýva, že imunomodulačný účinok fotodynamického ošetrenia na transplantovaf nové tkanivo môže viesť k významne predlženej dobe prežitia implantátu.
Experiment bol zopakovaný pre porovnanie aloimplantátov uskutočnených podľa vynálezu s obmenami koncentrácie (od 0,25 do 1,0 pg/ml) fotosenzibilizátora BPD so štandardnými kontrolnými aloimplantátmi. Výsledky týchto testov sú zhrnuté v tabuľke 2.
Tabuľka 2 typ štepu (počet testovaných zvierat) kontrolný aloimplantát (10) alogénny s predbežným ošetrením kože darcu (5) alogénny s predbežným ošetrením kože darcu (5) dávka fotosenzibilizátora a svetla
1,0 pg/ml BPD, 10J/cm2LED
0.5 ng/ml BPD. 10 J/cm2 LED stredná doba prežitia (štandardná odchýlka)
7,5 dní (0,84)
11,0 dní (0,0)
14,3 dní (1,5)
Pretože sa zdá. že dvojnásobné zvýšenie množstva fotosenzibilizátora samo o sebe významne nepredĺžilo dobu prežitia implantátu, bolo postulované, že imunomodulačné účinky fotodynamického ošetrenia transplantovaného tkaniva môžu závisieť od selektívnych účinkov na bunkovú populáciu v koži a nemusia byť nutne dôsledkom cytotoxického účinku fotodynamickej terapie.
Príklad 5
Histologické vyšetrenie kože určenej na transplantáciu
Na vyšetrenie účinku ošetrenia kožných štepov fotodynamickou terapiou za podmienok, kože s výnimkou iného rozmedzia koncentrácie fotosenzibilizátora, tj. 0.25 alebo 0,50 ug/ml BPD. Niektoré tkanivá boli inkubované v roztoku elektrolytu samotného bez prítomnosti fotosenzibilizátora ako kontrolné vzorky. Všetky tkanivové vzorky boli inkubované počas doby 24 h, načo bol reprezentatívny počet vystavený svetlu. V prípade svetelnej expozície bolo použité červené svetlo s hodnotou energie 10 J/cm2.
Všetky vzorky potom boli umiestené do formalínu a podrobené histologickému vyšetreniu. Tkanivá inkubované v samotnom elektrolytovom roztoku (kontrolné vzorky) alebo v roztoku 0,50 ug/ml BPD bez expozície svetlom sa javili normálne. Vzorky ošetrené buď 0,25 alebo 0,50 Ug/ml BPD s následným ošetrením červeným svetlom vykazovali tieto zmeny: rozšírenie jadra, perinukleárnu vakuoláciu, pokles eozinofilie epiteliálnych buniek, zvýšenie objemu cytoplazmy a zväčšenie medzibunkových priestorov medzi keratinocytmi na povrchu epitelu. Na základe týchto histologických nálezov bolo postulované, že fotodynamické ošetrenie podľa vynálezu viedlo skôr než k usmrteniu buniek k určitému stupňu ich poškodenia. Mechanizmus tohto neočakávaného necytotoxického pôsobenia nie je známy.
Odborníkovi je zrejmé, že opísaný vynález je možné obmieňať a modifikovať bez prekročenia jeho rozsahu vyjadreného patentovými nárokmi.
Claims (13)
1. Použitie fotosenzibilizačného prostriedku na prípravu liečiva na obmedzovanie odhojovania aloimplantátov zahrnujúcich darcovské tkanivo, obsahujúce bunky vykazujúce antigény (APC), pričom uvedené obmedzovanie odhojovania aloimplantátov spočíva v tom, že
a) darcovské tkanivo sa uvedie do styku s fotosenzibilizačným prostriedkom na získanie modifikovaného darcovského tkaniva,
b) modifikované darcovské tkanivo sa vystaví svetlu s vlnovou dĺžkou absorbovanou uvedeným fotosenzibilizačným prostriedkom počas doby dostatočnej na zbavenie darcovského tkaniva buniek APC a
c) darcovské tkanivo zbavené buniek APC sa transplantuje do tkaniva príjemcu.
2. Použitie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že darcovským tkanivom je kožné tkanivo alebo pankreatické ostrovčeky.
3. Použitie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že fotosenzibilizačným prostriedkom je BPD.
4. Použitie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že aspoň niektoré vlnové dĺžky uvedeného svetla sú vo viditeľnej časti elektromagnetického spektra.
5. Použitie podľa nároku I, vyznačujúce sa tým, že fotosenzibilizačný prostriedok je vo forme roztoku s rozmedzím koncentrácie 0,25 až 1,0 gg/ml.
6. Použitie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že počas stupňa b) je modifikované darcovské tkanivo suspendované v roztoku elektrolytu.
7. Použitie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že dávka svetla počas stupňa b) je asi 10 J/cm2.
8. Použitie podľa nároku 1, vyznačujúce sa tým, že fotosenzibilizačný prostriedok je vo forme konjugátu zahrnujúceho cieľovo špecifickú zložku.
9. Použitie podľa nároku 8, vyznačujúce sa tým, že cieľovo špecifický prostriedok zahrnuje činidlo, ktoré sa špecificky viaže na APC.
10. Použitie podľa nároku 8, vyznačujúce sa tým, že cieľovo špecifickým činidlom je protilátka, jej fragment alebo receptorový ligand pre receptor na povrchu buniek APC.
11. Použitie podľa nároku 8, vyznačujúce sa tým, že cieľovo špecifický prostriedok zahrnuje činidlo, ktoré sa viaže na značku, ktorá sa potom špecificky viaže na bunky APC.
12. Darcovské tkanivo so zníženou náchylnosťou k odhojovaniu aloimplantátov, pripravené s použitím liečiva podľa nároku 1.
13. Kompozícia, vyznačujúca sa tým, že zahrnuje darcovské tkanivo obsahujúce bunky vykazujúce antigén (APC) v zmesi s fotosenzibilizačným prostriedkom.
1/1
C 00 H
COOR
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US37170795A | 1995-01-13 | 1995-01-13 | |
| PCT/CA1996/000019 WO1996021466A1 (en) | 1995-01-13 | 1996-01-12 | Method to prevent transplant rejection |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK93797A3 true SK93797A3 (en) | 1998-01-14 |
Family
ID=23465087
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK937-97A SK93797A3 (en) | 1995-01-13 | 1996-01-12 | Method to prevent transplant rejection |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0804238B1 (sk) |
| JP (1) | JP3702330B2 (sk) |
| KR (1) | KR19980701317A (sk) |
| CN (1) | CN1192157A (sk) |
| AT (1) | ATE277636T1 (sk) |
| AU (1) | AU693634B2 (sk) |
| CA (1) | CA2210109C (sk) |
| CZ (1) | CZ214697A3 (sk) |
| DE (1) | DE69633494T2 (sk) |
| ES (1) | ES2227578T3 (sk) |
| FI (1) | FI972953A (sk) |
| HU (1) | HUP9801123A3 (sk) |
| NO (1) | NO973251L (sk) |
| NZ (1) | NZ298355A (sk) |
| PL (1) | PL321246A1 (sk) |
| SK (1) | SK93797A3 (sk) |
| TW (1) | TW426518B (sk) |
| WO (1) | WO1996021466A1 (sk) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5882328A (en) * | 1995-01-13 | 1999-03-16 | Qlt Phototherapeutics, Inc. | Method to prevent transplant rejection |
| US5789433A (en) * | 1995-01-17 | 1998-08-04 | Quadra Logic Technologies, Inc. | Green porphyrins as immunomodulators |
| US6096776A (en) * | 1995-01-17 | 2000-08-01 | Qlt Phototherapeutics, Inc. | Green porphyrins as immunomodulators |
| US6107325A (en) * | 1995-01-17 | 2000-08-22 | Qlt Phototherapeutics, Inc. | Green porphyrins as immunomodulators |
| US5824080A (en) * | 1995-09-28 | 1998-10-20 | The General Hospital Corporation | Photochemistry for the preparation of biologic grafts--allografts and xenografts |
| EP0981371A1 (en) * | 1997-05-16 | 2000-03-01 | QLT Phototherapeutics, Inc. | Green porphyrins as immunomodulators |
| US6364907B1 (en) | 1998-10-09 | 2002-04-02 | Qlt Inc. | Method to prevent xenograft transplant rejection |
| US6197294B1 (en) | 1998-10-26 | 2001-03-06 | Neurotech S.A. | Cell surface molecule-induced macrophage activation |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5028594A (en) * | 1988-12-27 | 1991-07-02 | Naxcor | Use of photodynamic compositions for cytotoxic effects |
| US5147289A (en) * | 1990-03-29 | 1992-09-15 | Therakos, Inc | Non-specific immune system enhancement |
| US5820872A (en) * | 1992-11-18 | 1998-10-13 | Yale University | Methods and compositions for improving the effectiveness of X-irradiation therapy for the treatment of an internal solid tumor |
-
1996
- 1996-01-12 NZ NZ298355A patent/NZ298355A/en unknown
- 1996-01-12 DE DE69633494T patent/DE69633494T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1996-01-12 WO PCT/CA1996/000019 patent/WO1996021466A1/en active IP Right Grant
- 1996-01-12 JP JP52134496A patent/JP3702330B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-01-12 EP EP96900220A patent/EP0804238B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-01-12 CN CN96191452A patent/CN1192157A/zh active Pending
- 1996-01-12 HU HU9801123A patent/HUP9801123A3/hu unknown
- 1996-01-12 PL PL96321246A patent/PL321246A1/xx unknown
- 1996-01-12 CZ CZ972146A patent/CZ214697A3/cs unknown
- 1996-01-12 SK SK937-97A patent/SK93797A3/sk unknown
- 1996-01-12 AU AU43818/96A patent/AU693634B2/en not_active Ceased
- 1996-01-12 CA CA002210109A patent/CA2210109C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-01-12 KR KR1019970704706A patent/KR19980701317A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-01-12 ES ES96900220T patent/ES2227578T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-01-12 AT AT96900220T patent/ATE277636T1/de not_active IP Right Cessation
- 1996-02-05 TW TW085101405A patent/TW426518B/zh not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-07-11 NO NO973251A patent/NO973251L/no not_active Application Discontinuation
- 1997-07-11 FI FI972953A patent/FI972953A/fi unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU4381896A (en) | 1996-07-31 |
| FI972953A (fi) | 1997-09-08 |
| CA2210109A1 (en) | 1996-07-18 |
| JP3702330B2 (ja) | 2005-10-05 |
| EP0804238B1 (en) | 2004-09-29 |
| DE69633494D1 (de) | 2004-11-04 |
| ATE277636T1 (de) | 2004-10-15 |
| JP2001526623A (ja) | 2001-12-18 |
| CZ214697A3 (en) | 1997-12-17 |
| CN1192157A (zh) | 1998-09-02 |
| KR19980701317A (ko) | 1998-05-15 |
| ES2227578T3 (es) | 2005-04-01 |
| NO973251D0 (no) | 1997-07-11 |
| HUP9801123A3 (en) | 1999-12-28 |
| MX9705268A (es) | 1997-10-31 |
| FI972953A0 (fi) | 1997-07-11 |
| PL321246A1 (en) | 1997-11-24 |
| TW426518B (en) | 2001-03-21 |
| CA2210109C (en) | 2008-09-23 |
| WO1996021466A1 (en) | 1996-07-18 |
| EP0804238A1 (en) | 1997-11-05 |
| NZ298355A (en) | 2000-02-28 |
| DE69633494T2 (de) | 2005-10-20 |
| HUP9801123A2 (hu) | 1998-08-28 |
| NO973251L (no) | 1997-09-08 |
| AU693634B2 (en) | 1998-07-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5882328A (en) | Method to prevent transplant rejection | |
| US5135915A (en) | Method for the treatment of grafts prior to transplantation using TGF-.beta. | |
| US6287558B1 (en) | Devices containing cells or tissue and an agent that inhibits damage by a host cell molecule | |
| EP0621786B1 (en) | Induced tolerance to xenografts | |
| PT642342E (pt) | Inactivacao selectiva de celulas de sangue | |
| EP0804238B1 (en) | Method to prevent transplant rejection | |
| JPH07502727A (ja) | 接着分子に対する抗体を用いた同種移植片拒絶の防止 | |
| Hardy et al. | Pancreatic islet transplantation: immuno‐alteration with ultraviolet irradiation | |
| US5885570A (en) | Induction of tolerance with modified immunogens | |
| Teicher et al. | Modulation of alkylating agents by etanidazole and Fluosol-DA/carbogen in the FSaIIC fibrosarcoma and EMT6 mammary carcinoma | |
| Chowdhury et al. | Donor-specific unresponsiveness to murine cardiac allografts induced by intrathymic-soluble alloantigens is dependent on alternate pathway of antigen presentation | |
| MXPA97005268A (en) | Method to prevent the rejection of transplan | |
| Yamaguchi et al. | Prolonged survival of rat hepatic allografts pretreated with a single donor-specific blood transfusion: the distribution of donor cells expressing class I major histocompatibility complex antigens in the recipient | |
| JP3553941B2 (ja) | 異種移植片の胸腺 | |
| EDELMAN et al. | Fetal islet allotransplantation in rabbits | |
| Skarsgard | Invitro alteration of rat pancreatic islet immunogenicity in an allogeneic transplant model | |
| Toledo-Pereyra et al. | Improved survival after donor pretreatment with anti-lymphoblast globulin (ALG) in perfused kidneys: Experimental findings | |
| Gorantla | Mechanisms that mediate graft versus host disease after composite tissue allotransplantation |