CZ20033475A3 - Pyrrolidine oxadiazole- and thiadiazole oxime derivatives being oxytocin receptor antagonists. - Google Patents

Description

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká nových pyrrolidinoxadiazolových a pyrrolidinthiadiazolových derivátů, zvláště pro použití jako léčiva, a také farmaceutických prostředků, obsahujících tyto pyrrolidinové deriváty. Uvedené deriváty jsou vhodné pro léčbu a/nebo prevenci předčasných porodních stahů, předčasného porodu a bolestivé menstruace. S výhodou mají pyrrolidinové deriváty modulační, zvláště antagonistický účinek receptoru oxytocinu. Výhodněji se uvedené sloučeniny mohou použít při léčbě a/nebo prevenci onemocnění, způsobených oxytocinem, zahrnujících předčasné porodní stahy, předčasný porod a bolestivou menstruaci.

Dosavadní stav techniky

V oblasti porodnictví je jedním z nejdůležitějším problémů regulace předčasných porodních stahů a předčasného porodu, protože jsou hlavním důvodem perinatálního onemocnění a úmrtnosti.

Pro léčbu předčasných porodních stahů se doporučovalo použití síranu hořečnatého a ethanolu. Avšak síran hořečnatý při koncentracích v plazmě nad terapeutickýcm rozmezím 4 až 8 mg/dl může způsobit inhibici přenosu nervových impulzů skrz srdce a neuromuskulárního přenosu, dýchací potíže a zástavu srdce, proto je tento prostředek nevhodný, zejména když je poškozena funkce ledvin.

• · · 9 ·

- 2 Ethanol je účinný při prevenci předčasných porodních stahů, ale nezpůsobuje odpovídající snížení výskytu dýchacích potíží plodu. Tedy ethanol se považuje za to, že má negativní vliv na plod..

Dva další terapeutické prostředky spadají do skupin:

a) p2-adrenergní agonisté nebo

b) antagonisté oxytocinu.

32-Adrenergní receptor obecně způsobuje inhibiční účinek v buňkách, kde se expresuje (svaly, srdce, děloha atd.). 32-adrenergní agonisté se používají pro aktivaci uvedeného inhibičního účinku receptoru. Proto jsou p2-adrenergní agonisté sympatomimetika, která mezi jiným inhibují děložní stahy. Známí β2adrenergní agonisté pro léčbu předčasných porodních stahů jsou Ritodrin, Terbutalin a Albuterol.

Ritodrin (například (R*,S*)-hydroxy-.alfa.-[1-[[2-(4-hydroxyfenyl)ethyl]amino]ethyljbenzenmethanol; viz US 3,410,944 N.V.Philips) je hlavním β2adrenergním agonistou, ale způsobuje mnoho kardiovaskulárních a metabolických vedlejších účinků u těhotné ženy, zahrnující tachykardii, zvýšenou sekreci reninu, hyperglykémi (reaktivní hypoglykemii u dítěte).

Terbutalin (například 5-[2-[( 1,1-dimethylethyl)amino]-1-hydroxyethyl]-1,3benzendiol, US 3,937,838, Draco) a Albuterol (a¹-[[(1,1-dimethylethyl)aminojmethyl]-4-hydroxy-1,3-benzendimethanol; US 3,644,353, Allen a Hanburys) jsou další βΣ^τβηβ^ηί agonisté a mají podobné vedlejší účinky jako Ritodrin.

Současnější přístup k léčbě předčasných porodních stahů spočívá v použití antagonistů oxytocinu.

- 3 ··· «····

Oxytocin (OT) je peptidový hormon a způsobuje kontrakci dělohy savců během porodních stahů. Odpovídající receptor oxytocinu je podobný receptorům vasopresinu V_1a a V₂ a působí pomocí receptoru vázaného G proteinem, spojeného s aktivaci fosfolipázy C, a zvyšuje se v IP₃, který uvolňuje Ca²⁺ z nitrobuněčních zásob. Zvyšování nitrobuněčného vápníku, které následně způsobuje zvýšenou kontrakci hladkého svalstva pomocí aktivace slabého řetězce kinazy myozinu. Receptory oxytocinu (OT) se zvyšují výrazně během těhotenství. Ukázalo se, že koncentrace receptorů OT koreluje se spontánní aktivitou dělohy (M. Maggi et al. J.CIin.Endocrmol Metabol·, 70; 1142, 1990). V posledních několika letech výzkum ukázal, že hormon oxytocin může být fyziologickým iniciátorem porodních stahů u mnoha druhů savců, včetně lidí. Dále se předpokládá, že oxytocin vytváří tento účinek ve dvou částech:

přímou kontrakcí děložního svalstva a zvýšením syntézy a uvolňování kontraktilních prostaglandinů z děložní sliznice/decidua. Tyto prostaglandiny mohou navíc být důležité při procesu uvolnění děložení čípku během porodu.

Těmito mechanizmy je proces porodních stahů (včasných i předčasných) iniciován zvýšenou senzitivitou dělohy na oxytocin, vznikajících z části jako výsledek zvýšení množství receptorů oxytocinu v této tkáni.

Blokováním oxytocinu se může dosáhnout přímého (kontraktilní) a nepřímého (zvýšenou syntézou prostaglandinů) účinku oxytocinu na dělohu. Předpokládá se, že blokátor nebo antagonista oxytocinu je účinější pro léčbu předčasných porodních stahů než obvyklé způsoby.

Atosiban (například oxytocin, 1-(3-merkaptopropionová kyselina)-2-(O-ethylD-tyrosin)-4-L-threonin-8-L-ornithin) je cyklický pentapeptid, který je

- 4 nejznámější antagonista OT (WO 9501368, Ferring AB; J. Reprod. Fertin., 101(2), 345-52 (anglicky) 1994); Am. J. Obstet. Gynecol., 170(2), 474-8 (anglicky) 1994). Principielní nevýhodou použití antagonistů peptidu jako je atosiban je problém nízké orální biodostupnosti, spočívající z intestinální degradaci (odbourávání ve střevech). Proto se musí podávat parenterálně (mimostřevně).

Také WO 96/22775 a US-5,756,497 (Merck) popisují benzoxazinyl-piperidiny nebo benzoxazinony jako antagonisty receptoru OT. Indanylpiperidiny a tolylpiperaziny jsou uvedeny Evans et al., v J- Med-Chem., 35, 3919 (1992) jako orálně dopravitelní antagonísté OT.

Zjistilo se, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou antagonísté oxytocinu a váží se na receptor oxytocinu. Pokud se receptor oxytocinu váže sloučeninami podle předkládaného vynálezu, antagonizuje se oxytocin tím, že je blokván ze svého receptoru a není proto schopen uplatnit své biologické nebo farmakolgické účinky. Sloučeniny podle předpokládaného vynálezu jsou proto vhodné pro léčbu a prevenci předčasných porodních stahů a předčasného porodu. Sloučeniny jsou také vhodné pro zastavení porodních stahů pro přípravu na porod císařským řezem. Zvláště jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu vhodné pro léčbu a prevenci poruch zvířat, výhodně savců a zvláště lidí, týkající se oxytocinu. Dalším cílem tohoto vynálezu je poskytnout způsob antagonizace funkcí oxytocinu u onemocnění savců. Cílem tohoto vynálezu je také vyvinout způsob prevence nebo léčby onemocnění předčasných porodních stahů, týkající se oxytoxinu, antagonizací vazby oxytocinu na svůj receptor.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou také vhodné pro léčbu bolestivé menstruace, kterou lze definovat jako cyklickou bolest spojenou s menstruací během ovulačních cyklů. Předpokládá se, že bolest vzniká z

děložních stahů a ischemie, pravděpodobně způsobené účinkem prostaglandinů, vytvořených sekrecí děložní sliznice. Blokováním přímého nebo nepřímého účinku oxytocinu na dělohu je antagonista oxytocinu účinější pro léčbu bolestivé menstruace než obvyklé způsoby.

Podstata vynálezu

Následující část poskytuje definice různých chemických zbytků, které tvoří sloučeniny podle vynálezu a lze je použít jednotně během popisu a nároků, aniž by jinak vyjádřená definice poskytovala širší definici.

„Ci-C_e-alkyl“ znamená monovalantní alkylové skupiny, které mají 1 až 6 atomů uhlíku. Tento termín lze například vyjádřit skupinami, jako jsou methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, terc.-butyl, n-hexyl a podobně.

„Aryl“ znamená nenasycenou aromatickou karboxylovou skupinu o 6 až 14 atomech uhlíku, která má jeden kruh (například fenyl) nebo více kondenzovaných kruhů (například naftyl). Arylová skupina s výhodnou zahrnuje skupiny fenyl, naftyl, fenantrenyl a podobně.

„Ci-C₆-alkyl aryl“ znamená skupiny Ci-C₆ -alkyl, které mají arylový substituent, zahrnující benzyl, fenethyl a podobně.

„Heteroaryl“ znamená monocyklickou heteroaromatickou skupinu nebo bicyklickou nebo tricyklickou heteroaromatickou skupinu se spojeným kruhem. Konkrétní příklady heteroaromatických skupin zahrnují případně substituovaný pyridyl, pyrrolyl, furyl, thienyl, imidazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, pyrazolyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4-triazolyl, 1,2,3oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,2,5-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl, 1,3,4- 6 triazinyl, 1,2,3-triazinyl, benzofuryl, [2,3-dihydrojbenzofuryl, isobenzofuryl, benzothienyl, benzo-triazolyl, isobenzothienyl, indolyl, isoindolyl, 3H-indolyl, benzimidazolyl, imidazo[1,2-a]pyridyl, benzothiazolyl, benzoxazolyl, chinolizinyl, chinazolinyl, ftalazinyl, chinoxalinyl, cinnolinyl, naftyridinyl, pyrido[3,4bjpyridyl, pyrido[3,2-b]pyridyl, pyrido[4,3-b]pyridyl, chinolyl, isochinolyl, tetrazolyl, 5,6,7,8-tetra-hydrochinolyl, 5,6,7,8-tetrahydroisochinolyl, purinyl, pteridinyl, karbazolyl, xanthenyl nebo benzochinolyl.

„Ci-C₆-alkyl heteroaryl“ znamená skupiny CL-Cs-alkyl, které mají heteroarylový substituent, zahrnující 2-furalmethyl, 2-thienylmethyl, 2-(1 H-indol-3yljethyl a podobně.

„C2-C₆-aikenyl“ znamená skupiny alkenyl, které mají 2 až 6 atomů uhlíku a které mají alespoň 1 nebo 2 místa alkenylové nenasycenosti. Skupiny alkenyl výhodně zahrnují ethenyl (-CH=CH₂), n-2-propenyl (allyl, -CH₂CH=CH2) a podobně.

„C₂-C₆-alkenyl aryl“ znamená skupina C₂-C₆-alkenyl, které mají arylový substituent, zahrnující 2-fenylvinyl a podobně.

„C₂-C₆-alkenyl heteroaryl“ znamená skupiny C₂-C₆-alkyl, které mají heteroarylový substituent, zahrnující 2-(3-pyridinyi)vinyl a podobně.

„C2-C6-alkinyl“ znamená skupiny alkinyl, které mají výhodně 2 až 6 atomů uhlíku a které mají alespoó 1 až 2 místa alkinylové nenasycenosti, výhodné skupiny alkinyl zahrnují ethinyl (-C=CH), propargyl (-CH₂C=CH) a podobně.

„C₂-C₆-alkinyl aryl“ znamená skupiny C₂-C₆-alkinyl, které mají arylový substituent, zahrnující fenylethinyl a podobně.

- 7 „C₂-C₆-alkinyl heteroaryl“ znamená skupiny C₂-C_s-alkinyl, které mají heteroarylový substituent, zahrnující 2-thienylethinyl a podobně.

„Ca-Cs-cykloalkyl“ znamená nasycenou karbocyklickou skupinu o 3 až 8 atomech uhlíku, která má jeden kruh (například cyklohexyl) nebo více kondenzovaných kruhů (například norbornyl). Výhodný cykloalkyl zahrnuje cyklopentyl, cyklohexal, norbornyl a podobně.

„Ci-C₆-alkyl cykloalkyl“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají cykloalkylový substituent, zahrnující cyklohexylmethyl, cyklopentylpropyl a podobně.

„Heterocykloalkyl“ znamená skupinu C₃-C₈-cykloalkyl podle výše uvedené definice, kde jsou až 3 atomy uhlíku nahrazeny heteroatomy, zvolenými ze skupiny, sestávající z O, S, NR, přičemž R je definován jako vodík nebo methyl. Výhodný heterocykloalkyl zahrnuje pyrrolidin, piperidin, piperazin, 1-methylpiperazin, morfolin a podobně.

„Ci-C₆-alkyl heterocykloalkyl“ znamená skupiny C-C₅ -alkyl, které mají heterocykloalkylový substituent, zahrnující 2-( 1 -pyrrolidinyl)ethyl, 4-morfolinylmethyl, (1-methyl-4-piperidinyl)methyl a podobně.

„Karboxy“ znamená skupinu -C(O)OH.

„Ci-C₆-alkyl karboxy“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají substituent karboxy, zahrnující 2-karboxyethyl a podobně.

- 8 „Acyl“ znamená skupinu -C(O)R, kde R zahrnuje H, „Ci-Ce-alkyl“, „C₂-C₆alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyl“, „C₃-C₈-cykloalkyl“, heterocykloalkyl „heterocykloalkyl¹', „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl aryl“ nebo „Ci-C₆-alkyl heteroaryl“, „C₂-C₆-alkenyl aryl“, „C₂-C_s-alkenyl heteroaryl“, „C₂-C_s-alkinyl aryl“, „C₂-C₆alkinylheteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl cykloalkyl“, „Ci-C₆-alkyl heterocykloalkyl“.

„Ci-C₆-alkyl acyl“ znamená skupiny C^Cs-alkyl, které mají acylový substituent, zahrnující 2-acetylethyl a podobně.

„Aryl acyl“ znamená skupiny aryl, které mají acylový substituent, zahrnující 2acetylfenyl a podobně.

„Heteroaryl acyl“ znamená skupiny heteroaryl, které mají acylový substituent, zahrnující 2-acetylpyridyl a podobně.

„C₃-C₈-(hetero)cykloalkyl acyl“ znamená 3- až 8-členné cykloalkylové nebo heterocykloalkylové skupiny, které mají acylový substituent.

„Acyloxy“ znamená skupinu -OC(O)R, kde R zahrnuje „Ci-C₆-alkyl“, „C₂-C₆alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyl, „C₃-C₈-cykloalkyl“, hterocykloalkyl“heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl aryl“ nebo „Ci-C₆-alkyl heteroaryl“, „C₂-C₆alkenyl aryl“, „C₂-C_s-alkenyl heteroaryl“, „C₂-C6-alkinyl aryl“, „C₂-C₆-alkinylheteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl cykloalkyl“, „Ci-C₆-alkyl heterocykloalkyl“.

„Ci-C₆-alkyl acyloxy“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají substituent acyloxy, zahrnující 2-(acetyloxy)ethyl a podobně.

„Alkoxy“ znamená skupinu -O-R, kde R zahrnuje „Ci-C_e-alkyl“, „C₂-C₆-alkenyl“, „C₂-C6-alkinyr, „C₃-C8-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „aryl, „heteroaryl“, „CvCe-alkyl aryl“ nebo „Ci-C_s-alkyl heteroaryl“, „C₂-C₆-alkenyl aryl“, „C₂-C₆alkenyl heteroaryl“, „C₂-C₆-alkinyl aryl“, „C₂-C₆-alkinylheteroaryl“, Ci-C₆-alkyl cykloalkyl“, „Ci-C₆-alkyl heterocykloalkyl“.

„C^Ce-alkyl alkoxy“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají substituent alkoxy, zahrnující 2-ethoxyethyl a podobně.

„Alkoxykarbonyl“ znamená skupinu -C(O)OR, kde R zahrnuje „Ci-C₆-alkyl“, „C₂ -C₆-alkenyl“, „C₂-C6-alkinyl“, „C₃-C₈-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C_s-alkyl aryl“ nebo „C,-C₆-alkyl heteroaryl“, „C₂-C₆-alkenyl aryl“, „C₂-C6-alkenyl heteroaryl“, „C₂-C₆-alkinyl aryl“, „C₂-C₆-alkinylheteroaryr‘, „Ci-Ce-alkyl cykloalkyl“, „Ci-C₆-alkyl heterocykloalkyl“.

„Ci-C₅-alkyl alkoxykarbonyl“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají substituent alkoxykarbonyl, zahrnující 2-(benzyloxykarbonyl)ethyl a podobně.

„Aminokarbonyl“ znamená skupinu -C(O)NRR', kde každý R, R' nezávisle zahrnuje vodík, „Ci-C₆-alkyl“, „C₂-Cs-alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyl“, „C₃-C₈-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl aryl“ nebo „Ci-C_ealkyl heteroaryl“, „C₂-C₆-alkenyl aryl“, „C₂-C₆-alkenyl heteroaryl“, „C₂-C_s-alkinyl aryl“, „C₂-C₆-alkinylheteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl cykloalkyl“, „Ci-C₆-alkyl heterocykloalkyl“.

„Ci-Ce-alkyl aminokarbonyl“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají substituent aminokarbonyl, zahrnující 2-(dimethylaminokarbonyl)ethyl a podobně.

„Acylamino“ znamená skupinu -NRC(O)R', kde každý R, R' je nezávisle vodík, „C-i-Ce-alkyl“, „C₂-C₆-alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyl“, „C3-C8-cykloalkyl“, „heterocyklo-alkyl“, „aryl“, „heteroaryl, „Ci-C₆-alkyl aryl“ nebo „Ci-C₆-alkyl heteroaryl“, „C₂-C₆-alkenyl aryl“, „C₂-C₆-alkenyl heteroaryl“, „C₂-C₆-alkinyl aryl“, „C₂-C₆-alkinylheteroaryl“, „C^Ce-alkyl cykloakyl“, „Ci-C₆-alkyl heterocykloalkyl“.

„Ci-Cs-alkyl acylamino“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají substituent acylamino, zahrující 2-(propinylamino)ethyl a podobně.

„Ureido“ znamená skupinu -NRC(O)NR'R, kde každý R, R', R je nezávisle vodík, „Ci-Ce-alkyl“, „C₂-C₆-alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyl“, „C₃-C₈-cykloalkyr, „heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl aryl“ nebo „Ci-C₆-alkyl heteroaryl“, „C₂-C₆-alkenyl aryl“, „C₂-C₆-alkenyl heteroaryl“, „C₂-C₅-alkinyl aryl“, „C₂-C₆-alkinylheteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl cykloalkyl“ , „Ci-C₆-alkyl heterocykloalkyl“, a kde R'a R společně s atomem dusíku, na který jsou vázány, mohou případně tvořit 3-8-členný heterocykloalkylový kruh.

„Ci-C₆-alkyl ureido“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají substituent ureido, zahrnující 2-(/V'-methylureido)ethyl a podobně.

„Karbamať znamená skupinu -NRC(O)OR', kde každý R, R' je nezávisle vodík, „CL-Ce-alkyl“, „C₂-C₆-alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyl“, „C₃-C8-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl aryl“ nebo „Ci-C_e-alkyl heteroaryl“, „C₂-C₆-alkenyl aryl“, „C₂-C_s-aIkenyl heteroaryl“, „C₂-C₆~alkínyl aryl“, „C₂-C_s-alkinylheteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl cykloalkyl“, „Ci-C₆-alkyl heterocykloalkyl“.

- 11 „Amino“ znamená skupinu -NRR', kde každý R, R' je nezávisle vodík, „Ci-C₆alkyl“, „C₂-C6-alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyl“, „C3-C₈-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl aryl“ nebo „Ci-C₆-alkyl heteroaryl“, „C₂-C₆alkenyl aryl, „C₂-C₆-alkenyl heteroaryl, „C₂-C₆-alkinyl aryl“, „C₂-C₆-alkinylheteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl cykloalkyl“, „Ci-C_e-alkyl heterocykloalkyl“, a kde R a R' společně s atomem dusíku, na který jsou vázány, může případně tvořit 3 až 8-členný heterocykloalkylový kruh.

„Ci-C₆-alkyl amino“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají substituent amino, zahrnující 2-(1 -pyrrolidinyl)ethyl a podobně.

„Amonium“ znamená kladně nabitou skupinu -N⁺RR'R'', kde každý R, R', R je nezávisle „Ci-Ce-alkyl“, „C₂-C₆-alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyl“, „C₃-C₈-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl, „Ci-Ce-alkylaryl“ nebo „Ci-C₆-alkylheteroaryl“, „C₂-C₆alkenylaryl“, „C₂-C₆-alkenylheteroaryl“, „C₂-C₆-alkinylaryl“, „C₂-C₆-alkinyl heteroaryl“, „Ci-C₆-alkylcykloalkyl“, „Ci-C₆-alkylheterocykloalkyl“, a kde R a R' společně s atomem dusíku, na který jsou vázány, mohou případně tvořit 3 až 8-členný heterocykloalkylový kruh.

„Ci-Ce-alkylamonium“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají amoniový substituent, zahrnující 2-( 1 -pyrrolidinyl)ethyl a podobně.

„Ionizovatelný zbytek“ znamená zbytek, který může být převeden na sůl, například protonizací, zbytky amino nebo sulfonyl jsou příklady ionizovatelných/protonizovatelných zbytků.

„Halogen“ znamená atomy fluoru, chloro, bromu nebo jodu.

„Sulfonyloxy“ znamená skupinu -OSO₂-R, kde R je zvolen z H, „Ci-C₆-alkyr, „C^Ce-alkyl“, substituovaného halogeny, například skupina -OSO2-CF3, „C₂C₆-alkenyl“, „C2-C₆-alkinyl“, „C₃-C8-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C₆-alkylaryl“ nebo „C-Cs-alkylheteroaryl“, „C₂-C₆-alkenyl aryl“, „C₂-C₆-alkenylheteroaryr, „C₂-C₆-alkinylaryr, „C₂-C₆-alkinylheteroaryl“, „Ci-C₆-alkylcykloalkyl“, „Ci-C₆-alkylheterocykloalkyl“.

„Ci-C₆-alkylsulfonyl“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají substituent sulfonyloxy, zahrnující 2-(methylsulfonyloxy)ethyl a podobně.

„Suifonyl“ znamená skupinu ,,-SO₂-R“, kde R je zvolen H, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-Cs-alkyl“, „Ci-C_s-alkyl“, substituovaného halogeny, například skupina -SO₂-CF₃, „C₂-C₆-alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyl“, „C₃-C₈-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-Ce-alkylaryl“ nebo „Ci-C₆-alkylheteroaryl“, „C₂Ce-alkenylaryl“, „C₂-C₆-alkenylheteroaryl“, „C₂-C_s-alkinylaryl“, C₂-C₆-alkinyl heteroaryl“, „Ci-C₆-alkylcykloalkyl“, „Ci-Ce-alkylheterocykloalkyl“.

„Cú-Cs-alkylsulfonyl“ znamená skupiny C^Ce-alkyl, které mají sulfonylový substituent, zahrnující 2-(methylsulfonyl)ethyl a podobně.

„Sulfinyl znamená skupinu ,,-S(O)-R, kde R je zvolen z H, „Ci-C_s-alkyl“, „Ci-C₆-alkyl“, substituovaný halogeny, například skupina -SO-CF3, „C₂-C₆alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyr‘, „C3-C₈-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Cú-Ce-alkylaryr nebo „Ci-Ce-alkylheteroaryl“, „C₂-C₆-alkenylaryl“, „C₂-C₆-alkenylheteroaryl“, „C₂-C₅-alkinylaryl“, „C₂-C₅-alkinylheteroaryl“, „Ci-Ce-alkylcykloalkyl“, „Ci-C₆-alkylheterocykloalkyr.

„Ci-Cs-alkylsuIfinyl“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají sulfinylový substituent, zahrnující 2-(methylsulfonyl)ethyl a podobně.

- 13 „Sulfanyl“ znamená skupiny -S-R, kde R zahrnuje H, „Ci-Ce-alkyl“, „Ci-C₆alkyl“, substituovaný halogeny, například skupinu -SO-CF₃, „C₂-C₆-alkenyr, „C2-C6-alkinyl“, „C₃-C8-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Ci-C_s-alkylaryl“ nebo „Ci-C₆-alkylheteroaryl“, „C2-C₆-alkenylaryr, „C₂-C₆alkenylheteroaryl“, „C₂-C₆-alkinylaryl“, „C2-C₆-alkinylheteroaryl“, „Ci-C₆-alkyl cykloalkyl“, „Ci-C₆-alkylheterocykloalkyl“. Výhodné sulfanylové skupiny zahrnují methylsulfanyl, ethylsulfanyl a podobně.

„Ci-C_s-alkylsulfanyl“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají sulfanylový substituent, zahrnující 2-(ethylsulfanyl)ethyl a podobně.

„Sulfonyiamino“ znamená skupinu -NRSO₂-R', kde každý R, R' zahrnuje nezávisle vodík, „Ci-C₆-alkyl“, „C₂-C₆-alkenyl“, „C2-C₆-alkinyl“, „C₃-C_s-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „aryl“, „heteroaryl“, „Cí-Ce-alkylaryl“ nebo „Ci-C₆alkylheteroaryl“, „Ci-C₆-alkenylaryl“, „C₂-C₆-alkenylheteroaryl“, „C₂-C₆-alkinyl aryl“, „C₂-C₆-alkinylheteroaryr, „Ci-C₆-alkylcykloalkyi“, „Ci-C₆-alkylheterocykloalkyl“.

„Ci-Ce-alkylsulfonylamino“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají sulfonylaminový substituent, zahrnující 2-(ethylsulfonyiamino)ethyl a podobně.

„Aminosulfonyl znamená skupinu -SO₂-NRR', kde R, R'zahrnuje nezávisle vodík, „C i-Cs-alkyl“, „C₂-C6-alkenyl“, „C₂-C₆-alkinyl“, „C₃-C₈-cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „alkyl“, „heteroaryl“, „Ci-C₆-alkylaryl“ nebo „Ci-C₆-alkylheteroaryl“, „C₂-C_e-alkenylaryl“, „C2-C₆-alkenylheteroaryl“, „C₂-C₅-alkinylaryl“, „C₂-C₆-alkinylheteroaryl“, „Ci-C₆-alkylcykloalkyl“, „Ci-C_s-alkylheterocykloalkyl“.

- 14 • · ·* 9 9 9 9 99 φ

9 99 9 9 9 · • · · · · 999 9999«

9·«·· ·· 99 9 « „Ci-Cs-alkylaminosulfonyl“ znamená skupiny Ci-C₆-alkyl, které mají aminosulfonylový substituent, zahrnující 2-(cyklohexylaminosulfonyl)ethyl a podobně.

„Substituovaný nebo nesubstituovaný“: Pokud není uvedeno jinak definicí jednotlivého substituentu, výše uvedené skupiny, jako „alkyl“, „alkenyl“, „alkinyl“, „aryl“ a „heteroaryl“ a další skupiny mohou být substituovány 1 až 5 substituenty, zvolenými ze skupiny, sestávající z „Ci-C₆-alkyl“, „C₂-C6-alkenyl“, „C₂-C_s-alkinyl“, „cykloalkyl“, „heterocykloalkyl“, „Ci-C₆-alkylaryl“, „Ci-C₆-alkylheteroaryl“, „Ci-Ce-alkylcykloalkyl“, „Ci-C₆-alkylheterocykloalkyl“, „amino“, „amonium“, „acyl“, „acyloxy“, acylamino“, „amínokarbonyl“, „alkoxy-karbonyl“, „ureido“, „karbamat“, „aryl“, „heteroaryl“, „sulfinyl“, „sulfonyl“, „alkoxy“, „sulfanyl“, „halogen“, „karboxy“, trihalomethyl, kyano, hydroxy, merkapto, nitro a podobně. Alternativně by uvedené substituce také mohly zahrnovat situace, kdy se sousední substituenty podrobily uzavření kruhu, zvláště když zahrnují sousední funkční substituenty, tedy tvoří například laktamy, laktony, cyklické anhydridy, ale také acetaly, thioacetaly, aminaly, vytvořené uzavřením kruhu, například snahou získat ochrannou skupinu.

„Farmaceuticky přijatelné soli nebo komplexy“ znamená soli nebo komplexy níže uvedených sloučenin vzorce, který zachycuje požadovanou bilogickou aktivitu. Příklady těchto solí zahrnují, aniž by tím byly omezeny, adiční soli s anorganickými kyselinami (například kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová, kyselina fosforečná, kyselina dusičná a podobné) a soli vytvořené s organickými kyselinami, jako je kyselina octová, kyselina oxalová, kyselina vinná, kyselina jantarová, kyselina jablečná, kyselina fumarová, kyselina maleinová, kyselina askorbovám kyselina benzoová, kyselina tříslová, kyselina pamová, kyselina alginová, kyselina polyglutamová, kyselina naftalensulfonová, kyselina naftalendisulfonová, kyselina methansulfonová a kyselina poly-galakturonová. Uvedené sloučeniny se mohou také podávat jako farmaceuticky přijatelné kvartem! soli, známé

- 15 odborníkovi v oboru, které sepcificky zahrnují kvarterní amoniové soli vzorce -NR,R',R⁺ Z, kde R,R', R je nezávisle vodík, alkyl nebo benzyl, Ci-C₆alkyl, C₂-C6-alkenyl, C₂-C₆-alkinyl, C,-C_s-alkylaryi, Ci-C₅-alkylheteroaryl, cykloalkyl, heterocykloalkyl a Z je opačný iont, zahrnující chlorid, bromid, jodid, -O-alkyl, toluensulfonát, methylsulfonát, sulfonát, fosfát nebo karboxylát (jako je benzoát, sukcinát, acetát, glykolát, maleát, malát, fumarát, citrát, tartrát, askorbát, cinnamoát, mandloát a difenylacetát).

„Farmaceuticky aktivní derivát“ zanemná kteroukoliv sloučeninu, která při podávání příjemci je schopná působit přímo nebo nepřímo popsaným účinkem.

„Enantiomerní přebytek“ (ee) znamená produkty, které se získají asymetrickou syntézou, například syntézou, týkající se neracemických výchozích materiálů a/nebo reagentů, nebo syntézou, zahrnující alespoň jeden enantioselektivní krok, přičemž vzniká přebytek enantiomeru alespoň 52 %. Z absence asymetrické syntézy se obvykle získají racemické produkty, které však také mají účinek jako antagonisté OT-R.

Obecný vzorec (I) podle předkládaného vynálezu také zahrnuje jeho tautomery, geometrické izomery, opticky aktivní formy, jako jsou enantiomery, diastereomery, a racemátové formy a také farmaceuticky přijatelné soli. Výhodné farmaceuticky přijatelné soli vzorce (I) jsou adiční soli s kyselinami, vytvořené s farmaceuticky přijatelnými kyselinami, jako jsou soli hydrochlorid, hydrobromid, sulfát nebo bisulfát, fosfát nebo hydrogenfosfát, acetát, benzoát, jantarát, fumarát, maleát, laktát, citrát, tartrát, glukonát, methansulfonát, benzensulfonát a para-toluensulfonát.

Jeden aspekt předkládaného vynálezu sestává z pyrrolidin oxadiazolových a thiadiazolových sloučenin vzorce (I).

- 16 • · ·· · · · · ·· · • · ·· · · · · • · · · · «··

Pyrrolidin oxadiazolové a thiadiazolové deriváty podle vzorce (I) jsou vhodné pro modulaci, zvláště pro inhibici funkce OT-R, a specifičtěji pro antagonizaci receptoru oxytocinu. Pokud je receptor oxytocinu vázán sloučeninami podle vzorce (I), je oxytocin antagonizován tak, že je blokován ze svého receptoru a je proto neschopný působit svými biolobickými a farmakoiogickými účinky. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou proto zvláště vhodné pro léčbu a/nebo prevenci onemocnění savců a zvláště lidí, týkajících se oxytocinu.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou sloučeniny vzorce (I).

Uvedený vzorec také zahrnuje své geometrické izomery, opticky aktivní formy, jako jsou enantiomery, diastereomery, a své racemátové formy a také své farmaceuticky přijatelné soli. Výhodné farmaceuticky přijatelné soli sloučenin (I) jsou adiční soli s kyselinami, vytvořené s farmaceuticky přijatelnými kyselinami, jako jsou soli hydrochlorid, hydrobromid, sulfát, bisulfát, fosfát nebo hydrogenfosfát, acetát, benzoát, jantarát, fumarát,

- 17 * · ·· ··«· c· · • · ·· · · · · • · ·· · «··· • · * · 9 · · » 9 * « · maleát, laktát, citrát, tartrát, glukonát, methansulfonát (mesylát), benzensulfonát a para-toluensulfonát.

V uvedeném vzorci (I) je skupina A zvolena ze skupiny, sestávající z -(C=O)-, -(C=O)-O-, -SO₂-, -SO₂NH-, -C(=NH)-, -(C=O)-NH-, -(C=S)-NH, -ch₂-. Nejvýhodnějí je A karbonylová skupina.

B je nesubstituovaný nebo substituovaný thiadiazolový kruh.

R¹ je zvolen ze skupiny, obsahující nebo sestávající z nesubstituované skupiny Ci-C6-alkyl, nesubstituované nebo substituované skupiny C2-C6alkenyl, nesubstituované nebo substituované skupiny C2-C6-alkinyl, nesubstituované nebo substituované skupiny aryl, nesubstituované nebo substituované skupiny heteroaryl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C6-alkylaryl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C6alkylheteroaryl, R¹ může tvořit s atomem O, na který je vázán, 3 až 8-členný substituovaný nebo nesubstituovaný, nasycený nebo nenasycený heterocyklický kruh, který může obsahovyt 1 až 2 další heteroatomy, zvolené z N, S a O, a který je případně spojen se skupinou aryl, heteroaryl nebo 3 až 8-členným nasyceným nebo nenasyceným cykloalkylovým kruhem. Výhodně R¹ je H nebo Ci-C3-alkyl, nejvýhodněji skupina methyl.

R² je zvolen ze skupiny, zahrnující nebo sestávající z nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl, nesubstituované nebo substituované skupiny C₂-C₆-alkenyl, nesubstituované nebo substituované skupiny C₂-C₆alkinyl, nesubstituované nebo substituované skupiny aryl, nesubstituované nebo substituované skupiny heteroaryl, nesubstituované nebo substituované skupiny nasycené nebo nenasycené 3-8-členné skupiny cycloalkyl, acyl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl aryl, nesubstituo- 18 váné nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl heteroaryl, uvedené skupiny cykloalkyl nebo aryl nebo heteroaryl se mohou spojit s 1-2 dalšími skupinami cykloalkyl nebo aryl nebo heteroaryl. Výhodnější je skupina aryl, zvláště skupina fenyl, která je případně substituovaná, například další skupinou (tedy tvoří bifenylový zbytek).

R³, R⁴, R⁵ and R⁶ jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, sestávající ze skupin vodík, halogen, Ci-C₆-alkyl, Ci-C_s-alkoxy. Výhodně je každá z nich H.

Výhodné pyrrolidinové deriváty jsou sloučeniny podle vzorce (I), kde R¹ je zvolen ze skupiny, sestávající z H nebo -Ci-C₆ alkyl, zvláště -CH₃, A je -(C=O)-, R² je substituovaná nebo nesubstituovaná skupina aryl, substituovaná nebo nesubstituovaná skupiny heteroaryl, zvláště skupina bifenyl.

Podle výhodného provedení, substituent B je 1,2,4 oxadiazolový substituent, který může být vázán na pyrrolidinový kruh následujícími způsoby (Ha) or (Nb):

(Hb)

V uvedeném vzorci (lla) a (lib) je R⁷ zvolen ze skupiny, obsahující nebo sestávající ze skupin vodík, sulfonyl, amino, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl, nesubstituované nebo substituované skupiny C₂-C₆-alkenyl, nesubstituované nebo substituované skupiny C₂-C₆alkinyl, kde uvedené řetězce alkyl, alkenyl, alkinyl mohou být přerušeny heteroatomem, zvoleným z N, O nebo S, nesubstituované nebo substituované skupiny aryl, nesubstituované nebo substituované skupiny heteroaryl, nesubstituované nebo substituované nasycené nebo nenasycené 3 až 8- 19 -

členné skupiny cykloalkyl, nesubstituované nebo substituované skupiny heterocykloalkyl, kde uvedené skupiny cykloalkyl, heterocykloalkyl, aryl nebo heteroaryl mohou být spojeny s 1-2 dalšími skupinami cykloalkyl, heterocykloalkyl, aryl heteroaryl, acylového zbytku, nesubstituované nebo substituované skupiny (X-Ce-alkyl aryl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl heteroaryl, nesubstituované nebo substituované skupiny C₅-C₆-alkenyl aryl, nesubstituované nebo substituované skupiny C-i-C₆-alkenyl heteroaryl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkynyl aryl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkinyl heteroaryl, unsubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl cycloalkyl, nesubstituované nebo substituované skupiny C^-Ce-alkyl heterocycloalkyl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkenyl cycloalkyl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkenyl heterocycloalkyl, nesubstituované nebo substituované skupiny CT-Ce-alkinyl cycloalkyl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkinyl heterocycloalkyl, substituované nebo nesubstituované skupiny alkoxycarbonyl, substituované nebo nesubstituované skupiny aminokarbonyl, substituované nebo nesubtituované skupiny Ci-C₆-alkyl karboxy, substituované nebo nesubstituované skupiny Ci-C₆-alkyl acyl, substituované nebo nesubstituované skupiny aryl, acyl, substituované nebo nesubstituované skupiny heteroaryl acyl, substituované nebo nesubstituované skupiny C₃-C₈-(hetero)cykloalkyl acyl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl acyloxy, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl alkoxy, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C_s-alkyl alkoxykarbonyl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C_s-alkyl aminokarbonyl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl acylamino, acylamino, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl ureido, substituované nebo nesubstituované skupiny C-C₆-alkyl karbamat, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl amino, nesubstituované nebo substituované skupiny CiCs-alkyl ammonium, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl sulfonyloxy, nesubstituované nebo substituované skupiny C^Ce-alkyl sulfonyl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl sulfinyl, nesubstituo- 20 váné nebo substituované skupiny Ci-C6-alkyl sulfanyl, nesubstituované nebo substituované Ci-C₆-alkyl sulfonylamino, nesubstituované nebo substituované skupiny C-i-C₆-alkyl aminosulfonyl, hydroxy, halogen, kyano.

Podle výhodného provedení R⁷ je substituent, obsahující ionizovatelný zbytek (zvláště protonizovatelný).

Zvláště může být R⁷ zvolen ze skupiny, sestávající ze zbytků karboxy nebo amino.

Alternativně může být R⁷ zvolen ze skupiny, sestávající z kteréhokoliv z výše uvedených substituentů, které mají alespoň jeden zbytek karboxy nebo amino. Výhodným ionizovatelným zbytkem je cyklický terciární amin (heterocykloalkyl).

Výhodnější jsou Ci-C₆-alkyl amino, heterocycloalkyl, jako piperaziny nebo piperidiny, C-i-Ce-alkyl heterocykloalkyl, aminokarbonyl, Ci-C₆-alkyl aminokarbonyl, Ci-C₆-alkyl acylamino, Ci-C₆-alkyl sulfonyl, Ci-C₆-alkyl karboxy.

Nejvýhodnější jsou are dimethylaminomethyl, 2-(dimethylamino)ethyl, 1methyl-3-piperidinyl, (4-acetyl-1-piperazinyl)-methyl.

Podle dalšího provedení substituent B je 1,3,4-oxadiazol vzorce (IV) nebo jeho tautomer vzorce (III):

(iv)

• · · · » « · · a * · · * « • · · ·····

V uvedeném vzorci (III) a (IV) X je O nebo S, přičemž v případě vzorce (IV) X může být také vazba. V případě, kdy X je O nebo S a R₈ je vodík, sloučeniny vzorce (IV) znamenají odpovídající tautomery vzorce (III).

R_a vzorce (IV) je zvolen ze skupiny, obsahující nebo sestávající ze skupiny vodík, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C_e-alkyl, nesubstituované nebo substituované skupiny C₂-C_s-alkenyl, nesubstituované nebo substituované skupiny C₂-C₆-alkíny[, nesubstituované nebo substituované skupiny aryl, nesubstituované nebo substituované skupiny heteroaryl, nesubstituované nebo substituované nasycené nebo nenasycené 3 až 8členné skupiny cykloalkyl, případně obsahující alespoň jeden heteroatom (například 1 až 3), zvolený z N, O, S, acylového zbytku, nesubstituované nebo substituované skupiny C-i-Cs-alkyl aryl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkyl heteroaryl, nesubstituované nebo substituované skupiny Ci-C₆-alkenyl aryl, nesubstituované nebo substituované skupiny CÁ-Cs-alkenyl heteroaryl, substituované nebo nesubstituované skupiny alkoxykarbonyl, karboxylového amidu, substituované nebo nesubstituované skupiny Ci-C₆-alkoxy, substituované nebo nesubstituované skupiny aryloxy, substituované nebo nesubstituované skupiny heteroaryloxy, halogen, cyano, substituované nebo nesubstituované skupiny Ci-C₆-alkyl carbonyl, substituované nebo nesubstituované skupiny aryikarbonyl nebo heteroarylkarbonyl, substituované nebo nesubstituované nasycené nebo nenasycené skupiny C4-C₈-cycloalkylkarbonyl, kde uvedené skupiny cycloalkyl nebo aryl nebo heteroaryl mohou být spojeny s 1-2 dalšími skupinami cykloalkyl nebo aryl nebo heteroaryl a kde uvedený řetězec alkyl, alkenyl, alkinyl může být přerušen heteroatomem, zvoleným z N, O nebo S.

Zvláště výhodné pyrrolidinové deriváty jsou sloučeniny podle vzorce (I), kde A je -(C=O), R¹ je skupina Ci-C₆ alkyl, R² je buď skupina aryl nebo heteroaryl, přičemž každý z R³, R⁴, R⁵ a R⁶ je H a B je oxadiazol vzorce (lIa), (lib), (III) nebo (IV).

Nejvýhodnější pyrrolidinové deriváty jsou sloučeniny podle vzorce (I), kde A je -(C=O), R¹ je skupina methyl, R² je buď (ne)substituovaná skupina aryl nebo

- 22 (ne)substituovaná skupina heteroaryl, přičemž každý z R³, R⁴, R⁵ a R⁶ je H a B je oxadiazol vzorce (11a), (lib), (III) a (IV), zvláště 1,2,4 oxadiazol vzorce (Ha) nebo (lib).

Nejvýhodnější pyrrolidinové deriváty jsou sloučeniny podle vzorce (I), A je -(C=O), R¹ je skupina methyl, R² je skupina bifenyl, přičemž každý z R³, R⁴, R⁵ a R⁶ je H a B je oxadiazol podle vzorce (Ha), (lib), (III) a (IV), zvláště 1,2,4 oxadiazol vzorce (Ha) nebo (lib).

Sloučeniny vzorce (I) mohou obsahovat jedno nebo více asymetrických center a mohou proto existovat jako enantiomery nebo diastreoizomery. Rozumí se tím, že vynález zahrnuje obě směsi a odděleně jednotlivé izomery nebo enantiomery sloučenin vzorce (I). Ve zvláště výhodném provedení se pyrrolidinové deriváty podle vzorce (I) získají v enantiomerním přebytku alspoň 52 % ee, výhodně alespoň 92-98% ee.

Specifické příklady sloučenin vzorce (I) zahrnují následující sloučeniny:

(3EZ,5S)-1-([1,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-[(2'-methyl[1,r-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-yIkarbonyl)-5-(1,3,4-oxadiazol-2-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-oxo-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-thioxo-4,5-díhydro-1,3,4oxadiazol-2-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-(3-benzyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3pyrrolidinon O-methyloxim

- 23 (3£Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(3-{[(2-furylmethyl)sulfanyl]methyl}1.2.4- oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[2-oxo-2-(1-pyrrolidinyl)ethyl]1.2.4- oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3£Z,5S)-1-([1 ,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(2-pyridinylsulfanyl)methyl]1.2.4- oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(4-fluorofenyl)-1,2,4-oxadiazol-5yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(2-thienylsulfanyl)methyl]-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[2-(3,5-dimethyl-1 H-pyrazol-1 yl)ethyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(methylsulfonyl)methyl]-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(5-methyl-3-isoxazolyl)-1,2,4oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1 ,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-thienylmethyl)-1,2,4-oxadiazol5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -([1,1'-bifeny l]-4-y Ikarbon y l)-5-(3-fe ny I -1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1, 1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(3-{[(2-furylmethyl)sulfonyl]methyl}1.2.4- oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3£Z,5S)-5-[3-(aminomethyl)-1,2,4-oxad iazol-5-yl]-1 -([ 1,1bifeny l]-4ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

(3EZ,5S)-1-([1 .V-biphenylH-ylkarbonylj-S-fS-nRSj-hydroxyfphenyOmethyl]1,2,4-oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(1F?S)-1-hydroxypropyl]-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-biphenyl]-4-ylcarbonyl)-5-[3-(hydroxymethyl)-1,2,4oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(1S,2R)-2-hydroxycyklohexyl]1,2,4-oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-biphenyl]-4-ylcarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5RS)-1-([1 ,T-bifenyi]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol-5yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(3/?S)-piperidinyl]-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(2/?S)-piperidinyl]-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-[(2'-chloro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-1-{[2'-(trifluoromethyl)[1,1 'biphenyl]-4-yl]karbonyl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5S)-1-[(2'-fluoro[1,1’-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim • · * ·

- 25 (3EZ,5S)-1-[(4'-fluoro[1,1’-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -([1,1 ’-b if eny l]-4-y I ka rbo ny l)-5-(1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3E,5S)-1-[(2'-fluoro[1,1'-biphenyl]-4-yl)carbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3E,5S)-1-[(2'-methyl[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5S)-1-[(2'-methyl[1,1'-biphenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(fenoxymethyl)-1,2,4-oxadiazol-3yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-phenyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim /\/-({3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1.2.4- oxadiazol-5-yl}methyl)acetamid (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[4-(hydroxymethyl)fenyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(2S)-2-hydroxy-2-fenylethyl]1.2.4- oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim {3-[(2S,4EZ)-1-([1,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1.2.4- oxadiazol-5-yl}methylformamid • · · · · ···· ··· ···· · · « ··· ·«· ·« » » · · » • « · * · · · · · ♦ · · · ····· ·· «· * · ·

- 26 (3£Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(methoxymethyl)-1,2,4-oxadiazol3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3£Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(2-fenoxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-3yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3£Z,5S)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(2-methoxyethyl)-1,2,4-oxadiazol3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-[5-(1 -acetyl-4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]-1 -([1,1 ’-bifenyl]-4ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(2-pyridinyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -([1,1 ’-bifenyl]-4-y Ika rbony l)-5-[5-(3-th ieny I)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]-3pyrrolidinon O-methyloxim (3£Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-ethyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-cyklopentyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-methyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(ES)-hydroxy(fenyl)methyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(1RS)-1-hydroxy-2-fenylethyl]1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(1 R)-1 -(dimethylamino)-2fenylethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim

- 27 (3EZ,5S)-1-([1 ,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(3-pyridinyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(4-pyridinyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5S)-5-{5-[(4-acetyl-1 -piperazinyl)methyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1 -([1,1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-[3-(1 -acetyl-4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-1-([1,1'-bifenyl]-4ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-{5-[(4-acetyl-1-piperazinyl)methyl]-1,2,4-oxad iazoI-3-y l}-1 -([1,1 'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

A/-({3-[(2S,4£Z)-1-([1,1^,-bifeny!]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)-3-(1-piperidinyl)propanamid (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(3S)-1-methylpiperidinyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(3E)-1-methylpiperidinyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(6-hydroxy-3-pyridinyl)-1,2,4oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(dimethylamino)methyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-{5-[(1S,2/?)-1-amino-2-hydroxypropyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1([1,1 ’-bifenyl]-4-yIkarbonyl)-3-pyrroIidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(3S)-piperidinyl]-1,2,4-oxadiazol3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylcarbonyl)-5-{5-[(3R)-piperidinyl]-1,2,4-oxadiazol3- yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxím (3EZ,5RS)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(1-methyl-3-piperidinyl)-1,2,4oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim řerí-butyl-(3E)-3-{3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinylj-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-1-piperidinekarboxylat

4- ({3-[(2S,4EZ)-1-([1,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)-2,6-piperazindion (3Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5S)-1-[(2'-chloro-4'-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrroIídinon O-methyloxim (3£ΞΖ, 5S)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-( 1 -methyl-4-piperid inyl)-1,2,4oxadiazoi-3-yl]-3-pyrrolidínon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyi)-5-{5-[(dimethylamino)methyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidínon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(1-methyl-4-piperidinyl)-1,2,4oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-{5-[(1S)-1-amino-2-hydroxyethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-([1 ,Γbifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

5- [(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-A/-[3(dimethylamino)propyl]-1,2,4-oxadiazol-3-karboxamid (3E,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(dimethylamino)methyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim

- 29 • · · · · · · · · • * · · · · · • · · · · · ·*···· · terř-butyl-(3S)-3-{3-[(2S,4EZ)-1 -([1,1 '-bifenyi]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-1-piperidinkarboxylat (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(4-methyl-1-piperazinyl)methyl]1.2.4- oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(4-methyl-1-piperazinyl)methyl]1.2.4- oxadiazo!-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim ethyl-5-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1.2.4- oxadiazol-3-karboxylat (3E,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim /V-({3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1.2.4- oxadiazol-5-yl}methyl)-3-(dimethylamino)propanamid ferí-butyl 4-(2-{3-[(2S,4EZ)-1-([1,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}ethyl)-1-piperazinkarboxylat (3EZ,5S)-1-[(2’-chloro-4'-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-[3-(2hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-[(4'-fluoro-2'-methyl[1,r-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbony!)-5-{5-[2-(dimethylamino)ethyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim

2-{5-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-biphenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1.2.4- oxadiazol-3-yl}ethyl [(ferf-butoxykarbonyl)amino]acetat /V-({3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1.2.4- oxadiazol-5-yl}methyl)-2-(dimethylamino)acetamid

- 30 • · ·· · · · · ·· · • · · · · · · · ·· · · · ···· • ··« · ··· ···· «··«· ·· ·· · · · (3EZ,5S)-1-[(2'-chloro-4'-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-{5-[(1S)-1-amino-2-řerř-butoxyethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-([1,1'biphenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim terí-butyl 4-{5-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidínyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-piperidinkarboxylat (3EZ,5S)-1-([1,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(1-piperazinylmethyl)-1,2,4oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim tert-b uty I (4S)-4-{3-[(2S,4EZ)-1 -([1,1 ’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-4-[(ferf-butoxykarbonyl)amino]butanoát

4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{[(řerř-butoxykarbonyl)amino]methyl}-1,2,4-oxadiazol-3-yl)4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1,1'-bifenyl terř-butyl 2-{3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}ethylkarbamat

2-{5-[(2S,4EZ)-1-([1 ,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1.2.4- oxadiazol-3-yl}ethyl aminoacetát (3E,5S)-1 -[(2',4'-difluoro[1,1 '-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-[(2',4'-difluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{(1S)-2-te/Ť-butoxy-1-[(terf-butoxykarbonyl)amino]ethyl}1.2.4- oxadiazol-3-yl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1 ,Γ-bifenyl (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-vinyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim

- 31 • · » ······ ··· ···· · · · ··· «·· · · * ···· • · ··· · · · · ···· ····· · · · · ·· ·

4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{(1S,2R)-2-terí-butoxy-1-[(terf-butoxykarbonyl)amino]propyl}-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1,1 bifenyl (3Z,5S)-1-[(2',4'-difluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim řerř-butyl 4-({3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bífenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)-1-piperazinkarboxylat

Další aspekt předkládaného vynálezu se týká použití pyrrolidin oxadiazolových nebo -thiadiazolových derivátů podle vzorce (I) jako léčivo, zvláště pro léčbu a/nebo prevenci předčasných porodních stahů, předčasného porodu, zastavení porodu před císařským řezem a bolestivé menstruace. Výhodně jsou sloučeniny podle vzorce (I) vhodné pro modulaci funkce OT, proto specificky umožňují léčbu a/nebo prevenci poruch, které jsou způsobeny receptorem oxytocinu. Uvedená léčba umožňuje modulaci - zvláště regulaci nebo antagonizaci - receptoru oxytocinu.

Specifičtěji jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu vhodné pro léčbu předčasného porodu, bolestivé menstruace a pro zastavení porodu před císařským řezem.

Ještě dalším předmětem předkládaného vynálezu je způsob výroby pyrrolidinových derivátů podle vzorce (I).

Pyrrolidinové derivativáty, uvedené v tomto vynálezu jako příklad, se mohou vyrobit z obvykle dostupných výchozích materiálů za použití následujících obecných metod a postupů. Bude zřejmé, že tam, kde jsou uvedeny obvyklé nebo výhodné experimentální podmínky (například teploty, čas, moly reagentů, roztoky atd.), se mohou použít jiné experimentální podmínky, pokud není uvedeno jinak. Optimální reakční podmínky se mohou měnit s konkrétně

- 32 • · ·· ···· ·· · ·· · · · · · · ·· · · · · · · · • · · · · · · · · · · · ····· ·· · · ·· · používanými reagenty nebo rozpouštědly, ale tyto podmínky se mohou stanovit odbormíkem v oboru rutinními optimalizačními postupy.

Obecně by se mohly pyrrolidinové deriváty podle obecného vzorce (I) získat několika způsoby za použití protokolů chemie rozpuštěné fáze a pevné fáze.

Podle jednoho způsobu se pyrrolidinové deriváty podle obecného vzorce (I), kde substituent B je 1,2,4 oxadiazol vzorce (Ha), vyrobí z odpovídajících sloučenin karboxylové kyseliny (V) a amidoximů (VI), přičemž substituenty R¹R⁷ a A jsou definovány výše, pomocí známých protokolů chemie kapalné fáze, jako je způsob uvedený v příkladech a zobrazen ve schéma 1 níže.

Schéma 1

Amidoximové sloučeniny (VI) se získají buď z průmyslových zdrojů nebo se vyrobí z odpovídajících nitrilů (VII) tak, že se provede jejich reakce s hydroxylaminem za standardních podmínek, která je dobře známá odborníkovi v oboru, jako je reakce popsaná v příkladech a zobrazená ve schéma 2 níže.

Scheme 2

HO.

H₂N r⁷

VII

VI

- 33 • · · · ···· ·· · • 9 · · · ··· » · · 9 * ···· « ··· · · · · ·»·· • · « · · ·· «· · · ·

Nitrilové sloučeniny VII se získají buď z průmyslových zdrojů nebo se vyrobí například z odpovídajících karboxylových kyselin (Vlil) tak, jak je uvedeno ve schéma 3, že se provede některý ze způsobu vzájemné konverce funkční skupiny, který je dobře znám odborníkovi v oboru, přičemž se provede přeměna karboxylové kyseliny na odpovídající nitril. Příklady zahrnují (i) redukci karboxylové kyseliny (Vlil) na odpovídající karbaldehyd s následnou transformací na odpovídající oxim a dehydrataci posledně uvedeného na odpovídající nitril (VII) za použití, například Λ/,Λ/'-karbonyldiimidazolu nebo podobných reagentů, nebo (ii) transformaci karboxylové kyseliny (Vlil) na odpovídající primární karboxamid s následnou dehydratací na odpovídající nitril (VII), za použití standardních podmínek bobře známých odborníkovi v oboru, které jsou popsány dále v příkladech.

Schéma 3

HO

Vlil

VII

Pyrrolidin-2-karboxylové kyseliny (V) (viz schéma 1), přičemž substituenty R¹R⁷ a A jsou definovány výše, se mohou vyrobit ze sloučenin obecného vzorce (IX) tak, že se provede reakce se substituovanými hydroxylaminy (X) za použití standardních technik syntézy, které jsou dále popsány v příkladech a zobrazené ve schéma 4.

- 34 • * ·· ···· ·· · • · ·· · ♦ · · ·· ·· · ····

Schéma 4

Sloučeniny vzorce (X) se získají buď z průmyslových zdrojů nebo se vyrobí z /V-Boc-hydroxylaminu (XI) a alkylačních činidel (XII) (X = Cl, Br, I) standardními tachnikami syntéz, které jsou zobrazeny ve schéma 5 a popsány dále v příkladech.

Schéma 5

XI XII x

Ketosloučeniny obecného vzorce (IX), kde substituenty R¹-R⁷ a A jsou definovány způsobem uvedeným výše, se mohou vyrobit tak, že se provede oxidace průmyslově dostupného, vhodně /V-chráněného 4-hydroxyprolinu (XIII), za použití standardních technik syntéz, které jsou popsány v příkladech a zobrazeny ve schéma 6. Alternativně se sloučeniny obecného vzorce (IX) samotné mohou získat ze sloučenin obecného vzorce (V) transformací oximetheru na ketonový zbytek, například za podmínek slabé hydrolýzy, jak je popsáno dále v příkladech. Pokud se v tomto případě na ketosloučeniny (IX)

následně opět působí jinou hydroxylaminovou sloučeninou X*, jak je zobrazeno ve schéma 6, potom celá transformace V^IX—>V* bude odpovídat vzájemné výměně R¹ v oximetherovém zbytku sloučenin obecného vzorce (V). Analogická oximetherová vzájemná přeměna je možná na úrovni konečných sloučenin obecného vzorce (I) (I -»XIV —>!*). jak je také zobrazeno ve schéma 6.

Schéma 6

Podle jiného způsobu se pyrrolidinové deriváty podle obecného vzorce (I), přičemž substituent B je 1,2,4 oxadiazol vzorce (lib), vyrobí z odpovídajících sloučenin amidoximu kyseliny (XV), přičemž substituenty R¹-R⁷ a A jsou definované způsobem uvedeným výše, a karboxylové kyseliny (Vlil) se vyrobí • · · • · · · · · · ·»· ··· ·· · » · · · « · ··· · · · » *···· ··· ···· ·· *

99 99 99 9 9 99 9

- 36 dobře známými protokoly chemie rozpuštěné fáze, které jsou popsány v příkladech a zobrazeny ve schéma 7 níže.

Schéma 7

Vlil

[B = lib]

Amidoximové sloučeniny (XV) se získají z odpovídajících nitrilů (XVI), přičemž substituenty R¹-R⁷ a A jsou definovány způsobem uvedeným výše tak, že se na posledně uvedené působí hadroxylaminem za standardních podmínek, dobře známých odborníkovi v oboru, jak je popsáno v příkladech a zobrazeno ve schéma 8 níže. Nitrilové sloučeniny (XVI) samotné se vyrobí například z odpovídajících karboxylových kyselin (V), kde substituenty R¹-R⁷ a A jsou definovány způsobem uvedeným výše, způsoby vzájemné konverze kterékoliv funkční skupiny, dobře známých odborníkovi v oboru, přičemž se karboxylová kyselina transformuje na odpovídající nitril. Příklady zahrnují (i) redukci karboxylové kyseliny (V) na odpovídající karbaldehyd s následnou transformací na odpovídající oxim a dehydrataci posledně uvedeného na odpovídající nitril (XVI) za použití například Λ/,Λ/’-karbonyldiimidazolu nebo podobných reagentů, nebo (ii) transformaci karboxylové kyseliny (V) na odpovídající primární karboxamid a následnou dehydratací na odpovídající nitril (XVI), za použití standardních podmínek, dobře známých odborníkovi v oboru, jak je popsáno dále v příkladech.

- 37 Schéma 8

Pyrrolidinové deriváty podle obecného vzorce (I), kde substituent B je 1,3,4 oxadiazol vzorce (III) a/nebo (IV), se mohou vyrobit z odpovídajících hydrazidových sloučenin (XVII), přičemž substituenty R¹-R⁷ a A jsou definovány způsobem uvedeným výše, protokoly chemie rozpuštěné fáze, dobře známé odborníkovi v oboru, které jsou popsány v příkladech a zobrazeny ve schéma 9 níže. Například sloučeniny vzorce (I), kde substituent B je 1,3,4 oxadiazol vzorce (III), se mohou získat reakcí sloučeniny (XVII) s CDI nebo CS₂, za bazických podmínek, přičemž se získají odpovídající produkty, kde X je O a nebo S. Alternativně mohou the hydrazidové meziprodukty (XVII) reagovat s TMOF a následně s P₂O₅ v refluxujícím toluenu, přičemž se vznikají sloučeniny vzorce I, kde B je (IV).

- 38 Schéma 9 • · · ·· ···· * · « » « · · · · · ··· ··· · · · · · · · ·· ··· * · · · ····

CDI (X=0) nebo CS₂ (X=S)

I [B = lila (X=O)] I [B = lllb(X=S)]

Hydrazidové sloučeniny (XVII) se získají například z odpovídajících karboxylových kyselin V, přičemž substituenty R¹-R⁷ a A jsou definovány způsobem uvedeným výše, pomocí odpovídajících methylesterů (XVIII) a následnou reakcí posledně uvedeného s hydrazinem za standardních podmínek, dobře známých odborníkovi v oboru, které jsou popsány v příkladech a zobrazeny ve schéma 10 níže.

- 39 Schéma 10

• r · · · · · · · • · · · · · « · · · · · « · · * · · »

Sloučeniny obecného vzorce (I), přičemž substituenty R¹-R⁸ a A jsou definovány způsobem uvedeným výše, jsou proto dostupné z prekurzorů obecného vzorce (V) / (XVIII) (viz schéma 1, 7-10 výše). Obvykle mají uvedené prekurzory vzorce (V) / (XVIII) zpočátku ochrannou skupinou pro atom dusíku pyrrolidinového kruhu, jako je Boc, Fmoc nebo jiné, z toho důvodu označení (V) a/nebo (XVIII’) (-A-R² = ochranná skupina, PG), jak je uvedeno ve schéma 11. Při syntéze konečných sloučenin (I) se A/-ochranné skupiny (V’) a/nebo (XVIII’) obvykle odstraní a nahradí vhodným Λ/substituentem, jako je například acylová skupina, skupina -C(O)-R² nebo -SO₂-R², například působením acylačního činidla nebo sulfonačního činidla (XX). Další sloučeniny vzorce (XX) jsou karboxylační činidla, sulfonační činidla, sulfonamidační činidla, imidační činidla, amidační činidla, thioamidační činidla nebo alkylační činidla. Vazba žádaného zbytku (-A-R²) na pyrrolidinový atom dusíku se může provést buď po nebo před vznikem oxadiazolového nebo thiadiazolového kruhu, jak je zobrazeno ve schéma 11 (A a nebo B), a popsáno dále v příkladech. Nejvhodnější volbou sekvenčního protokolu syntézy bude záviset na povaze substituentů R¹-R⁸ (zvláště R⁷). Výhodná acylační činidla (XX) jsou chloridy kyseliny (XXa), obvykle používané současně s vhodnými terciárními aminovými bázemi, nebo karboxylová kyselina (XXb), používaná současně s peptidovým vazebným činidlem, například DIC nebo EDC.

- 40 • ·· φφ φφφφ φφ · φφφφ φ φ φ φ » «

5·· Φ Φ * Φ · * · · Φ φ « · ··· » ·Μ« • φ φ Φ « Φ Φ «Φ «· «

Sloučeniny vzorce (I), kde A is -(C=O)-O-, -SO₂-, -SO₂NH-,-C(=NH)-, -(C=O)NH, -(C=S)-NH, -CH₂-, se mohou vyrobit za použiti odpovídajícím způsobem upravených karboxylačních činidel, sulfonačních činidel, sulfonamidových činidel, imidačních činidel, amidačních činidel, thioamidačních činidel nebo alkylačních činidel, například sulfonylchloridy, isokyanáty, isothiokyanáty, chloroformaty, substituované alkylhalidy nebo jiné, za vzniku sulfonamidu, močoviny, thiomočoviny, karbamatu, substituovaných alkylových derivátů a nebo jiných.

- 41 Schéma 11 ·· · · · · · · ·· · • · · · · · ·· · • · · · · 9 < - ·

999 9 9 99 9 9 99 9

[-A-R²=PG₁napr.Boe] (Odstranění ochrany N)

-o. R⁵ .‘Γ« ^R 'h

XIX

XXa(např.A=C(O);LG=CI) XXb(např. A=C(O);LG=OH)

Baze nebo peptidové vazebné činidlo (Schéma 1, 7-10)

[-A-R²= -PG,např.-Boc]

I [-A-R2= -C(O)-R2] (Odstranění ochrany N)

LG

XXa(např.A=C(O);LG=CI) XXb(napf. A=C(O);LG=OH)

Baze nebo peptidové vazebné činidlo (Schéma 1, 7-10)

[-A-R²= -C(O)-R²]

Podle dalšího obecného způsobu se sloučeniny obecného vzorce (I) mohou převést na alternativní sloučeniny vzorce (I') vhodnými technikami vzájemné

- 42 ····· ·· · · ·· konverze chráněné/nechráněné/funkční skupiny, dobře známé odborníkovi oboru, jak je zobrazeno ve schéma 12 a popsáno dále v příkladech.

Schéma 12

[B = Ha, lib]

Kde B'je zbytek B substituovaný výše uvedeným způsobem'

[B‘ = lla', lib']

Příklady zahrnují:

1. Odstranění ochrany N

1. Odstranění ochrany N

2. Alkylace: R-CHjX/baze (X = Cl, Br, I)

2. Acylace: R-COX/baze (X = Cl, Br, OH)

R‘

R’

- 43 Podle ještě dalšího způsobu se pyrrolidinové deriváty podle obecného vzorce (I) vyrobí novým protokolem pevné fáze tak, jak je zřejmé ze schéma 13 a popsáno dále v příkladech. Například při syntéze pevné fáze sloučenin obecného vzorce (I), kde B = (Ha), se provede reakce A/-Boc-chráněného pyrrolidinového derivátu (V) s pryskyřicí, která nese vazbu náchylnou k odštěpení nukleofily, například s oximovou pryskyřicí Kaiser, za použití standardních vazebných podmínek, zprostředkovaných karbodiimidem, dobře známých odborníkovi v oboru. Odstraněním ochrany Boc zředěným TFA v DCM nebo BF₃.OEt₂ ve zředěném HOAc v DCM vznikají sloučeniny vzorce (XXIV). Posledně uvedená sloučenina se může upravit acylačními činidly obecného vzorce (XX), přičemž substituenty A a R² jsou definované způsobem uvedeným výše a LG by mohla být vhodná odštěpitelná skupina. Výhodná acylační činidla (XX) jsou chloridy kyseliny (XXa), používané současně s terciární aminovou baží, nebo karboxylové kyseliny (XXb), používané současně s peptidovým vazebným činidlem, jako jsou například DIC, EDC, TBTU, DECP nebo jiné, přičemž vznikají produkty obecného vzorce (XXIII). Sloučeniny vzorce (I), kde A je odlišná od karbonylové fukční skupiny, se vyrobí náhradou vzorce (XX) sloučeninami, které obsahují vhodné funkční skupiny, například sulfonylchloridy, isokyanaty, isothiokyanaty, chloroformaty, substituované alkylhalidy nebo jiné, za vzniku sulfonamidu, močoviny, thiomočoviny, karbamatu, substituovaných alkylových derivátů a nebo jiných. Aby se získaly finální sloučeniny obecného vzorce (I), odštěpí se vazba na pryskyřici prodlouženým působením amidoximů (VI) s následným zahříváním, například s pyridinem. Kruhy ve schéma 13 symbolizují lože pryskyřice, ka kterou se váží odpovídající sloučeniny během syntézy pevné fáze. Jiné deriváty vzorce (I) se vyrobí za použití známých modifikací nebo variací k sledu reakcí ve schéma 13. Pro syntézy pevné fáze sloučeniny obecného vzorce (I) se mohou kromě výše uvedené oximové pryskyřice Kaiser použít další vhodné reagenty, zvláště pryskyřice, známé odborníkovi v oboru.

•· ···· ·· · • · · · · · • * · · » · · • · · · · ···· ····· ·· *· ·· ·

Schéma 13

R

ΧΧ1ΙΓ [-A-R²= -PG.např.Boc]

Peptidové vazebné činidlo

Odstraněni ochrany N

rí^rS 9

N. „R

XXIII' [-A-R²= -PG.např. Boc]

zA_{x 2}

LG R²

XXa(např.A=C(O)lG=CI)

XXb(např.A=C(O)IG=OH)

Baze nebo peptidové vazebné činidlo ?R^S Q

XXIII [-A-R²= -C(O)-R?]

[-A-Rz= -C(O)-R²] ^h% h₂n^r⁷

VI

[-A-R²= -C(O)-R?]

Sled reakcí, uvedených ve výše uvedených schématech, poskytuje enantiomerně čisté sloučeniny vzorce (I), pokud se používají enantiomerně čisté výchozí sloučeniny. (/?)- a také (S)-enantiomery se mohou získat v závislosti na tom, zda se jako výchozí materiály použily (R)- nebo (S)- formy průmyslově dostupných sloučenin vzorců (V)-(VIII), (X), a/nebo (XX).

Avšak sled reakcí, uvedený ve výše uvedených schématech, obvykle poskytuje směsi (E)- a (Z)-izomerů s ohledem na substituenty na exocyklické dvojné vazbě pyrrolidinového kruhu. Ve všech prostudovaných případech by se tyto (E)/(Z)-izomery mohly oddělit standardními chromatografickými technikami, které jsou dobře známé odborníkovi v oboru, jako je reverzní fáze vysokotlaké kapalné chromatografie (HPLC) nebo silikagelová rychlá chromatografie (FC). Alternativně by se mohl některý z (E)/(Z)-izomerů následně obohatit selektivní krystalizaci ve vhodných rozpouštědlech nebo směsi rozpouštědel. Stanovení absolutní konfigurace exocyklické dvojné vazby se provedlo za použití technik NMR, dobře popsaných v literatuře a známých odborníkovi v oboru (pro stanovení konfigurací například oximových skupin, viz například E. Breitmaier, W. Voelter Carbon-13 NMR Spectroscopy, 3. ed., VCH, 1987, str. 240). Pro zvýšení celkových výtěžků výhodného izomeru (obvykle (Z)-izomer), by se mohl méně výhodný izomer (obvykle (E)izomer) recyklovat svévolnou re-izomerizací v organických rozpouštědlech, obsahující stopy kyseliny, jako je HCI, s následným opětovným dělením (E)/(Z) pomocí chromatografie a/nebo krystallizace, jak je zobrazeno ve schéma 14.

- 46 Schéma 14

A XVb a-r2	Chromatografie a/nebo krystalizace	R\ 0 1 Nx\ tx N AR2	+ ° X a-r2
l-(BZ)		l-(E)	l-(Z)

organické rozpouštědlo, HCI (stopa)

Pokud výše uvedené obecné metody syntézy nejsou aplikovatelné pro získání sloučenin podle vzorce (I) a/nebo nezbytných meziproduktů pro syntézu sloučenin vzorce (I), mohly by se použít vhodné metody výroby, známé odborníkovi v oboru. Obecně bude způsob syntézy kterékoliv jednotlivé sloučeniny vzorce (I) záviset na specifických substituentech každé molekuly a na dostupnosti nezbytných meziproduktů; opět jsou tyto faktory zřejmé odborníkovi v oboru. Pro všechny způsoby ochrany, odstranění ochrany, viz Philip J. Kocienski, v “Protecting Groups’’, Georg Thieme Verlag Stuttgart, New York, 1994 a Theodora W. Greene a Peter G. M. Wuts v “Protective Groups in Organic Synthesis“, Wiiey-lnterscience, 1991.

Sloučeniny podle vynálezu se mohou izolovat společně s molekulami rozpouštědla krystalizací z odparu vhodného rozpouštědla. Farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami sloučenin vzorce (I), které obsahují bazické centrum, se mohou vyrobit obvyklým způsobem. Například se může na roztok volné baze působit vhodnou kyselinou, buď v čisté formě nebo ve vhodném roztoku, a výsledná sůl se izoluje buď filtrací nebo odpařením reakčního rozpouštědla ve vakuu. Farmaceuticky přijatelné adiční soli s baží se mohou získat analogickým způsobem tak, že se na roztok sloučeniny vzorce (I)

působí vhodnou baží. Oba typy soli se mohou vytvořit nebo vzájemně převést za použití iontoměničových technik.

Finální aspekt předkládaného vynálezu se týká použití sloučenin podle vzorce (I) pro léčbu předčasných porodních stahů, předčasného porodu, bolestivé menstruace, výhodně jsou sloučeniny vzorce (I) vhodné pro modulaci receptoru oxytocinu, použití uvedených sloučenin pro výrobu farmaceutických prostředků pro modulaci receptrou oxytocinu a také formulací, obsahujících účinné sloučeniny podle vzorce (I). Uvedená modulace receptoru oxytocinu se považuje za vhodný přístup k léčbě předčasných porodních stahů, předčasného porodu a bolestivé menstruace. Proto farmaceutické prostředky, obsahující sloučeninu vzorce (I) a farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo pomocný prostředek jsou také předmětem předkládaného vynálezu. Odborníkovi v oboru je známo velké množství těchto nosičů, ředidel nebo pomocných sloučenin, vhodných pro formulaci farmaceutického prostředku. Předkládaný vynález také poskytuje sloučeniny pro použití jako léčivo.

Sloučeniny podle vynálezu společně s obvykle používanými adjuvanty, nosiči nebo pomocnými prostředky mohou být obsaženy ve formě farmaceutických prostředků a jejich jednotkové dávky, a v této formě se mohou používat jako pevné látky, jako jsou tablety nebo plněné kapsle, nebo kapaliny, jako jsou roztoky, suspenze, emulze, elixíry, vše pro orální použití, nebo ve formě sterilních injekčních roztoků pro parenterální (zahrnující subskutánní) použití. Tyto formy farmaceutických prostředků a jejich jednotkové dávky mohou obsahovat složky v obvyklých poměrech s nebo bez dalších účinných sloučenin nebo látek a tyto dávkové formy mohou obsahovat jakékoliv účinné množství aktivní složky úměrné rozmezí používané denní dávky.

Pokud se používají jako farmaceutika, podávají se pyrrolidinové deriváty podle tohoto vynálezu obvykle ve formě farmaceutického prostředku. Tyto prostředky se mohou vyrobit způsobem, známým ve farmacii, a obsahují alespoň jednu aktivní sloučeninu. Obecně se sloučeniny podle vynálezu podávají ve farmaceuticky účinném množství. Množství podávané sloučeniny se obvykle stanoví ošetřujícím lékařem, s ohledem na relevantní okolnosti,

• · · · ·

zahrnující podmínky léčby, zvolení cesty podávání, aktuálně podávanou sloučeninu, věk, hmotnost a reakci jednotlivého pacienta, vážnosti příznaků pacienta a podobně.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu se mohou podávat různými cestami, zahrnující orální, rektální, transdermální, subkutánní, intravenozní, intramuskulární a intranazální podávání. Prostředky pro orální podávání mohou mít formu kapalných roztoků nebo suspenzí nebo prášků ve velkém balení. Avšak obvykleji se prostřeky prezentují v jednotkových dávkových formách, aby se usnadnilo přesné dávkování. Pojem “jednotkové dávkové formy” znamená fyzicky oddělené jednotky vhodné jako jednotkové dávky pro lidské subjekty a jiné savce, přičemž každá jednotka, obsahující předem stanovené množství účinné látky, vytvoří společně s vhodnou farmaceutickou pomocnou látkou požadovaný terapeutický účinek. Obvyklé jednotkové dávkové formy zahrnují předem naplněné, předem odměřené ampule nebo stříkačky kapalných prostředků nebo v případě pevných prostředků pilulky, tablety, kapsle nebo podobně. V těchto prostředcích je pyrrolidin oxadiazolová sloučenina obvykle minoritní složkou (asi 0.1 až asi 50 % hotnostních nebo výhodně asi 1 až asi 40 % hmotnostních) a zbytek tvoří různá vehikula nebo nosiče a procesní pomocné prostředky pro vytvoření požadované dávkové formy.

Kapalné formy vhodné pro orální podávání mohou zahrnovat vhodná vodná nebo nevodná vehikula s pufry, suspendační nebo disperzní činidla, koloranty, chuťové látky a podobně. Pevné formy mohou zahrnovat například kteroukoliv z následujících složek nebo sloučeniny podobné povahy: pojivo, jako je mikrokrystalická celulóza, gumu tragant nebo želatinu; pomocnou látku, jako je škrob nebo celulóza, dezintegrační činidlo, jako je kyselina alginová, Primogel nebo kukuřičný škrob; lubrikant, jako je stearan hořečnatý; glidant (kluznou látku), jako je koloidní oxid křemičitý; sladidlo, jako je sacharóza nebo sacharin; nebo chuťovou látku, jako je máta peprná, methylsalicylát nebo pomerančová příchuť.

• · ·

Injektovatelné sloučeniny jsou obvykle založeny na injektovatelném sterilním roztoku soli nebo solném roztoku pufrovaném fosfátem nebo jiných injektovatalných nosičích, známých v oboru. Jako bylo uvedeno výše, pyrrolidinové derivativáty vzorce (I) jsou v těchto prostředcích obvykle minoritní složkou, pohybující se v rozmezí 0.05 až 10 % hmtonostních a zbytek tvoří injektovatelný nosič a podobně.

Výše uvedené sloučeniny pro orální podávání nebo injektovatelné prostředky jsou pouze reprezentativní. Další materiály a také procesní techniky a podobně jsou uvedeny v části 8 spisu Remingtonů Pharmaceutical Sciences, 17. edice, 1985, Marek Publishing Company, Easton, Pennsylvania, na který se předkládaný vynález odkazuje.

Sloučeniny podle vynálezu se mohou také podávat ve formách postupného uvolňování účinné látky z léčiva. Popis reprezentativních materiálů postupného uvolňování lze nalézt ve spisu Remingtonů Pharma-ceutical Sciences, na který se předkládaný vynález odkazuje.

Následně bude vynález objasněn pomocí některých příkladu, které však neznamenají omezení rozsahu vynálezu. HPLC, NMR a MS data, uvedená v příkladech a uvedená níže, se získala dále uvedeným způsobem. V uvedených příkladech se používají následující zkratky: min (minuta), hr (hodina), g (gram), mmol (millimol), m.p. (teplota tání), eq (ekvivalenty), mL (millilitr), pL (mikrolitry), ACN (acetonitril), Boc (butoxykarbonyl), CDCI₃ (deuterizovaný chloroform), CDI (karbonyldiimidazol), cHex (eyelohexaney), DCM (dichloromethan), DECP (diethylkyanofosfonat), DIC (diisopropyl karbodiimid), DMAP (4-dimethylaminopyridin) DMF (dimethylformamid), DMSO (dimethylsulfoxid), DMSO-d₆ (deuterizovaný dimethylsulfoxid), EDC (1(3-dimethyl-amino-propyl)-3-ethylkarbodiimid), EtOAc (ethylacetat), Et₂O (diethylether), Fmoc (9-fluorenylmethoxykarbonyl), HOBt (1-hydroxybenzotriazol), oximová pryskyřice Kaiser (4-nitrobenzofenon oximová pryskyřice); K₂CO₃ (uhličitan draselný), NaH (hydrid sodný), NaHCO₃ (hydrogenuhličitan sodný), nBuLi (n-butyllithium), TBTU (O-benzotriazolyl-A/,/V,/V’,Λ/’-tetramethyluronium-tetrafluoroborat), TEA (triethylamin), TFA (kyselina trifluorooctová),

- 50 THF (tetrahydrofuran), TMOF (trimethylorthoformat), MgSO₄ (síran hořečnatý), PetEther (petroleumether), rt (pokojová teplota).

Příklady provedení vynálezu

Meziprodukt 1: (2S)-1 -(ferc-butoxykarbonyl)-4-oxo-2-pyrrolidinkarboxylová kyselina (cf. schéma 6, sloučenina XIII)

Technická kyselina (2S,4R)-1-(terc-butoxykarbonyl)-4-hydroxy-2-pyrrolidinkarboxylová (30g, 0.13mol) se rozpustila v acetonu (1500ml). Do baňky se umístilo mechanické míchadlo a roztok se silně míchal. Čersvě vyrobený roztok 8N kyseliny chromové se připravil rozpuštěním oxidu chromitého (66.7g, 0.667mol) ve vodě (40ml), přidáním koncentrované kyselina sírové (53.3ml) a přidáním dostatečného množství vody dosáhl objem roztoku 115ml. Roztok 8N kyseliny chromové (115ml) se potom po kapkách přidával po dobu 30 minut za stále silného míchání, přičemž se exotermní reakce udržovala při optimální teplotě 25 °C za použití ledové lázně. Po úplném přidání kyseliny chromité se reakční směs míchala dalších 15 minut, přičemž se udržovala optimální teplota 25 °C. Reakční směs se potom prudce schladila přidáním methanolu (20 ml). Exothermní reakce se kontrolovala použitím ledové lázně a pokud to bylo bezbytné přímým přidáním malého množství drceného ledu do samotné reakční směsi. Reakční směs se potom filtrovala vrstvou celitu a potom zkoncentrovala ve vakuu. Výsledný kyselý roztok se potom extrahoval ethylacetátem (3 x 300 ml) a spojené organické vrstvy se promyly solným roztokem (2 x 100 ml). Organická fáze se potom sušila síranem hořečnatým a zkoncentrovala ve vakuu. Surový produkt rekrystalizoval z ethylacetátu za

vzniku bílého krystalického produktu, (2S)-1-(řerc-butoxykarbonyl)-4-oxo-2pyrrolidinkarboxylové kyseliny (22,55g, 76%). Antipodovy meziprodukt, (2R)1-(terf-butoxycarbonyl)-4-oxo-2-pyrrolidin-karboxylová kyselina, se vyrobil podle stejného protokolu, přičemž se vycházelo z technické (2R,4S)-1-(řercbutoxykarbonyl)-4-hydroxy-2-pyrrolidinkarboxylové kyseliny.

1H NMR (360MHz, CDCI3); 1.4 (m, 9H), 2.5-3.0 (m, 2H), 3.7-3.9 (m, 2H), 4.75 (dd, 1H)

Mezitproukt 2: (2S,4EZ)-1 -(ferc-butoxvkarbonvl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylová kyselina (cf. schéma 4, sloučenina V)

Vyrobil se roztok, obsahující (2S)-1-(íerc-butoxykarbonyl)-4-oxo-2-pyrrolidinkarboxylovou kyselinu (meziprodukt 1, 5.0g, 21mmol) and O-methylhydroxylamin hydrochlorid (2.7g, 32.8mmoi) in chloroformu (100ml), obsahujícím triethylamin (5.5g, 55mmol). Reakční směs se míchala při teplotě okolí přes noc. A potom se odstranilo roztpouštědlo. Výsledná surová reakční směs se rozpustila v ethylacetátu (150ml) a rychle promyla 1N HCI (40ml). Kyselá vrstva se potom extrahovala ethylacetátem (3 x 20ml) a spojené organické vrstvy se promyly solným roztokem a potom se sušily nad síranem hořečnatým, filtrovaly a potom se odstranilo rozpouštědlo ve vakuu. Požadovaný produkt (5.3g, 94%) se izoloval ve formě světle žlutého oleje.

¹H NMR (400 MHz, CDCI₃); 1.45 (m, 9H), 2.8-3.2 (m, 2H), 3.9 (s, 3H), 4.2 (m, 2H), 4.5-4.7 (m, 1H).

- 52 • 99 · · • · 9 99 9 9 ··

Meziprodukt 3: f2S.4EZ)-1-(řerc-butoxvkarbonyl)-4-(ethoxvimino)-2-pyrrolidinkarboxylová kyselina (cf. schéma 4, sloučenina V)

Vyrobil se roztok, obsahující (2S)-1-(ferc-butoxykarbonyl)-4-oxo-2-pyrrolidinkarboxylovou kyselinu (meziprodukt 1, 5.0g, 22mmol) a O-ethylhydroxylamin hydrochlorid (6.4g, 65.5mmol) ve směsi 1:1 pyridinu a ethanolu (100ml). Reakční směs se zahřívala k refluxu 2,5 hodiny a potom se ochladila a odstranilo se rozpouštědlo. Zbytek se rozpustil v ethylacetátu a rychle promyl 1,3N HCI (40ml). Kyselá vrstva se potom extrahovala ethylacetátem (3 x 20ml) a spojené organické vrstvy se promyly solným roztokem, sušily nad síranem hořečnatým, filtrovaly a potom se odstranilo rozpouštědlo ve vakuu. Požadovaný produkt (5.5g, 93%) se izoloval ve formě světle žlutého oleje.

¹H NMR (400 MHz, DMSO); 1.3 (t, 3H), 1.55 (m, 9H), 2.9-2.7 (m, 1H), 3.4-3.1 (m, 1H), 4.1-4.3 (m, 4H), 4.6 (m, 1H), 12-13.5 (br, 1H).

Meziprodukt 4: (2S,4EZ)-4-í(allyloxv)imino1-1-(terc-butoxykarbonyl)-2-pyrrolidinkarboxylová kyselina (cf. schéma 4, sloučenina V)

Vyrobil se roztok, obsahující (2S)-1-(řerc-butoxykarbonyl)-4-oxo-2-pyrrolidinkarboxylovou kyselinu (meziprodukt 1, 5.0g, 22mmol) a O-allylhydroxylamin hydrochiorid monohydrát (7.2g, 65.5mmol) ve směsi 1:1 pyridinu a ethanolu (100ml). Reakční směs se zahřívala k refluxu 2,5 hodin a potom se ochladila a odstranilo se rozpouštědlo. Zbytek se rozpustil v ethylacetátu a rychle promyl 1,3N HCI (40ml). Kyselá vrstva se potom extrahovala ethylacetátem (3 x 20ml) a spojené organické vrstvy se promyly solným roztokem a potom se sušily nad síranem hořečnatým, filtrovaly a potom se odstranilo rozpouštědlo ve vakuu. Požadovaný produkt (5.9g, 94%) se izoloval ve formě světle žlutého oleje.

¹H NMR (400 MHz, CDCI₃); 1.5 (m, 9H), 2.8-3.2 (m, 2H), 4.2 (m, 2H), 4.5-4.7 (m, 3H), 5.25 (m, 2H), 5.9 (m, 1H), 11.1 (široký S, 1H).

Meziprodukt 5: (2S,4EZ)-1-(ferc-butoxvkarbonvl)-4-{f(4-methoxvbenzvl)oxyjimino}-2-pyrrolidin-karboxylová kyselina (cf. schéma 4, sloučenina V)

Stejným způsobem, který se použil při přípravě meziproduktu 2, přičemž se vycházelo z (2S)-1-(íerc-butoxykarbonyl)-4-oxo-2-pyrrolidinkarboxylové kyseliny (meziprodukt 1) a 1-[(aminooxy)methyl]-4-methoxybenzenu (meziprodukt 6), vznikla titulní sloučenina ve formě gumy v 85% výtěžku.

Ή NMR (400 MHz, DMSO); 1.5 (m, 9H), 2.7-2.9 (m, 1H) 3.9 (s, 3H), 4.2 (m, 3H), 4.6 (m, 1H), 5.15 (s, 2H), 7.1 (d, 2H), 7.45 (d, 2H).

Meziprodukt 6: 1-f(Aminooxy)methyl]-4-methoxybenzen (cf. schéma 5, sloučenina X)

- 54 • ·

Vyrobil se roztok /V-Boc-hydroxylaminu (2.0g, 17.1mmol) v suchém THF (60ml). Potom se přidal hydrid sodný (1.1g 60% suspenze v parafinovém oleji, 25.7mmol) a suspenze se míchala. Potom se do reakční směsi přidalo katalytické množství KJ před opatrným přidáním 4-methoxybenzylchloridu (3.2g, 20.4mmol). Reakční směs se míchala přes noc a potom se odstranilo rozpouštědlo ve vakuu. Zbytek se pohltil v diethyletheru (100ml) a plynný HCI probublával 20 minut, přičemž způsobil začátek srážení produktu. Baňka se uzavřela zátkou a nechala stát přes noc. Produkt se zfiltroval ve formě šedobílého vosku (39-52% výtěžek podle různých vzázek).

¹H NMR (400 MHz, D₂O);3.8 (s, 3H), 5 (s, 2H), 7.0 (d, 2H), 7.4 (d, 2H).

Meziprodukt 7: Netechnické amidoximv

Způsob A. například Λ/'-hydroxyethanimidamid (acetamidoxim) (cf. schéma 2, sloučenina VI)

Do 90ml směsi 50% hydroxylamin/50% voda (hmotn./hmotn.) se přidalo 45ml vysoce čistého acetonitrilu a směs se míchala magnetickým míchadlem při teplotě 25 °C. Většinou se odděloval krystalický W-hydroxyethanimidamid. Směs se míchala 24 hodin při pokojové teplotě, přičemž se zcela vytvořily krystaly, a filtrovala další den. V případech, kdy se zpočátku neoddělovala pevná látky, se odebralo malé množství roztoku, odpařilo a vytvořené krystaly se použily pro naočkování velkého množství roztoku. Produkt se čistil následujícícm způsobem: krystaly se filtrovaly a potom rozpustily v nepolárním rozpouštědle (perfluorohexan) při zahřívání a roztok se přes noc ochladil na pokojovou teplotu pro rekrystalizaci. Krystalický materiál se potom filtroval a promyl perfluorohexanem. Požadovaný produkt, W-hydroxyethanimidamide, měl teplotu tání 136°C-138°C a výzěžek přibližně 56%.

• · · * · *

Způsob B: e.g. ferc-Butyl-2-amino-2-(hydroxyimino)ethylkarbamat (schéma 2,sloučenina XI)

Triethylamin (535μΙ, 3.84mmol) se přidal do roztoku terc-butyl kyanomethylkarbamatu (500mg, 3.20mmol) a hydroxylamin hydrochloridu (227mg,

3.84mmol) v ethanolu (10ml). Reakční směs se potom zahřívala přes noc při teplotě 80 °C. Výsledný roztok se potom odpařoval ve vakuu. Do zbytku se přidal ethylacetát (10ml) a filtrací se odstranil triethylamin hydrochlorid. Roztok se potom odpařoval ve vakuu za vzniku surového produktu.

¹H NMR (360 MHz, DMSO); 1.53 (s, 9H), 3.62-3.63 (d, 2H), 5.33-5.44 (s, 2H) 7.10(t, 1H), 8.94(s, 1H).

Podobně za použití způsobu B a vhodných výchozích technických karbonitrilů a hydroxylamin hydrochloridu se získaly následující amidoximové meziprodukty: (2RS)-A/',2-dihydroxybutanimidamid, (1 S,2R)-/\/',2-dihydroxy-cyklohexankarboximidamid, /V',3-dihydroxypropanimidamid, A/',2-dihydroxy-ethanimidamid, (2/?S)-/V',2-dihydroxy-2-fenylethanimidamid, terc-butyl 4-[amino(hydroxyimino)methyl]-1-piperidinecarboxylat, terc-butyl (3RS)-3-[amino(hydroxyimino)methylj-l-piperidinkarboxylat, terř-butyl (2RS)-2-[amino(hydroxyimino)methyl]-1-piperidinkarboxylat, ethyl amino(hydroxyimino)ethanoat.

- 56 Meziprodukt 8: (2S.4EZ)-1-(Í1 ,r-bifenvH-4-ylkarbonyl)-/\/'-hvdroxv-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamid (schéma 8, sloučenina XV)

Do 3-litrové baňky s přírubou se vložila kyselina 1-(terc-butoxykarbonyl)-4(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylová (meziprodukt 2, 95.9g, 0.371mol), opatřila shora míchadlem, vstupem/výstupem dusíku a teplotní sondou. Do baňky se potom přidal suchý THF (1,15L) a před přidáním triethylaminu (52mL, 0.371mol) se roztok ochladil na teplotu -20°C. Roztok se potom míchal 10 minut. Do roztoku se 10 minut přidával ethylchloroformat (35ml, 0.371mol), přičemž se teplota udržovala okolo -20°C. Reakční směs se potom míchala dalších 30 minut při této teplotě. Roztok čpavku nasyceného THF se vyrobil probubláváním čpavku 250 ml suchéhoTHF po dobu 15 minut při teplotě -78°C. Roztok čpavku se přidával do reakční baňky kanylou 10 minut, přičemž se udržovala reakční teplota pod -25°C, aby se regulovala exotermická reakce. Roztok se nechal 2 hodiny stát, aby dosáhlo pokojové teploty, a potom se míchal další hodinu. Z reakční směsi se ve vakuu odstranilo rozpouštědlo a zbytek se rozdělil mezi dichloromethan (500mL) a vodu (500mL). Po oddělení se organická vrstva promyla 3 x 250ml_ vody, spojené vodné vrstvy se potom promyly 2 x 250mL DCM a tento DCM se zpětně promyl 100ml vody. Spojené organické vrstvy se potom sušily nad síranem sodným, filtrovaly a rozpouštědlo se odstranilo ve vakuu. Požadovaný produkt, řerř-butyl (2S,4EZ)-2-(aminokarbonyl)-4-(methoxyimino)-1-pyrrolidin-karboxylat, se získal ve formě bílé amorfní pevné látky (85.8g, 90%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO); 1.5 (s, 9H), 2.65 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 3.9 (s,

3H), 4.2 (m, 2H), 4.5 (m, 1H), 7.2 (m, 1H), 7.65 (m, 1H).

- 57 Do 1L baňky s kruhovým dnem se za inertní atmosféry vložil řerc-butyl (2S,4EZ)-2-(aminokarbonyl)-4-(methoxyimino)-1-pyrrolidinkarboxylat (20g, 77.7mmol). Potom se do baňky přidal suchý dichloromethan (140mL) a následně TFA (60mL). Reakční směs se míchala při pokojové teplotě 90 minut, přičemž se monitoroval úbytek výchozího materiálu metodou tle (10% MeOH v DCM). Potom se do reakční směsi přidal toluen (200mL) a rozpouštědla se odstranila ve vakuu. Zbytek se opět rozpustil v DCM (200mL), ochladil ne teplotu -5°C a přidal se triethylamin (43mL, 311mmol) (exotermní reakce). Do reakční směsi se přidal [1,1'-bifenyl]-4-karbonyl chlorid (16.8g, 77.7mmol) a směs se míchala při pokojové teplotě 1,5 hodiny. V tomto okamžiku se přidal další DCM (500mL) a 1M HCI (250mL). Směs se silně míchala a sraženina se zfiitrovala. Vrstvy filtrátu se oddělily, organická vrstva se promyla 1M HCI (250mL) a nasyceným hydrogenuhličitanem (250mL). Bazická vodná vrstva se zpětně promyla DCM (250mL), a spojené organické vrstvy se sušily nad síranem hořečnatým, filtrovaly a filtrát se koncentroval na objem ca. 200mL. Vzniklá kaše se zfiitrovala za vzniku požadovaného produktu, (2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxamidu, ve formě šedobílé pevné látky (7.3g, 28%). Další množství méně čistého materiálu (7.9g, 30%) by se mohlo získat přidáním hexanu (125mL) do filtrátu.

¹H NMR (400 MHz, DMSO); 2.6 (m, 1H), 3.2 (m, 1H), 3.8 (m, 3H), 4.1-4.5 (m, 2H), 4.9 (m, 1H), 7.2-8.0 (m, 11H).

Do baňky s kulatým dnem se vložil (2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxamid (7.46g, 22.1 mmol), pyridin (400mL) a přidal se p-toluensulfonylchlorid (4.21g, 22.1mmol). Výsledná suspenze se zahřívala 4 hodiny na teplotu 80°C. Rozpouštědlo se odstranilo ve vakuu a zbytek se rozpustil v DCM (400mL), roztok se před sušením nad síranem sodným a promyl 1M HCI (2 x 75mL) nasyceným hydrogenuhličitanem (70mL), filtroval a ve vakuu se odstranilo rozpouštědlo. Čištěním silikagelovou chromatografií, elucí zpočátku dichloromethanem, přičemž se odstranil méně polární materiál, a následně 1% MEOH v DCM vznikla požadovaná • «

- 58 ·«·· «· · ··· ··· ·· · » · · ·

B · · · ····<

• « · · í>

sloučenina, (2S,4EZ)-1-([1,1'-biphenyl]-4-ylcarbonyl)-4-(methoxyimino)-2pyrrolidinkarbonitril, ve formě šedobílé pevné látky (4.2g, 60%).

¹H NMR (400 MHz, DMSO); 3.0 (m, 1H), 3.2 (m, 1H), 3.7 (m, 3H), 4.2 (m, 1H), 4.5 (m, 1H), 5.4 (m, 1H), 7.4-7.8 (m, 9H).

Podle výše uvedeného obecného způsobu syntézy meziproduktů 8 se do suspenze (2S,4EZ)-1-([1,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarbonitrilu (3.71g, 11.62mmol) a hydroxylamin hydrochloridu (0.97g, 13.94mmol) v ethanolu (150ml) za míchám pomalu přidával triethylamin (1.94ml, 13.94mmol). Reakční směs se potom pomalu míchala 16 hodiny při teplotě 80 °C a potom se ochladila na teplotu okolí. Rozpouštědlo se odstranilo odpařením a pevná látka se suspendovala ve vodě (100ml) a potom filtrovala. Pevná látka se promyla diethyl etherem (2 x 100ml) a potom se sušila ve vakuu při teplotě 40°C za vzniku požadovaného produktu, (2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/\/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2pyrrolidinkarboximid-amidu (3.35g, 82%).

¹H-NMR (400MHz, DMSO): 2.6-2.7 (m, 1H), 2.9-3.1 (m, 1H), 3.6-3.75 (m, 3H), 4.0-4.2 (m, 1H), 4.2-4.4 (m, 1H), 4.6 (m, 0.5H), 5.1 (m, 0.5H), 5.5 (m, 2H), 7.4-7.8 (m, 9H), 9.2-9.4 (m, 1H).

Meziprodukt 9: ferc-butyl (2S,4EZ)-2-(hydrazinokarbonyl)-4-(methoxyimino)-1pyrrolidinkarboxylat (schéma 10, sloučenina XVII)

Vyrobil se roztok, obsahující například kyselinu (4EZ)-1-(ferc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylovou (meziprodukt 2, 17.81 mmol; 4.6g) ve směsi 1:1 methanolu a toluenu (250mL). Potom se do

- 59 míchaného roztoku se pod dusíkem při pokojové teplotě po kapkách přidal trimethylsilyl diazomethan (32.5mL 2M roztok v hexanech, 59mmol). Po dokončeném vývoji plynného dusíku se vzniklý žlutý roztok odpařoval ve vakuu a zbytek se opět rozpustil v DCM a promyl nasyceným NH₄CI a 10% NaHCO₃, a solným roztokem, sušil nad Na₂SO₄ a odpařil ve vakuu za vzniku požadované sloučeniny, 1-řerc-butyl 2-methyl (2S,4£Z)-4-(methoxyimino)-1,2pyrrolidin-dikarboxylatu, ve formě žlutého oleje (4.0g, 83%).

Ve 4mL MeOH se rozpustil 1-řerc-butyl 2-methyl (2S,4EZ)-4-(methoxyimino)1,2-pyrrolidindikarboxylat (1.95 mmol; 530mg) a přidal se roztok 4 ml MeOH a 1,5mL (d=1.03; 30.86 mmol) 80% hydrazinhydratu (finální c(NH₂NH₂) = 13%). Reakční směs se míchala 2 dny. Rozpouštědla se odpařila ve vakuu a zbytek se opět rozpustil v MeOH a odpařil (3x). Požadovaný produkt, řerc-butyl (2S,4Ez)-2-(hydrazinokarbonyl)-4-(methoxyimino)-1-pyrrolidinkarboxylat, se izoloval ve formě žlutého oleje (500mg; 94%).

¹H-NMR (CDCI₃): 1.47 (s, 9H, CH3), 2.8-3.2 (m, 2H, CH2), 3.87 (s, 3H, CH3O), 3.95-4.3 (m, 2H, CH2), 4.52 (m, 1H, CH-N). MS(APCI⁺): 273.0, 545.4(2M⁺¹).

Meziprodukt 10: 2'-methylft .V-bifenylM-karboxylová kyselina

Do směsi kyseliny 4-brombenzoové (30g, 0.15mol), kyseliny 2-methylfenylborité (24g, 0.15 mol), uhličitanu sodného (250g) v toluenu (500mL) a vodě (500mL) se pod atmosférou dusíku přidal tetrakis-trifenylphosphin palladium(O) (9g, 0.0074mol). Reakční směs se refluxovala 10 hodin. Po uplynutí této doby se do reakční směsi přidalo 100ml 10% NaOH, vodná vrstva se oddělila a promyla toluenem (2x200mL). Okyselením vodné vrstvy 3N roztokem HCI vznikl produkt ve formě pevné látky, který se filtroval, promyl vodou a sušil. Surový produkt potom krystalizoval z toluenu za vzniku

- 60 kyseliny 2'-methyl[1,1'-bifenyl]-4-karboxylové (20g, 62.5%).

Opačně by se mohl produkt také získat z 1-bromo-2-methylbenzenu a kyseliny 4-karboxybenzenborité za použití analogických podmínek.

¹H NMR (300 MHz, DMSO); 2.2 (s, 3H), 7.2-7.4 (m, 4H), 7.43 (d, J = 9Hz, 2H), 7.99 (d, J = 9Hz, 2H), 13 (b, 1H).

Podobně za použití vhodných technických boritých kyselin a arylbromidů se získaly následující 1,1’-bifenylové deriváty, týkající se meziproduktu (12): 4'methyl[1,1'-bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 2',3-dimethyl[1,1 '-bifenylj-4-karboxylová kyselina; 2',6'-dimethyl[1,1'-bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 2-methyl[1,1'-bienyl]-4-karboxylová kyselina; 3-methyl[1,1'-bifenylj-4-karboxylová kyselina; 2,2'-dimethyl[1,1’-bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 2'-methoxy-[1,1'bienyl]-4-karboxylová kyselina; 3'-methoxy[1,1 '-bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 4'-methoxy[1,1'-bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 2'-chloro[1,1’bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 3'-chloro[1,1'-bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 4'-chloro[1,1'-bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 3',4'-dichloro[1,1'-bifenyl]-4karboxylová kyselina; 2'-(trifluoromethyl)[1,1'-bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 3'-(trifluoromethyl)[1,1'-bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 2'-kyano[ 1,1 '-bifenylj4-karboxylová kyselina; 2',4'-difluoro[1,1'-bifenyl]-4-karboxylová kyselina; 4(2-pyridinyl)benzoová kyselina; 4-(3-pyridinyl)benzoová kyselina; 4-(4pyridinyl)benzoová kyselina; 4-(5-pyrimidinyl)benzoová kyselina; a jiné.

Meziprodukt 11: 4-(3-methvl-2-pyridinyl)benzoová kyselina

Směs 2-bromo-3-methylpyridinu (22.5g, 0.1312mol), 4-(hydroxymethyl)phenylborité kyseliny (25g, 0.164mol), Pd(PPh₃)4 (9.5g, 0.0082mol) a uhličitanu sodného (200g v 500 ml vody) v toluenu (750 ml) se refluxovala pod atmosférou dusíku 15 hodin. Oddělením toluenové vrstvy a destilací za sníženého tlaku vznikl zbytek. Zbytek se potom čistil kolonovou chromatografií za vzniku [4-(3-methyl-2-pyridinyl)fenyl]methanolu (12g, 47%).

Do roztoku [4-(3-methyl-2-pyridinyl)fenyl]methanolu (12g, 0.06mol) suchém DMF (150mL) se přidal pyridiniumdichromat (91g, 0.24mol) směs se míchala • ·

při pokojové teplotě 3dny. Reakční směs se nalila do vody a extrahovala ethylacetatem (250mL). Organická vrstva se promyla vodou, solným roztokem, sušila a zkoncentrovala. Surový produkt se čistil kolonovou chromatografii nad silikagelem za vzniku 4-(3-methyl-2-pyridinyl)benzoové kyseliny (3g, 25%) ve formě bílé pevné látky.

¹H NMR (300 MHz, DMSO); 2.3 (s, 3H), 7.33 (dd, J = 7.5Hz, 5Hz, 1H), 7.67 (d, J = 8Hz, 2H) , 7.75 (d, J = 7.5Hz, 1H), 8.01 (d, J = 8Hz, 2H), 8.50 (d, J = 5Hz, 1H), 13 (b, 1H).

Meziprodukt 12: 4-(1-Qxido-3-pyridinyl)benzoová kyselina

Do směsi 4-tolylborité kyseliny (38g, 0.28mol), 3-bromopyridinu (44g, 0.28mol), Na₂CO₃ (200g) v toluenu (500ml) a vodě (500ml) se přidal Pd(PPh₃)4 (16g, 0.014mol), a směs refluxovala 16 hodin. Reakční směs se ochladila a oddělená organická vrstva se promyla vodou a solným roztokem a sušila. Odstranilo se rozpouštědlo za vzniku 4-(3-pyridyl)toluenu (42g, 90%).

Do směsi 4-(3-pyridyl)toluenu (35g, 0.207mol) v pyridinu (400ml) a vodě (400ml) se po částech přidával KMnO₄ (163g, 1.03mol) a směs refluxovala 12 hodin. Reakční směs se zfiltrovala vrstvou celitu a okyselila konc. HCI. Produkt se promyl vodou a sušil za vzniku 4-(3-pyridyl)benzoové kyseliny (32g, 76%) ve formě bílé pevné látky. Do směsi 4-(3-pyridyl)benzoové kyseliny (22g, 0.11mol) v THF (2.5I) se přidal mCPBA (152g, 0.44mol, 50%) a směs se míchala při pokojové teplotě 12 hodin. Pevná fáze se zfiltrovala a promyla THF za vzniku 4-(1-oxido-3-pyridinyl)benzoové kyseliny (20g, 86%).

¹H NMR (300 MHz, DMSO); 7.5-7.8 (m, 5H), 7.9 (d, J = 8Hz, 2H) , 8.33 (d, J = 5Hz, 2H).

Podobně se z 4-tolylborité kyseliny (45g, 0.33mol) a 2-bromopyridinu (52g, 0.33mol) jako meziprodukt získala 4-(1-oxido-2-pyridinyl)benzoová.

• ·

Příklad 1:

Obecný způsob syntézy rozpuštěné fáze pyrrolidin oxadiazolovych derivátů obecného vzorce I, kde B = Ha (schémata 1,11): (3EZ,5S)-1-(Í1,1'-bifenyH-4ylkarbonvl)-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim;

(3E,5S)-1-r(2'-methvl[1,1'-bifenvn-4-vl)karbonyl1-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim a (3Z,5S)-1-[(2'-methylí1,1'-bifenyll-4yl)karbonyn-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pvrrolidinon O-methyloxim.

a) Protokol pro vytvoření oxadiazolového kruhu

Diisopropylkarbodiimid (3.16g, 25.17mmol) se přidal do roztoku kyseliny (2S,4 EZ)-1-(terc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2, 6.50g, 25.17mmol) a acetamidoximu (meziprodukt 7, 1.86g, 25.17mmol) v DCM (55ml) a směs se míchala přes noc při pokojové teplotě (DCM-nerozpustné amidoximy se předem rozpustily v THF, do jehož roztoku se přidal roztok DIC a meziprodukt 2 v DCM). Po filtraci čerpadlem a odpaření ve vakuu se zbytek rozpustil v pyridinu (60ml) a roztok se refluxoval jednu hodinu, potom se ochladil a nechal stát přes noc, potom se odpařil ve vakuu. Surový produkt se potom rozpustil v DCM (50ml) a promyl nasyceným roztokem NaHCO₃(vodným) (2 x 50ml) a potom 1M HCI (vodný roztok) (2 x

• · · ·

50ml), sušil nad síranem hořečnatým a odpařil ve vakuu (surový výtěžek 70%). Silikagelovou chromatografií, elucí 15% ethylacetátem hexanech vznikla požadovaná sloučenina, řerc-butyl (2S,4EZ)-4-(methoxyimino)-2-(3methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-1-pyrrolidinkarboxylat (4.4g, 60% výtěžek).

¹H NMR (360 MHz, DMSO); 1.3-1.6 (d, 9H), 2.4 (s, 3H), 2.8-3.4 (m, 2H), 3.9 (s, 3H), 4.3 (s, 2H), 5.2-5.4 (m, 1H).

b) Protokol pro krok odstranění N-ochranné skupiny

Vyrobil se roztok, obsahující řerc-butyl (2S,4£Z)-4-(methoxyimino)-2-(3methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-1-pyrrolidinkarboxylat (1.26 g, 4.25 mmol) v bezvodém DCM (120 ml). Při teplotě 0°C reakční směsí pomalu probublává plynný HCI, který se předtím sušil odlučovačem H₂SO₄ cc, a odstraňování ochranné skupiny se monitorovalo pomocí TLC za použití směsi cyklohexan/ethylacetat (1/1) a směs se zabarvila roztokem pancaldi. Po asi 45 minutách TLC prokázala žádný výchozí materiál a DMC se potom odpařil ve vakuu bez zahřívání, aby se zabránilo rozkladu pyrolidinové soli. Potom se přidalo více DCM (20 ml) a roztok se opět odpařil , aby se odstranil zbývající potenciál HCI (2-3 krát). Požadovaný produkt, (3£Z,5S)-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim hydrochloridová sůl, se izoloval ve formě bílé pevné látky a použil bez dalšího čištění a charakterizace.

c) Protokoly pro krok N-uzavření

Způsob A: Do roztoku (3EZ,5S)-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3pyrrolidinon O-methyloximu hydrochloridové soli (200mg, 0.86mmol) v DCM (5ml) se přidal [1,1'-bifenyl]-4-karbonyl chlorid (205mg, 0.95mmol) a následně diisopropylethylamin (314pl, 1.81mmol) a směs se míchala přes noc při pokojové teplotě. Do reakční směsi se přidala aminomethyl-polystyrenová pryskyřice (250mg) a směs se míchala jednu hodinu před filtrací čerpadlem. Roztok se promyl kyselinou citrónovou (vodný roztok) (2 x 5ml) a potom se sušil nad MgSO₄, a odpařil ve vakuu. Produkt, (3£Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4ylkarbonyl)-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiaz-ol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim, se • · • · · • · · · ·

čistil silikagelovou chromatograií, elucí 20% ethylacetátem v hexanech (60mg, 19% výtěžek)

Způsob B: Vyrobil se roztok, obsahující (3EZ,5S)-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim hydrochloridovou sůl, 2'-methyl[1,1 bifenyl]-4-karboxylovou kyselinu (0.857g, 4.04 mmol, 0.95ekv) a případně DMAP (1.03 g, 8.50 mmol. 2.0 ekv) v suchém DCM (120 ml). Reakční směs se míchala při RT 10 minut a potom se ochladila až na teplotu 0°C. Při teplotě 0°C se po dobu 30 minut pomalu po částech přidával EDC, HCI (815 mg, 4.25mmol). Reakční směs se míchala 2 hodiny při teplotě 0°C a přes noc pomalu zahřívala na RT. Jakmile se reakce ukončila, organická fáze se dvakrát promyla kyselinou citrónovou (10%) a uhličitanem sodným (10%). Organická fáze se sušila a odpařila. Surový produkt se čistil a rozdělil na (E)a (Z)-izomery kolonovou chromatografii (Biotage systém, kolona 40M, 90 g SiO₂, za použití směsi cyklohexan/ethylacetat (1/1) jako eluentu) za vzniku (3E,5S)-1-[(2'-methyl[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloximu (770 mg, 34%) (bezbarvý olej, 97.5% čistota HPLC) a (3Z,5S)-1-[(2'-methyl[ 1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloximu (740 mg, 33%) (bezbarvý olej, 98.3 % čistota HPLC).

(3E,5S)-1-[(2'-methyl[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.28 (s, 3H, ArCH₃), 2.42 (s, 3H, CH₃), 3.03-3.32 (m, 2H), 3.88 (s, 3H, NOCH₃), 4.384.59 (m, 2H), 6.03 (m, 1H), 7.22-7.29 (m, 5H, H arom.), 7.40-7.44 (m, 2H, H arom.), 7.55 (m, 1H); MS(APCI⁺): 391.5; MS(APCL): 389.2.

(3Z,5S)-1-[(2'-methyl[1,T-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: bílá pevná látka, teplota tání 146.5°C; IR (čistý) v 2936, 1645, 1583, 1408, 1323, 1047, 890 cm’¹; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.28 (s, 3H, ArC/7₃), 2.42 (s, 3H, CH₃), 3.03-3.32 (m, 2H), 3.88 (s, 3H, NOCH₃), 4.38-4.59 (m, 2H), 6.03 (m, 1H), 7.22-7.29 (m, 5H, H arom.), 7.407.44 (m, 2H, H arom.), 7.55 (m, 1H); MS(APCI⁺): 391.5; MS(APCI ): 389.2

- 65 *· ···· · · · • · · · · · • · · · · · · • · ··· ·····

Příklad 2:

(3EZ,5S)-1-[(2'-chloroí1₁1'-bifenvl1-4-yl)karbonyn-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-vl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim ?

Podle obecných způsobů, uvedených příkladu 1 (způsob B), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(íerí-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), Λ/'-hydroxyethanimidamidu (meziprodukt 7) a 2'-chloro[1,1 bifenyl]-4-karboxylové kyseliny (meziprodukt 10) po rychlé chromatografii izoluje titulní sloučenina jako směs E-/Z-izomerů ve formě oleje v 31% výtěžku (98.5 % čistota HPLC).

Olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.41 (s, 3H, CH₃), 2.96-3.31 (m, 2H, CH₂),

3.87 (s, 3H, NOCHa), 4.31-4.59 (m, 2H, CH₂), 6.03 (m, 1H), 7.30 (s, 3H, H arom.), 7.50-7.64 (m, 5H, H arom.); MS(ESI⁺): 411.2; MS(ESL): 408.9.

Příklad 3:

(3EZ,5S)-5-(3-methvl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-1-{f2'-(trifluoromethyl)í1,1'-bifenyH4-yl1karbonyl}-3-pyrrolidinon O-methvloxim \

?

- 66 Podle obecných způsobů, uvedených v příkladu 1 (způsob B), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(terř-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), Λ/'-hydroxyethanimidamidu (meziprodukt 7) a 2’-(trifluoromethyl) [1,1’-bifenyl]-4-karboxylové kyseliny (meziprodukt 10) po rychlé chromatografií izoluje titulní sloučenina jako směs E-/Z-izomerů ve formě oleje v 44% výtěžku (88.2 % čistota HPLC).

Olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.40 (s, 3H, CH₃), 2.88-3.31 (m, 2H, CH₂),

3.87 (s, 3H, NOCH₃), 4.27-4.53 (m, 2H, CH₂), 6.03 (m, 1H), 7.27-7.70 (m, 7H, H arom.), 7.77 (m, 1H, H arom.); MS(ESI⁺): 445.4; MS(ESI ): 443.1.

Příklad 4:

(3E,5S)-1-f(2'-fluoro[1,1'-bifenvn-4-yl)karbonyn-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim a (3Z,5S)-1-[(2'-fluoro[1,1'-bifenyll-4vl)karbonvH-5-(3-methvl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecných způsobů, uvedených v příkladu 1 (způsob B), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(íerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), Λ/'-hydroxyethanimidamidu (meziprodukt 7) a 2'-fluoro[1,1'bifenyl]-4-carboxylové kyseliny (meziprodukt 10) získaly titulní sloučeniny jako směs E-/Z-izomerů a následně se rozdělily rychlou chromatografií za vzniku (3E,5S)-1 -[(2'-fluoro[1,1 '-bifenyl]-4-yl)karbonylj-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5yl)-3-pyrrolidinon O-methyloximu v 11% výtěžku (95.0% čistota HPLC) a (3Z,5S)-1 -[(2'-fluoro[1,1 '-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5yl)-3-pyrrolidinon O-methyloximu v 11% výtěžku (98.2 % čistota HPLC).

- 67 (3E,5S)-1-[(2'-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: olej ; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.42 (s, 3H, CH₃), 3.07-3.25 (m, 2H, CH₂), 3.87 (s, 3H, NOC/7₃), 4.42-4.52 (m, 2H, CH₂), 6.04 (m, 1H), 7.15-7.29 (m, 2H, H arom.), 7.30-7.44 (m, 2H, H arom.), 7.70 (m, 4H); MS(ESI⁺): 395.0; MS(ESl·): 393.0.

(3Z,5S)-1 -[(2'-fluoro[1,1 '-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxad iazol-5yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: olej ; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.42 (s, 3H, CH₃), 3.02 (m, 1H, CH), 3.25 (m, 1H, CH), 3.87 (s, 3H, NOCH₃), 4.34-4.58 (m, 2H, CH₂), 6.04 (m, 1H), 7.15-7.29 (m, 2H, H arom.), 7.30-7.44 (m, 2H, H arom.), 7.70 (m, 4H); MS(EST): 395.0; MS(ESl·): 393.0.

Příklad 5:

(3EZ,5S)-1-f(4'-fluoro[1 _l1'-bifenyl1-4-yl)karbonvl1-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecných způsobů, uvedených v příkladu 1 (způsob B), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(terf-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), Λ/'-hydroxyethanimidamidu (meziprodukt 7) a 4'-fluoro[1,1 bifenyl]-4-karboxylové kyseliny (meziprodukt 10) po rychlé chromatografii izoluje titulní sloučenina jako směs E-/Z-izomerů ve formě oleje v 32% výtěžku (94.1 % čistota HPLC).

Olej; Ή NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.42 (s, 3H, CH₃), 2.95-3.30 (m, 2H, CH₂),

3.87 (s, 3H, NOCH₃), 4.27-4.55 (m, 2H, CH₂), 6.02 (m, 1H), 7.12 (m, 2H, H arom.), 7.27-7.61 (m, 6H, H arom.); MS(ESI⁺): 395.5; MS(ESIj: 393.4.

- 68 • · ·· ···· • · · · · • · · · · ··· · · ·« ··

Příklad 6:

(3EZ,5S)-1-í(2'-chloro-4'-fluoroí1,1'-bifenvn-4-vhkarbonvll-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-S-ylj-S-pyrrolidinon O-methyloxim; (3Z,5S)-1-[(2'-chloro-4'-fluoroÍ1 _l1’-bifenvH-4-vl)karbonvl1-5-(3-methvl-1,2,4-oxadiazol-5-vl)-3-pyrrolidinon 0methyloxim

Podle obecných způsobů, uvedených v příkladu 1 (způsob B), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(terř-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), Λ/'-hydroxyethanimidamidu (meziprodukt 7) a 2'-chloro-4’fluoro [1,1'-bifenyl]-4-karboxylové kyseliny (meziprodukt 10) po rychlé chromatografií izoluje titulní sloučenina jako směs E-/Z-izomerů ve formě oleje v 60% celkovém výtěžku (95,20 % čistota HPLC). Následnou rychlou chromatografií vznikl (3Z,5S)-1 -[(2'-chloro-4'-fluoro[1,1 '-bife nyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim v 30% výtěžku (97.5% čistota HPLC).

(3EZ,5S)-1-[(2'-chloro-4’-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃):

2.31 (s, 3H, CH₃), 2.78-3.24 (m, 2H, CH₂), 3.77 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.52 (m, 2H, CH₂), 5.93 (m, 1H), 6.88-7.60 (m, 7H, H arom.); MS(ESI⁺): 429.20.

(3Z,5S)-1-[(2'-chloro-4'-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃):

2.31 (s, 3H, CH₃), 2.78-3.24 (m, 2H, CH₂), 3.77 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.52 (m, 2H, CH₂), 5.93 (m, 1H), 6.88-7.60 (m, 7H, H arom.); MS(ESI⁺): 429.20.

Příklad 7:

(3EZ,5S)-1-í(2',4'-difluoroí1 .ť-bifenvIM-yDkarbonvlI-S-O-methyl-l ,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim; (3Z,5S)-1 -[(2'₁4'-difluorof 1,1 '-bifenyH-4-yl)karbonvH-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim; (3E,5S)-1-r(2',4^l-difluorof1, U-bifenylI^-yDkarbonyll-S-O-methyl-I^Aoxadiazol-S-yD-S-pyrrolidinon O-methyloxim.

Podle obecných způsobů, uvedených v příkladu 1 (způsob B), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(terc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), Λ/'-hydroxyethanimidamidu (meziprodukt 7) a 2',4’-difluoro [1,1'-bifenyl]-4-karboxylové kyseliny (meziprodukt 10) po rychlé chromatografii izoluje titulní sloučenina jako směs E-/Z-izomerů ve formě oleje v 37% celkovém výtěžku (98.6 % čistota HPLC). Následným dělením E- and Zizomerů rychlou chromatografii se získal (3Z,5S)-1-[(2',4'-difluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon 0methyloxim v 15% výtěžku (98.5% čistota HPLC), a (3E,5S)-1-[(2',4'd if I uoro[ 1,1 '-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim v 13% výtěžku (97,5% čistota HPLC).

(3EZ,5S)-1-[(2',4'-difluoro[1,1’-bifenyl]-4-yl)karbony!]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃):

2.34 (s, 3H, CH₃), 2.86-3.25 (m, 2H, CH₂), 3.79 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.52 (m,

2H, CH₂), 5.96 (m, 1H), 6.82-7.01 (m, 2H, H arom), 7.32-7.66 (m, 5H, H arom); MS(ESI⁺): 413.40 ; MS(ESI ) : 411.20.

- 70 (3Z,5S)-1-[(2',4'-difluoro[1 ,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCb):

2.31 (s, 3H, CH₃), 2.78-3.24 (m, 2H, CH₂), 3.77 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.52 (m, 2H, CH₂), 5.93 (m, 1H), 6.88-7.60 (m, 7H, H arom.); MS(ESI⁺): 413.40 ; MS(ESI ) : 411.20.

(3E,5S)-1 -[(2',4'-difluoro[1,1 '-bifeny l]-4-yl)ka rbonyl]-5-(3-methy I-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃):

2.31 (s, 3H, CH₃), 2.78-3.24 (m, 2H, CH₂), 3.77 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.52 (m, 2H, CH₂), 5.93 (m, 1H), 6.88-7.60 (m, 7H, H arom.); MS(ESI⁺): 413.40 ; MS(ESI ) : 411.20.

Příklad 8:

(3EZ,5S)-1-í(4'-fluoro-2'-methyl[1,1'-bifenvn-4-yl)karbonyH-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim.

Podle obecných způsobů, uvedených v příkladu 1 (způsob B), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(terř-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), Λ/’-hydroxyethanimidamidu (meziprodukt 7) a 4'-fluoro-2'methyl[1,1'-bifenyl]-4-karboxylové kyseliny (meziprodukt 10) po rychlé chromatografií izolovala titulní sloučenina jako směs E-/Z-izomerů ve formě oleje v 14% celkovém výtěžku (95.2 % čistota HPLC).

Olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃) : 2.17 (s, 3H, CH₃), 2.34 (s, 3H, CH₃), 2.863.26 (m, 2H, CH₂), 3.80 (s, 3H, NOCW₃), 4.33-4.45 (m, 2H, CH₂), 5.97 (m, 1H), 6.82-6.95 (m, 2H, H arom), 7.10-7.66 (m, 5H, H arom); MS(ESI⁺): 409.33; MS(ESI ) : 407.11.

- 71 Přiklad 9:

(3E, 5 5)-1-((1,1'-bifenvn-4-ylkarbonyl)-5-|3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5yH-3-pyrrolidinon Q-methyloxim; (3Z,55)-1-([1,1'-bifenvn-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2hydroxyethvl)-1,2,4-oxadiazol-5-vH-3-pyrrolidinon Q-methyloxim.

Podle obecných způsobů, uvedených v příkladu 1 (způsob B), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(terf-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), W,3-dihydroxypropanimidamidu (meziprodukt 7) a [1,Tbifenyl]-4-carboxylové kyseliny (meziprodukt 10) po rychlé chromatografií izoluje titulní sloučenina jako směs E-/Z-izomerů ve formě oleje v 64% celkovém výtěžku (90 % čistota HPLC). V tomto stupni se provedlo čištění proplachem za použití pol-trisaminu v DCM (Novabiochem), aby se odstranil přebytek kyselinových vedlejších produktů, které vypadávají a které by bylo obtížné odstranit kolonou rychlé chromatografie. E- a Z-izomery se nakonec rozdělily rychlou kolonovou chromatografií (Biotage systém, kolona 40M, 90 g SiO₂, za použití směsi cyklohexan/ethylacetat (2/8) jako eluentu, za vzniku (3E,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim in 25% výtěžku (98.0% čistota HPLC), a (3Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5ylj-3-pyrrolidinon O-methyloxim v 25% výtěžku (99.5% čistota HPLC).

(3E, 5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim: bílá pevná látka, teplota tání 140.5°C; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.98-3.05 (m, 3H, CW₂), 3.33 (m, 1H, CH₂), 3.86 (s, 3H, OCH₃), 4.35-4.57 (m, 2H, CH₂), 6.04 (m, 1H, CH), 7.38-7.51 (m, 3H,

H._Ar.), 7.51-7.61 (m, 6H, H._Ar); M*(ESI⁺): 407.31; M(ESI j: 405.13.

- 72 » ·· ···*·* ·» · ·«·· ·· · ··· «·· ·· * · · · · • · ··· · ··· ··«>·· ·«· ·« · · ·· (3Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim: bílá pevná látka, teplota tání 141 °C; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.98-3.05 (m, 3H, CH₂), 3.33 (m, 1H, CH₂), 3.86 (s, 3H, OCH₃), 4.35-4.57 (m, 2H, CW₂), 6.04 (m, 1H, CH), 7.38-7.51 (m, 3H, H._Ar.), 7.51-7.61 (m, 6H, H._Ar.); M⁺(ESI⁺): 407.31; M(ESI ): 405.13.

Příklad 10:

2-(5-f(2S,4EZ)-1-(f1,r-bifenyl1-4-vlkarbonvl)-4-(methoxvimino)-pyrrolidinyn1,2,4-oxadiazol-3-yl}ethvl-í(terc-butoxykarbonyl)arriinoíacetat; 2-(5-f(25,4EZ)1-(Í1 .V-bifenvH^-vlkarbonyD^-fmethoxviminolpyrrolidinvn-l^^-oxadiazol-Svl}ethvl aminoacetat.

Do míchaného roztoku (3Z,5S)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloximu (1.59mmol, příklad 9), dimethylaminopyridinu (185mg, 1.51 mmol) a kyseliny [(terc-butoxykarbonyl)amino]acetové (264mg, 1.51 mmol) v DCM (50ml) se při teplotě 0°C po částech přidával (během 15 minut) EDC (290mg, 1.51mmol). Po míchání 1 hodinu při teplotě 0°C se reakční směs nechala zahřát na pokojovou teplotu. Reakční směs se monitorovala TLC a LC / MS. Po další hodině míchání při RT se reakční směs hydrolyzovala vodou, promyla kyselinou citrónovou 10% (2 x 10ml) potom Na₂CO3 (vod) (2 x 10ml), sušila nad MgSO₄ a odpařovala ve vakuu za vzniku surového produktu. Silikagelovou chromatografií, elucí 40% EtOAc v cyklohexanu vznikla požadovaná sloučenina, (2-{5-[(2S,4EZ)-1 ([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-3yl}ethyl[(tert-butoxykarbonyl)amino] acetat) jako směs E- a Z-izomerů v 90% výtěžku (čistota HPLC: 93.6%).

·« · · ·· · «·· ·«· ·· · · · · » • « ·«· · ··· *·«·· • · · · · · · ·· · ··· ·· ·· ♦· ·· ·

- 73 M⁺(ESI⁺): 564.61; M(ESI): 562.60 (2-{5-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1,2,4-oxadiazol-3-yl}ethyl[(terc-butoxykarbonyl)amino]acetat) (100mg, 0.178 mmol) se upravoval 25% roztokem TFA/DCM při teplotě 0°C 1 hodinu. Reakční směs se potom roztokem uhličitanu sodného (10%) pomalu při teplotě 0 °C upravila bazicky a extrahovala DCM. Organické fáze se spojily a sušily nad síranem hořečnatým a po odstranění rozpouštědla vznikla požadované sloučenina, 2-{5-[(2S,4EZ)-1-([1,1 '-bífeny!]-4-ylkarbonyl)-4(methoxyimino)-pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-ethylaminoacetat, ve formě oleje v 70% výtěžku (94.6% čistota HPLC).

M⁺(ESI⁺): 464.17; M(ESL): 462.86

Příklad 11:

(3EZ,5S)-1-f(2'-chloro-4^,-fluoro[1,1 '-bifenvn-4-yl)karbonyl)-5-[3-(2-hvdroxvethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-vn-3-pyrrolidinon O-methyloxim.

Podle obecných způspobů, uvedených v příkladu 1 (způsob B), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(ferc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrroiidinkarboxyiové (meziprodukt 2), N',3-dihydroxypropanimidamidu (meziprodukt 7) a 2'-chloro4’-fluoro [1,1 '-biphenyl]-4-karboxylové kyseliny (meziprodukt 10) po rychlé chromatografii izolovala titulní sloučenina jako směs E-/Z-izomerů ve formě oleje v 8% celkovém výtěžku (78.7 % čistota HPLC).

Olej; Ή NMR (300 MHz, CDCI₃) : 2.93 (m, 2H , CH₂), 3.10-3.25 (m, 2H, CH₂), 3.80 (s, 3H, NOCHj), 4.34-4.45 (m, 2H, CH₂), 5.98 (m, 1H), 6.90-7.05 (m, 2H, H arom), 7.20-7.66 (m, 5H, H arom); MS(ESL): 459.12 ; MS(ESL): 457.07.

- 74 • · · · · · · · · · · • · · · · · · • · ♦ · · » » · ··· · · · · · * · · • ···· · · · ·· · · · · ·· ·

Příklad 12:

řerc-Butyl_4-f5-f(2S,4EZ)-1-([1 ,T-bifenvH-4-ylkarbonvl)-4-(methoxyimino) pyrrolidinyll-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-1-piperidínkarboxylat;_(3EZ,5S)-1-(Í1,1'bifenvn-4-vlkarbonyl)-5-f3-(4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl1-3-pyrrolidinon

O-methyloxim.

Podle obecných způsobů, uvedených v příkladu 1 (způsob A), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), řerc-butyl 4-[amino(hydroxyimino)methyl]-1-piperidinkarboxylatu (meziprodukt 7) a [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu se po rychlé chromatografií (směs cyklohexan/ethylacetat 6/4) izolovala požadovaná sloučenina, řerc-butyl 4-{5-[(2S,4£Z)-1-([1,1 ’-b ifeny l]-4-y I ka rbony l)-4(methoxyimino)-pyrrolidinylj-l,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-piperidinkarboxylat, jako směs E-/Z-izomerů v 60% výtěžku (97.9 % čistota HPLC).

Olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.47 (s, 9H, CH₃), 1.60-2.10 (m, 4H, CH₂), 2.90-3.02 (m, 2H, CH₂), 3.30-3.40 (m, 1H, CH), 3.86 (s, 3H, NOC/ý), 4.014.55 (m, 6H, CH₂N), 6.03 (m, 1H), 7.48-7.64 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 546.4; MS(ESI ): 544.2.

řerc-Butyl 4-{5-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimíno)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-piperidínkarboxylat (100 mg, 1.80mmol) se 1 hodinu upravoval 25% roztokem TFA/DCM při teplotě 0°C. Reakční směs se potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Organické fáze se spojily a sušily nad síranem hořečnatým

- 75 • >

• ·

9 9 9 a a poodstranění rozpouštědla vznikl zbytek, který se čistil rychlou chromatografii za použití směsi cyklohexan/ethylacetat (2/8) jako eluentu, přičemž vznikl (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(4-piperidinyl)1,2,4-oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim jako směs E-/Z-izomerů v 80% výtěžku (96.1 % čistota HPLC).

Olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.80-2.20 (m, 4H, CH₂), 2.90-3.50 (m, 8H, CH₂), 3.87 (s, 3H, NOC/7₃), 4.30-4.60 (m, 2H, CH₂), 6.04 (m, 1H, CH), 7.487.64 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 446.4.

Příklad 13:

(3EZ,5S)-5-f3-(1-acetyl-4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-1-(f1,1'-bifenyl1-4ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim.

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol-5yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (příklad 12) se při teplotě 0°C rozpustil v suchém DCM za přítomnosti 1.5 ekvivalentu triethylaminu a roztok se upravil 1 ekvivalentem acetylchloridu. Reakční směs se míchala při této teplotě 30 minut a potom hydrolyzovala ledem. Reakční směs se potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DMC. Sušila se síranem hořečnatým a odstraněním rozpouštědla vznikl zbytek, který se čistil rychlou chromatografii za použití směsi cyklohexan/ethylacetat (1/1) jako eluentu za vzniku (3EZ,5S)-5-[3-(1-acetyl-4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-1 -([1,1 • 4 ·

- 76 ·· ···· ·· · ·· * bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloximu jako směsi E-/Z-izomerů v 95% výtěžku (100 % čistota HPLC).

Olej; Ή NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.70-2.20 (m, 8H, CH₃CO, CH₂), 2.89-3.40 (m, 6H, CH₂), 3.88 (s, 3H, NOCH₃), 4.40-4.60 (m, 2H, CH₂), 6.04 (m, 1H, CH), 7.48-7.64 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺); 488.37 ; MS(ESI ): 486.17.

Příklad 14:

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenvl1-4-ylkarbonvl)-5-f3-(1-methvl-4-piperidinvl)-1,2,4oxadiazol-5-yl1-3-pyrrolidinon Q-methyloxim.

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol-5yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (příklad 12) se rozpustil v suchém DCM při teplotě 0°C za přítomnosti 1.5 ekvivalentu triethylaminu a roztok se upravil 1 ekvivalentem methyljodidu. Reakční směs se míchala při pokojové teplotě 12 hodin. Reakční směs se hydrolyzovala a potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Potom se sušila síranem hořečnatým a odstraněním rozpouštědla vznikl zbytek, který se čistil rychlou chromatografií za použití směsi dichloromethan/methanol (98/2) jako eluentu za vzniku (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl1-4-ylkarbonvl)-5-f3-(1-methvl-4-piperidinvl)1,2,4-oxadiazol-5-yH-3-pyrrolidinon O-methyloxim jako směsi E-/Z-izomerů v 50% výtěžku (96.8 % čistota HPLC).

Olej; ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.19 (m, 2H, CH₂), 2.14-2.70 (m, 8H, CH₃, CH₂), 2.89-3.25 (m, 4H, CH₂), 3.80 (s, 3H, NOCH₃), 4.20-4.55 (m, 2H, CH₂),

5.94 (m, 1H, CH), 7.33-7.58 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 460.43 ; MS(ESI ): 458.24.

Příklad 15:

Obecný způsob syntézy rozpuštěné fáze pyrrolidin oxadiazolovývh derivátů obecného vzorce I, kde B je substituent vzorce lib (viz schémata 7,11):

(3EZ,5S)-1-(f1,1'-bifenyn-4-vlkarbonvl)-5-í5-(phenoxvmethyl)-1,2,4-oxadiazol3-yl1-3-pyrrolidinon O-methvloxim

Do suspenze (2S,4EZ)-1-([1,1'-biphenyl]-4-ylkarbonyl)-/\/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8, 100mg, 0.28mmol),

DMAP (41mg, 0.34mmol) a kyseliny fenoxyoctové (48mg, 0.31mmol) v DCM & DMF (1:1, 10ml) se přidal EDO (59mg, 0.31mmol). Po míchání přes noc při teplotě okolí se rozpouštědlo odpařilo ve vakuu. Zbytek se rozpustil v DCM (10ml) a promyl kyselinou citrónovou (vodný roztok) (2 x 10ml) a následně hydrogenuhličitanem sodným (vodný roztok) (2 x 10ml). Po odpaření ve vakuu se přidal pyridin (15ml) a roztok se refluxoval přes noc. Pyridin se odstranil ve vakuu a zbytek se rozpustil v DCM (10ml), promyl kyselinou citrónovou (vodný roztok) (2 x 10ml), sušil nad síranem hořečnatým a odpařil za vzniku titulní sloučeniny v 80% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 469.2.

- 78 Příklad 16:

(3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenvn-4-ylkarbonvl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyn1,2,4-oxadiazol-5-yl)methvlformamid

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1 -([1,1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/\/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a (formylamino)octové kyseliny získala titulní sloučenina v 72% čistotě HPLC.

¹H-NMR (400MHz, CDCI₃): 2.9-3.2 (m, 2H), 3.8 (m, 3H), 4.2-4.4 (m, 2H0, 4.6 (m, 2H), 5.9 (m, 1H), 7.0 (m, 1H), 7.3-7.7 (m, 9H), 8.2 (s, 1H). MS(ESI⁺): m/z = 420.1.

Příklad 17:

(3EZ,5S)-1-(Í1,1'-bifenvn-4-vlkarbonyl)-5-[5-(methoxymethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yn-3-pvrrolidinon O-methyloxim

• · · · • · · ·····

- 79 Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny methoxyoctové získala titulní sloučenina v 91% čistotě HPLC.

¹H-NMR (400MHz, CDCI₃): 2.9-3.2 (m, 2H), 3.4 (s, 3H), 3.75 (m, 3H), 4.2-4.5 (m, 2H), 4.6 (s, 2H), 6.0 (m, 1 HO, 7.4-7.6 (m, 9H). MS(ESI⁺): m/z = 407.2.

Příklad 18:

(3EZ,5S)-1-(f1,1'-bifenvl1-4-vlkarbonvn-5-(5-fenyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1’bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny benzoové získala titulní sloučenina v 85% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 439.2.

- 80 • · · · · · · · · 9 9 9

9 9 9 9 9 · 9 9 9

Příklad 19:

/V-({3-f(2S,4EZ)-1-(ri ,1^,-bifenyn-4-ylkarbonvl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl11,2,4-oxadiazol-5-yl)methyl)acetamid

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4£Z)-1-([1,1' bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (acetylamino)octové získala tituln sloučenina v 72% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 434.2.

Příklad 20:

(3EZ,5S)-1-([1,1^,-bifenvl1-4-vlkarbonvl)-5-{5-í4-(hvdroxymethyl)fenyn-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pvrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1' bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximid····· ·· ·· ·· ·

- 81 amidu (meziprodukt 8) a kyseliny 4-(hydroxymethyl)benzoové získala titulní sloučenina v 54% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 469.4.

Příklad 21:

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenvn-4-ylkarbonvl)-5-f5-(2-hydroxvethyl)-1,2,4-oxadiazol3-vH-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1’bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny 3-hydroxypropanové získala titulní sloučenina v 61% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 407.2.

Příklad 22:

(3EZ,5S)-1-(í1,1’-bifenyn-4-vlkarbonyl)-5-{5-r(2S)-2-hvdroxy-2-fenvlethyl11 ^A-oxadiazol-S-vD-S-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4£Z)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximid- 82 amidu (meziprodukt 8) a kyseliny (3S)-3-hydroxy-3-fenylpropanové získala titulní sloučenina v 89% čistotě HPLC. MS(ESI⁺)·' m/z = 483.3.

Příklad 23:

(3EZ,5S)-1-([1 ,T-bfhenyl1-4-vlkarbonyl)-5-F5-(2-fenoxyethvl)-1,2,4-oxadiazol3-vn-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1 ,Γbifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny 3-fenoxypropanové získala titulní sloučenina v 84% čistotě HPLC. MS(ESI⁺)·’ m/z = 483.3.

Příklad 24:

(3EZ,5S)-1-(Í1.1'-bifenvl1-4-ylkarbonyl)-5-í5-(2-methoxyethyl)-1,2,4-oxadíazol3-vn-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4£Z)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximid- 83 -

• ·· · · ·· ·« «· · amidu (meziprodukt 8) a kyseliny 3-methoxypropanové získala titulní sloučenina v 80% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 421.1.

Příklad 25:

(3EZ,5S)-5-í5-(1-acetyl-4-piperidinyl)-1,2.4-oxadiazol-3-yl1-1-(ri ,r-bifenyl1-4ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1 -([1,1 'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/\/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny 1-acetyl-4-piperidinkarboxylové získala titulní sloučenina v 87% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 488.4.

Příklad 26:

(3EZ,5S)-1-([1,1^,-bifenyH-4-vlkarbonvl)-5-f5-(2-pvridinvl)-1 ^^-oxadiazol-S-ylI3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximid- 84 • · * 4 · 4 4 · 4 4 « · • 4 · · 4 4 4 · · «

4 4 4 4 4 · * * · ·· ··· · · 4 · »···«

444 44 44 44 4· · amide (meziprodukt 8) a kyseliny 2-pyridinkarboxylové získala titulní sloučenina v 82% čistotě HPLC. MS(ESI⁺ý m/z = 440.2.

Příklad 27:

(3EZ,5S)-1-(F1,1'-bifenyl1-4-vlkarbonyl)-5-[5-(3-thienyl)-1 ^^-oxadiazol-S-ylI-Spyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamide (meziprodukt 8) a kyseliny 3-thiofenkarboxylové získala titulní sloučenina v 64% čistotě HPLC. MS(ESI⁺)'. m/z = 445.2.

Příklad 28:

(3EZ,5S)-1-(F1,1'-bifenvn-4-ylkarbonvl)-5-(5-ethyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1 -([1,1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny propionové získala titulní sloučenina v 47% čistotě HPLC. MS(ESl⁺): m/z = 391.1.

- 85 • ·· ·· · · · · ·· · ·«·· · · · · · · ··· · · · ···· • · ··· · · · 9 ····· «···· · · * · · · ·

Příklad 29:

(3EZ,5S)-1-(f1 J’-bifenyH-4-vlkarbonyl)-5-(5-cyklopentyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny cyklopentankarboxylové získala titulní sloučenina v 62% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 431.1.

Příklad 30:

(3CZ,5S)-1-(f1 ,r-bifenyl]-4-vlkarbonvl)-5-(5-methyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny octové získala titulní sloučenina v 76% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 377.0.

- 86 • ·· ······ ··· »··· · · · · · * • · · ·· · * · · · • · ··· · · · · · · · · ·

Příklad 31:

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyH-4-vlkarbonyl)-5-{5-í(RS)-hydroxy(fenyl)methyH-1,2,4 oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1' bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/\/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (2ES)-hydroxy(fenyl)ethanové získala tituln sloučenina v 73% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 469.3.

Příklad 32:

(3EZ,5S)-1-(f1.r-bifenyU-4-vlkarbonyl)-5-{5-í(1/?S)-1-hydroxy-2-fenvlethyl11,2,4-oxadiazol-3-vl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1, 1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (2/?S)-2-hydroxy-3-fenylpropanové získala titulní sloučenina v 78% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 483.3.

Příklad 33:

(3EZ,5S)-1 -(í 1,1 '-bifenvn-4-vlkarbonyl)-5-f5-r(1 P)-1 -(dimethylamino)-2-fenylethyll-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v přikladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V^,-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (2R)-2-(dimethylamino)-3-fenylpropanové získala titulní sloučenina v 54% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 510.6.

Příklad 34:

(3EZ.5S)-1-(f1.1'-bifenvl1-4-ylkarbonyl)-5-f5-(3-pyridinvl)-1,2,4-oxadiazol-3-vn3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1 -([1,1 'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny 3-pyridinkarboxylové získala titulní sloučenina v 78% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 440.2.

• *· ·· ·· · ·

- 88 Příklad 35:

(3EZ,5S)-1-([1.1'-bifenyn-4-vlkarbonvl)-5-F5-(6-hydroxy-3-pvridinyl)-1,2,4oxadiazol-3-vn-3-pyrrolidinon O-methyloxim.

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1'bífenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny 6-hydroxynikotinové získal titulní sloučenina v 50% výtěžku (90% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.90-3.30 (m, 2H, CH₂), 3.86 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.60 (m, 2H, CH₂), 6.04 (m, 1H, CH), 6.70 (d, 1H, H arom), 7.40-7.70 (m, 9H, H arom.); 8.10 (d, 1H, H arom), 8.40 (d, 1H, H arom); MS(ESI⁺): 456.4; MS(ESI ): 454.2.

Příklad 36:

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl1-4-vlkarbonvl)-5-{5-[(dimethylamíno)methyn-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim; (3Z,5S)-1-(f1,1'-bifenyH-4-ylkarbonvl)-5-{5-f(dimethvlamino)methvn-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3-pyrrolidinon Omethyloxim;_(3E.5S)-1-(f1,1'-bifenyl1-4-ylkarbonyl)-5-{5-f(dimethylamino)methvl]-1,2,4-oxadiazol-3-vl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim.

- 89 • « · · ···· ·· · • · · · · ··· • · ··· ···

Podle obecného způsobu, uvedené v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ykkarbonyl)-/\/^,-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (dimethylamino)octové získala titulní sloučenina v 50% celkovém výtěžku (96% čistota HPLC) jako směs E- a Zizomerů. Dělením pomocí rychlé chromatografie vznikl čistý Z-izomer v 23% výtěžku (98.5% čistota HPLC) a čistý E-izomer ve 20% výtěžku (98.2% čistota HPLC).

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(dimethylamino)methyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim: ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.42 (s, 6H, CH₃), 2.90-3.30 (m, 2H, CH₂), 3.86 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.60 (m, 2H, CH₂), 6.01 (m, 1H, CH), 7.40-7.70 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 420.4.

(3Z,5S)-1-([1 ,r-biphenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(dimethylamino)methyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim: ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.42 (s, 6H, CH₃), 2.90-3.30 (m, 2H, CH₂), 3.86 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.60 (m, 2H, CH₂), 6.01 (m, 1H, CH), 7.40-7.70 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 420.4.

(3E,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(dimethylamino)methyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim: ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.42 (s, 6H, CH₃), 2.90-3.30 (m, 2H, CH₂), 3.86 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.60 (m, 2H, CH₂), 6.01 (m, 1H, CH), 7.40-7.70 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 420.4.

Příklad 37:

4-({3-f(2S,4EZ)-1-([1 .L-bifenvn^-ylkarbonvD^-řmethoxviminojpyrrolidinylI1,2,4-oxadiazol-5-yl)methvl)-2,6-piperazindion.

• · · · · · · ··

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (3,5-dioxo-1-piperazinyl)octové získala titulní sloučenina v 55% výtěžku (99.0% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.80-3.30 (m, 2H, CH₂), 3.61 (s, 4H, CH₂), 3.86 (s, 3H, NOCH₃), 4.09 (m, 2H, CH₂), 4.30-4.60 (m, 2H, CH₂), 6.02 (m, 1H, CH), 7.42-7.75 (m, 9H, H arom), 8.56 (m, 1H, NH); MS(ESI⁺): 489.20 ; MS(ESI ): 487.17.

Příklad 38:

(3EZ,5S)-1-(f1,1'-bifenyl1-4-vlarbonyl)-5-{5-[2-(dimethylamino)ethvH-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim.

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a A/,/V-dimethyl-3-alaninu získala titulní sloučenina v 25% výtěžku (91.5% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.31 (s, 6H, CH₃), 2.80-3.40 (m, 6H, CH₂), 3.88 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.60 (m, 2H, CH₂), 6.03 (m, 1H, CH), 7.40-7.63 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 434.4.

Příklad 39:

ferc-Butvl (4S)-4-(3-r(2S,4EZ)-1-([1 ,T-bifenyn-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyH-1,2,4-oxadiazol-5-vl)-4-f(ferc-butoxykarbonyl)amino1 butanoat.

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1 ,Tbifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (2S)-5-ferc-butoxy-2-[(ferc-butoxykarbonyl)amino]-5-oxopentanové získala titulní sloučenina v 75% výtěžku (78.9% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.31 (s, 18H, CH₃), 2.05-2.45 (m, 4H, CH₂), 2.702.95 (m, 2H, CH₂), 3.87 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.55 (m, 2H, CH₂), 5.10 (m, 1H, CH), 6.03 (m, 1H, CH), 7.40-7.63 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 620.3, MS(ESI): 618.3.

Příklad 40:

(3EZ,5RS)-1-(f1 ,1'-bifenyl1-4-ylkarbonyl)-5-f5-(1-methvl-3-piperidinyl)-1,2,4oxadiazol-3-yn-3-pyrrolidinon O-methyloxim,

- 92 • · · · · · • · · · · · • · · · · ··· ·· t. · · · · ·

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1 -([1,1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/\/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny 1-methyl-3-piperidinkarboxylové získala titulní sloučenina v 72% výtěžku (99.2% čistota HPLC).

⁴H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.60-1.80 (m, 3H, CH, CH₂), 2.05-2.15 (m. 2H, CH₂), 2.33 (s, 3H, CH₃), 2.92-3.22 (m, 6H, CH₂), 3.84 (s, 3H, NOCH₃), 4.344.50 (m, 2H, CH₂), 6.01 (m, 1H, CH), 7.38-7.63 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺); 460.5

Příklad 41:

OEZ.SSj-l-ťil ,1'-bifenvl]-4-vlkarbonyl')-5-[5-(1-methvl-4-piperidinvl)-1,2,4oxadiazol-3-vH-3-pyrrolidinon O-methyloxim.

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,Tbifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny 1-methyl-4-piperidinkarboxylové získala titulní sloučenina v 85% výtěžku (96.9% čistota HPLC).

- 93 Ή NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.98-2.14 (m, 5H, CH, CH₂), 2.32 (s, 3H, CH₃), 2.89-3.20 (m, 6H, CH₂), 3.86 (s, 3H, NOCH₃), 4.34-4.50 (m, 2H, CH₂), 6.02 (m, 1H, CH), 7.38-7.63 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 460.4

Příklad 42:

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenvn-4-vlkarbonyl)-5-(5-vinyl-1,2,4-οχ8άΐ3ζοΙ-3-νΙ)-3pyrrolidinon O-methyloxim.

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximiamidu (meziprodukt 8) a kyseliny akrylové získala tato sloučenina ve 20% výtěžku (89.4% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.85-3.15 (m, 2H, CH₂), 3.78 (s, 3H, NOCH₃), 4.28-4.44 (m, 2H, CH₂), 5.89 (m, 2H, CH), 6.45 (d, 1H, CH), 6.58 (d, 1H, CH), 7.30-7.56 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 389.2.

Příklad 43:

terč-Butvl_(3E)-3-{3-f(2S,4EZ)-1 -([1,1 '-bifenvn-4-vlkarbonvl)-4-(methoxyimino)pyrroiidinyl1-1,2,4-oxadiazol-5-vl)-1-piperidinkarboxylat; (3EZ.5SV1(Í1,1 '-bifenvn-4-ylkarbonvl)-5-í5-f(3R)-piperidinvl1-1,2,4-oxadíazol-3-yl)-3pyrrolidinoe O-methyloxim.

- 94 • · · · · * · • ·· · · · · · ·«« · * · · · · · · ·

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1 ,Γbifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (3R)-1-(řerc-butoxycarbonyl)-3-piperidinkarboxylové získala titulní sloučenina, řerř-butyl (3/?)-3-{3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-1piperidinkarboxylat, v 85% výtěžku (96.5% čistota HPLC).

MS(ESI⁺): 546.5.

řerc-Sutyl (3ft)-3-{3-[(2S,4EZ)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)-pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-1-piperidinkarboxylat (100 mg, 1.80 mmol) se upravoval 1 hodinu při teplotě 0°C 25% roztokem TFA/DCM. Reakční směs se potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Organické fáze se spojily a sušily nad síranem hořečnatým a odstraněním rozpouštědla vznikl zbytek, který se čistil rychlou chromatografií za použití směsi dichloromethan/methanol jako eluentu za vzniku požadovaného produktu, (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5[(3 R)-piperid inyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloximu, jako směsi E-/Z-izomerů v 80% výtěžku (95.7% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.62-1.92 (m, 3H, CH₂), 2.20-2.42 (m, 2H, CH₂),

2.75-3.41 (m, 7H, CH₂), 3.86 (s, 3H, NOCH₃), 4.36-4.51 (m, 2H, CH₂), 6.02 (m, 1H, CH), 7.40-7.64 (m, 9H, H arom); MS(ESI⁺); 446.2.

- 95 Φ « 4 · · * ··· · · ·· « ·

Příklad 44:

(3CZ.5S)-1-(í1.1'-bifenyn-4-ylkarbonvl)-5-{5-í(3P)-1-methvlpiperidinvU-1,2,4oxadiazol-3-vl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim.

Roztok, obsahující 1 ekvivalent (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5[(3R)-piperidinyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloximu (příklad 43), rozpuštěného v suchém DCM při teplotě 0°C za přítomnosti 1.5 ekvivalentu triethylaminu, reagoval s 1 ekvivalentem methyljodidu. Reakční směs se míchala při pokojové teplotě 12 hodin. Reakční směs se hydrolyzovala a potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Organická fáze se potom sušila síranem hořečnatým a zkoncentrovala ve vakuu za vzniku zbytku, který se čistil rychlou chromatografií za použití směsi dichloromethan/methanol jako eluentu za vzniku očekávaného produktu, (3EZ,5S)-1 -([1,1 ^ř-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5[(3R)-1-methylpiperidinyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidínon O-methyloximu, jako směsi E-/Z-izomerů v 45% výtěžku (97.6% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.61-1.90 (m, 3H, CH₂), 2.01-2.20 (m, 3H, CH₂), 2.23 (m, 3H, CH₃), 2.70-3.30 (m. 5H, CH_Z), 3.77 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.52 (m, 2H, CH₂), 6.01 (m, 1H, CH), 7.38-7.70 (m, 9H, H arom.); MS(EST): 460.2.

• · · · · ·

Příklad 45:

terc-butyl (3S)-3-{3-[(2S,4EZ)-1 -([ 1,1 '-bifenvn-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyll-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-1-piperidinkarboxylat;_(3EZ,5S)-1-(f1,1'bifenyl1-4-ylkarbonyl)-5-{5-r(3S)-piperidinyn-1,2.4-oxadiazol-3-yl}-3pyrrolidinon O-methyloxim.

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4£Z)-1-([1,1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (3S)-1-(terc-butoxykarbonyl)-3-piperidinkarboxylové získala titulní sloučenina, terc-butyl (3S)-3-{3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-1piperidinkarboxylat, v 85% výtěžku (97.20% čistota HPLC).

MS(ESI⁺): 546.5 terc-Butyl (3S)-3-{3-[(2S,4EZ)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino) pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-1-píperidinkarboxylat (100 mg, 1.80mmol) se 1 hodinu upravoval 25% roztokem TFA/DCM při teplotě 0°C. Reakční směs se potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Organické fáze se spojily a sušily nad síranem hořečnatým a odstraněním rozpouštědla vznikl zbytek, který se čistil rychlou chromatografii za použití směsi dichloromethane/methanol jako eluentu za vzniku požadovaného produktu, (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(3S)- 97 -

piperidinyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim, jako směsi EZZ-izomerů v 85% výtěžku (95.1% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.62-1.92 (m, 3H, CH₂), 2.20-2.42 (m, 2H, CH_Z), 2.75-3.41 (m, 7H, CH₂), 3.86 (s, 3H, NOCH₃), 4.36-4.51 (m, 2H, CH₂), 6.02 (m, 1H, CH), 7.40-7.64 (m, 9H, H arom); MS(ESI⁺): 446.2.

Příklad 46:

(3EZ,55)-1-([1,1'-bifenyl1-4-ylkarbonvl)-5-{5-í(35)-1-methylpiperidinyn-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim.

Roztok, obsahující 1 ekvivalent (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5[(3S)-piperid inyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (příklad 45), rozpuštěný v suchém DCM při teplotě 0°C za přítomnosti 1.5 ekvivalentu triethylaminu, reagoval 1 ekvivalentem methyljodidu. Reakční směs se míchala 12 hodin při pokojové teplotě. Reakční semě se hydrolyzovala a potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Organická fáze se potom sušila síranem hořečnatým a zkoncentrovala ve vakuu za vzniku zbytku, který se čistil rychlou chromatografií za použití směsi dichloromethan/methanol jako eluentu za vzniku očekávaného produktu, (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(3S)-1-methylpiperidinyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloximu, jako směsi E-/Zizomerů v 55% výtěžku (97.9% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.61-1.90 (m, 3H, CH₂), 2.01-2.20 (m, 3H, CH₂), 2.33 (m, 3H, CH₃), 2.70-3.30 (m. 5H, CH₂), 3.84 (s, 3H, NOCH₃), 4.30-4.52 (m, 2H, CH₂), 6.01 (m, 1H, CH), 7.38-7.70 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 460.2.

Příklad 47:

terc-Butvl 4-(2-(3-í(2S,4EZ)-1-(f1,1'-bifenyl1-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinvH-1,2,4-oxadiazol-5-vl)ethvl)-1-piperazinkarboxylat.

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny 3-[4-(terc-butoxykarbonyl)-1-piperazinyl]propanové získala titulní sloučenina v 70% výtěžku (78% čistota HPLC).

Ή NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.38 (s, 9H, CH₃), 2.38 (m, 4H, CH₂), 2.70-2.85 (m, 6H, CH₂), 3.34 (m, 4H, CH₂), 3.84 (s, 3H, NOCH₃), 4.23-4.42 (m, 2H, CH₂), 5.92 (m, 1H, CH), 7.19-7.53 (m, 9H, H arom.); MS(EST): 575.5.

Příklad 48:

terc-Butvl 4-({3-í(2S,4EZ)-1-(í1,1^l-bifenyl'l-4-ylkarbonvl)-4-(methoxvimino)pyrrolidinyll-1 ^^-oxadiazol-S-yljmethyD-l-piperazinkarboxylate; (3EZ,5S)-1([1,1 '-bifenyl1-4-vlkarbonyl)-5-í5-(1 -piperazinvlmethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yn-3pyrrolidinon O-methyloxim.

- 99 ·· ·· ···· · · · • · · · · · · · ·· ·· · · · · · • ··· · · · · *····

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,Tbifenyl]-4-ylkarbonyl)-/\/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny [4-(řerc-butoxykarbonyi)-1-piperazinyljoctové získala titulní sloučenina, řerc-butyl 4-({3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)-1piperazinkarboxylat, v 75% výtěžku (88% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.38 (s, 9H, CH₃), 2.38 (m, 4H, CH₂), 2.70-2.85 (m. 4H, CH₂), 3.34 (m, 4H, CH₂), 3.84 (s, 3H, NOCHý, 4.23-4.42 (m, 2H, CH₂), 5.92 (m, 1H, CH), 7.19-7.53 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺); 561.5.

řerc-Butyl 4-({3-[(2S,4EZ)-1 -([1,1 ’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)-1-piperazinkarboxylat (100 mg, 1.80 mmol) se 1 hodinu upravoval 25% roztokem TFA/DCM při teplotě 0°C. Reakční směs se potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Organické fáze se spojily a sušily nad síranem hořečnatým a odstraněním rozpouštědla vznikl zbytek, který se čistil rychlou chromatografií za použití směsi dichloromethan/methanol jako eluentu za vzniku požadovaného produktu, (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5(1-piperazinylmethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloximu, jako směsi E-/Z-izomerů v 85% výtěžku (94.3% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃); 2.50 (m, 4H, CH₂), 2.85-2.87 (m. 4H, CH₂), 3.043.19 (m, 2H, CH₂), 3.76 (s, 5H, CH₂, NOCH₃), 4.27-4.42 (m, 2H, CH₂), 5.94 (m, 1H, CH), 7.20-7.54 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 461.2.

- 100 • · ·· ···· ·· · • · · · · · · • · · · ···« ··· · ··· ·····

Příklad 49:

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenvll-4-vlkarbonvl)-5-{5-f(4-methyl-1-piperazinyl) methyll1,2,4-oxadiazol-3-vl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: (3Z,5S)-1-(Í1,1'-bifenyl1-4vlkarbonyl)-5-{5-[(4-methyl-1-piperazinvl)-methylH ,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methvíoxim.

Roztok, obsahující 1 ekvivalent (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5(1 -piperazinylmethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloximu (příklad 48), rozpuštěného v suchém DCM při teplotě 0°C za přítomnosti 1.5 ekvivalentu triethylaminu, reagoval se 1 ekvivalentem methyljodidu. Reakční směs se míchala 12 hodin při pokojové teplotě. Reakční směs se hydrolyzovala a potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Organická fáze se potom sušila síranem hořečnatým a koncentrovala ve vakuu za vzniku zbytku, který se čistil rychlou chromatografií za použití směsi dichloromethan/methanol jako eluentu za vzniku očekávaného produktu, (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5[(4-methyl-1-piperazinyl)-methyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloximu, jako směsi E-/Z-izomerů 50% výtěžku (99.9% čistota HPLC). Čistý Z-izomer by se mohl oddělit rychlou chromatografií a získal by se v 31% výtěžku (98.9% čistota HPLC).

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bfhenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(4-methyl-1-piperazinyl)-methyl]1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim: ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.32 (s, 3H, CH₃), 2.50-3.20 (m, 10H, CH₂), 3.78-3.92 (m, 5H, CH₂; NOCH₃),

- 101 -

4.27-4.45 (m, 2H, CH₂), 5.95 (m, 1H, CH), 7.32-7.57 (m, 9H, H arom); MS(ESI⁺): 475.2.

(3Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(4-methyl-1-piperazinyl)-methylj1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim: ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.32 (s, 3H, CH₃), 2.50-3.20 (m, 10H, CH₂), 3.78-3.92 (m, 5H, CH₂; NOCH₃), 4.27-4.45 (m, 2H, CH₂), 5.95 (m, 1H, CH), 7.32-7.57 (m, 9H, H arom); MS(ESI⁺): 475.2.

Příklad 50:

(3EZ,5S)-5-(5-í(4-acetyl-1-piperazinyl)methyl1-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-(f1,1'bifenvH-4-vlkarbonvl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim; (3Z,5S)-5-{5-í(4-acetvl-1 piperazinyl)methyl]-1,2,4-oxadiazol-3-vl}-1-(f1,1'-bifenvl1-4-ylkarbonyl)-3pyrrolidinon O-methyloxim.

Do roztoku, obsahující 1 ekvivalent of (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenylj-4-ylkarbonyl)5-[5-(1-piperazinylmethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloximu (příklad 48) v suchém DCM, se při teplotě 0°C přidaly 1.5 ekvivalenty triethylamin a 1 ekvivalent acetylchloridu. Reakční směs se míchala při této teplotě 30 minut a potom se hydrolyzovala ledem. Reakční směs se potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Organická fáze se sušila síranem hořečnatým a odstraněním rozpouštědla vznikl zbytek, který se čistil rychlou chromatografií za vzniku očekávaného produktu, (3EZ.5S)-5-{5-f(4-acetyl-1-piperazinyl)methyn-1,2,4-oxadiazol-3-vll·1-ď1, r-bifenvH-4-ylkarbonvl)-3-pyrrolidinon Q-methyloximeu, jako směsi E-!Z- 102 • · · · • · · · • · · · • · · · · izomerů v 70% výtěžku (94.4% čistota HPLC). Čistý Z-izomer by se mohl oddělit rychlou chromatografii za použití směsi cyklohexan/ethylacetat (1/1) jako eluentu a získal by se v 40% výtěžku (98.0% čistota HPLC).

(3EZ,5S)-5-{5-f(4-acetvl-1-piperazinyl)methyl1-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-1-([1,1'bifenyll-4-ylkarbonylj-3-pyrrolidinon O-methyloxim: ¹H NMR (300 MHz, CDCIs): 2.09 (m, 3H, CH₃), 2.65 (s, 4H, CH₂), 2.90-3.20 (m, 2H, CH₂), 3.54 (m, 2H, CH₂), 3.71 (m, 2H, CH₂), 3.85-3.92 (m, 5H, CH₂; NOCH₃), 4.36-4.50 (m, 2H, CH₂), 6.02 (m, 1H, CH), 7.40-7.75 (m, 9H, H arom); MS(ESP): 503.2.

(3Z,5S)-5-{5-[(4-acetyl-1-piperazinyl)methvn-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-1-([1,1'bifenvn-4-ylkarbonvl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.09 (m, 3H, CH₃), 2.65 (s, 4H, CH₂), 2.90-3.20 (m, 2H, CH₂), 3.54 (m, 2H, CH₂), 3.71 (m, 2H, CH₂), 3.85-3.92 (m, 5H, CH₂; NOCH₃), 4.36-4.50 (m, 2H, CH₂), 6.02 (m, 1H, CH), 7.40-7.75 (m, 9H, H arom); MS(ESP): 503.2.

Příklad 50:

4-{f(2S,4EZ)-2-(5-ff(ferc-butoxykarbonyl)aminojmethyl}-1 ^^-oxadiazol-S-yl)4-(methoxyimino)pyrrolidinvnkarbonyl)-1,1'-bifenyl.

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,1’bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny [(terc-butoxykarbonyl)aminojoctové získala titulní sloučenina v 80% výtěžku (78.2% čistota HPLC).

- 103 ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.48 (s, 9H, CH₃), 1.58 (s, 2H, CH₂), 2.90-3.43 (m, 2H, CH₂), 3.85 (s, 3H, NOC/7₃), 4.20-4.60 (m, 2H, CH₂), 6.03 (m, 1H, CH), 7.37-7.63 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 492.20, MS(ESIj: 490.2.

Příklad 51:

A/-((3-f(2S,4EZ)-1-(f1 ,T-bifenyn-4-ylkarbonvl)-4-(methoxyimino)-pyrrolidinyn1,2,4-oxadiazol-5-yl)methvl)-3-(1-piperidinyl)propanamid.

4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{[(terř-butoxykarbonyl)amino]methyl}-1,2,4-oxadiazol-3-yl)4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1,1'-bifenyl (příklad 50) se upravil 25% roztokem TFA/DCM při teplotě 0°C. Reakce se monitorovala pomocí LC/MS až do jejího ukončení. Reakční směs se upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a DCM. Spojené oragnické fáze se sušily nad síranem hořečnatým. Odstranilo se rozpouštědlo za vzniku surového produktu, který se použil bez dalšího čištění v dalším kroku. Zbytek se rozpustil v DCM při pokojové teplotě, přidal se DMAP (1.1 ekvivalent) a kyselina 3-(1 -piperidinyl)propanová (1 ekvivalent). Reakční směs se potom ochladila na teplotu 0°C a po částech se přidal EDC (1.1 ekvivalent). Po míchání 1 hodinu při teplotě 0°C se reakční směs nechala zahřát na pokojovou teplotu. Reakční směs se monitorovala TLC a LC/MS. Obvykle po 12 hodinách míchání při pokojové teplotě se reakční směs hydrolyzovaia, promyla roztokem uhličitanu sodného (10%), sušila nad MgSO₄ a odpařovala ve vakuu za vzniku surového produktu. Rychlou chromatografií na silikagelu, elucí 60% EtOAc v hexanu

- 104 -

vznikla titulní sloučenina jako směs E- a Z-izomerů v 50% výtěžku (87.4% čistota HPLC).

MS(ESI⁺): 531.5; MS(ESI ) : 529.2.

Příklad 52:

A/-((3-f(2S,4EZ)-1-([1,1'-biphenvl1-4-vlkarbonyl)-4-(methoxvimino) pyrrolidinyll1,2,4-oxadiazol-5-vl)methyl)-3-(dimethvlamino)propanamid.

4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{[(terí-butoxykarbonyl)amino]methyl}-1,2,4-oxadiazol-3-yl)4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1,1'-bifenyl (příklad 50) se upravil 25% roztokem TFA/DCM při teplotě 0°C. Reakce se monitorovala LC/MS a po jejím ukončení se monitorování zastavilo. Reakční směs se potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Spojené oragnické fáze se sušily nad síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odstranilo za vzniku surového produktu, který se použil bez dalšího čištění v dalším kroku. Zbytek se rozpustil v DCM při pokojové teplotě, přidal se DMAP (1.1 ekvivalent) a A/,A/-dimethyl-p-alanin (1 ekvivalent). Reakční směs se potom ochladila na teplotu 0°C a po částech se přidal EDC (1.1 ekvivalent). Po míchání 1 hodinu při teplotě 0°C se reakční směs nechala zahřát na pokojovou teplotu. Reakce se monitorovala TLC a LC/MS. Obvykle po 12 hodinách míchání při pokojové teplotě se reakční směs hydrolyzovala, promyla roztokem uhličitanu sodného (10%), sušila nad MgSO₄ a odpařila ve vakuu za vzniku surového produktu. Rychlou chromatografií na silikagelu,

- 105 -

elucí 60% EtOAc v hexanu vznikla titulní sloučenina jako směs E- a Zizomerů 52% výtěžku (82% čistota HPLC).

MS(ESI⁺): 491.2.

Příklad 53:

/V-({3-í(2S,4EZ)-1-([1,1'-biphenyn-4-vlkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyn1,2,4-oxadiazol-5-vl}-methvh-2-(dimethvlamino)acetaiTiid.

4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{[(terř-butoxykarbonyl)amino]methyl}-1,2,4-oxad iazol-3-yl)4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1,1 '-bifenyl (příklad 50) se upravil 25% roztokem TFA/DCM při teplotě 0°C. Reakce se monitorovala LC/MS a monitirování se zastavilo po jejím ukončení. Reakční směs se potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Spojené organické fáze se sušily nad síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odstranilo za vzniku surového produktu, který se použil bez čištění v dalším kroku. Zbytek se rozpustil v DCM při pokojové teplotě, přidal se DMAP (1.1 eqvivalent) a kyselina (dimethylamino)octová (1 ekvivalent). Reakční směs se potom ochladila na teplotu 0°C a po částech se přidal EDC (1.1 ekvivalent). Po míchání jednu hodinu při teplotě 0°C se reakční směs nechala zahřát na pokojovou teplotu. Reakce se monitorovala TLC a LC/MS. Obvykle po 12 hodinách míchání při pokojové teplotě se reakční směs hydrolyzovala, promyla roztokem uhličitanu sodného (10%), sušila nad MgSO₄ a odpařila ve vakuu za vzniku surového produktu. Rychlou chromatografií na silikagelu, elucí 60% EtOAc v hexanu vznikla titulní sloučenina jako směs E- a Zizomerů v 45% výtěžku (88.1% čistota HPLC).

«· · · · ··· ·· · ~ e ·· · « · · • ··· « · * · · * * · · • · · · ·· · * ·

- 106

MS(ESI⁺): 477.25: MS(ESI ) : 475.15.

Příklad 54:

4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{2-f(ferf-butoxvkarbonvl)amino]ethyl}-1 ^^-oxadiazol-S-yl)4-(methoxvimino)pyrrolidinyHkarbonyl)-1,1 '-bifenyl.

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1-([1,Tbifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a A/-(řerř-butoxykarbonyl)-p-alanin získala tato sloučenina v 75% výtěžku (91.9% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.36 (s, 9H, CH₃), 2.80-3.15 (m, 4H, CH₂), 3.51 (m, 2H, CH₂), 3.78 (s, 3H, NOCH₃), 4.27-4.42 (m, 2H, CH₂), 5.93 (m, 1H, CH), 7.39-7.56 (m, 9H, H arom.); MS(ESI⁺): 506.20, MS(ESL): 504.2.

Příklad 55:

4-ff(2S_l4EZ)-2-(5-f(1S)-2-terc-butoxv-1-í(terc-butoxykarbonvl)amino1ethyl)1,2.4-oxadiazol-3-yl)-4-(methoxyimino)pvrrolidinynkarbonyl)-1,1 '-bifenyl;

(3EZ,5S)-5-{5-í(1S)-1-amino-2-řerc-butoxvethyl1-1 ^A-oxadiazol-S-ylj-l-ďl ,VbifenvH-4-vlkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim; (3EZ,55)-5-{5-f(15)-1amino-2-hydroxyethyl1-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-(f1 ,r-bifenvH-4-ylkarbonyl)-3pyrrolidinon O-methyloxim.

- 107 M a Λ Λ Λ Λ • w 9

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15. se z (2S,4EZ)-1-([1,1'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/\/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (2S)-3-ferf-butoxy-2-[(ferř-butoxykarbonyl)aminojpropanové získala titulní sloučenina, 4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{(1S)-2-řercbutoxy-1-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-ethyl}-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyf]karbonyí}-1,1'-bifenyl, ve 44% výtěžku (89.4% čistota HPLC).

MS(ESI⁺): 578.5.

4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{(1 S)-2-íerc-butoxy-1-[(řerc-butoxykarbonyl)amino]ethyl}1,2,4-oxadiazol-3-yl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1,1 '-bifenyl (100 mg, 1.80mmol) se upravoval 1 hodinu 25% roztokem TFA/DCM při teplotě 0°C. Reakční směs se upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Organické fáze se spojily a sušily nad síranem hořečnatým a odstraněním rozpouštědla se získaly dva produkty, které se oddělily a čistily rychlou chromatografií za vzniku žádaných produktů jako směsi E-/Z-izomerů, (3EZ,5S)-5-{5-[(1S)-1-amino-2-terc-butoxyethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-([1,1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloximu, ve 20% výtěžku (80.8% čistota HPLC), a (3EZ,5S)-5-{5-[(1S)-1-amino-2-hydroxyethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloximu v 30% výtěžku (98.1% čistota HPLC).

(3EZ,5S)-5-{5-[(1S)-1-amino-2-terř-butoxyethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-([1,1 'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.07 (s, 9H, CH₃), 1.96 (m, 2H, NH₂), 2.83-3.18 (m, 2H, CH₂), 3.64• · • ·

- 108 -

3.78 (m, 5H, CH₂, NOCH₃), 4.23-4.43 (m, 2H, CH₂), 5.96 (m, 1H, CH), 7.307.56 (m, 9H, H arom); MS(ESI⁺): 478.0.

(3EZ,5S)-5-{5-[(1S)-1-amino-2-hydroxyethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1 -([ 1,1 'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim: ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.90-3.15 (m, 2H, CH₂), 3.86 (s, 3H, NOCH₃), 4.05-4.42 (m, 4H, CH₂), 4.81 (m, 1H, CH), 5.89 (m, 1H, CH), 7.36-7.62 (m, 9H, H arom); MS(ES!⁺): 422.20; MS(ESI-): 420.1.

Příklad 56:

4-{[(2S.4EZ)-2-(5-((1S,2R)-2-řerc-butoxv-1-f(řerc-butoxykarbonyl)amino1 propyD-1,2,4-oxadiazol-3-vl)-4-(methoxvimino)pvrrolidinvl1karbonyl)-1,1'bífenyl; (3EZ,5S)-5-{5-f(1S,2R)-1-amino-2-hydroxvpropyl1-1,2,4-oxadiazol-3yl}-1 -([1,1 '-bifenvn-4-vlkarbonyl)-3-pvrrolidinon O-methyloxim.

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 15, se z (2S,4EZ)-1 -([1,1 bifenyl]-4-ylkarbonyl)-/V'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8) a kyseliny (2S,3R)-3-řerc-butoxy-2-[(řerc-butoxykarbonyl)amino]butanové získala titulní sloučenina, 4-{[(2S,4EZ)-2-(5{(1S,2/?)-2-terc-butoxy-1-[(ferc-butoxykarbonyl)-amino]-propyl}-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1 ,Γ-bifenyl, v 48% výtěžku (85.9% čistota HPLC).

MS(ESI⁺): 592.7 • · · ·

- 109 -

4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{(1S,2R)-2-íerc-butoxy-1-[(ferc-butoxykarbonyl)amino] p ropy I}-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1,1 'bifenyl (100 mg, 1.80mmol) se upravoval 1 hodinu 25% roztokem TFA/DCM při teplotě 0°C. Reakční smě se potom upravila bazicky roztokem uhličitanu sodného (10%) a extrahovala DCM. Organické fáze se spojily a sušily nad síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odstranilo za vzniku zbytku, který se čistil rychlou chromatografii za použití směsi dichlormethan/methanol jako eluentu za vzniku požadovaného produktu, (3EZ,5S)-5-{5-[(1 S,2R)-1-amino-2hydroxypropyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3pyrrolidinon O-methyloximu, jako směsi E-/Z-izomerů v 30% výtěžku (90.3% čistota HPLC).

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.24-1.35 (m, 4H, CH₃, CH), 2.94-3.25 (m, 2H, CH₂), 3.83 (s, 3H, NOCH₃), 4.22-4.50 (m, 3H, OH, CH₂), 6.01 (m, 1H, CH), 7.38-7.60 (m, 9H, H arom); MS(ESI⁺); 436.3.

Příklad 57:

Ethyl 5-f(2S.4EZ)-1-(f1,1'-biphenyH-4-vlkarbonyl)-4-(methoxyimino) pyrrolidinyll-1,2,4-oxadiazol-3-karboxvlat.

o^x i

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 1 (způsob B), se z kyseliny (2S,4EZ)-1-(terc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidin-karboxylové (meziprodukt 2), ethyl amino(hydroxyimino)ethanoatu (meziprodukt 7) a kyseliny [1,1'-bifenyl]-4-karboxylové po rychlé chromatografii izolovala titulní sloučenina jako směs E-/Z-izomerů ve formě oleje v 35% výtěžku (96.1 % čistota HPLC).

- 110 -

¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 1.35 (t, 3H), 2.9-3.3 (m, 2H), 3.8 (m, 3H), 4.2-4.60 (m, 4H), 6.01 (s, 1H), 7.25-7.60 (m, 9H); MS(ESI⁺): 435.3.

Příklad 58:

5-f(2S.4EZ)-1-(f1.T-bifenvn-4-vlcarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinvn-/V-[3(dimethvIaminolpropyH-l^^-oxadiazol-S-karboxamid.

Ethyl 5-[(2S,4EZ)-1-([1 ,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino) pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazole-3-karboxylat (187mg, 0.43mmol, příklad 57) se rozpustil v poměru THF: voda 3:1 (10ml) a roztok se míchal. Přidal se LiOH (20mg, 0.47mmol, 1.1 ekv) a směs se míchala 2 hodiny při pokojové teplotě. THF se odstranil ve vakuu, zbytek se zředil vodou a roztok se okyselil 6N HCI (2 kapky, pH= 5). Vodná fáze se extrahovala DCM (2x1 OmL). Organická fáze se sušila síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odstranilo ve vakuu za vzniku derivátu kyseliny (165mg, 94%) ve formě žlutého oleje. Tento surový meziprodukt (102mg, 0.25mmol) se rozpustil DCM (5mL) a směs se ochladila na teplotu 0°C. V jedné dávce se přidal EDC.HCI (53mg, 0.28mmol, 1.1 ekv) a směs se míchala 10 minut. Přidal se Λ/¹ ,/V¹-dimethyl-1,3-propandiamin (35mg, 0.28mmol, 1.1ekv) a roztok se míchal při pokojové teplotě přes noc. Směs se potom promyla 10% vodným roztokem kyseliny citrónové (2x5mL). Dělení nebylo dobré v důsledku částečné rozpustnosti sloučeniny ve vodě. Organické rozpouštědlo se odstranilo ve vakuu a zbytek se čistil semipreparativní LC za vzniku titulní sloučeniny v 56% výtěžku (93% čistota HPLC).

• · · ·

- 111 ¹H NMR (300 MHz, CDCI₃): 2.0-2.1 (m, 2H), 2.8 (s, 6H), 2.9-3.3 (m, 4H), 3.5 (m, 2H), 3.8 (m, 3H), 4.2-4.60 (m, 4H), 5.9 (s, 1H), 7.25-7.65 (m, 9H), 7.8 (m, 1H); MS(ESI⁺): 491.4.

Příklad 59:

Obecný způsob syntézy pevné fáze pyrrolidin oxadiazolových derivátů obecného vzorce I, kde B je substituent vzorce Ha (viz schéma 13)

a) Krok plnění

Roztok kyseliny (2S,4EZ)-1-(terí-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2, 26g, lOOmmol) v suchém DCM (150ml) se přidal do oximové pryskyřice Kaiser (34.97g, 50mmol), která se suspendovala v suchém DCM (200ml). Potom se do suspenze přidal diisopropylkarbodiimid (7.83ml, 50mmol) a směs se třepala přes noc při okolní teplotě. Pryskyřice se potom zfiltrovala pomocí čerpadla a následně promyla DMF, DCM a nakonec diethyletherem dřivé než se sušila při teplotě 40°C ve vakuu.

b) Krok odstranění ochrany

Pryskyřice, získaná v kroku plnění, se třepala s 20% roztokem kyseliny trifluoroctové v dichloromethanu (200ml) 30 minut před filtrací pomocí čerpadla a následným proplachem poměrnými částmi DMF, DCM a nakonec diethyletherem před sušením při pokojové teplotě ve vakuu.

c) Krok uzavření N

Pryskyřice s předchozího kroku se převedla do filtračních destiček o 96 jamkách (přibližně 50 mg suché pryskyřice na jamku) a každá jamka se upravila N-reaktivní derivatizačním činidlem, například některým z následujících roztoků:

a) chlorid kyseliny (0.165mmol) a diisopropylethylamin (0.165mmol) v suchém dichloromethanu (1 ml), přes noc • * * · ·

- 112 b) kyselina (0.165mmol) a DIC (0.165mmol) v suchém dichloromethanu nebo NMP(1 ml), v závislosti na rozpustnosti karboxylové kyseliny, přes noc

c) isokyanat (0.165mmol) v suchém THF (1 mi), přes noc

d) sulfonylchlorid (0.165mmol) a diisopropylethylamin (0.165mmol) v NMP (1ml), přes noc

e) benzyl(alkyl)bromid (0.165mmol) a diisopropylethylamin (0.165mmol) v NMP (1ml), přes noc.

Destička se potom utěsnila a třepala přes noc při teplotě okolí. Pryskyřice se potom zfiltrovaly a následně promyly poměrnými částmi DMF, DCM a nakonec diethyletherem před sušením při pokojové teplotě ve vakuu.

d) Krok odštěpení

Amidoximová složka (například meziprodukty 7, 0.27mmol) se přidala do suspenzí vsázek funkcionalizované oximové pryskyřice z předchozího kroku (50mg, 0.05 mmol) v DCM (0.5-1 ml), destičky se utěsnily a třepaly přes víkend (~66 hodin) při okolní teplotě. Po filtraci se vzniklé rozpouštědlo odpařilo ve vakuu. Ke zbytku se přidal pyridin (0.5-1 ml) a roztok se refluxoval přes noc. Po ochlazení na okolní teplotu se roztok odpařil ve vakuu a zbytky se opět rozpustily v DMC (0.5-1ml). Po promytí 2 x 0.5-1ml 1M HCI_(VOd) se roztoky sušily nad síranem hořečnatým a odpařily ve vakuu za vzniku surových produktů, které se analyzovaly HPLC a hmotnostní spektroskopií. V případech, že byla na oxadiazolovém substituentu (např. příklady 40, 46-48) přítomna ochranná skupina ΛΖ-Boc, přidal se do surové sloučeniny roztok 25% TFA in DCM (3ml) (obvykle 0.15mmol) a roztok se míchal při okolní teplotě 40 minut. Rozpouštědlo se potom odstranilo ve vakuu za vzniku produktů s nechráněným N.

- 113 Příklad 60:

(3£Z,5S)-5-(3-benzyl-1,2,4-oxadiazol-5-vl)-1-(n ,r-bifenyl1-4-vlkarbonyl)-3pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,45Z)-1(řerř-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a /\/'-hydroxy-2-fenylethanimidamidu získala titulní sloučenina v 86% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 453.2.

Příklad 61:

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenvl1-4-ylkarbonvl)-5-(3-([(2-furvlmethvl)sulfanyl1methvl)1,2,4-oxadiazol-5-vl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4£Z)-1(terí-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrofidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a 2-[(2-furylmethyl)sulfanyl]-/\/'-hydroxyethanimidamidu získala titulní sloučenina v 53% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 489.6.

• ·

- 114 Příklad 62:

(3EZ,5S)-1-(Í1 .r-bifenvll-4-vlkarbonvl)-5-(3-í2-oxo-2-(1-pvrrolidinvl)ethyl11,2,4-oxadiazol-5-vl)-3-pvrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerř-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-biphenyl]-4-karbonylchloridu a (1Z)-/V'-hydroxy-3-oxo-3-(1-pyrrolidinyl)propanimidamidu získala titulní sloučenina v 89% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 474.2.

Příklad 63:

(3EZ.55)-1-(f1_l1'-bifenyn-4-ylkarbonvl)-5-{3-í(2-pyridinylsulfanyl)methyl11,2.4-oxadiazol-5-vl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

- 115 Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxyiové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbony!chloridu a A/'-hydroxy-2-(2-pyridinyl-sulfanyl)ethanimidamid získala titulní slučenina v 66% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 486.2.

Příklad 64:

(3£Z,5S)-1-(n ,1'-bifenvn-4-vlkarbonvl)-5-[3-(4-fluorofenyl)-1,2,4-oxadiazol-5νΠ-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(terc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a 4-fluoro-/\/'-hydroxybenzenkarboximidamidu získala titulní sloučenina v 79% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 457.2.

Příklad 65:

(3EZ,5S)-1-(Í1,1'-bifenvn-4-vlkarbonyl)-5-{3-r(2-thienylsuifanyl)methyl1-1,2,4oxadiazol-S-viy-S-pyrrolidinon O-methyloxim

- 116 Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59 se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a A/'-hydroxy-2-(2-thienylsulfanyl) ethanimidamidu získala titulní sloučenina v 81% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 491.4.

Příklad 66:

(3EZ,5S)-1-(F1,1'-bifenvll-4-vlkarbonyl)-5-{3-í2-(3,5-dimethyl-1H-pvrazol-1vDethylM ,2,4-oxadiazol-5-vl)-3-pvrrolidinon O-methyloxim ?~

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a 3-(3,5-dimethyl-1 /-/-pyrazol-1 -yl)-/\/'hydroxypropanimidamidu získala titulní sloučenina v 79% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 485.3.

Příklad 67:

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenvl]-4-vlkarbonvl)-5-(3-í(methvlsulfonyl)methvl1-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim • ·

- 117 -

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1 '-bifenyl]-4-karbonylchloridu a /V'-hydroxy-2-(methylsulfonyl)ethanimidamidu získala titulní sloučenina v 87% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 455.2.

Příklad 68:

(3EZ.5S)-1-(f1.1'-bifenyl1-4-vlkarbonvl)-5-í3-(5-methyl-3-isoxazolvl)-1,2,4oxadiazol-5-vH-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(íerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1 '-bifenyl]-4-karbonylchloridu a /V'-hydroxy-5-methyl-3-isoxazolkarboximidamidu získala titulní sloučenina v 78% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 444.2.

Příklad 69:

(3EZ,5S)-1-(F1,1^l-bifenyl1-4-vlkarbonvl)-5-[3-(2-thienvlmethyl)-1,2,4-oxadiazol5-vH-3-pyrrolidinon O-methyloxim

- 118 -

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a /\/'-hydroxy-2-(2-thienyl)ethanimidamidu získala titulní sloučenina v 85% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 459.2.

Příklad 70:

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl1-4-vlkarbonyl)-5-(3-fenyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(terc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchlorid u a Λ/'-hydroxybenzenkarboximidamidu získala titulní sloučenina v 82% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 439.2.

Příklad 71:

(3EZ,5S)-1-(Í1.1'-bifenvll-4-ylkarbonvl)-5-(3-{í(2-furylmethvl)sulfonynmethvl}1,2,4-oxadiazol-5-vl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

- 119 -

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a 2-[(2-furylmethyl)sulfonyl]-A/'-hydroxyethanimidamidu získala titulní sloučenina v 88% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 521.4.

Příklad 72:

(3EZ,5S)-5-f3-(aminomethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-vlH-(í1,1'-bifenvl1-4ylkarbonvl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a řerc-butyl (2Z)-2-amino-2-(hydroxyimino) ethylkarbamatu (meziprodukt 7) získala titulní sloučenina v 85% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 392.0.

Příklad 73:

(3EZ,5S)-1-([1 .V-bifenvII^-ylkarbonvD-S-O-ífEQ-hvdroxvífenvD-methylI1,2,4-oxadiazol-5-vl}-3-ovrrolidinon O-methyloxim

- 120 z

O

N

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a (2/?S)-/V',2-dihydroxy-2-phenylethanimidamidu (meziprodukt 7) získala titulní sloučenina v 75% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 469.3.

Příklad 74:

(3EZ,5S)-1-(ri,1^,-bifenyn-4-ylkarbonvl)-5-{3-f(1/?S)-1-hvdroxypropyn-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim o

N

OH

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a (2RS)-/V',2-dihydroxybutanimidamidu (meziprodukt 7) získala titulní sloučenina v 79% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 421.2.

(3EZ,5S)-1-(n ,1'-bifenvl1-4-vlkarbonyl)-5-f3-(hydroxymethyl)-1,2,4-oxadiazol5-vn-3-pvrrolidinon O-methyloxim

Příklad 75:

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [ 1,1 '-bifenyl]-4-karbonylchloridu a /\/',2-dihydroxyethanimidamidu (meziprodukt 7) získala titulní sloučenina v 85% HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 393.0.

- 122 Příklad 76:

(3EZ,5S)-1-([1 ,r-bifenvn-4-vlkarbonyl)-5-{3-f(1S,2P)-2-hvdroxvcvklohexyll·

1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(terc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt

2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a (1S,2/?)-/V',2-dihydroxycyklohexankarboximidamidu (meziprodukt 7) získala titulní sloučenina v 85% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 461.2.

Příklad 77:

(3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenvn-4-vlkarbonyl)-5-(3-|(3ES)-piperidinvl1-1,2,4oxadiazol-5-vl}-3-pyrrolidinon 0-methvloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(ferc-butoxykarbonyl)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt

2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a ferc-butyl (3ES)-3-[amino(hydroxyimino)methyl]-1-piperidinkarboxylatu (meziprodukt 7) získala titulní sloučenina v 77% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 446.2.

- 123 -

·· · · · · ·» * • · · · · · • · · · · · · • · ·«· ····

Příklad 78:

(3EZ,5S)-1 -(Γ1 .r-bifenvH-4-vlkarbonyl)-5-{3-f(2KS)-piperidinyH-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Podle obecného způsobu, uvedeného v příkladu 59, se z kyseliny (2S,4EZ)-1(řerc-butoxykarbonyí)-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboxylové (meziprodukt 2), [1,1'-bifenyl]-4-karbonylchloridu a terc-butyl (2RS)-2-[amino(hydroxyimino)methyl]-1-piperidinkarboxylatu (meziprodukt 7) získala titulní sloučenina v 78% čistotě HPLC. MS(ESI⁺): m/z = 446.2.

Příklad 79:

Obecný způsob syntézy rozpuštěné fáze pyrrolidin oxadiazolových derivátů obecného vzorce I, kde B je substituent vzorce III, X = S (schéma 9,11):

(3EZ,5S)-1-(f1,T-bifenyn-4-ylkarbonyl)-5-(5-thioxo-4,5-dihvdro-1,3,4oxadiazol-2-vl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

Do roztoku of řerc-butyl (2S,4EZ)-2-(hydrazinokarbonyI)-4-(methoxyimino)-1pyrrolidinkarboxylatu (meziprodukt 9, 2.86 mmol; 780mg) v ethanolu (25ml) se

- 124 -

při teplotě 0°C přidal sirouhlík (6.86mmol; 522mg) a hydroxid draselný (3mmol; 168mg). Směs se refluxovala 7 hodin. Rozpouštědlo se odpařilo a zbytek se opět rozpustil v EtOAc a promyl nasyc. NH₄CI a 10% NaHCO₃ a solným roztokem. Organická vrstva se sušila nad Na₂SO₄ a odpařila za vzniku požadovaného meziproduktu s chráněným /V, řerc-butyl (2S,4£Z)-4(methoxyimino)-2-(5-thioxo-4,5-dihydro-1,3,4-oxadiazol-2-yl)-1-pyrrolidinkarboxylatu, ve formě nažloutlého oleje (200mg, 23%).

¹H-NMR (CDCI₃): 1.46 (m, 9H, CH3), 2.7-3.3 (m, 2H, CH2), 3.88 (s, 3H, CH3O), 4.05-4.35 (m, 2H, CH2), 5.29 (m, 1H, CH-N). MS(APCI ): 313.0.

Meziprodukt s chráněným N z výše uvedeného kroku, řerc-butyl (2S,4£Z)-4(methoxy-imino)-2-(5-thioxo-4,5-dihydro-1,3,4-oxadiazol-2-yl)-1-pyrrolidinkarboxylat (0.64 mmol; 200mg) se rozpustil v suchém DCM (25ml) při teplotě 0°C a plynný HCI probublával roztokem 20min. Rozpouštědlo se odpařilo a zbytek se opět rozpustil v DMC a odpařil. Zbytek se opět rozpustil v suchém DCM (20ml) a přidal se triethylamin (5,12mmol; 518mg), následně se pomalu přidávalo činidlo uzavírající N, například [1,1'-bifenylj-4-karbonylchlorid (0.64mmol; 139mg), který se předtím rozpustil v DCM při teplotě 0°C; reakční směs se míchala při pokojové teplotě přes noc. Do směsi se potom přidalo 200 mg Pol-trisaminu (3.45 mmol/g), aby se propláchl acylchlorid, a reakční směs se míchala dalších 5 hodin, potom se zfiltrovala a filtrát se propláchla nasyceným roztokem NH₄CI a solným roztokem, sušila nad Na₂SO₄ a rozpouštědlo se odpařilo. Surový produkt se čistil FC za použití lineárního gradientu 40:60 (EtOAc:cyklohexan) až 90:10 (EtOAc:MeOH) 37 minut na rychlém mástru za vzniku titulní sloučeniny, (3EZ,5S)-1-([1,1 '-bifenyl]-4ylkarbonyI)-5-(5-thioxo-4,5-dihydro-1,3,4-oxadiazol-2-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloximu (40mg, 16%).

¹H-NMR (CDCI₃): 2.8-3.2 (m, 2H, CH2), 3.9 (s, 3H, CH3-O), 4.2-4.5 (m, 2H, CH2), 5.95 (m, 1H, CH-N), 7.3-7.7 (m, 9H, Ar). MS(APCI⁺): 395.0; MS(APCl·): 393.0.

- 125 Příklad 80:

Obecný způsob syntézy rozpuštěné fáze pyrrolidin oxadiazolových derivátů obecného vzorce I, kde B = lil, X = O (schéma 9,11):

5-í(2S,4EZ)-1-(í1,1'-bifenyn-4-vlkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinvn-1,3,4oxadiazol-2(3H)-on

Do míchaného roztoku terc-butyl (2S,4EZ)-2-(hydrazinokarbonyl)-4(methoxyimino)-l-pyrrolidinkarboxylatu (meziprodukt 9, 1.84 mmol; 500 mg) a triethylaminu (2,76 mmol; 279 mg) v THF (25mL) se při teplotě 0°C přidal 1,1'-karbonyldiimidazol (2.76 mmol; 448 mg). Míchání pokračovalo 5 hodin. Přidala se další část triethylaminu a 1 ,Γ-karbonyldiimidazolu a míchání pokračovalo při pokojové teplotě přes noc. Rozpouštědlo se odpařilo a zbytek se rozpustil v EtOAc a promyl nasyceným roztokem NH₄CI a 10% NaHCO₃, a solným roztokem. Organická vrstva se sušila nad Na₂SO₄ a odpařila na sušinu za vzniku /V-chráněného meziproduktu, terc-butyl (2S,4E)-4-(methoxyimino)2-(5-oxo-4,5-dihydro-1,3,4-oxadiazol-2-yl)-1 -pyrrolidinkarboxy latu, ve formě bílé pěny (460mg, 84%).

¹H-NMR (CDCI₃): 1.46 (s, 9H, CH3), 2.8-3.25 (m, 2H, CH2), 3.88 (s, 3H, CH30), 4.05-4.35 (m, 2H, CH2), 5.06 (m, 1H, CH-N). MS(APCl·): 297.0.

ΛΖ-chráněný meziprodukt z výše uvedeného kroku, terc-butyl (2S,4E)-4(methoxyimino)-2-(5-oxo-4,5-dihydro-1,3,4-oxadiazol-2-yl)-1-pyrrolidinkarboxylat, se podrobil stejným podmínkám pro odstranění ochrany N a

- 126 následné A/-acylaci, jak je popsáno v příkladu 49, přičemž po čištění rychlou chromatografií vznikne titulní sloučenina, (5-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)-pyrrolidinyl]-1,3,4-oxadiazol-2(3H)-on (130mg, 26%).

Ή-NMR (CDCIs): 2.8-3.1 (m, 2H, CH2), 3.84 (s, 3H, CH3-O), 4.2-4.5 (m, 2H, CH2), 5.75 (m, 1H, CH-N), 7.35-7.7 (m, 9H, Ar). MS(APCI⁺): 379.0; MS(APCI): 377.0.

Příklad 81:

Obecný způsob syntézy rozpuštěné fáze pyrrolidin oxadiazolových derivativátů obecného vzorce I, kde B ie substituent vzorce IV, X = vazba, R⁸ = H (schéma 9,11);

(3EZ,5S)-1-(f1,1'-bifenyl1-4-vlkarbonyl)-5-(1,3,4-oxadiazol-2-yl)-3-pyrrolidinon

O-methyloxim o

t

Do roztoku řerc-butyl (2S,4EZ)-2-(hydrazinokarbonyl)-4-(methoxyimino)-1pyrrolidinkarboxylatu (meziprodukt 9, 2.86 mmol; 780 mg) v TMOF (8mL) se přidaly 3 drops kyseliny octové a reakční směs se zahřívala 4 hodiny na teplotu 80°C, potom přes noc při pokojové teplotě. Rozpouštědlo se odpařilo na sušinu za vzniku nažloutlé pěny (610mg). Zbytek se opět rozpustil v toluenu a přidal se P₂O₅. Reakční směs se zahřívala k refluxu 2.5 hodiny, potom se rozpouštědlo odstranilo. Ke zbytku se přidala voda a roztok se extrahoval EtOAc. Organická vrstva se promyla nasyceným roztokem NH₄CI a solným roztokem za vzniku požadovaného W-chráněného meziproduktu, terč- 127 -

butyl-(2S,4E)-4-(methoxyimino)-2-(1,3,4-oxadiazol-2-yl)-1 -pyrrolidinkarboxylatu, ve formě žlutého oleje (330 mg, 63%). Analýza ¹H-NMR odhalila, že produkt byl přítomen v čistotě >90%. Sloučenina se považovala za dostatečně čistou, aby se použila v následných krocích bez dalšího čištění (pouze 2 místa na TLC, stanovení Pancaldi, odpovídající E- a Z-izomerům, R_f = 0.35 a 0.47, eluce EtOAc:hexane 1:1).

¹H-NMR (CDCIa): 1.46 (broad m, 9H, CH3), 2.8-3.3 (m, 2H, CH2), 3.89 (s, 3H, CH3-O), 4.05-4.3 (m, 2H, CH2), 5.4 (m, 1H, CH-N). MS(APCI⁺): 283.0.

A/-chráněný meziprodukt z výše uvedeného kroku, řerc-butyl (2S,4E)-4(methoxyimino)-2-(1,3,4-oxadiazol-2-yl)-1-pyrrolidinkarboxylat, se podrobil stejným podmínkám pro odstranění N-ochrany a následné /V-acylaci, jak je popsáno v příkladu 49, přičemž po čištění rychlou chromatografií vznikne titulní sloučenina, (3EZ,5S)-1-([1,1'-biphenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(1,3,4-oxadiazol-2-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (80mg, 10%).

¹H-NMR (CDCIs): 2.8-3.2 (m, 2H, CH2), 3.65 (s, 3H, CH3-O), 4.2-4.45 (m, 2H, CH2), 5.95 (m, 1H, CH-N), 7.3-7.6 (m, 9H, Ar), 8.2 (s, 1H, CH hetero). MS(APCI⁺): 363.4.

Příklad 82:

Obecný způsob syntézy rozpuštěné fáze pyrrolidin oxadiazolovývh derivátů obecného vzorce I, kde B ie substituent vzorce lib, R⁷ = H:

(3EZ,5S)-1-([1 ,T-bifenvl1-4-ylkarbonyl)-5-(1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3-pyrrolidinon

O-methyloxim

- 128 -

Do suspense (2 S, 4EZ)-1 -([ 1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-A/'-hydroxy-4-(methoxyimino)-2-pyrrolidinkarboximidamidu (meziprodukt 8, 170mg, 0.48mmol) v TMOF (20ml) se přidalo katalytické množství kyseliny p-toluenesulfonové a reakční směs se 16 hodin zahřívá k refluxu. Potom se ve vakuu odpařil TMOF a zbytek se rozpustil v DCM (15 ml). Roztok se promyl vodným roztokem NaHCO₃(vod) (2x15ml), sušil nad MgSO₄ a odpařil ve vakuu. Silikagelovou chromatografií, elucí 15% EtOAc v hexanech vznikl požadovaný produkt, (3EZ,5S)-1-([1,1'-biphenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (59mg).

¹H-NMR (400MHz, CDCI₃): 2.9 (m, 1H), 3.2 (m, 1H), 3.9 (m, 3H), 4.3-4.6 (m, 2H), 6.1 (m, 1H), 7.3-7.7 (m, 9H, 8.7 (s, 1H). MS(APCI⁺): 363.2.

Příklad 83:

Výroba farmaceutické formulace

Formulace 1 - Tablety

Pyrrolidin oxadiazolová sloučenina vzorce (I) se ve formě suchého prášku smíchá se suchým želatinovým pojivém přibližně v hmotnostním poměru 1:2. Jako lubrikant se přidá malé množství stearanu hořečnatého. Směs se v tabletovacím lisu zpracuje na 240-270 mg tablety (80-90 mg aktivní pyrrolidin oxadiazolové sloučeniny na tabletu).

Formulace 2 - Kapsle

Pyrrolidin oxadiazolová sloučenina vzorce (I) se ve formě suchého prášku smíchá se škrobovým ředidlem přibližně v hmotnostním poměru 1:1. Směs se » · · · ·

- 129 plní do 250 mg kapslí (125 mg aktivní pyrrolidin oxadiazolové sloučeniny na kapsli).

Formulace 3 - Kapalina

Pyrrolidin oxadiazolové sloučenina vzorce (I), sacharóza a xanthanová guma se smísí, protlačí sítem o velikosti ok 10 mesh U.S. a potom se smíchá s předem připraveným roztokem mikrokrystalické celulózy a sodnou solí karboxymethylcelulózy (11:89) ve vodě. Benzoan sodný, chuťová látka a barvivo se rozpustí ve vodě a roztok se přidá za míchání. Potom se přidá dostatečné množství vody.

Formulace 4 - Tablety

Pyrrolidin oxadiazolové sloučenina vzorce (I) se ve formě suchého prášku smíchá se suchým želatinovým pojivém přibližně v hmotnostním poměru 1:2. Jako lubrikant se přidá malé množství stearanu horečnatého. Směs se zpracuje na tabletovacím lisu na 450-900 mg tablety (150-300 mg aktivní pyrrolidin oxadiazolové sloučeniny).

Formulace 5 - Injekce

Pyrrolidin oxadiazolová sloučenina vzorce (I) se rozpustí v pufrovém sterilním slaném injektovatelném vodném prostředí, aby se vytvořila vyhovující koncentrace.

Příklad 84 : Biologické testy

Sloučeniny podle vzorce (I) se mohou podrobit následujícím testům:

a) In vitro kompetitní vazebný test pomocí Scintillating Proximity Assay (Pharmaceutical Manufacturing International, 1992, str..49-53, Cook, N.D. et al)

Tento test umožňuje stanovit afinitu testovaných sloučenin na receptor OT. Membrány z buněk HEK293EBNA, které expresují receptor hOT, se resuspendovaly v pufru, který obsahuje 50 mM Tris-HCI, pH 7.4, 5 mM MgCI₂ a 0.1 % BSA (hmotn./obj.). Membrány (2-4 pg) se smíchaly s 0.1 mg wheat- 130 germ aglutininu (WGA) SPA bead (type A) a 0.2 nM radioaktivně značeného [125|]_ovTA(OVTA je Ornithin Vasoactiv a je analogem OT pro kompetitní vazebné experimenty). Nespecifická vazba se stanovila za přítomnosti 1 μΜ oxytocinu. Celkový objem testu byl 100 pl. Destičky (Corning ® NBS plate) se inkubovaly při pokojové teplotě 30 minut a počítaly na sčítači Mibrobeta. Testované sloučeniny se použily v koncentracích 30 pM, 10 pM, 1 pM, 300 nM, 100 nM, 10 nM, 1 nM, 100 pM, 10 pM. Kompetitní vazebná data se analyzovala za použití programu iterativní, nelineární, vhodné křivky, Prism.

Vazebné affinity na receptor oxytocinu pyrrolidinových derivátů vzorce (I) se stanovily za použití výše uvedeného biologického testu in vitro. Representativní hodnoty některých příkladů sloučenin jsou uvedeny v tabulce 1 níže. Hodnoty znamenají vazebnou afinitu (IC₅₀; pM) příkladu sloučenin podle vzorce (I) na receptor oxytocinu.

- 131 «. · « · · ·

Tabulka 1:

Strukturní vzorec	Název-llIPAC	Vazebná afinita lidského OT-R ICsofpM)
—0, OH °”N	(3 EZ, 5S )-1 -([ 1,1'- bifeny l|-4-ylkarbonyl)-5{3-[(1 RS)-1-hydroxypropyl]-1,2,4-oxadiazol5-yl}-3-pyrrolidinorl· 0 -methyloxim*	0.006
'XqyX <N b-N 0 >=0	(3 EZ, 5S )-1 -([ 1,1 ’-b ifen y l]-4-yllcarbonyl)-5{3-[2-oxo-2-(1 -pyrrolidinyl)ethyl]-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon 0methyloxim	0.007
O
ýM XA OH	(3£Z,5S)-1-([1,1'-bifenylI-4-ylkarbonyl)-5[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yll-3pyrrolidinorl· O-methyloxim	0.011
O
N νΑ ,-γΌΧ O 0	(3 EZ, 5S )-5-(5-( 1 -acetyi-4-piperidí nyl)-1,2,4oxadiazol-3-yi]-1-([1,1'-bifenyl]-4ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyioxim	0.002
„os N tV7 P ΓΎ^0 N~^ Q 0	/V-({3-[(2 S,4£Z)-1-([1,1'-bifenyl]-4ylfcarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)acetamid	0.003

-132Tabulka 1 - pokračování:

Strukturní vzorec	Název-ÍUPAC	Vazebná afinita lidského OT-R IC50 (μΜ) '
xo Ň 0 0. N	(3£Z ,5S )-1-([1,1 '-bifeny ll-4-ylKarbonyl)-5(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3pyrrolidinon < O-methyloxim	0.088
xo N 0 0. N	(3£Z,5S)-1-[(2’-methyl[1,1’-bifenylJ-4yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim	0.021
xo N O-nA, 0 O^N	(3 £Z, 5S )-1 -([1,1 ’-b ife n y l]-4-ylkarbonyl)-5(1,3,4-oxadiazol-2-yl)-3-pyrrolidinon 0 methyloxim	0.211
I T° ΓΗλΑ-ι \=/ O °-NÁ^	(3 E, 5S )-1 -[(2'-met hyl[ 1,1’-bifeny H-4yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim	0.023
1 % ó	(3Z,5S)-1-[(2'-methyl[1,1'-bifenyl]-4yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-ox adiazol-5yl)-3-pyrrolidinon<. O-methyloxim	0.009

Podle výhodného provedení vykazují sloučeniny vazebné afinity (/C₅o (μΜ)) menší než 0.40 μΜ, výhodněji menší než 0.1 μΜ.

- 133 -

b) Funkční test č. 1: Inhibice Ca²*-mobilizace pomocí FLIPR (Fluorescent ímaging Plate Reader)

FLIPR je zařízení pro fluorescenční zobrazení, používající laser, který je schopný iluminace 96-jamkové destičky a představuje simultánní čtení každé jamky a proto umožňuje rychlá měření velkého množství vzorků.

Tento test ukazuje inhibici mobilizace vápníku způsobenou OT / OT-R nezbytnou pro děložní stahy - při použití testovaných sloučenin vzorce (I).

Příprava destiček: FLIPR-destičky se předem potáhly PLL (Poly-L-Lysin) 10pg/ml + 0.1% želatiny, aby se během 30 minut až 2 dny při teplotě 37 °C zachytávaly buňky HEK (Human Embryonic Kidney). Buňky se převedly do destiček o 96 jamkách (60000 buněk/jamku).

Značení pomocí fluo-4: 50pg fluo-4 (fluorescenční markér) se rozpustilo ve 20μΙ kyseliny pluronové (20% v DMSO). Rozpuštěný fluo-4 se potom zředil v 10ml DMEM (Dubecco’s Minimal Essential Medium-F12 medium bez FCS (Fetal Calf Sérum). Prostředí se odstranilo z destiček, následoval jeden proplach prostředím DMEM-F12. Nyní se přidalo 100μΙ prostředí DMEM-F12, obsahující fluo-4, a buňky se inkubovaly 1-1,5 hodiny (buňky CHO) a 1,5-2 hodiny (buňky HEK). Buňky nyní obsahují fluorescenční markér.

Pufr: 145 mM NaCI, 5 mM KCI, 1 mM MgCI₂, 10 mM Hepes, 10 mM glukózy, EGTA (kyselina ethylen-bis oxyethylen nitrilo tetraoctová). Upraveno na hodnotu pH 7.4.

Provedení testu: Připravilo se (96-jamkové destičky) minimum δθμΐ/jamku antagonistů (5x) ve výše uvedeném pufru (1x). Antagonisté se přidaly do destiček s jamkami při různých koncentracích (30 pM, 10 pM, 1 pM, 300 nM, 100 nM, 10 nM, 1 nM, 100 pM, 10 pM).

OT se přidá při koncentraci 40 nM.

Fluorescenční markér, který je citlivý na množství Ca²⁺, mobilizovaného uvnitř buňky, se může kvantifikovat zařízením FLIPR.

- 134 Aktivity pyrrolidinových derivátů podle vzorce (I) se stanovily za použití výše popsaného biologického testu in vitro. Representativní hodnoty některých příkladů sloučenin jsou uvedeny v tabulce 2 níže. Hodnoty znamenají kapacitu příkladů sloučenin podle vzorce (I) pro účinnou antagonizací oxytocinem indukované nitrobuněčné mobilizace Ca²⁺, způsobené receptorem oxytocinu.

- 135 • · · ······ ··· • · · · ·· · *·· ··· ·· · ···· • · ··· · · · V ····· • · · · · · · · · · · ·

Tabulka 2:

, Strukturní vzorec	Název-IUPAC	inhibice Ca2’-, mobilizace, hOT-R IČso (μΜ)
xo I N o 0. <KN	(3EZ.5S )-1-((1, T-bifenyl]-4-yikarbonyl)-5(3-methyl-1, 2,4-oxadiazol-5-yl)-3pyrrolidinon· 0 -methyicxim	0.004
^0 í N o o. N	(3EZ,5S)-1-[(2'-methyl[1,1'-bifenyl]-4yl)karbonyl)-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5yl)-3-pyrrolidinon 0 -methyloxim	0.012
xo I N oo^-U 0 °^N	(3 EZ, 5S )-1 -([ 1,1 '-bifen y I J-4-yiKarbony I>-5(1,3t4-oxadiazol-2-yl)-3-pyirolidinon 0methyloxim	0.220
0 — a N σού 0 N ? ^==N	(3EZ,5S)-1-[(2'-chloro[1.1'-bifenyl]-4yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5yl)-3-pyrrolidinon O-metnyloxim	0.001
I % \==/ 0	(3Z,5S )-1-{(2'-methyl[1,1'-bifenyl]-4yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5yl)-3-py rrolidinori' 0 -methyloxim	0.004

- 136 c) Funkční test č. 2: Inhibice syntézy IP3 (Inositol Tri-Phosphat) v buňkách HEK/EBNA-OTR

Tento test ukazuje inhibici syntézy IP3, způsobené OT / OT-R, která je nezbytná pro děložní stahy, za použití testovaných sloučenin vzorce (I).

Stimulace buněk: Buňky HEK/EBNA OTR (krysa nebo člověk) se umístily do 12-jamkových destiček (costar) a vyrovnávaly 15-24 hodin radioaktivně značeným [³H]-i nositolem v prostředí bez přídavku inositolu 1% FCS (0.5ml/jamku). Použilo se 4 pCi/ml. Potom se prostředí s obsahem značení nasálo. Potom se během 10-15 minut při teplotě 37 °C přidaly DMEM (bez FCS, inositol), 20mM Hepes (kyselina 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazin-ethansulfonová), 1 mg/ml BSA, obsahhující 10 mM LiCI (čerstvě připravený). Agonista (například oxytocin používaný při koncentraci 10 nM) a antagonisté (například testované sloučeniny vzorce (I) používané v koncentraci 10 pM, 1pM, 300 nM, 100 nM, 10 nM, 1 nM, 100 pM, 10 pM, 3 pM) se přidávaly během požadovanou dobu (15-45 min) a následně se prostředí nasálo. Antagonizací receptoru OT se radioaktivně značený inositol fosforyloval za vzniku IP3, množství radioaktivně značeného IP3 se může stanovit během následujícího zpracovaní. Reakce se zastavila 1ml STOP-roztokem (například 0.4 M kyselinou perchloristou) a nechala ustát 5-10 minut při pokojové teplotě. Potom se 0.8 ml převedlo do trubiček, obsahující 0.4 ml neutralizačního roztoku (0.72 Μ KOH/0.6M KHCO₃), a trubičky se zvířily a nechaly v chladu alespoň 2 hodiny.

Separace IP: Vzorky se behem 15 minut odstředily ve stolní odstředivce při 3000-4000 rpm. Supernatant (1 ml) se převedl do nových trubiček, obsahujících 2,5 ml H₂O. Pevná pryskyřice (0.8ml) se vyrovnala 20 ml H₂O a a celé vzorky se nalily so chromatografické kolony, aby se oddělila směs. Pro odstranění volného inositolu se provedly dva proplachy 10 ml vody.

Eluce celkového IP: Eluce se dosáhlo použitím směsi 3 ml 1M mravenčan amonný/0.1 M kyselina mravenčí. Eluent se jímal do scintilačních čítačích

- 137 ··· ·· « *··* • · · · · · · · · «···· ··· · · · · · · · ·*··· «· ·· «« · trubic a následně se přidalo 7 ml scintilační kapaliny. Množství IP3 se stanoví scintillatičním čítačem.

d) Model inhibice děložních stahů in vivo

Test ukazuje biologický účinek testovaných sloučenin na modelu předčasných porodních stahů a předčasného porodu in vivo.

Nikoliv březí samičí krysy Charles River CD(SD) BR (9-10 týdnů staré, 200250g) se léčily 18 a 24 hodin před experiment 250 pg/kg, i.p. diethylstilbestrolem (DES). Pro účel testu se zvířata anaestetizovaly urethanem (1.75 g/kg, i.p.) a umístily na placed homeothermický operační stůl. Izolovala se trachea a kanylovala vhodnou polyethylenovou (PE) trubicí. Provedl se středový řez v hypogastrické úrovni a jeden děložní výrůstek se obnažil, jeho cefalický konec se kanyloval trubičkou PE240 a po naplnění vnitřní dutiny 0.2 ml sterilního fysiologického roztoku soli se napojil na systém zvětšení/zaznamenání “Gemini” pomocí měniče tlaku P23ID Gould Statham pro měření uvedeného tlaku. Pro způsob podávání i.v. testovaných sloučenin se izolovala jedna jugulára (krční žíla) a kanylovala trubičkou PE60 napojenou na křídlovou jehlu pro podávání dispenzní injekční stříkačkou. V případě intraduodenálního podávání testovaných sloučenin se izoloval duodenum (dvanáctník) a podobně se kanyloval malým řezem v jeho stěně. Izolovala se také jedna krkavice a kanylovala katetrem PE60 a napojila na vhodou injekční stříkačku pro krevní vzorky (viz níže). Po stabilizaci se opakovaně v intervalech 30 minut intravenozně injektovala stejná dávka oxytocinu. Když se získaly srovnatelné kontraktilní reakce dělohy na zvolenou dávku oxytocinu, podávala se testovaná sloučenina při koncentracích 0.3; 1; 3; 10 mg/kg (5 ml/kg infuze; i.v) a 30 mg/kg (7,5 ml/kg infuse; i.v), a také koncentracích 3 a 10 mg/kg (5 ml/kg; per os), 30 mg/kg (7,5 ml/kg; per os) a také 60 mg/kg (10 ml/kg; per os.). Další injekce stejné dávky oxytocinu se potom provedly ve vhodnou dobu po léčbě, aby se stanovily inhibiční účinky zkoumaných sloučenin. Kontraktilní reakce dělohy na oxytocin se kvantifikovaly měřením nitroděložního tlaku a počtu kontrací.

- 138 • ·· ······ ··· • · · · ·· · ··· • · · * · · ···« • · ··» · ··· ····· • •«•X ·· · · · · «

Celkem šest zvířet tvoří jednu skupinu, která se léčí uvedenou testovanou sloučeninou při uvedených koncentracích (viz výše).

Účinek testovaných sloučenin se vyhodnotil srovnáním hodnot tlaku před a po léčbě. Navíc 2, 30, 90 a 210 minut po podání testované sloučeniny se odebralo 0.5 ml vzorku krve z kanylované karkavice každého pokusného zvířete. Plazma se získala standardním laboratorním způsobem a výsledné vzorky se skladovaly při teplotě -20°C.

Účinky pyrrolidinových derivátů podle vzorce (I) se stanovily za použití výše popsaného biologického testu in vivo. Reprezentativní hodnoty jednoho příkladu sloučeniny jsou uvedeny v tabulce 3 níže. Hodnoty znamenají kapacitu příkladu sloučeniny podle vzorce (I) pro účinnou antagonizaci děložních stahů vyvolaných oxytocinem u krysy.

- 139 ····· · · Λ · · · ·

Tabulka 3

Zastupuje:

- 140 • ·« ······ ··· ·»«· * · * « · · • · · · · « ···· • · · · · · · · · ····· « · · ♦ · ·· «· · · ·

Pt·' Wi-wí

Claims (25)

1. Patentové nároky

   1. Pyrrolidin oxadiazolové deriváty podle vzorce (I) a také jejich geometrické izomery, jejich opticky aktivní formy jako jsou enantiomery, diasteromery, a jejich racemátové formy a také jejich farmaceuticky přijatelné soli, kde

   A je zvolen ze skupiny, sestávající z -(C=O)-, -(C=O)-O-, -SO₂-, -SO₂NH-,-CH₂-;

   B oxadiazolový nebo thiadiazolový kruh;

   R¹ zvolen ze skupiny, obsahující nebo sestávající z Ci-C₆-alkyl, C₂-C₆-alkenyl, C₂-C₆-alkinyl, aryl, heteroaryl, Ci-C₆ alkyl aryl, Ci-Ce alkyl heteroaryl, R¹ může tvořit s atomem O, na který je vázán, 3- až 8- členný, nasycený nebo nenasycený heterocyklický kruh, který může obsahovat 1-2 další heteroatomy, zvolené z atomů N, S a O, a který je případně spojen s arylovým, heteroarylovým nebo 3- až 8-členným nasyceným nebo nenasyceným cykloalkylovým kruhem;

   R² zvolen ze skupiny, obsahující nebo sestávající z Ci-C₆-alkyl, C₂-C₆-alkenyl, C₂-C₆-alkinyl, aryl, heteroaryl, heteroarylalkyl, 3až 8-členné cycloalkyl, acyl, Ci-C_s-alkyl aryl, Cb-Cs-alkyl heteroaryl, přičemž uvedené skupiny cykloalkyl nebo aryl nebo

   - 141 heteroaryl mohou být spojeny s 1-2 dalšími skupinami cykloalkyl nebo aryl nebo heteroaryl;

   R³, R⁴, R⁵ a R^s jsou nezávisle na sobě zvoleny ze skupiny, sestávající z H, halogen, Ci-C₆-alkyl nebo Ci-C₅-alkoxy.
2. 2. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle nároku 1, kde R¹ je zvolen ze skupiny, sestávající z H nebo skupiny -C,-C_s -alkyl, zvláště -CH₃.
3. 3. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle nároku 1 nebo 2, kde A is -(C=O)-.
4. 4. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle některého z předcházejících nároků, R² je skupina aryl nebo heteroaryl.
5. 5. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle nároku 4, kde R² skupina fenyl.
6. 6. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle nároku 5, kde uvedená skupina fenyl je substituovaná skupinou fenyl.
7. 7. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle některého z předcházejících nároků, kde B je oxadiazol vzorce (Ha) nebo (lib)

   N>-°> (lib) ‘ Ar kde R⁷ je zvolen ze skupiny, obsahující nebo sestávající z H, sulfonyl, amino, Ci-C₆-alkyl, C₂-C₆-alkenyl, C₂-C_s-alkinyl, kde uvedené řetězce alkyl, alkenyl, alkinyl mohou být přerušeny heteroatomem, zvoleným z N, O nebo S, aryl, heteroaryl, nasycené nebo nenasycené 3- až 8členné skupiny cykloalkyl, heterocykloalkyl, kde uvedené skupiny cykloalkyl, heterocykloalkyl, aryl nebo heteroaryl mohou být spojeny s

   - 142 -

   1-2 skupinami cykloalkyl, heterocykloalkyl, aryl nebo heteroaryl, acylového zbytku, Ci-C₆-alkyI aryl, Ci-C₆-alkyl heteroaryl, Ci-C₆-alkenyl aryl, CJ-Ce-alkenyl heteroaryl, O-Ce-alkinyl aryl, Ci-C₆-alkinyl heteroaryl, C,-C₆-alkyl cykloalkyl, Ci-C_e-alkyl heterocykloalkyl, Ci-C₆-alkenyl cykloalkyl, Ci-C₆-alkenyl heterocykloalkyl, Ci-C₆-alkinyl cykloalkyl, CiC₆-alkinyl heterocykloalkyl, alkoxykarbonyl, aminokarbonyl, Ci-C₆-alkyl karboxy, Ci-C₆-alkyl acyl, aryl acyl, heteroaryl acyl, C₃-C₈-(hetero)cykloalkyl acyl, Ci-C₆-alkyl acyloxy, Ci-C₆-alkyl alkoxy, Ci-C₅-alkyl alkoxykarbonyl, Ci-C₆-alkyl aminokarbonyl, Ci-C₆-alkyl acylamino, acylamino, Ci-Cs-alkyl ureido, Ci-C₆-alkyl karbamat, Ci-Ce-alkyl amino, Ci-C_s-alkyl amonium, Ci-C₆-alkyl sulfonyloxy, Ci-C₆-alkyl sulfonyl, (ΧCe-alkyl sulfinyl, Ci-C₆-alkyl sulfanyl, Ci-C_e-alkyl sulfonylamino, Ci-C_salkyl aminosulfonyl, hydroxy nebo halogen.
8. 8. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle nároku 7, kde R⁷ je zvolen ze skupiny, sestávající ze zbytku sulfonyl nebo amino nebo skupiny Ci-C_salkyl, C₂-C₆-alkenyl, C₂-C₆-alkinyl, aryl, heteroaryl, 3- až 8-členné skupiny cykloalkyl, která případně obsahuje alespoň jeden heteroatom, zvolený z N, O, S, Ci-C₆-alkyl aryl, Ci-C₆-alkyl heteroaryl, C,Ce-alkenyl aryl, Ci-C₆-alkenyl heteroaryl, alkoxykarbonyl, karboxylamid, C-i-Cs-alkyl karbonyl, arylkarbonyl nebo heteroarylkarbonyl, C₄Cs-cykloalkylkarbonyl, přičemž výše uvedené skupiny jsou substituované alespoň jedním zbytkem sulfonyl nebo amino.
9. 9. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle nároku 8, kde R⁷ zvolen ze skupiny, sestávající z Ci-C₆ -alkyl amino, heterocykloalkyl, Ci-C₆ -alkyl heterocykloalkyl, aminokarbonyl, Ch-Ce alkylamino karbonyl, Cú-Csalkyl acyl amino, Ci-C₆ -alkyl sulfonyl nebo Ci-C₆ -alkyl.
10. 10. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle nároku 9, kde R⁷ je zvolen ze skupiny sestávající z dimethyl aminomethyl, 2-(dimethylamino)ethyl,

    -methyl-3-piperidinyl nebo 4-(acetyl-1 -piperazinyljmethyl.

    - 143 • ·· · · «··· * * · ···· « · · · · « *·· ·· · ···· • · · · » 9 9 9 9 9 · 9 9
11. 11. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle některého z nároků 1 až 10, kde B je isoxadiazol vzorce (III) nebo (IV) kde X je O nebo S;

    R₈ je vodík, Ci-C₆-alkyl, C₂-C₆-alkenyl, C₂-C₆-alkinyl, aryl, heteroaryl, nasycený nebo nenasycený 3- až 8-členný cycloalkyl, který případně obsahuje 1 až 3 heteroatomy, zvolené z N, O, S, acylový zbytek, Ci-C₆-alkyl aryl, Ci-C₆-alkyl heteroaryl, C-i-Cealkenyl aryl, Ci-C₆-alkenyl heteroaryl, alkoxykarbonyl, karboxylamid, Ci-C₆-alkoxy, aryloxy, heteroaryloxy, halogen, kyano, CiCe-alkyl karbonyl, arylkarbonyl nebo heteroarylkarbonyl, nasycený nebo nenasycený C₄-C₈-cykloalkylkarbonyl, kde uvedené skupiny cykloalkyl nebo aryl nebo heteroaryl mohou být spojeny s 1-2 dalšími skupinami cykloalkyl nebo ary! nebo heteroaryl a kde uvedený řetězec alkyl, alkenyl, alkinyl může být přerušen heteroatomem, zvoleným z N, O nebo S.
12. 12. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle některého z předcházejícíh nároků, kde každý z R³, R⁴, R⁵ a R⁶ je H.
13. 13. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle některého z předcházejícch nároků, kde A je -(C=O)-, R¹ je skupina methyl, R² je skupina bifenyl, každý z R³, R⁴, R⁵ a R⁶ je H a B oxadiazolový kruh vzorců (lla), (lib), (lil) nebo (IV).

    - 144
14. 14. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle nároku 13, kde B oxadiazolový kruh vzorců (Ha) nebo (lib).
15. 15. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle některého z předcházejícíh nároků, zvolený z následující skupiny :

    (3EZ,5S)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3 pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -[(2'-methyl[1,1 '-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(1,3,4-oxadiazol-2-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3 pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-thioxo-4,5-dihydro-1,3,4oxadiazol-2-yi)-3-pyrroiidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-(3-benzyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-1-([1,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(3-{[(2-furylmethyl)sulfanyl]methyl}-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[2-oxo-2-(1-pyrrolidinyl)ethylj1,2,4-oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(2-pyridinylsulfanyl)methylj1,2,4-oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(4-fluorofenyl)-1,2,4-oxadiazol

    5-yl]-3-pyrrolídinon O-methyloxim

    - 145 (3EZ,5S)-1-([1 ,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(2-thienylsulfanyl)methyl]1 ,2,4-oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[2-(3,5-dimethyl-1 H-pyrazol-1yl)ethyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(methylsulfonyl)methyl]-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(5-methyl-3-isoxazolyl)-1,2,4oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-thienylmethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1 ,T-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(3-fenyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(3-{[(2-furylmethyl)sulfonyl]methyl}-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-[3-(aminomethyl)-1,2,4-oxad iazol-5-yl]-1 -([1, 1 ’-bifenyl]-4ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(ť?S)-hydroxy(phenyl)methyl]1,2,4-oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(1ES)-1-hydroxypropyl]-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(hydroxymethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(1S,2R)-2-hydroxycyklohexyl]1,2,4-oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim

    - 146 - (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(3RS)-piperidinyl]-1,2,4-oxadiazoi-5-yl}-3-pyrrolidínon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{3-[(2RS)-piperidinyl]-1,2,4oxadiazol-5-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-[(2'-chloro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-1-{[2'-(trifluoromethyl)[1,1 bifenyl]-4-yl]karbonyl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5S)-1-[(2'-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4-oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -[(4'-fluoro[1 ,T-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3E,5S)-1-[(2'-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3E,5S)-1-[(2'-methyl[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidínon O-methyloxim (3Z,5S)-1-[(2'-methyl[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

    - 147 • · · · ···· ·· · • · «· * * » · • · · · · ···· • · « · · ··· ···· (3EZ, 5S)-1 -([ 1,1 ’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(phenoxymethyl)-1,2,4oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-fenyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim /V-({3-[(2S,4£Z)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(rnethoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)acetamid (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[4-(hydroxymethyl)fenyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylarbonyl)-5-{5-[(2S)-2-hydroxy-2-fenylethyl]1.2.4- oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim {3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1.2.4- oxadiazol-5-yl}methylformamid (3EZ,5S)-1-([1,1’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(methoxymethyl)-1,2,4oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(2-fenoxyethyl)-1,2,4oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(2-methoxyethyl)-1,2,4oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-[5-(1-acetyl-4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]-1-([1 , T-bifenyl]4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(2-pyridinyl)-1,2,4-oxadiazol-3yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim

    - 148 - (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbony!)-5-[5-(3-thienyl)-1,2,4-oxadiazol-3yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbony!)-5-(5-ethyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-cyklopentyl-1,2,4-oxadiazol-3yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-methyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1 '-bienyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(RS)-hydroxy(phenyl)methyl]1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(1RS)-1-hydroxy-2phenylethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(1R)-1-(dimethylamino)-2phenylethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(3-pyridinyl)-1,2,4-oxadiazol-3yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(4-pyridinyl)-1,2,4-oxadiazol-3yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5S)-5-{5-[(4-acetyl-1 -piperazinyl)methyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1 -([1,1 'bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-[3-(1-acetyl-4-piperidinyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-1-([1,1 '-bifenyl]4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-{5-[(4-acetyl-1-piperazinyl)methyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

    - 149 • · · · * ♦ · · · · · /V-({3-[(2S,4EZ)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)-3-(1-piperidinyl)propanamid (3EZ,5S)-1-([1,1'-biphenyl]-4-ylcarbonyl)-5-{5-[(3S)-1-methylpiperidinyl]1.2.4- oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinone O-methyloxime (3£Z,5S)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(3f?)-1-methylpiperidinyl]1.2.4- oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3£Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(6-hydroxy-3-pyridinyl)-1,2,4oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5S)-1-([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(dimethylamino)methyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3£Z,5S)-5-{5-[(1 S,2R)-1-amino-2-hydroxypropyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1 ([1,1 ’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(3S)-piperidinyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(3E)-piperidinyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5ES)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(1 -methyl-3-piperidiny!)1.2.4- oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim řerc-butyl (3ft)-3-{3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)-pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-1-piperidinkarboxylat

    4-({3-[(2S,4£Z)-1-([1 , r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)-2,6-piperazinedion (3Z,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim

    - 150 • · · · ·«·· «« * · » · · · (3Z,5S)-1-[(2'-chloro-4'-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(1-methyl-4-piperidinyl)-1,2,4oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(dimethylamino)methyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -([1,1 ’-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-( 1 -methyl-4-piperid inyl)-1,2,4oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-{5-[(1S)-1-amino-2-hydroxyethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-([1,1’biphenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

    5-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-/V[3-(dimethylamino)propyl]-1,2,4-oxadiazol-3-karboxamid (3E,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(dimethylamino)methyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim terc-butyl (3S)-3-{3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)-pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-1 -piperidinkarboxylat (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(4-methyl-1-piperazinyl)methyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3Z,5S)-1-([1 ,r-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[(4-methyl-1-piperazinyl)methyl]1,2,4-oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim ethyl 5-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)-pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-3-karboxylat (3E,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim

    - 151 - (3Z,5/?S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[3-(2-hydroxyethyl)-1,2,4oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim /V-({3-[(2S,4EZ)-1-([1 ,r-bitenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)-3-(dimethylamino)propanamid terc-butyl 4-(2-{3-[(2S,4EZ)-1-([1 .r-bifenylj^-ylkarbonyl^-ímethoxyiminojpyrrolidinyll-l ,2,4-oxadiazol-5-yl}ethyl)-1 -piperazinkarboxylat (3EZ,5S)-1-[(2'-chloro-4'-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-[3-(2hydroxyethyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1 -[(4'-fluoro-2'-methyl[1,1 '-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl1.2.4- oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-{5-[2-(dimethylamino)ethyl]-1,2,4oxadiazol-3-yl}-3-pyrrolidinon O-methyloxim

    2-{5-[(2S,4£Z)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1.2.4- oxadiazol-3-yl}ethyl [(terc-butoxykarbonyl)amino]acetat

    A/-({3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)-2-(dimethylamino)acetamid (3EZ,5S)-1-[(2'-chloro-4'-fluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl1.2.4- oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-5-{5-[(1 S)-1-amino-2-terc-butoxyethyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim terc-butyl 4-{5-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-biphenyl]-4-yikarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-3-yl}-1-piperidinkarboxylat (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-[5-(1-piperazinylmethyl)-1,2,4oxadiazol-3-yl]-3-pyrrolidinon O-methyloxim

    - 152 - terc-butyl (4S)-4-{3-[(2S,4£Z)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxy imino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}-4-[(terc-butoxykarbonyl)amino]butanoat

    4-{[(2S,4£Z)-2-(5-{[(terc-butoxykarbonyl)amino]methyl}-1,2,4-oxadiazol-3yl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1,1 '-bifenyl terc-butyl 2-{3-[(2S,4EZ)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino) pyrrolid inyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}ethylkarbamat

    2-{5-[(2S,4EZ)-1 -([1,1 '-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]1.2.4- oxadiazol-3-yl}ethyl aminoacetat (3E,5S)-1-[(2',4'-difluoro[1 ,T-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim (3EZ,5S)-1-[(2',4'-difluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim

    4-{[(2S,4EZ)-2-(5-{(1S)-2-terc-butoxy-1-[(terc-butoxykarbonyl)amino]ethyl}1.2.4- oxadiazol-3-yl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1,1 '-bifenyl (3EZ,5S)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-5-(5-vinyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-3pyrrolidinon O-methyloxim

    4-{[(2S,4£Z)-2-(5-{(1 S,2R)-2-terc-butoxy-1-[(terc-butoxykarbonyl)amino]propyl}-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]karbonyl}-1 ,Tbifenyl (3Z,5S)-1-[(2',4'-difluoro[1,1'-bifenyl]-4-yl)karbonyl]-5-(3-methyl-1,2,4oxadiazol-5-yl)-3-pyrrolidinon O-methyloxim terc-butyl 4-({3-[(2S,4EZ)-1-([1,1'-bifenyl]-4-ylkarbonyl)-4-(methoxyimino)pyrrolidinyl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl}methyl)-1-piperazinkarboxylat

    - 153 -
16. 16. Pyrrolidin oxadiazolový derivát podle některého z nároků 1 až 15 pro použití jako léčivo.
17. 17. Použití pyrrolidin oxadiazolového derivátu podle některého z nároků 1 až 15 pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčbu a/nebo prevenci předčasných porodních stahů, předčasného porodu a bolestivé menstruace.
18. 18. Použití pyrrolidin oxadiazolového derivátu podle některého z nároků 1 až 15 pro výrobu farmaceutického prostředku pro modulaci receptoru oxytocinu.
19. 19. Použití podle nároku 18, přičemž uvedená modulace spočívá v blokování receptoru oxytocinu nebo v antagonizaci vazby oxytocinu na jeho receptor.
20. 20. Použití podle nároku 19 pro léčbu nebo prevenci poruch, způsobených receptorem oxytocinu.
21. 21. Použití pyrrolidin oxadiazolového derivátu podle některého z nároků 1 až 15 pro výrobu farmaceutického prostředku pro orální podávání.
22. 22. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden pyrrolidin oxadiazolový derivát podle některého z nároků 1 až 15 a farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo pomocnou látku.
23. 23. Způsob výroby pyrrolidin oxadiazolové sloučeniny vzorce (I), kde B je

    1,2,4-oxadiazolová skupina vzorce (lib), vyznačující se tím, že a obsahuje následující krok:

    XV

    VIII [B = lib]

    - 154
24. 24. Způsob výroby pyrrolidin oxadiazolové sloučeniny vzorce (I), kde B

    1,2,4-oxadiazolová skupina vzorce (lla), vyznačující se tím, že obsahuje následující krok:

    v

    VI

    I [B = lla]
25. 25. Způsob výroby pyrrolidin oxadiazolové sloučeniny vzorce (I), kde B je

    1,3,4-oxadiazolová skupina vzorce (III) nebo (IV), vyznačujícíse t í m, že obsahuje oba následující kroky:

    CDi (X=O) nebo CS₂(X=S)

    I [B = Hla (X=O)] I [B = Hlb (X=S)]

    Zastupuje;