CZ20032637A3

CZ20032637A3 - Inhibitory kináz

Info

Publication number: CZ20032637A3
Application number: CZ20032637A
Authority: CZ
Inventors: Peter Martin Fischer; Schudong Wang; Gavin Wood
Original assignee: Cyclacel Limited
Priority date: 2001-03-29
Filing date: 2002-03-26
Publication date: 2004-02-18
Also published as: GB2375534B; MXPA03008833A; CN1503794A; JP4294960B2; DE60220771D1; US20070185134A1; WO2002079193A8; EP1373253B1; GB0207229D0; IL158116A0; DE60220771T2; CN100519553C; ES2287263T3; NZ528347A; AU2002249389B2; WO2002079193A1; BR0208447A; US20040132746A1; US7262202B2; ATE365163T1

Description

Inhibitory kináz

Oblast techniky

Vynález se týká inhibitorů kináz, závislých na cyklinu jako protinádorových látek. Vynález se rovněž týká farmaceutických prostředků s obsahem těchto látek a jejich použití pro výrobu těchto prostředků k léčení zhoubných nádorů, leukemie, lupenky a podobně.

Dosavadní stav techniky

Některé 4,5,6 - substituované N-(substituovaný fenyl)-2-pyrimidinaminy a antiasthmatickými vlastnostmi jsou popsány v EP 233461. Dále jsou některé 4-heteroayl-N-(3 - substituovaný fenyl)-2-pyridinaminy, které mají antiproliferativní vlastnosti a vyvolávají inhibicí proteinkináz C, inhibici tyrosinproteinkinázy, spojené s receptorem pro epidermální růstový faktor (EGF-R-TPK) a CDKl/cyklin B popsány v dokumentu WO 95/09847, přičemž heteroarylovou skupinou, uvedenou v příkladové části je pyridyl a indolyl.

Publikace Paul, R. a další, J. Med. Chem., 1993, svazek 36, s. 2716-2725 popisuje další skupinu fenylaminopyrimidinů s protizánětlivým účinkem. Tyto sloučeniny obsahují nesubstituované pyrrolové skupiny, monosubstituované 2-thienylové skupiny a dimethyl-3-furylové skupiny v poloze 4 pyrimidinového kruhu.

Vynález si klade za úkol navrhnout antiproliferativní látky ze skupiny N-fenyl-2-pyrimidinových sloučenin. Bylo prokázáno, že sloučeniny podle vynálezu jsou inhibitory

2.

proteinkinázy C. Účinnost těchto látek je možno prokázat inhibicí proliferace buněk v buněčných liniích a/nebo inhibicí kináz, závislých na cyklinu.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří inhibitory kináz obecného vzorce I

kde jeden ze symbolů X¹ a X² znamená NR¹⁰ a druhý z těchto symbolů znamená CR⁹,

Z znamená NH, NHCO, NHSO₂, NHCH₂, CH₂, CH₂CH₂ nebo CH=CH,

R¹, R², R³, R⁹ a R¹⁰ nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl, aryl, aralkyl, heterocyklickou skupinu, atom halogenu, N0₂, CN, OH, alkoxyskupinu, aryloxyskupinu, (R''')_nNH₂, (R''')_nNH-R', (R ' )_nN-(R') (R ) , NH-aryl, N-(aryl)₂, COOH,

COO-R' , COO-aryl, CONH₂, CONH-R', CON-(R') (R'') , CONH-aryl, CON-(aryl)₂, SO₃H, SO₂NH₂, CF₃, CO-R' nebo CO-aryl, přičemž alkylové, arylové, aralkylové a heterocyklické skupiny jsou popřípadě dále substituovány jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny atom halogenu, N0₂, CN, OH,

O-methyl, NH₂, COOH, CONH₂ a CF₃, • 4

R⁴, R⁵, R^s, R⁷ a R⁸ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, substituovaný nebo nesubstituovaný nišší alkyl, atom halogenu, N0₂, CN, OH, substituovaná nebo nesubstituovaná alkoxyskupina, NH₂, NH-R', N-(R')(R''), COOH, COO-R' , CONH₂, CONH-R' , CON-(R')(R''), SO₃H, SO₂NH₂nebo CF₃, kde R', R'' a R''' se nezávisle volí z alkylových skupin, které mohou být stejné nebo různé a n znamená 0 nebo 1, za předpokladu, že v případě, že R¹ a R² znamenají atomy vodíku, X¹ znamená NH, X² znamená CH a R³ znamená atom vodíku, není fenylová skupina nesubstituovaná a dále má odlišný význam od 4-ethylové, 3-methylové, 3-(1,1,2,2-tetrafluorethoxyskupiny), a 3,4,5-trimethoxyskupiny v případě, že ostatní skupiny R⁴ až R⁸ znamenají atomy vodíku, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.

V průběhu přihlášky znamená alkyl skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem o 1 až 8 atomech uhlíku, například methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, terč.butyl, pentyl, hexyl a podobně, nižší alkyl znamená odpovídající skupinu, obsahující 1 až 4 atomy uhlíku.

Aryl znamená skupiny, obsahující 6 až 10 atomů uhlíku, například fenyl, naftyl a podobně.

Aralkyl znamená skupinu, vzniklou spojením alkylové a arylové části.

Výhodné sloučeniny obecného vzorce I jsou ty látky, které obsahují mono-, di- nebo trisubstituovaný pyrrolový zbytek, vázaný na pyrimidinový kruh jedním z uhlíkových atomů svého kruhu. S výhodou jde o pyrrol-3-ylovou skupinu, která je di- nebo trisubstituovaná, to znamená, že X¹znamená CR⁹ a X² znamená NR¹⁰, s výhodou NH.

Pyrrolová skupina může být substituována skupinami R¹, R², R⁹ a R¹⁰. R¹, R² a tam, kde to padá v úvahu také R⁹ a R¹⁰nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl, aryl, aralkyl, heterocyklickou skupinu, atom halogenu, N02, CN, OH, alkoxyskupinu, aryloxyskupinu, (R'^/,)nNH₂, (R' ' ')_nNH-R', (R ' )_nN-(R') (R ) , NH-aryl, N-(aryl)₂, COOH, COO-R', C00aryl, CONH₂, CONH-R', CON-(R') (R ) , CONH-aryl, CON(aryl)₂, SO₃H, SO₂NH₂, CF₃, CO-R' nebo CO-aryl, přičemž alkylové, arylové, aralkylové a heterocyklické skupiny jsou popřípadě dále substituovány jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny atom halogenu, N0₂, CN, OH,

O-methyl, NH₂, COOH, CONH₂ a CF₃. Nejvýhodnějším významem pro R¹⁰ je atom vodíku.

Ve výhodném provedení se R¹, R² a R⁹ nezávisle volí ze skupiny atom vodíku nebo halogenu, N0₂, CN, (R''')_nN(R')(R'' ) , CONH₂, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku a heterocyklická skupina. Ve zvláště výhodném provedení znamená 1 a zejména alespoň 2 nebo 3 ze substituentů R¹, R²a R⁹ skupinu, odlišnou od atomů vodíku.

R¹ s výhodou znamená atom vodíku, CN, atom halogenu, nitroskupinu, alkylaminoskupinu nebo heterocyklickou skupinu. V případě, že R¹ znamená atom halogenu, jde s výhodou o atom chloru nebo bromu. V případě, že R¹ znamená alkylaminoskupinu, jde s výhodou o diethylaminomethyl nebo

dimethylaminomethyl. V případě, že R¹ znamená heterocyklickou skupinu, jde s výhodou o morfolin-4-ylmethyl nebo 4-methylpiperazin-1-ylmethyl. Ne j výhodně j ším významem pro R¹ je atom vodíku nebo CN.

V případě, že R¹ má svrchu popsaný výhodný význam, znamenají R² a R⁹ s výhodou nižší alkyl a zvláště methyl.

Výhodným významem pro skupinu Z je NH, NHSO₂ nebo NHCH₂ a zvláště NH.

Fenylové substituenty R⁴ až R⁸ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku nebo halogenu, nitroskupina, aminoskupina, aminoalkyl, hydroxyskupina, alkoxyskupina, karbamoyl, sulfamyl, CN, N(R')(R'^z), Cl-C4alkyl a substituovaný Cl-C4alkyl.

Nej výhodně j ším významem pro R⁴, R⁵, R^s, R⁷ a R⁸ j e nezávisle pro jednotlivé symboly atom vodíku, nesubstituovaný nižší alkyl, atom halogenu, N0₂, CN, OH,

N-(R') (R'') nebo CF₃, kde R', R'' a R'' ' nezávisle znamenají stejné nebo odlišné alkylové skupiny a n znamená 0 nebo 1.

V dalším výhodném provedení se R⁴ až R⁸ nezávisle volí ze skupiny atom vodíku nebo fluoru, NH₂, N0₂, OH, Cl, Br,

I, CN, CH₂OH, CF₃ a dimethylaminoskupina. Zvláště výhodným významem pro R⁴ až R⁸ je atom vodíku.

Zvláště výhodná provedení zahrnují 2-[N-(fenyl)]-4(2,4-dimethylpyrrol-3-yl)pyrimidinaminy, v nichž fenylová skupina je substituována v poloze 2, 3, 4 nebo 5 alespoň

jedním substituentem ze skupiny H, F, NH₂, N0₂, OH, Cl, Br, I, CN, CH₂OH, CF₃ nebo OMe.

V rámci tohoto specifického provedení je fenylová skupina s výhodou monosubstituována F, NH₂, N0₂, OH, Cl,

Br, I, CN, CH₂OH, CF₃ nebo OMe v poloze 2, 3, 4 nebo 5 nebo je disubstituována, takže vznikají 2,4-difluoro-,

3,5-difluoro-, 3,4-difluoro-, 2,4-dichloro-, 3,5-dichloro-, 3,4-dichloro- nebo 4-chloro-3-trifluormethylfenylové deriváty.

V dalším výhodném provedení vynález zahrnuje

2-[N-(fenyl)]-4- (3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril)pyrimidinaminy, v nichž je fenylová skupina substituována v poloze 2, 3 nebo 4 alespoň jedním substituentem ze skupiny F, NH(CH₃)₂, N0₂, OH, Cl, Br, I nebo CF₃.

V tomto specifickém provedení je fenylová skupina s výhodou monosubstítuovaná některou ze skupin F, NH(CH₃)₂, N0₂, OH, I nebo CF₃ v kterékoliv z poloh 3 nebo 4, nebo je disubstituovaná, takže vznikají 4-methyl-3-nitro, 3-jod-4-methyl, 4-chloro-3-methyl, 3-hydroxy-4-methyl, 4-fluoro-3-methyl nebo 4-methyl-3-fluorované fenylově deriváty.

V dalším výhodném provedení se vynález týká

- 2 - [N-(fenyl)]-4-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidinaminů v nichž je fenylová skupina s výhodou monosubstituovaná substituenty F, NH(CH₃)₂, N0₂, OH, I nebo CF₃ v poloze 4, s výhodou jde o atom fluoru nebo skupinu NH(CH₃)₂,

- 2-[N-(fenyl)]-4- (2,4-dimethyl-5-halogen-lH-pyrrol-3-yl)-

-pyrimidinaminů v nichž je fenylová skupina s výhodou mono substituovaná substituenty F, NH(CH₃)₂, N0₂, OH, I nebo CF₃ v poloze 3 nebo 4, s výhodou jde o 4-fluoro- nebo

3-nitroskupinu, přičemž halogenovou skupinou je s výhodou atom chloru nebo bromu,

- 2-[N-(fenyl)]-4- (2,4-dimethyl-5-dialkylaminoalkyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidinaminů v nichž je fenylová skupina s výhodou monosubstituovaná substituenty F, NH(CH₃)₂, N0₂, OH, I nebo CF₃ v poloze 4, s výhodou jde o atom fluoru, přičemž dialkylaminoalkylovou skupinou je s výhodou diethylaminomethyl nebo dimethylaminomethyl,

- 2-[N-(fenyl)]-4-(2,4-dimethyl-5-(heterocyklická skupina)-ΙΗ-pyrrol-3-yl)-pyrimidinaminů v nichž je fenylová skupina s výhodou monosubstituovaná substituenty F, NH(CH₃)_2/ N0₂, OH, I nebo CF₃ v poloze 4, s výhodou jde o atom fluoru, přičemž heterocyklickou skupinou je s výhodou 5-morfolin-4-ylmethyl nebo 4-methylpiperazin-l-ylmethyl.

Ve velmi výhodném provedení se sloučeniny podle vynálezu volí z následující skupiny:

[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-jodfenyl)-amin, (3,4-difluorfenyl)- [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-

-pyrimidin-2-yl]-amin, (4-chlorfenyl)-[4 -(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-amin, (3,5-difluorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin,

4-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-ylamino]-fenol,

3- [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-ylamino]-fenol, (2,4-difluorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)pyrimidin-2-yl]-amin, (2,4-dichlorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)pyrimidin-2-yl]-amin, (4-chlor-3-trifluormethylfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-trifluormethylfenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (3-trifluormethylfenyl)-amin, (3-chlorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin2-yl]-amin,

N- [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-Ν',N'·· ····

-dimethylbenzen-1,4-diamin, (3-chlor-4-jodfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, [4- (2,4- dimethyl-lH-pyrrol-3 -yl) -pyrimidin-2-yl] - (3-fluor-4-jodfenyl)-amin,

3,5-dimethyl-4- [2-(3-nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

3.5- dimethyl-4- [2- (4-trif luormethylf enylamino) -pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2-(4-jodfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

3.5- dimethyl-4-[2-(4-methyl-3-nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3 -jod-4-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-chlor-3-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl]-3,5··<·

-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3-hydroxy-4-methyl feny lamino) -pyrimidin-4-yl ] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-fluor-3-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-fluor-4-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-dimethylaminofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril, amid kyseliny 4-[2-(4-fluorfenylamino) -pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karboxylové, [4- (3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-fluorfenyl)-amin, (4-fluorfenyl)- [4-(1,2,4-trimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, [4-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin,

N-[4-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-Ν',N'-dimethylbenzen-1,4-diamin, [4-(5-amino-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]• « A · A A

A· A A

-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]- (3-nitrofenyl)-amin, [4-(5-chlor-2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-diethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-dimethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-5-morfolin-4-ylmethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, {4-[2,4-dimethyl-5-(4-methylpiperazin-l-ylmethyl)-1H-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl}-(4-fluorfenyl)-amin.

Struktura svrchu uvedených sloučenin je znázorněna na obr. 1.

Zvláště výhodné sloučeniny jsou inhibitory CDK, jejichž IC₅₀ pro cdk2/cyclin E je nižší než 5 μΜ ± 0,05. Jde například o následující látky:

[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin,

··· [4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-jodfenyl)-amin, (3,4-difluorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, (4-chlorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, (3,5-difluorfenyl)-[4 -(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin,

4-[4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-ylamino]-fenol,

3- [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-ylamino]-fenol, [4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-trifluormethylfenyl)-amin, (3-chlor-4-jodfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, [4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (3-fluor-4-jodfenyl)-amin,

3,5-dimethyl-4-[2-(3-nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-hydroxyfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

3,5-dimethyl-4 - [2- (4 - trif luormethylf enylamino) -pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-jodfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3-hydroxyfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

3,5-dimethyl-4 - [2- (4-methyl-3-nitrof enylamino) -pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3 - j od-4-methylf enylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-chlor-3-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3-hydroxy-4-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-f luor-3 -methylf enylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3-fluor-4-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-dimethylaminofenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

·· ····

amid kyseliny 4 -[2 -(4-fluorfenylamino)-pyrimidín-4-yl]-3,5-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-2-karboxylové, (4-fluorfenyl)- [4- (1,2,4-trimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, [4- (2,4 - dimethyl -5-nitro-lH-pyrrol-3 -yl) -pyrimidin-2 -yl] -(4-fluorfenyl)-amin,

N-[4-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-Ν',N'-dimethylbenzen-1,4-diamin, [4-(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4- (5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] -(3-nitrofenyl)-amin, [4-(5-chlor-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4- (5-diethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]- (4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-dimethylaminomethyl-2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-fluorfenyl)-amin, [4- (2,4-dimethyl-5-morfolin-4-ylmethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]- (4-fluorfenyl)-amin a (4-[2,4-dimethyl-5-(4-methylpiperazin-1-ylmethyl)-1H-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl} - (4-fluorfenyl) -amin.

•9 9999 •9 9

9 9

9 9 9

99

Z těchto látek jsou velmi výhodné ty inhibitory CDK, jejich IC₅₀ pro cdk2/cyclin E je nižší než 1 μΜ ± 0,05. Jde například o následující látky:

[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl] -(4-fluorfenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl] -(4-jodfenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-trifluormethylfenyl)-amin,

3,5-dimethyl-4- [2-(3-nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-hydroxyfenylamíno)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

3,5-dimethyl-4- [2-(4-trifluormethylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-jodfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

3,5-dimethyl-4 -[2 -(4-methyl-3 -nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-jod-4-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-chlor-3-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-IH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-hydroxy-4-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-dimethylaminofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril, amid kyseliny 4 -[2 -(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethy1-1H-pyrrol-2 -karboxylové, [4-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin,

N-[4-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-Ν',N'-dimethylbenzen-1,4-diamin, [4 -(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin,

99 · ·

9· ···· ·· 9 ♦ « • 9 9 9 • 9 « 9 9 • 9 9 9 9

999 99 99 [4-(5-brom-2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin, [4-(5-chlor-2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] - (4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-diethylaminomethyl-2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-dimethylaminomethyl-2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin a [4-(2,4-dimethyl-5-morfolin-4-ylmethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin.

Ještě výhodnější z uvedených látek jsou ty sloučeniny, jejichž IC₅₀ pro cdk2/cyclin E je nižší než 0,5 μΜ + 0,05. Jde například o tyto látky:

[4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (3-nitrofenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-jodfenyl)-amin,

3,5-dimethyl-4 -[2-(3-nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-1H

·· ·*·· • · · • · · • · · · • · · ·

-pyrrol-2-karbonitril,

3.5- dimethyl-4-[2-(4-trifluormethylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-jodfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-hydroxy-4-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dímethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2-(4-fluor-3-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril, amid kyseliny 4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dímethyl-lH-pyrrol-2-karboxylové, [4- (2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin a [4-(5-diethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin.

·· ····

Dále budou uvedeny látky, které jsou zvláště účinné jako antiproliferativní látky, jak bylo prokázáno při zkouškách na buněčném materiálu:

[4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] - (3-nitrofenyl)-amin, [4- (2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] - (4-trifluormethylfenyl)-amin, (3-chlor-4-jodfenyl) - [4- (2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-amin,

3,5-dimethyl-4- [2- (3-nitrofenylamino) -pyrimidin-4-yl] -1H-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-f luorf enylamino) -pyrimidin-4-yl ] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-hydroxyfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl- 1H-pyrrol-2-karbonitril,

3,5-dimethyl-4- [2- (4-trif luormethylf enylamino) -pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-jodfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl- 1H-pyrrol-2-karbonitril,

3,5-dimethyl-4- [2- (4-methyl-3-nitrofenylamino) -pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril, • · · · ·

4- [2- (3 -jod-4-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-fluor-3-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

-[2 -(4-dimethylaminofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril, amid kyseliny 4-[2-(4-fluorfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karboxylové, (4-fluorfenyl) - [4- (1,2,4-trimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-amin, [4- (2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2 -yl] -(4-fluorfenyl)-amin,

N- [4- (2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] -Ν' ,Ν'-dimethylbenzen-1,4-diamin, [4- (5-brom-2,4-dimethyl - lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] -(3-nitrofenyl)-amin, • · · · [4- (5-diethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-dimethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin a {4-[2,4-dimethyl-5-(4-methylpiperazin-l-ylmethyl)-1H-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl}-(4-fluorfenyl)-amin.

Bylo prokázáno, že sloučeniny obecného vzorce I jsou antiprolifaretivní látky a je proto možno je použít při léčení stavů, při nichž dochází k poruchám proliferace buněk, jako jsou zhoubné nádory, leukemie a další poruchy, spojené s neřízenou buněčnou proliferaci, jako jsou lupenka a restenózy. Jak již bylo uvedeno, je možno antiproliferativní účinek sloučenin podle vynálezu prokázat schopností těchto látek vyvolat inhibici proliferace buněk při zkouškách in vitro na různých typech buněk, například na buněčných liniích A549, HT29, Saos-2, HeLa nebo MCF-7 nebo může jít o průkaz inhibice enzymu CDK, například CDK2 nebo CDK4 v příslušných testech. Tyto zkoušky včetně provedení jsou podrobněji popsány dále v příkladu 3. Při použití buněčných linií a zkoušek na uvedené enzymy je možno stanovit, zda určitá látka má antiproliferativní vlastnosti.

Aniž by bylo zapotřebí se vázat na teoretické vysvětlení, mají sloučeniny podle vynálezu antiproliferativní účinek, který je závislý na kináze C neproteinové povahy. Řada sloučenin vyvolává inhibici kinázy, závislé na cyklinu (CDK), který se neúčastní řízení buněčného cyklu. Tyto enzymy typu CDK zahrnují CDK2 a CDK4 • · a zvláště jejich interakce s cyklinem E a cyklinem Dl. Sloučeniny podle vynálezu jsou dále selektivní pro tyto enzymy, které se účastní vzniku proliferativních onemocnění. Pod pojmem „selektivní se rozumí, že přestože tyto látky patrně mají určitý inhibiční účinek na jiné enzymy, například PKC, jsou přednostně účinné proti enzymu, který se účastní vzniku proliferativni poruchy.

Sloučeniny podle vynálezu mohou vyvolat inhibici kteréhokoliv stupně nebo stupňů buněčného cyklu, například tvorby obalu jádra, výstupu z klidové fáze buněčného cyklu GO, progrese Gl, dekondenzace chromosomů, rozrušení obalu jádra, počátku replikace DNA, progrese replikace DNA, ukončení replikace DNA, zdvojeni centrosomu, progrese G2, aktivace mitotických nebo meiotických funkci, kondenzace chromosomů, oddělení centrosomu, mikrotubulární nukleace, tvorba vřetena a jeho funkce, interakce s mikrotubulárními proteiny, oddělení chromátidů a jejich segregace, inaktivace mitotických funkcí, tvorba kontraktilního prstence a cytokinese. Zvláště mohou sloučeniny podle vynálezu ovlivnit některé funkce genů, například vazbu chromatinu, tvorbu replikačních komplexů, mechanismus replikace, fosforylaci nebo další sekundární modifíkační aktivity, proteolytickou degradaci, mikrotubulární vazbu, vazbu actinu, vazbu septinu, mikrotubulární aktivitu k organizaci středu nukleace a vazbu na složky signálů pro buněčný cyklus.

Sloučeniny podle vynálezu je tedy možno použít k výrobě farmaceutických prostředků pro léčení proliferativních poruch. Obvykle jde o zhoubný nádor nebo leukémii. Proliferativni poruchy je však možno chápat v širším smyslu tak, že zahrnují jakékoliv poruchy řízení

buněčného cyklu, například kardiovaskulární poruchy, jako jsou restenóza a kardiomyopatie, autoimunitní poruchy, jako glomerulonefritis a rheumatoidní arthritis, dermatologické poruchy, jako je lupenka, zánětlivé, houbové a parazitární poruchy, jako jsou malárie, rozedma a plešatost. Při těchto poruchách mohou sloučeniny podle vynálezu vyvolat apoptózu buněk nebo uchovat požadované typy buněk.

Ve zvláště výhodném provedení je možno sloučeniny podle vynálezu použít k léčení poruch, závislých na CDK nebo senzitivních poruch. Poruchy, závislé na CDK jsou spojeny s vyšší aktivitou jednoho nebo většího počtu enzymů CDK. Abnormální účinnost se obvykle týká enzymů CDK2 a/nebo CDK4 . Obvykle jde o poruchy, kdy pokles úrovně CDK není primární příčinou vzniku poruchy, avšak je důsledkem primární metabolické poruchy. Inhibitory však mohou takové poruchy zmírnit. Jde především o zhoubné nádory a o leukemie.

Součást podstaty vynálezu tvoří také použití inhibitorů obecného vzorce II

kde jeden ze symbolů X¹ a X² znamená NH a druhý z těchto symbolů znamená CR⁹, • · • * · · ·· ··

Z znamená NH, NHCO, NHSO₂, NHCH₂, CH₂, CH₂CH₂ nebo CH=CH,

R¹, R², R³, R⁹ a R¹⁰ nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl, aryl, aralkyl, heterocyklickou skupinu, atom halogenu, N0₂, CN, OH, alkoxyskupinu, aryloxyskupinu, NH₂, NH-R',

N-(R')(R'')_; NH-aryl, N-(aryl)₂, COOH, COO-R', COO-aryl, CONH₂, CONH-R', CON-(R') (R ) , CONH-aryl, CON-(aryl)₂, SO₃H, SO₂NH₂, CF₃, CO-R' nebo CO-aryl, přičemž alkylové, arylové, aralkylové a heterocyklické skupiny jsou popřípadě dále substituovány jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny atom halogenu, N0₂, CN, OH,

O-methyl, NH₂, COOH, CONH₂ a CF₃,

R⁴, R^s, R⁶, R⁷ a R^s se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, substituovaný nebo nesubstituovaný nišší alkyl, atom halogenu, N0₂, CN, OH, substituovaná nebo nesubstituovaná alkoxyskupina, NH₂, NH-R', N-(R')(R''), COOH, COO-R', CONH₂, CONH-R', CON- (R' ) (R ) , SO₃H, SO₂NH₂nebo CF₃, kde R' a R'' se nezávisle volí z alkylových skupin, které mohou být stejné nebo různé a za předpokladu, že v případě, že R¹ a R² znamenají atomy vodíku, X¹ znamená NH, X² znamená CH a R³ znamená atom vodíku, má fenylová skupina odlišný význam od 3-(1,1,2,2-tetrafluorethoxyskupiny), a

3,4,5-trimethoxyskupiny v případě, že ostatní skupiny R⁴ až R⁸ znamenají atomy vodíku, jakož i farmaceuticky přijatelných solí těchto látek pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení proliferativních onemocnění.

Pod pojmem „proliferativní porucha se rozumí stavy, které byly již svrchu podrobně vysvětleny.

Podle dalšího provedení se vynález týká použití sloučenin obecného vzorce II pro výrobu farmaceutických prostředků pro léčení virových infekcí. Z těchto virových infekcí je možno uvést infekce VZV, HSV typ 1 a 2 a HIV. S výhodou se tyto látky používají při léčení infekce HIV a příbuzných poruch.

Ve zvláště výhodném provedení se jedna nebo větší počet sloučenin podle vynálezu podává v kombinaci s jedním nebo větším počtem dalších protinádorových prostředků. V těchto případech je možno podávat sloučeniny podle vynálezu společně, současně nebo následně s dalšími prostředky.

Pod pojmem „výroba farmaceutického prostředku se rozumí použití sloučeniny obecného vzorce I přímo nebo zpracování této látky na farmaceutický prostředek.

Sloučeniny podle vynálezu je možno použít ve formě solí nebo esterů, zvláště ve formě farmaceuticky přijatelných solí nebo esterů.

Farmaceuticky přijatelné soli sloučenin podle vynálezu zahrnují vhodné adiční soli s kyselinami nebo soli s bázemi. Souhrnnou publikací, týkající se vhodných farmaceutických solí je publikace Berge a další, J. Pharm. Sci, 66, 1-19, 1977. Soli je možno vytvořit například se silnými anorganickými kyselinami, jako jsou kyselina sírová, fosforečná nebo halogenovodíková, se silnými organickými karboxylovými kyselinami, například alkankarboxylovými kyselinami o 1 až 4 atomech uhlíku, které mohou být nesubstituované nebo jsou substituovány například atomy halogenu, jako je kyselina octová, s nasycenými nebo nenasycenými dikarboxylovými kyselinami, jako jsou kyselina šúavelová, malonová, jantarová, maleinová, fumarová, ftalová nebo tereftalová, s hydroxykarboxylovými kyselinami, jako jsou kyselina askorbová, glykolová, mléčná, jablečná, vinná nebo citrónová, s aminokyselinami, jako jsou kyselina asparagová nebo glutamová, s kyselinou benzoovou nebo s organickými sulfonovými kyselinami, jako jsou kyseliny

Cl-C4alkylsulfonové nebo arylsulfonové, popřípadě substituované atomy halogenu, může jít například o kyselinu methansulfonovou nebo p-toluensulfonovou.

Estery se tvoří při použití organických kyselin nebo alkoholů a hydroxidů v závislosti na funkční skupině, která má být esterif ikována. Z organických kyselin je možno použít karboxylové kyseliny, například alkankarboxylové kyseliny o 1 až 12 atomech uhlíku, které mohou být nesubstituované nebo jsou substituovány například atomy halogenu, jako je kyselina octová, dále je možno vytvořit estery s nasycenými nebo nenasycenými dikarboxylovými kyselinami, jako jsou kyselina šfavelová, malonová, jantarová, maleinová, fumarová, ftalová nebo tereftalová, s hydroxykarboxylovými kyselinami, jako jsou kyselina askorbová, glykolová, mléčná, jablečná, vinná nebo citrónová, s aminokyselinami, jako jsou kyselina asparagová nebo glutamová, s kyselinou benzoovou nebo s organickými sulfonovými kyselinami, jako jsou kyseliny

Cl-C4alkylsulfonové nebo aryl sulf onové, popřípadě substituované atomy halogenu, může jít například o kyselinu methansulf onovou nebo p-toluensulf onovou. Vhodné hydroxidy φ · zahrnuji anorganické hydroxidy, jako hydroxid sodný, draselný, vápenatý nebo hlinitý.

Alkoholy zahrnuji alkanalkoholy o 1 až 12 atomech uhlíku, nesubstituované nebo substituované například atomy halogenu.

Ve všech provedeních, která byla svrchu uvedena zahrnuje vynález všechny existující enanciomery a tautomery sloučenin obecného vzorce I. Odborník rozezná látky, které mají optické vlastnosti podle přítomnosti jednoho nebo většího počtu chirálních uhlíkových atomů a také snadno určí sloučeniny s tautomerními vlastnostmi. Příslušné enanciomery nebo tautomery je možno izolovat známým způsobem.

Vynález se dále týká sloučenin podle vynálezu v jejich různých krystalických formách, polymorfních formách a hydratovaných nebo bezvodých formách. Je zřejmé, že sloučeniny je možno izolovat v kterékoliv z takových forem při použití jen malých změn při čištění nebo izolaci těchto látek z rozpouštědel, použitých k jejich přípravě.

Vynález dále zahrnuje sloučeniny podle vynálezu ve formě jejich prekursoru. Takové prekursory mají obvykle stejnou strukturu jako sloučeniny obecného vzorce I až na to, že jedna nebo větší počet skupin byl modifikován tak, že tato modifikace může být odstraněna po podání do lidského nebo živočišného organismu. Odstranění takové modifikace se obvykle uskutečni působením enzymu, který je přirozeně přítomen v organismu příjemce, i když je také možné společně podat další látku, která bude příčinou uvedené modifikace in vivo. Příkladem takové modifikace ·« ···« ·· · může být tvorba esteru, například některého ze svrchu uvedených esterů, přičemž modifikaci je možno odstranit enzymem esterázou a podobně. Tyto systémy jsou v oboru dobře známé.

Vynález se rovněž týká farmaceutických prostředků, které jako svou účinnou složku obsahují sloučeninu podle vynálezu. Přestože je možno sloučeniny podle vynálezu včetně jejich farmaceuticky přijatelných solí, esterů a farmaceuticky přijatelných solvátů, podávat jako takové, zejména při podání u člověka, obvykle budou podávány spolu s farmaceutickými nosiči, pomocnými látkami nebo ředidly podle předpokládaného způsobu podání. Toto zpracování je možno uskutečnit obvyklým způsobem.

Vynález se tedy týká také farmaceutických prostředků, obsahujících jednu nebo větší počet sloučenin obecného vzorce I nebo II nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí nebo esterů spolu s alespoň jednou farmaceutickou pomocnou látkou, ředidlem nebo nosičem.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být při výrobě farmaceutického prostředku míšeny s jakýmkoliv vhodným pojivém, kluznou látkou, suspenzním činidlem, solubilizačním činidlem a/nebo je možno vytvořit povlaky. Příklady těchto pomocných látek pro různé lékové formy je možno nalézt v souhrnné publikaci Handbook of

Pharmaceutical Excipients, 2. vydání, 1994, vydavatel A Wade a PJ Weller.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou být upraveny pro perorální, rektální, vaginální, parenterální, nitrosvalové, intraperitoneální, intraarteriální, • 4 intrathekální, intrabronchiální, podkožní, intradermální a nitrožilní podání a také pro podání nosní nebo ústní sliznící nebo pro podání pod jazyk.

V případě perorálního podání jsou výhodnou formou lisované tablety, pilulky, gelové kuličky, kapky a kapsle. Tyto prostředky s výhodou obsahují jeden až 250 mg a zvláště 10 až 100 mg účinné látky v jednotlivé dávce.

Další lékové formy jsou roztoky nebo emulze, které jsou určené pro nitrožilní, intraarteriální, intrathekální, podkožní, intradermální, intraperitoneální nebo nitrosvalové podání a mohou být připraveny ze sterilních nebo sterilizovatelných roztoků. Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou také mít formu čípků, pesarů, suspenzí, emulzí, mazání, krémů, gelů, sprejů, roztokii nebo pudrů.

Alternativním prostředkem pro transdermální podání může být náplast. Účinnou složku je například možno včlenit do krému, tvořeného vodnou emulzí polyethylenglykolu nebo kapalného parafinu. Účinná složka může být také zařazena v koncentraci 1 až 10 % hmotnostních do mazání z bílého vosku nebo bílého měkkého parafinu spolu se stabilizátory a konzervačními prostředky podle potřeby.

Injekční formy mohou obsahovat 10 až 1000 mg, s výhodou 10 až 250 mg činné složky v jednotlivé dávce.

Prostředky podle vynálezu je možno zpracovat na lékové formy s obsahem jednotlivých dávek, to znamená rozděleně na podíly, obsahující jednotlivou dávku, její podíl nebo větší počet jednotlivých dávek.

9« 9999

9 9

Odborník snadno určí příslušnou dávku účinné látky, kterou je zapotřebí podávat. Ošetřující lékař může stanovit dávku, která bude nejvhodnější pro každého nemocného a bude záviset na jeho věku, hmotnosti a na reakci na léčení. Uváděné dávky jsou průměrem z předpokládaných dávek. Může být proto zapotřebí použít i vyšší nebo nižší dávky.

Jako příklad je možno uvést, že při léčení zhoubných nádorů se bude podávat jedna nebo větší počet s obsahem 10 až 150 mg účinné látky denně.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu mohou dále obsahovat ještě jednu nebo větší počet dalších protinádorových látek, například běžně užívaných látek.

Protinádorové látky jsou obecně účinnější v případě, že jsou použity v kombinacích. Kombinace jsou zvláště žádoucí v případě, že je nutno se vyvarovat příliš vysoké toxicity a odolnosti zhoubného nádoru proti léčení. Je také žádoucí podávat většinu látek v dávkách, které jsou ještě tolerovány při minimálních časových intervalech mezi takovými dávkami. Hlavní výhodou kombinace protinádorových látek je aditivní a v některých případech i sinergní účinek v důsledku různých biochemických interakcí a také menší výskyt odolnosti nádorových buněk, zejména v časných stádiích, kdy by mohly buňky ještě vyvinout odolnost v případě léčení jedinou látkou. Ke zvýšení účinku biochemickými interakcemi je možno uvést podávání leucovorinu ke zvýšení vazby účinného nitrobuněčného metabolitu 5-fluorouracilu na jeho cílovou strukturu, thymidylátsynthetázu, čímž dochází ke zvýšení cytotoxického účinku této látky.

Při léčení zhoubných nádorů a leukemie je možno použít velký počet kombinací. Souhrnná publikace, týkající se takových kombinací při praktickém použití je například publikace Oncologic Therapies, vydavatel E. E. Vokes a H.

M. Golomb, tisk Springer.

Příznivé kombinace je možno navrhnout studiem inhibičního účinku zkoumaných látek spolu se známými látkami, o nichž se předpokládá, že by měly příznivý vliv při léčení určitého typu zhoubného nádoru. Často se tyto zkoušky provádějí na buněčných liniích, odvozených od takového nádoru. Tento postup je také mošno využít ke stanovení pořadí podávání látek, které mají být použity v kombinaci, to znamená současně nebo následně.

Sloučeniny podle vynálezu je možno připravit například modifikací Traubeho syntézy, tak jak je uvedena v publikaci A. R. Katritzky, I. Taher, Can. J. Chem. 1986, 64, 2087 a v citovaných publikacích, jde o kondenzaci mezi

1,3-dikarbonylovými sloučeninami vzorce 1 nebo akryláty vzorce 2 nebo 3 a amidinem vzorce 4, jak je znázorněno v následujícím schématu 1.

Schéma 1

R¹

Dikarbonylové sloučeniny vzorce 1 je možno připravit řadou známých postupů, například podle publikace J. March v Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanism, and Structure, 4. vyd., John Wiley & Sons, inc., New York,

1992, s. 1283. Akryláty vzorce 2 a 3, které jsou zvláště vhodné pro použití při uvedeném postupu, je možno připravit z heterocyklických methylketonů vzorce 5 kondenzací s terč .butoxybis (dimethylamino) methanem vzorce 6, podle následujícího schématu 2.

Schéma 2

R¹

·· ·· · · ·· ···· » ·· • · ··

Diaminosloučeniny vzorce 4 jsou amidiny vzorce 4a nebo guanidiny vzorce 4b v závislosti na významu symbolu Z. Amidiny (HN=CRNH₂) je možno připravit z aminosloučenin jako prekursorů kondenzaci například s keteniminy nebo adicí amoniaku na příslušné nitrily nebo imidáty. Guanidiny vzorce 4b, jejichž příprava je uvedena ve schématu 3, je možno připravit celou řadou postupů, pro účely vynálezu je nejvhodnější aminace kyanoamidu vzorce 8 anilinem vzorce 9.

V případě, že sloučenina vzorce 5 je pyrrol, je možno použit dva postupy, jak je znázorněno ve schématu 4. Acetylová skupina, která se užije ke tvorbě pyrimidinových prekursorů vzorce 2 a 3 se nachází buď v poloze 3 pyrrolu (struktura 5b) nebo v poloze 2 pyrrolu (struktura 5c).

V prvním případě X¹ znamená CR⁹ a X² znamená NH, ve druhém případě X¹ znamená NH a X² znamená CR⁹ ve sloučenině vzorce 5.

Schéma 4

5b ·· ···« • · ·· ·· · · · • · · · · · • · · · · · · · • · · · · · · ···· ··· ··· ·· ··

V obou případech se pyrrolové kruhy vytvoří známým způsobem. Zvláště vhodná je modifikace Knorrovy syntézy, popsaná v publikaci J. A. Joule, G. F. Smith, Heterocyclic Chemistry, 2. vydání, Van Nostrand Reinhold, UK, Co. Ltd., 1978, s. 213-215. V případě pyrrol-3-ylového systému se nejprve nitrosylují karbonylové sloučeniny vzorce 10, předem aktivované (R¹ = COOEt, CN apod.). Výsledné oximy vzorce 11 se kondenzují s dikarbonylovými sloučeninami vzorce 12 například v přítomnosti zinku a kyseliny octové nebo vodného dithionátu za vzniku reaktivního alfa-aminokarbonylového meziproduktu vzorce 13 . Substituent R¹ (např. COOEt, CN) ve výsledných 3-acetylpyrrolech vzorce 5b je možno dále modifikovat přímo nebo v souvislost s meziprodukty 2 nebo 3 nebo až v pyrrolopyrimidinových produktech vzorce I. Dekarboxylací (R¹ = COOEt) se získají produkty, v nichž R¹ znamená atom vodíku, oxidací (R¹ = CN) je možno připravit produkty, v nichž R¹ znamená CONH₂ a podobně.

Mimoto je možno produkty, v nichž R¹ znamená atom vodíku, transformovat na různé deriváty, zvláště pomocí elektrofilní substituce. Tímto způsobem je možno snadno připravit deriváty, v nichž R¹ znamená například atom halogenu, nitroskupinu, amino skupinu, alkyl, • · alkylaminoskupinu a podobně. Při použití pyrrol-2-ylového systému je situace analogická. V tomto případě je nutno aktivační skupinu uložit na karbonylovou složku vzorce 15 (například R⁹ = COOEt, CN apod.) . Tato látka se pak kondenzuje s oximy 16, odvozenými z dikarbonylových sloučenin vzorce 14 za vzniku meziproduktu vzorce 17. Substituent R⁹ v produktu vzorce 5c nebo derivátech je možno modifikovat stejným způsobem jako skupinu R¹ ve svrchu popsaných pyrrol-3-ylových systémech.

Sloučeniny obecného vzorce I je také možno připravit přímo z vhodných pyrimidinových prekursorů, například z 2,4-disubstituovaných (atom halogenu, amin a podobně) pyrimidinů postupnými substitučními reakcemi.

Přehled obrázků na výkresech

Na obr. 1 je znázorněna chemická struktura sloučeniny podle vynále zu.

Praktické provedeni vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

V příkladové části přihlášky budou použity následující

zkratky:
LC-MS	kapalinová chromatografie -	hmotová	spektrometrie
NMR	nukleární magnetická rezonance
r. t.	teplota místnosti
PE	petrolether s teplotou varu	40 až 60	°C
DMSO	dimethylsulfoxid

Obecné poznámky

NMR spektra byla zaznamenávána na zařízení Bruker DPX-300. Chemické posuny se uvádějí v ppm (δ) od tetramethylsilanu. Při rychlé chromatografii na sloupci byl použit EM Kieselgel 60 s průměrem částic 0,040 až 0,063 mm. Teplota tání byla stanovena elektroteploměrem LEICA těsto-72 0 a je uvedena bez opravy. V případě potřeby jsou v závorkách uvedena čísla sloučenin.

Příklad 1

- dimethylamino -1 - (2,4 -dimethyl - lH-pyrrol -3 - yl) propenon

Směs 2 g, 15 mmol 1-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)ethanonu v 5 ml 1,1-bisdimethylamino-3,3-dimethylbutan-2-onu se zahřívá 22 hodin na 100 °C. Sraženina z reakční směsi se uvede do suspenze ve směsi EtOAc/PE za současného chlazeni. Surový produkt se odfiltruje, promyje se EtOAc/PE a usuší ve vakuu, čímž se získá 2,6 g produktu jako purpurová pevná látka. ¹H-NMR (CDC1₃) δ 2,25 (s, 6H, CH₃) ,

2,45 (s, 6H, CH₃) , 5,46, (d, 1H, J = 12,6 Hz, CH) , 6,35 (s,

1H, pyrrolyl-H) , 7,63 (d, 1H, J=12,6 HZ, CH) .

Příklad 2 [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] - (4-fluorfenyl)-amin [1]

3Ί

Ke směsi 1 mmol, 0,19 g 3-dimethylamino-l-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) propenonu a 2 mmol, 0,44 g 4 -fluorfenylguanidinnitrátu v 5 ml 2-methoxyethanolu se přidá 4 0 mg NaOH. Reakční směs se zahřívá 6 hodin pod dusíkem na 100 až 120 °C. Rozpouštědlo se odpaří do sucha a odparek se čistí rychlou chromatografií při použití EtOAc/PE 1:2. Překrystalováním z téže směsi se ve výtěžku 62 % získá 174 mg produktu ve formě hnědých krystalů.

¹H-NMR (CDC1₃) δ 2,21 (s, 3H, CH₃) , 2,43 (s, 3H, CH₃) , 6,33 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,73 (d, 1H, J = 5,3 Hz, pyrimidinyl-H), 7,00 (m, 3H, Ph-H), 7,79 (m, 2H, Ph-H),

8,28 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H), 9,16 (s, 1H, NH),

10,59 (s, 1H, NH).

Svrchu uvedeným způsobem je možno připravit ještě následující sloučeniny:

[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (3-nitrofenyl)-amin [2]

Žlutooranžová pevná látka. Teplota tání 197 až 199 °C. LC-MS: m/z = 310 (M+l). Οι₆Η₁₅Ν₅Ο₂ vypočteno C 61,12, H 4,89, N 22,64, nalezeno C 61,61, H 4,99, N 22,20. ¹H-NMR (CDC1₃) δ 2,71 (d, 6H, CH₃) , 7,05 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H),

7,47	(m,	2H, Ph-H),	7,78 (m, 1H,	Ph-H), 7,81 (s, 1H, Ar-H),
8,07	(m,	1H, Ph-H),	8,51 (d, 1H,	J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H),
8,99	(br	s, 1H, NH)	, 9,91 (br s,	1H, NH).

[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-jodfenyl)-amin [3]

¹H-NMR (CDC1₃) δ 2,26 (s, 3H, CH₃) , 2,48 (s, 3H, CH₃) ,

6,80 (d, 1H, J=5,'3 Hz, pyrimidinyl-H), 7,47 (m, 2H, Ph-H) , 7,57 (m, 2H, Ph-H), 7,23 (s, 1H, pyrrolyl-H), 8,32 (d, 1H,

J = 5,3 Hz, pyrimidinyl-H).

(3,4-difluorfenyl) - [4 -(2,4-dimethy1-1H-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin [4] ¹H-NMR (CDC1₃) δ 2,23 (s, 3H, CH₃) , 2,46 (s, 3H, CH₃) ,

6,42 (m, 1H, pyrrolyl-H), 6,77 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H), 7,11 (m, 1H, Ph-H), 7,41 (m, 1H, Ph-H),

8,05 (m, 1H, Ph-H), 8,29 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H), 9,21 (s, 1H, Ph-H), 10,46 (br s, 1H, NH).

(4-chlorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin [5]

Teplota tání 219 až 223 °C. MS: [M+H]⁺ = 299,4, C16H15C1N4 vypočteno 298,8. ¹H-NMR (DMSO-d6) δ 2,19 (s, 3H, CH₃) , 2,42 (s, 3H, CH₃) , 6,48 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,82 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H), 7,31 (d, 2H, J=8,7 Hz, Ph-H), 7,84 (d, 2H, J=8,7Hz, Ph-H), 8,34 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H), 9,45 (s, 1H, Ph-H), 10,72 (br s, 1H, NH).

(3,5-difluorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin [6]

Teplota tání 153,3 až 156,8 °C. MS: [M+H]⁺ = 303,6, C1SH14F2N4 vypočteno 3 00,3. ¹H-NMR (CD3OD) δ 2,25 (s, 3H,

CH₃) , 2,47 (s, 3H, CH₃) , 6,42 až 6,48 (m, 2H, pyrrolyl-H a

Ph-H), 6,80 (d, 1H, J=5,5 Hz, pyrimidinyl-H), 7,44-7,48 (m, 2H, Ph-H), 8,31 (d, 1H, J = 5,5 Hz, pyrimidinyl-H).

4- [4- (2,4-dimethyl - lH-pyrrol - 3-yl) -pyrimidín-2-ylamino] -fenol [7]

Teplota tání 189,5 až 193,4 °C. MS: [M+H] ⁺ = 281,9, Ci6Hi6N4O vypočteno 280,3. ¹H-NMR (CD3OD) δ 2,23 (s, 3H,

CH₃) , 2,43 (s, 3Η, CH₃) , 6,44 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,756,78 (m, 3H, pyrimidinyl-H a Ph-H), 7,39 (d, 2H, J=8,8 Hz,

Ph-H), 8,17 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H).

3- [4- (2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-ylamino] -fenol [8]

Teplota tání 169,0' až 174,6 °C. MS: [M+H] ⁺ = 281,3, C16H16N4O vypočteno 2 8 0,3. ^XH-NMR (CD3OD) δ 2,26 (s, 3H,

CH₃) , 2,47 (s, 3H, CH₃) , 6,44-6,48 (m, 2H, pyrrolyl-H,

Ph-H), 6,84 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H) , 7,05-7,10 (m, 2H, Ph-H), 7,32 (m, 1H, Ph-H), 8,25 (d,, 1H, J = 5,3 Hz, pyrimidinyl-H).

(2,4-difluorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)pyrimidin-2-yl]-amin [9]

Teplota tání 219 až 220 °C. MS: [M+H]⁺ = 302,6,

Ci₆Hi₄F₂N₂ vypočteno 300,3. ¹H-NMR (DMSO-d_s) δ 2,10 (s, 3H,

CH₃) , 2,36 (s, 3H, CH₃) , 6,43 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,77 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H) , 7,06 (m, 1H, Ph-H), 7,27 (m, 1H, Ph-H), 7,66 (m, 1H, Ph-H), 8,25 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H), 8,71 (s, 1H, Ph-H), 10,70 (br s, 1H, NH) .

(2,4-dichlorfenyl) - [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) pyrimidin-2-yl]-amin [10]

Teplota tání 158,5 až 159,7 °C. MS: [M+H]⁺ = 335,4, C₁₆H₁₄C1₂N₄ vypočteno 333,2. ^TÍ-NMR (DMSO-d_s) δ 2,18 (s, 3H,

CH₃) , 2,38 (s, 3H, CH₃) , 6,51 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,90 (d, 1H, J=5,5 Hz, pyrimidinyl-H) , 7,46 (m, 1H, Ph-H) , 7,71 (m,

1H, Ph-H), 8,05 (m, 1H, Ph-H), 8,36 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H) , 8,49 (s, 1H, Ph-H), 10,80 (br s, 1H, NH) .

(4-chlor-3-trifluormethylfenyl) - [4- (2,4-dimethyl - lH-pyrrol3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin [11]

Teplota tání 187,7 až 190,7 °C. MS: [M+H]⁺ = 368,6, C17Hi4C1F3N4 vypočteno 366,8. ¹H-NMR (DMSO-dg) δ 2,19 (s, 3H, CH3) , 2,42 (s, 3Η, CH₃) , 6,50 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,89 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H) , 7,61 (m, 1H, Ph-H), 8,08 (m,

1H, Ph-H), 8,39-8,42 (m, 2H, Ph-H a pyrimidinyl-H) , 9,79 (s, 1H), 10,80 (br s, 1H, NH).

[4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] - (4-trifluormethylfenyl)-amin [12]

Teplota tání 165,6 až 167,9 °C. MS: [M+H] ⁺ = 332,9, Ci₇H₁₅F₃N₄ vypočteno 332,3. ¹H-NMR (DMSO-dg) δ 2,26 (s, 3H,

CH₃), 2,49 (s, 3Η, CH₃) , 6,56 (s, 1Η, pyrrolyl-H), 6,94 (d, 1H, J = 5,3 Hz, pyrimidinyl-H), 7,67 (d, 2H, J=8,5 Hz, PhH) , 8,09 (d, 2H, J=8,5 Hz, Ph-H), 8,45 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H), 9,82 (s, 1H, NH) .

[4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (3-trifluormethylfenyl)-amin [13]

Teplota tání 152,7 až 154,3 °C. MS: [M+H]⁺ = 322,6, Ci₇Hi₅F₃N₄ vypočteno 332,3. Y-NMR (DMSO-d_s) δ 2,26 (s, 3H,

CH₃) , 2,48 (s, 3H, CH₃) , 6,56 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,92 (d, 1H, J=5,3 Hz, pyrimidinyl-H) , 7,29 (m, 1H, Ph-H) , 7,55 (m, 1H, Ph-H), 8,03 (m, 1H, Ph-H), 8,42-7,45 (m, 2H, pyrimidinyl-H a Ph-H), 9,73 (s, 1H, NH) , 10,83 (br s, 1H, NH) .

(3-chlorfenyl) - [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin2-yl]-amin [14]

Teplota tání 140,4 až 144,2 °C. MS: [M+H] ⁺ = 299,5, C₁₆H₁₅C1N₄ vypočteno 298,8. Y-NMR (DMSO-d_s) δ 2,21 (s, 3H,

CH₃) , 2,44 (s, 3H, CH₃) , 6,51 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,85 (d,

1H, J	= 5,3	Hz,	pyrimidinyl-H) , 6,94	(d,	1H,	J=7,6 Hz,	Ph-H)
7,28	(t,	1H,	J=8,1 Hz, Ph-H), 7,61	(d,	1H,	J=8,2 Hz,	Ph-H)
8,19	(s,	1H,	Ph-H) , 8,37 (d, 1H, J=	= 5,3	Hz,	pyrimidinyl-H),
9,55	(s,	1H,	NH), 10,78 (br s, 1H,	HN)

N- [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] -Ν' ,N' -dimethylbenzen-1,4-diamin [15]

Teplota tání 179,9 až 182,1 °C. MS: [M+H]⁺ = 307,3, Ci8H2iN5 vypočteno 307,4). ¹H-NMR (CDC13) δ 2,25 (s, 3H, CH₃) , 2,46 (s, 3H, CH₃) , 2,91 (s, 6H, CH₃) , 6,46 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,70 (d, 1H, J-5,1 Hz, pyrimidinyl-H), 6,78 (dd, 2H, J=6,8, 2,2 Hz, Ph-H), 6,79 (br s, 1H, NH), 7,45 (dd, 2H, J=6,8, 2,2 Hz, Ph-H), 7,80 (br s, 1H, NH), 8,28 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H) .

(3-chlor-4- jodfenyl) - [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-amin [16] • ·

Teplota tání 185,0 až 187,4 °C. MS: [M+H] ⁺ =423,9, C1SH14C1IN4 vypočteno 424,7. ^XH-NMR (DMSO-ds) δ 2,18 (s, 3H, CH₃) , 2,41 (s, 3H, CH₃) , 6,48 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,84 (d,

1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H) , 7,40 (dd, 1H, J=8,8, 2,4 Hz, Ph-H) , 7,75 (d, 1H, J=8,8 Hz, Ph-H) , 8,34 (m, 1H, Ph-H) ,

8,36 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H), 9,61 (s, 1H, NH) ,

10,75 (s, 1H, NH).

[4- (2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] - (3-fluor-4-jodfenyl)-amin [17]

Teplota.tání 200 až 202 °C. MS: [M+H]⁺ = 407,4, Ci_SHi₄FIN₄ vypočteno 408,2. hí-NMR (DMSO-d₆) δ 2,18 (s, 3H,

CH₃) , 2,40 (s, 3H, CH₃) , 6,48 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,84 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H), 7,35 (m, 1H, Ph-H), 7,64 (t, 1H, J=8,0 Hz, Ph-H), 8,02 (dd, 1H, J=12,0, 2,2 Hz, Ph-H), 8,36 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H), 9,65 (s, 1H, NH) ,

10,75 (s, 1H, NH).

Příklad 3

- (3 -dimethylaminoakryloyl) - 3,5-dimethyl-lH-pyrrol -2 -

ml, 94 mmol ethylkyanoacetátu se zředí 20 ml AcOH a roztok se zchladí na -10 °C v lázni s methanolem a ledem. 6,5 g, 94 mmol NaN0₂ se rozpustí v 10 ml vody a roztok se po kapkách přidá k předchozímu roztoku v průběhu 40 minut, přičemž vnitřní teplota směsi má být nižší než 0 °C. Po skončeném'přidávání se reakční směs míchá za chlazení ještě 1 hodinu. Pak se směs zahřeje na teplotu místnosti a míchá

se ještě další 3 hodiny. Směs se zředí 50 ml kyseliny octové a 50 ml vody. Přidá se 10,6 ml, 103 mmol pentan-2,4-dionu a směs se zahřeje na teplotu přibližně 75 °C. Pak se k reakční směsi po částech přidá 6,9 g, 105 mmol práškového zinku v průběhu 30 minut takovou rychlostí, aby vnitřní teplota směsi nepřekročila 90 °C. Směs se zahřívá ještě 30 minut a pak se vlije do 1 ml vody. Z reakční směsi se odfiltruje 3,65 g 3,5-dimethyl-IH-pyrrol-2-karbonitrilu jako špinavě bílá pevná látka. Filtrát se extrahuje 3 x 500 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odpaří na hnědý olej, který se čistí chromatografií na 100 g oxidu křemičitého, jako eluční činidlo se užije směs heptanu a ethylacetátu 4:1, čímž se získá další podíl 4,41 g produktu ve formě bledě žluté pevné látky. Celkový výtěžek je 72 %.

1,2 g, 10 mmol 3,5-dimethyl-IH-pyrrol-2-karbonitrilu se rozpustí v 15 ml bezvodého 1,2-dichlorethanu a po částech se přidá 2,93 g, 22 mmol chloridu hlinitého.

Reakční nádoba se promyje dusíkem a zchladí na lázni s vodou a ledem. Pak se po kapkách přidá 0,71 ml, 10 mmol acetylchloridu a směs se míchá ještě 1 hodinu za chlazení a pak 3 hodiny při teplotě místnosti. Pak se reakce zastaví opatrným přidáním 2M vodného roztoku HCI. Směs se upraví na pH přibližně 6 přidáním hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se oddělí, vodná fáze se extrahuje 3x100 ml ethylacetátu. Organické fáze se spojí, promyjí se vodou a pak nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a zfiltrují. Rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá ve výtěžku 88 % celkem 1,42 g 4-acetyl-3,5•· 9 99 9

9 9

9 » • 9 9 9

99

-dimethyl-IH-pyrrol-2-karbonitrilu jako špinavě bílá látka. ¹H-NMR (DMSO-d_s) δ 2,44 (s, 3H, CH₃) , 2,45 (s, 3H, CH₃) ,

2,54 (s, 3H, CH₃) , 8,75 (br s, 1H, NH) .

1,38 g, 8,51 mmol 4-acetyl-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitrilu se uvede do suspenze v 1,3 ml 1,l-bisdimethylamino-3,3-dimethylbutan-2-onu a směs se zahřívá 42 hodin na 75 °C. Reakční směs se odpaří do sucha a odparek se čistí chromatografií na oxidu křemičitém při použití směsi heptanu a ethylacetátu, čímž se ve výtěžku 65 % získá 1,2 g produktu jako špinavě bílá pevná látka. ^-NMR (DMSO-d₆) δ 2,21 (s, 3H, CH₃) , 2,31 (s, 3H, CH₃) ,

3,32 (s, 6H, CH₃), 5,22 (d, 1H, J=12,4 Hz, CH), 7,47 (d,

1H, J=12,4 Hz, CH), 11,96 (br s, 1H, NH).

Příklad 4

3,5-dimethyl-4-[2-(3-nitrofenylamino) -pyrimidin-4-yl]-1H-pyrrol-2-karbonitril [31]

Ke směsi 1,0 mmol, 0,22 g 4-(3-dimethylaminoakryloyl)-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitrilu a 1,5 mmol, 0,36 g

3-nitrofenylguanidinnitrátu v 5 ml 2-methoxyethanolu se přidá 138 mg, 1,0 mmol uhličitanu draselného. Reakční směs se zahřívá 18 hodin pod dusíkem na 120 °C. Rozpouštědlo se odpaří do sucha a odparek se čistí rychlou chromatografií při použití směsi ethylacetátu a heptanu 1:2, čímž se získá výsledná látka jako světle žlutá pevná látka s teplotou tání 258 až 259 °C. MS: [M+H] ⁺ = 336,1, C17Hi4N6O2 vypočteno 334,3. ¹H-NMR (CD3OD) δ 2,39 (s, 3H, CH₃) , 2,49 (S, 3H,

CH₃), 6,94 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 7,50 (t, 1H,

J=8,3 Hz, Ph-H), 7,81 (m, 1H, Ph-H), 7,94 (m, 1H, Ph-H),

8,45 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H) , 8,94 (t, 1H, J=2,2

Hz, Ph-H).

• · • · ··

Analogickým způsobem je možno připravit také následující sloučeniny:

4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril [32]

MS: [M+H] ⁺ = 307,7, Ci₇H₁₄FN₅ vypočteno 307,3. ^-NMR (DMSO-dg) δ 2,30 (s, 3H, CH₃) , 2,40 (s, 3H, CH₃) , 6,84 (d, IH, J=5,0 Hz, pyrimidinyl-H), 7,00 (m, 2H, Ph-H), 7,73 (m, 2H, Ph-H), 8,40 (d, IH, J=5,5 Hz, pyrimidinyl-H), 9,46 (s, IH, NH), 12,19 (br s, IH, NH).

4-[2-(4-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril [33]

Teplota tání 272 až 276 °C. MS: [M+H]⁺ = 305,8,

C₁₇H₁₅N₅O vypočteno 305,3. ¹H-NMR (CD₃OD) δ 2,33 (s, 3H,

CH₃) , 2,41 (s, 3H, CH₃) , 6,74-6,56 (m, 3H, pyrimidinylH/Ph-H), 7,36 (d, 2H, J=8,5 Hz, Ph-H), 8,25 (d, IH, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H).

3,5-dimethyl-4-[2-(4-trifluormethylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril [34]

Teplota tání 195,6 až 198,9 °C. MS: [M+H]⁺ = 357,7, Ci8Hi4F3N5 vypočteno 357,3. ¹H-NMR (CDC13) δ 2,33 (s, 3H,

CH₃) , 2,44 (s, 3H, CH₃), 6,75 (d, IH, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 7,20 (br s, IH, NH) , 7,50 (d, 2H, J=8,8 Hz, Ph-H), 7,71 (d, 2H, J=8,8 Hz, Ph-H), 8,39 (d, IH, J=5,l Hz, pyrimidinyl), 8,40 (br s, IH, NH).

4-[2-(4-jodfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril [35]

Teplota tání 178,3 až 181,2 °C. MS: [M+H] ⁺ = 416,6, Ci8Hi4IN5 vypočteno 415,2. ¹H-NMR (CDC13) δ 2,39 (s, 3H,

CH₃) , 2,49 (s, 3H, CH₃) , 6,76 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H) , 7,10 (br s, 1H, NH) , 7,44 (d, 2H, J=8,8 Hz, Ph-H), 7,61 (d, 2H, J=8,8 Hz, Ph-H), 8,42 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H) , 8,45 (br s, 1H, NH) .

4-[2-(3-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril [36]

Teplota tání 247 až 250 °C. MS: [M+H]⁺ = 305,8,

Ci₇H₁₅N₅O vypočteno 3 05,3. ¹H-NMR (DMSO-d_s) δ 2,31 (s, 3H,

CH₃) , 2,41 (s, 3H, CH₃) , 6,33 (m, 1H, Ph-H), 6,82 (d, 1H,

J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 7,01 (t, 1H, J=8,l Hz, Ph-H),

7,11 (m, 1H, Ph-H), 7,33 (t, 1H, J=2,1 Hz, Ph-H), 8,40 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H) , 9,18 (s, 1H) , 9,30 (s, 1H) , 12,20 (br s, 1H, NH).

3,5-dimethyl-4 - [2-(4-methyl-3-nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril [37]

Teplota tání 233 až 237 °C. MS: [M+H]⁺ = 350,0 Ci8H16N6O2 vypočteno 348,6. ¹H-NMR (DMSO-d6) δ 2,31 (s, 3H,

CH₃) , 2,42 (s, 3H, CH₃), 2,44 (s, 3Η, CH₃) , 6,92 (d, 1H, J = 5,4 Hz, pyrimidinyl-H), 7,39 (d, 1H, J=8,5 Hz, Ph-H), 7,87 (dd, 1H, J=8,l, 1,7 Hz, Ph-H), 8,48 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 8,63 (d, 1H, J=l,7 Hz, Ph-H), 9,87 (s, 1H, NH), 12,21 (br s, 1H, NH).

•9 99··

99· ···· ··· ···

4- [2- (3-jod-4-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril [38]

Teplota tání 189,5 až 191,7 °C. MS: [M+H] ⁺ = 431,5, C₁₈Hi₆IN₅ vypočteno 429,6. ^-NMR (DMSO-d₆) δ 2,29 (s, 3H,

CH₃) , 2,32 (s, 3H, CH₃) , 2,43 (s, 3H, CH₃) , 6,85 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 7,20 (d, 1H, J = 8,1 Hz, Ph-H), 7,57 (m, 1H, Ph-H), 8,41-8,43 (m, 2H, Ph-H, pyrimidinyl-H), 9,48 (s, 1H, NH) , 12,20 (br s, 1H, NH) .

- [2 - (4 - chlor-3 -methylf enylamino) -pyrimidin-4 -yl] - 3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril [3 9]

Teplota tání 194,2 až 197,9 °C. MS: [M+H] ⁺ = 338,0, CiaH16ClN5 vypočteno 337,8. ¹H-NMR (DMSO-d6) δ 2,27 (s, 3H,

CH₃) , 2,31 (s, 3H, CH₃) , 2,41 (s, 3H, CH₃) , 6,86 (d, 1H,

J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H), 7,28 (d, 1H, J=8,5 Hz, Ph-H), 7,61 (dd, 1H, J=8,8, 2,4 Hz, Ph-H), 7,73 (d, 1H, J=2,7 Hz,

Ph-H), 8,43 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 9,51 (s, 1H, NH), 12,21 (br s, 1H, NH).

4- [2- (3-hydroxy-4-methylfenylamino) -pyrímidin-4-yl] -3,5-dimethyl-IH-pyrrol-2-karbonitril [40]

Teplota tání 221 až 225 °C. MS: [M+H]⁺ = 320,9, C18H17N5O, vypočteno 319,4. ¹H-NMR (DMSO-dg) δ: 2,03 (s, 3H, CH3) , 2,29 (s, 3Η, CH₃) , 2,40 (s, 3H, CH₃) , 6,78 (d, 1H, J = 5,1 Hz, pyrimidinyl-H), 6,89 (d, 1H, J=8,l Hz, Ph-H), 7,02 (dd, 1H, J=8,3, 1,7Hz, Ph-H), 7,29 (d, 1H, J=0,7 Hz, Ph-H), 8,37 (d, 1H, J=4,9 Hz, pyrimidinyl-H), 9,08 (s, 1H) , 9,20 (s, 1H) , 12,17 (br s, 1H, NH) .

O » ····

4- [2- (4-fluor-3-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-2-karbonitril [41]

Teplota tání 161,3 až 164,1 °C. MS: [M+H] ⁺ = 321,6 CiaHigFNs vypočteno 321,4. ¹H-NMR (DMSO-d_s) δ: 2,19 (s, 3H,

CH₃) , 2,30 (S, 3H, CH₃) , 2,42 (s, 3H, CH₃) , 6,82 (d, 1H,

J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 7,03 (t, 1H, J=9,3 Hz, Ph-H),

7,53 (m, 1H, Ph-H), 7,61 (dd, 1H, J=7,l, 2,4 Hz, Ph-H),

8,39 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 9,36 (s, 1H, NH),

12,20 (br s, 1H, NH).

4-[2-(3-fluor-4-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril [42 ]

Teplota tání 177,7 až 179,9 °C. MS: [M+H]⁺ = 322,5, Ci8H16FN5 vypočteno 321,3. ¹H-NMR (DMSO-d6) δ: 2,15 (s, 3H, CH₃) , 2,30 (s, 3H, CH₃) , 2,43 (s, 3H, CH₃) , 6,86 (d, 1H,

J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 7,13 (t, 1H, J=9,0 Hz, Ph-H),

7,36 (dd, 1H, J=8,l, 1,7 Hz, Ph-H), 7,75 (dd, 1H, J=12,9, 1,5 Hz, Ph-H), 8,43 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H), 9,56 (s, 1H, NH), 12,21 (br s, 1H, NH).

4- [2 - (4-dimethylaminofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-2-karbonitril [43 ]

Teplota tání 190,6 až 193,7 °C. MS: [M+H]⁺ = 334,7, Ci₉H₂oN₆ vypočteno 3 32,4. ^H-NMR (CDC1₃) δ: 2,36 (s, 3H,

CH₃) , 2,46, (s, 3H, CH₃) , 2,94 (br s, 6H, CH₃) , 6,66 (d, 1H,

J=5,6 Hz, pyrimidinyl-H), 6,79-6,80 (m, 2H, Ph-H), 7,05 (br. s, 1H, NH), 7,40-7,43 (m, 2H, Ph-H), 8,34 (d, 1H,

J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 8,52 (br s, 1H, NH).

AA AAAA

AAA A • A A

A A A A

AA AA

Příklad 5

Amid kyseliny 4- (3-dimethylaminoakryloyl)-3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karboxylové

1,1 g, 10 mmol 1 - (2,4-dimethyl - lH-pyrrol-3-yl) ethanonu se částečně rozpustí ve 2M roztoku amoniaku v methanolu a přidá se 10 ml roztoku peroxidu vodíku ve vodě s koncentrací 27 % hmotnostních, roztok se přidává po kapkách v průběhu 40 minut takovou rychlostí, aby vnitřní teplota směsi nepřekročila 30 °C. Pak se směs míchá 18 hodin při teplotě místnosti. Výsledná bílá suspenze se zfiltruje a získaná bílá pevná látka se nechá překrystalovat z ethylacetátu, čímž se získá 1,06 g amidu kyseliny 4-acetyl-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karboxylové . Podíl 72 0 mg, 4 mmol této látky se uvede do suspenze ve 2 ml, 9,6 mmol 1, l-bisdimethylamino-3,3-dimethylbutan-2-onu v baňce, propláchnuté dusíkem a suspenze se zahřívá 48 hodin na teplotu 75 °C. Surová směs se zchladí a čistí se chromatografií na oxúdu křemičitém při použití gradientu ethylacetátu a methanolu. Tímto způsobem se získá 449 mg produktu ve formě špinavě bílé pevné látky. ^XH-NMR (DMSO-dg) δ: 2,30 (s, 3H, CH₃) , 2,46, (s, 3H, CH₃) , 2,90 (br s, 2H, NH) , 3,09 (s, 3H, CH₃) , 3,13 (s, 3H, CH₃) , 5,23, (d, 1H, J=12,4 Hz, CH) , 7,38, (d, 1H, J=12,7 Hz, CH) , 10,97 (br s, 1H, NH).

Příklad 6 ·· ····

Μ

Amid kyseliny 4-[2-(4-f luorf enylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karboxylové [44]

100 mg, 0,43 mmol amidu kyseliny 4 -(3-dimethylaminoakryloyl)-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karboxylové, 139 mg,

0,56 mmol 4-fluorfenylguanidinnitrátu a 94 mg, 0,68 mmol uhličitanu draselného se částečně rozpustí v 5 ml

2- methoxyethanolu a směs se zahřívá 18 hodin na 120 °C. Pak se směs odpaří ve vakuu a odparek se čistí chromatografií na oxidu křemičitém při použití gradientu ethylacetátu a methanolu. Surový produkt se rozetře s iPr₂O, čímž se získá 31 mg produktu ve formě špinavě bílé pevné látky s teplotou tání 93,5 až 96,8 °C. MS: [M+H]⁺ = 326,9, C17H1SFN5O vypočteno 325,3. ^XH-NMR (DMSO-d6) δ: 2,36 (s, 3H, CH₃) , 2,39 (s, 3H, CH₃) , 6,79 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H), 6,92 (br s, 2H, NH), 7,07 (t, 2H, J=8,5 Hz, Ph-H), 7,76-7,78 (m, 2H, Ph-H), 8,36 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H) , 9,41 (s, 1H, NH), 11,24 (br s, 1H, NH).

Příklad 7

3- dimethylamino-1-(3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-yl)-propenon \

10,3 ml, 0,1 mol pentan-2,4-dionu se zředí AcOH a zchladí na 0 °C. 6,9 g 0,1 mmol dusitanu sodného se rozpustí v 10 ml vody a roztok se po kapkách přidá k předchozímu roztoku, přičemž vnitřní teplota se udržuje na hodnotě nejvýš 10 °C. Směs se 1 hodinu míchá za chlazení a ·· ···· ► · · · ·· ·· pak 3 hodiny při teplotě místnosti. 14 ml, 0,11 mol ethylacetoacetátu se rozpustí ve 100 ml směsi AcOH a vody a přidá se 7,19 g, 0,11 mol práškového zinku. Pak se přidá ještě roztok oximu, směs se 30 minut zahřívá na 100 °C a pak se vlije do 0,8 litru vody. Vodná směs se extrahuje 3x500 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem horečnatým, zfiltrují a odpaří ve vakuu. Odparek se čistí chromatografií na oxidu křemičitém při použití gradientu heptanu a ethylacetátu, čímž se získá 4,32 g ethylesteru kyseliny 5-acetyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-karboxylové. Podíl 3,5 g, 16,7 mmol této látky se přidá ke 4,22 g, 75,3 mmol hydroxidu draselného v 10 ml vody a směs se zahřívá 18 hodin na 130 °C. Pak se směs zchladí, zředí se 50 ml vody a okyselí 2M vodným roztokem vodným roztokem HC1. Směs se extrahuje 3x50 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým, zfiltrují a odpaří ve vakuu. Odparek se čistí chromatografíí na oxidu křemičitém při použití ethylacetátu, čímž se získá 1,05 g 1-(3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-yl)ethanonu. Podíl 536 mg,

3,9 mmol této látky se uvede do suspenze v 1,2 ml, 8,8 mmol N,N-dimethylformamiddimethylacetalu v baňce, proplachované dusíkem a zahřívá se 48 hodin na 90 °C. Pak se směs zchladí a rozetře s chladným ethylacetátem. Výsledná sraženina se odfiltruje a promyje se ethylacetátem, čímž se získá 444 mg špinavě bílého produktu. ¹H-NMR (DMSO-d₆) δ: 1,41 (s, 3H,

CH₃) , 2,23 (s, 3H, CH₃) , 2,23 (br s, 6H, CH₃) , 4,77 (d, 1H,

J=12,4 Hz, CH), 4,95 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,85 (d, 1H,

J=12,4 Hz, CH).

Příklad 8 [4-(3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-yl)-pyrimidin-2-yl]- (452 ·>· ····

-fluorfenyl)-amin [45]

125 mg, 0,65 mmol 3-dimethylamino-l-(3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-yl)-propenonu, 211 mg, 0,98 mmol

4-f luorf enyl guanidinnitrátu a 149 mg, 1,08 mmol uhličitanu draselného se částečně rozpustí v 2-methoxyethanolu a směs se zahřívá 18 hodin na 120 °C. Pak se směs odpaří ve vakuu a odparek se čistí chromatograf i i na oxidu křemičitém při použití předem naplněného sloupce s 5 g Isolute SI™ při použití gradientu heptanu a ethylacetátu. Surový produkt se rozetře s iPr₂O, čímž se získá 158 mg produktu jako špinavě bílá pevná látka s teplotou tání 168,4 až 171,5 °C. MS:

[M+H]⁺ = 283,9, C16H1SFN4 vypočteno 282,3. ^]'H-NMR (CDC13) δ: 2,30 (s, 3H, CH₃) , 2,35 (s, 3H, CH₃) , 5,85 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,83 (d, 1H, J=5,6 Hz, pyrimidinyl-H), 6,87 (br s, 1H, NH), 7,05 (t, 2H, J=8,5 Hz, Ph-H), 7,51 až 7,54 (m, 2H, Ph-H), 8,26 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H) , 9,08 (br s, 1H, NH).

Příklad 9

- dimethylamino-1- (1,2,4 - trimethyl -IH-pyrrol -3-yl) propenon

818 mg, 14,6 mmol KOH se částečně rozpustí v 15 ml DMSO a roztok se 5 minut míchá. Pak se po malých podílech přidá 1 g, 7,3 mmol 1-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) ethanonu a směs se 45 minut míchá. Pak se po kapkách přidá 0,54 ml, 8,75 mmol jodethanu takovou rychlostí, aby vnitřní teplota směsi nepřekročila 30 °C. Směs se ještě 45 minut míchá, pak • · · · · · se vlije do 50 ml vody a směs se extrahuje 3x60 ml diethyletheru. Organické extrakty se spojí, promyji se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem horečnatým, zfiltruji a odpaří ve vakuu, čímž se získá 1,06 g 1-(1,2,4-trimethyl-lH-pyrrol-3-yl) ethanonu jako růžová pevná látka. Tato látka se uvede do suspenze ve 3,6 ml, 17,5 mmol 1, l-bisdimethylamino-3,3-dimethylbutan-2 -onu v baňce, promývané dusíkem a výsledná směs se zahřívá 3 6 hodin na 70 °C. Pak se směs odpaří ve vakuu a odparek se rozetře s ethylacetátem. Získá se 973 mg produktu ve formě červenavé pevné látky. ¹H-NMR (DMSO-d_s) δ: 1,30 (s, 3H,

CH₃) , 1,51 (s, 3H, CH₃) , 2,20 (br s, 6H, CH₃) , 2,66 (s, 3H, CH₃) , 4,57 (d, 1H, J=12,5 Hz, CH) , 5,53 (s, 1H, pyrrolylH) , 6,72 (d, 1H, J=12,7 Hz, CH) .

Přiklad 10 (4-fluorfenyl)- [4-(1,2,4-trimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin

150 mg, 0,73 mmol 3-dimethylamino-l-(1,2,4-trimethyl-lH-pyrrol-3-yl)propenonu, 189 mg, 0,87 mmol 4-fluorfenylguanidinnitrátu a 144 mg, 1,04 mmol uhličitanu draselného se částečně rozpustí ve 3 ml 2-methoxyethanolu a směs se zahřívá 36 hodin na 110 °C. Pak se směs odpaří ve vakuu a čistí chromatografií na oxidu křemičitém při použití gradientu heptanu a ethylacetátu. Po překrystalování ze směsi iPr₂O a heptanu se získá výsledný produkt jako hnědavá pevná látka s teplotou táni 124,2 až 128,3 °C. Získá se celkem 20 mg produktu. MS: [M+H] ⁺ =

298,4, Ci₇Hi₇FN₄ vypočteno 296,3. ¹H-NMR (CDC1₃) δ: 2,21 (s,

3H, CH₃) , 2,42 (s, 3H, CH₃) , 3,51 (s, 3H, CH₃) , 6,40 (s, 1H, pyrrolyl-H), 6,76 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H) , 7,01 • 9 V··· • W· ·· · · *· ·· · · · • » « · · · » • · · · · · · · · • · · · · · ♦ · ««· ···· ··· ·*· ·· ·· (t, 2H, J=8,8 Hz, Ph-H), 7,58 až 7,61 (m, 2H, Ph-H), 7,70 (br s, 1H, NH) , 8,28 (d, 1H, J=5,6 Hz, pyrimidinyl-H).

Příklad 11

- dimethylamino-1- (2,4-dimethyl-5-nitro-IH-pyrrol-3 -yl)propenon

N

0,28 ml roztoku kyseliny dusičné s koncentrací 69 % hmotnostních, 4,3 7 mmol se po kapkách přidá k 5 ml Ac₂O při teplotě místnosti, přičemž teplota směsi nesmí překročit 25 °C. Nitrační směs se míchá 15 minut při teplotě místnosti a pak se zchladí na -40 °C. 500 mg, 3,64 mmol 1-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl) ethanonu se rozpustí v 6 ml Ac₂0 a roztok se po kapkách přidá k předchozí směsi, přičemž vnitřní teplota směsi nepřekročí 30 °C. Směs se míchá ještě 3 0 minut při teplotě -40 °C a pak dalších 30 minut při teplotě -10 °C. Pak se směs vlije do 50 ml směsi vody a ledu a výsledná směs se extrahuje 3x60 ml diethyletheru. Organické extrakty se spojí, promyjí se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem sodným, zfiltrují a odpaří ve vakuu na tmavě hnědou pevnou látku. Tato látka se nechá překrystalovat z methanolu, čímž se získá 158 mg l-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) ethanonu. Podíl 150 mg, 0,82 mmol této látky se uvede do suspenze v 0,42 ml, 2,02 mmol

• ·· * ·
· * • · • « ·	·· • •	·· • • · Λ
• · ··· ····	···	···

« · • · • · • · ·· ·« ·*·· • · ··

1, l-bisdimethylamino-3,3-dimethylbutan-2-onu v baňce, proplachované dusíkem, zahřívá se 18 hodin na 70 °C. Pak se směs rozetře s ethylacetátem, čímž se získá 119 mg produktu ve formě hnědé pevné látky. ¹H-NMR (DMSO-d₆) δ: 2,30 (s,

3H, CH₃) , 2,40 (s, 3H, CH₃) , 2,80 (br s, 3H, CH₃) , 3,07 (br s, 3H, CH₃) , 5,19 (d, 1H, J=12,7 Hz, CH) , 7,45 (d, 1H, J=12,4 Hz, CH), 12,76 (br, 1H, NH).

Příklad 12 [4- (2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] - (4-fluorfenyl)-amin [47]

110 mg, 0,46 mmol 3-dimethylamino-l-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl)propenonu, 150 mg, 0,7 mmol 4-fluorfenylguanidinnitrátu a 193 mg, 1,4 mmol uhličitanu draselného se částečně rozpustí ve 2-methoxyethanolu a roztok se zahřívá 18 hodin na 120 °C. Směs se odpaří ve vakuu a čistí se chromatografii na oxidu křemičitém při použití gradientu heptanu a ethylacetátu. Surový produkt se rozetře s iPr₂O, čímž se získá 22 mg produktu ve formě světle oranžové pevné látky s teplotou tání 166,3 až 170,1 °C. MS: [M+H]⁺ = 329,3, C₁₆H₁₄FN_SO₂ vypočteno 327,3. ^-NMR (DMSO-dg) δ: 2,49 (s, 3H, CH₃) , 2,59 (s, 3H, CH₃) ,

6,73 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 7,04 (t, 2H, J=8,8

Hz, Ph-H) , 7,07 (br, s, 1H, NH) , 7,55 až 7,58 (m, 2H, PhH), 8,44 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 9,40 (br s, 1H,

NH) .

Analogickým způsobem bylo možno připravit ještě následující sloučeninu:

N- [4- (2,4-dimethyl-5-nitro-IH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] 56

-Ν' ,Ν' -dimethylbenzen-l,4-diamin [48]

Teplota tání 265 až 268 °C. MS: [M+H] ⁺ = 353,0, C₁₈H₂₀N₆O₂ vypočteno 352,4. ^-NMR (DMSO-d₆) δ: 2,39 (s, 3H, CH₃) , 2,48 (br s, 6H, CH₃) , 2,82 (s, 3H, CH₃) , 6,69 (d, 2H, J=9,0 Hz, Ph-H), 6,74 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H),

7,50 (d, 2H, J=9,0 Hz, Ph-H), 8,38 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 9,18 (s, 1H, NH), 13,00 (br s, 1H, NH).

Příklad 13 [4-(5-amino-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-f luorf enyl) -amin [49] mg, 0,14 mmol [4-(2,4-dimethyl~5-nítro-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-aminu se rozpustí ve 3 ml ethanolu a přidá se 10 mg 10% paladia na aktivním uhlí a pak ještě 48 μΐ, 0,84 mmol vodného roztoku hydrazinhydrátu s koncentrací 55 % hmotnostních. Směs se zahřívá 18 hodin na teplotu varu pod zpětným chladičem. Pak se směs zchladí, zfiltruje se přes vrstvu celitu a filtrát se odpaří ve vakuu. Odparek se čistí chromatografií na oxidu křemičitém při použití směsi ethylacetátu a 2M amoniaku v methanolu 20:1, čímž se získá 14 mg produktu jako žlutá pevná látka s teplotou tání 227 až 231 °C. MS: [M+H]⁺ = 3 97,8, C16H16FN5 vypočteno 2 97,3. ¹H-NMR (CDC13) δ: 1,98 (s, 3H, CH₃) , 2,37 (s, 3H, CH₃) , 4,86 (br s, 2H, NH₂) , 6,65 (d, 1H, J=4,9 Hz, pyrimidinyl-H), 7,03 (t, 2H, J=8,3

Hz, Ph-H), 7,49 (br s, 2H, NH), 7,58-7,61 (m, 2H, Ph-H),

8,53 (d, 1H, J=4,9 Hz, pyrimidinyl-H).

Příklad 14 [4-(5-brom-2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]• · • ·

-(4-fluorfenyl)-amin [50] mg, 0,28 mmol [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-aminu se rozpustí ve 4 ml THF a směs se zchladí na -50 °C. 55 mg, 0,31 mmol N-bromsukcinimidu se rozpustí ve 2 ml THF a roztok se po kapkách přidá k předchozímu roztoku, přičemž vnitřní teplota směsi se udržuje na teplotě nejvýš -40 °C. Směs se míchá 1 hodinu za chlazení a pak se odpaří ve vakuu. K odparku se přidá 10 ml vody a směs se extrahuje 3x10 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyji se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem horečnatým, zfiltrují a odpaří ve vakuu. Odparek se čistí chromatografii na oxidu křemičitém při použití gradientu heptanu a ethylacetátu, čímž se získá po překrystalování z iPr₂O 19 mg produktu jako oranžová pevná látka s teplotou tání 181,4 až 183,3 °C. MS: [M+H]⁺ = 362,9 Ci5H14BrFN4 vypočteno 3 61,2. ¹H-NMR (CDCl3) δ: 2,10 (s, 3H, CH₃) , 2,36 (s, 3H, CH₃) , 6,56 (d, 1H, J=5,1 Hz, pyrimidinyl-H), 6,97 (t, 2H, J=8,3 Hz, Ph-H), 7,00 (br s,

1H, Nh), 7,79 až 7,52 (m, 2H, Ph-H), 8,85 (br s, 1H, NH), 8,26 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H).

Analogickým způsobem byla připravena ještě následující sloučenina:

[4-(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin [51]

Teplota tání 198,1 až 203 °C, MS: [M+H]⁺ = 389,3, CiSH14BrN5O4 vypočteno 3 61,2. ¹H-NMR (CDC13) δ: 2,4 9 (s, 3H, CH₃) , 2,59 (s, 3H, CH₃) , 6,73 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 7,04 (t, 2H, J=8,8 Hz, Ph-H), 7,57 (m, 2H, • ·

Ph-H), 7,90 (br s, 1H, NH), 8,44 (d, 1H, J=5,l Hz, J=5,l

Hz, pyrimidinyl-H), 9,40 (br s, 1H, NH).

Příklad 15 [4- (5-chlor-2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] -(4-fluorfenyl)-amin [52] mg, 0,28 mmol [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-aminu se rozpustí ve 4 ml THF a roztok se zchladí na -60 °C. 41 mg, 0,31 mmol N-chlorsukcinimidu se rozpustí ve 2 ml THF a roztok se po kapkách přidá k předchozímu roztoku, přičemž vnitřní teplota směsi nesmí převýšit -50 °C. Směs se ještě 30 minut míchá za chlazení a pak se odpaří ve vakuu. K odparku se přidá 10 ml vody a směs se extrahuje 3x10 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyjí se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem horečnatým, zfiltrují a odpaří ve vakuu. Surový produkt se čistí chromatografií na oxidu křemičitém při použití gradientu heptanu a ethylacetátu, čímž se získá po překrystalování z iPr₂O 37 mg produktu jako oranžová pevná látka s teplotou tání 200 až 203 °C. MS: [M+H]⁺ = 317,7, C16H14C1FN4 vypočteno 316,8. ¹H-NMR (CDCl3) δ: 2,17, (s, 3H, CH₃) , 2,42 (s, 3H,

CH₃) , 6,77 (d, 1H, J=5,9 Hz, pyrimidinyl-H), 7,02 až 7,06 (m, 3H, Ph-H, NH), 7,54 až 7,56 (m, 2H, Ph-H), 7,95 (br s, 1H, NH) , 8,25 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H) .

Příklad 16 [4- (5-diethylaminomethyl-2,4-dimethyl - lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin [53] μΐ, 0,31 mmol diethylaminu se zředí 0,5 ml methanolu a přidá se 30 μΐ, 0,37 mmol roztoku formaldehydu • · ve vodě s koncentrací 37 % hmotnostních. Pak se po malých podílech přidá ještě 87 mg, 0,31 mmol [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-aminu a směs se vaří pod zpětným chladičem. Po 1,5 hodině se směs zředí 10 ml vody. Výsledná sraženina se odfiltruje a rozetře se s 2N vodným roztokem HCl. Pak se směs zfíltruje a filtrát se promyje 2M vodným roztokem NaOH. Pak se filtrát extrahuje 3x15 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, promyji se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým, zfiltrují a odpaří ve vakuu. Surový produkt se čistí chromatografií na oxidu křemičitém při použití gradientu heptanu a ethylacetátu, čímž se získá 36 mg produktu ve formě oranžové pevné látky s teplotou tání 71,9 až 74,2 °C po překrystalování z iPr₂O. MS: [M+H]⁺= 367,7, C2iH26FN5 vypočteno 3 67,5. ¹H-NMR (CD3OD) δ: 1,10 (t, 6H, J=7,1 Hz, CH₃) , 2,19 (s, 3H, CH₃) , 2,41 (s, 3H,

CH₃) , 2,58, (t, 4H, J=7,8 Hz, CH₂) , 3,56 (s, 2H, CH₂) , 6,78 (d, 1H, J=5,6 HZ, pyrimidinyl-H), 7,00 (t, 2H, J=8,5 Hz, Ph-H), 7,61 až 7,63 (m, 2H, Ph-H), 8,22 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H).

Analogickým způsobem je možno připravit ještě následující sloučeniny:

[4-(5-dimethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin [54]

Teplota tání 88,4 až 91,6 °C. MS: [M+H]⁺ = 340,6, C19H22FN5 vypočteno 33 9,4. ¹H-NMR (CDC13) δ: 2,18 (s, 3H,

ch₃) ,	2,56	(s,	6Η, CH₃) , 2,42	(s, 3Η, CH₃) ,	3,38 (s, 2H,
ch₂) ,	6,75	(d,	1H, J=5,4 Hz,	pyrimidinyl-Η)	, 7,00 (t, 2H,
J=8,6	Hz,	Ph-H)	, 7,13 (br s,	1H, NH), 7,56	až 7,59 (m, 2H,

• · · ·

Ph-H), 8,31 (d, 1H, J=5,l Hz, pyrimidinyl-H), 8,55 (br s, 1H, NH).

[4-(2,4-dimethyl-5-morfolin-4-ylmethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin [55]

Teplota tání 94,7 až 97,6 °C. MS: [M+H] ⁺ = 382,1, C2iH24FN5O vypočteno 381,5. ¹H-NMR (DMSO-ds) δ: 2,12 (s, 3H,

CH₃) , 2,33-2,35 (m, 7H, CH₃, CH₂) , 3,55 (m, 4H, CH₂) , 4,03 (s, 2H, CH₂) , 6,73 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H) , 7,08 (t, 2H, J=9,0 Hz, Ph-H), 7,74-7,78 (m, 2H, Ph-H), 8,28 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H), 9,27 (s, 1H, NH) , 10,76 (s, 1H, NH).

{4-[2,4-dimethyl-5-(4-methylpiperazin-1-ylmethyl)-1H-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl}-(4-fluorfenyl)-amin [56]

Teplota tání 120,4 až 123,1 °C. MS: [M+H]⁺ = 396,4, C22H27FN5 vypočteno 3 94,5. ¹H-NMR (CDC13) δ: 1,62 (br s, 4H, CH₂), 2,10 (s, 3H, CH₃) , 2,34 (s, 3H, CH₃) , 2,37 (s, 3H,

CH₃) , 2,43 (br s, 4H, CH₂) , 3,42 (s, 2H, CH₂) , 6,67 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H), 6,91-6,96 (m, 3H, Ph-H, NH), 7,50-7,52 (m, 2H, Ph-H), 8,24 (d, 1H, J=5,4 Hz, pyrimidinyl-H), 8,30 (br s, 1H, NH).

Příklad 17

Specifičnost sloučenin podle vynálezu pro kinázu

Některé ze sloučenin ze svrchu uvedených příkladů byly sledovány na selektivitu svého působení pro kinázy. Byla použita řada proteinkináz včetně CDK a také řada funkčně nepříbuzných kináz.

Zkoušky na CDK4/cyclin Dl, CDK2/cyclin E,

CDKl/cyclin B kinázu je možno uskutečnit tak, že se sleduje fosforylace GST-Rb v příslušném systému. Tato fosforylace, vyvolaná systémem CDK4/cyclin Dl, CDK2/cyclin E nebo CDKl/cyclin B se stanoví na základě včlenění radioaktivně značeného fosfátu do GST-Rb (772-928) při použití radioaktivně značeného ATP in vitro při použití ploten s 96 vyhloubeními. Fosforylační reakční směs v celkovém množství 4 0 μΐ obsahovala 5 0 mM HEPES pH 7,4, 2 0 mM chloridu hořečnatého, 5 mM EGTA, 2 mM DTT, 20 mM β-glycerofosfátu, mM NaF, 1 mM Na₃VO₄, směs inhibitorů proteázy (Sigma, viz svrchu), BSA 0,5 mg/ml, 1 μg čištěného komplexu enzymu, 10 μΐ kuliček GST-Rb-Sepharosa, 100 μΜ ATP, 0,2 μθί ³²P-ATP. Reakce se provádí 30 minut při 30 °C za stálého protřepávání. Na konci této doby se do každého vyhloubení přidá 100 μΐ 50 mM HEPES pH 7,4 a 1 mM ATP. Celkový objem z každého vyhloubení se přenese na filtrační plotnu DFC. Plotna se 5krát promyje vždy 200 μΐ 50 mM HEPES o pH 7,4 a 1 mM ATP. Pak se do každého vyhloubení přidá 50 μΐ scintilační kapaliny a radioaktivita vzorků se měří pomocí scintilačního počítače Topcount, HP. Hodnota IC₅₀ pro různé peptidy se vypočítá při použití programu GraFit.

Zkoušky na CDK2/cyclin A kinázu je možno uskutečnit také na plotnách s 96 vyhloubeními při použití rekombinantního CDK2/cyclin A. Pufr pro provádění zkoušky obsahuje 25 mM β-glycerofosfátu, 20 mM MOPS, 5 mM EGTA, mM DTT, 1 mM NaV0₃, pH 7,4, k pufru se přidá 2 až 4 pg CDK2/cyclin A a jako substrát pRb (773-928) . Reakce se zahání přidáním směsi Mg/ATP (15 mM MgCl₂, 100 μΜ a 30 až

kBq [γ-³²Ρ] -ATP na vyhloubení a směs se inkubuj e podle potřeby 10 až 30 minut při 30 °C. Reakce sezastaví uložením do ledu a pak se materiál zfiltruje přes filtrační plotny p81 (Whatman Polyfiltronics, Kent, UK) . Po promytí 3krát vždy 75 mM kyseliny orthofosforečné se plotny vysuší, přidá se scintilační kapalina a radioaktivita se měří pomocí scintilačního počítače TopCount (Packard Instruments, Pangbourne, Berks, UK).

Účinnost kinázy PKCa je možno měřit zařazením radioaktivně značeného fosfátu v Histonu 3, jak již bylo popsáno. Reakční směs v celkovém množství 65 μΐ obsahuje 50 mM Tris HCl, 1 mM octanu vápenatého, 3 mM DTT,

0,03 mg/ml fosfatidylserin, 2,4 μg/ml PMA, 0,04 % NP40, mM Mg/Cl, 100 ng čištěné PKCa, Histon 3, 0,2 mg/ml, 100 μΜ ATP a 0,2 μCi [γ-³²Ρ]-ΑΤΡ. Reakce se provádí 15 minut při 37 °C v zařízení pro protřepávání mikroploten a zastaví se přidáním 100 μΐ 75 mM kyseliny fosforečné a uložením plotny do ledu. Pak se 50 μΐ reakční směsi přenese na filtrační plotnu P81 a po vymytí volného radioaktivního fosfátu (3x200 μΐ, 75 mM kyseliny orthofosforečné na vyhloubení) se přidá do každého vyhloubení 50 μΐ scintilační kapaliny Microscint 40 a radioaktivita se měří pomocí scintilačního počítače Topcount, HP.

Pro použití při uvedených zkouškách je možno získat CDK2 a/nebo PKC ze zdrojů, získaných rekombinantními metodami nebo z běžných dostupných zdrojů. Je možno dosáhnout současné exprese CDK2/cyclin E se zakončeními His a CDKl/cyclin B, exprese PKCa se dosáhne jednotlivě v hmyzích buňkách Sf 9, infikovaných příslušnou konstrukcí • · ··· ·

• « ·

baculoviru. Buňky se izolují 2 dny po infekci odstředěním při nízké rychlosti a z usazeniny buněk se čistí proteiny chromatografií při použití chelátu kovu. Postupuje se tak, že se usazenina hmyzích buněk rozruší v pufru A, který obsahuje 10 mM tris-HCl o pH 8,0, 150 mM NaCl, 0,02% NP40, mM β-merkaptoethanolu, 1 mM NaF, 1 mM Na₃VO₄ a směs inhibitorů proteázy (Sigma), obsahující AEBSF, pepstatin A, E 64, bestatin a leupeptin za současného působení ultrazvuku. Rozpustná frakce se vyčeří odstředěním a nanese na sloupec Ni-NTA-Agarosy (Quiagen) . Nenavážené proteiny se ze sloupce vymyjí 300 mM NaCl, 5-15 mM imidazolu v pufru A, navázané proteiny se eluují při použití 250 mM imidazolu v pufru A. Čištěné proteiny se podrobí dialýze proti pufru pro uloženi, který obsahuje 20 mM HEPES o pH 7,4, 50 mM NaCl, 2 mM DTT, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 0,02% NP40, a 10 % objemových glycerolu, materiál se rozdělí na podíly a uložení při teplotě -70°C. PKC-α-6xHis je možno čistit stejným způsobem, avšak při použití odlišných pufrů, 50 mM NaH₂PO₄, pH 8,0 a 0,05% Triton X-100 místo tris NP40.

Výsledky z následující tabulky 1 ukazují, že zkoumané látky mají vysoký stupeň selektivity pro inhibici CDK.

Tabulka 1

Sloučenina	CDK2/cyclin E (IC₅₀, μΜ)	Sloučenina	CDK2/cyclin E (IC₅₀, μΜ)
1	l,o ± 0,7	38	0,86
2	0,04	39	1,02
3	0,5	40	0,15
4	1,3 ± 0,4	41	0,05
5	1,7	42	0,76
6	1,3	43	0,54

«· ···· • · · • · · • · · · • · · ·

7	2,9	44	0,22
8	1,4	46	1,79
12	0,90	47	0,06
16	1,52	48	0,96
17	1,73	50	0,55
31	0,03	51	0,37
32	0,09	52	0,73
33	0,09	53	0,87
34	0,18	54	0,14
35	0,55	55	0,87
36	0,04	56	1,51
37	0,39

Příklad 18

Antiproliferační účinek vybraných látek

Vybrané sloučeniny ze svrchu uvedených přikladu byly použity ke standardním zkouškám na proliferaci buněk při použití řady různých nádorových lidských buněčných linií. Byly provedeny obvyklé zkoušky trvající 72 hodin při použití thiazolylové modři MTT, chemicky jde o 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-difenyltetrazolimbromid, zkouška se provádí podle publikací Haselebrger K., Peterson D. C., Thomas D. G., Darling, J. L., Anti Cancer Drugs 1996, 7, 331-8, Loveland, Β. E., Jozns, T. G., Mackay, I. R. , Vaillant, F., Wang, Z. X., Hertzog, P. J., Biochemistry International 1992, 27, 501-10). Lidské nádorové buněčné linie byly získány z veřejné sbírky ATCC (American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manessas,

VA 20110-2209, USA).

Výsledky, které jsou shrnuty v tabulce 2 prokazují antiproliferativni účinek sloučeniny podle vynálezu.

• · ·· *··♦ ··

Tabulka 2

	Cytotoxicita (IC₅₀, μΜ)
	Lidské nádorové buněčné linie	Netransformované buněčné linie
Slouč.	A549	HeLa	HT2 9	MCF7	Saos-2	Hs27	IMR90	W138
2	3,30		3,30		6,60
12	15,00		3,10		17,00
16	4,39
31	0,40	0,26	0,31	0,26	0,74	18,9	14,1	9,7
32	2,47	1,38	2,41	1,93	2,89	15,1	20,8	9,6
33	0,88	0,76	1,83	1,03	0,89	4,2	14,1	9,9
34	3,64		0,95		3,40
35	0,51	0,09	0,11	0,45	0,75	35,1	37,3	21,3
36	1,12		2,56		0,90
37	0,47		0,28		1,04
38	3,60		0,72		3,12
39	4,37		3,27		5,88
40	0,86		1,47		1,13
41	2,95		2,11		5,80
42	1,49		0,28		2,23
43	1,41		0,17		1,50
44	1,36		1,92		2,61
47	3,13		3,11		3,78
48	3,05		0,61		2,65
51	7,56		2,92		12,40
53	0,97		1,31		1,61
54	2,76		3,20		0,70
56	13,80		5,09		14,15

Zastupuj e:

·· ··· ♦

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Inhibitory kináz obecného vzorce I kde jeden ze symbolů X¹ a X² znamená NR¹⁰ a druhý z těchto symbolů znamená CR⁹,

Z znamená NH, NHCO, NHSO₂, NHCH₂, CH₂, CH₂CH₂ nebo CH=CH,

R , R , R , R a R nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl, aryl, aralkyl, heterocyklickou skupinu, atom halogenu, N0₂, CN, OH, alkoxyskupinu, aryloxyskupinu, (R''')_nNH₂, (R' ' ' )_nNH-R' , (R' )_nN- (R' ) (R ) , NH-aryl, N-(aryl)₂, COOH,

COO-R' , COO-aryl, CONH₂, CONH-R' , CON-(R') (R ) , CONH-aryl, CON-(aryl)₂, SO₃H, SO₂NH₂, CF₃, CO-R' nebo CO-aryl, přičemž alkylová, arylové, aralkylové a heterocyklické skupiny jsou popřípadě dále substituovány jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny atom halogenu, NO₂, CN, OH,

O-methyl, NH₂, COOH, CONH₂ a CF₃,

R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ a R⁸ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, substituovaný nebo nesubstituovaný nišší alkyl, atom halogenu, NO₂, CN, OH, substituovaná nebo nesubstituovaná alkoxyskupina, NH₂, NH-R', N- (R') (R'') ,

COOH, COO-R', CONH₂, CONH-R', CON-(R') (R ) , SO₃H, SO₂NH₂nebo CF₃, ·· ···♦ kde R' , R' ' a R' ' ' se nezávisle volí z alkylových skupin, které mohou být stejné nebo různé a n znamená 0 nebo 1, za předpokladu, že v případě, že R¹ a R² znamenají atomy vodíku, X¹ znamená NH, X² znamená CH a R³ znamená atom vodíku, není fenylová skupina nesubstituovaná a dále má odlišný význam od 4-ethylové, 3-methylové, 3-(1,1,2,2-tetrafluorethoxyskupiny) , a 3,4,5-trimethoxyskupiny v případě, že ostatní skupiny R⁴ až R⁸ znamenají atomy vodíku, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek.
2. Inhibitory podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž X¹ a X² znamenají CR⁹ a NH,

R¹, R², R³ a R⁹ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkyl, aryl, aralkyl, heterocyklickou skupinu, atom halogenu, N0₂, CN, OH, alkoxy skupinu, aryloxyskupinu, (R')_nNH₂, (R' ' ' ) _nNH-R', (R ' ) _nN-(R') (R ) , COOH, COO-R',

CONH₂, CONH-R', CON-(R') (R ) , SO₃H, SO₂NH₂, CF₃ a CO-R' , přičemž alkylové, arylové a aralkylové skupiny jsou popřípadě dále substituovány jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny atom halogenu, NO₂, CN, OH,

O-methyl, NH₂, COOH, CONH₂ a CF₃,

Z se volí ze skupiny NH, NHSO₂ a NHCH₂,

R⁴ až R⁸ se volí nezávisle ze skupiny atom vodíku, atom halogenu, nitroskupina, aminoskupina, aminoalkyl, hydroxyskupina, alkoxyskupina, karbamoyl, sulfamyl,

N(R')(R''), Cl-C4alkyl a substituovaný Cl-C4alkyl.
3. Inhibitory podle nároku 1 nebo 2, obecného vzorce I, v němž Z znamená NH a R³ znamená H.
4. Inhibitory podle nároku 3, obecného vzorce I, v němž se R¹, R² a R⁹ nezávisle volí ze skupiny atom vodíku nebo halogenu, N0₂, CN, (R ') _nN- (R') (R ) , CONH₂, alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku a heterocyklické skupina.
5. Inhibitory podle nároku 4, obecného vzorce I, v němž v případě, že R¹ znamená atom halogenu, jde s výhodou o atom chloru nebo bromu a v případě, že

R¹ znamená alkylaminoskupinu, jde s výhodou o diethylaminomethyl nebo dimethylaminomethyl a v případě, že R¹ znamená heterocyklickou skupinu, jde s výhodou o morfolin-4-ylmethyl nebo 4-methylpiperazin-l-ylmethyl.
6. Inhibitory podle nároků 1 až 5, obecného vzorce I, v němž R¹ znamená H nebo CN a R² a R⁹ znamenaj i methyl.
7. Inhibitory podle nároku 6, obecného vzorce I, v němž R¹ znamená H.
8. Inhibitory podle nároku 6, obecného vzorce I, v němž R¹ znamená CN.
9. Inhibitory podle nároku 1 až 8, obecného vzorce I, v němž

R⁴, R⁵, R^s, R⁷ a R⁸ znamená nezávisle pro jednotlivé symboly atom vodíku, nesubstituovaný nižší alkyl, atom halogenu,

N0₂, CN, OH, N-(R')(R) nebo CF₃, kde R', R'' a R''' nezávisle znamenají stejné nebo odlišné alkylové skupiny a n znamená 0 nebo 1.
10. Inhibitory podle nároku 9, obecného vzorce I, v němž • ·

R⁴ až R⁸ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku nebo fluoru, NH₂, N0₂, OH, Cl, Br, I, CN, CH₂OH, CF₃ a dimethylaminoskupina.
11. Inhibitory podle nároku 9 nebo 10, obecného vzorce I, v němž R⁴ a R⁸ znamenají atomy vodíku.
12. Inhibitory podle nároku 1 až 11, obecného vzorce I, které zahrnují 2 -[N-(fenyl)]-4 -(2,4-dimethylpyrrol-3 -yl)pyrimidinaminy, v nichž fenylová skupina je substituována v poloze 2, 3, 4 nebo 5 alespoň jedním substituentem ze skupiny H, F, NH₂, NO₂, OH, Cl, Br, I, CN, CH₂OH, CF₃ nebo OMe.
13. Inhibitory podle nároku 12, obecného vzorce I, v němž je fenylová skupina s výhodou monosubstituována F, NH₂,

NO₂, OH, Cl, Br, I, CN, CH₂OH, CF₃ nebo OMe v poloze 2, 3, 4 nebo 5 nebo je disubstituována, takže vznikají

2.4- difluoro-, 3,5-difluoro-, 3,4-difluoro-, 2,4-dichloro-,

3.5- dichloro-, 3,4-dichloro- nebo 4-chloro-3-trifluormethylfenylová deriváty.
14. Inhibitory podle nároků 1 až 11, obecného vzorce I, které zahrnuje 2 -[N-(fenyl)]-4-(3,5-dimethyl-IH-pyrrol-2 -karbonitril)pyrimidinaminy, v nichž je fenylová skupina substituována v poloze 2, 3 nebo 4 alespoň jedním substituentem ze skupiny F, NH(CH₃)₂, NO₂, OH, Cl, Br, I nebo CF₃.
15. Inhibitory podle nároku 14, obecného vzorce I, v němž je fenylová skupina s výhodou monosubstituovaná některou ze skupin F, NH(CH₃)₂, NO₂, OH, I nebo CF₃ v kterékoliv z poloh

44 »444

4 4 ·

4*4

4 4 · 4

4 4 4 4

44 44

3 nebo 4, nebo je disubstituovaná, takže vznikají 4-methyl3-nitro, 3-jod-4-methyl, 4-chloro-3-methyl, 3-hydroxy-4-methyl, 4-fluoro-3-methyl nebo 4-methyl-3-fluorované fenylové deriváty.
16. Inhibitory podle nároků 1 až 5, obecného vzorce I, které zahrnují 2 - [N-(f enyl) ]-4-(2,4-dimethyl-5-nitro-1Hpyrrol-3-yl)pyrimidinaminy v nichž je fenylová skupina s výhodou monosubstituovaná substituenty F, NH(CH₃)₂, NO₂, OH, I nebo CF₃ v poloze 4.
17. Inhibitory podle nároku 16, obecného vzorce I, v némž substituentem na fenylové skupině je atom fluoru nebo skupina NH(CH₃)₂.
18. Inhibitory podle nároků 1 až 5, obecného vzorce I ze skupiny 2- [N- (fenyl) ] -4- (2,4-dimethyl-5-halogen-lH-pyrrol-3-yl)pyrimidinaminů v nichž je fenylová skupina s výhodou monosubstituovaná substituenty F, NH(CH₃)₂, NO₂, OH, I nebo CF₃ v poloze 3 nebo 4.
19. Inhibitory podle nároku 18, obecného vzorce I, v němž je fenylová skupina substituována 4-fluoro- nebo

3-nitroskupinou, přičemž halogenovou skupinou je s výhodou atom chloru nebo bromu.
20. Inhibitory podle nároků 1 až 5, obecného vzorce I ze skupiny 2- [N- (fenyl) ] -4- (2,4-dimethyl-5-dialkylaminoalkyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidinaminů v nichž je fenylová skupina monosubstituovaná substituenty F, NH(CH₃)₂, NO₂, OH, I nebo CF₃ v poloze 4.

·· ····
21. Inhibitory podle nároku 20, obecného vzorce I, v nichž je fenylová skupina substituována atomem fluoru, přičemž dialkylaminoalkylovou skupinou je s výhodou diethylaminomethyl nebo dimethylaminomethyl.
22. Inhibitory podle nároků 1 až 5, obecného vzorce I ze skupiny 2-[N-(fenyl)]-4-(2,4-dimethyl-5-(heterocyklické skupina)-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidinaminů v nichž je fenylová skupina s výhodou monosubstituovaná substituenty F,

NH(CH₃)₂, NO_2z OH, I nebo CF₃ v poloze 4.
23. Inhibitory podlé nároku 22, obecného vzorce I, v němž je substituentem na fenylové skupině atom fluoru, přičemž heterocyklickou skupinou je s výhodou 5-morfolin-4-ylmethyl nebo 4-methylpiperazin-l-ylmethyl.
24. Inhibitory podle nároku 1, obecného vzorce I ze skupiny [4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-fluorfenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (3-nitrofenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-jodfenyl)-amin, (3,4-difluorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, (4-chlorfenyl)-[4 -(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin,

·· • · • • o 99 • r · • • • 9 999 99

• · · • · · • · · · • * · · «· ·· ·· ···· (3,5-dif luorf enyl) - [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-amin,

4- [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-ylamino] -fenol,

3- [4- (2,4-dimethyl - lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-ylamino] -fenol, (2,4-difluorfenyl)- [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)pyrimidin-2-yl]-amin, (2,4-dichlorfenyl)- [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)pyrimidin-2-yl]-amin, (4-chlor-3-trifluormethylfenyl) - [4- (2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, [4-(2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-trifluormethylfenyl)-amin, [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (3-trifluormethylfenyl)-amin, (3-chlorfenyl)- [4-(2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl)-pyrimidin2-yl]-amin,

N-[4-(2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-Ν' ,N' -dimethylbenzen-1,4-diamin, (3-chlor-4-jodfenyl) - [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-amin, [4-(2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-fluor-4-jodfenyl)-amin,

3.5- dimethyl-4-[2-(3-nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

3.5- dimethyl-4-[2-(4-trifluormethylfenylamino)-pyrimidin-4 -yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-jodfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

3,5-dimethyl-4-[2 -(4-methyl-3-nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-jod-4-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2 -(4-chlor-3-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-hydroxy-4-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-fluor-3-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-fluor-4-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-dimethylaminofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril, amid kyseliny 4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karboxylové, [4-(3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-fluorfenyl)-amin, (4-fluorfenyl)- [4- (1,2,4-trimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, [4-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin,

N-[4-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-Ν',Ν'-dimethylbenzen-1,4-diamin, [4-(5-amino-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(b-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin, [4-(5-chlor-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4- (5-diethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4- (5-dimethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4- (2,4-dimethyl-5-morfolin-4-ylmethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin a {4-[2,4-dimethyl-5-(4-methylpiperazin-l-ylmethyl)-1H-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl} - (4-fluorfenyl) -amin.
25. Inhibitory podle nároku 24, obecného vzorce I ze skupiny [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidín-2-yl]- (4-fluorfenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (3-nitrofenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl~lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl] - (4-jodfenyl)-amin, (3,4-difluorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-amin, (4-chlorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, • · · · · · (3,5-difluorfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin,

4-[4-(2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-ylamino]-fenol,

3-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-ylamino] -fenol, [4-(2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-trifluormethylfenyl)-amin, (3-chlor-4-jodfenyl)-[4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, [4-(2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (3-fluor-4-jodfenyl)-amin,

3,5-dimethyl-4 -[2-(3-nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidín-4-yl]-3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

3,5-dimethyl-4- [2-(4-trifluormethylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-jodfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril, • · · ·

4- [2- (3-hydroxyfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

3,5 -dimeth.yl-4- [2 - (4-methyl-3-nitrofenylamino) -pyrimidin-4 -yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3-jod-4-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2-(4-chlor-3-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3-hydroxy-4-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-fluor-3-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3-fluor-4-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2-(4-dimethylaminofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-2-karbonitril, amid kyseliny 4-[2-(4-fluorfenylamino) -pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karboxylové, (4-fluorfenyl)- [4-(1,2,4-trimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-amin, [4-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin,

N-[4-(2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-Ν',N'-dimethylbenzen-1,4-diamin, [4-(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin, [4-(5-chlor-2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-díethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-dimethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-5-morfolin-4-ylmethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin a {4-[2,4-dimethyl-5-(4-methylpiperazin-l-ylmethyl)-1H-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl}-(4-fluorfenyl)-amin.
26. Inhibitory podle nároku 25, obecného vzorce I ze skupiny [4-(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin, • · [4- (2,4-dimethyl-ΙΗ-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] - (4-jodfenyl)-amin, [4- (2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] - (4-trifluormethylfenyl)-amin,

3.5- dimethyl-4- [2- (3-nitrofenylamino) -pyrimidin-4-yl] -1H-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-f luorf enylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl - IH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-hydroxyfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl- 1H-pyrrol-2-karbonitril,

3.5- dimethyl-4 - [2- (4 - trif luormethylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (4-jodfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl- 1H-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3-hydroxyfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

3.5- dimethyl-4- [2- (4-methyl-3-nitrofenylamino) -pyrimid.in-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3 -jod-4-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-chlor-3-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril, • ·

4- [2- (3-hydroxy-4-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-fluor-3-methylfenylamino)-pyrimidín-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-fluor-4-methylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-dimethylaminofenylamino) -pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karbonitril, amid kyseliny 4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-lH-pyrrol-2-karboxylové, [4- (2,4-dimethyl-5-nitro-IH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] -(4-fluorfenyl)-amin,

N- [4- (2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] -Ν',N'-dimethylbenzen-1,4-diamin, [4-(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-brom-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin, [4-(5-chlor-2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-fluorfenyl)-amin, [4-(5-diethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin, • · [4-(5-dimethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin a [4-(2,4-dimethyl-5-morfolin-4-ylmethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin.
27. Inhibitory podle nároku 26, obecného vzorce I ze skupiny [4-(2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]-(3-nitrofenyl)-amin, [4 -(2,4-dimethyl-IH-pyrrol-3-yl)-pyrimidin-2-yl]- (4-jodfenyl)-amin,

3.5- dimethyl-4-[2-(3-nitrofenylamino)-pyrimidin-4-yl]-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidín-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-hydroxyfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

3.5- dimethyl-4-[2-(4-trifluormethylfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-IH-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(4-jodfenylamino)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril,

4-[2-(3-hydroxyfenylamíno)-pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl-1H-pyrrol-2-karbonitril, ·· ····

3,5-dimethyl-4- [2- (4-methyl-3-nitrofenylamino) -pyrimidin-4-yl]-lH-pyrrol-2-karbonitril,

4- [2- (3-hydroxy-4-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl - lH-pyrrol -2 -karbonitril,

4- [2- (4-fluor-3-methylfenylamino) -pyrimidin-4-yl] -3,5-dimethyl -lH-pyrrol-2 -karbonitril, amid kyseliny 4-[2-(4-fluorfenylamino)-pyrimidin-4-yl]-3,5- dimethyl - lH-pyrrol -2 - karboxylové, [4- (2,4-dimethyl-5-nitro-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl] -(4-fluorfenyl)-amin, [4- (5-brom-2,4-dimethyl - lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl ] -(3-nitrofenyl)-amin a [4- (5-diethylaminomethyl-2,4-dimethyl-lH-pyrrol-3-yl) -pyrimidin-2-yl]-(4-fluorfenyl)-amin.
28. Inhibitory podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž X¹ a X² znamenají NH a CR⁹,

R¹, R², R³ a R⁹ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, alkyl, aryl, aralkyl, heterocyklickou skupinu, atom halogenu, N0₂, CN, OH, alkoxyskupinu, aryloxyskupinu, (R')_nNH₂, (R')_nNH-R', (R ' ) _nN-(R') (R ) , COOH, COO-R' ,

CONH₂, CONH-R' , CON- (R' ) (R ) , SO₃H, SO₂NH₂, CF₃ a CO-R' , přičemž alkylové, arylové a aralkylové skupiny jsou popřípadě dále substituovány jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny atom halogenu, N0₂, CN, OH,

0-methyl, NH₂, COOH, CONH₂ a CF₃,

0 » 0 0 0 0

Z se voli ze skupiny NH, NHSO₂ a NHCH₂,

R⁴, R⁵ a R⁸ se volí nezávisle ze skupiny atom vodíku, atom halogenu, nitroskupina, aminoskupina, aminoalkyl, hydroxyskupina, alkoxyskupina, karbamoyl, sulfamyl,

N(R')(R^ř') , Cl-C4alkyl a substituovaný Cl-C4alkyl,

R⁶ se volí ze skupiny atom vodíku, atom halogenu, nitroskupina, aminoskupina, aminoalkyl, hydroxyskupina, alkoxyskupina, karbamoyl, sulfamyl, N(R')(R''), methyl, propyl, butyl a substituovaný Cl-C4alkyl,

R⁷ se volí ze skupiny atom vodíku, atom halogenu, nitroskupina, aminoskupina, aminoalkyl, hydroxyskupina, karbamoyl, sulfamyl, N(R')(R''), C2-C4alkyl a substituovaný Cl-C4alkyl.
29. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že jako účinnou složku obsahuje inhibitory podle některého z nároků 1 až 28 nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli spolu s farmaceuticky přijatelnými pomocnými látkami.
30. Použití inhibitorů podle některého z nároků 1. až 28 nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí pro léčení proliferativních poruch.
31. Použití podle nároku 30, vyznačuj ící se tím, že proliferativní poruchou je zhoubný nádor nebo leukemie.
32. Použití podle nároku 30 nebo 31, vyznačující se tím, že se inhibitor podává v množství, dostatečném pro inhibici alespoň jednoho enzymu

CDK.
33. Použití podle nároku 22, při němž enzymem CDK je CDK2 a/nebo CDK4.
34. Použití inhibitorů obecného vzorce II kde jeden ze symbolů X¹ a X² znamená NH a druhý z těchto symbolů znamená CR⁹,

Z znamená NH, NHCO, NHSO₂, NHCH₂, CH₂, CH₂CH₂ nebo CH=CH,

R¹, R², R³, R⁹ a R¹⁰ nezávisle znamenají atom vodíku, alkyl, aryl, aralkyl, heterocyklickou skupinu, atom halogenu, N0₂, CN, OH, alkoxyskupinu, aryloxyskupinu, (R''')_nNH₂, (R''')_nNH-R', (R ' )_nN-(R') (R ) , NH-aryl, N-(aryl)₂, COOH,

COO-R', COO-aryl, CONH₂, CONH-R', CON-(R')(R⁷'), CONH-aryl, CON-(aryl)₂, SO₃H, SO₂NH_2/ CF_3z CO-R' nebo CO-aryl, přičemž alkylové, arylové, aralkylové a heterocyklické skupiny jsou popřípadě dále substituovány jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny atom halogenu, N0₂, CN, OH,

O-methyl, NH₂, COOH, CONH₂ a CF₃,

R⁴, R^s, R⁶, R⁷ a R⁸ se nezávisle volí ze skupiny atom vodíku, substituovaný nebo nesubstituovaný nišší alkyl, atom halogenu, N0₂, CN, OH, substituovaná nebo nesubstituovaná alkoxyskupina, NH₂, NH-R', N-(R')(R''),

COOH, COO-R', CONH₂, CONH-R', CON-(R') (R ) , SO₃H, SO₂NH₂nebo CF₃,

AA AAAA ♦ · AAA • AAA

AAAA A

A AAAA

A AAA AA AA kde R', R'' a R''' se nezávisle volí z alkylových skupin, které mohou být stejné nebo různé a n = 0 za předpokladu, že v případě, že R¹ a R² znamenají atomy vodíku, X¹ znamená NH, X² znamená CH a R³ znamená atom vodíku, má fenylová skupina odlišný význam od 3-(1,1,2,2-tetrafluorethoxyskupiny) , a

3,4,5-trimethoxyskupiny v případě, že ostatní skupiny R⁴ až R⁸ znamenají atomy vodíku, jakož i farmaceuticky přijatelných soli těchto látek pro výrobu farmaceutického prostředku pro léčení proliferativnich onemocnění.
35. Použití podle nároku 34,vyznačující se tím, že jde o použití inhibitoru podle některého z nároků 2 až 13.