CZ20031569A3 - Polynukleotidy obsahující fragment sekvence v protisměru od genu CARP, vektory a expresní kazety, které je obsahují, a jejich použití - Google Patents
Polynukleotidy obsahující fragment sekvence v protisměru od genu CARP, vektory a expresní kazety, které je obsahují, a jejich použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20031569A3 CZ20031569A3 CZ20031569A CZ20031569A CZ20031569A3 CZ 20031569 A3 CZ20031569 A3 CZ 20031569A3 CZ 20031569 A CZ20031569 A CZ 20031569A CZ 20031569 A CZ20031569 A CZ 20031569A CZ 20031569 A3 CZ20031569 A3 CZ 20031569A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- polynucleotide
- gene
- expression
- sequence
- cassette
- Prior art date
Links
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title claims abstract description 70
- 239000013598 vector Substances 0.000 title claims abstract description 43
- 101710086403 Carbonic anhydrase-related protein Proteins 0.000 title claims abstract 3
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 title claims description 53
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 title claims description 53
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 title claims description 53
- 239000012634 fragment Substances 0.000 title claims description 23
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 79
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims abstract description 25
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims abstract description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims abstract description 7
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 51
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 30
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 22
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 18
- 210000002064 heart cell Anatomy 0.000 claims description 13
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 13
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 12
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 10
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 10
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 10
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 claims description 9
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 claims description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 8
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 230000010076 replication Effects 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 206010007572 Cardiac hypertrophy Diseases 0.000 claims description 5
- 208000006029 Cardiomegaly Diseases 0.000 claims description 5
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 claims description 5
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 claims description 5
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims description 5
- 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 claims description 4
- 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 claims description 4
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 claims description 4
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 4
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 4
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 4
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 claims description 3
- 208000009525 Myocarditis Diseases 0.000 claims description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 3
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 claims description 3
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 claims description 3
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 claims description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 3
- 102000009840 Angiopoietins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010009906 Angiopoietins Proteins 0.000 claims description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 2
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 claims description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 claims description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 claims description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 claims description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 claims description 2
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 claims description 2
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 claims description 2
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 claims description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 2
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims description 2
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 claims description 2
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 claims description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 claims 1
- 101150021185 FGF gene Proteins 0.000 claims 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 claims 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 claims 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 claims 1
- 101100491162 Mus musculus Ankrd1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 claims 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 claims 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 claims 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims 1
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 claims 1
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 claims 1
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 claims 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 abstract description 18
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 abstract description 13
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 abstract description 10
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 abstract description 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 abstract description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 abstract description 6
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 abstract description 5
- -1 constructs Substances 0.000 abstract description 2
- 102100039181 Ankyrin repeat domain-containing protein 1 Human genes 0.000 abstract 2
- 101710122305 Ankyrin repeat domain-containing protein 1 Proteins 0.000 abstract 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 34
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 33
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 17
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 17
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 15
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 15
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 12
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 10
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 10
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 10
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 8
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 241000714474 Rous sarcoma virus Species 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 5
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 5
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 5
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 5
- 102000003971 Fibroblast Growth Factor 1 Human genes 0.000 description 4
- 108090000386 Fibroblast Growth Factor 1 Proteins 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 4
- NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N N-formyl-L-phenylalanine Chemical compound O=CN[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC=C1 NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N 0.000 description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 4
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 4
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 4
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 3
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 229940029303 fibroblast growth factor-1 Drugs 0.000 description 3
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 3
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 3
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 3
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 3
- TZDNWXDLYFIFPT-BJDJZHNGSA-N Ala-Ile-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O TZDNWXDLYFIFPT-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- DPNWSMBUYCLEDG-CIUDSAMLSA-N Asp-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DPNWSMBUYCLEDG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- 241000713704 Bovine immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 241000713730 Equine infectious anemia virus Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- HVKAAUOFFTUSAA-XDTLVQLUSA-N Glu-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HVKAAUOFFTUSAA-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 2
- UHPAZODVFFYEEL-QWRGUYRKSA-N Gly-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CN UHPAZODVFFYEEL-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- MXIULRKNFSCJHT-STQMWFEESA-N Gly-Phe-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=CC=C1 MXIULRKNFSCJHT-STQMWFEESA-N 0.000 description 2
- FULZDMOZUZKGQU-ONGXEEELSA-N Gly-Val-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)CN FULZDMOZUZKGQU-ONGXEEELSA-N 0.000 description 2
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101000652736 Homo sapiens Transgelin Proteins 0.000 description 2
- 241000701024 Human betaherpesvirus 5 Species 0.000 description 2
- OMDWJWGZGMCQND-CFMVVWHZSA-N Ile-Tyr-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N OMDWJWGZGMCQND-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 2
- DLCOFDAHNMMQPP-SRVKXCTJSA-N Leu-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DLCOFDAHNMMQPP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- BGZCJDGBBUUBHA-KKUMJFAQSA-N Leu-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BGZCJDGBBUUBHA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N Leu-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 2
- IPSDPDAOSAEWCN-RHYQMDGZSA-N Lys-Met-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IPSDPDAOSAEWCN-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- ODTZHNZPINULEU-KKUMJFAQSA-N Lys-Phe-Asn Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N ODTZHNZPINULEU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- HLZORBMOISUNIV-DCAQKATOSA-N Met-Ser-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C HLZORBMOISUNIV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 101000714513 Mus musculus Carbonic anhydrase-related protein Proteins 0.000 description 2
- 102000016349 Myosin Light Chains Human genes 0.000 description 2
- 108010067385 Myosin Light Chains Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 102000000536 PPAR gamma Human genes 0.000 description 2
- 108091008767 PPARγ2 Proteins 0.000 description 2
- 102000003728 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108090000029 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Proteins 0.000 description 2
- 101000622060 Photinus pyralis Luciferin 4-monooxygenase Proteins 0.000 description 2
- 108020005091 Replication Origin Proteins 0.000 description 2
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- 241000713311 Simian immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 102100031013 Transgelin Human genes 0.000 description 2
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 2
- LCHZBEUVGAVMKS-RHYQMDGZSA-N Val-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)[C@@H](C)O)C(O)=O LCHZBEUVGAVMKS-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- 108010051583 Ventricular Myosins Proteins 0.000 description 2
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 2
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 108010057952 lysyl-phenylalanyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 210000002363 skeletal muscle cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 2
- HBZBAMXERPYTFS-SECBINFHSA-N (4S)-2-(6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,2-f][1,3]benzothiazol-2-yl)-4,5-dihydro-1,3-thiazole-4-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(=N1)c1nc2cc3CCNc3cc2s1 HBZBAMXERPYTFS-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- VUFNLQXQSDUXKB-DOFZRALJSA-N 2-[4-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]butanoyloxy]ethyl (5z,8z,11z,14z)-icosa-5,8,11,14-tetraenoate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(=O)OCCOC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 VUFNLQXQSDUXKB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 101150096316 5 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 241000701242 Adenoviridae Species 0.000 description 1
- ZIWWTZWAKYBUOB-CIUDSAMLSA-N Ala-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ZIWWTZWAKYBUOB-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N Ala-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KUDREHRZRIVKHS-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- HMRWQTHUDVXMGH-GUBZILKMSA-N Ala-Glu-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN HMRWQTHUDVXMGH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- CKLDHDOIYBVUNP-KBIXCLLPSA-N Ala-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CKLDHDOIYBVUNP-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N Ala-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PMQXMXAASGFUDX-SRVKXCTJSA-N Ala-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CCCCN PMQXMXAASGFUDX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N Ala-Ser-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- HOVPGJUNRLMIOZ-CIUDSAMLSA-N Ala-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C)N HOVPGJUNRLMIOZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LYILPUNCKACNGF-NAKRPEOUSA-N Ala-Val-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)N LYILPUNCKACNGF-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- 102100022987 Angiogenin Human genes 0.000 description 1
- 101800000733 Angiotensin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102400000345 Angiotensin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- JTWOBPNAVBESFW-FXQIFTODSA-N Arg-Cys-Asp Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)CN=C(N)N JTWOBPNAVBESFW-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- FLYANDHDFRGGTM-PYJNHQTQSA-N Arg-Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N FLYANDHDFRGGTM-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 1
- GRRXPUAICOGISM-RWMBFGLXSA-N Arg-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O GRRXPUAICOGISM-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 1
- OQPAZKMGCWPERI-GUBZILKMSA-N Arg-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O OQPAZKMGCWPERI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- CMLGVVWQQHUXOZ-GHCJXIJMSA-N Asn-Ala-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O CMLGVVWQQHUXOZ-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N Asn-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MKJBPDLENBUHQU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LMIWYCWRJVMAIQ-NHCYSSNCSA-N Asn-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N LMIWYCWRJVMAIQ-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- VGRHZPNRCLAHQA-IMJSIDKUSA-N Asp-Asn Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O VGRHZPNRCLAHQA-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- UGKZHCBLMLSANF-CIUDSAMLSA-N Asp-Asn-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UGKZHCBLMLSANF-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N Asp-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O WSGVTKZFVJSJOG-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- YFSLJHLQOALGSY-ZPFDUUQYSA-N Asp-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YFSLJHLQOALGSY-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- JNNVNVRBYUJYGS-CIUDSAMLSA-N Asp-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O JNNVNVRBYUJYGS-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SCQIQCWLOMOEFP-DCAQKATOSA-N Asp-Leu-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O SCQIQCWLOMOEFP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N Asp-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- GWWSUMLEWKQHLR-NUMRIWBASA-N Asp-Thr-Glu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)O GWWSUMLEWKQHLR-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 241000701802 Aviadenovirus Species 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 101100496968 Caenorhabditis elegans ctc-1 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000000584 Calmodulin Human genes 0.000 description 1
- 108010041952 Calmodulin Proteins 0.000 description 1
- 241000701157 Canine mastadenovirus A Species 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 101150044789 Cap gene Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000713756 Caprine arthritis encephalitis virus Species 0.000 description 1
- 108090000565 Capsid Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010051609 Cardiac Myosins Proteins 0.000 description 1
- 102000013602 Cardiac Myosins Human genes 0.000 description 1
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 description 1
- 102100028892 Cardiotrophin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100035882 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 1
- 102100038909 Caveolin-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 1
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 1
- UXUSHQYYQCZWET-WDSKDSINSA-N Cys-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O UXUSHQYYQCZWET-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- GUKYYUFHWYRMEU-WHFBIAKZSA-N Cys-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GUKYYUFHWYRMEU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 102000001039 Dystrophin Human genes 0.000 description 1
- 108010069091 Dystrophin Proteins 0.000 description 1
- 101150029662 E1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000009024 Epidermal Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010008655 Epstein-Barr Virus Nuclear Antigens Proteins 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100028072 Fibroblast growth factor 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100028073 Fibroblast growth factor 5 Human genes 0.000 description 1
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- NCWOMXABNYEPLY-NRPADANISA-N Glu-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NCWOMXABNYEPLY-NRPADANISA-N 0.000 description 1
- JPHYJQHPILOKHC-ACZMJKKPSA-N Glu-Asp-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O JPHYJQHPILOKHC-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- HJIFPJUEOGZWRI-GUBZILKMSA-N Glu-Asp-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N HJIFPJUEOGZWRI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- HKTRDWYCAUTRRL-YUMQZZPRSA-N Glu-His Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 HKTRDWYCAUTRRL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- ZPASCJBSSCRWMC-GVXVVHGQSA-N Glu-His-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZPASCJBSSCRWMC-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- ZCOJVESMNGBGLF-GRLWGSQLSA-N Glu-Ile-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O ZCOJVESMNGBGLF-GRLWGSQLSA-N 0.000 description 1
- ZSWGJYOZWBHROQ-RWRJDSDZSA-N Glu-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O ZSWGJYOZWBHROQ-RWRJDSDZSA-N 0.000 description 1
- KRRFFAHEAOCBCQ-SIUGBPQLSA-N Glu-Ile-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KRRFFAHEAOCBCQ-SIUGBPQLSA-N 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- YHOJJFFTSMWVGR-HJGDQZAQSA-N Glu-Met-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YHOJJFFTSMWVGR-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- VNCNWQPIQYAMAK-ACZMJKKPSA-N Glu-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VNCNWQPIQYAMAK-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- BDISFWMLMNBTGP-NUMRIWBASA-N Glu-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BDISFWMLMNBTGP-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- YSWHPLCDIMUKFE-QWRGUYRKSA-N Glu-Tyr Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 YSWHPLCDIMUKFE-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- MXXXVOYFNVJHMA-IUCAKERBSA-N Gly-Arg-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)CN MXXXVOYFNVJHMA-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- RPLLQZBOVIVGMX-QWRGUYRKSA-N Gly-Asp-Phe Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O RPLLQZBOVIVGMX-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- MFBYPDKTAJXHNI-VKHMYHEASA-N Gly-Cys Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@@H](CS)C([O-])=O MFBYPDKTAJXHNI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- FIQQRCFQXGLOSZ-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FIQQRCFQXGLOSZ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- OMOZPGCHVWOXHN-BQBZGAKWSA-N Gly-Met-Ser Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)CN OMOZPGCHVWOXHN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N Gly-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- FEUPVVCGQLNXNP-IRXDYDNUSA-N Gly-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FEUPVVCGQLNXNP-IRXDYDNUSA-N 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- FRJIAZKQGSCKPQ-FSPLSTOPSA-N His-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 FRJIAZKQGSCKPQ-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 1
- DGLAHESNTJWGDO-SRVKXCTJSA-N His-Ser-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N DGLAHESNTJWGDO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- ZHMZWSFQRUGLEC-JYJNAYRXSA-N His-Tyr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZHMZWSFQRUGLEC-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- 101000889396 Homo sapiens Ankyrin repeat domain-containing protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000740981 Homo sapiens Caveolin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101001060274 Homo sapiens Fibroblast growth factor 4 Proteins 0.000 description 1
- 101001060267 Homo sapiens Fibroblast growth factor 5 Proteins 0.000 description 1
- 241000714260 Human T-lymphotropic virus 1 Species 0.000 description 1
- 241000598171 Human adenovirus sp. Species 0.000 description 1
- 241000713340 Human immunodeficiency virus 2 Species 0.000 description 1
- CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N Ile(5)-angiotensin II Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C([O-])=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=[NH2+])NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC([O-])=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N 0.000 description 1
- KIMHKBDJQQYLHU-PEFMBERDSA-N Ile-Glu-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N KIMHKBDJQQYLHU-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- KBAPKNDWAGVGTH-IGISWZIWSA-N Ile-Ile-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KBAPKNDWAGVGTH-IGISWZIWSA-N 0.000 description 1
- UWBDLNOCIDGPQE-GUBZILKMSA-N Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN UWBDLNOCIDGPQE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- IDMNOFVUXYYZPF-DKIMLUQUSA-N Ile-Lys-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N IDMNOFVUXYYZPF-DKIMLUQUSA-N 0.000 description 1
- AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N Ile-Lys-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- ZNOBVZFCHNHKHA-KBIXCLLPSA-N Ile-Ser-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N ZNOBVZFCHNHKHA-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 1
- 102100026019 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108010038501 Interleukin-6 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N L-leucine-L-tyrosine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KWTVLKBOQATPHJ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N KWTVLKBOQATPHJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N Leu-Ala-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BQSLGJHIAGOZCD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MLTRLIITQPXHBJ-BQBZGAKWSA-N Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O MLTRLIITQPXHBJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- BAJIJEGGUYXZGC-CIUDSAMLSA-N Leu-Asn-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N BAJIJEGGUYXZGC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- VIWUBXKCYJGNCL-SRVKXCTJSA-N Leu-Asn-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 VIWUBXKCYJGNCL-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- ONPJGOIVICHWBW-BZSNNMDCSA-N Leu-Lys-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 ONPJGOIVICHWBW-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- ARRIJPQRBWRNLT-DCAQKATOSA-N Leu-Met-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N ARRIJPQRBWRNLT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- ZDBMWELMUCLUPL-QEJZJMRPSA-N Leu-Phe-Ala Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZDBMWELMUCLUPL-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- IRMLZWSRWSGTOP-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ala Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IRMLZWSRWSGTOP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- RGUXWMDNCPMQFB-YUMQZZPRSA-N Leu-Ser-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RGUXWMDNCPMQFB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- DAYQSYGBCUKVKT-VOAKCMCISA-N Leu-Thr-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O DAYQSYGBCUKVKT-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- WUHBLPVELFTPQK-KKUMJFAQSA-N Leu-Tyr-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O WUHBLPVELFTPQK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ISSAURVGLGAPDK-KKUMJFAQSA-N Leu-Tyr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ISSAURVGLGAPDK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- AAORVPFVUIHEAB-YUMQZZPRSA-N Lys-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O AAORVPFVUIHEAB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- IWWMPCPLFXFBAF-SRVKXCTJSA-N Lys-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IWWMPCPLFXFBAF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- SSYOBDBNBQBSQE-SRVKXCTJSA-N Lys-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SSYOBDBNBQBSQE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N Lys-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- WOEDRPCHKPSFDT-MXAVVETBSA-N Lys-His-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CCCCN)N WOEDRPCHKPSFDT-MXAVVETBSA-N 0.000 description 1
- QOJDBRUCOXQSSK-AJNGGQMLSA-N Lys-Ile-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O QOJDBRUCOXQSSK-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- LECIJRIRMVOFMH-ULQDDVLXSA-N Lys-Pro-Phe Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 LECIJRIRMVOFMH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- QVTDVTONTRSQMF-WDCWCFNPSA-N Lys-Thr-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN QVTDVTONTRSQMF-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- CAVRAQIDHUPECU-UVOCVTCTSA-N Lys-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O CAVRAQIDHUPECU-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- RMKJOQSYLQQRFN-KKUMJFAQSA-N Lys-Tyr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RMKJOQSYLQQRFN-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DRXODWRPPUFIAY-DCAQKATOSA-N Met-Asn-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN DRXODWRPPUFIAY-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- MTBVQFFQMXHCPC-CIUDSAMLSA-N Met-Glu-Asp Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MTBVQFFQMXHCPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YCUSPBPZVJDMII-YUMQZZPRSA-N Met-Gly-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O YCUSPBPZVJDMII-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- JOYFULUKJRJCSX-IUCAKERBSA-N Met-Met-Gly Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)NCC(O)=O JOYFULUKJRJCSX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- 241000701168 Murine adenovirus 1 Species 0.000 description 1
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 description 1
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 description 1
- 102100026925 Myosin regulatory light chain 2, ventricular/cardiac muscle isoform Human genes 0.000 description 1
- 101710105127 Myosin regulatory light chain 2, ventricular/cardiac muscle isoform Proteins 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 101100221647 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) cox-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000007399 Nuclear hormone receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020005497 Nuclear hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 101150062589 PTGS1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- OYQBFWWQSVIHBN-FHWLQOOXSA-N Phe-Glu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O OYQBFWWQSVIHBN-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 1
- JEBWZLWTRPZQRX-QWRGUYRKSA-N Phe-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O JEBWZLWTRPZQRX-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- LRBSWBVUCLLRLU-BZSNNMDCSA-N Phe-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O LRBSWBVUCLLRLU-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- ZIQQNOXKEFDPBE-BZSNNMDCSA-N Phe-Lys-His Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N ZIQQNOXKEFDPBE-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- RTUWVJVJSMOGPL-KKUMJFAQSA-N Phe-Met-Glu Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N RTUWVJVJSMOGPL-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- RAGOJJCBGXARPO-XVSYOHENSA-N Phe-Thr-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 RAGOJJCBGXARPO-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- GOUWCZRDTWTODO-YDHLFZDLSA-N Phe-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O GOUWCZRDTWTODO-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- 108010001014 Plasminogen Activators Proteins 0.000 description 1
- 102000001938 Plasminogen Activators Human genes 0.000 description 1
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 1
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AJCRQOHDLCBHFA-SRVKXCTJSA-N Pro-His-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AJCRQOHDLCBHFA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- SMFQZMGHCODUPQ-ULQDDVLXSA-N Pro-Lys-Phe Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SMFQZMGHCODUPQ-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- XYAFCOJKICBRDU-JYJNAYRXSA-N Pro-Phe-Val Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XYAFCOJKICBRDU-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- 101710098940 Pro-epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 108700020978 Proto-Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000052575 Proto-Oncogene Human genes 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000242743 Renilla reniformis Species 0.000 description 1
- FCRMLGJMPXCAHD-FXQIFTODSA-N Ser-Arg-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O FCRMLGJMPXCAHD-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RDFQNDHEHVSONI-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asn-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RDFQNDHEHVSONI-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- BGOWRLSWJCVYAQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BGOWRLSWJCVYAQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MUARUIBTKQJKFY-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MUARUIBTKQJKFY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- BXLYSRPHVMCOPS-ACZMJKKPSA-N Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO BXLYSRPHVMCOPS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GVMUJUPXFQFBBZ-GUBZILKMSA-N Ser-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GVMUJUPXFQFBBZ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- PPCZVWHJWJFTFN-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PPCZVWHJWJFTFN-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N Ser-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- 101000677856 Stenotrophomonas maltophilia (strain K279a) Actin-binding protein Smlt3054 Proteins 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- UKBSDLHIKIXJKH-HJGDQZAQSA-N Thr-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UKBSDLHIKIXJKH-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- UTSWGQNAQRIHAI-UNQGMJICSA-N Thr-Arg-Phe Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 UTSWGQNAQRIHAI-UNQGMJICSA-N 0.000 description 1
- JBHMLZSKIXMVFS-XVSYOHENSA-N Thr-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JBHMLZSKIXMVFS-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N Thr-Asp Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N 0.000 description 1
- MPUMPERGHHJGRP-WEDXCCLWSA-N Thr-Gly-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O MPUMPERGHHJGRP-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- WPAKPLPGQNUXGN-OSUNSFLBSA-N Thr-Ile-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WPAKPLPGQNUXGN-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- XNTVWRJTUIOGQO-RHYQMDGZSA-N Thr-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XNTVWRJTUIOGQO-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 1
- PJCYRZVSACOYSN-ZJDVBMNYSA-N Thr-Thr-Met Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O PJCYRZVSACOYSN-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 1
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 description 1
- 102000006747 Transforming Growth Factor alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 101800004564 Transforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 102000004987 Troponin T Human genes 0.000 description 1
- 108090001108 Troponin T Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- FBVGQXJIXFZKSQ-GMVOTWDCSA-N Tyr-Ala-Trp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N FBVGQXJIXFZKSQ-GMVOTWDCSA-N 0.000 description 1
- HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N Tyr-Gly Chemical compound [O-]C(=O)CNC(=O)[C@@H]([NH3+])CC1=CC=C(O)C=C1 HPYDSVWYXXKHRD-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- HSBZWINKRYZCSQ-KKUMJFAQSA-N Tyr-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O HSBZWINKRYZCSQ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- QFXVAFIHVWXXBJ-AVGNSLFASA-N Tyr-Ser-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QFXVAFIHVWXXBJ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- KDKLLPMFFGYQJD-CYDGBPFRSA-N Val-Ile-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N KDKLLPMFFGYQJD-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- SDUBQHUJJWQTEU-XUXIUFHCSA-N Val-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N SDUBQHUJJWQTEU-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- 206010047295 Ventricular hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000488 activin Substances 0.000 description 1
- 108700010877 adenoviridae proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010078114 alanyl-tryptophyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 102000004305 alpha Adrenergic Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000861 alpha Adrenergic Receptors Proteins 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 108010072788 angiogenin Proteins 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108010058966 bacteriophage T7 induced DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102000012740 beta Adrenergic Receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010041776 cardiotrophin 1 Proteins 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 108091092356 cellular DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 208000028831 congenital heart disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000000959 cryoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 1
- 102000047448 human ANKRD1 Human genes 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 238000002350 laparotomy Methods 0.000 description 1
- 108010047926 leucyl-lysyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010091871 leucylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 108010012058 leucyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 108020001756 ligand binding domains Proteins 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 108010056582 methionylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000003387 muscular Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000001452 natriuretic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002020 noncytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 108020004017 nuclear receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 108010024607 phenylalanylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010083476 phenylalanyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 229940127126 plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 108090000468 progesterone receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000003998 progesterone receptors Human genes 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 101150066583 rep gene Proteins 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 108010048818 seryl-histidine Proteins 0.000 description 1
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 1
- 239000013605 shuttle vector Substances 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 102000005969 steroid hormone receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003113 steroid hormone receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 1
- 108091006106 transcriptional activators Proteins 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 1
- 230000006648 viral gene expression Effects 0.000 description 1
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/05—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
- C12N2830/008—Vector systems having a special element relevant for transcription cell type or tissue specific enhancer/promoter combination
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
- C12N2830/15—Vector systems having a special element relevant for transcription chimeric enhancer/promoter combination
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
- C12N2830/60—Vector systems having a special element relevant for transcription from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
- C12N2830/80—Vector systems having a special element relevant for transcription from vertebrates
- C12N2830/85—Vector systems having a special element relevant for transcription from vertebrates mammalian
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Polynukleotidy obsahující fragment sekvence v protisměru od genu CARP, vektory a expresní kazety, které je obsahují, a jejich použití
Oblast techniky
Předkládaný vynález spadá do oblasti biologie, zejména se týká oboru cíleni exprese genů. Konkrétně se vynález týká návrhu a vývoje nového systému pro specifickou expresi transgenů. Předmětem vynálezu je nová promotorové sekvence, která je schopná řídit hladinu a specifitu exprese transgenů in vivo v buňkách srdečního svalu. Vynález tak poskytuje nové přípravky, konstrukty a vektory, které umožňují regulaci a cílení exprese nukleových kyselin do buněk srdečního svalu. Předkládaný vynález má četné způsoby využití, například v experimentálních a klinických oborech, při léčení a diagnostice, a konkrétně při léčení a/nebo prevenci některých nemocí srdce.
Dosavadní stav techniky
Řízení hladiny a cílení exprese transgenů je nutné v mnoha aplikacích. Tak například v genová terapii úspěch léčení vyžaduje cílení proteinu syntetizovaného transgenem, což umožňuje omezit nežádoucí vedlejší účinky. Konstrukce transgenních zvířat a výzkum účinků oblastí, kde může být využita vhodná exprese proteinů a poskytnout tak zlepšení dosud užívaných metod.
genů jsou příklady kontrola specifity
- 2 ·· ··♦· ·«*· • 4 • · · · ·4 · 4 · · · • 4 4 9 4 4 · · ·· 4 4444 4444
444 44 ·· ·· ··
Z tohoto hlediska bylo již mnoho promotorů testováno na jejich schopnost regulace a cílení kardiospecifické exprese. Konkrétně jde promotor genu kódujícího lehký řetězec srdečního myosinu (MLC-2) u laboratorního potkana (Henderson S. A. et al., J Biol Chem, 264 (1989) 18142-8, Lee K. J. et al·., J Biol Chem, 126 (1992) 15875-85), srdeční α-aktin U myší (Biben C. et al., Dev Biol, 173 (1996) 200-12), natriuretický faktor (ANF) (Harris A. N. et al., J Mol Cell Cardiol, 29 (1997) 515-25), těžký řetězec a- nebo β-myosinu (a- nebo β-MHC) (Colbert M. C. et al., J Clin Invest, 100 (1997) 195868), svalovou kreatinkinázu (MCK) králíků (Vincent C. K. et al., Mol Cell Biol, 13 (1993) 567-74) nebo srdeční troponin T (Patent Spojených Států č. 5,266,488).
Zatímco tyto promotory jsou známy tím, míru tkáňové specifity, je také známo, zůstávají hluboko pod úrovní aktivity promotorů, obecně 10 až lOOkrát, takže využití nelze předpokládat.
že poskytují jistou že úrovně aktivity takzvaných silných jejich terapeutické
Například Franz W. M. et al., (Cardiovasc Res, 35 (1997) 560-6) a Griscelli F. et al., (C R Acad Sci III, 320 (1997) 103-12) prokázali, že hladiny aktivity sekvencí ležících „upstream (proti směru transkripce) od genů kódujících a-MHC a MLC-2 laboratorního potkana v adenovirovém konstruktu zůstávají podstatně níže než aktivity promotoru RSV (virus Rousova sarkomu), a to přibližně lOx.
Předkládaná přihláška se proto týká nové promotorové sekvence pocházející z „upstream (proti směru transkripce) úseku genu CARP (srdeční ankyrinový repetiční protein). Tato nová promotorové sekvence je nejen schopná řídit kardiospecifickou expresi, ale také projevuje vysokou hladinu exprese in vivo srovnatelnou s jakýmkoliv silným promotorem,
4 444 • 4 4 • «ΜΙ • 4 ··
4 4 • 4 444 • · ♦ « • 4 4 1
4 β 4
4444 » 4 4 jako je například promotor CMV (cytomegaloviru).
Protein CARP, který představuje jeden z prvních markérů diferenciace kardiomyocytů působící „downstream (po směru transkripce) od homeoboxového genu Nbx2.5 při regulaci exprese genu MLC-2v, byl studován a kódující úsek tohoto genu byl sekvencován u myši (Zou Y. et al., Development, 24 (1997) 793804), králíka, (Aihara Y. et al. , Biochim Biophys Acta, 28 (1999) 318-24) a člověka (Chu W. et al., J Biol Chem, 270 (1995) 10236-45) .
Kuo H. et al. (Development, 126 (1999) 4223-34) klonovali fragment velikosti 10 Kb a z něho sekvencovli fragment velikosti 2,5 Kb v protisměru od kódující sekvence myšího genu CARP. Delece provedené na 5' konci fragmentu ukázaly, že úsek promotoru velikosti 213 bp mezi nukleotidy -166 a +47, vzhledem k počátku transkripce v poloze +1, byl dostatečný k tomu, aby poskytl kardiospecifickou expresi in vitro, což vedlo k předpokladu výskytu elementu na 5’ konci, který řídí specifita promotoru. Kuo et al. také připravili transgenní myší linii obsahující fragment velikosti 2,5 Kb v protisměru od genu CARP, projevující specifickou expresi transgenu v buňkách srdečního a kosterního svalstva v rané etapě embryonální vývoje, přičemž toto exprese pak byla inhibována během dalšího vývoje.
Mezinárodní přihláška WOOO/15821 popisuje úsek ležící 5' v protisměru od kódující sekvence myšího genu CARP, umístěný konkrétně mezi nukleotidy -2285 a +62, vzhledem k transkripci v poloze +1. Tento sekvence byla hodnocena zejména na in vivo aktivitu prostřednictvím adenovirových vektorů. Úrovně získané aktivity nicméně byly velmi nízký, takže bylo nutné, aby vůbec bylo možno detekovat aktivitu in vivo, izolovat promotorovou sekvenci mezi dvěma invertními terminální repeticemi
- 4 9« 999» • · · * 9 9*«
9 » • 9 9
99 9 • 9 ^9 <9
9 999
9 9 ·
99 »P> 9999 • 9 9 · «
9 ·
9 9 9
9* adeno-asociovaného viru (AAV-ITR).
Původce se zaměřil na lepší charakterizaci úseku 5' genu pro CARP protein. Tak byl schopen identifikovat novou sekvenci v protisměru CARP genu a demonstrovat neočekávané a výhodné vlastnosti této nové sekvence, konkrétně významné zlepšení hladiny aktivity in vivo.
Původce skutečně překvapivě zjistil, že zatímco tato nově identifikovaná sekvence nevede k žádné významné expresi in vitro, velmi dobré hladiny aktivity bylo dosaženo in vivo, a to ekvivalentní s takzvanými silnými promotory, přičemž byla zachována vysoká selektivita exprese pro srdeční tkáň.
Podstata vynálezu
Předmět předkládaného vynálezu je polynukleotid obsahující úsek v protisměru od kódující sekvence genu pro CARP protein, nebo fragment hybridizující v podmínkách vysoké stringence s touto sekvencí, přičemž polynukleotid je schopen u transgenu umístěného pod jeho kontrolu indukovat expresi specifickou pro srdeční tkáň.
Vynález se také týká jakéhokoliv polynukleotidu přírodní původu nebo získaného chemickou syntézou, který vykazuje alespoň 93%, výhodně alespoň 95% identitu se sekvencí uvedenou v seznamu sekvencí jako SEKVENECE ID. Č. 1. Ještě výhodněji má polynukleotid podle vynálezu alespoň 98% identitu se SEKVENCÍ ID. Č. 1.
Expresním polynukleotidem přírodní původu se v kontextu předkládaného popisu rozumí fragment genomové DNA získaný štěpením buněčné DNA pomocí restrikčních enzymů.
- 5 Expresní polynukleotid získaný chemickou syntézou znamená v kontextu předkládaného vynálezu DNA fragment připravený automatizovanou syntézou, například s pomocí vhodného automatizovaného zařízení pro syntézu DNA.
V kontextu předkládaného vynálezu termín podmínky s vysokou stringencí se požívá ve smyslu definovaném v laboratorní příručce Maniatis et al. 1982 (Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor CSH, N. Y., USA) nebo v některém z mnoha dalších vydání. Tak například hybridizační podmínky jsou takové, že následně jsou potřebná tři promytí v 65 °C v přítomnosti 0,2 SSC a 0,1% SDS , aby se eliminovaly nehybridizované fragmenty.
Specifický charakter exprese znamená předkládaného vynálezu, že aktivita promotoru vyšší v buňkách specifické tkáně, tj .
tkáně. Ačkoli nespecifická exprese kontextu je významné v tomto případě srdeční může existovat i v ostatních buňkách, odpovídající hladina aktivita zůstává obecně velmi nízká (zanedbatelná) ve srovnání s hladinou, která je pozorována v srdečních buňkách, obecně je nižší nejméně lOx.
Výsledky uvedené v této přihlášce v příkladech v tomto ohledu ukazují rozdíl v expresi, který dosahuje faktoru 1000 (t j . specifická exprese je lOOOx vyšší než nespecifická), což odráží vysokou selektivitu polynukleotidů podle vynálezu v srdečních buňkách in vivo.
Navíc výsledky uvedené v příkladech níže jasně ukazují, že použití polynukleotidů podle vynálezu poskytuje vysoké hladiny exprese, mnohem vyšší než jaké byly dosud známy pro jiné promotory specifické pro srdeční tkáň, přičemž tento rozdíl je až lOOx vyšší. Tyto prvky tak jasně ukazují výhody a neočekávané vlastnosti polynukleotidů podle vynálezu • · · ·
- 6 v termínech síly a specifity exprese nukleové kyseliny požadovaných v srdeční tkáni.
Výhodně polynukleotid podle vynálezu obsahuje část sekvence mezi polohou -2266 a +92, vzhledem k transkripční poloze +1, ze sekvence uvedené v připojeném seznamu sekvencí jako SEKVENCE ID. Č. 1.
Předmětem předkládaného vynálezu je proto sekvence hybridizující, a to v podmínkách vysoké stringence, se uvedenou zde jako SEKVENCE ID. Č. 1.
Předkládaný vynález nicméně není omezen na polynukleotidy obsahující fragmenty „upstream od myšího genu, ale týká se jakýchkoliv funkčních variant nebo jakékoliv jiné sekvence kteréhokoliv jiného biologického druhu, která má stejné vlastnosti, zejména je schopná specificky indukovat in vivo exprese transgenu v srdeční tkáni.
Takže odborník je výhodně schopen vztahovat uvedené údaje odkazem na sekvence „upstream v humánním genu, jehož sekvence je uložena v GenBank pod referenčním č. AF131884, a která je zde uvedena jako SEKVENCE ID. Č. 2. Předkládaný vynález tudíž zahrnuje jakékoliv sekvence obsahující fragmenty sekvence „upstream od genu pro CARP protein, modifikované například delecí určité struktury, které si zachovávají totožné nebo podobné funkce jako sekvence uvedená zde jako SEKVENCE ID. Č. 1.
Výhodně polynukleotid podle vynálezu projevuje alespoň 80%, výhodněji alespoň 90% identitu se sekvencí uvedenou zde jako SEKVENCE ID. Č. 2.
Expresní funkční modifikovaná sekvence, polynukleotidů uvedené variantou se rozumí která si zachovává výše. Modifikace mohou jakákoliv vlastnosti zahrnovat • · 4 4 · · ·9 4 4 · · «44 4 4 4 · 4 • 4 4 4 4 4 · · · · · 4 • · 4 4 · ·· ··· 4
4 · 4 4 4 4 · · «4 444 44 44 44
- 7 modifikace jednoho nebo více nukleotidů v požadované sekvenci typu adice, mutace, delece a/nebo substituce. Tyto modifikace mohou být do sekvence vneseny obvyklými molekulárněbiologickými metodami, jako je například konkrétně místně cílená mutageneze nebo ve výhodnějším způsobu umělou syntézou sekvence v syntetizátoru. Získané varianty jsou pak testovány na jejich schopnost kontrolovat specifitu exprese v srdečních svalových buňkách srovnatelnou polynukleotidem majícím SEKVENCI ID. Č. 1.
Další předmět vynálezu se týká expresní kazety obsahující polynukleotid jak byl definován výše, operativně spojený s transgenem, takže exprese transgenu je specificky cílena do srdečního svalu.
Výhodně kazeta podle vynálezu obsahuje navíc signál pro ukončení transkripce, umístěný směrem 3' od nukleotidové sekvence transgenu.
Výhodně transgen obsahuje požadovanou terapeutickou nukleovou kyselinu kódující protein nebo RNA, které se mohou podílet na patologickém stavu srdce jako je například srdeční vada, srdeční hypertrofie, hypoxie, ischemie nebo rejekce srdečního transplantátu.
Jako požadovaný terapeutický protein lze uvést kromě jiných následující příklady:
proteiny indukující angiogenezi, jako jsou například členy VEGF rodiny, členy FGF rodiny a konkrétně FGF1, FGF2, FGF4, FGF5, angiogenin, EGF, TGFcť, TGFp, TNFa, rozptylový faktor/HGF, členiy angiopoetinové rodiny, cytokiny a konkrétně interleukiny jako IL-1, IL-2, IL-8, angiotensin-2, aktivátor plazminogenu (TPA), urokináza (uPA), molekuly zapojené do syntézy aktivních lipidů (prostaglandiny, Cox-1) , • · • · ···· · · ·· « · · · · · · • ···· · ···· · • · · · · ·· ··· proteiny podílející se na řízení kontraktility srdce, jako je například fosfolamban, inhibitory fosfolambanu, SERCA-2a, p2-adrenergní receptor nebo dystrofin nebo minidystrofin (viz FR 91 /11947), proteiny s kryoprotektivní aktivitou, které specificky blokují apoptózu, jako například proteiny, který jsou členy rodiny bel a proteinkinázy jako je například AKT/PKB, transkripční faktory, jako jsou například přírodní nebo chimérické nukleární receptory, obsahující vazebnou doménu pro DNA, vazebnou doménu pro ligand a doménu působící jako transkripční aktivátor nebo inhibitor, jako jsou například fúzní proteiny tetR-NLS-VPl6, fúzní proteiny odvozené z estrogenních receptorů, fúzní proteiny odvozené z receptorů pro steroidní hormony, fúzní proteiny odvozené z receptorů pro progesteron, proteiny z CID (chemický induktor dimerizace, „Chemical Inducer of Dimerization) systému, který popsali Rivera et al., (Rivera et al., Mature Medicine, 2 (1996) 10281032) . Konkrétně lze zde uvést jako chimérický nukleární receptor nukleární receptory PPAR („Peroxisome Proliferator Activated Receptor), a zejména PPARy2, jak byly popsány v publikované přihlášce WO 96/23884 a FR 99/07957, a v Frohnert et al., (J Biol Chem 274 (1999) 3970-3977) a Mukherjee et al., (Biol Chem 272 (1997) 8071-8076), buďto v nativní formě, tj. bez modifikace primární struktury, nebo modifikovaný PPARy2 obsahující jedno nebo více vazebných míst pro ligand nebo E/F domény (Schoonjans et al. Biochim. Biophys. Acta. 1302 (1996) 93-109), jako například PPARy2y2 mající sekvenci uvedenou zde • · · ·
jako SEKVENCE ID. Č. 3, imunosupresory jako například interleukiny 2 a 10, které umožňují úplně nebo částečně inhibovat imunitní signální dráhu a tak prodloužit dobu udržení srdečního transplantátu, proteiny působící jako agens redukující hypoxii jako například NOS (syntetáza oxidu dusnatého), bcl-2 (B lymfocytární leukémie/lymfom 2), SOD (superoxiddismutáza) a kataláza.
Jako příklad vhodné požadované terapeutické RNA lze uvést „antisense RNA (tj . RNA s opačným smyslem proti směru transkripce), který jsou použitelné pro řízení (resp. potlačení) exprese genů nebo transkripce z buněčných mRNA, takže blokují translaci do proteinu, jak bylo popsáno v patentu EP 140 308, a také ribozymy, které jsou schopné selektivně štěpit (likvidovat) cílové RNA, jak bylo popsáno v patentu EP 321 201.
Samozřejmě předkládaný vynález není omezen na tyto specifické příklady proteinů nebo RNA, ale odborník může snadno vynález využít pro expresi jakékoliv nukleové kyseliny v srdečních buňkách na základě předkládaného vynálezu a jednoduchého rutinního experimentování.
Dalším předmětem předkládaného vynálezu je vektor obsahující polynukleotid nebo expresní kazetu podle vynálezu. Takový vektor může obsahovat jakoukoliv jinou DNA sekvenci nutnou pro expresi transgenu v cílových tkáních a konkrétně může obsahují počátek replikace, který je účinný v srdečních buňkách.
Vektor podle vynálezu může být různého charakteru, konkrétně se může jednat o vektor plazmidového, episomálního, • · · · • ·
chromosomálního, virového nebo fágového charakteru a/nebo původu. Výhodně je vektorem plazmid nebo rekombinantni virus.
Pro ilustraci plazmidů obsahujících polynukleotid nebo expresní kazetu mohou být uvedeny plazmidy pXL3634, pXL3728 a pXL3759, který jsou popsány podobněji dále.
Podle první provedení vynálezu jsou vektory podle vynálezu typu plazmidů. Jako plazmidový vektor lze kromě dalších uvést jakýkoliv z klonovacích a/nebo expresních plazmidů, které jsou odborníkům známy a které obecně obsahují replikační počátek. Lze také zmínit plazmidy nové generace nesoucí replikační počátek a/nebo markér, které byly dále zlepšeny, jak bylo popsáno například v publikované přihlášce WO 96/26270.
Podle výhodného provedení vynálezu je plazmidový vektor miniplazmid a obsahuje replikační počátek, jehož funkčnost v hostitelské buňce vyžaduje přítomnost alespoň jednoho proteinu, který je specifický a cizorodý vzhledem k buňce. Takové vektory byly konkrétně popsány v publikované přihlášce WO 97/10343.
Podle druhého provedení vynálezu jsou vektory podle předkládaného vynálezu virové vektory. Jako příklady virových vektorů lze, kromě dalších, uvést rekombinantni adenoviry, rekombinantni adeno-asociované viry, rekombinantni retroviry, lentiviry, herpetické viry a virus vakcínie, jejichž příprava může být provedena metodami, které jsou odborníkům známy. Výhodně jsou použity chimérické virové vektory jako například chimérické vektory adenovirus-retrovirus, který jsou popsány např. v publikované přihlášce WO 95/22617, a také vektory episom/adenovirus, který jsou popsány v publikaci Leblois et al. (Mol Ther (2000) 1 (4), 314-322) a v přihlášce
WO 97/47757.
Pokud jsou použity adenoviry podle tohoto provedení, jsou • · · · · · • · «· ····
-lito výhodně vektory pocházející z defektních adenovirů, tj. virů, které nejsou schopné autonomní replikace v cílových buňkách. Konstrukce těchto defektních virů, a také jejich infekční vlastnosti, byly podrobně popsány v odborné literatuře (viz konkrétně např. S. Baeck and K. L. March, Circul. Research, 82, (1998) 295-305), T. Shenk, B. N. Fields, D. M. Knipe, P. M. Howley et al. (1996), Adenoviridae: Viruses and Replication (in virology) 211-2148, EDS-Ravens publishers Philadelphia, Yeh, P. et al. FASEB 11 (1997) 615-623).
Různý sérotypy adenovirů, jejichž struktura a vlastnosti se poněkud liší, již byly charakterizovány. Mezi sérotypy, jejichž použití je výhodně v kontextu předkládaného vynálezu, patří humánní adenoviry typu 2 nebo 5 (Ad 2 nebo Ad 5) nebo adenoviry živočišného původu, jako například adenoviry popsané v přihlášce FR 93/05954, a nebo adenoviry smíšeného původu. Jako příklady adenovirů živočišného původu, které mohou být použit v kontextu předkládaného vynálezu, lze uvést psí, bovinní (hovězí) a myší adenoviry (Beard et al., Virology 75 (1990) 81), a adenoviry ovčího, prasečího, ptačího nebo opičího původu. Výhodný adenovirus živočišného původu je psí adenovirus, výhodněji adenovirus CAV2 (kmen Manhattan nebo A26/61), jak byl popsáno v publikované přihlášce WO 94/26914.
Defektní adenoviry podle vynálezu obsahují obecně na každém konci invertovanou terminální repetici (ITR), sekvence dovolující enkapsidaci (Psi), gen El a alespoň jedem z genů E2, E4 a L1-L5, které přesto byly deaktivovány kterýmkoliv z postupů, které jsou odborníkům známy (Levero et al., Gene, 101 (1991) 195, EP 185 573, Graham, EMBO J. 3 (1984) 2917).
Výhodný rekombinantní adenovirus pro použití v kontextu předkládaného vynálezu obsahuje deleci v El úsek svého genomu. Konkrétněji obsahuje delece úseků Ela a Elb. Jako konkrétní ·· ·♦·« ·· ···· · · ··· ··· · · · • · «· · · · · · · · · · ·· · · · ······ ·
9 9 9 9 9 9 9 · 9 9
999 9 9 9 9 9 9 99
- 12 příklad lze uvést delece zahrnující nukleotidy 454-3328, 3823446 nebo 357-4020 (číslování vztaženo ke genomu Ad5).
Podle výhodné varianty rekombinantní adenovirus použitý v kontextu vynálezu obsahuje navíc deleci v úseku E4 svého genomu. Konkrétně delece v E4 úseku postihuje všechny otevřené čtecí rámce. Jako zcela konkrétní příklad lze uvést delece zahrnující nukleotidy 33466-35535 nebo 33093-35535. Jiné typy delece v E4 úseku jsou popsán v přihláškách WO 95/02697 a WO 96/22378, které jsou zahrnuty v předkládaném popisu formou odkazu.
Co se týče adeno-asociovaných virů (AAV) , jsou to relativně malé DNA viry, které se stabilně a místně specificky integrují do genomu buněk, které infikují. Jsou schopné nakazit široké spektrum buněk, bez indukce jakéhokoliv účinku na buněčný růst, morfologii nebo diferenciaci. Navíc se nezdá, že jsou zapojeny do patologických stavů u lidí. AAV genom byl klonován, sekvencován a charakterizován. Obsahuje přibližně 4700 bází a na každém konci obsahuje invertovanou terminální repetici (ITR) asi 145 bází, která slouží jako počátek replikace pro virus. Zbytek genomu je rozdělen do 2 základních úseků nesoucích enkapsidační funkce: levá část genomu, která obsahuje rep gen zapojený do virové replikace a exprese virových genů, pravá část genomu, která obsahuje cap gen kódující virové kapsidové proteiny.
Použití vektorů pocházejících z AAV pro přenos genů in vitro a in vivo byl popsán v literatuře (viz konkrétně WO 91/18088, WO 93/09239, patent Spojených Států č. 4 797 368, patent Spojených Států č. 5 139 941, EP 488528). Tyto přihlášky popisují různé konstrukty pocházejících z AAV, ve kterých geny rep a/nebo cap byly odstraněny a nahrazeny požadovanými geny, a jejich použití pro transfer in vitro (na ·· »··· ·« ····
- 13 buňky v kultuře) nebo in vivo (přímo v organismu) požadovaného genu. Defektní rekombinantní AAV podle vynálezu mohou být připraveny kotransfekcí do buněčné linie infikované humánním pomocným virem (například adenovirem) plazmidu obsahujícího nukleové sekvence podle vynálezu ohraničené dvěma AAV invertovanými terminálními repeticemi (ITR) a plazmidu nesoucího AAV enkapsidační geny (geny rep a cap) . Vytvořené rekombinantní AAV jsou pak purifikovány obvyklými technikami.
Podle tohoto provedení mohou také být použity lentiviry, umožňují transfer a účinnou a stabilní integraci požadovaného genu do klidových buněk.
Mohou být uvedeny například HTLV-1 ze zvířecích lentivirů, jako je například FIV (kočičí infekční virus), EIAV (koňský virus infekční anémie, WO 98/51810), BIV (virus bovinního imunodeficitu), SIV (virus opičího imunodeficitu), CAEV (virus kozí artritidy a encefalitidy) (WO 98/39463, Naldini et al., Science, 272, 1996, 263-267, Schnele et al. Hum Gen Ther, 11, 2000, 439-447) nebo lentivirus příbuzný typu, který způsobuje AIDS, HIV-2, který u lidí není vysoce patogenní (Kundra et al., Hum Gen Ther, 9, 1998, 1371-1380).
Expresní kazety mohou být vloženy do různých místa rekombinantního genomu. Kazeta může být vložena na úrovni úseku El, E3 nebo E4, jako náhrada suprimovaných nebo nadbytečných sekvencí. Může také být vložena v kterémkoliv jiném místě, mimo sekvencí nutných v cis pro produkci virů (ITR sekvence a enkapsidační sekvence).
Nicméně je nutné poznamenat, že zavedení sekvencí podle předkládaného vynálezu do vektorů popsaných výše není esenciální, takže srdeční buňky mohou být přímo transfekovány DNA obsahující tyto sekvence.
Nukleové sekvence podle předkládaného vynálezu mohou být *· »<··· • · » · ·* » ·* • · • ··* • · 4 • ·· · · · • · 1 • · · <
• 4 ·9
| kyselin | se |
| buněk | nebo |
| mohou | být |
| :, jak | bylo |
zavedeny po kovalentní kondenzaci nukleových sloučeninami podporujícími jejich penetraci do buněk nebo jejich transport k jádru, výsledné konjugáty volitelně enkapsidovány do polymerních mikročástj popsáno v mezinárodní přihlášce WO 94/27238.
Podle dalšího provedení mohou být nukleové sekvence zahrnuty v transfekčním systému obsahujícím polypeptidy podporující jejich proniknutí do buněk, jak bylo popsáno v mezinárodní přihlášce WO 95/10534.
Tyto polynukleotidy, kazety a vektory mohou být podávány in šitu kterýmikoliv prostředky odborníkům známými , například koronární infúzí (Barr et al., Gene Ther, 1, 1994, 51-58), intrakardiální injekcí, epikardiální injekcí, tj. přes ventrikulární stěnu (Guzman et al., Cir Res, 73, 1993, 12021207), intraperikardiální injekcí (Fromes et al. , Gene Ther, 6, 1999, 683-688) nebo retrofúzí koronárních žil (Boeckstegers et al., Circulation, 100, (Suppl I), 1999, 1-815).
Polynukleotidy, kazety nebo vektory podle vynálezu mohou výhodně být podávány ve formě přípravku, který je obsahuje, například s pomocí chemického nebo biochemického transferového agens usnadňujícího jejich transfekci do srdečních buněk. Termínem chemické nebo biochemické transferové agens se rozumí kterákoliv sloučenina usnadňující penetraci nukleové kyseliny do buňky. Patří sem např. kationtová agens (činidla), jako jsou například kationtové lipidy, peptidy, polymery (polyethylenimin, polylysin), nanočástice nebo nekationtová činidla, jako jsou například nekationtové lipozomy, nekationtové nanočástice nebo polymery, Taková činidla jsou odborníkům dobře známa a jsou konkrétně popsána v přihláškách WO 95/18863, WO 97/18185 a WO 98/15639.
Předkládaný vynález se kromě toho týká léků obsahujících ♦ « ···· <· »« *» ·»·· > > · · · · ·· · • « »·· » · ··· · · · • · ·»·<··«· · · • · · · · · · · « · · «· lil ·» ·· ·· ·»
- 15 polynukleotidy podle vynálezu, expresní kazety nebo vektory, a také farmaceutických přípravků, které je obsahují ve farmaceuticky účinném množství, společně s farmaceuticky kompatibilními excipienty.
Polynukleotidy, expresní kazety nebo vektory podle vynálezu mohou být výhodně použity pro výrobu léků pro aplikaci do srdeční tkáně, které mohou exprimovat konkrétně gen kódující požadovaný protein, pro léčbu srdečních nemocí a konkrétně pro léčbu a/nebo prevenci srdeční insuficience, hypoxie, srdeční hypertrofie, myokarditidy, srdeční ischémie nebo pro prevenci rejekce po srdeční transplantaci.
Takový lék může například zahrnovat kazetu nebo vektor podle vynálezu, který je schopný exprimovat funkční formu poškozeného genu podle srdečního patologického stavu, který je žádoucí léčit .
Výhodně farmaceutický přípravek obsahuje farmaceuticky přijatelná vehikula pro formulace pro injekci, konkrétně pro intrakardiální injekci. To může zahrnovat konkrétně izotonické, sterilní fyziologické roztoky (hydrogenfosforečnan a dihydrogenfosforečnan sodný, chlorid sodný, draselný, vápenatý nebo hořečnatý, apod. nebo směsi takových solí) nebo suché, konkrétně lyofilizované, přípravky, které po přidání sterilizované vody nebo fyziologického roztoku, v závislosti na požadavku, umožňují přípravu roztoků pro injekci. Mohou být použity jiné excipienty, jako například hydrogel. Tento hydrogel může být připraven jako každý biologicky kompatibilní a necytotoxický (homo- nebo hetero-) polymer. Takové polymery byly například popsány v přihlášce WO 93/08845. Některé z nich, jako například konkrétně ty získané z ethylenoxidu a/nebo propylenoxidu jsou komerčně dostupné. Dávky použité pro injekci mohou být upraveny podle různých parametrů a konkrétně ·· φ φ · φ φ · ··· · · · · φ · φ φφφφ φ φφφφ φ φ φ φ φ φφφ φφ φφφ φ φ • Φ φ φφφφ φφφφ φφφφφ φ φ φφ φφ φφ
- 16 podle sledovaného cíle (značení, patologický stav, screening apod.), exprimovaného transgenu nebo trvání požadované exprese.
Obecně jsou rekombinantní adenoviry podle vynálezu formulovány a podávány ve formě dávek mezi 104 a 1014 pfu a výhodně 106 a 1O10 pfu. Termín pfu (jednotka tvořící plaky) odpovídá infekční síle virového roztoku a je určen infekcí vhodné tkáňové kultury a měřením počtu plaků infikovaných buněk. Techniky pro určování pfu titru virového roztoku jsou v oboru dobře známy.
Předmětem předkládaného vynálezu je navíc způsob exprese terapeutického požadovaného transgenu, během kterého jsou použity polynukleotidy, kazety nebo vektory podle předkládaného vynálezu, takže transgen může být exprimován.
Kromě toho se vynález také týká kterékoliv buňky modifikované kazetou nebo vektorem (obzvláště adenovirem), jak bylo popsáno výše. Termín modifikovaná buňka znamená kteroukoliv buňku obsahující polynukleotid nebo kazetu podle vynálezu. Tyto buňky mohou být určeny pro implantaci do organismu podle metodologie popsané v přihlášce WO 95/14785. Tyto buňky jsou v podstatě humánní srdeční buňky.
Předkládaný vynález se také týká transgenních zvířat a konkrétně myší nesoucích polynukleotid nebo kazetu, jak bylo definováno výše, ve kterých je gen kódující terapeutický požadovaný protein nahrazen reportérovým genem. Takové transgenní myši mohou být použity pro screening molekul na jejich aktivitu na regulační sekvence genu kódujícího CARP protein.
Molekuly mohou být podávány myším, a pak po jejich utracení jsou připraveny histologické řezy, aby se identifikovaly tkáně obarvené reportérovým genem.
• · · · • · · 4
- 17 • 4 · · · · · 4 4 • 4 · · 4 4 4 4 4* 4 4 4
4 4444 4444
44444 ·» 44 44 44
Transgenní zvířata podle předkládaného vynálezu také představují molekulárně biologické modely vhodné pro výzkum nezbytný k porozumění molekulárním mechanismům, které jsou základním prvkem srdečních patologických stavů genetického původu, jako je například srdeční insuficience, srdeční hypertrofie, srdeční hyperplázie a infarkt myokardu.
Jako příklad mohou být uvedeny myší modely pro studium myokarditidy, ve kterých je inaktivován gen kódující interferon-1 (IFN-1) (Aitken et al., Circulation, 90, 1994, 1139) .
Další požadované zvířecí modely podle předkládaného vynálezu mohou zahrnovat polynukleotid podle vynálezu spojený s transgeny, jako jsou například protoonkogeny nebo onkogeny, například c-myc, tak tvořící modely hyperplázie (Jackson et al·., Mol Cell Biol, 10, 1990, 3709-3716), p21-ras pro modely ventrikulární hypertrofie (Hunter et al., J Biol Chem, 270, 1995, 23176-23178), nukleární antigen viru Epstein-Barrové pro studium určitých kardiomyopatií (Huen et al., J Gen Virol, 74, 1993, 1381-1391).
Podle dalšího provedení transgenní zvířata podle vynálezu představují experimentální modely srdeční hypertrofie a zahrnují expresní kazetu, ve které transgen kóduje například kalmodulin (Gruver et al., Endocrinology, 133, 1993, 376-388), interleukin-β nebo receptor interleukinu-6 (Hirota et al., Proč Nati Acad Sci, 92, 1995, 4862-4866), kardiotrofin-1 (Pennica et al., Proč Nati Acad Sci, 92, 1995, 1142-1146) a konečně α-adrenergní receptor (Milano et al., Proč Nati Acad Sci, 92, 1994, 10109-10113).
Navíc polynukleotidy podle vynálezu, modifikované tak, že umožní zvýšení exprese CARP genu, také představují předmět vynálezu. Transgenní zvířata takto získaná tak představují • · · 9 • ·· ·
9 9 9 9 9 99 9 • 9999 9 9999 9 9 9
9 9 ř- 9 9 9 9 » 9 9 ·
9 999 » 9999
999 99 99 99 99
- 18 experimentální prostředky pro infarkt myokardu (Stanton et al., Circul Res, 86, 2000, 939-945).
Pro uskutečnění předkládaného vynálezu odborník může výhodně odvolávat na následující manuál SAMBROOK et al. (Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York, 1989) nebo jedno z jeho posledních vydání.
Předkládaný vynález je detailněji popsán s pomocí následujících příkladů, které jsou pouze ilustrativní a neomezuj 1cl.
Popis obrázků
Obrázek 1: ukazuje nukleotidovou sekvenci (sekv. id. č. : 1) polynukleotidu v protisměru genu kódujícího myší CARP protein.
Obrázek 2: ukazuje nukleotidovou sekvenci (sekv. id. č.: 2) polynukleotidu v protisměru genu kódujícího humánní CARP protein.
Obrázek 3: je schématické znázornění plazmidu pXL3634.
Obrázek 4: je schématické znázornění plazmidu pXL3728.
Obrázek 5: ukazuje relativní aktivitu in vitro plazmidů pXL3635 a pXL3634 vzhledem k referenční aktivitě CMV promotoru (pRL-CMV). Aktivita každého promotor reprezentuje Photinus pyralis luciferázovou aktivitu normalizovanou k Renilla reniformis luciferázové aktivitě.
Obrázek 6A: je schématické znázornění plazmidu pXL3759.
Obrázek 6B: je schématické znázornění adenovirů AVI. 0
CARP-Luc+.
* • » • · · · • · · · · · · · · · · • · 99· · · ·· · · ··
- 19 Obrázek 7A: ukazuje luciferázovou aktivitu (pg luciferázy/srdce) 7 dnů po intrakardiální transdiafragmatické injekci laboratorních potkanů variabilním množstvím plazmidů pXL3031 a pXL3634.
Obrázek 7B: ukazuje expresi luciferázy (pg luciferázy/srdce) 7 dnů po intrakardiální transdiafragmatické injekci do srdcí laboratorních potkanů 25 μg plazmidů pXL3031 a pXL3635, pXL3130 a pXL3153.
Obrázek 8: představuje poměr exprese luciferázy v srdci relativně k expresi ve svalu jako funkci exprese v srdci získané po intrakardiálním podávání plazmidů pXL3031, pXL3634, pXL3635, pXL3153 a pXL3130.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Charakterizace polynukleotidu „upstream (v protisměru) CARP genu
BamHI-XhoI fragment o velikosti 2,3 kb ze sekvence v 5' myšího genu kódujícího CARP protein byl klonován a sekvencován na obou vláknech metodou terminace řetězců (Sanger et al., 1977, PNAS, 74, 5463) s použitím soupravy Sequenase (United States Bíochemical, Cleveland, Ohio). Sekvence je ukázána na obrázku 1 a obsahuje tedy část v protisměru genu kódujícího myší CARP protein mezi nukleotidy -2266 a +92 relativně k transkripční poloze +1 (sekv. id. č.: 1).
- 20 4 4 4« 4 4 • · 4 4 4 4
449« 9 · 4 • 44 4 9 44 4 • 4 · · 49 · *
Příklad 2
Konstrukce CARP plazmidových vektorů
2.1 Plazmid pXL3634
BamHI-XhoI fragment o velikosti 2,3 kb charakterizovaný v příkladu 1 byl klonován po doplnění BamHI místa do plazmidu pGL3-Basic (Promega), předem štěpeného s Xhol a Smál, za zisku plazmidu pXL3634. Schématické znázornění tohoto plazmidu je ukázáno na obrázku 3.
2.2 Plazmid pXL3728
Plazmid pXL3728 byl získán z plazmidu pXL3179, což je vektor pocházející z plazmidu pXL2774 (WO 97/10343/), ve kterém byl zaveden gen kódující fúzi mezi signálním peptidem interferonu humánních fibroblastů a cDNA FGF1 (fibroblastový růstový faktor 1) (sp-FGFl, Jouanneau et al., PNAS, 88, 1991, 2893-2897) pod kontrolu promotoru získaného z časného úseku humánního cytomegaloviru (hCMV IE) a pozdního úseku polyadenylačního signálu SV40 viru (GenBank SV4CG).
BamHI-XhoI fragment o velikosti 2,3 kb charakterizovaný v příkladu 1, jehož konce byly doplněny, byl klonován do plazmidu pXL3179 (pCOR CMV-FGF), předem štěpeného s Xbal a EcoRI za zisku plazmidu pXL3728. Schématické znázornění tohoto plazmid je ukázáno na obrázku 4.
2.3 Plazmid pXL3729
EcoRI-SalI fragment z plazmidu pXL3634 byl klonován do plazmidu pXL3728 předem štěpeného s EcoRI-SalI za zisku plazmidu pXL3729.
- 21 •4 4444
4444 44 44 «44 444 44 4 · 4 4 4 4 4444 4 4 4
4 4 f> 4 44 444 4 4 «4 4 4444 4444 • 4444 44 44 44 44
Přiklad 3
Komparativní plazmidy
3.1 Plazmidy pXL3130 a pXL3153
Plazmidy pXL3130 a pXL3153 obsahují v daném pořadí humánní promotor α,-aktinu hladkého svalstva (-680, +30) a myší promotor SM22 (-436, +43) připojený k CMV enhanceru (522,-63), jak bylo popsáno v přihlášce WO 00/18908.
3.2 Plazmid pXL3635
| GAT TTA AAT | AAT GTA | GTC | TTA |
| GTG CAC ACC | AAT GTG | GTG | A-3 ’ |
| místa Swal | a Xbal | do | 5 ' |
| restrikční | místa byla | pak |
Promotor RSV-229, +34 byl klonován obsahujícího delší verzi RSV promotoru v Adl.ORSVLAcZ, Stratford-Perricaudet et al., J Clin Invest, 90, 1992, 626-30) prostřednictvím PCR pomocí primerů 5'-GGC
TGC AAT-3 ' a 5'-GGG GTC TAG AAG , které zavedly, v daném pořadí, a 3' PCR fragmentu. Tato dvě pak použita k zavedení fragmentu promotoru do pGL3-basic za vzniku pXL3635.
z konstruktu (obsaženého
3.2 Plazmid pXL3031
Plazmid pXL3031 je dle popisu autorů Soubrier et al. (Gene
Ther., 6, 1999, 1482-8).
pXL2774 (WO 97/10343),
Je to vektor pocházející z plazmidu ve kterém luc gen kódující modifikovanou luciferázu Photinus pyralis (cytoplazmatickou) získanou z pGL3-basic (GenBank: CVU47295) byl zaveden pod kontrolu promotoru získaného z časného úseku humánního cytomegaloviru (hCMV IE, GenBank HS5IEE) a pozdního úseku polyadenylačního signálu SV40 viru (GenBank SV4CG).
- 22 • · · · · · · · 4 · *44 4 · 4 · · • · · · · 4 4 4 4 4 4 · • 4 4 4444 444 ··· 44 44 44 44
Příklad 4
Buněčné kultury
Byly založeny z laboratorních potkanů, primární kultury kardiomyocytů Březí samice laboratorního potkana byly utraceny v komoře saturované C02. Po otevření břišní dutiny byly odstraněny dělohy a byly promyt v PBS při teplotě místnosti. Embrya byla uvolněna z obalů a placenta odříznuta (10 až 12 embryí na samici laboratorního potkana). Srdce byla odstraněna a promyta ve směsi ADS/glukóza. Srdeční ouška a velké cévy byly odstraněny pod binokulární čočku, a pak byla srdce opět pročištěna směsí ADS/glukózy, aby se uchovaly pouze srdeční komory a byly 3-krát promyty v sterilní směsí ADS/glukózy.
Srdce pak byla ošetřena trypsinem v 0,3 ml směsi ADS/glukóza/trypsin na srdce, s použitím trypsinu T 4674 (Sigma, St Louis, Missouri) v konečné koncentraci 0,1 mg/ml, po dobu 20 minut ve 37 °C, za jemného míchání (60 až 100 otáček za minutu).
Supernatant pak byl odstraněn a trypsin byl deaktivován přidáním 1 ml FCS zbaveného komplementu. Po centrifugaci v 1500 rpm po dobu 10 minut byl supernatant odstraněn a srdeční buňky byly nabrány do 1 ml FCS zbaveného komplementu. Souběžně byly kroky ošetření trypsinem opakovány 5 až 6 krát, dokud nebylo dosaženo kompletní disociace buněk. Pool buněk byl stočen v 1500 rpm po dobu 10 minut, pak byl dvakrát promyt v FCS a buňky byly konečně filtrovány na mřížkovém filtru.
Takto oddělené buňky pak byly uloženy do kultury v koncentraci 106 buněk/jamka na 24 jamkovou destičku nebo v koncentraci 2 x 106 buněk/jamka na 12 jamkovou destičku.
• · 4 · 4 4 »4 44
444 444 44 4 • 4444 4 4444 4 4 4
4 444 44 444 4 4
4 4444 4444
444 44 44 4 · 44
- 23 Každá jamka obsahovala 1 ml kultivačního média.
Kultivační médium obsahovalo v celkovém objemu 100 ml, 68 ml DMEM (bez pyruvátu) (Gibco-BRL), 17 ml M199 (Sigma M 4530), ml koňského séra zbaveného komplementu (Sigma H6762), 5 ml
FCS zbaveného komplementu (Gibco-BRL) a 1 ml lOOx směsi Peni/Strepto/glutamin (Gibco-BRL).
Kardiomyocyty byly pěstovány po dobu přibližně 1 nebo 2 dny.
Přiklad 5
Transfekce primárních kultur kardiomyocytů
Primární kultury kardiomyocytů byly kotransfekovány celkovým množstvím DNA rovnajícím se 500 ng na jamku, obsahující 1 ng plazmidu pRL-CMV (Promega lne., Madison, WI), variabilním množstvím v rozmezí od 1 do 100 ng každého z plazmidů pXL3635 a pXL3634, jak bylo popsáno výše, q.s. 500 ng pUCl9.
Směs plazmidů byla inkubována s 6 nmol RPR 120535B (Byk et al., J Med Chem. 41, 1998, 229-35) na gg DNA (0,3 μΐ roztoku lipidu v koncentraci 10 mM) v konečném objemu 20 μΐ ve 150mM NaCl, 50mM hydrouhličitanu, a pak míchána na vortexu po dobu 5 sekund a znovu inkubována po dobu přibližně 20 až 30 minut při teplotě místnosti.
Směs pak byla přidána ke 250 μΐ média bez séra a inkubována s buňkami po dobu alespoň 2 hodin. Médium bylo nakonec odstraněno a buňky byly inkubovány po dobu pohybující se od 24 hodin do 7 dnů při teplotě 37 °C v přítomnosti 5% CO2.
Buňky byly sklízeny 24 hodin nebo 48 hodin po transfekci a • · ··· ·
004«
- 24 «0 4«
0 0 0 0 «404 « 4 0 «0 0 «444 «000
00« «0 00 «4 «0 aktivita Renillia luciferázy a luciferázy ze světlušek byla analyzována s pomocí soupravy Promega Duál Luc podle instrukcí výrobce. Aktivity byly odečítány na přístroji Victor.
Příklad 6
Komparativní vyhodnocení in vitro aktivity polynukleotidu
Relativní aktivity CARP polynukleotidu (pXL3634) a RSV (pXL3635) promotorů byly vyhodnoceny in vitro přechodnou transfekcí v primárních kulturách kardiomyocytů z laboratorních potkanů a byly exprimovány relativně k aktivitě plazmidů pRL-CMV (obrázek 5) .
Výsledky ukazují, že použitý polynukleotid v protisměru od CARP genu (pXL3634) má velmi nízkou in vitro aktivitu, řádově 0,04 % relativně k aktivitě CMV promotoru.
Relativní aktivita nespecifického silného RSV promotoru (pXL3635) byla také nízká, v daném pořadí řádově 0,05 % a 0,68 % aktivity referenčního CMV promotoru.
Příklad 7
Konstrukce adenoviru
Adenovirus umožňující expresi luciferázy pod kontrolou CARP promotoru byl konstruován podle způsobu autorů Crouzet et al. (PNAS, 94, 1997, 1414-1419), expresní kazeta byla totožná s kazetou plazmidů pXL3634 (obrázek 3).
Kyvadlový vektor umožňující rekombinaci v E. coli byl konstruován ve dvou stádiích. Nejdříve byl CARP promotor
44 4
- 25 * * 4 · * * · · 4 4 4 4 ··· 4 4 4 · · · ····* 4 · ··· · · ·
4 444 44 444 4 4
4 4444 4*44
4*4*9 *· ·4 44 4* (fragment: Xhol doplněn Klenow/BamHI) zaveden do pXL3474 (štěpen se Seal a BglII) mezi úseky ITR-Ψ a pIX, aby vznikl piazmid pXL3758. pXL3759 pak byl vytvořen zavedením do pXL3758, štěpením s BstBII (doplněn Klenowem) a BstEII, fragment obsahující luciferázovou cDNA a SV40 polyadenylační místo (BamHI fragment doplněn s Klenow/BstEII z pXL3634). pXL3759 je schématicky ukázán na obrázku 6A.
Homologní dvojitá rekombinace v E. coli byla uskutečněna tak, jak bylo popsáno výše, před plazmidem pXL3215 obsahujícím ΔΕ1/ΔΕ3 adenovirový genom, do kterého byla zavedena RSV-LacZ expresní kazeta do El úseku. Piazmid pXL3215 je derivát plazmidu pXL2689, který obsahuje replikační počátek plazmidu RK2, gen rezistence na tetracyklin (Crouzet et al. PNAS, 1997). Produkt této dvojité rekombinace, piazmid pXL3778, byl kontrolován sekvencováním expresní kazety. Po štěpení s PacI, aby se uvolnil lineární virový genom, byl piazmid transfekován do buněčné linie Per.C6 (WO 97/00326), aby se vytvořil virus AVI.0CARP-Luc+.
Virus byl také kontrolován sekvencováním expresní kazety restrikční analýzou a přítomnost částic RCA E1+ (replikačně kompetentní adenovirus) byla testována hybridizací se sondou Ψ.
Zásobní roztoky s vysokým titrem viru byly získány amplifikací viru v linii Per.C6 a virové částice byly purifikovány na CsCl gradientu. Titr tohoto viru ve virových částicích/ml (vp/ml) byl získán chromatografií a aktivita byla testována in vitro titrací luciferázové aktivity po infekci svalových buněk kosterního svalstva nebo kardiálních svalových buněk a srovnáním s viry používanými jako kontrola obsahujícími CMV promotor.
»4 4444 • 4 4444
- 26 44 44 • 4 · · · 4 4« 4
44444 44444 44 4
4 444 44 444 4 4 · 4 » 4 4 4 4444
444 4 4 44 44 44
Příklad 8
Injekce DNA in vivo
Laboratorní potkani kmene CD SPRAGUE o hmotnosti 200 g byli uvedeni do anestézie směsí Ketaminu v koncentraci 70 mg/ml/Xylazinu v koncentraci 6 mg/ml v dávce 1 ml/kg injikované intraperitoneálně.
Intramyokardiální injekce byly prováděny po laparotomii transdiafragmaticky Hamiltonovou skleněnou injekční stříkačkou o objemu 100 μΐ připojenou ke katétru Steriflex (ref. 167.10 G19 V) vybaveným stop-přírubou a ukončeným jehlou BD 26G*3.8 (krátké sešikmení). Po dobu 5 sekund tak bylo injikováno 50 μΐ DNA roztoku v 0,9% NaCl.
Po utracení zvířat byla srdce odstraněna, promyta v 0,9% roztoku NaCl a makroskopicky vyšetřena. Srdce pak byla analyzována na luciferázovou aktivitu pomocí soupravy (Promega E151A) po rozmělnění homogenizátorem (Ultra-thurax, Diax600 Heidolph) v lyzačním pufru ze soupravy doplněném inhibitory proteázy (C0mplete™, Roche Diagnostics), pak následovala centrifugace po dobu 20 minut ve 4 000 rpm ve 4 °C. Odečty byly prováděny na přístroji LUMAT LB 9501 (10 μΐ supernatantu + 50 μΐ luciferázového substrátu Promega). Luciferázové aktivity byly konvertovány na hmotu luciferázy v srdci (pg luciferázy/srdce) s použitím kalibrace popsané v práci autorů Mir et al (PNAS, 96, 1999, 4262-4267) .
Alternativně byla srdce fixována ve 3,7% paraformaldehydu a analyzována imunohistochemickým vyšetřením na expresi FGF-1.
- 27 ♦ · AAAA • A A · · · A A A
A AAAA A AAAA A A A
A A AAA AA AAA A A
AA A AAAA AAAA • A AAA AA AA AA AA
Příklad 9
Komparativní vyhodnocení in vivo aktivity CARP polynukleotidu
Výsledky shrnuté na obrázku 7A ukazují, že hladiny exprese luciferázy získané po injekci zvyšujících se dávek 1, 5, 25 a 125 μρ plazmidů pXL3031 a pXL3634, nejsou významně odlišné, což jasně dokazuje, že polynukleotid v protisměru od CARP genu je schopný indukovat vysoké hladiny exprese ekvivalentní hladinám silného promotoru, jako je například CMV.
Na druhé straně, exprese dosažená s dalším silným virovým promotorem, promotorem RSV (pXL3635), byla slabší, než exprese dosažená s CMV promotorem nebo polynukleotidem v protisměru od CARP genu (obrázek 7B).
Navíc, ačkoli se přidání CMV enhanceru v protisměru od promotorů buněk hladkého svalstva (SM α-aktin, pXL3130 nebo SM22, pXL3153) ukázalo in vitro velmi účinné (WO 00/18908), zdá se, že in vivo je v srdečních buňkách neúčinné.
Příklad 10
Vyhodnocení specifity exprese CARP polynukleotidu
Intrakardiální transdiafragmatickou injekcí bylo laboratorním potkanům podáváno 25 μg každého z plazmidů pXL3634, pXL3435 a pXL3031 .
Souběžně byly prováděny intramuskulární injekce do kraniálního holenního svalu skupiny myší 10 μg každého z těchto plazmidů s elektrotransferem nebo bez něj.
Exprese luciferázy byla analyzována 7 dnů po injekci tak, • ••4
44 4
444 444 44 4
4 4·· 4 4 444 4 4 4
449449949 4
4 4444 4444
444 44 4« 44 44
- 28 jak bylo popsáno (PNAS, 96, 1999, 4262-4267).
Hladiny exprese luciferázy v srdci byly exprimovány relativně k hladinám pozorovaným v kraniálním holenním svalu a jsou shrnuty na obrázku 8.
Výsledky jasně ukazují, že polynukleotid v protisměru od CARP genu a CMV promotor jsou jediné dva promotory schopné indukovat nej vyšší expresi v srdeční tkáni. Nicméně, poměr exprese srdce/sval je 1 při CMV promotoru, zatímco tento poměr je blízko 100, když byl použit polynukleotid v protisměru od CARP genu, což jasně ukazuje velice vysokou selektivitu druhého uvedeného k srdeční tkáni.
Výhodnost specifity exprese polynukleotidu je také jasná relativně k jiným konstruktům obsahujícím enhancer a promotor specifický pro buňky hladkého svalstva, jako je například genu kódujícího protein SM-22 a aktin, jehož poměr exprese srdce/sval jsou také uvedeny pro ilustraci na obrázku 8.
- 29 •9 ···· • 9 ·· • 99 999 99 • · 99« · · 99« 9 ·
9 9 9 9 9 99 *9 *«« 99 99 9« • «99
Seznam sekvencí <160> 3 <Π0> PatentTn Ver. 2.1 <210> 1 <211> 2358 <212> DNA <213> Mus musculus <400> 1 ggatcctttc atgtttaaca atatcaaccc,taacccaagg ggaacagcct gcctgacagt 60 ggctttgcca cccatgaata cttcctagtc tagtocgttt gtgaaactca goccatccca 120 acacttctgc aagccccatc ctctacaagg tgctcattgg gaatttcctg gagcttctct 180 ttcaggatca gcctgattct agggcagcag ttctcaacct gggggcctcg accectttgg 240 gggaatcaaa cgacccttta caggggtoac atatcatcta tcctatatgt caggtattta 300 cattacgatt čgtaacagta gcaaaattae aggtatgaaa tagcaatgaa ataattttat 360 gattgaaggfc caccacaaca tgaggccgcc acactgttct agagaaaaat cacctgggtg 420 gggaaaggtt tgggaaagcc tttctgtcca ttcttcattc ttcaaagtga tgtgttcaca 480 gaaagccttt cagctgttct gctggggcto ttagtaagtc tgagtaggaa ctgtatgtac 540 caggtctgct tcttatgggt ggagccaaga cgcatcgtgg gtggagcgaa gacgcaacct 600 caccttctag ctctgcatcc atagcaagta gcctaatgtt tctgtgtcta ggtgtcatct 660 ctgtgaatcg agatcctfcgg ócttgcttga attagggagg cacaaaatac toagagattc 720 aagactgctc agcagcccag agtccttcct caaaggaaag gtctcaactc tcagcccccc 780 ttagctctga gtcaggcctg gaacaaacgg ccacaggaat gagaaaagct gccatagctg 840 cttgtcactt caagaggfcca aagaaaatag tgttaaccat gaaaacgaga agaccaacag 900 ttatccattg atagcgtctc aggacagata ggacagagag aacactagga gaggggaacc 960 cacgaaggac aággtattag tgtgttggtt ttcagggcaa tgtcttgtac tgaagattct 1020 agaaacaoaa tttgctggtt gaacagctga agtggggtgg gggttcttae ccčatgttca 1080 tggaagggtg agtgaggaga gacagatata tgatggccag cataacaaac atacacaaca 1140 ccctaattaa cacttccctc ttctactgac acccccttca ctctcctctt tcataaaaaa 1200 taáaaaaagt attttatgtg gctcttacga tagaatcttt ectcgaacta taaaaagatc 1260 taaatattta tatttttcac attttaatat cttagcgatg acaagccaga aacaagtatt 1320 ttttgcctct ctcaacagaa aagcttgggg cctttttgtt tccgtgttag gaatagaaca 1380 cgagágcccc gtgtatctag gcagatgctc tatcattagc ccatgagtot ccagcctcag 1440 acgcacattt ttctcgggct ctcttaagct tttcccacag cattgggaaa ctttactgac 1500 agcatccaag ttgtgcttct gctaagaact ggactcacat ctctctgtgo atcacfctcgg 1560 cccgttttgg ggtagatcct ctgattagcc ttcagáttta gaacacggtg agcctgtggt 1620 gcactaatta tggccagtga caccatagag tcaaagtgca ttactgaatg ctttcaattt 1680 etectaatgc tggtacgatg gcatgtcaca gggccatttt agctgcagac atcactccag 1740 agaattccaa acagatagag acaagtggca cccagaccca tctccttccc etcgggctga 1800 ttatccccag aaataggatg tcccaaagca acacttccca gcoaactgga gtgctgataa 1860 gtccagttat cagaaagata tggctgtaag tgtgatgcac agtgcttgca ttttcttgat 1920 acgttagtca tatgagagct gacaaagaag gaaaaagagc agcgatgtgg tgcaatatta 1980 acaggeagct gtcccctggc ttcccgatac gtgggatgac tcgcattgct gagcggtgtg 2040 gtcactgoca aaggaatgac cctctcacat ttcttcctga ttcgcatacg ccgcggccag 2100 cttgtcatct ccctcttggg cttcocagac actaagtctg gaatgaaaat tcacctgcct 2160 ctgaattggc cactggtggg ggcaggggtg tgacttggct tcecaggctg gaagattatc 2220 tcacccagcc ctagctatat aacgggctgg tgtggagggg ctccacaggg ccagttccag 2280 gggttcatcc acaagagaga aaaacataga ctcgaggtct agggagcttg catgcctgca 2340 ggtcggaggc oaccatgg 2358
- 30 ·· ···« «· ·*··
9 9 9 9 9 9 9 9
9 999 9 9 999 99 9
9 999 99 999 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 ·· 999 99 99 99 99 <210> 2 <211> 2074 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 2 ctgcagcaag ttacttaatg ttttttgcct cagcatcctc gtcttgctcc aacttcgagg gcatggacag ctctgggatt catcccaoag tcottcoecc aaacacttct cctcctaata gcctggaaca aaaaggčata cgaaatggta gaaaaagtgt gatgaagaga ccaatgaaaa tagtaatgac tctgtttgct ataggagcta tacaaagaag attagcatgg actctgtgca gaaacattcc atatattaaa aataaataaa taataaagag aaaatagtga tagctgtgtc catctcaaag aaaagcccag cctttaagat agaatattag gagaccggaa catatgatac ctctttgtca afcgttttgtc ttggggtggg gagtcgatgt accatccact gactgagcat tcaaggggca agaggagaat gggtgagttt ggggagaaat agacacacaa aggtcaaaca ccctccattc acaattccct tctcccattc ttctatcctg agtttttcct gaaactataa aaataccccc agtatgttta ttagaaacca gaaatagaga cottttoaac ccttccggaa agccacgtgt ctcaaatctt gatgcatcag aatcatctgg attcctacga gttaccataa atcaactcag aattccctgg tttctgacaa gctcccacag gtgattcctt tccccacagc tgacctaatc agagtcctgc cattgctaat atctggtctc tagtatttgt ggtagagatg ggattttgcc atgttgccca gctaagcaat cttcctgtct ctgcctccca aaatgttggg cacecggctg atagctggtt tcatttactc tatttcttga gtaaaáatgc tccaattafct atgctgtttfc agaacacggt gccagtgaca tcátaaaaga aaagtgcatt actgaatgct gtaaggtggc atgtcatggg gcctatttag cccagacatc gatatagaca agtgccttta gggccoagat cccttcccct taggatgtcc tgggacaagt ttcccctaag tgaagtgttg gatattactg ggggtgtgat atgtagggca tctacatttt aagctgacaa agaaaaaaag ggcagtgatg tggtgcaatg gactcttgác aaataggatg acttgcattg ctgagcgatg gccctctcac atttcttcct gattcacata ttcagcaggg tcttcagctt cccagacact gagtctggaa tgaaaattca taátgggggc gggagtgtta cttcggttcc cággttggaa gctatataag ctgaccggtg tggaggggoc cagcagggcc cgacagaaaa acatacaaga ctccttcagc caac tctgtaaaat gagagcatta 60 tcatatccaa gacccttaaa 120 cctccctcag tttgggtcag 180 ccatgactac ttatgactta 240 tcagcaggac atatactaaa 300 agaatgacac acaaatttgt 360 aaaaggaaaa aattaaaaag 420 gagatttcct ttatttacco 480 aggaggtact gggagggtcc 540 cttctcaaag tttcagaaac 600 ggcagceaca tttgttgatt 660 taacttccta attaacactt 720 tcttttacts akaraaaccc 780 cataatttac acctcaaaga 840 gcaaagtgca ttatccctcc 900 ' gtgctttkaa attcaagatg 960 agtggggcca gggatctgta 1020 , atttgagaac ttcagctcaa 1080.· atttttbtca tatatatata 1140 ggctagtatt gaactcctaa 1200 attacaggtg taagccactg 1260 ccactctgat ecattttgaa 1320 . aagcatgtca tgtgctaatg 1380 ttcaatgtct tataatgatg 1440 actccaaaga attccaaaca 1500 caggetgttt acccagggaa 1560 ataagtctgc ttatcagaaa 1620 cttgataggt agtcatatga 1680 tcaacagaca gctgtcccct 1740 tgatcaccac caaaggaatg 1800 ttagcttgtc ctcccctccc 1860 cctgcctctg agttggctcc 1920 gattatctca cccggcccca 1980 aactccaggg attccttcca 2040
2074 <210> 3 <211> 750 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3
Met Gly Glu Thr Leu Gly Asp Ser Pro Ile Asp Pro Glu Ser Asp Ser 1 5 10 . 15 .
- 31 ·« ···« • · * • · · · · • · ·
9 ·
9 99 • · · • « ··· • · · a • · · « a· «« ·««« a
| Phe | Thr | Asp | Thr 20 | Leu | Ser | Ala | Asn | Ile 25 | Ser | Gin | Glu | Met | Thr Met 30 | Val |
| Asp | Thr | Glu 35 | Met | Pro | Phe | Trp | Pro 40 | Thr | Asn | Phe | Gly | Ile 45 | Ser Ser | Val |
| Asp | Leu 50 | Ser | Val | Met | Glu | Asp 55 | His | Ser | His | Ser | Phe 60 | Asp | Ile Lys | Pro |
| Phe 65 | Thr | Thr | Val | Asp | Phe 70 | Ser | Ser | Ile | Ser | Thr 75 | Pro | His | Tyr Glu | Asp 80 |
| Ile | Pro | Phe | Thr | Arg 85 | Thr | Asp | Pro | Val | Val 90 | Ala | Asp | Tyr Lys Tyr Asp 95 | ||
| Leu | Lys | Leu | Gin 100 | Glu | Tyr | Gin | Sex | Ala 105 | Ile | Lys | Val | Glu | Pro Ala 110 | Ser |
| Pro | Pro | Tyř 115 | Tyr | Ser | Glu | Lys | Thr 120 | Gin | Leu | Tyr | Asn | Lys 125 | Pro His | Glu |
| Glu | Pro 130 | Ser | Asn | Ser | Leu | Met 135 | Ala | Ile | Glu | Cys Arg 140 | Val | Cys Gly Asp | ||
| Lys 145 | Ala | Ser | Gly | Phe | His 150 | Tyr | Gly | Val | His | Ala 155 | Cys | Glu | Gly Cys | Lys 160 |
| Gly | Phe | Phe | Arg | Arg 165 | Thr | Ile | Arg | Leu | Lys 170 | Leu | Ile | Tyr | Asp Arg 175 | Cys |
| Asp | Leu | Asn | Cys Arg 180 | Ile | His | Lys | Lys 185 | Ser | Arg | Asn | Lys | Cys Gin 190 | Tyr |
| Cys | Arg | Phe 195. | Gin | Lys | Cys | Leu | Ala 200 | Val | Gly | Met | Ser | His 205 | Asn | Ala | Ile |
| Arg | Phe 210 | Gly Arg | Met | Pro | Gin 215 | Ala | Glu | Lys | Glu | Lys 220 | Leu | Leu | Ala | Glu | |
| Ile 225 | Ser | Ser | Asp | Ile | Asp 230 | Gin | Leu | Asn | Pro | Glu 235 | Sex | Ala | Asp | Leu | Arg 240 |
| Ala | Leu | Ala | Lys | His 245 | Leu | Tyr Asp | Ser | Tyr 250 | Ile | Lys | Ser | Phe | Pro 255 | Leu | |
| Thr | Lys | Ala | Lys 260 | Ala | Arg | Ala | Ile | Leu 265 | Thr | Gly Lys | Thr | Thr 270 | Asp | Lys | |
| Ser | Pro | Phe 275 | Val | Ile | Tyr Asp | Met 280 | Asn | Ser | Leu | Met | Met 285 | Gly | Glu | Asp | |
| Lys | Ile | Lys | Phe | Lys | His | Ile | Thr | Pro | Leu | Gin | Glu | Gin | Sex | Lys | Glu |
290 29S 300
Val Ala Ile Arg II© Phe Gin Gly Cys Gin Phe Arg Sex Val Glu Ala 30S 310 315 320
- 32 φφ ·Φ*« • φ • φ • φ • * * · «
φ«· * · φ
Λφφ
Φ· »* »· φ
Φ·· φ · φ • φ φφ φ φ φ φ φ φ φ » φφ ·»·· φφ «
t • φ φφ
| Val | Gin Glu | Ile | Thr 325 | Glu Tyr Ala Lys Ser Ile Pro Gly Phe Val Asn | |
| 330 | 335 | ||||
| Leu | Asp Leu | Asn | Asp | Gin Val Thr Leu Leu Lys | Tyr Gly Val His Glu |
| 340 | 345 | 350 | |||
| Ile | Ile Tyr | Thr | Met | Leu Ala Ser Leu Met Asn | Lys Asp Gly Val Leu |
| 355 | 360 | 365 | |||
| Ile | Ser Glu | Gly | Gin | Gly Phe Met Thr Arg Glu | Phe Leu Lys Ser Leu |
| 370 | 375 | 380 | |||
| Arg Lys Pro | Phe | Gly Asp Phe Met Glu Pro Lys | Phe Glu Phe Ala Val | ||
| 385 | 390 395 | 400 | |||
| Lys Phe Asn | Ala | Leu | Glu Leu Asp Asp Ser Asp | Leu Ala Ile Phe Ile | |
| 405 | 410 | 415 | |||
| Ala Val Ile | Ile | Leu | Ser Gly Asp Arg Pro Gly | Leu Leu Asn Val Lys | |
| 420 | 425 | 430 | |||
| Pro | Ile Glu | Asp | Ile | Gin Asp Asn Leu Leu Gin | Ala Leu Glu Leu Gin |
| 435 | 440 | 445 | |||
| Leu | Lys Leu | Asn | His | Pro Glu Ser Ser Gin Leu | Phe Ala Lys Leu Leu |
| 450 | 455 | 460 | |||
| Gin | Lys Met | Thr | Asp | Leu Arg Gin Ile Val Thr | Glu His Val Gin Leu |
| 465 | 470 ' 475 | ,480 | |||
| Leu | Gin Val | Ile | Lys | Lys Thr Glu Thr Asp Met | Ser Leu His Pro Leu |
| 485 | 490 | 495 | |||
| Leu | Gin Glu | Ile | Tyr | Lys Asp Leu Tyr Ala Trp | Ala Ile Leu Thr Gly |
| 500 | 505 | 510 | |||
| Lys | Thr Thr | Asp | Lys | Ser Pro Phe Val Ile Tyr Asp Met Asn Ser Leu | |
| 515 | 520 | 525 | |||
| Met | Met Gly | Glu | Asp | Lys Ile Lys Phe Lys His | Ile Thr Pro Leu Gin |
| 530 | 535 | 540 | |||
| Glu | Gin Ser | Lys | Glu | Val Ala Ile Arg Ile Phe | Gin Gly Cys Gin Phe |
| 545 | 550 555 | 560 | |||
| Arg | Ser Val | Glu | Ala | Val Gin Glu Ile Thr Glu | Tyr Ala Lys Ser Ile |
| 565 | 570 | 575 | |||
| Pro | Gly Phe | Val | Asn | Leu Asp Leu Asn Asp Gin | Val Thr Leu Leu Lys |
| 580 | . 585 | 590 | |||
| Tvr Gly Val | HIS | Glu | Ile Ile Tyr Thr Met Leu | Ala Ser Leu Met Asn | |
| 595 | 600 | 605 | |||
| Lys Asp Gly | Val | Leu | Ile Ser Glu Gly Gin Gly | Phe Met Thr Arg Glu | |
| 610 | 615 | 620 | |||
| Phe | Leu Lys | Ser | Leu | Arg Lys Pro Phe Gly Asp | Phe Met Glu Pro Lys |
- 33 • ·· • · · ·· · · ···· • · · · · · • · · · · · · · • · »·· ·· · · · · · • · · · · · · ···· 99 999 9 9 9 9 9 9 9 9
| 625 | 630 | 635 | 640 | ||||||||||||
| Phe | Glu | Phe | Ala | Val 645 | Lys | Phe | Asn | Ala | Leu 650 | Glu | Leu Asp Asp | Ser 655 | Asp | ||
| Leu | Ala | lle | Phe 660 | lle | Ala | Val | lle | lle 665 | Leu | Ser | Gly Asp Arg 670 | Pro | Gly | ||
| Leu | Leu | Asn 675 | Val | Lys | Pro | lle | Glu 680 | Asp | lle | Gin | Asp | Asn 685 | Leu | Leu | Gin |
| Ala | Leu 69Ó | Glu | Leu | Gin | Leu | Lys 695 | Leu | Asn | His | Pro | Glu 700 | Ser | Ser | Gin | Leu |
| phe 705 | Ala | Lys | Leu | Leu | Gin 710 | Lys | Met | Thr | Asp | Leu 715 | Arg | Gin | lle | Val | Thr 720 |
| Glu | His | Val | Gin | Leu 725 | Leu | Gin | Val | lle | Lys 730 | Lys | Thr | Glu | Thr | Asp 735 | Met |
| Ser | Leu | His | Pro | Leu | Leu | Gin | Glu | lle | Tyr | Lys | Asp | Leu | Tyr |
740 745 750
Claims (26)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Polynukleotid obsahující fragment sekvence v protisměru od kódující části genu pro protein CARP mající sekvenci uvedenou v seznamu sekvencí jako SEKVENCE ID. Č. 1 nebo sekvenci, která s ní hybridizuje v podmínkách vysoké stringence, přičemž polynukleotid je schopen indukovat in vivo specifickou expresi genu operativně spojeného s polynukleotidem v srdečních buňkách.
- 2. Polynukleotid, který má alespoň 93% identita se SEKVENCÍ ID. Č. 1.
- 3. Polynukleotid podle nároku 1, kde fragment je obsažen v sekvenci zahrnující nukleotidy -2266 až +92 v myším genu pro protein CARP uvedeném jako SEKVENCE ID. Č. 1.
- 4. Expresní kazeta, která obsahuje sekvenci kódující požadovaný terapeutický protein nebo RNA, kterážto kazeta je umístěna pod kontrolu DNA sekvence definované ve kterémkoliv z nároků 1 až 3.
- 5. Expresní kazeta, která obsahuje sekvenci kódující požadovaný terapeutický protein nebo RNA, kterážto kazeta je umístěna pod kontrolu DNA sekvence mající alespoň 80% sekvenční identitu se sekvencí uvedenou v seznamu sekvencí jako SEKVENCE ID. Č. 2.
- 6. Kazeta podle kteréhokoliv z nároků 4 a 5, kde protein nebo RNA jsou schopny aktivovat růst srdečních buněk, redukovat nebo potlačovat imunitní reakce, indukovat angiogenezi, korigovat kontraktilitu svalu, srdeční • · · ·- 35 4·· 4 4 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 4444 4 4 4 «4 444 44 ·«4 4 444 4 4444 4444 «4 444 44 4 0 4 4 44 hypertrofii, srdeční vadu a myokarditidu.
- 7. Kazeta podle kteréhokoliv z nároků 4 až 6, kde požadovaný terapeutický protein je protein z rodiny obsahující VEGF, FGF, angiopoetiny a cytokiny.
- 8. Kazeta podle kteréhokoliv požadovaný terapeutický protein je transkripční faktor.z nároků 4 až 6, kde aktivační nebo inhibiční
- 9. Kazeta podle kteréhokoliv z nároků 4 až 6, kde požadovaný terapeutický protein je imunosupresivní protein jako například interleukin-10, interleukin-2 a interleukin-8.
- 10. Kazeta podle kteréhokoliv z nároků 4 až 6, kde požadovaná terapeutická RNA je antisense RNA, která umožňuje potlačit expresi genů nebo blokovat transkripci z mRNA v srdečních buňkách.
- 11. Kazeta podle nároku 4 až 6, kde protein je agens pro redukci hypoxie, vybrané ze skupiny obsahující syntetázu oxidu dusnatého (NOS), superoxid dismutázy (SOD) a katalázy.
- 12. Vektor, který obsahuje polynukleotid podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3.
- 13. Vektor, který obsahuje expresní kazetu podle kteréhokoliv z nároků 4 až 11.
- 14. Vektor, který obsahuje replikační počátek, který je účinný v srdečních buňkách.• · · 4 · ·- 36 ·· · ··· ♦ · ♦ · · · • 4 4 44 4 • 4 * • 44 » · · 4444 44444444· 4 4 44 44 44
- 15. Vektor podle kteréhokoliv z nároků 12 až 14, kterým je plazmid, kozmid nebo jakákoliv DNA, která není ve virové kapsidš.
- 16. Vektor podle kteréhokoliv z nároků 12 a 14, kterým je rekombinantní virus vybraný ze skupiny obsahující adenovirus, retrovirus, herpesvirus, adeno-asociované viry nebo jejich deriváty.
- 17. Kompozice vyznačující se tím, že obsahuje vektor podle kteréhokoliv z nároků 12 až 16.
- 18. Kompozice vyznačující se tím, že obsahuje vektor podle kteréhokoliv z nároků 12 až 16 a chemické nebo biochemické přenosové agens.
- 19. Lék vyznačující se vektor podle kteréhokoliv z nároků 12 až tím,16.že obsahuje
- 20. Farmaceutický přípravek vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství polynukleotidu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 nebo vektoru podle kteréhokoliv z nároků 12 až 16.
- 21. Použití polynukleotidu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 nebo vektoru podle kteréhokoliv z nároků 12 až 16 pro výrobu léku určeného pro léčení srdeční vady.
- 22. Použití polynukleotidu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 nebo vektoru podle kteréhokoliv z nároků 12 až 16 pro výrobu léku určeného k léčení srdeční hypertrofie.- 37 * · · » · 0 0 · ··· «00 0« 0 0 0440 « 009« « 0 « • 40 040 0 0000 000«00 900 00 00 0« 00
- 23. Použití polynukleotidu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 nebo vektoru podle kteréhokoliv z nároků 12 až 16 pro výrobu lék určeného léčbě hypoxie.
- 24. Použití polynukleotidu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 nebo vektoru podle kteréhokoliv z nároků 12 až 16 pro výrobu léku pro prevenci rejekce během srdeční transplantace.
- 25. Transgenní zvíře, které nese polynukleotid podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, ve kterém je gen kódující požadovaný terapeutický protein nahrazen reportérovým genem.
- 26. Způsob in vivo exprese požadovaného terapeutického genu vyznačující se tím, že zahrnuje krokya) izolace vektoru podle kteréhokoliv z nároků 12 až 16 ab) vnesení účinného množství vektoru do srdeční tkáně v podmínkách, kdy je požadovaný gen exprimován.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US25158200P | 2000-12-07 | 2000-12-07 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20031569A3 true CZ20031569A3 (cs) | 2003-11-12 |
Family
ID=22952571
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20031569A CZ20031569A3 (cs) | 2000-12-07 | 2001-12-05 | Polynukleotidy obsahující fragment sekvence v protisměru od genu CARP, vektory a expresní kazety, které je obsahují, a jejich použití |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US7193075B2 (cs) |
| EP (1) | EP1358208A2 (cs) |
| JP (1) | JP2004519222A (cs) |
| KR (1) | KR20030090609A (cs) |
| CN (1) | CN1483040A (cs) |
| AU (2) | AU2640002A (cs) |
| BR (1) | BR0116014A (cs) |
| CA (1) | CA2431193A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ20031569A3 (cs) |
| FI (1) | FI20030851A (cs) |
| IL (1) | IL156137A0 (cs) |
| MX (1) | MXPA03005039A (cs) |
| NO (1) | NO20032584L (cs) |
| NZ (1) | NZ526408A (cs) |
| PL (1) | PL365314A1 (cs) |
| RU (1) | RU2283865C2 (cs) |
| WO (1) | WO2002046220A2 (cs) |
| ZA (1) | ZA200305184B (cs) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2526792A1 (en) * | 2003-06-05 | 2004-12-16 | Centelion | Plasmid encoding fibroblast growth factor for the treatment of hypercholesterolemia or diabetes associated angiogenic defects |
| NZ584848A (en) * | 2007-09-28 | 2012-09-28 | Intrexon Corp | Therapeutic gene-switch constructs and bioreactors for the expression of biotherapeutic molecules, and uses thereof |
| WO2010062518A1 (en) * | 2008-10-28 | 2010-06-03 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Sulfonylurea-responsive repressor proteins |
| WO2010091204A1 (en) * | 2009-02-04 | 2010-08-12 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Dual targeting of mir-208 and mir-499 in the treatment of cardiac disorders |
| RU2497529C2 (ru) * | 2011-11-08 | 2013-11-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова" (МГУ) | Способ стимуляции регенеративных процессов в ишемизированных тканях |
| CN105779457B (zh) * | 2016-05-31 | 2019-02-12 | 北京大学 | 心肌细胞特异启动子及其应用 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU5819599A (en) * | 1998-09-11 | 2000-04-03 | Regents Of The University Of California, The | Recombinant adenovirus for tissue specific expression in heart |
| US6033642A (en) * | 1999-03-29 | 2000-03-07 | Starmet Corporation | Method for producing silicon tetrafluoride from uranium oxyfluoride |
-
2001
- 2001-12-05 PL PL01365314A patent/PL365314A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2001-12-05 JP JP2002547956A patent/JP2004519222A/ja not_active Withdrawn
- 2001-12-05 WO PCT/EP2001/015412 patent/WO2002046220A2/en active IP Right Grant
- 2001-12-05 IL IL15613701A patent/IL156137A0/xx unknown
- 2001-12-05 MX MXPA03005039A patent/MXPA03005039A/es active IP Right Grant
- 2001-12-05 NZ NZ526408A patent/NZ526408A/en unknown
- 2001-12-05 CA CA002431193A patent/CA2431193A1/en not_active Abandoned
- 2001-12-05 AU AU2640002A patent/AU2640002A/xx active Pending
- 2001-12-05 CN CNA01821309XA patent/CN1483040A/zh active Pending
- 2001-12-05 CZ CZ20031569A patent/CZ20031569A3/cs unknown
- 2001-12-05 AU AU2002226400A patent/AU2002226400B2/en not_active Ceased
- 2001-12-05 KR KR10-2003-7007662A patent/KR20030090609A/ko not_active Application Discontinuation
- 2001-12-05 BR BR0116014-1A patent/BR0116014A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-12-05 EP EP01995724A patent/EP1358208A2/en not_active Withdrawn
- 2001-12-05 RU RU2003120081/13A patent/RU2283865C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-12-07 US US10/005,337 patent/US7193075B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2003
- 2003-06-06 FI FI20030851A patent/FI20030851A/fi unknown
- 2003-06-06 NO NO20032584A patent/NO20032584L/no not_active Application Discontinuation
- 2003-07-03 ZA ZA200305184A patent/ZA200305184B/en unknown
-
2005
- 2005-09-30 US US11/239,469 patent/US20060110362A1/en not_active Abandoned
-
2006
- 2006-08-23 US US11/508,239 patent/US20070150971A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP1358208A2 (en) | 2003-11-05 |
| AU2002226400B2 (en) | 2006-11-02 |
| NZ526408A (en) | 2005-07-29 |
| US7193075B2 (en) | 2007-03-20 |
| RU2283865C2 (ru) | 2006-09-20 |
| CA2431193A1 (en) | 2002-06-13 |
| WO2002046220A9 (en) | 2007-11-08 |
| JP2004519222A (ja) | 2004-07-02 |
| KR20030090609A (ko) | 2003-11-28 |
| US20060110362A1 (en) | 2006-05-25 |
| US20070150971A1 (en) | 2007-06-28 |
| NO20032584D0 (no) | 2003-06-06 |
| CN1483040A (zh) | 2004-03-17 |
| MXPA03005039A (es) | 2004-08-02 |
| BR0116014A (pt) | 2003-10-21 |
| IL156137A0 (en) | 2003-12-23 |
| US20030039984A1 (en) | 2003-02-27 |
| NO20032584L (no) | 2003-08-05 |
| PL365314A1 (en) | 2004-12-27 |
| FI20030851A (fi) | 2003-06-06 |
| RU2003120081A (ru) | 2005-01-27 |
| WO2002046220A2 (en) | 2002-06-13 |
| AU2640002A (en) | 2002-06-18 |
| WO2002046220A3 (en) | 2003-09-04 |
| ZA200305184B (en) | 2004-10-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11773408B2 (en) | Gene-therapy vectors for treating cardiomyopathy | |
| US20210363193A1 (en) | Modified aav capsid polypeptides for treatment of muscular diseases | |
| CN113423434A (zh) | 用于基因递送的重组腺相关病毒载体 | |
| AU2008216018A1 (en) | Mitochondrial nucleic acid delivery systems | |
| US20050004058A1 (en) | Sequences upstream of the carp gene, vectors containing them and uses thereof | |
| CN114174520A (zh) | 用于选择性基因调节的组合物和方法 | |
| US20070150971A1 (en) | Sequences upstream of the carp gene, vectors containing them and uses thereof | |
| CN112639108A (zh) | 治疗非综合征性感觉神经性听力损失的方法 | |
| KR100723009B1 (ko) | 인간 ｐ３１ 유전자를 함유하는 악성 종양 치료용 약학적조성물 | |
| AU2002226400A1 (en) | Sequences upstream of the carp gene, vectors containing them and uses thereof | |
| JP2001500021A (ja) | 新規な内部リボソームエントリー部位およびそれを含有するベクター | |
| US20240035034A1 (en) | Use of a combination of an orphan motif and cpg density to control expression of a heterologous transgene | |
| ES2325711B1 (es) | Vectores de expresion que comprenden el promotor del gen pklr humano y su uso para la elaboracion de composiciones farmaceuticas destinadas a terapia genica somatica con expresion especifica en celulas eritroides. | |
| CN112041437A (zh) | 用于恢复f8基因功能的腺相关病毒组合物和其使用方法 | |
| US20230220402A1 (en) | Use of an orphan motif to increase expression of a heterologous transgene | |
| Coleman | Efficient transduction and targeted expression of lentiviral vector transgenes in the developing retina | |
| CZ20002906A3 (cs) | Rekombinantní nukleová kyselina obsahující negativní regulační elementy pro nervově specifickou exresi transgenu a její použití |