CZ20012982A3

CZ20012982A3 - Derivát gabapentinu pro prevenci a léčbu viscerální bolesti

Info

Publication number: CZ20012982A3
Application number: CZ20012982A
Authority: CZ
Inventors: Justin Stephen Bryans; Laurent Diop
Original assignee: Warner-Lambert Company
Priority date: 1999-02-23
Filing date: 2000-02-03
Publication date: 2002-05-15
Also published as: EP1031350A1; HUP0200344A3; IL144872A0; HUP0200344A2; NO20014046D0; EP1154768A1; JP2002537332A; EA200100721A1; HK1040198A1; WO2000050027A1; CN1341018A; CA2360528A1; NO20014046L; KR20010102314A; BR0008323A; AU2909800A

Description

Derivát gabapentinu pro prevenci a léčbu viscerální bolesti bolesti a

Oblast techniky

Tento vynález se týká způsobu prevence a léčby viscerální gastrointestinálních poruch, jako jsou například funkční střevní poruchy (FBD). a nespecifické střevní záněty (IBD) prostřednictvím použití účinných množství [lS-(la, 3β))-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny.

Dosavadní stav techniky

Gabapentin (1-(aminometyl) cyklohexan octová kyselina) je antiepileptický lék aktivní na různých zvířecích modelech epilepsie a účinně snižující frekvenci křečí u pacientů. Gabapentin, ačkoli je to strukturální analog γaminomáselné kyseliny (GABA) , se neváže významněji na receptory GABA, ale váže se na α2δ podjednotku kalciového kanálu (Gee NS et al. (1996) J Biological Chemistry 271: 5768-5776), což naznačuje, že modulace neuronálních Ca²⁺ kanálů závislých na napětí je důležitá pro účinek gabapentinu. Také byla prokázána korelace mezi afinitou ligandů ve vazebném místě [³H] gabapentinu a antikonvulzní aktivitou (Taylor CP et al (1993) Epilepsy Res 14: 11-15). V nedávné době bylo prokázáno, že gabapentin s.c. potlačuje na modelu chronické alodynie hypersenzitivitu tlustého střeva indukovanou pomocí TNBS (Diop L. et al. (1998) Soc Neurosci Abstr: 24:639).

Mezinárodní patentová přihláška WO 97/33858 popisuje substituované deriváty gabapentinu zahrnující [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octovou kyselinu, které se váží na α2δ podjednotku kalciového kanálu a jsou užitečné v léčbě epilepsie a příbuzných poruch centrálního nervového systému (CNS).

Běžné gastrointestinální (GI) poruchy zahrnují funkční poruchy střeva (FBD) a nespecifické záněty střeva (IBD). Tyto gastrointestinální poruchy zahrnují široké spektrum onemocnění, která jsou v současnosti pouze částečně kontrolovatelná, a která zahrnují ve skupině FBD gastrointestinální reflux, dyspepsii a syndrom dráždivého tračníku (IBS), a ve skupině IBD Crohnovu chorobu, ileitis a ulcerozní kolitidu, ktérážto onemocnění mohou všechna způsobit viscerální bolest. V nedávné době bylo u těchto patologických stavů prokázáno, obzvláště u syndromu dráždivého tračníku a u dyspepsie, že práh viscerální bolesti je snížen, což ukazuje na viscerální hypersenzitivitu.

Je známo málo léků, které selektivně působí na hypersenzitivitu sdruženou s gastrointestinálnim traktem (Farthing MJ (1998) Drugs 56: 11-21).

Dostupné léčebné prostředky proti bolesti se dělí do dvou kategorií: 1) nesteroidní protizánětlivé léky používané k léčbě mírné bolesti, jejichž terapeutické použití je však omezeno nežádoucími účinky na gastrointestinální trakt (eroze žaludku, tvorba peptického vředu, zánět duodena a tlustého střeva); 2) morfin a příbuzné opioidy používané k léčbě

01-2351-01-Če středně těžkých až těžkých bolesti, jejichž terapeutické použiti je omezeno nežádoucími účinky zahrnujícími zácpu, respirační útlum, tolerancí a potenciální abusus.

Existuje potřeba léků, které by zmírnily viscerální bolesti bez nežádoucích vedlejších účinků.

Popis vynálezu

Tento vynález se tedy týká použití kyseliny [ 1S-(Ια,3β)] (1-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové strukturního vzorce I

nebo její farmaceuticky přijatelné soli pro výrobu léčiva pro prevenci a léčbu viscerální bolesti a gastrointestinálních poruch, zejména pro výrobu léčiva určeného pro perorální podání. Gastrointestinální poruchou může být funkční střevní, gastroezofageální refluxní choroba, dispepsie, syndrom dráždivého tráčníku. Sloučenina podle vynálezu je rovněž vhodná pro léčení Crohnovy choroby, ileitidy a pulcerózní kolitidy.

Detailní popis vynálezu

Sloučenina použitá v předkládaném vynálezu, [1S-(Ια,3β)] (1aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octová kyselina (vzorec uvedený strukturní vzorec I), je popsaná v mezinárodní patentové přihlášce (WO 97/33858, která je tímto začleněna jako reference, a která obecněji popisuje substituované deriváty gabapentinu, včetně kyseliny [ 1S-(Ια,3β)] (l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové. Takové deriváty se váží na α2δ podjednotku kalciového kanálu a jsou užitečné v léčbě epilepsie. V této přihlášce WO 97/33858 bylo prokázáno, že sloupenina využitá v předkládaném vynálezu má podobu afinitu k α2δ podjednotce derivované z mozkové tkáně prasete, jako má gabapeptin.

Nyní bylo prokázáno, že kyselina (Ια,3β—]-(l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octová, ačkoli má podobnou nebo menší aktivitu na somatickou bolest nebo epilepsii, je překvapivě desetkrát účinnější na viscerální bolesti než gabapeptin.

Tento vynález je v rozporu s dobře známou znalostí, že na každé úrovni nervového systému převládá těsný vztah mezi dráhami somatické a viscerální bolesti (Cross SA (1994) Mayo Clin Proč. 69:375-83.

&>_hf • · ♦ «·· ♦ · '·« • ·.· · ' · ·· • · ·· • · · ♦ 9 9 9

Sloučeniny použité v předkládaném vynálezu zahrnují solváty, hydráty, farmaceuticky přijatelné soli a polymorfy (různé krystalické mřížovité řetězce) sloučeniny definované Vzorcem I.

Tam, kde je vhodné vytvořit sůl, zahrnují farmaceuticky přijatelné soli acetát, benzensulfonát, benzoát, bitartarát, kalcium acetát, kamsylát, karbonát, citrát, edenát, edisylát, estolát, esylát, fumarát, gluceptát, glukonát, glutamát, glykoloylarsanilát, hexylresorcinát, hydrabamin, hydrobromid, isethionát, hydrochlorid, hydrogenkarbonát, hydroxynaftoát, jodid, laktát, laktobinát, malát, maleát, mandelát, mesylát, metylsulfát, mucát, napsylát, nitrát, pamoát (embonát), pantotenát, fosfát/difosfát, polygalakturonát, salicylát, stearát, subacetát, sukcinát nebo hemisukcinát, sulfát nebo hemisulfát, tanát, tartarát nebo hemitartarát, theoklát, triethijodid, benzatin, chloroprokain, cholin, dieatnolamin, etylendiamin, meglumin, prokain, hliníkové, amonné, tetrametylamonné, vápenaté, lithiové, magnéziové, draselné, sodné a zinkové soli. (Viz také Farmaceutické soli Berge SM et al. (1997) J Pharm Sci 66:1-19, kterážto publikace je tímto začleněna jako reference).

Termín pacient zahrnuje savce, obzvláště člověka.

Všechno toto je vyžadováno pro provedeni způsobu prevence a léčby viscerální bolesti a gastrointestinálních poruch FBD nebo IBD podle předkládaného vynálezu prostřednictvím podání [lS-(la, 3β)]-(1-aminometyl3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny v množství, které je účinné pro prevenci nebo léčbu patologického stavu, tj. ke kontrole viscerálních bolestí a/nebo FBD nebo IBD. Použité účinné množství [lS-(la, 3β)]-(1aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny bude obecně v rozmezí od zhruba 1 až do 300 mg/kg tělesné hmotnosti pacienta. Typické dávky budou od zhruba 10 do 5000 mg za den pro dospělého pacienta normální hmotnosti.

Typické FBD poruchy zahrnují gastroezofageální refluxní chorobu, dyspepsii a IBS. Typické IBD poruchy zahrnují ileitis, ulcerózní kolitidu a Crohnovu chorobu.

V dalším aspektu předkládaného vynálezu je poskytnut farmaceutický preparát pro léčbu nebo prevenci viscerální bolesti a gastrointestinálních poruch, kterýžto preparát zahrnuje aktivní složku [1S-(Ια, 3β)]-(l-aminometyl-3metyl-cyklohexyl) octovou kyselinu definovanou Vzorcem I. Farmaceutické preparáty sloučeniny, která je předmětem předkládaného vynálezu zahrnující jednu z jejích solí, jsou produkovány formulací této aktivní složky do dávkové jednotkové formy s alespoň jedním farmaceuticky přijatelným nosičem nebo excipientní látkou. Pro přípravu farmaceutických preparátů ze sloučeniny použité v tomto vynálezu mohou být použity inertní, farmaceuticky přijatelné nosiče v buďto pevné nebo tekuté formě.

· ♦ · . · φ * Φ ·.· · · ·

4·· . . ·· ·-'· · · · «·.

Φ Φ · Φ · ·.

• Φ Φ · · ΦΦΦ ·' · ·· • Φ · · ·· ·: φ

ΦΦ Φ ···· Φ Φ · · · .· 'φ'.# · · Φ Φ Φ

Pevné dávkové formy pro perorální podání zahrnují kapsle, tablety, pilulky, prášky a granule. Přednostně obsahuji 5% až 70% [1S-(1<X, 3β)] — (1— aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny. V takových pevných dávkových formách je aktivní forma smíšena s alespoň jednou běžnou excipientní látkou (nebo nosičem), jak je například citrát sodný nebo dikalcium fosfát, nebo a) nebo plnícími nebo objem zvětšujícími látkami, jako jsou například škroby, laktóza, sacharóza, glukóza, manitol a kyselina siliková, b) vazebnými látkami, jako jsou například karboxymetylcelulóza, algináty, želatina, polyvinylpyrolidon, sacharóza a akácie, c) zvlhčujícími látkami, jako je například glycerol, d) dezintegrujícími látkami, jako jsou například agar-agar, uhličitan vápenatý, bramborový nebo tapiokový škrob, kyselina alginová, určité komplexní silikáty a uhličitan sodný, e) látky zpožďující roztoky, jako je například parafin, f) látky urychlující absorpci, jako jsou například kvartérní amoniové sloučeniny, g) zvlhčující látky jako jsou například cetyl alkohol a glycerol monostearát, h) adsorbčni látky, jako jsou například kaolin a bentonit, a i) lubrikační látky, jako jsou například talek, kalcium stearát, magnézium stearát, pevné polyetylén glykoly, lauryl sulfát sodný, nebo jejich směsi. V případě kapslí, tablet a pilulek mohou dávkové formy také obsahovat pufrující látky.

Pevné kompozice podobného typu mohou být také použity jako plnící látky u měkkých a tvrdých želatinových kapslí za použití takových excipientních látek, jako je například laktóza, stejně tak jako polyetylenglykoly o vysoké molekulové váze, a podobně.

Pevné dávkové formy, jako jsou například tablety, dražé, kapsle, pilulky a granule mohou být připraveny s potažením a krytem, jako jsou například enterické potahy a další potahy dobře známé v oboru. Mohou mít také takové složení, že uvolňují aktivní složku v určité části střevního traktu opožděným způsobem. Příklady uložených kompozicí, které mohou být použity, jsou polymerní látky a vosky. Aktivní složka může být také v mikroenkapsulované formě, pokud je to vhodné, s jednou nebo více výše zmíněných excipientních látek. Tekuté dávkové formy pro perorální podání zahrnují farmaceuticky přijatelné emulze, roztoky, suspenze, sirupy a elixíry. Kromě [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny mohou tekuté dávkové formy navíc obsahovat inertní ředící látky běžně používané v oboru, jako jsou například voda a další rožpouštěcí látky, solubilizační látky a emulzifikační látky, jako jsou například etylalkohol, izopropylalkohol, etylkarbonát, etylacetát, benzylalkohol, a podobně. Suspenze mohou kromě aktivní složky obsahovat navíc suspendující látky, jako jsou například etoxylované izostearylové alkoholy, polyoxyetylen sorbitol a sorbitan estery, mikrokrystalickou celulózu, aluminium metahydroxid, bentonit, agar-agar a tragakant, nebo směsi těchto látek, a podobně.

···

Preparáty pro rektální podáni jsou přednostně čípky, které mohou být připraveny smíšením sloučeniny, která je předmětem předkládaného vynálezu s vhodnými nedráždivými excipientními látkami a nosiči, jako jsou například kakaové máslo, polyetylenglykol nebo čípkový vosk, které jsou v pevném stavu při běžných teplotách, ale které jsou tekuté při teplotě těla, a proto se v rektu rozpouštějí a uvolňují aktivní složku.

Preparáty vhodné pro parenterální injekce mohou obsahovat fyziologicky přijatelné sterilní vodné a nevodné roztoky, disperze, suspenze nebo emulze, a sterilní prášky pro rekonstituci v injekčních roztocích nebo disperzích. Příklady vhodných tekutých nosičů, ředících látek, rozpouštěcích látek, nebo vehikul zahrnují vodu, etanol, polyoly (propylenglykol, polyetylenglykol, glycerol a podobně), a jejich vhodné směsi.

Tyto preparáty mohou také obsahovat adjuvantní látky, jako jsou například látky konzervační, zvlhčující, emulzifikující a disperzující. Prevence účinku mikroorganismů může být zajištěna různými antibakteriálními a antifungálními látkami, například parabeny, chlorobutanolem, fenolem, kyselinou sorbovou a podobně. Může být také žádoucí zahrnout izotonické látky, například cukry, chlorid sodný a podobně.

Farmaceutický preparát je přednostně v jednotkové dávkové formě. V takové formě je preparát rozdělen do jednotkových dávek obsahujících příslušná množství [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny. Jednotková dávková forma může být ve formě zabaleného preparátu, baleni obsahující malá množství preparátu, například zabalené tablety, kapsle a prášky v lahvičkách nebo ampulích. Jednotkovou dávkovou formou může být také kapsle, tobolka, nebo samotná tableta, nebo to může být příslušné množství těchto zabalených forem. Některými příklady dávkových jednotkových forem jsou tablety, kapsle, pilulky, prášky, čípky a parenterální roztoky zabalené v nádobkách obsahujících buďto jednu nebo určité větší množství dávkových jednotek, které je možno rozdělit do jednotlivých dávek.

Procento aktivní složky v uvedených preparátech se může lišit v širokém rozmezí, ale z praktických účelů je aktivní složka přednostně přítomna v koncentraci alespoň 10% v pevném preparátu a alespoň 2% v primárně tekutém preparátu. Nejuspokojivější preparáty jsou takové, v kterých je ' přítomno mnohem vyšší procento aktivní složky, například od 10% do 90% váhově.

Způsoby podání [1S—(Icc, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny nebo jejích solí jsou parenterální, nebo přednostně perorálni. Například užitečná perorálni dávka je mezi 20 a 800 mg a užitečná intravenózní dávka je mezi 5 a 50 mg. Dávka je v dávkovacím rozmezí používaném v léčbě viscerální bolesti a gastrointestinálních poruch, jako jsou například FBD nebo IBD, nebo jaké jsou potřeba podat pacientovi podle zvážení lékaře.

• ·· ·φφ ♦ ·· · · ·* · λ \♦ • · Φ · · · #· • · φ · φ ·Φ· ·. φ·· · · · · · ;Φ'-Π ·φ ··· ΦΦΦΦ ·· ·· *'-* «φφ

Jednotková dávková forma [1S-(Ια, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny, která má být použita v tomto vynálezu, může také obsahovat další sloučeniny užitečné v léčbě viscerálni bolesti a gastrointestinálních poruch.

Výhody použiti [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny v předkládaném vynálezu, zahrnuji selektivní aktivitu sloučeniny na viscerálni bolest a relativni netoxickou povahu sloučeniny, jednoduchost přípravy, fakt, že sloučenina je dobře tolerována, a jednoduchost i,v. a zejména peorálniho podáni léku.

Příklady provedení vynálezu

Farmakologické údaje

Původně bylo prokázáno, že [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyI) octová kyselina má na zvířecích modelech somatické bolesti a epilepsie podobnou nebo menší aktivitu než gabapentin. Co se však týká viscerálni bolesti, byla schopnost [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny léčit selektivně gastrointestinální poruchy podle tohoto vynálezu prokázána na dvou zvířecích modelech alodynie.

Somatická bolest:

Karageninem indukovaná hyperalgézie u potkanů: účinek gabapentinu a [1S(1α, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny

Nociceptivní tlakové prahy byly měřeny v tlakovém testu na potkaních tlapkách za použití analgesymetru (Randall LO a Sellitto JJ (1957) Arch Int Pharmacodyn 4: 409-419. Potkaní samci kmene Sprague Dawley (70-90 g) byli na zařízení trénováni před testovacím dnem. Na zadní tlapku každého potkana byl postupně aplikován tlak a nociceptivní prahy byly určeny jako tlak vyžadovaný (g) k vyvolání vytažení tlapky. Hodnota cutoff 250 g byla použita k zabránění jakéhokoli poškození tlapky. V den testu byla provedena dvě základní měření před tím, než bylo zvířatům podáno 100 ul 2% karageninu pomocí intraplantární injekce do pravé zadní tlapky. Nociceptivní prahy byly měřeny opět 3 hodiny po karageninu, aby bylo prokázáno, že došlo k hyperalgézii. Zvířatům byl podáván buďto gabapentin, [lS-(la, 3β)]—(1— aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octová kyselina, nebo solný roztok 3,5 hodiny po karageninu a nociceptivní prahy byly vyšetřeny 4, 4,5 a 5 hodin po karageninu.

·· ·' · · · « ·.· '< ·· • · · ·· · * « · • · ·······♦ · · • · « · ···«··· ·· «« »« . «··

Výsledky

Účinek gabapentinu

Dávka p.o. (mg/kg)	Inhibice za 1 hodinu (%)	Inhibice za 2 hodinu (%)
30	48	20

Účinek [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny

Dávka p.o. (mg/kg)	Inhibice za 1 hodinu (%)	Inhibice za 2 hodinu (%)
30	68	34

Epilepsie:

Semikarbazidem indukované tonické křeče u myší: účinek gabapentinu a [1S— (Ια, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny

Tonické křeče u myší jsou indukovány pomocí subkutánního podání semikarbazidu (750 mg/kg). Je zaznamenávána latence tonické extenze předních tlapek. Myši, u kterých nedošlo během 2 hodin po semikarbazidu ke křečím jsou považovány za chráněné a je jim přiřazeno maximální latenční skóre 120 minut.

Při stejné dávce 30 mg/kg p.o. chránil gabapentin 100% zvířat, zatímco [1S(1α, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octová kyselina chránila 40%.

Viscerální bolest:

U člověka jsou gastrointestinální poruchy často sdruženy s viscerální bolestí. U těchto patologických stavů je snížen práh viscerální bolesti, což ukazuje na viscerální hypersenzitivitu. Byly použity dva modely viscerální bolesti ke zhodnocení efektu [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3metyl-cyklohexyl) octové kyseliny podané perorálně: kolitida indukovaná pomoci TNBS a rektální alodynie indukovaná septickým šokem u bdělých potkanů. U každého modelu byl účinek srovnán s účinkem perorálně podaného gabapentinu.

1) Chronická viscerální alodynie u potkanů indukovaná pomocí TNBS: účinek gabapentinu a [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny

Bylo prokázáno, že injekce trinitrobenzensulfonové kyseliny (TNBS) do stěny tlustého střeva potkana indukují chronickou kolitidu. Na tomto experimentálním modelu distenze tlustého střeva u bdělých potkanů snížily předchozí injekce TNBS do proximální části tlustého střeva práh viscerální bolesti.

Materiál a metodika

Jsou použiti potkani kmene Sprague-Dawley vážící 340-400 g. Zvířata byla umístěna po třech do klece v regulovaném prostředí (20±l°C, 50±5% vlhkost, světlo 8:00 ráno až 8:00 večer). V den 0 je za anestézie (ketamin 80 mg/kg i.p.; acepromazin 12 mg/kg i.p.) podána do proximální části tlustého střeva kontrolních potkanů injekce TNBS (50 mg/kg v 30% etanolu) nebo solného

	' θ	• • •	, * * * ♦ t ·· ·* * >4^^ · • · · 9 * » * • «9 · ··« 9 · • · ♦ 9 rVfr \ ♦ ···· »· ·· ’ «*·
		' · · ·
roztoku	(1,5 ml/kg). Po chirurgickém	zákroku	jsou zvířata jednotlivě
umístěna	do polypeopylenových klecí	a jsou	udržována v regulovaném
prostředí	(20°C, 50% vlhkost, světlo 8:	00 ráno	až 8:00 večer) po dobu 7

dnů. Sedmý den po podáni TNBS je řitním otvorem vložen balónek: (5-6 cm dlouhý) a je udržován v poloze (vrchol balónku 5 cm od řitního otvoru) připevněním katétru k bázi ocasu. Perorální podání gabapentinu nebo [1S(1α, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny je provedeno 1 hodinu před distenzí tlustého střeva: balónek je progresivně nafouknut po krocích o 5 mmHg (0,667 kPa) od 0 do 75 mm Hg, kdy každý krok nafouknutí trvá 30 sekund. Každý cyklus distenze tlustého střeva je kontrolován standardním barostatem. Práh (mm Hg) odpovídá tlaku, který vyvolal první břišní kontrakci, a cyklus je poté přerušen. Práh tlustého střeva je určen po provedení čtyř cyklů distenze na stejném zvířeti.

Data jsou analyzována srovnáním skupin léčených testovanou sloučeninou s se skupinou léčenou pouze pomocí TNBS a s kontrolní skupinou. Pro každou skupinu jsou vypočteny průměry a SEM. Antialodynická aktivita každé perorální dávky testované sloučeniny je vypočtena následujícím způsobem:

Aktivita = A-T/C-T kde A = průměrný práh skupiny léčené testovanou sloučeninou

T = průměrný práh skupiny léčené pouze pomocí TNBS

C = průměrný práh kontrolní skupiny

Změřené výsledky ve skupinách léčených testovanou -sloučeninou jsou vyjádřeny v % inhibice snížení prahu bolesti indukovaného pomocí TNBS.

Statistická významnost mezi každou skupinou byla určena pomocí jednocestného testu ANOVA s následným Studentovým nepárovým t-testem, rozdíly byly považovány za statisticky významné při menším než 0,05.

Výsledky

Účinek gabapentinu:

Dávka p.o. (mg/kg)	Inhibice za 1 h (%)	Počet potkanů
100	14,7+5,1%*	7
300	48,6±13,3%**	8
500	64,9110,5%***	8
1000	75,2±6,1***	8

*: p menší než 0,05 **: p menší než 0,01 ***: p menší než 0,001

Medián efektivní dávky (ED_S0) gabapentinu je 321 mg/kg p.o.

.9

♦ ‘9

9 ♦.

« ♦

I» *·» « ♦ ·

Efekt [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny;

Dávka p.o. (mg/kg)	Inhibice za 1 h (%)	Počet potkanů
10	34,0±9,7%‘	8 ; ··.·;
30	46,6+8,4%“	7
100	97,4±22, 4%“‘	8

ED₅₀ [lS-(la, 3β) ] -(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny je 22,9 mg/kg p.o.

Je známo, že gapapentin podaný subkutánně (s.c.) nemodifikuje za kontrolních podmínek práh tlustého střeva. Na rozdíl od toho zvyšuje za stejných podmínek morfin (s.c.) práh tlustého střeva u zvířat léčených pomocí TNBS i u kontrol, což naznačuje odlišný mechanismus účinku. (Diop L. et al. (1998) Soc. Neurosci. Abstr.: 24: 639).

[lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octová kyselina měla na modelu viscerální bolesti u potkanů silnou antialodynickou aktivitu, přičemž tato sloučenina byla za stejných podmínek více než desetkrát účinnější než gabapentin. Příslušné hodnoty ED₅₀ jsou 321 mg/kg p.o. pro gabapentin a 23 mg/kg p.o. pro [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metylcyklohexyl) octovou kyselinu. Tento efekt navíc nezahrnuje opiátový mechanismus.

2) Rektální hypersenzitivita u potkanů indukované pomoci LPS

Bylo prokázáno, že intraperitoneální injekce lipopolysacharidu (LPS) indukuje rektální hyperalgézii u bdělých potkanů.

Materiál a metodika

Zvířata jsou chirurgicky připravena pro elektromyografii: potkani jsou anestetizovány pomocí intraperitoneální injekce acepromazinu (0,6 mg/kg) a ketaminu (120 mg/kg). Do abdominálního zevního šikmého svalstva jsou nad tříselný vaz implantovány tři skupiny třech elektrod. Elektrody jsou upevněny vně těla na zadní části krku a chráněny skleněnou trubičkou připevněnou ke kůži. Zvířata jsou jednotlivě umístěna do polypropylenových klecí a udržována v místnosti s kontrolovanou teplotou (21°C) Potrava (UAR pelety, Epinay, Francie) a voda jsou poskytnuty ad libitum.

Elektromyografické záznamy byly zahájeny pět dnů po chirurgickém výkonu. Elektrická aktivita abdominálních příčně pruhovaných svalů je zaznamenávána pomocí elektroencefalografického přístroje (Mini VIII Alvar, Paříž, Francie) za použití krátké časové konstanty (0,03 s) , aby se odstranily nízkofrekvenční signály (méně než 3 Hz),a rychlosti papíru 3,6 cm/min. Shluky vrcholů jsou zaznamenávány jako index abdominálních kontrakcí.

Distenzní postup: Potkani jsou umístěny do plastových tunelů (6 cm průměr x 25 cm délka) , kde se nemohou pohybovat, uniknout nebo otočit, aby se zabránilo poškození balónku. Zvířata jsou zvykána na tento postup po dobu 4

♦ 44 »9 · 44 44 -.-.:.:4 «4 4 . · . - 4 . * · 4 # · * '44 « · · · · 4 « t·

4· 4 4 ·- 4.444 ♦ - 4 -.--4.-' 4 • 4 · 4 4 .-4-.-.4.4

444 4444 44 4«. .- ' .4-4-.:- -.’ .· .4 4 4 dnů před rektální distenzí, aby se minimalizovaly stresové reakce během í experimentů. Balónek použitý pro distenzi je arteriálni embolektomický ¹ katétr (Fogarty, edwards Laboratories lne.). Rektální distenze je provedena vložením balónku (2 mm průměr x 2 cm délka) do rekta, jeden cm od řitního otvoru a katétr je fixován na bázi ocasu. Je progresivně nafukován teplou vodou po krocích 0,4 ml od 0 do 1,2 ml, kdy každý krok nafouknutí trvá 5 minut. Objem použité vody je kontrolován kompletním odstraněním stříkačkou na konci distenzní periody, aby bylo možno detekovat možný únik vody.

: Experimentální protokol:

Potkanům je injekčně aplikován LPS (1 mg/kg (Escherichia coli, serotyp 0111:B4) Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) nebo jeho vehikulum je provedena • rektální distenze s doprovodným zaznamenáním abdominálních kontrakcí 9 a 12 hodin po tomto podání. Abychom určili antinociceptivní vlastnosti gabapentinu a [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny u stavů s hyperalgézií jsou perorálně podány 1 hodinu před rektální distenzí, ale před (12 hodin) injekcí LPS (1 mg/kg i.p.) gabapentin (10 a 30 mg/kg), [lS-(lct, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octová kyselina, nebo vehikulum (NaCl 0,9% 0,3 ml/potkana)

Léky: Všechny sloučeniny byly okamžitě před použitím rozpuštěny ve sterilním NaCl (0,9% izotonický solný roztok).

Statistika: Statistická analýza počtu abdominálních kontrakcí vyskytujících se během každé doby rektální distenze je provedena pomocí jednocestného testu ANOVA s následným parametrickým Studentovým nepárovým t-testem.

Výsledky

Účinek gabapentinu: Gabapentin podaný p.o. v dávce 30 mg/kg p.o. signifikantně inhibuje (85,3%, p méně než 0,001) počet abdominálních kontrakcí indukovaných rektální distenzi 0,4 ml u potkanů léčených pomocí LPS. V koncentraci 10 mg/kg p.o. nevykazuje gabapentin významnou antihyperalgickou aktivitu (24,9%).

Účinek [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny:

Po perorálním podání [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octová kyselina (3, 10, 30 mg/kg p.o.) inhibuje způsobem závislým na dávce počet abdominálních kontrakcí indukovaných rektální distenzí 0,4 ml u potkanů léčených pomocí LPS. ED₅₀ je 3,81 mg/kg p.o.

Závěrem tyto výsledky ukazují, že gabapentin a [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl3-metyl-cyklohexyl) octová kyselina vykazují antihyperalgickou aktivitu u rektální hypersenzitivity indukované pomocí LPS na modelu viscerální bolesti u potkanů. [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octová kyselina vykazuje účinnější hyperalgickou aktivitu než gabapentin; srovnání aktivních dávek ukazuje, že [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl)

4	♦ ·
♦ ·
•	•
4 '	• 4
4	•
44·	. 4.444 ' '

octová kyselina je na tomto modelu viscerální bolesti zhruba pětkrát účinnější než gabapentin.

Uvedená data prokazuji, že [lS-(la, 3β)]-(l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octová kyselina je účinná v prevenci a léčbě viscerální bolesti, obzvláště u gastrointestinálních poruch, jako jsou například funkční střevní poruchy (FBD) nebo nespecifické střevní záněty (IBD). Tato účinnost [lS-(la, 30)]— (l-aminometyl-3-metyl-cyklohexyl) octové kyseliny je navíc pozorována po perorálním podání sloučeniny.

Tato sloučenina, u které byla prokázána na zvířecích modelech somatické bolesti a epilepsie podobná nebo nižší aktivita než u gabapentinu, je navíc na zvířecím modelu viscerální bolesti překvapivě 5 až 10 krát účinnější než gabapentin.

Claims

1. Použití kyseliny [1S-(Ια,3β)](l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové nebo její farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu léčiva použitelného při prevenci nebo léčeni viscerálni bolesti.

2. Použití kyseliny [1S-(Ια,3β)](l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové nebo její farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu léčiva použitelného při prevenci nebo léčení gastrointestinálních poruch.

3. Použití kyseliny [1S-(Ια,3β)](l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové nebo její farmaceuticky přijatelné soli podle nároku 2, kde je gastrointestinální porucha charakterizována jako funkční střevní porucha nebo zánětlivé onemocnění střeva.

4. Použití kyseliny [1S-(Ια,3β)](l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové nebo její farmaceuticky přijatelné soli podle nároku 2, kde je gastrointestinální poruchou funkční střevní porucha.

5. Použití kyseliny [1S-(Ια,3β)](l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové nebo její farmaceuticky přijatelné soli podle nároku 2, kde je gastrointestinální poruchou gastroezofageální refluxní choroba.

01-2351-01-Če

6. Použití kyseliny [ 1S-(Ια,3β)](l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové nebo její farmaceuticky přijatelné soli podle nároku 2, kde je gastrointestinální poruchou dyspepsie.

7. Použití kyseliny [1S-(Ια,3β)](l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové nebo její farmaceuticky přijatelné soli podle nároku 2, kde je gastrointestinální poruchou syndrom dráždivého tračníku.

8. Použití kyseliny [1δ-(1α,3β)](l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové nebo její farmaceuticky přijatelné soli podle nároku 2, kde se léčený stav zvolí z Crohnovy choroby, ileitidy a pulcerózní kolitidy.

9. Použití kyseliny [1S-(Ια,3β)](l-aminomethyl-3-methylcyklohexyl)octové nebo její farmaceuticky přijatelné soli podle nároku 1 nebo 2, kde je léčivem formulace pro orální podání.