CZ183797A3 - Cross-linked micro-particles and their use as a therapeutic carrier - Google Patents
Cross-linked micro-particles and their use as a therapeutic carrier Download PDFInfo
- Publication number
- CZ183797A3 CZ183797A3 CZ971837A CZ183797A CZ183797A3 CZ 183797 A3 CZ183797 A3 CZ 183797A3 CZ 971837 A CZ971837 A CZ 971837A CZ 183797 A CZ183797 A CZ 183797A CZ 183797 A3 CZ183797 A3 CZ 183797A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- microparticles
- sterile powder
- microparticle
- particles
- drug
- Prior art date
Links
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 title claims abstract description 208
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 title description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 42
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 38
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims abstract description 23
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 19
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 239000002195 soluble material Substances 0.000 claims abstract 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 19
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 11
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 claims description 10
- 239000003446 ligand Substances 0.000 claims description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 7
- 125000003396 thiol group Chemical class [H]S* 0.000 claims description 7
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 6
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 5
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 claims description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 4
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 claims description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 claims description 2
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 claims description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000011243 crosslinked material Substances 0.000 claims 1
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 claims 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 abstract description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 20
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 17
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 16
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 16
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 15
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 10
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 10
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 9
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 8
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 7
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N floxuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 ODKNJVUHOIMIIZ-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 7
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 7
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 7
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 5
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 5
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 5
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- -1 L-lactic acid PMB ester Chemical class 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 4
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 4
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- CXUAEBDTJFKMBV-UHFFFAOYSA-N 1-(chloromethyl)-2,3,4,5,6-pentamethylbenzene Chemical compound CC1=C(C)C(C)=C(CCl)C(C)=C1C CXUAEBDTJFKMBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dithiobis(6-nitrobenzoic acid) Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(C(=O)O)=CC(SSC=2C=C(C(=CC=2)[N+]([O-])=O)C(O)=O)=C1 KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 3
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 3
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 3
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 3
- 239000000306 component Substances 0.000 description 3
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 3
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 3
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 2
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 2
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 2
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 2
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N nitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1 LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 2
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 2
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 2
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 1
- JWICNZAGYSIBAR-LEEGLKINSA-N (4s)-4-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-aminopropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]acetyl]amino]-5-[[2-[[(2s)-3-carboxy-1-[[(2s)-1-[[1-[[(2s)-1-[[(2s)-4-carboxy-1-[[2-[[2-[[2-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-4-(diaminomethylideneamino Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N)CC1=CC=CC=C1 JWICNZAGYSIBAR-LEEGLKINSA-N 0.000 description 1
- WYMDDFRYORANCC-UHFFFAOYSA-N 2-[[3-[bis(carboxymethyl)amino]-2-hydroxypropyl]-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O WYMDDFRYORANCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHIDNBAQOFJWCA-UAKXSSHOSA-N 5-fluorouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(F)=C1 FHIDNBAQOFJWCA-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N Alanine Chemical compound CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 101800000974 Fibrinopeptide A Proteins 0.000 description 1
- 102400000525 Fibrinopeptide A Human genes 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010019695 Hepatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010027457 Metastases to liver Diseases 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 102000005686 Serum Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010045362 Serum Globulins Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 1
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006096 absorbing agent Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000002583 angiography Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 229940030225 antihemorrhagics Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011953 bioanalysis Methods 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 239000012503 blood component Substances 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000005515 capillary zone electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 1
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002961 echo contrast media Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000004880 explosion Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229920000370 gamma-poly(glutamate) polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 229960004198 guanidine Drugs 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000025 haemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000001261 hydroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N iodoacetamide Chemical compound NC(=O)CI PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000014207 opsonization Effects 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000010118 platelet activation Effects 0.000 description 1
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 description 1
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 230000007026 protein scission Effects 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 230000004088 pulmonary circulation Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000979 retarding effect Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 231100000004 severe toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000057 systemic toxicity Toxicity 0.000 description 1
- LXEJRKJRKIFVNY-UHFFFAOYSA-N terephthaloyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=C(C(Cl)=O)C=C1 LXEJRKJRKIFVNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 230000002885 thrombogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000103 thrombolytic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/22—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations
- A61K49/222—Echographic preparations; Ultrasound imaging preparations ; Optoacoustic imaging preparations characterised by a special physical form, e.g. emulsions, liposomes
- A61K49/223—Microbubbles, hollow microspheres, free gas bubbles, gas microspheres
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/167—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction with an outer layer or coating comprising drug; with chemically bound drugs or non-active substances on their surface
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Acoustics & Sound (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Radiology & Medical Imaging (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Obiast techniky
Vynález še týká zesíťovanýčh mikročástic a jejich použití jako terapeutických nosičů.
Dosavadní stav techniky
Použití systémů mikročáStieOvých nosičů pro parenterální dodávání terapeutických a diagnostických činidel přitahuje vzrůstající pozornost. Technologie a chemie systémů mikročástic nabízí mikročástice jako nosiče pro dodávání činidel podkožně/intravenózne a intraarteriálně. “Ideální nosič” se vyznačuje několika klíčovými aspekty. Tyto zahrnují velikost, distribuci velikosti, užitečné zatížení, rychlost biodegrádace, snadnost použití, kin etiku uvolnění a dostupnou reprodukovatelnou výrobu. Jednotlivé aspekty tohoto “ideálního nosiče” byly úspěšně řešeny, zejména užitečné zatížení léčiva, rychlost biodegradače a Částečně i velikost a distribuce velikosti.
Známe nosiče byly vyráběny různými technikami, založenými převážně na rozpouštědle a emulzi. Nevýhoda těchto metod spočívá v regulaci klíčových vlastností nosiče během jednoho nebo dvou výrobních kroků. Velikost, distribuce velikosti, užitečné zatížení a rychlost biodegrádace byly ták určeny produktu v jediném dynamickém prostředí, typizovaném jednoduchým nebo dvojitým emulzriím systémem nebo technikami odpařování rozpouštědla. Jak je typické pro emulzní procesy, byl roztok léčiva, polymeru a činidla modifikujícího povrch smíchán s nerozpustným rozpouštědlem, emulzifikován, částice byly fixovány zahřátím nebo stabilizací a Směs byla čištěna odstraněním olejů nebo rozpouštědla nevhodného pro parenterální použití.
Reakční nádoba v emulzních nebo rozpouštědloodpářujících systémech je základní charakteristikou dosavadního .stavu techniky. V riádobe se morfologie mikročástic reguluje vyvažováním iňterfáciálních sil olejových a vodních komponent, interakcí rozpuštěné látky na rozhraní, rovnováhou mezi promícháváním, zahříváním a vznikem pláště a samozřejmě inkorporace aktivní látky do polymerní matrice. Takové technologie jsou však nevhodné pro farmaceutickou výrobu ve velkém měřítku, požadovanou pro parenterální Činidlo.
Téměř bez výjimky byla regulace velikosti a distribuce velikosti známých mikročástic zcela odkázána na regulaci velikosti během technik sušení rozprašováním popsanými v publikacích PGT
WO-A-9112823, WO-A-9218164 a WO-A-9408627, pro výrobu mikročástic použitelných k zobrazení kontrastního ozvěnového signálu a dalšímu potenciálnímu párentěrálriímu využití. Prudká toxicita intravenózních mikročástic je zejména spojena s kapilárním blokováním plicního oběhu, Souběžným poklesem plicního vcnózniho tlaku a ztrátou poddajnosti. Vztah mezi velikostí částic a LD toxicitou jé dobře dokumentován. Naše vlastní údaje ukazují příkrý nárůst toxicity intravenózních Částic, s průměrnou velikostí přes 6 pm, což je známá kapilární velikost v plicní tkáni pro nedefořmovatelné mikročástice.
Čím větší je průměrná velikost mikročástic, tím zřetelně širší je distribuce jejich velikosti a rozmezí velikostí mikročástic narůstá o dva řády. Pro terapeutické použití, jako čhemoémbolizace, je výhled na injekční podávání mikročásticůvéhó přípravku obsahujícího částice v rozmezí velikosti 5-100 pm v rozporu s konceptem vysoce regionálně cíleného dodávání. Na horní hranici je možnóst ucpání hlavních cév o průměru 100 pm, s doprovodným nebezpečím nekrózy velkých zasažených oblastí; ná opačném konci rozsahu je podstatné množství přípustné pro systémovou distribuci.
Mechanismus dosažení ustáleného uvolňování v mikročásticových systémech byl drive néjóbvykleji dosahován regulací eroze matrice a uvolněním aktivních složek (zapuštěných nebo pohlcených) do obklopujícího média. Účinné složky byly buď začleněny v době výroby mikročástic, nebo pohlceny matricí s následnou fixací nebo stabilizaci.
Začlenění léčiva do matrice známých mikročástic vyžaduje zahřívání v přítomnosti vody a kyslíku. To vede samozřejmě k porušení léčiva oxidativním poškozením nebo nekontrolovatelným zesíťováriím s nosičem. V případech, kdy je použita chemická stabilizace, potenciální ztráta aktivity bývá dokonce větší.
Jiný mechanismus zpomalení nebo modifikace uvolňovací rychlosti léčiva z rozpustného pólymemítio nosiče je navázání aktivní složky kóvaleňtní vazbou k rozpustnému polymeru. Obecně toto nebylo uplatňováno na systémy mikročástic, kde jsou léčiva, ligandy nebo protilátky vázány k částicovým nosičům.
Hlavní překážkou navazování aktivních složek na mikročástice je za dosavadního stavu techniky relativní hydrofobnošt mikročástic. Mnoho Chemických reakcí za vzniku nových vazeb probíhá ve vodném prostředí, proto jé téměř nemožné modifikovat hydrofobní mikročástice. Předchozí výroba hydrofilních mikročástic zahrnovala komplexní reakci v přítomnosti hydrofilního polymeru v emúlzním procesu.
Rychlost biodegradace mikročástic je určena převážně rozsahem zesíťování, Za dosavadního stavu techniky měly změny v zesíťování Škodlivý účinek na navázání léčiva a následnou schopnost vytvořit mikročástice. Pokusům měnit tento parametr a regulovat rychlost biodegradace a uvolňování léčiva byla věnována malá pozornost. Ža dosavadního Stavu techniky
Λ požadovaly mikročástice k dosažení monodisperzní suspenze ve vodném prostředí značné množství povrchově aktivních činidel nebo sonikováhí. Dokonce jíž po vytvoření měly mikročástice sklon k agloměrOvání, a byly proto složitě podávány podkožně injekční stříkačkou.
«
I
Podstata vynálezu
Tento vynález je záložen na objevu, že mikročástice typu popsaného v publikacích PCT WO-A-9112823, WO-A-9218164 a WO-A-9408627, mající dobré částicové charakteristiky, si Udržují i po termálním zasíťování své hydrofílní vlastnosti a schopnost být rekonstituovány ve vodě za vzniku monodisperzní suspenze. Funkční skupiny ve výchozí sloučenině, jako karboxýl, amin, hydroxyl nebo merkaptoskupiňa, zůstávají zachovány a jsou použitelné přó dérivatížaci.
V předkládaném vynálezu se sterilní prášek skládá z hladkých sférických mikročástic o průměru 0,1 až 50 pm, zesíťovaných látek, přičemž jsou hydrofílní mikročástice schopny rekonstituce ve vodě za vzniku monodisperzní suspenze, která navíc obsahuje fyziologicky nebo diagnoštičně aktivní složky vázaně přímo nebo nepřímo ha mikročástice prostřednictvím volných funkčních skupin (amin, hydróxyt, karboxýl nebo merkaptoskupiňa).
Tento vynález využívá techniku výroby mikročástic popsanou v PTC publikacích (viz výše). Uplatňující dokonalou regulaci velikosti, distribuce velikosti, Užitečného zatížení, rychlosti biodegradace a kinetiky uvolňování, jednoduchou v použití a vhodnou pro výrobu ve větším měřítku. Mikročástice, připravené na základě tohoto vynálezu, jsou schopny vyhovět svým aplikačním požadavkům ve všech případech při zachovaní schopnosti vytvořit modifikovaný nosič ve velkém měřítku farmaceutického upotřebeni a vždy še stejnou úrovní regulace. Vedle regulace velikosti se v jednotlivých krocích zavádí nezávislá kontrola, pro distribuci velikosti, rychlost fixace, nebo recipročně rychlost biodegradace užitečné zatížení léčiva a formulaci a zakončení. Jak býlo uvedeno v dřívějších PCT publikacích (viz výše), žadatelé disponují v plném měřítku procesem, který produkuje mikročástiče o specifických vlastnostech. Proces pracuje s farmaceutickými standardy bez přístupu cizorodých částic, které brání parenterálnímu použití mikročástic vyráběných procesy podle dosavadního stavu techniky.
Předkládaný vynález Se týká výroby mikročášticových přípravků pro intravenózní, intraarteriální a ex vivo použití, intravenózní suspenze mikročástic, při rekonstituci v ředidle, Obsahují méně než 5 % objemu mikročástic větších než 6 pm. Navíc se distribuce velikosti tvarem podobá Gaussově křivce, S 50 % mikročástic ležících v rozsahu 5 pm, 3 pm, 2 pm až 1,2 pm.
Žádaná distribuce má 80 % mikročástic v rozsahu 3 pm: (Všechny distribuce se vztahují na objem nebo hmotu).
Pro systémy větších částic, s využitím kombinace vysoce regulovaného sušení rozprašováním a následné frakčionace je možné vyrábět mikročástice dostatečné velikosti a úzké distribuce velikosti tak, že (podle intraarteriáímho podávání}, systemičké uvolňování je vyloučené a poiize cévy menší než 20 pm jsou ucpávány.
Současný vynález zahmúje zavedení aktivní složky do zásobníku pro sušení rozprašováním a následnou stabilizaci částic. Výhoda spočívá ve veliče přesné kontrole morfologie a užitečného naložení oproti dřívějším postupům.
Postup používaný u tohoto vynálezu zahrnuje uskladnění nosného materiálu a léčiva ve stavu suchého prášku s nepatrným Obsahem vody, schopným rekonstituce do původních rozpustných složek.
V předkládaném vynálezu se zesíťování používá pro regulaci rychlosti uvolnění aktivních složek. Např. stupeň zesíťování a rychlost degradace je určen před zakotvením aktivní složky. Aktivní ligand je pak připojen á vykazuje kontrolovatelný profil uvolňování určený stupněm zesíťování matrice. Toto je výhoda stálé rychlosti vylučování a není pozorován známý efekt výbuchu.
Další aspekt tohoto vynálezu je možnost ovlivnění zesíťování. Potenciální úroveň derivatizovatelných skupin a teplota i Čas nutné pro zesíťování jsou kontrolovány přídavkem aditiv, která mění tyto parametry.
Zavedení lysinu, polylysiňu, glutamátu, polyglutamátu, fenylalaninu a tyrosinu do zásobníku má vliv na zvýšehí/snížení rychlosti biodegradace finálního mikročásticóného prostředku. Přídavek těchto aditiv navíc významně zvyšuje počet potenciálních skupin, ke kterým se navazují aktivní složky nebo ligandy. Přídavek těchto aditiv dáleredukuje Čas/teplotu stabilizace mikročástic při zahřívání rozpustných mikročástic vytvořených pri sušení rozprašováním.
Předkládaný vynález poskytuje mikročástice, které jsou vhodné zejména pro směrování na definovaná místa díky úzké velikostní distribuci a které mají, díky kombinaci vhodných rysů, výjimečné použití.
Bylo objeveno, že mikročástice vyrobené popsanou technikou máji výhodnější vlastnosti než mikročástice přístupné podle dosavadního stavu techniky vzhledem ke schopnosti manipulace, derivatizace a formování mikročástic. Žadatelova technologie umožňuje výrobu mikročástic, které zachovávají podstatně sekundární strukturu, jsou hydrofilní, nepodléhají denaturaci a nejsou nerozpustné se stíněnými funkčními skupinami, jak tomu bylo za dosavadního stavu techniky.
Mikročástice:
(i) obsahují určitý počet aminových, hýdřoxylových nebo karboxylových skupin nebo jejich kombinaci pro derivatižaci (ii) jsou vysoce hydrofilní, jejich aktivní skupiny jsou ve vodném prostředí přístupné pro derivatižaci (iii) jsou zpracovatelné v suchém i mokrém stavu.za vzniku suchých finálních produktů, nevyžadují povrchově aktivní činidlo nebo sohikaci pro vznik monodisperzních suspenzí (i v) rychlost biodegradace a uvolňování aktivních složek je určena Složením a zešíťováním matrice (v) jsou ve velikostech v rozmezí.0,01-100 pm (ví) zůstávají v oběhu in vivo pro periody (60 min a více), zřetelně déle než známé hydfófobnější mikročástice a déle než lipošomy, opsonizace je potlačená, thrombogenní účinek minimalizován.
Pro intravenózní podávání je vhodná velikost mikročástic pod 4 pm, přo intraarteriální podávání 8-30 pm. Zejména u větších mikročástic je zvláštním krokem volitelná frakcionace. Tento rozsah velikosti mikročástic se vyjadřuje jako poměr interkvartilňího rozsahu ke střednímu průměru a je 0,2-O.S.
Mikročástice podle předkládaného vynálezu se dérivatizují konjugací s léčivy, ligandy, peptidy nebo proteiny přímo na nosiči s využitím karboxylové nebo aminové skupiny základních mikročástic nebo aditiv v zásobníku pro sušení rozprašováním. Konjugace se účastní glutaraldehyd, EDCI, tereftaloylchlorid, kyanogénbromid nebo reďuktivní aminace. Popřípadě se ligand, léčivo, protein.nebo péptidváží přeš biodegřadabilní hydroxykyselinové raménkó druhu popsaného v WO-A-9317713 (Rijksuňiveršitěit Gróningen), jehož obsah je zahrnut v Odkaze.
Další výhoda tohoto vynálezu je ve schopnosti převést a předvést produkt jako suchý sterilní prášek.
Mikročástice v práškové formě podle tohoto vynálezu nepotřebují povrchově aktivní činidla pro převedení do moňodisperzní suspenze nebo pro rekonstituci. Po rekonstituování neaglomerují a mohou být podávány stříkačkou.
Tento vynález popisuje s vodou mísitelný systém vyrobený z biokompatibilních složek. Mikročástice podle předkládaného vynálezu nejsou po zahřívání nerozpustné, neboť si dostatečně podrží sekundární strukturu a zůstávají vysoce hydrofilní. Důkaz zachování sekundární struktury se získal ověřením isoělektrického bodu mikročástic (PI), který je při pH 4,5 až 5 velice blízký nativnímu albuminu. Plná denaturace albuminu vede k podstatnému zvýšení PI na hodnotu 6,5 až 7.
Štěpeni proteinových mikročástic proteázami poskytuje peptidy, které při porovnání s produkty štěpení výchozího rozpustného proteinu vykazují identické HPLC profily. Kyselá hydrolýza proteinových mikročástic a výchozího proteinu poskytuje nápadně podobný obsah aminokyselin. Tyto dvě analýzy podporují pozorování, že protein v mikročásticích je převážně v nativním stavu.
Nové mikročástice jsou hydrofilní a mají schopnost cirkulovat v periodách větších než jedna hodina, poprvé je tak předkládán biokompatibilní nosičový systém vykazující prodlouženou dobu cirkulace s vysoce specifickou afinitou k ligandům. Specifita mikročástic jé určena při jejich výrobě a zajišťuje vysokou afinitu k vázaní ligandů, která je běžně spojována s chromatografickými matricemi nebo enzymy. Mikročástice také nabízejí využití ve spojení š biologickými kapalinami; např. při dětoxifikaci v extrakorporeálním systému,’ bioánálýžáčh sera nebo krve a při separaci krevních komponent před jejich aplikací do organismu.
Následující příklady ilustrují Vynález.
Příklady provedeni vynálezu
Příklad 1
Tento příklad ilustruje fixaci rozpustných mikročástic za vzniku nerozpustných nebo méně rozpustných mikročástic zesíťováním obálky látky. Mikročástice jsou zesíťovány různými způsoby, zahrnujícími zahřívání nebo chemickou cestu. Upravení stupně fixace má následně za výsledek stupeň rozpustnosti mikročástice v daném prostředí. Navíc se v tomto stupni rozpuštění uvolňují jakékoliv aktivní složky vázané nebo jinak inkorporované do mikročástic. Stupeň fixace mikročástic je také ovlivněn stupněm jejich enzymatického odbourávání. Čím větší je stupeň fixace, tím je mikročástice odolnější vůči enzymatickému štěpení.
HSA mikročástice byly vyrobeny sušením rozprašováním ze zásobní směsi 150 ml 25% ethanolu obsahujícího 10,0 mg/ml HSA. Podmínky pro sušení rozprašováním použité pro výrobu mikročástic jsou Upřesněny v Tabulce 1 (viz níže).
Tábulka 1
Podmínky sušení rozprašováním | Nastavení |
Vstupní teplota | 220°C |
Výstupní teplota počáteční | • 85,2 °C |
Výstupní teplota konečná | 84,0 °C |
Tlak atomizace | 7,5 bar |
Nastavení vlhčícího válče | 0,5 |
Rychlost podávání | 3,88 g / min |
Zásobní roztok | 25 % ethanol 100 mg / ml HSA |
Procesem sušení rozprašováním se vyrobilo 17,21 g mikročástic. Mikročástice z jedné výrobní nádoby se rozdělily na stejně velké alikvoty a fixovaly zahříváním na 175 °C po dobu 45, 55 a 75 minut. Proces fixace zahříváním učiní z rozpustných mikročástic získaných sušením rozprašováním mikročástice nerozpustné, zešíťováním některých aminokyselin v albuminové struktuře; Tři různé sady mikročástic fixovaných zahříváním byly kalibrovány ve vodném Systému za použití Multisizeru II (Coultér Electronics). Mikročástice měly průměrnou velikost 3,28 ± 0,6 pm s 90% zastoupením hmoty v rozmezí 2-5 pm.
Mikročástice fixované zahříváním 55 minut se analyzovaly, dříve než se na ně vázaly jakékoli aktivní složky, jako nosiče léčiv.
Analýza volného thiolu. Volná thiolová skupina v albuminu je velice přístupná modifikacím, a tak se používá jako měřítko stavu albuminu. Má být přítomná ve struktuře mikročástic, aby se potvrdilo, že molekula albuminu se během vytváření mikročástic nepoškodila.
Analýza volné thioiové skupiny se provedla reakcí albuminových mikročástic s DTNB, tj.’ 5,5'-dithiobis(2-nitrobenzoovou) kyselinou. Přítomná volná thiolová skupina reaguje s DTNB Za vzniku derivátu nitřobenZóove kyseliny, který absorbuje při 412 nm. Měřila se absórbanče suspenze mikročástic (12 mg/ml) při 412 nm. K suspenzi sé přidalo 50 pl 20%roztoku DTNB v TRIS pufru a směs se inkubovaía 10 minut při teplotě místnosti a změřila sé absorbance. Ze spočítaného rozdílu absorbancí a z molárního extinkčníhó koeficientu produktu reakce se spočítala koncentrace přítomných volných ihiolových skupin v mikročásticích. Molární poměr thiolovýčh skupin naměřený v mikročásticích byl 0,4785. To se blížilo hodnotě 0,5045 pro nativní albumin. Z malého rozdílu získaných hodnot se Usoudilo, žé thiolová skupina zůstává během vytváření mikročástic intaktní.
Mikročástice (jak rozpustné, tak nerozpustné) a nativní albumin se rozštěpily na stavební aminokyseliny hydrolýzou v plynné fázi zahříváním s koncentrovanou HCI 24 hodin na 120 °C.
Vzorky sě pak derivatizovaly přídavkem triethylaminu v 50% ethanolu a následně triethylaminem a P1TC v ethanolu. Derivatizované vzorky se analyzovaly na HPLC a aminokyseliny se detekovaly při vlnové délce 254 nm.
Tabulka 4 (na konci popisu) ukazuje výsledné aminokyselinové Složení. Nečekaně se mezi vzorky neobjevily výrazné rozdíly, pouze velmi malá ztráta aminokyselin obsahujících karboxylovou, hydroxylovou nebo amidovou Skupinu po insolúbilizaci mikročástic.
Peptidová analýza. Štěpení mikročástic a albuminu působením pepšinu se provádělo s použitím 1 ml okyseleného roztoku mikročástic nebo albuminu, ke kterému se přidalo 20 pl 1% roztoku pepsinu. Štěpení Se provádělo 24 hodin při 37 °C, poté se přidal další.podíl pepsinu a následovala další inkubace při 37 °C až do úplného rozštěpení vzorků. HPLC analýza výsledných lysátů se prováděla gradientem acetonitrilu v 0,1% TFÁ, absorbance se měřila při 214 nm.
Štěpení mikročástic a albuminu působením trypsinu se provádělo se vzorky s předem rozrušenou proteinovou strukturou (působením guanidinu-HCl, ĎTT ajódacetamidu). K těmto předpřipraveným vzorkům se přidal 0,2% trypsin a vzorky se inkubovaly při 37 °C až do úplného rozštěpení (v případě nutnosti byl přidán další podíl trypsinu). HPLC analýza lyzátů se prováděla způsobem popsaným výše.
HPLC analýzy neukázaly žádné podstatné rozdíly mezi mikročásticemi a strukturou albuminu. Toto zjištění potvrzuje podstatnou retenci sekundární a terciární struktury mikročástic po insolúbilizaci.
Vázání na FlTC. FITC (fluórescein isothiokyanát) se váže kovalentně na aminoskupiny mikročástic a představuje princip derivatizování nabitých skupin, zejména lysinových zbytků, léčivy, ktere se následně uvolňují degradací vlastní rnikroČásticové matrice.
FITC se kovalentně navázal na tri rnikroČásticové Šarže. Použil se poměr mikročástic k FITCu 15:1. K Suspendovaným mikročásticím se přidalo 12,5 mg FITCu a směs se inkubovala při 30 °C 30 minut. Nadbytek fluoresceinu se odstranil promytím mikročástic až do nepřítomnosti fluóresčeinu, t.j. dále se již nepozorovalo vymývání markéru.
Mikročástice se Štěpily proteinázóu K v koncentraci 0,4 EU/ml. Fluórescein se uvolňoval při štěpení mikročástic a měřil se odebíráním vzorků v různých Časových intervalech. Uvolněný FITC se oddělil od mikročástic centrifugací a kvantitativně se určil měřením absorbaňče. při 493 nm.
Výsledky ukázaly, že Čím jsou mikročástice méně tepelně fixovány, tím rychleji se zpočátku uvolňuje fluorescein. Avšak po 225 minutách všechny vzorky uvolnily více než 90 % fluoresceinu. Množství FITCu navázaného na různě tepelně fixované mikročástice se téměř nelišilo, jednotlivé naložení bylo 10 ± 0,5 % mol/mol pro všechny tři šarže.
Rychlosti uvolňování navázaných aktivních složek še tak řídí určením rychlosti degradace mikročástic před vlastním navázáním aktivních složek.
Mikročástice ž příkladu 1 še inkubovaly s lidskou krví 30 minut při 37 °C, aby se určilo, zda mikročástice jsou schopny Stimulovat aktivaci krevních destiček. Koncentrace mikročástic se rovnala dávce 2000 x 106 částic/kg. Po 30 minutách inkubace se sérum testovalo ňa ovlivnění c· agregace krevních destiček stimulované kolagenem ADP a ařačhidonovou kyselinou. Vlivy na obecné hemostatické mechanismy se stanovily měřením ptókoagulační aktivity, částečnou dobou thromboplastinu, doba prothrombinu vznikem fragmentu 1+2 a fibrinopeptidu A, a fibrínolytická aktivita měřením doby lýze euglobulinu.
Při teto koncentraci se nepozoroval žádný důkaz nežádoucích efektů při daných experimentech. Výsledky ukazují, žč mikročástice jsou inertní a hydrofilní, na rozdíl od mikročástic vyráběných emulzními postupy.
V dalším testu se mikročástice vyrobené podle postupu z příkladu 1 sterilizovaly gama zářením ze zdroje Co60 a dávkách 25-35 Kgray. Mikročástice se rekonstituovaly ve vodném prostředí na koncentraci 1,5 x 10’ mikřočástic/ml a podávaly zdravým dobrovolníkům mužům v dávkách 25-300 x 106 mikročástic/kg še souhlasem etické komise. Mikročástice byly duté s obsahem vzduchu, což umožňovalo kontrolovat jejich průchod a stabilitu v krevním řečišti za 'J.
pomoci ultrazvukového zobrazení.
S použitím Acusonu-128, se získalo šedé 2D zobrazení pravé a levé srdeční dutiny pro monitorování oběhového času po IV dávkování. Aby se objevila opacifikace pravé i levé srdeční dutiny? je nutná určitá hladina mikročástic v komorách. Při dávkách od 25 x 10e/kg výše, opacifikace v levé i pravé srdeční dutině trvala po dobu 1 hodiny nebo více, dokazujíc tak, že podstatné množství mikročástic zůstalo v oběhu.
Tyto údaje ukazují, že základní mikročásticoýý nosič je inertní vůči koagulačnimu mechanismu v krvi a hodí se jako nosič pro léčiva. Naproti tomu mikročástice připravené emulzními procesy ukazovaly rychlý RES příjem a poločas oběhu 10 minut a méně. Tyto mikročástice nevyžadují derivatizaci s bloky polymerů pro zvýšení poločasu v oběhu.
.1,
Tento příklad ukazuje, že aditiva se mohou přidat to zásobníku pro výrobu mikročástieověho produktu sušením rozprašováním, vzniklé mikročástice se fixují zahříváním při nižších teplotách. Aditiva, která umožňují žesíťování mikročástieověho polymeru (insolubilizaci) při nižších teplotách, mají použití když se léčiva společně suší rozprašováním a tak inkorpórují do matrice. Při použití těchto aditiv se mikročástice s citlivými aktivními složkami insolubilizují při
Příklad 2 výhodnější nižší teplotě.
K zásobníku pro sušení rozprašováním se přidalo 5mg/ml tyrosinu a vytvořily se mikročástice postupem popsaným v příkladě 1. Pro získání mikročástic se neměnily podmínky sušení rozprašováním.
Vytvořené mikročástice se fixovaly zahříváním jako prve, ale při teplotě 1Ό0 °C 55 minut, podstatně nižší než běžně 175 °Č 55 minuty při dosažení stejného žesíťování. Vyrobené mikročástice měly průměrnou velikost 3,28 ± 0,6 pm s 90 % hmoty v rozmezí 2-5 pm.
Příklad 3
Příklad 1 rozebírá výrobu mikročástic 3pm. Tento příklad ukazuje, že úpravou podmínek pro sušení rozprašováním a použitím sekundárního stupně klasifikace vznikají větší mikročástice s výbornou regulací velikosti a distribuce velikosti.
20% HSA se vysušil rozprašováním žá podmínek uvedených v Tabulce 2. Připravené mikročástice se fixovaly zahříváním na 175 °C 55 minut, deaglomerovály a třídily za použití zahnutého tryskového třídiče (viz Tabulka 3),
Prostřední tříděná frakce se jímala a refórmulovala, proces třídění odstranil většinu éxcipieritu. Výsledný volně proudící suchý prášek se charakterizoval způsobem popsaným výše. Mikročástice měly průměrnou velikost 12 pm, bez mikročástic menších ňež 6 pm, s 85 % hmoty mezi 9-18 pm.
Odstraněním mikročástic menších než 6 pm se prostřednictvím kapilárního zachycování předchází velkému krevnímu oběhu mikročástic, následujícímu po intraateriálním podávání. To má výhodu lokalizace depozitního íčku, a tak redukováni Celkového množství léku potřebného k dosažení terapeutické aktivity v požadovaném místě. To jě žádoucí zejména v případě cytotoxických látek, neboť syStemická toxicita jé hlavní příčinou škodlivých vedlejších účinků.
Tabulka 2
Podmínky sušení rozprašováním | Nastavení |
Vstupní teplota | 220 °C |
Výstupní teplota počáteční | .89,1 °C |
Výstupní teplota konečná | 89,2 °C |
Tlak atomizace | 2,0 bar |
Nastavení vlhčícího válce | .0,5 |
Rychlost podávání | 20,1 g / min |
Zásobní roztok | 20%HSA |
- Tabulka3
Podmínky třídění | Nastavení |
Primární tah | 0,6 barg |
Sekundární tah | 2,0 barg |
Tah diťuzéru | 8,0 barg |
Protilátky se vázaly na povrch mikročástic. Pro detekci navázané protilátky se používal FITČIgG.
K 5 mg FITC IgG se přidalo 35 mg jodistanu sodného. Směs se inkubovala při teplotě místnosti 1 hodinu, potom se přidalo 20 mg mikročástic. Suspenze se míchala 10 minut a pak se na mikročástice navázala protilátka s přídavkem 30 mg tetrahydroboritanu sodného. Reakce probíhala 2 hodiny při teplotě místnosti, potom sé mikročástice oddělily a promyty.
Vzorek mikročástic se redukoval za uvolnění lehkých řetězců navázaných protilátek. Po odstranění 'mikročástic se jímal výsledný filtrát. Přítomnost lehkých řetězců FITC-značené protilátky ve filtrátu se měřila s použitím fliiorimetru.
Vazba mezi protilátkami a mikročásticemi se také uskutečňuje prostřednictvím tri- a tetrapeptidových ramének. Peptidy se kováléntně vážou na aktivovaný cukerný kruh protilátek s použitím jodistanového a tětrahydróboritanového postupu popsaného výše. Protilátky se poté vážou na mikročástice prostřednictvím peptidového raménka s použitím EĎCI, jak se popisuje v příkladu 6.
Příklad 4
Tento příklad ukazuje, že inkorporace aditiv do zásobníku pro sušení rozprašováním, např. HS A, mění chemické vlastnosti mikročástic vyrobených podle příkladu 1, takže se výrazně zvyšuje počet niíst pro chemickou vazbu.
Polylysin se inkorporoval do zásobního roztoku pro sušení rozprašováním v koncentraci 5 mg/ml. Postup sušení rozprašováním se prováděl podle příkladu 1. Mikročástice vyrobené z modifikovaného zásobníku měly průměrnou velikost 3,5 ± 0,3 pm š podobnými fyzikálními charakteristikami a resušpenzními vlastnostmi jako HSAmikročástice.
FITC se navázal na póiylysinové mikročástice, jak se popisuje v přikladu 1. Mikročástice še promývaly až do ztráty absorpce FITC. FITC navázaný na HSA mikročástice se ve vodné suspenzi neuvolňo val. Mikročástice se Štěpily, jak še popisuje vpnkladu 1, a změřilo sě celkově množství fluorěsceinu navázaného na mikročástice.
Rychlost uvolňování fluořešceinu při štěpení še ukázala větší než uvolňování mikročástic. Změřilo se celkové množství 20 molárních % fluořešceinu navázaného na mikročástice, byl zjištěn více než 50% nárůst oproti standardnímu složení mikročástic.
Příklad 5
Tento příklad ukazuje že aktivní látky se vážou na obálku a následně se uvolňují rychlostí závisející na degradaci vlastních mikročástic.
K roztoku 10 mg/ml methotrexatu se přidalo 25 mg karbodiimidu (EĎCI). Roztok se míchal 4 hodiny pro iniciaci a úplný průběh aktivace methotrexatu. K aktivovanému léčivu sé přidalo 50 mg HSA mikročástic vyrobených podlé příkladu 1 a směs sě míchalá 3 hodiny při teplotě místnosti. Methotrexát Se chemicky navázal ná mikročástice prostřednictvím aminových skupin albuminu. Mikročástice se oddělily á promyly, aby se odstranil nenavázaný methótrexat.
Mikročástice s navázaným méthotrexatem se charakterizovaly a stanovil se obsah léčiva. Mikročástice mely průměrnou velikost 3,2 ± 0,6 pm s 90 % hmoty mezi 2-5 pm. Analýza obsahu léčiva ukázala, že mikročástice neuvofiují léčivo během suspenzace ve vodném prostředí. Test tříměsíční stability neukázal žádné uvolnění léčiva během této doby. Při štěpení albuminových mikročástic proteinázou K se uvolňovalo léčivo, které se vázalo k omezenému počtu aminokyselin á malých peptidu.
f.
Doxorubicin sekonjugoval s mikročásticemi vyrobenými podle příkladu 1, v přítomnosti
Přiklaď 6 karbodiimidu, 3 mg doxorubicinu, 6 mg EDCI a 100 mg mikročástic sě suspendovalo v destilované vodě při pH 6,6 a 37 °Č po dobu 20 hodin za stálého míchání, resuspehdovalo a formulovalo.
Mikročástice s doxořubieinem Se analyzovaly na obsah léčiva a charakterizovaly. Výsledky neukázaly žádnou změnu mikročástic během konjugace s léčivem. Zatížení léčivém Se stanovilo na vzorku enzymaticky štěpených .mikročástic pomocí HPLC analýzy. Naměřilo se zatížení 2 % a léčivo se navázalo na limitovaný počet aminokyselin nebo krátkých peptidů.
Již dříve se ukázala aktivita doxorubicinu vázaného na polymerní nosiče v tumorech vykazujících résištenci vůči multiléČivovému přístupu:
Příklad 7
Mikročástice vyrobené podle příkladu 1 se derivatižovaly 2'-deoxy-5-fiuorouridinem (FudR). Léčivo se aktivovalo působením sukčinanhydridu.
K Ó.2M fosfátovému pufru piři pH 8,3 se přidalo 40 mg FUdR. K tomuto roztoku sepřidalo 200 mg sukčinanhydridu a reakčni směs se míchala 2 hodiny pri 30 °Č, pH 8,3 se udržovalo s použitím IMNaOH Po změně pH reakčni směsi na 6,5 se přidalo 0,5 g mikročástic.
1 Suspenze se míchala 10 minut, pak se přidal EDCI a N-hydroxysukcinimid v poměru 15:1, reakce probíhala při teplotě místnosti. Po 24 hodinách se mikročástice oddělily a promyty, přítomnost FUdR vázaného na mikročástice se potvrdila pomocí HPLC analýzy. Kyselá hydrolýza mikročástic š ňávázariýrií léčivém še’prováděla'v systému ASTĚD spoužrtím 1% ŤFA, následnéuvólnění FUdR se sledovalo pn 269 nm. 15% W/w FUdR se navázal na mikročástice prostřednictvím vazby hydrolyzovatelné v kyselém prostředí.
Cytotoxická aktivita konjugátů mikročástic s léčivem v příkladech 5 až 7 se měřila in vitro. Použila še HSN buněčná linie. To je chemicky indukovaný krysí střevní sarkom, který produkuje jatěrní tumory v animálním modelu s vaskulániím vzorem podobným lidským kolořektálním jatemím metastázám. Úhyn buněk se měřil nepřímo s použitím MTT. To je redukováno v aktivních miťochondriích na barevný metabolit formazan. HSN buňky se inkubovaly v multikomůrkóvých miskách, ke kterým se přidaly kontrolní dávky léčiva nebo lysátu mikročástic s navázaným léčivem. Po různých expozičních Časech se do komůrek přidalo MTT a změřila se koncentrace formazanu jako indikace buněčné smrti. Test se kalibroval pro tuto buněčnou linii proti řadě známých počtů buněk.
Všechna tři léčiva (methotrexat, 5-FUdR, a doxofubicin) měla podobné křivky závislosti na dávkách pro přirozené léčivo i pro lysat mikročástic s navázaným léčivem, indikující podobnost eytótoxické aktivity. Maximální redukce v buněčné aktivitě pro všechna třiléčiva a lysáty byla 80 %. Pro 5-FÚdR a methotrexat, nejštrmější Část křivky závislosti na dávkách byla od l pg/mldo 0,1 pg/ml, pro doxorubicin od 0.1 pg/ml, v rámci rozsahu séra in vivo. Kontrolní lysáty nedérivatizovaných mikročástic nevykazovaly žádnóu čytotoxickůú aktivitu.
Příklad 8
Tento příklad ilustruje vazbu aktivní látky ně přímo ha stěnu mikročástice, ale prostřednictvím degradábiíní vazby nebo raménka. To umožňuje lepší kontrolu navázání i uvolňovaní aktivní látky.
S použitím technologie popsané v WO-9317713 pro navazování léčiv ha rozpustné nosiče, se na mikročástice navázal, s využitím raménka kyseliny mléčné, ňaproxen. K suspenzi 10 mmol L-mlěČné kyseliny v dimethylformamidu se přidalo 20 mmol triethylaminu a 10 mmol pentamethylbenzylchloridu (PMB). Směs se zahřívala až do rozpuštění všech komponent, pak še nechala při teplotě místnosti. Po inkubaci roztoku přes noc se přidal nadbytek uhličitanu sodného a preeipitoyaňý ester, PMB-ester kyseliny L-mléčné, se oddělil, promyl a vysušil.
K roztoku Obsahujícímu 10 mmol naproxenu, PMB-esteru kyseliny L-mléčné a
4-dimethylaminopyndinu, se přidalo 11 mmol roztoku dicyklohexylkarbodiimidu. Reakční směs se míchala při 25 °C a monitoroval se vznik naproxenového produktu. Po úplném proběhnutí reakce se naproxenový derivát kyseliny L-mléčně oddělil, promyl a vysušil.
PMB chrániči skupina se odstranila reakcí naproxenového derivátu s anisolem a trifluoroctovou kyselinou při teplotě místnosti 2 minuty. Nadbytek činidla se odstranil ve vakuu a odparek se promyl. Okyselení promytého odparku poskytlo naproxenový derivát kyseliny L-mléčné, který se extrahoval, promyl a sušil ve vakuu při 50 °Č.
Naproxenový derivát kyseliny L-mléčné sé aktivoval reakcí s karbodiimidem v poměru 1:1, následovanou reakcí s 1 mmolem N-hydroxysukcinimidu. Aktivovaný NHS-haproxenový derivát kyseliny L-mléčné se přidal k HSA mikročásticím v poměru 5:1 v borátovém pufru. Výsledný produkt sě oddělil a vysušil.
Vysušené naproxeňové mikročástice se formulovaly za vzniku volně tekutého prášku, s průměrnou velikostí mikročástic 3,5 ± 0,6 pm. 90 % Hmoty mikročástic bylo v rozmezí 2 až 5 pm.
Analýza produktu se provedla pomocí kapilární zonové elektroforézy (Beckman, UK). Ta ukázala přítomnost léčiva na mikročásticích. Uvolňování léčiva s použitím estéráz a následná analýza uvolněného naproxenu.se. prováděla s použitím systému ASTED připojeného na Gilson HPLC (Anachem, UK). Ukázalo se, že léčivo zůstalo intaktní a ve své nativní.formě.
Příklad 9
Výroba mikročástic sušením rozprašováním umožňuje regulovat mnoho faset procesu a finální charakteristiku mikročástic. Povrchová charakteristika výsledných mikročástic se ovlivní zavedením ligandů pro enzymy nebo receptory na obálku mikročástice. V tomto příkladě je zvýšen počet argininových zbytků, což je využito k navázání TPA.
S použitím postupu popsaného v příkladě 1 a 5, se k zásobníku pro sušení rozprašováním přidal polyarginin, Za stejných podmínek jako v příkladě 1 se vyrobily mikročástice. Mikročástice měly průměrnou velikost 3,31 ± 0,6 pm a 90 % hmoty bylo mezi 2 až 5 pm.
K 100 mg mikročástic se přidal roztok obsahující 250 pg TPA. Suspenze se míchala 2 hodiny, potom se mikročástice oddělily a krátce promyly. Koncentrace TPA zůstávajícího v reakční směsi se změřila pomočí RP-HPLC po redukci peptidů inkubací v 20mM ĎTT při 37 °C 30 minut v přítomnosti 8M močoviny. Analýza fragmentů se prováděla s použitím gradientu 10-40% acetonitrilu ve vodě a 0,1% TFA za 60 minut.
Mikročástice s navázaným TPA se analyzovaly ňa přítomnost TPA s použitím testu lýze krevní sraženiny. Fibrinová sraženina vznikla spojením fibrinógenu, thrombinu a TPA-mikročástic. Ke sraženině se pak přidal plasminogen a skleněná perlička se přidala na povrch pro určení konce testu, lýze sraženiny. Propadnutí skleněné perličky skrz lyžovanou sraženinu ukázalo, že TPA navázané na mikročástice je stále aktivní.
Množství TPA navázaného ňa mikročástice se určilo s pomocí modifikovaného fibrinovéhó testu. K mikrotitrové komůrce v misce se přidal tenký agarosový gel obsahující fibrinogen a thrombin. Kč gelu se přidalo 20 μΐ suspenze TPA-mikročástic a plasminogen. Po 30 minutách se miska prómýlá, redukce gelového zákalu se určila pomocí mikrotitrového čtecího zařízení při 340 nm. Koncentrace TPA přítomného na mikročásticích se určila pomocí příslušných TPA standardů. Výsledky ukázaly, že na mikročástice se navázalo 15 až 20 % TPA.
TPA-mikročástice mají využití jako deposita thrombolytického činidla pro administraci v době angiografie, podobně jako v WO-A-9408627, jako deposita echokontrastního činidla, s výhodou lokalizace zásobníku TPA v myokardu.
Průmyslová využitelnost
Technika výroby mikročástic podle tohoto vynálezu uplatňuje dokonalou regulaci ?
.. . . Ί velikosti, distribuce velikosti, užitečného zatížení, rychlosti biodegradace a kinetiky uvolňování, jednoduchou v použití a vhodnou pro výrobu ve větším měřítku. Mikročástice, připravené na základě tohoto vynálezu, jsou schopny vyhovět svým aplikačním požadavkům ve všech případech při zachování schopnosti vytvořit modifikovaný nosič ve velkém měřítku farmaceutického upotřebení.
Tabulka 4. Aminokyselinové složení přirozeného albuminu a mikročástic
Aminokyselina | HSA(n = 5) | Rozpustné mikročástice (n = 5) | Nerozpustně mikročástice (n = 7) |
Kyselina aspartová | 50,188 ±2,73 | 57,99 ±4,13 | 59,23 ±4,81 |
Kyselina glutamová | 79,31 ±5,44 | 80,47 ±2,26 | 85,70 ±4,04 |
Šeřin | 23,21 ±1,39 | 23,2 ±1,23 | 20,65 ±2,44 |
.Glycin | 14,54 ±0,71 | 15,33 ±0,38 | 14,93 ± l/)7 |
Histidín | 17,34 ±1,06 | 17,65 ±1,01 | 16,42 ±0,85 |
Threonin | 26,99 ± 1,34 | 27,23 ±1,56 | 28,39 ±2,38 |
Alanin | 63,83 ± 1,34 | 61,45 ±0,96 | 62,69 ± 1,86 |
Arginin | 25, í 8 ±0,95 | 24,39 ±1,02..... | 23,15 '± 1,55 |
Prolin | 28,36 ±1,17 | 27,45 ±2,03 | 25,20 ±3,05 |
Tyrošin | 18,37 ±0,71 | 18,02 ±0,42 | 16,13 ±1,38 |
Valin | 35,54 ±1,49 | 35,07 ±1,03 | 37,59 ± 4,53 |
Methionin | 7,99 ±0,5 | 7,68 ±0,42 | 6,24 ± 1,16 |
Isoleucín | 6,42 ±0,54 | 6,64 ± 0,57 | 8,96 ±1,78 |
Leucin | 63,22 ± 3,48 | 62,13 ±3,14 | 59,28 ±4,38 |
Fcnylalanin | 32,00 ±2,73 | 30,45 ±2,13 | 30,48 ± 1,92 |
Lysin | 56,185 ±2,50 | 53,45 ±1,62 | 51,68 ±3,67 |
Claims (15)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Sterilní prášek, vyznačuj í c í set í m, že obsahuje hladké sférické mikročástice, 0,1 až 50 pm v průměru, ze zesíťovanýčh látek, mikročástice jsou hydrofilní a schopné rekonstituce ve vodě za vzniku monodisperzní suspenze, které navíc zahrnují fyziologicky nebo diagnosticky aktivní komponenty vázáné přímo nebo nepřímo na mikročástice prostřednictvím jejich volných funkčních Skupin.
- 2. Sterilní prášek podle nároku 1, v y z n a č u jící se tím, že látkou je aminokyselina, polyamihokyselina nebo jiný polypeptid.
- 3. Sterilní prášek podle nároku 1 nebo nároku 2, vyznač u j ící se t í rn, že obsahuje další vodou rozpustné látky, které usnadňují enzymatickou biodegíadaci.
- 4, Sterilní prášek podle kteréhokoliv z předchozích nároků 1 až 3, v y z n a č u j í c í se t í m, že aktivní komponentou je léčivo, chemické raménko, ligand pro enzym nebo receptor, nebo protilátka.
- 5.Sterilní prášek podle kteréhokoliv z předchozích hářóků 1 až 4, v y z n a č u j ící s e t í m, že je vodou rozpustný a obsahuje zmíněné skupiny a získá se ze zmíněného materiálu (i) sušením rozprašováním a zesíťováním, takže zmíněné skupiny jsou získány ve volně formě a (ii) navázáním aktivní složky na zesíťovaný materiál prostřednictvím zmíněných skupin.
- 6. Sterilní prášékpodle nároku 5, vy z n a ču j í c í s e t í m{ že krok (i) zahrnuje sušení rozprašováním roztoku vodou rozpustné látky a zesíťování vysušené látky za horka v přítomnosti méně než 4 % vlhkosti.
- 7. Stérilní prášek podle kteréhokoliv z předchozích nároků 1 až 6, vyznačující s é t í m, že funkční skupiny jsou amin, hydroxyl, karboxyl nebo meřkaptoskupina.
- 8. Sterilní prásek podle nároku 7, v y z n a č u j i c í s e t í m, že funkční skupiny jsou amin, hydroxyl nebo karboxyl.
- 9. Sterilní prášek podle kteréhokoliv z předchozích nároků 1 až 8, v y z n a č u j í c í se t í m, že částice mají poměr interkvartilního rozsahu k průměrnému průměru 0,2 az 0,5.1Ó. Sterilní prášek podle nároku 9, vy z na č uj í č í se t í m, že 95 % částic jě menších než 6 pm a 80 % částic je vrozmezí i až 6 pm.
- 11. Sterilní prášék podle nároku 9, v y z nač ují c í s e t í m, že 90 % částic je menších než 20 pm a méně rtež 5 % objemu je menších než 6pm.
- 12. Suspenze mikročástic podle definice z kteréhokoliv z předchozích nároků 1 až 11, v y z n a č u j í c í setí m, že je vhodná pro parenterální podávání.’
- 13’ Suspenzemikročástičpodle nároku 12, v y z nač u j í c í s e t í m, že mikročástice podle nároku 10 jsou pro intravenózní podávání.
- 14. Suspenze mikročástic podle nároku 12, vyznačují cí se tí m, že mikročástice podle nároku 11 jsou pro intraarteriálňí podávání.
- 15. Sterilní prášek podle kteréhokoliv z předchozích nároků 1 až 11, vy z na č u j ící se t í m, že akti vní složkou jě cytotoxická látka.
- 16. Použití doxorubicinu pro přípravu léčiva zahrnujícího sterilní prášek podle nároku 15 pro léčení tumorů vykazujících resistenči vůči multiléčivověmu přístupu.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP94309417 | 1994-12-16 | ||
PCT/GB1995/002925 WO1996018388A2 (en) | 1994-12-16 | 1995-12-14 | Cross-linked microparticles and their use as therapeutic vehicles |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ183797A3 true CZ183797A3 (en) | 1997-11-12 |
Family
ID=8217949
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ971837A CZ183797A3 (en) | 1994-12-16 | 1995-12-14 | Cross-linked micro-particles and their use as a therapeutic carrier |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0796090B1 (cs) |
JP (1) | JP4350165B2 (cs) |
CN (1) | CN1175208A (cs) |
AT (1) | ATE234080T1 (cs) |
AU (1) | AU692019B2 (cs) |
BR (1) | BR9510462A (cs) |
CA (1) | CA2207077C (cs) |
CZ (1) | CZ183797A3 (cs) |
DE (1) | DE69529917T2 (cs) |
DK (1) | DK0796090T3 (cs) |
ES (1) | ES2191721T3 (cs) |
FI (1) | FI972546A (cs) |
HU (1) | HUT77369A (cs) |
NO (1) | NO972554D0 (cs) |
NZ (1) | NZ297072A (cs) |
PL (1) | PL321018A1 (cs) |
PT (1) | PT796090E (cs) |
WO (1) | WO1996018388A2 (cs) |
ZA (1) | ZA9510702B (cs) |
Families Citing this family (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6391343B1 (en) | 1991-01-15 | 2002-05-21 | Hemosphere, Inc. | Fibrinogen-coated particles for therapeutic use |
GB9423419D0 (en) | 1994-11-19 | 1995-01-11 | Andaris Ltd | Preparation of hollow microcapsules |
US5955108A (en) * | 1994-12-16 | 1999-09-21 | Quadrant Healthcare (Uk) Limited | Cross-linked microparticles and their use as therapeutic vehicles |
EP0914096B1 (en) * | 1996-05-17 | 2003-08-13 | Elan Drug Delivery Limited | Microparticles and their use in wound therapy |
GB9610830D0 (en) | 1996-05-23 | 1996-07-31 | Andaris Ltd | Use of hollow microcapsules |
GB9615435D0 (en) * | 1996-07-23 | 1996-09-04 | Andaris Ltd | Spray-dried product and its therapeutic use |
GB9621825D0 (en) * | 1996-10-19 | 1996-12-11 | Andaris Ltd | Microparticles and their use as therapeutic vehicles |
WO1998017318A1 (en) * | 1996-10-19 | 1998-04-30 | Quadrant Healthcare (Uk) Limited | Use of hollow microcapsules in diagnosis and therapy |
EP1028752B1 (en) * | 1996-10-21 | 2004-12-15 | Quadrant Drug Delivery Limited | Platelet substitutes and conjugation methods suitable for their preparation |
US6068600A (en) * | 1996-12-06 | 2000-05-30 | Quadrant Healthcare (Uk) Limited | Use of hollow microcapsules |
EP0964676A1 (en) * | 1997-01-30 | 1999-12-22 | Quadrant Healthcare (UK) Limited | Microparticles and their use in cancer treatment |
AU741528B2 (en) | 1997-06-05 | 2001-12-06 | Hemosphere, Inc. | Fibrinogen-coated microspheres |
US20060165606A1 (en) | 1997-09-29 | 2006-07-27 | Nektar Therapeutics | Pulmonary delivery particles comprising water insoluble or crystalline active agents |
GB9724143D0 (en) * | 1997-11-14 | 1998-01-14 | Andaris Ltd | Pharmaceutical conjugate |
GB9825105D0 (en) * | 1998-11-16 | 1999-01-13 | Andaris Ltd | Pharamaceutical conjugates |
US7871598B1 (en) | 2000-05-10 | 2011-01-18 | Novartis Ag | Stable metal ion-lipid powdered pharmaceutical compositions for drug delivery and methods of use |
CA2468958C (en) | 2001-12-19 | 2012-07-03 | Nektar Therapeutics | Pulmonary delivery of aminoglycosides |
GB0323378D0 (en) * | 2003-10-07 | 2003-11-05 | Univ Leicester | Therapeutic agent |
CA2750725C (en) * | 2004-01-07 | 2014-10-21 | Seikagaku Corporation | Spacer derivative for hyaluronic acid and non-steroidal anti-inflammatory drug residues |
GB0623607D0 (en) | 2006-11-27 | 2007-01-03 | Haemostatix Ltd | Tissue adhesive |
US7914999B2 (en) * | 2006-12-29 | 2011-03-29 | Abbott Laboratories | Non-denaturing lysis reagent |
GB0814302D0 (en) | 2008-08-05 | 2008-10-01 | Coretherapix Slu | Compounds and methods |
EP2216054A1 (en) | 2009-02-06 | 2010-08-11 | ProFibrix BV | Biodegradable extravascular support |
GB0909136D0 (en) | 2009-05-28 | 2009-07-01 | Profibrix Bv | Dry powder composition |
GB0909131D0 (en) | 2009-05-28 | 2009-07-01 | Quadrant Drug Delivery Ltd | Dry powder fibrin sealant |
KR20120125465A (ko) | 2010-01-08 | 2012-11-15 | 프로피브릭스 비.브이. | 건조 분말 피브린 실란트 |
NO20110653A1 (no) | 2011-05-02 | 2012-11-05 | Spiro Medical As | Respirasjonsovervakning |
RU2013155713A (ru) | 2011-07-06 | 2015-08-20 | Профибрикс Бв | Составы для лечения ран |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0494417B1 (en) * | 1991-01-10 | 1996-04-17 | Basf Corporation | Process for crosslinking gelatin and for incorporation a material therein |
GB9221329D0 (en) * | 1992-10-10 | 1992-11-25 | Delta Biotechnology Ltd | Preparation of further diagnostic agents |
-
1995
- 1995-12-14 PT PT95940381T patent/PT796090E/pt unknown
- 1995-12-14 BR BR9510462A patent/BR9510462A/pt not_active Application Discontinuation
- 1995-12-14 CZ CZ971837A patent/CZ183797A3/cs unknown
- 1995-12-14 JP JP51847396A patent/JP4350165B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1995-12-14 WO PCT/GB1995/002925 patent/WO1996018388A2/en active IP Right Grant
- 1995-12-14 CN CN95197597A patent/CN1175208A/zh active Pending
- 1995-12-14 AU AU41849/96A patent/AU692019B2/en not_active Ceased
- 1995-12-14 NZ NZ297072A patent/NZ297072A/xx unknown
- 1995-12-14 PL PL95321018A patent/PL321018A1/xx unknown
- 1995-12-14 ES ES95940381T patent/ES2191721T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-14 HU HU9701980A patent/HUT77369A/hu unknown
- 1995-12-14 DK DK95940381T patent/DK0796090T3/da active
- 1995-12-14 CA CA002207077A patent/CA2207077C/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-12-14 AT AT95940381T patent/ATE234080T1/de not_active IP Right Cessation
- 1995-12-14 DE DE69529917T patent/DE69529917T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1995-12-14 EP EP95940381A patent/EP0796090B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-15 ZA ZA9510702A patent/ZA9510702B/xx unknown
-
1997
- 1997-06-05 NO NO972554A patent/NO972554D0/no not_active Application Discontinuation
- 1997-06-16 FI FI972546A patent/FI972546A/fi unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP0796090A2 (en) | 1997-09-24 |
CA2207077C (en) | 2007-02-06 |
PL321018A1 (en) | 1997-11-24 |
WO1996018388A3 (en) | 1996-08-29 |
CN1175208A (zh) | 1998-03-04 |
AU692019B2 (en) | 1998-05-28 |
MX9704503A (es) | 1997-10-31 |
DK0796090T3 (da) | 2003-06-23 |
ATE234080T1 (de) | 2003-03-15 |
ZA9510702B (en) | 1996-12-17 |
HUT77369A (hu) | 1998-03-30 |
FI972546A0 (fi) | 1997-06-16 |
FI972546A (fi) | 1997-07-04 |
NO972554L (no) | 1997-06-05 |
ES2191721T3 (es) | 2003-09-16 |
EP0796090B1 (en) | 2003-03-12 |
WO1996018388A2 (en) | 1996-06-20 |
NO972554D0 (no) | 1997-06-05 |
DE69529917D1 (de) | 2003-04-17 |
DE69529917T2 (de) | 2003-12-11 |
NZ297072A (en) | 1999-03-29 |
AU4184996A (en) | 1996-07-03 |
PT796090E (pt) | 2003-07-31 |
JPH10510527A (ja) | 1998-10-13 |
JP4350165B2 (ja) | 2009-10-21 |
BR9510462A (pt) | 1998-12-15 |
CA2207077A1 (en) | 1996-06-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CZ183797A3 (en) | Cross-linked micro-particles and their use as a therapeutic carrier | |
US5955108A (en) | Cross-linked microparticles and their use as therapeutic vehicles | |
CA2269335C (en) | Platelet substitutes and conjugation methods suitable for their preparation | |
JP5080453B2 (ja) | 非経口投与に適したコアとマイクロカプセル並びにそれらの製造方法 | |
US20070281031A1 (en) | Microparticles and methods for production thereof | |
US20070116768A1 (en) | Sustained release preparations composed of biocompatible complex microparticles | |
US8017152B2 (en) | Cores and microcapsules suitable for parenteral administration as well as process for their manufacture | |
EP1047452B1 (en) | Conjugates comprising two active agents | |
Cremers et al. | Preparation and characterization of albumin-heparin microspheres | |
US20020136732A1 (en) | Compositions comprising carriers and transportable complexes | |
Magee et al. | Effect of process variables on the in vitro degradation of protein microspheres | |
MXPA97004503A (en) | Steril powder of interlocked materials and its | |
AU2002255172B2 (en) | Soluble protein-polymer systems for drug delivery | |
WO2000035487A1 (en) | Pharmaceutical conjugates comprising two active agents | |
López‐Iglesias et al. | Rational Design and Development of Polymeric Nanogels as Protein Carriers | |
MXPA99003677A (en) | Platelet substitutes and conjugation methods suitable for their preparation | |
AU2002255172A1 (en) | Soluble protein-polymer systems for drug delivery |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |