CZ177098A3 - Prekursory prodrugs inhibitorů thrombinu - Google Patents

Description

Vynález se týká farmaceuticky užitečných prodrog farmaceuticky aktivních sloučenin, které jsou zvláště konkurenčními inhibitory trypsinovitých serinových proteáz, zvláště thrombinu, použití těchto prodrog jakožto léčiv, farmaceutických prostředků, které je obsahují a syntetických cest jejich přípravy.

Dosavadní stav techniky

Koagulace krve je klíčívý proces zahrnutý jak v hemostázi (to je prevence ztráty krve z poškozené cévy) tak thrombózy (to je vytváření krevních sraženin v cévách vedoucích někdy k ucpání cév.

Koagulace je výsledkem komplexní řady enzymatických reakcí . Jedním z konečných stupňů této řady reakcí je konverze proenzymu thrombin na aktivní enzym thrombin.

Je známo, že thrombin má centrální úlohu při koagulaci. Aktivuje krevní destičky, což vede k agregaci destiček, převádí fibrinogen na fibrinové monomery, které spontánně polymerují na fibrinové polymery a aktivují faktor XIII, který jako takový sesíťuje polymery za vzniku nerozpustného fibrinu. Kromě toho thrombin aktivuje faktor V a faktor VII, přičemž dochází ke zpětné vazbě generace thrombinu z prothrombinu.

Lze proto očekávat, že inhibice agregace krevních destiček a vytváření sesítění fibrinu, efektivních inhibitorů thrombinu bude vykazovat antithromhotickou aktivitu. Kromě antithrombotické aktivity lze očekávat podporu účinné inhibice pozitivního mechanizmu zpětné vazby.

• ·

Vývoj nízkomolekulárních inhibitorů thrombinu popsal

Claesson (Blood Coagul. Fibrin.,

5, str. 411, 1994).

Blomback a kol. (J. Clin.

Lab. Invest. 24, doplněk 107,

59, 1969) popisuje inhibitory thrombinu na bázi aminokyselinové sekvence umístěné kolem místa štěpení pro fibrinogenové

Aalfa řetězce. Z diskutovaných aminokyse1 inovoých sekvencí se doporučují tripeptidová sekvence Pbe-Val-Arg jako nejúčinnější inhibitor.

Nízkomolekulární thrombinové inhibitory na peptidové bázi jsou popsány například v patentovém spise US 4 346078, v mezinárodních zveřejněných přihláškách vynálezu číslo WO 93/ 11152, WO 94/29336, WO 93/18060 a WO 95/01168 a v evropských zveřejněných přihláškách vynálezu číslo 648780, 468231, 559046, 641779, 185390, 526877, 542525, 195212, 362002, 364344, 530167, 293881, 686642 a 601459.

Nověji byly popsány inhibitory thrombinu na bázi derivátů peptidu ve zveřejněné evropské přihlášce vynálezu číslo O 649317 a v mezinárodních zveřejněných přihláškách vynálezu číslo W0 95/23609, WO 95/35309, WO 96/25426 a W0 94/29336.

Obzvláště v mezinárodní zveřejněné přihlášce vynálezu číslo W0 94/29336 se popisuje derivát obecného vzorce

R*00C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-H , kde znamená R^a atom vodíku, benzylovou skupinu nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.

Jakkoliv je známo, že tyto aktivní sloučeniny vykazují výraznou antithrombinovou aktivitu, bylo by stále vhodné zlepšit jejich farmakokinetické vlastnosti jak při oralním^tak při parenterálním podávání, přičemž takováto žádoucí zlepšení zaΛ' f

hrnuj í:

a) zlepšenou absorpci z gastrointestinálního traktu se zřetelem na snížení intra a/nebo interindividuální variability se zřetelem na biologickou dostupnost účinných látek,

b) zploštění časového profilu koncentrace v plasmě (to je snížení píku koncentrace v plasmě v průběhu dávkovacího intervalu) , se zřetelem na snížení nebezpečí poklesu mimo hranici terapeutického intervalu a vedlejších jevů způsobených koncentračním pikem, který je příliš vysoký (například krvácení) a příliš nízký (například vytváření thrombu) a

c) zvýšení doby působení účinných látek.

Kromě toho orální a parenterální podávání aktivních inhibitorů thrombinu může vést k nežádoucímu lokálnímu krvácení (například ve střevním 1uměnu nebo subkutanně) jakožto následek vysoké místní koncentrace.

Konečně orálního podávání aktivních inhibitorů thrombinu, které také inhibují trypsin a jiné serinové proteázy v gastrointestinálním traktu, může mít přídavně vedlejší účinky včetně netrávení (například v případě, kdy je trypsin inhibován ve střevním 1uměnu).

Jakkoliv určité N-benzyloxykarbonylové deriváty shora zmíněných aktivních sloučenin byly rovněž označovány jako inhibitory thrombinu v mezinárodní zveřejněné přihlášce vynálezu číslo WO 94/29336, neuvádělo se, že by tyto deriváty mohly být užitečné jako prodrogy. Ve skutečnosti se v WO 94/29336 nikde nezmňují vhodné prodrogy aktivních sloučenin.

Nyní se s překvapením zjistilo, že shora vytčené problémy mohou být zvládnuty podáváním sloučenin podle vynálezu, • · • · <

- 4 které jsou jako takové neaktivní, po orálním a/nebo parenterálním podání metabolizují v těle za vytváření aktivních inhibitorů thrombinu vóetně inhibitorů shora uvedených.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je sloučenina obecného vzorce I

R10(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R2 (I) kde znamená

Ri skupinu -R³ nebo - A^CÍ O) Ní R⁴)R^ nebo -A^CÍOIOR⁴

A¹ alkylenovou skupinu s 1 aš 5 atomy uhlíku,

R2 (který nahrazuje jeden z atomů vodíku v amidinové jednotce Pab-H) znamená hydroxy1ovou skupinu, skupinu obecného vzorce OCÍO1R⁶, CÍOIOR⁷ nebo

C( O) OCHÍ R⁸) OCÍ O) R⁹

R³ atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, alkylfenylovou skupinu s 1 aš 3 atomy uhlíku v al kýlovém podílu, která je popřípadě substituována alkylovou skupinou s 1 aš 6 atomy uhlíku, alkyloxyskupinou s 1 aš 6 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo atomem halogenu,

R⁴ a R⁵ na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 aš 6 atomy uhlíku, fenylovou skupinu, 2-naftylovou skupinu nebo v případě, kdy R¹ znamená skupinu obecného vzorce - AíCÍO) N(R⁴)R⁵, spolu s atomem dusíku, na který jsou vázány skupinu pyrrolidinylovou nebo piperidinylovou skupinu,

R⁶ alkylovou skupinu s 1 až 17 atomy uhlíku, fenylovou nebo 2-naftylovou skupinu, přičemž všechny tyto skupiny jsou popřípadě substituovány alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo atomem halogenu,

R⁷ skupinu 2-naftylovou, fenylovou, alkylfenylovou s 1 až 3 atomy uhlíku v a1kýlovém podílu, přičemž všechny tyto skupiny jsou popřípadě substituovány alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, a1koxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo atomem halogenu, nebo znamená alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy uhlíku, která je popřípadě substituována a1koxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, acyloxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo atomem halogenu,

R^s atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

R⁹ skupinu 2-naftylovou, fenylovou, alkoxyskupinu s 1 až atomy uhlíku, alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, která je popřípadě substituována atomem halogenu, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo acyloxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, za podmínky, že v případě, kdy

R1 znamená skupinu R³, znamená R³ skupinu benzylovou, methylovou, ethylovou, n-butylovou nebo n-hexylovou a R² znamená skupinu obecného vzorce C( O) OR⁷, kde neznamená R⁷ benzylovou skupinu, nebo její farmaceuticky vhodná sůl (označovaná zde nadále jako “sloučenina podle vynálezu).

Sloučeniny podle vynálezu mohou vykazovat tautomerismus. Všechny takové tautomerní formy vynález zahrnuje.

	·· · • · ·	·· ·· • 4 · ·	4· ·· • 4 ·
	• 4	• 4 · · · · ·	4 · 4
	• ·	····· '4 4 ··	• 4 4 4 ·
	•	• · · · ·	• 4 ·
	• · · ·	• 44 ··	4· ··
	- 6 -
Sloučeniny podle	vynálezu mohou	obsahovat	jeden nebo
několik asymetrických	atomů uhlíku a	mohou proto	vykazovat

optický a/nebo diastereoizomerismus. Všechny diastereomery se mohou oddělovat o sobě známými způsoby například chromátografií nebo frakcionovanou krystal ižací. Různé stereoizomery se mohou izolovat separací racemické nebo jiné směsi sloučenin o sobě známými způsoby například frakcionovanou krystal ižací nebo chromatografií HPLC.Nebo se žádané optické izomery mohou připravovat reakcí vhodných opticky aktivních výchozích látek za podmínek, které nevedou k racemizaci nebo epimerizaci, nebo derivatizací například homochirální kyselinou s následným oddělením diastereomerních derivátů o sobě známými způsoby (například HPLC, chromatografií na oxidu křemičitém). Vynález zahrnuje všechny možné stereoizoméry.

Vynález se také týká použití sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I, shora popsané avšak bez platnosti výjimky, jakožto prodrogy.

Alkylové skupiny symbolu R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ a R⁹ mají linární řetězec nebo, pokud mají dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec, nebo jsou cyklické nebo parciálně cyklické, nasycené nebo nenasycené, přerušené atomem kyslíku a/nebo substituované nebo zakončené hydroxy1ovou skupinou za podmínky, že hydroxylová skupina není vázána na sp² atom uhlíku nebo na atom uhlíku, který přiléhá k atomu kyslíku.

Parciálně cyklickými alkylovými skupinami se míní skupiny jako například CHaCh.

Alkylové skupiny symbolu R^s a R³, R⁶ a R⁷ jsou popřípadě substituovány, mají 1inární řetězec nebo, pokud mají dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec, jsou nasycené nebo nenasycené a/nebo jsou přerušené atomem kyslíku.

·· « 99 ·· 99 99

9 9 9 9 9 9 9 9 9

999 9 9 999 9 999

999999 99 99 999 9 ·

9 9 9 9 9 9 9 9

9999 9 99 99 99 99

Alkylové podíly alkyl fenolových skupin symbolu R³ a R⁷ mají linární řetězec nebo, pokud mají dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec a/nebo jsou nasycené nebo nenasycené.

Alkylenové skupiny symbolu A¹ mají linární řetězec nebo, pokud mají dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec a/nebo jsou nasycené nebo nenasycené.

A1koxyskupiny symbolu R⁹ a R³, R⁷ a R⁹ jsou popřípadě substituovány, mají linární řetězec nebo, pokud mají dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec a/nebo jsou nasycené nebo nenasycené.

Acyloxyskupiny symbolu R⁷ a R⁹ jsou popřípadě substituovány, mají linární řetězec nebo, pokud mají dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec a/nebo jsou nasycené nebo nenasycené.

Používané zkratky mají následujícíc význam:

Ac	acetyl
ag	vodný
Aze	S-azetidin-2-karboxylová kysel ina
Boc	terč.-butyloxykarbonyl
í Boc)2O	di-terc.-butyloxykarbonyl
Bn	benzyl
Bu	butyl
Cgl	cyk1ohexylg1yc i n
Ch	cyklohexyl
DCC	dicyklohexylkarbodi imid
DMAP	N,N-dimethylaminopyridin
EDC	1 -(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodii midhydrochlor i d
Et	ethyl
EtOH	ethanol

0 0	0	00	0 0	00	00
• 0	0	0	0	0	Φ 0	•	0 0	•
•	0 0	0	0	004	0 0
•	0000	• 0	0	0 ·	• 00 0	0		•
•	0	0 0	0 ·	•	•	00	•
• 00«	0	• 0	0 0	··

EtOAc	ethylacetát
h	hodiny
HCL	kyšelina ch1orovodíková
H-Pab-H	1-amidino-4-aminomethylbenzen
H-Pab-Z	4-aminomethyl-1 - (N-benzyloxykarbonylamidi- no)benzen
HPLC	vysokovýkonostní kapalinová chromatografie
K2CO3	uhličitan draselný
Me	methyl
Men	(IR,2S,SRlmenthyl
Pab-OH	4-aminomethylbenzamidoxim- ( 4-aminomethyl- 1-aminohydroxyiminomethyl)benzen
Piví aloyl1	2,2-dimethylacetyl
Pr	propy1
Prl	N-pyrrolidinyl
RPLC	reverzní fázová vysokovýkonostní kapalinová chromatograf ie
TFA	tr i f1uoroctová kyše1 i na
THF	tetrahydrof uran
Z	benzyloxykarbony1

Písmenková označení před chemickými názvy n, s, i a t mají o sobě známý význam: normální, iso, sek a terciární. Označení v případě NMT spekter· s, d, t, q a b znamenají singlet, dublet, triplet, kvartet a široký. Stereochemie pro aminokyseliny n je vždy ( S) , pokud není uvedeno jinak.

Vynález se také týká sloučenin obecného vzorce I, shora definovaných s další podmínkou, že

a) R¹ neznamená -A¹C(O)OR⁴,

b) R⁴ a R⁵ neznamená na sobě nezávisle atom vodíku,

c) R⁶ neznamená alkylovou skupinu s 1 až 17 atomy uhlíku, jestliže R² znamená skupinu obecného vzorce OCÍO1R⁶.

Vynález se také týká sloučenin obecného vzorce I, kde

• ·	9	• 9	99	99	99
	9	•	•	9	• 9	•	99	9
•	9 9	•	9	999	• 9
•	····	• 9	9	9 9	• 99 9	•		•
•	•	• 9	• ·	•	9		•
9999	9	9 9	• 9	9 9		• 9

znamená

a) R* skupinu -A*C(0)0R⁴,

b) R⁴ a R⁵ na sobě nezávisle atom vodíku,

c) R⁶ alkylovou skupinu s 1 až 17 atomy uhlíku, jestliže R² znamená skupinu obecného vzorce OCCO1R⁶.

Jestliže R¹ znamená skupinu obecného vzorce -A¹C(O)N(R⁴)R⁵, jsou výhodnými sloučeniny kde znamená

A¹ alkylenovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku,

R⁴ atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uh1 í ku,

R⁵ alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo cykloalkylovou skupinu se 4 až 6 atomy uhlíku nebo

R⁴ a R⁵ pyrrolidinylovou skupinu.

Jestliže R¹ znamená skupinu obecného vzorce -A¹C(0)OR⁴, jsou výhodnými sloučeniny kde znamená

A¹ alkylenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku,

R⁴ alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.

Jestliže R¹ znamená skupinu R³, jsou výhodnými ty sloučeniny podle vynálezu, kde v obecném vzorci I znamená R³ atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, která má linární řetězec nebo, pokud má dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec, nebo je cyklická nebo parciálně cyklická, nebo znamená alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu, která je popřípadě substituovaná a má lineární řetězec nebo, pokud má dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec.

Výhodnými jsou sloučeniny podle vynálezu, kde v obecném vzorci I znamená R² hydroxylovou skupinu, skupinu 0CÍ01R⁶ (přičemž v takovém případě znamená R⁶ popřípadě substituovanou fenylovou skupinu nebo alkylovou skupinu s 1 až 17 atomy uhlíku, která má 1inární řetězec nebo, pokud má dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec, nebo je cyklická nebo par-

	•	··	··	··		··
• ·	•	•	•	•	• ·	•	• ·	•
•	• ·	•	•	···	• ·
•	····	• ·	•	• ·	♦ ·· ·	•		•
•	•	• ·	• ·	•	Φ	• ·	•
····	•	··	• ·	··

- ΙΟ ciálně cyklická a/nebo nasycená nebo nenasycená), nebo R² znamená skupinu 0C(0)R⁷ (přičemž v Lakovém případě znamená R⁷ popřípadě substituovanou fenylovou skupinu nebo alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy ublíku, která je popřípadě substituovaná, má linární řetězec nebo, pokud má dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec, nebo je cyklická nebo parciálně cyklická a/nebo nasycená nebo nenasycená), nebo R² znamená skupinu alkylfenylovou s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu, která je popřípadě substituovaná a má lineární řetězec nebo, pokud má dostatečný počet atomů uhlíku, rozvětvený řetězec,nebo R² znamená skupinu C( O) OCH( R^s) OC( O) R⁹ (přičemž v takovém případě znamená R^s atom vodíku nebo methylovou skupinu, R^g fenylovou skupinu nebo alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, která je popřípadě substituovaná, má linární řetězec nebo, pokud má dostatečný počet atomu uhlíku, rozvětvený řetězec, nebo je cyklická nebo parciálně cyklická.

Ještě výhodnějšími jsou sloučeniny podle vynálezu, kde v obecném vzorci I znamená

R¹ atom vodíku, 1ineární alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, rozvětvenou alkylovou skupinu se 3 až 1O atomy uhlíku, parciálně cyklickou alkylovou skupinu se 4 až 1O atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinu se 4 až 1O atomy uhlíku, popřípadě substituovanou lineární alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu, popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu se 3 atomy uhlíku v rozvětveném alkylovém podílu, nebo znamená skupinu obecného vzorce -A^CÍ O) N(R⁴)R⁵, kde znamená A¹ alkylenovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, R⁴ atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku a R⁵ alkylovou skupinu s 2 až 6 atomy uhlíku nebo cykloalkylovou skupinu se 5 až 6 atomy uhlíku nebo R⁴ a R⁵ spolu dohromady pyrrolidinylovou skupinu nebo R¹ znamená skupinu obecného vzorce -AiCÍOlOR⁴, kde znamená A¹ alkylenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku a R⁴ alkylovou sku··

9 9

99

999 9 9 • 9 · • 9 99

9 • · · •9999

9· ····9 •9 •··· • ··*

99 pinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

R² znamená hydroxylovou skupinu, skupinu 0C(01R^& (přičemž v takovém případě znamená R⁶ popřípadě substituovanou fenylovou skupinu nebo lineární alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, rozvětvenou alkylovou skupinu se 3 až 4 atomy uhlíku nebo cis-oleylovou skupinu nebo R² znamená skupinu 0C(0)R⁷ (přičemž v takovém případě znamená R⁷ popřípadě substituovanou a/nebo popřípadě nenasycenou lineární alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, nebo popřípadě substituovanou a/nebo popřípadě nenasycenou rozvětvenou alkylovou skupinu s 3 až 4 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou fenylovou skupinu nebo popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v 1ineárním alkylovém podílu, nabo popřípadě substituovanou alkylfenylovou s 3 atomy uhlíku v rozvětveném alkylovém podílu, nebo R² znamená skupinu C( O) OCHí R⁸1 OC( O) R⁹ (přičemž v takovém případě znamená R^s atom vodíku nebo methylovou skupinu, R⁹ fenylovou skupinu nebo cykloalkylovou skupinu s 5 až 7 atomy uhlíku, lineární alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, rozvětvenou alkylovou skupinu s 3 až 6 atomy uhlíku, nebo parciálně cyklickou alkylovou skupinu se 7 až 8 atomy uhlíku.

Obzvláště výhodnými jsou sloučeniny podle vynálezu, kde v obecném vzorci I znamená

R¹ lineární alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinu se 6 až 10 atomy uhlíku nebo , popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v lineárním alkylovém podílu,

R² znamená hydroxylovou skupinu, skupinu OCÍOIR⁶ (přičemž v takovém případě znamená R⁶ lineární alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo rozvětvenou alkylovou skupinu se 3 atomy uhlíku nebo R² znamená skupinu 0CÍ01R⁷ (přičemž v ta-

··	•	• 9	• 9	99	99
* ·	9	9	•	•	9	9	•	99	9
•	• 9	•	•	• 99	9	9
•	9999	• 9	9	9 9	9	999	9		9
•	•	• 9	9 ·		9	9		•
• 999	9	• 9	99		··		9 9

- 12 kovém případě znamená R⁷ popřípadě substituovanou lineární alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, nebo popřípadě substituovanou rozvětvenou alkylovou skupinu s 3 až 4 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v lineárním alkylovém podílu, nebo popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu s 3 atomy uhlíku v rozvětveném alkylovém podílu, nebo R² znamená skupinu C(O)OCHÍR⁸)0C(0)R⁹ (přičemž v takovém případě znamená R⁸ atom vodíku a R⁹ cykloalkylovou skupinu s 5 až 7 atomy uhlíku, lineární alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, nebo parciálně cyklickou alkylovou skupinu se 7 až 8 atomy uhlíku.

Jestliže R¹ znamená R³ a R³ znamená popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu, je výhodným substitunetem alkylová skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, zvláště methylová skupina.

Jestliže R² znamená skupinu OCÍO1R⁷ a R⁷ znamená popřípadě substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy uhlíku, jsou výhodnými substituenty atom halogenu, zvláště chloru a alkoxyskupina s 1 až 6 atomy uhlíku, zvláště methoxyskupina.

Jestliže R² znamená skupinu 0C(0)R⁷ a R⁷ znamená popřípadě substituovanou fenylovou skupinu, jsou výhodnými případnými substituenty alkylová skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, zvláště methylová skupina, alkoxyskupina s 1 až 6 atomy uhlíku, zvláště methoxyskupina a atom halogenu zvláště chloru.

Jestliže R² znamená skupinu CÍO1OR⁷ a R⁷ znamená popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, je výhodným případným substituentem nitroskupina.

Výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou sloučeniny podle příkladu 1 až 68.

Jakožto výhodnější sloučeniny podle vynálezu se uvádějí:

EtOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂; nPrOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂; /BuOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂; EtOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-COOEt; EtOOCCH₂-(7?)CgI-Aze-Pab-COO-zzBu; PrlC(O)CH₂CH₂CH₂OOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-Z; ChNHC(O)CH₂OOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-Z; (nPr)₂NC(0)CH₂OOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃)₃; EtOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃)₃; EtOOCCH₂-(l?)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH₃)OOCCH₃; MeOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OOCPh; MeOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH;

EtOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-OH;

BnOOCCH₂-(/?)CgI-Aze-Pab-OH;

7/PrOOCCH₂-(Z?)Cgl-Aze-Pab-Z;

nPrOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH;

i PrOOCCH₂-(/?)Cgl- Aze-Pab-OH;

zBuOOCCH₂-(/?)Cgl-Azc-Pab-OH;

(nPr)₂NCOCH₂OOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-OH;

ChNHCOCH₂OOCCH₂-(J?)CgI-Aze-Pab-OH;

EtOOCCH₂-(7?)CgI-Aze-Pab-OAc;

HOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH;

HOOCCH₂-(7?)CgI-Aze-Pab-O-ds-Oleyl;

Cyiíloo|Uyl-OOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-Z;

/BuCH₂OOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-Z;

(2-Me)BnOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-Z;

ChCH₂OOCCH₂-(A)Cgl-Aze-Pab-Z;

ChOOCCH₂-(7?)CgI-Aze-Pab-Z;

• 4	4	• 4	44	44	44
4 4	•	• ·	9	4 4	4	4
•	t ·	•	4	444	4 4	44
•	4444	4 ·	4	4 4	4 44Φ	4	4
4	•	• 4	4 4	4	4	4
·♦··	•	• 4	44	44	44

PhC(Me)₂OOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-Z;

(Me)₂CHC(Me)₂OOCCH₂-(7?)CgI-Aze-Pab-Z;

BnOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe);

ChCH₂OOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe);

(2-Me)BnOOCCH₂-(/?)Cgl-Azc-Pab-COOPh(4-OMe);

EtOOCCH₂-(^)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me);

BnOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me);

BnOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu;

iPrOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂;

EtOOCCH₂-(P)Cgl-Aze-Pab-COO-zBu;

BnOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr;

EtOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh;

EtOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCH₂Ch;

EtOOCCH₂-(K)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OOCPh;

EtOOCCH₂-(J?)CgI-Aze-Pab-COOCH₂OOCPh;

BnOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OAc;

EtOOCCH₂-(jR)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc;

zBuOOCCH₂-(jR)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc;

MeOOC-C(=CHEt)CH₂-OOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-Z;

Men-OOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe); a

EtOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-PabCOOCH₂CCl₃.

Obzvláště výhodnými sloučeninami podle vynálezu isou=

EtOOCCH₂-(J?)Cgl~Aze-Pab-COOCH₂CCl₃;

BnOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOnBu;

nPrOOCCH₂-(jR)Cgl-Aze-Pab-Z;

CyPooktyl-OOCCH₂-(K)CgI-Aze-Pab-Z;

• to	•	··
• to	•	• ·
•	• to	• to
•	to···	• · ·
•	•	• ·
• ••to	•	··

• to toto toto • · to · to • toto to to toto • toto ··· · to ·· · · ♦ ·· ·· ··

- 15 EtOOCCH₂-(/ř)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh; MeOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH;

EtOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH; ziPrOOCCH₂-(j?)CgI-Aze-Pab-OH;

íPrOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH; BnOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH; and

EtOOCCH₂-(/?)Cgl~Aze-Pab-OAc.

Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I spočívá podle vynálezu v tom. že

a) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R² hydroxylovou skupinu, se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce I. kde znamená R² skupinu C(O)OR⁶, kde R⁶ má shora uvedený význam, s alkoxidovou zásadou (například s alkoxidem alkalického kovu), například při teplotě místnosti a v přítomnosti vhodného rozpouštědla (napří k1 ad tetrahydrofuranu),

b) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R² hydroxylovou skupinu, se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce I, kde znamená R² skupinu C(O)OR⁷, kde R⁷ má shora uvedený význam, s hydroxy1aminem nebo s jeho adiční solí s kyselinou, například při teplotě místnosti a v přítomnosti vhodné zásady (například uhličitanu draselného nebo triethy1aminu) a v přítomnosti vhodného organického rozpouštědla (například tetrahydrofuranu nebo ethanolu) ,

c) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce II

H-(R)Cgl-Aze-Pab-R² ( II)

• 0	0	00	• 0	0 0	00
<· 0		• ·	Φ	0 ·	0	0 0	0
•	• 9	•	0	0 0 0	0 0
0	0000	♦ 0	•	0 0	0 000	0		0
•	•	0	0	0 0	0			0
0000	0	»0	00	00		0 0

- 16 kde R² má shora uvedený význam, se sloučeninou obecného vzorce III

RÍO(O)C-CH2-L1 ( III) kde R¹ má shora uvedený význam a L¹ znamená uvolňovanou skupinu, například skupinu ha1ogenidovou jako bromidovou nebo skupinu alkylsulfonátovou například trifluormethylsul fonátovou, například při teplotě místnosti nebo zvýšené β

(například 40 C) v přítomnosti vhodné zásady (například uhličitanu draselného) a ve vhodném organickém rozpouštědle (například v tetrahydrofuranu, v dimethyl formámidu nebo v acetonitrilu),

d) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R¹ atom vodíku a R² hydroxylovou skupinu, nebo skupinu C(0)0R⁷, kde R⁷ má shora uvedený význam, se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce I, kde znamená R¹ alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku nebo alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu a R² hydroxylovou skupinu, nebo skupinu C(O)OR⁷, se vhodnou zásadou (například s alkoxidem alkalického kovu nebo s hydroxidem alkalického kovu) například při teplotě místnosti a v přítomnosti vhodného organického rozpouštědla (například vody nebo methanolu),

e) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R² skupinu 0C(0)R⁶, kde R⁶ má shora uvedený význam, se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce I, kde znamená R² hydroxylovou skupinu, se sloučeninou obecného vzorce IV

R^CÍO)-0-C(0)R6 (IV) nebo se sloučeninou obecného vzorce V

R⁶C(0)Hal (V) «·

• · ·· ·· • · kde znamená Hal vědy atom chloru nebo bromu a R⁶ má shora uvedený význam, například při teplotě místnosti a v přítomnosti vhodné zásady (například triethylaminu, pyridinu nebo

DMAP) a v přítomnosti vhodného organického rozpouštědla (například methylenchloridu nebo tetrahydrofuranu),

f) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R¹ atom vodíku a R² skupinu C(O)OR⁶, kde R⁶ má shora uvedený význam, se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce VI, • · • ··· * · · · • · · • · · 9 • · ··

9 9 9

9 9

99

Ρ⁴0(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R² (VI) kde znamená P¹ skupinu chránící labilní ester kyseliny, například tBu nebo Bn, a R² skupinu C(O)OR⁶, kde R⁶ má shora uvedený význam, se vhodnou kyselinou (například s trifluoroctovou kyselinou) například při teplotě místnosti a v přítomnosti vhodného organického rozpouštědla (například methylenchloridu) ,

g) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R¹ skupinu R³, R³ znamená alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v al kýlovém podílu a R² hydroxy1ovou skupinu nebo skupinu obecného vzorce C(0)0R⁷, kde R⁷ má shora uvedený význam, se nechává reagovat transesterifikační reakcí sloučenina obecného vzorce VII,

R^la0(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R² (VII) kde znamená R^la alkylovou skupinu s 1 až 1O atomy uhlíku nebo alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu a R² má shora uvedený význam nebo znamená alternativní labilní alkylovou skupinu za o sobě známých podmínek .

··	•	··	··
• ·	•	• ·	•
•	• ·	•	•	♦ ··
•	·« ··	• ·	•	• ·
•	•	•	•	• ·
····	•	• ·	• ·

··	♦ ·
• ·	• ·
• ·	··
• ···	• ·
•	• ·
··	• ·

- 18 Sloučeniny obecného vzorce II se mohou získat, odstraněním chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce VIII

Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-R² (VIII) kde R² má shora uvedený význam za o sobě známých podmínek.

Sloučeniny obecného vzorce VI a VII se mohou připravovat, obdobně jako je popsáno pro sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená R¹ R³ a R³ znamená alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku nebo alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkýlovém podílu.

Sloučeniny obecného vzorce VIII se mohou připravovat reakcí sloučenin obecného vzorce IX

H-Pab-R² (IX) kde má R² shora uvedený význam, se sloučeninou Boc-Cgl-Aze-OH, například při teplotě místnosti v přítomnosti vhodného kopulačního systému, například EDC. vhodné zásady například DMAP a vhodného organického rozpouštědla, například dichlormethanu nebo acetonitrilu.

Sloučeniny obecného vzorce VIII, kde znamená R² hydroxylovou skupinu, se mohou přiopravovat reakcí odpovídající sloučeniny obecného vzorce VIII, kde znamená R² skupinu C(O)OR⁷ nebo C(O)0CH(R⁸)0C(O)R⁹, s hydroxy1aminem nebo s jeho adiční solí s kyselinou, například při teplotě místnosti v přítomnosti vhodné zásaday (například uhličitanu draselného nebo triethylaminu) a vhodného organického rozpouštědla (například tetrahydrofuranu nebo ethanolu).

Sloučeniny obecného vzorce VIII, kde znamená R² skupinu

C(O)OR⁷ nebo C(O)0CH(R⁸)OC(0)R⁹, se mohou připravovat reakcí

00	•	00	00	00	• 0
• ·	•	• Φ		0 0	• Φ
•	• ·	• ·	• •0	• ·	00
•	····	• · 0	0 0	0 00·	• ·
•	•	• ·	0 ·	•	• Φ
····	•	00	00	00	00

Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H se sloučeninou obecného vzorce X

L²C(0)0R^2a (X) kde znamená L² uvolňovanou skupinu (například halogen nebo fenolát) a R^2a skupinu R⁷ nebo CHí R⁸)0C( O) R⁹ a R⁷, R⁸ a R⁹ mají shora uvedený význam. například při teplotě místnosti nebo při nižší teplotě než teplotě místnosti, v přítomnosti vhodné zásady (například hydroxidu sodného) a vhodného organického rozpouštědla (například tetrahydrofuranu).

Sloučeniny obecného vzorce VIII, kde znamená R² skupinu OC(O)R⁶ se mohou připravovat také reakcí odpovídající sloučeniny obecného vzorce VIII, kde znamená R² hydroxylovou skupinu, se sloučeninou obecného vzorce IV nebo V, shora definovanou, například při teplotě místnosti, v přítomnosti vhodné zásady (například triethylaminu, pyridinu nebo DMAP) a vhodného organického rozpouštědla (například methylenchloridu nebo tetrahydrofuranu).

Sloučeniny obecného vzorce VIII, kde znamená R² skupinu OC(O)R⁶ se mohou připravovat také reakcí

Boc-( R)Cgl-Aze-Pab-H se sloučeninou obecného vzorce XI

R⁶C(O)-O-O-CÍO)R^& (XI) kde R⁶ má shora uvedený význam, například při teplotě místnosti, v přítomnosti vhodného organického rozpouštědla (například tetrahydrofuranu).

• · • · ··· ··· · · · · ··· · ···· · ··· • ···· · · · · 9 9 999 9 · • · · · · · 9 9 9

999 9 9 9 9 9 9 9 9 9

- 20 Sloučeniny obecného vzorce VIII, kde znamená R² hydroxylovou skupinu, se mohou připravovat, reakcí odpovídající sloučeniny obecného vzorce VIII, kde znamená R² skupinu OC(O)R⁶ a R⁶ má shora uvedený význam, se vhodnou zásadou (například s alkoxidem alkalického kovu) například při teplotě místnosti, v přítomnosti vhodného organického rozpouštědla (například tetrahydrofuranu) .

Sloučeniny obecného vzorce IX jsou z literatury dobře známy a mohou se připravovat obdobnými způsoby, jako je shora popsáno. Například sloučeniny obecného vzorce IX, kde znamená R² skupinu C(0)OR⁷ nebo C( O) 0CH( R⁸ ) OC( O) R⁹ a R⁷, R⁸ a R⁹ mají shora uvedený význam, se mohou připravovat reakcí H-Pab-H nebo jeho chráněného derivátu se sloučeninou obecného vzorce X, shora definovanou, například při teplotě místnosti nebo při nižší teplotě než teplotě místnosti, v přítomnosti vhodné zásady (například hydroxidu sodného) a vhodného organického rozpouštědla (například tetrahydrofuranu).

Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H se může připravovat reakcí H-Pab-H nebo jeho chráněného derivátu se sloučeninou Boc-Cgl-Aze-OH, například způsobem shora popsaným pro přípravu sloučeniny obecného vzorce VITI.

Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H se může také připravovat odstraněním chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce XII

Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-P³ (XII) kde znamená P² chránící skupinu ortogonální k Boc za podmínek v oboru o sobě dobře známých.

Sloučeniny obecného vzorce III, IV, V, X, XI a XII jsou buď obchodn dostupné, nebo jsou z literatury dobře známy, nebo jsou připravite1né o sobě známými způsoby (například jak • ·

- 21 shora popsáno).

Sloučeniny podle vynálezu se mohou izolovat z reakčnich směsí o sobě známými způsoby.

Pro pracovníky v oboru je důležité, že se při shora popsaných způsobech funkční skupiny meziproduktů nemusí chránit chránícími skupinami.

Funkčn í skupiny, které je žádoucí chránit, jsou skupina hydroxy1ová, aminoskupina, amidinoskupina a skupina karboxylové kyseliny.

Jakožto vhodné chránící skupiny pro hydroxylovou skupiny se uvádějí skupina trialkylsilylová a diarylsilylová (například terč.-butyldimethylsilylová, terč.

-butyldi fenylsilylová nebo trimethylsilylová) a skupina tetrahydropyranylová.

Jakožto vhodné chránící skupiny pro skupinu karboxylové kyseliny se uvádějí skupina alkylová s 1 až 6 atomy uhlíku nebo skupina benzylesterová. Jakožto vhodné chránící skupiny pro aminoskupinu a amidinoskupinu se uvádějí skupina terč.-butyloxykarbonylová nebo benzyloxykarbonylová. Dusíky amidinoskupiny mohou mít jednu nebo dvě chránící skupiny.

Chránící skupiny se mohou odstraňovat o sobě známými způsoby, které jsou dále příkladně popsány.

Používání chránících skupin je zevrubně popsáno v publikaci Protéctive Groups in Organ ic Chemistry“, J W F McOmie, Plenům Press, 1973 a Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání, T W Greene & P G M Wutz, Wiley-Interscience, 1991.

Sloučeniny podle vynálezu jsou užitečné, protože metabolizují v lidském těle na sloučeniny, které mají farmakologickou účinnost, Proto se označují jako farmaceutika a zvláště j ako prodrogy.

9·· ·· ·· · · «· • · · ··· ···· • · · 9 9 999 · · 99 ···· · 9 · · · · ··« * φ • · ···· · · · ♦··· · ·· ·· ·· ··

- 22 Zvláště jakkoliv jsou sloučeniny podle vynálezu jako takové inaktivní na thrombin, metabolizují v těle na mocné inhibitory thrombinu, jak například dokládají následující testy.

Výrazem, že sloučeniny podle vynálezu jako takové jsou inaktivní na thrombin“ se zde míní, že vykazují hodnotu IC50TT, stanovenou níže popsaným testem A, větší než 1 uM.

Očekává se proto, že sloučeniny podle vynálezu budou užitečné za podmínek, kdy je žádoucí inhibice thrombinu.

Sloučeniny podle vynálezu jsou proto indikovány pro terapeutické a/nebo profylaktické ošetření thrombozy a hyperkoagulace v krvi a v tkáních zvířat včetně lidí.

Thromboembolická onemocnění, kteráse připomínají, zahrnují aktivovanou odolnost proteinu C, jako faktor V-mutace (faktor V Leiden) a mají vlastní nebo získanou deficienci v antithrombinu III, proteinu C, proteinu S, heparinového kofaktoru TT. Jiné stavy, o kterých je známo, že jsou spojeny s hyperkoagulační schopností a thromboembolickými nemocemi, zahrnují cirkulující antiphospholipidové protilátky ( Lupus antikoagulant) homocysteinemi i, heparinem navozenou thrombocytopeni i a defekty v fibrinolýze. Sloučeniny podle vynálezu jsou proto vhodné pro terapeutické a/nebo profylaktické ošetřování těchto stavů.

Sloučeniny podle vynálezu jsou dále indikovány pro ošetřování stavů, kdy se projevuje nežádoucí nadbytek thrombinu bez znaků hyperkoagulace, například pro neurodegenerativní nemoce, jako je Alzheimerova nemoc.

Jako zvláštění případy, které přicházejí v úvahu, se uvádějí terapeutické a/nebo profylaktické ošetření thrombózy cév a pulmonárního embolismu, arteriální thrombózy (například

- 23 infarktu myokardu, nestabilní angíny, mrtvice na bázi thrombózy a periferální arteriální thrombóza) a systémický embolismus zpravidla z atria v průběhu arteriální fibrilace nebo z 1evé komory po transtěnovém myokardiálním infarktu.

Kromě toho se očekává, že sloučeniny podle vynálezu budou užitečné v profylaxi reokluze (to je thrombózy) po trombolýze, perkutanní trans-luminální angioplastii (PTA) a po operaci k zavedení srdečního bypasu. Prevence rethrombózy po mikrochirurgii a po cévní chirurgii je obecná.

Jakožto další indikace se uvádí terapeutické a/nebo profylaktické ošetření roztroušené intravaskulární koagulace způsobené bakteriemi, mnohočetným trauma, intoxikací nabo jakýmkoliv jiným mechanismem. Antikoagulační ošetření v případech, kdy krev přichází do styku s cizím povrchem v těle, například s vaskulárním štěpem, vaskkulárním stentem, s vaskulárním kathetrem, s mechanickými a s biologickými protézovými ventily nebo s jakýmkoliv jiným lékařských zařízením; a antikoagulační ošetření v případech, kdy krev přichází do styku s mechanickými předměty vně těla, například v průběhu kardiovaskulární chirurgie za použití zařízení pro srdce a plíce a při hemodia1 ýze.

Kromě působení na koagulační proces je známo, že thrombin aktivuje velký počet buněk (například neutrofily, fibroblasty, endotheliální buňky a buňky hladkého svalstva. Proto mohou být sloučeniny podle vynálezu užitečné také pro terapeutické a/nebo profylakt ické ošetřen í idiopatického syndormu, di stresového resp iračn í ho syndromu dospělých, pulmonární fibrózy po ošetření radiací a septicemie, zánětlivé odezvy, jakémkoliv omezení edem, akutní chemoterapií, septického šoku, která zahrnuje bez záměru na nebo chronickou atherosklerozu napříkklad koronárn í arter iální onemocnění, mozkové arteriální onemocněn í, peri ferální arteriální onemocnění, reperfuzn í • ·

- 24 poškození a restenózu po perkut.anní trans-luminální angioplastii (PTA).

Sloučeniny podle vynálezu, které inhibují trypsin a/nebo thrombin mohou být také užitečné při ošetřování pankreatitidy.

Vynález se také týká způsobu ošetřování stavů, které vyžadují inhibici thrombinu, přičemž se podává terapeuittioky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I, shora definované jeho její farmaceuticky vhodná sůl, osobám, které takovými stavy trpí nebo jsou k nim náchylné.

Sloučeniny podle vynálezu se zpravidla podávají orálně, lícně, rektálně, dermálně, nasálně, tracheálně, bronchiálně, jakýmkoliv parenterálním způsobem nebo inhalačně ve formě farmaceutických prostředků, které obsahují prodrogu jako takovou ve formě zásady nebo ve formě adi ční soli s farmaceuticky vhodnou anorganickou nebo organickou kyselinou ve farmaceuticky vhodné dávkovači formě. V zásislosti na poruše, ošetřované osobě a cestě podání se prostředky mohou podávat v různých dávkách.

Sloučeniny podle vynálezu se také mohou kombinovat a/nebo společnně podávat s jakoukoliv antithrombotickou účinnou látkou s různým mechanismem působení, jako jsou proti destičkám působící acetylsalicylová kyselina, ticlopidin. clopidogrel, thromboxanový receptor a/nebo inhibitory synthetázy fibrinogenové receptorové antagonisty, prostacyklinová mimetika a fosfodiesterázové inhibitory a antagonisty ADP receptoru ( P2T) .

Sloučeniny podle vynálezu se dále mohou kombinovat a/nebo společnně podávat s throbolytiky, jako jsou například tkáňový plasmigenový aktivátor (přírodní nebo rekombinantni), streptokináza, urokináza, prourokináza, ani solováný treptokinázový plasminogenový aktivátorový komplex (ASPAC) a zvířecí salivár- 25 • · · ·· ·· · * · · • · · · · · · · · · • · φ · · φφφ φφφφ φ φφφφ φ φ φ φ φ φ φφφ φ φ φ φ φφφφ · · · • ΦΦΦ φ ·Φ ·· ♦· · · ní žlázové plasminogenové aktivátory při ošetřování thrombotických nemocí a zvláště infarktu myokardu.

Vynález se také týká farmaceutických prostředků obsahujících sloučeninu obecného vzorce I, shora definovanou nebo její farmaceuticky vhodnou sul ve směsi s farmaceuticky vhodnými pomocnými činidly, ředidly nebo nosiči.

Vhodnými denními dávkami sloučeniny podle vynálezu při terapeutickém ošetřování lidí je přibližně 0,001 až 10O mg/kg tělesné hmotnosti při perorálním podání a 0,001 až 50 mg/kg tělesné hmotnosti při parenterálním podání

Sloučeniny podle vynálezu mají přednost v tom, že mají zlepšené farmakodynamické vlastnosti, jak shora uvedeno, jak při orálním tak při perenterálním podání ve srovnání se sloučeninou obecného vzorce

R^a0(0)C-CHs-(R)Cgl-ftze-Pab-H kde R^a má shora definovaný význam a zvláště sloučeniny, kde znamená R^a atom vodíku.

Sloučeniny podle vynálezu jsou neaktivní na thrombin, trypsin a na jiné serinové proteázy. Sloučeniny podle vynálezu zůstávají inaktivní v gastrointestinálním traktu a předcházejí možným komplikacím známým při orálním podání antikoagulantů, která jsou jako taková aktivní, jako jsou krvácení a netrávení v důsledku inhibice trypsinu.

Kromě toho místní krvácemí, spojené s parenterálním a po parenterálním podání aktivního inhibitoru thrombinu se může předcházet použitím sloučeniny podle vynálezu.

Sloučeniny podle vynálezu jsou také výhodné tím, že jsou ·· φ φφ ·· φφ φφ • φ φ φφφ · · φ · • · φ φ φ ··· φφφφ • φφφφ · · φ φ · · φφφ · φ • Φ Φ Φ Φ Φ 9 φ ·

ΦΦΦΦ Φ Φ» ΦΦ φφ «Φ

- 26 účinnější, měně toxické, déle působící se širší aktivitou, vykazují méně vedlejších účinků, jsou ochotněji absorbovány a mají další výhodnější vlastnosti než sloučeniny známé ze stavu techniky.

Biologické testy

Test A

Stanovení doby srážení thrombinu ( TT)

Lidský thrombin (T 6769, Sigma Chem Co, konečná koncentrace 1,4 NIH jednotek/ml) v pufrovém roztoku, hodnota pH 7,4, 1OO ul, a roztok inhibitoru, 1OO ul , se inkubují po dobu jedné minuty. Shromážděná normální citrátovaná lidská plasma, 100 Ul, se pak přidá a měří se doba koagulace v automatickém zařízení (KC 10, Amelung).

Doba koagulace v sekundách se vynese proti koncentraci inhibitoru a TC50TT se stanoví interpolací.

IC50TT je koncentrace inhibitoru, která zdojnásobuje koagulaci thrombinu pro lidskou plasmu.

Test B

Stěnovaní doby thrombinu v plasmě ex vivo

Inhibice thrombinu po oráoním nebo parenterálním podání sloučeniny podle vynálezu se zkouší u krysy při vědomí, která jeden nebo dva dny před zkouškou se vybaví katetherem pro odebírání vzorků krve z krční tepny. Ve dni zkoušky se podá sloučenina, ropzpuštěná v systému ethanol · Solutol™ : voda (5:5=90) a odebírají se vzorky krve v určitých intervalech do plastových zkumavek obsahujících 1 díl roztoku citrátu sodného

44	9	4 4	44	44	99
• ·	9	4 9	4	4 9	9 9
•	9 ·	• 4	444	4 4	• 4
9	4444	4 4 4	4 4 4	44 4	9 9
9	4	4 ·	4 4	4	4 4
9999	♦	• ·	• 4	99	4 4

(0,13 mol/1) a 9 dílů krve. Zkumavky se odstředí k získání destiček prosté plasmy. Plasmy se používá ke stanovení doby thrombinu dále popsaným způsobem.

Citrátovaná krysí plasma, 100 ul, se zředí roztokem solanky, 0,9%, ÍOO ul,a koagulace plasmy se nastartuje přidáním lidského thrombinu (T 6769, Sigma Chem Co, Sp. st.a.1 v pufrovém roztoku, hodnota pH 7,4, ÍOO ul. Měří se doba koagulace v automatickém zařízení (KC 10, Amelung, Německo).

Koncentrace aktivního inhibitoru thrombinu H0(O)C-CH2ÍR)Cgl-Aze-Pab-H (mezinárodní zveřejněná přihláška vynálezu číslo W0 94/29336) v krysí plasmě se stanovuje použitím standardní křivky vztahu doby ve shromážděné citrátové krysí plasmě ke známé koncentraci shora uvedeného aktivního thrombinového inhibitoru rozpuštěného v solance.

Na základě stanovené plasmové koncentrace inhibitoru aktivního thrombinu H0(0)C-CHa(R)Cgl-Aze-Pab-H (za předpokladu, že prodloužení doby koagulace je způsobeno shora uvedenou sloučeninou) v případě krysy, plocha pod křivkou po orálním a/nebo parenterálηím podání prodrogy se vypočte (AUCpd) za použití trapezoidálního pravidla a extrapolačních hodnot do nekonečna .

Biologická dostupnost aktivního thrombinového inhibitoru

H0(0)C-CH2ÍR)Cgl-Aze-Pab-H po orálním a/nebo parenterálním podání se vypočte podle vzorce:

Γ(AUCpd/dávka)/(AUCaktivní,iv/dávka] x 100 kde AUCaktivní,iv znamená AUC, získanou po intravenozním podání H0(0)C-CH2ÍR)Cgl-Aze-Pab-H bdělé kryse, jak shora popsáno.

·· · • · · • · · * ···· · • · ··♦· « • · ···· ·· *· • · · • *··· • · · * • · · * ···· ·* ·· * * ·· • * ·· • ··· ·· » · · »» ··

- 28 Test C

Stěnovaní doby thrombinu v moči ex vivo

Množství aktivního thrombinového inhibotoru HO(O)C-CH2 (R)Cgl-Aze-Pab-H, které se vylučuje močí po orálním a/nebo parenterálním podání sloučeniny podle vynálezu ropzpuštěné v systému ethanol:Solutol™:voda (5:5:90) se určuje stanovením doby thrombinu v moči ex vivo (za předpokladu, že prodloužení doby koagulace je způsobeno shora uvedenou sloučeninou).

Bdělé krysy se umístí do metabolických klecí, umožňujících odělené shromažďování moče a výkaů po 24 hodin po orálním podání sloučeniny podle vynálezu. Thrombinová doba se stanovuje ve shromážděné moči dále popsaným způsobem.

Shromážděná normální citrátovaná lidská plasma, 1OO yl, se inkubuje s koncentrovanou krysí močí nebo s jejím solankovým roztokem po dobu jedné minuty. Koagulace plasmy se iniciuje podáním lidského thrombinu (T 6769, Sigma Chem Co) v pufrovém roztoku, hodnota pH 7,4, 1OO yl. Měří se doba koagulace v automatickém zařízení (KC 1O. ftmelung).

Koncentrace aktivního inhibitoru thrombinu HO(O)C-CH2ÍR)Cgl-Aze-Pab-H v krysí moči se stanovuje použitím standardní křivky vztahu doby ve shromážděné normální nitrátové lidské plasmě ke známé koncentraci shora uvedeného aktivního thrombinového inhibitoru rozpuštěného v koncentrované krysí moči (nebo v jejím solankovém roztoku). Násobením celkové produkce krysí moče v průběhu 24 hodin zjištěnou střední koncentrací shora uvedeného aktivního inhibitoru, vyloučeného v moči, se může vypočítat množství vyloučeného aktivního inhibito ru (AMOUNTpd).

Biologická dostupnost aktivního inhibitoru thrombinu

00	•	• 0	00	00	00
• ·	0	• ·	•	0 0	0	0
•	• ·	•	•	000	0 ·		··
•	····	• ·	•	• 0	0 000	0	0
•	•	•	•	• 0	0	•	0
• 000	•	• 0	0 0	00		00

HOÍO)C-CHzíR)Cgl-Aze-Pab-H po orálním a/nebo parenterální» podání prodrogy se vypočte podle následujícího vzorce:

[(AMOUNTpd/dávka)/íAMOUNTaktivní,1v/dávka] x 1OO kde AMOUNTaktivnί ,iv znamená množství vyloučené močí po intravenozním podání HOÍO)C-CH2ÍR)Cgl-Aze-Pab-H bdělé kryse, jak shora popsáno.

Test D

Stěnovaní HOÍO)C-CH2ÍR)Cgl-Aze-Pab-H v moči způsobem LC-MS

Množství aktivního thrombinového inhibotoru H0(O)C-CH2~ (R)Cgl-Aze-Pab-H. které se vylučuje močí po orálním a/nebo parenterální m podání sloučeniny podle vynálezu, rozpuštěné v systému ethanol:Solutol™:voda (5:5:90) se určuje níže popsanou analýzou LC-MS.

Studie na zvířeti se provádí stejně, jako je popsáno při o testu C. Vzorky moče se shromáždí a zmrazí při teplotě -20 C před analýzou.

Ve vzorcích moče se stanovuje obsah HOÍ O) C-CH2 ( R) Cgl Aze-Pab-H tímto způsobem:

Roztálé vzorky moče se promísí a popřípadě se převedou do odstředivky. Pevná fáze v extrakční zkumavce (Analytichem Bond Elut. No. 1210-2059) se aktivuje 1,0 ml methanolu a kondicionuje se 1,0 ml systému acetonitri1:voda (50:50) a přidá se 1 ml 0,1% kyseliny mravenčí. Přidá se 50 ql pracovního vnitřního standardu (20 umol/1) do každé extrakční zkumavky. Pro močové standardy se přidá 50 yl standardního roztoku. Do každé zkumavky se vnese 200 url vzorku nebo pro močového standardy slepá moč a protlačí se působením gravitace nebo mírného vakua.

• 0	•	• 0	• 0	00	00
• 0	•	• »	0	0 0	• 0
•	• 0	• 0	• 0·	0 0	00
0	0000	0 0 0	0 0	• 000	• 0
•	•	• 0	0 0	0	0 0
····	•	• Φ	00	00	00

Zbylá moč se promyje 1,0 ml oclanu amonného (2 mmol/1) před eluováním 1,0 ml systému acetoni tri 1:octan amonný (2 mmol/1) (35:65). Shromážděný eluát se převede do autovzorkovací fioly. Vstřikuje se 30 ul extraktu na LC sloupec (Hypersil BDS-C18; 3 um; 75 mm x 4,O mm vnitřní průměr; Hewlett-Packard No. 7992603354), jako elučního činidla se používá amoniumacetátového pufru (1,3 mmol/1) se 40 % acetonitrilu a 0,1 % kyseliny mrqvenčí při 0,75 ml/min. Výtok se rozdělí tak, že 30 yl/ min se zavádí do iontového zdroje elektronů v hmotovém spektrometru P-E Sciex API-3. H0(0)C-CH₂(R)Cgl-Aze-Pab-H a

H0(0)C-CH₂(R)Cgl-Pro-Pab-H (vnitřní standard) mjí obě retenční doby blízké 1,5 minut. Jejich molekulární ionty (ÍM+H)⁺) se monitorují při m/z 430,2 a 444,2 při jednotkovém hmotovém rozlišení. Močové standardy o dvou koncentracích, jeden při mezi kvantifikace, se použijí pro cejchování na základě poměru pí kové plochy H0(0)C-CH₂(R)Cgl-Aze-Pab-H se zřetelem k vnitřnímu standardu. Posuzuje se linearita metody v oboru 0,050 až 20 u.mol/1. Koeficient variace je 1 až 2 % při 1 až 20 umol/1 a 7 % při 0,5 umol/1. Mez kvantifikace je 0,050 umol/1.

Násobením celkové produkce krysí moče v průběhu 24 hodin naměřenou koncentrací HO(O)C-CH₂(R)Cgl-Aze-Pab-H v moči se může vypočítat množství vyloučeného aktivního inhibitoru (AMOUNTpd). Biologická dostupnost aktivního inhibitoru thrombinu H0(0)C-CH₂(R)Cgl-Aze-Pab-H se vypočte způsobem podle testu C.

Vynález blíže objasňují, nijak však neomezují následující příklady praktického provedení, přičemž jsou díly a procenta míněny hmotnostně. pokud není uvedeno jinak a jednotlivé zkratky a symboly mají shora uvedený význam.

Všeobecné experimentální postupy

Hmotová spektra se zaznamenávalí na trojitém čtyřpólovém

• to	•	• ·	··	··	··
• ·	•	• to	to	•	•	•	•
•	• to	• ·	• toto	•	to		toto
•	• •toto	• · ·	• ·	•	···	•	•
•	•	• ·	• ·		•	•	•
···♦	•	♦ «	··		♦ to		··

hmotovém spektrometru Finnigan MAT TSQ 700 opatřeném elektrospray interface.

Měření NMR a ¹³C NMR se provádějí na spektrometrech

BRUKER ACP 300 a Varian IJNITYS plus 400 a 500, pracujících na frekvencích *H 300,13, 399,96 a 499,82 MHz a ¹³C na frekvencích 75,46, 100,58 a 125,69 MHz. Chemické posuny jsou vyjádřeny v jednotkách delta.

Příprava výchozích materiálů

Způsoby popsanými v mezinárodní přihlášce vynálezu WO 94/29336 se připraví Boc-( R)Cgl-Aze-Pab-Η, Boc-(R)Cgl-ftze-Pab x HCI, H-(R)Aze-Pab-Z, H-(R)Aze-Pab-Z x HCI, Bn-00CCH₂-(R)Cg1 -AzePab-Z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-Z, Boc-(R)Cgl-Aze-OH a Pab-Z x HCI.

Příklad 1

EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH = CH₂ (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH = CH₂

Do roztoku Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (6,1 g, 13 mmol) v THF (125 ml) a 2M NaOH (70 ml, 140 mmol) při teplotě 0 C se přikape al1ylchlorformát (1,7 g, 14 mmol). Po 1-hodinovém míchání

Q při teplotě O C se reakční směs zkoncentruje, přidá se voda (100 ml) a výsledná vodná fáze se extrahuje methylenchloridem (3x100 ml). Spojené organické fáze se zkoncentrují a získá se 6,4 g surového produktu, který se čistí bleskovou chromatografií s elučním systémem EtOAcTHF^:Et₂N (68:29^3). Zkoncentrováním se získá 5,8 g (81 % teorie) sloučeniny Boc-(R)Cgl-AzePab-COOCH₂CH = CH₂ v podobě bílé pevné látky.

Ή NMR (500 MHz, CDC1₃): ó 8,19 (bt, IH), 7,78 (d, 2H), 7,26 (d, 2H), 6^2 -5,92 (m, IH), 5,32 (d, J=17 Hz, IH), 5,18 (d, J=10 Hz, IH), 5,06 (d, J-7 Hz, IH), 4,82 (bs, IH), 4,61 (d, J=6 Hz, 2H), 4,58-4,48 (m, IH), 4,38-4,27 (m, 2H), 4,14-4,03 (m, IH), 3,77-3,68 (m, IH), 2,60-0,90 (m, 24H).

·*	9	99	99	99	99
9 9	9	9 9	9	9 9	9	9
•	9 9	9	9	999	9 9	99
•	9999	9 9	9	9 9 9	999	9	9
9	9	9	9	9 9	9	9	9
9999	9	99	99	99	99

13C NMR (125 MHz, CDC1₃) karbonylové a amidinové signály:

delta 172,70, 170,74, 168,02, 164,54, 155,98.

(i i) H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂CH = CH₂ x 2 TFA

Do roztoku Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂CH = CH₂ (2,03 g, 3,65 mmol ze stupně (i) ) v methylenchloridu (15 ml) při teplotě O C se přidá TFA (15 ml). Reakční směs se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti. Zkoncentrováním se získá 2,8 g sloučeniny H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH = CH₂ x 2 TFA v podobě bílé pevné 1átky.

Ή NMR (500 MHz, MeOH (d4)): δ 7,80 (d, 2H), 7,57 (d, 2H), 6,02 (m, IH), 5,45 (d, J=17 Hz, IH), 5,33 (d, J = 10 Hz, IH), 5,91-4,80 (m, 3H), 4,56 (s, 2H), 4,38 (bq, J=8 Hz, IH), 3,71 (d, J=7 Hz, IH), 2,76-2,60 (m, IH), 2,35-2,20 (m, IH), 1,9-1,0 (m, 11H).

(iii) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH = CH₂

Směs H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂CH = CH₂ x 2 TFA (649 mg, 0,95 mmol ze stupně (i i)), uhličitan draselný (656 mg, 4,8 mmol), voda (0,1 ml) a THF (1O ml) se míchá 2 hodiny při teplotě 40 c

C s následným přidáním ethylbromacetátu (190 mg, 1,14 mmol) v THF (1 ml). Po míchání 4 hodiny při teplotě 40 C a 14 hodin při teplotě místnosti se reakční směs zfiltruje, zkoncentruje a vyčistí bleskovou chromatografií s elučním systémem EtOAc:THF:Et₃N (68:29=3), čímž se získá 244 mg (47 % teorie) sloučeniny EtOOCCHs-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂CH = CH₂ v podobě bílé pevné látky.

Ή NMR (400 MHz, CDC1₃): δ 8,46 (bt, IH), 7,81 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 6,08-5,94 (m, IH), 5,35 (d, J= 18 Hz, IH), 5,23 (d, J= 11 Hz, IH), 4,93 (dd, J=6 a 9 Hz, IH), 4,66 (d, 2H), 4,62-4,38 (AB _část . ABXspektra), 4,16-4,04) (m, 4 H), 3,20 (d, 2H), 2,86 (d, IH), 2,64-2,45 (m, 2H), 2,0-1,0 (m 17H).

··	♦	··	··	··	··
• ·	•	• ·	•	•	•	•	•
•	• ·	• ·	···	•	•		··
•		• · ·	• ·	•	···	•	•
♦	•	• ·	• ·		•	•	•
····	•	··	• ·				··

¹³C NMR (100 MHz, CDCI3) karbonylové a anidinové signály: delta 175,33, 172,24, 170,72, 168,19, 164,35.

Příklad 2 nPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH = CH₂

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH = CH₂ x 2 TFA (503 mg, 0,704 mmol: příklad 1 (li)) az n-propylbromoacetátu (160 mg, 0,88 mmol), v množství 277 mg (68 % teorie) v podobě bílé pevné 1átky.

‘H-NMR (400 MHz, CDCi₃): δ 8,48 (bt, 1H), 7,83 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 6,76 (h , 1H), 6,02 (m, 1H), 5,37 (dd, 1H), 5,24 (dd, 1H), 4,94 (t, 1H), 4,67 (dd, 2H), 4.49 (AB _ část ABX-spektra, 2H), 4,12 (m, 2H), 3,98 (t, 2H), 3.24 (AB-system, 2H), 2,87 (d, 1H), 2,52 (m, 2H), 1,99 (bd, 2H), 1,80-1,50 (m, 7H), 1,61 (q, 2H), 1,30-1,10 (m, 2H), 1,00 (qd, 2H), 0,90 (t, 3H).

¹³C NMR (100 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály:

delta 175,4, 172,3, 170,7, 167,9, 164,5.

Př í k1ad 3 tBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH =CH₂

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH = CH₂ x 2 TFA (285 mg, 0,42 mmol; příklad 1 (i i)) a z t-butylbromoacetátu (96 mg, 0,50 mmol), v množství 93 mg (39 % teorie) v podobě bílé pevné látky.

ΦΦ ♦ ·* ΦΦ ♦ · · · · φ «« · φ φ φφφ • ΦΦΦΦ Φ · · Φ Φ Φ

Φ Φ Φ Φ Φ Φ

ΦΦΦΦ Φ ΦΦ ΦΦ

ΦΦ ΦΦ

Φ Φ Φ Φ

Φ Φ ΦΦ

Φ·Φ · Φ

Φ Φ Φ

ΦΦ ΦΦ

- 34 Ή NMR (500 MHz, CDC1₃): ό 8,50 (bt, 1Η), 7,81 (d, 2Η), 7,36 (d, 2Η), 6,07-5/7 (m, 1H), 5,36 (d, J=16 Hz, 1H), 5,22 (d, J=10 Hz, 1H), 4,93 (dd, J=9 a. . 6 Hz, 1H), 4,76 (d, J=6 Hz, 2H), 4,57-4,46 (m, 2H), 4,18-4,04 (m, 2H), 3,19-3,08 (AB-spektrum, J_AB =20 Hz, 2H), 2,86 (d, J=8 Hz, 1H), 2,72-2,53 (m, 2H), 2,0-0,9 (m, 23H).

¹³C NMR ( 1OO MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 175,28, 171,53, 170,76, 167,81, 164,1.

Příklad 4

EtOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-COOEt (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1( i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (600 mg, 1,3 mmol) a z ethylchlorformátu (150 mg, 1,4 mmol), v množství 240 mg (34 % teorie) v podobě bílé látky.

Ή-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 9,37 (bs, 1H), 8,16 (bs, 1H), 7,72 (d, 2H), 7,18 (d, 2H), 5,17 (d, 1H), 4,73 (t, 1H), 4/7 (dd, 1H), 4,27 (m, 2H), 4,06 (q, 2H), 3,66 (t, 1H), 2,48 (m, 1H), 2,37 (m, 1H), 1,4-1,8 (m, 7H), 1,22 (s, 9H), 1,3-0,8 (m, 7H).

13C NMR (75 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 172,6, 170,7, 167,9, 164,8, 156,0.

(i i) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt x 2 HC1

Do roztoku Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt (240 mg, 0,44 mmol ze stupně (i)) v EtOAc (20 ml) se zavádí 5 minut chlorovodík při c O teplotě O C. Reakční směs se míchá 1 hodinu při teplotě O C, čímž se získá 225 mg (1OO % teorie) produktu v podobě bílé 1átky.

Ή-NMR (300 MHz, D₂0): δ 7,85 (d, 2H), 7,61 (d, 2H), 4,98 (dd, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,44 (p, 5H), 3,90 (d, 1H), 2,73 (m, 1H), 2,37 (m, 1H), 2,0-1,65 (m, 9H), 1,39 (t, 3H), 1,4-1,1 (m, 7H), 0/8 (m, 1H).

• 9 · ··♦· ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · · • · ··· · · • · · · · · ·· · · · • · · · · <*·· • ·· ·· ·♦ ··

- 35 ¹³C NMR (75 Mřte, D^O) karbonylové a aiaidinové signály:

delta 172,7, 169,4, 166,8, 154,3.

( i i i ) EtOOCCH2-(R)Cg1 -Ase-Pab-COOEt

Uvedená sloučenina se připlaví způsobem podle příkladu 1 (iii) s H-(R)Cgl-Ase-Pab-COOEt x 2 HC1 (160 mg, 0,31 mmol, ze stupně (i i)) a 2 ethylbrobacetátu (52,5 mg, 0,31 mmol. Výtěžek je 100 mg (61 % teorie) v podobě světle žlutého prášku. Ή-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 8_;48 ( bt, 1H), 7,81 (d, 2H), 7,38 (d, 2H), 4_;51 (AB . část ABX-jspekt^2H), 4,21 (q, 2H), 4_f 15-4/)5 (m, 4H), 3,21 (AB-spe letním, 2H), 2,86 (d, 1H), 2,68 (m, 1H), 2,53 (m, 1H), 1,96 (bd, 2H), 1,90-1,70 (m, 12H), 1,35 (t, 3H), 1,22 (t, 6H), 1,300.95 (m, 2H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály:

delta 175,5, 172,2,. 170,7, 167,6, 164,9.

Příklad 5

Et00CCH₂-(R)Cg1 -ftze-Pab-C00-nPr (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (6,0 g, 13 mmol) a n-propylchlorformátu (1,57 ml, 14 mmol). Výtěžek je 5, 4 g (76 % teorie).

‘H-NMR (400 MHz, CDC1₃): δ 8,25 (bt, 1H), 7,82 (d, 2H), 7,31 (d, 2H), 5,09 (bd, 1H), 4,87 (dd, 1H), 4,58 (dd, 1H), 4,39 (dd, 2H), 4,14 (q, 1H), 4,10 (t, 2H), 3,79 (t, 1H), 2,54 (dm, 2H), 2,21 (s, 1H), 1,87-1,55 (m, 8H), 1,33 (s, 9H), 1,45-1,0 (m, 4H), 0,99 (t, 3H).

¹³C NMR (ÍOO MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály:

delta 172,7, 170,6, 167,8, 165,0, 155,9.

• · • « φφφφ

- 36 φφφ • »··· φ φ · φφ φφ

Φ	•	Φ
•	Φ	Φ ··
Φ	•	• Φ
Φ	Φ	• Φ
'·	•	φ Φ

φφ φφ • φ φ · φ φ ·· φ φφφ φ · φ φ · • Φ ·* (ii) Η-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr χ 2 TFA

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (ii) za použití 2,1 g (3,7 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr (ze stupně (1 i)) ve výtěžku 3,7 g.

Ή-NMR (400 MHz, MeOH-d₄): δ 7,77 (d, 2H), 7,60 (d, IH), 4,86 (dd, IH), 4,56 (AB ěást ABX-spectrum, 2H), 4,33 (m, 4H), 3,72 (d, IH), 3,30 (m, IH), 2,68 (m, IH), 2,28 (m, IH), 1,9-1,7 (m, 9H), 1,4-

1.1 (m, 6H), 1,02 (t, 3H).

¹³C NMR (100 MHz, MeOH-d.4) karbonylové a amidinové signály: delta 172,7, 169,3, 168,0, 161,4.

(iii) EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr x 2 TFA (472 g, 0,69 mmol ze stupně (ii)) a z ethylbromacetátu (138 mg, 0,83 mmol), v množství 0,22 mg (58 % teorie) v podobě bílé pevné látky.

Ή-NMR (400 MHz, CDC1₃): δ 8,46 (bt, IH), 7,82 (d, 2H), 7,32 (d, 2H), 4,92 (dd, IH), 4,49 (AB _óásL ABX-spectrum, 2H), 4,10 (m, 6H), 3,23 (AB-spettrum, 2H), 2,80 (dm, 2H), 1,98 (bd, 2H),L74 (q, 2H), 1,63 (dd, 2H), 1,52 (m, 1), 1,21 (t, 3H), 1,20-1,10 (m, 2H), 0,98 (t, 3H).

¹³C NMR (100 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 175,3, 172,2, 170,7, 167,6, 164,8.

Př í k1 ad 6

MeOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-COO-nPr

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr x 2 TFA (365 mg, 0,53 mmol;

příklad 5 (ii)) az methylbromacetátu (98 mg, 0,64 mmol), v množství 114 mg (41 % teorie) v podobě bílé pevné látky.

··	•	··	··	··	··
« ·	•	•	•	•	• ·	*	•
•	• ·	•	•	···	• ·	··
•	····	• ·	•	• ·	• ···	•	•
•	•	• ·	• ·	•	•	•
··««	•	··	• ·	··	··

‘H-NMR (500 MHz, CDC1₃): ό 8,44 (bt, IH), 7,82 (d, 2H), 7,32 ( (d, 2H), 7,04 (b ., IH), 4,92 (dd, IH), 4,49 (AB část ABX spektra), 4,12 (m, 2H), 4,10 (t, 2H), 3,63 (s, 3H), 3,24 (s, 2H), 2,87 (d, IH), 2^65 (m, IH), 2,52 (m, IH), 2,01 (b , IH), 1,96 (bd, 2H), 1,75 (q, 4H), 1,63 (bdd, IH), 1,53 (m, IH), 1,3-1,1 (m, 5H), 0,99 (t, 3H).

¹³C NMR (100 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 175,3, 172,5, 170,7, 167,7, 165,0.

Příklad 7

Et-00CCH₂-(R) Cgl-Aze-Pab-C00CH₂CH₂0Me (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH₂OMe

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (iii) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (6,0 g, 13 mmol) a z 2-netboxyethylchlorformátu (1,94 g, 14 mmol) v množství 3,9 g (52 % teorie).

‘H-NMR (400 MHz, CDC1₃): δ 8,24 (bt, IH), 7,83 (d, 2H), 7,31 (d, 2H), 5_}08 (bd, IH), 4,87 (dd, IH), 4,58 (dd, IH), 4,39 (dd, 2H), 4,30 (t, 2H),

4,15 (m, IH), 3,79 (bt, IH), 3,68 (t, 2H), 3,40 (s, 3H), 2,65-2,45 (m, 2H), 2,20 (b. ., IH), 1,9-1,55 (m, 6H), 1,34 (s, 9H), 1,3-0,95 (m, 6H).

¹³C NMR (1OO MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály:

delta 172,7, 170,7, 167,8, 164,6, 155,9.

(ii) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH₂OMe x 2 TFA

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (ii) z 1,71 g Boc-(R) Cgl - Aze-Pab-COOCH₂CH₂OMe (ze stupně (i) v množství 1,89 g (88 % teorie).

‘H-NMR (400 MHz, MeOH-d4): Ó 7,77 (d, 2H), 7,59 (d, 2H), 4,85 (dd, IH), 4_f56 (d, 2H), 4,49 (m, 2H), 4,37 (m, IH), 4,28 (m, IH), 3,70 (m, 3H), 3,37 (s, 3H), 2,68 (m, IH), 2,28 (m, IH), 1,9-1,7 (m, 7H), 1,4-1,1 (m, 6H).

··	•	··	··	··	··
• ·	•	•	•	•	• ·	• ·
•	• ·	• ·	···	• ·	··
•	····	• ·	•	• ·	• ···	• *
•	•	•	•	• ·	•	• ·
····	•	··	··	• 9	··

¹³C NMR (100 MHz, MeOH-d4) karbonylové a affiidinové signály: delta 172,7, 169,3, 168,0, 154,6.

( i i i) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂CH₂0Me

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂CH₂0Me x 2 TFA (487 mg, 0,69 mmol (ii)) a z ethylbromacetátu (138 mg, 0,83 mmol) za získání surového produktu, který se vyčistí bleskovou chromatografií za použití systému THF:methylenchlorid (3:1) jako elučního činidla. Výtěžek 0,13 mg (34 % teorie) v podobě bílé pevné látky ‘H-NMR (400 MHz, CDC1₃): δ 8/6 (bt, 1H), 7,83 (d, 2H), 732 (d, 2H), 7.21 (b. 1H), 4.92 (dd, 1H), 4.49 (AB část ABX spektra ,

2H), 4/0 (t, 2H), 4/2 (q, 2H), 4/7 (q, 2H), 3,68 (t, 1H), 3/0 (s, 3H), 3/4 (s, 2H), 2/2 (m, 1H), 2/2 (m, 1H), 2/7 (b , 1H), 1/7 (bd, 1H), 1/-1,5 (m, 5H), 1,3-1/ (m, 6H), 1/5-0,95 (m, 2H).

¹³C NMR (1OO MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 175,3, 172,2, 170,7, 167,8, 164,6.

Příklad 8

MeOOCCH₂-(R)CgI -Aze-Pab-C00CH₂CH₂0Me

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (iii) z H- ( R) Cgl - Aze-Pab-C00CH₂CH₂0Me x 2 TFA (490 mg, 0,7 mmol; příklad 7( i i) ) a z methylbromacetátu (128 mg, 0,84 mmol), čímž se získá surový produkt, který se čistí bleskovou chromatografií za použití systému THF:methylenchlorid (3:1) jako elučního činidla. Výtěžek je 155 mg (41 % teorie) v podobě bílé pevné látky.

‘H-NMR (400 MHz, CDC1₃): δ 8,44 (t, 1H), 7,83 (d, 2H), 7/1 (d, 2H),

4/2 (dd, 1H), 4/9 (AB _eásL ABX spektra 2H), 4/0 (t, 2H),

4/3 (m, 2H), 3/8 (t, 2H), 3,63 (s, 3H), 3,39 (s, 3H), 3,25 (s, 2H), 2/7 (d, 1H), 2/2 (m, 1H), 2,52 (m, 1H), 1,96 (bd, 1H), 1/-1,5 (m, 6H),

1,3-1,1 (m, 5H), 1/0 (q, 2H).

• · ··· ··· ···· • · · · ···· · ··· • ···· · · · · · · ··· · · • · · · · · · · · ···· · ·· ·· ·· ··

- 39 ⁴³C NMR (100 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 175,2, 172,6, 170,7, 167,8, 164,5.

Příklad 9

EtOOCCIfe - ( R)Cgl-Aze-Pab-C00-nBu (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-C00-nBu

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 1 (i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (1.01 g, 2,1 mmol) a z n-butylchlorfornátu (0,32 g, 2,4 mmol). Po 1,5-hodinovém míchání při teplotě místnosti se reakčni směs zkoncentruje a extrahuje se třemi dávkami methylenchloridu. Spojená organická fáze se promyje vodou, vysuší síranem sodným a zkoncentruje se, čímž se získá 1,0 g (83 % teorie) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu v podobě bílé pevné látky.

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 9,81-9,31 (bs, 1H), 8,36-8,20 (m, 1H), 7_}35 (d, 2H), 7,84 (d, 2H), 6,78-6,43 (bs, 1H), 5,05-4,82 (m, 2H), 4,69-

4,15 (m, 3H), 4,15-4,08 (m, 3H), 3,86-3,70 (m, 1H), 2,68-2,42 (m, 2H), 1,92-0,88 (m, 25H).

13c NMR (125 MHz, CDC1₃) karbonylové a amidinové s i gnály: delta 172,5, 170,7, 167,9, 164,9, 156,0.

FAB-MS: (m+1)=572 (m/z) (i i) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu x 2 HC1

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 4( i i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu (2,5 g, 4,4 mmol; ze stupně (i)) v množství 2,4 g ( 1OO % teorie) v podobě bílé pevné látky ^lH-NMR (300 MHz, MeOH-d4): δ 7,78-7,60 (m, 2H), 4,66 -4,49 (m, 2H), 0,98 (t, 2H), 4,49-4.35 (m, 3H), 4,35-4,22 (m, 1H), 3,75 (d, 1H), l_f92-1,67 (m, 8H), 1,56-1,07 (m, 8H). Signál jednoho z protonů je překryt signálem CD3OH.

• ·

- 40 • ··· • · · · ¹³C NMR (1OO MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 172,7, 169,3, 167,9, 154,7.

MS: (m+l)=472 (m/z) ( i i i) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu l(ii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu x 2 HC1 (400 mg, 0,74 mmol) a z ethylbromacetátu (147 mg, 0,88 mmol). Produkt se čistí bleskovou chromatografií za použití gradientu EtOH O, 1 = > 12,8 % jako elučního činidla, čímž se získá 290 mg (70 % teorie) v podobě bílé pevné látky.

Ή-NMR (300MHz, CDC1₃): δ 9,70-9_?36 (bs, 1H), 8,47 (t, 1H), 7,81 (d,

2H), 7,32 (d, 2H), 7,07-6,73 (bs, 1H), 4,97-4,87 (dd, 1H), 4_;62-4_?35 (m, 2H), 4,20-3,98 (m, 6H), 3,27-3,12 (m, 2H), 2,84 (s, 1H), 2,70-2,40 (m, 2H), 2,03-0,85 (m, 22H) ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 175,3, 172,3, 170,8, 167,9, 165,0.

FAB-MS: (m+l)=558 (m/z)

Příklad 10

Pr1C ( O)CH₂ CH₂ CH₂OOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-Z (i) Pr1C(O)CH₂CH₂CH₂OH

Směs gama-butyrolaktonu (4,0 g, 46,5 mmol) a pyrrolidinu (6,6 g, 92,8 mmol) se míchá 2,5 hodiny při teplotě místnosti. Produkt se zkoncentruje ve vakuu, čímž se získá 14,5 g (100 % teorie) produktu v podobě žlutého oleje *H NMR (300 MHz, MeOH-d4)): delta 3,58 (t,2H), 3,50 (t,2H), 3,40 (t,2H), 2,42 (t,2H), 2,06-1,75 (m,6H)

- 41 • · · ·· ·· ·· ·· ··· ··· ···· • · · · · ··· · · ·· • ···· · · · · · · ···· · • · ···· · « · ··· · · ·· ·· ·· *· ( i i) Pr1C(O)CH2CH₂CH2OOCCH2Br

Do směsi PrlCí0)CH2CH2CH2OH (7,2 g, 45,8 mmol ze stupně (il) a DMAP (5,6 g, 45,8 mmol) v methylenchloridu se při teplotě O c přikape bromacetylbromid (4,0 ml, 45,8 mmol). Po

I, 5-hodinovém míchání při teplotě místnosti se přidá další dávka bromacetylbromidu (1,0 ml, 11,4 mmol) a DMAP (1,4 g,

II, 4 mmol) a reakční směs se udržuje na teplotě zpětného toku po dobu 1,5 hodiny. Přidá se voda a methylechlorid se třikrát extrahuje. Organická fáze se vysuší síranem sodným a po zkoncentrování se získá 10,3 g (81 % teorie) produktu v podobě žlutého oleje.

H-NMR (400 MHz, CDC1_S): ó 4₍ 15 (t, 2H), 3,75 (s, 2H), 3,40-3,31 (m, 4H), 2,30 (t, 2H), 1,98-1,83 (m, 4H), 1,81 -1,73 (m, 2H) (iii) Pr1C(O)CH2CH2CH2OOCCH2-<R)Cgl-Aze-PabíZ)

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu l(ii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (6 g, 10,4 mmol) a Pr1C( O)CHzCHzCHzOOCCIfeBr (3,5 g, 12,4 mmol ze stupně (ii)). Surový produkt se čistí bleskovou chromatografií se systémem heptan:EtOAc:isopropanol (1=2:2) jako elučním činidlem, čímž se získá 4,2 g produktu, který se dále čistí preparativní RPLC se systémem 44 % acetonitrilu v O, 1 M NH^OAc jako elučním činidlem, čímž se získá 2,64 g (36 % teorie) produktu v podobě bílé pevné látky.

‘H-NMR (500 MHz, CDC1₃): δ 9,80- 9,22 (b s, IH), 8,36 (t, IH), 7,96 -7,58 (m, 3H), 7,45 (d, 2H), 7,37 -7,22 (m, 5H), 5,20 (s, 2H), 4,95 4,88 (dd, IH), 4,72 -4,29 (m, 2H), 4,15 -4,04 (m, 2H), 4,04 -3,88 (m, 2H), 3,40 (t, 2H), 3,34 (t, 2H), 3,28 -3,17 (m, 2H), 2,85 (d, IH), 2,67 -2,48 (m, IH), 2,23 (t, 2H), 2,14 -0,93 (m, 18H).

¹³C NMR (125 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály:

delta 175,3, 172,4, 170,9, 170,4, 168,2, 164,6.

FAB-MS: (m+l)=703 (m/z).

• * · • · ·

- 42 Příklad 11

ChNHCÍ O)CH2OOCCH2- ( R)Cgl-Aze-Pab( Z) (i) ChNHCÍO)CH₂OH o

Při teplotě 1OO C se 2,5-hodiny míchá směs cyklohexylaminu (9,9 a, 99,8 mmol) a 2,5-dioxo-1,4-dioxanu (3,0 a, 25,9 mmol). Produkt se 2koncentruje, čímš se získá 8,1 g (1OO % teorie) produktu v podobě hnědého oleje.

⁴H-NMR (500 MHz, MeOH-d4): delta 3,92 (s,2H), 3,75-3,65 (m,lH),

1,90-1,58 (m,5H), 1,43-1,07 (m,5H). Signál dvou protonů je překryt signálem CD3OH.

13C NMR (125 MHz, MeOH-d4) karbonylové a amidinové signály delta 174,0, 62,5, 33,7, 26,5, 26,1, 26,0. Signál jednoho z atomů uhlíku je překryt signálem CD3OD.

( i i) ChNHCÍ O)CH2OOCCH₂Br

Do směsi ChNHCÍO)CH2OH (8,0 g, 50,9 mmol ze stupně (i)) a DMAP (6,2 g, 50,9 mmol) v methylenchloridu (80 ml) se při tepc lotě O C přikape bromacetylbromid (4,0 ml, 45,8 mmol). Po

I, 5-hodinovém míchání při teplotě místnosti se přidá další dávka bromacetylbromidu (1,0 ml, 11,4 mmol) a DMAP (1,4 g,

II, 4 mmol) a reakčni směs se udržuje na teplotě zpětného toku po dobu 1,5 hodiny. Přidá se voda a vodná fáze se extrahuje třemi dávkami methylenchloridu. Organická fáze se promyje vodou vysuší se síranem sodným a po zkoncentrování se získá 10,3 g (73 % teorie) produktu v podobě hnědého oleje.

Ή NMR (400 MHz, CDC1₃): δ 6,12-6,00 (bs, IH), 4,62 (s, 2H), 3,90 (s, 2H), 3,84-3,76 (m, IH), 1,95-1,.86 (m, 2H), 1,75-1,65 (m, 2H), 1,65 1,56 (m, IH), 1,43-1,29 (m, 2H), 1,24-1,10 (m, 3H).

( i i i) ChNHCÍ0)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Uvedená sloučenina se připraví způsobem podle příkladu

- 43 • * ···· l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (6 g, 10,4 mmol)

ChNHC(0)CH₂OOCCH₂Br (3,5 g,

12,4 mmol, ze stupně (ii))

Surový produkt se čistí bleskovou chromatografi í se systémem heptan:EtOAc:isopropanol (5:2:2) jako elučním činidlem a po zkoncentrování se podrobí preprativní RPLC za použití systému 50 % acetonitrilu v O, 1M NH4OAC jako elučního činidla. Po zkoncentování a vysušení zmrazením se získá 2,6 g (36 % teorie) produktu v podobě bílé pevné látky.

Ή-NMR (500 MHz, CDC1₃): δ 9,78-9,25 (bs, IH ), 7,90 (t, IH), 7_?78 (d, 2H), 7_;44 (d, 2H), 7_?38-7_?24 (m, 5H), 6,66 (t, IH), 5,20 (s, 2H), 4,90-4,83 (dd, IH), 4,60-4,45 (m, 2H), 4,18-3,93 (m, 4H), 3,73-3,62 (m, IH), (d, IH), 3,23, 3,44 (AB, 2H), 2,87, 2,65-2,08 (m, 3H), 1,98-0,93 (m, 22H) ¹³C NMR (125 MHz, CDO3) karbonylové a amidinové signály: delta 175,1, 171,7 168,8, 166,1, 164,4.

FAB-MS: (m+l)=703 (m/z).

Příklad 12 (nPr)₂NC(O)CH₂00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂00CC(CH3)3 (i)(nPr)₂NC(O)CH₂0H

Směs 2,5 dioxo-1,4-dioxanu (2,02 g, 17,4 mmol a di-n-propylaminu (5 ml, 36,5 mmol) se udržuje 1 hodinu na teplotě 50

O o

C a 66 hodin na teplotě 90 C. Přidá se toluen, který se následně odstraní ve vakuu s nadbytkem di-n-propy1aminu. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií s použitím elučního systému 1O % methanolu v methylechloridu, čímž se získá 4,18 g (66 % teorie) žádané sloučeniny.

*H NMR (300 MHz, CDCI3)^: delta 4,1 (d,2H), 3,65 (t,lH), 3,25 (t,lH), 3,25-3,35 (m,2H), 2,90-3,0 (m, 2H) , 1,45-1,6 (m, 4H) , 08-0,95 (m,6H).

- 44 • · ♦ ·· · · ·· · · • · · · · · · · · ♦ • · · · · 999 9 999

9999 99 9 9 99 999 9· • · · · · · · · ♦ ···· 9 99 99 9999 (i i)(nPr)2NC(O)CH2OOCCH2~Br

Při teplotě místnosti se 1,5 hodiny míchá směs (nPr)2NC(01CH20H (0,743 g, 4,7 mmol ze stupně (i)), DCC (0,951 g, 4,6 mmol) a bromoctové kyseliny (0,704 g, 5,1 mmol) v methylenchloridu (15 ml). Sraženina se oddělí filtrací a rozpouštědlo se odstraní z filtrátu ve vakuu. Děti lácí zbytku v koloně se získá 0,66 g (50 % teorie) žádaného produktu.

*Η NMR (300 MHz, CDCI3I· delta 4,8 (s,2H), 4,0 (s,2H), 3,2-3,3 (m,2H), 3,05 - 3,15 (m, 2H) , 1,5-1,7 (m, 4H) , 0,8-1,0 (dt,6H).

(iii) Pivaloyloxymethyl-4-nitrofenylkarboxylát

Směs pívalátu stříbra (7,5 g, 25 mmol) a jodmethyl-4-nitrofenylkarboxylátu (Alexander a kol. J.Med. Chem 31, str. 318, 1988) (7,99 g, 25 mmol) se refluxuje v benzenu (50 ml) po dobu 2 hodin. Benzen se odstraní ve vakuu a zbytek se rozpustí v toluenu. Filtrací přes hyflo a vyčištěním bleskovou chromátografií s použitím toluenu jako elučního činidla se získá 4,00 g (54 % teorie) uvedené sloučeniny.

*H NMR (300 MHz, CDCI3) ^: delta 8,25 (d,2H), 7,40 (d,2H), 5,85 (s,2H), 1,2 (s,2H) ¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 176,77, 155,06 (iv) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCHzOOCCÍCH3)3

Při teplotě místnosti se roztok pivaloyloxymethyl-

4-nitrofenylkarboxylátu (1,18 g, 4 mmol ze stupně (iii)) v methylenchloridu (20 ml), přidá k roztoku Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (1,88 g, 4 mmol) a triethylaminu (0,66 ml, 4,75 mmol) v methylenchloridu (20 ml). Po 1 hodině se methylenchlorid nahradí EtOAc a směs se čistí bleskovou chromatografi i při použití EtOAc jako elučního činidla, čímž se získá 1,27 g (50 % teorie) sloučeniny Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂00CC(CH3)3.

- 45 ·· · ·· *· ·· ·· • · · ··· ···· • · · · · ·♦· · · ·· • ···· · · · · · · ··· · · • · · · · · · · · ···· ♦ ·· ·· ·»

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃): δ 9,5 (bs, 1 H), 8.25 (t, 1 H), 7.8 (d, 2 H), 7,3 (d, 2 H), 7,0 (bs, 1 H), 5,0-4,8 (m, 2 H), 4,65-4,5 (m, 1 H), 4,5-4.3 (m, 2 H), 4,2-4,05 (m, 1 H), 3,75 (t, 1 H), 2,7-2,4 (m, 2 H), 1,9 -1,45 (m, 5 H), 1,45 - 0,8 (m, 24 H) (v) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC( CH3)3

Sloučenina Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH3)3 (327 mg,

0,52 mmol z předchozího stupně (iv)) se rozpustí ve směsi methylenchloridu (5 ml) a TFA (1,2 ml). Po 2 hodinách se reakční směs zkoncentruie ve vakuu, přidá se acetonitrii a rozpouštědlo se opět odstraní ve vakuu, čímž se získá surový produkt H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH3)3, kterého se použije bez čištění v následujícím stupni.

(v i) (nPr)2 NC(O)CH₂00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH3)3

Zbytek ze stupně (v) se smísí s (nPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂Br (150 mg, 0,53 mmol, ze stupně (i i)) as uhličitanem draselným (480 mg, 3,5 mmol) v THF (5 ml) a směs se udržuje 3 hodiny na teplotě 40 C. Reakční směs se zfiltruje a zkoncentruje na surový produkt, který se vyčistí preparát ivní RPLC, čímž se získá 78 mg (21 % teorie) sloučeniny (nPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂-(R)Cg1Aze-Pab-C00CH₂00CC(CH3)3· ‘H NMR (300 MHz, CDCI₃): δ 9,3-9/ (bs, 1 H), 8.5 (m, 1 H), 7,95-

8,15 (bs, 1 H), 7,85-7,95 (d, 2 H), 7,2-7,3 (d, 2 H), 5,8 (s, 2 H), 4/-4,9 (dd, 1 H), 4,5-4,7 (m, 3 H), 4,0-4,4 (m, 3 H), 2,8-3,4 (m, 5 H), 2,2-2,7 (m, 3 H), 1,75-1,3 (m, 9 H), 1,3-1,0 (m, 14 H), 1,0-0,7 (m, 7 H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 177,24, 175,30, 171,85, 170,79, 165,82, 163,14.

0 ·· 00 00 00

000 000 0000

0 0 0 0 000 0 0 00 • 0000 0 0 0 0 0 0 000 0 0

0 0 0 0 0 000 0000 0 0· 00 00 00

- 46 Příklad 13

ELOOCCH2-(R)Cg1 -Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃13

Tato sloučenina se připravuje podobně jako podle příkladu 12(vi) ze surového Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCHzOOCCÍCH₃)3 (0,41 g, 0,65 mmol, viz příklad 12(iv)) za použití acetonitrilu (10 ml) jakožto rozpouštědla. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se rozdělí mezi EtOAc a vodu. Vodná fáze se extrauje třikrát EtOAc, organické fáze se spojí, vysuší se (síranem sodným) a rozpouštědlo se odstraní ve vakuu. Zbytek se podrobí bleskové chromatografií za použití systému methylenchlorid/ methanol jako elučního činidla. Vymražovacím sušením z ledové kyseliny octové se získá 84 mg (21 % teorie) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH3)3 Ή NMR (300 MHz, CDCI3): δ 9,9 (bs, 1 H), 8,5 (t, 1 H), 7,35 (d, 2 H), 5,85 (s, 2 H), 5,90 (dd, 2 H), 4,6-4,35 (m, 2 H), 4,15-4,0 (m, 4),

3,2 (s, 2 H), 2,85 (d, 1 H), 2,7-2,45 (m, 2), 2,0-1,9 (m, 2 H), 1,8-1,45 (m, 5 H), 1,3-0,9 (m, 18 H).

13C NMR (75 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 177,23, 175,48, 172,29, 170,80, 168,85, 163,14.

Příklad 14

EtOOCCH2-(R)Cg1-Aze-Pab-COOCHí CH3)OOCCH₃ (i) Boc-(R)Cg1 -Aze-Pab-COOCHÍ CH₃)OOCCH₃

Při teplotě místnosti se 16 bodin míchá roztok Boc-(R)Cgl-Aze-Pab (6,38 g 13,5 mmol), 1-acetoxyethyl-4-nitrofenyl karboxylátu (Alexander a kol. J.Med. Chem. 31, str. 318, 1988) (3,05 g, 12 mmol) a triethy1ami nu (1,95 ml, 14 mmol) v methylenchloridu s následným přidáním EtOAc. Výsledný roztok

··	•	··	99	9 9	99
• ·	•	• 9	•	• 9	9	9
•	• ·	• ·	999	9 9	• 9
	9999	9 9 9	• 9 9	999	•	9
•	•	• ·	• 9	9	9	9
	•	99	9 9	99	99

se mírně ^koncentruje a promyje se vodným roztokem uhličitanu sodného (10%), 2koncentruje se na surový produkt, který se čistí bleskovou chromatografií za použití EtOAc jako elučního činidla, čímž se získá 5,59 g (77 % teorie) sloučeniny Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCHÍ CH₃)OOCCH3

Ή NMR (300 MHz, CDC13): δ 9,5 (bs, 1 H), 8,25 (t, 1 H), 7,85 (d, 2 H), 7,35 (d, 2 H), 6,95 (q, 1 H), 6,7 (bs, 1 H), 5,0-4,85 (m, 2 H), 4,65-. 4,5 (m, 1 H), 4,5-4,25 (m, 2 H), 4,2-4,05 (m, 1 H)3,75 (t, 1 H), 2,65-

2,45 (m, 2 H)2,05 (s, 3 H), 1,9-1,45 (m, 11 H), 1,45-0,8 (m, 12 H).

¹³C NMR (75 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály'· delta 172,61, 170,80, 169,54, 168,91, 162,50, 156,02.

( i i) H- ( R)Cg1 -Aze-Pab-COOCHÍ CH3)OOCCH3

Surová sloučenina se připraví způsobem popsaným v příkladu 12(v) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCHÍCH3)OOCCH3 (2,21 g, 3,68 mmol, ze stupně (i)).

( i i i) EtOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCHÍCH₃)OOCCH3

Surová sloučenina H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCHÍCH3)OOCCH3 ze stupně (ii) se rozpustí v methy1enchloridu (150 ml). Směs se promyje 1O% roztokem uhličitanu sodného a organická fáze se vysuší síranem draselným a zfiltruje se. Do výsledného roztoku se přidá uhličitan draselný (756 mg, 5,5 mmol) a ethyl(O-trifluormethansulfonyl)glykolát (790 mg, 3,3 mmol) v methylenchloridu (5 ml). Reakční směs se míchá 5 až 1O minut při teplotě místnosti a zkoncentruje se ve vakuu. Zbytek se rozpustí v EtOAc a výsledná směs se zfiltruje přes celit. Filtrát se podrobí bleskové chromatografií s EtOAc jako elučním činidlem následované HPLC, čímž se získá 475 mg (22 % teorie) sloučeniny EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCHÍCH₃)OOCCH3- 48 -

··	9	··	·*	99	99
• 9	9	•	•	9	9 9	9	9
•	• ·	•	•	999	9 9	99
«	····	• ·	•	9 9	9 999	•	9
t	•	• ·	9 9	9	•	9
9999	•	··	99	9 9	··

H NMR (300 MHz, CDC13): δ 9,5 (bs, 1 Η), 8,3 (t, 1 Η), 7,7 (d, 2 Η),

7,2 (d, 2 Η), 6,85 (q, 1 Η), 4,8 (t, 1 Η), 4,45-4,25 (m, 2 Η), 4,1-3,85 (m, 4 Η), 3,1 (s, 2 Η), 2,75 (s, 1 H), 2,5-2,3 (τη, 2 Η),1,95 (s, 3 Η), 1,9-1,8 (m, 1 Η), 1,7-1,25 (τη, 8 Η), 1,25-1,75 (τη, 8 Η).

¹³C NMR (75,5 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály: delta 175,26, 172,34, 170,81, 169,49, 168,80, 162,43.

Příklad 15

MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh

Do roztoku Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (1,0 g, 2,1 mmol) a dinatriumhydrogenfosfátu (18,7 g, 105 mmol) v THF (45 ml) se c přikape při teplotě 20 C běbem 45 minut dibenzoylperoxid (556 mg, 2,3 mmol), rozpuštěný v THF (1O ml). Po 24-hodinovém mí© cháni při teplotě 20 C se reakční směs zkoncentruje a výsledný surový produkt se podrobí preparát ivní RPLC. Získá se 124 mg (10 % teorie) sloučeniny Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh v podobě bílé pevné látky.

'H-NMR (500 MHz, CDC1₃): δ 8.26 (m, 1H), 8,09 (m, 2H), 7,72 (m, 2H), 7,59 (m, 1H), 7/8 (m, 2H), 7/6 (d, 2H), 5/3 (s, 2H), 4,87-4,98 (m, 2H), 4,54-4,61 (m, 1H), 4,33-4,47 (m, 2H), 4,13-4,19 (m, 1H), 3/1 (t, 1H), 2,53-2,63 (m, 2H), 1,73-1,86 (m, 3H), 1,66-1/2 (m, 2H), 1/6 (s, 9H), 0,968-1,28 (m, 6H).

¹³C NMR (100 MHz. CDCI3) karbonylové a amidinové signály:

delta 172,7, 170,6, 163,9, 157,0, 155,9.

LC-MS: m/z 592 (M+H+), m/z 614 (M + Na⁺).

(ii) H-ÍR)Cgl-Aze-Pab-OOCPh

Do roztoku Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh (600 mg, 1,01 mmol z předchozího kroku (i) v methylenchloridu (18 ml) se přidá při teplotě 20 C TFA (6 ml). Po 14-hodinovém míchání se reak- 49 -

99	9	99	··	99	99
9 9	9	9 9	•	9 9	9	9
9	9 9	9	•	• •e	9 9	99
9	9999	• ·	•	• · ·	999	9	9
9	9	•	•	• ·	9	9	9
9999	9	··	·♦	9 9	99

ční směs zkoncent.ruje a výsledný surový produkt se rozdělí mezi EtOAc:O,l M NaOH. Fáze se oddělí a organická vrstva se vysuší síranem sodným a odpaří se. Výtěžek: 480 mg (96 % teorie) v podobě bílé pevné látky.

‘H-NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ 8/8 (m, 2H), 7,77 (m, 2H), 7,64 (m, IH), 7,52 (m, 2H), 7,43 (d, 2H), 4/5-4,81 (m, IH), 4,50 (s, 2H), 4/84,34 (m, 2H), 3/2 (d, IH), 2,57-2,68 (m, IH), 2,23-2,33 (m, IH), 1,881,96 (m, IH), 1.73-1 .,84 (m, 2H), 1,59-1,71 (m, 2H), 1,45-1,57 (m, IH), 0,80-1,34 (m, 5H)

LC-MS: m/z 492 (M+H+), m/z 514ÍM + Na*).

(iii) MeOOCCHs-(R)Cg1 -Aze-Pab-OOCPh

Do roztoku H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPb (480 mg, 0,97 mmol z předchozího stupně (i i)), uhličitanu draselného (270 mg, 2 mmol) v acetonitrilu (5 ml) se přidá při teplotě 20 c methyl bromacetát (177 mg, 1,16 mmol). Reakční směs se míchá 14 hodin c pri teplote 20 C. Reakční směs se zfiltruje a ^koncentruje se a výsledný surový produkt se podrobí preparát ivní RPLC, čímž se získá 269 mg (49 % teorie) sloučeniny v podobě bílé pevné látky HeOOCCH₂-<R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh.

‘H-NMR (500 MHz, CDC1₃): δ 8,43 (m, IH, NH), 8,09 (m, 2H), 7,69 (m, 2H), 7,59 (m, IH), 7,47 (m, 2H), 7,34 (m, 2H), 5,27 (s, 2H), 4_y93 (dd, IH), 4,59 (dd, IH), 4,40 (dd, IH), 4/2 (m, 2H), 3,65 (s, 3H), 2,87 (d, IH), 2,72-2,63 (m, IH), 2,55-2/8 (m, IH), 1,96 (m, IH), 1,74 (m, 2H), 1,67 (d, IH), 1,59 (d, IH), 1,56-1,50 (m, IH), 1,29-1,08 (m, 4H), 1,04-0/4 (m, IH) ¹³C NMR (100 MHz, CDCI3) karbonylové a amidinové signály:

delta 175,1, 172,5, 170,6, 164,0, 157,1.

LC-MS: m/z 564 (M+H⁺).

··	•	99	··	• ·	··
• ·	•	9 9	9	• ·	•	9
•	• ·	9	•	999	• ·	99
•	··♦·	9 9	•	• ·	• ·♦·	9	9
•	•	9 ·	• ·	•	9	9
·♦··	9	··	··	·«	99

Příklad 16

Me00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH

Do roztoku MeOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OC(O)Ph (260 mg, 0,46 mmol; příklad 15 (ii)) v THF (4,6 ml) se přidá při teplotě 20 C KOMe (1,6 ml, 0,29 M, 0,46 mmol). Po 15 minutovém míchání se směs zkoncentruje a podrobí se preparát ivní RPLC. Získá se 109 mg (51 % teorie) sloučeniny MeOOCCH₂- ( R)Cgl-Aze-Pab-OH v podobě bílé pevné látky.

Ή-NMR (500 MHz, MeOH-d4): δ 7,59 (d, 2H), 7,34 (d, 2H), 4,83 (s, 2H), 4,82-4,76 (m, 1H), 4,48 (d, 1H), 4,33 (d, 1H), 4,15-4,30 (m,2H), 3,64 (s, 3H), 3,04 (d, 1H), 2,57 (m, 1H), 2,26 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,75 (m, 2H), 1,58-1,70 (m, 2H), 1,53 (m, 1H), 1,31-1/0 (m, 4H), 1.04 (m, 1H)

13_C NMR (1OO MHz, MeOH-d4) karbonylové a amidinové signály: delta 175,9, 174,3, 172,7, 155,2.

LC-MS: m/z 460 (M+H+), m/z 482 (M+Na⁺).

Příklad 17

EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH

Do roztoku EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-C(O)OCH(CH3)OOCCH3 (184 mg, 0,31 mmol, viz příklad 14 (iii)), se přidá hydroxy]aminhydrochlorid (120 mg, 1,72 mmol) a tri ethylamin (0,8 ml,

5,7 mmol) v EtOH (95%, 4,0 ml) a směs se míchá 4 dny při tep- lotě místnosti. Reakční směs se ^koncentruje a výsledný surový produkt se podrobí preparát ivní RPLC. Výsledkem je 85 mg (58 % teorie) sloučeniny EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.

- 51 9

9999 • · · ··♦·

99 • 9 9

9999

9 9 9 99

9 99

9999

99

9 9 9

999

999 99

99

9999

Ή-NMR (300 MHz, CD₃OD): δ 7,6 (d, 2H), 7_?35 (d, 2H), 4,75-4,85 (m,

IH), 4,4-4,55 (m, 2H), 4.0-4,35 (m, 4H), 3,35 (d, 2H), 3,05 (d, IH), 2,5-2,65 (m, IH), 2,2-2,35 (m, IH), 1,9-2,05 (m, IH), 1,4-1,85 (m, 5H), 0,85-1,35 (m, 8H) ¹³C NMR (75,5 MHz, CD3OD) karbonylové a amidinové signály: delta 175,97, 173,91, 172,72, 155,23.

LC-MS:(m+l)= 474 (m/z).

Příklad 18

BnOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-OH

Do roztoku hydoxylaminhydrochloridu (320 mg, 4,59 mmol) a triethylaminu (1,7 ml, 12,24 mmol) v ethanolu se přidá BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (1,O g, 1,52 mmol). Reakční směs se míchá 40 hodin při teplotě místnosti a ^koncentruje se. Surový produkt se čistí preparát ivní RPLC se systémem 50 % acetonitrilu v O,1M NH4OAC jako elučním činidlem, čímž se získá 0,34 g (42% teorie) BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH.

LC-MS:(m+l)= 536 (m/z).

Příklad 19 nPrOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab- Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z x 2 HCI (700 mg, 1,2 mmol) a z n-propylbromáčetátu (268 mg, 1,45 mmol). Výtěžek je 259 mg (35 % teorie).

FAB-MS:(m+1) = 606 (m/z).

Příklad 20 nPrOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-OH ·· ·» • · * · • * ·· • «·« · · • · · ·♦ ··

- 52 Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 18 z nPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (182 mg, 0,3 mmol; příklad 191 a surový produkt, se podrobí preparát ivní RPLC se systémem 40 % acetonitrilu v O, 1M NH^iOAc jako elučním činidlem, čímž se získá 74 mg (51 % teorie) žádané sloučeniny.

·· ·* • · · • ···· • · · ·· • · ·· ····

LC-MS: (m+1)=488( m/z)

Příklad 21 i PrOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-OH

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle pří kladu 18 z iPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (590 mg, 0,7 mmol; příklad 39). Výtěžek je 110 mg (32 % teorie).

LC-MS:(m+1)=488 (m/z)

Příklad 22 tBu00CCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-OH

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 18 z tBu00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (738 mg, 1,2 mmol; příklad 37). Výtěžek je 290 mg (48 % teorie).

LC-MS:(m+1)=502(m/z)

Příklad 23 (nPr)₂NC0CH₂00CCH₂-(R)Cgl-Aze-PabíOH) ( i) HOOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-0-Boc

Při teplotě místnosti se 2 hodiny míchá roztok HOOCCH₂(R)Cgl-Aze-Pab-OH (670 mg, 1,5 mmol; příklad 28), (Boc)₂0 (654

• ·	•	99	··	9 9	··
• ·	•	•	•	•	9 9	9	«
•	• ·	9 9	···	9 *		··
•	• · · ·	9 ♦	•	• · 9	···	>	•
•	•	• ·	9 9	•	•	•
····	9	··	99	··		• ·

mg, 3 mmol) a DMAP (92 mg, 0,75 mmol) v systému THF '· voda (10:1). Reakčni směs se zkoncentruje a vyčistí se preparativní RPLC. Po vysušení zmrazením se získá 112 mg (12 % teorie) sloučeniny HOOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-0-Boc v podobě bílé pevné hmoty.

LC-MS:(m-1)=643 (m/z) (i i) (nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc

Při teplotě místnosti se míchá 4 dny roztok HOOCCH2(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-Boc (100 mg, 0,15 mmol ze stupně (i)), (nPr)2NCOCH2OH (27 mg, 0,17 mmol, viz příklad 12(i)),

EDC (40 mg, 0,21 mmol) a DMAP (10 mg, 0,075 mmol) v acetonitrilu (5 ml). Reakčni směs se zkoncentruje a vyčistí se preparativní RPLC. Po vysušení zmrazením se získá 21 mg (18 % teorie) sloučeniny (nPr)2NCOCH2OOCCH2-( R)Cgl ( Boc)-Aze-Pab-0-Boc

LC-MS:(m~1)=787 (m/z) ( i i i) (nPr)2NCOCH2OOCCH2-(R)Cgl(Boc) -Aze-Pab-OH

Při teplotě místnosti se míchá 5 minut roztok (nPr)2NCOCH2~(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-0-Boc (20 mg, 0,025 mmol) v systému TFA:methylenchlorid (1:1). Reakčni směs se zkoncentruje. Po vysušení zmrazením 2 acetonitrilu a vody se získá 5 mg (34 % teorie) sloučeniny (nPr)2NCOCH200CCH2-(R)Cgl-(Boc)Aze-Pab-OH.

LC-MS:(m+1)=587 (m/z)

Příklad 24

ChNHCOCHa OOCCH2-(R)Cg1 -Aze-Pab-OH

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkla···

- 54 9 · ···· du 18 z ChNHCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (118 mg, 0,17 mmol;

příklad ll(iii)). Výtěžek je 1,8 mg.

LC-MS:(m+1)=585 (m/z)

Příklad 25

MeNHCOCH₂OOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-OH

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 18 z MeNHC0CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (81 mg, 0,12 mmol; příklad 36). Výtěžek je 10 mg, (16 % teorie).

LC-MS:(m+1)=517(m/z)

Příklad 26

Et00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc (i) H-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle pří kladu 27 ve stupních (i), (ii) a (iii) za použití anhydridu kyseliny octové místo anhydridu kyseliny propanoové.

LC-MS:(m + 1)=430( m/z) ( i i)EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) ze H-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc (370 mg, 0,6 mmol) a z ethylbromacetátu (105 mg, 0,63 mmol). Výtěžek je 67 mg (22 % teorie).

LC-MS:(m + 1)=516( m/z)

Příklad 27

EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-0C(O)Et

- 55 ·· · ·· ·· «· >« • · · *·· «··« • · · · · ··· * · ·» * ···· · · · · · · ··· · « • · » · · · · · · ···· · ·· ·· «· ·· (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OH

Do roztoku hydroxylaminhydrochloridu a triethylaminu v EtOH se přidá Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (1,0 g, 1,52 mmol). Reakční směs se míchá 40 hodin při teplotě místnosti a zkoncentruje se. Surový produkt se čistí preparativní RPLC.

LC-MS:(m+1)=488 (m/z) ( i i)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OCÍO)Et

Při teplotě místnosti se míchá 45 minut roztok Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OH (500 mg, 0,91 mmol ze stupně (i)) a anhydrid propanoové kyseliny (3,5 ml) a zkoncentruje se. Surový produkt se Čistí preparativní RPLC se systémem 50 % acetonitrilu v 0, 1M NH4OAC jako elučním činidlem, čímž se získá 266 mg (54 % teorie) sloučeniny Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-0C(O)Et.

I.C-MS : ( m + 1 ) =544 (m/z) (iii) H-(R)Cgl-Aze-Pab-OCÍ0)Et

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 1(i i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-OCÍO)Et (238 mg, 0,44 mmol ze stupně (ii)). Výtěžek je 290 mg (100 % teorie).

LC-MS:(m+1)=444 (m/z) (iv) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OCÍO)Et

Do roztoku H-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCEt (300 mg, 0,45 mmol ze stupně (iii)) a uhličitanu draselného (308 mg, 2,23 mmol)

Q v methylenchloridu (6 ml) se při teplotě O C přikape Et00CCH20S0sCF3 (105 mg, 0,45 mmol, připraveného z triflicaldehydu a ethylglykolátu). Po 1-hodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs promyje vodou, citrónovou kyselinou a vodou, vysuší se síranem sodným a zkoncentruje se. Surový produkt se čistí preparativní RPLC se systémem 45 % acetonitrilu v 0, 1M NH4OAC jako elučním činidlem, čímž se získá 63 mg

··	•	··	··	··		··
• ·	•	• ·	•	• ·	•	•
•	• ·	• ·	···	• ·		··
•	····	• · ·	• <·	• ···	•	•
•	•	• ·	• ·	•	•	•
····	•	··	·♦	··		··

(27 % teorie) sloučeniny EtOOCCH2-(R)Cgl~Aze-Pab-OC(O)Et.

LC-MS:(m + 1)=530 (m/z)

Příklad 28

HOOCCH2-<R)Cg1 -Aze-Pab-OH (i) tBu00CCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-OOCPh

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cg1-Aze-Pab-OOCPh (250 mg, 0,5 mmol; příklad 15 (ii)) a z t-butylbromacetátu (119 mg, 0,6 mmol). Výtěžek je 211 mg (69 % teorie).

LC-MS:(m+1)=606 (m/z) (i i) HOOCCH2-<R)Cg1-Aze-Pab-OOCPh

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(ii) z tBuOOCCH_s-(R)Cg1-Aze-Pab-OOCPh (233 mg, 0,3 mmol, ze stupně (i)). Výtěžek je 65 mg (37 % teorie).

LC-MS:(m+1)=550 (m/z) (iii) HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OH

Při teplotě místnosti se 5 minut míchá roztok HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-OOCPh (60 mg, 0,1 mmol, ze stupně (i i)) a KOMe (0,2M, 0,2 mmol) v THF (1O ml) a methanolu (1,5 ml).

Reakční směs se ^koncentruje a zbaví se vody a methanolu vymrazovacím sušením. Získá se 28 mg (63 % teorie) sloučeniny HOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-0H.

LC-MS:(m+1)=446 (m/z)

Příklad 29

HOOCCH2-íR)Cgl-Aze-Pab-0-cis-oleyl • · ····

- 57 ··· (i) tBuOOCCH₂-(R)Cgl(Boa)-Aze-Pab-Z

Při teplotě místnosti se 24 hodin míchá roztok tBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (1,7 g, 2,8 mmol; příklad 37), (Boc)₂0 (672 mg, 3,08 mmol) a DMAP (68 mg, 0,56 mmol) v THF (30 ml). Při teplotě 5 C se přidá další (Boc)₂ (305 mg, 1,4 mmol). Po dalších 24 hodinách se reakčni směs zkoncentruje a čistí preparátivní RPLC, čímž se získá 587 mg (30 % teorie) s1oučen i ny tBuOOCCH₂-(R)Cg1(Boc)-Aze-Pab-Z.

EC-MS:(m + 1)=720 (m/z) (i i)tBu00CCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-0H

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 18 z tBuOOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-Z (580 mg, 0,8 mmol, ze stupně (i)). Výtěžek je 341 (71 % teorie).

EC-MS:(m +1)=602 (m/z) ( i i i) tBuOOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-cis-oleyl

Roztok tBuOOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-OH (340 mg, 0,56 mmol; ze stupně (ii)), cis-oleylchloridu (170 mg, 0,56 mmol) a triethylaminu (62 mg, 0,61 mmol) v methylencbloridu se míchá 5 minut. Reakčni směs se zkoncentruje a čistí preparát ivní RPLC, čímž se získá 326 mg (67 % teorie) sloučeniny tBuOOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-O-cis-oleyl.

EC-MS:(m+1)=867 (m/z) (iv) H00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-O-cis-oleyl

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(ii) z tBuOOCCH₂-(R)Cgl(Boc)-Aze-Pab-0-cis-oley1u (223 mg, O,25 mmol ze stupně ( i i i)) .

LC-MS:(m+1)=710 (m/z) • ·

- 58 Příklad 30

Cyk1ookty1 -00CCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-Z (i) Cyklooktylbromacetát

V methylenchloridu se rozpustí cyklooktanol (1,3 g, 10 mmol) a DMAP (0,3 g) a přidá se bromacetylchlorid (1 ml, 12 mmol). Po 18-hodinovém míchání se reakční směs promyje vodným roztokem uhličitanu sodného (2M) a HC1 (1M), vysuší se, zkoncentruje se a vyčistí bleskovou chromatografií se systémem petroleumether:methylenchlorid (50:50) jako elučním činidlem, čímž se získá 1,8 g (72 % teorie) cyklooktylbromacetátu.

( i i)Cyklookty1-OOCCH2(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z x 2 HC1 (703 mg, 1,2 mmol) a z cyklooktylbromacetátu (363 mg, 1,46 mmol ze stupně (i)). Výtěžek je 379 mg (46 %).

FAB-MS:(m+1)= 674 (m/z)

Příklad 31 tBuCH200CCH₂-(R>Cgl-Aze-Pab-Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(lii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z x 2 HC1 (2,5 g, 4,3 mmol) a z terč.-butylmethylbromacetátu (1,08 g, 5,2 mmol). Výtěžek je 1,87 g (69 % teorie)

FAB-MS:(m+1)= 634 (m/z)

Příklad 32 (2-Me)BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z • · • · · ·

- 59 (i) Methylbenzylbromacetát

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 30( i ) ze 2-methylbenzylalkoholu (5 g, 41 mmol) a z bromacetylchloridu (12,6 g, 80 mmol). Výtěžek je 8,2 g (82 % teorie).

( i i) ( 2-Me)BnOOCCH₂- ( R)Cg1 -Aze-Pab- Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 1 (iií) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z x 2 HC1 (580 mg, 1 mmol) a ze 2-methylbenzylbromacetátu (290 mg, 1,2 mmol ze stupně (i)). Výtěžek j e 30 mg (4,5 %).

LC-MS:(m+1)=668 (m/z)

Příklad 33

ChCH₂00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Na teplotě zpětného toku se udržuje 4 dny roztok BnOOCCH₂(R)Cgl-Aze-Pab-Z (1,41 g, 1,7 mmol) a cyklohexylmethyl alkoholu (6 ml) v triethylaminu (474 ul) a methylechloridu (3 ml). Reakční směs se zpracuje na surový produkt, který se vyčistí bleskovou chromatografií se systémem metbylenchlorid:methanol (95:5) jako elučním činidlem, čímž se získá 801 mg (71 % teorie) sloučeniny ChCH₂00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z.

FAB-MS:(m+1)= 660 (m/z)

Příklad 34

ChOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab- Z (i) Cyklohexylbromacetát

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 32(i) z cyklohexanolu (lg, 1O mmol) a z bromacetylchlo-

• · ····

- 60 ridu (1 ml, 12 mmol).

(i i) ChOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z x 2 HC1 (2,5 g, 4,32 mmol) a z cyklohexylbromacetátu (1,5 g, 5,2 mmol). Výtěžek 1,7 g (60% teorie).

FAB-MS:(m+1)= 646 (m/z)

Příklad 35

PhC(Me₂00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (i) 2-Fenyl-2-propylbromacetát

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 30( i) z 2-fenyl-2-propanolu (3g, 22 mmol) a z bromacetylchloridu (4,16 g, 26 mmol). Výtěžek je 1,2 g (44 % teorie).

( i i) PhCÍMe₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z x 2 HC1 (1,2 g, 2,2 mmol) a z 2-fenyl-2-propylbromacetátu (640 mg, 2,5 mmol ze stupně (i)) Výtěžek je 1,3 g (86 % teorie).

Ή-NMR (500 MHz; CDC1₃) δ 9,3 (br s, 1H), 8_;35 (t, 1H), 7_?.75 (d, 2H),

7,45 (d, 2H), 7,30-7,05 (m, ÍOH^HH), 5/5 (s, 2H), 4,78 (t, 1H), 4,40-4/0 (AB ABX spektra, 2H), 3,95 (q, 1H), 3,74 (q, 1H),

3,27^3.19 (AB-spektrum, 2H), 2.72 (d, 1H), 2.43 (q, 2H), 1,93 (br d, 1H), 1,75-1,60 (m, OH^ÍOH), 1,54 (d, 1H), 1,49-1,40 (m, 1H), L251,0 (m, 4H), 0,92 (q, 1H) • · « •··· · ·

- 61 Příklad 36

MeNHCOCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab- Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z x 2 HCl (1,0 g, 1,7 mmol) a MeNHC0CH₂00CCH₂Br (440 mg, 2 mmol, připravený obdobně jako podle příkladu 11 (stupně (i), (ii) a (iii) za použití methylaminu místo cyklohexylaminu). Výtěžek je 380 (35 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 635 (m/z)

Příklad 37 tBuOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z x 2 HCl (500 mg, 1,0 mmol) a t-butylbromacetátu (231 mg, 1,2 mmol). Výtěžek 420 mg (69 % teorie).

LC-MS:(m+l)= 620 (m/z)

Příklad 38 (Me)₂CHC(Me)₂00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (787 mg, 1,4 mmol) a z 2,3dimethyl-2-butylbromacetátu (364 mg, 1,63 mmol). Výtěžek je 590 mg (67 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 648 (m/z)

• · 9	• ·		• «	• 9	9 9
• · ·	•	9	•	• 9	9 ·
• · «	•	•	♦ ··	• ·	• ·
• ····	9 9	•	9 9	♦ ···	• 9
• ·	9	•	9 9	•	9 9
·♦·· ·	99		99	• 9	99

Příklad 39 i PrOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab- Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (700 mg, 1,20 mmol) a z isopropylbromacetátu (262 mg, 1,5 mmol). Výtěžek je 225 mg (31 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 606 (m/z)

Příklad 40

BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPb(4-OMe) (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-C00Ph(4-OMe)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 1(i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H a z 4-methoxyfenylchlorformátu.

FAB-MS:(m+1)= 622 (m/z) (ii) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh( 4-OMe) x 2 HCI

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 4(i i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPhí4-OMe) (ze stupně (i)).

( i i i) BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-C00Ph(4-OMe)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00Ph( 4-OMe) x 2 HCI (85 mg, 0,16 mmol, ze stupně ( i i i)) a z benzylbromacetátu (90 mg, 0,2 mmol). Výtěžek je 60 mg (56 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 670 (m/z) ·· · ·· • · · · · * · · · · • ···· « · · • · · · •··· · ·«

··	99	9 ·
•	9 9 9	•
• ··	9 9	• ·
• ·	9 999 9	•
• ·	9 9	•
99	9 9	99

Příklad 41

ChCH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPhí4-0Me)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPhí4-OMe) (554 mg, 0,64 mmol; příklad 40 (ii)) a z cyklohexylmethylbromacetátu (165 mg, 0,7 mmol). Výtěžek je 34 mg (8 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 676 (m/z)

Příklad 42 (2-Me)BnOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-COOPhí 4-OMe)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPhí4-OMe) (522 mg, 1 mmol; příklad 40(i i)) a z 2-ímethyl)benzylbromacetátu (365 mg, 1,5 mmol). Výtěžek je 158 mg (23 % teorie).

LC-MS=(m+l)= 684 (m/z)

Příklad 43

EtOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-COOPhí 4-OMe) (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 1(i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab (1,96 g, 4,56 mmol) a z 4-tolylchlorformátu (850 mg, 4,99 mmol). Výtěžek je 1,39 (55 % teor i e) .

FAB-MS:(m+1)= 606 (m/z) ( i i)H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00Ph(4-Me)

- 64 Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 4( i i ) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPhí4-Me) (388 mg, 0,64 mmol) ze stupně (i). Výtěžek je 293 (91 % teorie).

• Φ φ φφ φφ ♦ ··· φφφ φφφφφφφ • φ φ φ φ φφφ φ φ φφ φ φφφφ φ φ φ φ φ φ ·Φ· ·♦ • φ φφφφφφφ • ΦΦΦ φ φφ φφ φφ **

FAB-MS:(m+1)= 506 (m/z) ( i i i)EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Me) (288 mg, 0,6 mmol) ze stupně (ii) a z ethylbromacetátu (114 mg, 0,7 mmol). Výtěžek je 81 mg (24 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 592 (m/z)

Příklad 44

Bn00CCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-COOPhí 4-Me)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPhí4-Me) (272 mg, 0,54 mmol) z příkladu 43 (ii) a z benzylbromacetátu (147 mg, 0,6 mmol). Výtěžek je 107 mg (31 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 654 (m/z)

Př í k1ad 45

BnOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-C00-nBu

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu x 2 HC1) (400 mg, 0,74 mmol; příklad 9 (ii)) a z benzylbromacetátu (210 mg, 0,88 mmol). Výtěžek je 220 mg (48 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 620 (m/z) • · ····

- 65 Příklad 46 iPrOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH = CH₂

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH = CH₂ x 2 TFA) (456 mg, 0,67 mmol, viz příklad 1 (ii)) a z izopropylbroBiacetátu (145 mg, 0,8 mmol). Výtěžek je 294 mg (79 % teorie).

FAB-MSKm+1)= 556 (m/z)

Příklad 47

EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu (i) Boc-Pab-COO-iBu

Do roztoku Boc-Pab-H (500 mg, 2,0 mmol), připraveného, z Pab-Z a (Boc)₂0 (úpravou Boc-Pab-Z) s následnou hydrogenací v přítomnosti palladia na uhlí a triethylaminu (400 mg, 4,0 mmol) v methy1enchloridu (10 ml) se přidá i-buty1chlorformát o

(270 mg, 2,2 mmol) při teplotě O C. Po 5-hodinovém míchání se přidá voda. Organická fáze se vysuší síranem sodným a po zkoncentrování se získá 530 mg (76 % teorie) sloučeniny Boc-Pab-COO-iBu.

‘H-NMR (500 MHz, CDC1₃) δ 9,5 (bs, 1H), 7,82 (d, 2H), 7,31 (d, 2H),

6,6 (bs, 1H), 5,0 (bs, 1H), 4,33 (bd, 2H), 3,93 (d, 2H), 2,04 (m, 1H),

1,45 (s, 9H), 0,97 (d, 6H) (i i) H-Pab-C00-iBu x 2 HC1

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 4(i i) z Boc-Pab-COO-iBu) (520 mg, 1,5 mmol, ze stupně ( i)) . Výtěžek j e 430 mg (88 % teor i e) .

• 9	•	99	99	99	99
• 9	•	• ·	9	• · ·	9
•	• ·	• 9	999	9 ·	99
•	9999	9 9 9	9 9	• 99 9 9	9
•	9	9 9	9 9	9 ·	•
«···	9	99	99	• 9

(i i i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu

Do roztoku Boc-(R)Cgl-Aze-OH (480 mg, 1,4 mmol), H-PabCOO -i Bu x 2 HC1 (430 mg, 1,3 mmol, ze stupně (ii) a DMAP (650 mg, 5,3 mmol) v acetonitrilu (20 ml) se přidá EDC (270 mg, 1,4 mmol). Po 3-denním míchání při teplotě místnosti se reakční směs zkoncenlruje a rozpustí se ve vodě a EtOAa. Organická fáze se promyje vodným roztokem hydrogenuhliči tanu sodného, vysuší se síranem sodným zkoncentruje se a vyčistí bleskovou chromatografií za použití EtOAc jako elučního činidla, čímž se získá 510 mg (52 % teorie) sloučeniny Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu.

( i v)H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu x 2 HC1

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 4( i i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu) (500 mg, 0,88 mmol, ze stupně ( i i i)) . Výtěžek je 360 mg (87 % teorie).

(v) E100CCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-C00-iBu)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-iBu x 2 HC1) (290 mg, 0,53 mmol ze stupně (iv)) a z etbylbromacetátu (11Ο mg, 0,64 mmol). Výtěžek je 140 mg (47 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 558 (m/z)

Příklad 48

Bn00CCH₂-(R)Cg1-Aze-Pab-COO-nPr

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr x 2 TFA (902 mg, 1,3 mmol; příklad 5( i i)) a z benzylbromacetátu (362 mg, 1,6 mmol). Výtěžek je 199 mg (25 % teorie).

• ·	•	«·	99	99		• 9
• ·	•	• ·	•	• ·	9	•
•	• ·	• t	···	• ·		94
•	····	• · ·	9 »	* 999	9	9
	•	• ·	• ·	•	•	9
···*	•	• 9	··	··		99

Ή-NMR: (400MHz; CDC1₃) δ 8.43 (bs, 1H), 7,78 (d, 2H), 7,38-7,27 (m, 7H), 5,05 (s, 2H), 4,90 (dd, 1H), 4,56-4,39 (AB část ABX _spektra, 2H), 4,12-4,03 (m, 3H), 3,98-3,91 (q, 1H), 3,33-3,22 (AB-spe trum, 2H), 2,85 (d, 1H), 2,65-0,94 (m, 19H)

Př í k1ad 49

EtOOCCH₂- ( R)Cg1 -Aze-Pab-COOCH₂OOCCh (i)EtCOOCH₂OOCCh

Do roztoku tetrabutylamoniumhydrogensulfátu (15,6 g, 45,6 mmol) a cyklohexankarboxylové kyseliny (5,85 g, 46 mmol) v methylenchloridu se přidá NaOH (9,1 ml, 1OM, 68 mmol) při teplotě O C. Po 5-minutovém míchání se reakční směs zfilt.ruje, promyje se methylenchloridem, rozpustí se v toluenu zkoncentruje se a rozpustí v THF, čímž se získá [Bu₄Nl⁺[OOCCh].EtSCOOCHzCl (4 g, 25,9 mmol (Folkmann a Lund, J. Synthesis, str. 1159, 1990), který se přidá do roztoku THF [Bu₄N]⁺[OOCCh] při teplotě místnosti. Po 12-hodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs zkoncentruje a vyčistí se bleskovou chromatografií, čímž se získá 2,57 g (40 % teorie) sloučeniny EtCOOCH₂OOCCh.

¹H-NMR (400 MHz, CDCI3) diagnostické vrcholy delta 5,80 (s,2H, O-CH₂-O), 2,85 (q,2H,CH₂-S).

( i i) ClCOOCH₂OOCCh

Při teplotě O C se do sloučeniny EtCOOCH₂OOCCb (2,9 g, 11,8 mmol ze stupně (i)) přikape SO₂C1₂ (3,18 g, 243,6 mmol). Po 30-minutovém míchání se reakční směs zkoncentruje, čímž se získá 1,82 (70 % teorie) sloučeniny ClCOOCHzOOCCh.

iH-NMR (500 MHz, CDCI3) diagnostické vrcholy delta 5,82 (s,2H,0-CH₂-0).

• to · ·· toto • · · ··· · · · · • to · ·· >·> · to ·· ♦ to·*· ·· · · · * ··· · · • · ··«· ·«· «•«to ♦ ·· ·· ·« ·♦ ( i i i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu li i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (750 mg, 1,59 mmol) a z ClCOOCH₂OOCCh (460 mg, 2,1 mmol, ze stupně (ii)) . Surový produkt se vyčistí preparát ivní RPLC. Výtěžek je 355 mg (9 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 656 (m/z) (iv) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh x 2 TFA

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(ii) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂00CCh (ze stupně ( i i i)) .

(v) EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂00CCh x 2 TFA (193 mg, 0,35 mmol, ze stupně (iv)) a z ethyltrifluoracetátu (83 mg, 0,35 mmol). Výtěžek je 87 mg (39 % teorie).

¹H-NMR (400 MHz, CDCI3) delta 8,48 (t br, IH) , 7,83 (d, 2H) , 7,37 (d,2H), 5,86 (s,2H), 4,95 (dd, IH), 4,15-4,39 (AB-část spektra

ABX,2H) 4,18-4,05 (m,5H), (3,26-3,17 (AB-spektrum, 2H), 2,87 (d, IH), 2,75-0,95 (m,29H).

Příklad 50

EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂00CCH₂Ch

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 49, přičemž výchozí látkou je cyklohexyloctová kyselina místo cyklohexankarboxylové kyseliny. Výtěžek je 74 mg, (17 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 656 (m/z) • · · · · ··· · · ·♦.

* ···· · · · · · » ··· · · • · ·«·« ··« «»·· · ·· ·· ·· ··

- 69 Příklad 51

Et00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCHÍMe)OOCPh

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 49, přičemž výchozí látkou je EtSCOOCHíCH₃)Cl (připravená z C1COCH(CH₃)Cl a z EtSH způsobem, který popsal Folkmann a kol.(J. Synthesis, str. 1159, 1990) místo EtSCOOCHzCl. Výtěžek je 70 mg , (23 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 650 (m/z)

Příklad 52

Et00CCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-C00CH₂00CPh

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 49, přičemž výchozí látkou je kyselina benzoová místo cyklohexankarboxylové kyseliny. Výtěžek je 50 mg (39 % teorie).

‘H-NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,73-9,25 (s br, IH), 8,45 (t, IH), 8,05 (d, 2H), 7_f83 (d, 2H), 7,60-7,10 (m, 6H), 6,10 (s, 2H), 4,96-4,84 (dd, IH), 4,62-4,30 (ABX, 2H), 4,20-3,93 (m, 4H), 3,25 (s, 2H), 2,84 (d, IH), 2,73-2,41 (m, 2H), 2,41-0,87 (m, 15H) ¹³C NMR (300 MHz, CDC1₃) karbonylově a amidinové signály:

delta 163,1, 165,3, 169,0, 170,8, 172,3, 175,5.

Příklad 53

BnOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-COOCHÍ Me)OAc

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCHÍCH₃)OCÍO)CH₃ (108 mg, 0,21 mmol; příklad 14( i i)) a z benzylbromacetátu (36 yl, 0,23 mmol). Výtěžek je 41 mg (30 % teorie).

• 9	9	··	• 9 ··		99
* ·	•	•	9	9 · 9	9		9
•	• ·	e	9	··· 9 ·		99
♦	9999	• ·	•	9 99 999	9		9
•	•	•	9	9 9 ·	9		9
	♦	9t	♦ · 99		99

FAB-MS(m+1)= 650 (m/z)

Příklad 54

ELOOCCH2-(R)Cg1 -Aze-Pab-C00CH₂0Ac (i) H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂0Ac x 2 TFA

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 14(i) a (ii) za použití acetoxymethy1-4-nitrofenylkarboxylátu (připraveného obdobným způsobem jako podle příkladu 12 (i i i) ) za použití acetátu stříbra místo pivalátu stříbra. Zpracováním se získá sloučenina H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂0Ac x 2 TFA, které se použije bez dalšího čištění v následujícím stupni.

(i i) Et00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂0Ac

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc x 2 TFA (0,83 mmol; ze stupně (i)) a z ethylbromacetátu (2,2 mmol). Výtěžek je 286 mg.

FAB-MS:(m+1)= 574 (m/z)

Příklad 55 tBuOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-C00CH₂0Ac

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc x 2 TFA (0,313 mmol; příklad 54(i)) a z t-butylbromacetátu (73 mg, 0,376 mmol). Výtěžek je 156 mg (83 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 602 (m/z)

Příklad 56

BnOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-COOCH₂OOC-LBu

• 0	0	00	00	··	• 0
• 0	0	•	0	0	Φ 0	•		•
•	0 0		0	• 00	0 0		00
0	0000	0 0	0	0 0	• 0··	0
0	0	•	0	0 0	0	0		0
0000	0	00		0*	00		00

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂00C-tBu (379 mg, 0,71 mmol; příklad 12(v)) a z benzylbromacetátu (135 ul, 0,85 mmol).

Výtěžek je 146 mg (30 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 678 (m/z)

Příklad 57

EtOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-C00CH₂CC13 ( i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CC13

Uvedená sloučenina se připaví obdobně jako podle příkladu 1( i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (1,0 g, 2,12 mmol), 2M NaOH (11,7 ml) a z trichlorethylchlorformátu (494 mg, 2,33 mmol). Výtěžek je 1,08 g (79 % teorie).

( i i) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CC13

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(ii) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CC13 (1,04 g, 1,607 mmol; stupeň ( i)) . Výtěžek je 1,43 g (99 % teor i e) .

'H-NMR: (500MHz; CD₃0D) δ 7/9 (d, 2H), 7,61 (d, 2H), 5,10 (s, 2H), 4,87-4/1 (m, 2H), 4,63-4,52 (q, 2H), 4,41-4,34 (m, 1H), 4,30-4,24 (m, 1H), 3/2 (d, 1H), 2/2-2,63 (m, 1H), 2,32-2/5 (m, 1H), 1,88-1,10 (m, 14H) (iii) Et00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂CCl₃

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH2CCI3 (400 mg, 0,52 mmol) ze stupně (ii)) a z ethylbromacetátu (95 mg, 0,57 mmol). Výtěžek je 8 mg (23 % teorie).

Ή-NMR: (500MHz; CDC1₃) δ 8.47 (bt, IH), 7,83 (d, 2H), 7,48 (bs, 1H), 7,31 (d, 2H), 4.92 (dd, 1H), 4.85 (s, 2H), 4.58-4.39 (AB část ABX spektra , 2H), 4/6-4,06 (m, 4H), 3/4 (s, 2H), 4,87 (d, 1H), 2,65-2_z59 (m, 1H), 2,56-2,48 (m, 1H), 2,10-0,95 (m, 16H)

	•	··		99 99		99
• ·	•	•	•	9 9 9	•		9
•	• ·	•	•	999 · ·		99
•	····	• ·	•	• 99 999	9		9
•	•	•	•	9 9 ·	9		9
	♦			♦ ♦ ··		99

Příklad 58

MeOOC-C(=CEt1CH2OOCCH2-<R)Cgl-Aze-Pab-Z (i) MeOOC-C(= CH)C(OH)EL

Do roztoku (10,1 g, 174 mol) propionaldehydu se přikape roztok methyl akry1átu (10 g, 0,116 mol) a 1,4-diazobicyklo[2,2,2]oktan (1,3 g, 0,0116 mol). Reakční směs se míchá 14 dní při teplotě místnosti. Přidá se etbylacetát (150 ml). Organická fáze se promyje vodou a solankou, vysuší se síranem sodným, · zfiltruje se a zkoncentruje, čímž se získá MeOOC-C-(=CH)C(OH)Et. Výtěžek je 15,5 g (93 % teorie).

Ή-NMR: (400MHz; CDC1₃) δ 6/4 (s, IH), 5,81 (s, IH), 4/4 (t, IH),

3/8 (s, 3H), 2,82 (bs, IH), 1,69 (m, 2H), 0,95 (t, 3H) (ii) MeOOC-C(=CEt)CH₂Br

Do MeOOC-C(=CH)C(OH)Et (3 g, 20,8 mmol ze stupně (i)) a

se při teplotě 0 C přikape HBr (6,5 ml, přibližně 48%). Po 5 minutách se přikape kyselina sírová (koncentrovaná, 6 ml). Reakční směs se míchá 12 hodin při teplotě místnosti. Obě fáze se oddělí a horní fáze se rozředí etherem. Etherová fáze se promyje vodou a vodným roztokem hydrogenuzličitqanu sodného, vysuší se (síranem sodným na dřevěném uhlí) a zkoncentruje se. Zbytek se vyčistí bleskovou chromatografií. Výtěžek je 1,7 g (40 % teorie).

‘H-NMR: (400MHz; CDC1₃) δ 6,97 (t, 3H), 4,23 (s, 2H), 3,8 (s, 3H),

2,32 (m, 2H), 1,13 (t, 3H) (iii) tBuOOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkla73

♦ ♦	•	99	99	99	99
• ·	•	• ·	9	9 9	•		9
•	• 9	•	9	999	9 9		99
e	9999	• 9	9	9 9	9 999	•		9
•	9	9	9	9 9	9	•	99	9
9999	9	99	99	99

du 1(iii) z H-( R)Cgl-Aze-Pab-Z (2,1 g,

3,6 mmol) a z t-butylbromacetátu (780 mg, 4,0 mmol).

Výtěžek je 1,73 g (78 % teorie).

(iv) H-00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Při teplotě místnosti se 3 hodiny míchá roztok tBuOOCCH₂(R)Cgl-Aze-Pab-Z (ze stupně (iii)) a TFA v methylenchloridu. Reakční směs se zkoncentruje a vymrazovacím sušením se zbaví vody a HC1 (konc. 10 eq).

(v) MeOOC-C(=CEt)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Zmrazením se vysuší roztok H-00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (263 mg, 0,41 mmol, ze stupně (iv)), NaOH í 1M, 1,239 ml, 1,239 mmol) a vody (4 ml). Přidá se DMF (5 ml), načež se přikape MeOOC-C(=CEt)CH₂Br (103 mg, 0,496 mmol; ze stupně (ii)) při o

teplotě 0 C. Reakční směs se míchá 24 hodin při teplotě místnosti, zředí se toluenem (5 ml), promyje se vodou, vysuší se síranem sodným a zkoncentruje se. Zbytek se vyčistí bleskovou chromatografií za použití systému EtOAc ' methanol (95:5) iako elučního činidla. Výtěžek ie 95 mg (33 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 690 (m/z)

Příklad 59

Men00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPhí 4-OMe) (i) MenOOCCH₂Br

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 3O(i) z MenOH (10 mmol) a z bromacetylchloridu (12 mmol). Výtěžek je 1,5 g (54 % teorie).

( i i) Men00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPhí4-OMe)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně iako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOPhí4-OMe) (521 mg, 1 mmol)

44	•		44	44	44		♦ 4
• ·	•	•	4	4	4 4			*
•	• 4	4	4	«44	4 4		44
4	····	• 4	4	4 4	• 444	4		•
•	4	4	4	4 ·	4	4		•
····	4		44	··	44		4 4

(příklad 40( i i 11 a z Men00CCH₂Br (416 mg, ze stupně (il). Výtěžek je 36 mg (5 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 718 (m/z)

Příklad 60 tBuOOCCHs-(R)Cgl-Aze-Pab-COOnPr

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 1 ( i i i ) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr (575 mg, 0,837 mmol příklad 5( i i) ) a z t-butylbromoacetátu (196 mg, 1,01 mmol). Výtěžek je 11Ο mg (23 % teorie).

LC-MS:(m+l)= 572 (m/z)

Příklad 61

Men00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (0,7 g, 1,21 mmol) a z Men0PCCH₂Br (0,4 g, 1.45 mmol z příkladu 59(i)). Výtěžek je 0,33 g (38 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 702 (m/z)

Příklad 62

BnOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-C00-Bn(4-NO₂) (i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-NO₂)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 1(i) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-H (1,03 g, 2,18 mmol), z 2M NaOH (24 ml) a z 4-N0₂-benzylchlorformátu (518 mg, 2,4 mmol). Výtěžek je 1,32 g (93 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 651 (m/z)

• 0	•	«4	0«	04	0«
• ·	•	0	•	0	0 0	«		•
•	• 4	0	0	004	0 4		00
4	····	4 4	4	4 0	4 004	0		0
•	0	♦	0	0 0	0	0	00	0
····	0	40	00	00

( i i) H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn(4-N0₂)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu 4( i i ) z Boc-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bn( 4-N0₂) (1,32 mg, 2,03 mmol), ze stupně (i). Výtěžek je 1,0 g (79 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 551 (m/z) ( i i i) BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-C00-Bn(4-N0₂)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bní4-N0₂) (0,5 g, 0,80 mmol, ze stupně (ii)) a z benzylbromacetátu (220 mg, 0,90 mmol).

FAB-MS:(m+1)= 699 (m/z)

Příklad 63

EtOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-Bn(4-N0₂ )

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00-Bn(4-N0₂) (211 g, 0,38 mmol;

příklad 62 (ii)) a z ethylbromacetátu (47 ul, 0,42 mmol). Výtěžek je 44 mg (18 % teorie).

‘H-NMR: (300MHz; CDC13) δ 9,55 (bs, IH), 8,50 (bt, IH), 8,20 (d, 2H), 7,80 (d, 2H), 7,60 (d, 2H), 7,35 (d, 2H), 6,87 (bs, IH), 4,95 (dd,

IH), 4,65-4,40 (AB část ABX spektra, 2H), 4,18-4,04 (m, 5H), 3,27-3,15 (AB-spektrum, 2H), 2,87 (d, IH), 2,75-2,60 (m, IH), 2,57-

2,45 (m, IH), 2,00-0,95 (m, 16H).

Příklad 64

Pr 1 C( O) CH₂OOCCH₂ - ( R) Cg 1 - Aze - Pab- Z (i) PrlC(O)CH₂OH

Na teplotě zpětného toku se udržuje 1 hodinu směs

2,5-dioxo-1,4-dioxanu (2,0 g, 17 mmol) a pyrrol idinu (8 ml, 97

··	•	·*	··	• 9		99
• ·	•	• ·	•	9 9	•	•
•	• 9	• ·	···	• 9		99
•	♦ ···	• · ·	• ·	• 999	•	•
•	•	9 ·	• ·	•	•	•
···»	9	99	• 9	• 9		9·

mmol). Přebytek pyrrolidinu se odstraní odpařením. Výtěžek je 4,4 g (99 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 130 (m/z) (i i) PrlCí O)CH₂00CCH₂Br

Do roztoku PrlC(0)CH₂0H (0,4 g, 3,1 mmol, ze stupně (i)) v DMF (15 ml) se přikape bromacetylbromid (0,63 g, 3,1 mmol) c pří teplotě O C. Reakční směs se míchá 1,5 hodiny při teplotě a

O C a 3 hodiny při teplotě místnosti. Přidá se další bromacetylbromid (0,63 g, 3,1 mmol) a reakční směs se zahřeje na tepe lotu 80 C, míchá se 12 hodin při teplotě místnosti a zkoncentruje se. Výtěžek je 320 mg (41 % teorie).

FAB-MS:(m+1)= 252 (m/z) (iii) Pr1C(0)CH₂OOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-Z (580 mg, 1 mmol) a z Pr1C(0)CH₂OOCCH₂Br (300 mg, 1,2 mmol, ze stupně (ii)). Výtěžek je 400 mg (60 % teorie).

FAB-MS(m +1) =675 (m/z) ‘H-NMR: (500MHz; CDC13) δ 9,66-9,42 (bs, 1H), 8,64-8/6 (m, 1H), 8,03-7,93 (d, 2H), 7,89-7,66 (bs, 1H), 7,45 (d, 2H), 7,45-7,25 (m, 5H), 5,20 (s, 2H), 4,98-4,92 (dd, 1H), 4,82-4.,74 (m, 1H), 4,62, 4,58 (AB spe^rum, 2H), 4,26-4,05 (m, 3H),3,47-3,16 (m, 6H), 2,95 (d,lH), 2/82/8 (m, 1H), 2,54-2,42 (m, 1H), 2/3-1,95 (m, 16H)

Příklad 65 ( 2- Me) BnOOCCH₂ - ( R) Cg 1 - Aze - Pab - C00- Bn( 4- N0₂ )

• ·	4	• 4	44	44	44
• 4	•	4	4	•	4 4	4		4
4	9 4	4	4	• 44	4 4		• 4
4	4444	4 4	4	4 ·	4 444	4		4
•	4	•	4	4 4	4	4		4
• 4··	4	44		44	44		• C

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bní4-NO₂) (500 g, 0,80 mmol, příklad 62(i i)) a z 2-(methyl1benzylbromacetátu (234 mg 0,96 mmol, příklad 32(i)). Výtěžek je 528 mg (92 % teorie).

Ή-NMR: (400MHz, CDC1₃) 0 9,34 (bs, IH), 8,38 (t, IH), 8,09 (d, 2H), 7,72 (d, 2H), 7,48 (d, 2H), 7,37 (bs, IH), 7,23 (d, 2H), 7,17-7,05 (m, 4H), 5,18 (s, 2H), 5,00 (s, 2H), 4,81 (dd, IH), 4,45-4,34 (AB část ABX spektra, 2H), 4,04-3,97 (q, IH), 3,93-3,86 (q, IH), 3,27-3,17 (AB spektrum, 2H), 2,79 (d, IH), 2,54-2,35 (m,2H), 2,22 (s, 3H), 1,911,84 (bd, IH),1,71-1,39 (m, 5H), 1,19-0,84 (m, 4H).

Příklad 66

MeOOCCH₂-(R1 Cg1 -Aze-Pab-COOEt

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-COOEt (305 g. 0,69 mmol; příklad 4( i i ) ) a z methylbromacetátu (126 mg, 0,83 mmol. Výtěžek je 188 mg (53 % teorie).

LC-MS:(m+1)=516 (m/z)

Příklad 67 (nPr)₂ NC(O)CH₂ 00CCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-C00-Rn(4-N0₂) (i) (nPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂C1

Při teplotě místnosti se 12 hodin míchá směs (nPr)₂NC(O)CH₂0H (244 mg, 1,53 mmol; příklad 12( i)) a bromacetylchioridu (270 mg, 1,72 mmol). Směs se vlije do vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se methylen- 78 -

··	•	·♦	··	··	··
• ·	•	• ·	•	• ·	•	•
•	• ·	•	•	···	• ·	··
♦	····	• ·	•	• ·	• ···	•	•
•	•	•	•	• ·	•	• ·
····	•		··	··	··

chloridem. Organická fáze se promyje vodným roztokem hydrogensíranu draselného (0,2M) a solankou, vysuší se a zkoncentruj e se.

FAB-MS:(m+1) =237(m/z) *H-NMR: (400MHz, CDC1₃) δ 4,82 (s, 2H), 4,22 (s, 2H), 3,31-3,26 (t, 2H), 3,10-3.15 (t, 2H), 1,68-1,52 (m, 2H), 1,97-0,86 (m, 6H) ( i i) ( nPr)₂NC(O)CH2OOCCH2-(R)Cgl-Aze-Pab-COO-Bní4-N0₂)

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cg1 -Aze-Pab-COOBn(4-NO₂) <343 g, 0,62 mmol; příklad 62(i i)) a z ( nPr)₂NC( O)CH2OOCCH2CI (160 mg, 0,68 mmol, ze stupně (i)). Výtěžek je 89 mg (19 % teorie).

FAB-MS:(m+1)=750 (m/z)

Příklad 68 (2Me)BnOOCCH₂-(R)Cg1 -Aze-Pab-COOCH₂00CtBu

Uvedená sloučenina se připraví obdobně jako podle příkladu l(iii) z H-(R)Cgl-Aze-Pab-C00CH₂00CtBu (380 g, 0,71 mmol; příklad 12(v)) a z 2-(methy1)benzylbromacetátu (215 mg, 0,88 mmol, přík1 ad 32( i)) . Výtěžek je 37 mg (7,5 % teorie) .

FAB-MS:(m+1)=692 (m/z)

Příklad 69

Sloučeniny podle příkladu 1 až 68 byly všechny testovány testem A a všechny vykázaly hodnotu IC50TT vyšší než 1,0 uM, (nebyly tedy aktivní na thrombin jako takový; aktivní inhibitor HOOC-CH2 - ( R) Cgl - Aze-Pab-H vykazuje IC50TT 0,01 14M .

φφ Φ· φ φ φ φ • · ·· • ··· · · φ φ φ φφ ··

- 79 φφ φ φ φ φ φφφ φ ΦΦΦ· φ φ φφφφ φ φφ φφ φ φφ φ ···· • · · φφ • φ φφ φφ φφ

Příklad 70

Sloučeniny podle příkladů 1 aš 68 byly testovány jedním, dvěma nebo všemi testy B, C a/nebo D a všechny vykazují orální a/nebo parenterální biologickou dostupnost u krys, jako aktivní inhibitor HOOC-CH^-(R)Cgl-Ase-Pab-H bud* jako volné kyseliny a/nebo jejich jeden nebo několik esterů. Na sákladě předpokladu že HOOC-CHa-CRlCgl-A^e-Pab-H se tvoří v krysách, byla biologická dostupnost vypočtená podle vzorců předepsaných v testech B a/nebo C jako přiměřená.

Průmyslová využitelnost

Sloučeniny s větší účinností, menší toxicitou, déle působící se širší aktivitou, s menšími vedlejšími účinky a ochotněji absorbovatelné pro výrobu jako prodrogy pro výrobu inhibitorů thromb i nu.

·· ·· • · · · ···· β ·

PATENTOVÉ • · • ··· • · · · ·· · · · • · * ·· ··

Claims (51)

1. Sloučenina obecného vzorce I

   R¹0( O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R² ( I) kde znamená

   R¹

   A¹

   R²

   R3

   R¹

   A⁴

   R²

   R3 skupinu -R3 nebo - A*C( O) N(R⁴)R⁵ nebo -A¹C(0)OR⁴ alkylenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, (který nahrazuje jeden z atomů vodíku v amidinové jednotce Pab-H) znamená hydroxylovou skupinu, skupinu obecného vzorce OC(O)R⁶, C(O)OR⁷ nebo

   C( 01 0CH( R⁸) 0C( O) R⁹ atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku, alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v al kýlovém podílu, která je popřípadě substituována alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, alkyloxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo atomem halogenu, na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylovou skupinu, 2-naftylovou skupinu nebo v případě, kdy R¹ znamená skupinu obecného vzorce - A¹C(O)N(R⁴1R⁵, spolu s atomem dusíku, na který jsou vázány skupinu pyrrolidinylovou nebo piperidinylovou skupinu, alkylovou skupinu s 1 až 17 atomy uhlíku, fenylovou nebo 2-naftylovou skupinu, přičemž všechny tyto skupiny jsou popřípadě substituovány alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo atomem halogenu,

   - 81 R⁷ skupinu 2-naftylovou, fenylovou, alkylfenylovou s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu, přičemž všechny tyto skupiny jsou popřípadě substituovány alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nitroskupinou nebo atomem halogenu, nebo znamená alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy uhlíku, která je popřípadě substituována alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, acyloxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo atomem halogenu,

   R^s atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

   R⁹ skupinu 2-naftylovou, fenylovou, alkoxyskupinu s 1 až

   6 atomy uhlíku, alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, která je popřípadě substituována atomem halogenu, alkoxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku nebo acyloxyskupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, za podmínky, že v případě, kdy

   R¹ znamená skupinu R³, znamená R³ skupinu benzylovou, methylovou, ethylovou, n-butylovou nebo n-hexylovou a R² znamená skupinu obecného vzorce C(O)OR⁷, kde neznamená R⁷ benzylovou skupinu, a její farmaceuticky vhodná sůl.
2. 2. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená A¹ alkylenovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku a R¹ skupinu vzorce - A¹ C( O) N( R⁴) R⁵ a ostatní symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
3. 3. Sloučenina podle nároku 1 nebo 2 obecného vzorce I, kde znamená R⁴ atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, jestliže R¹ znamená skupinu vzorce -Α⁴Ό( O)N(R⁴)R⁵ a ostatní symboly mají v nároku 1 nebo 2 uvedený význam.

   - 82 ····
4. 4. Sloučenina podle nároku 1 až 3 obecného vzorce I, kde znamená R⁵ alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku nebo cykloalkylovou skupinu se 4 až 6 atomy uhlíku, jestliže R¹ znamená skupinu vzorce - A^JC( O) N( R⁴ ) R⁵ a ostatní symboly mají v nároku 1 až 3 uvedený význam.
5. 5. Sloučenina podle nároku 1 až 3 obecného vzorce I, kde znamená R⁴a R⁵ spolu dohromady pyrrolidinylovou skupinu, jestliže R¹ znamená skupinu vzorce -A¹C(O)N(R⁴)R⁵ a ostatní symboly mají v nároku 1 až 3 uvedený význam.
6. 6. Sloučenina podle nároku 2 až 5 obecného vzorce I, kde znamená A¹ alkylenovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, R⁴ atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku a R⁵ alkylovou skupinu s 2 až 6 atomy uhlíku nebo cykloalky1ovou skupinu se 4 až 6 atomy uhlíku nebo R⁴ a R⁵ spolu dohromady pyrrolidinylovou skupinu a ostatní symboly mají v nároku 2 až 5 uvedený význam.
7. 7. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená A¹ alkylenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, jestliže R¹ znamená skupinu vzorce -A¹C(O)OR⁴ a ostatní symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
8. 8. Sloučenina podle nároku 1 nebo 7 obecného vzorce I, kde znamená R⁴ alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, jestliže R¹ znamená skupinu vzorce -A¹C(O)OR⁴ a ostatní symboly mají v nároku 1 nebo 7 uvedený význam.
9. 9. Sloučenina podle nároku 7 nebo 8 obecného vzorce I, kde znamená A¹ alkylenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, R⁴ alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a ostatní symboly mají v nároku 7 nebo 8 uvedený význam.
10. 10. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená R³ atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 1O atomy uhlíku, • · ···· která je lineární nebo v případě, že má dostatečný počet atomů uhlíku rozvětvená a/nebo parciálně cyklická nebo cyklická, nebo R³ znamená a 1kylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu, přičemž jsou tyto skupiny popřípadě substituovány a alkylové podíly jsou lineární nebo v případě, že mají dostatečný počet atomů uhlíku rozvětvené, jestliže R¹ znamená skupinu R³ a ostatní symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
11. 11. Sloučenina podle nároku 1 nebo 1O obecného vzorce I, kde znamená R¹ atom vodíku, lineární alkylovou skupinu s 1 až 1O atomy uhlíku, rozvětvenou alkylovou skupinu s 3 až 10 atomy uhlíku, parciálně cyklickou alkylovou skupinu se 4 až 1O atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinu se 4 až 10 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v lineárním alkylovém podílu nebo popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu se 3 atomy uhlíku v rozvětveném alkylovém podílu a ostatní symboly mají v nároku 1 nebo 1O uvedený význam.
12. 12. Sloučenina podle nároku 11 obecného vzorce I, kde znamená R¹ lineární alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinu se 6 až 10 atomy uhlíku nebo popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v lineárním alkylovém podílu a ostatní symboly mají v nároku 11 uvedený význam.
13. 13. Sloučenina podle nároku 1 až 12 obecného vzorce I, kde znamená R² hydroxylovou skupinu a ostatní symboly mají v nároku 1 až 12 uvedený význam.
14. 14. Sloučenina podle nároku 1 až 12 obecného vzorce I, kde znamená R⁶ popřípadě substituovanou fenylovou skupinu nebo alkylovou skupinu s 1 až 17 atomy uhlíku, která je lineární nebo v případě, že má dostatečný počet atomů uhlíku rozvětvená a/ • · nebo parciálně cyklická nebo cyklická a/nebo nasycená nebo nenasycená, jestliže R² znamená skupinu 0C(0)R⁶ a ostatní symboly mají v nároku 1 až 12 uvedený význam.
15. 15. Sloučenina podle nároku 14 obecného vzorce I, kde znamená R⁶ popřípadě substituovanou fenylovou skupinu, lineární alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, rozvětvenou alkylovou skupinu s 3 až 4 atomy uhlíku nebo cis-oleylovou skupinu a ostatní symboly mají v nároku 14 uvedený význam.
16. 16. Sloučenina podle nároku 15 obecného vzorce I, kde znamená R⁶ lineární alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 3 atomy uhlíku a ostatní symboly mají v nároku 15 uvedený význam.
17. 17. Sloučenina podle nároku 1 až 12 obecného vzorce I, kde znamená R⁷ popřípadě substituovanou fenylovou skupinu nebo alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy uhlíku, která je popřípadě substituovaná a je lineární nebo v případě, že má dostatečný počet atomů uhlíku rozvětvená, parciálně cyklická nebo cyklická a/nebo nasycená nebo nenasycená, nebo R? znamená alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu, která je popřípadě substituovaná a alkylové podíly jsou lineární nebo v případě, že mají dostatečný počet atomů uhlíku rozvětvené, jestliže R² znamená skupinu OC(O)R⁷ a ostatní symboly mají v nároku 1 až 12 uvedený význam.
18. 18.

    Sloučenina podle nároku 17 obecného vzorce I, kde znamená R⁷ popřípadě substituovanou a/nebo popřípadě nenasyces 1 až 4 atomy uhlíku nebo popopřípadě nenasycenou rozvětve4 atomy uhlíku, popřípadě subnebo popř í pádě subst i tuovanou atomy uhlíku v lineárním alkysubstituovanou alkylfenylovou nou lineární alkylovou skupinu případě substituovanou a/nebo nou alkylovou skupinu se 3 až stituovanou fenylovou skupinu alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 lovém podílu, nebo popřípadě skupinu se 3 atomy uhlíku v rozvětveném alkylovém podílu a os·· ·· ·· * · * ·· ·· tatní symboly mají v nároku 17 uvedený význam.
19. 19.

    Sloučenina podle nároku 18 obecného vzorce I, kde znamená R⁷ popřípadě substituovanou lineární alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo popřípadě substituovanou rozvětvenou alkylovou skupinu se 3 aě 4 atomy uhlíku nebo popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu se 3 atomy uhlíku v rozvětveném alkylovém podílu a ostatní symboly mají v nároku 18 uvedený význam.
20. 20. Sloučenina podle nároku 1 až 12 obecného vzorce I, kde znamená R⁸ atom vodíku nebo methylovou skupinu, jestliše R² znamená skupinu C( 01 0CH( R⁸ ) 0C( 01R⁹ a ostatní symboly mají v nároku 1 aě 12 uvedený význam.
21. 21. Sloučenina podle nároku 1 aš 12 nebo 20 obecného vzorce I, kde znamená R⁹ fenylovou skupinu nebo alkylovou skupinu s 1 aš 8 atomy uhlíku, která je popřípadě substituovaná a je lineární nebo v případě, že má dostatečný počet atomu uhlíku rozvětvená a/nebo parciálně cyklická nebo cyklická, jestliže R² znamená skupinu C( O)0CH(R⁸)0C(O)R⁹ a ostatní symboly mají v nároku 1 až 12 nebo 20 uvedený význam.
22. 22. Sloučenina podle nároku 20 nebo 21 obecného vzorce I, kde znamená R⁸ atom vodíku nebo methylovou skupinu a R⁹ fenylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu s 5 až 7 atomy uhlíku, lineární alkylovou skupinu s 1 aš 6 atomy uhlíku, rozvětvenou alkylovou skupinu s 3 aš 6 atomy uhlíku nebo parciálně cyklickou alkylovou skupinu se 7 aš 8 atomy uhlíku a ostatní symboly mají v nároku 20 nebo 21 uvedený význam.
23. 23. Sloučenina podle nároku 22 obecného vzorce I, kde znamená R⁸ atom vodíku a R⁹ cykloalkylovou skupinu s 5 aš 7 atomy uhlíku, lineární alkylovou skupinu s 1 aš 6 atomy uhlíku nebo parciálně cyklickou alkylovou skupinu se 7 aš 8 atomy uhlíku a ostatní symboly mají v nároku 22 uvedený význam.
24. 24. Sloučenina podle nároku 1 až 23 obecného vzorce I, kde znamená R¹ R³ a R³ znamená popřípadě substituovanou alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy ublíku nebo popřípadě substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a ostatní symboly mají v nároku 1 až 23 uvedený význam.
25. 25. Sloučenina podle nároku 24 obecného vzorce I, kde případným substituentem je methylová skupina a symboly mají v nároku 24 uvedený význam.
26. 26. Sloučenina podle nároku 1 až 25 obecného vzorce I, kde znamená R² skupinu 0C(0)R⁷ a R⁷ znamená popřípadě substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy uhlíku, přičemž případným substituntem je atom halogenu nebo alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a symboly mají v nároku 1 až 25 uvedený význam.
27. 27. Sloučenina podle nároku 26 obecného vzorce I, kde případným substituentem je atom chloru nebo methoxyskupina a symboly mají v nároku 26 uvedený význam.
28. 28. Sloučenina podle nároku 1 až 27 obecného vzorce I, kde znamená R² skupinu OC(O)R⁷ a R⁷ znamená popřípadě substituovanou fenylovou skupinu, přičemž případným substituntem je alkylová skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku a atom halogenu a symboly mají v nároku 1 až 27 uvedený význam.
29. 29. Sloučenina podle nároku 28 obecného vzorce I, kde případným substituentem je atom methylová skupina, methoxyskupina a atom chloru a symboly mají v nároku 28 uvedený význam.
30. 30. Sloučenina podle nároku 1 až 29 obecného vzorce I, kde znamená R² skupinu 0CÍ01R⁷ a R⁷ znamená popřípadě substituovanou a1kyfeny1ovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém • · · _Α· • · ·· • ··· φ · φ · φ

    Φφ ··

    ΦΦ φ podílu, přičemž případným subst i Luntem je nitroskupina a symboly mají v nároku 1 až 29 uvedený význam.
31. 31. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, kterou je

    EtOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂; «PrOOCCH₂-(tf)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂; íBuOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂;

    EtOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOEt;

    EtOOCCH₂-(K)Cgl-Aze-Pab-COO-«Bu;

    PrlC(O)CH₂CH₂CH₂OOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-Z;

    ChNHC(O)CH₂OOCCH₂-(7?)CgI-Aze-Pab-Z;

    (zzPr)₂NC(O)CH₂OOCCH₂-(2?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃)₃;

    EtOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCC(CH₃)₃;

    EtOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOCH(CH₃)OOCCH₃;

    MeOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OOCPh;

    MeOOCCH₂-(tf)Cgl-Aze-Pab-OH;

    EtOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-OH;

    BnOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH;

    nPrOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-Z;

    nPrOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-OH;

    zPrOOCCH₂-(Z?)Cgl-Aze-Pab-OH;

    zBuOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH; (nPr)₂NCOCH₂OOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-OH;

    ChNHCOCH₂OOCCH₂-(jR)Cgl-Aze-Pab-OH;

    EtOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-OAc;

    HOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH;

    HOOCCH₂-(/Č)CgI-Aze-Pab-O-cz'5-OleyI;

    Cy^ooifyl-OOCCH₂-(Z?)CgI-Aze-Pab-Z;

    /BuCH₂OOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-Z;

    ·· · • · · • · · • ···· • · ···· «

    • 9 99 99 99 9 • 9 9 9 9 9 • 9 999 9 · 9 9 9 9 9 9 ♦ 999 9 9 • 9 9 · 9 9 9 99 99 9 9 9<

    ChCH₂OOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe);

    (2-Me)BnOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe);

    EtOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-Mc);

    BnOOCCH₂-(J?)Cgl-Azc-Pab-COOPh(4-Me);

    BnOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COO-nBu;

    zPrOOCCH₂-(2?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CH=CH₂;

    EtOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COO-zBu;

    BnOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COO-nPr;

    EtOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh;

    EtOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCH₂Ch;

    EtOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OOCPh;

    EtOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCPh;

    BnOOCCH₂-(7ř)Cgl-Aze-Pab-COOCH(Me)OAc;

    EtOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc;

    íBuOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OAc;

    MeOOC-C(=CHEt)CH₂-OOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-Z;

    Men-OOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe); and

    EtOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CCl₃.

    (2-Me)BnOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-Z;

    ChCH₂OOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-Z;

    ChOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-Z;

    PhC(Me)₂OOCCH₂-(J?)CgI-Aze-Pab-Z;

    (Me)₂CHC(Me)₂OOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-Z;

    BnOOCCH₂-(/?)Cgl-Aze-Pab-COOPh(4-OMe);
32. 32. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, kterou je

    EtOOCCH₂-(J?)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂CCl₃;

    BnOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOnBu;

    nPrOÓCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-Z;

    • · 9 99 • · 9 9 9 • 9 9 9 9 • 9999 9 9 9 9 9 9 9 9999 9 99

    99 99 99 9 9 9 9 9 999 9 9 9 9 9 9 9 999 9 9 9 9 9 9 9 99 99 99

    - 89 Cy loo ,tyl-OOCCH₂-(7?)CgI-Azc-Pab-Z;

    EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-COOCH₂OOCCh; MeOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH;

    EtOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH; nPrOOCCH₂-(7?)Cgl-Aze-Pab-OH;

    íPrOOCCH₂-(J?)Cgl-Azc-Pab-OH;

    Bn00CCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OH a

    EtOOCCH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-OAc.
33. 33. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, s přídavnou podmínkou, že R¹ neznamená skupinu -A¹C(O)OR⁴ a symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
34. 34. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, s přídavnou podmínkou, že R⁴ a R⁵ neznamenají na sobě nezávisle atom vodíku a symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
35. 35. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, s přídavnou podmínkou, že R⁶ neznamená alkylovou skupinu s 1 až 17 atomy uhlíku, jestliže R² znamená skupinu OC(O)R⁶ a symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
36. 36. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, s přídavnou podmínkou, že R¹ znamená skupinu -A^CfOlOR⁴ a symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
37. 37. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, s přídavnou podmínkou, že R⁴ a R⁵ znamenají na sobě nezávisle atom vodíku a symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
38. 38. Sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce I, s přídavnou podmínkou, že R⁶ znamená alkylovou skupinu s 1 až 17 atomy uhlíku, jestliže R² znamená skupinu OC(O)R⁶ a symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
39. 39.

    Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I, kde jed-

    • · • ·· ·· ·· • · • • • • • · • • · » • • · • • ··· • · • ···· « · • • · • ··· • • • • • • • · • • • · • ···· e ·· ··

    notlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam, podle nároku 1, vyznačuj ící se tím, že

    a) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R² hydroxy1ovou skupinu, se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného kde znamená R² skupinu

    Cí 01OR⁶, kde význam, s alkoxidovou 2ásadou,

    b) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R² hydroxylovou skupinu, se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce I, kde znamená R² skupinu C(O)OR⁷, kde R⁷ má shora uvedený význam, s hydroxy 1 aminem nebo s jeho adiční solí s kyselinou,

    c) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce II

    H-(R)Cgl-Aze-Pab-R² (II) kde R² má shora uvedený význam, se sloučeninou obecného vzorce III

    Rⁱ0(O)C-CH₂-L¹ (III) kde R¹ má shora uvedený význam a L¹ znamená uvolňovanou skupinu,

    d) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R¹ atom vodíku a R² hydroxylovou skupinu, nebo skupinu C(0)0R⁷, kde R⁷ má shora uvedený význam, se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce I, kde znamená R¹ alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku nebo alkylfenylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu a R² hydroxylovou skupinu nebo skupinu C(O)OR⁷, se zásadou,

    e) pro přípravu sloučenin obecného vzorce

    I, kde znamená R² skupinu OC(O)R⁶, kde R⁶ má shora uvedený význam, se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce I, kde znamená R² hydroxy1ovou skupinu, se sloučeninou obecného vzorce IV

    R⁶C( O) -0-C(0)R6 ( IV) nebo se sloučeninou obecného vzorce

    R⁶C(O)Hal (V) kde znamená Hal vždy atom chloru nebo bromu a R⁶ má shora uvedený význam.

    f) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R¹ atom vodíku a R² skupinu C(0)0R⁶, kde R⁶ má shora uvedený význam, se nechává reagovat odpovídající sloučenina obecného vzorce VI,

    P*0(O)C-CH₂-(R)Cgl-Aze-Pab-R² (VI) kde znamená P¹ skupinu chránící labilní ester kyseliny a R² skupinu C(O)OR⁶, kde R⁶ má shora uvedený význam, s kyselinou

    g) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde znamená R¹ skupinu R³, R³ znamená alkylovou skupinu s 1 aš 1O atomy uhlíku, alkylfenylovou skupinu s 1 aš 3 atomy uhlíku v al kýlovém podílu a R² bydroxylovou skupinu nebo skupinu obecného vzorce C(0)0R⁷, kde R⁷ má shora uvedený význam, se nechává reagovat transesterifikační reakcí sloučenina obecného vzorce VII,

    R^la0(O)C-CH₃-(R)Cgl-Aze-Pab-R² (VII) kde znamená R^la alkylovou skupinu s 1 až 10 atomy uhlíku nebo alkylfenylovou skupinu s 1 aš 3 atomy uhlíku v alky-

    • 9 • • 9 9 9 • 9 • • 9 • • 9 · 9 · 999 • ···♦ • · 9 9 • • • 9 9 9 9 ·♦·· 9 • 9 99

    ·· ·9

    9 9 · · • 9 99 • · · · • · · *· 99

    - ⁹² lovém podílu a R² má shora uvedený význam.
40. 40. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou látku obecného vzorce I podle nároku 1 až 38 nebo její farmaceuticky vhodnou sůl ve směsi s farmaceuticky vhodným pomocným činidlem, ředidlem nebo nosičem .
41. 41. Sloučenina podle nároku 1 až 38 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodná sůl pro použití jako farmaceuticky účinné látky.
42. 42. Sloučenina podle nároku 1 až 38 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodná sůl pro použití při ošetřování stavů, kdy je žádoucí inhibice thrombinu.
43. 43. Sloučenina podle nároku 1 až 38 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodná sůl pro použití při ošetřování thrombózy.
44. 44. Sloučenina podle nároku 1 až 38 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodná sůl pro použití jako antikoagulantu.
45. 45. Použití sloučeniny podle nároku 1 až 38 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli jakožto účinné látky pro výrobu léčiv pro ošetřování stavů, kdy je žádoucí inhibice thrombinu.
46. 46. Použití sloučeniny podle nároku 45 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli jakožto účinné látky pro výrobu léčiv pro ošetřování thrombózy.
47. 47. Použití sloučeniny podle nároku 1 až 38 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli jakožto účinné látky pro výrobu antikoagulantu.

    ·· ·· • · • 9 • · · • • • • · • • · * • · 9 • • ··· • · • • ···· • · • • · • ··· • • • • • • · • • • ·· · • *· • · ·· ' • ·
48. 48. Způsob ošetřování stavů, kdy je žádoucí Inhibice thrombinu, vyznačující se tím, že se podává terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1 až 38 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli osobě trpící nebo citlivé na takový stav.
49. 49. Způsob podle nároku 48, vyznačuj ící se tím, že se podává terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1 až 38 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli osobě trpící thrombózou.
50. 50. Způsob podle nároku 48, vyznačující se tím, že se podává terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1 až 38 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli osobě trpící schopností hyperkoagu1ace v krvi a ve tkáni.
51. 51. Použití sloučeniny podle nároku 1 obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli avšak bez uvedené výjimky jakožto prodrogy.