CZ131092A3

CZ131092A3 - Process for preparing 4-demethylepipodophylotoxin-glucoside-4'-phosphates

Info

Publication number: CZ131092A3
Application number: CS921310A
Authority: CZ
Inventors: Mark G Saulnier; John F Kadow; David R Langley; Min Min Tun
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1991-04-29
Filing date: 1992-04-29
Publication date: 1993-01-13
Also published as: NZ242059A; CA2062510A1; IL101188A; TW260671B; NO921363L; IL101188A0; NO178826B; KR920019812A; HUT63431A; AU658343B2; IE921285A1; AU653788B2; EP0511563A1; HU9300730D0; CN1030141C; FI921756A0; NO178826C; AU6898194A; AU1288692A; FI921756L

Description

Gclast techniky rředložený vynález se týká novéno způsobu vyroby sloučenin s protinádorovým účinkem, jakož i nových meziproduktu, které vznikají pri této vjrooě. Zejména je vynález zaměřen na nový způsoo a meziprodukty k přípravě 4-demethylepipodoťylotoxin-glukosid-4-ícsfá tů.

Dosavadní stav tecnniky

Stoposia a teniposid, dva deriváty 4-demethylepipodofylotoxin-glukosidu, jsou v současné době nejvíce užívány v klinické therapii rakoviny a etoposid je v současné době schválen ve Spojených státech k léčení malobuněčného karcinomu plic a karcinomu varlete. Avšak tyto sloučeniny mají velmi nízkou rozpustnost ve vodě, což způsobuje, že je obtížné je formovat do vnodných farmaceutických dávkovačích forem.

V patentu US 4 904 768 jsou popsána vodorozpustná proléčiva derivátů 4-demethylepipodofylotoxin-glukosidu nesoucí 4<fosfátovou skupinu, která jsou ilustrována etoposid-4-fosfátem. Etoposid-4-fosfát byl připraven reakcí etoposidu s oxy chloridem fosforečným a následnou hydrolýzou, nebo reakcí etoposidu s difenylchlorfosfátem a následnou hydrogenací za účelem odstranění fenylových skupin.

Etoposid-4-fosfát je rovněž zmíněn v Japanese Kokai 63/192 793 /publ. 10.8.1988/ a byl připraven reakcí 2 *,*3*bis-Q-/2,2,2-trichlorethoxykarbonyl/etoposidu s oxychloridem fosforečným a následnou hydrolýzou a odštěpením skupin chránících hydroxyskupiny cukru zpracováním se zinkem.

Výchozí látky použité ve shora uvedených postupech se získají kondenzací 4-chráněného 4-demethylepipodofylotóxinu s hydroxychráněnou ethyliden-/3 -D-glukopyranosou a následujícím odstraněním alespoň 4-chránící skupiny. S překvapením a neočekávaně autoři zjistili, že fenolická 4-hydroxyskupina 4-demethylepipodofylotoxinu se může cnránit formou triesteru kyseliny fosforečné, který se po kondenzaci s glukopyranosylo vým zbytkem může odštěpit a poskytne přímo etoposid-4-fosfát. Uvedený postup eliminuje nutnost samostatné protekce a deprotekce 4-fenolické hydroxyskupiny 4-demetnylepipodofylotoxinu, a proto představuje ekonomičtější a účinnější cestu než ostat z

ní známé způsoby výroby etoposid-4-fosfátu.

Podstata vynálezu

Předložený vynález se týká způsoou výroby sloučeniny

(IV), kde dvě skupiny fí společně znamenají alkylidenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, nebo její farmaceuticky přijatelné soli, nebo jejího solvétu, který spočívá v tom, že se nechá reagovat sloučenina obec ného vzorce II

?Λ0 kde R¹ je skupina chránící hydroxyskupinu, nebo dvě skupiny R¹ znamenají společně alkylidenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku a R² je skupina chránící hydroxyskupinu, se sloučeninou obecného vzorce III

(III), kde r3 je skupina chránící fosfátovou skupinu, v přítomnosti Lewisovy kyseliny, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I

O \ n o³ ll^c-³ o

odstraní se skupiny chránící hydroxyskupinu a když R¹ znamená skupinu chránící hydroxyskupinu, nechá se výsledný produkt reagovat s karbonylovou sloučeninou mající 1 až 5 atomů uhlíku nebo s jejím acetalovým nebo ketalovým ekvivalentem a skupiny chránící fosfátovou skupinu se odstraní.

Dalším aspektem předloženého vynálezu je nový způsob * * přípravy chráněného 4-demethylepipodofylotoxin-glukosid-4fosfátu, meziproduktu vzorce I, který spočívá v reakci gluko pyranosy s chráněnou hydroxyskupinou vzorce II a 4-demethylpodofylotoxin-4-fosfátu s cnráněnou fosfátovou skupinou v přítomnosti Lewisovy kyseliny.

Předložený vynález zahrnuje rovněž nové sloučeniny vzorců I a II.

Předložený vynález řeší zdokonalený způsob přípravy 4-demethylepipodofylotoxin-glukosid-4-fosfátů, jejich farma5 ceuticky přijatelných solí a solvátů, zejména je tento způsoo vhodný pro přípravu etoposid-4-fosfátu, včetně jeho farmaceuticky přijatelných solí a solvátů. Zde užitý výraz farmaceuticky přijatelné soli zahrnuje mono- neoo di- soli alkalických kovů, soli kovů alkalických zemin, výhodnou farmaceuticky přijatelnou solí je dvojsodná sůl. Solváty se tvoří krystalizací nebo rekrystalizací z organických rozpouštědel, jako je ethanol, nebo z vody /hydráty/. Výraz alkyliden zahrnuje přímý nebo rozvětvený uhlíkový řetězec, například ethyliden, propyliden a isopropyliden. Výrazu 4-demethylpodofylotoxin, pokud není uvedeno jinak, by se melo rozumět tak, že zahrnuje 4-demethylpodofylotoxin a 4-demethylepipodofylotoxin jednotlivě i ve směsi.

Způsob podle předloženého vynálezu zahrnuje reakci 4demethylpodofylotoxinu s chráněnou fosfátovou skupinou vzorce III s hydroxychráněnou glukopyranosou vzorce II v přítomnosti Lewisovy kyseliny, poskytující meziprodukt vzorce I.

Skupiny chránící hydroxyskupiny a fosfátovou skupinu mezipro* duktu se potom odštěpí přímo za vzniku 4-demetnylepipodofylotoxin-glukosid-4-fosfátu vzorce IV, když dvě řt¹ skupiny společně znamenají alkylidenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, neboykdyž znamená chráněnou hydroxyskupinu, nechá se produkt reagovat s vhodnou karbonylovou sloučeninou nebo jejím acetalovým neoo ketalovým ekvivalentem, za vzniku sloučeniny vzorce IV.

Skupina chránící fosfátovou skupinu ve sloučeninách vzorců I a III může být kterákoliv skupina známá pro tento účel, příklady takových skupin jsou, aniž by se omezovaly pouze na ně, 2,2,2-trichlorethyl, fenyl, substituovaný fenyl, benzyl a substituovaný benzyl; substituenty mohou být jedna nebo více skupin vybraných ze skupiny methoxy, nitro a methyl. Výhodně je skupinou chránící fosfátovou skupinu fenylová neoo benzylová skupina a nejvýhodněji benzylová skupina.

Skupinou chránící nydroxyskupinu ve sloučeninách vzorců I a II může být kterákoliv z konvenčně používaných skupin a zahrnuje, aniž by se omezovala pouze na ně, ethery, jako methyl, t-butyl, benzyl, p-methoxybenzyl, p-nitrobenzyl, allyl, trityl, methoxymethyl, methoxyethoxymethyl, ethoxyethyl, tetrahydropyranyl, tetranyhrothiopyraný1 a trialkylsilylethery, jako trimethylsilylether a t-outyldimethylsilylether, estery, jako benzoyl, acetyl, fenylacetyl, formyl, mono-, di- a trihalogenacetyl, jako chloracetyl, dichloracetyl, trichloracetyl, trifluoracetyl a estery kyseliny uhličité, jako methyl, ethyl, 2,2,2-trichlorethyl, benzyl a p-nitrofenyl. Výhodnější chránící skupinou nydroxyskupiny je taková, která se obvykle používá v chemii podofylotoxinu; příklady takových skupin, které mohou být zmíněny zahrnují, ale nevymezují, benzylskupina, estery, jako alkanoylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku a halogenovaná alkanoylová skupina se 2 až 3 atomy uhlíku, napr. formyl, acetyl, mono-, di- a trihalogenacetyl a alkylkarbonát s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylu nebo halogenovaný alkylkarbonát s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylu, jako je ethyl a mono-, di- a trihalogenethylkarbonát. Halogen zahrnuje fluor, brom, chlor a jod. Nejvýhodnější chránící skupinou hydroxyskupiny je 2,2,2-trichlorethylkarbonát /t.j. 2,2,2-trichlorethoxykarbonylová skupina/.

Sloučeniny vzorce III se mohou získat reakcí 4-demethylpodofylotoxinu s chlorf osfátem CÍP/0//0^/^, kde R^ má dříve uvedený význam. Reakce se provádí v inertním organickém rozpouštědle, jako je acetonitril, při teplotě okolí a v přítomnosti akceptoru kyseliny, např. báze terciárního aminu, jako je diisopropylethylamin. Ilustrací tohoto ooecného postupu je reakce 4-demethylepipočofylotoxinu s difenylchlorfosfátem v přítomnosti diisopropylethylaminu v acetonitrilu při teplotě místnosti za vzniku 4-demethylepipodofylotoxin-4-difenylfosfátu.

Stereochemická konfigurace v poloze 1 výchozí látky vzorce III není kritická, jelikož kondenzací sloučeniny vzorce II se sloučeninou vzorce III za uvedených podmínek obvykle vzniká produkt mající požadovanou konfiguraci v poloze 1, t.j. epipodofylotoxin. Výchozím materiálem může být tudíž 4-demethylepipodofylotoxin s chráněnou fosfátovou skupinou, 4-demethylpodofylotoxin s chráněnou fosfátovou skupinou nebo jejich směs.

Deriváty tetra-O-chráněné^-D-glukopyranosy vzorce II a způsoby jejich přípravy jsou obecně známy ze stavu techniky. Sloučeniny vzorce II, kde dvě skupiny R‘ společně znamenají alkylidenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku se mohou rovněž připravit známými způsoby, například reakcí glukosy s vhodnou karbonylovou sloučeninou, nebo s jejím acetalovým nebo ketalovým ekvivalentem, v přítomnosti kyselého katalyzátoru, za vzniku cyklického acetalu a následným zavedením chránících skupin hydroxyskupiny R . Karbonylovou sloučeninou může být například acetaldehyd, propionaldehyd nebo aceton a jejich ekvivalenty, jako paraldehyd, acetaldehyddimethylacetal a acetondimethylacetal. Tak například D-glukosa se nechá reagovat s paraldehydem v přítomnosti minerální kyseliny, např. kyseliny sírové, za vzniku 4,6-0-ethyliden-D-glukosy, která se nechá reagovat s hydroxidem sodným a potom s benzylchlormravenčanem, aby se přeměnila anomerní hydroxyskupina na benzylkarbonát. Vzniklá sloučenina se zpracuje s 2,2,2-trichlorethylchlormravenčanem a výsledný produkt se podrobí katalytické hydrogenaci za vzniku 4,6-0-ethyliden2,3-bis-O-/2,2,2-trichlorethoxykarbony1/-/5-D-glukopyranosy. Tato sloučenina je rovněž uvedena v Japanese Kokai J58-225 096.

Kopulace chráněné glukopyranosy vzorce II a chráněného 4-demethylpodofylotoxin-4-fosfátu vzorce III za vzniku sloučeniny vzorce I se provádí v inertním organickém rozpouštědle a v přítomnosti Lewisovy kyseliny, výhodně v přítomnos8 ti oorrrifluoridetherátu. Rozpouštědlem je s výhodou halogenovaný uhlovodík, jako methylenchlorid, dichlorethan neoo chloroform. Reakční teplota je oovykie pod 0 °C a vhodná je teplota asi -15 až asi -25 °C.

Skupiny chránící hydroxy- a fosfátové skupiny sloučenin vzorce I se potom odštěpí, čímž se získají odpovídající f A deriváty 4-demethylepipodofylotoxin-glukosid-4-fosfstu. Odštěpení chránících skupin /deprotekce/' se může uskutečnit způsoby obecně známými ze stavu techniky a příklady takových způsobů mohou jmenovitě zahrnovat hydrolýzu, hydrogenací, nydrogenolýzu, redukci apod. Např. 2,2,2-trichlorethoxykarbonylová skupina chránící hydroxyskupinu se může odstranit zinkovým činidlem, jako je zinek a kyselina octová; fenylová a oenzylová skupina chránící fosfátovou skupinu se mohou odstranit katalytickou hydrogenolýzou a benzylová skupina se může odstranit rovněž katalytickou transhydrogenací za použití paladia na uhlí a činidlem jako je 1,4-cyklohexadien a 1-metnyl1,4-cyklohexadien. V závislosti na druhu chránících skupin se může odštěpení chránících skupin /deprotekce/ uskutečňovat postupně, v kterémžto případě pořadí odštěpování není zvlášť rozhodující, nebo, je-li to žádoucí, odstraní se chránící skupiny v jediném stupni.

Znamená-li R¹ chránící skupinu hydroxyskupiny, nechá se sloučenina po odštěpení skupiny chránící hydroxyskupinu reagovat s vhodnou karbonylovou sloučeninou, např. acetaldehydem, propionaldehydem, acetonem nebo jejich acetalovým nebo ketalovým ekvivalentem, jako je paraldehyd, acetaldehyddimethylacetal a acetondimethylacetal, v přítomnosti kyselého katalyzátoru, za tvorby odpovídající sloučeniny vzorce IV.

V charakteristickém provedení ilustrujícím uvedený postup se 4-demethylepipodofylotoxin-4-aifenylfosfát podrobí reakci s 4,ú-Q-ethyliden-2,3-bis-0-/2,2,2-trichlorethoxykar- 9 bonyl/-D-glukopyranosou v dichlorethanu při -20 °C v přítomnosti bortrifluoridetherátu, čímž se získá 2,3-bis-O-/2,2,2trichlorethoxykarbonyl/etoposid-4-difenylfosfát. Zpracováním se zinkem a kyselinou octovou se odstraní 2,2,2-trichlorethoxykarbonylskupiny, následující katalytickou hydrogenolýzou se odstraní fenylskupiny a získá se etoposid-4-fosfát. V dalším příkladu, kdy je jako skupina chránící fosfátovou skupinu použita benzylová skupina, odstraní se tato katalytickou transhydrogenací např. s použitím paladia na uhlí a 1-methy11,4-cyklohexadienu.

4-Demethylepipodofylotoxin-glukosid-4-fosfát vzorce IV se může převést na svou farmaceuticky přijatelnou sůl uvedením do styku se zdrojem vhodného kationtů, napr. zpracováním sloučeniny s bází, jako je uhličitan sodný, rezultuje ve formě své sodné soli. Solváty 4-demethylepipodofylotoxin-glukosid4-fosfátu vzorce IV se mohou získat rovněž krystalizací nebo rekrystalizací z organických rozpouštědel nebo z vody; tak například diethanolát etoposid-4-fosfátu se může získat z nasyceného roztoku etoposid-4-fosfátu v rozpouštědlovém systému obsahujícím ethanol.

Dalším aspektem předloženého vynálezu jsou nové sloučeniny obecného vzorce I

< i \

kde R¹ je skupina chránící hydroxyskupinu, něho dvě skupiny R¹ společně znamenají alkylidenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, R² je skupina cnránící hydroxyskupinu a íP je skupina chránící fosfátovou skupinu. Výhodně znamená R^ alkylidenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, R^ je chránící skupina hydroxyskupiny vybraná ze skupiny zahrnující benzyl, alkanoyl s 1 až 3 atomy uhlíku, halogenovaný alkanoyl s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxykarbonyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxyskupině a halogenovaný alkoxykarbonyl s 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxyskupině a R^ je vyorán ze skupiny zahrnující fenyl, substituovaný fenyl, benzyl a substituovaný benzyl. Výnodněji znap 3 mená R halogenovaný ethoxykarbonyl a R fenyl nebo benzyl,

2 nejvýhodněji znamenají dvě R společně.ethyliden, R je

2,2,2-trichlorethoxykarbonyl a R^ je benzyl.

Dalším aspektem předloženého vynálezu jsou nové sloučeniny vzorce III

(III) kde R^ znamená chránící skupinu fosfátové skupiny, výhodně je R^ vybrán ze skupiny zahrnující fenyl; substituovaný fenyl, benzyl, substituovaný benzyl a 2,2,2-trichlorethyl; výhodněji znamená ΐΡ fenyl nebo benzyl a nejvýhodněji znamená benzyl.

Následující příklady slouží k plnější ilustraci předloženého vynálezu a nepředstavují v žádném směru omezení rozsahu vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

4-Demethylepipodofylotoxin-4-difenylfosfát /sloučenina 1/

K roztoku 1 ,44 g 4-demethylepipodofylotoxinu, připravenému z podofylotoxinu způsobem popsaným v Helv. Chim. Acta. 152, s.944, 1969,ve 25 ml suchého acetonitrilu se přidalo 941 yul diisopropylethylaminu a 821 yul difenylchlorfosfátu. Směs se míchala při teplotě místnosti 16 hodin a zahustila se ve vakuu. Zbytek se rozpustil v C^Clg a promyl se vodou a solným roztokem. Čištění se provedlo středotlakou chromatografií na silikagelu za použití 2 % MeOH v a dále krystalizací z EtOAc v hexanu. Neoptimalizovaný výtěžek čisté sloučeniny 1 byl 700 mg /ca 30 %/.

HRMS vypoč. pro C-,-,Η^^Ο..Ρ /Μ + H/ : 633,1 526

3330^11 nalez.:

633,1532

Příklad 2

2

4-hemetnylepipodofylotoxin-4-dibenzylfosfát /sloučenina 2/

Dibenzylchlorfosřát /6 ekviv./ se čerstvě připravil z ekvimolarních množství N-chlorsukcinimidu a dibenzylfosfítu zahříváním pod zpětným chladičem ve 150 ml CH^C^ po dobu 20 minut. Tato směs se zfiltrovala a filtrát se přidal k roztoku 1 ,22 g 4-demethylepipodofylotoxinu, 1,7 ml diisopropylethylaminu a 37 mg 4-dimethylaminopyridinu v suchém acetonitrilu. Směs se míchala 16 hodin a potom rozdělila pomocí nasyceného NaHCO^. Organické extrakty se promyly vodou a solným roztokem a vysušily nad Na2SO^. Čištění se provedlo mžikovou chromatografií na silikagelu za použití 1 % MeOH v CH2CI2 a dále krystalizací z EtOAc, 10 % MeOH v a dále krystalizací z EtOAc, 10 % MeOH v CH₂C1₂ a hexanu. Neoptimalizovaný výtěžek čisté sloučeniny 2 byl 760 mg /ca 38 %/.

^]H-NMH /CLC1₃/ ξ 7,37-7,27 /rn, 1 OH/, 6,83 /s,

1H/, 6,49 /s, 1H/, 6,27 /s, 2H/, 5,96 /d, 2H/, 5,25 - 5,17 /m, 4H/, 4,82 /d, 1H, J=3,3Hz/, 4,60 /d, 1H, J=5Hz/, 4,40 4,30 /m, 2H/, 3,62 /s, 6H/, 3,28 /dd, 1H, J=13 a 5Hz/, 2,77 2,68 /m, 1H/.

Hmot. spektrum, m/e = 661 /M⁺ + H/.

Příklad 3

2'' 3*-bis-O-/“2,2,2-trichlorethoxy/karbonyl_/-etoposid-4difenylfosfát /sloučenina 3/

K suspenzi 50 mg sloučeniny 1 a 45 mg 4,6-O-ethyliden2,3-bis-O-/”/2,2,2-trichloretnoxy/karbony1_7- -D-glukopyranosy v 0,5 ml suchého 1,2-dichlorethanu se při -20 °C pod argonem přidalo po kapkácn 27 yul oortrifluoridetherátu během 5 minut. Po dvou hodinách při -20 °C se směs zchladila

-ul pyridinu a necnala se zahřát na teplotu místnosti.

Směs se zředila 20 ml CH~C1₂ a promyla se dvakrát studenou 1N kyselinou chlorovodíkovou, vodou a solným roztokem a vysušila se nad MgSO^. Přečištění pomocí preparativní TLC, za použití 1 % MeOH v CH₂C1₂, poskytlo 74,5 mg /80,5 %/ čisté titulní sloučeniny 3.

IR /K3r/ 1778, 1600, 1488, 1284, 1260, 1232, 1190, 1162,

1132, 958, 822, 774 cm¹.

^H-NMR /CBC1₃/ cf 7,35 - 7,15 /m, 10H/, 6,72 /s, 1H/, 6,47 /s, 1H/, 6,15 /s, 2H/, 5,98 /s, 2H/, 4,88 /d, 1H/, 4,82 - 4,45 /m, 7H/, 4,35 /m, 1H/, 4,25 - 4,18 /m, 2H/, 3,80 - 3,49 /m, 4H/, 3,48 /s, 6H/, 3,41 - 3,37 /m, 1H/, 3,13 /dd, 1H,,J=14,1 a 5,2Hz/, 2,86 - 2,76 /m, 1H/, 1,31 /d, 3H, J=5Hz/.

Hmot. spektrum, m/e = 1171 /M⁺ + H/.

Příklad 4 *,*3 *-bis-O-/”/2,2,2-trichlorethoxy/karbonyl_7-etoposid-4dibenzylfosfát /sloučenina 4/

Postup popsaný v příkladu 3 byl opakován s použitím 145 mg sloučeniny 2a 135 mg 4,6-O-ethyliden-2,3-bis-O-/”/2,2,2-trichlorethoxy/karbonyl_7-/3-D-glukopyranosy v 1,5 ml suchého 1,2-dichlorethanu s 74 /ul bortrifluoridetherátu a poskytl 240 mg čisté titulní sloučeniny 4.

IR /K3r/ 1768, 1599, 1505, 1485, 1458, 1420, 1381, 1338,

1260, 1229, 938, 818 cm¹.

- I + H-NMH /CDCl-j/

7.35 - 7,25 /ώ, 10H/, 6,75 /s, 1H/, 6,51 /s, 1H/, 6,22 /s, 2H/, 5,58 /s, 2H/, 5,24 5,14 /m, 4H/, 4,91 /d, 1H/, 4,83 - 4,47 /m, 7H/, 4,37 /m, 1H/, 4,24 - 4,20 /ra, 1H/ 3,80 - 3,45 /m, 4H/, 3,62 /s, 6H/, 3,44 3.35 /m, 1H/, 3,15 /dd, 1H, J=14 a 5,2Hz/, 2,88 - 2,78 /m, 1K/, 1,31 /d, 3’H, J=4,9-Hz/

Hmot. spektrum, m/e = 1199 /Μ + H/.

Příklad 5

Etoposid-4-difenylfosfát

K roztoku 200 mg sloučeniny 3 v 8 ml suchého THF se pod dusíkem při teplotě místnosti přidalo 468 mg práškovitého zinku a dále 4,8 ml kyseliny octové. Na reakční směs se při teplotě 25 až 30 °C působilo 30 minut ultrazvukem a potom se směs míchala 3 hodiny při teplotě místnosti. Potom se směs zfiltrovala přes Celit a promyla 200 ml CH₂C1₂. Filtrát se promyl nasyceným roztokem NaHCO-, vodou a solným roztokem a vysušil se nad MgSO^. Odpařením ve vakuu a následující mžikovou chromatografií na silikagelu za použití 0 až 3 % MeOH v CH₂C1₂ se získalo 116 mg /83 %/ čisté titulní sloučeniny.

Konverze titulní sloučeniny na etoposid-4-fosfát je popsána v patentu US 4 904 768.

Příklad 6

Etoposid-4-dióenzylfosfát

Postup popsaný v příkladu 5 se opakoval s použitím roztoku 152 mg sloučeniny 4 ve 2 ml suchého dioxanu, 315 mg zinkového pracnu a 1,2 ml kyseliny octové a získalo se i 26 mg /66 .J čisté titulní sloučeniny.

Příklad 7

Stoposid-4-fosfát

Roztok 500 g 4-dibenzylfosfátetoposidu /0,59 mol/ ve 2 1 metnanolu se přidal k suspenzi 50 g 10 % Pd/C v 1 1 methanolu a suspenze se zahřála na asi 37 °C. K této suspenzi se pomalu přidal roztok 1-methyl-1,4-cyklohexadienu /555 g,

660 ml, 5,89 mol, 10 ekv./ v 1 1 methanolu a suspenze se míchala při teplotě 40 až 45 °C dokud se reakce neukončila, což bylo stanoveno pomocí TLC. Reakční směs se zfiltrovala a objem filtrátu se upravil na asi 1 1 zahuštěním nebo přídavkem dalšího methanolu a výsledný roztok se potom přidal ke 4 1 absolutního ethanolu. Roztok se naočkoval referenčním *

standardem etoposid-4-fosfátu a zahustil se na asi 2,5 1.

K suspenzi se přidalo 3,5 1 absolutního ethanolu a suspenze se při asi 20 °C míchala 18 - 72 hodin. Pevná látka se oddělila filtrací, promyla dvakrát 250 ml absolutního ethanolu a sušila za vakua 18 hodin při 2 asi 20 °C. Získalo se 300 - 350 g titulní sloučeniny jako diethanolátu /80 - 90 % výtěžek/.

Teplota tání: 141 - 150 °C /ztráta rozpouštědla/; 160 - 172 °C /tání/.

Zbytek ethanolu: 11,8 % /pomocí NMR/; 13,2 % /thermogravimetrickou analýzou/. Vypoč. pro ^C29^H33°i6^p · ^{2 G}2^H6° ^12,1

Obsah vlhkosti: 0,22 % metodou podle Karl Fischera.

Claims

PATENTOVÉ

NÁROKY

1 . Způsob výroby sloučeniny obecného vzorce IV /o ΑΛ3Γ90 Y AzaivN/.. cud dvyn (IV),

1 a kde dvě skupiny R společně znamenají alkylidenovou skupinu o 1 až 5 atomech uhlíku, nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo solvátu, vyznačující se tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II kde R¹ je skupina cnránící hydroxyskupinu, nebo dvě skupiny r' znamenají společně alkylidenovou skupinu o 1 až 5 atomech o uhlíku a R je skupina chránící nydroxyskupinu, se sloučeninou-obecného vzorce III

1 7 (III), kde R·^ je skupina chránící fosfátovou skupinu, v přítomnosti Lewisovy kyseliny za vzniku sloučeniny obecného vzorce I odstraní se skupiny cnránící Hydroxyskupiny, a když R¹ znamená skupinu cnránící hydroxyskupinu, nechá se výsledný pro1 s dukt reagovat s karbonylovou sloučeninou mající 1 az 5 atomů uhlíku nebo s jejím ketalovým nebo acetalovým ekvivalentem a skupiny chránící fosfátovou skupinu se odstraní.
2. Způsob podle nároku 1 pro přípravu sloučeniny obec ného vzorce IV, kde dvě skupiny R^ znamenají alkyiidenovou skupinu o 1 až 5 atomech unlíku, je vybrán ze skupiny zahrnující benzyl, alkanoyl o 1 až 3 atomech uhlíku, halogenovaný alkanoyl o 1 až 3 atomech uhlíku, alkoxykarbony1 o 1 až
3 atomech uhlíku a halogenovaný alkoxykarbonyl o 1 až 3 ato, o mech uhlíku a R je vybrán ze skupiny zahrnující fenyl, substituovaný fenyl, benzyl, substituovaný benzyl a 2,2,2-trichlorethyl.

3. Způsob podle nároku 1 pro přípravu sloučeniny obec ného vzorce IV, kde dvě skupiny R^ znamenají ethylidenovou skupinu, R je 2,2,2-trichlorethoxykarbonyl a R^J je fenyl nebo benzyl.
4. Způsob podle nároku 3,vyznačující se t í m, že je benzyl.
5. Způsob podle nároku 1,vyznaču jící se tím, že Lewisovou kyselinou je bortrifluoridetherát.
6. Způsob podle nároku 2,vyznačující se t í m, že Lewisovou kyselinou je bortrifluoridetherát.
7. Způsob podle nároku 3,vyznačující se tím, že Lewisovou kyselinou je bortrifluoridetherét.
8. Způsob podle nároku 4,vyznaču jící se tím, že Lewisovou kyselinou je portrifluoridetherát.
9. Způsob podle nároku 7,vyznačující se tím, že skupiny chránící Hydroxyskupinu se odstraní zinkovým činidlem a skupiny cnránící fosfátovou skupinu se odstraní katalytickou nydrogenolýzou.
10. Způsob podle nároku 8,vyznačující se t í m, že skupiny chránící hydroxyskupinu se odstraní zinkovým činidlem a skupiny chránící fosfátovou skupinu se odstraní katalytickou transferovou hydrogenací.
11. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I vyznačující s e tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II ΰ

se sloučeninou obecného vzorce III (III), v přítomnosti Lewisovy kyseliny, kde je skupina cnránící hydroxyskupinu, neoo dvě skupiny R¹ společně znamenají alkylidenovou skupinu o 1 až 5 atomech uhlíku,

R je chránící skupina hydroxyskupiny a R^ je chránící skupina fosfátové skupiny.
1 2.

Způsob podle nároku 1I pro přípravu sloučeniny vzor ce I, kde dvě skupiny R¹ znamenají alkylidenovou skupinu o 1 až 5 atomech uhlíku, R je vybrán ze skupiny zanrnujíci benzyl, alkanoyl s 1 až 3 atomy uhlíku, halogenovaný alkanoyl s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxykarbonyl s 1 až 3 atomy unlíku a halogenovaný alkoxykarbonyl a 1 až 3 atomy unlíku a R^ je vybrán ze skupiny zahrnující fenyl, substituovaný fenyl, benzyl, substituovaný benzyl a 2,2,2-trichloretnyl.
13. Způsob podle nároku 11 pro přípravu sloučeniny vzorce I, kde dvě skupiny R znamenají ethylidenovou skupinu, R je 2,2,2-trichlorethoxykarbonyl a R^ je fenyl nebo benzyl.
14. Způsob podle nároku 11,vyznačující se tím, že Lewisovou kyselinou je bortrifluoridetherát.
15. Způsob podle nároku 12,vyznačující se tím, že Lewisovou' kyselinou je bortrifluoridetherát.
16. Způsob podle nároku 13,vyznačující se tím, že Lewisovou kyselinou je bořfrifluoridetherát.
17. Sloučenina obecného vzorce I kde

R¹ je skupina chránící hydroxyskupinu, nebo dvě skupiny R¹ společně znamenají alkylidenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku,

R² je skupina chránící hydroxyskupinu a fp je skupina cnránící fosfátovou skupinu.

*
18. Sloučenina podle nároku 17, kde dvě skupiny R^ spo léčně znamenají alkylidenovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, R² je vybrán ze skupiny zahrnující benzyl, alkanoyl s 1 až 3 atomy uhlíku, halogenovaný alkanoyl s 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxykarbonyl s 1 až 3 atomy uhlíku a halogenovaný alkoxykaroonyl s 1 až 3 atomy uhlíku a R-3 je vybrán ze skupiny zahrnující fenyl, substituovaný fenyl, benzyl, substituovaný benzyl a 2,2,2-trichlorethyl.
19.

Sloučenina podle nároku 17, kde dvě skupiny R¹ spo léčně znamenají ethylidenovou skupinu, R je 2,2,2-trichlorethoxykarbonyl a je fenyl nebo benzyl.

Sloučenina obecného vzorce III
20.

!' (III) kde

R^ je skupina cnránící fosfátovou skupinu.
21. Sloučenina podle nároku 20, kde R^ je vybrán ze skupiny zahrnující fenyl, substituovaný fenyl, benzyl, substituovaný benzyl a 2,2,2-tricnlorethyl.
22. Sloučenina podle nároku 20, kde R^ je fenyl nebo benzyl.