CZ124494A3 - Process for preparing ester of prolineboric acid, intermediate employed in this process and process for preparing such intermediate - Google Patents

Description

Způsob výroby esterů kyseliny .prolinborité, meziprodukt pro tento způsob' a způsob jeho výroby'

Oblast techniky

Vynález.se týká způsobu výroby opticky aktivních esterů kyseliny prolinborité.. Tyt.o látky jso.u užitečné jako meziprodukty , pro výrobu peptidů,. které obsahují, kyselinu prolinboritou· místo prolinu.. Peptidy tohoto typu . je možno použít k ínnibici různých.·, z biologického hlediska významných proteáz.

Dosavadní stav techniky

Zájem o analogy alřa-aminokyselin s obsahem kyseliny · borité a o peptidy, obsahující kyselinu boritou,· vázanou na alf a-aminokyseli.ny v místě C-zakončení byl vzbuzen zprávami, že tyto látky jsou' účinnými inhibitory řady proteáz, zejména serinových proteáz, jak'bylo popsáno například v Matťéson a .další, J. AmvChem·. Soc., 103, 5241, 1981, Kettn< a další, J. Biol. Chem., 259, 15106,1984 a Kinder á další, J. Med. Cnem., 27, 1919, 1985.

Řada publikací, například Koehler a další, Biochemísťry’, 10,2477, 1971 a Rawn a další, Biochemistry',· 13, 3124, 1974 uvádí,..že prázdná ρ-orbita^ centrovaná na atomu boru těchto sloučenin se dostává do interakce š hydroxylovou skupinou, která je .aktivním místem enzymu, čímž vzniká'čtyřboký adiční produkt, který nápodobuje přechodný stav enzymatické hydrolýzy. Je pravděpodobné, že- se analog -kyseliny borité váže s větší afinitou k enzymu'než samotný substrát,'takže dochází, k inhibici působením enzymu na přirozený substrát.

Analogy alfa-aminokyselin s obsahem kyseliny borité á peptidy, které tyto analogy obsahují se běžně používají ve výzkumu vzhledem k tomu, že pomáhají osvětlit biologické-funkce enzymů,. k je jichž inhibici působením .tě.cht.o látek dochází. Mimoto.

jak bude'dále vysvětleno, bude patrně možno tyto -látky použít k léčebným účelům.

Pebtidy, které obsahují“analog prolinu s obsahem kyseliny borité ná alfa-aminoskupině na C-zakcnčéhí (BoroPro) -*· jsou- zvláště zajímavé vzhledem k tomu', 'že'běží o účinné inhibit.or y^ něk t e rý-ch.enzymů, které Štěpí_bilkovány za prolinovým' zbytkem. V-publikaci-Bacftovchih á další-,'-J ._; Biol.'.' Chem. 265, 3738/ 1990 se uvádí, , že takové peptidy’jsou inhibitory IgA proteináz z některých bakterií. Účinnost těchto enzymů je jedním z hlavních faktorů virul.ence bakterií. V publikaci Flentke á další, Proč.'.Nati. Sci. USA, 88, 1556, 1991 se uvádí, že peptidy tohoto typu způsobují inhibici dipeptidylpeptidázy IV (DP-IV), která působí inhibici -proliferace, vyvolané, působením antige,nu a produkci IL-2 v T-buňkac-h.

Je známo, že výsledkem .dvou posledně uvedených účinků je potlačení imunologické odpovědi, Pótlační této.odpovědi, může být užitečné napříkládtk 'léčbě odmítnutí transplanto Jf* váného:orgánu, k dosazení^r'lep.ší životnosti štěpů a v případě různých autoimunologických onemocnění. '

Dříve zhá'mésýh'teTické postupy' pro výrobu aTfa^“aml no bor.itých kyselin jsou .'založeny na .postupu, který, byl uveden v publikaci Matteson· a další, 1981, tak jak byla svrchů uvedena, postup spočívá v-tom, že se nejprve vytvoří hyórogenboritan, pak (asymetrický) homolog s chlormethyllithiem a pak se uskuteční 'aminolýza. V publikaci Matteson a další, Organometallics, 3,. .1284, 1984 se popisuje použití tohoto postupu· k přípravě analogu kyseliny -borité v případě N-acetyl g

s f

alaňinu, N-acetylvalinu, N-acetylleucinu a N-acetylfenylalaninu. Některé z těchto látek hýly získány s výhodným poměrem diastereomerů 9:1.

Aplikace Mattesonova postupu na přípravu, BcroFro byla uvedena ve svrchu popsaných publikacích' Bachovachina a Flentkeho, avšak rozsáhlé modifikace, jichž je zapotřebí ke konstrukci pyrrolidinového kruhu činí tento postup prakticky neupotřebitelný. Mimoto dosud'nebyly popsány podmínky, jimiž by bylo možno získat jedén-z enanciomerů BoroPro, a to asymetrickou syntézou nebo dělením.

Snahy dále objasnit biochemii enzymů, štěpících bílkoviny za prolinovým. zbytkem, zvláště DP-IV a také snahy zjistit možnost případného léčebného použití inhibitorů . ·.

těchto enzymů na bázi BoroPro jsou zpomalovány .tím, že není k dispozici vhodný postup pro výrobu kyseliny .prolinborité.

Snahazískat BoroPro účinným· způsobem vedle k hledánídalších postupů pro výrobu této látky, zejména v opticky g aktivní ..formě. ‘

Podstata vynálezu

- Vynález se týká tří blízce příbuzných postupů pro výrobu esterů kyseliny prolinborité. Výchozí látkou pro dva z těchto postupů je pyrrol, výchozí látkou pro třetí z nich je pyrrolidin. Do oboruvynálezu spadají také některé nové.meziprodukty, které se v průběhu těchto postupů' používájíZ'Kýšeliňá prolinboritá má střeďchirality v poloze alfa vzhedem k atomu boru.. V širším smyslu se vynález týká také způsobu dělení enanciomerů kyseliny prolinborité v případě potřeby... V průběhu tohoto postupu se ester kyseliny

4· prolinborité vytvoří reakcí s'chirálním alkoholem, zvláště výhodnou látkou je pinandiol. Rozdělení enanciomerů je možno usnadnit oddělením diastereomerní směsi, která je výsledkem 'zavedení'dalšího středu chirality. Takto získané- estery kyseliny prolinborité je možno snadno vázat na' aktivované .karboxylové skupiny, tak jak se této reakce typic ky'využ.ívá'-při· syntéze pěp-tiďů, čímž vznikají-peptidy; které' mají,.na/svém^C-Zakončení .místo...aminokyseliny ester kyseliny prolinborité. ·Ochrannou .skupinu na esterové‘skupině je .možno. ..odště-pit,' S-í-m-ž se- z-í-s-k-á 'pept-í-d s ’νοίηοα skupinou 'kyseliny borité. V případěže ochrannou skupinou na esterové skupiriěVje’ pinandiol, není možno tuto'.skupinu snadno odstranit známým způsobem.· Vynález ť-e.dy rovněž navrhuje několik, .. postupů k odštěpení pinandiolové ochranné skupiny.

Přehled obrazů na výkresech

Na obr. 1 je znázorněno reakční schéma, které uvádí výhodné provedení vynálezu.

Podrobný'popis reakce , , .

První syntetický postup podle vynálezu využívá jako výchozí látku pyrrol, který se uvede do reakce s aktivova' ným _ denivát em__; karboxylové ky.se l.inyu-.k .ochraně-· dusí-ko.v-ého· -. atomu skupinou obecného vzorce -COOR, kde R znamená alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, cyklbalkyl o 3 až.. 6 atomech uhlíku, benzyl, fenyl, popřípadě substituovaný jednou nebo větším počtem alkylových skupin o 1 až 6 atomech uhlíku nebo trimethylsilylethyl, čímž se získá sloučenina následujícího obecného vzorce'I

Ve výhodných ochranných skupinách znamená R terč.butyl, benzyl, trimethylsilyletnyl, fenyl, methyl nebo ethyl. Nejvýhodnější-ochrannou skupinou je terč.butyloxy- karbonyl nebo Soc. Ochranné 'skupiny se zavádějí známým způsobem..Specifická syntéza' 1-BOc-pyrrolu byla popsána v publikaciGrehn a další, Angew. Chem. Int. Ed. Eng.,, 23, 295,'1984.

Na sloučeninu obecného vzorce I se pak působí lithiačníffi činidlem za vzniku sloučeniny obecného vzorce II

kde R má svrchu uvedený význam.

Lithiaci sloučeniny obecného vzorce .1 je možno uskutečnit působením lithiumtetramethylpipérididu známým způsobem, ’·**· *

'fe

4.. ·Λ, 4, * -V b>'^jl například podle publikace 'Hasan'· a další, J. .Org'. Chem., 4 6',./.' 157, 1981 nebo působením· jiných amidů lithia 'še, sterickou *'· ůzábranou, například při použití lithi.úrndii'sořropylárni'*du..ňe^:bo' lí thium7aičyklonexý laminu nebo' ','ťakě^v použitím ^ň^blftýlli.thTa ' v. pří tomnpsti .tetramethy le thy i end-i aminu. Tato '-reakce' se ob- '^L

v.ykle· p/rováaí 'v 'inertním' rozpouštědle', s výhodou/v (etheru·,“ - ' ^?f _ < _ Í ' ./'< . ' 1.____r .· 3_'' ·' ^'apríkiad.-výT.HE-;--'di'ěthýTěthě'ru7Ydimé'tnbx-y-e-thánu,-nebo,-methyl·-·. -

-···· :-· *“ · ''i Ύ “ _f· '* * :/ΠΓ^^τ,'.''ι~· Q'''í Y'··-- T. jsí.® hc - bu ty l e theru _při ' t ep lote ,v rozme ž íy·78. , až^..r.40. 0 . .. . .

.J.e také. možno .postupovat tak, že se ' pyrrol podřobíbromaci ¢-/ ' . ..... . ,

V,_.nnl n,7P' ? známvm .-ínii.Rnhom,·,, ,r?iίη,ς,ΐV/l ηρ/1.1ρ,^η.Ί.·ίψ·ρρο. r.b.oO.’ ? 1 i: 77----— -----ť - -----a další; Org.. Syn.-.·, 70, -151, 1991, výsledný- produkt- je množ- > _ψ rv W_:. - _, - ··· ’ ' , y · · *· - '»·· -ř-noTchřánib ''á^pak^pbdrobitYlithraci· při-- pbůžltílmehě/ nákladných ...lithiácnich' činidel, například n-buty_;ilithia priApouziti/znamých .postupů. . '* ;·Meziprodukt obecného vzorce II, který není .zapotřebí izolovat,, se pak ...uvede do reakce s trialkylboritanem, v němž může mít každá alkylová skupina přímý, rozvětvený nebo cyklický řetězec a.může obsahovat 1 až 6 atomů uhlíku, s výhodou /-jdé o- trimeťhylboritan .nebo triethylboritah, pak se provádí-hydrolýza, - katalýzovaná kyselinou při použití slabé kyseliny', například kyseliny citrónové nebo-octové'nebo hydrogensiranů draselného,, čímž se získá chráněná ky.selina pyrrol-.2-boritá--obecriého vzorce III 7

RO (III) se.pak redukuje při se' získá chráněná

IVkde.R má svrchu-uvedený význam.

Meziprodukt obecného vzorce III použftí katalytické hydrogenace, čímž kyselina prolihboritá obecného vzorce

ŮV)

Rdě R má svrchu uvedený význam.

Katalytická hydrogenace meziproduktu obecného vzorce III může být uskutečněna.v'.organickém rozpouštědle, napříkla v ethylacetátu nebo v tetrahydrofuranu^připoužití katalyzétoru,'napříklaD 5% platiny na aktivním uhl'í', oxidu platí ho, thodia na aktivním uhlí, rhodia na oxidu hlinitém, paladia ha aktivní-m uhlí nebo-Raneyova niklu při atmosférickémtlaku nebo .také při tlaku přibližně 0,35 MPa.·' o<

Derivát'kyseliny boriťé .obecného vzorce IV jé možno získat také tak, že se vychází zpyrrolidinu, na který se působí vhodným' acylačním- činidlemčímž se získá chráněná sloučenina obecného vzorce VIII (VIII)

kde R má svrchu uvedený význam.

Ochranná skupina· se. volí tak, aby bylo možno pyrrolidin aktivovat v poloze, sousedící s atomem dusíku za účelem lithiace, ochranná skupina by měla obsahovat větší Část, která brání účinku lithiačního činidla na karbonylovou skupinu·.·Výhodné' . j'e pbúžití kárbámoýlbvé ..ochranné., sku- v X - t -V - * 1' ' ' * · ’ . .· · ·· —τ· . ... ·.., piny obecného vzorce -COOR,'například- jde oskupíny; v nichž .R-znamená terč;. butoxy skup inu nebo 2,4,-6-triterc-.buty.lf e noxy skup inu'. _: ďeímbžnó; už-íť· také nektéřé áčylové· nebo aroylové skupiny,-.například terč .buty.lkarbonylovou nebo' trif eny lme ťnyl karbony lovou, skupinu.. Další vhodné .aktivační skupiny jsou popsány v publikaci Beak a další) .Chem. Rev.,' 84, 471 - 523,' 1984. Ne jvýhodnější-ochrannou skupinou je v tomto případě terč .buty-lóxykarbonyl, 3oc.; Ochrannou skupinu. je možno na pyr.rolidin navázat známým způsobem.

' ' . JÍ'

Na sloučeninu obecného vzorce' VIII se pak p.ůscbí lithiačnim' činidlem, čímž se získá· sloučenina obecného vzorce IX '

Li (IX.).

kde-R .má svrchu uvedený .význam.

' Liťhiaci sloučeniny obecného vzorce VIII je možno uskutečnit působením sek.butyllithia a tetramethylethylen <· · · diaminu známým způsobem', například způsobem'podle publikace

Beak.a další, Tet. Lett., 30, 1197, 1989. Tato reakce se účelně provádí v inertním organickém rozpouštědle, s výhodou v etheru, například v diethyletheru, methy-lterc, butyletheru nebo THF při teplotě v rozmezí -78 až 0, s výhodou -78 až -40 °C. Lithiaci je možno uskutečnit působením reaktivního alkylovanéno derivátu lithia, jako je sek.butyllithium nebo terč.butyllithium, s výhodou v přítomnosti koordinační přísady, například tetraméthylethylendiaminu.. amidu'kyseliny hexamethylfosfořečné nebo, Ν,N'-dimethylpropy.lenmočoviny DMPU.

Meziprodukt obecného, vzorce IX, který není nutno izo- lovat, se pak uvede do reakce s trialkylboritanem, v němž každá z alkylových skupin může mít přímý, rozvětvený nebo cyklický řetězec a může obsahovat 1 až 6 atomů uhlíku·, s výhodou jde-o írimethylbo’ritan,nebo triethylb.oritan. V následujícím stupni se provádí hydrolýza působením vody a extrakce do vodného roztoku baze, například hydroxidu sodného nebo hydroxidu draselného k usnadnění následného čištění.

Po okyselení alkalického roztoku na pH přibližně ’3 a po ex-·. trakci se· získá chráněná kyselina prolinboritá obecného vzorce', IV........

Aby bylo možno vytvořit ester kyseliny borité, je zapotřebí volný meziprodukt kyseliny borité. obecného vzorce Iv esterifikovat reakcí s diolem obecného vzorce V

HO - X - OH ’ ^L' (V) kde X znamená spojovací,skupinu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce VI

- ,10 -

(VI) kde. ' / . ι . ¹ · . .

X · . je tatáž spojovací skupina jako svrchu a

R v má svrchu'uvedený¹význam.'

Takto , vytvořená' esterová s.kupina má pouze ’ funkcí odštěpitelné,ochranné skupiny. .Struktura, syntéza a způsoby .. navázání a. odštěpení esterové' ochranné skupiny tohoto typu jsou'obecně známé'. Každý odborník bude také považovat strukturu spojovací skupiny. X za- součást molekuly, jejíž- povaha není kritická,. Spojovací skupina X může být například tvořena na.feyceným uhlovodíkovým ře.tězcém o 2 až 3 atomech uhlíku, tento řetězec může.popřípadě tvořit část cyklického uhlíkového systému o' 5 až 12 atomech'uhlíku, který může' popřípadě obsahovat dvojné vazby...nebo může ,být' kondenzován, dále 'může jít. o^; uhlovodíkový řetězec se 2'nebo 3 atomy uhlíku, tvořící část aromatického kruhového systému, nebo může jí t-o 'skupinu o.becného.wzo.rc.e -J CH-2.).._n?xNH.T.(C.H₂'.)_m-, kde ,n ^.a m znamena j í celá .čísla'2 nebo'3, 'tyto skupiny mohou být nesubsti.tuované nebo mohou být dále substituovány jedním nebo větším počtem substituentů ze skupiny: alkyl's obsahem 1 až 3 atomů uhlíku nebo fenyl. / . ' -·ί

Vhodnými dioly obecného vzorce V jsou například í ethylenglykol, pinakol, kate.chol, ' pinandiol, butan-2,3- ;'

-dio'l, .2,2-dimethylpropan-l,3-diol, diéthanolamin a 1,2-bifenylethan-1,2-diol. '

Jakmile je skupina kyseliny'borité' chráněna esterovou skupinou, je možno odstranit ochrannou'.skupinu na atomu dusíku. známým způsobem, například postupy,· které jsou +

popsány v publikaci Greenem, Protective GroupS, in Organic Syhthesis,, J, Wiley and Sons,, 1981, čímž se získá hydro.chlorid požadovaného esteru kyseliny prolinborité obecného vzorce VII

kde X má svrchu uvedený význam. '.

Například v'případě, že se. jako ochranná skupina.'užije Boc, je možno tuto skupinu snadno odstranit působením plynného chlorovodíku v ethylacetátu.

Výhodné je uskutečnit ésterifikaci sloučeniny obecného vzorce IV s použitím chirálního, .-neracemického di-o.lu, například (1S,2S,3R,5S)-(+)-pinandiolu, 1,2-difenylethan-1,2-diolu nebo butan ,2,3-diolu vzhledem k toniu, že tímto postupem se doymolekuly zavádějí další středy chirality. Tímto, způsobem se pak usnadní rozdělení podle středu chirality v poloze alfa vzhledem k atomu boru při použití známých postupů pro dělení diastereomerů, jako je například vysokotlaká kapalinová chromatografie HPLC- nebo frakční krystalizace. Tento postup je znázorněn na reakčním schématu na obr. 1, kce je možno oddělit isomery sloučeniny « obecného vzorce VI, v nichž je kyselina boritá chráněna.

.pomocí (1S,2S,3R,5Š)-(f)-pinandiolu pomocí HPLC, čímžse získají.sloučeniny Via a VÍb. Isomery hydrochloriďu slou.čéniňy obecného vzorce'· VIŤ s toutéž -ochrannou skupinou na· atomu, boru je možno, rozdělit frakční krystalizaci v'' řo.z-. pouštědle, .například v ethylacetátu nebo ve‘''směsi dichlor, FTT o +- Τ·“«· * S . O A r Α,.Λ.Λ _·^.π i ,4., r-» λ Ά ,χλ λ ,Λ,-β. α Ί . , — — .Ία , „ λ. -·.'-»> Λ A J i « .» λ τ ». «.ν' J .

ιιιν Vliauw - ·α CL.iljxca»-.CvCLUUlj 1 CUPl UkJd.JUlU ;1CUU C. úl IC3.1 X U ód V ó.* I — ^— ku sloučeniny obecného vzorce VIIb^; ve formě, jediného; isomerů s konfigurací ,R atomu'uhlíku, který; je vázán, na atom'boru. . ·

Další.výhodou při použití pinandiolu je skutečnost, že takto vytvořené boritanové estery jsou stálejší 'než estery, odvozené od jiných, diolů, například od'pinakolu, u nichž je možno často pozorovat v,průběhu chromatografie velmi značné ztráty'ochranné skupiny. Uvedeným způsobem je tedy možno zlepšit'jak čištění, -tak dělení isomerů. chromá-, tografií na silikagelu vzhledem' k tomu, že je možno dosáhnout vyššího výtěžku požadovaného, produktu.

V- případě; že poněkud modifikuje, vzorce,III podrobit ••Jí.· 1.. > X ‘ se svrchu uvedený syntetický postup je možno derivátizovaný pyrrol obecného přímé esterifikaci působením diolu obec'-.

ného. vzorce V.. Tímto .z.půso.bem.-se' získá es.te.r .obecného ..vzorce IIIA

(IIIA)

- .13 kde X a R'mají svrchu uvedený význam, který je možno redukovat stejným způsobem jako sloučeninu obecného vzorce lil, čímž se získá chráněný ester' kyseliny prólinborité obecného vzorce Vi. Jinak řečeno, pořadí stupňů, v nichž, je.pyrrolový kruh redukován.a kyselina borítá je esterifikována, je možno obrátit.

* ^v .

Takto získané estery kyseliny prolinborité je.možno snadno.navázat na aktivované karboxylové kyseliny, které na ámisloučese typicky využívají pn synteze peptidu, například nokyseliny s chráněným· atomem dusíku, čímž se získá nina obecného vzorce· X

.0 (X) kde -COOR je ochranná skupina.na aminoskupině, běžr - váná při syntéze peptidů. v níž R je napříkls ě užíd terc.butyl, benzyl nebo fluorenylmethyl a' .

R znamená postranní řetězec-přírodně se vyskytující aminokyseliny, popřípadě s příslušnými ochrannými skupinami, běžně užívanými při syntéze peptidů.

Sloučeniny obecnéhovzorce X obsahují ochranné skupiny jak na kyseliněborité, tak·na atomu dusíku aminokyseliny. Může· být zapotřebí jednu z nich nebo obě ..tyto ochranné skupiny odstranit.k dosažení biologické účin- ? nosti nebo za účelem dalšího chemického zpracování. / Ochranné skupiny je možno odstranit v jakémkoliv pořadí. Dále budou popsány různé postupy pro odstranění těchto ><

ochranných skupin. - ' ' Odstranění Ochranné skupiny na atomu dusíku je možno dosáhnout známými- postupy, čímž v.znikne sl-oučenina obecného vzorce XI . . ... .. · ·

kde X a R mají svrchu uvedený význam. ' ¹ i. · ··

Esterová skupina, která· je jako ochranná skupina .vázána na kyselinu borit.ou, je stálá v organickém prostředí' neutrál- ní a kyselé povahy, avšak řada esterů tohoto typu se^ rychle štěpí-ve vodném, prostředí .za mírně alkalických podmínek.při ph 7/5 za vzniku kyseliny borité. V případě esterů kyseliny borité a pinandiolu je však známo, že hydrolýza je obtížná a je zapotřebí použít'zvláštních'podmínek'pro odstranění'pinandiolové skupiny, jak bylo popsáno například v Matteson a další, J. Am. Chem. Soc., 102,' 7590, 1980 a Bro.wn a další,

J. Organometallic .Chem.·, 385, 15, 1988. Známé postupy nejsou vhodné·, pro odstranění pinandiolové skupiny že sloučenin vzorce VI,' X nebo XI. Bylo nalezeno· několik postupů pro odstranění pinandiolové skupiny' z.boritanu, například ze sloučenin ' obecného vzorce VI, X nebo XI. Odstranění uvedené skupiny ·, je možno dosáhnout za.mírných podmínek při použití'oxidačního činidla, schopného odštěpit 1,2-čioly, tímto způsobem se poruší rovnováha a reakce směřuje k volné kyselině boříté. Postupuje se.například tak, '.že se na sloučeniny obecného vzorce VI a X, v nichž ochrannou skupinou je pinandiol·,· působí metajodistanem sodným ve směsi vodného octanu amonného a acetonu při teplotě místnosti, čímž vznikají sloučeniny obecného .vzorce IV nebo XII kde „' . R~ a

R mají' svrchu uvedený význam.

Reakce dobře probíhá ve vodě, popřípadě v přítomnosti pufru, například octanu. amonného n.ebo hydroge.nfbsforečnanu sodného· při pH 3 až 10, s výhodou 5 až 8 při teplotě .0 až 80., s výhodou. 20 až 40 °C v přítomnosti s vodou mísitelného pomocného organického rozpouštědla, například acetonu, methanolu, ethanolu, THF nebo acetonitrilu. Oxidačním činidlem může-být riěnukleofilní oxidační Činidlo, schopné odštěpit

1,2-dioly, jako kyselina jodistá nebo její soli nebo také manganistany. Za uvedených podmínek není pozorováno oxidativní štěpení vazby mezi uhlíkem a'atomem boru. .Je zřejmé,

-?· že·'uvedený postup -je možno použít u .jakéhokoli v/derivátu.kyseliny borité, chráněného' pinandiolěm..· Mimoto·, je tento postup použitelný 'pro jakoukoliv ochrannou skupinu typul,2-diolupřestože . je-zvláště vhodný pro -ty ochranné'skupiny , v jejichž --případe' jé -jednoduchá hydrolýza ve-vodném ' prostředí . pomalá nebo- neúplná. i·' · v ;

•Μ?». ' • — · +·-». · -r- · ll, ... · . -t, . . . ... · _z . v-'.případě ,-;že--se - esterová skupina»·na kyseli-ně- bor.i.te > ' v - - / *1 4 . ' ‘*..1·' .v V typu pinandi.olovéyskupiny nachází na sloučenině·,', obsahuj ί-_Λ c'í n'e‘c'h'r'áněhou amiwskuplhú';' ja'koi'ě'’n'a'p'ř'íkia’d',_!'s'l'¹ou'čeni'n-a' obecného vzorce'XI svrchu, uvedený postupýrbvněž .možno k

'''použít, pro. šloučěninýýtohoťo typu jékyšakyvhpdně-jší další. . nový postup .-Tento' postup spočívá v tom^-, že se -vodný roztok sloučeniny obecného, .vzorce XI, který má pH 4 nebo nižší,- nanese na sloupec kationtoměničové pryskyřice a jako eluční·Činidlo se užije voda nebo zředěná kyselina octová, čímž se dosáhne odštěpení pinandiolu. Také v tomtopřípadě se poruší rovnovážný stav a reakce směřuje k hydrolýze. Sloupec se pak\vymývá zředěným, vodným roztokem hydroxidu amonného, .čímž se získá výsledný produkt, který po odpaření a .okyselení vytvoří sůl. sloučeniny, obecného vzorce XIII •ms··

Vhodné je použití silně.kyselé kationtoměničové pryskyřice, například pryskyřicetypu kyseliny sulfonové, jako j.e Dowex 50. Pinandiol, který se z pryskyřice vymývá, ja možno z vodného roztoku oddělit a znovu použít.

Toho je možno nejsnáze dosáhnout tak, že se vodný roztok nechá projít sloupcem neiontového polymerního adscřpčního R činidla, například Amberlitu XAD-200, který adsorbuje pinandiol téměř kvantitativně. Pinandiol se ze'sloupce od,straní eluci při použití methanolu nebo ethanolu. Je možno oba postupy kombinovat do .jednoho postupu, při němž jevoda z jednoho sloupce přečerpávána do druhého při použití čerpadla. To má tu výhodu, že je zapotřebí daleko menšího množství vody a mimoto může postup probíhat dostatečně dlouho k dosažení vysoké přeměny produktu.

Jé zřejmé, že svrchu popsaný postup pro odstranění pinandiolové skupiny pří použití kationtoměničové pryskyřice je možno použít pouze pro ty sloučeniny, které obsahují bazické funkční, skupiny, například nechráněnou aminoskupinu.

. Třetí postup je'rovněž možno' použít pro.pinandiolové estery sloučenin, obsahujících nechráněnou aminoskupinu, . například pro sloučeniny obecného vzorce XI. Tento postup spočívá v transesterifikaci pinandiolového esteru kyseliny borité jiným derivátem kyseliny borité obecného 'vzorce . R⁴-B(0H)₂, ve dvoufázovém systému. R^ znamená uhlovodíkovou skupinu o 1. až'12-atomech uhlíku s přímým, rozvětveným nebo cyklickým řetězcem nebo'fenylovou skupinu, výhodný je fenyl. Jednou fází dvoufázového, systému je voda, jejíž pH bylo upraveno na hodnotu nižší než 7, s výhodou 1 až 4, druhou fází je organické rozpouštědlo typu uhlovodíku, například ^:hexanpetrolether nebo toluen. To znamená, že v případě, žé'se sloučenina obecného vzorce XI zpracovává působením

- 18 - ' ' ' ř kyseliny' fenylboriťé ve směsi vody o pH la hexanu s následným' oddělením obou fází, získá se v organické fázi ester pinandiolů s kyselinou' fenylboritou, který je možno jednoduše izolovat odpařením, ve vodné fázi-se získá roztok volné kyseliny borité- obecného vzorc.e .XIII, který je možno izolovat při použití ionťoměničové pryskyřice obdobným způ; .sobem Jako svrchu. V tomto systému· je jedinou složkou·, roz .pustnou-v organické .fázi- pinandiolfenylboritan,- takže dochází k· odstranění- pinandio.lu a tím „k .porušení rovnovážného • šťávuVy tvořená '.sloučenina obecného,. vz'o'rc'e'XTIT i sloučeni_na obecného, vzorce XI zůstávají ve, vodné. fázi vzhledem k tomu/' že nejsou rozpustné v uhlovodíkových 'rozpouštědlech. Ré v'

P akci je možno uskutečnit. při'-použití-'jakékolivkyseliny borité s postranním uhlovodíkovým, řetězcem za předpokladu;- še její'pinandiolový ester .je rozpustný v uhlovodíkových rozpouštědlech . .' --;

Sloučeninu obecného vzorce XIII ve zcela volné' formě bez ochranných skupin je možno připravit.také tak, že se odstraní 'ochranná skupina'na. atomu. dusíku ve' sloučenině obecného vzorce XII při použití známých postupů. Je zřejmé'·, .že sloučeniny obecných vzorců X^:, XI, ΧΙΪ a;XIII budou ob-« vykle obsahovat dva středy chirali-ty. Jeden z těchto středů se nachází na átomuboru.á druhý na aminokyselině s. výjimkou případu, kdy touto skupinou, je'glycin. Je dále zřejmé ,· -že ' -č-i-sté--jednot-l-ivé -dias-teFeo-i-someryá-tě-chto •.s--l-oúěentó' jsou—pro ' biologické použití vhodnější něž' směsi diastěreoisomerů.

»^ri '

Je- tedydůležité mít možnost získat uvedené látky ve. formě jednotlivých čistých isomerů. Obecně je možno uvést, že

... .... f.

vzhledem k tomu, že aminokyseliny jsou obvykle dostupné ve formě jednotlivých enanciomerů, jé možno tohoto cíle dosáhnout rozdělením směsi získaných diastereomerů vazbou ' --opticky čisté aminokyseliny na racemickou kyselinu prolin19 boritou při použití známých postupů. Nicméně bylo prokázáno, že s výjimkou-zvláštního případu, kterým je.valin, je- toto dělení Často obtížné a. .velmi nákladné, na čas. Je proto výhodné užít kyselinu prolinbqritou ve formě jediného isomeru na středu čhirality v bezprostřední blízkosti atomu boru vzhledem k tomu, že po vazbě na opticky čistou aminokyselinu pak není zapotřebí rozdělit žádné ísomery. Vynález tedy poskytuje snadný postup pro rozdělení .enanciomerů kyseliny prolinborité.

I ·'

Praktické provedení vynálezu. bude osvětleno ,'násl'e- . dujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Kyselina l-( 1, l-čiméthy.lethoxykarbonyl)pyrrol-2-boritá

K roztoku 8,8. ml, 52 mmol ťetramethylpiperidinu ve 275 ml THF se-v argonové atmosféře při teplotě -78 °C přidá 26 ml, 52 mmol 2M roztoku butyllithia v hexanu. Po 15 minutách se přidá ještě roztok 8,35 g,· 50 mmol l-(l,l-dimethylethoxykarbonyl)pyrrolu v 10 ml THF a roztok se míchá ještě .4 hodiny při teplotě -78 °C. Pak se přidá 30 ml,

178 mmól triethylboritanu a směs se v průběhu 3 hodin nechá zteplat na teplotu místnosti. Po dalších 12 hodinách se reakční .směs- zředí 500 ml etheru a promyje se' 3 x 100· ml 1M vodného roztoku hydrogensíranu draselného a pak ještě 1 x 100 ml 1M vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Pak se směs vysuší síranem hořečnatým a odpaří na,rotačním odpařovači, čímž se získá hnědá pevná látka, která se čistí

20rychlou chromatograf ii na-silikagelu při použití směsi, ethylacetátu a hexanu· v poměru .1 : .9, čímž se ve výtěžku 82 % získá. 8,7 g bílé. krystalické pevné látky s teplotou tání.. 101,0 až 101,5 °C,

,. ... . . , . ... . - . ... .. .

Τί-Νϊ-ÍR )CDC1₃); ^1,65 (s, 9 Η) , 6,26 (t, J = 3,3'^Hz, 1H), 7,10 . ('dd ,,-J= 1,6, 3,2. Hz , ÍH)., 7', 15..( s,.. 2H).,,7,44 (dd, .

J = 1,6, 8,2 Hz, lH),·’ .' ' ‘ i >1 '^C-NMR (CDCl ); ,27,9, .85,5,(112,0,· 127,0-, 128/7', -152,0, CIMS ‘ni/Z’ Ť%^:m7int3^21-2”7μΗ⁺r fl/Cí5-6' (ϊθθΚ^1-387( 68j .

. . · -i . . ^A . 'k.

c₉h₁₄sno

4- Analýza pro vypočteno nalezeno

C 5.1,23, H 6,69, Ν' 6,64 %

51,22, Ή 6,51, N 6,.67 ·%.

Příklad 2

Kyselina l-(1,1-dimethylethoxykarbonyl)pyrrolidin-2-tcritá ... ' ' · ·'. . ^? ' ..

č 'i..'. ♦. >

A·'¹*' - ' ’’ r’ - '

Roztok .6', 15.. g, 24 mmol· kyseliny 1, (1,1-čime-thylethoxykarbonyl)pyrrol-2-borité, získané způsobem podle příkladu lve 100 ml ethylacetátu se hydrogenuje při použití ,-přibližně 500 mg 5% platiny ..na .aktivním, uhlí při' tlaku 0,'35’MPa po dobu'24 až 48 hodině Výsledná suspenze “· · .se zfiltruje pres vrstvu celitu a· odpaří.- Máterial se chromatografuje na silikagelu, sloupec se postupně vymývá směsí hexanu' a' ethylacetátu v poměru 9 ; 1 a pak acetonem. Acetonové frakce'se odpaří, čímž se·ve výtěžku 97 % získá 6,05 g produktu jako čirá sklovitá látka, která krystalizu je po-odstranění stop rozpouštědel a má pak teplotu tání 10.0 až 101 °C. '

•sj •η ¹H-NMR (CDC1 ): 1,42 (s, 9K),-'l,6 - 2,15 .(m, 5H) , 3,1 - 3,.5 (m, 2H), · ¹³C-NMR (CDC1₃): 25,1, 25,7, 28,4, 45,6, 46,2, 78,5, 154,5, C.ISM m/z (% rel .'int.): ’ 116 (100) , 70 (46).

Analýza pro GgH^gBNO^ vypočteno C 50,27, H 8,44, N 6,51 %' nalezeno C 50,52, H 8,22,· N ..6,.58 %.

Příklad 3 (IS,2S,3R,55 )'-pinándiol-l-(1,1-dimethylethoxykarbony1)pyrroliďin-2S.-boritan a .(TS,2S,3R,5S)-pinandiol-l-(l,l-dimethylethoxykarbonyl)pyrrolidin-2R-bori.tan

Roztok 1,52 g, 7,1-mmol -kyseliny 1-(1,1-dimethy1ethoxykárbonyl)pyrrolidin-2-borité, získané způsobem poole .příkladu 2 a'1,36 g, 8,0 mmol {IS, 2S ,.3R, 5S) - (+)-pirianaiolu se.míchá při teplotě místnosti ve 25 ml etheru 2 hodiny.

Pak se směs odpaří a odparek se podrobí rychlé chromatografii na silikagelu při použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 85 : 15, čímž se ve výtěžku 85 % získá 2.,1 g směsi obou. diastereomerů v poměru 1 : 1. Tyto látky se-dělí HPLČ na sloupci s rozměrem 300 x 3,9 mm s náplní Microporasilu A, jako eluční činidlo se užije směs methylterč.butylethéru a hexanu v poměru'1 : 9, detekce ultrafialovým zářením při 220 nm. Za těchto podmínek.-se nejprve-vymývá' {15,2S, 3R, 5S)-pinandiol-1-τ(1; 1-ďimethylethoxykarbonyl)pyrrolidin-2S- . -boritan.

S-isomer: . ¹H-NMR (C_cD_c): 0,55 (s, 3H) , 1,.09 (s., 3H), 1,52 O ,0 (s, 9H)·, 1,50 (s, 3H), 1,2 - 2,2 (m, 8H), 3,1 - 3,5 (m, 3n) , ’ 4,11 (m,.0,3H), 4,33 (m, 0,7H).

¹³H-HMR (C„D_c) o _o

36,-0, 38,2, 46

23,9, 25,6,. 27,1, 27,3.,. 28,4, 28,6, 1, 51,9,78,3,’ 78,5, 85,7, 154,9.

.- . < - -17 .. . =

---- R-i somer z·' tH-NMR . is, SH), 1,61 (m (CgDg): 0,52 (s, ...3H1,08 .( S, ,·3Η), .1,2 - 2,2 (m, 8H) , 3,1 3H),' 1,5 2 3,6 (m,. 3H),

(-in , ¹³C-NMr’(C_cDJ : 23^,972676, 27/1 ,-”27‘,9 ,

Ό Q

35;, 8 7 38-,2-, 39,6; 45.,3, 51,8 , 73,1, - 78-, 5

25,4/'28-, 7, 28 / 85,7, 154,5.

o'J.

. Je .zřejmé, že '(IR, 2R, 35 ,'5R).-pi-nándiol-l'l.( I, ldimethylethdxykarbonyl )pyrro.lidin-2S-bóritan a (IR, 2R', 3S , 5R)-pinandiol-l-( 1, 1-d.imethylěthoxykarbonyl )pyrrolidin-2R-boritan by bylo možno obdobným způsobem získat- také při použití (1R,2R, '3S, 5R)-(-)-pinanaiolu. ,₍ · .

. Příklad 4- .- - ' (1S , 2S , 3R, 5S)-pinandiolpyrrolidin-2S'-boritanhy.drochlorid „ P % 'Roztok 28,5 mg,.0,08 mmol (1S , 2.S , 3R, 5Ξ)-pinandiol- (1 /l-dimethýiéthoxýkárbonýl ).pyrr0li“din-2S-boritánu, získaného’ v příkladu'3 se míchá v -.roztoku přibližně. 3M bezvodého chlorovodíku v ethylacetátu. Po dvou hodinách se roztok dvakrát odpaří z ethylacetátu, čímž se ve výtěžku 91 % získá 21,2 mg výsledného hydrochloridu ve formě bílé pevné látky ε teplotou tání 204 °C za. rozkladu.' •'«Ar

4, .'ϊ $

lť ¹K-NMR (CDC1₃): 0,83 (s, 3H), 1,14 (d, J = 11Hz,' 1H) , 1,29 (s, 3H), 1,45 (s, 3H), 1,85 - _;2·, 15 (m, 5H) , 2,17 - 2,50. (m, 3H), 3,18 - 3,25 (m, 1H)','.3,45 (bs, 2H)', 4,42 (dd,

J = 1,8 Hz, 1H), 8,80 (bs, 1H), 10,56 (bs,. 1H). ' ¹³C-NMR .(CDC1 ) : 23,9, '24,5, 26,5, 27,0, 27,2, 28,4,

O

38,2, 39,4, 45,8, 51,2, 79,0, 87,6./ fl

34,9,

CIMS m/z (% rel.inf.) 250 (MH+, 100),

HRMS (El) pro C₁₄H₂₄SN0₂ vypočteno 249,1900, malezeno 249,1899.

Je zřejmé, že (lR,2R,3S,5R)-pinandiolpyrrblidin-2S-boritanhyďrochlorid by bylo možno připravit obdobným způsobem.

Příklad 5 ' >

(IS, 2.S, 3R, 5S) -pinandiOlpyrrolidin-2R-boritanhydrochlořid

Roztok 18,3 mg, 0,05 mmol (1S-, 28,3R , 5S j-pinandiol— 1—(1,1-dimethylethoxykarbonyl)pyrřblidin-2R-boritanu, · získaného v příkladu 3 se zpracovává působením bezvodého chlorovodíku .v ethylacetátu stejným způsobem jako v příkladu 4., Po zpracování reakční směsi se ve výtěžku 96 % získá Í4,3.mg požadovaného hydrochloridu ve formě' bílé pevné -látky s teplotou tání 248 °C za rozkladu.

^LH-NMR (CDC1 ): 0,83 (s, 3H) , .1,14 (d., J = 11 Hz, 1H) ,.

1,29 (s„ 3H), 1,45 (s, 3H), L,85 - 2,15.(m, 6H), 2,17 2,50 (m, 3H), 3,18 - 3,25 (m,· 1Η),·3,45 (bs, 2H), 4,42 (dd, J = 1,8, 8,6 Hz, 1H) , 8,80 (bs·, 1H), 10,56 (bs, 1H).

Xi . ¹³C-NMR (CDC1.J: 23,9, 24,5,-26,5, 27,0, 27,2, ,28,5,34,9,

O •38,1,. 39,4, 45,8, 51,2, 79,0, 87,8, ' . ’

CIMS m/z (% rel.int.) 250 (MH+, 100), /· y Η?¹)!?. .(El λ P.^r0. .'vypočteno 249.,.1900.., .

. ,· //,- . nalezeno .„249-, 1903 . -- .

. ' ‘ ·' , ' ·* ^: r i ..ii - ·>♦> · ( , ‘-s*’ '-afc-τ»- ·+ '· ·· ’ Je zřejmé, že 'odpovídající ( IR, 2R,3S,'5R)-pinandiol- pyrrolidin-2R-boritanhydrochlorid by bylo) možno připravit .analogickým způsobem -.-..._____;, ...·_____ r\

X / ; - ň - -i I'iKl čtU l· .o (15,25,3Ř,55)-pinandiol-l-(1,1-dimethylethoxykarbonyl)pynro1-2-boritan

Roztok-1,36 g, 6,45 mmol kyseliny l-(1,1-dimethyí- '. ethoxykarbonyl )pyrrol-2-borité , získané' způsobem -podle' příkladu 1 a 1,10 g, .-6,45 mmol (15,2S, 3R, 5S)-(+')-pinančiolu ·.se.'míchá '4' hodiny' ve 20 ml etheru.. Pak se směs odpaří . , -ii . , ' na rotačním o.dpařováči a odparek se podrobí, rychlé chromatografii na silika.ge.lu při použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 95 : 5, čímž s.e. ve výtěžku' 82 % získá' 1,83 g požadovaného produktu ve forměčirého oleje.· ¹H-NMR (CDC1₃·)·:.· 0,90 (s, '.'3H) , 1,30 (s, 3H), 1,41 (d,·

J = 11Hz, ÍH), 1,50 (s, 3H), 1,59. (s, 9H),'1,96 (m, 2H),

2,21 (t, J = 6 Hz, 1H),2,16 -'2,40 (mj 2H), 4,4.5 (dd,

J = 2, 8 Hz, 1H), 6,20 (t, J = 3 Hz, 1H), 6,65 (ď, J = 3 Hz, 1H) , 7,40 .(d, -J = 3 Hz, 1H) . ' .

'¹³C-NMR (CDClgl: 24,0., .26,4,. 27,2, 28,1, 28,6, 35,5, 38,3,

39,8, 51,8,75,8, '83,6,·83,9, 111,6, 123,2,-124,7; 150,0. .

CIMS m/z (% rel.int.) 346 (MH+, 4), 246 (81), 153 (100), 135 (56)..

Je zřejmé, že odpovídající (15,2H-, 3Ξ , 5R) -pinandiol-l'-(1, 1-dimethylethoxykarbonyl)pyrrol-2-boritan by bylo možno připravit analogickým způsobem.

Příklad 7 ’ '

Příprava kyseliny l-(1,1-dímeťhylethoxykarbonyl)pyr'rolidín-2-borité z l-( 1,1-dimethylethoxykarbonyl )pyrrolidin'u

K roztoku 17.,1 g, 100 mmol. 1-(1,1-dimethylethoxykarbonyl)pyrrolidinu ve 200 ml diethyletheru se při teplotě -78 °C v atmosféře dusíku přidá 92,3 ml. 120 mmol 1,'3 M roztoku sek-bu.tyllithia v cyklohexanu a současně se' teplota udržuje pod -60 °C. Po skončeném přidávání .se reakční směs míchá ještě 4 hodiny při teplotě -78 °C.,Pak se přidá ještě'

31,1 g, 300 mmol trimethylboritahu á směs se nechá v průběhu 3 hodin zteplat na teplotu místnosti. Po.dalších 12 hodinách se přidá 150 ml 'vody· a. pak ještě 200 ml 2M hydroxidu sodného. Vodná fáze' se oddělí a organická fáze se znovu extrahuje 150 ml 2M hydroxidu sodného.· Bazické extrakty se spojí, okyselí se na pH 3 přidáním 2M' roztoku kyseliny chlorovodíkové- a pak se extrahují 5 x 200 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, vysuší se síranem sodným a-odpaří, čímž'se ve výtěžku 72 % získá 15,49 g produktu ve formě bílé krystalické pevné látky.· Tento produkt je totožný s produktem, získaným způsobem .podle příkladu 2.

t

Příklad 8 (1S,2S,3R,5S)-pínandio1-1-(1,1-dimethylethoxykarbony1)pyrrolidín-2RS-b.oritan ' “ ' <-r ,

K míchanému roztoku 15,49 g, 72,0 mmol .materiálu, ' · ' ' získaného vpříkladu 7 .ve 250 ml chloroformu-se^r přidá :

- L2., 77 g,-· 75 mmol -.( ÍS í 2S., 3R, 5S) + (+)-pinandiolu. Směsⁱ se ' , · mí-chá.16 hodin při teplotě místnosti v atmosféře dusíku, pak' se 'řožpouš'ťědl'o odpaří 'a odparek ’se č’is^-ťí^-rychlOU-chTO matografir.na si-likagelu při použití směsi hexanu a ethylacetátu nejprve v poměru 9 : 1 a’·pák. 4. : 1, čímž se získá ' ve výtěžku-67,7 %-celkem 23,62 g. směsi.jdiastereomerů výsledného produktu v poměru 1 : 1 ve formě oleje, výtěžek je vztažen na 1-(1,ϊ-dimethylethoxykarbonyl)pyrrolldin. Tento produkt je totožný se směsí isomerů, která byla připravena způsobem podle příkladu 3.

.... ' ¹H-NMR (CDC1₃): 0,85 (s,.3H). 1,12- 1,21 (m, IH). 1,29/ (s, 3H) , 1,41 (s, 3H) 1,45 (s, 9H) , 1,81 220 (m, 8H) ,

2,28 - .2,39 (m, IH), 3,04 - 3,18 (m, IH), 3,34.- 3,45 (m, ; 29).,-.4,.28 - 4,38..(.“n, IH), ¹³C-NHR (CDC1 ): 23,7, 26,2,.27,1, 28,5, 35,5, 38,2, 39,6, . 46,1, 78,0, 78,8, 85,7, 85,8, 154,7.

COMS m/z (% rel.int. ) 350 (MH+, 100), 294 (72.), 250 (30).

Příklad 9

Analytický postup pro diasteřeoisomery (15,2S,3R,5S)pinandiolpyrrolidin-2-boritanhydrochloridu '

- 27 Jako reakční činidlo se.připraví roztok 0,2M fenylisothiokyanátu ve směsi dichlormethanu a triethylaminu v poměru 9 : 1. 1 až 5 mg analyzovaného vzorku se.zpracovává působením 10 mikrolitrů roztoku reakčního činidla na 1 mikromol analyzované'látky a vzniklý čirý roztok se nechá stát 15 minut při teplotě místnosti. Pak se vzorek 1 mikrolitr tohoto roztoku zředí 1,00 ml acetonitrilu s čistotou, vhodnou pro provádění HPLC a 10 mikrolitrů tohoto roztoku se analyzuje pomocí HPLC při použití sloupce YMCAQ-303 S-5 120A, 4,.6 x 250 mm, jako mobilní fáze se užije 55 % methylkyanidu a 35 % 25 mM roztoku fosforečnanu amonného.o pH 7,5, rychlost.průtoku 1 ml/min, detekce UV-záření při.254 nm. Derivát fenylthiomočoviny s R-isomerem kyseliny prolinborité se vymývá po době přibližně 5,4 minut, jeho epimer přibližně 7,8 minut a nezreagovaný fenylisothiokyanát, který slouží jako vnitřní standard, po době 12,2 minut.

Příklad 10 (1S, 2S , 3R, 5S )pinandiolpyrrolidin-2RS-boritan'nydrochlorid

Roztok 224 g, 0,64 molu (lS,2S,3R,5S)pinandiol-l-(1,1-dimetylethoxykařbonyl)'pyrrolidin-2RS-boritanu v

900 ml diethyletheru se zchladí v ledu a roztokem se nechá procházetbezvodý plynný chlorovodík 35-minut při teplotě 10 až 18 °C. Pak se roztok míchá přes noc při teplotě místnosti, znovu se zchladí v ledu a vytvořená sraženina se odfiltruje. Pevný podíl se promyje 400 ml chladného etheru a pak ještě 200 ml směsi petroletheru a diethyletheru v poměru 9 : 1, načež se- suší ve vakuu,' čímž se ve výtěžku 62 % získá 113 g požadovaného hydrochloridu ve formě bílé pevné látky s teplotou tání , 228 až 234 °C. Při analýze tohoto materiálu pomocí HPLC podle příkladu 9 je možno prokázat, že jde o směs isomeru R : S kyseliny borité v poměru 60 40.

¹H-NMR ,(CDG1₃)·:. 0,83 (s,.3H), 1,14 (d, .J = 11 Hz, 1H), ,1,29 (s, 3H) , l',45 (s, 3H) 1,85 - 2,15 (πτ, 6H) ,2,17 2,50 (m, 3H) , 3,18 - 3,25Jm, 1H), 3,45 (bs, 2H), 4,42 (dd, 3.=.1,8, 8,6 Ηζ.,.-ΙΗ), 8,8.0 (bs,lH), 10,56' (bs, 1H)

C-NMK'(CĎC1₃/ : _23,9_,_24,5 , _ 26,5 J7,0, Jý) 2_, .28,4, .34,9,.

.. 38,2., /3.9,4, .4.5,8, '51,2, 79,0,/87,6. ....

,. . .. ·. s, .

* . . /

CIMS m/z. {% rel. int. ( -250 (MH+), 100) , ' . '

'. Analýza pro' 0,.·-.Η_ ,BNO_ . HC1' >·. (. ... .. U, '' vypočteno ' 0/ 58,.57, H 8,82, N 4,90, Cl 12,'41 ‘ -ΓΓ. ΓΪ .-sr /1 rs ΤΙ-Λ’ Λ^Ι.ΚΤ 3 Ol Ol Ί 'Λ η π

U . JO , *·*υ , n O , OU , Ή,Ο±, ύί J. Č. , /0.

.Při obdobné reakci, prováděné š množstvím 29 g,

101 mmol účinné látky^:sepři použití 200 ml přibližně

4,5 M etherového roztoku chlorovodíku a 15.0 ml ethyl- . < · .' · acetátu jako rozpouštědla ve výtěžku 47% získá 11,1 g výsledného hydrochlóridu.· ve ^:formě směsi isomeru R a S v poměru 81 , 19. < w

Příklad 11

Příprava (·IS, 25,3R', 5S)pinandiolpyrrolidiin-2Ř-boritan hydřo.chl.or,i:du ufrakčníí.kry.stal.izací . ......

Metoda A

1,18 g, 4,13 mmol směsi isomeru v poměru 607..:. 40, získané způsobem podle příkladu 1.0 se rozpustí za mírného zahřátí v 65· ml methylendichloridu a roztok se. zfiltruje.

Filtrát se zředí 65 ml ethylacetátu a v>prúběhu 1 minuty dojde ke krystalizaci. Suspenze se míchá 1 až 2 hodiny =» , při teplotě místnosti, první podíl pevné látky se oddělí a poměr diastereomerů se stanoví stejně jako v příkladu 9. Ve výtěžku 46 % se získá 540 mg produktu, poměr isomerů R a S je 97,1' : 2,9, Z filtrátu se. oddestilovává rozpouštěd^ lo tak- dlouho, až je odstraněna většina methylendichloridu .a zbývající ethylacetátový. roztok se pak míchá přes noc při teplotě místnosti, čímž se ve výtěžku 29 % získá druhý podíl 346 mg špinavě bílé pevné látky s poměrem isomerů R a S 39,2 : 60,8. -První podíl se nechá překrystal ovát z 10 ml isopropýlalkoholu, čímž sě ve výtěžku 80 % získá 430 mg materiálu, který je z více než 99 % tvořen 2R-isomerem, který má teplotu tání 269 až 272 °C za.rozkladu.

/alfa/Dg +0,70°,.(c = 1,15'methanol).

₁H-NMR (CDCÍ ): 0,83 (s, 3H), 1-,Í4 (d, J = 11 Hz, 1H), 1,29 (s, 3H), 1,45 (s, -3H),'1,85 - 2,15 (m, 6H), 2,17 - 2,50 (m, 3H), 3,18 - 3,25 (m, 1H), 3,45 (bs, 2H) , 4,42 {dd,

J = 1,8, 8,6 Hz, 1H), 8,80 (bs, 1H), 10,56 (bs, 1H) .

¹³C-NMR (CDC1₃): 23,9,.24,5, 26,5, 27,0, 27,2, 28,5, 34,9,' 38.,1, 39,4, 45,8, 51,2, 79,0, 87,8,.CIMS m/z (% rel.int.) 250' (MH+, 100),

Analýza pro C_l4H₂₄BNO₂ HC1:

vypočteno C 58,87, H 8,82, N 4,90, Cl 12,41 % nalezeno C 58,64, H 8,79, .N 4,90, Cl 12,66 %.

Metoda B

Suspenze 850 mg, 2,98' mmol (1S,2Si3R,5S)-pinandiolpyrrolidin-2RS.-boritan hydrochloridu ve formě směsi isomerů

T.' : 1 v. 60 ml ethylacetátu· se'zahřívá 4 hodiny-za míchání na teplotu varu pod zpětným chladičem. Směs se za'horka zfiltruje a vzniklá pevná látka se usuší, Čímž se ve výtěžku -64 % získá 541 mg materiálu, obohaceného o isomer R, poměr R-: S je ·2 :·' 1.. Odpařením filtrátu se získá -217 mg materiálu, obohaceného o isomer S, poměr R : S je l_;i: 4·

500 'mg z.filtrbváné pevné látky, se' zpracovává obdobným., způsobem·· působením-45·'ml ethylacetátu’celkem‘1,5'hodiny a směs .se znovu .za horka zfiltruječímž se· ve výtěžku. 73- % získá ~3'66' 'mg' má'těrial'Qš^? pomerěm R : 'S = 7 *: 1. 'Tento materiál se znovu, zpracovává l,5i.hodiny, působením 38 'ml .ethy.lácetátún _w_ Vé .výtěžku -78% sé’.iz.oluje .'287·. mg pevné látky, ktera-má· nyní podíl :R:'S =-97 :* 3.Spektrální vlastnosti'tohoto materiálu byly. stejné jako vlastnosti materiálu, který byl získán metodou A.

Příklad 12 ,

Příprava kyseliny l-(1,l-dimethýlethoxykarbonýl)pyrrolídin-2-borité z (1S,2S,3R,5S)pinandiol-l-(1,íddimethýlethoxykarbonyl)pyrrolidin-.2-boritanu - ' - ' ' '; ·· ' ' . - ..z--v .

K roztoku'1,9'g, 5,44 mmol(ÍS,2S,3R,5S)-pinandiol-1-.( 1,1-dímethylethoxykarbonyl )pyrrolidin-2RS-boritanu z příkladu 8 v. 80'ml acetonu se přidá 80 ml,.0,1 M roztoku, octanu amonného a 3,49 g, 16,33 mmol methajodistanů sodného. Reakční směs se míchá 40 hodin při teplotě místnosti', pak se aceton odpaří a odparek se zpracovává-působením 2M roztoku hydroxidu sodného. Vodná fáze se promyje· 2- x 80' ml methylendichloridu., okyselí přidáním 2M'roztoku kyseliny chlorovodíkové'na pH 3 a pak se extrahuje 4.x 80 ml methylendichlori.du. Organické extrakty se spojí, vysuší se síranem sodným a odpaří, .Čímž se ve výtěžku-76 % získá 890 mg výsledného v

- ·31 produktu ve formě bílé pěnovité pevné látky. Podle NMR-spektra je tento materiál totožný s materiálem, připraveným způsobem podle příkladu 2. Pro analytické účely byla kyselina boritá derivatizována pinakolem.

Příklad .13

Pinako 1-1-(1,1-dime thy le thoxykarbonyl )'pyrrolidin-2RS-boritan.

K míchanému roztoku 8.90 mg, '4,14 mmol kyseliny borité z příkladu 12 v chloroformu se přidá 489 mg, 4,14 mmol p-inakolu. Směs se míchá 15 hodin při teplotě místnosti, pak se rozpouštědlo- odpaří a pdparek.se čistí chromatografii na silikagelu při použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 1 4, čímž se ve výtěžku 85 % .získá 1,04 g produktu ve formě. bílé pevné látky s teplotou tání 73 až 75'°C.

.. . *

H-NMR (CDCŮ ): 1,18 (s, 6H), 1,21 (s, 6H)', 1,38 (s, 9H), .1,57 -2,00 (m, 4H) 2,98 (brs, ÍH) , 3,2,7 (m, 2H) , ¹³C NMR (CDC1₃); 24,3, 24,5, 24,7,-24,9, 25,3,.27,0, 27,6, 28,4, 28,6, 43,5, 45,8, 46,3, 78/8'83,2, 154',4, 154,8..

CI-MS m-/z (% rel. int.): '298 (1.8), 242 (100, MH+ - tBu)', 198 (30, MH+ - Boc).

Analýza pro 0₁₅Η₂θΒΝ0₄ vypočteno ' C 60,62, H 9,50, N 4,71 % nalezeno ,C 60,94, H 9,65, N 4,88

Příklad 14 · ' ( 1S,1S, 3R, 5S)pinandí’olester N-( 1., 1-dimethylethoxykarbonyl )-L-valylpyrro-lidin-2Ř-boritanu ‘

Roztok 351.7.g, 1 ,:62 molu terč.-5oc-L-valínu v l-,6---ii_trech;-me-thy-lendic.hlpřiduse-zchladí v -ledová-lázní .a -v - pru— běhu 40 minut se oři teplotě v rozmezí' 0 až 2 °C -přidá roz-tok 161,8 g, 0‘784 molu dicyklohexylkařbodiimidu v 0,75 litrec ^rn?thYj-^e.údichlo.ridu..' Po skončeném přidávání se roztok míchá' ještě 3,5í· hodiny-při. teplotě v rozmezí 0 až 5 °C. Pak se vytvořená bí lá.. sraženina odfiltruje •a-prpmy je: se· 0,-2 litry - - :

méthylendichloridu. Výsledný Čirý,roztok se při' teplotě 18 až 20 C. za .chlazení na vodní lázni přidá k roztoku 210 g, • ' i - ' ' L ^W ' ·. ’

..0,735 molu (“IS, 2S,3R, 5S)pinandiolpyrroličin-2RS-boritanhydrochlorióu,'připraveného způsobem podle příkladu 10 ve 2,0 litrech méthylendichloridu sobsahem 164 g, 1,62 moluN-methylmorf.olinu. Směs se míchá přes. noc při teplotě místnosti·. Pak se zakalený roztok zfiltruje. přes vrstvu silikagelu's' průměrem částic 200. až·425 mesh, vysokou .2 cm při průměru ^;16' cm. -Vrs-tva se promyje 1,5 litry methylendichlořidu. Rozpouštědlo·' šé‘ odpaří, čímž še získá'542 ,g vysoce viskosní- ho dleje. Tento olej; se rozpustí v 0,7 litrech ethylacetátu a směs se . zchladí .na ledové .lázni. Vytvoří se.krystalky, které se odfiltrují při'nízké teplotě a promyjí se 0,1 litrem chladného ethylacetátu. Filtrační koláč se za vlhka.,, přenese do 0,65 litrů petroletheru a směs se. jednu hodinu míchá při teplotě místnosti. Bílá pevná látka se odfiltruje, promyje se 0,1 litrem chladného petroletheru a suší’do stálé hmotnosti, čímž se':získá 113 ,'4 g výsledriého produktu ve formě bílé pevné látky s teplotou tání 128 až 130 °C. Veškerý matečný .louh se spojí a.odpaří na objem přibližně 0,8-litrů. Směs se nechá st.át-2 dny v-mrazícím zařízení, čímž dojde ke tvorbě pevného podílu, který se .odfiltruje'a Zpracovává působením petroletheru stejně jako.svrchu, čímž se získá 50,4 g béžové pevné látky. Tato látka je směsí nečistot a nežádaného diastereoisom.eru. Matečný louh se odpaří a odparek se čistí nasloupci silikagelu s rozměrem 14 x 60 cm při použití 14 litrů směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 85 15. Příslušné frakce'se oddělí, zpracují působením petroletheru, pevný .podíl se oddělí filtrací a usuší, čímž se získá ještě 18,5 ,g požadovaného produktu. ’ Mimoto se'získá ještě 7,5 g druhého diastereoisomeřu s teplotou' tání 82 až 83 ^C. Spojené frakce a.matečné louhy se nechaj projít druhým.sloupcem, čímž se získá ještě 13,5 -g čisté sloučeniny, celkem se· ve výtěžku 44,3 % získá 145,4 g požadovaného diastereoisomeřu s teplotou tání 128 až 130 °C.

¹H-NMR (CDC1₃): Ó;83. (s; 3H), 0,91' (d, J - 6,7 Hz, 3H),. 0-,97 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,27 (s, 3H) , 1) 35'.- 1,45 (m, 1H .1,39 (s, ,3H), 1,41 (s, 9 Η) , 1,72-2,14 (m, 9H),.2,26.2,36 (m, 1H) , 3,l5.(dd, J = 6,7, 10,1· Hz, 1H) , 3,43 - 3,-51 (m, 1H) , 3,70 - 3,81 (πί,.ΙΗ), 4,19- 4,28 .(m, 2H) , 5,29(d, J .=· 9,2 Hz, .1H), ³C-NMŘ (CDC1₃): 17.3. 19,2, 24,0-, ' 26,3., 27,1, .27,2, 27,4, 28,4, 28,6, 31,4,' 33,9, 35,5, .3.8,2,.39,6, 46,7, 51,2, 56,6 77,8, '79,2, 85,8, 155,9, 170,2. .

CIMS m/z (% rel.-int.) 449 (MH+, 100), 393 (50),

Analýza pro C^H^BN 0_g vypočteno C-64,28, H 9,22, N 6,25 %' nalezeno- C 64,58, -H .9,33 , N 6,52 %.

Příklad 15 . ' .

Hydrogenmaleát (1S,2S,3R,5S )-pinandíolesteru L-vslyl. pyrrolidin-2R-boritan'u

- - - _--248 mg·, 0553-mmol-·( 1S,-;2Sv?R,5S}-pinandiolesteru .

' N-(1~ l-dimethyl-ethoxý-karbonyl)-L-vallylpyrrblidin-2R-⁷' 'ť ‘ ·’ * - ' '

-boritanu se přidá k míchanému roztoku bezvodého chlorovodíku, v ethylacetátu. Po 1,5 hodině se rozpouštědlo odpaří., čímž vznikne hydrochlorid, zbavený ochranné sku-p.iny-,·.-.· Odparek-se·-dělí zmeži methyrendichlOrid^a“' roztOk?··^” uhličitanu sodnéh.o a organická vrstva se vysuší síranem rn^-u-. _i.

iurqvijcn-jjji». itíLuu ví-g.emx.vnei· vr&iva vusočs-íiujc vyčieiuiuu ičíc — ku ve volné formě, která, existuje . v- cyklické · formel obsahující vazbu mezi atomem dusíku a atomem boru, avšak přidáním kyseliny se znovu mění na otevřenou formu. Organický ' roztok se zfiltruje do roztoku 64 mg, 0,553 mmolkyseliny maleinové v 5 ml methanolu' a, rozpouštědlo s,.e, odpaří, Čímž se získá'258 mg krystalického zbytku, který se nechá překrystalovat'z ethylacetátu, čímž se ve výtěžku75 % získá 193 .mg produktu s teplotou tání 145 až'· 146· °C·. ·.'

Ý·

Ή-NMR (CDC1 )': 0,84 (s, 3H)., 1,08 (d, J

6,9 Hz,' 3Hi , ...

1,13 (d, J = 6,9 Hz,.3H), 1,-26 - 1,31' (m, 2H), 1,29 (s, . 3H), 1,38 (s, 3Η),·Ί,72 - 2,15 (m,7H), 2,24/- 2,J38. (zv,;. 2H), 3,28 (dd, J =-6,.9, 9,4 Hz, 1H), 3,38 - 3,47 (m, 1K) , 3,73 -.3,78 (m, IHj, 4,14 (d, J = '5,1 Hz, 1H) , 4,26/'(d, j = 7,1' Hz, 1H), 6,25 (s, -2H), 7,5 - 9,0 (v. br, 4H).

¹³C-NMR (CDC1₃): 17,0, 18,4, 24,0, 26,3, 27,0, 27,í, 28,7, 30,0, 35,4, 38,2, 39,5, 47,3, 51,2, 56,6, 78,1', 86,2, 135,6,

166,3, 16.9,5.

35CIMS m/z (% rel. int.) 349 (MH+, 100), 197 (18),

Analýza pro :

vypočteno . C 59,49, H 8,03, Ν' 6,03% nalezeno C 59,50, H 8,13, N 6,03 %.'

Příklad 16

Methansulfonát kyseliny'L-yalylpyrroíidin-2R-borité

a) Kyselina cyklo-L-valylpyrrolidin-2R-borítá

Roztok 5,0.g, 10,08 mmol maleátu, získaného podle příkladu 15 v 60 ml 1,0%-roztoku kyseliny octové se nanesena sloupec s výškou 3,5 cm ..a průměrem 4 cm s náplní iontoměničové pryskyřice Dowex'50X2-200 v H+ formě. Sloupec se' promývá 14 litry 1,0% roztoku kyseliny octové, pak 4.2 litry vody a pak běžně dodávaným 0,880 roztokem hydroxidu amonného v ředění 1 : 100. Pinandiol je možno izolovat zpět z neutrální .a kyselé frakce. Produkt se nachází v prvních bazických .frakcích, které, se oddělí a promyjí se 2 x 100 ml methylendichloriďu.,· Organické extrakty se vysuší a odpaří,· čímž se ve ' výtěžku 20 % získá 241 mg volné výchozí' látky spolu s malým množstvím pinándiolu. Vodná .fáze se lyofilizuje, čímž se ve výtěžku 66 % získá 1,52 g výsledného produktu, který existuje v cyklické formě s vazbou mezi atomem dusíku a atomem boru, produkt je bílá pevná látka s teplotou tání 12Ό až 130' °C..

¹H-NMR (D₂P): 0,97 (d, J * 7,0 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 1,59 - 1,80 (m, 2H), 1,95 - 2,03.(m, 2H), 2,41 - 2,51 (m, 1H), 2,62 --2,69 (m, 1H), 3,23 - 3,3.2 (m, 1H), 3,513,.58.(m,.S překrývajícím dubletem, J = 4,2' Hz, 2H).

30,7, 29,9, 49,5, 51,0, ¹³C-NMR ’(D₂0) : 19,0, 21,7, 27,3,

170,3.

IR-spekťrum .(cm'¹) 3400 - 3314, '3221 - -3108', 2951 - 2872,

1537,- 1452. - 1359·. '

CIMS m/z- (% rp int 1 77A< í Qfi M Ul _ ί'Γ fl ’ϊ 107 Ύ 1 ΠΠ MP*_H D) ·

-U » 2 * b> / ι-i I \ «ř } i X 2 * ^A ’ *—' ^{1 1} 2 .i... . 4 2 ^v Z J

Analvza oro C„H.„BN„O„ y ia á o vypočteno , C 50,50, H 8,95, N 13,09 % ' n-aiezenó^-C' 50,43, Ή ^:,8,76,'^;W-12,93 ·%.'·'

b) Methansulfónát kyseliny L-válylpyr'rol’idin-2R-borité

K míchané suspenzi 5,17 g, 24,16 mmol svrchu získané cyklizované kyseliny borité ve 190 ml acetonitrilu se pod dusíkem přidá roztok ,2,32 g, 24,16 mmol kyseliny methánsulfonové v 10 ml acetonitrilu po kápkách v průběhu 5 minut a směs se- 2 hodiny míchá při teplotě místností· Pak se pevný >L podíl odfiltruje, dobře.se promyje acetonitrilem a diethyletherem a pak suší,.čímž;se ve.Výtěžku 82 % získá-6,14 gpevného produktu ve formě .bílé pevné látky s .teplotou tání 179 až 180 °C. Krystalizaci tohoto materiálu ze směsi dimethylformamidu a acetonitrilu se ve výtěžku 70 % získá produkt s teplotou tání 181 .až 182 °C. - .....¹H-NMR (D O, fosfát, pH 2): 0,99 (d, J = 6,8 Hz, 3H), .1,09 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 1,69 - 1,75'(m, IH), 1,90 - 1,99 (m,

IH), 2,10 - 2,14 (m, 2H), 2,28 - 2,35 (m,.IH), . 2,80 (s, 3H) , 3,07 (dd,.J = 7,0- a 11,2 Hz, IH),.3,46 -3,51 (m, IH), 3,75 (t, J = 9,0 Hz, IH), 4,14. (d, J = 5,1 Hz, IH), cis-rotamer amidu (přibližně 3 %) je možno, pozorovat také při .3,53 - 37

3,55 (m) a 3,83 (d, J = 6,2 Hz).

,-fc í

¹³C-NMR: - 16,2, 1-8,4, 26,9, 27,1, 29,0, 38,8, 57,2, 167,2, vrcholy pro cis-rotamer amidu j

47,9, 49,0, e možno pozorovat při 16,8,'24,3, 29,9, 07,8,

167,5.

IR-spektrum, '(cm^-1) : ',338'7, .3000 (br), 2972 1197.

2655, 1545, 1370,

CIMS m/z (% rel. int., addukt ethylglykolu) 2.41 (MK+ 100), Analýza pro C^H^B^OgS .

vypočteno C 38,72, H 7,47, N 9,03 % nalezeno C '38,65, H 7,45, N 8*44Příklad 17 fc“

Kyselina N-(1,1-dimethylethoxykarbonyl)-L-valylpyrrolidin-2R-boritá ,K, míchanému roztoku (IS, 2S ,.3Ř, 5S)-pinandiolesteru N-( 1, l-dimethylethoxykarbony.lj-L-vaÍylpyrrolidin-2R-boritanu, který obsahuje 1,0 g, 2,3 mmol této-Tátky, připravené podle příkladu 14 v 75 ml acetonu se přidá 60 ml, 0,1 M roztoku· octanu amonného a 1,48 g, 6,91 mmol methajodistanu sodného. Reakční směs se míchá 48 hodin při teplotě místnosti a pak se aceton odpaří. Odparek se zpracovává působením 100 ml 2M roztoku hydroxidu sodného a pak se promyje 2 χ 50 ml methylendichloridu. ' Vodná vrstva se opatrně okyselé přidáváním 2M kyseliny^:chlorovodíkově až na pH 3 a pak se extrahuje 4 x 70 ml .methylendichloridu. Organické extrakty se spojí- a· vysuší síranem sodným- a odpaří, čímž se ve výtěžku 97 % získá 700 mg produktu ve formě penovité bílé pevné látky. Dalším čištěním chromatografií- na silikagelu při -použití

- 38 směsi methylendichloriču amethanolu 9 : 1 se ve výtěžku • 62 % získá 449 mg kyseliny borité's teplotou tání 82 ·, až 92 °C. . ' ' ' f » . ¹H-NMŘ (CDC1₃) : - 0,95 (d, -J-' = -5,7 Hz, 6H), 1,42 (s, -9H),

.....1,55.-.---1,80 Cm,. 1H)-, 1 _r30- --2,20- (-m·, 4H)-, -2,89 - 3.0 . ......

- (m.,---lH) , 3; 3.0 ť .3,55 (m·, ÍH') ,-·-3,55-- 3,65 ( m, · ÍH.)', Z-,10 '' 4,30 (m, ÍH) , 5,34 (d_r J = 9,2 Hz, ÍH) .

¹³C-NMR (CDC1₃): 18,0,-19,.1, 26,3., 27,7, 28,3,.31,2,.46,1,

-/5 2,-0, -55,7 , -79,5,--155-,. 6-,170,8 ·· - -· - -,-1- -- — - ~- IR-Spěktrum (cm^-\ : 3395 - 3319 , ·:·2971 - 2875, 1711, -1619, 1400, 1174,

CIMS m/z (% rel. intaddukt ethylenglykolu··)-341 (MH', 100), 285 (MH⁺-tB.u, 67), 241 (MH⁺ - BOC ,21).

Příklad 18

Hydrochlorid.kyseliny L-valylpyrrolidin-2R-borité

250 mg, . 0,796 mmol kyseliny N-(l, 1-d-imethylethoxy- karbonyl)-L-valylpyrrolidin-2R-borité',—získané podle příkladu. 17 . se. míchá s._20_.ml,_ 4,5 14.. rozto.ku_čhlp_r.oyodíku_v etheru při teplo.tě ·,místnosti .po.d dusíkem'1.,.5 hodiny... Rozp.ouštědlo s.e odpaří a odparek se rozetře·,.s 3x10 m-1 diethyletheru,. ether· se .pokaždé slije·.· Pak se odparek vysuší, čímž se ve výtěžku 86 % získá 172 mg produktu ve formě bílého prášku s teplotou tání 211 až 213 °C.

¹H-NMR (D₂O, fosfát, -pH 2): 0,99 (d, J = 6,9- Hz, 3H),

1,09 ,(d,. J = 7,0 Hz, 3H.) , 1,67 - 1-,76 (m,.,-lH.), 1,87 - 2,01

-;·39 ~ (m, 1Η)', '2,09 - 2,15 (m, 2H), 2,28 - 2,35' (m, 1H), 3,07 (dd, J - 7,0 Hz a 11,4 Hz, 1H) ,. 3,48 (dtJ = 6,7 a

10,3 Hz', 1H)., 3,73' (dt, J = 1,7 a 10,2. Hz, 1H) , 4,14 (d, J = 5,2 Hz, 1H). .

¹³C-Nf4R: 1.6,0, 18-,3, 25,9, 27,1, 28,9, 47,9, 48,9, 57,2,

157,3.

IR-spektrum (cm^-1): 3400 - 2800, 3368, 2970- 2880, 1635·,

147.5 - 1378, 1400, .CIMS m/ž (% rel. int.,· addukt ethylenglykolu) 241 (MH⁺, 1Ό0) .

Příklad 19

Příprava kyseliny ,cyklo-L-valy.lpyrrolidin-2R-borité ' transesterifikací kyselinou-fenylboritou

Roztok 500 mg, 1,3 mmol hydrochloridu (1S, 2S, 3R, 5'S)- pinandiolesteru L-valylpyrrolidin-2R-'boritanu, připraveného způsobem, popsaným v, příkladu. 1.5 ve’100' ml Iři roztoku kyseliny chlorovodíkové,- obsahujícím 20 ml hexanu a'500-mg,

2,6 mmol kyseliny fenylborité se energicky .1· hodinu míchá při teplotě místnosti.. Pak se hexan odstraní dekantací, načež se ,přidá dalších 20 ml hexanu a výsledná směs se míchá ještě .dalších 30 minut. Pak se jednotlivé vrstvy od.sebe oddělí·, hexanové vrstvy se spojí a vysuší se-^: síranem sodným,'·, načež se organické vrstvy odpaří, čímž se ve výtěžku .99 % získá 331 mg pinandiblfenylboritánu ve formě bílé krystalické pevné látky. Pak se nechá vodná vrstva, projít sloupcem iontoměničové pryskyřice Dowex 50. Sloupec s náplní této pryskyřice se nejprve promývá s použitím 200 ml vody, pak se sloupec promyje 50 ml běžně dodávaného 0,880 hydroxidu amonného v ředění 1 : 100. Bazické frakce se oddělí a pak se. lyofilizují, čímž se ve výtěžku 83·% ; získá celkem 230 mg. volné kyseliny borité- ve- formě bílého prášku. Podle výsledků NMR-spektra je- tento materiál totožný ,-š výsledným-.produktem, který by! získán'; z_pů_sobem_ p_odle_příkla.du 16a.;...'..... - ------ - - -

Claims (3)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Způsob výroby esterů kyseliny prolinborité obecného vzorce VII

   Í..I kde X je spojovací skupina, vyznačuj ícíse tím, že se i .

   a) pyrrol. zpracovává působením aktivovaného derivátu - karboxylové kyseliny za vzniku N-chráněnéhopyrrolu obecného vzorce I (I) kde R znamená alkyl o’ 1 až 6 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3- až 6 atomech uhlíku, fenyl, popřípadě substituovaný alespoň jednou alkylovou skupinou o 1 až 6 atomech'uhlíku nebo trimethylsilylethyl,

   b) na chráneriý meziprodukt obecného vzorce 1 se působí lithiačním-činidlemza vzniku meziproduktu obecného vzorce II kde R má' svrchu uvedený, význam·, ' ·

   c) meziprodúkt obecného vzorce II se uvede do reakce s trialkyiboritar.em,. v němž každá alkylová skupina může' mít přímý, rozvětvený nebo cyklický řetězec'a •obsahuje 1 až 6-atomů uhlíku, ε následnou hydrolýzou, katályzovanou kyselinou, za vzniku meziproduktu obecného vzorce III uvedený, význam, kde R. má ..svrchu

   d) sloučenina obecného vzorce III se redukuje katalytickou hydrogenací za vzniku prolinového meziproduktu obecného vzorce IV

   OH

   Ν'

   IV)

   R' • 1 kde R má svrchu uvedený význam,

   e) sloučenina obecného vzorce IV .se uvede do. reakce s diolem obecného vzorce V

   HO - X - OH ' (V).

   kde X je tatáž spojovací skupina jako. svrchu, . za vzniku boritanového esteru obecného vzorce VI

   RO 0 kde

   X. je tatáž, spojovací skupina jako svrchu a R má svrchu uvedený význam,

   f) načež se odstraní ochranná skupina na atomu dusíku prolinového kruhu.

   • 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se t í m , že se ve stupni c) uvádí do reakce meziprodukt obecného vzorce II s' trimethylboritaném nebo triethylbori- j .taném. . ,

   4*-'· .....

   3. Způsob,podle nároku 1, vyznačuji c í ' s e tí m , .žě spojovací'.'.skupinou .X .je nasycený uhlovodíkový...re- . tězec o '2 až 73- atomech uhlíku,' nasycený uhlovodíkový řetězec o 2 až.3 atomech uhlíku, tvořící část cyklického uhlíkového systému, obsahujícího 5. až 12 atomů uhlíku a popřípadě obsa .hájícího' nenasycené^važby-jjebp^kondenžpyan^kruhy^^jdále^uhlovodí.kový řetězec -o 2 až 3 atomech uhlíku, tvořící část- ároma'tickéhó kruhového sýs-temu, nebo znamená X skupinu obecného vzorce ,v níž n a m znamenají celá čísla
2. 2 nebo 3 a skupina je popřípadě substituována alespoň jednou alkylovou skupinou o 1 až 3 atomech uhlíku nebo. fenylovou skupinou. ·.

   ,4. Způsob podle nároku 1, v. yznačující se t í m , že se esterifikace ve· stupni e) provádí půš.ob.ením diolu ze skupiny ethylenglyko.l,. pinakol, ...katecnol, pinaňďiol, . butan-2,3-diol,jdiethanolamin nebo 1,2-d.ifenylethan-1', 2-diol.

   5.. Způsob pbalenároku 4, vyznačujíc í s'e t í m, že se esterifikace provádí při použití opticky áktiv- ního*^Lpi‘nandlolu', ·^J' '·..... . .......

   6. Způsob podle nároku 5, vyznačuj ící se tím, že se N-chráněný ester, pinandiolu.·, získaný, ve stupni e) dále dělí na jednotlivé diastereoisomery.

   7. Způsob podle nároku 5, vyznačující se t í m , že se ester pinandiolu, . zbavený ochranné skupiny na atomu dusíku a vytvořený ve stupni f) nároku 1 dále dělí na jednotlivé diastereoisomery.

   '8. Způsob podle nároku 1, vyznačuj ící se t í m', že se jako výchozí látky užije pyrrolu, v němž 8 znamená terč.butyl, benzyl, trimethylsilylethyl, fenyl', methyl nebo ethyl..

   9. Způsob výroby esteru kyseliny prolinborité obecného vzorce VII kde X je spojovací skupina, vyz. nacující se ť í m , že se

   a) na .pyrrol působí aktivovaným derivátem, karboxylové kyseliny za vzniku N-chráněného pyrrolu obecného vzorce I

   N

   RO

   - 46^; r':’ .kde R- znamená alkyl-o . 1...až 6 atomech uhlíku) cyklo-^: ' · · t . · -6-' ' ^r alkyl o .3 až 6 atomech uhlíku·,, benzyl, 'fenyl,· popř.ír’ • „ —# “.· . < « . ^J· , . ·. - H ·»· j i . , . r -.

   pádě substituovaný'ječnou nebo větším' po'čtem^:--alkylo-‘ vých /skupin o 1 až.:6,. atomech uhlíku nebo-.trimethyl, silylethyl, ./'·' *' , .·.<· ··-· -·* ..... ' -jí- - _M ... . . ·. , ^J.

   \:-'^b '7

   A’* · ¹ ná ,’ ch' raněný/me zip řpdpkť. oběcňého.„y z ó r ce ;I.' se, působí' ' 1 i thi ačn'í'm^r S inidlem^zaývzniku· mez iproduk tu ‘‘obecného kde.R má svrchu uvedený význam, meziprodukt obecného .vzorce IÍse uvede do reakce . ϊ · '4'4ΐ>.μ:. .

   'i s -•.trialkylboritanem·, v němž každá’ alkylová /'skupina · má^prímý,.rozvětvený nebo cyklický řetězec a obsahuje

   .1 až-6 atomů uhlíku, '.s-následnou hydrolýzou, kaťalyyovanou kyselinou, za vzniku meziproduktu obecného vz.o.rc.e..ÍI.I_. . . . /. ... . í . . ... ._/._. ._ ·.... _ (III) kde' R má svrchu uvedený význam,

   d) sloučenina obecného vzorce III se uvede do reakce ,s diolem obecného vzorce V

   Kč - X - OH . (V)

   ·. kde X je spojovací skupina, • za vzniku boritanového esteru obecného vzorce IIIA (IIIA)

   Čij _:kde.X a R mají svrchu uvedený význam,

   e) výsledný ’ester se redukuje při‘použití katalytické hydrogenace za vzniku prolinového meziproduktu obecného vzorce VI ,R

   - 48 - kde X a R mají svrchu uvedený význam,

   f) -. načež se odstraní ochranná skupina na atomu dusíku prolinového kruhu. ‘ ’

   10... Způsob ..podl.e. nároku 9., v y. .z. n.a.o .u _.j Í..C..Í .. . a - s e ‘t-í/m --že se-ve/.stupni c) ..uvede -do rekace-mezipro-—, dukt obecného vzorce. II s trimethylboritanem nebo s triethylboritaném.. ,

   - - j . - .---I l-.ýZpůsob-..poďle-,mároku. .9.,4.v ..y.-. z^n./a^č^u.. j..„í.^o_í s-’e t í m ', že v spojovací skupinou' X je'nasycený uhlovodí' kový -řetězec o 2 až- 3 atomech «uhlíku. - nasycený-uhlovodíkový řetězec‘^ť ó 2 až 3 atomech, uhlíku, tvořící část cyklického uhlíkového systému,- obsahujícího¹ 5, až 12 atomů uhlíku a popřípadě..obsahujícího nenasycené vazby nebo'.kondenzované kru hy, dále uhlovodíkový řetězec .6,2. až-3 atomech uhlíku, * tvořící, část aromatického kruhového.systému, nebo znamená X skupinu obecného vzorce -.(CH.) -NH-(CH„) ₇, v níž n a m znamenají celá čísla 2 nebo '3 a skupina je popřípadě- substituována-alespoň jednou. alkylovou .^skupinou o .1 až 3 a-to^{L τ} ' i. . ·, ·; /- ' mech uhlíku n.eboy.fenylovou 'skupinou. \. / ··'...· ΐ· ' i · :i .

   12. Způsob -podlé nároku '9, vyznačuji o. í

   -se t í'm , že se es-terifikacé. ve stupni d)'provádí při .použití, diolu .ze. skupiny ethyíenglykof, pinakol, katechol, pinandiol, 'butan--2,3-diol, diethano lamin -a 1,2-difenylethan -1,2-di-ol. .

   13. Způsob podle nároku 12, vyznačující ; s e t í m , že se jako diol použije opticky aktivní pinandiol. · ..

   14. Způsob podle nároku 13, vyznačuj í c í se tím, že se Nechráněný ester pinandiolu, vytvořený ve stupni e.) nároku'9 dále dělí .na jednotlivé diastereoisomery.

   15. Způsob podle· nároku 13, vy. značující se t í m , že se ester pinandiolu, zbavený ochranné skupiny na dusíkovém atomu, vytvořený ve stupni f) nároku 9 dále dělí na jednotlivé diastereoisomery.

   16. Způsob podle nároku 9·, v y z n a č u j í c í'. s e tím , že se jako. výchozí látky užije pyrrolu/ v němž R znamená terč.butyl, benzyl, trimethylsilylethyl, fenyl, methyl nebo ethyl.

   : 17. Způsob výroby meziproduktu Obecného vzorce IV kde R .má význam, uvedený v nároku 1, vyznačující s é tím, že se

   a) na pyrrol působí aktivovaným;derivátem'karboxylové . kyseliny .za vzniku N-chráněhého' pyrrolu obecného vzorce I kde R znamená alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3'-až’6 atomech uhlíku, benzyl, fenyl, popřípadě substituovaný alespoň jednou alkylovou skupinou, lo··.·!-.ažn6-atomech-.-uhlíku·· -nebo--tr-i-methyl-s-i-ly-l-ethy-l-,-· v» 'r, k v. A ví X tví r?. -7 -í η Λ Λι i V — 1 ^Γ τ Λ ΚΌ O T CA Γι ?VC ΓίΚ Ί i i Ci LÍH Cil i L, 1 J J v \^· i >_ ·^ u.

   lithiacním-činidlem za vzniku meziproduktu·obecného vzorce II

   Li

   II) kde R má svrchu 'uvedený význam,

   c) · meziprodukt obecného vzorce II se uvéde do'reakce s trialkylboritanem, v němž každá alkylová skupina má přímý,· rozvětvený nebo cyklický řetězec a obsahuje 1 až 6 atomů uhlíku, s následnou hydrolýzou, katalyzovanou kyselinou, za vzniku meziproduktu obecného vzorce III .·.. .

   <:·?

   X ;oh

   ΌΗ' (ΠΙ) kde R má svrchu uvedený význam·, a

   d) sloučenina obecného vzorce III se redukuje při použiti katalytické hydrogenace za vzniku prolinového meziproduktu obecného vzorce IV.

   18. Způsob výroby meziproduktu' obecného vzorce IV (IV) kde R má význam, uvedený v nároku 1, v y z na č u j í c í s e tím, že se

   a) na pyrrolidin působí acylačním činidlem za vzniku chráněného pyrrolidinů obecného vzorce VIII

   - 52 (VIII)

   RO kdeR znaneťná alkyl o-l-až 6 atpmech^unlíkucykloalkyl o.3'-až\6 atomech uhlíku, benzyl, fenyl.., popři-.

   . -pádě substituovaný' alespoň jebnou alkylovou skupinou o^l až _6 atomech,uhl.íku nebo tri.methylsilylethyl,;

   - b) na--sloučeninu-/obecného-vzorce VIII sé působí lithiačním Činidlem za .vzniku sloučeniny obecného vzorce IX kde R'má. svrchu uvedený význam.,'

   c) . sloučenina obecného vzorce IX.se uvede do reakce' s trialkylboritanem, v němž každá alkylová skupina má přímý, rozvětvený nebo cyklický řetězec a obsahuje '1 až 6 atbmů'uhlíku, načež se

   d) produkt z předcházejícího stupně hydrolyzuje za vzniku sloučeniny obecného vzorce IV.

   .I

   19. Způsob podle nároku 18, vyznačující se tím, že se ve stupni c) uvede do reakce meziprodukt obecného vzorce IX s trimethylboritanem nebo triethvlboritaném.

   20.. Meziprodukt obecného vzorce III kde R' znamená alkyl o 1 až 6 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 5 atomech uhlíku/· benzyl, fenyl, popřípadě substituovaný, jedním nebo větším počtem alkylo_ vých skupin ρ 1 až 6 atomech uhlíku nebo trimethyl- | šilylethyl, ι ·Ί jako meziprodukt pro výrobu esterů kyseliny prolinborité obecného vzorce I a meziproduktu obecného vzorce .IV.

   21. Kyselina l-( 1,1-dimethýlethoxykarbonyl )'pyrrol-2-boritá. ’

   22. Sloučenina ze skupiny (lS,2S,3R,5S)pinandiol-1 (1, l-dimethylethoxykarbónyl)pyrroli.din-2S-boritan, {IS, 2S, 3R, 5S) -pinandiol-1- (1,1-dimethylethoxykarbonyl) pyrrolidin-2R-boritan, (IR, 2R, 3S, 5R).pi.nandiol-l-( 1,1-di met hýle thoxy karbonyl) pyrrolidin-2S-boritan a

   - 54. (IR , 2R , 3S , 5R)pinandiol-l-(-1,1-dimethy lethoxykarbonyl) pyrrolidin-2R-boronát. .

   ‘ · -Ϊ

   23. Sloučenina ze skupiny (1S/2S,3R,5S)pinandiol-‘ Py.rrOlidin-2S-7bOritarihydrOChl.Orid , ... ;(-1S j-2:Sý3.R.í55)'.pinandi’.oipyrrolidin:-2R-borÍ.tanhydr.ochl'o.ri'd7' ( IR, 2R, 3S ,’5R)pinantíiolpyr'rolidi'n-2S-boritanhydro.chlorid, (1R , 2R','3S ,'5R)pinandiolpyrrolidin-2R-bor'itánhydrociilorid.

   . ....... *..24.„.Sloučenina' .ze.,skupiny.;i.(..lS,.25:,3R:,.5-Slp.inandiol.-1-,........

   * ..... .£' ,-(1 ,'1-dimethylethóxykarbonyl )pyrrol-2-boritan a’

   .. . · · · ^J * . *··· - ^J'· íIR,2R,35,5R)pinandioI-i-( 1, i-dimethy lethoxykarbonyl )py.rrol-2-boritan. :

   25. Způsob odstranění pinandiolu jako ochranné esterové skupiny z boritanového esteru, vyznačuj íc í se t.í m , že se na tento boritanový ester působí oxidačním činidlem, schopným odštěpit'1,2-dióly.

   26. Způsob podle nároku 25, v y'z n a'č’u j ,ί.,ρ. í s e t i m , že se. jako oxidační činidlo užije metajodistan sodný . , ’ '. . . ·>

   27. Způsob odstranění pinandiolu jako ochranné^esterové skupiny· ze sloučeniny obecného vzorce X -

   H

   N *

   (X) kde '2 ,

   R .znamena ochrannou skupinu a.
3. 3 ,

   R znamena postranní řetězec přírodně se vyskytující aminokyseliny, popřípadě s příslušnými ochrannými skupinami, nebo k odstra není pinandiolu jako ochranné esterové skupiny ze sloučeniny obecného vzorce ΧΪ kde X znamená'spojovací skupinu a . 3 - .

   R má svrchu uvedený význam, ' vy.z.nač uj íc í se t ím, že se na bořit ano vý ' ester .působí oxidačním činidlem, schopným odštěpení 1,2-čiolu.

   28. Způsob podle nároku 27, v yz n ač u j í c í Se t í m , že se jako: oxidační činidlo užije metaj.odis.tan sodný.

   - 56í' -··.29. Způsob odstranění pinandiolů jako ochranné-este’ ' > : ' . . * fy ' ¹ rové skupiny' z boritanového ?esteru, obsahujícího volnou .· U aminoskupinu, v . y z jr..a č u 'j -í ,c í · =s' e ' t í m že se _? '

   - -Τ-'· - -* - · -ft . ' . ' — ' ' ~ ~ vodný roztok uvedeného boritanového esteru ..nanese na slou-··

   V;' * '. · pec katiohtoměničové, pryskyřice, - sloupec .se vymývá vodou·..·· nebo'.zředěným,, vodným roztokem kyseliny .k odstranění pinanďi olu anakonecý.sé“*;s 1 oůpec'' vymyvá' z'redeným yo dňým ířož'tpkem./ . ' u. ! ·' Ζ'ΧΖ'''* · '•/“‘‘'i· < .7* ' X'. ' · - i'í ·Τ»Π Ί '-i, .·>-!. .ý 'baze; 'k ’ získání -volné 'kyseliny borité·'.' ·' ··’······' ^!í ·< '·.' ·

   Z ,3'0/' Způsob”,ρο'δΤβ nařok’ir-2'9’7·' v ý žh· á ’c“u j íc?' i⁷· s-e t í /mfj .že..se užije^sroupcer.s,Záplní silně kyselé... :ka.tion:t'oměriíčové 'pryskyřice,. .,

   31. Způsob odstranění pinandiolů jako. ochranné esté'rov.é skupiny ze sloučeniny obecného vzorce XI \

   (XI)· kde

   X znamená spojovací skupinu·a -

   3 ,

   R ' má význam; uvedený v nároku 27, vyznačuj ící se. tím ,. že. se vodný roztok tohoto boritanového es.teř.u nanese na sloupec kationtoměničové pryskyřice, sloupec se vymývá vodou nebo zředěným vodným roztokem kyseliny k odstranění pinončiolu a nakonec se. sloupec vymývá zředěným vodným roztokem baze k získání, volné kyseliny borité.

   32. Způsob podle nároku 31, v y z n a č u j í c í se t í m , že se užije sloupce s. náplní silně kyselé kationtoměničové pryskyřice.

   33. Meziprodukt- obecného vzorce X kde ' ’

   R . znamená ochrannou skupinu,

   R znamená postranní' řetězec přírodně se vyskytující aminokyseliny, popřípadě s příslušnými ochrannými skupinami a skupina -0-X-0- je odvozena od pinandiolu.

   - -58 . 34. ’(lS,2S,3R,5S)pínandiolester' N— (1,1-dimethylethoxykarbonyl)-LTvalylpyrrolidin-2R-boriťan,

   35. Meziprodukt obecného vzorce Xi kde ochranná skupina -0-X-0- je odvozena od pinandiolu a

   3 ,'·'.,··'

   R znamená postranní řetězec přírodně se vyskytující aminokyseliny, popřípadě; s příslušnými ochrannými * . skuoinami·. ''

   3'6. (IS ,'2S, 3R, 5S)pinandiolester L-valylpyrrclidin-2R-boritanu nebo jeho, sůl,' . ·

   37. Způsob výroby esteru kyseliny.prolinborité obecného vzorce VII (VII)

   JÍ

   kde X znamená spojovací skupinu, vyznaču. -jící. se t í .m , že se'

   a) na pyrrolidin působí acylačním činidlem za získáníchráněného pyrrolidinu obecného vzorce VIII (VIII) kde R znamená'alkyl, o 1 až 5 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 6 atomech uhlíku, benzyl, fenyl, popřípadě substituovaný alespoň jednou alkylovou skupinou o 1 až 6 atomech uhlíku nebo trimethylsílylethyl,

   b) Na sloučeninu obecného vzorce VIII se působí litniač ním činidlem za vzniku sloučeniny obecného vzorce IX kde R má svrchu uvedený .význam,

   c) sloučenina obecného, vzorce IX. se uvede do reakce s trialkýl.boritanem, v němž každá alkylová skupina má. přímý, rozvětvený nebo cyklický řetězec a obsahuje 1' až '6 atomů uhlíku,

   60 . d) produkt z předchozího stupně se hydrolyzuje za vzniku sloučeniny obecného vzorce IV .4,’ϊ . J kdé ;R-'má‘^f svrchu'· uvedený význam,' .<

   e) sloučenina obecného vzorce IV se uvede db reakce s diolem obecného vzorce V. \

   HO - X - OH . - (V) kde X je tatáž spojovací skupina jako svrchu, za vzniku- boritanového esteru-obecného vzorce IV /°\

   k. . Λ

   O (v-)

   Ikde R má svrchu uvedený význam a X je tatáž spojovací skupina jako svrchu,

   f) z atomu dusíku v prolinovém kruhu se odstraní ochranná skupina.

   38. Způsob podle nároku 37, vyznačující s e t í.m ,..ž.e se ve stupni c) uvede co reakce meziprodukt obecného vzorce IX s trimethylboritanem nebo s triethy lboritanem.

   39. Způsob podle nároku 37, vyznačující se t í m , že spojovací skupinou X je nasycený uhlovodíkový řetězec o 2 až 3 atomech uhlíku, nasycený uhlovodíkový řetězec o 2 až 3 atomech uhlíku, tvořící část cyklického uhlíkového systému, obsahujícího 5 až 12 atomů uhlíku a popřípadě obsahujícího nenasycené vazby .nebo kondenzované kruhy,' dále uhlovodíkový řetězec o 2 až 3 atomech uhlíku,' tvořící část aromatického kruhového- systému, nebo může X znamenat skuoinu obecného vzorce -(CH„) -(CH.) v níž n a m zname2 n 2 m nají celá čísla.2· nebo 3 a.skupina je. popřípadě substituová- na alespoň jednou alkylovou skupinou o T až 3 atomech uhlíku neboenýlovou skupinou.

   40. Způsob podle nároku ·37, vy.značujíc.í se tím, že se esterif ikace ve-‘Stupni e) provádí při použití diolu ze skupiny ethylenglykol, pinakol, katechol, pinandiol, butan-2,3-diol, diethanolamin nebo 1,2-difenyletha.n-1,2-diol.

   41. Způsob podle nároku 40,vyznačující, se t í m , že se při esterifikaci jako diol použije opticky aktivní, .pinandiol,.

   . 42. Způsob podlé nároku 41, - v y z ,n a č u j í c í se t í ,m ., že se N-chráněný·ester pinandiolu,, který .se získá ve stupni e) nároku 37 dále -dělí na jednotlivé diastereoisomery.

   43. Způsob podlejnároku 41, vy z n a Č u j í c.í se tím,.že se.ester pinandiolu, zbavený ochranné ý. skupiny na atomu dusíku,· ,vy tvořený ve stupni-f) nároku 37 dálevdě.lí-.na .-.jednotlivé -diastereoisomery.- —- - -

   44. Způsob podle nároku 37, vy z n a ..č u j í c í ' .s.„e. tím,, že se.užije yý.choz.ích látek,, v nichž R znamená-terč.butyl,^benzýl,· trimethylsilylethyl, fenyl, methyl nebo- ethyl; ' η™