CS277138B6 - Process for preparing transmissible factor industrially - Google Patents

Process for preparing transmissible factor industrially Download PDF

Info

Publication number
CS277138B6
CS277138B6 CS905435A CS543590A CS277138B6 CS 277138 B6 CS277138 B6 CS 277138B6 CS 905435 A CS905435 A CS 905435A CS 543590 A CS543590 A CS 543590A CS 277138 B6 CS277138 B6 CS 277138B6
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
blood
leukocytes
membrane
suspension
ultrafiltrate
Prior art date
Application number
CS905435A
Other languages
Czech (cs)
Other versions
CS543590A3 (en
Inventor
Jan Rndr Phmr Rahm
Jirina Dlouha
Vlasta Chmelikova
Stanislav Pharmdr Sebesta
Vladimir Rndr Csc Prochazka
Original Assignee
Masarykova Nemocnice S Polikli
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Masarykova Nemocnice S Polikli filed Critical Masarykova Nemocnice S Polikli
Priority to CS905435A priority Critical patent/CS277138B6/en
Publication of CS543590A3 publication Critical patent/CS543590A3/en
Publication of CS277138B6 publication Critical patent/CS277138B6/en

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Řeší se průmyslová příprava přenosového faktoru ze zvířecí krve nebo z krevních elementů této krve, která spočívá v hemolyse erytrocytů přítomných v krvi nebo krevních elementech, v odstředění buněčných stěn erytrocytů a neporušených leukocytů na velkokapacitní průtokové odstředivce, v promytí sedimentu během odstředění a následné desintegraci leukocytů ultrazvukem nebo dekompresí v dusíku. Vzniklá suspense zbytků krevních buněk se přímo ultrafiltruje přes membránu s vylučovacím limitem 10.000, ultrafiltrát obsahující směs nízkomolekulárních peptidů a nukleotidů se sterilisuje pomocí sterilisační membrány a lyofilisuje nebo použije přímo jako léková forma. Přenosový faktor je imunomodulátor používaný při léčení vrozených nebo získaných poruch imunitního systému, bakteriálních i virových infekcí a nádorových onemocnění.Industrial preparation of transmission factor from animal blood or blood elements of this blood that lie in hemolysis erythrocytes present in blood or blood elements, in the centrifugation of cellular erythrocyte walls and intact leukocytes high capacity flow centrifuges in washing the sediment during centrifugation and subsequent disintegration of the leukocytes by ultrasound or decompression in nitrogen. Originated suspension of blood cell debris is directly ultrafilters through a membrane with excretion 10,000, ultrafiltrate containing a mixture of low molecular weight peptides and nucleotides is sterilized by sterilization membranes and lyophilized or used directly as a dosage form. Transfer factor is an immunomodulator used in the treatment of congenital or acquired immune disorders system, bacterial and viral infections and cancer.

Description

Vynález se týká způsobu průmyslové výroby přenosového faktoru z leukocytů přítomných ve zvířecí krvi nebo v krevních elementech této krve.The invention relates to a process for the industrial production of a transfer factor from leukocytes present in animal blood or in blood elements of this blood.

Přenosový faktor nebo též transfer faktor (TF), případně podle přesnější terminologie dialysovatelný leukocytární extrakt (DLE), je imunomodulační preparát, nesoucí řadu imunologických aktivit závislých i nezávislých na antigenu. Je-li připraven z leukocytů (dále Le) dárců imunisovaných příslušným antigenem, je schopen přenášet imunitní reakci na tento antigen na neodpovídajícího příjemce (TF aktivita).Transfer factor or transfer factor (TF), or, according to more precise terminology, dialysable leukocyte extract (DLE), is an immunomodulatory preparation carrying a number of antigen-dependent and antigen-independent immunological activities. When prepared from leukocytes (hereinafter Le) of donors immunized with the respective antigen, it is able to transmit the immune response to this antigen to the non-responding recipient (TF activity).

Klinicky se používá k léčení vrozených nebo získaných poruch buňkami zprostředkované imunity, při různých bakteriálních nebo virových infekcích a při terapii nádorových onemocnění. Podává se ve formě injekcí nebo perorálně.It is used clinically to treat congenital or acquired disorders of cell-mediated immunity, in various bacterial or viral infections, and in the treatment of cancer. It is given as an injection or orally.

Přenosový faktor je směs nízkomolekulárních peptidů a nukleotidů, získaná extrakcí Le imunisovaných dárců nebo dárců s dobře fungujícím imunitním systémem. Kriteriem koncentrace TF je jedna mezinárodní jednotka (MJ), definovaná jako extrakt obvykle z 5.108 Le. Výchozím materiálem pro přípravu je většinou lidská krev.Transfer factor is a mixture of low molecular weight peptides and nucleotides obtained by extracting Le immunized donors or donors with a well-functioning immune system. The TF concentration criterion is one International Unit (MU), defined as the extract usually from 5.10 8 Le. The starting material for the preparation is mostly human blood.

Nejčastější způsob přípravy TF spočívá v tom, že se bílé krvinky obsažené v buffy coatu (dále BC, což je leukocyty obohacená frakce krevních buněk získaná odstředěním krve obsahující konservační roztok) rozruší střídavým zmražením a rozmražením (J. F. Raymond se sp. , Vox Sang. 29 , 338, 1975; Brit, patent č. 1443948). Zbytky krevních buněk se bud odstředí při 20 000 G a supernatant se dialysuje do destilované vody, nebo se k dialyse použije přímo desintegrovaný BC. Dialysu lze nahradit ultrafiltrací přes membránu s vylučovacím limitem 10 000. Dialysát nebo ultrafiltrát se většinou lyofilisuje a před použitím se rozpouští ve vodě pro injekce.The most common method of preparing TF is to disrupt the white blood cells contained in the buffy coat (BC, which is a leukocyte-enriched fraction of blood cells obtained by centrifuging the blood containing the preservative solution) by alternating freezing and thawing (JF Raymond et al., Vox Sang. 29 , 338, 1975; Brit, Patent No. 1443948). Blood cell debris is either centrifuged at 20,000 G and the supernatant is dialyzed into distilled water or directly disintegrated BC is used for dialysis. Dialysate can be replaced by ultrafiltration through a 10,000 cut-off membrane. The dialysate or ultrafiltrate is usually lyophilized and dissolved in water for injection before use.

Příprava TF přes svoji jednoduchost skrývá některé technologické obtíže, které se zvýrazní při jejím převodu do produkčního měřítka.Despite its simplicity, the preparation of TF hides some technological difficulties, which are accentuated during its conversion to the production scale.

Velká spotřeba preparátu v humánní i veterinární medicíně vyvolala na jedné straně nutnost hledat dostupnější zdroje leukocytů než je lidská krev a na straně druhé nutnost vyrovnat se s dalšími technologickými problémy, spojenými s velkokapacitní výrobou TF. Jako výchozího materiálu se začalo používat živočišné krve (prasečí - Jap. patent č. 56115-720, dále pak hovězí, koňské, kachní atd.), případně i lymfatických orgánů. Použití krve jako zdroje Le má řadu důležitých výhod, mimo jiné umožňuje imunisaci dárců. Naproti tomu mohou být lymfatické orgány kontaminovány různými toxickými látkami (např. z potravy), přecházejícími do konečného produktu.The high consumption of the preparation in human and veterinary medicine has made it necessary, on the one hand, to look for more available sources of leukocytes than human blood and, on the other hand, to cope with other technological problems associated with large-scale TF production. Animal blood (porcine - Japanese Patent No. 56115-720, then bovine, equine, duck, etc.) and possibly lymphatic organs began to be used as starting material. The use of blood as a source of Le has a number of important advantages, including the immunization of donors. In contrast, lymphatic organs can be contaminated with various toxic substances (eg from food) passing into the final product.

Základním technickým problémem průmyslové výroby TF je ekonomická příprava velkého množství koncentrované suspense bílých krvinek. Přenosový faktor připravuje z buffy coatu savčí krve. BC se dá snadno získat odstředěním krve v diskontinuálních (kyvetoCS 277138 B6 vých) odstředivkách, kdy tvoří úzké rozhraní mezi vrstvami plasmy a ěrytrocytů (dále Ery). Kapacita rotorů těchto odstředivek je však malá, maximálně 6 litrů, což je důvodem nepoužitelnosti BC jako výchozího materiálu pro průmyslovou výrobu TF.The basic technical problem of industrial production of TF is the economic preparation of a large amount of concentrated suspension of white blood cells. The transfer factor prepares mammalian blood from the buffy coat. BC can be easily obtained by centrifuging the blood in discontinuous (cuvette CS 277138 B6) centrifuges, where it forms a narrow interface between the layers of plasma and erythrocytes (hereinafter Ery). However, the rotor capacity of these centrifuges is small, a maximum of 6 liters, which is the reason for the unusability of BC as a starting material for the industrial production of TF.

Stejně tak je z kapacitních i ekonomických důvodů nevyhovující isolace Le protiproudnou centrifugací (elutriací), případně pomocí různých průtokových separátorů buněk používaných např. při leukaferese.Likewise, for capacity and economic reasons, the isolation of Le is unsatisfactory by countercurrent centrifugation (elutriation), or by means of various flow cell separators used, for example, in leukapheresis.

Isolace Le sedimentací krevních buněk za přídavku polyelektrolytů, která by se snadno dala převést do většího měřítka, vede k malým výtěžkům Le, nehledě na to, že přítomnost zbytků vysokomolekulárních koagulantů Ery v suspensí komplikuje následnou ultrafiltraci.Isolation of Le by sedimentation of blood cells with the addition of polyelectrolytes, which could easily be scaled up, leads to low yields of Le, despite the fact that the presence of residues of high molecular weight Eagu coagulants in the suspension complicates the subsequent ultrafiltration.

Uvedené nevýhody odstraňuje způsob průmyslové výroby přenosového faktoru ze zvířecí krve nebo z krevních elementů této krve, jehož podstata spočívá v tom, že se Ery přítomné v krvi nebo v krevních elementech hemolysují v hypotonickém prostředí, leukocyty a zbytky ěrytrocytů se odstředí v průtokové odstředivce, načež se Le v sedimentu po promyti destilovanou vodou desintegrují ve vodě, poté se vzniklá suspense ultrafiltruje a po sterilisaci průchodem přes sterilisační membránu se ultrafiltrát lyofilisuje nebo použije přímo jako léková forma.These methods are eliminated by a method for the industrial production of a transfer factor from animal blood or from blood elements of this blood, the essence of which is that the era present in the blood or blood elements are hemolyzed in a hypotonic environment, leukocytes and erythrocyte residues are centrifuged in a flow centrifuge. The Le in the sediment, after washing with distilled water, is disintegrated in water, then the resulting suspension is ultrafiltered and, after sterilization by passing through a sterilizing membrane, the ultrafiltrate is lyophilized or used directly as a dosage form.

Způsobem podle vynálezu se leukocyty desintegrují ultrazvukem nebo dekompresí v dusíku a vzniklá suspense se ultrafiltruje přes membránu s vylučovacím limitem 10 000.According to the method of the invention, the leukocytes are disintegrated by ultrasound or decompression in nitrogen and the resulting suspension is ultrafiltered through a membrane with an exclusion limit of 10,000.

Způsob podle vynálezu se provádí tak, že se Ery ze zvířecí krve nebo z jejích elementů hemolysují v hypotonickém prostředí destilované vody. Le se odstředí v průtokové odstředivce, přičemž extrakt hernolysovaných Ery, především hemoglobin, odchází z odstředivky jako lehká fáze a sediment tvoří Le se zbytky Ery. Sediment se za chodu odstředivky promyje destilovanou vodou a Le se ve vodné suspensí desintegrují ultrazvukem nebo dekompresí v dusíku. Suspense rozrušených krevních buněk se ultrafiltruje přes membránu s vylučovacím limitem 10 000. Ultrafiltrát se sterilisuje membránovou filtrací a lyofilisuje, nebo použije přímo jako léková forma.The method according to the invention is carried out in such a way that Ery from animal blood or from its elements are hemolyzed in a hypotonic environment of distilled water. Le is centrifuged in a flow centrifuge, with the extract of the herbalized Ery, in particular hemoglobin, leaving the centrifuge as a light phase and the sediment forming Le with the Ery residues. The sediment is washed with distilled water while the centrifuge is running, and Le is disintegrated in the aqueous suspension by ultrasound or decompression in nitrogen. The disrupted blood cell suspension is ultrafiltered through a membrane with an exclusion limit of 10,000. The ultrafiltrate is sterilized by membrane filtration and lyophilized, or used directly as a dosage form.

Způsob podle vynálezu má tyto výhody:The method according to the invention has the following advantages:

1. Hemolysou Ery v krvi nebo v krevních elementech vznikne dvousložkový systém, představovaný na jedné straně neporušenými Le a zbytky Ery, na druhé straně kapalinou tvořenou extraktem z Ery. Tento dvousložkový systém umožňuje průmyslovou isolaci Le jejich odstředěním na velkokapacitních průmyslových odstředivkách .1. Hemolysis of the Era in the blood or in the blood elements results in a two-component system, represented on the one hand by intact Le and the remnants of the Era, on the other hand by the liquid formed by the Ery extract. This two-component system enables the industrial isolation of Le by centrifuging them on large-capacity industrial centrifuges.

2. Lze připravit velká kvanta dostatečně koncentrované suspense promytých leukocytů, takže výsledný produkt obsahuje značné množství biologicky účinných látek - peptidů a nukleotidů - v malém objemu. Příznivým důsledkem této skutečnosti je snadná lyofilisace konečného produktu. .2. Large quantities of a sufficiently concentrated suspension of washed leukocytes can be prepared, so that the final product contains a considerable amount of biologically active substances - peptides and nucleotides - in a small volume. A favorable consequence of this fact is the easy lyophilization of the final product. .

/ (/ (

3. Sedimentované Le se při desintegraci pravidelně rozptýlí v celém objemu extrakční kapaliny, čímž je umožněna jejich dokonalá extrakce.3. During disintegration, the sedimented Les are regularly dispersed in the entire volume of the extraction liquid, thus enabling their perfect extraction.

4. Suspensi rozrušených Le a Ery lze přímo, bez dalších úprav, ultrafiltrovat přes membránu s vylučovacím limitem 10 000. Není tedy nutná ani dialysa, ani filtrace nebo odstředění stěn krevních buněk.4. The suspension of disrupted Le and Ery can be directly, without further treatment, ultrafiltered through a membrane with an exclusion limit of 10,000. Thus, neither dialysis nor filtration or centrifugation of the blood cell walls is necessary.

Způsob podle vynálezu je blíže objasněn příklady provedení, aniž by se jimi omezoval.The process according to the invention is explained in more detail by way of non-limiting examples.

Příklad 1Example 1

Objem 10 1 prasečí krve konservovaný přídavkem 1 500 ml konservačníhó roztoku ACD (roztok 42,67 g citronanu sodného, 14,93 g kyseliny citrónové a 40,00 g glukosy v redestilované vodě o výsledném objemu 1 000 ml) se- zředí 190 1 destilované vody a odstředí v průtokové odstředivce při zrychlení 1 500 G a průtoku 100 1/hod. Sediment se promyje za chodu odstředivky celkem 20 1 destilované vody při stejném průtoku. Získá se 1 200 ml sedimentu, který se suspenduje v 1 200 ml vody a desintegruje ultrazvukem tak dlouho, až suspense při mikroskopické kontrole neobsahuje neporušené leukocyty. Suspense, tvořená stěnami krevních buněk v extraktu leukocytů, se přímo, bez dalších úprav, ultrafiltruje přes membránu s vylučovacím limitem 10 000. Ultrafiltrát se sterilisuje filtrací přes sterilisační membránu. Získá se 2 350 ml sterilního ultrafiltrátu, který obsahuje celkově 400 mg nukleotidů a 1 120 mg peptidů.A volume of 10 l of pig blood preserved by the addition of 1,500 ml of ACD preservative solution (a solution of 42.67 g of sodium citrate, 14.93 g of citric acid and 40.00 g of glucose in redistilled water with a final volume of 1 000 ml) is diluted with 190 l of distilled water. water and centrifuged in a flow centrifuge at an acceleration of 1,500 G and a flow rate of 100 l / h. The sediment is washed while the centrifuge is running with a total of 20 l of distilled water at the same flow rate. 1200 ml of sediment are obtained, which is suspended in 1200 ml of water and disintegrated by sonication until the suspension contains intact leukocytes under microscopic examination. The suspension, formed by the walls of blood cells in the leukocyte extract, is directly, without further treatment, ultrafiltered through a membrane with an exclusion limit of 10,000. The ultrafiltrate is sterilized by filtration through a sterilizing membrane. 2,350 ml of sterile ultrafiltrate are obtained, which contains a total of 400 mg of nucleotides and 1,120 mg of peptides.

Výtěžek je 170 MJ přenosového faktoru.The yield is 170 MJ of transfer factor.

Příklad 2Example 2

Objem 5 1 krevních elementů, získaných odstředěním konservované prasečí krve v průtokové odstředivce, se zředí přídavkem 45 1 destilované vody a vzniklá suspense leukocytů se odstředí v průtokové odstředivce za stejných podmínek jako v příkladu 1. Sedimentované leukocyty a zbytky erytrocytů se promyjí za chodu odstředivky celkem 10 1 destilované vody. Získá se 1 080 ml sedimentu, který se suspenduje v 1 080 ml vody a desintegruje dekompresí v dusíku za mikroskopické kontroly jako v příkladu 1. Vzniklá suspense stěn krevních buněk se ultrafiltruje popsaným způsobem a získá se 2 100 ml sterilního ultrafiltrátu, který se lyofilisuje. Výtěžek je 1 324 mg lyofilisátu, odpovídajícího 158 MJ přenosového faktoru.A volume of 5 l of blood elements obtained by centrifuging the preserved pig blood in a flow centrifuge is diluted by adding 45 l of distilled water and the resulting leukocyte suspension is centrifuged in a flow centrifuge under the same conditions as in Example 1. Sedimented leukocytes and erythrocyte residues are washed 10 1 distilled water. 1,080 ml of sediment is obtained, which is suspended in 1,080 ml of water and disintegrated by decompression in nitrogen under microscopic control as in Example 1. The resulting suspension of blood cell walls is ultrafiltered as described to give 2,100 ml of sterile ultrafiltrate, which is lyophilized. The yield is 1,324 mg of lyophilisate, corresponding to 158 MJ of transfer factor.

Obsah nukleotidů je 331 mg, peptidů 993 mg.The nucleotide content is 331 mg, the peptides 993 mg.

Obsah peptidů a nukleotidů v TF se stanoví spektrofotometricky v UV oblasti v rozmezí ?00 až 300 nm. Kvalitativní složení přípravku se kontroluje gelovou filtrací na dextranovém gelu, např. typu Sephadex G-25.The content of peptides and nucleotides in TF is determined spectrophotometrically in the UV range in the range of? 00 to 300 nm. The qualitative composition of the preparation is checked by gel filtration on a dextran gel, eg of the Sephadex G-25 type.

Claims (3)

PATENTOVÉ NÁROKYPATENT CLAIMS 1. Způsob průmyslové výroby přenosového faktoru, vyznačující se tím, že se erytrocyty ve -zvířecí krvi nebo v krevních elementech této krve hemolysují v hypotonickém prostředí, načež se neporušené leukocyty se zbytky erytrocytů odstředí v průtokové odstředivce, leukocyty přítomné v sedimentu se po jeho promyti desintegrují ve vodě, vzniklá suspense se ultrafiltruje, poté se ultrafiltrát sterilisuje pomocí sterilisační membrány a sterilní ultrafiltrát se lyofilisuje nebo použije přímo jako léková forma.A process for the industrial production of a transfer factor, characterized in that the erythrocytes in the animal blood or in the blood elements of this blood are hemolyzed in a hypotonic environment, after which the intact leukocytes and the erythrocyte residues are centrifuged in a flow centrifuge and the leukocytes present in the sediment are washed they disintegrate in water, the resulting suspension is ultrafiltered, then the ultrafiltrate is sterilized by means of a sterilizing membrane and the sterile ultrafiltrate is lyophilized or used directly as a dosage form. 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se leukocyty desintegrují ultrazvukem nebo dekompresí v dusíku.The method of claim 1, wherein the leukocytes are disintegrated by ultrasound or decompression in nitrogen. 3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se desintegrací vzniklá suspense ultrafiltruje přes membránu s vylučovacím limitem 10 000.Process according to Claim 1, characterized in that the suspension formed by disintegration is ultrafiltered through a membrane with an exclusion limit of 10,000. Konec dokumentuEnd of document
CS905435A 1990-11-06 1990-11-06 Process for preparing transmissible factor industrially CS277138B6 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS905435A CS277138B6 (en) 1990-11-06 1990-11-06 Process for preparing transmissible factor industrially

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS905435A CS277138B6 (en) 1990-11-06 1990-11-06 Process for preparing transmissible factor industrially

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS543590A3 CS543590A3 (en) 1992-05-13
CS277138B6 true CS277138B6 (en) 1992-11-18

Family

ID=5399263

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS905435A CS277138B6 (en) 1990-11-06 1990-11-06 Process for preparing transmissible factor industrially

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS277138B6 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11604026B2 (en) 2019-03-14 2023-03-14 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Lyophilization loading tray assembly and system
US11634257B2 (en) 2017-10-09 2023-04-25 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Lyophilization container and method of using same

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11634257B2 (en) 2017-10-09 2023-04-25 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Lyophilization container and method of using same
US11604026B2 (en) 2019-03-14 2023-03-14 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Lyophilization loading tray assembly and system
US11609042B2 (en) 2019-03-14 2023-03-21 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Multi-part lyophilization container and method of use
US11609043B2 (en) 2019-03-14 2023-03-21 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Lyophilization container fill fixture, system and method of use
US11740019B2 (en) 2019-03-14 2023-08-29 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Lyophilization loading tray assembly and system
US11747082B2 (en) 2019-03-14 2023-09-05 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Multi-part lyophilization container and method of use
US11815311B2 (en) 2019-03-14 2023-11-14 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Lyophilization container fill fixture, system and method of use
US11994343B2 (en) 2019-03-14 2024-05-28 Terumo Bct Biotechnologies, Llc Multi-part lyophilization container and method of use

Also Published As

Publication number Publication date
CS543590A3 (en) 1992-05-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100617648B1 (en) Pharmaceutical Composition for Treating Avellino Cornea Dystrophy Comprising Blood Plasma or Serum
US20250241958A1 (en) Human platelet lysate derived extracellular vesicles for use in medicine
JP3297433B2 (en) Method for inactivating viruses in pharmaceutical compositions contaminated with viruses
EP0654039B1 (en) Process for hemoglobin extraction and purification
KR102223080B1 (en) Process for the preparation of erythrocytes loaded with one or more substances of pharmaceutical interest and so obtained erythrocytes
KR0162094B1 (en) Platelet membrane particulate
US20020131958A1 (en) Method for purifying a biological composition
CA1063019A (en) Extracts of the haemopoietic system
KR20010099700A (en) Method for production of stroma-free hemoglobin
JPH0822879B2 (en) Method for producing antihemophilic factor by cold precipitation and improving the solubility of the resulting antihemophilic factor product
RU2132688C1 (en) Method of preparing biologically active preparations from embryonal tissues
CS277138B6 (en) Process for preparing transmissible factor industrially
RU2041715C1 (en) Biologically active remedy, method for its producing, preparation containing the mentioned remedy and method for applying the preparation
JP2000503631A (en) Non-immunogenic and tolerogenic platelet and erythrocyte compositions
CN100348267C (en) Purification of red blood cells by separation and diafiltration
RU2341286C1 (en) Method of blood substitute production and related installation for method implementation
US4490357A (en) Simplified in-vitro interferon production
RU2221591C1 (en) Method for preparing preparation for active immunization against tularemia
CN110804578A (en) Production method for removing IgG from bovine serum
CZ281415B6 (en) Process for preparing transmissible factor from mammal blood buffer coat
RU2253475C1 (en) Method of preparing factor viii preparation
US6303154B1 (en) Chemical alteration of mammal urine and mammal blood
CZ285482B6 (en) Process for preparing natural dietetic preparation
RU2445974C2 (en) Method for producing concentrated factor viii of human blood plasma
RU2140287C1 (en) Method of albumin preparing