CS277138B6 - Způsob průmyslové výroby přenosového faktoru - Google Patents
Způsob průmyslové výroby přenosového faktoru Download PDFInfo
- Publication number
- CS277138B6 CS277138B6 CS905435A CS543590A CS277138B6 CS 277138 B6 CS277138 B6 CS 277138B6 CS 905435 A CS905435 A CS 905435A CS 543590 A CS543590 A CS 543590A CS 277138 B6 CS277138 B6 CS 277138B6
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- blood
- leukocytes
- membrane
- suspension
- ultrafiltrate
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 29
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 29
- 108010074506 Transfer Factor Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 19
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims abstract description 8
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 6
- 230000006837 decompression Effects 0.000 claims abstract description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 claims abstract description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 claims description 5
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 claims description 5
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 7
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 abstract description 6
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 abstract description 6
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 3
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 abstract description 2
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 abstract description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 abstract description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 abstract description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 abstract description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 abstract description 2
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 abstract 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 abstract 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 abstract 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 abstract 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 abstract 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 abstract 1
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 abstract 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 241000272525 Anas platyrhynchos Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 208000027205 Congenital disease Diseases 0.000 description 1
- 208000029767 Congenital, Hereditary, and Neonatal Diseases and Abnormalities Diseases 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 208000037919 acquired disease Diseases 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229920000867 polyelectrolyte Polymers 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Řeší se průmyslová příprava přenosového
faktoru ze zvířecí krve nebo z krevních
elementů této krve, která spočívá v hemolyse
erytrocytů přítomných v krvi nebo krevních
elementech, v odstředění buněčných
stěn erytrocytů a neporušených leukocytů na
velkokapacitní průtokové odstředivce,
v promytí sedimentu během odstředění
a následné desintegraci leukocytů ultrazvukem
nebo dekompresí v dusíku. Vzniklá
suspense zbytků krevních buněk se přímo
ultrafiltruje přes membránu s vylučovacím
limitem 10.000, ultrafiltrát obsahující
směs nízkomolekulárních peptidů a nukleotidů
se sterilisuje pomocí sterilisační
membrány a lyofilisuje nebo použije přímo
jako léková forma. Přenosový faktor je
imunomodulátor používaný při léčení vrozených
nebo získaných poruch imunitního
systému, bakteriálních i virových infekcí
a nádorových onemocnění.
Description
Vynález se týká způsobu průmyslové výroby přenosového faktoru z leukocytů přítomných ve zvířecí krvi nebo v krevních elementech této krve.
Přenosový faktor nebo též transfer faktor (TF), případně podle přesnější terminologie dialysovatelný leukocytární extrakt (DLE), je imunomodulační preparát, nesoucí řadu imunologických aktivit závislých i nezávislých na antigenu. Je-li připraven z leukocytů (dále Le) dárců imunisovaných příslušným antigenem, je schopen přenášet imunitní reakci na tento antigen na neodpovídajícího příjemce (TF aktivita).
Klinicky se používá k léčení vrozených nebo získaných poruch buňkami zprostředkované imunity, při různých bakteriálních nebo virových infekcích a při terapii nádorových onemocnění. Podává se ve formě injekcí nebo perorálně.
Přenosový faktor je směs nízkomolekulárních peptidů a nukleotidů, získaná extrakcí Le imunisovaných dárců nebo dárců s dobře fungujícím imunitním systémem. Kriteriem koncentrace TF je jedna mezinárodní jednotka (MJ), definovaná jako extrakt obvykle z 5.108 Le. Výchozím materiálem pro přípravu je většinou lidská krev.
Nejčastější způsob přípravy TF spočívá v tom, že se bílé krvinky obsažené v buffy coatu (dále BC, což je leukocyty obohacená frakce krevních buněk získaná odstředěním krve obsahující konservační roztok) rozruší střídavým zmražením a rozmražením (J. F. Raymond se sp. , Vox Sang. 29 , 338, 1975; Brit, patent č. 1443948). Zbytky krevních buněk se bud odstředí při 20 000 G a supernatant se dialysuje do destilované vody, nebo se k dialyse použije přímo desintegrovaný BC. Dialysu lze nahradit ultrafiltrací přes membránu s vylučovacím limitem 10 000. Dialysát nebo ultrafiltrát se většinou lyofilisuje a před použitím se rozpouští ve vodě pro injekce.
Příprava TF přes svoji jednoduchost skrývá některé technologické obtíže, které se zvýrazní při jejím převodu do produkčního měřítka.
Velká spotřeba preparátu v humánní i veterinární medicíně vyvolala na jedné straně nutnost hledat dostupnější zdroje leukocytů než je lidská krev a na straně druhé nutnost vyrovnat se s dalšími technologickými problémy, spojenými s velkokapacitní výrobou TF. Jako výchozího materiálu se začalo používat živočišné krve (prasečí - Jap. patent č. 56115-720, dále pak hovězí, koňské, kachní atd.), případně i lymfatických orgánů. Použití krve jako zdroje Le má řadu důležitých výhod, mimo jiné umožňuje imunisaci dárců. Naproti tomu mohou být lymfatické orgány kontaminovány různými toxickými látkami (např. z potravy), přecházejícími do konečného produktu.
Základním technickým problémem průmyslové výroby TF je ekonomická příprava velkého množství koncentrované suspense bílých krvinek. Přenosový faktor připravuje z buffy coatu savčí krve. BC se dá snadno získat odstředěním krve v diskontinuálních (kyvetoCS 277138 B6 vých) odstředivkách, kdy tvoří úzké rozhraní mezi vrstvami plasmy a ěrytrocytů (dále Ery). Kapacita rotorů těchto odstředivek je však malá, maximálně 6 litrů, což je důvodem nepoužitelnosti BC jako výchozího materiálu pro průmyslovou výrobu TF.
Stejně tak je z kapacitních i ekonomických důvodů nevyhovující isolace Le protiproudnou centrifugací (elutriací), případně pomocí různých průtokových separátorů buněk používaných např. při leukaferese.
Isolace Le sedimentací krevních buněk za přídavku polyelektrolytů, která by se snadno dala převést do většího měřítka, vede k malým výtěžkům Le, nehledě na to, že přítomnost zbytků vysokomolekulárních koagulantů Ery v suspensí komplikuje následnou ultrafiltraci.
Uvedené nevýhody odstraňuje způsob průmyslové výroby přenosového faktoru ze zvířecí krve nebo z krevních elementů této krve, jehož podstata spočívá v tom, že se Ery přítomné v krvi nebo v krevních elementech hemolysují v hypotonickém prostředí, leukocyty a zbytky ěrytrocytů se odstředí v průtokové odstředivce, načež se Le v sedimentu po promyti destilovanou vodou desintegrují ve vodě, poté se vzniklá suspense ultrafiltruje a po sterilisaci průchodem přes sterilisační membránu se ultrafiltrát lyofilisuje nebo použije přímo jako léková forma.
Způsobem podle vynálezu se leukocyty desintegrují ultrazvukem nebo dekompresí v dusíku a vzniklá suspense se ultrafiltruje přes membránu s vylučovacím limitem 10 000.
Způsob podle vynálezu se provádí tak, že se Ery ze zvířecí krve nebo z jejích elementů hemolysují v hypotonickém prostředí destilované vody. Le se odstředí v průtokové odstředivce, přičemž extrakt hernolysovaných Ery, především hemoglobin, odchází z odstředivky jako lehká fáze a sediment tvoří Le se zbytky Ery. Sediment se za chodu odstředivky promyje destilovanou vodou a Le se ve vodné suspensí desintegrují ultrazvukem nebo dekompresí v dusíku. Suspense rozrušených krevních buněk se ultrafiltruje přes membránu s vylučovacím limitem 10 000. Ultrafiltrát se sterilisuje membránovou filtrací a lyofilisuje, nebo použije přímo jako léková forma.
Způsob podle vynálezu má tyto výhody:
1. Hemolysou Ery v krvi nebo v krevních elementech vznikne dvousložkový systém, představovaný na jedné straně neporušenými Le a zbytky Ery, na druhé straně kapalinou tvořenou extraktem z Ery. Tento dvousložkový systém umožňuje průmyslovou isolaci Le jejich odstředěním na velkokapacitních průmyslových odstředivkách .
2. Lze připravit velká kvanta dostatečně koncentrované suspense promytých leukocytů, takže výsledný produkt obsahuje značné množství biologicky účinných látek - peptidů a nukleotidů - v malém objemu. Příznivým důsledkem této skutečnosti je snadná lyofilisace konečného produktu. .
/ (
3. Sedimentované Le se při desintegraci pravidelně rozptýlí v celém objemu extrakční kapaliny, čímž je umožněna jejich dokonalá extrakce.
4. Suspensi rozrušených Le a Ery lze přímo, bez dalších úprav, ultrafiltrovat přes membránu s vylučovacím limitem 10 000. Není tedy nutná ani dialysa, ani filtrace nebo odstředění stěn krevních buněk.
Způsob podle vynálezu je blíže objasněn příklady provedení, aniž by se jimi omezoval.
Příklad 1
Objem 10 1 prasečí krve konservovaný přídavkem 1 500 ml konservačníhó roztoku ACD (roztok 42,67 g citronanu sodného, 14,93 g kyseliny citrónové a 40,00 g glukosy v redestilované vodě o výsledném objemu 1 000 ml) se- zředí 190 1 destilované vody a odstředí v průtokové odstředivce při zrychlení 1 500 G a průtoku 100 1/hod. Sediment se promyje za chodu odstředivky celkem 20 1 destilované vody při stejném průtoku. Získá se 1 200 ml sedimentu, který se suspenduje v 1 200 ml vody a desintegruje ultrazvukem tak dlouho, až suspense při mikroskopické kontrole neobsahuje neporušené leukocyty. Suspense, tvořená stěnami krevních buněk v extraktu leukocytů, se přímo, bez dalších úprav, ultrafiltruje přes membránu s vylučovacím limitem 10 000. Ultrafiltrát se sterilisuje filtrací přes sterilisační membránu. Získá se 2 350 ml sterilního ultrafiltrátu, který obsahuje celkově 400 mg nukleotidů a 1 120 mg peptidů.
Výtěžek je 170 MJ přenosového faktoru.
Příklad 2
Objem 5 1 krevních elementů, získaných odstředěním konservované prasečí krve v průtokové odstředivce, se zředí přídavkem 45 1 destilované vody a vzniklá suspense leukocytů se odstředí v průtokové odstředivce za stejných podmínek jako v příkladu 1. Sedimentované leukocyty a zbytky erytrocytů se promyjí za chodu odstředivky celkem 10 1 destilované vody. Získá se 1 080 ml sedimentu, který se suspenduje v 1 080 ml vody a desintegruje dekompresí v dusíku za mikroskopické kontroly jako v příkladu 1. Vzniklá suspense stěn krevních buněk se ultrafiltruje popsaným způsobem a získá se 2 100 ml sterilního ultrafiltrátu, který se lyofilisuje. Výtěžek je 1 324 mg lyofilisátu, odpovídajícího 158 MJ přenosového faktoru.
Obsah nukleotidů je 331 mg, peptidů 993 mg.
Obsah peptidů a nukleotidů v TF se stanoví spektrofotometricky v UV oblasti v rozmezí ?00 až 300 nm. Kvalitativní složení přípravku se kontroluje gelovou filtrací na dextranovém gelu, např. typu Sephadex G-25.
Claims (3)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob průmyslové výroby přenosového faktoru, vyznačující se tím, že se erytrocyty ve -zvířecí krvi nebo v krevních elementech této krve hemolysují v hypotonickém prostředí, načež se neporušené leukocyty se zbytky erytrocytů odstředí v průtokové odstředivce, leukocyty přítomné v sedimentu se po jeho promyti desintegrují ve vodě, vzniklá suspense se ultrafiltruje, poté se ultrafiltrát sterilisuje pomocí sterilisační membrány a sterilní ultrafiltrát se lyofilisuje nebo použije přímo jako léková forma.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se leukocyty desintegrují ultrazvukem nebo dekompresí v dusíku.
- 3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se desintegrací vzniklá suspense ultrafiltruje přes membránu s vylučovacím limitem 10 000.Konec dokumentu
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS905435A CS277138B6 (cs) | 1990-11-06 | 1990-11-06 | Způsob průmyslové výroby přenosového faktoru |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS905435A CS277138B6 (cs) | 1990-11-06 | 1990-11-06 | Způsob průmyslové výroby přenosového faktoru |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS543590A3 CS543590A3 (en) | 1992-05-13 |
| CS277138B6 true CS277138B6 (cs) | 1992-11-18 |
Family
ID=5399263
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS905435A CS277138B6 (cs) | 1990-11-06 | 1990-11-06 | Způsob průmyslové výroby přenosového faktoru |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS277138B6 (cs) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11604026B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-03-14 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization loading tray assembly and system |
| US11634257B2 (en) | 2017-10-09 | 2023-04-25 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization container and method of using same |
-
1990
- 1990-11-06 CS CS905435A patent/CS277138B6/cs unknown
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11634257B2 (en) | 2017-10-09 | 2023-04-25 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization container and method of using same |
| US11604026B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-03-14 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization loading tray assembly and system |
| US11609042B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-03-21 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Multi-part lyophilization container and method of use |
| US11609043B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-03-21 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization container fill fixture, system and method of use |
| US11740019B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-08-29 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization loading tray assembly and system |
| US11747082B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-09-05 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Multi-part lyophilization container and method of use |
| US11815311B2 (en) | 2019-03-14 | 2023-11-14 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Lyophilization container fill fixture, system and method of use |
| US11994343B2 (en) | 2019-03-14 | 2024-05-28 | Terumo Bct Biotechnologies, Llc | Multi-part lyophilization container and method of use |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS543590A3 (en) | 1992-05-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100617648B1 (ko) | 혈장 또는 혈청을 함유하는 아벨리노 각막 이영양증 치료용약학 조성물 | |
| US20250241958A1 (en) | Human platelet lysate derived extracellular vesicles for use in medicine | |
| JP3297433B2 (ja) | ウイルスで汚染された薬理組成物中のウイルスの不活性化方法 | |
| EP0654039B1 (en) | Process for hemoglobin extraction and purification | |
| KR102223080B1 (ko) | 하나 이상의 약제학적 관심 물질이 로딩된 적혈구를 제조하는 방법 및 이렇게 하여 수득된 적혈구 | |
| KR0162094B1 (ko) | 혈소판 막 미립자 | |
| US20020131958A1 (en) | Method for purifying a biological composition | |
| CA1063019A (en) | Extracts of the haemopoietic system | |
| KR20010099700A (ko) | 무-간질 헤모글로빈의 제조 방법 | |
| JPH0822879B2 (ja) | 冷沈澱により抗血友病因子を製造し且つ得られる抗血友病因子製品の溶解度を改善するための方法 | |
| RU2132688C1 (ru) | Способ изготовления биологически активных препаратов из эмбриональных тканей | |
| CS277138B6 (cs) | Způsob průmyslové výroby přenosového faktoru | |
| RU2041715C1 (ru) | Биологически активное средство, способ его получения, препарат, содержащий указанное средство, и способ использования препарата | |
| JP2000503631A (ja) | 非免疫原性かつ寛容原性の血小板組成物および赤血球組成物 | |
| CN100348267C (zh) | 通过分离和渗滤纯化红血细胞 | |
| RU2341286C1 (ru) | Способ получения кровезаменителя и установка для осуществления способа | |
| US4490357A (en) | Simplified in-vitro interferon production | |
| RU2221591C1 (ru) | Способ получения препарата для активной иммунизации против туляремии | |
| CN110804578A (zh) | 一种牛血清去除IgG的生产方法 | |
| CZ281415B6 (cs) | Způsob přípravy přenosového faktoru z buffy coatu savčí krve | |
| RU2253475C1 (ru) | Способ получения препарата фактора viii | |
| US6303154B1 (en) | Chemical alteration of mammal urine and mammal blood | |
| CZ285482B6 (cs) | Způsob výroby přírodního dietetického přípravku | |
| RU2445974C2 (ru) | Способ получения концентрата фактора viii из плазмы крови человека | |
| RU2140287C1 (ru) | Способ получения альбумина |