CS272721B1 - Method of medicament preparation that contains purified gamma-globulin with high content of monomer - Google Patents
Method of medicament preparation that contains purified gamma-globulin with high content of monomer Download PDFInfo
- Publication number
- CS272721B1 CS272721B1 CS912787A CS912787A CS272721B1 CS 272721 B1 CS272721 B1 CS 272721B1 CS 912787 A CS912787 A CS 912787A CS 912787 A CS912787 A CS 912787A CS 272721 B1 CS272721 B1 CS 272721B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- globulin
- gamma
- solution
- ultrafiltration
- filtration
- Prior art date
Links
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 title claims abstract description 67
- 239000000178 monomer Substances 0.000 title claims abstract description 29
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 31
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 25
- 239000003814 drug Substances 0.000 title description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 38
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 30
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 27
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims abstract description 25
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 23
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 10
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims abstract description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 5
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000001147 anti-toxic effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 59
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 25
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 10
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 9
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 8
- 239000012506 Sephacryl® Substances 0.000 claims description 7
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims description 7
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 6
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 6
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 5
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 claims description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 4
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 4
- 238000005292 vacuum distillation Methods 0.000 claims description 4
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 claims description 4
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 3
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 claims description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 2
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 claims description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 claims description 2
- 235000013905 glycine and its sodium salt Nutrition 0.000 claims description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims description 2
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims 1
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 claims 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 20
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 9
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 8
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 7
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 7
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 7
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 7
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 5
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 5
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 5
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 3
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 3
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 229920000298 Cellophane Polymers 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000004577 thatch Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007863 gel particle Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 239000005373 porous glass Substances 0.000 description 1
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 1
- 150000004760 silicates Chemical class 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
1 CS 272721 B1
Vynález sa týká sposobu přípravy purifikovaného krvného gama-globulínu ludského alebozvieracieho povedu s vysokým obsahom monoméru, z normálněj alebo hyperimunnej plazmy při-padne z normálneho.alebo retroplacentárného připadne hyperimunného séra, ktorý je určenýpre terapeutické účely. Až doposial sa realizuje příprava krvného gama-globulínu pře terapeutické účely jednakvo formě přípravy pre intramuskulárné (i.m.) podanie a jednak vo formě pre intravenoznú(i.v.) aplikáciu. Forma přípravy pre i.v. podanie umožňuje podaf tento preparát aj i.m.cestou, ale forma přípravy i.m. preparátu je pře i.v. podanie kontraindikovaná.
Na precipitáciu krvného gama-globulinu zo zmesi plazmatických alebo sérových bielkovínsa v celosvetovom měřítku najčastejšie používá etanol (Cohn E.3., Gurd F.N.R., SurgenorD.M., Barnes B.A., Brown R.K., Derouaux G., Gillespie 3.M., Kahnt F.W., Lewer W.F., LiuC.H., Mittelman 0., Mouton R.F., Schmid K., Uroma E.: 3.Am.Chem.Soc. 72,465,1950; DeutschH.F., Gostling G.L., Alberty R.A., Williams J.W.s J.Biol.Chem. 164,109,1946; Oncley 3.L.,Melin M., Rickert D.A., Cameron 3.W., Gross P.M.: 3,Am.Chem.Soc. 71,541,1949; NitschmanH.S., Kistler P., Lergier W.: Helv.Chim.Acta 37,866,1954; Kistleř P., Nitschman H.S.: VoxSang. 7,414,1962; Taylor H.L., Bloom F.C., McCall K.B., Hyndtnan L.A., Anderson H.D.: 3.Am.Chem.Soc.. 78,1356,1956; Kuska 3., Kremer 3.: Csl. patent 89170) a frakcia II je najčastejšiepoužívaným východzím materiálom pre přípravu gama-globulínu pre terapeutické účely či užpre i.m. tak aj pře i.v. podanie.
Preparáty gama-globulínu připravené obvyklým spósobom a vyhovujúce doposial platnýmkritériam pre i.m. podanie majú agregačné spektrum, ktoré sa nachádza v rozmedzí 77 - 83 %monoméru, 13 - 22 % diméru a 3 -7 % polyméru IgG. .....
Preparáty gama-globulínu pre i.v. podanie vyrobené podlá Štěpánka a Uhríka (ŠtěpánekΙ.ϊ A0 202 180; Štěpánek I., Uhrík 3.: A0 208 868 a Štěpánek I.: A0 244 306) majú agre-gačné spektrum, ktoré sa nachádza v rozmedzí 90 - 96 % monoméru, 4 - 8 % diméru a 0,75 -- 2,0 % polyméru IgG.
Testovanie obsahu monoméru, diméru a polyméru IgG v intramuskulárnych a intravenóznychpreparátech bolo sprevádzané pomocou gelovej filtrácie na Sephacryle S-3000 s prietokovouregistráciou denzity pri 254 nm.
Celosvětová tendencia přípravy i.v. gama-globulinových preparátov zretelne smerujeku preferovaniu čo najvyššieho obsahu monoméru IgG a ku preferovaniu čo najnižšieho obsa-hu iných příměsí.
Agregáty IgG podané i.m. alebo i.v. cestou móžu vyvolat u pacientov nežiaduce reakcie(Marcus D.M.: 3.1mmunol. 84,273,1960; Christian C.L.: j.Immunol. 84, 112,1960) pričom saza příčinu týchto reakcií možno považovat aktiváciu komplementu účinkom agregátov IgG. Ak-tivovaný komplement je zodpovědný aj za anafylaktické reakcie (Ishizaka T., Ishizaka K.,Boros T.; 3.1mmunol. 87,433,1961). Agregáty IgG jednak aktivujú granulocyty (Koch C.,Valerius N.H., Andersen V.: Acta Path.microbiol.Immunol.Scand.Sect. C 92,161,1984) a tiežspósobujú extracelulárné uvolnovanie lyzozomových enzýmov (Ferenčík M.: Univ.ComenianaeBratisl. 24,No 1,9,1986).
Podlá imunoelektroforetických analýz gama-globulínového roztoku, izolovaného akofrakcia II podlá Cohna a Oncleya, ktorá sa používá ako východzí materiál pre přípravu i.m.a i.v. gama-globulinového preparátu pre terapeutické účely je zřejmé, že tento obsahuje i
-Eberhard H.3., Nilsson 3.N., Aronsson T.: 3.Exptl.Med. 111,201,1960), albumin o molekulár-nej hmotnosti 69000 (Cohn E.3., Hughes W.L., Weare 3.H.: 3.Am.Chem.Soc. 69,1753,1947),transferín o molekulárnej hmotnosti 90000 (Koechlin 8.A): J.Am.Chem.Soc. 74,2649,1952),
IgM o molekulárnej hmotnosti 1000000 (Schultze H.E., Haupt H., Heide K., Moschlín G.,Schimdtberger R., SchwickG.: Naturforsch. 17b,313,1962). CS 272721 B1 2 Súčasná technologická prax na jednej straně sice odděluje gama-globulín od zmesiiných krvných bielkovín, ale na druhej straně zanáša do roztoku nízkomolekulárné anorga-nické alebo organické zlúčeniny. Technologický postup může taktiež část niektorých zlúče-nín s biochemicko-fyziologickou aktivitou v roztoku gama-globulínu koncentrovat t.j. obo-hacovat vzhtadom ku ich koncentrácii vo východzej surovině, z ktorej bol gama-globulínizolovaný.
Agregáty IgG můžu vznikat počas skladovania plazmy alebo séra připadne aj počas skla-dovania hotového tekutého přípravku, ďalej jednak v procese izolácie a jednak v proceselyofilizácie v důsledku interakcie nízkomolekulárných a vysokomolekulárných látok s mole-kulami IgG.
Podstatou vynálezu je spůsob přípravy přípravku obsahujúceho purifikovaný krvný gama--globulín s vysokým obsahom monoméru vyznačujúci sa tým, že sa bielkovinný materiál obsa-hujúci purifikovaný gama-globulín suspenduje za aseptických podmienok v takom množstveapyrogennej destilovanej vody o teplote 0 °C až + 6 °C, aby hodnota koncentrácie bielkovínsa nachádzala v rozmedzí 5 až 180 gramov na liter, gama-globulinový roztok sa vyčiri na-příklad filtráciou a oddelia sa balastné zlúčeniny s molekulárnou hmotnosťou do 150000a nad 250000, potom sa zakoncentrováva ultrafiltráciou, vakuovou destiláciou, vymrazova-nim alebo inými metodami, potom sa sterilizuje například filtráciou alebo pomocou iných me-tod, před koncovou lyofilizáciou sa roztok stabilizuje například přidáním chloridu sodného,glukózy, maltozy alebo iných cukrov, prevedie sa jeho namrazenie a lyofilizácia pričomv případe potřeby sa roztok podrobí Salšiemu spracovaniu ako je například iontomenná aleboafinitná chromatografia.
Nedostatkom předkládaného vynálezu je, že oddelenie IgA, 3·^ - globulínu a 3-^ - glo-bulínu od IgG nebude preveditefné. Východziou surovinou může byť pasta frakcie II, izolovaná metodou podl’a Cohna a On-cleya z normálnej alebo hyperimunnej plazmy připadne z normálneho, retroplacentárnéhoalebo hyperimunného séra fudského alebo zvieracieho původu s definovanou antibakteriálnou,antitoxickou alebo antivirovou protilátkovou aktivitou. Taktiež můžu byť použité bielko-vinné materiály gama-globulínu izolované pomocou iných metod.
Bielkovinný materiál sa rozpúštá za aseptických podmienok v takom množstve destilo-vanej apyrogennej vody o teplote 0 °C až + 6 °C, aby sa hodnota koncentrácie bielkovínnachádzala v rozmedzí 5 až 180 gramov na liter, s optimom 60 až 100 gramov na liter. Roz-púšťanie sa urýchluje miešaním. Po rozpuštění sa gama-globulinový roztok vyčiri napříkladfiltráciou. V technologických pomeroch sú vyššie uvedené optimálně podmienky zpravidla zachovanévtedy'ak rozpúšťame za aseptických podmienok 1 kg gama-globulinovej pasty v 2.000 ml desti-lovanej apyrogennej vody o teplote 0 °C až + 6 °C. Hodnota pH takto připraveného roztokugama-globulinu bývá zpravidla v rozmedzí 60 až 100 gramov na liter.
Takto připravený roztok gama-globulinu sa vyčiri například filtráciou a nízkomoleku-lárné ako aj vysokomolekulárné zlúčeniny do molekulárnej hmotnosti 150000 a nad 250000sa oddelia spůsobom podlá vynálezu pomocou gelovej filtrácie, dialyzou v kombinácii s ultra-filtráciou alebo dialyzou v kombinácii s elektrodialyzou, diafiltráciou v kombináciis ultrafiltráciou a ultrafiltráciou, oproti destilovanej apyrogennej vodě pri teplote0 °C až + 6 °C alebo proti vodnému roztoku chloridu sodného o koncentrácii maximálnědo 30 gramov na liter, s optimom 3,0 až 9,0 gramov na liter, při teplote 0 °C až + 6 °C.Všetky pochody prebiehajú v rozmedzí pH 4,0 až 8,0.
Roztok gama-globulinového monomeru, z ktorého boli oddělené balastné prímesy nízko-molekulárných a vysokomolekulárných zlúčenin do molekulárnej hmotnosti do 150000 a nad250000 sa potom zakoncentrováva ultrafiltráciou, vakuovou destiláciou, vymrazovaním aleboinými metodami, potom sa sterilizuje například filtráciou alebo pomocou iných metod, před CS 272721 B1 koncovou lyofilizáclou sa upravuji! v roztoku podmienky, roztok sa rozplní do flaštičieka prevedie sa jeho namrazenie, V případe potřeby sa podrobí ďalšiemu spracovaniu.
Vynález je Sálej objasněný na príkladoch prevedenia, ktorými jeho rozsah nieje aniobmedzený ani vyčerpaný. Příklad 1 Východziou surovinou může byť pasta frakcie II, izolovaná metodou podlá Cohna a On-celya z normálnej alebo hyperimunnej plazmy připadne z normálného, retroplacentárnéhoalebo hyperimunného séra ludského alebo zvieracieho původu s definovanou antibakteriálnou,antitoxickou alebo antivirovou protilátkovou aktivitou.
Bielkovinný gama-globulinový materiál sa rozpúšťá v takom množstve destilovanej apy-rogennej vody o teplote 0 °C až + 6 °C, aby hodnota koncentrácie bielkovín bola v rozmedzí5 až 180 gramov na liter, s optimom 60 až 100 gramov na liter. Rozpúšťanie sa urýchlujemiešaním. Po rozpuštění sa gama-globulinový roztok vyčíri například filtráciou. V technologických pomeroch sú vyššie uvedené podmienky optima zpravidla zachované vte-dy ak rozpúštáme 1 kg gama-globulínovej pasty v 2.000 ml destilovanej apyrogennej vodyo teplote 0 °C až + 6 °C. Hodnota pH gama-globulínového roztoku bývá zpravidla v rozmedzí4,0 až 8,0 a koncentrácia bielkovín v rozmedzí 60 až 100 gramov na liter. Takto připravenýroztok purifikovaného gama-globulínu sa vyčíri například filtráciou a separácia balastnýchpříměsí nízkomolekulárnejia vysokomolekulárnej povahy do molekulárnej hmotnosti 150000a nad 250000 sa z gama-globulinového roztoku prevedie A. : Gelovou filtráciou B. : Oialyzou v kombinácii s ultrafiltráciou alebo dialyzou v kombinácii s elektrodialyzou C. : Diafiltráciou v kombinácii s ultrafiltráciou D. : Ultrafiltráciou A.: V súčasnosti existuje celá rada komerčných materiálov pre gelovú filtráciu na báze dextránových gélov pod označením Sephadex, na báze akrylamidu a dextranu pod označenímSephacryl, polyakrylamidových gélov pod označením Biogel, hydroxyalkylmetakrylátových gélovpod označením Spheron, polystyrénových gélov pod označením Styragel, polyvinilacetátovýchgélov pod označením Merckogel, porézných silikátov pod označením Porasil, a porézných skielpod označením Bioglas, ktoré mají! odstupňované velkosti půrov v gélových časticiach a umož-ňuji! gélovú filtráciu v poměrně' širokých rozmedziach molekulárných hmotností. Vývoj v dan-nej oblasti rýchlo pokračuje a s najvačšou pravdepodobnosfou technologický pokrok umožnípriemyselnú přípravu dokonalejších materiálov než sú súčasne dostupné.
Separácia balastných příměsí nízkomolekulárnej a vysokomolekulárnej povahy sa pre-vádza do molekulárnej hmotnosti 150000 a nad 250000 elučnou gélovou chromatografiou s des-tilovanou apyrogennou vodou alebo s roztokom chloridu sodného v destilovanej apyrogennejvodě o koncentraci! do 30 gramov na liter při teplote 0 °C až + 6 °C s přibližnou oblasfoudelenia molekulárných hmotností do 1000000 pričom je potřebné uvedené materiály používatv optimálnom zrnění zaručujúcom prietok v technologických podmienkách.
Ako materiál pre gelovú filtráciu možno použit aj výrobok fy Chemopetrol k.p. na bázeperlovéj celulózy pod označením Perloza MT - 500 s vylučovacím limitom molekulárných hmot-ností okolo 500000. fialej je možné s úspechom použit Sephacryl S-300 s velmi jemným zrně-ním alebo Sephacryl S-300 s vysokou rozlišovaciou schopnosťou, ktoré umožňujú prevádzat ge-lovú filtráciu v rozmedzí molekulárných hmotností 10000 až 1500000. Jednak Perloza a jednakSephacryl sú konzervované 0,02 %-ným azidom sodným, ktorý je před použitím potřebné z uve-dených materiálov kvantitativné odstránif premývaním.
Do kolony naplnenej napučaným gélovým materiálom necháváme nasávat gama-globulinový roztok takovou rýchlosťou, aby prietok spodnou plochou kolony sa pohyboval medzi 0,01 ml2 až 3,0 ml za minutu na plochu 1 cm . Množstvo gama-globulinoveho roztoku nasadeného na ko-lonu nemá překročit 25 až 30 % objemu gelovej časti kolony. Účinnost delenia je možné sle- CS 272721 Dl 4 dovať podl’a stupňa oddelovania etylalkoholu, chloroformu a ninhydrin pozitívných látokz gama-globulínového roztoku. Je výhodné mať na výtok z kolony zapojený prietokovýspektrofotometer alebo prietokový refraktometer a podlá polohy elučných vrcholov možnobezpečne odhadnut’ ako pracuje kolona, ďalej lokalizáciu monomeru a tento oddeliť. Poklaťby nedošlo ku dokonalému oddeleniu je potřebné zmenšit’ objem vkládaného gama-globulinové-ho roztoku a spomaliť prietok. Po oddělení monomeru IgG sa tento Sálej spracováva. B.: Dialýza sa v poslednom desaťročí znovu začína uplatňovat najma při výrobě liečiv ako technologická metoda separácie tých zmesí prírodných alebo syntetických látok, ktorýchmolekuly majú rozdielnú molekulárné hmotnost’. V súčasnosti existuje celá rada komerčných membrán pre dialýzu či už v podobě rovin-nej membrány alebo v podobě potrubia o menlivom priemere a menlivej velkosti pórov na bázeregenerovanej celulózy alebo jej derivátov, připadne na báze kolodia a taktiež na bázevinilových polymérov. Vývoj v dannej oblasti rýchlo pokračuje a s najvačšou pravdepodob-nosťou technologický pokrok umožní priemyselnú přípravu dokonalejších rovinných a potrub-ných membrán než sú v súčasnosti dostupné.
Velkost’ pórov v celofánovom dialyzačnom potrubí je možné zvačšiť pomocou namočeniacelofánovej folie alebo potrubia do vodného roztoku chloridu zinočnatého do koncentrácie300 gramov na liter vody (Craig L.C., Konigsberg W.: J.Phys.Chem. 65,166,1961).
Sterilný roztok puriflkávaného gama-globulínu sa opatrné přesaje do sterilného dialy-začného potrubia, ktoré sa před zahájením presavania v spodnej časti uzatvorí uzlem a po-přesátí sa vrchná časť uzatvorí uzlom so smyčkou, za ktorú sa naplněné potrubie zavěsína háčik, ktorý je umiestnený tak, aby roztok gama-globulínu v dialyzačnom potrubí bolv styku s pretekajúcou destilovanou vodou alebo roztokom chloridu sodného v destilovanejapyrogennej vodě o koncentrácii do 30 gramov na liter, pri teplote 0 °C až + 6 °C pri pH4,0 až 8,0 pričom velkost’ porov v dialyzačnej membráně by mala byť tak velká, aby umožnilaseparáciu zlúčenín vyjádřenu molekulárnou hmotnosťou do 150000.
Koniec dialýzy je indikovaný negativnou reakciou na etanol a chloroform, na přítom-nost’ albuminu a transferínu v gama-globulínovom roztoku. Po skončení dialýzy sa dialyzačnépotrubie s gama-globulinovým roztokom zvesí z háčika, opatrné sa vyberie a po rozstrihnutísa gama-globulínový roztok preleje do zbernéj nádoby a óalej sa spracováva napříkladultrafiltráciou alebo diafiltráciou na membráně XM 300, výrobku fy Amicon, pričom sa od-straňuje skupina bielkovín s molekulárnou hmotnosťou nad 250000. Po skončení ultrafiltrá-cie sa roztok monomeru IgG podrobí ďalšiemu zpracovaniu.
Separáciu monoméru IgG je možné previesť aj pomocou elektrodialýzy v tom usporiadani,že dialyzačné potrubie s velkosťou pórov, ktoré prepustia zlúčeniny do molekulárnej hmot-nosti 250000 sa umiestni do potrubia o váčšom priemere, ktorého steny prepustia zlúčeninydo molekulárnej hmotnosti 150000. Roztok purifikovaného gama-globulínu sa umiestni do vnú-torného potrubia pričom do medziplášťa dáme roztok chloridu sodného v apyrogennej voděo koncentrácii do 30 gramov na liter. Samotná dialýza v tomto usporiadani či už proti roz-toku chloridu sodného alebo proti destilovanej vodě pretekajúcim okolo prebieha pomaly.
Urýchlenie procesu dialýzy je možné aj tým, že do roztoku chloridu sodného v ktoromje umiestnený gama-globulín spósobom vyššie opísaným sa zavedie rovnosmerný elektrický prúdpři použití napatia do 100 V. Elektrodialýza musí prebiehať v nádobě z umelej hmoty a jevhodné ak do seba vložené dialyzačné potrubie sú umiestnené do válcovej formy z umelejhmoty, ktorá sa počas elektrodialýzy otáča, čím sa priebeh elektrodialýzy urýchluje. Přielektrodialýze je vhodné použit’ elektrody z platiny alebo z uhlíku, ktoré sú rovnako dlhéako dialyzačné potrubie. Tým, že v dósledku zavedenia prúdu bude na jednej z elektrodunikat' chlór, bude sa hodnota pH roztoku v ktorom elektrodialýza prebieha zvyšovat’. Ako-náhle stúpne hodnota pH nad 8,0 je potřebné roztok chloridu sodného v nádobě vyměnit’. Jevhodné, ak obsah nádoby je cca 50 násobkom objemu gama-globulinového roztoku vloženého CS 272721 B1 do vnútornej dialyzačnej trubice. Taktiež je vhodné ak objem medziplášťa dialyzačnéhopotrubia s vačším priemerom je cca 3 násobok objemu gama-globulinového roztoku vloženéhodo vnútorného dialyzačného potrubia.
Ukončenie elektrodialýzy indikuje negativná reakcia' na etanol, chloroform, albumina transferin v roztoku monomeru IgG, ktorý sa bude vyskytovat v medziplášťovom priestoreodkiaf sa po skončení elektrodialýzy opatrné vypustí a podrobí sa ďalšiemu spracovaniu, C..· Přípravu monomeru IgG je možné ťiež realizovat pomocou kombinácie diafiltráciea ultrafiltrácie.
Diafiltráciu, ktorá je vlastně kombináciou dialýzy a ultrafiltrácie je možné realizo-vat jednak v podobě dutých nití, pričom gama-globulínový roztok preteká pod mierným tlakomdo 500 kP vo vnútri nifovej membrány a cez póry v stene niťovej membrány přestupuji] zlúče-niny s molekulárnou hmotnostou do 150000 do. z vonkajšej strany pretekajúceho roztoku desti-lované j vody alebo do roztoku chloridu sodného v destilovanej apyrogennej vodě, o koncentrá-cii do 30 gramov na liter, při tepláte 0 °C až + 6 °C, při pH 4,0 až 8,0, ktorý zlúčeninydo molekulárnej hmotnosti 150000 unáša od niťovej membrány do odpadu. Velmi přesný obrazo stave oddelenia albuminu alebo transferínu nám poskytne vysokotlaká gélová chromatogra-fia.
Diafiltráciu je možné realizovat aj v podobě kazetového systému, kde v rovinnom uspo-riadaní je alebo vyměnitelná membrána, připadne doska z umelej hmoty s definovanou vef-kosfou pórov. Gama-globulinový roztok pod mierným tlakom do 500 kP preteká například nadmebránou a cez póry v stene rovinnej membrány alebo poréznej došky přestupuji] velmi poma-lým prietokom zlúčeniny do molekulárnej hmotnosti 150000 do pretekajúceho roztoku apyrogen-nej vody alebo do vodného roztoku chloridu sodného v destilovanej apyrogennej vodě o kon-centraci! do 30 gramov na liter, ktoré pretekajú například pod doskou alebo membránoua odplavujú tak zlúčeniny do molekulárnej hmotnosti 150000 do odpadu. Po oddělení zlúčeníndo molekulárnej hmotnosti 150000 prevedieme oddelenie zlúčenín nad molekulárnú hmotnost250000.
Odstraňovanie zlúčenín s molekulárnou hmotnostou nad 250000 je možné realizovat po-mocou diafiltračne-ultrafiltračnej membrány XM 300, výrobku fy Amocin, ktorá má vylučo-vaciu medzu molekulárnej hmotnosti 300000. Odstraňovanie zlúčenín s molekulárnou hmot-nosťou do 150000 je možné realizovat pomocou diafiltračne-ultrafiltračných membrán XM 100 Aalebo YM 100, pričom obe membrány majú vylučovaciu medzu 100000 a sú výrobkom fy Amicon.Vyššie spomínané diafiltračne-ultrafiltračné membrány je možné použit na přístroji MC-2Aalebo na zariadeniach amatérsky pre tento účel zhotovených.
Separáciu zlúčenín s molekulárnou hmotnostou do 150000 je možné realizovat napříkladpomocou ultrafiltračnej patrony H10P100-20 usporiadanej do formy dutých nití alebo napří-klad pomocou ultrafiltračnej špirálovo točenej patrony S10Y10Q, pričom obe ultrafiltračnépatrony majú vylučovaciu medzu 100000, sú výrobky fy. Amicon a možno ich použit napříkladna přístroji DC-30 alebo na zariadeniach pre tento účel amatérsky zhotovených. Roztok taktozískaného monoméru IgG sa podrobí ďalšiemu spracovaniu.
Vzhladom na to, že roztok gama-globulínu sa pri diafiltrácii zakoncentrováva, prevediesa opatovné nariedenie s destilovanou apyrogennou vodou alebo s roztokom sodného v desti-lovanej apyrogennej vodě o koncentrácii do 30 gramov na liter a toto zakoncentrovávanie na-příklad na polovičný objem a narieďovanie na póvodný objem sa prevádza dovtedy, pokial’je reakcia gama-globulinového roztoku na přítomnost etanolu a chloroformu, albuminu a trans-ferínu pozitívná. Velmi přesný obraz nám o oddělení albuminu a transferínu poskytne tlako-vá gélová chromatografia.
Sterilizácía diafiltračného zariadenia sa prevádza totožným spósobom aký je popísanýpri sterilizácii ultrafiltračnej aparatury. CS 272721 B1 0.; Ultrafiltrácia je realizovatelná jednak v podobě dutých nití pričom gama-globuli-nový roztok preteká vo vnútri niťe pod tlakom do 800 kP a cez póry v stene niťovej (nebrá-ny prestupujú zlúčeniny do 150000 molekulárněj hmotnosti do zbernej nádoby. Vzhladom nato, že roztok gama-globulínu sa při ultrafiltrácii zakoncentrováva prevedie sa opátovnénariedenie s destilovanou vodou alebo s roztokom chloridu sodného v destilovanej apyro-gennej vodě v koncentrácii do 30 gramov na liter a toto zakoncentrovanie například na polvičný objem a narieďovanie na povódný objem sa prevádza dovtedy pokial je přítomný chlo-roform, etanol a nynhydrín pozitivně látky v retenáte. Velmi přesný obraz o stave oddele-nia albuminu alebo transferínu nám poskytne vysokotlaká gélová chromatografia.
Ultrafiltráciu je možné realizovat aj v podobě kazetového systému, kde v rovinnomusporiadaní je alebo vyměnitelná membrána alebo doska z umelej hmoty s definovanými vel-kosťami porov. V súčasnosti sa začínají! zavádzať do praxe rovinné membrány s definovanýmivelkosťami porov špirálovo točené. Gama-globulínový roztok pod tlakom do 800 kP pretekánad membránou a cez póry v stene rovinnej alebo stočenej membrány alebo poréznej doškyz umelej hmoty prestupujú zlúčeniny do molekulárnej hmotnosti 150000 do zbernej nádoby.Spirálovou vinutá membrána má v' porovnaní s dutými nitami podstatné vačšiu pracovnúplochu.
Separáciu zlúčenín s molekulárnou hmotnosťou do 150000 je možné realizovat napříkladpomocou ultrafiltračnej patrony H10P100-20 usporiadanej do formy dutých nití alebo napří-klad pomocou ultrafiltračnej špirálovotočenej membránovej patrony S10Y100, pričom obeultrafiltračné patrony majú vylučovaciu medzu molekulárnej hmotnosti 100000, sú vyrobkamify Amicon a možno ich použit například na stroji DC-30 alebo na zariadeniach pre tentoúčel amatérsky zhotovených.
Gama-globulinový roztok po oddělení zlúčenín do molekulárnej hmotnosti 150000 sa znovu podrobí ultrafiltrácii například na membráně XM 300, výrobku fy Amicon, ktorá má vylu-čovaciu medzu molekulárnej hmotnosti 300000. Ultrafiltrácia sa prevádza podobným spůso-bom ako vyššie popísaná a prevádza sa dovtedy, pokial nevzrastá už koncentrácia monoméruIgG stanovená vzhladom na určitý konkrétný objem, o čom operativně informuje vysokotlakágélová chromatografia.
Sterilizácia ultrafiltračného zariadenia sa prevádza alebo parou alebo chemickoucestou například prepláchnutím aparatúry vodným roztokom formalínu o koncentráciido 50 gramov na liter s následným vymytím formalínu sterilnou destilovanou apyrogennouvodou o teplote 0 °C až + 6 °C. Důkaz chloroformu sa prevádza Fujiwarovou reakciou (Fujiwara: Sitzber.Naturw.Ges.Rostock 6,33,1916) či už v povodnom usporiadaní alebo v novších aplikáciach podlá Setaa Schultzeho (Seto T.A., Schultze M.C.: Anal.Chem. 28,1625,1956), Hildebrechta (Hilde-brecht C.D.: Anal.Chem. 29,1037,1957), Friedmana a Coopera (Friedman P.3., Cooper J.R.:Anal.Chem. 30,1674,1958).
Ninhydrin pozitivně látky stanovujeme sposobom podlá Ruhemana (Ruheman S.: J.Chem.Soc. 97,1438,1910). Stanovenie etanolu sa prevádza Agulhonovou reakciou (Agulhon H.:
Bull.Soc.Chim.France /4/,9,881,1911) či už v povodnom usporiadaní alebo v novějšíchaplikáciach podlá Kelletta (Kellett E.G.: Analyst 62,728,1937) alebo Webba (Webb D.A.:Sci.Proc.Roy Dublin Soc. 21,281,1936).
Roztok gama-globulinového monoméru, z ktorého boli oddělené balastné prímesy nízko-molekulárných a vysokomolekulárných zlúčenín do molekulárnej hmotnosti 150000 a nad250000 sa v případe potřeby zakoncentrováva ultrafiltráciou, vakuovou destiláciou, vymra-zovaním alebo inými metodami, potom sa sterilizuje například filtráciou alebo pomocouiných metod, před koncovou lyofilizáciou sa upravujú v roztoku podmienky, roztok sa roz-plni do flaštičiek a prevedie sa jeho namrazenie. V případe potřeby sa podrobí ďalšiemuspracovaniu pomocou iontomennej chromatografie alebo afinitnej chromatografie.
Claims (4)
- * 7 CS 272721 B1 Pod úpravou podntienok v roztoku monomeru IgG před lyofillzáciou rozumieme pridaniechloridu sodného a glukózy do požadovanej koncentrácie po čom následuje úprava hodnoty pHdo určitého rozmedzia. Namiesto glukózy je možné použit aj iné cukry. Dobré stabilizačněúčinky vykazuje u gama-globulínu pridanie maltózy do 10 %-nej koncentrácie před lyofili-záciou (Ochs H.D., Piforsky B., Rousel R.H., Buckley R.H., Fischer S.H., Anderson C.3.,Wedgwood R.3.: Lancet 11,1158,1980), alebo pridanie aminooctovej kyseliny v kombináciis kyselinou epsilon-aminokapronovou (Škvařil F.: Immunoglobulins, National Academy ofSciences, Washington D.C. 1970 str. 165). Velký význam pre všetky sposoby používané v příklade 1 má používanie vody zbavenejmikroskopických mechanických nečistot, čo je možné realizovat pomocqu ultrafiltrácie vodynapříklad na ultrafiltračnej patrone H10P10-20, výrobok fy Amicon, například na přístrojiDC-30 alebo na zariadeniach na tento účel amatérsky zhotovených. Preparáty gama-globulínu pře i.v. a i.m. podanie, vyrobené podlá navrhovaného postu-pu z cca 99,5 %-ného obsahu monomeru IgG v roztoku v lyofilizovanom stave majú agregačnéspektrum, ktoré sa nachádza v rozmedzí 92-98 % monoméru, 3-6 % diméru pričom nebol dete-govaný žiadný polymer IgG. Testovanie obsahu monoméru, diméru a polyméru IgG v lyofili-zovanom stave po rozpuštění bolo prevadzané pomocou gelovej filtrácie na Sephacryle S-300superfine s prietokovou registráciou denzity prí 254 nm. Testovanie obsahu IgA a IgM, v rozpustenom lyofilizovanom preparáte monoméru IgG,pomocou IDP súprav a Q antisér naznačuje, že obsah IgM je v rámci technologie kompletněodstránený, pričom obsah IgA zostáva nezmenený. Příklad 2 Východziou súrovinou mSžu byť bielkovinná pasta gama-globulínu alebo roztok gama-glo-bulínu v purifikovanom stave, izolované aj pomocou iných metod. Bielkovinná pasta aleboroztok gama-globulínu sa spracováva podobné ako v příklade 1 s tým rozdielom, že sa ne-kladie doraz na stanoveníe etanolu a chloroformu, ale na stanovenie precipitačnej látky,ktorá bola použitá na precipitáciu gama-globulínu alebo tej zlúčeniny, ktorá uvolnila garoa--globulín z vazby na niektorom zo sorbentov. PREDMET VYNÁLEZU1. SpSsob přípravy přípravku obsahujúceho purifikovaný krvný gama-globulín s vysokým obsa-hom monoméru vyznačujúci sa tým, že bíelkovinný materiál obsahujúci purifikovaný gama--globulín sa suspenduje za aseptických podmienok v takom množstve apyrogennej destilo-vané j vody o teplote 0 °C až + 6 °C, aby hodnota koncentrácie bielkovín sa nachádzala v rozmedzí 5 až 180 gramov na liter, gama-globulinový roztok sa vyčirí napříkladfiltráciou a oddelia sa balastné zlúčeniny s molekulárnou hmotnosťou do 150000 a nad250000, potom sa zakoncentrováva ultrafiltráciou, vakuovou destiláciou, vymrazovanímalebo inými metodami, potom sa sterilizuje například filtráciou alebo pomocou inýchmetod, před koncovou lyofilizáciou sa roztok stabilizuje například přidáváním chloridusodného, glukózy, maltózy alebo iných cukrov, roztok sa rozplní, prevedie sa jeho namra-zenie a lyofilizácia pričom v případe potřeby sa roztok před lyofilizáciou alebo polyofilizácii podrobí óalšiemu spracovaniu například pomocou iontomennej alebo afinitnejchromatografie.
- 2. Spčsob podlá bodu 1, vyznačujúci sa tým, že oddelenie balastných zlúčenín do moleku-lárnej hmotností 150000 a nad 250000 sa prevádza alebo v prostředí destilovanej apyro-gennej vody alebo vo vodnom roztoku chloridu sodného v destilovanej apyrogennej vodě o koncentrácii do 30 gramov na liter při teplote 0 °c až + 6 °C pri pH 4,0 až 8,0. Λ CS 272721 B1 8
- 3. Sposob podl’a bodu 1, vyznačujúci sa tým, že oddelovanie balastných zlúčenín s moleku-lárnou hmotnosťou do 150000 a nad 250000 sa prevádza pomocou gelovej filtrácie, dialýzyv kombinaci! s ultrafiltráciou alebo pomocou dialýzy v kombinaci! s elektrodialýzou,diafiltrácie v kombinácii s ultrafiltráciou, ultrafiltráciou.
- 4. Sposob podlá bodu 1 vyznačujúci sa tým, že bielkovinný materiál z ktorého sa frakciaobsahujúca gama-globulín izoluje je normálná alebo hyperimunná plazma, připadne nor-málně, retroplacentárné alebo hyperimunné sérum ludského alebo zvieracieho původu s definovanou antibakteriálnou, antitoxickou alebo antivirovou protilátkovou aktivi-tou .
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS912787A CS272721B1 (en) | 1987-12-14 | 1987-12-14 | Method of medicament preparation that contains purified gamma-globulin with high content of monomer |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS912787A CS272721B1 (en) | 1987-12-14 | 1987-12-14 | Method of medicament preparation that contains purified gamma-globulin with high content of monomer |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS912787A1 CS912787A1 (en) | 1990-06-13 |
| CS272721B1 true CS272721B1 (en) | 1991-02-12 |
Family
ID=5442590
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS912787A CS272721B1 (en) | 1987-12-14 | 1987-12-14 | Method of medicament preparation that contains purified gamma-globulin with high content of monomer |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272721B1 (cs) |
-
1987
- 1987-12-14 CS CS912787A patent/CS272721B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS912787A1 (en) | 1990-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2032802T5 (es) | Sucedaneo de sangre semisintetico extrapuro. | |
| SU786854A3 (ru) | Способ получени препарата на основе белковой сыворотки | |
| JPH0694421B2 (ja) | 静注可能な免疫グロブリン | |
| US20060030027A1 (en) | Capture and removal of biomolecules from body fluids using partial molecular imprints | |
| JP2002517516A (ja) | 静脈投与用免疫グロブリン及び他の免疫グロブリン生成物の製造法 | |
| PT88489B (pt) | Processo para reduzir a contaminacao de solucoes de macromoleculas por endotoxinas de origem bacteriana | |
| US3864478A (en) | Storage-stable hemoglobin solutions and method for their preparation | |
| Neftel et al. | Effect of storage of penicillin-G solutions on sensitisation to penicillin-G after intravenous administration | |
| CN115768789A (zh) | 用于获得包含人血浆来源的免疫球蛋白m的组合物的方法 | |
| JPS6053009B2 (ja) | 肝炎ウイルスｂによる急性または慢性の感染治療用の新規医薬 | |
| CS272721B1 (en) | Method of medicament preparation that contains purified gamma-globulin with high content of monomer | |
| US5407579A (en) | Hemoglobin purification | |
| US4197238A (en) | Method of preparation of human albumin using polyethylene glycol | |
| Dole | A Dialyzable Medium for Cultivation of Group A Hemolytic Streptococci. | |
| JPS58180433A (ja) | 免疫グロブリンから抗補体作用物質の除去法 | |
| RU2178309C2 (ru) | Антитимоцитарный глобулин для внутривенного введения и способ его получения | |
| FI78303C (fi) | Foerfarande foer avskiljande av lipoproteiner med hjaelp av derivatiserad polyhydroximetylen. | |
| SE407333B (sv) | Forfarande for rening av gamma-globulin, serskilt antilymfocyt-gamma-globulin | |
| US3586607A (en) | Process for the recovery and purification of lysozyme | |
| JPH08787B2 (ja) | ガンマグロブリン含有組成物の製造法 | |
| JPH01249062A (ja) | 体外循環回路 | |
| CS249861B1 (en) | Method of serum albumin preparation with reduced salts' content | |
| US2290146A (en) | Composition capable of inhibiting agglutination or hemolysis in blood | |
| JPS6236483B2 (cs) | ||
| Griswold et al. | Glomerular localization of antigen and antibody in rabbits following intravenous administration of serum cryoproteins from homologous animals with acute serum sickness |