CS272192B1 - Stabilizované činidlo na stanoveni katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy - Google Patents
Stabilizované činidlo na stanoveni katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy Download PDFInfo
- Publication number
- CS272192B1 CS272192B1 CS875216A CS521687A CS272192B1 CS 272192 B1 CS272192 B1 CS 272192B1 CS 875216 A CS875216 A CS 875216A CS 521687 A CS521687 A CS 521687A CS 272192 B1 CS272192 B1 CS 272192B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- aspartate aminotransferase
- catalytic concentration
- aspartate
- determining
- concentration
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Předmětem řešeni je stabilizované činidlo pro stanoveni katalytické koncentrace aspartátaminotransfsrasy na bázi L-aspartátu, malátdehydrogenasy a nikotinamidadanosinu, které obsahuje určité množství kyseliny askorbové a albuminu, činidlo se používá při stanoveni katalytické koncentrace asparátaminotransferasy v krevním séru nebo plazmě a vyniká oproti doposud používaným především vyšěl stabilitou.
Description
Stanovení katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy, tj. L-aspartát- 2-oxoglutarátaminogransferasy EC 2.6.1.1. v krevním séru nebo plazmě je velmi rozšířenou analýzou, umožňující znaěné zpřesnění diferenciální diagnostiky jaterních a srdečních chorob. Stanovení katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy je jednou ze základních analýz prováděných v klinické biochemii.
V současné době se připraví činidlo na stanovení katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy tak, že se k pufru obsahujícím L-aspartát a pyridoxal-5-fosfát přidá indikátorový enzym malátdshýdrogenasa a jeho substrát nikotinamidadenosindinukleotid. Tento roztok je etabilní v temnu při teplotě +4 °C asi tři týdny. Nízká stabilita zásobního roztoku je ekonomicky značně nevýhodná pro menší pracoviště a pro použití automatických analyzátorů, které pracují s velmi malými objemy pracovních činidel, a proto v tak krátké době nemohou zpracovat celý objem pracovních roztoků, které jsou připravovány z komerčně dostupných diagnostických souprav. Prodloužení stability připravovaných roztoků zmrazením, které je velmi hojně užívána, nelze v tomto případě použit, protože při zmrazení dochází k poškození indikátorového enzymu malátdehydrogenasy, a tím i k poklesu její katalytické aktivity.
Stabilita zásobních roztoků může být několikanásobně prodloužena, přidájí-li se do roztoku látky, které ochrání enzymy před jejich poškozením a antioxidanty zamezující nežádoucí oxidaci nikotinamidadenosindinukleotidu. Mnohé antioxidanty, jako je například propylgalát, ethylenglykol a kyselina citrónová hojně užívané v potravinářství a farmacii, mají nepříznivý vliv na katalytickou koncentraci indikátorového enzymu, malátdehydrogenasy· Proto je žádoucí nalézt takovou látku, která zabrání oxidaci nikotinamidadenosindinukleotidu a zároveň nebude mít nepříznivý vliv na katalytickou koncentraci enzymů.
Zmíněné nedostatky výrazně potlačuje stabilizované činidlo na stanovení katalytické koncentrace aspartátaminotransferas podle vynálezu. Oeho podstata spočívá v tom, že činidlo obsahuje 0,5 /Umol.l-^ až 10 /Umol.l”^ kyseliny askorobové a 0,5 až 10 g.l^ albuminu.
Činidlo s kyselinou askorbovou a albuminem má následující přednosti. Albumin působí jako ochranné médium malátdehydrogenasy. Katalytická koncentrace malátdehydrogenasy za přítomností albuminu při teplotě +4 °C zůstává zachována po několik týdnů. Také koncentrace redukované formy nikotinamidadenosindinukleotidu v přítomnosti kyseliny askorbové zůstává téměř zachována více než Jeden týden.
Albumin a kyselina sskorbová jsou přitom kompatibilní s analytickými systémy nejčastěji užívanými pro stanovení katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy, na rozdíl od Jiných ochranných systémů.
Uvedeným poměrně velmi jednoduchým způsobem lze podstatně zvýšit stálost pracovního roztoku pro stanovení katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy tak, aby byl použitelný po dobu nezbytnou a výhodnou pro různé typy zdravotnických laboratoří.
Příklad 1
Κ 1 litru pufru e L-aspartátem se přidá 0,5 /umol kyseliny askorbové a k pevné enzymové směsi obsahující malátdshydrogenasu a nikotinamidadenosindinukleotid se přidá 10 g albuminu. Po smíchání obou komponent se získá stabilizované činidlo pro stanovení katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy.
Příklad 2
K enzymové směsi obsahující malátdehydrogenasu a nikotinamidadenosindinukleotid se přidá 5 /Umol kyseliny askorbové a 0,5 g albuminu. Po smíchání enzymové směsi s roztokem pufru obsahujícím L-aspartát se získá 1 litr stabilizovaného činidla pro stanoveni katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy.
CS 272 192 81 2
Příklad použiti
K 1 ml stabilizovaného činidla na stanovení katalytické koncentrace asparátaminotransferasy obsahující 120 mmol.l”^ tris-(hydroximethyl)-aminomethanf 240 mmol.!-1 L-aspartát, 0,12 pyridoxal-5-fosfát, 0,216 mmo!.!”! niktinamidadenosindinukleotid, 8,4 /ukat.l malátdehydrogenasa, 0,5 /Umol.l”l kyselina askorbová a 10^0 g.l”^ albuminu připraveného podle příkladu 1 se přidá 0,1 ml analyzovaného séra. Po desetiminutové preinkubaci při 30 °C je anzymová reakce nastartována přídavkem 0,1 ml kyseliny 2-oxoglutarové o koncentraci 144 mmol.l”1. Zaznamenává se změna absorbance při 340 nm za časovou jednotku při teplotě 30 °C.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUStabilizované činidlo na stanoveni katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy na bázi L-aspartátu, malátdehydrogenasy a nikotinamidadenosinu, vyznačující ss tím, že obsahuje 0,5 yumol.l“^ až 10 /Umol.l-·'', kyseliny askorbové a 0,5 až 10 g.l! albuminu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS875216A CS272192B1 (cs) | 1987-07-09 | 1987-07-09 | Stabilizované činidlo na stanoveni katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS875216A CS272192B1 (cs) | 1987-07-09 | 1987-07-09 | Stabilizované činidlo na stanoveni katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS521687A1 CS521687A1 (en) | 1990-05-14 |
| CS272192B1 true CS272192B1 (cs) | 1991-01-15 |
Family
ID=5396631
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS875216A CS272192B1 (cs) | 1987-07-09 | 1987-07-09 | Stabilizované činidlo na stanoveni katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272192B1 (cs) |
-
1987
- 1987-07-09 CS CS875216A patent/CS272192B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS521687A1 (en) | 1990-05-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2054674C1 (ru) | Способ определения концентрации ионов калия в биологическом материале | |
| EP0072581B1 (en) | The stabilization of working reagent solutions containing enzymes, and the use of such stabilized reagents in enzyme or substrate assays | |
| EP0034213A1 (en) | A stabilized aqueous coenzyme solution for use in a clinical assay, a method of stabilizing a labile coenzyme in an aqueous clinical assay solution and a kit for use in said clinical assay | |
| Szasz et al. | Creatine kinase in serum: 6. Inhibition by endogenous polyvalent cations, and effect of chelators on the activity and stability of some assay components. | |
| Dixon et al. | The role of coenzymes in dehydrogenase systems | |
| EP0490286B1 (en) | Enzymatic composition for ethanol assay | |
| JP2854995B2 (ja) | 尿酸測定用試薬組成物 | |
| EP0463755A1 (en) | Stable aqueous NADH reagent and kit | |
| JP2017198670A (ja) | 糖化タンパク質の分析方法、分析試薬、分析キットおよび分析用試験片 | |
| JP3619865B2 (ja) | 液体の安定なチオール活性化剤 | |
| JP4639287B2 (ja) | 酵素的測定試薬の安定化方法 | |
| JPH01108997A (ja) | 血液又は血液から導出した試料中の血清のフルクトスアミン含量を特異的に測定する方法及び試薬、及び非特異的還元作用を有するか、又は／及び溷濁を惹起する試料成分を除去する方法 | |
| JP2619222B2 (ja) | 血液試料または血液由来の試料中のフルクトサミン含量を測定するための試薬と方法 | |
| EP0603831A1 (en) | Stable single liquid reagent for the determination of carbon dioxide in serum | |
| CN1311335A (zh) | 可稳定还原性辅酶ⅰ和还原性辅酶ⅱ的试剂 | |
| CS272192B1 (cs) | Stabilizované činidlo na stanoveni katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy | |
| JP4022799B2 (ja) | 電解質測定用試薬組成物 | |
| EP1083235A2 (en) | Reduced coenzyme solution | |
| US7432072B2 (en) | Method of preventing wrong color formation of n-(carboxymethylaminocarbony)-4,4′-bis(dimethylamino) diphenylamine sodium, reagent solution for the method, and measurement method employing the method | |
| JPWO1995006136A1 (ja) | グルコース測定用試薬 | |
| CN108486091A (zh) | 一种用于生化试剂复合酶的复合稳定剂及其应用 | |
| CS263028B1 (cs) | Stabilizovaná činidlo na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy | |
| EP0721986A2 (en) | Creatine kinase reagent | |
| JP4798600B2 (ja) | フルクトシルペプチドオキシダ−ゼの安定化方法 | |
| EP0886139A1 (en) | A reagent for measurement and a measurement method |