CS263028B1 - Stabilizovaná činidlo na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy - Google Patents
Stabilizovaná činidlo na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy Download PDFInfo
- Publication number
- CS263028B1 CS263028B1 CS875215A CS521587A CS263028B1 CS 263028 B1 CS263028 B1 CS 263028B1 CS 875215 A CS875215 A CS 875215A CS 521587 A CS521587 A CS 521587A CS 263028 B1 CS263028 B1 CS 263028B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- albumin
- concentration
- determination
- alanine
- catalytic concentration
- Prior art date
Links
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 title 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 claims abstract description 21
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 102100036475 Alanine aminotransferase 1 Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 12
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 claims abstract description 8
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 claims abstract description 7
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 claims abstract description 6
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 claims abstract description 5
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- WNDXUFDJFGKDLM-RBWOKHCDSA-N (4s)-4-[[(2s)-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s,3r)-2-[[(2s)-2-amino-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(4h-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-[[(2s,3s)-1-amino-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-ox Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)[C@@H](C)O)CC1C=NC=N1 WNDXUFDJFGKDLM-RBWOKHCDSA-N 0.000 claims 1
- IGVYYYIGRZRCKV-UHFFFAOYSA-N Albuminamide Natural products CCC(C)C(C(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC(O)=O)C(C)O)CC1=CN=CN1 IGVYYYIGRZRCKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 abstract description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N pyridoxal 5'-phosphate Chemical compound CC1=NC=C(COP(O)(O)=O)C(C=O)=C1O NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000007682 pyridoxal 5'-phosphate Nutrition 0.000 description 3
- 239000011589 pyridoxal 5'-phosphate Substances 0.000 description 3
- 229960001327 pyridoxal phosphate Drugs 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N Propyl gallate Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 2
- KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 2-oxoglutaric acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)C(O)=O KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000008941 Albumin Reagent Methods 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 108090000340 Transaminases Proteins 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000010580 coupled enzyme reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000003748 differential diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 229940093476 ethylene glycol Drugs 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 1
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 1
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000000473 propyl gallate Substances 0.000 description 1
- 235000010388 propyl gallate Nutrition 0.000 description 1
- 229940075579 propyl gallate Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 102000014898 transaminase activity proteins Human genes 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Předmětem řešení je stabilizované
činidlo pro stanovení katalytické koncentrace
alaninaminotransferasy a L-alaninem,
laktátdehydrogenasou, albuminem a
nikotinamidadenindinukleotirem, která obsahuje
kyselinu $itronovou a albumin v
určitém poměru. Činidlo se používá při
stanovení katalytická konoentrace v krevním
séru nebo glazmě a vyniká oproti doposud
používaným především vyšší stabilitou.
Description
Vynález se týká stabilizovaného činidla ke stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy.
«
Stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy (L-alanin: 2-oxoglutarátaminotransferasa EC 2.6.1.2.) v krevním séru nebo plazmě j,e velmi rozšířenou analýzou, umožňující značné zpřesnění diferenciální diagnostiky jaterních a srdečních chorob. Stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy je jednou ze základních analýz prováděných v klinické biochemii.
Katalytická koncentrace L-alaninaminotransferasy se stále častěji určuje pomocí spřažených enzymových reakcí. V současné době se připraví činidlo na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy tak, že se k pufru obsahujícímu L-alanin a pyridoxal-5-fosfát přidá indikátorový enzym laktátdehydrogenasa a jeho substrát nikotinamidadenindinukleotid. Tento roztok je.stabilní v temnu při teplotě +4 °C 2 až 3 dny. Nízká stabilita zásobního roztoku je ekonomicky značně nevýhodná pro menší pracoviště a pro použití automatických analyzátorů, které pracují s velmi malými objemy pracovních činidel, a proto v tak krátké době nemohou zpracovat celý objem pracovních roztoků, které jsou připravovány z komerčně dostupných diagnostických souprav. Prodloužení stability připravovaných roztoků zmražením, které je velmi hojně užíváno, nelze v tomto případě použít, protože při zmražení dochází k poškození indikátorového enzymu laktátdehydrogenasy, a tím i k poklesu její katalytické aktivity. Stálost činidla pro stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy lze sice zvýšit přídavkem albuminu, který působí jako ochranné médium, ale jen asi na 5 až 6 dnů.
Stabilita zásobních roztoků může být několikanásobně prodloužena, přidájí-li se do roztoku látky, které ochrání enzymy
263 028 před jejich poškozením a antioxidanty zamezující nežádoucí oxidaci nikotinamidadenindinukleotidu. Mnohé entioxidanty, jako je například propylgalát, ethylenglykol a kyselina askorbové^ hojně užívané v potravinářství a farmacii, mají nepříznivý vliv na katalytickou koncentraci indikátorového enzymu, laktátdehydrogenasy. Proto je Žádoucí nalézt takovou novou látku, která potlačí oxidaci nikotinamidadenindinukleotidu a zvýší tím použití činidla pro stanovení katalytické koncentrace ALT a zároveň nebude mít nepříznivý vliv na katalytickou koncentraci enzymů. Zmíněné nedostatky výrazně potlačuje stabilizované činidlo na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferas podle vynálezu. Jeho — 1 —1 podstata spočívá v tom, že obsahuje 0,5 /umol.l až 10,0 /umol.l kyseliny citrónové a 0,5 až 10 g.l”1 albuminu.
Činidlo s kyselinou citrónovou a albuminem má následující přednosti. Albumin v kombinaci s kyselinou citrónovou zvyšuje, ve srovnání s činidlem stabilizovaným jen albuminem, stálost činidla pro stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy z původních 5 až 6 dnů až na 10 dnů. Jedná se tedy o specifický vyšší účinek albuminu a kyseliny citrónové zejména na nikotinamid ad enindinukleotid, projevující se prodloužením stálosti činidla pro katalytickou koncentraci alaninaminotransferasy až na dvojnásobek, ve srovnání s činidlem stabilizovaným samotným albuminem. Je třeba dodržet rozsah koncentrací albuminu a kyseliny citrónové uvedený v definici vynálezu, neboí vyšší koncentrace kyseliny citrónové negativně ovlivní stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy. Albumin a kyselina citrónová jsou přitom kompatibilní s analytickými systémy nejčastěji užívanými pro stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy, na rozdíl od jiných ochranných systémů.
Uvedeným poměrně velmi jednoduchým způsobem lze podstatně zvýšit stálost pracovního roztoku pro stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy tak, aby byl použitelný po dobu nezbytnou a výhodnou pro různé typy zdravotnických laboratoří.
«Μ «Β
Příklad 1
263 028
Κ 1 litru pufru obsahujícímu 0,120 mol tris(hydroximethyl)-aminomethan a 0,480 mol l-alanin se přidá 0,5 /umol kyseliny citrónové. pH pufru je nastaveno na hodnotu 7,6. K pevné enzymové směsi obsahující 0,216 mmol nikotinamidadenindinukleotid a 36 /Ukat laktátdehydrogenasa se přidá 10 g hovězího albuminu.
Po smíchání obou komponent se získá stabilizované činidlo pro stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy. Činidlo je stálé minimálně 10 dní.
Příklad 2
K enzymové směsi obsahující 0,216 mmol nikotinamidadenindinukleotid a 36 /Ukat laktátdehydrogenasa se přidá 5 ^umol kyselina citrónová a 0,5 g hovězího albuminu. Po smíchání enzymové směsi s 1 1 pufru o složení 0,120 mol tris(hydroximethyl)-aminomethan a 0,480 mol L-alanin a 0,120 mmol pyridoxal-5-fosfát, jehož pH je nastaveno na hodnotu 7,6*se získá stabilizované činidlo pro stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy. Činidlo je stálé minimálně 10 dní.
Příklad 3
K 1 ml stabilizovaného činidla na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy obsahující 120 mmol.l“1 trisfhydroximethyD-aminomethan, 480 mmol.1 l-alanin, 0,12 mmol.1 pyridoxal-5-fosfát, 0,216 mraol.l“*1 nikotinamidadenindinukleotid, /Ukat.l*1 laktátdehydrogenasa, 0,5 /umol.l*1 kyselina citrónová a 10,0 g.l~1 hovězího albuminu o pH 7,6 připraveného podle příkladu 1 se přidá 0,1 ml analyzovaného séra. Po desetiminutové preinkubaci při 30 °C je enzymová reakce nastartována přídavkem 0,1 mol kyseliny 2-oxoglutarové o koncentraci 165 mmol.1”1. Zaznamenává se změna absorbance při 340 : nm za Časovou jednotku při teplotě 30 °C.
Claims (1)
- Stabilizované činidlo na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransf erasy s L-alaninem, laktátdehydrogenasou, albuminem a nikotinamidadenindinukleotidem vyznačující se tím, že obsahuje 0,5 /Umol.l“1 až 10,0 /umol.l^ kyseliny citrónové a 0,5 až 10 g.l*^ albuminu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS875215A CS263028B1 (cs) | 1987-07-09 | 1987-07-09 | Stabilizovaná činidlo na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS875215A CS263028B1 (cs) | 1987-07-09 | 1987-07-09 | Stabilizovaná činidlo na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS521587A1 CS521587A1 (en) | 1988-08-16 |
| CS263028B1 true CS263028B1 (cs) | 1989-04-14 |
Family
ID=5396617
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS875215A CS263028B1 (cs) | 1987-07-09 | 1987-07-09 | Stabilizovaná činidlo na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS263028B1 (cs) |
-
1987
- 1987-07-09 CS CS875215A patent/CS263028B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS521587A1 (en) | 1988-08-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Fossati et al. | Enzymic creatinine assay: a new colorimetric method based on hydrogen peroxide measurement. | |
| RU2054674C1 (ru) | Способ определения концентрации ионов калия в биологическом материале | |
| US4350762A (en) | Aminopyrine improved Trinder's reagent and dosing process for hydrogen peroxide from enzymatic oxidation of metabolic substrata with the same | |
| Witter | Measurement of blood cholinesterase: A critical account of methods of estimating cholinesterase with reference to their usefulness and limitations under different conditions | |
| ES2363228T3 (es) | Procedimiento de ensayo de proteína glicosilada. | |
| EP0072581B1 (en) | The stabilization of working reagent solutions containing enzymes, and the use of such stabilized reagents in enzyme or substrate assays | |
| EP0027236B1 (en) | Ascorbate resistant composition, test device and method for detecting a component in a liquid test sample | |
| WO1996034977A1 (en) | Determination of glycated proteins | |
| EP0490286B1 (en) | Enzymatic composition for ethanol assay | |
| US5278044A (en) | Stable aqueous NADH reagent and kit | |
| EP0178113B1 (en) | Reagent for assaying creatine kinase | |
| EP0396584B1 (en) | Assay of salicylates or reduced pyridine nucleotides | |
| JP3619865B2 (ja) | 液体の安定なチオール活性化剤 | |
| WO2002027012A1 (fr) | Procede de production de produits de degradation de proteines | |
| JP2619222B2 (ja) | 血液試料または血液由来の試料中のフルクトサミン含量を測定するための試薬と方法 | |
| JP4022799B2 (ja) | 電解質測定用試薬組成物 | |
| CS263028B1 (cs) | Stabilizovaná činidlo na stanovení katalytické koncentrace alaninaminotransferasy | |
| CA1091174A (en) | Stabilized liquid enzyme | |
| US7432072B2 (en) | Method of preventing wrong color formation of n-(carboxymethylaminocarbony)-4,4′-bis(dimethylamino) diphenylamine sodium, reagent solution for the method, and measurement method employing the method | |
| O'Neal et al. | An automated, saccharogenic method for determining serum amylase activity | |
| US4142938A (en) | Determination of triglycerides and glycerol | |
| Pantel et al. | Some new applications of the biamperostat catalytic-kinetic determination of copper, peroxidase, glucose oxidase, thyroxine and 5-chloro-7-iodo-8-hydroxyquinoline | |
| CS272192B1 (cs) | Stabilizované činidlo na stanoveni katalytické koncentrace aspartátaminotransferasy | |
| EP0721986A2 (en) | Creatine kinase reagent | |
| EP0138530A2 (en) | Method for the estimation of salicylates or reduced Pyridine nucleotides |