CS268592B1 - Sposob znázorněnia hlíenu v parafinových rezoch - Google Patents

Description

Vynález rieii farebné znázorněni· hlienu v parafinových rezoch.

Na dokaž hlienu a hlienovitých látok aa v patologii doposiat používali jednak »·tódy empirické ako např. farbenie aucikara1 no· a nukheaateinoa. Tieto aetody se vlak pre svoju neipecif1ckost postupné nahradili nasledovnýai histocheaickýni aetódaal. Polysacharidy sa dokazujů aetódou PAS /Periodic Acid Schiff/, při ktorej oxidádou polysacharidov vznikajů dialdehydy, ktoré reagujů so Schiffovou regenciou za vzniku červenofialového sfarbenie. Haleho aetoda využívá schopnost kyslých skupin glykoproteinov elektrostaticky viazat kolddný roztok trojaocného železa. Takto vlažené železo reaguje 3ale) s roztoko· ferrokyanidu draselného za vzniku nerozpustné) berlinskej «odrej. K 3 ali i· aetódaa patři farbenie alciánovou «odrou, ktorá je básický· farbivo· ftalocyaainového typu s koaplexne viazanýa atomoa ned1 a tiež aetoda aetachromat1ckej reakcie s toluídinovou modrou. Okrem týchto najznámejI ich metod existujů eití člalde ale váčiinou sú to nodifikácie týchto už spominaných hl stochem1ckých metodik.

Podstatou vynálezu je znázornenie hlienu v parafinových rezoch na.bázi postupného odparafinovania řezu obsahujúceho hUen v organických rozpúlladlách klesajůce) koncentrácie s následný· znázorněním hi stologickýai farbivaai tým sposobo·, že odparafinovaný rez sa ponechá v destilováno) vodě po dobu 3 až 5 «in a za tý« preparát zbavíme vody týa sposobo·, že ho necháme votne vysullt na vzduchu po dobu 24 hodin při laboratorně) teplote. Vysuiený rez sa poto· farbi v troch za sebou nasledujůcich fázach. V prvej fázi sa farbi farbiaci· roztoko· obsahujúci· kyslé farbivá trifenylmethanovej skupiny a to 1,5 až 2,5 g Fast Green FCF, 50 g destilovanej vody, 50 g 96 X alkoholu a 3,5 až 4,5 g kyseliny fosfowolfráaovej po dobu 5 až 15 ain. Po ofarbeni sa rez opláchne vo vodovodně) vodě a v druhé) fáze sa farbi roztoko· skladajůcim sa z 3 až 5 g kyseliny fosfowolf ránovej a z 0,5 až 1 g oranže G rozpustenej v 100 g destilovanej vody, ktorý· sa hlien zráža 2 až 3 s a po opláchnuti řezu vo vodovodnej vodě sa v tretej fáze farbi farblada roztoko· skladajůci· sa z 0,25 až 0,5 g xanthenových farbív rozpuštěných v 100 g destilované) vody po dobu 1 až 2 s a za tým sa rez opláchne vo vodovodně) vodě, nechá votne uschnůt na vzduchu a namočí sa do xylénu, kde sa ponechá po dobu 5 až 10 ·1η. Za tým ta raz převrstvi médioa, například kanadský· balzaaoa rozpustnýa v xyléne.

Výhoda vynálezu spočívá v značné) časovej úspoře vočl predchádzajůcia sposobo· farbenia, rýchla a nenáročná příprava farbiadch roztokov, dlhodobá trvanlivost ofarbených preparátov, dobrý farebný kontrast a táto aetoda prispleva k áaliienu objasňovaniu vlastnosti hlienu a hlienovitých látok.

Přiklad prevedenia

Ako materiál obsahujúci hUen sa použije exdzia z humánně) stinné) žtazy glandula submand 1 bulár1s, ktorá sa fixuje 4 X foraaIdehydo·. Z parafinového řezu sa odstráni parafin pomocou organických rozpůštadiel klesajúcej koncentráde a ponechá sa v destilované) vodě po dobu 2 až 3 min. Za týa zbavíme preparát vody týa sposobo·, že ho necháme votne vysullt na vzduchu po dobu 24 hodin pri laboratorně) teplote. Vysulený rez sa potom farbi v troch za sebou nasledujůcich fázach. V prvej fázi sa ponori do sklenenej kyvety obsahujúcej farbiaci roztok skladajůci sa z 1,5 až 2,5 g Fast Green FCF, 50 g destilované) vody, 50 g 96 X alkoholu a z 3,5 až 4,5 g kyseliny fosfowolfráaovej po dobu 5 až 15 min. Po ofarbeni sa rez opláchne vo vodovodně) vodě a ponori do áatlej kyvety obsahujúce) farbiaci roztok pozostávajúci z 3 až 5 g kyseliny fosfowolfránovej a z 0,5 až 1 g oranže G rozpuštěné) v 100 g destilované) vody po dobu 2 až 3 sec. Po uvedene) době sa vykoná dokladný, ale nie dlhý oplach vo vodovodně) vodě a rez sa ponori do datle) kyvety obsahujúce) farbiaci roztok, ktorý pozostáva z 0,5 g Pyroninu G rozpuštěného v 100 g destilované) vodě, kde sa farbi po dobu 1 až 2 sec. Znova sa vykoná krátký oplach vo vodovodně) vodě a nechá sa rez votne usulit na vzduchu. Po jeho

CS 268 592 B1 zaschnuti sa ponor! do kyvety obsahujúcej xylén, ponechá sa po dobu 5 až 10 min v nej a óalej sa zakrývá do médii rozpustných v xyléne. Výsledok farbenia je nasledovný: hllenové mudnózne tubuly stinných žllaz «ů výraznej ružovof1 alovej farby na zelenom pozadí. Oobré výsledky sů aj pri ofarbeni tráviacej a dýchacej sůstavy.

Sposob znázornenla hllenu a hllenovltých létok v parafinových rezoch uvedenou metodou má možnost použitia v bioptickej a nekroptickej praxi na oddeleniach patologie - a pri histologickej výuíbe ítudentov medicíny.

Claims (1)

1. * PREDNET VYNÁLEZU

   Sposob znázornenla hllenu v parafinových rezoch na bázi postupného odparafInovanla řezu obsahujůceho hlien v organických rozpůštadlách klesajúcej koncentrécie a následným znázorněním například histologlckými farbivami, vyznaíujúci sa tým, že odparafinovaný rez sa ponechá v destilovanej vodě po dobu 3 až 5 ain, za týa sa preparát zbaví vody tým, že sa nechá vo(ne vysušit na vzduchu po dobu 24 h pri laboratornej teplote a za tým sa farbi v troch za sebou nasledujůcich fázach, přitom v prvej fázi sa farbi kyslýni trifenyInetanovýni farbivaai a to 1,5 až 2,5 g Fast Green FCF, 50 g destilovanej vody, 50 g 96 X alkoholu a 3,5 až 4,5 g kyseliny fosfowolfrámovéj po dobu 5 až 15 min, za tým po opláchnuti vodou farbi sa v druhej fázi roztokem skladajúcin sa z 3 až 5 g kyseliny fo«fowolfránovej a z 0,5 až 1 g oranže G rozpustenej v 100 g destilovaje vody, ktorým sa hlien zráža po dobu 2 až 3 s a po opláchnuti řezu vo vodě sa v tretej fáze farbi farbfaclm roztokem skladajúcin sa z 0,25 až 0,5 g xanthenových farbiv rozpuštěných v 100 g destilovanej vody, po 1 až 2 s farbenia sa rez opláchne vodou, nechá vo(ne uschnut na vzduchu, ponoří sa do xylénu na 5 až 10 min. za týn sa převrstvi médion například kanadskýa balzamoa rozpustným v xyléne. ^ř