CS268592B1 - Sposob znázorněnia hlíenu v parafinových rezoch - Google Patents

Abstract

Rleienle sa týká sposobu znázorněni# hlíenu v obore h1stologlckejtechniky, ktorá ráznými farb1adm1 metodami znázorňuje biologická Struktúry v živých 1 neživých objektech v rámci medicíny a prlrodnýeh vledj Očelom rleienle je dokázat přítomnost hlíenu v biologickou materiál!· Podstatou rleáenla je ofarbenie hlíenu v parafinových rezoch v prvej fáze pomocou kyslých farblv trlfenylmethanovej skupiny, v druhej fáze farblvom oranže S a kyseliny fosfovolfrámovej, ktorá vyzráža hllen a v tretej fáze sa farbl pomocou farblv xanthenových. Sposob znázorntnla hlíenu a hllenovltých látok v parafinových rezoch uvedenou metodou má možnost použltia v bloptlckej a nekroptlckej praxi a pri h1atolog!ckej výuibe itudentov medicíny.

Description

CS 268 592 B1

Vynátez řítil farebné znázorněni· bílenu v parafinových rezoch.

Na dokaž hllenu a hllenovltých látok aa v patologii dopoalat používali Jednak me-tody empirické ako napr. farbenle aucikarm1noa a mukheaate1noa. Tleto metody ae vlakprt avoju neipeclfIckoat poatupne nahradili naaledovnýal hlstochemlckýml metodami. Po-lysacharldy aa dokazujů metodou PAS /Perlodlc Ac1d Schlff/, pr1 ktorej oxldéclou poly-aacharldov vznlkajú dlaldehydy, ktoré reagujú ao Schlffovou regenclou za vzniku červe-noflalového afarbenla. Kalého metoda využívá achopnoat kyslých skupin glykoprotelnovelektrostaticky vlazat kololdný roztok trojmocného železa. Takto vlažené železo reagujedále] a roztokom ferrokyanldu draselného za vzniku nerozpuatnej berlínské] modrej. K dalilm metodám patři farbenle alclénovou modrou, ktoré je béalckým farblvom ftalocya-mlnového typu a komplexně vlaženým atómom médi a t1ež metoda metachromat1cke] reakclea toluldlnovou modrou. Okrem týchto na]známe]i 1ch metod exlstujú eité dalile ale víčil-nou sú to modlflkéde týchto už spomlnaných hlstochem1ckých metodik.

Podatatou vynálezu je znázornenle hllenu v parafinových rezoch na.bázi postupnéhoodparafInovanla řezu obaahujúeeho hHen v organických rozpúiladlách klesajúee] končen- Λ tréde s následným znázorněním h1stolog1ckým1 farblvaml tým sposobom, že odparaf1nova-ný rez aa ponechá v destllovanej vodě po dobu 3 až 5 min a za tým preparát zbavíme vodytým sposobom, že ho necháme votne vyaullt na vzduchu po dobu 24 hodin prl laboratorně]teplote. Vytužený rez aa potom farbl v troch za sebou natledujúclch fázach. V prve]fázi aa farbl farbladm roztokom obaahujúdm kyslé farblvá trlfenylmetha novej skupinya to 1z5 až 2,5 g Past Green FCF, 50 g destllovanej vody, 50 g 96 Z alkoholu a 3,5 až 4,5 g kyseliny fosfowolfrámové] po dobu 5 až 15 min. Po ofarbenl ta rez opláchne vo vo-dovodnej vodě a v druhé] fáze aa farbl roztokom skladajůdm aa z 3 až 5 g kyseliny fos-fowolf rámové] a z 0,5 až 1 g oranže G rozpuštěné] v 100 g destllovanej vody, ktorýmaa hllen zráža 2 až 3 a a po opláchnuti řezu vo vodovodně] vodě sa v třete] fáze farblfarbladm roztokom skladajůdm sa z 0,25 až 0,5 g xanthenových farblv rozpuštěnýchv 100 g destllovanej vody po dobu 1 až 2 a a za tým sa rez opláchne vo vodovodnej vo-dě, nechá votne uschnút na vzduchu a namočí sa do xylénu, kde sa ponechá po dobu 5až 10 min. Za tým aa rez převrstvi médlom, například kanadským balzamom rozpustnýmv xyléne. Výhoda vynálezu spočívá v značné] časové] úspoře voč1 predchádza]ůc1· sposobomfarbenla, rýchla a nenáročná příprava farbladch roztokov, dlhodobá trvanlivost ofarbe-ných preparátov, dobrý farebný kontrast a táto metoda prispleva k dalilemu objasňovanluvlastnosti hllenu a hllanovltých látok. Přiklad prevedenla

Ako materiál obsahujúd hllen sa použije exdzla z humánně] sllnnej iíazy glandu-la aubmand1 bulár1s, ktorá aa fixuje 4 X formaIdehydom. Z parafinového řezu aa odatránlparafin pomocou organických rozpúitadlel kleaajúeej koncentrácle a ponechá aa v destilova-né] vodě po dobu 2 až 3 min. Za tým zbavíme preparát vody tým apoaobom, že ho nechámevotne vyaullt na vzduchu po dobu 24 hodin pr1 laboratorně] teplote. Vysuiený rez aa po-tom farbl v troch za sebou nasledujůdch fázach. V prve] fázi sa ponoří do sklenene]kyvety obaahujúce] farblacl roztok skladajúd sa z 1,5 až 2,5 g Fast Green FCF, 50 gdestllovanej vody, 50 g 96 X alkoholu a z 3,5 až 4,5 g kyseliny fosfowolfrámové] po do-bu 5 až 15 min. Po ofarbenl sa rez opláchne vo vodovodně] vodě a ponoří do SaCiej ky-vety obaahujúce] farblacl roztok pozoatávajúd z 3 až 5 g kyseliny fosfowolfrámoveja z 0,5 až 1 g oranže G rozpuštěna] v 100 g destllovanej vody po dobu 2 až 3 sec.

Po uvedenej době ta vykoná dokladný, ale nle dlhý oplach vo vodovodně] vodě a rez aaponoří do datle] kyvety obsahujúcej farblacl roztok, ktorý pozoatáva z 0,5 g Pyronlnu Grozpuštěného v 100 g destllovanej vodě, kde aa farbl po dobu 1 až 2 sec. Znova aa vy-koná krátký oplach vo vodovodnej vodě a nechá aa rez votne usulit na vzduchu. Po Jeho

Claims (1)

1. 2 CS 268 592 B1 zaschnuti sa ponoří do kyvety obsahujúcej xylén, ponechá sa po dobu 5 až 10 aln v neja člalej »a zakrývá do aédll rozpustných v xyléne. Výsledok farbenla Je nasledovný:hllenové nuclnózne tubuly stinných žllaz sů výraznej ružovof1 aloveJ farby na zelenonpozadí. Dobré výsledky sů aj pri ofarbenl trévlacej a dýchacej sůstavy. Sposob znázornenla hllenu a hllenovltých látok v parafinových rezoch uvedenou «-tódou aá aožnost použltla v bloptlckej a nekroptlckej praxi na oddelenlach patologiea prl h1stolog1ckej výuíbe Studentov Medicíny. PREDHET VYNÁLEZU Sposob znézornenla hllenu v parafinových rezoch na bázi postupného odparafInovanlařezu obsahujúceho hllen v organických rozpúštadlách klesajúcej koneentrécle a následnýnznézornenla například hlstologlckýal farblvaal, vyznaíujúcl sa týa, že odparaf1novanýrez sa ponechá v destllovanej vodě po dobu 3 až 5 u1n, za týn sa preparát zbaví vodytýn, že sa nechá vo(ne vysušit na vzduchu po dobu 24 h prl laboratorně] teplote a za týnsa farbl v troch za sebou nasledujůdch fázach, prlioa v prvej fázi sa farbl kyslýnltr1fenylaetanovýal farblvaal a to 1,5 až 2,5 g Fast Green FCF, 50 g destllovanej vody, 50 g 96 X alkoholu a 3,5 až 4,5 g kyseliny fosfovolfráaovej po dobu 5 až 15 aln, za týapo opláchnuti vodou farbl sa v druhej fázi roztokoa skladajúdn sa z 3 až 5 g kyselinyfosfowolfrámovej a z 0,5 až 1 g oranže G rozpustenej v 100 g destllovaje vody, ktorýasa hllen zráža po dobu 2 až 3 s a po opláchnuti řezu vo vodě sa v tretej fáze farblfarblacla roztokoa skladajúdn sa z 0,25 až 0,5 g xanthenových farblv rozpuštěných v 100 gdestllovanej vody, po 1 až 2 s farbenla sa rez opláchne vodou, nechá vo(ne uschnutna vzduchu, ponoří sa do xylénu na 5 až 10 min. za týa sa převrstvi aédloa napříkladkanadský» balzaaoa rozpustným v xyléne. f