CS263122B1

CS263122B1 - Mouse lymphocyte hybridoma producing antibody to human alpha-1'etoprotein

Info

Publication number: CS263122B1
Application number: CS877925A
Authority: CS
Inventors: Ivan Rndr Csc Hilgert; Hana Rndr Kristofova; Vaclav Rndr Csc Horejsi; Irena Rndr Stefanova; Pavla Rndr Csc Angelisova
Original assignee: Hilgert Ivan; Kristofova Hana; Horejsi Vaclav; Stefanova Irena; Angelisova Pavla
Priority date: 1987-11-05
Filing date: 1987-11-05
Publication date: 1989-04-14
Also published as: CS792587A1

Abstract

idomů, produkujícího protilátku proti lidokému alfa-fetoproteinu, uloženého ve sbírce hybridomů Uatavu molekulární genetiky ČSAV pod označením IMG CZAS AFP-ll. Samotná .monoklonální protilátka hybridomů AFP-ll je vhodná pro použití v radioimunologické analýze ke stanovení ulfa-fctoprotuinu a v sendvičovém enzymoimunologickém testu v kombinaci c jinými monoklonálními protilátkami přepravenými v Ústavu molekulární genetiky ČSAV (AFP-01 nebo AFi’-O.>) ke stanovení koncentrace lidského alfa-fetonroteinu.idomes, producing an antibody against human alpha-fetoprotein, stored in the hybridoma collection of the Institute of Molecular Genetics of the Czechoslovak Academy of Sciences under the designation IMG CZAS AFP-ll. The AFP-ll hybridoma monoclonal antibody itself is suitable for use in radioimmunoassay for the determination of alpha-fetoprotein and in a sandwich enzyme immunoassay in combination with other monoclonal antibodies transported to the Institute of Molecular Genetics of the Czechoslovak Academy of Sciences (AFP-01 or AFi'-O.>) for the determination of the concentration of human alpha-fetoprotein.

Description

Vynález se týká nového hybridomu, tj. hybridního jednobuněčného organismu, sestrojeného fúzí buňky myší myelomové linie Sp2/O-Ag14 a myší slezinné lymfoidní buňky, produkující protilátku proti lidskému alfa-fetoprotéinu.The invention relates to a novel hybridoma, i.e. a hybrid unicellular organism, constructed by fusing a mouse myeloma cell line Sp2 / O-Ag14 and a mouse spleen lymphoid cell producing an antibody against human alpha-fetoprotein.

Protilátky proti alfa-fetoproteinu se mohou vyrábět tak, že alfa-fetoprotein je opakovaně injikovánjako antigen pokusným zvířatům, nejčastěji králíkům. Sérum takto imunizovaných zvířat, odebírané po určité době působení antigenu, slouží jako zdroj protilátek, užívaných zejména pro kvantitativní stanovení plasmatického alfa-fetoproteinu metodou radioimunologické nebo enzymoimunoanalytické analýzy. Tento postup, nazývaný konvenční imunizací, má několik nevýhod. V séru imunizovaných zvířat se nachází heterogenní směs protilátek, jejichž spektrum je v každém jednotlivém organismu různé a neopakovatelné. Organismus zpravidla vytvoří kromě protilátek vůči žádanému antigenu i protilátky proti nečistotám antigenního preparátu. Výrobní šarže konvenčních sér se proto dají těžko standardizovat a vycházejí z výroby v širokém rozmezí kvality.Anti-alpha-fetoprotein antibodies can be produced by alpha-fetoprotein being injected repeatedly as an antigen to test animals, most commonly rabbits. The serum of the immunized animals collected after a period of antigen treatment serves as a source of antibodies, used in particular for the quantitative determination of plasma alpha-fetoprotein by radioimmunoassay or enzyme-immunoassay analysis. This procedure, called conventional immunization, has several disadvantages. In the serum of immunized animals there is a heterogeneous mixture of antibodies whose spectrum varies and does not repeat in each individual organism. Generally, in addition to antibodies to the desired antigen, the organism will produce antibodies against the impurities of the antigen preparation. Consequently, batches of conventional sera are difficult to standardize and are based on production in a wide quality range.

Nevýhodu konvenčních sér proti alfa-fetoproteinu v principu odstraňuje použití hybridomové technologie. Produkt hybridomu - monoklonální protilátka - je namířena proti jediné antigenní determinantě. Je-li konstruován dostatečně velký soubor hybridom^ je pravděpodobné, že se z něho podaří vyhledat hybridom syntetizující protilátku, která je namířená proti určité antigentfí determinantě molekuly lidského alfa-fetoproteinu. Znamená to, že mohou být konstruovány klony molekulárních protilátek proti různým antigenním determinantám řetězce molekuly alfa-fetoproteinu. Výhodnost získání monoklonálních protilátek proti několika antigenním determinantám je hlavně v možnosti využití kombinací protilátek namířených proti různým deter263 122In principle, the use of hybridoma technology eliminates the disadvantage of conventional sera against alpha-fetoprotein. The hybridoma product - a monoclonal antibody - is directed against a single antigenic determinant. If a sufficiently large set of hybridomas is constructed, it is likely that a hybridoma synthesizing an antibody that is directed against a certain anti-intelligent determinant of the human alpha-fetoprotein molecule is likely to be found. This means that molecular antibody clones can be constructed against various antigenic determinants of the alpha-fetoprotein molecule chain. The advantage of obtaining monoclonal antibodies against several antigenic determinants is mainly in the possibility of using combinations of antibodies directed against different deter263 122

-Z minantám ke zvýšení citlivosti analytických testů pro stanovení alfa-fetoproteinu v tělních tekutinách. Tento přístup, tj. příprava hybridomů produkujících monoklonální protilátky specificky rozeznávající alfa-fetoprotein, byl použit několika autory (např· Tsung, Y.-K., Milunsky, A·, Alpert, E.: Derivation and characterization of a monoclonal hybridoma antipody specific for human alfa-fetoprotein,Minantam to increase the sensitivity of the analytical tests to determine alpha-fetoprotein in body fluids. This approach, ie the preparation of hybridomas producing monoclonal antibodies specifically recognizing alpha-fetoprotein, has been used by several authors (eg, Tsung, Y.-K., Milunsky, A., Alpert, E .: Derivation and characterization of a monoclonal hybridoma antipody specific for human alpha-fetoprotein

J. Immunol. Meth. 39:363oř368, 1980; Stenman, U.H., Sutinen, M.L., Selander, R.K., Tontti, K., Schroder, J.: Characterization of a monoclonal antibody to human alpha-fetoprotein and its use in affinity chromátography, J. Immunol. Meth. 46:337«345, 1981; Uotila, M., Ruoslahti, E., Engkvall, E.: Two-site eandwich enzyme immunoassay with monoclonal antibodies to human alpha-fetoprotein, J. Immunol. Meth. 42:J. Immunol. Meth. 39: 363-368, 1980; Stenman, U.H., Sutinen, M.L., Selander, R.K., Tontti, K., Schroder, J .: Characterization of Monoclonal Antibody to Human Alpha-Fetoprotein and Its Use in Affinity Chromatography, J. Immunol. Meth. 46: 337-345, 1981; Uotila, M., Ruoslahti, E., Engkvall, E., Two-site eandwich enzyme immunoassay with monoclonal antibodies to human alpha-fetoprotein, J. Immunol. Meth. 42:

11«15, 1981;. Hunter, W.M., Bennie, J.G., Brock, D.J.H.,11, 15, 1981; Hunter, W.M., Bennie, J.G., Brock, D.J.H.,

Van Heyningen, V.: Monoclonal antibodies for use in an immunoradiometric assay for oc-foetoprotein, J. Immunol. Meth. 50:133oř144, 1982; Van Heyningen, V., Barron, L., Brock, D.J.H., Crichton, D., Lawrie, S.: Monoclonal antibodies to human Ot-foetoprotein: analysis of the behaviour of three different antibodies, J. Immunol. Meth. 50: 123«ř131, 1982). Bylo též popsáno použití sendvičového enzymoimunologického testu s využitím dvou monoklonálních protilátek ke stanovení koncentrací alfa-fětoproteinu v biologických vzorcích (Uotila a spol., viz výše uvedená citace). Tato metoda má výhodu v tom, že při ní není potřeba používat vysoce čištěného radioaktivně značeného antigenu, že je rychlá a jednoduchá. Monoklonální protilátky použité pro sestavení sendvičového enzymoimunologického testu autory Uotila a spol, byly získány ze supernatantů tkáňových kultur hybridomů, v nichž jsou koncentra ce monoklonálních protilátek velmi nízké. Uvedenými autory byly pozorovány nepříznivé nespecifické efekty neředěného lidského séra, které byly odstraněny, teprve ředěním vzorků 1:10.Van Heyningen, V .: Monoclonal Antibodies for Use in the Immunoradiometric Assay for α-Foetoprotein, J. Immunol. Meth. 50: 133-144, 1982; Van Heyningen, V., Barron, L., Brock, D.J.H., Crichton, D., Lawrie, S., Monoclonal Antibodies to Human O-Foetoprotein: Analysis of the Behavior of Three Different Antibodies, J. Immunol. Meth. 50: 123 (131, 1982). The use of a sandwich enzyme immunoassay using two monoclonal antibodies to determine alpha-fetoprotein concentrations in biological samples has also been described (Uotila et al., Supra). This method has the advantage that it does not need to use highly purified radiolabeled antigen, that it is fast and simple. The monoclonal antibodies used to construct the sandwich enzyme immunoassay by Uotila et al. Were obtained from tissue culture supernatants of hybridomas in which the monoclonal antibody concentrations are very low. These non-specific effects of undiluted human serum were observed by these authors only after 1:10 dilution of samples.

Tyto nevýhody odstraňuje použití monoklonální protilátky produkované hybridomem uloženým ve Sbírce hybridomů Ústavu molekulární genetiky ČSAV v Praze 4, Vídeňská č. 1083 podThese disadvantages are eliminated by the use of a monoclonal antibody produced by a hybridoma deposited in the Collection of Hybridomas of the Institute of Molecular Genetics of the Czechoslovak Academy of Sciences in Prague 4, Vídeňská No. 1083 under

263 12?263 12?

označením IMG CZAS AFP-11. Tento hybridom dobře roste jak ve tkáňové kultuře in vitro, tak in vivo v peritoneální dutině myší kmene BALIV c, takže je možno v ascitické tekutině produkovat za ekonomicky výhodných podmínek velké množství monoklonální protilátky· Monoklonální protilátku AFP-11 je možno použít v kombinaci s jinými monoklonálními protilátkami (AFP-O1 nebo AFP-O3) připravenými v Ústavu molekulární genetiky ČSAV k sestavení sendvičového enzymoimunologického testu· V tomto uspořádání se neprojevují nepříznivé vlivy způsobené neředěnými vzorky lidského séra.designation IMG CZAS AFP-11. This hybridoma grows well in both in vitro and in vivo tissue culture in the peritoneal cavity of BALIV c mice, so large amounts of monoclonal antibody can be produced in ascitic fluid under economically advantageous conditions. · AFP-11 monoclonal antibody can be used in combination with other monoclonal antibodies (AFP-O1 or AFP-O3) prepared by the Institute of Molecular Genetics of the Czechoslovak Academy of Sciences for the compilation of a sandwich enzyme immunoassay. This arrangement does not show adverse effects caused by undiluted human serum samples.

Uvedený hybridom byl získán způsobem známým z odborné literatury (Fazekas de St. Groth, S., Scheidigger, D.: Production of monoclonal antibodies: Stratégy and tactics, J. Immunol. Meth. 35:1dř21, 1980; Galfré, G., Howe, S.C., Milstein, C., Butcher, G.W., Howard, J.C.: Antibodies to major h.istocompatibility antigens produced by hybrid cell lineš, Nátuře 266:550, 1977) klonováním souboru hybridních buněk, vzniklých fúzí buněk myší myelomové linie Sp2/0-Ag14 a buněk, získaných ze sleziny myší kmene BALB/c, imunizovaných lidským alfa-fetoproteinem.The hybridoma was obtained by a method known in the literature (Fazekas de St. Groth, S., Scheidigger, D .: Production of monoclonal antibodies: Strategies and tactics, J. Immunol. Meth. 35: 1d21, 1980; Galfré, G., Howe, Milstein, C., Butcher, GW, Howard, JC: Antibodies to Major H. Antocompatibility Antigens Produced by Hybrid Cell Lines (Nature 266: 550, 1977) by cloning a set of hybrid cells resulting from fusion of mouse myeloma cell lines Sp2 / O-Ag14 and cells obtained from the spleen of BALB / c mice immunized with human alpha-fetoprotein.

Výhodou hybridomu je, že produkuje homogenní protilátku, tzv. protilátku monoklonální, která je schopna specificky reagovat s lidským alfa-fetoproteinem. Hybridom AFP-11 je možné kultivovat in vitro v médiích vhodných pro živočišné buňky a je adaptován pro růst in vivo v peritoneální dutině myší kmene BALB/c. Z konzerv, uchovávaných v kapalném dusíku, je možné zahájit produkci protilátky bez dalšího antigenu. Protilátka, produkovaná hybridomem AFP-11 , reaguje s lidským alfa-fetoproteinem a není třeba se zbavovat protilátek balast nich.The advantage of the hybridoma is that it produces a homogeneous antibody, the so-called monoclonal antibody, which is capable of specifically reacting with human alpha-fetoprotein. The AFP-11 hybridoma can be cultured in vitro in animal cell media and is adapted for growth in vivo in the peritoneal cavity of BALB / c mouse mice. From cans stored in liquid nitrogen, antibody production can be started without additional antigen. The antibody produced by the AFP-11 hybridoma reacts with human alpha-fetoprotein and does not need to be deprived of ballast antibodies.

Příklad 1Example 1

Za účelem pomnožení hybridoraových buněk in vivo bylo aplikováno 5 x 10^ buněk do peritoneální dutiny myší. Aby došlo k lepšímu uchycení aplikovaných buněk, byla myš 14 dníTo expand the hybridora cells in vivo, 5 x 10 6 cells were injected into the peritoneal cavity of mice. The mouse was 14 days for better attachment of the applied cells

-Λ 263 122 před přenosem buněk hybridomu ovlivněna parafinovým olejem (0.5 ml intraperitoneálně). Po 10 dnech růstu hybridomu v peritoneólnl dutině byla myě zabita a neprodukovaná ascitická tekutina odebrána. Celkem bylo získáno 2 ml ascitické tekutiny, která obsahovala 3,5 mg/ml imunoglobulinu. Protilátka AFP-11 reagovala se specifickým antigenem (lidským alfa-fetoproteinem) v enzymoiraunologickém testu (při použití prasečí antimyěí protilátky značené křenovou peroxidázou) až do ředění 1:10^ a v radioimunologickém precipitačním testu (při použití králičího antiséra proti myšímu imunoglobulinu a polyethylenglykolu k precipitaci komplexů antigen-moc noklonální protilátka) až do ředění 1:1(r. Monoklonální protilátku AFP-11 bylo možno použít ke stanovení alfa-fetoproteinu pomocí precipitačního radioimunologického testu v oboru koncentrací 5-200 ng^ml, při použiti ascitické tekutiny ředěné 1:10⁵.-Λ 263 122 before transfer of hybridoma cells affected by paraffin oil (0.5 ml intraperitoneally). After 10 days of hybridoma growth in the peritoneal cavity, mice were killed and unproduced ascites fluid collected. A total of 2 ml of ascites fluid containing 3.5 mg / ml immunoglobulin was obtained. AFP-11 antibody reacted with a specific antigen (human alpha-fetoprotein) in an enzyme-linked immunoassay (using a horseradish peroxidase-labeled anti-mouse antibody) up to a 1:10 dilution and in a radioimmunoassay (using a rabbit antiserum against mouse immunoglobulin and polyethylene glycol). precipitation of antigen-power noclonal antibody complexes up to a 1: 1 dilution (r.) The monoclonal antibody AFP-11 could be used to determine alpha-fetoprotein using a precipitation radioimmunoassay in a concentration range of 5-200 ng ^ ml, using ascitic fluid diluted 1 : 10 ⁵ .

Příklad 2Example 2

Monoklonální protilátku AFP-11 bylo možno použít pro stanovení koncentrace alfa-fetoproteinu v sendvičovém enzymoimunologickém testu v kombinaci s jinými monoklonálními protilátkami proti alfa-fetoproteinu (AFP-01 nebo AFP-03), a to s použitím imobilizované protilátka AFP-11 a protilátky AFP-01 nebo AFP-03 konjugované s peroxidázou, nebo s použitím iaobilizované protilátky AFP-01 a protilátky AFP-11 konjugované s peroxidázou.The monoclonal antibody AFP-11 could be used to determine the concentration of alpha-fetoprotein in a sandwich enzyme immunoassay in combination with other alpha-fetoprotein monoclonal antibodies (AFP-01 or AFP-03) using immobilized AFP-11 and AFP -01 or AFP-03 conjugated to peroxidase, or using an immobilized AFP-01 antibody and an peroxidase-conjugated AFP-11 antibody.

Příslušná monoklonální protilátka (AFP-11 nebo AFP-01) byla částečně čištěna z ascitické tekutiny srážením nasyceným roztokem síranu amonného do 50% nasycení, neředěna fyziologickým roztokem na koncentraci 50dt200/Ug/ml a imobilizována adsorpcí na povrch jamek polystyrénových kultivačních destiček s plochým dnem (1 h při 37°C). Po promytí jamek fyziologickým roztokem byla zbývající adsorpčně. aktivní místa na polystyrénovém povrchu jamek blokována inkubací s roztokem želatiny ve fyziologickém roztoku (2 h, 37°C). Vzorky standardu lidského séra (0,1 ml) obsahující známé koncentrace alfa-fetoproteinuThe respective monoclonal antibody (AFP-11 or AFP-01) was partially purified from the ascites fluid by precipitation with saturated ammonium sulfate solution to 50% saturation, undiluted with saline to a concentration of 50dt200 / Ug / ml, and immobilized by adsorption to the wells of flat-bottomed polystyrene culture plates. (1 h at 37 ° C). After washing the wells with saline, it was remaining adsorption. active sites on the polystyrene surface of the wells are blocked by incubation with a gelatin solution in saline (2 h, 37 ° C). Human serum standard samples (0.1 ml) containing known concentrations of alpha-fetoprotein

- !$ 263 12?- $ 263 12?

(Oa2OO ng/ml) byly inkubovány v takto připravených jamkách 16 h při 4°C a po promytí fyziologickým roztokem bylo přidáno 0,1 ml roztoku konjugátu příslušné monoklonální protilátky (AFP-01, AFP-03 nebo AFP-11) s peroxidázou (fmeíodou^ popsanou v odborné literatuře (Tijssen, P., Kurs tak, E.:(0 and 200 ng / ml) were incubated in the wells thus prepared for 16 h at 4 ° C, and after washing with saline, 0.1 ml of the peroxidase (AFP-01, AFP-03 or AFP-11) conjugate solution of the respective monoclonal antibody ( as described in the literature (Tijssen, P., Kurs tak, E .:

Highly efficient and simple met hod s for the preparation of peroxidase and active peroxidase-antibody conjugates for enzyme immunoassays, Anal. Biochem. 136:451«457, 1984), naředěn na koncentraci 10«100/Ug/ml v 50% hovězím séru ve fyziologickém roztoku). Po 2 h inkubaci při 4°C byly jamky promyty fyziologickým roztokem, bylo přidáno 0,1 ml substrátového roztoku (0.1% roztok o-diaminobenzen dichloridu v 0,1 U fosfátovém pufru pH 6,0 obsahujícím 0,02% peroxid vodíku) a po 10«20 minutách byla chromogenní enzymatická reakce zastavena přidáním 0,1 ml 2 M roztoku kyseliny sírové a byla změřena intenzita vzniklého zabarvení spektrofotometrií při 492 nm (OD^^). Jako negativní srovnávací vzorek, k němuž byly získané hodnoty vztahovány, byl použit standard lidského séra neobsahující žádný alfa-fetoprotein detekovatelný komerční rádioimunologickou soupravou. Typické hodnoty OD^^ byly 0,05«r0,2 pro vzorky obsahující 10 ng/ml alfa-fetoproteinu a O,7zž1,2 pro vzorky obsahující 100 n^ml, v závislosti na použité imobilizované monoklonální protilátce, na použitém konjugátu monoklonální protilátky s peroxidázou a na jeho ředění. Tyto hodnoty ukazují, že s využitím uvedených monoklonálních protilátek lze sestavit sendvičový enzymoimunologický test, použitelný pro stanovení koncentrací alfa-fetoproteinu v diagnosticky žádoucím oboru koncentrací (alespoň>10 ng/ml).Highly efficient and simple meth for the preparation of peroxidase and active peroxidase-antibody conjugates for enzyme immunoassays, Anal. Biochem. 136: 451 (457, 1984), diluted to a concentration of 10-100 (µg / ml in 50% bovine serum in saline). After 2 h incubation at 4 ° C, the wells were washed with saline, 0.1 ml substrate solution (0.1% o-diaminobenzene dichloride solution in 0.1 U phosphate buffer pH 6.0 containing 0.02% hydrogen peroxide) was added, and after 10-20 minutes, the chromogenic enzymatic reaction was stopped by the addition of 0.1 ml of a 2 M sulfuric acid solution and the intensity of the resulting color was measured by spectrophotometry at 492 nm (OD ^). A human serum standard containing no alpha-fetoprotein detectable by a commercial radioimmunoassay was used as a negative control to which the values were related. Typical OD 50 values were 0.05 ± 0.2 for samples containing 10 ng / ml alpha-fetoprotein, and 0.7 to 1.2 for samples containing 100 µl ml, depending on the immobilized monoclonal antibody used, on the monoclonal antibody conjugate used. with peroxidase and for its dilution. These values indicate that a sandwich enzyme immunoassay useful for determining alpha-fetoprotein concentrations in a diagnostically desirable concentration range (at least> 10 ng / ml) can be constructed using said monoclonal antibodies.

Buňky hybridomů AFP-11 mají ultrastrukturní obraz typických myelomových buněk. In vitro rostou jako polosuspenzní kultury. Základním kultivačním médiem je Eaglovo minimální esenciální médium s Hanksovou'solnou směsí doplněné o neesenciální aminokyseliny, L-glutamin (3 mM), pyruvát sodný (1 iaM). Toto médium (označené jako RFMI, Ústav molekulární genetiky ČSAV) je pro kultivaci hybridomů AFP-11 doplněno penicilinem, streptomycinem, gentamycinem, 2-merkaptoetanolem (0,05 mM), pufremAFP-11 hybridoma cells have an ultrastructural pattern of typical myeloma cells. They grow in vitro as semi-suspension cultures. The basic culture medium is Eagle's minimum essential medium with Hanks' salt mixture supplemented with non-essential amino acids, L-glutamine (3 mM), sodium pyruvate (1 µM). This medium (designated as RFMI, Institute of Molecular Genetics of the Czechoslovak Academy of Sciences) is supplemented with penicillin, streptomycin, gentamycin, 2-mercaptoethanol (0.05 mM), buffer for the cultivation of AFP-11 hybridomas.

-6 263 122-6 263 122

HBPES (kyselina N- (2-hydroxyethyl) piperazin-N *-2-ethansulfonová) (10 mM) a inkativovaným bovinním sérem (Bioveta, Ivanovice na Hané, 10%)· Hybridom je kultivován při 37°C. Střední generační čas je 20,2 hod· Produkovaná protilátka je monoklonální imunoglobulin podtřídy IgGl s lehkými řetězci typu K , její isoelektrický bod je v rozmezí pH 5,7*6,O.HBPES (N- (2-hydroxyethyl) piperazine-N * -2-ethanesulfonic acid) (10 mM) and inactivated bovine serum (Bioveta, Ivanovice na Hané, 10%) · The hybridoma is cultured at 37 ° C. The mean generation time is 20.2 hrs. · The antibody produced is a monoclonal immunoglobulin of the IgG1 subclass of light chain type K, its isoelectric point is in the range of pH 5.7 * 6.0.

Monoklonální protilátka, produkovaná hybrid omem AFP-11 ’··» * reaguje specificky s lidským alfa-fetoproteinem.The monoclonal antibody produced by AFP-11 hybridoma reacts specifically with human alpha-fetoprotein.

Hybridom AFP-11 může být průmyslově využíván jako zdroj monoklonální protilátky proti lidskému alfa-fetoproteinu v metodách analytických nebo preparativních.The AFP-11 hybridoma can be used industrially as a source of monoclonal antibody against human alpha-fetoprotein in analytical or preparative methods.

Monoklonální protilátka hybridomu AFP-11 může být využita pro analytické stanovení alfa-fetoproteinu při klinické diagnostice ve zdravotnických zařízeních, zvláště pro diagnézu nádorových onemocnění (hepatomy, teratomy atd.) nebo kongenitální malformace (rozštěp páteře - spina bifida plodu).The monoclonal antibody of the AFP-11 hybridoma can be used for the analytical determination of alpha-fetoprotein in clinical diagnostics in healthcare facilities, especially for diagnosis of cancer (hepatoma, teratoma, etc.) or congenital malformations (cleft spine - fetal spina bifida).

Claims

SUBJECT OF THE INVENTION

Mouse lymphocyte hybridoma IMG CZAS AFP-11, characterized in that it produces a monoclonal antibody of IgG1 subclass I against human alpha-fetoprotein.