CS253083B1

CS253083B1 - Způsob přípravy hemisukcinátů kardiotonických glykosidů

Info

Publication number: CS253083B1
Application number: CS851732A
Authority: CS
Inventors: Vladimir Pouzar; Pavel Drasar; Ivan Cerny; Miroslav Havel
Original assignee: Vladimir Pouzar; Pavel Drasar; Ivan Cerny; Miroslav Havel
Priority date: 1985-03-12
Filing date: 1985-03-12
Publication date: 1987-10-15
Also published as: CS173285A1

Abstract

ešení se týká způsobu přípravy hemisukcinátů kardiotonických glykosidů. Hemisukcináty kardioO kde R je H nebo CH se připraví tak, že v prvé fázi reaguje kardiotonický glykosid v aprotickém organickém rozpouštědle s dicyklohexylkarbodiimidem a 4-[2-trimethylsilyl ethoxyl-4-oxo-butanovou kyselinou za přítomnosti 4-oxo-butanovou kyselinou za přítomnosti 4-dimethylaminopyridinu nebo pyridinu, vzniklý produkt se přečistí a odpaří. V druhé fázi se odparek rozpustí v organickém rozpouštědle etherického charakteru, ke směsi se přidá sůl kyseliny fluorovodíkové ze skupiny tetraalkylamoniumfluoridů, kde alkyl je Cy až Cg, nakonec se vše zředí dichlormethanem nebo chloroformem, promyje, zfiltruje a odpaří. Látky tohoto typu slouží k přípravě konjugátů kardiotonických glykosidů používaných běžně k pří pravě analytických a diagnostických RIA souprav.

Description

Vynález se týká způsobu přípravy hemisukcinátů kardiotonických glykosidů. Hemisukcináty kardiotonických glykosidů slouží k přípravě konjugátů kardiotonických glykosidů používaných běžně k přípravě komponent analytických a diagnostických RIA souprav (radioimuno assay) (viz například Polyevaya O.Yu., a kol., Chim. Farm. Ž. 17 (5) 533 (1983) nebo Calbiochem-Hoechst 1983 Biochemical and Immunochemical Catalog., str. 15 a 114).

Hemisukcináty se používají v biochemii i farmacii a slouží rovněž mj. jako komponenty mediátorů cíleného transportu antimetabolitů ke tkáním s příslušnými receptory (Preobraženskaja a kol·., Bioorg. Chim. 5 (10) 1381 (1982),) či jako analoga přirozených léčiv, která mají ve srovnání s přírodními materiály vyšší hydrofilitu i mnohdy výhodnější terapeutický index (Yamada A.: Yakugaku Zasshi 79, 1441 (1959)).

Z uvedených důvodů jsou metody přípravy hemisukcinátů předmětem zvýšeného zájmu zejména v oblasti syntézy derivátů biologicky aktivních a přírodních látek, např. typu steroidních alkoholů (Drašar, Černý, Pouzar, Havel - Collection 306 vol. 49 (1984)), komponent nukleových kyselin a podobně (Wichman A. Biochem. J. 181, 691 (1979), Fukyama M. a kol. J. Biochem. 85, 1183 (1979)).

Dosud používaná příprava hemisukcinátů kardiotonických glykosidů spočívala v reakci kardioglykosidu jako například digoxinu nebo digitoximu v dichlormethanu, chloroformu, dimethylformamidu nebo benzenu s dicyklohexylkarbodiimidem a 2,2,2-trichlor-hydrogenbutandioátem za přítomnosti báze 4-dimethylaminopyridinu, následným přečištěním filtrací a odpařením. V druhé fázi se pak odparek vzniklého sukcinátu rozpustil v organickém rozpouštědle, s výhodou tetrahydrofuranu ve směsi s kyselinou octovou a vodou. Ke směsi se postupně přidával práškový zinek, až do zreagování všeho sukcinátu (čs. AO 237 749; Collection Cz. Com. (Vol. 50 (1985) str.

2760 Preparation of 3-carboxypropanoates of digitoxin and digoxin and their conjugates with L-tyrosine - Drašar, Pouzar ...).

Způsob podle vynálezu řeší nedostatky tohoto způsobu přípravy především nahrazením 2,2,2-trichlorethoxy-4-oxobutanové kyseliny 4- 2-trimethylsilylethoxy -4-oxo-butanovou kyselinou.

Tím se podstatně zjednodušilo zpracování reakční směsi, nedochází k dehydrataci hydroxylové skupiny v poloze 14, kdy vznikaly 14-dehydroderiváty. Odpadla tedy lyofilizace, která je' technicky náročná. Omezil se vznik vedlejších produktů na minimum, reakční směs není zkontaminovaná zinečnatými solemi a výsledný produkt není nutno čistit.

Předmětem vynálezu je způsob přípravy hemisukcinátů kardiotonických glykosidů obecného vzorce I

kde R je H nebo OH tak, že se v prvé fázi nechá reagovat kardiotonický glykosid digoxin nebo digitoxin vzorce II,

kde R je H nebo OH v dichlormethanu, chloroformu, tetrahydrofuranu nebo benzenu za teploty 0° C až +42 °C s dicyklohexylkarbodiimidem a 4-£2-trimethylsilylethoxyj[-4-oxobutanovou kyselinou za přítomnosti 4-dimethylaminopyridinu nebo pyridinu po dobu 30 min až 72 hodin, vzniklý produkt se přečistí a odpaří, načež se v druhé fázi odparek rozpustí v organickém rozpouštědle etherického charakteru, s výhodou tetrahydrofuranu, ke směsi se přidá sůl kyseliny fluorovodíkové ze skupiny tetraalkylamoniumfluoridů, kde alkyl je tvořen C_x až C_g, s výhodou tetrabutylamoniumfluorid. Směs se míchá za teploty 0 °C až +50 °C po dobu 1 až 8 hodin, pak se zředí dichlormethanem nebo chloroformem, promyje vodným roztokem neoxidující anorganické kyseliny, bud kyseliny sírové nebo kyseliny fosforečné, zfiltruje a odpaří.

Jako optimální se jeví reakce glykosidu s dicyklohexylkardodiimidem v 1 až 1,5 molárním přebytku a s 4-[2-trimethylsilyl-ethoxy^-4-oxo-butanovou kyselinou v 1 až 1,9 molárním přebytku za přítomnosti 4-dimethylaminopyridinu v množství 0,01 až 1 mol nebo pyridinu v 10 až 100 molárním přebytku a v druhé fázi s tetrabutylamoniumfluoridem v 2 až 5 molárním přebytku. Vzniklé produkty lze přečistit s výhodou na koloně sllikagelu.

Dále jsou uvedeny příklady způsobu přípravy podle vynálezu.

Příklad 1

Digitoxin (2295 mg, 3 mmol) byl suspendován v dichlormethanu (210 ml), ke směsi byla přidána 4-0-trimethylsilylethoxy3-4-oxo-butanová kyselina (930 mg, 4,26 mmol), dioyklohexylkarbodiimid (729 mg, 3,53 mmol) a 4-dimethylaminopyridin (39 mg, 0,32 mmol). Po 4 hodinách míchání při 20 °C byla směs zředěna petroletherem, zfiltrována a odpařena. Odparek byl ohromatografován na koloně silikagelu (220 g) v soustavě dichlormethan-methanol (99:1) . Bylo získáno 2800 g produktu, který byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (35 ml). Po přidání roztoku tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (7,7 ml, c = 1 mol.l ¹) byla směs míchána za laboratorní teploty 6 hodin, pak byla zředěna dichlormethanem (150 ml), promyta 10% vodnou kyselinou sírovou, vodou a vysušena bezvodým síranem sodným. Odparek byl chromatografován na koloně silikagelu (200 g) v soustavě dichlormethan-methanol (95:5) . Bylo získáno 1675 mg (65%) digitoxin 4''¹ -(3-karboxypropanoátu). T.t. = 194-198 °C (dichlormethan-petrolether).

IČ spektrum (chloroform) (cm S: 3611, 3527 (OH), 3300-2500 (COOH), 1745 (lakton + ester),

1630 (C=C). Pro C₄₅H_g8O₁₆ (865,0). Vypočteno: 62,48 % C, 7,92 % H, nalezeno: 62,73 % C,

8,15 % H.

Příklad 2

Příprava byla provedena stejně jako v příkladu 1 s tím. rozdílem, že digitoxin byl v prvé fázi reagován za teploty ledové lázně (0 °C), tetrabutylamoniumfluoriď byl nahrazen tetraethylamoniumfluoridem. Bylo tak získáno 1630 mg (63%) produktu. Při analýze bylo nalezeno 62,5 % C, 7,83 % H.

Příklad 3

Digoxin (3,28 g, 4,2 mmol) byl suspendován v dichlormethanu (150 ml), ke směsi byla při253083 dána 4-£2-trimethylsilyl-ethoxy2l-4-oxobutanová kyselina (1,3 g, 5,96 mmol) , dicyklohexylkarbodiimid (1,1 g, 5,33 mmol) a 4-dimethylaminopyridin (40 mg, 0,33 mmol. Po 7,5 hodinách míchání za laboratorní teploty byla směs zfiltrována a odpařena. Odparek byl chromatografován na koloně silikagelu (330 g) v soustavě dichlormethan-2-propanol (20:1). Bylo získáno 430 mg produktu, který byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (5,5 ml). Po přidání roztoku tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu (0,9 ml, c = 1 mol.l byla směs míchána za laboratorní teploty 7 hodin, pak byla zředěna chloroformem (110 ml), promyta 10% vodnou kyselinou sírovou, vodou a vysušena bezvodým síranem sodným. Odparek byl chromatografován na koloně silikagelu (40 g) v soustavě chloroform-methanol (95:5). Bylo získáno 224 mg (6%) digoxin 4¹''-(3-karboxypropanoátu) ve formě tuhé pěny. IČ spektrum (chloroform, cm ^): 3609, 3529 (OH), 3300-2500 (COOH), 1744 (lakton + ester), 1632 (C=C). Pro C₄₅Hg_gO₁₇ (881,0) vypočteno: 61,13 % C, 7,78 % H; nalezeno: 61,44 % C, 7,99 % H.

Příklad 4

Příprava digitoxin 4'''-(3-karboxypropanoátu) byla provedena jako v příkladu 1 s tím rozdílem, že v prvé fázi bylo k reakční směsi přidáno ekvimolární množství 4-dimethylaminopyridinu a tato fáze byla provedena v chloroformu, kyselina sírová byla nahrazena 10% kyselinou fosforečnou. Tímto způsobem bylo získáno 1610 mg (62%) produktu a při analýze zjištěno 62,33 % C, 7,70 % H.

Příklad 5

Příprava digitoxin 4¹¹'-(3-karboxypropanoátu) byla provedena jako v příkladu 1 s tím rozdílem, že v prvé fázi byla provedena v tetrahydrofuranu při +42 °C po dobu 30 min. Tímto způsobem bylo získáno 1650 mg (64%) produktu a při výsledné analýze zjištěno 62,27 % C,

8,05 % H.

Příklad 6

Příprava digitoxin 4'''-(3-karboxypropanoátu) byla provedena jako v příkladu 1 s tím rozdílem, že v druhé fázi byla provedena při teplotě +50°C po dobu 1 hodiny. Tímto způsobem bylo získáno 1650 mg (64%) produktu a při výsledné analýze zjištěno 62,33 % C, 8,07 % H.

Příklad 7

Příprava digoxin 4¹'¹ -(3-karboxypropanoátu) byla provedena jako v přikladu 3 s tím rozdílem, že v prvé fázi byl místo 4-dimethylaminopyridinu použit pyridin v 100 ml molárním přebytku po dobu 72 hodin. Tímto způsobem bylo získáno 215 mg (5,8 %) produktu a při výsledné analýze zjištěno 61,25 % C, 7,53 % H.

PŘEDMÉT VYNÁLEZU

Claims

PŘEDMÉT VYNÁLEZU

1. Způsob přípravy hemisukcinátů kardiotonických glykosidů obecného vzorce I,

O

H

OH

OH

OH

CHj-C-OH ² II (I) kde R je H nebo OH, vyznačený tím, že se v prvé fázi nechá reagovat kardiotonický glykosid obecného vzorce II, kde R má shora uvedený význam v dichlormethanu, chloroformu, tetrahydrofuranu nebo benzenu za teploty 0 aŽ +42 °C, s dicyklohexylkarbodiimidem a 4-{2-trimethylsilylethoxyJ-4-oxo-butanovou kyselinou za přítomnosti 4-dimethylaminopyridinu nebo pyridinu po dobu 30 minut až 72 hodin, vzniklý produkt se přečistí a odpaří, v druhé fázi se odparek rozpustí v organickém rozpouštědle etherického charakteru s výhodou tetrahydrofuranu, ke směsi se přidá sůl kyseliny fluorovodíkové ze skupiny tetraalkylamoniumfluoridů, kde alkyl je tvořen až Cg, směs se míchá za teploty 0 až +50 °C po dobu 1 až 8’ hodin, reakční směs se zředí dichlormethanem nebo chloroformem, promyje vodným roztokem neoxidující anorganické kyseliny, zfiltruje a odpaří.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že kardiotonický glykosid obecného vzorce II reaguje s dicyklohexylkarbodiimidem v 1 až 1,5 molárním přebytku a s 4-£2-trimethylsilyl-ethoxyj-4-oxo-butanovou kyselinou v 1 až 1,9 molárním přebytku za přítomnosti 4-dimethylaminopyridinu v množství 0,01 až 1 mol nebo pyridinu v 10 až 100 molárním přebytku a v druhé fázi s tetrabutylamoniumfluoridem v 2 až 5 molárním přebytku.
3. Způsob podle bodu 1 vyznačený tím, že jako neoxidující anorganická kyselina se užívá kyselina sírová nebo fosforečná.
4. Způsob podle bodu 1 vyznačený tím, že se vzniklé produkty přečistí na koloně silikagelu.