CS249591A3 - In the position 6 substituted hexahydrobenzo(cd)indole, process of its preparation and a pharmaceutical in which it is contained - Google Patents

Description

x‘.i ' / f> . r ' n

V poloze 6 substituovaný. hexahydrobenz/“cd_7indol, způsobjeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje ?’

Oblast techniky

Vynález se týká syntetické organické chemie a farmaceu-tické chemie a především J'iexahydrobenz/~cd_/indolů, kteréjsou užitečné při ošetřování stavů, kdy je třeba řídit v tě-le serotoninovou funkci· ·- v g;

Dosavadní stav techniky V několika posledních letech se zjistilo, že neurotrans-miter serotonin /5-hydroxytryptamin-5HT/ je spojen přímo nebonepřímo s četnými fysiologickými fenomény, jako je chuí, paměí,tepelná regulace, spánek, sexuální chování, úzkost, deprese,snížení krevního tlaku a halucinogenní chování /Glennon R.A., J. med. Cjiem., 3θ, 1, 1987/.

Zjistilo se, že existují různé typy 5-HT recprotů. Tytoreceptory jsou klasifikovány jako 5-HT-^, íxHTg a 5-HT^ recep-tory, přičemž se dělí ještě na podtřídy 5-HT η A, 5-HT^g, 5-ΗΤ^θa 5-ΗΤ-,η. Vazná afinita sloučeniny pro jeden nebo pro něko-lik 5-HT receptorů může vést k žádoucímu fysiologickému efek-tu nebo může minimalizovat nežádoucí jev. Proto je žádoucípřipravovat sloučeniny, které se mohou vázat na 5-HT receptorya působit jako serotoninové agonisty nebo antagonisty.

Plaugh v americkém patentovém spise číslo 4 576959 /udě-leno 1986/ a v evropské přihlášce vynálezu číslo 0153083/zveřejněno 1986/ popisuje třídu v poloze 6 substituovaných 4-dialkylamino-l,3»4,5-tetrahydrobenz/“cd__/indolů, kteréjsou popisovány jakožto centrální serotoninové agonisty.·Leander v americkém patentovém spise číslo 4 745126 /1988/popisuje způsob ošetřování úzkostných stavů u lidí použi-tím v poloze 4 substituovaného 1,3,4,5-tetrahydrobenz/~cd__7-indol-6-karboxamidu.

Nyní se zjistilo, že v poloze 6 substituované a zvláště 2 - některé v poloze 6 acylovou skupinou substituované 4-aminohe-xahydrobenz/“cd_7indoly /indoliny/ zvláště určité stereoiso-mery takových, indolinů jsou užitečné při ošetřování stavů,které vyžadují modifikaci serotoninové funkce v těle.

Určité indoliny byly již popsány, například v americkémpatentovém spise číslo 4 110539 /Bach·. a kol., 1978/, Plaug-hem a kol., J. Med. Chem. 31» str. 1746 až 1753 /1988/ av americkém patentovém spise číslo 4 576959 /Plaugh/a v ev-ropské přihlášce vynálezu číslo 153083 /Plaugh a kol·/ /zveřej-něno 1985/. Tyto indoliny se navrhovaly jakožto meziproduktypro přípravu odpovídajících indolů.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je v pčloze 6 substituovaný hexa-hydrobenz/”cd_/indol obecného vzorce I

/1/ kde znamená κ- atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uh-líku, alkenylovou skupinu s 3 až 4 atomy uhlíku,cyklopropylmethylovou skupinu, fenylovou sku-pinou substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 4atomy uhlíku, skupinu vzorce

atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uh-líku, alkenylovou skupinu s 3 až 4 atomy uhlíkunebo cyklopropylmethylovou skupinu, 2

'Z R atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uh- líku nebo aminovou skupinu blokující skupinu, η Ί až 4» B.4· atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlí- ku, halogenalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,alkozyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo fenylovouskupinu, c £ H? a R° na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinus 1 až 4 atomy uhlíku nebo cykloalkylovou skupinus 5 až 8 atomy uhlíku, R? alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, substituo- vanou alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, ary-lovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, a-rylalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alky-lovém podílu, substituovanou arylalkylovou skupinus 1 až 4/ atomy uhlíku v alkylovém podílu, cyklo-alkylovou skupinou s 3 až 7 atomy uhlíku substituo-vanou methylovou skupinu nebo cykloalkylovou sku-pinu s 3 až 7 atomy uhlíku za podmínky, že v pří-pádě, kdy A znamená C-C pak R' znamená alkylovou.skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, substituovanou al-kylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, arylovouskupinu, substituovanou arylovou skupinu, arylal-kylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovémpodílu, substituovanou arylalkylovou skupinu s 1až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu nebo cyklo-alkylovou skupinu s 3 až 7 atomy uhlíku, A skupinu vzorce

U - 0 GHOH nebo G C a jeho farmaceuticky vhodné soli. <

Zvláště se vynález týká sloučenin; obecného vzorce I,kde znamená a/ R1a R2 na sobě nezávisle atom vodíku nebo alkylovou sku-pinu s 1 až 4 atomy uhlíku, b/ R5 atom vodíku, c/ R? alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, substituo-vanou alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, feny-lovou skupinu nebo fenylakylovou skupinu s 1 až 4 a-tomy uhlíku v alkylovém podílu, d/n 2 až 4 a

é/ A skupinu vzorce C 3 O a jejich farmaceuticky vhodných solí.

Vynález se také týká farmaceutických prostředků, obsahu-jících jako účinnou látku sloučeninu obecného vzorce I, kdejednotlivé symboly mají shora uvedený význam, a farmaceu-tický excipient.

Vynález se také týká způsobu ovlivňování biologické 0-dezvy p-HT receptoru podáním účinného množství sloučeniny 0-becného vzorce I. Vynález se také týká způsobu ošetřováníchorobných stavů, které vyžadují řízení funkce serotoninuv těle.

Zde používaným výrazem ‘'alkyl“ se vždy míní alkylováskupina s přímým nebo s rozvětveným řetězcem, mající uvedenýpočet atomů uhlíku. Například "alkylovou skupinou s 1 až 4atomy uhlíku" se míní skupina methylová, ethylová, n-propy-lová, isopropylová, n-butylová, sek.-butylová, isobutylováa terc.-butylová skupina. "Alkylovou skupinou s 1 až 8 ato-my uhlíku" se míní významy uvedené pro alkylové skupiny s 1až 4 atomy uhlíku a dále skupina n-pentylová, 2-methylbuty-lová, 5-niethylbutylová, n-hexylová, 4-methylpentylová, n-heptylová, 3-ethylpentylová, 2-methylhexylová, 2,3-dimethyl-pentylová, n-oktylová, 3-propylpentylová, 6-methylheptylováa podobné skupiny. Výrazem "alkenylová skupina s 3 až 4 atomy uhlíku" sezde míní vždy olefinicky nenasycené alkylové skupiny, jakojsou například skupiny vzorce -ch2chzch2, -gh/ch5/chzgh2, -ch2gh2ch=ch2 Výrazem "arylová skupina" se zde vždy míní aromatickákarbocyklická ; skupina' mající cyklickou strukturu s jednímnebo se dvěma kruhy s celkevým počtem 6 až 10 atomů uhlíku - 5 - v cyklické struktuře. Jakožto příklady takové skupiny se uvá-dí skupina fenylová, naftylová a indanylová skupina. Výrazem "cykloalkylová skupina" se zde vždy míní alifa-tická kafcocyklieká struktura mající uvedený počet atomů uh-líku v kruhu. Jakožto příklady cykloalkylové skupiny s 1 až7 atomy uhlíku se uvádějí skupina cyklopropylová, cyklobuty-lová, cyklopentylová, cyklohexylová a cykloheptylová skupina. Výrazem "arylalkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku v al-kylovém podílu" se zde vždy míní karbocyklická struktura spo-jená s alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku; jakožto přík-laty takových skupin se uvádějí skupina benzylová, fenylethy-lová, oi. -methylbenzylová, 3-fenylpropylová, -naftylmethylo- vá, /3 -naftylmethylová, 4-fenylbutylová a podobné skupiny.Podobně se výrazem "arylalkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlí-ku v alkylovém podílu" míní aromatická karbocyklická struktu-ra spojená s alkylovou skupinou s 1 až 3 atomy uhlíku.

Alkylová skupina s 1 až 8 atomy uhlíku, arylová skupina,arylalkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílua arylalkylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém po-dílu mohou být substituovány jedním nebo dvěma substituenty.Jakožto typické substituenty arylových nebo alkylových podí-lů se uvádějí alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uhlíku, atom halo-genu, hydroxyskupina, thioalkylová skupina s 1 až 3 atomy uh-líku a podobné skupiny; kromě toho může být arylovg skupina,arylalkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podí-lu nebo arylakylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylo—vém podílu substituována také alkylovou skupinou s 1 až 3 a-tomy uhlíku nebo trifluormethylovou skupinou.

Touto "alkylovou skupinou s 1 až 3 atomy uhlíku" se vždymíní skupina methylová, ethylová, n-propylová nebo isopropylo-vá skupina; podobně výrazem "alkoxyskupina s 1 až 3 atomy uh-líku" se vždy míní methoxyskupina, ethoxyskupina, n-propoxy-skupina a isopropoxyskupina. Výrazem "atom halogenu" se vždymíní atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu; výrazem "thioal-kylová skupina s 1 až 3 atomy uhlíku" se zde vždy mino methyl- -: .-/.v.’,-·’-· thioskupina, ethylthioskupina, n-propylthioskupina a isopro-pylthioskupina.

Jakožto příklady substituované alkylové skupiny s 1 až8 atomy uhlíku se uvádějí příkladně skupina methoxymethylo-vá, trifluormethylová, 6-chlorhexylová, 2-brompropylová, 2-ethoxy-4-jodbutylová, 3-hydroxypentylová a methylthiomethy-lová skupina.

Jakožto příklady substituované arylové skupiny se uvá-dějí skupina p-bromfenylová, m-jodfenylová, p-tolylová, o-hydroxyfenylová, $ -/4-hydroxy/naftylová, p-/methylthio/fe-nylová, m-trifluormethylfenylová, 2-chlor-4-methoxyfenylová,d, -/5-chlor/naftylová skupina a podobné skupiny.

Jakožto příklady substituované arylalkylové skupiny s 1až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu se uvádějí skupina p-chlorbenzylová, o-methoxybenzylová, m-/methylthio/-ex methyl-benzylová, 3-/4*-trifluormethylfenyl/propylová, o-jodbenzy-lová, p-methylbenzylová skupina a podobné skupiny.

Zde používaným výrazem "blokovací skupina", používanýmčasto v chemii organických syntéz, se míní skupina, která semůže vázat na atom dusíku například v aminoskupině a předchá-zet tomu, aby se atom dusíku zúčastnil na reakci, prováděnéna jiné funkční skupině molekuly, která se však z atomu dusí-ku může zase v případě potřeby odstranit. Takové skupiny po-psal například T.W. Greene v kapitole 7· publikace Protec-tive Groups in Organic Synthesis /Chránící skupiny v orga-nické syntéze/, John W^ley and Sons, New York, 1981 a J.W.Bartoň v kapitole 2. publikace Protective Groups in Orga-nic Chemistry /Chránící skupiny v organické chemii/, J.P.W.McOmie, vyd. Plenům Press, New York, 1973. Jakožto příkla-dy takových skupin se uvádějí skupina obecného vzorce

- COOR kde znamená P skupinu methylovou, ethylovou, propylovou, isopropylo-vou, 2,2,2-trichlorethylovou, 1-methyl-l-fenylethylovou,isobutylovou, terc.-butylovou, terc.-amylovou, vinylo- - 7 - vou, allylovou, fenylovou, benzylovou a substituovanou benzylovou, například skupinu p-nitrobenzylovou, o-nit- robenzylovou, 2,4-dichlorbenzylovou, 3,4-dimethoxybenzy- lovou a trifenylmethylovou skupinuj acylová skupina nebo substituovaná acylová skupina, Jako je na-příklad skupina formylová, acetylová, chloracetylová, dichlor-acetylová, trichloracetylová, benzoylová a p-methoxybenzoylo-vá skupina; a další skupiny, jako je například methansulfony-lová, p-toluensulfonylová, p-brombenzensulfonylová, p-nitrofe-nylethylová a p-toluensulfonylaminokarbonylová skupina. Jakož-to výhodné blokovací skupiny se uvádějí skupina benzylová/-CHgCgH^/, trifenylmethylová /tritylová/, acylová obecnéhovzorce C/O/R nebo skupina obecného vzorce SiR^, kde znamenáR alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, halogenmethylovouskupinu, v poloze 2 atomem halogenu substituovanou alkoxysku-pinu nebo fenylovou skupinu.

Sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I mají alespoňjedno chirální centrum, a proto pro každou sloučeninu existu-jí alespoň dva stereoisomery. Chirální centrum je v poloze 4sloučeniny obecného vzorce I. Pokud substitut-ční skupina obsa-huje chirální centrum, mohou existovat další přídavné stereo-isomery· Vynález se týká racemických směsí jakož také v podstatěčistých stereoisomerů obecného vzorce I. Výrazem "v podstatěčistý” se zde vždy míní, že; alespoň přibližně 90 $ molových,zvláště přibližně 95 $ molových a především přibližně ales-poň 98 % molových žádaného stereoisomerů je obsaženo ve vzta-hu k ostatním možným stereoisomerům.

Obzvláště výhodnými jsou stereoisomery obecného vzorce I,ve kterých je konfigurace chirálního centra v poloze 2a S av poloze 4 H, to znamená 2aS, 4R.

Symboly "R" a “S” zde používanými se míní, jak je v or-ganické chemii běžné, specifická konfigurace chirálního cen-tra. Symbolem "R" se míní "pravá” a týká se konfigurace chi-rálního centra ve směru hodinových ručiček se zřetelem napriority skupin /vyšší ke druhé nižší/ při sledování vazby ve směru k nižší prioritní skupině. Symbolem "S" nebo "levý"se míní konfigurace chirálního centra ve směru proti hodino-vým ručičkám se zřetelem na priority skupin /vyšší ke druhénižší/ při sledování vazby ve směru k nižší prioritní skupi-ně. Priorita skupin je založena na jejich' atomovém čísle.Parciální seznam priorit a pojednání o stereochemii je pod-robné v publikaci The Vocabulary of Organic Chemistry /Slov-ník organické chemie/, Orchin a kol., John Wiley and Sonslne·, str. 126.

Jakkoliv jsou všechny sloučeniny obecného vzorce I uži-tečné pro shora uvedené účely, je použití některých sloučenin obecného vzorce I účelné a výhodné. Výhodnými jsou sloučeni-1 2 ny obecného vzorce I, kde znamená R a R vždy alkylovou sku-pinu s 1 až 4 atomy uhlíku a zvláště n-propylovou skupinu; R atom vodíku; R' alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy -Tkn,substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebocykloalkylovou skupinu s 3 až 7 atomy uhlíku. Jakkoliv jsouúčinné sloučeniny obecného vzorce I, kde znamená A skupinuvzorce -CHOH nebo C£C, jsou takové sloučeniny považovány pře-devším jako meziprodukty pro přípravu sloučenin obecnéhovzorce I, kde znamená A skupinu C-0. Další výhodná prove-dení vynálezu budou ještě uvedena.

Jak shora uvedeno, jsou předmětem vynálezu také farma-ceutický vhodné soli sloučenin obecného vzorce I. Jelikožsloučeninami obecného vzorce I jsou aminy, jsou to ze svépovahy zásady, a proto reagují s četnými anorganickými ky-selinami a s organickými kyselinami za vzniku farmaceutickyvhodných solí. Jakožto takové anorganické kyseliny se uvádě-jí příkladně kyselina chlorovodíková, dusičná, fosforečná,sírová, bromovodíková, jodovodíková, fosforitá a další po-dobné kyseliny; jakožto organické kyseliny se uvádějí příklad-ně alifatické monokarboxylové a dikarboxylové kyseliny, a-minokyseliny, fenylovou skupinou substituované alkanojzýékyseliny, kyselina hydroxyalkanodyá a hydroxyalkandiop^á,aromatické kyseliny a alifatické a aromatické sulfonové ky-seliny. Jakožto farmaceuticky vhodné soli se uvádějí přík-ladně sulfát, pyrosulfát, hydrogensulfát, sulfit, hydrogen- - 9 - sulfit, nitrát, fosfát, monohydrogenfosfát, dihydrogenfosfát,metaíosfát, pyrofosfát, chlorid, bromid, jjodid, acetát, pro-pionát, kaprylát,akrylát, formát, tartrát, isobutyrát, kap-rát, heptanoát, propiolát, oxalát, malonát, sukcinát, eube-rát, sebakát,fumarát, maleát, mandelát, butin-1,4-dioát, he-xin-l,6-dioát, hippurát, benzoát, chlorbenzát> methylbenzoát,ftalát, tereftalát, benzensulfonát, toluensulfonát, chlor-benzensulfonát, xylensulfonát, fenylacetát, fenylpropionát,fenylbutyrát, citrát, laktát, ó -hydroxybutyrát, glykolát,malát, naftalen-l-sulfonát, naftalen-2-sulfonát a mesylát·

Jakožto příklady representativních sloučenin obecnéhovzorce I se uvádějí! 4-/di-n-propylamino/-6-acetyl-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz-/“cdJZindol, 4-/di-n-propylamino/-6-/2,2-dimethlpropanoyl/-l,2,2a,3»4,5-hexahydrobenz/“cdJ indol, 4-/diethylanri.no/-6-propanoyl-l, 2,2a, 3,4,5-hexahydrobenz/"" cdJ·indol, 4- /di-n-propylamino/-6-benzpyl-l, 2,2a, 3,4,5-. hexahydrobenz-/“cd indol, /2aS,4R/-4-/n-propylamino/-6-/2-methylpropanoyl/-l,2,2a,3,4- 5- hex'ahydrobenz/”cd_/indol, l-methyl-4-/di-n-propylamino/-6-benzoyl-l,2,2a,3,4,5-hexa-hydrobenz/“cdJindol, 1—methyl-4—/n-propylamino/-6-/3-methylbutanoyl/-l,2,2a,3,4- 5-hexahydrobenz/“cd_7indol, /2aS,4H/-4-/di-n»propylamino/-6-/2,2-dimethylpropanoyl/-1,2,2a, 3,4,5 -hexahy drob enz/~ cd __/indol, /2aS,4H/-4-/di-n-propylamino/-6-benzoyl-l,2,2a,3»4»5-hexa-hydrobenz/”cd_/indol, 4_/U_B.-propyl-N-cyklopropylmethyl/amino-6-propanoyl-l, 2,2a- 3.4.5- hexahydrobenz/“cdindol, /2aS,4S/-4-/di-n-pro pylamino/-6-ac etyl-1,2,2a,3,4,5-hexa-hydrobenz/”C(3· __7indol, /2aS,4B/-4-/di-n-propylamino/-6-/2-fenylethanoyl/-l,2,2a- 3.4.5- hexahydrobenz/”cd _J7indol. - 11

Schéma 1 popisuje způsob přípravy sloučenin obecnéhovzorce 1 podle vynálezu, kde R"^, a R7 má shora uvedený vý-znam a kde znamená Z shora definovanou skupinu blokující «m-i-noskupinu.

Podle jednoho z uvedených postupů se smíchá 4-amino-6-bromhexahydřobenz/“cdJZindol obecného vzorce 1 s ekvivalent-ním množstvím až s mírným nadbytkem hydridu draselného v di-ethyletheru. Seakční složky se zpravidla míchají při nízkéteplotě, zvláště při teplotě přibližně -20 až přibližně +10°0, především při teplotě 0 °G. Získaná směs se ochladí nateplotu přibližně -100 až přibližně-60 °C, s výhodou na tep-lotu -78 °C a směs se míchá s lithiačním činidlem, s výhodous alespoň dvoumolárním nadbytkem tohoto činidla. Jakožtovhodná lithiační činidla se uvádějí sek.-butyllithium,s výhodou terc.-butyllithium a jiné podobné organolithnésloučeniny. Reakce se provádí s výhodou při teplotě přib-ližně -100 až přibližně -20 °C, především při teplotě —60 ažpřibliáiě -40 °C.

Takto připravený 4-amino-6-lithiumhexahydrobenz/“cdindol obecného vzorce 2 se pak uvádí do styku se vhodnou e-lektrofilní sloučeninou, jako je sloučenina obecného vzorce L - 0/0/R7 7 * kde R' má shora uvedený význam a L znamená dobře uvolnova-telnou skupinu, například atom chloru nebo atom bromu, metho-xyskupinu, fenoxyskupinuía podobné skupiny. Zpravidla se roz-tok sloučeniny obecného vzorce 2 při teplotě přibližně -100až přibližně -60 °C a s výhodou při teplotě přibližně -80 °Cpřidává do roztoku tohoto činidla v rozpouštědle obou složek.Pokud se použije nadbytku elektrofilní sloučeniny v reakčnísměsi, aminoskupina v poloze 1 se také acyluje /to znamená,že Z je acylová skupina vzorce R7C/O/ ve sloučenině obecné-ho vzorce 3a/ a je nutná následná hydrolytická reakce k zís-kání volného indolu obecného vzorce 1. K minimalizaci acyla-ce dusíku v poloze 1 se může použít poměru 1 : 1 elektro-filní sloučeniny a lithiovaného indolu /sloučeniny obecnéhovzorce 2/. Reakce se s výhodou provádí při teplotě přibližně - 12 - -40 °C až přibližně +10 °0. Žádaná sloučenina se čistí ochla-zením reakční směsi, například ledovou vodou, používanou v po-měru 1 : 1, Při vyšším poměru, který vede k výrazné acylaciv poloze 1, se produkt hydrolyzuje za použití kyseliny, na-příklad kyseliny fosforečné, nebo zásady, například uhličita-nu sodného nebo hydroxidu sodného. Směs se pak promyje orga-nickým rozpouštědlem nemísitelným s vodou, Organická fáze seextrahuje kyselinou; vodné fáze se spojí aářkalizují se; ažádaná sloučenina se extrahuje organickým rozpouštědlem nemí-sitelným s vodou. Organické rozpouštědlo se pak zkoncentruje,zpravidla ve vakuu, a žádaná sloučenina obecného vzorce I sedále čistí popřípadě o sobě známými zppůsoby. Při obměněném způsobu se atom dusíku v poloze 1 může blo-kovat nebo chránit před započetím metalizační reakce. Blokova-cí skupina /označená symbolem Z/ papří kl's'd'vzorce RjSi,^C/G/R nebo CHg/CgH^/, kde znamená R alkylovou skupinu s 3 až 4 atomyuhlíku, s výhodou triisopropylovou skupinu nebo fenylovou sku-pinu /CgH^/, se s výhodou používá pro indol jako reakční slož-ku a tritylová skupina se s výhodou používá pro indolin jakož-to reakční složku. Sloučenina la se pak nechává reagovats lithiačním prostředkem, jak shora uvedeno pro sloučeninuobecného vzorce 2a. Sloučenina obecného vzorce 2a se pak mů-že acylovat uváděním do styku se vhodnou elektrofilňí slouče-ninou, jak shora uvedeno. Ze vzniklé sloučeniny obecného vzor-ce 3a se pak odstraní chránící skupina zpracováním fluorido-gou solí, pokud Z znamená skupinu obecného vzorce SiR^, nebov případě, kdy Z znamená benzylovou skupinu, může se slouče-nina obecného vzorce 3a podrobovat hydrogenolyze na katalyzá-toru, jako je například palladium, k odstranění benzylovéskupiny. Žádaná sloučenina se izoluje za standardních pod-mínek a čistí se krystalizací z běžných rozpouštědel nebosloupcovou chromatografií na pevných nosičích, jako jsou si-likagel a "oxid hlinitý. “ 12 “

Schéma 1

•'i ah-whiiL· í/' X? }' - 13 - •Schéma 2

Obměněný způsob přípravy sloučeniny podle vynálezu obec-ného vzorce I je dán na schéma 2 a zahrnuje zpracování 6-li-thioveho derivátu obecného vzorce 2 a 2a /podle cháma 1/ al-dehydem obecného vzorce R'CH0 za vzniku alkoholu obecnéhovzorce 4 nebo 4a. Oxidace alkoholu se může provádět oxidanty,známými pracovníkům v oboru pro takové účely, jako je pyri- - 14 - diniumchlorchrornátt dimethylsulfoxid. a oxalylchlorid, vodnýroztok kyseliny chromové a kyselina sírová a jako jsou podobné oxidační prostředky. Odstraněním chránící skupiny z ami-noskupiny v poloze 1 se získá volná sloučenina obecného vzorce I.

Schéma 3

r7-m

4&amp; skupiny NR1R2

Alkonolové meziprodukty obecného vzorce 4» 4a se mohoualternativně připravovat způsobem podle schéma 3 vnášenímorganokovového re.-^kčního činidla /obecného^ vzorce rAí/, jakonapříklad alkyllithia obecného vzorce a^Li nebo Grignardovačinidla obecného vzorce R^LIgX do aldehydu obecného vzorce 5a 5a.

- 15 -

Aldehydy obecného vzorce 5a 5a se mohou připravovat 'různými způsoby. Dále uvedené způsoby nejsou míněny jako vy-čerpávající přehled a pracovníkům v oboru je zřejmé, že je mož- -no používat i jiných způsobů. Jedním způsobem je reakce 6-li-thiového derivátu obecného vzorce 2 a 2a s dimethylformadi-dem, následovaná zpracováním vodou. Jiný způsob je uvedenna schéma 4, který zahrnuje způsob přípravy 6-nitrilového de-rivátu obecného vzorce 6 následovanou redukcí a hydrolyzou.

Schéma 4 NR1R2 NR1R2

Do styku se uvádí l-benzoyl-6-bromderivát 1 se směsíkyanidu měůného a jodidu měůného v dimethylformamidu přiteplotě přibližně 140 °C. Vzniklý 6-nitril obecného vzorce6 se hydrogenuje na katalyzátoru Pd/C v přítomnosti semi-karbazidu za vzniku 6-semikarbazonu, sloučeniny obecnéhovzorce 7. Tato sloučenina se hydrolyzuje za použití kyseli-ny sírové, čímž se získá aldehyd obecného vzorce 5. Λ * / \ · - 16 -

Schéma 5^"

Alternativní způsob je znázorněn na schéma 5: 6-nitri- lový derivát obecného vzorce 6 se uvádído styku s redukčním Činidlem /"H_J, jako je diisobutylaluminiumhydrid. Vzniklý aldehyd obecného vzorce 5a se pak uvádí do styku s organo- kovovou sloučeninou, například s Grignardovým činidlem obec-7 ného vzorce H LlgBr, za vzniku alkoholu obecného vzorce 4a,který se oxiduje shora popsaným způsobem na β-acylový derivát,blokovaný v poloze 1 obecného vzorce 5a.

Jiný způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I za-hrnuje Priedel/Craftsovu acylaci 6-H indolinu obecného vzor-ce 8, jak je znázorněno na schéma 6. 17

Schéma 6

1 _2

Indolin obecného vzorce 8, kde R , λ a Z mají shorauvedený význam, se uvádějí do styku s acylačním činidlem,jako je anhydrid karboxylové kyseliny obecného vzorce /r7co/2o kde R má shora uvedený význam, nebo s halogenidem karboxy-lové kyseliny, zvláště s chloridem kyseliny obecného vzorce R7C/O/C1 kde R7 má shora uvedený význam, v přítomnosti Lewisovy kyse-liny. Jakožto výhodné Lewisovy kyseliny se uvádějí chloridhlinitý, bromid hlinitý, borfluorid, chlorid ciniSitý, fluo-rovodík, chlorid titaničitý a podobné sloučeniny. Reakcese s výhodou provádí v běžné používaných rozpouštědlech protakové acylační reakce, jako je příkladně nitrobenzen. Re-akce se zpravidla provádí při teplotě 20 °G až teplota zpět- 18 - ného toku. S výhodou se aminoskupina v poloze 1 chrání bloko-vací skupinou symbolu Z, jak je zřejmé ze schéma 6. Jakožtovýhodná blokovací skupina se uvádí benzoylová skupina. Blo-kovací skupina se může odstranit ze sloučeniny obecného vzor-ce 3a hydrolyzou, s výhodou za použití zásady, například hyd-roxidu sodného, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I.

Nebo se určité slouč^iiny obecného vzorce I mohou připra-vovat za použití 6-jodového derivátu obecného vzorce 9» jak jnaznačeno na schéma 7 a 8, přičemž B. , B a Z mají shora uve-dený význam. Ba schéma 7 je uveden způsob, při kterém se při-pravuje 6-alkinový derivát. Tento způsob vede ke sloučeniněacylované v poloze 6, ve které methylenová skupina přiléháke karbonylové skupině. Iři tomto způsobu se dusík v poloze 1může chránit skupinou /symbolu Z/, jako je například benzoy-lová skupina, Jato sloučenina obecného vzorce 9 se uvádí dostyku s palladiovým katalyzátorem vzorce Pd/PPhy^, kde zna-mená Ph fenylovou skupinu a s cínalkinovou sloučeninou obec-ného vzorce K7a - C£ _ sn -y- ch3 kde znamená fi7a alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, sub-stituovanou alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, arylal-kylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu, sub-stituovanou arylalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v al-kylovém podílu nebo cykloalkylovou skupinu s 3 až 7 atomy uh-líku. ^ato reakce se normálně provádí v rozpouštědle, jako jenapříklad toluen, při zvýšené teplotě, například při teplotěpřibližně 100 °C. Zpravidla se používá nadbytku cínalkinuspolu s přibližně 0,25 ekvivalenty sloučeniny palladia, vzta-ženo na sloučeninu obecného vzorce 9· Pak se uvádí do styku 6-alkin obecného vzorce 10 se síranem rtuínatým ve voděza vzniku ketonu obecného vzorce 11. Blokovací skupina v po-loze 1 se může odstranit hydrolyzou za použití zásady, jakshora uvedeno v případě sloučeniny obecného vzorce I. 19 -

Schéma 7 R7a

h2o

HgSO4

2a

I 20 -

-,(ζ! '-I

Schéma 8 objasňuje způsob, při kterém se nechává reagovatvinylether s 6-jod derivátem obecného vzorce 9,kde R , R aZ mají shora uvedený význam, přičemž Z znamená s výhodou ben-zoylovou skupinu, s dále uvedenou výjimkou. Při tomto způsobuse získá 6-/l-alkoxyalkenylový/ derivát obecného vzorce 81,který se pak může hydrolyzovat a může se z něj odstranit chrá-nící skupina za získání žádané sloučeniny obecného vzorce I.Nebo se z derivátu obecného vzorce 81 může odstranit chránícískupina, například butyllithiem, a pak se vinylová skupina hyd-rolyzuje. Při tomto způsobu se aminoskupina v poloze 1 chránívhodnou skupinou chránící aminoskupinu, s výhodou benzoylovouskupinou. Tato sloučenina obecného vzorce 9 se pak uvádí dostyku s palladiovým katalyzátorem a s žádaným vinyletherem.Jakožto vhodné vinylethery pro tento způsob se uvádějí slou-čeniny, kde Rc znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlí-ku a Q znamená atom vodíku nebo cínalkylovou skupinu, boralky-lovou skupinu nebo boralkoxyskupinu, halogenid zinku nebo ha-logenid hořčíku, například tributylcín. Jestliže Q znamená ha-logenid zinku nebo halogenid hořčíku, je výhodné, aby Z zna- o b menalo skupinu, jako je tritylová skupina. R a R mohou zna-menat na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 6atomy uhlíku, arylovou skupinu, arylalkylovou skupinu s 1 až 2 atomy uhlíku v alkylovém podílu, substituovanou arylovouskupinu, substituovanou arylalkylovou skupinu s 1 až 2 atomyuhlíku v alkylovém podílu nebo cykloalkylovou skupinu s 3 až 7 atomy uhlíku. Používaným katalyzátorem může být práškovápalladiová čerň - práškové palladium, nebo sloučenina obecné-ho vzorce Pd/PÍhy^, kde Ph znamená fenylovou skupinu$ slou-čeniny Pd/PPh^/^ se obecně používá v toluenu při teplotězpětného toku. Může se používat Pd-černě s trifenylfosfinem v toluenu při teplotě zpětného toku nebo ve směsi acetonit-rilu a triethylaminu při teplotě přibližně 100 °C. Podobnáreakce je popsána v Bull. Chem. Soc. Japan, 1987, 60, str. 767 až 768.

Jiný způsob přípravy je znázorněn na schéma 9· - 21 -

řro přímou přípravu určitých v poloze 6 acylovanýchsloučenin se může používat 6-jodderivátu obecného vzorce 9,Reakce se provádí uváděním do styku 6-jodslcučeniny s tri-alkylcínalkylovým komplexem a oxidem uhelnatým v přítom-nosti palladiového katalyzátoru obecného vzorce

Pd/Píh3/4 kde znamená Ph fenylovou skupinu, jak je v literatuře po-psáno pro arylhalogenidy /A. Schoenberg a R.B. Keck, J. Org.C^em. 59, str. 5327 /1974/ a A. Schoenberg, I. Bartoletti aR.F. Heck, J. Org. Chem., 59, str. 3318/1974//. Blokovacískupinou symbolu Z je s výhodou benzoylová skupina v pří-padě uvedeného způsobu přípravy a může se posléze odsl^anit,jak je popsáno pro případ sloučeniny obecného vzorce I.

Způsobem podle schéma 1 až 9 se může získat směs pro-duktů, která se musí čistit o sobě známými způsoby čištění,jako je například krystalizace nebo jako jsou chromatografic-ké způsoby.

Schéma 10 objasňuje způsob přípravy váchozí látky proreakci podle schéma 1.

Epoxidy obecného vzorce 15 jsou o sobe známé sloučeninya mohou se připravovat například z ketonu obecného vzorce 12,který je o sobě znám a je používaným reakčním činidlem. Na-příklad Paugh a kol., J. Líed. Chem. 51, str. 1746, 1988; Ni-chols a kol., Org. Prep. and Proč. Int., 9, str. 277, 1977; aLeanna a kol., Tet. Lett. 50, číslo 50, str. 5935, 1989, po-pisují způsoby přípravy různých provedení sloučenin obecnéhovzorce 15. Pracovníkům v oboru organické chemie je jasné,že existují čtyři stereoisomery obecného vzorce 15: - 23 -

Sloučeniny obecného vzorce 15a a 13b se zde označují ja-kožto exo-isomery; podobné se sloučeniny obecného vzorce 13ca 13d označují jako endo-isomery. Leanna a kol., jak shora u-vedeno, popisuje způsob přípravy epoxidů obecného vzorce 13,které jsou popřípadě v podstatě v exo formě nebo v podstatěv endo formě. Jakožto výhodná výchozí sloučenina se uvádísloučenina obecného vzorce 13, kde znamená R benzoylovouskupinu; nejvýhodnějsí výchozí látkou je směs v podstatě exo-isomerů shora charakterizované sloučeniny obecného vzorce 13.

Aminoalkoholy obecného vzorce 14 se připravují reakci epo c xidu obecného vzorce 13 s aminem obecného vzorce R iíH?, kdeznamená R atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlí-ku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, substituova-nou jednou až třemi skupinami vybranými ze souboru zahrnu-jícího atom halogenu, nitroskupinu nebo fenylovou skupinu. Ta-kové aminy jsou dobře dostupné. Otevření epoxidového kruhu po-stupuje v podstatě stereospecificky s aminoskupinou v poloze 5 a s hydroxylovců skupinouspecifická v tom smyslu, že14a předvídatelně vytvářejíobecného vzorce . 13a až 13d. poloze 4. Reakce je také stereo-e stereoisomery obecného vzorce odpovídajících stereoisomerů

14c

''ν' - 24 -

Stereoselektivní syntéza aminoalkoholu obecného vzorce14 a tedy všech následujících meziproduktů a produktů podleschéma 10 se může provádět za použití v podstatě čistého enan-tiomer^aminu obecného vzorce βθΝΗ^, kde skupina symbolu Βθmá alespoň jedno chirální centrum. Obzvláště výhodným aminemje /♦/ nebo /-/ 1-fenylethylamin. Liastereomery získaného a-minoalkoholu se pak mohou oddělovat četnými o sobě známýmizpůsoby, například chromatografií nebo krystalizací. Jakožtovhodná rozpouštědla pro překrystálování se uvádějí příkladnědiethylether, butanol a směsi hexanu a ethylacetátu. Alter-nativním způsobem dosahování stereospecifické syntézy je kon-verse všech diastereomerů obecného vzorce 14 na odpovídajícídiastereomery obecného vzorce 15, načež se diastereomery obec-ného vzorce 15 oddělují; tento alternativní způsob bude ještěpodrobně popsán. Pokud není nutná stereoselektivní syntéza,není nutné ani oddělování stereoisomerů aminoalkoholu obecné-

Q ho vzorce 15 a amin obecného vzorce B BHg nemusí být optickyaktivní.

Obzvláště účinný stereoselektivní způsob přípravy vyso-ce výhodné sloučeniny obecného vzorce 14, l-benzoyl-4-hydro-xy-5-/l-fenylethyl/amino-1,2,2a , 5» 4» 5-hexahydrobenz/“cd__7-indolu, zahrnuje reakci směsi v podstatě exo-isomerů odpoví-dajícího epoxidu obecného vzorce 15 nebo směsi v podstatěendo-isomerů odpovídajícího epoxidu obecného vzorce 15 s e-nantiomerem 1-fenylethylaminem v podstatě čistým v butanolujakožto rozpouštědle s následnou selektivní krystalizací jed-noho nebo dvou isomerů aminoalkoholu. Beakční teplota je s vý-hodou přibližně 50 až přibližně 150 °G a především přibližně80 až 100’°C.

Po úplném proběhnutí reakce, což se zjistí napříkladchromatografií v tenké vrstvě nebo kapalinovou chromatografií,žádaný aminoalkohol vykrystaluje při teplotě přibližně -20 až -přibližně +40 °G; výhodnou teplotou pro krystalizací je přib-ližně 0 až přibližně 15 °C. Tento způsob je tedy hodnotný aoddělování stereoisomerů probíhá účinně v jednom stupni. Vhod-nou volbou epoxidových isomerů, exo formy nebo endo formy, a /*Λ - 25 - enantiomeru 1-fenylethylaminu, R nebo S, se může určit, kteréze stereoisomerů sloučeniny obecného vzorce 14 se vysráží z reakční směsi. Například výhodný stereoisomer l-benzoyl-4-hydro-xy-5-/l-fenylethyl/amino-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/- cd_7in-dol, ve formě /2a-S, 4-R, 5-R/isomeru se může selektivně při-pravit reakcí exo-epoxidů s S-l-fenylethylaminem. četné způsoby přípravy aziridinů, například obecnéhovzorce 15, z aminoalkoholů, například obecného vzorce 14, jsouo soběvznámy. Jakožto dva příklady se uvádí použití diethyl-azodikarboxylátu a trifenylfosfinu /o, íditsunobu, Synthesis,leden 1581, str. 1/ a použití bromu a trifenylfosfinu /J.P.Preemer a P.J. 2éondron, Synthesis, prosinec, 1974, str. 894/.

Obzvláště účinný alternativní způsob se zřetelem na sho-ra uvedené způsoby zahrnuje zpracování sloučeniny obecnéhovzorce 14 terciárním aminem v inertním rozpouštědle, násle-dované přidáním methansulfonylchloridu. Stereoisomery obec-ného vzorce 15a až 15d aziridinů obecného vzorce 15 se zís-kají z odpovídajících stereoisomerů obecného vzorce 14a až14d s podržením konfigurace na každém chirálním centru v sub-stituentech 3^ nebo R , shora definovaných, jakož také v po-loze 2a:

Jakožto vhodné aminy se uvádějí aminy obecného vzorce/R^/R, kde znamená R^ na sobě nezávisle alkylovou skupinu s 1až 4 atomy uhlíku. Vhodnými rozpouštědly pro tuto reakci jsouchlorované uhlovodíky, například methylenchlorid, chloroform,tetrachlormethan a dichlorethan; aromatické uhlovodíky, na-příklad benzen, toluen a xyleny; a ethery, například tetra- 1 l - 26 - hydrofuran, diethylether, methyl-terc.-butyleth.er. Reakce semůže provádět při teplotě přibližně -55 až přibližně *45 °C.Podle výhodného provedení se aminoalkohol zpracovává triethyl-aminem v methylenchloriau při teplotě přibližně -20 až přibliž-ně 0 °C, pak se reakční směs zahřeje na teplotu přibližně 15až přibližně 55 °G pro ukončení reakce. Popřípadě se produkt,aziridin obecného vzorce 15» může nechat krystalovat ze vhod-ného rozpouštědla, jako je například acetonitril nebo isopro- o panol po zpracování vodou. V případě, kdy R obsahuje alespoňjedno chirální centrum ve stereokonfiguraci v podstatě jediné,mohou se jednotlivé stereoisomery aziridinu obecného vzorce15 navzájem oddělit například chromatografií nebo krystali-zací, čímž jde o stereospecifickou syntézu aziridinu obecné-ho vzorce 15 a následných produktů.

Aziridinový kruh se může otevřít za vzniku sekundárníhoaminu obecného vzorce 16 jakožto meziproduktu. Četné způsobyotevření aziridinového kruhu jsou obecně známy. Přosně se všakdbá toho, aby použitý způsob otevření kruhu aziridinu za vzni-ku sekundárního aminu obecného vzorce 16 byl v podstatě regio-specifický, to znamená, že se aziridin musí otevřít za vzni-ku v podstatě 4-aminosloučeniny spíše než 5-aminosloučeniny.Jedním z takových způsobů je katalytická hydrogenolyza, kteroupopsal Y. Sugi a S. Mitsui, Bull. Chem. Soc. Jap., 45, str.1489 až 1494, 1970. Jakožto vhodných katalyzátorů se zpravid-la používá hydrogenačních katalyzátorů nebo katalyzátorů prohydrogenolyzu, jako jsou katalyzátory na bázi ušlechtilých ko-vůj výhodným katalyzátorem je palladium. Jakožto vhodná roz-pouštědla pro tuto reakci se uvádějí uhlovodíky, napříkladbenzen, toluen, xyleny, ethylbenzen a terc.-butylbenzen; al-koholy, například methanol, ethanol a isopropanol; a směsirozpouštědel, například směs kyseliny octové s uvedenými al-koholy. Jakožto výhodná rozpouštědla pro přípravu sloučeniny

O obecného vzorce 16, kde znamená R"^ benzoylovou skupinu a R1-fenylethylovou skupinu, se uvádí ledová kyselina octovánebo směs methanolu a kyseliny fosforečné. Zdrojem vodíkumůže být plyn obsahující vodík dodávaný pod tlakem 0,1 MPa - 27 - nebo vyšším, nebo zdrojem vodíku mohou být sloučeniny, kteréjsou donory vodíku v katalytické přenosové hydrogenolyzní re-akci., jako je kyselina mravenčí nebo hydrazin. Výhodným zdro-jem vodíku je plyn obsahující vodík a zaváděný pod tlakem 0,T,až 1,0 MPa» Reakční teplota má být přibližně -20 až přibližně+80 C; výhodná teplota pro hydrogenolýzu aziridinu obecnéhovzorce 15, kde znamená RJ benzoylovou skupinu a R 1-fenyl-ethylovou skupinu je přibližně -20 až přibližně 0 °C.

Konverze sloučeniny obecného vzorce 15 na sloučeninu obec-ného vzorce 16 postupuje bez narušení stereochemické konfigura-ce chirálních center v poloze 2a nebo 4 sloučeniny obecnéhovzorce 16 nebo chirálních center jakýchkoliv případných sub-stituentů.

Popřípadě se sloučenina obecného vzorce 16 může izolovato sobě známými způsoby, jako je například krystalizsce· Sekun-dární amin v poloze 4 obecného vzorce 16 se může převádět naprimární amin obecného vzorce 17 četnými způsoby o sobě známý-mi. z organické chemie nebo se skundární amin jako takový můžeizolovat· Výhodné je však převádět sekundární amin obecnéhovzorce 16 na primární amin obecného vzorce 17 bez izolace se-kundárního aminu jednoduchým pokračováním reakce hydrogenoly-zy bea přerušení reakce přípravy sloučeniny obecného vzorce16» Pro takovouto reakci jsou výhodnými rozpouštědly a kataly-zátory stejná rozpouštědla a katalyzátory, jakých se používápro přípravu sekundárních aminů obecného vzorce 16· Může bytžádoucí provádět hydrogenolýzu sekundárního aminu obecného vzor-ce 16 za odlišné teploty a tlaku než hydrogenolýzu aziridinuobecného vzorce 15. Pro hydrogenolýzu výhodné sloučeniny obec-ného vzorce 16, kde znamená RJ benzoylovou skupinu a R 1-fe-nylethylovou skupinu, je výhodnou teplotou přibližně 50 až přib-ližně 60 GC a výhodným tlakem přibližně 0,1 až 2,0 MPa. Za těch-to podmínek hydrogenolýza sloučeniny obecného vzorce 16 nasloučeninu obecného vzorce 17 postupuje bez narušení stereo—chemické konfigurace chirálního centra v poloze 4. - 28 -

Izolace sloučeniny obecného vzorce 1? je možná o sobě zná-mými způsoby, například krystalizací. Popřípadě se sloučeninaobecného vzorce 17 může dále čistit například překrystalová-ním.

Sloučenina obecného vzorce 17 se může halogenovat propřípravu, například derivátu obecného vzorce 18, který má v po-loze 6 atom bromu nebo atom jodu. Izolace sloučeniny obecnéhovzorce 17 se může provádět za použití jodu a ortoperkyselinyjodu v přítomnosti kyseliny, například kyseliny sírové nebotrifluoroctové, v rozpouštědle, jako je například kyselina oc-tová» Jiný způsob jodování zahrnuje použití íí-jodsukcinimiduv přítomnosti kyseliny trifluoroctové. 6-Bromderivát se můžepřipravovat za použití bromu v kyselině octové za použitíN-bromsukcinimidu.

Pracovníkům v oboru jsou zřejmé možné obměny shora uve-dených postupů, které mohou být žádoucí nebo nutné pro prová-dění způsobu přípravy sloučenin obecného vzorce I podle vyná-lezu. Takové obměny patří do rozsahu vynálezu.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou připravovat ze vhod-ných sloučenin obecného vzorce 18, at. již jsou tyto sloučeninyobecného vzorce 18 ve formě směsi stereoisomerů nebo jsou v pod-statě čistými enantiomery, za použití reekčních Činidel a způ-sobů v. oboru známých. Výhodným meziproduktem pro sloučeniny o-becného vzorce I podle vynálezu je 6-bromderivát sloučeniny o-becnéha vzorce 18, jakkoliv je výhodným také 6-jodderivát, po-kud se používá karbonylační neakce podle schématu 8. S výhodouznamená skupinu blokující aminoskupinu, například benzoylo-vou. skupinu. Popřípadě se může skupina, blokující aminoskupinu,zavádět na aminosubstituent v poloze 4 za použití způsobů, kte-ré popsal Green a ^Sarton ve shora uvedených citacích. Popřípa-dě se mohou zavádět alkylové skupiny na aminosubstituent v po-loze. 4 za použití běžných reakcí, například reakce aminu v po-loze 4 se vhodným halogenidem, jak popisuje Mořrison a Boydv kapitole 22 publikace Organic Chemistry, třetí vydáni, Allyna Bacon, Boston, 1973. Popřípadě se benzoylová skupina může od- AáaÉUíSiu2saaEtteji4iíiJ>ti£íU.'>;)v!řó£eJtó:.^ Λ.ν: 11,, <} , t'í>’ rt," - 29 - dělit, z polohy 1 za použití o sobě známých způsobů a popřípa-dě ae může nahradit jinou skupinou chránící aminoskupinu. Sku-pily chránící aminoskupinu a alkylové skupiny se mohou zavádětpopřípadě před. hromováním nebo po hromování. 4-Amino-6-bromhexahydrobenz/_ cd-7indoi, jakožto výchozílátka pro přípravu sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu,se může snadno připravit jinými způsoby, jak se popisuje v a-merickém patentovém spise číslo 4 576959 a v evropské zveřej-něné přihlášce vynálezu číslo 015083 /Flaugh/.

Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I podle vynále-zu blíže objasňují následující příklady praktického provedení,které však vynález nijak neomezují.

Jednotlivých výrszů a zkratek se případně používá v jejichběžném významu, pokud není jinak uvedeno. Například "N“ zna-mená normální nebo normalitu; "mmol" milinol; "g” gram; *'ml”mililitr; *K" znamená molární; "min" znamená minutu; *'Me”znamená methyl; "F " propyl^ MEt“ ethyl; "THE“ tetrahydrofu-ran, "EtOAc“ ethylaeetát;"tt" znamená teplotu tání; "TLC”chromátografii v tenké vrstvě; ”hM hodinu; "NMR" nukleárnímagnetickou resonanci; "IČ" infračervenou spektroskopii; "UY“ ultrafialovou spektroskopii a "m.s.“ znamená hmotovouspektrometrii. Příklady provedeni vynálezu Příklad 1 Příprava směsi /2aS,4R/, /2aR,4S/-l -benzoyl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-!,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz^“cd_7indolu

Do roztoku dimethylformamidu /100 ml/, obsahujícího směs/2aS,4R/ a /2aR,4S/ 1-benzoyl-6-brom-4-/di-n-propylamino/-hexahydrobenz/""cd_7indolu v prostředí dusíku se přidá 3,4 g/37,5 mmol/ kyanidu měňného a 7,1 g /37,5 mmol/ jodidu měá.-ného. Směs se pak míchá při teplotě 140 °G po dobu šesti ho-din. Reakční směs se vlije na led, zředí se vodou, přidá se - 30 - dichlormethan a směs se míchá po dobu 30 minut. Směs se zfil-truje křemelinou /obchodního názvu "Celite*/ a filtrát se ex-trahuje dvakrát dichlormethanem. Organický roztok se vysušísíranem hořečnatým a pak se odpaří, čímž se získá 4 g pevnélátky. Chromátografií surového produktu na silikagelu za použi-ti jako elučního systému 1:19 methanol/dichlormethan se získá3 s /62 % teorie/ produktu. Příklad 2 Přípravy směsi. /2aS,4R/-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-1 ,2,2a,3- 4,5-hexahydrobenz/’”cd>_7indolu a /2aR,4S/-6-kyano-4-/di-n-pr opy lamino/-1 ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenž/"’cd_7indolu

Do míchaného roztoku .4,8 g /0,0124 mol/ l-benzoyl-6-kya-no-4-/di-n-propylamino/-1 ,2,2a, 3,4,5-hexahydr ob enz/”cd_7in-dolu, připraveného způsobem podle příkladu 1, ve 20# ml tet-ryhydrofuranu ochlazeného na teplotu -78 °C v prostředí dusí-ku, se přidá 16 ml /0,025 mol/ 1,6M roztoku n-butyllithia v he-xanu. Reakční směs se míchá při teplotě -78 QC po dobu 30 mi-nut a pak se nechá ohřát na teplotu -20 °C. Do reakční směsise přidá. 100 ml 1N kyseliny chlorovodíkové. Směs se extrahujejednou ethyletherem, kyselý roztok se alkalizuje přidáním chlad-ného 5N roztoku hydroxidu sodného. Zásaditá směs se extrahujedvakrát dichlormethanem. Spojené organické roztoky se pro-myjí nasyceným vodným roztokem chloridu sodného. Dichlormetha-nový roztok se vysuší síranem hořečnatým a odpaří se, čímž sezíská 4 g oleje. Chromatografií tohoto oleje na silikageluza eluování ethylacetátem jakožto elučním činidlem se získá3 g /85 % teorie/ produktu ve formě oleje, který stánímztuhne. Příklad 3 Příprava směsi /2a,S,4R/-6-scetyl-/di-n-propylamino/-l,2,2a-3 ,4,5-hexahydrobenz/“cd__7indolu a /2aR,4S/-6-acetyl-/di-n-propylamino-1,2,2a ,3,4,5-hexahydrobenz/'"cd_7indolu

Λ' BShiiEh." , i ' - 31 -

Roztok 0,5 g /1,8 mmol/ 6-kyano-4-/di-m-propylamino/-1 ,2,2a3,,4,5-hexahydrobenz^”cd__7indolu, připravený způsobem,podle příkladu 2, v 75 ml benzenu se zpracovává 5 ml 2,0Mroztoku methylmagnesiumbromidu v diethyletheru. Reakční směssa vaří pod zpětným chladičem po dobu dvou dní. Reakční směsse ochladí a nadbytek Grignardova činidla se rozloží přidá-ním nasyceného vodného roztoku chloridu amonného. Benzenovávrstva se oddělí a promyje se jednou nasyceným vodným rozto-kem chloridu sodného. Organický roztok se odpaří za získáníoleje. Olej se rozpust! ve 25 ml 2N kyseliny chlorovodíkovéa roztok se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Ky-selý roztok se alkaLizuje přidáním nadbytku koncentrovanéhovodného roztoku hydroxidu amonného. Zásaditá směs se extrahu-je dvakrát dichlormethanem. Spojené organické roztoky se pro-myjí jednou nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a vy-suší se síranem hořečnatým. Dichlormethanový roztok se odpa-ří, čímž se získá 0,5 g oleje. Chromatografií tohoto oleje nasilikagelu a za použití ethylacetátu jakožto elučního činid-la se získá 0,4 g /75 % teorie/ produktu ve formě oleje, kte-rý stáním ztuhne na hmotu o teplotě tání 76 až 77 °C.

Analýza pro Ογθ^θ^Ο vypočtenou C 75,96 % H. 9,39 % N 9,32 Υ» nalezeno! ,C 75,66 % H 9,33% N 9,38%? NMR/300 MHz, CDCl^/0,89 /t, 6H, CCH^/, 1,46 /mult, 5H, 3aL - CHgMě/, 2,16 /široké d, 1H, 3 β -H/, 2,49 /mult, 4H, CHgBt/,’ 2,50 /s, 3H, COCH^, 2,87 /dd, 1H, 5 A -&amp;/, 3,15 /mult, 1H, 2 -H/, 3,19 /mult, 2H, 2 ól -HJ? 2 /^-H/, 3,42 /dd, 1H, 5 /5-H/, 3,73 /mult, 1H, 4-H/, 4,04 /široké s,1H, 1-H/, 6,43 /d, 1H, 8-H/, 7,63 /d, 1H/, 7-H/ M.S.i m/e = 300 /fd/ Příklad 4 Příprqva /2aR,4R/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino-1,2,2a,3,4,5-he ^bydr obenz/.“c d_7indolu - 32 -

Vj Jí’-·. «í^AíUjlu.ráiíiUira-·, A.

Směa l-benzoyl-4,5-/endo/epoxy-1,2,2a,3,4,5-hexahydro-benz/"cd_7indolu /21 g, 0,076 mol/ a /+/-R-1-fenethylaminu/18 g, 0,15 mol/ ve 400 ml n-butanolu se vaří pod zpětnýmchladičem v prostředí dusíku po dobu 16 hodin. Reakční směsse zkoncentruje ve vakuu, čímž se získá 30 g oleje jakožtorovná směs dvou diastereomerních aminoalkoholů.

Směs aminoalkoholů se rozpustí ve. 300 ml dichlormethanua najednou se přidá Et^N /30 g, 0,225 mol/ v prostředí du-síku. Reakční směs se ochladí na teplotu -10 °C a pak se poma-lu po kapkách přidá mesylchlorid /12,9 g, 0,011 mol/. Rychlostpřidávání je taková, aby se udržela reakční teplota -10 až+5 °C. Po ukončeném přidávání mesylchloridu se reakční směsmíchá po dobu dalších 30 minut při teplotě -5 °C a pak 30 mi-nut při teplotě okolí. Do reakční směsi se pak přidá 200 mlvody a směs se míchá. Oddělí se dichlormethanový roztok a pro-myje se postupně hydrogenuhličitanem sodným ve formě nasycené-ho roztoku a solankou. Organický roztok se vysuší /síranem ho-řečnatým/ a zkoncentruje se k suchu, čímž se získá směs dia-stereomerních aziridinů. Směs se rozdělí přeparativní chroma-tografií HPLC /za použití silikagelu a jako elučního činidlasystémového gradientu hexan/ethylacetát/. První diastereomeraziridinů, který se eluuje, se označuje jako isomer 1} 6Z6 go teplotě tání 162 až 163 °C z isopropanolu. Druhý diastere-omer, který se eluuje, se označuje jako isomer 2; 7,4 g oteplotě tání 144 až 145 °C z isopropanolu. B. /2aR,4R/-4-amino-1-benzoyl-1 , Z^a^^jS-hexahydrobenz^ cd_7-indol

Roztok aziridinového isomeru 1 /9,4 g, 0,025 mol/ v 90ml ledové kyseliny octové se hydrogenuje za tlaku 414 kPa apři teplotě 60 °c v přítomnosti 5 % palladia na uhlí po dobu16 hodin. Reakční směs se zfiltruje a filtrát se odpaří,čímž se získá olej. Zbytek se rozpustí v 1N kyselině chlorovo-díkové a kyselá směs se extrahuje jednou ethylacetátem.

- 33 - $yselý roztok se alkalizuje přidáním koncentrovaného roztokuhydroxidu amonného. Zásaditá směs. se extrahuje dichlormetha-nem. Diehlořmethanový roztok se promyje solankou a vysuší se/síranem horečnatým/. Organický roztok se odpaří k suchu, čímžse získá 2aE,4R-4-amino-1-benzoyl-,1,2,2a, 3,4,5-hexahydro/":cd_7-indol^ 5,2 g ve formě oleje. C. /2aE,4R/-4-amino-1 -benzcyl-6-brom-1 ,2,2a ,3,4,5-hexahydro-benz/f"cd_7indol

Roztok /2aR,4R/-4-amino-1-benzoyl-1,2,2a,3,4,5-hexahydro-benz/ cd_7indolu /5,2 g, 0,019 mol/ a octanu sodného /6,2 g,0,076 mol/ ve 40 ml ledové kyseliny octové a 10 ml methanoluse ochladí na teplotu 10 °C. Do reakční směsi se přidá po kap-kách roztok bromu /3 g, 0,019 mol/ v 10 ml ledové kyseliny oc-tové. Reakční teplota se udržuje na 10 °C v průběhu přidáváníbromu. Reakční směs se pak míchá při teplotě okolí po dobujedné hodiny. Rozpouštědla se pak odpaří a zbytek se rozpus-tí ve vodě. Kyselý roztok se alkalizuje studeným vodným 50%roztokem hydroxidu sodného. Zásadité směs se extrahuje dva-krát. dichlormethanem. Organický roztok se promyje solankou^vysuší se /síranem horečnatým/ a zkoncentruje se ve vakuu,čímž se získá 6,8 g /2aR,4R/-6-bromové sloučeniny ve formě o-le je. D. /2aR,4R/—1-benzoyl-6-brom-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/"’cd_7indol

Reakční směs /2aR,4R/-4-amino-1 -benzoyl-6-brom-1 ,2,2a- 3,4,5-hexahydrobenz/ cd__7indolu /6,8 g, 0,019 mol/, uhliči-tanu draselného /8,28 g, 0,06 mol/ a n-propyljodidu /10,2 g,0,06 mol/ ve 200 ml CH^CN se míchá pod zpětným chladičem podobu 16 hodin. Reakční směs se zfiltruje a rozpouštědlo seodpaří. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a roztok se extra-huje zředěnou kyselinou chlorovodíkovou. Kyselý roztok sealkalizuje koncentrovaným roztokem hydroxidu amonného.

- 34 - Zásaditá směs se extrahuje ethylacetátem. Organický roztokse. promyje solankou a vysuší se /síranem horečná tým/. Ethylacetát se odpaří, čímž se jako zbytek získá olej. Chromato-grafií /na silikagelu za použití ethylacetátu jako elučníhočinidla/ se získá 2,4 g produktu. E. /2aR,4R/-1-benzoyl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-h exa hy dr o b en z/”c d__7ind o 1

Do roztoku /2aR,4R/-1-benzoyl-6-brom-4-/di-n-prcpylami-no/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/"’cd_7indolu /2,4 g, 5 mmol/ve 100 ml dimethylformamidu se přidá kyanid měSný /1,34 g, 15 mmol/ a jodid měňný /2,85 g, 15 mmol/. Reakční směs se mí-chá pod zpětným chladičem v prostředí dusíku po dobu 16 ho-din. Pak se reakční směs vlije do 500 ml vody. Sraženina seoddělí a promyje se několikrát vodou. Sraženina se suspendu-je ve zředěném roztoku hydroxidu amonného a suspenduje seethylacetátem. Veškerá směs se zfiltruje přes celitovou vrst-vu. Oddělí se ethylacetátový roztok a promyje se solankou.Ethylecetátový roztok se vysuší /síranem horečnatým/ a zkonvcentruje se k suchu, čímž se získá 1,7 g nitrilu ve formě o-leje. E. /2aR,4R/-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hexahydro-benz/”cd_7indol

Do míchaného roztoku 1,7 g /4,4 mmol/ /2aR,4R/-6-kyano- 4-/d.i-n.-propylamino/-1 -2-2a ,3,4,5-hexahydrobenz/“cd_7indoluve 25 ml tetrahydrofuranu, ochlazeného na teplotu -78 °C,v prostředí dusíku se přidá 5,5 ml /8,8 mmol/ 1,6M roztokun-butyllithia v hexanu. Reakční směs se míchá při teplotě-78 °C po dobu 30 minut, načež se nechá ohřát na teplotu -20°C. Do reakční směsi se přidá 20 ml 1N kyseliny chlorovodíko-vé. Směs se extrahuje jednou ethyletherem. Kyselý roztokse alkalizuje přidáním studeného 5R roztoku hydroxidu sod-ného. Zásaditá směs se extrahuje dvakrát dichlormethanem. - 35 -

Spojené organické roztoky se promyjí nasyceným roztokem chlo-ridu. sodného, Dichlormethanový roztok se vysugí síranem ho-řečnatym a odpaří se, čímž se získá 1,3 g oleje. Chromatogra-fií tohoto oleje na silikagelu za použiti ethylacetátu jakož-to elučního činidla se získá 1 g /80 % teorie/ produktu veformě oleje. G. /2aR,4R/-1 -trityl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/”cd_J indol

Do roztoku /2aR,4R/-1-trityl-6-kyano-4-/di-n-propylami-no/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/“čd_7indolu /1 g, 3,5 mmol/a Et^N /354 mg, 3,5 mmol/ v 50 ml methylenchloridu se přidároztok trifenylmethylchloridu /tritylchloridu/ /0,98 g, 3,5mmol/ v 10 ml methylenchloridu po kapkách při teplotě míst-nosti. Reakční směs se míchá po dobu 16 hodin při teplotěmístnosti. Reakční směs se extrahuje vodou a chladnou 1Kkyselinou chlorovodíkovou. Organicky roztok se promyje nasy-ceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasycenou solankou.Organický roztok se vysuší síranem hořečnatým a zkoncentrujese k suchu ve vakuu, čímž se získá zbytek.. Tento zbytek sesuspenduje v teplých hexanech, ochladí se a zfiltruje se k od-stranění nerozpuštěných podílů. Filtrát se zkoncentruje zazískání oleje. Olej se chromatografuje na silikagelu za použi-tí 20 % ethylacetátu v hexanech jakožto elučního činidla,čímž se získá 1,5 g /2aR,4R/-1-trityl-6-kyano-4-/di-n-propyl-amino/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/“cd_7indolu. H. /2aR,4R/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-tetra-hydrobenz/”c d_7indol R ztok 1,6 g /3 mmol/ /2aR,4R/-1-trityl-6-kyano-4-/di-n-pr opy lamino/-1 ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/"cd__7indolu ve100 ml tetrahydrofuranu se zpracovává 20 ml 2,0 M roztokumethylmagnesiumbromidu v diethyletheru. Reakční směs se och-ladí a nadbytek Grignardova činidla se rozloží přidáním na- - 36 - syceného roztoku chloridu amonného. Reakční směs se extrahujeethylacetátem. Organický roztok se odpaří za získání oleje.Tento olej se rozpustí v 25 ml 5N kyseliny chlorovodíkové aroztok se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Kyse-lý roztek se alkslizuje přidáním nadbytku koncentrovaného roz-toku hydroxidu amonného. Zásaditá směs se extrahuje dvakrátethylacetátem. Spojené organické roztoky se promyjí jednounasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem ho-řečnatým. Ethylacetátový roztok se odpaří, čímž se získá 0,9g oleje. Chromátografií tohoto oleje na silikagelu za pou-žití ethylacetátu jakožto elučního činidla se získá 600 mgproduktu. Překrystalováním z hexanů se získá 228 mg /-/ke-tonu. teplota tání 85 až 86 °C; / __7p = “4.94 ° /methanol/ Příklad 5 Příprava /2aS,4S/-6-ac etyl-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/'”cd_7indolu A.

Aziridinový isomer 2 podle příkladu 4A /8,5 g, 0,022 mol/se hydrogenuje za vzniku /2aS,4S/-4-amino-1-benzoyl-1,2,2a-3,Λ 5-hexahydrobenz/”cd_7indolu /4,5 g/ ve formě., oleje. B. /2aS,4S/-4-amino-1-benzoyl-6-brom-1 ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz-/~cd_7indol

Za použití způsobu podle příkladu 4c sa /2aS,4S/-4-amino- 1-benzoyl-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/“bd_7indol /4,5 g, 0,016 mol/ halogenuje za vzniku 5,4 g /2aS,4S/-6-hromovanésloučeniny ve formě oleje. C.

/2aS,4S/-1-benzoyl-6-brom-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/“"cd_7indoL

Způsobem podle příkladu 4D se provádí reakce /2aS,4S/- - 37 4-amino-1 -benzoyl-6-brom-1 ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/”cd__7in-dolu /5,4 g, 0,015 ψοΐ/ s n-propyljodidem /10,2 g, 0,06 mol/v přítomnosti uhličitanu draselného /8,28 g, 0,06 mol/ ve 200ml OILjCN, čímž se po chromatografii získá 3,1 g produktu. D. /2aS, 4S/-1-benzoyl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/”cd__7indol

Za použití způsobu podle příkladu 4E poskytuje /2aS,4S/-1-benzoyl-6-brom-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-bexahydro-benz/”cd_7indol /3,1 g, 7 mmol/ reakcí s kyanidem měďným /1,0g, 21 mmol/ a s jodidem měďným /4,0 g, 21 mmol/ ve 100 mldimethylformamidu 2,5 g nitrilu ve formě oleje. E. /2aS,4S/-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hexahydro-b enz/”c d_7ind o 1

Za použití způsobu podle příkladu 4E za použití 2,5 g/6,5 mmol /2aS\4S/-1-benzoyl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-1 ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/“cd__7indolu a 8,1 ml /13 mmol/n-butyllithia 1,6 g oleje. Chromatografii tohoto oleje nasilikagelu za použití ethylacetátu jakožto elučního činidlase získá 1 g /54 % teorie/ produktu ve formě oleje. E. /2aS,4S/-1-trityl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-he xahydrob enz/”c d_7indol

Za použití způsobu podle příkladu 4G se z produktu pod-le příkladu 4E /1 g, 3,5 mmol/ získá 1,6 g produktu. G. Příprava /2aS,4S/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-l,2,2a,3,4,5-he xahy dr ob en z/”c d__7ind o 1

Způsobem podle příkladu 4H za použití 1,6 g, 2,9 mmolproduktu podle příkladu 4F se získá 1,0 g oleje. Chromatogra-fií tohoto oleje na silikagelu za použiti ethylacetátu jakožto - 38 - elučního činidla se získá 700 mg produktu. Překrystalovánímz hexanů se získá 240 mg /+/ ketonu. Jeho teplota tání je85 až 86 °C. £ (L -= +5,15 ° /methanol/ Příklad 6 Příprava /+/-/2aS,4R/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a- 3,4,5-hexahydrobenz/"c d_7indolu

Shora popsaného způsobu se použije pro přípravu /2aS,4R/-1-benzoyl-6-brom-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hexahydro-benz/”ed__7indolu. Použije se způsobu podle příkladu 4 propřípravu /+/ /2aS,4R/-1-trityl-6-kyano-4-/di-n-propylamin/-1 ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/~cd_7indolu, jehož roztok /2,4 g, 4,6 mmol/ ve 100 ml tetrahydrofuranu se zpracuje 25 ml 2,0 Mroztoku methylmagnesiumbromidu v diethyletheru. Reakční směsse vaří pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. Reakční směsse ochladí a nadbytek Grignardova činidla se rozloží přidá-ním nasyceného roztoku chloridu amonného. Reakční směs se ex-trahuje ethylacetátem. Organický roztok se odpaří za získá-ní oleje. Olej se rozpustí ve 25 ml 5N kyseliny chlorovodí-kové a roztok se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 minut,kyselý roztok se alkalizuje přidáním nadbytku koncentrovanéhoroztoku hydroxidu amonného. Zásaditá; směs se extrahuje dva-krát. ethylacetátem. Spojený organický roztok se promyje jednounasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem ho-rečnatým. Ethylacetátový roztok se odpaří, Čímž se získá 1,4 g oleje. Chromátografií tohoto oleje na silikaglu za pou-žití ethylacetátu jakožto elučního činidla se získá 1^2 g /87% teorie/ produktu. Překrystalováním z hexanu se získá 840 mgproduktu, kterým je /+/keton o teplotě tání 121 až 122 °G. Z -7D = + 66,60 0 /methanol/ Příklad 7

- 39 - í’Zwu2ÍÍl.M;ij^ljdí2jSj-^ittuc«i2iíiÍ3í . 1 'ty ' Příprava /-//2aR,4S/-6-acetyl-4-/di-n-propylamino/-1 ,2,2a-3 ,4,5-hexahydrobenz/""cd_7indolu

Shora popsaného způsobu se použije pro přípravu /2aR,4S/-1 -benzoyl-6-brom-4-/di-n-propylamino/-1., 2,2a, 3,4,5-hexahydro-benz/ cd_7indolu. Použije se způsobu podle příkladu 4 propřípravu /2aR,4S/-1-trityl-6-kya.no-4-/di-n-prcpylamino/-1 ,2,2a ,3,4,5-hexehydrobenz/”cd__7indolu, jehož roztok /3,4 g, 6,5 mmol/ ve 100 ml tetrahydrofuranu se zpracovává 40 ml 2,0M roztoku methylmagnesiumbromidu v diethyletheru. Reakční směsse vaří pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. Reakční směsse, ochladí a nadbytek Grignardova činidla se rozloží přidánímnasyceného roztoku chloridu amonného. Zásaditá směs se extra-huje dvakrát ethylaeetétem. Spojený organický roztok se pro-myje jednou nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší sesíranem hořečnatým. Bthylacetétový roztok se odpaří, čímž sezíská 1,9 g oleje. Ohromatografií tohoto oleje na silikageluse za použití ethylacetátu jakožto elučního činidla získá 1,8g produktu, který se překrystaluje z hexanu, čímž se získá 1,4g produktu o teplotě tání 120 až 121 °C. /“ <ž- _7p = -64,48 0 /methanol/ Příklad 8 Příprava /+/-/2eS,4R/-6-/2-methylpropanoyl/-4-/di-n-propyla-mino/-1 ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/“cd _7indolu /2aSj4R/-1 -trityjL-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a- 3,4,5-hexahydrobenz/”cd_7indor·’ se připraví způsobem podlepříkladu 6. Roztok tohoto hexahydrobenz/ cd^indolu /9,5 g,0,018 mol/ ve 200 ml tetrahydrofuranu se zpracovává 30 ml2,0 M roztoku isopropylmagnesiumchloridu v diethyletheru.Reakční směs se ochladí, nadbytek činidla se rozloží přísa-dou 50 ml 5N kyseliny chlorovodíkové a reakční směs se pakzahřívá na parní lázni po dobu 30 minut. Kyselá směs se ex-trahuje dvakrát ethylacetátem. Spojený organický roztok se - 40 - se pak promyje jednou nasyceným roztokem chloridu sodnéhoa vysuší se síranem horečnatým. Ethylacetátový roztok se od-paří, čímž se získá 1,9 g oleje. CÉromatografií tohoto olejena silikagelu za použití ethylscetétu jakožto elučního činid-la se získá 0,9 g produktu. Překrystalováním z hexanů sezíská 360 mg produktu o teplotě tání 87 až 89 °C. /~ot _7D = + 52,72 0 /methanol/ Příkled 9 Příprava /-/-6-/2-methylpropanoyl/-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a-3,4,5-hexahydrobenz/”cd_7indolu

Postupuje se způsobem podle příkladu 8 za použití /—/—1—trityl-6-kyano-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hexehydro-benz/”cd_7indolu /7 g, 13 mmol/, isopropylmegnesiumchloridu/50 ml, 2 molární roztok v ethyletheru/, tetrahydrofuranu/150 ml/, čímž se získá 3,8 g surového produktu. Chrometogra-fií tohoto produktu na silikagelu za použití ethylacetátu ja-kožto elučního činidla se získá 0,8 g materiálu, který se pře-krystaluje z hexanů, čímž se získá 400 mg produktu, jehož tep-lota tání je 88 až 89 °C. /“oL _7d = -51,0 0 /methanol/ Příklad 10 Příprava /-/-/2aR,4S/-6-/propanoyl/-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/“cd_7indolu

Rnztok /-/-/2aR,4S/-1-trityl-6-kyano-4-/di-n-propyla-mino/-1,2,2a,3,4,5-he hydrobenz/_cd_7indolu /1,5 g, 2,7mmol/ ve 200 ml tetrahydrofuranu se zpracovává 25 ml 2,0 M ·’roztoku ethylmegnesiumbromidu v diethyletheru. Reakční směsse zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. Heakčnísěms se ochladí a rozloží se přísadou 50 ml 5N kyseliny chlo-rovodíkové, načež se zahřívá na parní lázni po dobu 30 minut».

- 41 - Éýselá směs se extrahuje ethylacetátem. Kyselý roztok se alka-lizuje přidáním nadbytku koncentrovaného roztoku hydroxiduamonného. Zásaditá směs se extrahuje dvakrát ethylacetátem.Spojený organický roztok se promyje jednou nasyceným roztokemchloridu sodného a vysuší se síranem horečnatým. Chrometogra-fií tohoto oleje na silikagelu za použití ethylacetátu jakož-to elučního činidla se získá 0,4 g produktu. Překrystalovánímz hexanů se získá 300 mg /-/ketonu o teplotě tání 90 až 91 °C./"* ý-_7-q = -63,68 0 /methanol/ Příklad 11 Eříprava /+/-/2aS,4R/-6-/pentanoyl/-4-/di-n-propylamino/-1,2-2a,3,4,5-hexahydrobenz/”cd_7indolu.

Roztok /+/-/2aS,4R/-1 -trj.tyl-6-kyano-4~/di-n-propylami-no/-! ,2,2a, 3,4,5-hexahydrobenz/”cd_7indolu /1,0 g, 2 mmol/ve 40 ml tetrahydrofuranu se vnese po kapkách do roztokun-butylmagnesiumjodidu /25 mmol/ ve 25 ml diethyletheru. Re-akční směs se zahřívá pod zpětným chladičem pod dobu 16 ho-din. Reakční směs se ochladí a rozloží se přísadou 50 ml 5Nkyseliny chlorovodíkové a pak se zahřívá na parní lázni podobu, 30 minut. Kyselá směs se extrahuje ethylacetátem. Kyse-lý roztok se alkalizuje přidáním nadbytku roztoku hydroxiduamonného. Zásaditá směs se extrahuje dvakrát ethylacetátem.Spojený organický roztok se promyje jednou nasyceným roztokemchloridu sodného a vysuší se síranem hořečnatým. Ethylace-tátový roztok se odpaří, čímž se získá 0,4 g oleje. Tento o-lej se chromátografuje na silikagelu za eluování ethylacetá-tem, čímž se získá 70 mg produktu. Překrysálováním z hexanuse získá 25 mg ketonu o teplotě tání 104 až 105 C. /”<£ _7ώ = + 35,7 ° /methanol/ Příklad 12 Příprava /+/-/2aS,4R/-6-/benzoyl/-4-/di-n-propylamino/-

- 42 1 ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/”cd_7indolu

Roztok /+/-/2aS, 4R/-1 -trityl-6-kyano-4-/di-n-propylami_-no/-1,2,2a,3,4,5-hexehydrobenz/”cd_7indolu /1,5 g, 2,7 mmol/ve 30 ml tetrahydrofuranu se zpracuje 10 ml 3,0 M roztokufenylmagnesiumbromidu v diethyletheru. Reakční směs se zahří-vá pod zpětným chladičem pc dobu 16 hodin. Reakční směs seochladí a rozloží se přísadou 50 ml 5N kyseliny chlorovodíko-vé a pak se zahřívá na parní lázni po dobu 30 minut. Kyselásměs se extrahuje ethylacetátem. tfyselý roztok se alkalizu_je přidáním nadbytku koncentrovaného rozteku hydroxidu amonné-ho. Zásaditá směs se extrahuje dvakrát ethylacetátem. Spoje-ný organický roztok se promyje jednou nasyceným roztokem chlo-ridu sodného a vysuší se síranem horečnatým. Ethylacetátovýroztok se odpaří, čímž se získá 0,6 g oleje. Chromátegrafiítohoto oleje na silikagelu za eluování ethylacetátem se zís-ká 0,3 g produktu. Překrystalováním z hexanů se získá 3ůO mg/+/ketonu o teplotě tání 161 až 162 °C. /” d S-q ~ 1 93,66 0 /methanol/ Příklad 13 Příprava /+/-/2aS ,4R/-6-/2-fenylethanoyl/-4-/di-n-propylami-no/-1 ,2,2a ,3,4,5-hexahydrobenz/'~cd_7indolu

Roztok /+/-/2aS,4R/-l-trityl-6-kyano-4-/čLi-n-propylami-no/-! ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/”cd__7indolu /1 ,0 g, 2 mmol/ve 40 ml tetrahydrofuranu se přidá po kapkách do roztokubenzylmagnesiumchloridu /25 mmol/ ve 25 ml diethyletheru.Reakční směs se zahřívá pod zpětným chladičem po dobu 16 hodinReakční směs se pak ochladí a rozloží se přidáním 50 ml 5Nkyseliny chlorovodíkové a pak se zahřívá na parní lázni podobu 30 minut. Kyselá směs se extrahuje ethylacetátem. Kyse-lý roztok se alkalizuje přidáním nadbytku koncentrovanéhoroztoku hydroxidu amonného. Zásaditá směs se extrahuje dva-krát ethylacetátem. Spojený organický roztok se promyje jed- - 43- nou. nasyceným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranemhorečnatým» fíthylacetátový roztok se odpaří, čímž se získá0,6 g oleje. Chromátografií tohoto oleje na silikagelu zapoužití ethylacetátu jakožto elučního činidla se získá 0,4g produktu. Překrystalováním z hexanu se získá 225 mg /+/ketonu o teplotě tání 104 až 105 °C. / = + 47,62 0 /methanol/ Příklad 14 Příprava /2aS,4R/-6-ethynyl-4-/di-n-propylamino/-1,2,2a,3,4- 5-hexahydrobenz/~čd_7indolu

Rozpustí se 1-benzoyl-/2aS,4R/-6-joď-4-/di-n-propylami-no/-1 ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/”čd__7indol /100 mg, 0,205mmol/ a trimethylcínacetylentrimethylsilan /272 mg, 1,0mmol, 3 ekv/ v bezvodém toluenu /5 ml/, do získaného rozto-ku se pak přidá tetrakistrifenylfosfinpalladium /20 mg, 0,017mmol, 0,05 ekv/. Vzniklý světle žlutý roztok se pak vaří podzpětným chladičem v prostředí dusíku. Po 4 hodinách se re-akční směs nechá ochladit na teplotu místnosti, zfiltruje sea zkoncentruje se do sucha. Zbytek se chromatografuje ha si-likagelu. za použití systému hexany : ethylacetát /1:1/, čímžse. získá žádaný produkt /79 mg, 84 %/. Tento materiál se roz-pustí v 1N roztoku /5 ml/ tetrabutylamoniumfluoridu v tetra-hydrofuranu a míchá se při teplotě místnosti přes noc /12hodin/» Roztok se zředí ethylacetátem /10 ml/ a promyje sepostupně vodou /3x10 ml/, solankou /10 ml/ a vysuší se sí-ranem sodným. Zbytek se chromatografuje na silikagelu za pou-žití systému hexany : ethylacetát /1:1/, čímž se získá směs1-benzoylo./6l %/ a indolinu s odstraněnou chránící skupinouz dusíku /33 %/.

Sloučeniny obecného vzorce I mají selektivní afinitupro 5-HT receptory v mozku s mnohem menší afinitou pro jinéreceptory. Pro svoji schopnost selektivně se vázat na 5-HTreceptory, jsou sloučeniny obecného vzorce I užitečné pro »* * » * -ί »»* ρΑ·’' :ι*« - 44 - ošetřování chorobných stavů, při kterých je příznivá obměnafunkce 5-HI^ receptoru avšak bez vedlejšího působení, kteréby mohlo být spojeno s méně selektivní sloučeninou. Určitésloučeniny podle vynálezu mají podstatnou afinitu pro 5-HT1Ái- pro 5-HT1D receptory a jsou užitečné pro ošetřování chorob-ných stavů, které se mohou příznivě ovlivnit změnou recep-torů. Ovlivňování 5-HT^ a 5-HT^p receptorů podporujř/agonist/nebo inhibuje /antagonist/funkce serotoninu. Jakožto chorob-né stavy se uvádějí úzkost, deprese, nadbytečná žaludeční sekřece, žaludeční nevolnost, vysoký tlak, sexuální dysfunkce,narušení chuti, alkoholismus a kouření, poruchy soudnosti, senilní demence. Pro ošetřování uvedených stavů se používá účinného množství sloučeniny obecného vzorce I. Výrazem "farmaceuticky úůinné množství", zde používaným,se vždy míní množství sloučeniny obecného vzorce I podle vy-nálezu, které je schopné snižovat nepříznivé symptomy urči-tého onemocnění. Příslušnou dávku sloučeniny obecného vzorce v I podle vynálezu, podávanou nemocnému, ovlivňují příslušnéokolnosti, jako je typ podávané sloučeniny, způsob podávání,stav ošetřovaného a podobné skutečnosti. Sloučeniny obecné-ho vzorce I sé mohou podávat různým způsobem včetně orální-ho^ rektálního , transdermálního, subkutánního, intravenozní-ho, intramuskulárního, intranasálního. Zpravidla jedna dáv-ka pro profylaktické ošetřní -.3/: obsahuje přibližně 0,01mg/kg až přibližně 50 mg/kg účinné látky při orálním podává-ni. Výhodná orální dávka obsahuje účinné látky 0,01 až přib-ližně 3,0 mg/kg a především přibližně 0,1 až přibližně 1,0mg/kg. Pokud se sloučenina obecného vzorce I podává orálně,může být nutné podávat sloučeninu obecného vzorce I vícekrátza den, například vždy po přibližně 8 hodinách. V případěintravenozního podávání je množství účinné látky přibližně10 /Ug/kg až přibližně 300 ^ug/kg, s výhodou přibližně20 /Ug/kg až přibližně 50 ^ug/kg tělesné hmotnosti. Sásledující příklady dokládá jí..'schopnost sloučenin obec-ného vzorce I podle vynálezu vzájemně reagovat se serotonino-

- 45 - vjmi 1A a/nebo 1D receptory. Afinity sloučenin ne centráln-f 5-vazbě popsal Taylor a kol.,/J. Pharmacol. Sxp. Ther., 236,str. 118 až 125, 1986/. Membrány pro zkoušky vázání se při-pravují ze samečků krysy Sprague-Dawley /o hmotnosti 150až 250 g/► Krysy se usmrtí odříznutím hlavičky, mozky serychle ochladí a rozříznou se pro získání hippocampi. Hippo-campi se ihned používá nebo se- uloží ve zmrazeném stavu /-70°C/ až do dne použití. Membrány se připravují homogenizacítkáně ve 40 objemech ledově chladného pufru Tris-HCl /50 mM,hodnota pH 7,4 při 22 °C/ za použití Techmar Tissumizeru/65 po 15 s/ a homogenát se odstřeluje po dobu 10 minut při39800 x g. Získaná peleta se opět suspenduje v témže pufrua odstředění a opětné suspendování se opakuje třikrát k pro-mytí membrány. Mezi druhým a třetím promytím se resuspendova-ná membrána inkubuje po dobu 10 minut při teplotě 37 °C k us-nadnění odstranění endogenních ligand. Hotová peleta se opětsuspenduje v 67 mM Tris-HCl o hodnotě pH 7,4 na koncentraci2 mg mokré hmotnosti původní tkáně na 200 /Ul. Homogenizátse skladuje ve zmrazeném stavu /-70 C/ až do dne prováděnízkoušky. Každá trubka pro zkoušku vázání má konečný objem800 /ml a obsahuje: Tris-HCl /50 mM/pargylin /10 /UM/, chlo-rid vápenatý /3 mM/, /“3H._?8-OH-DPAT /1 ,0 nM/, hodnocenousloučeninu ve vhodném zředění a resuspenzi membrány v množ-ství ekvivalentním 2 mg mokré hmotnosti původní tkáně, při-čemž konečná hodnota pH je 7,4. Zkušební trubka se inkubu-je po dobu 10 minut při teplotě 37 °C a obsah se pak rych-le zfiltruje filtry GF/B /předběžně upravenými 0,5 % poly-ethyleniminu/, načež se provede čtyři krát promytí 1 ml le-dově chladného pufru. Radioaktivita filtrů se kvantifikujekapalinovou scintilační spektrometrií a definuje se speci-fické vázání /“3H_78-OH-DPAT na 5-HT1A jakožto rozdíl mezi/"^H. 78-OH-DPAT vázaným v přítomnosti a v nepřítomnosti 10/UM 5-HT.

Afinita určité sloučeniny k 5-HT^A receptoru se vyjad-řuje jako IC5G hodnota, to je koncentrace požadovaná k in-hibici 50% vázání. Hodnoty IC5G se stanoví z 12 bodových - 46 - křivek za použití nelineární regrese /SYSTAT, SYSTAT, INC.,Evanston, IL/. Výsledky tohoto stanovení jsou uvedeny v ta-bulko e I.

Afinity sloučenin k centrálním 5-HT^D vázacím polohámse stanovují modifikovaným způsobem, který popsal Kouringa Peroutka /J. Neurosci., 7, str. 894 až 903, 1987/. Hově-zí mozky, hískané z Pel-Preeze Bioltígicals, a "caudate nuclei“se rozřežMa zmrazí se na teplotu -70 °C až do doby přípra-vy membrány pro provedení zkoušky. V této chvíli se tkáňhomogenizuje ve 40 objemech ledově chladného pufru Tris-HCl/50 mM, hodnota pH 7,4 při teplotě 22 °C/ ze použití TechmarTissumizeru /65 za 15 s/ a homogenizát se odstřeďuje po do-bu 10 minut při 39800 g. Vzniklá peleta se opět suspendujev témže pufru a proces odstřeďování a opětného suspendováníse opakuje třikrát k promytí membrány. Mezi druhé a třetípromytí se zařazuje inkubace suspendovaných membrán po dobu10 minut při teplotě 37 °C k usnadnění odstranění endogenní5-HT. Konečná peleta se opět suspenduje v pufru Tris na kon-centraci 25 mg původní mokré tkáně na ml pro použití kezkoušce vázání. Každé trubka pro zkoušku vázání má konečnýobjem 800 /Ul a obsahuje Tris-HCl /50 mM/, pargylin /10/UM/, askorbát /5,7 mM/, chlorid vápenatý /3. mM/, 8-OH-DPTA/100 nM k maskování 5-HT^ receptorů/, mesulergin /100 nMk maskování 5-HTlc receptorů/, / 3H_75-HT /1,7 až 1,9 nM/,vhodná ředidla zkoušených drog a ekvivalent suspenze mem-brány odpovídající 5 mg mokré hmotnosti původní tkáně, při-čemž konečná hodnota pH je 7,4. Zkušební trubka se inkubujepo dobu 10 minut při teplotě 37 °C a obsahy se pak rychlezfiltrují filtry GE/H /předběžně upravenými 0,5 % polyethy-leniminem/, načež se čtyřikrát promyjí 1 ml ledově chladné-ho pufru. Radioaktivita zadržená najfiltru se kvantifikujekapalinovou scintilační spektrometrií a specifikuje se vá-zání /“3H_7 na 5-HT^ polohy jakožto rozdíl mezi vázáním/”"3H 75-HT v přítomnosti a v nepřítomnosti 10 ^uM 5-KT. ssyraťW’řčSRsw- ^v^<í;&amp;£aJ/í®:,ÍÍ >•1 .' \ - 47 -

Afinity sloučenin na 5-HT receptor se vyjadřuj: to hodnota IC > to je koncentrace potřebné k inhibic: vázání. Hodnoty se stanovují z 12 bodových křivek za tí nelineární regrese /SYSTAT, SYSTAT, lne., Evanston Výsledky tohoto stanovení jsou uvedeny v tabulce I Tabulka I Příklad číslo S-Hl,/’7 5-HT 717 3 0,63 1 -U 7,47 4 0,80 236,38 5 0,31 129,24 6 0,30 6,25 7 6,61 8500,00 8 0,25 1,24 9 54,88 3125,00 10 9,47 9000,00 12 0,34 * 1 ,78 13 0,98 2,70 /1/ IC5Q v nanomol na litr

Sloučenina podle příkladu 14 se hodnotí se zřetelem nasvoji schopnost interakce se serotonin 1A receptorem za pou-žití způsobu, který obecně popsal Wong a kol., J. NeuralTransm., 71, str. 207 až 218, 1988. Sameček krysy Sprague-Dawley /o hmotnosti 110 až 150 g/ z Hsrlah Industries /Cum-berland, IN/ se krmí Purina Chow podle libosti po alespoň3 dny před použitím k výzkumu. Krysy se zabijí odříznótímhlavičky. Mozky se rychle odstraní a mozkové kortexy se od-říznou při teplotě 4 °C.

Mozkové tkáně se homogenizují v 0,32 M roztoku sacha-rozy. Po odstředění za 1000 x g po dobu 10 minut a pak při17000 x g po dobu 20 minut sedimentuje surová synaptosomál-ní frakce. Felety se suspendují ve 100 objemech 50 mM Tris-EC1, při hodnotě pH 7,4, inkubují se při teplotě 37 °C podobu 10 minut a odstředí se při 50000 x g po dobu 10 minut.Proces se opakuje a konečné pelety se suspendují v ledemchlazeném 50 mM Tris-HCl při hodnotě pH 7,4. Způsobem rádio-

ÍÍ^£e?'ÍA'iX«ÍŠÍÍ-.-t*i.ViJ<'W - 48 - ligandové vazby se polohy specificky označí tritiovaným 8-hyd-roxy-2-dipropylamino-l,2,3,4-tetrahydronaftalenem /3H-8-CH-DPAT/, který je identifikován jakožto 5-HT]A receptory.

Způsob vázání /^H-8-0H-DPAT/se může provádět ve stavu těch·niky popsaným způsobem /Wong a kol., J. Neural Transm. 64,atr. 251 až 269, 1985/. Při tomto způsobu se synaptosomálnímembrány, isolované z mozkového kortexu, inkubují při teplotě37 °C po dobu 10 minut v 2 ml 50 mM Tris-HCl;, při hodnotě pH7,4, v 10 yuM pargylinu, v 0,6 mM kyseliny askorbové v 0,4nM ^H-8-0H-DPAT a v 1 až 1000 mM zkoušené sloučeniny. Vázáníse ukonči zfiltrovánim vzorků za sníženého tlaku za použitífiltrů ze skleněných vláken /GFB/. Filtry ose promyjí dvakrát5 ml ledově chladného pufru a umístí se. do scintilačních fiols 10 ml PCS /Amersham/Searle/scintilační kapaliny. Měří se ra-dioaktivita kapalinovým scintilačním spektrometrem. Pro sta-novení nespecifického vázání obsahují oddělené vzorky tak<neznačenou 8-OH-DPAT v 10 ^uM. Specifické vázání ^H-8-0H-DPATse definuje jako rozdíl vázané radioaktivity v nepřítomnostia v přítomnosti 10 ^uM neznačeného 8-OH-DPAT. Výsledky jsou uvedeny v tabulce IX. Hodnota ΙΟ^θ, to zna-mená koncentrace v nanomolech sloučeniny potřebné k inhibicivázání 50 % ^H-8-QH-DPAT je uvedena v tabulce II.

Tabulka II

Vzorek 14 I050 0,5

Zkoušky se prováděly k doloženi působnosti sloučeninobecného vzorce I podle vynálezu proti serotoninu. Hodnotilyse určité sloučeniny ke stanovení jejich schopnosti ovlivňo-vat 5-hydroxyindoly serotonin, 5-hydroxyindol octovou kyse-linu /5HIAA/ a sérum kortikosteron in vivo za použití násle-dujících způsobů.

- 49 -

Sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce 1 se vstřiku-jí subkutánně samečkům albínů krys» Za hodinu se krysám uříZrne. hlavička»

Krev se shromáždí a nechá se shluknout. Po odstředě-ní se sérum zmrazí a skladuje se před analýzou. Celý mozekse vyjme a zmrazí se na suchém ledu pro uskladnění před ana-lýzou. Spektrofluorometričky se měří koncentrace kortikoste-ronu. za použití způsobu, který popsal Sólem a Brinck-Johnson"Evaluation of a Method for Determination of Free Cortico-steroids in Minuté Quantities of Mouše Plasma" /Hodnocenízpůsobů pro stanovení volných kortikosteroidů v nepatrnýchmnožstvích myší plasmy/, Scand. J. Clin. Lab. Invest.,

Suppl. 80, str. 1 až 14, 1965.

Koncentrace hydroxyindoloctové kyseliny /5HIAA/ v celémmozku se stanobuje kapalinovou chromatografií s elektroche- i-Λ mickou detekcí, jak popisuje Fuller a Perry "Effects of Bus-pirone and its Metabolite, 1-/2-pyrimidinyl/piperazine, onBrain Monoamines and Their Metabolites in Rats" /Vlivy bus-pironu a jeho metabolitů, 1-/2-pyrimidinyl/piperazinu namozkové monoaminy a jejich metabolity v případě krys/, J.Pharmacol. Exp. Ther., 248, str. 50 až 156, 1989- Výsledkytéto zkoušky jsou uvedeny v následující tabulce III» - 50 -

Tabulka III

Mozkové 5-hydrcxyindoly / n mol/g/ - Příklad Jilslo/d V^a^mq/ya) Sernfnnin 5--ΗΙΛΑ Sérový kort-ikňst-prnn (ιισ/lOOml) kontrol a Příklad 6(0.003)(0,03)(0,3) Příklad 7(0,003)(0,03)(0,3) kontrol aPříklad 8 (0,003) (0,03) (0,3) Příklad 5(0,003)(0,03)(0,3) 2,76 ±0,12 2.46 ± 0,142,99 ± 0,063,08 ± 0,04* 2,75 ± 0,052,57 ± 0,102,85 ± 0,081,66 ± 0,04 2,13 ± 0,10 1,81 ± 0.14 i 1,58 ± 0,08* 1,41 ± 0,03* 2,06 ± 0,13 1,87 ± 0,07 1,77 ± 0,171,68 ± 0,12 3.8 ± 0,2 5.8 ± 1,010,6 ± 2.0* 42,2 ± 1,1* 3.8 ± 0,5 6,5 ± 2,6 8.4 ± 4,0 3.4 ± 0,2 1,88 ± 0,05*2,26 ± 0,06*2,26 ± 0,16* 1,83 ± 0,081,90 ± 0,101,69 ± 0,06 1,56 ± 0,101,34 ± 0,06* i 1,30 ± 0.07* 1 i 1,68 ± 0,10. 1,91 ± 0,061,74 ± 0,04 3.6 ± 0,727,1 ± 6,4*42^0 ± 0,4* 4,1 ± 0,5 0,0 ± 1;6 6.7 ± 2,0 * Významný rozdíl se zřetelem na kontr

skupinu /P<^C,05/

Sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu se s výho-dou pro podávání zpracovávají na farmaceutické prostředky.Vynález se proto také týká farmaceutických prostředků,které obsahují sloučeninu obecného vzorce I podle vynálezua farmaceuticky vhodný excipient pro tuto sloučeninu obecné-ho vzorce I.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu se připravují !Ía1iV 3 .ť Ό..Λ - 51 - o SQbg známými způsoby ze snadno dostupných složek. Při výro-bě. prostředku podle vynálezu se účinná látka zpravidla mísís excipientem, ředí se excipientem nebo se uzavírá v nosiči,kterým může být kapsle, sáček, papír a jiný obal. Pokud je ex-cipient současně ředidlem, může být pevný, polopevný nebo ka-palný a působí jakožto nosič, pojidlo nebo prostředí pro ú-činnou látku obecného vzorce I. Prostředek podle vynálezu mů-že. mít formu tablet, pilulek, prášků, kosočtverečků, sáčků,váčků, elixírů, suspenzí, emulzí, roztoků, sirupů, aerosolů/v pevném nebo v kapalném prostředí/, mastí obsahujících na-příklad hmotnostně až 10 % účinné látky, měkkých a tvrdýchželatinových kapslí, čípků, sterilních vstřikovatelných roz-toků a sterilúčh prášků.

Jakožto příklady vhodných excipientů se uvádějí laktosa,dextrosa, sacharosa, sorbitol, mannitol, škroby, klovatina,akacia, fosforečnan vápenatý, algináty, tragakanth, želatina,křemičitan vápenatý, mikrokrystálická celulóza, polyvinylpyrro-lidon, celulóza, voda, sirup, methyleelulóza. Prostředky mo-hou také obsahovat mazadla, jako je například mastek, stea-rát hořečnatý a minerální olej, smáčedla, emulgační a suspen-zační přísady, konservační činidla, jako jsou napříkladmethylhydroxybenzoát a propylhydroxybenzoát, sladidla a ochu-covací přísady. Prostředky podle vynálezu se mohou formulo-vat tak, aby měly rychlé působení, prodloužené nebo odlože-né působení účinné látky po podání nemocnému za použití o so-bě známých způsobů.

Prostředky se s výhodou vyrábějí v jednotkové dávkovačiformě, přičemž každá dávka obsahuje přibližně 0,5 nig ažpřibližně 50 mg, zpravidla přibližně 1 mg až přibližně 10mg účinné látky. Výrazem "jednotková dávkovači forma" sezde vždy míní fyzikálně oddělené jednotky, vhodné pro po-dávání lidem i jiným savcům, přičemž každá dávka obsahujepředem stanovené množství účinné látky, vypočtené pro dosa-žení žádoucího terapeutického působení, spolu se vhodnýmnosičem. Příklady následujících prostředků vynález opět toliko 1'

’· V. ’;· - 52 - t**>« tjt j -> t '> ,''\>·-·;·

Jz<iiuiA.í.\^xUiaixťíÝ)w: íHWVtwalrtW''’, < t, >, ^vL· objasňují, nijak jej však neomezují. Farmaceuticl^ý prostředek 1 Tvrdé želatinové kapsle se připrs ivují za použití násle dujících složek Množství /mg/kapsle/ 6.-ac etyl-4-/di-n-propylamino/-1 ,2,2a- 3,4, 5-hexahydrobenz/""cd/7indol 25 škrob, sušený 425 stearát hořečnatý 10 celkem 460

Shora uvedené složky se smísí a plní se. do tvrdých že-latinových kapslí v množství 460 mg na jednu kapsli.

Farmaceutický prostředek 2

Tablety se připravují za použití následujících složek:

Množství /mg/tableta/ 4-/di-n-propylamino/-6-/2,2-dime thy1-propsnoyl/-1,2,2a,3,4,5-hexahydro- benz/“cd_7indol 25 celulóza, mikrokrystalická 625 koloidní oxid křemičitý 10 kyselina stearová 5

Složfcy se smísí a slisují se na formu tablet vždy ohmotnosti 665 mg.

Farmaceutický prostředek 3

Suchý prášek ke vdechování se připravuje za použití ná-sledujících složek

Hmotnostní procenta 4-/diethylamino/-6-propanoyl-1,2,2a-3,4,5-hexahydrobenz/ cd_7indol 5 . laktosa ' 95 - 53 - Účinná látka se smísí s laktosou a směs se přidá do su-chá směsi pro vdechování. farmaceutický prostředek 4

Tablety,obsahující vždy 60 mg účinné látky, sa připravu-jí z následujících složek 4-/npropylamino/-6-/2-methylpropsnoyl-1 ,2,2a- ύ' 3,4,5-hexahydrobenz/~indol_7 vinná sůl 60,0 mg škrob 45,0 mg mikrokrystalická celulóza 35,0 mg polyvinylpyrrolidon ve formě 10% vodného roztoku 4,0 mg natriumkarboxymethylovaný škrob 4,5 mg stearát hořečnatý 0,5 mg mastek 1 .0 mg celkem 150,0 mg v/ Účinná látka, škrob a celulóza se provedou sítem U.S. čís-lo 20 mesh /průměr ok 425 yum/ a důkladně se promísí. Roztokpolyvinylpyrrolidonu se smísí se vzniklým práškem a směs seprovede sítem U.S. číslo mesh 4 /4750 yum/. Takto vyrobenégranule se suší při teplotě 50 až 60 °C a pak se vedou sítemU.S. číslo mesh 16 / 1180 /Um/, Natriumkarboxymethylovanýškrob, stearát hořečnatý a mastek se vedou sítem U.S. číslomesh 30 /600 ^urn/ a pak se přidají do připravených granu-lí, promíchají se s slisují se na tabletovacím stroji, čímžse získají tablety o hmotnosti 150 mg.

Farmaceutický prostředek 5

Kapsle,obsahující vždy 20 mg účinné látky, se připra-vují za použití následujících složek:/2aS,4R/-4-/di-n-propylamino/-6-/2,2-dimethyl- prop;anoyl/-1 ,2,2a, 3,4,5-hexahydrobenz/“cd_7- indol 20 mg škrob 69 mg stearát hořečnatý 1 mg - 54 -

Celkový obsah složek je 190 mg. Účinná látka, celulóza,škrob a stearát horečnatý se navzájem smísí, vedou se sítemčíslo U.S. mesh 20 /průměr otvorů 850 /Um/ a plní se do tvr-dých. želatinových kapslí, vždy 190 mg do kapsle.

Farmaceutický prostředek 6 Cípky, vždy o hmotnosti 225 mg, se připravují za použi-tí následujících složek: 4-/di-n-propylamino/-6-benzoyl-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/”cd_7indol 225 mg glyceridy nasycené mastné kyseliny do 2000 mg Účinná látka se vede sítem číslo U.S. mesh 60 /průměrotvorů 250 yum/ a suspenduje se v glyceridech nasycené mast-né kyseliny předem roztavené za použití minimálního nutnéhotepla. Směs se pak lije do formy na čípky o nominální kapa-citě 2 g a nechá se ochladit.

Farmaceutický prostředek 7

Suspenze,obsahující vždy 50 mg účinné látky v 5 ml dáv-ce,sa připravuje za použití následujících složek: 1-methyl-4-/n-propylamino/-6-/3-methylbutanoyl/- 1 ,2,2a,3,4,5-hexahydřobenz/'”cd_7indol 50,00 mg xanthanová klovatina 4,00 mg natriumkarboxymethylceluloza /11 %/ a mikro- krystalická celulóza /89 %/ 50,00 mg sacharosa 1,75 g benzoát sodný 10,00 mg vonná přísada q.v. barvivo q.v. čištěná voda do 5,00 ml Účinná látka, sacharosa a xanthanová klovatina se smí- sí, vedou se sítem číslo U.S. mesh 10 /průměr ortvorů 2000 /Um/ a pak se smísí s předem připraveným roztokem mikrokrys- talické celulózy a karboxymethylcelulózy ve vodě. Pak se ? j!i? ť Λι <3Λ /£"> *'*- - 55 - přidá benzoát sodný, vonná přísada a barvivo a zředí sa tro-chou vody za míchání. Nakonec se přidá dostatečné množstvívody k dosažení požadovaného objemu.

Farmaceutický prostředek 8

Kapsle, obsahující vždy 150 mg účinné látky, se připra-vuji za použití následujících složek: 4-/di-n-propylamino/-6-acetyl-l, 2,2a,3,4,5- i·.? hexahydrobenz/""cd__7indol 50 mgškrob. 507 mgstearát hořečnatý 3 mgcelkem 560 mg -:y

Účinná látka, celulóza škrob a stearát hořečnatý se smí-sí, vedou se sítem číslo U.S. mesh 20 /průměr otvorů 850 yum/a plní se vždy v množství 560 mg do tvrdé želatinové kapsle.

Průmyslová využitelnost 4-Amino-6-substituovaný hexahydrobenz/ cd_7 indol uži-tečný pro ošetřování onemocnění, která se mohou příznivě ov-livňovat změnou 5-HT^ receptorů. i;

Claims (20)

“ *"Λρ^Ρ?*ΗΑΜνΊ »*^<**}Λ·ΐτ)Γ“»*·ίí.< 1 '4 PATENTOVÉ

1 . V poloze 6 substituovaný hex. ahydrobenz/"*cd_J7indolobecného vzorce I

kde zněměná r1 atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uh- líku, alkenylovou skupinu s 3 až 4 atomy uhlíku,cyklopropylmethylovou skupinu, fenylovou sku-pinou, substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 4atomy uhlíku, skupinu obecného vzorce -GOR4, /CH^S/C^alkyl/ nebo -/CH^CONR^6, 2 R atom vodíku, alkylovou skupinu s t až 4 atomy uhlí- ku, alkenylovou skupinu s 3 až 4 atomy uhlíkunebo cyklopropylmethylovou skupinu, R^ atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uh- líku nebo skupinu blokující aminoskupinu, n 1 až 4, R4 atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uh- líku, halogenalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uh-líku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo fe-nylovou skupinu, R^ a r6 na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinus 1 až 4 atomy uhlíku nebo cykloalkylovou skupinus 5 až 8 atomy uhlíku, R*^ alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, substitu- - 57 - l1 § ovanou alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, ary-lovou skupinu, substituovanou arylovou skupinu, aryl-alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovémpodílu, substituovanou arylalkylovou skupinu s 1 až4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, cykloalkylovouskupinu s 3 až 7 atomy uhlíku nebo cykloalkylovouskupinou s 3 až 7 atomy uhlíku substituovanou methy-lovou skupinu za podmínky, že v případě, kdy A zna-mená G=G, pak R znamená alkylovou skupinu s 1 až7 atomy uhlíku, substituovanou alkylovou skupinu s 1až 7 atomy uhlíku, arylovou skupinu, substituovanouarylovou skupinu, arylalkylovou skupinu s 1 až 3 a-atorny uhlíku v alkylovém podílu, substituovanou a-rylalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylo-vém podílu nebo cykloalkylovou skupinu s 3 až 7 ato-my uhlíku, A skupinu vzorce G = 0 CHOH nebo C = C a jeho farmaceuticky vhodné soli.

2* V poloze 6 substituovaný hexahydrobenz/^ cd__7indol pod-le nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená A skupinu Cr=O, 1 2 EL a R na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylovcu skupinu s 3 až 4atomy uhlíku, skupinu -/CH2/nS/G]_^alkyl/ nebo cyk-lopropylmethylovou, R^ atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uh- líku, n 2 až 4 a ostatní symboly mají v nároku 1 uvedený význam, a jeho far-maceuticky vhodné soli.

3. V poloze 6 substituovaný hexahydrobenz/“cd_7indol pod-le nároku 2 obecného vzorce I, kde znamená R? alkylovou sku-pinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s .1 až 4 atomyuhlíku substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

i Λ· !<·

Pí £ 3 ϊ!Ϊ! · . * ' l·' - 58 - í fenylovou skupinu, fenylakylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlí-ku v alkylovém podílu, atomem halogenu substituovanou fenyl-alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílunebo cykloalkylovou skupinu s 3 až 7 atomy uhlíku, a ostat""ní symboly mají v nároku 2 uvedený význam a jeho farmaceutic-ky vhodné soli.

4. V poloze 6 substituovaný hexahydrobenz/~čd__7indol pod-le nároku 1 obecného vzorce I, kde znamená A skupinu C=0, R*a R^ ne sot)ě nezávisle alkylovou skupinu s 2 až 3 atomy uhlí-ku, atom vodíku, R? alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlí-ku a ostatní symboly mají v nároku 1 uvedený význam a jehofarmaceuticky vhodné soli.

5» V poloze 6 substituovaný hexahydrobenz/~cd 7indol pod-1 2 le nároku 4 obecného vzorce I, kde znamená R a R na sobe ne-7 závisle vždy n-propylovou skupinu, R methylovou nebo ethy-lovou skupinu a ostatní symboly mají v nároku 4 uvedený vý-znam a jeho farmaceuticky vhodné soli.

V poloze 6 substituovaný hexehydrobenz/""cd__7indol pod-le nároku 1 obecného vzorce X, vybraný ze souboru zahrnujícího4-/di-n-propylamino/-6-ac etyl-1 , 2,2a, 3,4,5-hexahydrobenz/ cd_7-indol, 4-/di-n-propylemino/-6-/2,2-dimethylpropanoyl-1,2,2a- 3.4.5- hexahydrobenz/”cd__7indol, 4-/diethylamino/-6-propanoyl-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/”cd_7indol, 4-/di-n-propylamino/- 6-benzoyl-1 ,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/”cd__7indol, 4-/n-pro-pylamino/-6-/2-methylpropanoyl/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz-/"cd_7 indol, 4-/n-proqpylamino/-6-/3-methylbutanoyl/-1 ,2,2a- 3.4.5- hexahydrobenz/”cd_7indol, 4-/di-n-propylamino/-6-ben-zoy.1-1 ,2,2a ,3,4, 5-hexahydrobenz/”cd__7indol, 4-/N-n-propyl-N-cyklopropylmethyl/amino-6-propanoyl~1 ,2,2a,3,4,5-hexahydro-benz/~cd,_Zindol a jejich farmaceuticky vhodné soli.

7. V podstatě čistý stereoisomer sloučeniny obecnéhovzorce I podle nároku 1 až 6 a jeho farmaceuticky vhodnésoli.

- 59 - 5

8. Stereoisomer podle nároku 7 obecného vzorce I, kdekonfigurace v poloze 2a je S a v poloze 4 je S nebo v pqlo—ze 2a je B a v poloze 4 je R, přičemž jednotlivé symboly majív nároku 7 uvedený význam.

9. Stereoisomer podle nároku 7, kterým je /2aS,4S/-4-/di-n-propylamino/-6-ac etyl-1 ,2,2a, 3,4,5-hexahydrobenz/“cd_7-indoi.

IQ. Stereoisomer podle nároku 7, kterým je /2aR,4R/-4-/di-n-propylamino/-6-aceiyl/-1,2,2a,3,4,5-hexahydrobenz/“cd_7-inďol.

11. Stereoisomer podle nároku 7, kterým je /2aS,4S/-4-/di-n-propylamino/-6-/2-methylpropanoyl/-1,2,2a,3,4,5-hexa-hydrobenz/“čd_7indol.

12. Stereoisomer podle nároku 7, kterým je /2aR,4R/-4-/di-n-propylamino/-£-/2-methylpropanoyl/-1,2,2a,3,4,5-hexa-hydrobenz/“cd_7indol.

13. V poloze 6 substituovaný hexahydrobenz/”cd__7indol podle nároku 1 obecného vzorce 1, kde znamená A skupinu C=C, 12 — R a R na sobě nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu s 3í až 4atomy uhlíku nebo cyklopropylmethylovou skupinu, R atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 az 4 atomy uhlí- ku nebo skupinu blokující aminoskupinu, T R alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku, substituo- vanou alkylovou . skupinu s 1 až 7 atomy uhlíkuv alkylovém podílu, arylovou skupinu, arylalkylovouskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylovém podílu,substituovanou arylovou skupinu, substituovanouarylalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebocykloalkylovou skupinu s 3 až 7 atomy uhlíku, a jejich farmaceuticky vhodné soli.

;;; ·;?·· 14. V poloze 6 substituovaný hexahydrobenz/-cd_7indol - 60 - podle nároku 13 obecného vzorce I, kde znamená R1 a R2 nasobě nezávisle alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, R^atom vodíku a alkylovou skupinu s 1 až 7 atomy uhlíku,alkoxyskupinou substituovanou alkylovou skupinu s 1 až 7 ato-my uhlíku, fenylovou skupinu, fenylalkylovou skupinu s 1 až3 atomy uhlíku v alkylovém podílu, atomem halogenu substitu-ovanou fenylalkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alky-lovém podílu nebo cykloalkylovou skupinu s 3 až 7 atomy uh-líku.

15. V podstatě čistý stereoisomer sloučeniny podle náro-ku 13, přičemž konfigurace v poloze 2a je S e v poloze 4 jeS nebo v poloze 2a je R a v poloze 4 je R.

16. V poloze 6 substituovaný hexshydrobenz/”čd_7indolpodle nárokuΊ obecného vzorce I, kde znamená A skupinu CHOH, 1 2 R. a R 'na sobe nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu s 1až 4 atomy uhlíku, alkenylovou skupinu s 3 až 4 ato-my uhlíku nebo cyklopropylmethylovou skupinu, R^ atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlí- ku nebo skupinu blokující aminokkupinu, R? alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, substituo- vanou alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku, arylo-vou skupinu,, substituovanou arylovou skupinu, aryl-alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovémpodílu, substituovanou arylalkylovcu skupinu s 1 až4 atomy uhlíku v alkylovém podílu, nebo cykloalkylo-vou skupinu s 3 až 7 atomy uhlíku, a jelÍQ . farmaceuticky vhodné solil

17. V poloze 6 substituovaný hexahydrobenz/^ cd_7indolpodle nároku 16 obecného vzorce I, kde znamená R a R nasobě nezávisle alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhoíku, R^atom vodíku nebo skupinu blokující aminoskupinu, vybranouze souboru zahrnujícího skupinu benzoylovou, benzylovou atriisopropylsilylovou.

- 61

18. Farmaceutický prostředek ovlivňující 5-HI^ recepto-vý, vyznačující se tím, že obsahuje jakoúčinnou látku v poloze 6-substituovaný hexahydrobenz/~cd 7-indoX podle nároku 1 až 17 spolu s alespoň jedním farmaceu-ticky vhodným excipientem.

19. V poloze 6 substituovaný hexahydrobenz/~cd_7indolpodle nároku 1 až 17 použitelný jakožto farmaceuticky .účin-ná látka.

20. Způsob přípravy v poloze 6 substituovaného hexahydro- £ benz/ cd_7indolu podle nároku 1 až 17 obecného vzorce I, kdeznamená R^ atom vodíku a ostatní symboly mají v nároku 1 až ' :¾ 17 uvedený význam, vyznačující se tím, že g <;.· se hydrolyzuje nebo hydrogenuje sloučenina obecného vzorce I, -ύ < kde znamená RJ skupinu blokující aminoskupinu.

•Λ'