CS248021B2

CS248021B2 - Agent for encreasing the utilization of fodder with ruminants

Info

Publication number: CS248021B2
Application number: CS82381A
Authority: CS
Inventors: Emerson L Potter
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1981-01-22
Filing date: 1982-01-19
Publication date: 1987-01-15
Also published as: DK24682A; EP0057072A1; AU556299B2; DE3261865D1; IE820119L; RO84197A; NZ199522A; ATE11207T1; KR830008503A; GT198273311A; ZA82337B; GB2091555B; IE52407B1; JPS57141253A; CA1190788A; GR75160B; IL64801A0; GB2091555A; FI820161L; RO84197B

Description

Je známa celá rada chemických látek, které zvyšují využití krmivá u přežvýkavců. Například monensin již má své široké použití při zvyšování využití krmivá u přežvýkavců, například u skotu a ovcí. Monensin, jakož i řada dalších antibiotik typu polyetherů a příbuzné sloučeniny mění mechanismus využití krmiv u přežvýkavců, účinek spočívá převážně v příznivém ovlivnění fermentace. Mikroorganismy ve vyvinutém bachoru přežvýkavce rozkládají uhlohydráty, které jsou hlavní složkou potravy přežvýkavců za vzniku pyrohroznanů. Pyrohroznany jsou dále metabolizovány mikrobiologickým způsobem za vzniku octanů, máselnanů a propionanů. Všechny tyto látky se uvádějí jako těkavé alifatické kyseliny (VTA). Octany, máselnany a propionany jsou využívány jak к růstu, tak při produkci energie, propionany jsou však nejúčinnější a využitelnější než ostatní metabolity. Některé ze známých růstových látek a látek, podporujících využití krmivá proto podporují u přežvýkavců uvedené funkce tak, že zvyšují tvorbu propionanů z uhlohydrátů na úkor produkce octanu a máselnanů.

Raun a další v J. Ani. Sci., 43, 670 (1976) prokazují, že účinnost monensinu na využití krmivá dosahuje maxima při dávce 30 g na tunu krmivá. Podobné maximum v účinnosti při určité dávce je možno pozorovat u většiny dalších látek se stejným účinkem včetně glykopeptidů jako jsou avoparcin, aktaplanin a podobně. Tento maximální účinek spočívá patrně v tom, že není možno zvýšit tvorbu propionanů v bachoru nad určité množství.

Je proto velmi překvapující, že po podání kombinace některých těchto látek, a to glykopeptidů a polyetheru zvířatům s vyvinutým bachorem se dále zvyšuje účinek na využití krmiv a dále -se zvyšuje i produkce propionanů, než je tomu v případě, že se kterákoli ze svrchu uvedených látek podá v optimální dávce.

Vynález si klade za úkol navrhnout prostředek, zvyšující využití krmivá a založený na synergním účinku kombinace svrchu uvedených látek, podání tohoto prostředku má mít za následek lepší využití krmiv u přežvýkavců.

Předmětem vynálezu je tedy prostředek pro zvýšené využití krmiv u přežvýkavců, vyznačující se tím, že obsahuje polyetherové antibiotikum monensin nebo narasin, a glykopeptidové antibiotikum aktaplanin, přičemž tyto složky jsou přítomné v hmotnostním poměru 1: 10 až 10 : 1.

Při použití prostředku podle vynálezu je možno zvýšit využití krmiv u přežvýkavců tak, že se těmto zvířatům podá perorálně kombinace antibiotika typu polyetheru a antibiotika typu glykopeptidů v množství, které zvyšuje tvorbu propionanů u zvířat s vyvinutou funkcí bachoru.

Sloučeniny, které se užívají v prostředku podle vynálezu, jsou známy a běžně se dodávají.

Antibiotika typu polyetheru, užívaná jako součást prostředku podle vynálezu, jsou produkována rodem Streptomyces. Jde o cyklické ethery. Tato skupina sloučenin byla shrnuta v publikaci Kirk-Othmer: Encyclopedia of Chemical Technology, sv. 3, 3. vydání (John Wiley a Sons. Ind., 1978], str. 47 a následující, dále v Annual Reports in Medical Chemistry sv. 10 (Academia Press, N. Y. 1975) a str. 246 a další a v J. ChromLib., sv. 15 (Elsevier Scientific Publishing Cc., N. Y. 1978), str. 488 a další.

Stejně jako je tomu u jiných produktů fermentace, řada antibiotik typu polyetheru sestává z více než jednoho faktoru. Různé faktory jsou použitelné v prostředku podle vynálezu. Mimoto řada těchto antibiotik snadno vytváří ethery, estery, soli nebo jiné deriváty, které jsou účinné jako takové nebo jsou převáděny in vivo na původní antibiotika.

Příkladem antibiotik typu polyetheru, která je možno použít v prostředku podle vynálezu, jsou známá antibiotika, která zvyšují tvorbu propionanů v bachoru, a to monensin včetně různých faktorů А, В a C, a narasin.

Zvláště výhodným polyetherem pro využití v prostředku podle vynálezu je monensin, široce používaná sloučenina pro lepší využití krmivá u přežvýkavců, jak bylo popsáno v US patentu č. 3 839 557. Pod pojmem „monensin“ se rozumí různé účinné faktory, soli, například sodná sůl monensinu a estery monensinu, například karbamát a podobně.

Stejně jako svrchu uvedená antibiotika typu polyetheru jsou známa i antibiotika typu glykopeptidů, která rovněž tvoří součást prostředku podle vynálezu. Typickým antibiotikem typu glykopeptidů, jehož vliv na využití krmiv je znám, je aktaplanin.

Prostředek podle vynálezu při zvláště výhodném složení obsahuje jako jednu složku, a to jako antibiotikum polyetherového typu monensin ve směsi se synergním množstvím aktaplaninu.

Jak již bylo uvedeno, složky prostředku podle vynálezu jsou známé a řada z nich se běžně dodává. Monensin byl například poprvé popsán v US patentu č. 3 501 568. Soli s estery monensinu a jejich použití ke zvýšení využitelnosti krmiv u přežvýkavců byly popsány v US patentu č. 3 839 557. Řada karbamátů monensinu, jichž je možno užít к urychlení růstu, je popsána v evropském patentu č. 11-859. Všechny tyto látky jako takové rovněž zvyšují využití krmivá u přežvýkavců.

V US patentu č. 4 038 384 a 4 085 224 je popsána výroba a použití narasinu. Narasin bývá někdy nazýván také jako A-28086.

Polyetherová antibiotika, tak jak byla svrchu popsána, se užívají ve směsi *s gly248021 kopeptidovými antibiotiky, o nichž je také známo, že zvyšují využití krmiv u přežvýkavců. Tyto sloučeniny jsou ve vodě rozpustné a jako antibiotika jsou účinné proti grampozitivním bakteriím.

V US patentu č. 3 928 571 se popisuje použití různých sloučenin glykopeptidového typu pro lepší využití krmivá u přežvýkavců. Zvláš-ё je popsáno známé antibiotikum A-4696 (známé také jako aktaplanin).

Jak již bylo uvedeno, předmětem vynálezu je prostředek, který sestává z polyetherového antibiotika a z glykopeptidového antibiotika. Složky tohoto prostředku jsou použity v množství, které je v uvedené kombinaci synergní. Prostředek zajišťuje produkci většího množství propionanu v bachoru zvířat s vyvinutou bachorovou funkcí než je možno zajistit kteroukoli jednotlivou složkou prostředku při jejím podání v optimální dávce. Podání prostředku podle vynálezu má tedy za následek zcela neočekávané zvýšení produkce propionanu a tím i neočekávané zvýšení využití krmivá.

Prostředek podle vynálezu tedy sestává z polyetheru a synergního množství glykopept^;du, tak jak byly tyto látky svrchu popsány. Hmotnostní poměr jednotlivých složek se obvykle pohybuje v rozemzí 1 až 10 dílů polyetheru a 1 až 10 dílů glykopeptidu. Je typické, že maximální dávka každé složky pro použití prostředku podle vynálezu je v podstatě shodná s maximální dávkou této látky v případě jejího samostatného použití к urychlení růstu a ke zlepšení využití krmivá. Například monensin zajišťuje maximální zlepšení při využití krmivá v dávce 30 g na tunu krmivá, to jest při koncentraci 11 ppm, jak bylo popsáno v publikaci Raun a další, J. Ani, Sci. 43, 670 (1976). Podobně aktaplanin v dávce 30 g na tunu krmivá vyvolává největší vzestup produkce propionanu. Při výhodném složení prostředku podle vynálezu obsahuje tento prostředek jako první složku monensin, obvykle sůl monensinu, která se běžně dodává a obsahuje především faktor A s malým množstvím faktoru В, a mimoto aktaplanm jako druhou složku. Tato směs se přidává do krmivá přežvýkavců v dávce 15 až 50 g monensinu na tunu krmivá a 15 až 50 g aktaplaninu na tunu krmivá. Ve výhodném složení se podává 30 g monensinu a 30 g aktaplaninu současně na tunu krmivá nebo 20 g narasinu a 20 g aktaplaninu.

Prostředek podle vynálezu je možno přežvýkavcům podávat perorálně, například ve směsi s vhodným nosičem, jako je krmivo pro tato zvířata. Tento způsob je zvláště vhodný pro krmná telata. Dále uvádíme typické složení krmivá pro toto použití.

в Složka	%
hrubě mletá kukuřice	69,95
mleté kukuřičné palice	10,00
sójová mouka (50 % bílkoviny)	8,00
vojtěšková mouka	5,00
melasa	5,00
močovina	0,60
hydrogenfosforečnan vápenatý	0,50
uhličitan vápenatý	0,50
sůl	0,30
vitamín A a D2 — směs	0,07
směs -s obsahem vitamínu E	0,05
směs stopových prvků	,0,02

100,0

К tomuto krmivu se pak přidá směs podle vynálezu v poměru 1 :1 v množství 40 až 100 g směsi na tunu krmivá. Výsledná krmivová směs se pak podává přežvýkavcům v množství 2,5 až 15 kg denně. Tímto způsobem je možno dosáhnout urychlení růstu a zvýšeného využití krmivá. Prostředek podle vynálezu může být podáván také s krmnými dávkami s obsahem trávy, siláže a podobně a je možno jej podávat i zvířatům, která nejsou chovaná na výkrm.

Dalším možným způsobem podávání prostředku podle vynálezu je zpracování svrchu uvedené směsi na větší pevnou formu, například na kuličku, z níž se v bachoru pomalu uvolňuje účinná látka. Perorálně se podává jedna nebo větší počet kuliček tohoto typu к zajištění stejnoměrného uvolňování účinné složky v bachoru po delší dobu, například po dobu 3 měsíců nebo ještě déle. Toto podání je zvláště výhodné v případě, že jde o pasoucí se zvířata, například o krmná telata a podobně.

Kuličky svrchu uvedeného typu s obsahem prostředku podle vynálezu a nosiče je možno vyrobit tak, že se smísí vhodná kombinace antibiotik, tak jak byly tyto kombinace svrchu uvedeny s kopolymerem, vzniklým kondenzací 60 až 95 hmotnostních dílů kyseliny mléčné a 40 až 5 hmotnostních dílů kyseliny glykolové. Je například možno postupovat tak, že se prostředek s obsahem 20 g monensinu a 20 g avoparcinu smísí s 80 g kopolymeru, vzniklého z 80 dílů kyseliny mléčné a 20 dílů kyseliny glykolové. Takto vzniklou směs je možno zpracovávat také na tablety nebo je také možno postupovat tak, že se s výhodou uvedená směs vloží do ocelového válce, otevřeného na obou koncích nebo do podobného prostředku. Takto naplněný válec je velmi vhodný pro perorální podání telatům a má dostatečnou hmotnost к tomu, aby byl udržován v bachoru zvířete až do porážky. Tak to · vyrobený prostředek se jen pomalu rozpadá, takže ' zvíře dostává kontinuálně účinnou · synergní směs v průběhu přibližně 3 měsíců. To je nejvhodnější zejména pro zvířata 'na pastvě, zvláště pro skot.

Dalším možným způsobem perorálního podání je podání ve formě přídatného· krmivá, lizu a podobně. Je například možno dispergovat prostředek podle vynálezu do bloku soli nebo · anorganických látek. Tento blok se pak uloží tak, aby byl na volném prostranství, ve stáji nebo v jiném vhodném prostoru snadno· dostupný zvířatům, jimž má být · prostředek podle vynálezu podáván.

Prostředek podle vynálezu byl účinný v pokusech, při nichž bylo stanoveno zvýšené využití krmivá. Například při vyhodnocení kombinace monensinu a aktaplaninu in vivo · bylo podáváno krmným telatům krmivo svrchu · uvedeného složení. 15 kontrolních zvířat dostávalo krmivo bez přísad. Dalších 15 · zvířat dostávalo krmivo s · obsahem 30· g monensinu v jedné tuně, třetí skupina 15 zvířat dostávala totéž krmivo s 30 g aktaplaninu v 1 · tuně. · Čtvrtá pokusná skupina 15 zvířat dostávala · totéž krmivo s · obsahem 30 g monensinu a 30 g aktaplaninu v 1 tuně. Kontrolní zvířata bez jakékoli účinné látky v krmivu přibývala denně 60 dkg. Využití krmivá u této kontrolní skupiny, vypočteno jako množství krmivá ' na množství přírůstku v kg bylo 13,49. Skupina, která dostávala monensin přibývala б5 dkg denně při využití krmivá 12,05, skupina, dostávající aktaplanin přibývala 63 dkg denně při využití krmivá 12,36. ' Je překvapující, že skupina, která dostávala prostředek podle · vynálezu v krmivu přibývala denně 70 dekagramů při spotřebě 11,08 kg krmivá na 1 kg přírůstku. Z výsledku tohoto pokusu je pasné, · že uvedeným způsobem je možno podstatně snížit náklady na výkrm jatečného skotu tak, že se do jejich krmivá přidá · vhodné množství prostředku podle vynálezu.

Byly rovněž provedeny pokusy in vitro · k průkazu vzestupu produkce propionanu prostředkem podle vynálezu. Šťáva z bachoru byla odebírána býkům s trvalou bachorovou pištěli. Býkům bylo podáváno svrchu uvedené krmivo.

Vzorek bachorové šťávy byl přefiltrován čtyřmi vrstvami gázy a materiál byl uložen do láhví ve vakuu. Materiál, který byl zadržen, · byl znovu uveden v suspenzi ve fyziologickém · pufru, aby bylo dosaženo původního objemu bachorové šťávy a pak byl pufr opět odfiltrován stejným způsobem. Použitý pufr byl popsán v publikaci Uheng a další, J. Dairy Sci., 38, 1225 (1955).

Oba eluáty pak byly ' slity do· dělicí nálevky a · v této nálevce byly ponechány · tak dlouho, až zbývající částicový materiál se samovolně oddělil od ' čiré kapaliny. Kapalina pak byla odebrána, zředěna stejným objemem svrchu uvedeného pufru a pH roztoku byla upraveno na 7,0.

Takto připravená kapalina byla pak uložena do fermentačních láhví. Pro každý účel byly použity dvě fermentační láhve. Tyto láhve byly ponechány 4 dny k dosažení rovnovážného stavu a pak byla denně po 6 dní měřena produkce propionanu, · čímž byla · získána kontrolní hodnota. Měření bylo prováděno plynovou chromatografií. Pak bylo do fermentačních láhví přidáváno 20 g jemně mletého krmivá denně. Toto krmivo sestávalo z 20 % koncentrátu a 80· % vojtěškového sena. Pak byly přidávány jednotlivé složky prostředku podle vynálezu a prostředek podle vynálezu a byl vyhodnocován účinek těchto· látek při přidání do krmivá ve fermentačních lahvích. Krmivo· bylo přiváděno do lahví obvykle, dvakrát denně. Po každém přidání účinné složky nebylo dva dny prováděno měření k dosažení rovnovážného stavu a pak byla měřena produkce těkavých alifatických kyselin (VFA) v každé láhvi plynovou chromatografií po dobu 5 dní. Výsledky jsou uvedeny v následující tabulce:

TABULKA I

Monensin ppm	Aktaplanin 'ppm	Produkce propionanu mM/24 hodin
0	0	11,4 ± 2,1 SD
0	1	13,0 ± 2,0
0	4	19,9' ± 3,0
0,5	0	14,2 ± 1,7
0,5	1	16,8 ± 2,8
0,5	4	21,3 ± 2,2
3	0	18,4 ± 3,2
3	1	20,9 ± 2,0
3	4	22,4 ± 2,0

ÍO

Takto získané údaje prokazují, že kombinace aktaplaninu a monensinu podle vynálezu je synergní, pokud jde o schopnost zvýšit produkci propionanu na vyšší úroveň, než je dosažitelná při optimálních dávkách kterékoli jednotlivé složky tohoto prostředku. Je tedy zřejmé, že prostředek podle vynálezu je cenný pro zvýšené využití krmivá u přežvýkavců, zejména z toho důvodu, že představuje úsporu nákladů při výkrmu zvířat.

Další pokusy in vivo byly prováděny s cílem prokázat neočekávaný výsledek současného použití polyéteru a glykopeptidu podle vynálezu, pokud jde o přírůstky i o využití krmiv. Tyto pokusy byly prováděny například na 240 hardfordských býčcích ve stáří přibližně 8 měsíců o hmotnosti průměrně 250 kg. Zvířata byla rozdělena na jedenáct pokusných skupin a jednu kontrolní skupinu. Všem zvířatům byla podávána kukuřičná siláž jednou denně podle libosti, pokus byl prováděn 140 dní. Mimoto bylo každému zvířeti do krmivá přidáno 0,90 kg následujícího doplňkového krmivá:

Složka	Hmotnostní %
vojtěšková mouka	13,00
živočišný tuk	2,00
sójová mouka	74,50
směs anorganických solí	0,30
uhličitan vápenatý	6,00
hydrogenfosforečnan vápenatý 2,00
chlorid sodný	1,00
vitamín E	0,50
vitamíny A a D3	0,70
	100,00

Zkoumaná látka byla zpracována do předběžné směsi s obsahem 50 hmot. % kukuřičných palic a 48 hmot. °/o mleté kukuřice. Směs pak byla přidána do kukuřičné siláže v množství, které zajišťovalo požadovanou dávku účinné látky. Výsledky jsou uvedeny v následující tabulce II. Údaje znamenají průměr pro celou skupinu zvířat, jimž byla podávána uvedená dávka.

Monensin Akta- Počet g/tunu planin zvířat g/tunu

TABULKA II

Denní % změny Průměrpřírůs- oproti ný příjem tek, kg kontrole suché hmoty v kg % změny Využití °/o změny oproti krmivá proti kontrole kontrole

0	0	20	1,01	0	5,62	0	5,54	0
10	0	19^a	1,12	+ 9,9	6,17	+ 9,6	5,52	— 0,3
30	0	20	1,09	+ 7,2	5,85	+ 4,8	5,42	-2,2
0	10	20	1,12	+ 9,4	5,81	+ 4,1	5,28	— 4,9
0	20	20	1,08	+ 6,3	5,81	+ 4,1	5,43	— 2,0
0	40	20	1,09	+ 7,2	5,61	+ 1,0	5,22	-6,1
10	10	20	1,15	+ 12,6	6	+ 7,1	5,27	-5,1
30	10	20	1,09	+ 7,2	5,5	-1,9	5,06	-9,5
10	20	20	1,13	+ 10,8	5,68	— 2,9	5,16	-7,4
30	20	19^b	1,10	+ 8,1	5,63	+ 1,4	5,21	— 6,3
10	40	19^c	1,17	+ 14,3	5,55	+ 6,5	4,88	- 13,5
30	40	19^d	1,06	+ 4,5	5,64	-7,0	4,95	— 11,9

Poznámky к tabulce:

a) jeden býček byl vyřazen pro ucpání jícnu

b) jeden býček byl vyřazen pro ucpání jícnu

c) jeden býček byl vyřazen pro pneumonii

d) jeden býček byl vyřazen pro ucpání jícnu.

Ve svrchu uvedené tabulce bylo využití krmivá vypočítané tak, že celkové množství spotřebovaného krmivá v kg bylo děleno přírůstkem v kg. V ideálním případě by zvířata měla mít vyšší přírůstky při nižší tedy vyjádřeny nejnižšími čísly. Údaje v tabulce II jasně ukazují, že kombinace monensinu a aktaplaninu zlešuje využití kr mivá více než jednotlivé složky, jsou-li užity samostatně. Nejlepších výsledků bylo dosaženo při kombinaci 30 g/tunu monensinu a 10 g/tunu aktaplaninu, 10 g/tunu monensmu a 40 g/tunu aktaplaninu, 30 g/tunu monensinu a 40 g/tunu aktaplaninu. Optimálního výsledku bylo dosaženo při kombinaci 10 g/tunu monensinu a 40 g/tunu aktaplaninu, při použití této směsi bylo možno dosáhnout 13,5% zlepšení využití krmivá oproti kontrolním zvířatům.

Všechny kombinace však vedly к dosažení neočekávaně dobrých výsledků.

V dalším pokusu bylo užito dvě stě herdfordských býčků o průměrné hmotnosti

332 kg, pokus trval 154 dní a jeho účelem bylo zjistit účinnost kombinace 30 g/tunu monensinu a 20i g/tunu, 40 g/tunu nebo g/tunu aktaplaninu. Býčkům byla podá248021

Každý pokus -s určitou dávkou byl · · opakován 4x · tak, že pro každou skupinu bylo užito 8 stájí po pěti . zvířatech. Výsledky, uvedené v následující tabulce III, jsou . průměrem vždy ze všech 40 zvířat.

vána kukuřičná siláž nebo celé mleté kukuřičné palice jednou denně podle libosti, současně byla podávána doplňková krmivá jako v předchozím pokusu. Zvířata byla rozdělena do pěti skupin po 40 zvířatech.

TABULKA III

Monensin	Aktaplanin	Počet	Průměrný	Průměrná
g/tunu	g/tunu	pokusných	denní	denní
		zvířat	přírůstek	spotřeba
			kg	sušiny
				kg

% využití krmivá

0	0	40	2,43	18,13	7,49
30	0	40	2,41	16,79	7,01
30	20	39п	2,56	16,74	6,70
30	40	38^b	2,43	15,72	6,53
30	60	40	2,42	15,64	6,51

Poznámky:

a) 1 býček byl vyřazen pro· onemocnění bj 2 býčci byli vyřazeni pro pneumonii

Z údajů, uvedených v tabulce III je zřejmé, že u zvířat, jimž byl podáván monensin, bylo dosaženo přírůstků podobných jako u zvířat kontrolních, bylo však dosaženo zlepšení ve využití krmivá o 6,4 %. Při použití kombinace actaplaninu a monensinu bylo dosaženo vysokého zlepšení ve využití krmivá.

Další pokusy byly prováděny k průkazu neočekávané interakce polyéteru narasinu v kombinaci s actaplaninem. K pokusu bylo užito 240 herdfordských býčků o hmotnosti průměrně 317 kg v průměrném věku 18 měsíců. Zvířatům byla podávána kukuřičná siláž a kukuřice s vysokým obsahem vlhkosti a na každého býčka 0,9 kg následujícího doplňkového krmivá:

Složka: hmot. % vojtěšková mouka .12,00 močovina5,00 sójová mouka45,00

Složka hmot. % směs stopových prvků0,80 uhličitan · vápenatý11,00 hydrogenfosforečnan vápenatý8,00 chlorid draselný5,00 chlorid sodný10,00 vitamin E1,40 vitamín E1,40 vitamín A a Dis1,40

100,00

Při pokusech · bylo užito tří úrovní dávek narasinu (0,4 a 12 g/tunu) -a čtyř úrovní dávek actnálnninu (0,10, 20 a 40 g/tunu). Zvířata byla náhodně rozdělena do -'čtyř bloků po 12 -částečně zastřešených stájí. Pak byla zvířata náhodně vybrána do pokusu tak, že každá dávka byla zkoušena v každé stájí. Výsledky jsou uvedeny v následujících tabulkách IV a VI.

TABULKA IV

Průměrný denní přírůstek v kg

N a rasin g/tunu

0'

Aktaplanin g/tunu

20

0	2,51	2,54	2,66	2,59
4	2,53	2,67	2,65	2,55
12	2,52	2,55	2,67	2,54

TABULKA V

Průměrný denní hmotnostní přírůstek v kg

Narasin g/tunu	Aktaplanin g/tunu
0	10	20	40
4	2,53	2,67	2,65	2,55
12	2,52	2,55	2,67	2,54

TABULKA VI

Průměrné využití krmivá

Narasin g/tunu	0	Aktaplanin g/tunu
10	20 40
0	6,64	6,47	6,19	6,18
4	6,46	6,03	6,09	6,07
12	6,18	5,97	5,69	5,83

Údaje v tabulkách IV až VI prokazují, že býčci, jímž byl podáván samotný narasin v dávce 12 g/t, měli podobné denní přírůstky jako kontrolní zvířata, avšak -o 7,2 % sníženou spotřebu krmivá. Býčci, jimž byl podáván pouze aktaplanin v dače 20 g/t měli vyšší přírůstky o 5,9 % s lehce sníženou spotřebou krmivá. Při užití kombinace bylo dosaženo neočekávaného zlepšení přírůstku i využití krmivá. Největšího zlepšení bylo dosaženo při užití 12 g/t narasinu a 20 g/t aktaplaninu.

Při použití prostředku podle vynálezu je tedy možno dosáhnout zvýšeného využití krmivá a urychlení růstu u přežvýkavců. Prostředek podle vynálezu se podává prežvýkavcům -s vyvinutou funkcí bachoru a za účelem zvýšení produkce propionanu, přičemž tento prostředek sestává z antibiotika glykopeptidového typu, které samo zvyšuje využití krmivá, a antibiotika typu polyetheru, které rovněž zvyšuje využití krmivá, jak již bylo popsáno. Prostředek se podává perorálně, přičemž jednotlivá dávka každé ze složek odpovídá její optimální dávce v případě, že látka je užita samostatně jako sloučenina, zvyšující produkci propionanu a tím i využití krmívá. Jde tedy o kombinaci dávek, které zvyšují produkci propíchánu, přičemž výsledné zvýšení je vyšší než v případě jednotlivého použití uvedených látek. Prostředek podle vynálezu je možno podávat také к urychlení růstu tak, že se podává kombinace monensinu a aktaplaninu a avoparcinu, s výhodou aktaplaninu. Jak již bylo uvedeno, prostředek podle vynálezu je možno podávat perorálně ve formě přídatného krmivá, jako kuličky s pomalým uvolňováním účinné látky ve formě lizu a podobně. Výhodným způsobem perorálního podání prostředku podle vynálezu je prídatné krmivo. V tomto případě se prostředek podle vynálezu míchá s krmivém jako vhodným nosičem. Dalším výhodným způsobem jsou útvary, vhodné pro uložení do bachoru při pomalém uvolňování účinné látky. Tento způsob je zvláš tě výhodný u zvířat na pastvě, například u skotu a ovcí.

Vynález bude osvětlen následujícími příklady, které uvádějí výhodná provedení prostředku podle vynálezu. Jak již bylo uvedeno, prostředek podle vynálezu osahujc s výhodou moenensm a aktaplanin. Aktaplanin, stejně jako moneusin sestává z několika faktorů, všechny tyto faktory je možno užít v prostředku podle vynálezu buď jednotlivě, nebo ve formě směsi dvou nebo většího počtu faktorů. Byl rovněž izolován pseudoaglykon, který je společný všem dosud známým faktorům, a bylo prokázáno, že tento pseudoaglykon je rovněž biologicky účinný. Prostředek podle vynálezu tedy obsahuje ve svém výhodném provedení kterýkoli z nově izolovaných faktorů Bj, B₂, B₃, C|_a, C₃, E, G a příbuzné faktory.

'Protože ve svém zvláště výhodném provedení obsahuje prostředek pro zvýšení využití krmivá aktaplanin, bude uveden také způsob výroby komplexu aktaplaninu a některých jeho jednotlivých faktorů i pseudoaglykonu.

P г í к 1 a d 1

Pro výrobu faktorů antibiotika A-4696 (aktaplanin) je vhodné pěstování v submerzní kultuře za aerobních podmínek. Poměrně malá množství tohoto antibiotika je možno získat také ve třepacích lahvích, avšak při výrobě velkých množství je výhodné pěstování ve sterilním tanku v submerzní kultuře za aerobních podmínek. Živné prostředí ve sterilním· tanku může být naočkováno suspenzí myceliálních fragmentů.

Je vhodné získat vegetativní očkovací materiál produkčního organismu tak, že se naočkuje poměrně malé množství živného prostředí myceliálními fragmenty organismu a jakmile se získá mladá aktivní vegetativní kultura, přenese se asepticky do velkého tanku. Prostředí, v němž se vytváří naočkují na šikmý živný agar, který má následující složení:

vegetativní očkovací materiál, může být totéž prostředí, jaké se užívá k výrobě faktorů antibiotika A-4696 ve velkém, je však možno užít i jiných živných prostředí.

Kmen Actinoplanes missouriensis ATCC 31 680, ATCC 31681, ATCC 31 682 a ATCC 31 683, produkující antibiotikum A-4696, rostou při teplotě 20· až 40' °C. Největší množství faktoru antibiotika A-4696 je produkováno při teplotě 30 °C.

V průběhu 'submerzního pěstování v aerobní kultuře se živným prostředím nechá probublávat sterilní vzduch. Množství tohoto vzduchu se mění v rozmezí 0,1 až 1,0 objemu vzduchu za minutu na objem živného prostředí. Nejefektivnějšího růstu a produkce antibiotika se dosáhne v případě, že se užije alespoň 1/2 objemu vzduchu za minutu na 1 objem živného prostředí.

Rychlost produkce antibiotika A-4696 a jeho faktorů a koncentrace antibiotika v živném prostředí může být sledována v průběhu růstu odebíráním vzorků z fermentačního prostředí a prováděním testů na antibiotickou účinnost proti organismu, o němž je známo, že je na antibiotikum citlivý. Jedním z těchto · organismů · je například Bacillus subtilis. Biologickou zkouškou je možno provádět běžnými způsoby na plotnách při použití kalíšků nebo papírových kotoučů.

Maximální produkce antibiotika se obvykle dosáhne v průběhu 4 až 6 dní fermentace v třepacích lahvích nebo submerzní aerobní kultuře.

Antibiotikum A-4696 je možno pro následnou izolaci jeho faktoru Bj, B2, B3, Cj_a, C3 a E_t oddělit z živného prostředí a od dalších balastních látek, které mohou být přítomny běžnými způsoby s použitím adsorpce a extrakce. Výhodnější je adsorpce, protože postupy tohoto typu nevyžadují použití další množství rozpouštědel, kterých je nutno užít při extrakčních postupech.

Protože způsob výroby aktaplaninu je v podstatě stejný při použití kmenů ATCC 31 680· (pro izolaci faktorů B₂ a C3 antibiotika A-4696), ATCC 31 682 (pro izolaci faktorů B| a C|_ít antibiotika A-4696) a ATCC 31 683 (pro izolaci faktorů B3 a E.₍. antibiotika A-4696) je uvedeno pouze použití kmene ATCC 31 682. Určité rozdíly ve složení produkčního prostředí a v souvislosti s použitím kmene ATCC 31 683 jsou v případě potřeby rovněž uvedeny.

A. Fermentace v třepací láhvi

Myceliální fragmenty Actinoplanes misourieusis, například kmeny ATCC 31 682 se

Složka	Množství ¹
cerelóza	0,5
bramborový dextrin	2,0
mouka	1,5
extrakt z kvasnic	0,25
uhličitan vápenatý	0,1
agar	2,0

Šikmý agar, naočkovaný kmenem ATCC 31 682 se · pak inkubuje 6 dnů při teplotě 30· °C. Kultura nesporuluje, takže je nutné macerovat mycelium sterilní pipetou. Macerovaná zralá kultura se překryje sterilní destilovanou vodou a opatrně se oddělí pipetou nebo sterilní tyčinkou k získání myceliální suspenze.

Takto· získaná suspenze se užije k · naočkování 100 ml sterilního vegetativního živného prostředí s · následujícím 'složením:

Množství v %

Složka

cerelóza	0,5
bramborový dextrin	0,25
mouka Nutrisoy	1,5
extrakt z kvasnic	0,25
uhličitan vápenatý	0,1

Naočkované vegetativní prostředí se pěstuje 48 hodin při tep'otě 30 °C . ·na rotační třepačce při 250 otáčkách za minutu. 10 ml tohoto vegetativního prostředí se užije k naočkování 100 ml dalšího stupně následujícího složení:

Složka Množství v %

cerelóza	0,5
kvasnme	0,25
mouka	1,5
kukuřičný škrob	2,0
uhličitan · · vápenatý	0,1
Sag 471*	0,05

* si’ikonové protipěnové činidlo (Union

Carbide)

Takto ' naočkované prostředí se inkubuje 2’ ' hodin při teplotě 30 °C za stálého třepání na rotační třepačce · při 250 . otáčkách za minutu.

0,4 ml tohoto živného prostředí . se užije k naočkování 100 ml ' produkčního prostředí v Erlenmeyerových baňkách o . obsahu

500 ml, předem · · sterilizovaného . 30 minut na teplotě 121 · °C.

Složka Množství v %
cerelóza	1,0
kukuřičný škrob	3,5
sacha ó<a	3,0
melasa	1,5
kvasnice	1,0
mouka z baví líkových semen
(Proflo)	l,o
uhličití n vápenatý	0,2
hydrogenfosforečnan draselný	0,05
síran amonný	0,025
•sy an hořečnatý . 72H-)O	0,5
Sag 471	0,03
Produkční prostředí, se uloží	na 96 hodin
při teplotě 30 ^CC na rotační třepačku o 250
otáčkách za minutu. Na konc:	fermentace
je pH přibližně 8,0.

Pro produkci faktorů B₃ a E₍ antibiotika A-4696 se užije kmen ATCC 31 683 a postupuje se svrchu uvedeným způsobem až do mezistupně. 0,4 ml tohoto mezistupně se pak užije к naočkování 100 ml produkčního prostředí s následujícím složením v Erlenmeyerových baňkách o objemu 500 ml při předběžné sterilizaci 30 minut při teplotě 121^CC.

Složka Množství v % cerelóza1,0 kvasnice2,0 uhličitan vápenatý0,2 hydrogenfosforečnan draselný0,05 síran amonný0,025

Sag 4710,03

Produkční prostředí se uloží při teplotě 30 °C na 96 hodin na rotační třepačku při 250 otáčkách za minutu. Na konci fermentace je pH živného prostředí 8,0.

B. Fermentace v tanku o objemu 40 litrů

Příprava očkovacího materiálu se provádí svrchu uvedeným způsobem až do mezistupně tak, jak bylo popsáno v odstavci A. 25 litrů produkčního- prostředí se sterilizuje 30 minut v autoklávu při teplotě 121^CC a pak se uloží do ’ fermentačníbo tanku o objemu 40 litrů. 100 ml prostředí z mezistupně se pak užije к naočkování sterilního produkčního iprostředí. Naočkované pro dukční prostředí se podrobí fermentaci při teplotě 30 °C po dobu 4 dnů. Prostředí se provzdušňuje sterilním vzduchem v množství 1/2 objemu vzduchu na 1 objem živného prostředí za minutu. Fermentační produkční prostředí se míchá míchacím zařízením vhodného rozměru tak, aby se vzduch dostatečně mísil s živným prostředím. V průběhu fermentace pH živného prostředí postupně stoupá z počáteční hodnoty 6.5 na hodnotu přibližně 8,0. Větší množství antibiotika je možno získat tak, že se toto produkční prostředí užije jako očkovací materiál a naočkuje se ještě větší množství produkčního prostředí.

Tímto způsobem je možno získat dostatečně velké množství fermentačního prostředí pro izolaci jednotlivých faktorů antibiotika A-4696.

C. Izolace antibiotika A-4696

800 litrů fermentačního prostředí, získaného svrchu uvedeným způsobem se zfiltruje po přidání 5 % (hmotnostní/objemová procenta] pomocného prostředku (Celíte 515 j. Filtrační koláč se uvede znovu v suspenzi v 3 600 litrech deionizované vody a pH vodné suspenze se upraví na 10,5 při použití vodného roztoku hydroxidu sodného. Suspendované pevné částice se oddělí filtrací a promyjí se vodou. Filtrát a promývací kapal· na se slijí a výsledný roztok se okyselí při použití 20% (hmotnostní/objemová %] vodného roztoku kyseliny sírové na pH 4,5. Kyselý roztok se vyčeří filtrací při použití 1 % pomocného prostředku (Celit 545]. Čirý roztok se nechá projít sloupcem o rozměrech 70 x 150 cm s obsahem 350 litrů Amberlitu IRA-116 v Na¹ formě a sloupec se promyje 1 200 litry deionizované vody. Pryskyřice IRA-116 se vyjme a po vsázkách vymývá při pH 10,5 vodným roztokem hydroxidu sodného, jehož se užije celkem 1 000 litrů. Eluát se centralizuje na pH 7 přidáváním 20 % vodného roztoku kyseliny sírové, načež se promyje třikrát celkem 150 litry deionizované vody. Voda, určená к promývání, se neutralizuje a slije s neutralizovaným eluátem. Výsledný roztok se zahustí a lyofihzuje. Surový komplex má špinavě šedou až tmavě hnědou barvu.

D. Odstranění solí ze surového antibiotika A-4696

1,0 kg surového komplexu se pomalu přidá za energického míchání к 1,5 litru deionizované vody. Výsledná suspenze se míchá 20 minut a pak se neutralizuje na pH 7 při použili 10% vodného roztoku hydroxidu a m o η n é h o. Nevoz p ústný к o n ι p l c x a n t i b ’ o t i ka A-1696 se oddělí filtrací ve vakuu, promyje se clekmizovanou vodou a lyofihzuje. Sušený komplex zbavený solí se získá ve výtěžku přibližně 80 %, vztaženo na biologickou účinnost.

E. Čištění antibiotika A-4696, zbaveného solí

300 g sušeného komplexu, zbaveného solí, se uvede v suspenzi ve 2 litrech deionizované vody a pH suspenze se upraví na 2,7 přidáním vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 3 N. Okyselený roztok se odstřeďuje 40 minut při 2 500 otáčkách za minutu. Supern-atant se nanese na vrchol sloupce o rozměrech 8 x 85 cm s obsahem 6 litrů pryskyřice Duolit S761 к odbarvení. Účinná látka se vymývá deionizo19 vanou vodou při rychlosti průtoku 30 ml/ na tenké vrstvě. Frakce, které obsahuje antibiotikum A-4696, se zahustí při teplotě 35° Celsia a tlaku 400 Pa na objem 3 litry a pak se lyofilizují. Odbarvený komplex se izoluje ve výtěžku přibližně 70· %, vztaženo na biologickou účinnost jako bílá až špinavě bílá pevná látka.

F. Izolace faktorů B_b B₂, B3, Cta, C3 a E_tantibiotika A-4696 ve formě hydrochloridu g sušeného odbarveného komplexu antibiotika A-4696 'připraveného svrchu uvedeným způsobem se rozpustí ve 100 ml deionizované vody. Výsledný vodný roztok se zfiltruje a nanese na chromatografický sloupec o rozměrech 5 x 100 cm s obsahem 2 litrů polyamidu (Machery a Nagel SC6). Sloupec se vymývá deionizovanou vodou a odebere se 200 až 300 frakcí po 25 ml. Eluce se sleduje v ultrafialovém světle a chromatografuje na tenké vrstvě. Podle takto získaných údajů se frakce s obsahem určitého faktoru slijí a lyofilizují. K některému dělení bylo zapotřebí sloupce dvojnásobné délky, to jest 200 cm tak, že byly užity dva polyamidové sloupce za sebou. Dalšího čištění bylo dosaženo opakovanou chromatografií.

Svrchu uvedené postupy v odstavcích A až F byly prováděny při použití kmene ATCC 31 682 v případě, že byla požadována izolace faktorů B, a Cla antibiotika A-4696, kmene ATCC 31 680 v případě, že byla požadována izolace faktorů B2 a Cs antibiotika A-4696 a kmene ATCC 31 683 v případě, že byla požadována izolace faktorů B3 a E( antibiotika A-4696. Všechny tyto kmeny produkují svrchu uvedené faktory, avšak uvedené kmeny jsou výhodné k produkci uvedených faktorů.

Příklad 2

Izolace faktorů B(, B₂., B3, Cla, C3 a Ej_ ve formě hydrochloridu při použití jediného kmene Actinoplanes missouriens's je možno provádět následujícím způsobem:

200 mg sušeného odbarveného komplexu antibiotika A-4696, získaného z kmene 31 683 způsobem podle příkladu A, stupně A až E se rozpustí ve 2 ' ml destilované vody. Výsledný vodný roztok se zfiltruje a dělí chromatografií na sloupci při použití absorpčních prostředků v revezní fázi, například Li Chroprep^R RP-18 [E. Merek, Darmstadt, NSR) jako stacionární fáze při současném ' použití gradientu vodného acetonitrilu s obsahem triethylaminfosfátu jako mobilní fáze. Je samozřejmé, že odborník změní koncentraci acetonitrilu v závislosti na složení určitého fermentačního prostředí, zásadně je výhodný koncentrační gradient v rozmezí 10 až 40· %. , Eluát se sleduje v ultrafialovém 'světle a frakce s obsahem jednotli vých faktorů se odebírají. Acetonitril se odpaří ve vysokém vakuu a výsledné vodné roztoky se lyofilizují. Lyofilizované chromatografické frakce se pak znovu rozpustí v destilované vodě, adsorbují se na adsorpčním prostředku v reverzní fázi, eluce se provádí 50% vodným methanolem. Vodné roztoky s ' obsahem jednotlivých faktorů se odpaří do sucha, čištěné faktory antibiotika A-4696 se získají jako amorfní pevné látky.

Příklad 3

Způsob výroby dihydrochloridu pseudoaglykonu antibiotika A-4696

2,0 g · komplexu antibiotika A-4696, připraveného· způsobem podle příkladu 2, 'se rozpustí v 50· ml methanolového roztoku kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 5 % a směs se zahřívá 70 minut na teplotu varu pod zpětným chladičem. Pak se reakční směs odpaří do sucha při teplotě 35 až 40 °'C za sníženého tlaku. Odparek se zředí malým. objemem vody za vzniku pevné ' látky, která se izoluje filtrací. Tato pevná látka se usuší na vzduchu, rozpustí se v malém množství methanolu a · znovu se 'sráží přidáním acetonitrilu až do vzniku granulované pevné látky. Požadovaný produkt se odfiltruje, usuší a při vysokotlaké kapalinové chromatografií lze prokázat, že jde o jediný homogenní produkt. Totožnost a struktura tohoto produktu byla potvrzena hmotovou spektroskopií, protonovou nukleární rezonancí a elementární analýzou.

Dihydrochlorid pseudoaglykonu antibiotika A-4696 je také možno připravit tak, že se hydrolyzují jednotlivé faktory nebo směsi faktorů antibiotika A-4696.

Příklad 4

Způsob výroby faktoru G aktaplaninu

Připraví se š’kmý živný agar následujícího složení:

SOžka Hmotnostní %

cerelóza	0,5
bramborový dextrin	2,0
mouka	1,5
extrakt z kvasnic	0,25
uhličitan vápenatý	0,1
agar	2,0

Šikmý agar se naočkuje kmenem ATCC 31 681 a pak 'se inkubuje 6 dní při teplotě 30 °C. Po skončení inkubace se kultura na šikmém agaru převrství destilovanou vodou a uvolní 'sterilní tyčinkou nebo kličkou za vzniku vodné suspenze mycelia.

Tato vodná suspenze se užije jako očkovací materiál pro očkování 100 ml 'sterilního' vegetativního živného prostředí téhož

4 8 0 21 složení jako svrchu popsaný šikmý agar. Naočkované živné prostředí se inkubuje 48 hodin při teplotě 30 ^CC. V průběhu inkubace se vegetativní živné prostředí míchá na rotační třepačce při 250 otáčkách za minutu. 10 ml vzrostlé kultury se pak užije jako očkovací materiál pro sterilní živné prostředí, které se užívá jako mezistupeň a má následující složení:

Složka Hmotnostní % cereióza .0,5 kvasnice0,25 mouka1,5 kukuřičný škrob2,0 uhličitan vápenatý0,1 protipěnivé činidlo (Sag 471)0,05

Toto prostředí se inkubuje 24 hodin při teplotě 30 °C za současného míchání na rotační třepačce při 250 otáčkách za minutu. Vzrostlá kultura se pak užije naočkováním sterilního produkčního prostředí pro antibiotikum A-4696 G s následujícím složením:

Složka Hmotnostní %

cerelóza	2,5
kvasnice	2,0
uhličitan vápenatý	0,2
síran amonný	0,025
hydrogenfosforečnan draselný	0,05
glycerol	1,5
melasa	1,5
kukuřičný škrob	3,5
protipěnivé činidlo (Sag 471)	0,03

Fermentace se provádí 143 hodin při teplotě 30 °C za stálého míchání a provzdušňování sterilním vzduchem rychlostí 1/2 objemu vzduchu na 1 objem živného prostředí za minutu. V průběhu fermentace se zvýší pH živného prostředí z počáteční hodnoty 6,5 přibližně na 8,0. Na konci fermentace přibližně po 143 hodinách obsahuje živné prostředí 5 000 jednotek/ml.

litrů tohoto fermentačního prostředí se zředí 30 litry acetonu a pH se upraví na

1,8 přidáním kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 6 N. Okyselené živné prostředí se zfiltruje použitím pomocného prostředku a nerozpustný podíl se na filtru promyje vodou. Filtrát se upraví na pH 3,5 přidáním 150 ml hydroxidu sodného o koncentraci 50 % a pak se zahustí ve vakuu na objem 29 litrů. Pak se pH znovu upraví z 2,2 na 3,1 1 hydroxidem sodným a provede se nová filtrace .к odstranění nerozpustných částic. Filtrát s obsahem antibiotika se nechá projít sloupcem o průměru 7,5 cm s obsahem 5 litrů Mitsubishi Dianion HP-20 bez funkčních skupin (styrendivinylbenzenová pryskyřice) po předběžném působení methylalkoholu a následném promytí vodou. Rychlost průtoku je 250 ml za minutu. Po adsorpcí antibiotika na pryskyřici se slou pec promyje 5 litry vody a pak se postupně vymývá 21 litry 21 % vodného methylalkoholu, 15 litry 50 % vodného methylalkoholu a 15 litry 50 % vodného acetonu. Odebírají se frakce o obsahu 4 litry. Frakce 8, 9 a 10 obsahuje převážnou část antibiotika a je také prostá větš ny nečistot. Frakce 8, 9 a 10 se slijí a odpaří na objem 6 litrů ve vakuu. Po úpravě pH koncentrátu na 6,8 vodným roztokem hydroxidu sodného se koncentrát vlije do 60 litrů isopropylalkoholu. Antibiotikum A-4696 G se ze zředěného koncentrátu vysráží a pak se zfiltruje a usuší. Tímto způsobem se získá 54,2 g antibiotika A-4696 G ve v podstatě čisté formě. Antibiotikum A-4696 G se pak dále čistí vysokotlakou kapalinovou chromatografií.

Antibiotikum A-4695 G ve volná formě se pak rozpustí v methylalkoholu a roztok se zředí kyselinou chlorovodíkovou o koncentraci 1 N. Po promíchání se okyselený roztok zředí acetonem, č^;mž se vysráží dihydrochorid antibiotika A-4696 G.

Příklad 5

Krmivo pro skot s obsahem antibiotik podle vynálezu může mít například následující složení:

Složka hrubě mletá kukuřice69,95 mleté kukuřičné palice10,00 sójová mouka (50 % bílkoviny)8,00 vojtěšková mouka5,00 melasa5,00 močovina0,60 hydrogenfosforcčnan vápenatý0,50 uhhčitan vápenatý0,50 sůl0,30 směs s obsahem vitamínu A a D«>0,07 směs s obsahem vitamínu E0,05 směs stopových prvků0,03

100,00

D 1 tuny svrchu uvedeného krmivá se stejnoměrně vmísí 30^; g monensinu a 30 g .aktaplaninu. Krmivo se ipodává perorálně krmným telatům v množství 2,5 až 15 kg denně za zvýšeného využití krmivá.

Příklad 6

Do krmivá z příkladu 5 se přidá homogenní směs 30 g monensinu a 30 g avoiparcinu. Krmivo se podává krmným telatům ke zvýšení produkce propionanu, což se projeví jako zvýšené využití krmivá.

Příklad?

Směs 40 g narasinu a 25 g vankomycinu se stejnoměrně smísí s 1 tunou travní siláže. Krmivo se podává krmným telatům ke zvýšení využití krmivá.

Příklad 8

Využití krmivá je možno účinně zvýšit také u zvířat na pastvě zavedením prostředku s řízeným uvolňováním účinné látky.

К míchanému roztoku 150 ml dichlormethanu. s obsahem 22,0 g kopolymeru, odvozeného od 80 hmotnostních % kyseliny mléčné a 20 hmotnostních % kyseliny glykolové s vnitřní viskozitou 0,19 se přidá najednou homogenní směs 12,0 g sodné soli monensinu a 12,0 g aktaplaninu. Roztok se míchá při teplotě místnosti 10 minut a pak se rozpouštědlo odstraní odpařením za sníženého tlaku. Získaná pevná směs se mele a zahřívá na teplotu místnosti 10 minut a pak se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku. Získaná hmota se zahřeje na

100 °C a vloží do otevřeného ocelového válce o rozměrech 35 x 50 ml a hmotnosti

98,8 g. Výsledná hmotnost takto vzniklé kapsle je 142,8 g.

Je také možno postupovat tak, že se připraví odděleně prostředek s řízeným uvolňováním monensinu a prostředek s řízeným uvolňováním aktaplaninu a tyto dva prostředky je pak možno uložit do bachoru zvířete na pastvě, takže toto zvíře dostává účinnou denní dávku prostředku podle vynálezu.

Naplněná kapsle se perorálně podá krmným telatům sondou. Tele se pak volně pase. Prostředek podle vynálezu uvolňuje trvale účinné množství prostředku, zvyšujícího produkci propionanu po dobu 3 měsíců. V případě potřeby je možno do bachoru uložit další kapsle.

Claims

Prostředek pro zvýšené využití krmiv u přežvýkavců, vyznačující se tím, že obsahuje polyetherové antibiotikum monensin nebo narasin a glykopeptidové antibioti kum aktaplanin, přičemž tyto složky jsou přítomné v hmotnostním poměru 1 : 10 až 10 : 1.