JPH0215085A - ポリエーテル坑生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は新規ポリエーテル抗生物質、特に抗生物質Ａ８
２８１０および新規微生物を培養することによる該抗生
物質の製造法に関する。

従来技術と解決すべき問題点 動物の健康製品は大なる需要がある。抗生物質は、疾病
の治療のためばかりでなく動物の発育増進を高めるため
に重要な種類の動物健康製品であり続ける。抗生物質は
疾病を軽減するかまたは飼料利用効率を増大させること
により発育を増進させることができる。

家禽産業に重大な影響を及ぼす疾病の一つはコクシジウ
ム症である。コクシジウム症はエイメリア（Ｅ　ｉｍｅ
ｒｉａ）属またはイソポーラ（Ｉ　５ｏｐｏｒａ）属の
ｌないしそれ以上の種の感染に起因する。コクシジウム
症による経済的損失が持続するので、改良された抗コク
シジウム剤の需要がある。

飼料利用効率の増強により発育を促進させることは他の
獣医学上の経済的に望ましい目標である。

この種の発育促進は牛のような反別動物および家禽、豚
のような単胃動物のために特に重要である。

動物の健康の分野で現在まで特に重要であった抗生物質
の一つはポリエーテル抗生物質である。

たとえばポリエーテル系モネンシンは貴重な商品であっ
て、これは家禽のコクシジウム症の治療用および動物の
飼料利用効率増強用の双方に使用されている。

本発明はポリエーテル抗生物質（Ａ８２８１０と呼称す
る）を提供する。ウェスｉ・レイ［ＪｏｈｎＷ、　Ｗｅ
ｓｔｌｅｙ・ポリエーテル・アンチバイオテイックス：
ナチュラリイ・才力リング・アンド・イオノフォアズ（
Ｐｏｌｙｅｔｈｅｒ　　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ：　Ｎ
ａｔｕｒａｌｌｙ　　Ｏｃｃｕｒｒｉｎｇ　　Ａｃ１ｄ
　　１ｏｎｏｐｈｏｒｅＳ）１ケミストリー（Ｃｈｅｍ
ｉｓｔｒｙ）第２巻（マーセル・デツカ−（Ｍａｒｃｅ
ｌ　　Ｄｅｋｋｅｒ）：　ニューヨーク１９８３年）］
は、現存しうるポリエーテル類をクラスおよびタイプに
より分類した。ウェストレイの分類法を用いれば、Ａ８
２８１０は１個のスピロケタール系を有するので、クラ
スｉｂ、タイプ（１）に属する新規ポリエーテル類であ
る。これに属する他のポリエーテル類は、Ａ８０１９０
（米国特許第４゜５８２．８２２号）；Δ−２８６９５
ＡおよびＢ（米国特許第３．８３９．５５８号）；Ａ２
０４１および■（米国特許第３，７０５，２３８号）；
Ａ−３２８８７（米国特許第４，１３３．８７６号）；
キャリオマインン゛ニーテロマイシン、ＣＰ−４７，４
３４、ＲＰ３７４５４およびＸ−１４８６８抗生物質を
包含する。

発明の構成と効果 −つの見地から本発明は、 式： ［式中、Ｒは水素または−ＣＯＮＨＲ，（基中、Ｒ，は
アルキル、アリール、アルキルアリール、アリールアル
キル、ハロアリール、ニドロアリール、ハロアリールア
ルキル、アルコキシアリール、アリールオキシアリール
、アリールシクロアルキル、アシルアリールまたはシク
ロアルキル）である基を表わす］ で示されるＡ８２８１０化合物またはそのアシルもしく
はアルキルエステルまたはそのアルキルエーテル誘導体
あるいはこれらの塩類を提供する。

Ａ８２８１０の特性 抗生物質Ａ８２８１０は、式［１］の構造と決定された
（質量スペクトルおよびＮＭＲ分析に基づく）。Ａ８２
８１０（その遊離酸型として）は次の特性を有する。

状態：白色結晶 融点：６９〜７１°Ｃ ｐＫａ＋　６．６（８０％ジメチルスルホキシド水溶液
） ２５゜ ［α］　　　　、−７，３５°（メタノール中ｃｌ）８
９Ｄ 分！＋８４２（フィールド・デゾープション質量スペク
トル分析） 実験式：　Ｃ４５Ｈ７ａｏ　１４ Ｕ■；端吸収のみ Ｉ　Ｒ（ＣＨ（Ｊ）３）：　（第１図）次の波数（Ｃ１
１−りにおける吸収、３０２０．２９７７．２９３５．
２８８０．１７２６．１４５８．１３７９．１２０６．
１１６４．１１４６．１１１５．１１０４．１０９４．
１０７３．１０５０．１０２５．１００６．９９１．９
８０および９４゛６゜ 溶解性：水に不溶；メタノールのような低級アルコール
、アセトンのようなケトン類、酢酸エチルのようなエス
テル類、クロロホルムのようなハロケン化炭化水素およ
びジエチルエーテル、ペンセン、トルエン、温ヘキサン
のようす炭化水３ｉ　ニ可溶。

構造から明らかなように、Ａ８２８１０は塩およびエス
テル銹導体を形成することかできる酸として機能性を有
し、またエステル化されるかまたはエーテル誘導体を形
成することができる少なくとも１個のヒドロキシル基を
有する。

Ｒが水素以外の基である化合物［１］はウレタン誘導体
と呼ばれる。化合物［１１は抗生物質として、また飼料
利用効率増強剤として有用である。

アシルはＣ１〜Ｃ７（好ましくはＣ３〜Ｃ４）アルカン
酸部分、すなわち式： ［基中、Ｒ，ａはＣ２〜ＣＩ＋アルキルまたは水素を表
わすコ で示される）□（たとえばホルミル、アセチル、プロピ
オニル、ブチリルなどを意味する。

シクロアルキルは、３〜７の炭素原子を含む環式炭化水
素基、たとえばシクロプロピル、シクロブチル、シクロ
ヘキシルなど（ンクロヘキンルが好ましい）を意味する
。シクロアルキルは、本明細書中のアリール基により置
換されてアリールシクロアルキル（たとえば２−（フェ
ニル）シクロプロピル）を形成してもよい。

アルコキシは置換基として０１〜Ｃ７低級アルキル基を
有する酸素官能基たとえばメトキシ、エトキン、プロポ
キシなどを意味する。

アリールは、芳香族炭化水素から水素原子１個を除いて
誘導される芳香族残基、たとえばフェニル、ピリジルま
たはフリル（特にフェニル）のような基を意味する。ア
リール基は種々の基で置換されていてもよい。フェニル
核上の置換基はその４位に存在するのが好ましい。その
例として４−アルキルアリールたとえば４−メチルフェ
ニル（４トリル）；４−ハロフェニルだとえ１ｆ４−ク
ロルフェニル；４−ニトロフェニル；４−アリールオキ
シアリールたとえば４−フェノキシフェニル４−アルコ
キンフェニルたとえば４−メトキシフェニル；および４
−（アルキルカルボニル）フェニルたとえ１ｆ４−（メ
チルカルボニル）フェニル；または４−（フェニルカル
ボニル）フェニルカ挙ケられる。

アルキルは０１〜Ｃ７の直鎖もしくは分枝状炭化水素基
、好ましくはＣ，−Ｃ４の炭化水素基たとえばメチル、
エチル、プロピル、イソプロピル、ｎブチルなどを意味
する。アルキル基は、前記のようなアリール基で置換さ
れてアリールアルキル基（たとえばフェニルエチルまた
は２−フェニルエチル）を形成するか、またはハロアリ
ール基で置換されてハロアリールアルキル基（たとえば
４ブロモフエネチル）を形成してもよい。

Ａ８２８１０およびその誘導体の塩は本発明の抗生物質
を分離および精製するのに有用である。

その薬理学的に許容される塩は特に有用である。

塩類としてＡ８２８１０およびその誘導体のアルカリ金
属塩、アルカリ土類金属塩ならびにアミン塩が例示され
る。

Ａ８２８１０の代表的かつ適当なアルカリ金属塩および
アルカリ土類金属塩は、ナトリウム、カリウム、リチウ
ム、セシウム、ルビジウム、バリウム、カルシウムまた
はマグネシウムの塩を包含する。Ａ８２８１０の適当な
アミン塩は、アンモニウム塩および第１、第２または第
３（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルアンモニウム塩およびヒドロ
キシ（Ｃ３〜Ｃ４）アルキルアンモニウム塩を包含する
。例示的アミン塩ハ、Ａ８２８１０を、水酸化アンモニ
ウム、メチルアミン、５ｅｃ−ブチルアミン、イソプロ
ピルアミン、ジエチルアミン、ジイソプロピルアミン、
エタノールアミン、トリエチルアミンまたは３−アミノ
−１−プロパツールなどと反応させることにより生成す
る塩を包含する。

動物を治療するとき、化合物の遊離塩基または塩のいず
れかを使用するかは通常、重要な意義はない。しかし経
済性、便宜性または毒性の理由のため、塩型を選択する
ことができる。

他の観点から本発明は、アクチノマデュラ・フイブロサ
ｓｐ＋ノブ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　ｆｉｂｒｏ
ｓａ　ｓｐ。

ｎｏｖ、）・ＮＲＲＬ１８３４８またはそのＡ８２８１
０を産生する突然変異菌株を、液中好気的発酵条件下、
抗生物質Ａ８２８１０を生産するように培養し、必要に
応じて塩を形成させることから成るＡ８２８１０の製造
法を提供することができる。

生産したＡ８２８１０を発酵液から、および極性有機溶
媒を用いて菌糸体から抽出する。八８２８１０を分離し
、更にカラムクロマトグラフィーのような手法により精
製する。

更に本発明はＡｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　　ｆｉｂｒｏ
ｓａ　ｓｐ、ｎｏｖ、　８ＮＲＲＬＩ８３４８またはそ
のＡ８２８１０生産突然変異閑の生物学的に純粋な菌株
を提供することができる。便宜上、この微生物を菌株Ａ
８２８１０、ｌと呼称する。菌株Ａ８２８１０．１は、
西アフリカ・トゴ（Ｔ　ｏｇｏ）の土壌試料から単離し
た親株（菌株Ａ８２８１０）から誘導された自然変異菌
株である。

Δ８２８１０生産微生物は、イリノイ州６１６０４ペオ
リア・ノース・ユニバーシティ・ストリート１８１５の
ノーザン・リージョナル・リサーチ・センター、アグリ
カルチュラル・リサーチ、ノース・セントラル・リージ
オン（ＮｏｒｔｈｅｒｎＲｅｇｉｏｎａｌ　　Ｒｅ５ｅ
ａｒｃｈ　　Ｃｅｎｔｅｒ、　　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒ
ａｌＲｅｓｅａｒｃｈ、　Ｎｏｒｔｈ　　Ｃｅｎｔｒａ
ｌ　　Ｆ’、ｅｇｉｏｎ）に寄託され、そのストック・
カルチュア・コレクション（ｓｔｏｃｋ　ｃｕｌｔｕｒ
ｅ　ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）の一部を成し、これから受
理番号ＮＲＲＬｉ８３４８の下に公的に人手することか
できる。

リリー・リサーチ・ラポラ］・リーズ（ＬｉｌｌｙＲｅ
ｓｅａｒｃｈ　　Ｌ　ａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）のフレ
デリック′Ｐ１メルツ（Ｆ　ｒｅｄｅｒｉｃｋ　　Ｐ、
　Ｍｅｒｔｚ）により、この変異菌の分類学的研究が行
なわれた。この研究に基づき、新規微生物をＡｃｔｉｎ
ｏｍａｄｕｒａ属の新種として分類し、Ａｃｔｉｎｏｍ
ａｄｕｒａ　ｆｉｂｒｏｓａ　ｓｐ、　ｎｏｖ、という
分類名を提案した。この分類は、実験室における類似柱
との比較、およびＡ８２８１０．１の特性と公表された
類似柱に関する特性の記載との比較に基づくものである
。

適用した方法 この研究はストレプトミセス種（Ｓ　ｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓｓｐｃｃｉｃｓ）の特性に関するインターナショ
ナル・ストレプトミセス・プロジェクト（Ｉｎｔｅｒｎ
ａｔｉｏｎａｌＳ　ｔｒｃｐｔｏｍｙｃｅｓ　Ｐ　ｒｏ
ｊｅｃｔ）（Ｉ　Ｓ　Ｐ　）［シャーリング（Ｅ、　　
１３　、　　Ｓ　ｈｉｒｌ　ｉｎｇ）およびゴツトリー
ブ（Ｄ。

Ｇ　ｏｔｔ　ｌ　１ｅｂ）“メソノズ・フォア・キャラ
クタライセイシコン・オン・ストレプトミセス・スベイ
シーズ（Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒ
ｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　　５
ｐｅｃｉｅｓ）”　（Ｉｎｔ、　　Ｊ、　　５ｙｓｔＢ
ａｃＬｃｒｉｏ１．　　Ｉ　６：　３１３〜３４０（１
９６６年）］およびコルトン（Ｇ　ｏｒｄｏｎ）により
与えられた方法［ゴルトン（Ｒ、Ｅ　、　　Ｇ　ｏｒｄ
ｏｎ）、　　バーネット（Ｄ、Ａ。

Ｂ　ａｒｎｅｔｔ）、　ハンダーハン（Ｊ　、　　Ｅ　
、　　Ｈａｎｄｅｒｈａｎ）およびパンダ（Ｃ，Ｐａｎ
ｇ）リカルジア・コニリア力（Ｎｏｃａｒｄｉａ　　ｃ
ｏｅｌｉａｃａ）、　　ノカルジアψアウトトロフイカ
（Ｎｏｃａｒｄｉａ　　ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ）お
よびザ・ノカルシン・ストレイン（ｔｈｅ　　Ｎｏｃａ
ｒｄｉｎＳｔｒａｉｎ）”　（Ｉｎｔ、　　Ｊ、　　５
ｙｓｔ、　　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　　２４５４〜６３
（１９７４年）１により推奨された方法を用いて行なっ
た。

澱粉加水分解は、ｌ５ＰＮｏ、４（無機塩−澱粉寒天）
板上、ヨウ素を用いる澱粉の存在に関する試験法により
測定した。

塩化ナトリウム耐性は、ｌ５ＰＮｏ、２寒天に、塩化ナ
トリウムを所望の濃度と等しくなるように加えることに
より測定した。

裏面および気生菌糸に色名を指定するため、それぞれＩ
Ｃ３Ｓ−ＮＢＳセントロイド・カラー・チャート（Ｃｅ
ｎｔｒｏｉｄ　　Ｃｏｆｏｒ　　Ｃｈａｒｔｓ）標準試
料Ｎｏ、２１０６（ワシントンＤ、Ｃ，米国商務省ナシ
ョナル・ビューロー・オン・スタンダーズ（Ｎａｔｉｏ
ｎａｌ　Ｂｕｒｅａｕ　ｏｒＳｔａｎｄａｒｄｓ））お
よびカラー−ハーモニイーマニュアル（Ｇ　ｏｌｏｒ　
　ＨａｒｍｏｎｙＭａｎｕａｌ）（コンテナー・コーポ
レイション・オン・アメリカ（イリノイ州ンカゴ１９５
８（第４版）））を用いた。

形態学的研究は、光学顕微鏡および走査電子顕微鏡（Ｓ
ＥＭ）を用いて行なった。

全細胞の加水分解物中、ジアミノピメリン酸（ＤＡＰ）
異性体は、ベラカーら［ベノカー（Ｂ。

Ｂ　ｅｃｋｅｒ）、　　レチェバリア（Ｍ、　Ｐ　、　
Ｌ　ｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ）。

ゴルドン（Ｒ、Ｅ　、　Ｇ　ｏｒｄｏｎ）およびレチェ
ハリア（Ｈ，Ｅ、　Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ）“ラピッ
ド・デイファレンンエイション・ビトウィーン・ノカル
ジア・アンド・ストレプトミセス・パイ・ペーパー・り
Ｃ７−７１−クラフィー・オン・ホールセル・ヒドロリ
セーツ（Ｒａｐｉｄ　　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏ
ｎ　　１３ｅｔｗｅｅｎ　　Ｎｏｃａｒｄｉａ　　ａｎ
ｄＳ　ｌｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｂｙ　Ｐａｐｅｒ　Ｃ
ｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｏｆ’　　Ｗｈｏｌｅ−ｃ
ｅｌｌ　Ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ）”　（ＡＩ）ｌ）
ＩＭｉｃｒｏｂｉｏｌ、　Ｉ　２：　４２１〜４２３（
１９６４年）］、およびレチェバリア［レチェバリア（
Ｍ、ＰＬ　ｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ）”　アイデンティフ
ィケイ／ヨン・オン・エアロビク・アクチノミセテス・
オン・クリニカル・インボータンス（［ｄｅｎｔｉｆｉ
ｃａｔｉｏｎ　ｏｆΔｅｒｏｂｉｃ　　　Ａｃｔｉｎｏ
ｍｙｃｅｔｅｓ　　ｏｆ　　ＣｌｉｎｉｃａｌＩｍＣ１
１ｎｉｃａｌＩ”　（Ｊ、　　Ｌａｂ、　　Ｃｌ１ｎ、
　Ｍｅｄ、　　７１　：９３４〜９４４（１９６８年）
１のクロマトグラフィーにより確定した。

抗生物質の抵抗性は、接種した１ｓＰＮｏ、２寒天ブレ
ーｊ・表面上に抗生物質感受性ディスクを当てることに
より測定した。抑制帯か観察されないとき（＋）として
、抑制帯か観察されたとき（〜）として抵抗性を評点し
た。

ミコール酸を、ミンニキンにより記載された手法［ミン
ニキン（Ｄ、Ｅ、Ｍｉｎｎｉｋｉｎ）、　アル／′ヤマ
オニー（Ｌ、　Ａ　ｌｓｈａｍａｏｎｙ）およびグソド
フエロウ（ＭＧｏｏｄｆｅｌｌｏｗ）　’“ディファレ
ン／エイジョン・オン・ミコバクテリウム・ノカルジア
・アンド・リレイテド・タクサ・パイ・ンンーレイヤー
・クロマトグラフィー・アナリシス・オン・ホールーオ
ルガニズム・メタノリセーツ（Ｄ　１ｆＴｅｒｅｎｔｉ
ａｔｉｏｎ　ｏｆＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、　Ｎｏ
ｃａｒｄｉａ　ａｎｄ　Ｒｅ１ａｔｅｄ　Ｔａｘａｂｙ
　Ｔｈ１ｎ　−Ｌａｙｅｒ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐ
ｈｉｃ　Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆ　　Ｗｈｏｌｅ−ｏｒｇ
ａｎｉｓｍ　Ｍｅｔｈａｎｏｌｙｓａｔｅｓ）”　（Ｊ
Ｇｃｎ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　　８８：　２００〜
２０４（１９７５年））］に基づく方法により測定した
。

リン脂質は、 （＋）レチェバリア（Ｍ、　Ｐ、　Ｌｅｃｈｅｖａｌｉ
ｅｒ　ａｎｄ　Ｈ。

Ｌ　ｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ）″ア８ユニバーンティ帝ラ
ボラトリ−・アプローチ（Ａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　
ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡ　ｐｐｒｏａｃｈ）”ダイエラ
（Ｄｉｅｔｚ）およびゼイヤー（Ｔ　ｈａｙｅｒ）Ｍ　
（スペシャル・パブリケイシフン（Ｓｐｅｃｉａｌ　Ｐ
ｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ）Ｎｏ、６（バージニア州アーリ
ントン在ソサエティ・フォア・インクストリアル・ミク
ロバイオロシイ（Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒＩ　ｎｄｕｓ
ｔｒｉａｌ　　　Ｍ　ｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）（１９
８０年））２７７〜２８４頁）； （２）ミンニキン（Ｄ　、　Ｅ　、　Ｍ　１ｎｎｉｋｉ
ｎ）、ハッチンソン（１、Ｇ　、　Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏ
ｎ）およびカルシ：１．７ｌ−（Ａｌ１．ｃａｌｄｉｃ
ｏｔＬ）　”シン−レイヤー・クロマトグラフィー・オ
ン・メタノリゼーツ・オン・ミコリフ・アシド−コンテ
イニング・ハタテリア（Ｔｈｉｎ−１ａｙｅｒ　Ｃｈｒ
ｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｏｆ　Ｍｅｊｈａｎｏｌｙｓ
ａｔｅｓ　ｏｒＭｙｃｏｌｉｃ　Ａｃｉｄ−ｃｏｎｔａ
ｉｎｉｎｇ　Ｂａｃｔｅｒｉａ）”　（Ｊ、　Ｃｈｒｏ
ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｌ　８８：　２２１〜２３３（
１９８０年））；および （３）ディト？−（Ｊ　、　Ｃ，Ｄ　ｉｔｔｍｅｒ）お
よびレスター　（Ｒ、Ｌ　、　Ｌ　ｅｓｔｅｒ）　”ア
・シンプル・スペンフィク・スプレィ・フォア・ザ・デ
イテクション・オン・ホスホリビズ・オン・シン−レイ
ヤー・クロマトグラムス（Ａ　　Ｓ　ｉｍｐｌｅ、　Ｓ
　ｐｅｃｉｆｉｃ　Ｓ　ｐｒａｙ　ｆ’ｏｒｔｈｅ　Ｄ
ｅｃｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　　ＰｈｏｓｐｈＯｌｉｐｉ
ｄｓ　ｏｎ　Ｔｈ１ｎ−１ａｙｅｒ　Ｃｈｒｏｍａｔｏ
ｇｒａｍｓ）”（Ｊ　、　Ｌ　１ｐｉｄ　Ｒｅｓｅａｒ
ｃｈ５（１）・　１２６〜１２８（１９６４年））；に
記載の手法により測定する。

メナキノン組成物は （１）クロノペンステノト（Ｒ，Ｍ、　Ｋ　ｒｏｐｐｅ
ｎｓＬｅｄｔ）、ケミカル・、メンノズ・イン・バクチ
リアル・システマテクス（Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｍｅｔｈ
ｏｄｓ　ｉｎ　ＢａｃｔｅｒｉａｌＳ　ｙｓｔｅｍａｔ
ｉｃｓ）、グッドフエロウ（Ｍ　、　Ｇ　ｏｏｄｆｅｌ
ｌｏｗ）およびミンニキン（Ｄ、　Ｅ、Ｍｉｎｎｉｋｉ
ｎ）編（１９８５年）１７３〜１９６頁 （２）コリンズ（Ｍ、　Ｄ、　Ｃｏｌｌｉｎｓ）（上記
文献）２６７〜２８５頁 に記載の手法により測定した。

脂肪酸分析は、ＨＰ　５８９８　Ａ　ミクロバイアル・
アイデンティフィケイシフン・システム（Ｍｉｃｒｏｂ
ｉａｌ　　Ｉｄｅｎｔｉ［１ｃａｔｉｏｎ　Ｓｙｓｔｅ
ｍ）（ミラー（Ｌ、Ｍｉｌｌｅｒ）およびバーガー（Ｔ
、　　Ｂｅｒｇｅｒ）“バクチリアル・アンデンティフ
ィケイシフン・パイ・ガス・クロマトグラフィー・オン
・ホール・セル・ファテ４’アシズ（Ｂａｃｔｅｒｉａ
ｌ　　Ｉ　ｄｅｎｔｉｆｉｃａＬｉｏｎｂｙ　Ｇａｓ　
Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｏｒＷｈｏｌｅ　Ｃｅ
１ｌＦａｔｔｙ　Ａｃ１ｄｓ）”　（ヘラレット−バラ
カード・アプリケ−／フン・ノート（Ｈｅｗｌｅｔｔ−
Ｐ　ａｃｋａｒｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｎｏｔｅ）
　２２８〜４１　（１９８５年））参照）８頁に記載の
手法を用いて行なった。脂肪酸メチルエステルは、同様
な条件で発育させて凍結乾燥した全細胞から得られる。

第７図に示す系統図（デンドロダラム）はユークノッド
距離（Ｅ　ｕｃｌ−ｉｄｉａｎ　ｄｉｓｔａｎｃｅ）に
基づき、フンビューターを用いて作成した。

第８図に示す主要（ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ）成分分析は二
次的であって、上記同様コンピューターを用いて作成し
た。

培養菌株の特性 培養菌株Ａ８２８１０．１は、複合培地および指定した
培地の双方で良好に発育する。しかし気相菌糸体はＩＳ
Ｐ培ｔｔｔ１２、ベネット寒天およびトマトペースト／
オートミール（ＴＰＯ）寒天を除き、まばらである。気
相菌糸体を産生じたとき、気生胞子塊はピンク色ないし
白色である。裏面は赤味の褐色ないし明確な赤味のオレ
ンジ色である。可溶性色素は観察されない。培養菌株Ａ
８２８１０゜１の培養菌株特性を表Ｉに示す。

表Ｉ・種々の寒天培地８」二Δ８２８１０．１の培養菌
株特性 　　Ｓ　Ｐ Ｎｏ、２ 豊富 ５５、ｓ、Ｂｒ 豊富、ｂ白色 淡褐色 ５Ｐ Ｎｏ、３ 良好 ３９、ｇｙ、ｒＯ 微量、桃色 なし 　Ｓ　Ｐ Ｎｏ、４ 豊富 ４３、ｍ、ｒＢｒ。

微■、ピンク色 なし ｓＰ 豊富 ３７、ｍ、ｒＯ なし なし ５Ｐ Ｎｏ、７ Ｇ　豊富 Ｒ：　４３．ｍ、ｒＢｒ。

Ａｍ：なし 寒天培地 １特性６ ＴＣＣ Ｎｏ、１７２ Ｇ：良好 Ｒ：　３９．ｇｙ、ｒＯ Ａｍ：微量、５ｃａ、淡黄色味の ピンク色 Ｓｐ：なし ベネノト Ｇ　：豊富 Ｒ：　４２．１．ｒＢｒ Ａｍ：良好、白色 Ｓｐ；なし エマーソン Ｇ　：豊富 Ｒ＋　５４．ｂｒＯ Ａｍ：微量、白色 Ｓｐ・なし Ｇ　：豊富 グルコース　　Ｒ：　３９．ｇｙ、ｒＯアスパラギン　
Ａｍ；微ｆｉ１５ｃａ、淡黄・ピンク色Ｓｐ：なし Ｇ・かなり良好 ジエンセンス　Ｒ：　３９．ｇｙ、ｒＯＡｍ：微量、白
色 寒天培地 ニュートリエンド Ａ８２８１０月特性５ Ｇ：良好 Ｒ：　５３．ｍ、０ Ａｍ゛なし Ｓｐ：なし Ｇ・良好 ポテト　　　Ｒ：　３９．ｇｙ、ｒＯ 人参　　　　Ａｍ・微量、白色 Ｓｐ・なし Ｇ：豊富 Ｒ：　５８．ｍ、Ｂｒ ＴＰＯＡｍ：良好、５ｃｂ、灰色黄色味ピンク色 Ｓｐ：なし Ｇ：良好 ザペソク　　Ｒ：　４３．ｍ、ｒＢｒ。

八ｍ：かなり良好、白色 Ｓｐ：なし ａ、　３０　’Ｃで１４日間培養 す、Ｇ−発育、Ｒ−裏面、Ａｍ−気相菌糸体、Ｓｐ−可
溶性色素。

形態学的特性 培養菌株Ａ８２８１０．１は広い基質菌糸体を産生ずる
。気相菌糸体は著しい。光学顕微鏡およびＳＥＭで観察
するとき、胞子中の分節は観察されない。菌糸は全く胞
子を形成しないと思われる。

外観上、密な繊維状を形成する多数の菌糸束が容易に認
められる。これら気相菌糸体のあるものは、幾らか胞子
との類似点を有する短い節または突起を形成する。ＳＥ
Ｍ観察によりこれらの構造は真正な胞子でないことが示
された。時には他の繊維状構造か観察される。これらの
構造は、気相菌糸の繊維状外観に加つるに一般に、種名
フイブロサ（ｒｉｂｒｏｓａ）の基礎となっている。

生理学的特性 培養菌株Ａ８２８１０．１は次に示す炭水化物から酸を
生産する　アドニトール、Ｌ−アラビノース、セロビオ
ース、フルクトース、ガラクトース、グルコース、グリ
セロール、グリコーゲン、ラクトース、マルトース、マ
ンノース、ラムノース、リボース、シュクロース、トレ
ハロースオヨびキンロース。八８２８１０．１は次のも
のからは酸全生産しない：Ｄ−アラビノース、セルロー
ス、デキストリン、ズルシトール、エタ／−ル、エリス
リトール、イノシトール、イヌリン、マンニト−ル、メ
リジト−ス（ｍｅｌ　１ｚｉｔｏｓｅ）、メソビオース
、α−メチル−〇〜グルコ／ド、ラフイ／−ス、サリシ
ン、ソルビトール、ソルボースおよびキンリト−ル。

培養菌株Ａ８２８１０．１は次の有機酸（ナトリウム塩
として）を利用する：酢酸、醋酸、プロピオン酸および
ピルビン酸。この菌株は安息香酸塩、クエン酸塩、キ酸
塩、乳酸塩、リンコ酸塩、ムチン酸塩、シュウ酸塩、フ
ハク酸塩および酒石酸塩を利用しない。

Ａ８２８１０．１はカゼイン、エラスチン、エスクリン
、ヒボキサンチン、澱粉、テストステロン、チロシンお
よび尿素を分解するか、アデニン、アラントイン、リン
ゴ酸、グアニン、馬尿酸塩および牛サンチンを分解しな
い。

Ａ８２８１０．１はカタラーゼ、ホスファターセおよび
ウレアーゼを産生し、ゼラチンを液化し、脱脂乳を加水
分解し、５０°Ｃ１８時間で生残ることができる。菌株
はメラノイト色素または硫化水素を産生ぜず、硝酸塩を
還元することなく、脱脂乳をペプトン化しない。

Ａ８２８１０月は、セファロチン（３０μ９）、ノンフ
マイシン（２μｇ）、ベニンリンｃ；　（ｌ　Ｏ単位）
１、Ｉファンビン（５μ９）およびリゾチーム（５０μ
９／抑）に抵抗性を有する。また菌株はバシトラシン（
１０単位）、ジエンタマイシン（１０μｉ？）、ネオマ
イシン（３０μ９）、オレアンドマイシン（１５μｇ）
、ストレプトマイシン（１０μｇ）、テトラサイｈリン
（３０μ９）、トブラマイシン（ｉ０μｇ）およびバン
コマイシン（３０μ９）に感受性を有する。

培養菌株Ａ８２８１０．１は２０〜４５°Ｃの温度で発
育し、最適生長温度は３７°Ｃであると考えられる。こ
の菌株は５％を越えない（５％を含む）濃度の塩化ナト
リウムに耐性を有する。

細胞膜分析 加水分解した全細胞はメソ−ジアミノピメリン酸を含ｆ
ｆする。全細胞抽出物中に次の糖類を検出したニガラク
トース、グルコース、マンノース、マシュロース（ｍａ
ｄｕｒｏｓｅ）およびリボース。それ故人８２８１０．
１はタイプ■細胞膜とタイプＢ糖パターンを有する［レ
チェバリア（Ｍ、　Ｐ　、　Ｌ　ｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ
　ａｂｄ　Ｈ，Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ）　”ケミカル
・コンボッジョン・アズ・ア・フライテリオン・イン・
ザ・クラシフィケイシフン・オン・エアロビク・アクチ
ノミセテス（Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏ
ｎ　ａｓ　ａＣｒｉｔｅｒｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｃ１
ａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｅｒ。

ｂｉｃ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）”　（Ｉ　ｎｔ
、　　Ｊ　、　Ｓ　ｙｓｔ、　Ｂ　ａｃｔｅｒｉｏｌ、
２０：　４３５〜４４３（１９７０年）参照］。

ミコール酸は検出されなかった。

全細胞のリン脂質試験により、ホスファチジルイノント
−ル、ジホスファチジルグリセロールおよびＧｌｕＮｕ
（グルコサミンを含む未知構造）の存在が示された。ホ
スファチジルエタノールアミンおよびホスファチジルコ
リンのいずれも検出されなかった。それ故人８２８１０
．１はタイプＩｖのリン脂質パターンを有する［レチェ
バリア（Ｍ、ＰＬ　ｅｃｈｅｖａｌ　１ｅｒ）、スター
ン（Δ、　Ｅ、　Ｓ　Ｌｅｒｎ）およびレチェバリア（
Ｈ、Ａ　、　Ｌ　ｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ）　”ホスホリ
ピズ・イン・ザ・タキソノミイ・オン・アクチノミセテ
ス（Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｔａ
ｘｏｎｏｍｙ　ｏｒΔｃｔ　ｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）”
アクチノミセテス（Ａｃｔｉｎ。

ｍｙｃｅｔｅｓ）、シャール（Ｋ、　Ｐ、５ｃｈａａｌ
）およびパルベラ−（Ｇ、　Ｐｕ１ｖｅｒｅｒ）ｌにュ
ーヨーク・シュツットガルトＺｂ１．　Ｂａｋｔ、　５
ｕｐｐ１．　ｌ　１．　　ＧｕｓｔａｖＦ　１ｓｃｈｅ
ｒ　Ｖ　ｅｒｌａｙ（１９８１年）参照コ。

Ａ８２８１０．１中に検出されたノナキノン類は、９個
のイソプレン単位を有する６水素化ノナキノン類ＭＫ−
９（Ｈａ）と少量の８水素化メカキノン類ＭＫ−９（Ｈ
８）である。

菌株Ａ８２８１０．１の同定 Ａ８２８１０．１の化学分類学的性質ならびに培養に関
する特性および形態学的特性により、その単離体はアク
チノマデユラ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ）属に帰属す
ることが支持される［スカーマン（Ｖ、Ｂ。

Ｄ、　Ｓ　ｌ＋ｅｒｍａｎ）、マクゴーワン（Ｖ、Ｍｃ
Ｇｏｗａｎ）およびスニース（Ｐ　、　）（、Ａ　、　
　Ｓ　ｎｅａｔｈ）、アブルーブト・リスク・オン・バ
クチリアル・ネームス（Ａｐｐｒｏｖｅｄ　　Ｌｉ５ｔ
ｓ　ｏｒ　　Ｂａｃｔｅｒｉａｌ　　Ｎａｍｅｓ）（ワ
シントンＤ、Ｃアメリカン・ソサエティ・フォア・ミク
ロバイオロシイ（Ａｍｅｒｉｃａｎ　５ｏｃｉｅｔｙ　
ｆｏｒ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）　Ｉ　９８０年）
）参照］。

培養菌株Δ８２８１０月と共に、Ａｃｔｉｎｏｍａ（Ｉ
　Ｕ　ｒ　ａに属する２３タイプの菌株を２１種の異な
る寒天培地上に発育させる。培養に関する特性と形態学
的特性を比較した。培養菌株Ａ８２８１０１は次の菌株
と類似性を示した。アクチノマデユラ・コエルレア（Ａ
、ｃｏｅｒｕｌｅａ）、アクチノマデユラ・マデュラエ
（Ａ　、　ｍａｄｕｒａｅ）、アクチノマデユラ・プル
ベラセウス（Ａ、ｐｕｌｖｅｒａｃｃｕｓ）、アクチノ
マデュ→・ロセオルファ（Δ、　ｒｏｓｅｏｒｕｆａ）
、アクチノマデユラ・ルブラ（Ａ　、　ｒｕｂｒａ）、
アクチノマデユラ・サルモネア（Ａ、　ｓａｌｍｏｎｅ
ａ）およびアクチノマデユラ・ベルコソスポーラ（Ａ　
、　ｖｅｒｒｕｃｏｓｏｓｐｏｒａ）。

これら７種の生化学的特性は、文献から集め、類似性係
数の表を作成することによりＡ８２８１０暑と比較した
。ジャカード（Ｊ　ａｃｃａｒｄ）係数Ｓｊと単独調和
（ｓｉｍｐｌｅ　ｍａｔｃｈｉｎｇ）係数Ｓｓｍを用い
た［クリロウイン（Ｗ、Ｋ　ｕｒｙｌｏｗｉｃｚ）、バ
ズキーウイソ（Ａ　、　　Ｐ　３ｓｚｋｉｅｗｉｃｚ）
、ウオズニッカ（Ｗ、　Ｗｏｚｎｉｃｋａ）、クルザト
コウスキー（Ｗ、　Ｋ　ｕｒｚａｔｋｏｗｓｋｉ）およ
びスズルガ（Ｔ　、　Ｓ　ｚｕｌｇａ）、“″ニュメソ
カル・タキソノミイ・オン・ストレプトミセテス（Ｎｕ
ｍｅｒｉｃａｌ　　Ｔａｘｏｎｏｍｙ　ｏｒＳ　ｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｔｅｓ）”　（ワルノヤワ、ポリシュ・
メディカル・パブリッシャーズ（Ｐｏｌｉｓｈ　Ｍｅｄ
ｉｃａｌ　Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ）　１９７５年）３７
頁参照］。

このデータを表Ｈに要約する。

表■ 類似性係数８を用いるＡ８２８１０ Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｓｐ、　　との比較１の数
種の 培養菌株 ｊ ｓｍ ａ、Ａ、ｃｏｅｒｕｌｅａのデータは採用していない。

これらの培養菌株それぞれの全細胞に関する脂肪酸分析
を行なった。このデータから得られた系統図および主要
成分分析結果をそれぞれ第７図および第８図に示す。

類似性係数と脂肪酸分析結果から、Ａ８２８１０１は、
比較すべき上記公知の７種のうちＡ。

ｐｕ　１ｖｅｒａｃｅｕｓと△、　ｖｅｒｒｕｃｏｓａ
ｓｐｏｒａの大概の特性項目とその共通性を持っている
。しかし、この類似性は１、八８２８１０．１が他のい
ずれかの種の菌株と同一であると結論するには不充分で
ある。

Ａ８２８１０．ｉとこれらの２種の間の差異を表■に示
す。

それ故この研究により、培養菌株Ａ８２８１０゜１はＡ
ｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａに属する新規の種であるという
結論が支持される。かかる理由のため、培養菌株Ａ８２
８１０．１をＡ　ｃｔ　ｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｒ　１ｂ
ｒｏｓａｓｐ、　ｎｏｖ、　　と命名した（ラテン語の
形容詞ｒｉｂｒｏｓａは気相菌糸の繊維状外観に注目し
た語である）。

他の微生物の場合と同様に、本発明のＡｃｔｉｎ。

ｍａｄｕｒａ　ｆｉｂｒｏｓａ　ｓｐ、ｎｏｖ、　ＮＲ
ＲＬ　ｌ　８３４８のＡ８２８１０生産菌株の特性は、
変異現象に従属する。この菌株の突然変異菌株は、この
技術分野で知られた方法たとえば紫外線、Ｘ線、ガンマ
および化学薬品（たとえばｎ−メチル−Ｎ”−二トロＮ
−ニトロソグアニジン）のような種々の物理的および化
学的突然変異誘発原で処理することにより得ることがで
きる。Ａ８２８１０生産特性を保持するＡｃｔｉｎｏｍ
ａｄｕｒａ　ｆｉｂｒｏｓａ　ｓｐ、　ｎｏｖ、　　Ｎ
　ＲＲＬ１８３４８の自然的および誘発された突然変異
菌は、本発明の一部であると考えられる。

Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｆｉｂｒｏｓａ菌株の発育
に使用する培地は多くの培地のいずれか１つであること
ができる。しかし製造の経済性、最適収率および生成物
単離の容易性のため、ある種の培地か選ばれる。

このように大規模発酵における好ましい炭水化物原は、
たとえばグルコースおよびポテトデキストリンであるが
、リボース、キンロース、フルクト−ス、ガラクトース
、マンノース、マンニトールなども使用することができ
る。

好ましい窒素源は酸素加水分解カゼインおよび酵母であ
るが、肝粉末、肉ペプトン類、魚粉なとも有用である。

培地に配合することができる栄養素無機塩類のうち、亜
鉛、ナトリウム、マグネシウム、カルシウム、アンモニ
ウム、クロリド、炭酸、硫酸、硝酸イオンなどのイオン
を供給することができる通常の可溶性塩がある。

また、この微生物の発育と生長のために必要な必須微重
元素を培地中に含有させるべきである。

かかる微■元素は通常、微生物の発育要求量に合うのに
充分量で培地中の他の成分中の不純物として存在する。

発泡は通常、問題ではないが、もし必要であればポリプ
ロピレングリコールのような消泡剤少量（すなわち０．
２ｆｆＲ／のを大規模発酵培地に加えることができる。

実質量の抗生物質を生産するため、タンク内における液
中好気的発酵が好ましい。Ａ８２８１０少量は振盪フラ
スコ培養により得ることができる。

抗生物質生産に通常付随する大型タンクへの胞子形微生
物の接種におけるタイムラグのため、生長期接種材料を
使用するのが好ましい。生長期接種材料は次のように製
造する。少量の培地に微生物の胞子型また菌糸体断片を
接種し、微生物の新鮮で活力ある発育培養物を得る。次
いでこの生長期接種材料を、より犬なるタンクに移す。

生長期接種材料の培地は大規模発酵のために使用するも
のと同一のものであることができるが、他の培地であっ
ても適当である。

へ８２８１０生産閑を約２５〜４０’Ｃの温度で発育さ
せることにより、Ａ８２８１０が生産される。Ａ８２８
１０生産のための最適温度は約３４〜３６°Ｃのようで
ある。

液中好気的培養工程で通常行なうように、容器底部から
容器中に滅菌空気を吹き入れ、この間培地を常套のター
ビン羽根車で撹拌する。良好な程度に適用する条件下に
おける発酵の最大酸素取入れ量は約０　、３５　ｍｆｖ
１／　Ｑ／分である。発酵成約１５Ｑを含む完全に調節
した１６５ｇ発酵容器中、撹拌速度３００　ｒｐｍにお
けるＯ、ｌ　２５ｖ／ｖ／ｍの通気速度は、０．３４大
気圧で空気飽和の４５％もしくはそれ以上の溶解酸素量
を維持するために充分な速度である。

発酵の間、抗生物質に感受性を有することが知られてい
る微生物に対する抗生物質活性を調へるために発酵液試
料を試験することにより、抗生物質Ａ８２８１０の生産
を続けることができる。Ａ８２８１０を試験するのに有
用な供試微生物１種は枯草菌（Ｂ　ａｃｉｌｌｕｓ、５
ｕｂｔｉ！ｉｓ　Ａ　Ｔ　ＣＣ６６３３）である。この
生物試験法は寒天−（ぼみ（ａｇａｒｗｅｌｌ）拡散試
験により好都合に行なわれる。

液中好気的発酵条件下、Ａ８２８１０の生産に続いてこ
れを発酵技術で使用する方法により発酵培地から回収す
ることができる。Ａ８２８１０生産菌を発酵させる間に
生成した抗生物質活性は、濾過した発酵液と菌糸佳境の
双方中に存在する。

しかし最明に培地を濾過し、菌糸佳境から発酵液を分離
することにより、最高量のＡ８２８１０を回収すること
ができる。濾過した発酵液と菌糸体を別々に精製し、そ
れぞれのＡ８２８１０部分を得る。この精製で種々の処
理法を適用することができる。濾過した発酵液の好まし
い精製法は、これをｐＨ約９に調節し、たとえば酢酸エ
チルのような適当な溶媒で抽出する方法を包含する。次
いて抽出溶媒を減圧下に蒸発させて発酵液部分のＡ８２
８１０を得ることができる。

菌糸佳境の好ましい精製法は、分離した菌糸体濾過固体
を、たとえばアセトンのような適当な溶媒で抽出する方
法である。次いで抽出溶媒を減圧下に蒸発させて濃厚水
溶液を得る。この水溶液をｐＨ約９に調節し、たとえば
酢酸エチルのような適当な溶媒で抽出する。抽出溶媒を
減圧下に濃縮することにより、菌糸体境部分のＡ８２８
１０を得る。

発酵液と菌糸体部分のＡ８２８１０を更に同様の方法で
精製する。好ましい方法はシリカゲルクロマトグラフィ
ーを包含する。

別法として培地成分と菌糸体を含む培養物固体をへ８２
８１０源とし、これを抽出または分離することなくくシ
かし好ましくは水を除いた後）使用することができる。

たとえば八８２８］０の発酵生産後、全発酵液を、凍結
乾燥により、ドラム乾燥により、または共沸蒸留して乾
燥することにより乾燥することができる。乾燥した発酵
液をたとえば直接、飼料プレミックス中に混合する。

本発明化合物［１］のアルカリ金属およびアルカリ土類
金属カチオン塩類は、カチオン塩の製造のため通常使用
する操作に従って製せられる。たとえばＡ８２８１０の
遊離酸をアセトンのような適当な溶媒に溶解し；水１／
３容を加え；この溶液を、カチオン塩形成の塩基（たと
えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム）でｐＨ約９〜
１０に調節する。生成した塩を濾過または溶媒蒸発のよ
うな通常の方法により単離することができる。

塩形成の好ましい方法は、Ａ８２８１０（酸型）を酢酸
エチルのような水非混和性溶媒に溶解し、等容の水を加
え、混合物を対応するカチオン塩基（たとえば水酸化ナ
トリウム、水酸化カリウムなど）でｐＨ１０に調節する
方法である。分離した有機層を水洗し、濃縮乾固する。

残留物をジオキサンから凍結乾燥する。この塩をヘキサ
ンのような適当な溶媒から結晶化することができる。

有機アミン類により形成される塩類は同様に製造するこ
とができる。たとえばガス状または液体アミンを、Ａ８
２８１０の適当な溶媒（たとえばアセトン）溶液に加え
；溶媒と過剰量のアミンを蒸発して除くことができる。

式［１１で示されるアシルエステル誘導体は、たとえば
Ａ８２８１０を対応する酸無水物または酸クロリドで処
理することにより製せられる。エステル化は、Ａ８２８
１０のヒドロキシル基のうちの１個所で起こる。このよ
うなエステル体は典型的に、室温でＡ８２８１０を、た
とえば対応する酸無水物と反応させることにより製造さ
れる。

式［１］で示されるアルキルエステル誘導体は、（票準
的操作によりカルボキシル基のエステル化により製せら
れる。アルキルエステル誘導体［１］は、生体外試験を
したときの活性が典型的に低い。しかし動物に投与した
とき、このエステル体は、生体内で活性型に変換される
薬剤前駆体（ｐｒｏ　ｄｒｕｇｓ）として作用すること
ができる。

式［１］で示されるアルキルエーテル誘導体は、ヒドロ
キシル基１個ないしそれ以上が′ｌ″Ｒ７基で置換され
た化合物である。ＹＲ，基中、ＹはＯまたは５１ Ｒ２はＣ８〜Ｃ６アルキル；ＣＩ〜Ｃ４アルコキシ（Ｃ
７〜Ｃ５）アルキル；Ｃ１〜Ｃ４アルコキシカルボニル
（Ｃ，−Ｃ５）アルキル；アミノ（０２〜Ｃ６）アルキ
ル・メルカプト（Ｃ２〜Ｃ２）アルキル；ヒトロキ／ア
ルキル；ハロアルキル；または（Ｒ’）ｍ−フェニル（
ＣＨ、）ｎ （ここにＲ′はＣ，〜Ｃ４アルキル、Ｃ３〜Ｃ４アルコ
キンまたはヒドロキシ：ｍはＯ〜２；ｎはＯ〜３）を表
わす。

上記基名アルキルおよびアルコキシは、前記意義を有す
るが、その炭素原子数は上記のように限定される。

ヒドロキシアルキルはモノヒドロキシ（Ｃ７〜Ｃ６）ア
ルキル、またＹか０であるとき２，３−ジヒドロキシプ
ロプ−１−イル基を意味する。

ハロアルキルは、ハロゲン置換基（臭素、塩素およびフ
ッ素から選ばれる）１〜３個を有するＣ６〜Ｃ，アルキ
ルを意味する。アルキル部分がジハロまたはトリハロで
置換されているとき、ハロ置換基は同一のハロゲンでな
ければならない。

エーテル誘導体［１］のうち、ＹがＯ，ＲがＣ３〜Ｃ６
アルキルである化合物が好ましい。エーテル誘導体は、
対応するＡ８２８１０化合物またはその塩を所望の第一
アルコールもしくはチオールと反応させることにより製
せられる。

アルコールまたはチオール出発物質のあるものを用いる
とき、混合物に酸触媒を加える必要があることもある。

適当な触媒は塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、ベンゼン
スルホン酸、トルエンスルホン酸、二酸セレンおよび三
フッ化ホウ素を包含する。

この反応を容易にするため、たとえば水、アセトン、ベ
ンゼン、エーテル、テトラヒドロフランまたはジオキサ
ンのような溶媒を加えることができる。一般に室温で反
応か起こるが、より高い温度であってもよい。

反応後の処理法は時には通常の後処理法で充分であるが
、更に精製して本発明化合物を得ることが必要なことも
ある。かかる精製は、たとえばカラムクロマトグラフィ
ー、薄層クロマトグラフィ、分別結晶などのようなよく
知られた方法により達成することかできる。

本発明は、またＡ８２８１０のウレタン誘導体を得るの
に適するように、Ａ８２８１０またはその塩を式： ％式％［２］ Ｌ式中、Ｒ１は前記と同意義］ で示されるイソシアネートと反応させることから成るウ
レタン誘導体の製造法を提供する。

Ａ３２８ｉ０の塩は特にナトリウム塩を用いるのが好ま
しい。イソンア不−ト体は、モノ誘導体を最適量で得る
ためわずかに過剰量（たとえば約１０％過剰量）で加え
るべきである。この反応は好ましくは、塩素化炭化水素
（たとえば四塩化炭素、塩化メチレンまたはクロロホル
ム）、エーテル、酢酸エチルのような不活性溶媒、また
はベンゼンまたはトルエンのような芳香族炭化水素溶媒
中で行なわれる。反応温度は重要で、はないが、約０°
Ｃないし混合物の沸点の間の温度（好ましくはほぼ室温
）である。

化合物［１］（Ａ８２８１０化合物）は抗菌および抗コ
クシジウム活性を有する。Ａ８２８１０化合物は嫌気性
菌に対して特に活性を有する。Ａ８２８１０の種々の菌
類に対する抑制を標準寒天−希釈試験法で試験した最少
抑制濃度（ＭＩＣ）を表■および■に要約する。２４時
間作用後の終時点における結果を示したものである。

表■。

抗生物質Ａ８２８１０の試験管内抗菌活性５ｊａｐｈｙ
ｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｘｉ、　ｌ５ｔａｐ
ｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｖ４１Ｓｔａｐ
ｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　Ｘ４００ＳＬａ
ｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　５１３ＢＳｔ
ａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ　
２７０Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｅｐｉｄｅｒｍ
ｉｄｉｓ　２２２Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｙｏ
ｇｅｎｅｓ　Ｃ２０３Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐ
ｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ＰａｒｋｌＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ　ｒａｅｃｉｕｍ　Ｘ６６Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　２０４１Ｈａｅｍ２Ｏ４１
Ｈａｅ　１ｎｆｌｕｅｎｚａｅ　Ｃ，Ｌ。

１１ａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ　　１ｎｒｌｕｅｎｚａｅ　
　７６Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　　Ｎｌ０Ｅ
ｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　　ＥＣ１４Ｅｓｃｈ
ｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　　ＴＥＭＥｎｔｅｒｏｂａ
ｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ　Ｃ３２Ｅｎｔｅｒｏｂ
ａｃｔｅｒ　ａｅｒｏｇｅｎｅｓ　１ｉＢ１７Ｋｌｅｂ
ｓｉｅｌｌａ　ｓｐ Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ　ｓｐ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　Ｘ５
２８Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ　
Ｘ２３９Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎｏｓ
ａ　ＰＳ１８Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｕｇｉｎ
ｏｓａ　ＰＳ７２Ｓｅｒｒａｔｉａ　ｍａｒｃｅｓｃｅ
ｎｓ　Ｘ９９Ｐｒｏｔｅｕｓ　ｓｐ。

Ｓｈｉｇｅｌｌａ　５ｏｎｎｅｉ １、Ｏ １，０ ＋、０ １、Ｑ １．０ １．０ 〉１２８ ８．０ 〉１２８ 〉１２８ ０．２５ 〉■２８ ０．２５ 〉１２８ 〉１２８ ２．０ 表■：抗生物質Ａ８２８１０に対する嫌気性菌の感受性 嫌気性菌 Ｍ　ｒ　Ｃ（ｍｃｇ／屑の Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｄｉｆ［′１ｃｉｌｅ　２９
９４Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ
　８１Ｃ１ｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｓｅｐｔｉｃｕｍ　１
２２ｇＥｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｅｒｏｆａｃｉｅｎ
ｓ　　１２３５Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ａｓａｃｃｈ
ａｒｏｌｙｔｉｃｕｓＰｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｒｅ
ｖｏｔｉ　　＋２８１Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ　ａｎａｅｒｏｂｉｕｓＰｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔ
ｏｃｏｃｃｕｓ　ｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓＰｒｏｐｉｏ
ｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｃｎｅｓ　７９Ｂａｃｔｅ
ｒｏｉｄｅｓ　ｆｒａｇｉｌｉｓ　　１ｌ１１１ａｃｔ
ｅｒｏｉｄｅｓ　ｆｒａｇｉｌｉｓ　＋８７７Ｂａｃｔ
ｅｒｏｉｄｅｓ　ｆｒａｇｉｌｉｓ　　１９３６ＢＢａ
ｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｔｈｅＬａｉｏｔａｏｍｉｃｒｏ
ｎＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅｎｉ
ｃｕｓＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｍｅｌａｎｉｎｏｇｅ
ｎｉｃｕｓＢａｃｔｅｒｏｉｄｃｓ　ｖｕｌｇａｔｉｓ
　１２＋１Ｒａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｃｏｒｒｏｄｅｎ
ｓ　　１８１４Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｓｙｍｂ
ｉｏｓｕｍ　１４７０Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｎ
ｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ　６０５４＾０．５ ≦０．２５ １３０２　　≦０２５ ≦０．２５ １４５１　　≦０２５ １６２４　　≦０２５ ≦０２５ 抗コクシジウト活性はＡ８２８１０化合物の重要な性質
である。たとえばエイメリア・テ不う（Ｅ　ｉｍｃｒｉ
ａ　ｔｅｎｅｌｌａ）に対する生体外組織−培養物スク
リーンにおいて、八８２８１０は＜０．００２５ｍｃｇ
／ｍＱ、プロピオニル−Ａ８２８１０は０゜０５ｍｃｇ
／ｍ（！、およびアセチル−Ａ８２８１０は０　、　Ｏ
ｌ　ｍｃｇ／　ｍ（ｌで活性を有する。

家禽のコクシジウム症を処置するため、Ａ８２８１０化
合物の非毒性抗コクシジウム量を、好ましくは１日当り
基準で経口的に投与する。Ａ８２８１０化合物は多くの
方法で供給することができるか、薬理学的に許容される
担体、好ましくは家禽により消化されうる飼料と共に供
給するのが最も好晶合である。Ａ　８２８１０化合物の
適当など農度を決定する際、種々の要因を考慮しなけれ
ばならないか、投与量は一般に飼料巾約０．５〜１００
　ｐｐｍ、好ましくは飼料量中約１〜２５ｐｐｍである
。

他の観点から本発明はコクシジウム症を処置するための
組成物に関する。１群の組成物はコクシジウム症を処置
するためのＡ８２８１０化合物の有効量を適当な担体と
共に含有させたものである。

以前に、多くの化合物が１種ないしそれ以上のポリエー
テル抗生物質の抗コクシジウム活性に関して共力効果を
有することが見い出された。たとえばマウリス・Ｅ・カ
レンダ（Ｍａｕｒｉｃｅ　Ｅ　、　Ｃａｌｌｅｎｄｅｒ
）およびトーマス・Ｋ・シェフアース（Ｔｈｏｍａｓ　
Ｋ、　　Ｊｅｆｆｅｒｓ）は、ニカルバジンまたは４．
４′−ジニトロカルボアニリドおよびポリエーテル抗生
物質から成る抗コクシジウム組成物を開示した［米国特
許下４，２１８，４３８号コ。アルバート・Ｊ・クリン
トン（Ａ　１ｂｅｒｔ　Ｊ　、　Ｃ１ｉｎｔｏｎ）およ
びジョーシン・Ｏ−Ｐ・オドバーティ（Ｇ　ｅｏｒｇｅ
Ｏ，Ｐ、Ｏ’　Ｄｏｈｅｒｔｙ）は、ある種ノナフタリ
ンアミン類およびベンゼンアミン類が、若干のポリエー
テル抗生物質の抗コクシジウム活性に関して共力効果を
有することを見い出した［それぞれ米国特許下４，７６
４．５３４号および第４，３６６．１６８号参照］。ラ
リ−・Ｒ・マクドウガルド（ＬａｒｒｙＲ，ＭｃＤｏｕ
ｇａｌｄ）は、モネンシンとメチクロルピンドールの殺
コクシジウム組成物を開示した［米国特許下４，０６１
，７５５号コ。

ニカルバンン（ｎｉｃａｒｂａｚｉｎ）および４，４°
−ジニトロカルボアニリドは米国特許１２．７３１．３
８２号に開示されている。ニカルバジンは４，４″／ニ
トロカルホアニリドと２−ヒドロキ／−４゜６−７メチ
ルピリミジンの複合体であるが、４４−ジニトロカルボ
アニリドのみが抗コクシジウム活性を現わす［サイエン
ス（Ｓ　ｃｉｅｎｃｅ）　］　２２巻２４４（１９５５
年）参照］。

本発明のＡ８２８１０化合物もまた上記のような種類の
化合物と共力効果を現わす。それ数本発明の他のグルー
プの組成物は、（１）Ａ８２８］０化合物［１］または
その薬理学的に許容される塩を、（２）下記から選ばれ
る化合物と組合わせて成る共力作用を有する共力薬であ
る： ａ、ニカルバジン、 ｂ、４．４’−ジニトロカルボアニリド、Ｃ式。

［式中、Ｒ２はＣ，−Ｃ，アルキル、Ｒ３はハロゲン、
Ｃ１〜Ｃ４フルオロアルキル、ＣＩ〜Ｃ４フルオロアル
コキシまたはＣ８〜Ｃ４フルオロアルキルチオ、Ｒ４は
ハロゲン、Ｒ５は水素またはハロゲンｍはＯ，ｌまたは
２：およびｎはＯまたは１（但しＲ４置換基が存在する
とき、これは２位以外の位置にある）を表わす」 で示されるナフタリンアミン化合物、 ｄ、２．４−ジニトロ−Ｎ−［４−（）リフルオロメト
キシ）フェニル］−６−（トリフルオロメチル）ベンゼ
ンアミン；２，４−ジニトロ−Ｎ−［４−（＋、１，２
．２−テトラフルオロエトキシ）フェニル］６−０リフ
ルオロメチル）ベンゼンアミン；または２．４−ジニト
ロ−Ｎ−［４−（ペンタフルオロエチル／）フェニル］
−６−０リフルオロメチル）ベンセンアミンから選ばれ
るベンゼンアミン、ｅメチクロルピンドール（ｍｅｔ　
１ｃｈｌｏｒｐｉｎｄｏｌ）、または ｒａ−ｅ化合物の薬理学的に許容される塩。

式［３１中、Ｃ１〜Ｃ４アルキルはメチル、エチル、ｎ
−フロビル、イソフロビル、ｎ−ブチル、ｓｅｃブチル
、イソブチル、ｔ−ブチルなどを包含する。

ハロゲンはフッ素、塩素、臭素およびヨウ素を表わす。

Ｃ５〜Ｃ４フルオロアルキルはフッ素原子１個ないしそ
れ以上を有する０１〜Ｃ４アルキルである。

このフルオロアルキル基はトリフルオロメチル、１．１
．２．２−テトラフルオロエチル、ペンタフルオロエチ
ル、１．２，３．３−テトラフルオロプロピル、ノナフ
ルオロブチルなどを包含する。

Ｃ１〜Ｃ４フルオロアルコキシはフッ素原子を個ないし
それ以−Ｌを有するＣ、−Ｃ，アルコキシである。この
フルオロアルコキシ基は、ジフルオロメトキン、トリフ
ルオロメトキシ、ｌ−フルオロエトキシ、１．１，２．
２−テトラフルオロエトキシ、ペンタフルオロエトキシ
、１，２，２　３．３−ペンタフルオロプロポキシ、ヘ
プタフルオロプロポキシ、４，４．４−トリフルオロブ
トキシなどを包含する。

Ｃ１〜Ｃ４フルオロアルキルチオはフッ素原子１個ない
しそれ以上を有するＣ１〜Ｃ，アルキルチオである。こ
のフルオロアルキルチオ基は、トリフルオロメチルチオ
、１．１，２．２−テトラフルオロエチルチオ、ペンタ
フルオロエチルチオ、４゜４．４４リフルオロブチルチ
オなどを包含する。

化合物［３］中、ｍおよびｎが０１およびＲ５が水素で
ある化合物が好ましい。

典型的化合物［３−］を次に列挙する：４−フルオロー
Ｎ−［２，４−ジニトロ−６−（トリフルオロメチル）
フェニル］−１−ナフタリンアミン・ ４−ヨード−Ｎ−［２，４−ジニトロ−６−（トリフル
オロメチル）フェニル］−１−ナフタリンアミン； ４−トリフルオロメチル−Ｎ−［２，４−ジニトロ−６
−’（トリフルオロメチル）フェニル］−１−ナフタリ
ンアミン・ ４−ペンタフルオロエチル−Ｎ−［２，４１ニトロ−６
−０リフルオロメチル）フェニル−１ナフタリンアミン ６、７−−７メチルー４−（１，１，２，２−テトラフ
ルオロエトキシ）−Ｎ−［２，４−ジニトロ−６（トリ
フルオロメチル）フェニル］−１−ナフタノンアミン ２−イソプロピル−４−クロロ−Ｎ−［３−クロロ−２
，４−ジニトロ−６−（トリフルオロメチル）フェニル
］−１−ナフタリンアミン；８−ｎ−ブチル−ｔ−（４
，４，４−トリフルオロブトキン）−Ｎ−［３−ブロモ
−２，４−ジニトロ６−（）リフルオロメチル）フェニ
ル］−１−１−フタリンアミン； ３−メチル−６−ブロビルー４−ヘプタフルオロプロピ
ル−Ｎ−［２，４〜ジニトロ−６−（トリフルオロメチ
ル）フェニル］−ナフタリンアミン；３．４−ジクロロ
−Ｎ−［２，４−ンニトロー６（トリフルオロメチル）
フェニル］−１−ナフタリンアミン： ４−（１，１−ジフルオロエトキシ’）−Ｎ−［２゜４
−ジニトロ−６−（トリフルオロメチル）フェニル」−
１−ナフタリンアミン ４−（１，１，２，２−テトラフルオロエトキシ）Ｎ−
［２，４−ジニトロ−６−（トリフルオロメチル）フェ
ニル］−１−ナフタリンアミン、および４−（１，１，
２，２−テトラフルオロエチルチオ）Ｎ−［２，４−−
ジニトロ−６−（トリフルオロメチル）フェニル１−１
−ナフタリンアミン。

Ａ８２８１０化合物と前記第２の成分ａ−ｅ化合物との
組合わせ成分は、コクシジウム症の原因となる少なくと
も１種の微生物に関し、活性成分を組合わせて共力効果
を現わす量で使用する。一般に組成物として使用すべき
最高量は、個々の成分で抗コクシジウムを治療するため
の最高量と同一量である。低限界の蛍は一般に、個々の
成分で治療するために必要な量より少量である。それ故
−般に（１）Ａ８２８１０化合物約０．５〜１００ｐｐ
ｍ、（２）ａ、ニカルハノン約５〜１２５ｐｐｍ、　ｂ
、　Ｃ４／ニトロノＪルボアニリド約２５〜１．５０　
ｐｐｍ、　ｃ特定のナフタリンアミン約１１−１Ｏ００
ｐｐ、（Ｉ。

特定のヘンセンアミン約１〜Ｉ　２５　ｐｐｍ、または
ｅ。

メチクロルビンドール約２０〜７０ｐｐｍを含む組成で
本発明を実施する。Ａ８２８１０化合物は特にベンセン
アミン、ナフタリンアミンまたはニカルバジンと共に投
与するとき、有効である。好ましい組成物は、Ａ８２８
１０化合物約２〜２０ｐｐｍを、ヘンセンアミン、ナフ
タリンアミンまたはニカルバジン約５〜８０ｐｐｍと共
に含有させたものである。

Ａ８２８１０化合物のもう一つの重要な性質は、動物の
飼料利用効率を改良させる性質である。たとえばＡ８２
８１０化合物は、発達した第−胃機能をｒ丁する反２８
）動物の飼料利用効率を改良する。

アーサー・ラウン（Ａ　ｒＬｕｒ　Ｐ　、　　Ｒａｕｎ
）か開示した方法［米国１ヶ許第３．７９４，７３２号
］（特に後記実砲例５参照）を用い、第一胃内のプロピ
オネート化合物の生成および濃度を観察することにより
飼料利用効率を監視することができる。Ａ８２８１０化
合物は典型的に、約０．０２〜１．５朽／ｋｙ／日の投
与１で反別動物に経口的に投与するとき、プロピオネー
ト類およびこれによる飼料利用効率を増加させる効果が
ある。

好ましい投与法は、活性化合物を動物飼料に混合するこ
とであるが、他の方法たとえば錠剤、水薬、丸薬または
カプセル剤で投与することができる。これらの種々の剤
型の薬剤製造は、獣医薬学的技術でよく知られた方法に
より行なうことができる。処置すべき動物に固有の１日
当り投与量に直接的に一致する量の本発明化合物を、各
１個の投与単位剤形中に含有させるべきである。

更に本発明は、飼料利用効率を増大させるのに適合し、
飼料とＡ８２８１０化合物２〜４０ｇ／トンから成る飼
料組成物に関する。

他の観点からＡ８２８１０化合物は、豚赤痢の処置に有
用である。Ａ８２８１０は、１．５６ｍｃｇ／Ｍ（ｌの
低い濃度でトレボネマ・ヒオデイセンテリア−ｃ　（Ｔ
　ｒｅｐｏｎｃｍａ　ｈｙｏｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｃ）
の発育を抑制する。豚に投与する好ましい方法は、Ａ８
２８１０化合物の適当量を飼料または飲用水中に配合す
る方法である。適当な量は、処置が予防のためであるか
または感染症の治療のためであるかのいずれかに関連す
る。通常、活性化合物の量は、すでに感染した動物感染
を治療するのに必要な量より、感染を予防するために必
要な■の方か低い。一般に感染を予防するため、Ａ８２
８１０化合物約２０〜１００ｙ／飼料トンの範囲の量が
有効である。

赤痢に罹患した豚を処置するため、Ａ８２８１０化合物
約１００〜５００ｙ／飼料トンの量か推奨される。これ
らの量は、約１〜５Ｍ９／に９＜体重）７口（予防的処
置）または約５〜２５ｍｑ／ｋｇ＜体重）７日（感染し
た動物の処置）である。飲用水に添加するとき、Ａ８２
８１０化合物約０．０４〜０．２ｇ／ガロン（予防的）
または約０．２〜１ｇ／ガロン（治療的）の川が推奨さ
れる。

更に本発明は、豚赤痢を治療するため、豚飼料とこの１
」的に有効量のへ８２８１０化合物から成る飼料組成物
に関連する。前記のように有効量は、典型的にＡ８２８
１０化合物約２０〜５００ｇ／飼料ｉ・ンの世である。

前記のように、へ８２８１０化合物はウェルシュ菌（Ｃ
Ｉｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）を含
む嫌気性菌に対して活性を有する。それ故Ａ８２８１０
化合物は、鶏、豚、牛および羊の腸炎を治療または予防
するのに有益であるのが当然である。またＡ８２８１０
化合物は反別動物の腸性中毒症の治療に有用である。

またＡ８２８１０は抗ウィルス活性を有する。

たとえば組織培養により、Ａ８２８１０は、■。

５６ｍｃｇ／ｍＱの低いｌ農度で単純ヘルペスウィルス
（ＨＳ　Ｖ・ＩおよびＩＩ）に対して活性を有し、０．
０４ｍｃｇ／ｘ（ｌの低い濃度でフレンド（Ｆｒｉｅｎ
ｄ）白血病ウィルスに対して活性を有することか示され
た。

他の組織培養試験でＡ８２８１０は２５０　ｍｃｇ＃ｆ
！の濃度で大湖（Ｇ　ｒｅａｔ　Ｌ　ａｋｅｓ）インフ
ルエンザウィルスおよびブラジルインフルエンザウィル
スに対して活性を示した。

加うるにへ８２８１０化合物はある種の駆虫活性を有す
る。たとえば生体外研究において、Ａ８２８１０（ナト
リウム塩）は５０ｐｐｍの濃度で（８５％抑制）投与し
、７２時間測定したとき、ケノルハブデイテイス・エレ
ガンス（Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｅｌｃｇａｎｓ
）を抑制する。

へ８２８１０化合物を経口的または非経口的に動物に投
与することかできる。また化合物を吹込法、すなわち抗
生物質を薬剤化した粉末形で動物または家禽を飼養する
囲いの空間もしくは室内に吹き入れる方法で投与するこ
とかできる。動物または家禽は空気中に存在する薬剤粉
末を呼吸し、また薬剤粉末を眼から体内に取り入れる（
眼内注入と呼ばれる方法）。

最も実際的な方法は、Ａ８２８１０化合物を供給飼料中
に処方する方法である。通常の乾燥飼料、液体飼料およ
びベレット飼料を包含する種々の飼料を使用する、二と
かできる。好ましい投与法は化合物と動物用飼料を混合
する方法であるが、また他の方法たとえば錠剤、水薬、
丸薬またはカプセル剤で投与することができる。処置す
べき動物に固有の１日当り投与量に直接的に一致する債
のＡ８２８１０化合物を、各１個の投与単位剤形中に含
有させるべきである。

薬剤を動物飼料に配合して製造する方法はよく知られて
いる。好ましい方法は、ｉＲ厚薬剤プレミックスを製造
し、次いでこれを用いて薬剤配合した飼料を製造する方
法である。このように一つの観点から本発明は、活性成
分として（１）Ａ８２８１０化合物または（２）Ａ８２
８１０と共力効果を有する前記化合物との複合物に、農
学的に許容される担体１種ないしそれ以上と組合わせて
成る動物飼料プレミックスを提供することができる。典
型的プレミックス中に、該プレミックスのボンド当り約
１〜２００の薬剤を含有させることができる。

プレミックスは液体または固体製品のいずれであっても
よい。

動物または家禽用の最終的飼料調製物は、投与する薬剤
の量に依存する。通常の各成分製造法、混合法およびベ
レット飼料の製造法を適用してＡ８２８１０化合物を含
イイする飼料を製造することかできる。

Ａ８２８１０化合物を用い、獣医学的技術で認められた
方法により非経口的薬剤を製造することかできる。Ａ８
２８１０化合物を含む有用な注射剤は！濁液または溶液
型のいずれであってもよい。

溶液型においてＡ８２８１０化合物を生理学的に許容さ
れる担体に溶解する。この担体は適当な溶媒、必要に応
じてベンジルアルコールのよウナ保ｒｊ剤および緩衝剤
から成る。有用な溶媒は、たとえばアルコール類、グリ
コール類、不活性部（たとえば植物油）または高度精製
鉱油を包含する。

注射用懸濁液組成物は補助剤と共に化合物のための非溶
媒を担体として使用することにより製せられる。非溶媒
はたとえば水またはポリエチレングリコールのようなグ
リコールであることができる。

生理学的に許容される適当な補助剤は、懸濁液組成物中
に化合物を懸濁保持するために必要である。補助剤はカ
ルボ牛ジメチルセルロース、ボリビニルピロリドン、ゼ
ラチンおよびアルギネート類のような増量剤の中から選
ぶことかできる。また化合物を懸濁させるための多種類
の界面活性剤が有用である。レシチン、アルキルフェノ
ールポリエチレンオキノド付加物、ナフタリンスルホネ
ート類、アルキルベンセンスルホネート類およびポリオ
キシエチレンソルビタンエステル類は、ｉ夜体非溶媒中
の有用な懸濁剤である。

親水性、密度および液体非溶媒の表面張力に影響を及ぼ
す多くの物質が、個々の場合に注射用懸濁液の製造の助
けとなることができる。たとえばシリコーンｉ１４　泡
剤、グリコール類、ソルビトールおよび糖類は有用な懸
濁剤となることができる。

吸入により投与するための微粉剤または粉剤の製造にお
いて、典型的に活性化合物をタルク、珪藻上または他の
ある種の物質を補助剤として混合する。

またＡ８２８１０化合物は、殺虫剤として有用である。

たとえばＡ８２８１０は、ミナミアワヨトウ、クモタニ
およびハエ幼虫に対して１１００ｐｐの低い濃度で、お
よびサシバエ成虫に対して５０　ｐｐｍの低い１ｇ９度
で活性を有する。

本発明の実施ｒ房様をより完全に説明するため、次に実
施例を詳述する。

実施例ｌ Ａ８２８１０　の製ノ告 Ａ　Ａ８２８１０の振盪フラスコ発酵 凍結乾燥したペレットまたは液体窒素中に保持した懸濁
液としての培養菌株Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａｒｉｂｒ
ｏｓａ　ｓｐ、　ｎｏｖ、　・Ｎ　ＲＲＬ、　ｌ　８３
４８を用い、次の組成を有する接種培地に接種する・接
種培地Ｉ 暖外　　　　　　　　　　　　量（％）グルコース　　
　　　　　　　　　　１．０ＩｊＪ溶性澱粉　　　　　
　　　　　　２０酵母エキス　　　　　　　　　　　０
．５カゼインの酵素的氷解物＊０，５ 炭酸力ルンウム　　　　　　　　　０．１脱イオン水　
　　　　　　　全ｆｆ１ｌ１２になる量未］、ＸＩ節ｐ
Ｈ＝６．６；滅菌前、水酸化す）　ＩＪウムを加えてｐ
Ｈ７，２に調節；滅菌後ｐＨ＝６．８゜注）＊印はＮＺ
アミンＡにューヨーク・ノーウィッチ、シェフイールド
・ケミカル・カンノでニイ（Ｓｈｅｆｆｉｅｌｄ　Ｃｈ
ｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、　））。

接種培地に２％寒天を加えて斜面培地または平板培地を
調製する。接種した斜面培地を３０’Ｃで約１０−１４
日間培養する。成熟した斜面培養物を滅菌器具で削り落
として胞子を取りはなして分離し、菌糸体マットをマセ
レート（ｍａｓｃｅｒａｔｅ）する。取りはなした胞子
の約１／４ｆｉｔを用い、第１段階の接種培地５０１１
Ｃを接種して培養発育させる。

接種した第１段階の培地を２５０ｘＱエルレンメイヤー
フラスコ中、２インチ（５，０８０ＪＷ）の円軌道回転
（２５０ｒｐｍ）する振盪器上、３０°Ｃで約１２０時
間培養する。

このように培養した第１段階の培地０．４ｍＱを用い、
次の組成の生産培地５０＋ｙＱに接種する。

生産培地Ｉ 灰分　　　　　　　　　量（９／Ｒ） グルコース　　　　　　　　　　　　５．０カセインの
酵素的水解物＊３，０ 酵母エキス　　　　　　　　　　　５．０廃糖蜜　　　
　　　　　　　　　１５．０硫酸マグネシウム（無水）
１０ 炭酸力ルンウム　　　　　　　　　２．０ポテトテキス
トリン　　　　　　２５．０オレイン酸メチル　　　　
　　　２０．０屑Ｑ冷水道水　　　　　　　　　全ｆｆ
１ｌ（になる■（滅菌前、５Ｎ水酸化ナトトリウムでｐ
＋−１７，０に調節）。＊ｒｌｌＮＺアミンＡ０ ２５０ｍＱ広ロエルレンメイヤーフラスコ中、２インチ
の円軌道回転（２５Ｏｒｐｍ）する振盪器上、３０〜３
２°Ｃで８〜１０日間培養する。

Ｂ、Ａ８２８１０のタンク発酵 大容量の接種材料を製造するため、Δ項記載のように培
養して製造した第１段階の培地１ＯｙｔＱを用い、第１
段階の培地と同一の組成を有する第２段階の発育培地４
００ＲＱに接種する。この第２段階の生長培地を２１２
広ロエルレンメイヤーフラスコ中、２インチの円軌道回
転（２５Ｏｒｐｍ）する振盪器」二、３０′Ｃで約７２
時間培養する。

上記第２段階で培養した生長培地８００１（を用い、滅
菌生産培地１１！Ｍ（消泡剤を加え、それ以外はＡ項記
載と同様に製せられる）に接種する。

接種したこの生産培地を、１６５Ｑ発酵タンク中、３４
°Ｃで撹拌しながら８〜１０日間発酵させる。

ゆるやかな空気流（０，１：？−０，２５ｖ／ｖ／ｍ）
テ空気飽和の４０％以上の溶解酸素濃度を保持し、容器
中、低速（１５０〜２０　Ｏｒｐｍ）で撹拌する。

実施例２ 前記実施例１８項の（１）第２段階の生長培地は、次に
示す組成を有する培地を使用し・ 第２段階培地■ 成分　　　　　　　　　　　量（９／　１２）酵母エキ
ス　　　　　　　　　　　５．０グルコース　　　　　
　　　　　　　５．０ポテトデキストリン　　　　　　
１０．０硫酸マグネンウム・七水和物　　　２．０グリ
セロール　　　　　　　　　ｌ、０脱イオン水　　　　
　　　　全ｆｆ１ｌ（２になる量（未調節ｐＨ＝　６．
５　：　Ｉ）Ｈ調節なし；滅菌後のｐＨ＝６．４）、 （２）生産培地は次の組成を有する培地を用い：生産培
地ＩＩ 成分　　　　　　　　　　　量（９／Ｒ）グルコース　
　　　　　　　　　　ｌ０１Ｏ豚肝粉末　　　　　　　
　　　　１５，０廃糖蜜　　　　　　　　　　　　　５
．０硫酸マグネ／ウム・七水和物　　　０．５ポテトデ
キストリン　　　　　　２５．０水道水　　　　　　　
　　　全量１１２になる量（未調節ｐｌ＋＝６．　ｌ；
　５Ｎ水酸化す）　１７ウム約１７０＋ｆｆでｐｌ−１
７，０に調節；滅菌後のｐＨ＝６．４；を肖泡剤Ｌサグ
（Ｓ　ａｇ）４７１　（０，２９／のおよび′Ｐ−２０
００（０，ＩｍＱ／のを加える）。

上記以外は実施例１の方法を用いてＡ８２８１０を製造
する。

実施例３ 前記実施例１における接種培地の代わりに（１）次の組
成を有する培地を用い 接種培地■ 成分　　　　　　　　　　　　量（ｙ／Ｃ）トリブチカ
ーゼ・大豆液　　　　　　３０酵母エキス　　　　　　
　　　　　　　３グルコース　　　　　　　　　　　　
　　５マルトース　　　　　　　　　　　　　　４硫酸
マグネシウム・七水和物　　　　　２脱イオン水 （ｐＨ７，０（無調節））、 （２）接種した第１段階の培地を３６°Ｃで４８時間培
養、（３）接種した第２段階の培地を３６°Ｃで２４時
間培養、（４）生産培地容量を１ｏｆ２、培養ｔｆＡ度
を３６°Ｃおよび培地は次の組成を使用：生産培地■ 成分　　　　　　　　　　　　量（９／　１２）ポテト
デキストリン　　　　　　　　３０グルコース　　　　
　　　　　　　　　ＩＯカゼインの酵素的水解物＊　　
　　　　　３酵素　　　　　　　　　　　　　　　　５
廃糖蜜　　　　　　　　　　　　　　１５硫酸マグネシ
ウム（無水）　　　　　　　１炭酸カルシウム　　　　
　　　　　　　２水道水　　　　　　　　　　全量１ｇ
となるｍ（未調節ｐＨ−６，３；　５Ｎ水酸化ナトリウ
ムでｐＨ１７，０に調節；滅菌後のＩ）Ｈ−６，４＋消
、泡剤；サク（Ｓａｇ）４７１（０，２９／のおよびＰ
−２０００（０，５ｘｌ！／Ｃ）添加）。＊印ＮＺアミ
ンへ〇上記以外は実施例１の方法を用いて八８２８１０
を製造する。

実施例４ Ａ８２８１０の単離 前記実施例１および２と同様の方法で１．ＯＯ（！タン
クから製せられた全発酵液を合しく２１５θ）、濾過ｆ
ＪＪＪ　剤［３％ハイフロ・スーパー−セル（ＨｙＮ。

Ｓ　ｕｐｅｒ−Ｃｅｌ）、マンビル・プロダクツ社（Ｍ
ａｎｖｉｌｌｅ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ　Ｃｏｒｐ、　）、
ロンポク（Ｌｏｍｐｏｃ）ＣＡ　９３４３６　］を用い
、フィルタープレスに通して濾過し、濾液１８０ｇを得
る。

菌糸体濾過固体をアセトンで（６０（！Ｘ　２回）抽出
する。アセ！・ン抽出物を合して減圧下、約１８Ｑ容に
濃縮する。濃縮物を発酵液濾液と合する。

混合物を５Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ９に調節し、この
溶液を酢酸エチル２／３容で抽出し、１時間混和し、−
夜冷やす。酢酸エチル抽出物１１！Ｍを分離し、少量の
濾過助剤と混合して濾過する。

清浄な抽出物を減圧下に〆加縮して残留物を得る。

この残留物をトルエン２００＋ｆｆに溶解し、この溶液
を、トルエン中シリカゲル（ブレース級、２０〜３００
メソシコ）２Ｉ２充填含有カラムに適用する。カラムラ
トルエン１０Ｑで洗い、トルエン：エタノールで［（９
８：２）、（９６：４）および（９０：１０）それぞれ
１０Ｑで順次］展開し、Ｕ分画を集める。

枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂｔｉｌｉｓ）および
赤血球溶解寒天平板を用いる生物試験法によりＡ８２８
１０の溶出を監視する。はとんどのＡ８２８１０を含む
分画（＃１３〜２０）を合して濃縮【７、油状物を得る
。このｈＩＪ状物をジオキサン２００ｘ（に溶解し、凍
結乾燥して粗Ａ８２８１０を得る（油状物として）。

租Δ８２８１０をクロロホルム２００ｍＱ、に溶解シ、
クロロホルム中シリカゲル（クレース級６２（２０〜３
００メンシユ））２ρ充填含有カラムに適用する。カラ
ムをクロロホルム１０１１１ｇで洗い、クロロホルム、
アセトン［（９：ｌ）、（４：ｌ）、（７：３）および
（１：１）それぞれ１０１２で順次］、次いでアセトン
ＩＯＣで展開し、ＩＱ分画を集める。

各分画を生物試験法で監視し、生物試験結果に従って次
のようにそれぞれ各分画をプールする・＃６〜９（プー
ルＡ）、＃１０〜１８（プールＢ）および＃１９〜２８
（プールＣ）。各プールをｌ農縮腰残留物をジオキサン
に溶解し、凍結乾燥する。プールＡおよびＣから得られ
た油状物は更に精製しなければならないが、プールＢか
ら白色粉末として９．９７のＡ８２８１０が得られる。

プールＡをアセトン９００ｆｆ（に溶解し、水ＩＱに加
える。この溶液を５　Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ９，０
に調節し、溶液を減圧下、約ＩＱ容に濃縮する。濃縮物
をトルエンで２回抽出し、抽出物を合して濃縮し、ジオ
キサンから凍結乾燥し、白色粉末として更に２．８９の
Ａ８２８１０を得る。

プールＣを同様に処理したが、凍結乾燥後もなお油状物
であった。４０状物をアセトニトリル５０１に溶解後、
直ちに結晶が生成する。結晶を濾取して減圧下に乾燥し
、更にＡ８２８１０純品（ナトリウム塩として）１２４
４ｉ９を得る〈融点１７３〜１７５℃）。

実施例５ Ａ８２８１０ナトリウム塩の結晶化 無定形Ａ８２８１０ナトリウム塩４００　ｍｇを、試験
管内ヘキサン５０ｍＱ中、音波処理（ｓｏｎｉｆｉｃａ
ｔｉｏｎ）により懸濁する。試験管側面に生成した結晶
を分離して減圧下に乾燥し、Ａ８２８１０ナトリウム塩
純品５０Ｍ９を得る（融点２５５〜２５７°Ｃ）。

第２図に示すクロロホルム中ＩＲの吸収最高値波数（ｃ
ｍ−りを次に示す：　３０２０．２９７０．２９５２．
２９３６．２６７９．１５７０．１４５８．１３９３．
１３８０．１３６３．１３５９．１１６３．１１１５．
１０９３．１０７５．１０６７．１０５４．１０２７．
１０１０，１００１．９９０．９７９お３上び９４０゜ フィールド−デイソープション（Ｆ　１ｃｌｄ　ｄｉｓ
。

ｒｐｔｉｏｎ（Ｆ　Ｄ））質量スペクトル：第６図。

実施例６ Ａ８２８１０（Ｊ離酸）の製造 前記実施例４で得られたＡ８２８１０（ナトリウム塩）
２００ｚｙをジオキサン７５ｍＣに溶解する。

この溶液に水２５　ｍＱを加え、この溶液をｌＮ塩酸の
添加によりｐＨ３に調節する。酸性溶液を１時間撹拌後
、クロロホルムで（１００ｘ＆Ｘ２回）抽出する。クロ
ロホルム抽出物を合し′Ｃ減圧下に濃縮し、Ａ８２８１
０遊離酸を得る。

実施例７ ”ｒセチル−Ａ８２８１０の製造 Ａ８２８１０（すトリウム塩）２００ｘｙをピリジン４
１に溶解し、酢酸ｊｊｊ（水物４１！（！を加えて混合
物を室温で・１０時間放置する。水］、Ｍを加え、水溶
液をクロロホルム５０．ｘ（２で抽出する。クロロホル
ム抽出物を順次、Ｑ、ｌＮ塩酸、１％炭酸水素ナトリウ
ム含有水および水それぞれ５０ｍＣで洗う。

このクロロホルム抽出物を減圧下に濃縮して得られた残
留物をアセトンに溶解する。アセトン溶液を減圧下に濃
縮して残留ピリジンと酢酸を除く。

この処理段階を３回繰返し行ない、生成した残留物をベ
ンゼンに溶解し、凍結乾燥し゛ＣアセチルーＡ８２８１
０（ナトリウム塩）２０４皮９を得る。

ファースト−アトム衝ｌ（ｆａｓｔ−ａｔｏｍ　ｂｏｍ
　−ｂａｒｄｍｅｎｔ）質量スペクトル（ＦＡＢＭＳ）
分析による分子爪−９０６゜ 第３図に示すクロロホルム中ＩＲの吸収最高値波数（ｃ
ｘ−りを次に示す：３０２１．２９７６．２９３５．２
８８０．２８３１．１７２８．１４５８．１３７９．１
３５７．１３２１．１３１４、Ｉ２４７．１２２６、Ｉ
２２３．１２０１．１１８５．１１０１．１０９４．１
０７６．１０５６．１０２４．９９０．９８１．９４７
．９２９．８９６および８７５゜ 実施例８ プロピオニル−Ａ８２８１０の製造 Ａ８２８１０（ナトリウム塩）２００＋９をピリジン４
ｍρに溶解し、プロピオン酸無水物４ｍＱを加え、混合
物を室温で４４時間放置する。水ＬＯｍＱを加え、溶液
をクロロホルム５０次夕で抽出する。クロロホルム抽出
物を順次、０．ＩＮ塩酸、１％炭酸水素ナトリウム含有
水および水それぞれ５０Ｔ１（ｌで洗う。クロロポルム
抽出物を減圧下に濃縮して得られた残留物をアセトンＬ
ｏｏｍ（に溶解する。このアセトン溶液を減圧下に濃縮
して残留ピリジンおよびプロピオン酸を除く。この処理
段階を３回繰返して行なう。残留物をベンゼンに溶解し
、凍結乾燥し、７＋１１秋物としてプロピオニル−Ａ８
２８１０（ナトリウム塩）を得る。

ｉｔｌ＋状物をアセトニトリル５吋に溶解し、アセトニ
）・リル中ノリカゲル（ウエルム（Ｗｏｅｌｍ）　ｌ　
００〜２００μ！１）２０ｕりを充填含有させたカラム
に適用する。カラムをアセトニトリル１００　ｍ（ｌで
洗い、アセトニトリル：アセトン［順次（９：　ｌ）、
（４：　ｌ）、（７・３）および（１・ｌ）それぞれ１
００ｘＱ：ｌおよび終りにアセトン１００１ｖ夕で展開
し、２５ｉｖ（！分画を集める。

／リカゲル薄層クロマトグラフィーにより、アセトニト
リル：アセトン（ＩＩ）で展開し、バニリン−硫酸スプ
レーで検出することによって溶出液を監視する。プロピ
オニル−Ａ８２８１０（ナトリウム塩）の大部分を含む
分画（＃１３〜２３）を合し、減圧下に濃縮して残留物
を得る。残留物を７オキサンに溶解し、凍結乾燥して所
望のエステル体４７Ｒｇを得る。

ＦＤＭＳによる分子Ｅｉ＝　９２０゜ 第４図に示すクロロホルム中ＩＨの吸収最高値波数（Ｃ
Ｉ−’）を次に示す二２９７５．２９７１．２９３５．
２８７９．２８３１１５７１．１４５７．１３９８．１
３８０．１３６４．１３５９．１３２１．１２３７．１
２２５．１２１６．１２１３、］、　Ｉ１９１．１１６
３．１１１６．１０９３．１０７６．１０６８．１０５
４．１０２７．１０１０．１００１．９９０．９８０．
９４５．９４０．９２９および８６１゜ 実施例９〜１１ 前記実施例７〜８の方法を適用して次に示すＡ８２８１
０工ステル誘導体を得た。

ｎ−へブタノイル−Ａ・８２８１０；バレリルへ８２８
１０；ｔｅｒｔ−ブチリル−Ａ８２８１０゜実施例１２ Ａ８２８１０の４−ブロモフェニルウレタン誘導体の製
造 Ａ８２８１０（ナトリウム塩）２００ｍｙをベンゼン２
５Ｍσに溶解し、撹拌しながらベンゼン２５２ρ中イソ
／アン酸４−ブロモフェニル２２５　ｍｑ’ｉ−加える
。トリエチルアミン１滴を加え、混合物を室温で１６０
時間撹拌する。生成した沈澱を濾別し、））へ液を凍結
乾燥してＡ８２８１０の４−ブロモフェニルウレタン誘
導体（ナトリウム塩）４００ｏを得る。ＦＤＭＳによる
分子ｆｆ１＝１０６１゜第５図に示すクロロホルム中Ｉ
Ｐの吸収最高値波数（ｃｘ−りを次に示す：　２９６９
．２９３５．２８７９．２８３０．１７２７．１５８９
．１５７０．１５１７．１４８９．１４６０．１３９９
．１３７９．１３６３．１３４４．１３１Ｇ、１３Ｏ６
，１２８７，１２６５，１２４７，１２３８，１２１６
，１２１１，１１９２，１１６３，１１４６，１１１６
，１１０２、＋０９３．１０７５．１０６８．１０５４
．１０２５．１００９．１０００．９９０．９７９．９
４３．９２３および８６１、　　実施例１３〜２２ 実施例１２の方法を適用して次に示すＡ８２８１０ウレ
タン誘導体を得た。

Ａ８２８１０・４−クロロフェニルウレタン；Ａ　８２
８１０・４−二トロフェニルウレタン：Ａ３２８］０・
フェニルウレタン、Ａ８２８１０・４−メチルフェニル
ウレタン；Ａ８２８１０・４ヨードフエニルウレタン・
Ａ８２８１０・４フルオロフェニルウレタン；　Ａ８２
８１０・シクロヘキンルウレタン；Ａ８２８１０・２−
フェネチルウレタン：Ａ８２８１０・２−（フェニル）
シクロプロピルウレタン；Ａ８２８１０・フェノキシフ
ェニルウレタン。

実施例２３ Ａ８２８１０のメチルエーテル誘導体の製造酸型Ａ８２
８１０をメタノールに溶解し、水（１／２容）を加える
。溶液を、エーテル誘導体が生成するまで放置する。こ
の溶液を減圧下に蒸発させる。生成物をたとえばシリカ
ゲルによるクロマトグラフィーに付し、Ａ８２８１０の
メチルエーテル誘導体を得た。

実施例２４〜２６ 適当なアルコールまたはチオールを用い実施例２３と同
様の操作により次に示すＡ８２８１０のエーテル誘導体
を得た。

Ａ８２８１０のロープロピルエーテル誘導体；Ａ８２８
１０の、メチルチオエーテル誘導体；Ａ８２８１０のｎ
−ブチルエーテルＸ’ｌ。

実施例２７ Ａ８２８１０のクロマトグラフィーによる同定１、ＴＬ
Ｃ 吸着剤：シリカゲル 系：　アセトニトリル：アセトン（］：１）検出：　Ｂ
ａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｌ）ｔｉｌｉｓＲｆ＝０．２５ （この系においてＡ８０１９０はＲｆ−約０．４４であ
った（バニリンスプレーで検出））。

１７、ＨＰＬＣ 吸着剤：ウォーターズ・ミューボンダバク（Ｗａｔｅｒ
ｓ　　ｐ　Ｂｏｎｄａｐａｋ）Ｃ１８（４Ｘ　３００　
Ｍｌカラム） 溶媒系ニアセトニトリル：水（９：　ｌ　）（１％酢酸
含有） 検出：屈折計 流速：３０ｒｔｒＱ／分 保持時間：５．３７分８ （ａ：比較のため、この系におけるＡ３０１９０は保持
時間約４．６５分を有する） 実施例２８ 共力作用を何する組成物の抗コクシジウム活性新しくふ
化したひな鳥をコクシジウム症にかからない環境で７日
間飼養する。８日日の朝、ひな鳥の体重測定をして処理
群に割り当てる。

ひな鳥の各群（１群当り通常４〜５羽）を実験の間、飼
養小屋囲い内に収容する。各小屋囲いのひな鳥に、一定
の照明時間割を定め、自由に近づくことかできる飼料（
各実験群は無薬剤群と薬剤処理群を含む）と水を準備す
る。実験を始めてから２日後、感染させるように定めた
ひな鳥に、コクシジウムの接合子のうの純粋懸濁液を、
羽根刈込み挿管接種（ｃｒｏｐ　−１ｎｔｕｂａｔｅ）
する。各試験に用いる接合子のうの量は感染させて薬剤
投与しない動物に臨床的コクシジウム症が発現するよう
に設定する。

更に７日間飼養後、飼養実験期間を終る。各群のひな鳥
の体重測定を行ない、各群の飼料消費１を測定する。こ
れらの測定からひな鳥の最終体重と飼料利用効率を計算
する。すべてのひな鳥を殺し、腸および盲腸のコクシジ
ウム誘発組織障害の存在を試験する。ある試験において
接合子のうの発現の試験を包含する。この評価において
、接合子のう排出が起こる期間、各群のひな鳥が排出し
た排泄物を集める。次いで、この排泄物を希釈し、血球
計算器で接合子のうを計数する。測定結果は、ひな鳥の
寄生虫の生殖能ノＪの指標として使用され、それ故動物
の感染症を抑制する薬剤効力の正確な結果を提供するこ
とができる。

この方法で本発明の共力作用を有する例証的組成物を試
験したときの観察結果を表■〜ＸＸＨに要約する。

１０．１ １０．９ １コクシジウムのイオノフオア感受性株ル）ベンゼンア
ミン ■コクシジウムのイオノフオア耐性株 メチル）ベンゼンアミン メチル）ヘンゼンアミン メチル）ベンセンアミン メチｈ）ベンセンアミン メチル）ベンセンアミン ２．４ メチル）ベンゼンアミン ｔｏ　　　　　０　　　　　０．４ ０．４　　　　０．５　　　　０．１ メチル）ベンゼンアミン メチル）ヘンゼンアミン １１．５ ８．７ ４．４ ０メチル）フェニルＪ−１−ナフタレンアミンロメチル
）フェニル」 ■ ナフタレンアミン 実施例２９ 急速に体重増加させるためにヒナ鳥に与えるのに適した
、バランスのよい高エネルギー飼料を以下の処方によっ
て製造する： 成　　分　　　　　　　　　　　　　％粉砕したイエロ
ーコーン　　　　　　５０ポンド ダイズミール、脱外皮・粉砕して 溶媒抽出したもの、５０％タンパク　　３１．０９動物
脂肪（牛脂） ６．５ ＋３０ 乾燥フィッシュ・ミール、ソルブル （ｓｏｌｕｂｌｅ）添加　（６０％タンパク）トウモロ
コ／からの蒸留ソルブル リン酸二カルシウム、飼料等級 炭酸カルシウム ース充填剤添加） ０．５ 収−−−一分 ％ ボンド Ｒ１＋１ミネラルプレミックス （ＭｎＳＯ４、ＺｎＯ，Ｋｌ、Ｆｅ５０＋、Ｃａｃ、３
）２−アミ／−１１−オキ／酪酸 （メチオニンのヒドロキン同族体）　　　０．１　　　
　　２Ａ８２８１０　　（Ｎａ塩＞　　　　　　　　０
．０１　　　　０．２これらの物質を通常の飼料混合法
によって混合する。この様な飼料を与え、自由に水をと
らせたヒナＩＲは、コクンシウム症の影響から防護され
体重増加は、同様の、藁物無添加飼料を与えたコクンジ
ウム症の影響のないヒナ鳥の体重増加に匹敵する。

実施例３０ 実施例２９の記載と同様であるが、活性成分として以下
のＡ８２８１０相乗的組合わせ物を使用し、ヒナ鳥用飼
料を製造する。

成　　分 厄測 ０．２５ ル）ベンゼンアミン 成　　分 虞導 Ａ３２８）０ ０．２５ Ｏ ４−クロロ−Ｎ−［２，４−ジニトロ ６−０リフルオロメチル）フェニル］ −１−ナフタレンアミン 成　　分 虞■ ０．２５ ４−ブロモ−Ｎ−［２，１−／ニトロ １−ナフタレンアミン 実施例３３ Ａ８２８１０によって改良された肉牛用飼料以下の様に
して、バランスのよい高段類肉牛０１飼料を製造する。

成　　分 粉砕トウモロコシ 粉砕トウモロコシ穂軸 脱水アルファルファミール、 １７バーセントタンパク 脱外皮ダイズミール、溶媒抽出、 ５０パーセントタンパク 糖蜜 尿素 ！＼８２８１０（Ｎａ塩） リン酸二カルシウム、飼料等級 炭酸力ルンウム ％ Ｏ ０，６ ０，００４４ ０，５ ポンド １９９、９１２ １００．０ ０、０８３ 成　　分 塩化すトリウム 微量ミネラルプレミックス ビタミンＡおよびＤ２プレミックス＊ ビタミンＥプレミックス＊＊ プロピオン酸カルシウム ％ ０．３ ０．０３ ０．０５ したクイズ飼料３８５．７ｙを含有する。

を加えたトウモロコンデイスティラー乾燥穀類。

混合した飼料を圧縮してペレットにする。動物１頭当た
り飼料１５ボンドの１日当たり平均摂取割合で、この飼
料は１頭につき１日当たり約３００ｒｎのＡ８２８１０
（Ｎａ塩）を供給する。

実施例３４ Ａ８２８１０によって改良されたブタ用飼料バランスの
よいブタ用飼料を以下の様にして製造する。

戊−−−一分 粉砕トウモロコ／ クイズ浦ミール、溶媒抽出、脱外皮 乾燥ビートの茎の髄 Ｊン酸二カルシウム 炭酸カルシウム ブタ用ビタミンフッミックス１ 塩（ＮａＣの 塩化コリン、２５％ 微量ミネラル）”レミックス２ ビタミンＡプレミックス３ メチオニンのヒドロキシ同族体 計 ％　　ポンド／トン ＋８５０　　　３７０ １０．００　　　２００ ２．９０　　　５８ １．２０．　　２４ １．１０　　　２２ ０．３５　　　　７ ０．１５　　　　３ ０．１０２ １００．００　　２０００ フッミックスｌｋｑ当たり、以下の成分を含有する：ビ
タミンＤ、７７１６１ＵＳＰ単位；ビタミンＥ２２０５
１、Ｕ、　、リボフラビン４４１ｘｇ；パントテン酸１
６２０ｚｇ；ナイアンン２２０５１ｇ；ビタミン８１２
４　、４　ｍｇ　；ビタミンに４４１ｍｇ：：７リン１
９１８０ｍｇ葉酸１１０１ｇ；ビリドキンン１６５＊ｇ
；チアミン１１０ｍｇ；ビオチン２２　＋’１ｇ。

プレミックス１ｋｇ当たり、以下の成分を含有する：小
１３０ｙ。

この飼料２００ポンドにつき、フレミックスは、少量の
溶媒抽出クイズ飼料にＡ８２８１０（１０ｇ）を加尤、
粉砕し、この粉砕混合物を更に溶媒抽出ダイズ飼料で１
ボンドに希釈することによって製造する。次いで、この
プレミックスを、常法により混合しながら上記のブタ用
飼料２００ボンドに加える。この薬物添加飼料は、基本
飼料１トン当たり、Ａ８２８１０　１００グラムの濃度
を与える。薬物添加飼料を雌ブタに、出産前および出産
後、少なくとも１日、好ましくは７〜１０日間、できる
たけ長期間与える。

大量または少量の、種々の濃度のＡ８２８１０を加えた
薬物添加飼料を、プレミックス中のＡ８２８１０の里お
よび／または基本飼料の量を変えることによって製造す
る。

雌ブタに、飼料１００ポンド当たり１．０〜１０グラム
の割合でＡ８２８１０を与える。この薬物添加飼料を水
と一緒に自由にとらせる。通常、雌ブタは１日当たり約
６−８ポンドの飼料を消費する。

実施例３５ 子ブタ用Ａ８２８１０’！！２剤 Ａ８２８１０を少量のエタノールに溶解する。

このエタノール溶、夜をポリエチレングリコール２００
に懸濁する。懸濁液を、名単位投与項が約０５〜２ｍ（
ｌの容徂を有するようにｌ溝槽する。この懸濁液を、１
日当たり３回、チューブを通した食事によって、１ポン
ド当たり０．５〜５〇九の割合で子ブタに与える。

実施例３６ ブタ赤痢の制御のための改良飼料 以下の成分を使用し、常法によってプレミックスを製造
する 成分　　　　　　量（９／＆ｙ） 活性化合物　　　　　　　　　　　　１５０．０ケイ酸
力ルンウム　　　　　　　　　　　２０，０炭酸カルシ
ウム （カキ殻粉末＞　　　　　　　　　　　　８３０．０合
計重ｆｔ１０００ｇ 通常の飼料混合法を使用し、飼料１トン当たり活性化合
物約１００９の最終濃度を与えるように、このプレミッ
クスを市販のブタ用飼料に加える。

【図面の簡単な説明】

第１図は抗生物質Ａ８２８１０のＩＲスペクトルを示す
グラフ、第２図はＡ８２８１０ナトリウム塩のＩＲスペ
クトルを示すグラフ、第３図はアセチル−Ａ８２８１０
のＩ　Ｒスペクトルを示すグラフ、第４図はプロピオニ
ル−Ａ８２８１０のＩＲスペクトルを示すグラフ、第５
図はＡ８２８１０の４−ブロモフェニルウレタン誘導体
のＩＲスペクトルを示すグラフ、第６図はＡ８２８１０
ナトリウム塩の質量スペクトルを示すグラフ、第７図は
Ａ８２８１０暑および関連するアクチノマテユラ種のテ
ンドログラム（系統図）であり、第８図はＡ８２８１０
．１および関連するアクチノマデ」う種の主要成分分析
の結果を示すグラフである。 特許出願人　イーライ・リリー・アンド・カンパニ 代 理 人

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される抗生物質Ａ８２８１０またはそのアルキルエ
   ステルまたはアシルもしくはアルキルエーテル誘導体ま
   たはこれらの塩類 ［式中、Ｒは水素；またはそれから誘導されるＲが−Ｃ
   ＯＮＨＲ＿１（基中、Ｒ＿１はアルキル、アリール、ア
   ルキルアリール、アリールアルキル、ハロアリール、ニ
   トロアリール、ハロアリールアルキル、アルコキシアリ
   ール、アリールオキシアリール、アリールシクロアルキ
   ル、アシルアリールまたはシクロアルキル）である基を
   表わす］。 ２、抗生物質Ａ８２８１０またはその農学的に許容され
   る塩類。 ３、抗生物質Ａ８２８１０。 ４、Ｒが水素以外の基であるＡ８２８１０誘導体。 ５、同化しうる炭素源、窒素源および無機塩源を含む培
   地中、アクチノマデュラ・フイブロサｓｐ．ノブ・ＮＲ
   ＲＬ１８３４８またはＡ８２８１０を産生するその突然
   変異株を、液中好気的発酵条件下で培養して抗生物質Ａ
   ８２８１０を生産し、必要に応じて塩に変換するか、エ
   ステル化するか、アシル化するか、そのエーテル誘導体
   を形成させるか、または式： Ｒ＿１−ＮＣＯで示されるイソシアネートと反応させる
   ことを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の抗生
   物質Ａ８２８１０もしくはその誘導体の製造法。 ６、アクチノマデュラ・フイブロサｓｐ．ノブ・ＮＲＲ
   Ｌ１８３４８またはＡ８２８１０を産生するその突然変
   異菌の生物学的に純粋な菌株。 ７、活性成分として請求項１〜４のいずれかに記載の抗
   生物質Ａ８２８１０またはその誘導体を、農学的に許容
   される担体と組合わせて含有させた抗コクシジウム剤。 ８、活性成分として請求項１〜４のいずれかに記載の抗
   生物質Ａ８２８１０またはその誘導体を、そのための農
   学的に許容される担体１種ないしそれ以上と組合わせて
   含有させた動物飼料用プレミックス。 ９、ａ、ニカルバジン、 ｂ、４，４’−ジニトロカルボアニリド、 ｃ、式： ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｒ＾２はＣ＿１〜Ｃ＿４アルキル；Ｒ＾３はハ
   ロゲン、Ｃ＿１〜Ｃ＿４フルオロアルキル、Ｃ＿１〜Ｃ
   ＿４フルオロアルコキシまたはＣ＿１〜Ｃ＿４フルオロ
   アルキルチオ；Ｒ＾４はハロゲン；Ｒ＾５は水素または
   ハロゲン；ｍは０、１または２；ｎは０または１を表わ
   す。但しＲ＾４置換基が存在するとき、これは２位以外
   の位置に存在する］ で示されるナフタリンアミン、 ｄ、２，４−ジニトロ−Ｎ−［４−（トリフルオロメト
   キシ）フェニル］−６−（トリフルオロメチル）ベンゼ
   ンアミン、２，４−ジニトロ−Ｎ−［４−（１，１，２
   ，２−テトラフルオロエトキシ）フェニル］−６−（ト
   リフルオロメチル）ベンゼンアミンまたは２，４−ジニ
   トロ−Ｎ−［４−（ペンタフルオロエトキシ）フェニル
   ］−６−（トリフルオロメチル）ベンゼンアミンから選
   ばれるベンゼンアミン、ｅ、メチクロルピンドール、ま
   たは ｆ、前記ａ〜ｅの化合物の薬理学的に許容される塩、か
   ら選ばれる第２の成分を更に含有させた請求項７または
   ８に記載の抗コクシジウム剤。 １０、活性成分としてＡ８２８１０またはその農学的に
   許容される塩、および２，４−ジニトロ−Ｎ−［４−（
   １，１，２，２−テトラフルオロエトキシ）フェニル］
   −６−（トリフルオロメチル）ベンゼンアミンまたはそ
   の農学的に許容される塩から成る抗コクシジウム剤。