CS242281B1

CS242281B1 - Způsob rafinace prostaglandinů

Info

Publication number: CS242281B1
Application number: CS848760A
Authority: CS
Inventors: Ivan Vesely; Jan Drahonovsky; Jan Stanek; Pavel Eichler; Vladimir Votava; Jiri Mostecky; Vladimir Kubelka; Jaroslav Palecek
Original assignee: Ivan Vesely; Jan Drahonovsky; Jan Stanek; Pavel Eichler; Vladimir Votava; Jiri Mostecky; Vladimir Kubelka; Jaroslav Palecek
Priority date: 1984-11-16
Filing date: 1984-11-16
Publication date: 1986-04-17
Also published as: CS876084A1

Abstract

Rafinace prostaglandinů a jejich analog obecného vzorce I, kde A značí vodík, B je hydroxylová skupina nebo A spolu s B tvoří ethylendioxylový můstek, R značí n-butyl nebo fenoxylovou skupinu, případně substituovanou chlorem nebo trifluormethylem, spočívá v tom, že se na surový prostaglandin obecného vzorce I v organickém rozpouštědle působí ekvimolárním množstvím dusičnanu stříbrného v organických rozpouštědlech za vzniku tuhých 1:1 aduktů obecného vzorce II, které se po isolaci z organického rozpouštědla rozloží působením solí alkalických kovů a uvolněný prostaglandinový derivát obecného vzorce I se po odfiltrování nerozpustných anorganických solí izoluje odpařením filtrátu. Rafinovaných prostaglandinů lze použít jako látek se širokým spektrem biologických účinků pro přípravu lékových forem v humánní a veterinární medicíně.

Description

Vynález se týká způsobu rafinace prostaglandinů a jejich analog obecného vzorce I, kde A značí vodík, B hydroxylovou skupinu nebo společně A + B tvoří ethylendíoxydový můstek, R značí n-butyl nebo fenoxylovou skupinu, popřípadě substituovanou atomem chloru nebo trifluormethylovou skupinou.

Přírodní prostaglandiny a jejich syntetická analoga tvoří skupinu látek s širokým spektrem biologických účinků. Z tohoto důvodu se staly základní složkou řady nových farmaceutických přípravků používaných v humánní i veterinární medicíně. Pro přípravu lékových forem jsou obvykle požadovány vysoce čisté, dobře definované substance. Vzhledem k tomu, že v dnešní době je podstatná část prostaglandinových derivátů získávána totální chemickou syntézou nebo biologickými transformacemi, jsou finální produkty kontaminovány nečistotami různého-původu, zejména vedlejšími produkty posledních syntézních stupňů, zbytky reakčních činidel a vysokovroucích rozpouštědel apod.

Pro svoje fyzikálně-chemické vlastnosti, především nedostatečnou termostabilitu a obvykle sirupovitou konzistenci, nelze prostaglandinové deriváty izolovat v čisté formě běžnými postupy.

Z literatury (např. C. Szántay, L. Novák: Synthesis of Prostaglandins, Akadémiai Kiado, 1978} je dobře známo použití různých druhů chromatografických procesů, které jsou však při vysokých nárocích na čistotu produktu velmi pracné a nákladné.

Pro rafinaci opticky aktivního prostaglandinu Fž alfa byla v patentové literatuře (DOS č. 3 128 637} popsána kombinovaná metodika extrakce a indukované krystalizace této látky, která je však v podstatě omezena na tento jediný případ.

Způsob izolace prostaglandinů (vedle řady dalších organických sloučenin) ze surových reakčních směsí pomocí komplexů s lithnými solemi je chráněn v DOS číslo 3 207 470. Z příkladů provedení ve výše uvedeném pat. spise není zřejmá purifikační účinnost chráněného procesu, přičemž způsob izolace organických sloučenin není selektivní.

V neposlední řadě je zmíněný postup znevýhodněn nutností pracovat s bezvodými rozpouštědly i lithnými solemi, které jsou obvykle silně hydroskopické.

Na tyto- známé rafinační procesy navazuje z pozitivních smyslů způsob rafinace podle vynálezu, který uvedené nedostatky odstraňuje.

Princip rafinace podle vynálezu je založen na reakci ekvimolárních množství surového prostaglandinů obecného vzorce I s dusičnanem stříbrným za tvorby tuhých 1:1 aduktů obecného vzorce II, kde A, B a R má vpředu uvedený význam, působením roztoků dusičnanu stříbrného v organických rozpouštědlech, jako např. acetonitrilu, nižších alkoholech kyselině octové, případně jejich směsích na roztoky prostaglandinových derivátů vzorce I v organických rozpouštědlech, jako nižších alkoholech, acetonu, ethylacetátu, chloroformu, případně jejich směsích.

Surové adukty získané jako precipitáiy při použití méně polárních rozpouštědel nebo jako odparky při použití polárních rozpouštědel, se jedno-, případně vícestupňovou krystalizací z rozpouštědel, s výhodou z kyseliny octové, nižších alkoholů, acetonitrilu, ethylacetátu a jejich směsí rafinují do požadovaného stupně čistoty.

Rozklad aduktu obecného vzorce II rozpuštěného ve výše uvedených rozpouštědlech se provede působením přebytečného množství solí alkalického kovu, které tvoří s dusičnanem stříbrným nerozpustné sraženiny, například působením halogenidů nebo sirníků, zakotvených na nosiči, např. silikagelu, nebo přímo nasyceným vodným roztokem chloridu sodného.

Po odfiltrování anorganických solí a odpaření rozpouštědel za vakua se získá vysoce čistý prostaglandinový derivát obecného vzorce I. Z nerozpustné stříbrné soli se stříbro regeneruje působením kyseliny dusičné a dusičnan stříbrný lze opět použít.

Účinky vynálezu jsou blíže uvedeny v následujících příkladech, které jsou toliko ilustrativní a žádným způsobem neomezují rozsah ani předmět vynálezu.

Příklad 1

0,596 g prostaglandinového derivátu ohecného vzorce I (A značí vodík, B značí hydroxylovou skupinu, R značí m-chlorfenoxylovou skupinu), znečištěného 1,2 % hmot. 15-epi-isomeru a 2,7 % hmot. A⁵-trans-isomeru bylo rozpuštěno v 5 ml metanolu. K tomuto roztoku bylo přidáno 5 ml 15 % hmot. roztoku dusičnanu stříbrného ve směsi acetonitril-etanol (1:1). Vzniklý roztok byl zředěn 20 ml ethylacetátu. Po 48 hodinách stání směsi při teplotě místnosti byla vzniklá sraženina odsáta, promyta 2 X 10 ml ethylacetátu a vysušena. Bylo získáno 0,83 g aduktu obecného vzorce II, který podle vysokotlaké kapalinové chromatografie (HLPC analýzy), kolona 4,6 X 250 mm, náplň Separon C 18, soustava metanol—voda—kyselina octová, detekce UV 274 nm), obsahoval 0,1 % rel. 15-epi-isomeru a 1 % rel. A⁵-trans-isomeru.

Příklad 2

1,1 g prostaglandinového derivátu obecného· vzorce I (A značí vodík, B značí hydrolxylovou skupinu, R značí m-chlorfenoxylovou skupinu), znečištěného 2,8 % hmot. A⁵-trans-isomeru a 4 % hmot. 5-difenylfosfonopentanové kyseliny bylo rozpuštěno v 20 ml acetonu a ke směsi bylo přidáno 0,65 mililitrů 4 M roztoku dusičnanu stříbrného v acetonitrilu. Rozpouštědla byla odpařena za vakua a zbytek byl rekrystalizován ze jSměsi 2 ml ethanolu a 3 ml toluenu. Bylo získáno 0,88 g aduktu obecného vzorce II, obsahujícího podle HPLC analýzy 1,2 % hmot. A⁵-trans-isomeru a 1,6 % hmot. 5-difenylfosfonopentanové kyseliny.

P ř í k 1 a d 3

3,0 g aduktu obecného vzorce II (A značí vodík, B značí hydroxylovou skupinu, R značí m-chlorofenoxylovou skupinu), znečištěného 1,3 % hmot. 15-epi-isomeru a 1,6 procent hmot. A⁵-trans-isomeru bylo za varu rozpuštěno v 10 ml isopropylalkoholu, roztok byl zfiltrován a ponechán za současného ochlazování na teplotu +5 °C krystalizovat přes noc.

Krystaly byly odsáty, promyty 2 ml isopnopylalkoholu, 5 ml ethylacetátu a vysušeny. Bylo získáno 2,5 g rafinátu vzorce II, obsahujícího 0,7 % hmot. 15-epi-isomeru a 0,7 % hmot. A⁵-trans-isomeru. Teplota tání 85 až 104 ^CC. Elementární analýza:

vypočteno:

44,38 % C, 4,88 % H, 2,35 % N;

nalezeno:

45,26 % C, 5,35 % H, 2,19 % N.

Příklad 4

Κ 1 ml 10% hmot. etanolického roztoku prostaglandinového derivátu obecného vzorce I (A značí vodík, B značí hydroxylovou skupinu, R značí m-trifluormetylfenoxylovou skupinu) bylo přidáno 0,1 ml 4 M roztoku dusičnanu stříbrného v acetonitrilu, směs byla zředěna do vzniku zákalu ethylacetátem a ponechána krystalizovat. Bylo získáno 113 mg krystalického aduktu obecného vzorce II, t. t. — 107 až 118 °C, jehož Čistota, ověřená HPLC analýzou byla 93 % rel. Rekrystalizací z malého množství acetonitrilu byl získán rafinát o čistotě vyšší než 97 % rel.

Příklad 5

Κ 1 ml 10% etanolického roztoku derivátu obecného vzorce I (A spolu s B tvoří ethylendioxylový můstek, R značí m-chlorfenoxylovou skupinu) bylo přidáno 0,1 ml 4 M roztoku dusičnanu stříbrného v acetonitrilu. Roztok byl zředěn 2 ml chloroformu a ponechán krystalizovat při -j-5 °C po dobu 48 hodin. Matečný louh byl odlit a zbylé krystaly byly rekrystalovány z 1 ml acetonitrilu. Tímto způsobem bylo získáno 98 miligramů aduktu obecného vzorce II, t. t. = 122 až 135 °C.

Příklad 6

Roztok 11,9 g aduktu obecného vzorce II (A značí vodík, B značí hydroxylovou skupinu, R značí m-chlorfenoxylovou skupinu] v 50 ml methanolu byl přikapán za míchání ke 20 ml nasyceného· roztoku chloridu sodného. Sražená stříbrná sůl byla odfiltrována, z filtrátu byl za vakua odpařen methanol a zbylá vodná fáze byla extrahována třikrát 25 ml ethylacetátu. Spojené organické podíly byly vysušeny síranem horečnatým a po odpaření rozpouštědla za vakua bylo získáno 8,8 g prostaglandinového derivátu obecného vzorce I, jehož čistota podle HPLC analýzy je vyšší než 98 %, jehož IČ charakteristiky jsou shodné se standardem.

Příklad 7

Roztok 1,3 g aduktu obecného vzorce II (A značí vodík, B značí hydroxylovou skupinu, R značí m-trifluormethylfenoxylovou skupinu) v 25 ml směsi ethylacetát—ethanol-kyselina octová (8:1:1) byl zfiltrován kolonou (průměr 15 mm), naplněnou 20 g silikagelu, obsahujícího 10 % hmot. chloridu sodného a 5 % hmot. vody.

Po filtraci byl sloupec promyt 50 ml směsi ethylacetát—ethanol (10 :1) a spojené filtráty byly odpařeny za vakua do odstranění kyseliny octové. Zbylý olej (0,8 g) představuje prakticky čistý prostaglandinový derivát obecného vzorce I, čistota 97 % podle HPLC analýzy, jehož IČ charakteristiky jsou shodné se standardem.

Příklad 8

1,0 g prostaglandinového derivátu I (A značí vodík, B značí hydroxylovou skupinu, R značí n-butylovou skupinu) obsahujícího 2,9 % rel. A⁵-trans-isomeru bylo rozpuštěno v 10 ml acetonitrilu. K tomuto roztoku bylo přidáno 0,65 ml 4 M roztoku dusičnanu stříbrného v acetonitrilu.

Rozpouštědlo bylo odpařeno na rotační vakuové odparce na polovinu původního objemu a zbytek byl postupně ředěn n-hexanem do vzniku zákalu. Stáním směsi při 0 °C bylo získáno 1,1 g krystalické pasty, která po ohřátí na teplotu místnosti poskytne světležlutý olej. Obsah A⁵-trans-isomeru stanovený HPLC analýzou odpovídá 1,8 % rel.

Claims

pRedmEt

1. Způsob rafinace prostaglandinů a jejich analog obecného vzorce I, kde A značí vodík, B hydroxylová skupina nebo A spolu s B tvoří ethylendioxylový můstek, R značí n-butyl nebo fenoxylovou skupinu, případně substituovanou chlorem nebo trifluormethylem, vyznačený tím, že se na roztoky surových prostaglandinů obecného vzorce I v organických rozpouštědlech působí ekvimolárním množstvím roztoku dusičnanu stříbrného v organických rozpouštědlech za vzniku tuhých 1 : 1 aduktů obecného vzorce II, kde A, B a R má shora uvedený význam, které se po izolaci, například rekrystalizaci z organického rozpouštědla, rozloží působením solí alkalických kovů, které tvoří s dusičnanem stříbrným nerozpustné sraženiny, a uvolněný prostaglandinový derivát obecného vzorce I se po odfiltrování nerozpustilých anorganických solí izoluje odpařením filtrátu.

VYNALEZU
2. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se jako organických rozpouštědel pro rozpuštění prostaglandinů použijí alkoholy s počtem atomů uhlíku 1 až 4, aceton, ethylacetát, chloroform, toluen, případně jejich směsi a pro rozpuštění dusičnanu stříbrného· acetonitril, alkoholy s počtem atomů uhlíku 1 až 4, kyselina octová, případně jejich směsi.
3. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se pro rekrystalizaci aduktů obecného vzorce II používá alkoholů obsahujících 1 až 3 atomy uhlíků nebo jejich směsí s rozpouštědly uvedenými v bodu 2.
4. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se rozklad aduktů obecného vzorce II provádí působením solí alkalických kovů ve vodném roztoku nebo zakotvených na nosiči.