CS235786B1 - Způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu prpti housenkám škůdců z krystaloforních bacilů druhu Bacillus thuringiensia - Google Patents
Způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu prpti housenkám škůdců z krystaloforních bacilů druhu Bacillus thuringiensia Download PDFInfo
- Publication number
- CS235786B1 CS235786B1 CS692082A CS692082A CS235786B1 CS 235786 B1 CS235786 B1 CS 235786B1 CS 692082 A CS692082 A CS 692082A CS 692082 A CS692082 A CS 692082A CS 235786 B1 CS235786 B1 CS 235786B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- assimilable
- caterpillars
- fermentation
- bacilli
- nigeriae
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 241000193388 Bacillus thuringiensis Species 0.000 title description 5
- 239000002917 insecticide Substances 0.000 title description 5
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 title description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 title 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 title 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 22
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 22
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 230000000749 insecticidal effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims abstract description 5
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims abstract description 5
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 claims abstract description 4
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 claims description 7
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims description 6
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 6
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N lactose group Chemical group OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)CO)[C@H](O1)CO GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 4
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 claims description 4
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 claims description 3
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 3
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 abstract description 6
- 239000002689 soil Substances 0.000 abstract description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 abstract description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 abstract 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 abstract 1
- 240000001307 Myosotis scorpioides Species 0.000 description 11
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 6
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 6
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 5
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 5
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 5
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 5
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 5
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 5
- YTPMCWYIRHLEGM-BQYQJAHWSA-N 1-[(e)-2-propylsulfonylethenyl]sulfonylpropane Chemical compound CCCS(=O)(=O)\C=C\S(=O)(=O)CCC YTPMCWYIRHLEGM-BQYQJAHWSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 4
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 229940097012 bacillus thuringiensis Drugs 0.000 description 3
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 2
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 2
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 1
- 244000178937 Brassica oleracea var. capitata Species 0.000 description 1
- 241000726760 Cadra cautella Species 0.000 description 1
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 1
- 240000004160 Capsicum annuum Species 0.000 description 1
- 235000008534 Capsicum annuum var annuum Nutrition 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241001631715 Dendrolimus Species 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 241000255777 Lepidoptera Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 241000287509 Piciformes Species 0.000 description 1
- 241000907661 Pieris rapae Species 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 244000203593 Piper nigrum Species 0.000 description 1
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 1
- 239000001511 capsicum annuum Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- -1 eacharoaa Substances 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N hydridophosphorus(.) (triplet) Chemical compound [PH] BHEPBYXIRTUNPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000004810 polytetrafluoroethylene Substances 0.000 description 1
- 229920001343 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Způsob výroby insekticidního bakterijního
preparátu proti housenkám z krystaloforních
bacilů ze skupiny Bacillus
thuringiensis submersní metodou za stálého
míchání a vzdušnění při teplotě
29 - 32 °C zaočkováním do sterilní tekuté
půdy obsahující asimilovatelné sacharidy
a asimilovatelný organický zdroj
dusíku, vyznačený tím, že asimilovatelných
sacharidů a asimilovatelného zdroje
dusíku s obsahem růstoáých faktorů a vitaminů
se použije v poměru 2 až 3 : 1
při výchozím pH do 7,5, přičemž po ukončeni
fermentace se účinná složka z fermentační
půdy isoluje a po přidání smáčedla,
adhesivního prostředku a ochranné
látky se suší.
Description
(54) Způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu prpti housenkám škůdců z krystaloforních bacilů druhu Bacillus thuringiensia
Způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu proti housenkám z krystaloforních bacilů ze skupiny Bacillus thuringiensis submersní metodou za stálého míchání a vzdušnění při teplotě 29 - 32 °C zaočkováním do sterilní tekuté půdy obsahující asimilovatelné sacharidy a asimilovatelný organický zdroj dusíku, vyznačený tím, že asimilovatelných sacharidů a asimilovatelného zdroje dusíku s obsahem růstoáých faktorů a vitaminů se použije v poměru 2 až 3 : 1 při výchozím pH do 7,5, přičemž po ukončeni fermentace se účinná složka z fermentační půdy isoluje a po přidání smáčedla, adhesivního prostředku a ochranné látky se suší.
»·'
786
235 786
Předmětný vynález se vztahuje na výrobu nového bakterijního preparátu jako selektivního biologického prostředku pro hubení hmyzích Škůdců-housenek z řádu Lepidopter.
Je známo, že dosud používané chemické insékticidní prostřed ky jako je např. DDT, HCH, vedou k vyvolání resistence hmyzu proti nim. V případech, kdy se tyto insekticidy dostanou db potravy člověka, vyvolávají v organismech lidi nežádoucí reakce a irreversibilní poruchy·
Ukázalo se, že neomezené používání insekticidů vedle přímého potřísnění potravin způsobuj^ znečistění rostlin* s kterými se dostávají do mléka, masa, tuků zvířat, takže znečistění potravy insekticidem je daleko častější, než by se zdálo· Chemické insekticidy zasahují rovněž nepříznivě do biocenos luk a lesů tím, že spolu se škůdcem hubí i nespočet drobných druhů hmyzu vesměs užitečných jako parasiti škůdců a porušují tak rovnováhu v přírodě.
Uvedené nevýhody vedly k hledání šetrnějších cest k potírání škůdců, jakým je biologický boj, který využívá přirozených nepřátel hmyzu specializovaných ns určitého škůdce· Jsou to nemoci a cizopasníci hmyzu· Pro umělé namnožení infekce na umělých půdách se hodí hlavně entomopatogenní bacily ze skupiny Bacillus thuringieneis, které vytvářejí krystaly toxické pro housenky· Jejich velmi virulentním reprementantem je Bacillus thuringiensis, na jehož příkladu je dále vynález popsán· Bacillus thuringiensis je bakterie, která způsobuje selektivně hynuti housenek Lepidopter, nepoškozuje jiný užitečný hmyz a není toxická pro Člověka a jiné teplokrevné organismy, ptáky, ryby, ani pro rostliny.
235 786
Již v r. 1962 byl vypracován patent
103416 na způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu z Bac. thuringieneis, který však byl nyní pozměněn v kultivačním režimuj^^pracována progresivní nová forma finalizace a preparát založen na později izolovaných nových kmenech se zvýšeným účinkem hlavně na velké housenky a housenky můr.
Způsob podle vynálezu umožňuje provozní výrobu standardního bakterijního preparátu z bacilů druhu Bacillus thuringienais ekonomickým způsobem ve velkém měřítku za použití moderního zařízení v krátkém Čase.
Vynález se týká způsobu výroby insekticidního bakterijního preparátu z krystaloforních bacilů druhu Bacillus thuringiensis submersní metodou za stálého míchání a vzdušnění při teplotě 29 až J2’C zaočkovéním do sterilní tekuté půdy obsahující similovatelné sacharidy a aaimilovatelný organický zdroj dusíku, vyznačený tím, že asimilovatelných sacharidů a asimilovatelného zdroje dusíku se použije v poměru 2 až 3 : 1 s obsahem růstových faktorů a vitaminů při výchozím pH do 7,5, přičemž ukončení fermentace je podmíněno uvolněním insekticidní složky, která se dále z fermentační tekutiny izoluje a po přidání smáčedla, adhesivního prostředku a ochranné látky suší·
Bacil se kultivuje aerobně v submersních podmínkách ve sterilní tekuté půdě za stálého vzdušnění a míchání. Kultivační doba je 48 hod až 72 hod·, optimální teplota okolo 30*C, výchozí pH ae může pohybovat mezi 6,5 a 7,5, nejlépe 7,0 až 7,2. Během fermentace se pH udržuje v tém$ rozmezí pomocí přísady např. K2HP0^ nebo CaCO^ nebo NaHCO^· Může být použito různých medií obsahujících asiailovatelný uhlík a dusík. Zdrojem uhlíku mohou být aaimilovatelné sacharidy (mono-, di- nebo polysacharidy, např. glukosa, eacharoaa, škrob). Asimilovatelným zdrojem dusíku je bílkovinný materiál, nejlépe obsahující současně vitaminy a růstové faktory, např. kvasníčný autolysát, kvaaničný extrakt, sušené kvasnice, pepton, sojové mouka, kukuřičná mouka, pšeničná mouka, mouka z odtučněných bavlníkových klíčků, kaseinový hydrolysát, kukuřičný extrakt, výpalky po výrobě alkoholických nápojů, rybí moučka apod.).
235 786
Je vhodné přidat do kultivačního media oligobiogenní prvky jako Mg, lín, Fe, Zn, Ca-soli.
Po skončení vývoje a 90-95 % vysporulování kultury bacilu, kdyáse současně uvolní insekticidní krystaly, se účinná biomasa spor a krystalů z fermentační tekutiny isoluje a sudí. Před isolací se vmíchá do fermentační tekutiny s biomasou ochranná látka např. laktosa nebo NaCl (5 až 20 %), smáčedlo (5 až 10 %) např. Triton X, Tween 20, Chevron, Slovaaol a adhesivní prostředek (množství do 5 %) např. melasa, kasein, latex, syrup. Izolace sporového materiálu se provede odstředěním nebo filtrací. Fermentační tekutinu s biomasou je možno zahustit na filmové odparce nebo odstředivkou typu Lavall. Sušení je možno provést několika způsoby: proudem teplého vzduchu, lyophilisací, ve vakuové sušárně nebo ve sprayové sušičce nebo přecipitací acetonem s následujícím vysušením. Materiál spor a krystalů ve romě suchého prášku si zachovává svoje insekticidní vlastnosti po řadu let, je-li uskladněn v suchu a chladu.
Uvedený výrobní způsob insekticidního preparátu platí i pro ostatní krystalofomí bacily ze skupiny Bacillus thuringiensie, jako jsou např. variety thuringiensis, alesti, kurstaki, aotto, dendrolimus, kenyae, galleriae, aubtoxicus, \»ntomocidu8, morrisoni, nigeriae, tolworthi, darmstadtiensis, toumanoffi, mořitai a další.
Biologickým testem na housenkách Lepidopter (např. housenkách zavíječe moučného, zavíječe datlového, zavíječe paprikového, běláska zelného apod.)9 a srovnáním se standardem ae určí biologická aktivita preparátu v biologických jednotkách. Biologický test trvá 7 až 10 dní.
Příklad 1.
Živná půda na třepačce, v předočkovacím tanku a fermentačním tanku má složení: 1,5 % sojové mouky, 1,4 % kukuřičného škrobu, 0,03 % MgSO4.7H2O, 0,002 % FeSO^THgO, 0,002 ZnS04 . 7H20s 0,002 % CaCl2, 0,1 % NaHCOy 500 ml baňky na třepačku se zaočkcji 20 až 24 hod. kulturou kmene Bac. thuringiensie vyrostlého na šikmém agaru o složení: škrob 2 %, pepton 0,75 %, kvasničný autolyzát 2,5 %, K2HP04 0,68 stopové prvky 0,1 % základního roztoku (základní roztok:
235 786
K2SO4 17,4 g,MgS04. 7H20 12,3 g, MnSO4 . 7H2O 0,22 g,
FeS04. 7H20 2,0 g, ZnS04 o 7H2O 1,44 g, CaClg . óHgO 18,3 g, H20 1000 ml)· Baňky na třepačku se plní 50 ml půdy a zaoSkují se kulturou z 1 šikmého agaru vždy 3 baňky· Předočkovací tank se očkuje 1 až 3 % 24-hod. kultury z třepačky· Fermentační tank se zaočkuje 20- až 24-hod. kulturou z předočkovacího tanku (2 až 10 %)· Kultivace ve fermentačním tanku probíhá při 28 až 32°C za vzdušnění 1/2 objemem vzduchu a míchání 300 otáček/min. 70 - 72 hod·,až dojde k uvolnění spor a krystalů v 95 % kultury.
Po skončení fermentace se do fermentační tekutiny s blomasou Bacillue thuringiensis vmíchá laktosa (10 až 20 % počítáno na sušinu), smáčedlo Slovasol (5 až 10 %) a 1 % melasy, míchá se 30 min. a suší se na sprayové sušičce (vstup 150 - 200°C, výstup maximálně 80°C).
Biotestem na housenkách zavíječe Ephestia cautella se stanoví aktivita preparátu v Mezinárodních biologických jednotkách.
Příklad 2.
' Živná půda skládající se z 2,5 % glukosy, 3 % kukuřičného extraktu a 0,68 % K2HPO4 o pH 7,0 - 7,2>se v předočkovacím tanku zaočkuje 1 až 3 jí vegetativního inokula bacilu 24 hodin starého,vyrostlého na třepacím stroji na živné půdě obsahující 2 % Škrobu, 0,75 % pěptonu, 2,5 % kvaanlčného autolysátu, 0,68 % K2HP04 a 0,1 % oligobiogenních ( stopových) prvků (viz přiklad 1) a kultivuje se při 29 - 30°C za vzdušnění 1/2 objemem vzduchu a mícháni 200 otáček/min. 20 až 24 hod. Takto připraveným inokulem z předočkovecího tanku se zaočkuje fermentační tank. Kultivace ve fermentačním tanku probíhá při 30°C za vzdušnění 1/2 objemem a míchání 300 Ot/min 54 až 72 hod·, až dojde k uvolnění spor a inkluzí v 95 % kultury. K biomase spor a inkluzí se přidá 10 - 20 % laktosy a smáčedlo Tween 20 5 - 10 %, zahustí se na filmové odparce a suší na sprayové sušičce jako v příkladě 1. V získaném preparátě se stanoví biotestem na housenkách běláska zelného počet jednotek aktivity.
Příklad 3.
235 7«β
Živné půda v před oč kovacím a fermentačním tanku mé . složení 1,5 % sojové mouky, 0,5 % glukosy, 0,5 % kukuřičného škrobu, 0,03 % MgS04 . 7^0, 0,002 % FeS04 . 7^0, s 0,002 % ZnS04 . 7Η^0 a 0,1 % CaCO^, živná půda v baňkách na třepačce pro inokulaci předočkovacího tanku má složení 2 % glukosy, 1,5 % kvasníčného autolysátu, 0,75 % peptonu, 0,6 % K2HP04 a 0,1 % oligobiogenních prvků (viz příklad 1·)· Postup při inokulaci a fermentaci je stejný jako v příkladě 1.
Biomasa spor a inklusí se ochladí asi na 20*C a zahustí na separátoru typu Alfa Lavall, čímž se sušina zvětší asi 6 krát· Ke koncentrátu ae přidá laktoea (5 až 25 % na auěinu a smáčedlo Triton X 5 až 10 %), míchá se asi 30 min· a suší ve sprayové sušičce (viz příklad 1·)· Preparát se testuje na biologickou aktivitu na housenkách zavíječe paprikového a srovná se a mezinárodním standardem· Příklad účinností :
Účinnosti bakterijního preparátu na L4 housenky mola Bphestia cautella končen, prep. mortalita
| l.den | 2 .den | 3 «den | <«den | 7· den | 8«den 9«den 10, | |
| 0,5 % | - | 60% | 100% | |||
| 0,3 % | - | 60% | 100% | |||
| 0,1 % | - | 30% | 70% | 100% | ||
| 0,05 % | 10% | 50% | 60% | 60% | 60% 60% 70% | |
| kontrola | — | MB | — | •B ' «Β |
i
Claims (2)
- Předmět vynálezu 7881· Způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu proti housenkám škůdců z krystaloforních b&lů druhu Bac i Hus thuringienaia vyznačený tím, že ae variety thuringiensis, alesti, kurstaki, sotto, dendroliaua, kenyae, galleriae, subtoxieue, entomocidus, morriaoni, nigeriae, tolworthi, darmatadtienais, toumanoffi, moritai kultivují submersní metodou za stálého míchání a vzdušnění při teplotě 29 - 32*C zaočkováním do sterilní tekuté živná půdy obsahující aaimilovatelná sacharidy a asimilovatelný organický zdroj dusíku,přičemž, aaimilovatelných sacharidů a asimilovatelnáho zdroje dusíku s obsahem růstových faktorů a vitaminů ee použije v poměru 2 až 3 : 1, při výchozím pH 6,5 až 7,5,přičemž po ukončení fermentace a uvolnění spor a krystalů se tyto z fermentační půdy izolují a po přidání smáčedla, adhesivního prostředku a ochranné látky se suší při teplotách do 80“C.
- 2· Způsob podle bodu 1· vyznačený tím, že se jako ochranná látka použije laktosa nebo chlorid sodný.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS692082A CS235786B1 (cs) | 1982-09-28 | 1982-09-28 | Způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu prpti housenkám škůdců z krystaloforních bacilů druhu Bacillus thuringiensia |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS692082A CS235786B1 (cs) | 1982-09-28 | 1982-09-28 | Způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu prpti housenkám škůdců z krystaloforních bacilů druhu Bacillus thuringiensia |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS235786B1 true CS235786B1 (cs) | 1985-05-15 |
Family
ID=5417351
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS692082A CS235786B1 (cs) | 1982-09-28 | 1982-09-28 | Způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu prpti housenkám škůdců z krystaloforních bacilů druhu Bacillus thuringiensia |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS235786B1 (cs) |
-
1982
- 1982-09-28 CS CS692082A patent/CS235786B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102112380B1 (ko) | 식물 해충, 특히 나비목 및 파리목에 대한 생물학적 방제제로서의, 신규한 브레비바실러스 라테로스포루스 균주 | |
| US4718935A (en) | Method for the preparation of mycoherbicide-containing pellets | |
| US4767441A (en) | Method for the preparation of mycoherbicide-containing pellets | |
| AU599374B2 (en) | In vitro method for producing infective bacterial spores and spore-containing insecticidal compositions | |
| RU2080065C1 (ru) | Бактериальный инсектицид для борьбы с чешуекрылыми | |
| US5266483A (en) | Bacillus strain and insect pest controlling agent | |
| WO2015175372A1 (en) | A sprayable dispersed starch-based bioplastic formulation to control pests | |
| EP0102702B1 (en) | Methods and compositions of combating pests | |
| JP3132195B2 (ja) | 新規微生物および植物病害防除剤 | |
| CS235786B1 (cs) | Způsob výroby insekticidního bakterijního preparátu prpti housenkám škůdců z krystaloforních bacilů druhu Bacillus thuringiensia | |
| US6455036B1 (en) | Granulated formulation and method for stabilizing biocontrol agents | |
| RU2084152C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для защиты растений от фитопатогенных бактерий | |
| US3632747A (en) | Bacterial fly-larva-killing agent | |
| KR900001513B1 (ko) | 미생물 살충제의 제조방법 | |
| RU1837773C (ru) | Штамм бактерий BacILLUS тнURINGIеNSIS VaR КURSтакI дл получени инсектицидного препарата | |
| US6367192B1 (en) | Fly pest control in mushroom cultivation | |
| NZ234241A (en) | Acaricidal compositions, bacillus strain, process for preparing acaricidally active agent, mixed micropopulation and treatment of honey bees | |
| CA2118267C (en) | Bioencapsulated biopesticides and process for the manufacture thereof | |
| JPH11332556A (ja) | 新規微生物及びそれを用いたコガネムシ科昆虫の防除方法 | |
| RU2064264C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus thuringiensis, предназначенный для получения препарата против личинок кровососущих двукрылых | |
| CN112210506B (zh) | 一株对灵芝谷蛾有杀虫活性的苏云金芽孢杆菌jxbt-0350及其应用 | |
| JP3073263B2 (ja) | ドレックスレラ属の新菌株及びそれらを含有する雑草防除剤 | |
| JP4536230B2 (ja) | 土壌病虫害防除剤および土壌病虫害防除法 | |
| WO1995035365A1 (en) | Process for cultivating bacillus thuringiensis biopesticides in wastewater treatment sludges | |
| GB2122089A (en) | Method and compositions for combating pests |