RU2084152C1 - Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для защиты растений от фитопатогенных бактерий - Google Patents
Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для защиты растений от фитопатогенных бактерий Download PDFInfo
- Publication number
- RU2084152C1 RU2084152C1 RU9494039379A RU94039379A RU2084152C1 RU 2084152 C1 RU2084152 C1 RU 2084152C1 RU 9494039379 A RU9494039379 A RU 9494039379A RU 94039379 A RU94039379 A RU 94039379A RU 2084152 C1 RU2084152 C1 RU 2084152C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- bacillus subtilis
- plant protection
- bacterium bacillus
- subsp
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Использование: сельскохозяйственная микробиология, касается производства средств защиты растений от фитопатогенов и касается нового штамма бактерий для производства указанных средств. Сущность изобретения: штамм бактерий Bacillus subtilis М-22 выделен из окружающей среды. Депонирован в коллекции Всероссийского института защиты растений под N М-22, проявляет антагонистическую активность по отношению Clavibacter michiganense subsp. michiganense, Vanthomonas campestris pv. vesicatora, Pseuabmonas corrugata, Pseudamonas syringae pv. tomato, Erwinia carotovora subsp. carotovora, Alternaria splani, Verticillum dachliae, Fusarium graminearum, Ascohyta fabae, Colletotrichum lagenarium, Rhizoctonia solani, Bipolaris sorokiniana, Sclerotinia sclerotiorum, Sertoria nodorum. 4 табл.
Description
Изобретение относится к сельскохозяйственной микобиологии и представляет собой штамм бактерии, являющийся антагонистом по отношению к яду фитопатогенных бактерий. Штамм B. subtilis депонирован в коллекции ВИЗР под N 22. Идентификацию штамма проводили по "Краткому определителю бактерий Берги", "Мир", М. 1980 г.
Химические пестициды обладают низкой эффективностью в защите от бактериозов сельскохозяйственных культур и значительной токсичностью для теплокровных животных и человека, поэтому их использование ограничено.
В настоящее время в защите от бактериозов в ограниченном объеме применяют микробиологические препараты на основе штаммов антагонистов фитолавин и фитобактериомицин.
Основной недостаток этих препаратов низкая биологическая активность и узкий спектр заболеваний. ("Список химических и биологических средств борьбы с вредителями, болезнями и сорняками и регуляторов роста растений, разрешенных для применения в сельском хозяйстве на 1986 1990 гг. "М. 1987, с. 95-96).
Наиболее близким к предлагаемому является штамм Bacillus subtilis ИМП-215, являющийся продуцентом бактофита (бацифита) препарата для защиты от мучнистой росы огурцов, вертициллезного вилта хлопчатника, корневых гнилей овощных и зерновых культур ("Проблемы создания и применения микроорганических средств защиты растений", М. 1989, с. 253, 257-295_ Недостатком указанного штамма является его недостаточно высокая эффективность против фитопатогенных бактерий.
Штамм Bacillus subtilis М-22-ВИЗР обладает высокой антагонистической активностью в отношении широкого спектра возбудителей бактериозов растений и является продуцентом биопрепарата гамаир. Штамм выделен из окружающей среды в г. Киеве (Украина).
Культуральные и морфологические признаки.
Штамм B. subtilis М-22-ВИЗР имеет следующие морфологические и культуральные признаки: клетки спорообразующие палочки, редко расположены в цепочки, расположение эндоспоры центральное Размеры клеток 0,8-0,9 мкм х 1,7-2 мкм. Размеры эндоспор 0,7-0,8 мкм х 1,0-1,4 мкм. По Граму окрашиваются положительно.
Для изучения культурально-морфологических свойств штамма культуру выращивали при 26±2oC в течение 2-4 суток на твердых питательных средах следующего состава:
Мясо-пептонный агар (МПА):
мясо-пептонный бульон 800 мл
водопроводная вода 200 мл
глюкоза 10 г
агар 20 г
стерилизация при 0,5 атм 20 мин.
Мясо-пептонный агар (МПА):
мясо-пептонный бульон 800 мл
водопроводная вода 200 мл
глюкоза 10 г
агар 20 г
стерилизация при 0,5 атм 20 мин.
Сусло-агар
сусло 200 мл
вода 800 мл
агар 20 г
стерилизация при 0,8 атм 20 мин.
сусло 200 мл
вода 800 мл
агар 20 г
стерилизация при 0,8 атм 20 мин.
Кукурузно-мелассовый агар:
кукурузный экстракт 30 г
меласса 15 г
агар 20 г
вода 1 л
стерилизация при 0,8 атм 20 мин.
кукурузный экстракт 30 г
меласса 15 г
агар 20 г
вода 1 л
стерилизация при 0,8 атм 20 мин.
pH сред до стерилизации 0,8-7,2.
На агаризованных средах на 1-е сутки колонии мелкие, тускло блестящие. На 2-3 сутки роста колонии на МПА с глюкозой и кукурузно-мелассовом агаре плотные, неправильной формы, край лопастной, центр складчатый, тускло блестящий, периферия матовая. На МПА без глюкозы и сусло-агаре колонии белесоватые, сильно разрастающиеся, более источенные, центр слегка возвышен. При росте газоном на ранних стадиях роста культура белесоватая, кожистая. Затем поверхность становится бугровато-складчатой, бежеватого цвета.
Физиологические признаки: обладает каталазной активностью, гидролизует крахмал, не растет в анаэробных условиях, не обладает лецитиназной активностью, максимальная температура роста 48±2oC, минимальная -10-12oC. Растет на искусственных питательных средах: МПБ, МПА, СПА, поликомпонентных средах, содержащих в своем составе гидролизат рапсового шрота, дрожжи БВК и кукурузную муку в различном соотношении. Утилизирует глюкозу, маннит, крахмал. Хорошо усваивает аминокислоты, белки и их гидролизаты, гидролизаты дрожжей и т.д.
Способ биосинтеза:
А. Посевная среда:
кукурузный экстракт 3,0
меласса 1,5%
pH 6,8-7,2
Б.Ферментационная среда аналогична инокуляционной.
А. Посевная среда:
кукурузный экстракт 3,0
меласса 1,5%
pH 6,8-7,2
Б.Ферментационная среда аналогична инокуляционной.
Культивирование проводили в глубинных условиях при температуре 26±2oC в течение 3-х суток. Инокулюм выращивали 24 ч. Культуральную жидкость сушили лиофильно.
Способ хранения штамма: в пробирках на косяках МПА при температуре +4-6oC или в лиофилизированном состоянии в ампулах. Частота пересева 2 раза в год, перезакладки в ампулы 1 раз в 5 лет.
Антагонистические свойства: подавляют рост фитопатогенных бактерий и грибов. Для определения антагонистической активности штамм выращивали на кукурузно-мелассовой среде в течение 3 суток при t 26±2oC. Определяли активность культуральной жидкости, этанольного экстракта биомассы и фильтрата культуральной жидкости методом лунок. Зоны лизиса тест-культур, посеянных газоном на МПА и среде Чапека, определяли через 1-3 суток на бактериях и 3-7 сутки на грибах. (табл 1)
Пример 1. Штамм B.subtilis М-22-ВИЗР выращивали на среде, содержащей кукурузный экстракт 3% меласса 1,5% остальное водопроводная вода, pH до стерилизации 7,0 в течение 3-х суток при t 28±2o C. Культуральную жидкость сушили лиофильно. Получили выход сухой биомассы 40 г/л с титром 3 1010 спор/г. Полученный биопрепарат (гамаир) на основе предлагаемого штамма испытали на семенах томата, искусственно зараженных возбудителем мягкой гнили овощных, в провокационных условиях влажной камеры. Для этого семена сорта Аврора замачивали в суспензии Erwinia carotovora subsp, carotovora с титром 109 кл/мл в течение 2-х ч. Затем семена обрабатывали суспензией образца биопрепарата в концентрации 0,05% в течение 30 минут. Контрольные семена замачивали в воде на 2 ч. В качестве эталонов сравнения использовали биопрепараты фитолавин (0,05% ), бактофин (0,05%) и химический препарат ТМТД. Семена помещали в чашки Петри на увлажненные фильтры и инкубировали 12 дней при 25o C. Как видно на таблице 2, обработка привела к стимуляции развития и полному подавлению загнивания проростков семян. Она была значительно более эффективной, чем в вариантах с эталоном сравнения (бактофитом и ТМТД). Фитолавин в условиях влажной камеры оказал высокую фитотоксичность, поэтому проанализировать его бактерицидный эффект в условиях не удалось вследствие загнивания проростка.
Пример 1. Штамм B.subtilis М-22-ВИЗР выращивали на среде, содержащей кукурузный экстракт 3% меласса 1,5% остальное водопроводная вода, pH до стерилизации 7,0 в течение 3-х суток при t 28±2o C. Культуральную жидкость сушили лиофильно. Получили выход сухой биомассы 40 г/л с титром 3 1010 спор/г. Полученный биопрепарат (гамаир) на основе предлагаемого штамма испытали на семенах томата, искусственно зараженных возбудителем мягкой гнили овощных, в провокационных условиях влажной камеры. Для этого семена сорта Аврора замачивали в суспензии Erwinia carotovora subsp, carotovora с титром 109 кл/мл в течение 2-х ч. Затем семена обрабатывали суспензией образца биопрепарата в концентрации 0,05% в течение 30 минут. Контрольные семена замачивали в воде на 2 ч. В качестве эталонов сравнения использовали биопрепараты фитолавин (0,05% ), бактофин (0,05%) и химический препарат ТМТД. Семена помещали в чашки Петри на увлажненные фильтры и инкубировали 12 дней при 25o C. Как видно на таблице 2, обработка привела к стимуляции развития и полному подавлению загнивания проростков семян. Она была значительно более эффективной, чем в вариантах с эталоном сравнения (бактофитом и ТМТД). Фитолавин в условиях влажной камеры оказал высокую фитотоксичность, поэтому проанализировать его бактерицидный эффект в условиях не удалось вследствие загнивания проростка.
Пример 2. Биологическую эффективность препарата на основе B.subtilis М-22-ВИЗР проверяли в вегетационном опыте на растениях томата гибрида Менуэт. Рассаду в фазе 5-6 настоящих листьев опрыскивали 0,05% суспензиями биопрепаратов, а затем заражали возбудителем бактериального рака путем инъекции 0,01 мл суспензии C. miohiganense subsp. michiganense с титром 109 кл/мл в пазуху листа. В течение периода вегетации наблюдали за распространенностью бактериального рака томата, учитывая увядания растений, появление пятен и усыхание листьев. Данные представлены в таблице 3. Как видно из таблицы, обработка биопрепаратом гамаир на основе B. subtilus М-22-ВИЗР вдвое снижала распространенность бактериоза томата, в то время как опрыскивание бактофитом и фитолавином уменьшала этот показатель лишь в 1,2-1,7 раза.
Пример 3. Сравнительную оценку эффективности биопрепарата на основе штамма B. subtilis М-22-ВИЗР проводили в условиях мелкоделяночного опыта в производственных теплицах АО "Лето" (С.-Петербург) на посадках томата. Применение биопрепаратов начинали с замачивания семян в 0,05% суспензиях в течение 30 минут. Затем проводили 2- кратное опрыскивание растений биопрепаратами в той же концентрации в рассадный период и один раз после высадки томатов на постоянное место произрастания. В течение периода наблюдений распространенность бактериального рака по формуле:
.
.
где P распространенность,
n число больных растений, шт;
N общее число учтенных растений, шт.
n число больных растений, шт;
N общее число учтенных растений, шт.
Перед началом сбора оценивали количество плодов на одном растении (табл 4). Данные таблицы свидетельствуют, что обработка гамаиром вдвое снижала распространенность бактериального рака томата (Clavibacter michiganense subsp. michiganense), что привело к значительному усилию образования плодов.
Claims (1)
- Штамм бактерий Bacillus subtilis ВИЗР М-22, используемый для защиты растений от фитопатогенных бактерий.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU9494039379A RU2084152C1 (ru) | 1994-10-10 | 1994-10-10 | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для защиты растений от фитопатогенных бактерий |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU9494039379A RU2084152C1 (ru) | 1994-10-10 | 1994-10-10 | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для защиты растений от фитопатогенных бактерий |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU94039379A RU94039379A (ru) | 1996-11-27 |
RU2084152C1 true RU2084152C1 (ru) | 1997-07-20 |
Family
ID=20161932
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU9494039379A RU2084152C1 (ru) | 1994-10-10 | 1994-10-10 | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для защиты растений от фитопатогенных бактерий |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2084152C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107058172A (zh) * | 2017-02-27 | 2017-08-18 | 中国农业科学院植物保护研究所 | 一种苏云金芽孢杆菌及其应用 |
RU2802234C1 (ru) * | 2022-12-05 | 2023-08-23 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Штамм бактерий Bacillus subtilis subspecies subtilis krd-20 - продуцент фунгистатических липопептидов |
-
1994
- 1994-10-10 RU RU9494039379A patent/RU2084152C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Тезисы докладов на Всесоюзной конференции "Проблемы создания и применения микробиологических средств защиты растений", 16 - 18 мая 1989, Велигож, 1989, 265 - 266. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN107058172A (zh) * | 2017-02-27 | 2017-08-18 | 中国农业科学院植物保护研究所 | 一种苏云金芽孢杆菌及其应用 |
RU2802234C1 (ru) * | 2022-12-05 | 2023-08-23 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Штамм бактерий Bacillus subtilis subspecies subtilis krd-20 - продуцент фунгистатических липопептидов |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU94039379A (ru) | 1996-11-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN109266586B (zh) | 贝莱斯芽孢杆菌bmf 03及其用途与发酵方法 | |
CN100334201C (zh) | 一株枯草芽孢杆菌及其应用 | |
AU2002227228B2 (en) | Bacterial inoculants for enhancing plant growth | |
KR0145740B1 (ko) | 고정화 미생물 농약과 그의 제조방법 | |
US8250806B2 (en) | Microbial blend compositions and methods for their use | |
RU2313941C2 (ru) | Препарат для защиты растений от возбудителей болезней сельскохозяйственных культур и винограда с ростстимулирующим эффектом, способ получения этого препарата и штаммы для его осуществления | |
CN110628664B (zh) | 防治根结线虫的远东假单胞菌及其制备方法与应用 | |
HU220582B1 (hu) | Készítmény és eljárás növénybetegségek elleni védelemhez | |
CN104195069A (zh) | 一株防治稻瘟病的枯草芽孢杆菌2012syx04 | |
CN104164393A (zh) | 用于防治稻瘟病的枯草芽孢杆菌 | |
RU2337955C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для защиты растений от фитопатогенных грибов и бактерий | |
KR101908729B1 (ko) | 식물 방제 및 생장 촉진 효과를 갖는 크라이세오박테리움 솔다넬리코라 균주 및 이의 용도 | |
EP0513184A1 (en) | Method of producing a modified seed and plant capable of producing plants of reduced stature | |
RU2634415C1 (ru) | Штамм гриба Trichoderma asperellum для получения биопрепарата комплексного действия для растениеводства | |
RU2284353C1 (ru) | Штамм микроорганизмов bacillus mycoides var. b.a. для получения биопрепарата, используемого для стимуляции роста и защиты растений от болезней | |
KR20080019831A (ko) | 유도전신저항성 바실러스 메가테리움 hk-isr1 균주 및이의 배양액을 포함하는 미생물 제제와 이를 이용한인삼병 방제 방법 | |
KR100997677B1 (ko) | 슈도모나스 제니큘라타 mh102 균주 및 이를 이용한 식물병 방제방법 | |
JP3132195B2 (ja) | 新規微生物および植物病害防除剤 | |
RU2307158C2 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus subtilis М1, ОБЛАДАЮЩИЙ ФУНГИЦИДНОЙ И ФУНГИСТАТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ ПО ОТНОШЕНИЮ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ БОЛЕЗНЕЙ КУЛЬТУРНЫХ РАСТЕНИЙ | |
RU2084152C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для защиты растений от фитопатогенных бактерий | |
KR100616408B1 (ko) | 라이조푸스 올리고스포러스을 포함하는 잔디생장촉진제 및이를 이용한 잔디 생장 촉진 방법 | |
RU2551968C2 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus pumilus А 1.5, В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПОВЫШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ И ИХ ЗАЩИТЫ ОТ БОЛЕЗНЕЙ, ВЫЗЫВАЕМЫХ ФИТОПАТОГЕННЫМИ МИКРООРГАНИЗМАМИ | |
KR101288414B1 (ko) | 신규한 로도토루라 그라미니스 y435 및 이를 포함하는 식물 저장병균 방제제 | |
RU2630661C1 (ru) | Штамм streptomyces globisporus к-35/15 в качестве средства для защиты растений от вредных насекомых - фитофагов | |
RU2121271C1 (ru) | Штамм бактерий pseudomonas lemoignei для получения препарата, используемого для стимуляции роста и защиты растений от грибных фитопатогенов в процессе вегетации и при хранении урожая |