CS235335B2 - Způsob výroby tautomemích 5-substituovaných 4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(a 2H)-pyrazolo[3,4-g]chinoiinů - Google Patents

Abstract

Způsob výroby tautomemích 5-substituovaných 4s4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro- -1H(a 2H)pyrazolo(3,4-gl ehinalinů obecných vzorců lila" a Illb* ve kterém R" znamená alkylovou skupinu s 1 ež 3 atomy uhlíku, vyznačující ae tím, že se forqjrlderivát obecného vzorce IVb ve kterém 3" má shora uvedený význam. nebo jeho tautomer, nechá ve vodném prostředí reagovat s hydrazinen.

Description

Vynález popisuje zlepěený způsob výroby tautomerních 5-substituovaných 4,48,5,6,7,8, 8a,9-oktahydro-1H(a 2H)-pyrazolo[3,4-g]chinolinů za použití nových intermediérních ketoderivátů.

V aáerickém patentová· spisu S. 4 198 415, vydaném 15. dubna 1980, a v aouvieejícím americkém patentová· aplsu č. 4 230 861, vydaném 28. října 1980, je popsána skupina oktahydropyrazolo[3,4-g]chinolinů. V těchto publikacích jsou popsány jak meziprodukty tuk finální produkty a jeden s postupů k přípravě těchto látek, popsaný ve shora uvedených spisech, je moino znázornit následujícím reakčním schématem:

— -_* ^o—— ^r1 h,c-n-chX-^a-n''^{! J} I

R ^CH₃ I

l L (lile) (Illb)

Ve vsoreímh uvedených v tomto schématu

R snamená atom vodíku, alkylovou skupinu s 1 ai 3 atomy uhlíku, allylovou skupinu nebo benaylovou skupinu a

R¹ představuje atom vodíku nebo sbytek vsorce COOZ', kde z' snamená alkylovou skupinu s 1 nebo 2 atomy uhlíku, henzylovou skupinu, alfa-methylbenzylovou skupinu nebo fenylethylovou skupinu.

Ty sloučeniny obecného vsorce lila nebo Illb, kde R¹ znamená atom vodíku a R představuje alkylovou skupinu β 1 až 3 atomy uhlíku nebo allylovou skupinu, jsou užitečné jako inhibitory sekrece prolaktinu a k léčbě Perkinsonova syndromu. Ty sloučeniny obecného vzorce Illauneho Illb, kde R snamená atom vodíku stejně jako fi’ , kde R znamená benzylovou skupinu nebo kde R¹ znamená zbytek vzorce COOZ', jsou uiitečné jako meziprodukty. Tyto mezi produkty se na přlsluěná léčiva převádějí postupy popsanými ve shora citovaných patentních spisech, činidlem používaným k přeměně 1-substituovaného 6-oxodekahydroehinoltnu popřípadě substituovaného v poloze 6, obecného vzorce 1, na meziprodukt obecného Vsorce II, je dimethylformamid-acetal, jako dimethylformamid-dimethylacetal.

V souhlase s vynálemem bylo nyní a překvapením ajiětěno, ie nové intermediárnl ketoderiváty poskytují Íepěí cestu k přípravě určité skupiny sloučenin spadajících do rozsahu shora uvedených obecných vsorců lila a Illb. Výhody spojené s použitím těchto nových mesiproduktů spočívají v možnosti použiti levnějších reakčních činidel, ve vyiěích výtěžcích finálních produktů a v tom, že intermediárnl ketoderivát není nutno isolovat (i když jej isolovat lze, je-li to žádoucí).

V souhlase s tím je předmětem vynálezu způsob výroby tautomerních 5-substituovaných 4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(a 2H) pyrazolo[3,4-g]chinolinů obecných vzorců lila a Illb

R' (lila) (Illb) ve kterém

R* znamená alkylovou skupinu s t až 3 atomy uhlíku, vyznačující se tím, že se formylderivát obecného vzorce IVb

(IVb) ve kterém

R* mé shora uvedený význam, nebo jeho tautomer, nechá ve vodném prostředí reagovat s hydrazlnem.

Výchozí formylderiváty, která mohou existovat v řadě tautomerních forem, lze připravit postupem podle následujícího reakčního schématu I:

Reakční schéma I (I) r· báze alkylester kyseliny mravenčí s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části oŤíjůi « xOQ

R (IVa) (IVb) dvc) dva)

V souladu s reakčním schématem I se trans-dl-1-substituovaný 6-oxodekahydrochinolin obecného vzorce I formyluje reakcí s alkylesterem kyseliny mravenčí obsahujím v alkylové části 1 až 6 atomů uhlíku v přítomnosti báze, za vzniku trans-dl-1-aubst.6-oxo-7-formyldekahydrochinolinu reprezentovaného sérií tautomerních struktur (viz vzorce IVa až IVd). Tento meziprodukt se účelně neisoluje (i když je to pochopitelná možné) a neprovádí se jeho charakterizace, ale ihned ee nechá in šitu reagovat ve smyslu vynálezu s hydrazinem za vzniku smási tautomerů, tj. trans-dl-5-substituovaného 4,4e,5,6,7,8,8a,9-okta235335 hydro-1H-pyrazolo[3,4-g]chinolinu (lila¹¹) a trans-dl-5-substltuovanáho 4,4a,5,6,7,8,8 a, 9-oktahydro-2H-pyrazolo[3,4-g]chinolinu (Illb).

Formylovaný produkt popsaný výěe čtyřmi tautomerními strukturami (vzorce IVa až IVd) ve vodném roztoku pravděpodobně existuje převážně jako obojetný lont znázorněný vzorcem IVb. VSechny výěe zmíněná teutomerní formy jsou věak v dynamická rovnováze a pokud je v tomto textu zakreslena nebo popisována potaze jedna z těchto struktur, zahrnuje vždy i všechny ostatní struktury. Vynález rovněž zahrnuje i resonanční struktury různých vzorců uvedených výěe, jako jsou

(IVb)

Postup podle reakčního schématu I je modifikací Claisaenovy kondenzace, při níž je možno methylenovou skupinu, aktivovanou přítomností sousedící karbonylové skupiny, acylovat v přítomnosti báze. Jako báze se obvykle používá ethoxid sodný, je ověem samozřejmé, že k danému účelu je možno použít i jiné báze, jako terc.alkoxidy alkalických kovů a hydrldy alkalických kovů, konkrétně terc.butoxid draselný, terc.amyloxid draselný nebo natriumhydrld.

Claissenova kondenzační reakce (I—>IV) se obvykle provádí v ethanbllckám roztoku, když je pochopitelně možno jako reakční prostředí použít i jiné nižěí alkanoly a podobná polární bezvodá rozpouštědla. Jako příklady vhodných rozpouštědel je možno uvést tetrahydrofuran, diethylether, dimethoxyethan, dioxan, dimethylsulfoxid, dimethylformamid a terč.butanol, s výhodou tetrahydrofuran, který může sloužit i jako rozpouštědlo pro následující cyklizační stupeň. I když teplota při reakci nehraje rozhodující úlohu, pracuje se nicméně s výhodou při teplotě zhruba od -20 °C do varu pod zpětným chladičem, zejména pak v rozmezí od 0 °C do teploty místnosti.

U cyklizačního stupně (IV—>IIIa* + Illb) podle vynálezu je jako konkrétní leekčvl činidlo uveden hydrazin, se stejným výsledkem věak lze použít i hydrazin-hydrét nebo soli hydrazinu. Vhodnými rozpouštědly pro tento cyklizační stupeň jsou voda, alkanoly s 1 až 4 atomy uhlíku, zejména terč.butanol, tetrahydrofuran, dimethylsulfoxid, dlmethpXyethan, dioxan a diethylether. Reakci je možno uskutečnit při teplotě zhruba od 0 °C do varu pod zpětným chladičem, přičemž výhodná je teplota místnosti.

Výhodou syntetického postupu popsaného výěe je, že jak formylaci tak cyklizaci je možno uskutečnit v téže reakční nádobě. S výhodou se tedy používají rozpouštědla vhodná pro obě tyto reakce, jako tetrahydrofuran, dimethylsulfoxid, terč.butanol, dlmethoaqrethan, diethylether a dioxan, zejména tetrahydrofuran. Je-li to žádoucí, lze k reakčnímu systému přidat vodu nebo alkanol s 1 až 4 atomy uhlíku. Reakci je možno provádět při pH v rozmezí zhruba od 13 do 0, a výhodou při pH cca 9. Výhodného pH okolo hodnoty 9 se dosáhne přidáním 10X roztoku kyseliny chlorovodíková (1 mol) do reakční směsi. I když je možno použít teplotní rozmezí zhruba od 0 °G do varu pod zpětným chladičem, je nicméně výhodná teplota místnosti.

Druhá výhoda způsobu podle vynálezu spočívá v tom, že výtěžky tautomerních pyrazolů (lila + Illb') jsou vyšáí než výtěžky dosahované při práci postupem podle dosavadního stavu techniky, při němž se jako reakční činidlo používá dimethylformamid-dimethylacetal. Další předností je, že s výhodou používané formylační činidlo - mravenčen ethylnatý - je relativně levné v porovnání s dimethylformamid-dimethylacetalem.

Je třeba poznamenat, že číslování výchozího ketonu obecného vzorce I se liší od číslování finálního pyrazolového produktu obecného vzorce III. Tak tedy asymetrický uhlík spojující kruhy v sousedství chinolinového dusíku je ve výchozím ketonu očíslován 8a, zatímco v pyrazolovém derivátu 4a. Druhý asymetrický uhlík spojujíáí kruhy je pak v ketoderivátu očíslován 4a, zatímco ve finálním produktu 8a. Racemické páry vzorců lila a Illb jsou obvykle označovány jako cis-dl-pár a trens-dl-pár. Konfigurace molekuly na ^4a ^a ^8a ^{v c}j-^s_61-páru tedy bude 4aR,4aS a 4aS,8aR, a v trans-dl-páru 4aR,8aR a 4aS,8aS. Konfigurace ve výchozích látkách pochopitelně zůstávají během syntézy pyrazolochinolinu zachovány, protože Claisenova kondenzace a následující cyklizace za použití hydrazinu neovlivňující konfiguraci na těchto optických centrech.

V našem souvisejícím československém patentovém spisu č. 234 050 je popsán způsob separace trans-dl-1-n-propyl-6-oxodekahydrochinolinu odpovídajícího obecnému vzorci I, ve kterém R znamená n-propylovou skupinu, na individuální stereoisomery vzorce la (4aR,8aR) a Ib (4aS, 8aS).

Η I n-C₃ ^H7 (Ib) . Shora popsaný způsob je možno použít jak v případě oddělených isoaerů (Ia a Ib) tak v případě trans-dl-racemátu, jak je uvedeno v reakčním schématu 1.

Postup podle reakčního schématu I s navazujíxí cyklizací podle vynálezu je uveden v následujícím reakčním schématu II, kde se používá isomer, tj. 4aR,8aR-1-n-propyl-6-oxodekahydrochinolin, k přípravě žádaného 4aR,8aR-4>4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(a 2H)pyrazolo [3,4-g]chinolinu.

Reakční schéma II

H

O

H hcooc₂h_{5 o} báze n-C₃H₇

H

OH

(IVa (Ia)

N

(lile') <IIIb')

Výhodnost postupu popsaného reakčním schématem II spočívá ve skutečnosti, že namísto cyklizace příslušného trans-dl-racemétu a štěpení výsledného trans-dl-pyrazolochinolinu se rozětěpí trans-dl-keton vsorče X á čistý 4aR,8aR-stereoisomer (Ia) se cyklizuje na opticky aktivní trans-4hR,8aR-oktahydropyrazolo[3,4-g]chinolin. Protože během štěpení odpadne nejméně polovina racemické směsi, je pochopitelně mnohem ekonomičtější odpadne-li polovina výchozího materiálu než polovina výsledného produktu, zejména pak s přihlédnutím k tomu, že organické reakce, jako je cyklizace ketochinolinu na pyrazolochinolin, nikdy neprobíhají kvantitativně.

Vynález ilustrují následující příklady provedení, jimiž se však rozsah vynálezu v žádném směru neomezuje.

Příklad 1

Do suché baňky s kulatým dnem, o objemu 250 ml, se naváží 1,5 g terc.butoxidu draselného, který se rozpustí přidáním 25 ml tetrahydrofuranu. K tomuto roztoku terc.butoxidu se přidá roztok 0,8) al ethyl-formlátu a 0,97 g trans-dl-l-n-propyl-6-oxodekahydrochinolinu v 10 al tetrahydrofuranu, reakční smés se cca 45 minut nechá reagovat při teplotě místnosti, načež se k ní přidají 2 al hydrazinu a příslušná množství 15% vodná kyseliny chlorovodíkové k snížení pH zhruba na hodnotu 9. Výsledné směs se 30 minut míché při teplotě místnosti, po kteréžto době svědčí chrometografie na tenké vrstvě o tom, že není přítomen již žádný výchozí ketoderivét. Reakční smšs se vylije do 10% vodného hydroxidu sodného a zásadité směs ae extrahuje stejným objemem methylendichloridu. Extrakt se vysuší a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Získá sa 1,31 g Slutého oleje tvořeného surovým trans-dl-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-IH(a 2H)pyrazolo-[3,4-g]chinolinem.

Příklad 2

Do baňky s kulatým dnem, o objemu 25 ml, se vnese příslušné množství 55% suspenze natriuahydridu v minerálním oleji, obsahující 360 mg (15 mmol) natriumhydridu a minerální olej se odstraní trojnásobným promytím hexanem. Zbylý natriumhydrid se suspenduje v 6 ml tetrahydrofuranu, k suspenzi se přidá nejprve 740 ml ethyl-formiétu a 1 kapka bezvodého ethanolu, a pak 975 mg trans-dl-1-n-propyl-6-oxodekahydrochinolinu ve 4 ml tetrahydrofuranu.

Reakční směs, která začne téměř okemžitě vřít pod zpětným chladičem, se zhruba 45 minut udržuje ve varu pod zpětným chladičem. Po této době neobsahuje reakční směs podle chromatografie na tenké vrstvě již žádný výchozí materiál. Po přidání 50 ml vody a 4 ml hydrazinu se zředěnou vodnou kyselinou chlorovodíkovou upraví pH zhruba na hodnotu 9 a směs se přes noc míchá pří teplotě místnosti, přičemž 3e z ní vyloučí sraženina. Izolací táto sraženiny se získá 373 mg trans-dl-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(u 2H)pyrazolo [3,4-g]chinolinů ve formě bílého práěku tajícího při 78 až 84 °C.

Analýza: pro ^ct3^H2l^N3 vypočteno 71,19 % C, 9,65 % H, 19,16 % N;

nalezeno 70,89 % C, 9,15 % H, 19,34 % N.

Dalěí materiál se získá tak, že se filtrát vylije do zředěného vodného roztoku hydroxidu sodného a tento alkalický roztok se několikrát extrahuje methylendichloridem. Methylendichloridové extrakty ae vysuěí a zahustí se, čímž se získá 623 mg bílého pěnovitého materiálu, který se vyčistí chromatografií na silikagélu za použití tetrahydrofuranu se stopovým množstvím hydroxidu amonného jako elučního činidla. Zpočátku vymyté frakce obsahující žádaný pyrazolo[3,4-g]chinolin se spojí a po odpaření rozpouštědla se z nich získá 437 mg bezbarvého olejovitáho materiálu.

Tento olejovitý materiál se převede na dihydrochlorid, který po překrystalování ze směsi methanolu a acetonu taje při 252 až 263 °C.

Shora popsaný pokus se opakuje s tím, že se použije 125 mg trans-4aR,8aR-n-propyl-6-oxodekahydrochinolinu a přísluěně nižěl množství ethyl-formiátu a báze (natriumhydrid namístě terc.butoxidu draselného). Po prakticky úplném ukončení reakce (daném vymizením výchozího materiálu z chromatogrgmu vzorku reakční směsi na tenké vrstvě) se reakční směs vylije do zředěného vodného roztoku hydroxidu sodného a zásaditá směs se extrahuje methylendichloridem. Po vysušení methylendichloridového extraktu a následujícím odpaření, rozpouštědla ve vakuu se získá zhruba 144 mg bezbarvého viskosního oleje, který při chromatografii na tenké vrstvě dává pouze jednu skvrnu. Tento olejovitý materiál se rozpustí v methanolu a k roztoku se přidá 3,2 ml 0,20N vodné kyseliny chlorovodíkové. Zahuštěním vzniklého žlutého roztoku se získá polotuhá žlutě zbarvená látka, která se rozpustí v methanolu. Methanolický roztok se odbarví aktivním uhlím a toto se odstraní filtrací přes křemelinu. Po odpaření rozpouštědla a překrystalování zbytku ze směsi methanolu a ethylacetátu se získá 80 mg máslově žlutého práškového 4aR,8aR-5-n-propyl-4,4a,5,6,7, 8,8a,9-oktahydro-1H(e 2H)pyrazolo [3,4-g] chinolinů o optické rotaci alfa^ ^x -121,76 ° (voda, c = 1).

Příklad 3

K roztoku 59,8 g terc.butoxidu draselného v 600 ml tetrahydrofuranu, předem ochlazenému na cca 0 °C, se přidá roztok 52 g opticky čistého 4aR,8aR-1-n-pvopyl-6-oxodekahydrochinolinu a 79 g ethyl-formiátu ve 250 ml tetrahydrofuranu. Během přidávání se uvolňuje plyn. Reakční směs se míchá nejprve 0,5 hodiny při teplotě cca 0 °C a pak dalěí hodinu při teplotě místnosti, načež se k ní přidá 25,6 g hydrazinu a pH roztoku se přidáním zhruba 500 ml 10% vodné kyseliny chlorovodíkové upravá na pH cca 9. Výsledné směs se 2 hodiny intensivně míchá při teplotě místnosti, pak se vylije do vody a vodná směs se silně zalkalizuje (pH cca 13) zředěným vodným hydroxidem sodným. Zásaditá směs se extrahuje methylendichloridem, methylendichloridový extrakt se vysuěí a rozpouštědlo se odpaří. Žlutý pěnovitý zbytek obsahuje podle chromatografie na tenké vrstvě žádaný pyrazolochinolin spolu s malým množstvím jediné nečistoty.

235336

Tento zbytek se rozpustí v 1 litru horkého methanolu, k němuž ae přidá 250 ml IH vodné kyseliny chlorovodíkové. Po zahuštění roztokuse získé.65,4 g 4aH,8aR-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(a 2H)pyrazolo[3,4-g] chinolin-hydrochlorldu vs fornt nažloutlého pevného materiálu, který po překrystalovéní ze směsi methanolu a ethylacetátu poskytne 51,7 g (výtěžek 76 %) nažloutlá pevná látky o optická rotaci (alfaj^ > —121,0 ⁰ voda, c 1)j [alfa]^ -377,40 (voda, C 1).

Analýza:

vypočteno 61,04 # C, 8,67 * H, 16,43 % H, 13,68 % Cl;

nalezeno 61,32 » C, 8,53 % H, 16,22 » N, 14,08 % Cl.

Příklad 4

K roztoku 3,6 g terc.butoxidu draselného v 50 ml tetrahydrofuránu se při teplotě 0 °C přidá roztok 5,0 g trans-dl-1-n-propyl-6-oxodekahydrochinolinu a 2,36 g ethyl-formiátu ve 25 ml tetrahydrofuránu. Výsledný roztok se míchá 15 minut při teplotě 0 °C a pak 17 hodin při teplotě místnosti, vyloučená žlutá sraženina se odfiltruje ve vakuu a po promytí tetrahydrofuranem sa vysuží va vakuu. Získá se draselná sůl trans-dl-l-n-propyl-6-oxo-7-forisyldekahydrochinolinu.

NMR (deúteriumoxid, hodnoty δ ): 9,00 (ainglet, IH, CHO), 3,02 - 0,99 (multiplet, 16H),

0,84 (triplet, J » 7, 3H, -CH^ z n-C^H?).

Shora připravený 7-formylderivát je možno výže popsaným způsobem podle vynálezu převést na odpovídajíc! produkt obecného vzorce lila” resp. Illb”.

V následující části jsou uvedeny příklady Štěpení výchozích látek a produktů na individuální opticky aktivní iaomery, příprava opticky aktivních produktů z odpovídajících opticky aktivních výchozích látek a výsledky testů faraakologická účinnosti finálních sloučenin.

Příklad 5 g trans-(+)-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(a 2H)pyrazolo[3,4-g]chinolin-dihydrochloridu sa rozpustí ve vodě a vodný roztok se zalkallzuje přidáním pevného uhličitanu draselného. Vodná fáze se několikrát extrahuje chloroformem k odstranění volná báze, která je v alkalická vrstvě nerozpustná a vyloučí se z ní. Extrakty ae spoji, vysuší se a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Izoluje se 4,7 g čirého oranžového oleja tvořeného trans-(+)-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(e 2H)-pyrazolo[3,4-g]ehinolinu va formě volná báze, vzniklá při shora popsaná neutralizaci.

1,8 g této Volná báze ae rozpustí v methanolu a k tomuto roztoku sa přidá horký methanollcký roztok 1,5 g (+)-vlnné kyseliny. Reakční roztok se 5 minut zahřívá k varu a pak se nechá zchladnout na teplotu místnosti. Vysráží se bezbarvá krystalická látka obohacená eolí 4aS,8aS-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(a 2H)-pyrazolo[3,4-g]chinolinu s (+)-vinnou kyselinou. Sraženina sa odfiltruje a filtrační koláč se promyje etherem, čímž ae získá 1,46 g pevného produktu. Tato frakce má optickou rotaci [alfsi] ^voda) +32,76?

a taje při 173 až 177 °C. Tento pevný materiál poskytne po překrystalovéní z horkého methanolu 0,70 g bezbarvá krystalická látky, která má optickou rotaci alfa & (voda) >· +58,44° a taje při 185 až 186 °C. Teto pevná látka se překrystaluje z horkého methanolu, čímž so získá 0,15 g čistá soli a 4aSpeaS-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8e,9-oktehydro-1H(a 2H)-pyrasolo[3,4-g]chinolinu 8 (+)-vinnou kyselinou ve formě bezbarvého krystalického produktu o optická rotaci [alfajp? (voda) “ +93,88° a teplotě tání 201 až 202 °C. Dalším překrystalovánín se ani teplota tání ani optická rotace již nezlepší.

Analýza: pro C^HgyN^Og vypočteno 55,27 % C, 7,37 % H, 11,37 » N;

nalezeno 55,00 % C, 7,13 9 H, 11,19 ÍM,

Příklad 6

Níže popsaným postupem se rozštěpí trans-(+}-1-n~propyl-6-oxadekahydrochinolin.

g (-)-di-p-toluoylvinné kyseliny se rozpustí v 75 ml teplého methanolu a tento roztok se přidá k roztoku 5,05 g trans-(+)-1-n-propyl-6-oxodekahydroehinolinu v 15 ml methanolu. Reakční směs se zahřeje k varu a pak se nechá zchladnout nm teplotu místnosti, při které se nechá stát přes noc. Naočkováním krystalky autentická sloučeniny se vyvolá krystalizace, krystalický tartrát se izoluje filtrací a filtrační koláč se promyje methanolem. Získá se 2,813 g (18,7 9) bílé krystalické látky tvořené (-)-di-p-toluoyltartrátem 4aR,8aR-l-n-propyl-6-oxodekahydrochinolinu o optické rotaci [alfa]^ = -107,49° (methanol, c = 1).

Filtráty a matečná louhy z předcházejícího postupu nebo z analogických postupů prováděných ve větším měřítku se spojí, čímž se získá roztok 1-n-propyl-6-oxodekahydrochinolinu obohaceného o 4aS,8aS-isomer, se sníženým obsahem 4aR,8aR-isomeru. Na tento roztok se shora popsaným postupem působí monohydrátem (+)-ditoluoylvinné kyseliny, čímž se získá 4aS,8aS”l-n-propyl-6-oxodekahydrochinolin-(+)-ditoluoyltartrát o optické čistotě zhruba 80 9. 20 g této soli poskytne po krystalizaci z 250 ml methanolu 12 g bílého krystalického prášku tajícího za rozkladu při 167,5 až 169,5 °C, o optické rotaci [alfaj^ _s +106,3° (methanol, c = 1,0); [alfa^gj = +506,7° (methanol, c = 1,0). Tyto údaje svědčí o optické čistotě zhruba 90 9. Druhý podíl produktu, získaný z matečných louhů z výěe popsané krystalizace poskytne 2,3 g bílé pevné látky tající za rozkladu při 166,0 až 166,5 °C, o optické rotaci [alfa]^ = 106,6°; [alfaj^g^ = +510,8° (v obou případech methanol, c =1,0), což svědčí o optické Čistotě cca 94 9. Po překrystalování prvního a druhého podílu krystalů z methanolu se získá bílý pevný materiál, z něhož se standardním postupem připraví volná báze. Tato volná báze poskytne destilací 4,14 g bezbarvého oleje vroucího při 82 až 86 °C/ /17,3 Pa, tvořeného 4aS,8aS-1-n-propyl-6-oxodekahydrochinollnem o optické rotaci [jalfa]^⁵ +86,2°; [alfa] ^55 “ +376,6® (v obou případech methanol, c = 1,0) o optické čistotě zhruba 98 9.

4,04 g shora připravené volné báze se rozpustí v ,0 ml methanolu, k němůž se přidá roztok 8,35 g monohydrátu (+)-ditoluoylvinné kyseliny v 65 ml methanolu. Výsledný roztok se zahustí na objem 50 ml, kdy se z něj začne vylučovat sraženina. Reakční směs se nechá přes noc stát při teplotě místnosti, během kteréžto doby dojde k další krystalizaci.

Po odfiltrování krystalů se získá 10,87 g bílá prášková látky tající při 167,0 až 167,5 °C. Tato sůl se převede na volnou bázi, která destiluje při 83 až 86 °C/17,3 Pa a má optickou rotaci [alfa]|⁵ = 86,9°; alfeJ^j = 378,8° (v obou případech methanol, c * 1,0), což svědčí o optické čistotě cca 98 9.

Alternativně je možno trans-(+)-1-n-propyl-6-oxodekahydrochinolin přímo působit (+)-di-p-toluoylvinnou za vzniku 4aS,8aS-1-n-propyl-6-oxodekahydrochinolin-(+)-di-p-toluoyltartrátu, který se vyčistí způsobem výěe pro sůl 4aR,8aR-ieomeru.

Příklad 7

4eS,8aS-l-n-propyl-6-oxodekahydrochinolin, připravený shora popsaným postupem, se následujícím způsobem převede ne 4aS,8aS-5-n-propyl-3,4,4e,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-lH(e 2H)-pyresolo [4,3-gJchinolin.

7,7 g terc.butoxidu draselného se rozpustí v 85 ml tetrahydrofuranu, výsledný roztok se ochladl zhruba na 0 °C a přidá se k němu směs 6,7 g 4aS,8aS-1-n-propyl-6-oxodekahydrochinolinu a 10,2 g ethyl-formlátu ve 40 ml tetrahydrofuranu. Během přidávání dochází k vývoji plynu. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a její vzorek se podrobí chromatografii na tenká vrstvě, z níž vyplývá, že již není přítomen žádný výchozí materiál. Přidá se 6 ml hydrazin-hydrátu a pak se 10% kyselinou chlorovodíkovou upraví hodnota pH zhruba na 9. Směs se intensivně míchá při teplotě místnosti tak dlouho, až v ní podle chromatografie na tenká vrstvě není přítomen žádný intermediární formylketon. Reakční směs se vlije do zředěného vodného roztoku hydroxidu sodného a zásaditá směs se extrahuje methylendichloriáem. Methylendichloridový extrakt se vysuší a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu, čímž se získá 9 g bezbarvého pánovitého produktu. Tento pánovitý materiál se rozpustí ve 100 ml methanolu, k němuž bylo přidáno ekvivalentní množství ,M vodná kyseliny chlorovodíkové. Výsledný roztok se zahustí, čímž se získá bílý pevný materiál, který po překrystalování ze směsi methanolu a ethylacetátu poskytne 5,69 g 4aS,8aS-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1U(a 2H)-pyrazolo(3,4-g)chinolin-hydrochloridu.

Sloučeniny popsaná ve shora uvedených příkladech projevují svoji účinnost jako D-1 agoniaty dopaminu různým způsobem. Tak například 4aS,8aS-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(a2H)-pyrazolo(4,3-g)chinolin stimuluje tvorbu cyklické adenosinmonofosforečné kyselily ve striatální membráně krysy.

Tato účinnost se stanovuje postupem, který popsali Wong a Reid v Communications in Psyehopharmacology, i, 269 (1980). 4aS,8aS-5-*n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-*oktahydro-1H(a 2H)-pyrasolo(4,3-g)chinolin, odpovídající 4aR,8aB-enantiomer a odpovídající racemát se testují cd do sdhopnosti aktivovat adenylát-cyklasu ve striatální membráně krysy, kterážto aktivace se měří jako vzestup koncentrace cyklické adenosinmonofoeforečná kyseliny. Výsledky tohoto stanovení jsou uvedeny v tabulce ,· Jeko pozitivní kontrolní látka se používá dopaain. V prvním sloupci tabulky 1 je uvedeny testovaná látka, ve druhém sloupci koncentrace testovaná látky a ve třetím sloupci produkce cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny v procentech oproti kontrole.

T a b u 1 k a 1

Testovaná látka	Koncentrace (juaol)	Produkce cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny v % oproti kontrole
Dopamin	. 10 50 100	149.7 + 7,2 215,5 + 28,8 183.8 + 12,5 κ)
Racemát	50	116,5 + 13,3
4aB,8aR-enantiomer	50	114,2 + 10,4
4aS,SaS-enantiomer	50	141,8 + 9,3 »’

V přítomnosti 10 yumol guanosin-trifosfátu činí základní hodnota aktivity adenylát-cyklasy v striatálních membránách krysy (+ standardní odchylka) 134,9 + 6,1 pmol/min/mg proteinu. Sloučeniny se testují ve třech nebo více separátních experimentech. Významné (p <C 0,025) produkce cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny je označeno hvězdičkou (x).

Podle údajů uvedených v tabulce 1 pouze 4aS,8aS-enantiomer významně zvyšuje produkci cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny, což svěděl o účinnosti D-1 agonisty dopaminu.

Druhým, zvlášt citlivým indikátorem D-1 agonistické účinnosti je uvolňování cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny z tkáňových řezů ze použití postupu, který popsali Stoof a Kebabian (ibid.). Při tomto postupu se striatální tkáň oddělí od mozku krysy a rozřeže se na fragmenty o velikosti 0,3 mm x 0,03 mm. Fragmenty tkáně se suspendují ve vhodném pufroveném systému (například Earlův vyvážený solný roztok) a do suspenze se za udržování teploty na 37 °C kontinuálně uvádí proud plynu sestévejícího z 95 dílů kyslíku a 5 dílů oxidu uhličitého. Těsně před vlastním použitím se fragmenty tkáně přenesou do čerstvého prostředí, k němuž se přidá albumin hovězího séra (2,5 mg/ml) a 3-isobutyl-1-methylxanthin (1 mmol) k zamezení rozkladu cyklické adenosinmonofoeforečné kyseliny. Fragmenty tkáně se inkubují v pufru bez přídavku testovaných látek a pak se přenesou do téhož prostředí, do něhož však byla přidána testovaná sloučenina. Vzorky inkubačních prostředí (bez přídavku e s přídavkem testované látky) se za použití specifického radioimunologického postupu zkoumají co do koncentrace cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny. Účinek testované látky nebo látek na uvolňování cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny se vyjadřuje v procentech, vztažených na stav u kontrolního pokusu.

Test se provádí za použití následujícího prostředí:

Složka	Koncentrace (mg/litr)
chlorid sodný	4 800
chlorid draselný	402,6
hydrogenuhličitan sodný	2 201,1
dihydrogenfosforečnan sodný	137,99
heptahydrét síranu hořečnatého	147,88
d-glukosa	1 009
dihydrát chloridu vápenatého	191,1
fenolová červeň	10

Při shora popsaných pokusech používají Stoof a Kebabian sulpiridu k potlačení negativního (anti D-1) účinku všech látek působících jako D-2 agonisty dopaminu.

Zmínění autoři prokázali, že D-2 agonist potlačuje produkci cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny (účinek protikladný účinku, který vyvolává D-1 agonist). Je známo, že sulpirid je antagonistou D-2 receptorů hypofýzy. Přidáním sulpiridu do pokusného systému, jako do syetému při shora popsaném testu, se blokují všechny D-2 účinky testované látky ve smyslu snížení produkce cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny. Stoof a Kebabian prokázali ztrátu účinku sulpiridu na produkci cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny ve striatální tkáni krysy za použití SKF 38393 jako čistého D-1 agonisty, což svědčí o tom, že se neuplatňují D-2 receptory, a že sloučenina není účinná jako D-2 agonist.

Výsledky jednoho takového stanovení za použití 4aS,8aS-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(a 2H)-pyrazolo[3,4-g]chinolin-dihydrochloridu (sloučenina A) jsou uvedeny v tabulce 2. Ve sloupci 1 této tabulky je uvedena přidávané sloučenina (pokud se nějaké používá), ve sloupci 2 koncentrace této sloučeniny, ve třetím sloupci koncentrace přítomné cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny a ve čtvrtém sloupci zvýšení koncentrace cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny vyjádřené v procentech.

Tabulka 2

Testovaná látka	Koncentrace	Koncentrace cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny	Zvýšení XX) koncentrace cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny
		71,6 + 8,2	0
A	5 x 107ll	131,0 + 9,2	83
A	5 x 106ll	160,1 + 23,8	124
A + sulpirid
(106lí)	5 x 10’7íí	143,7 + 6,2	100

Z výše uvedené tabulky vyplývá, že sulpirid nemá žádný účinek na zvýšení vylučování cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny.

Ve shora zmíněné práci zjistili Stoof a Kebabian, že racemát, tj. trans-(+)-5-n-propyl-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktehydro-1H(a 2H)-pyrazolo-[4,3-g]chinolin (LY141865) snižuje koncentraci cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny (viz str. 367, graf G práce shora uvedených autorů). Přídavek sulpiridu má jen malý nebo vůbec žádný účinek, a v nejlepším případě vrací koncentraci cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny na kontrolní hladinu. Tatáž racemlcká sloučenina redukuje účinek SKP38393 spočívající ve zvýšení hladiny cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny o 57 + 8 % (viz obrázek 3 na straně 368 práce shora citovaných autorů). Přídavek sulpiridu tento účinek potlačuje a hladiny cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny jsou v podstatě stejné jako v případě použití samotného SKF38393.

Údaje, které předložili Stoof a Kebabian se.v podstatě shodují se závěry, že 4aR,8aR-enantiomer, který je známým D-2 agonistou, je účinnou komponentou racemátu (LY141865) pokud jde o snižování produkce cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny, kterýžto účinek je opět potlačován sulpiridem. Trans-(+)-iaomer při testu D-2 agonistické účinnosti nevykazuje aktivitu jako D-2 agonist.

V separátním, ale obdobném pokusu bylo potvrzeno, že SKF38393 zvyšuje produkci cyklické adenosinmonofosforečné kyseliny (145 X v koncentraci 1O“⁶1I). Tento účinek snižuje přídavek 4aR,8aR-5-n-propy1-4,4a,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(a 2H)-pyrazolo[4,3-g]chinolinu, trans-(-)-enantiomeru a D-2 agonisty v dávce 0,5 x 10~®mol (ze 145 % na 42 X). Tento účinek je potlačován přidáním sulpiridu (10”®M) k systému.

Claims (3)

1. f ί E DUÍ I VYNÁLEZU

   1. Způsob výroby teutomerních 5-substituovaných 4,40,5,6,7,8,8a,9-oktahydro-1H(a 2H)pyrazolo[3,4-g]chinolinů obecných vzorců lila a Illb (lila) (Illb) ve kterém

   R znamená alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, vyznačující se tím, že se formylderivát obecného vzorce IVb

   R ve kterém

   R má shora uvedený význam, nebo jeho tautomer, nechá ve vodném prostředí reagovat s hydrazinem.
2. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použije vých».·»! ketoderivát obecného vzorce IVb v konfiguraci 4aR,8aR.
3. 3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se použije výchozí ketoderivát obecného vzorce IVb v konfiguraci 4aS,8aS.