CS233088B1 - ) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy - Google Patents
) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy Download PDFInfo
- Publication number
- CS233088B1 CS233088B1 CS402683A CS402683A CS233088B1 CS 233088 B1 CS233088 B1 CS 233088B1 CS 402683 A CS402683 A CS 402683A CS 402683 A CS402683 A CS 402683A CS 233088 B1 CS233088 B1 CS 233088B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- amino
- sulfo
- hydroxyethylcellulose
- triazine
- sulpho
- Prior art date
Links
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 title claims description 25
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 4
- 229940071826 hydroxyethyl cellulose Drugs 0.000 title 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 title 1
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 claims description 31
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 20
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 7
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 2
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- YKCWQPZFAFZLBI-UHFFFAOYSA-N cibacron blue Chemical compound C1=2C(=O)C3=CC=CC=C3C(=O)C=2C(N)=C(S(O)(=O)=O)C=C1NC(C=C1S(O)(=O)=O)=CC=C1NC(N=1)=NC(Cl)=NC=1NC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O YKCWQPZFAFZLBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 6
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 6
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 1
- FIDRAVVQGKNYQK-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrahydrotriazine Chemical compound C1NNNC=C1 FIDRAVVQGKNYQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 1
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 229920001612 Hydroxyethyl starch Polymers 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 229940050526 hydroxyethylstarch Drugs 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 125000000075 primary alcohol group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
233 088
Vynález sa týká trojsodnej soli 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón-amino)j anilino-4-(x-sulfoanilino)-l,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a spósobu jej přípravy.
Trojsodná sol 2-chlór-6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínuje farbivo, ktoré reaguje v alkalickom prostředí v rozmedziteplót 70 až 80 °C s polysacharidmi za vzniku stálých éteric-kých derivátov fo.F. Kennedy: Advan. Carbohyd. Chem. Biochem.29, 305 (1974)] . Farbivo takto viazané na vhodný nerozpustnýpolysacharidový nosič slúži, na základe jeho interakcie s niek-torými enzýmami, ako ligand v afinitnej chromatografii týchtoenzýraov. z rozpustných polysacharidov derivatizovaných týmtofarbivom bolí připravené trojsodná sol 6-[2-sulfo-4-(4-amino--3-sulfo-l-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-l,3, 5-triazin-2-yl-dextránu, hydrolyzovaného škrobu, glykogénu[p. Gemeiner, 0. Mislovičová, 0. Zemek, L. Kuniak: Collect.Czech. Chem. Commun. 46, 419 (1981)J a hydroxyetylškrobu. Všetky tieto polysacharidy sú vetvené cč-glukány, na rozdielod hydroxyetylcelulózy, ktorá je /3-glukán s lineárnym reťaz-com.
Podmienky reakcie hydroxyetylcelulózy s trojsodnou solou2-chlor-6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón-amino)]anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínom sa líšia od podmie-nok farbenia dextránov[p. Gemeiner a kol.: Collect. Czech.Chem. Commun, 46, 419 (1981)] tým, že sú miernejsie ale sapri nich dosiahne rovnaký stupeň substitúcie. Oe to spósobenéváčšou reaktivitou hydroxyetylcelulózy v důsledku přítomnostiváčšieho množstva primárné alkoholických skupin, ktoré reagujúpřednostně. Pri izolácii ziskanej trojsodnej soli 6-[2-sulfo--4-(4-amino-sulfo-l-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanili-no)-1,3,5-triazin-2-yl-hydroxyetylcelulózy nie je možné pri - 3 - 233 088 molekulových hmotnostiach nad 100 000 použit' metodu gélovejchroraatografie pre velmi vysokú viskozitu roztoku tejto zlú-čeniny.
Uvedený problém rieši tento vynález. Podstatou vynálezuje trojsodná sol 6-[2-sulfo-4-(4-amino-sulfo-l-antrachinón-amino)J anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxy-etylcelulózy, kde x je poloha substituenta 2 alebo 4 vzorca I
kde R představuje hydroxyetylcelulózu so stupňom substitúcie 2,5 a priemernej molekulovej hmotnosti 2.104 až 5,4.105. Ďalejpodstatou vynálezu je spósob přípravy týchto derivátov, ktorýsa vyznačuje tým, že jednotlivé frakcie hydroxyetylcelulózyreagujú vo vodnom alkalickom prostředí a za přítomnost i 1,7 %chloridu sodného pri teplote 70 až 80 °C a počas dvoch hodins trojsodnou solou 2-chlór-6~[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l--antrachinón-amino)J anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3 ,5-triazí-nu vzorca II pri váhových pomeroch trojsodná sol 2-chlór-6-
4 233 088 - [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón-amino j] anilino-4--(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínu : hydroxyetylcelulóza : uhli-čitan sodný = 0,2 až 0,32 : 1 : 0,54 až 0,59, načo sa zafar- bená hydroxyetylcelulóza oddeli od nenaviazaného farbiva bu3gólovou cbromatografiou (do priemernej molekulovej hmotnostiMw 100 000) alebo 6 až 7 násobným zrážaním a následnou centri-fugáciou z 0,5 % vodného roztoku chloridu sodného (nad Mw100 000). Výhodou navrhovaného spósobu přípravy trojsodnej soli 6--[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón-amino)] anilino-4--(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy je,že poskytuje farebné deriváty vodorozpustného polysacharidus lineárnou strukturou t.j. hydroxyetylcelulózy, ktoré sú vhod-né pre štúdium interakcie farebného polysacharidu s enzýmom.Ďalšou výhodou je spósob izolácie tejto látky z reakčnej zmesina základe jej nerozpustnosti v roztoku solí v 50 až 60 % vý-tažku. Příklad 1 25 mg hydroxyetylcelulózy (HEC) o priemernej molekulovej hmot-nosti (Mw) 350 000 sa rozpustí v 2 ml destilovanej vody pri tep-lotě 60 °C. Potom sa přidá 7 mg trojsodnej soli 2-chlór-6-(2--sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-ant rachinón-amino)] anilino-4-(x-sul-foanilino)-1,3 ,5-triazínu (Cibacron Blue 3G-A) rozpustenej v 0,2ml destilovanej vody. Reakčná zraes sa mieša pri teplote 60 °Cpo dobu 30 min. Potom sa přidá 43,75 mg chloridu sodného a po-kračuje sa v miešaní ešte po dobu 30 min. Po zvýšeni teploty na80 °C sa přidá 15 mg uhličitanu sodného rozpuštěného v 0,05 mldestilovanej vody a reakčná zmes sa mieša ešte po dobu 2 h. Poochladení sa reakčná zmes zriedi s 20 ml destilovanej vody azneutralizuje zriedenou kyselinou chlorovodíkovou na pH 7. Za-farbená hydroxyetylcelulóza sa vyzráža přidáním 20 ml 1 % vod-ného roztoku chloridu sodného a ochladením na teplotu 4 °C.Zrazenina sa odcentrifuguje pri 4.10 otáčkách za min. Superna-tant sa oddělí a zrazenina sa rozpustí v 20 ml destilovanejvody pri teplote 50 °C. Z roztoku sa Cibacron Blue-HEC znovuvyzráža s 20 ml 1 % vodného roztoku chloridu sodného pri tep-lote 4 °C a znovu odcentrifuguje. Toto sa opakuje 6 krát, ažkým je supernatant bezfarebný. Získaná Cibacron Blue-HEC sa roz-pustí v 20 ml destilovanej vody a dialyzuje po dobu 24 h proti - 5 233 088 destilovanej vodě. Po oddělení nerozpustných podielov odfiltro-váním sa získaný modrý roztok odpaří na vákuovej rotačnej od-parke do sucha pri tlaku 5 kPa* po přidaní a znovu odpařeníetanolu a potom acetonu sa získá suchý Cibacron Blue-HEC (15,2mg) s obsahom 68 yumólu Cibacron Blue-HEC/g. Přiklad 2
Postup podlá příkladu 1 s tým rozdielora, že sa použije HEC(Mw = 41 OOO) a 6,6 mg farbiva Cibacron Blue 3G-A. ZafarbenáHEC sa oddělí od nenaviazaného farbiva na koloně naplnenej dex-tránom sieťovaným epichlórhydrínom (Sephadex G-25 fine). Objemnáplně kolony je 100 ml, výška 21,5 cm a priemer 2,5 cm. Eluujesa destilovanou vodou, pri prietoku eluátu kolonou 30 až 35 ml/hZíská sa suchý Cibacron Blue-HEC (21 mg) s obsahom 79,3 yumóluCibacron Blue/g. Příklad 3
Postup podlá příkladu 1 s tým rozdielom, že sa použije HEC (Mw =540 000) a 6,6 mg farbiva Cibacron Blue 3G-A. Získá sa suchýCibacron Blue-HEC (17,8 mg) s obsahom 60,6 yuroólu CibacronBlue/g. Příklad 4
Postup podlá příkladu 1 s tým rozdielom, že sa použije HEC (Mw -350 000, 8 mg farbiva Cibacron Blue 3G-A a teplota 70 °C. Získása suchý Cibacron Blue-HEC (16,5 mg) s obsahom 65,4 ^umól Ci-bacron Blue/g.
Vynález má využitie v enzýmovom inžxnierstve a v biochémiia to pri izolácii a purifikácii enzýmov alebo ako substráty ainhibitory enzýmami katalyzovaných reakcií.
Claims (2)
- 6 PŘED MET VYNÁLEZU 233 0881. Trojsodná sol 6- 2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón-amino) anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxy-etylcelulózy, kde x je poloha substituenta 2 alebo 4 vzorca Ikde R představuje hydroxyetylcelulózu so stupňom substitúcie A 5 2,5 a priemernou molekulovou hmotnosťou 2.10 až 5,4.10 .
- 2. Spósob přípravy podlá bodu 1 vyznačujúci sa tým, že jedno-tlivé frakcie hydroxyetylcelulózy reagujú vo vodnom prostředía za přítomnosti 1,7 % chloridu sodného pri teplote 70 až 80 °Ca po dobu dvoch hodin s trojsodnou solou 2-chlór-6- 2-sulfo-4-(4-araino-3-sulfo-l-antrachinón-amino) anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínu vzorca II pri váhových pomeroch trojsodná sol50; Na (II) 7 - 233 088 2-chló r-6- 2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-ant rachinón-amino) ani-lino-4-(x-sulfoanilino)-l,3,5-triazínu : hydroxyetylcelulóza : : uhličitan sodný = 0,2 až 0,32 : 1 : 0,58 až 0,69, načo sa za-farbená hydroxyetylcelulóza oddělí od nenaviazaného farbivabu3 gólovou chromatografiou (do priemernej molekulovej hmotnostiMw 100 000) alebo 6 až 7 násobným zrážaním a následnou centri-fugáciou z 0,5 % vodného roztoku chloridu sodného (nad Mw100 000) . Oprava ve vytištépých popisech vyoáleau V popisu vyaálemt te autoriMau osvédSeož č* 233 Oaí < rv 4OS6*SJ >Je caybtó vyUštěoo stmináredoi saitideaí# Správné i Xnt«OXŽ δ 06 8 1>/O® C Oř B 13/OÍ
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS402683A CS233088B1 (cs) | 1983-06-03 | 1983-06-03 | ) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS402683A CS233088B1 (cs) | 1983-06-03 | 1983-06-03 | ) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS233088B1 true CS233088B1 (cs) | 1985-02-14 |
Family
ID=5382041
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS402683A CS233088B1 (cs) | 1983-06-03 | 1983-06-03 | ) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS233088B1 (cs) |
-
1983
- 1983-06-03 CS CS402683A patent/CS233088B1/cs unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lee et al. | 2-Imino-2-methoxyethyl 1-thioglycosides: new reagents for attaching sugars to proteins | |
| CA1195976A (en) | Granular starch ethers having reduced pasting temperatures | |
| JPS5841836B2 (ja) | 可溶性肝臓ウリカ−ゼ、その製法及び尿酸の測定法 | |
| US5480790A (en) | Water-soluble proteins modified by saccharides | |
| Dionísio et al. | Charged pullulan derivatives for the development of nanocarriers by polyelectrolyte complexation | |
| JPS62126977A (ja) | 水溶性の安定化されたペルオキシダ−ゼ誘導体、及びその製法 | |
| US5021561A (en) | Complexes of iron or other metals with sulphonated derivatives of chitosan | |
| US4088639A (en) | Macromolecular adenine nucleotide derivatives | |
| US6703496B1 (en) | Starch phosphates, method for the production thereof and their use | |
| CS233088B1 (cs) | ) Trojsodná soí 6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-l-antrachinón- amino/j anilino-4-(x- sulfoanilino)-l,3,5‘-triazín-2-yl-hydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy | |
| KR19990077979A (ko) | 양성구아검유도체의제조방법 | |
| Turková et al. | Immbilization on cellulose in bead form after periodate oxidation and reductive alkylation | |
| CA1277658C (en) | Anionically modified polysaccharides, process for their preparation and the use thereof | |
| Coughlin et al. | Preparation and properties of soluble–insoluble nicotinamide coenzymes | |
| Wood et al. | Characterization of a virus-inhibiting polysaccharide from Phytophthora infestans | |
| CN103025882B (zh) | 使用多糖和糖苷酶或糖基转移酶制备丙烯酸酯衍生物的糖苷的方法 | |
| Rupérez et al. | Extracellular β-malonoglucan from Penicillium erythromellis | |
| US3000872A (en) | Preparation of carboxymethyl dextran-iron complexes | |
| CS261080B1 (sk) | Trojsodná sol' 0-(4-(N-etyl-N-fenylamíno)-6-(4-metyl-2-sulfobenzén- -l-azo-2-(l-hydroxy-3,6-bissulfonát-l-yl)amíno]-l,3,5-triazín-2-yl}škrobu | |
| Gemeiner et al. | Preparation of p-aminobenzyl cellulose and its utilization for immobilization of enzymes | |
| US4929556A (en) | Enzyme immobilization with polysulfonium salts | |
| CS240463B1 (cs) | Trojsodná sol' 4-(N-etyl-N-f0nylamíno)-8-(4-meíyll-2-sulíobenzén-l- -azo-2-(l-hydroxy-3,6-bÍ8Sulfonaft-l-yl)antíno ]-1,3,5-triazín- -2-ylhydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy | |
| CS229094B1 (cs) | Trojsodná sof 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-siilfo-1-antrachinón-amino)]- anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a sposob jeho přípravy | |
| CS254162B1 (cs) | Sposob přípravy rozpustného cbromolytickéha substrátu na stanovenie (3(l-*3) glukanázy | |
| US3176007A (en) | Process employing chelating agents to prepare sludge-free hydroxyalkyl starch ethers |