CS229094B1 - Trojsodná sof 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-siilfo-1-antrachinón-amino)]- anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a sposob jeho přípravy - Google Patents

Trojsodná sof 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-siilfo-1-antrachinón-amino)]- anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a sposob jeho přípravy Download PDF

Info

Publication number
CS229094B1
CS229094B1 CS39183A CS39183A CS229094B1 CS 229094 B1 CS229094 B1 CS 229094B1 CS 39183 A CS39183 A CS 39183A CS 39183 A CS39183 A CS 39183A CS 229094 B1 CS229094 B1 CS 229094B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
sulfo
blue
amino
anilino
hydroxyethyl starch
Prior art date
Application number
CS39183A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Inventor
Peter Gemeiner
Danica Mislovicova
Original Assignee
Peter Gemeiner
Danica Mislovicova
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Peter Gemeiner, Danica Mislovicova filed Critical Peter Gemeiner
Priority to CS39183A priority Critical patent/CS229094B1/cs
Publication of CS229094B1 publication Critical patent/CS229094B1/cs

Links

Landscapes

  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Description

POPIS VYNALEZU
K AUTORSKÉMU OSVEDČENIU ČESKOSLOVENSKÁSOCIALISTICKÁREPUBLIKA( 19 )
ÚŘAD PRO VYNÁLEZY
A OBJEVY (22) Přihlášené 20.01 83(21) (PV 391-83) (40) Zverejnené 15 09 83(45) Vydané 15 04 86
(75)
Autor vynálezu
GEMEINER PETER ing. CSc., MISLOVIČOVÁ DANICA ing. CSc., BRATISLAVA (54) Trojsodná sof 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-siilfo-1-antrachinón-amino)]-anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a sposobjeho přípravy 1
Vynález sa týká trojsodnej soli 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino )J -anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a spdsobu jeho přípravy.
Trojsodná sol’ 6- [2-sulf o-4-( 4-amino-3-sulfo-1 -antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfo-anilino)-1,3,5--triazln-2-yl-dextránu je vodorozpustná látka a slúžila v afinitnej chromatografii ako prostriedok na Stádium afinity enzýmov a proteínov vdbec k antrachinón-triazí-novým farbivám,, ktoré sá jeuným z typov generálnych afinantov (E. Stellwagen: AccountsChem. Res. 10, 92 /1977/)· Chromolytioké dextrány o priemernej molekulovej hmotnosti 5.10^až 2.10^ sa vyznaSovali výraznou afinitou k enzýmom, ktorá je závislá nielen od typu chro-mofóru, ale aj od molekulovej hmotnosti polysacharidu. Zo skášaných antrachinón-triazíno-výoh farbív najvačšiu účinnost vykazovala trojsodná sol’ 2-chlór-6-[2-sulfo-4-(4-amino-3--sulfo-1-antraehinón-amino)]anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínu (P. Gemeiner, D. Mislovičová, J. Zemek, t. Kuniak: Colleot. Czeoh. Chem. Commun. 46, 419 /1981/). Vplyvcharakteru polysacharidu na afinitu jeho chromolytického derivátu ku enzýmom a albuminubol zatial’ dokázaný z rozpustných polysacharidov iba u dextránu, rozpustného Škrobu a gly-kogénu a z nerozpustných polysacharidov u sieťovaných dextránov, sieťovanej agarózy a celulózy (S. Angal, P. D. G. Dean: Biochem. J. 167, 301 /1977/).
HydroxyetylSkrob je áalší typ vodorozpustríého polysacharidu vhodného na tieto účely.Je to vetvený alfa-glukán (99 % amylopektín) vo formě jeho hydroxyetylderivátu so stupňomsubstitúcie 0,63 až 0,67. Frakcionáciou tohto vodorozpustného polysacharidu sa získalifrakcie hydroxyetylSkrobu s priemernou molekulovou hmotnosťou v rozmedzí 5.10^ až 2.10^.Pri vypracovaní podmienok reakcie hydroxyetylSkrobu s trojsodnou sol’ou 2-chlór-6-[2-sulfo--4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínom savychádzalo z podmienok farbenia dextránov (P. Gemeiner a kol.: Collect. Czech. Chem. Com- 229094 229094 2 mun., 46, 419 /1981/). Aby sa dosiahol jednotný stupeň substitúeie dextránov s trojaodnousol’ou 2-chlór-6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino)J anilino-4-Cx-sulfoanili-no)-1,3,5-triazínu (65 umól/g), používali sa hmotnostně poměry trojsodná sol’ 2-chlór-6-- 2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino) anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazí-nu : dextrón : uhličitén sodný = 0,5:1:2 s tým, že reakcia prebiehala po dobu 2 h při tep-lotě 80 °G. Za týchto podmienok sa viazalo len ,0 95 trojsodnej soli 2-chlór-6- 2-sulfo-4--(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino) anilino-4-(x-sulí'oanilino)-1,3,5-triazínu, čo jeekonomicky nákladné.
Uvedená nevýhodu odstraňuje v podstatnej miere tento vynález. Podstatou vynálezu jetrojsodná sol’ 6-[^2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino)J anilino-4-(x-sulfoanili-no)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylSkrobu, kde x je poloha substituenta 2 alebo 4 vzorca I
kde R představuje hydroxyetylSkrob so stupňom substitúeie 0,63 až 0,67 a o priemernej mo-lekulovej hmotnosti 5.10^ až 2.10^. Sálej podstatou vynálezu je spOsob přípravy týchto de-rivátov, ktorý sa vyznačuje tým, že jednotlivé frakcie hydroxyetylSkrobu sa po dobu 30 minaktivujú vodným roztokom trojsodnej soli 2-chlór-6- [2-suIfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachi-nón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínu vzorca II pri teplote 60 °C a popřidaní chloridu sodného a uhličitanu sodného reagujú s trojsodnou soPou 2-chlór-6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino)J anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínu po dobu2 h pri teplote 70 °C při hmotnostných poraeroch trojsodná sol’ 2-chlór-6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)~1,3,5-triazínu : hydroxyetyl-Skrob : uhličitan sodný = 0,18 až 0,25:1:0,2 v prostředí 3,5 % vodného roztoku chloridusodného.
(II) Výhodou navrhovaného spňsobu přípravy oproti doterajSiemu spňsobu přípravy chromoly-tických dextránov je, že pri 2 až 5násobne nižSej spotrebe trojsodnej soli 2-chlór-6-[2--sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínu,lOnásobne nižSej spotrebe uhličitanu sodného a pri znížení teploty o 10 °C sa dosahujerovnaký stupeň substitúeie ako pri farbení dextránov a že uvedený postup je jednoduchý anenáročný na použité chemikálie a přístroje.

Claims (2)

3 229094 Příklad 1 25 mg hydroxyetylškrobu (HES) o priemernej molekulovej hmotnosti 53 500 a 4,9 mg troj-sodnej soli 2-chlór-6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-aminoj] anilino-4-(x-sulfo-anilino)-1,3,5-triazínu (Cibacron Blue 3G-A áalej Blue) sa rozpustí v 1,25 ml destilovanejvody při teplote 60 °C a mieša sa po dobu 30 min. Potom sa pridé 43,75 mg chloridu sodnéhoa zmes sa zohreje na teplotu 70 °G. Po přidaní 5 mg uhliíitanu sodného sa reakSná zmesmieša ešte po dobu 2 h. Potom sa reakčná zmes ochladí, zneutralizuje zriedenou kyselinouchlorovodíkovou na pH 7 a přečistí na koloně naplnenej dextránom sletovaným epichlórhydrí-nom (Sephadex G-25 fine). Objem náplně kolony je 10C ml, výška 21,5 cm a priemer 2,5 cm.Eluuje sa destilovanou vodou, prl prietoku eluátu kolonou 30 až 35 ml/h. Prvá modrá frakcia obsahujdca vodný roztok trojsodnej soli 6-j2-sulfo-4-(4-aniino-3--sulfo-1-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetyl-škrobu (Cibacron Blue-HES, dalej Blue-HES) sa odpaří na rotačnej vákuovej odparke do suchapri tlaku 5 kPa; po přidaní a znovu odpaření etanolu a potom acetonu sa získá suchý Blue--HES (23,1 mg) s obsahom 65,4 umólu Blue/g. Příklad 2 Postup podl’a příkladu 1 s tým rozdielom, že sa použije hydroxyetylškrob o priemernejmolekulovej hmotnosti 127 000 a 4,63 mg Cibacron Blue 3G-A. Získá sa Blue-HES (22,5 mg)o obsahu 65,4 umól Blue/g. Příklad 3 Postup pódia příkladu 1 s tým rozdielom, Se sa použije hydroxyetylškrob o priemernejmolekulovej hmotnosti 402 000 a 6,23 mg Blue. Suchý Blue-HES (22,2 mg) obsahuje 68,7 UmólBlue/g. Příklad 4 Postup pódia příkladu 1 s tým rozdielom, že sa použil hydroxyetylškrob o priemernejmolekulovej hmotnosti 1 920 000 a 6,23 mg Blue. Suchý Blue-HES (21,7 mg) obsahuje 72,08umól Blue/g. Vynález má použitie v enzýmovom inžinierstve a v biochémii, a to pri izoláeii a purifi-kácii enzýmov alebo ako substráty a inhibitory enzýmami katalyzovaných reakcií. P K E D Μ E T VYNÁLEZU
1, Trojsodná sol’ 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino)J anilino-4-(x-sulfoanilino)-!,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu, kde x je poloha substituenta 2 alebo 4vzorca I
SO3Na 229094 4 kde R představuje hydroxyetylSkrob so stupňom substitúcie 0,63 až 0,67 a priemernou mole-kulovou hmotnosťou 5.10^ až 2.10®.
2. Spfisob přípravy podl’a bodu 1 vyznačujúci sa tým, že frakcionovaný vodorozpustnýhydroxyetylSkrob sa po dobu 30 min aktivuje vodným roztokom trojsodnej soli 2-chlór-6-[2--sulfO”4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazínuvzorca II
při teplote 60 °C a po přidaní chloridu sodného a uhličitanu sodného reaguje s trojsodnousol’ou 2-chlór-6- [2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfo-anilino)-1,3,5-triazínu po dobu 2 h pri teplote 70 °C pri hmotnostných pomeroch trojsodnáso! 2-chlór-6-^2-sulfo-4-(4-amino-3-sulfo-1-antrachinón-amino)] anilino-4-(x-sulfoanilino)--1,3,5-triazínu : hydroxyetylSkrob : uhličitan sodný = 0,18 až 0,25:1:0,2 v prostředí 3,5 %vodného chloridu sodného. Severografia, n. p., MOST Cena 2,40 Kčs
CS39183A 1983-01-20 1983-01-20 Trojsodná sof 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-siilfo-1-antrachinón-amino)]- anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a sposob jeho přípravy CS229094B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS39183A CS229094B1 (cs) 1983-01-20 1983-01-20 Trojsodná sof 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-siilfo-1-antrachinón-amino)]- anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a sposob jeho přípravy

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS39183A CS229094B1 (cs) 1983-01-20 1983-01-20 Trojsodná sof 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-siilfo-1-antrachinón-amino)]- anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a sposob jeho přípravy

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CS229094B1 true CS229094B1 (cs) 1984-05-14

Family

ID=5335885

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS39183A CS229094B1 (cs) 1983-01-20 1983-01-20 Trojsodná sof 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-siilfo-1-antrachinón-amino)]- anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a sposob jeho přípravy

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS229094B1 (cs)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Graves et al. 15 α-Glucan phosphorylases–Chemical and physical basis of catalysis and regulation
Lee et al. 8-(6-Aminohexyl)-amino-adenine nucleotide derivatives for affinity chromatography
Stoolmiller et al. The biosynthesis of hyaluronic acid by Streptococcus
Danenberg et al. Fluorinated pyrimidines. Structures of reversible and irreversible complexes of thymidylate synthetase and fluorinated pyrimidine nucleotides
O'dea et al. The estimation of small amounts of formaldehyde liberated during the oxidation of carbohydrates and other substances with periodate
Lowe et al. High-performance liquid affinity chromatography of proteins on Cibacron Blue F3G-A bonded silica
Atkinson et al. Inhibition of inosine 5′-phosphate dehydrogenase from Ehrlich ascites-tumour cells by 6-thioinosine 5′-phosphate
DK159688B (da) Oploeselig baerer-bundet lever-uricase, fremgangsmaade til dens fremstilling og anvendelse
Fox et al. Biosynthesis of bacterial glycogen. 13. Purification and properties of the Escherichia coli B ADPglucose: 1, 4-α-D-glucan 4-α-glucosyltransferase
Prado et al. A simple and sensitive method for determining reducing sugars in plant tissues. Application to quantify the sugar content in quinoa (Chenopodium quinoa Willd.) seedlings
Sekura [53] Adenosine 3′-phosphate 5′-phosphosulfate
Palanisamy et al. Synthesis and evaluation of affinity adsorbents for glycoproteins: an artificial lectin
CA1220148A (en) 9-(aminoalkyl)-8-hydroxyadenines and method of their preparation
Hettinger et al. Edeine. III. Composition of the antibiotic peptide edeine B
Whitby Transglucosidation reactions with flavins
Cha et al. Succinic Thiokinase: IV. IMPROVED METHOD OF PURIFICATION, ARSENOLYSIS OF GUANOSINE TRIPHOSPHATE, SUCCINATE-DEPENDENT GUANOSINE TRIPHOSPHATASE ACTIVITY, AND SOME OTHER PROPERTIES OF THE ENZYME
CS229094B1 (cs) Trojsodná sof 6-[2-sulfo-4-(4-amino-3-siilfo-1-antrachinón-amino)]- anilino-4-(x-sulfoanilino)-1,3,5-triazín-2-yl-hydroxyetylškrobu a sposob jeho přípravy
Simpson et al. Degradation of rutin by aspergillus flavus: The carbon monoxide producing system
Hurst et al. HYDROLYSIS OF CALF THYMUS DEOXYRIBONUCLEATE BY PANCREATIC DEOXYRIBONUCLEASE: I. A STUDY OF THE OLIGONUCLEOTIDES LIBERATED IN THE PRESENCE OF MAGNESIUM OR MANGANESE IONS
Alonso et al. Binding of N‐acetyl‐L‐glutamate to rat liver carbamoyl phosphate synthetase (ammonia)
Gemeiner et al. Antraquinone-triazine derivatives of polysaccharides. Relation between structure and affinity to lactate dehydrogenase
IE53887B1 (en) Nucleotide-based substrates
Yamazaki et al. A New Method of Chemical Modification of N6‐Amino Group in Adenine Nucleotides with Formaldehyde and a Thiol and Its Application to Preparing Immobilized ADP and ATP
Berglund et al. [18] ATP-and dATP-substituted agaroses and the purification of ribonucleotide reductases
Moe et al. Isoleucyl transfer ribonucleic acid synthetase. Competitive inhibition with respect to transfer ribonucleic acid by blue dextran